Изобретение относится к биотехнологии и может быть использовано при биовосстановлении почв и водоемов, загрязненных нефтепродуктами.
Известны штаммы, используемые для очистки воды и почвы от нефти и нефтепродуктов, например Rhodococcous erythropolis [1] окисляет нефтепродукты при низких концентрациях: в течение 40 суток содержание нефтепродуктов снижается с 3 до 1%.
Известен штамм Acinetobacter oleovarum [2], окисляющий ароматические углеводороды нефти.
Штамм Actinomyces sp. 1-96A получен методом ступенчатой аналитической селекции. Изолят выделен из образцов почвы Ярославского нефтепeрерaбатывающего завода (г. Тутаев). Штамм хранится в пколлекции АОЗТ "Биофлора", N B-05. Штамм Actinomyces sp. 1-96A относится к классу Actinomycetes, семейству Actinomycetaceae. Штамм депонирован в музее культур микроорганизмов АОЗТ "Биофлора", имеет коллекционный N B-05.
Культурально-морфологические признаки.
На твердой (агаризованной) среде Чапека, имеющeй состав: cахароза - 30 г; NaNO3 - 2 г; K2HPO4 - 1 г; MgSO4•7H2O - 0,5 г; KCl - 0,5 г; FeSO4 - 0,01 г; агар - 20 г; дистиллированная вода - 1000 мл, pH - 7,2, t = 29±1oC, образует беловатый воздушный мицелий, на 3-4-e сутки выделяет серовато-бурые вещества. Спороносцы длинные, слабо закручены в спирали; споры - овальные и шаровидные. На 8-10-e сутки на поверхности вокруг колоний наблюдаются кристаллоподобные образования, при боковом освещении дающие блеск. Аналогичные признаки наблюдаются при выращивании на среде Чапека, содержащей органический азот.
Культурально-морфологические признаки не изменяются при выращивании на агаризованной среде Чапека в интервале от 12 до 29oC.
Физиолого-биохимические признаки.
Протеолитическая активность - слабая, желатину разжижает медленно, молоко свертывает слабо, хорошо гидролизует крахмал. Усваивает органический и минеральный азот, растет на жирах, парафине, нафтенах и асфальтенах, медленный рост на клетчатке.
На жидкой среде N 65 DSM, имеющeй состав: глюкоза - 4 г; дрожжевой экстракт - 4 г; мальтозный экстракт - 10 г; CaCO3 - 2 г; вода дистиллированная - 1000 мл, pH 7,2 (доводится KOH), выращивается с добавлением в среду 1-0.1% гудрона или мазута. На 3-и сутки ферментации при 29±1oC на качалке n = 180 об/мин-1 обнаруживаются следы внесенного углеводорода, культуральная жидкость вязкая, с образованием светлых хлопьев при отстаивании (t = 4, 10oC).
Штамм сохраняется на агаризованной питательной среде N 65 с добавлением гудрона 0,1%.
Штамм может использоваться для ремедиации площадей и поверхностей, загрязненных тяжелыми фракциями нефтепродуктов.
Пример 1. Штамм Actinomyces sp. 1-96A выращивали на жидкой питательной среде Чапека с использованием минерального азота. Перед стерилизацией в колбу с питательной средой вносили гудрон в количестве 5%.
В качестве прототипа выращивали Acinetobacter oleovarum ВСБ-712 на жидкой питательной среде, имеющей состав: (NH4)2SO4 - 3,5 г; KH2PO4 - 6.5 г; MgSO4 - 0,7 г; FeSO4•7H2O - 12,5 мг; MnSO4•5H2O - 12.5 мг; ZnSO4•7H2O - 12,5 мг; CuSO4•H2O - 3 мг; вода дистиллированная - 1000 мл. Перед стерилизацией в среду вносили гудрон в количестве 5%.
Результаты опыта представлены в табл. 1.
Пример 2. Штамм Actinomyces sp. 1-96A выращивали на жидкой питательной среде N 65 DSM, имеющeй состав: глюкоза - 4 г; дрожжевой экстракт - 4 г; кукурузный экстракт - 10 г; CaCO3 - 2 г; вода дистиллированная 1000 мл. Перед стерилизацией в среду вносили мазут в количестве 5%.
В качестве прототипа использовали штамм Acinetobacter oleovarum ВСБ-712 на жидкой питательной среде (см. пример 1). Перед стерилизацией в колбу с питательной средой вносили мазут в количестве 5%.
Культуры выращивали при 29±1oC на качалке (n = 180 об/мин).
Результаты опыта представлены в табл. 2.
Таким образом, установлено, что штамм Actinomyces sp. 1-96A является перспективным для использования при ремедиации площадей и поверхностей, загрязненных нефтепродуктами.
Источники информации
1. А.с. 1805097, БИ N 18, 1993 г.
2. А.с. 1809822, БИ N 14, 1993 г.
Изобретение относится к биотехнологии, микробиологии, ремедиации загрязненных земель. Получен новый штамм Actinomyces sp. 1-96А методом аналитической селекции природных изолятов по принципу деструкции нефтепродуктов. Штамм разлагает гудрон и мазут в культуральной жидкости, содержащей их по 5%, в течение 10 суток. Штамм может быть использован в качестве ремедианта при очистке поверхностей и площадей, загрязненных нефтепродуктами. 2 табл.
Штамм Actinomyces sp. 1 - 96 A (коллекционный В-05 АОЗТ "Биофлора"), усваивающий в качестве источника углерода сырую нефть и продукты ее переработки, например гудрон, мазут, отработанные масла, и предназначенный для биовосстановления почв и водоемов, загрязненных нефтепродуктами.
