АНКСИОЛИТИЧЕСКОЕ СРЕДСТВО Российский патент 2001 года по МПК A61K31/35 A61P25/22 

Изобретение относится к медицине, в частности к фармакологии, и касается применения лекарственного средства ладастен /(адамант-2-ил)- (пара-бромфенил)амин/ в качестве анксиолитического средства.

В современной медицине в качестве основных анксиолитиков используются бензодиазепиновые транквилизаторы. Однако их эффекты проявляются в едином континиуме и включают анксиолитическое, седативное, гипнотическое, миорелаксирующее и противосудорожное действие (Воронина Т.А., Вихляев Ю.И., Дурнев А.Д., Неробкова Л.Н. /Характеристика фармакологических свойств феназепама // В кн. Феназепам. - Киев: Наукова Думка, 1982, с. 89, 93, 145, 146; Андронати С. А. , Воронина Т.А., Головенко Н.Я. и соавт. / Гидазепам. - Киев: Наукова Думка, 1992, 196 с.).

Невозможность отделить анксиолитическое влияние от остальных эффектов является основным ограничением использования бензодиазепиновых транквилизаторов. Применение бензодиазепинов противопоказано лицам, не прерывающим трудовой деятельности, особенно, если последняя включает элементы операторской работы (Вальдман А.В., Мартынихин А.В. /Исследования действия психотропных средств на психофизические характеристики операторской деятельности в условиях эмоционального напряжения // В кн. Фармакологическая коррекция процессов утомления. - М., 1982, с. 83-97). Поэтому выявление соединений с анксиолитической активностью, не имеющих побочных эффектов, свойственных бензодиазепинам, актуально для разработки транквилизаторов нового поколения.

Впервые обнаружено, что вещество (адамант-2-ил)-(пара-бромфенил)амин, обладающее иммуностимулирующим действием (патент СССР N 1826906 "Иммуностимулирующее средство бромантан", Морозов И.С., Арцимович Н.Г., Фадеева Т. А. , Климова Н.В., Галушина Т.С. и др. Бюллетень изобретений, N 25, 1993), психостимулирующим действием (авторское свидетельство СССР N 860446 "Замещенные N-адамантиламины, проявляющие психостимулирующую активность", Вальдман А.В., Зайцева Н.М., Климова Н.В., Лаврова Л.Н., Морозов И.С. и др. Бюллетень изобретений, N 43-44, 1993) обладает анксиолитическими свойствами.

Сущность изобретения заключается в новом применении, в качестве анксиолитического средства, известного вещества (адамант- 2-ил)-(пара-бромфенил)амина, новое название - ладастен.

Результаты фармакологического изучения препарата.

1. Влияние ладастена на поведение инбредных мышей в тесте "открытое поле" (С.Б. Середенин, А.А. Ведерников / Влияние психотропных препаратов на поведение инбредных мышей в условиях открытого поля / Бюлл. Эксп. Биол. Мед. , 1979, т. 88, N 7, с. 38-40).

Для демонстрации анксиолитического действия ладастена был использован метод измерения двигательной активности в тесте "открытое поле", который позволяет не только оценить силу анксиолитического эффекта, но и степень его селективности. Сутью данного подхода является сравнительный анализ поведенческих эффектов изучаемых соединений у мышей двух инбредных линий Balb/c и C57B1/6, которые характеризуются различными генетически детерминированными типами эмоционально-стрессовой реакции (ЭСР). О наличии анксиолитического действия судили по выявлению активирующего эффекта на двигательную активность у животных с "пассивным" типом ЭСР (линия Balb/c). Показателем седативных свойств исследуемых соединений служило выявление их ингибирующего действия на двигательную активность мышей с "активным" типом ЭСР (линия C57B1/6).

В работе также были использованы мыши - самцы линий Balb/c (C) и C57B1/6 (B6) массой 20-22 г (питомник "Столбовая"). Животных содержали в условиях лабораторного вивария в клетках по 10 особей в каждой, в течение не менее двух недель до начала эксперимента, на стандартной диете, при свободном доступе к воде, при нормальном 12-часовом световом режиме. Все эксперименты проводили в период времени с 9.00 до 13.00.

Через 90 минут после интрагастрального введения препарата животное выдерживали в темноте в течение 1 минуты и затем помещали в один из периферических квадратов "открытого поля", которое представляет из себя белую круглую арену диаметром 1 метр с белыми бортами высотой 50 см. Арена равномерно освещена 4-мя лампами по 75 Вт каждая, расположенными на высоте 1 м над поверхностью поля. Все пространство арены равномерно разделено 4-мя концентрическими окружностями, которые в свою очередь разбиты радиусами на сектора так, что периферическая окружность состоит из 16 одинаковых криволинейных квадратов. Наблюдение за животным производили в течение 3 минут, раздельно фиксировали число пересеченных квадратов на периферии и в центральных областях, а также число стоек. Суммарное число пересеченных квадратов вместе с числом стоек обозначали как общую активность. Статистическую обработку полученных результатов проводили используя t-критерий Стьюдента.

