СПОСОБ ТРАНСПЛАНТАЦИИ КОЖИ У МЛЕКОПИТАЮЩИХ Российский патент 2001 года по МПК A61B17/322 A61K33/14 

Изобретение относится к экспериментальной медицине.

В литературе описан способ трансплантации кожи (Сащикова В.Г. Имплантация кусочков кожи в толщу грануляционной ткани при трофических язвах нижних конечностей в пожилом и преклонном возрасте // Вестник хирургии. - 1992. - вып. 149, N 7-8. - С. 109-113), который выбран нами в качестве прототипа. Суть этого способа состоят в том, что небольшие кусочки кожи толщиной 0,5-0,7 мм получают путем отсечения у основания конуса кожи, образованного после вкола конца иглы в кожу бедра и поднятия кверху ее конца и внедряют после нанесения остроконечным скальпелем нескольких вертикальных разрезов глубиной 2-3 мм в толщу грануляций трофических язв нижних конечностей у больных пожилого и преклонного возраста. По мере разрастания приживающих кусочков эпидермиса происходит обратное развитие расположенных над ними грануляций, в результате чего дальнейшее заживление язвы обеспечивается быстрым ростом эпидермиса из этих хорошо укрепившихся зачатков. Погружение кусочков кожи в грануляции предотвращает их смещение. В толще грануляций сохраняется постоянная влажность и температура, благоприятно действующие на приживление кусочков. Язву закрывали давящей стерильной повязкой.

Однако известный способ имеет ряд недостатков:
1) показания к использованию этого способа сужены гранулирующими ранами ввиду того, что оставление под повязкой обнаженных жировой клетчатки, фасций и так далее, которые обнажаются при травмах (скальпированные раны), либо после ранней некроктомии при глубоких ожогах, недопустимо ввиду развития в них вторичных некрозов и ухудшения, как известно, впоследствии функциональных и косметических результатов;
2) использование сравнительно крупных кусочков кожи, погружаемых через сравнительно большие разрезы, не может обеспечить желаемую равномерность высевания кусочков кожи по всей площади раневой поверхности;
3) давящая повязка ухудшает кровоснабжение в области раны и не обеспечивает эффективного удаления экссудата с раневой поверхности;
4) повязка затрудняет наблюдение за областью пересадки и вызывает травматизацию тканей при ее смене;
5) рассечение грануляций скальпелем ведет к дополнительной кровопотере. Техническим результатом заявляемого изобретения является расширение показаний к трансплантации кусочков кожи вглубь тканей, а также ускорение сроков и улучшение результатов лечения.

Сущность предлагаемого способа заключается в том, что кусочки аутотрансплантата кожи размером 0,009 - 0,012 куб. мм смешивают с равным объемом 5%-ного водного раствора глюкозы или иным водным изотоническим раствором и взвесь этих кусочков в растворе посредством пипетки-микродозатора, конец которой выполнен в виде тонкой заостренной трубки-иглы, пропускающей кусочки аутотрансплантата, вводятся в любые мягкие ткани, составляющие дно раны. Прокол иглой осуществляется на глубину 3 мм под углом 40-45^o к поверхности раны таким образом, чтобы проекция перемещения кончика иглы на вертикальную ось при обычном положении тела совпадала с направлением действия силы тяжести. В один прокол впрыскивается 1-4 кусочка трансплантата. Раневая поверхность с пересаженной кожей заключается в изолирующую от внешней среды прозрачную капсулу, постоянно заполненную периодически сменяемым стерильным 0,9%-ным водным раствором натрия хлорида до момента полной эпителизации и ороговения раневого эпидермиса.

Заявляемое техническое решение отличается от прототипа тем, что используются кусочки кожи размером 0,009-0,012 куб.мм, что позволяет равным количеством взятой кожи покрыть большую площадь раневой поверхности реципиента. Введение кусочков кожи через иглу, вводимую под углом 40-45^o к раневой поверхности, обеспечивает лучшее удержание кусочков кожи в глубине тканей, что позволяет отказаться от давящей повязки. Поскольку после нанесения трансплантата раневая поверхность помещается в стерильную изотоничную плазме крови водную среду (0,9%-ный раствор натрия хлорида), исключаются некрозы мягких тканей, лишенных наружного покрова, которые в растворе покрываются микрослоем фибрина. Микрослой фибрина способствует удержанию в тканях трансплантатов и является хорошим субстратом для мигрирующего раневого эпителия. Поэтому трансплантация может быть осуществлена сразу после образования раневой поверхности. В жидкой среде ускоряется эпителизация и уменьшается развитие фиброза в области повреждения. Отсутствие давящей повязки не вызывает нарушений кровообращения и облегчает наблюдение за раневой поверхностью через прозрачную стенку капсулы. При смене раствора эффективно удаляется экссудат, раствор также может являться основой для воздействия на раневую поверхность водорастворимых лекарственных препаратов и биологически активных веществ.

В доступной нам литературе по биологии и медицине сведения о таком способе трансплантации кусочков кожи отсутствуют, что позволяет считать заявленное изобретение соответствующим критерию "новизна".

Пример 1.

У 6 белых крыс-самцов линии "Вистар" массой по 170 г с кожи брюшной поверхности иссекали полнослойный лоскут размером 1 см². Лезвием безопасной бритвы соскабливали с внутренней стороны лоскута ткани до слоя собственно кожи, затем погружали его в теплый физиологический раствор в чашку Петри и лезвием на погруженном в растворе пробковом столике измельчали до мелких кусочков, которые для измельчения до мельчайших кусочков (0,009-0,012 куб. мм) помещали в пробирку с любым физиологическим раствором, внутри которой вращался вокруг оси металлический стержень с насаженными лезвиями-ножами. Осажденные через мелкоячеистую сетку кусочки кожи центрифугировали, раствор сливали и смешивали кусочки кожи с равным объемом изотонического раствора глюкозы. Затем взвесь кусочков с помощью микропипетки, на конце которой находилась заостренная трубка-игла, впрыскивалась вглубь тканей дна раны спины (рана наносилась той же крысе, у которой забирался лоскут, под наркозом, размер раны 1 см, ее края для замедления эпителизации заворачивали кверху). Для этого игла микропипетки вводилась внутрь тканей на глубину 3-4 мм под углом 40-45^o к поверхности раны, общее количество проколов составляло 12 на 1 см² раневой поверхности. Пересадка кожи осуществлялась равномерно по всей поверхности раны. Рана с пересаженными кусочками кожи заключалась в прозрачную камеру, обеспечивающую постоянное нахождение раневой поверхности в физиологическом водном растворе 0,9%-ном хлорида натрия до полной эпителизации раны и ороговения раневого эпидермиса. Смена раствора проводилась 3 раза в сутки через равные промежутки времени. Полная эпителизация происходила на 5 сутки после операции. Из кусочков кожи к 9 суткам от момента трансплантации формировался участок кожи, который по своему строению был органотипическим. Косметический результат трансплантации в отдаленные периоды наблюдения (2-4 месяца) был хорошим.

Пример 2.

У трех собак массой 7-8 кг на голове наносилась рана размерами 1,5х1,5 см, края которой загибали и удерживали в этом положении с помощью дакроновых швов. Для пересадки брался у той же собаки лоскут кожи площадью 1 см² из паховой области. По описанной выше методике получали мелкие кусочки кожи, проводили трансплантацию. Раневая поверхность закрывалась прозрачной капсулой, которая в течение 8-12 суток была заполнена стерильным физиологическим раствором натрия хлорида, который менялся 2-3 раза в сутки. За этот период формировался на месте раневого дефекта кожный покров, имеющий органотипичное строение. Косметический результат трансплантации через 3 месяца после операции хороший.

Изобретение относится к области медицины, в частности к экспериментальной медицине, и может быть использовано для трансплантации кожи у млекопитающих. Используют кусочки кожи объемом 0,009-0,012 мм³. Взвешенные в изотоническом растворе глюкозы кусочки с помощью остроконечной трубки погружают в дно раны. Количество проколов - 12 на 1 см² площади раны по всей ее поверхности. В один прокол впрыскивают 1-4 кусочка кожи на глубину 3-4 мм. Раневую поверхность помещают в изолирующую от внешней среды прозрачную капсулу до полной эпителизации. Капсула постоянно заполнена периодически сменяемым стерильным физиологическим раствором. Способ позволяет покрыть большую площадь раневой поверхности и исключить некроз мягких тканей. Это ускоряет сроки заживления раневой поверхности.

Способ трансплантации кожи у млекопитающих, включающий внедрение мелких кусочков аутотрансплантанта вглубь тканей дна раны, отличающийся тем, что кусочки кожи объемом от 0,009 до 0,012 мм³, взвешенные в изотоническом растворе глюкозы, посредством тонкой трубки с заостренным концом погружают в любые мягкие ткани, образующие дно раны реципиента, при этом наносят 12 проколов на 1 см² площади раны по всей поверхности, в один прокол впрыскивают 1 - 4 кусочка кожи на глубину 3 - 4 мм, затем раневую поверхность помещают в изолирующую от внешней среды прозрачную капсулу, постоянно заполненную периодически сменяемым стерильным физиологическим раствором до полной эпителизации обнаженных тканей и ороговения раневого эпидермиса.