При анализе поведения животных этих линий в тесте "открытое поле" показано, что при введении ладастена в дозе 45 - 60 мг/кг, статистически достоверно увеличивалась периферическая, вертикальная и общая двигательная активность мышей линии C. В дозе 45 мг/кг, кроме того, достоверно повышались показатели центральной активности и снижалось количество дефекаций (табл. 1). В больших дозах (200 мг/кг) препарат статистически достоверно снижал уровень общей двигательной активности и увеличивал количество дефекаций. Таким образом, активацию поведения мышей линии C в тесте "открытое поле" со снижением числа дефекаций можно интерпретировать как анксиолитическое.

Влияние препарата ладастен на поведение мышей линии В6 характеризуется данными табл. 2. В дозах 50 и 60 мг/кг препарат статистически достоверно увеличивал уровень периферической и общей двигательной активности без увеличения центральной двигательной активности, а в дозе 45 мг/кг - только показатели общей двигательной активности.

Таким образом, совокупность полученных в настоящем исследовании результатов демонстрирует наличие у ладастена анксиолитического действия, селективно проявляющегося у животных с пассивным фенотипом эмоционально-стрессовой реакции. Ранее подобные эффекты были описаны для низких доз дневного транквилизатора гидазепама, атипичного анксиолитика мексидола (Воронина Т.А., Неробкова Л. Н. , Гарибова Т.А. и соавт. /Спектр фармакологической активности мексидола в эксперименте/ Раб. совещ. - М., 1991, с. 14-26) и нового оригинального селективного анксиолитика - афабазола (Середенин С.Б., Воронина Т. А., Незнамов Г.Г. и соавт. / Фармакогенетическая концепция анксиолитического эффекта/ Вестник АМН, 1998, N 11, с. 47-52).

2. Влияние ладастена на поведение инбредных мышей в тесте "приподнятый крестообразный лабиринт" (Pellow S.E., Johnston A.L., File S.E. - J. Pharm. Pharmacol. 1987, v. 37, pp. 917-928).

Метод приподнятого крестообразного лабиринта (ПКЛ), предложенный известным психофармакологом S. File, общепринятый в настоящее время для оценки анксиолитического действия (File S.E. - J. Pharm. Pharmacol., 1984, 36, pp. 837-840). Сущность метода заключается в анализе соотношения реакции страха животных в незнакомом пространстве и высоты с одной стороны и поисковой активности в новой обстановке с другой.

Установка представляет собой выполненный из плексиглаза лабиринт, который имеет форму креста с двумя открытыми (длина - 22 см, ширина - 5 см), двумя закрытыми (длина - 22 см, ширина - 5 см, высота стенок - 15 см) рукавами и центральной площадкой (5 х 5 см). Кроме того, лабиринт приподнят на высоту 60 см. Пол и стенки закрытых рукавов были покрашены черным цветом, тогда как пол открытых рукавов и центральная площадка были оставлены прозрачными.

В соответствии с характеристиками для лабораторных крыс и мышей формами поведения реакция страха определяется стремлением животных находиться в закрытых рукавах лабиринта, снижением двигательной активности. Поисковая активность определяет пребывание животных в открытых рукавах, увеличением двигательной активности.

Количественно оценивались следующие показатели: время пребывания в открытых рукавах лабиринта (в секундах), время на центральной площадке лабиринта, общее число забегов в открытые рукава, отношения числа забегов в открытые рукава к общему числу перемещений по рукавам лабиринта (в % от общего количества).

В работе были использованы мыши - самцы мышей линий Balb/c с генетически детерминированной выраженной реакцией страха, характеризующейся замиранием в новой обстановке и увеличением числа дефекаций, и самцы линии C57B1/6 с генетически детерминированной активной поисковой реакцией в новой обстановке, показателем которой является высокая двигательная активность.

Использование мышей двух указанных линий необходимо для сравнения эффектов ладастена с бензодиазепиновыми транквилизаторами. Типичный бензодиазепиновый транквилизатор диазепам в дозах, вызывающих анксиолитический эффект у мышей C вызывает седацию у мышей В6, что характеризует действие бензодиазепинов в ранее описанном едином континиуме эффектов (табл. 3 и 4).

Ладастен в дозах 45-60 мг/кг в отличие от бензодиазепинового транквилизатора диазепама активировал поведение мышей C и B6 (табл. 5 и 6). Таким образом, в тесте ПКЛ показано, что ладастен способен снизить реакцию страха у мышей C и стимулировать поведение мышей В6.

Доказательство именно анксиолитического действия ладастена на мышей C следует их экспериментов по анализу его влияния на спонтанную двигательную активность (СДА) животных в отсутствие эмоционального стресса (прибор "Optovarimex").

3. Влияние ладастена на уровень спонтанной двигательной активности у инбредных мышей.

Прибор "Optovarimex" представляет собой актометр, автоматически учитывающий спонтанную двигательную активность (СДА) лабораторных крыс и мышей.

Оценка СДА при введении ладастена мышам линии C57B1/6 подтвердила наличие у препарата психостимулирующих свойств. На мышей линии Balb/c ладастен в дозах 30-150 мг/кг не действовал (табл. 7).

Таким образом, активация мышей C в тесте ПКЛ при введении ладастена в дозах 45-60 мг/кг и отсутствие эффекта препарата в том же диапазоне доз при оценке СДА в отсутствие эмоционального стресса позволяют сделать вывод об анксиолитическом действии ладастена в отношении животных с выраженной реакцией страха.

Данный вывод подтверждает ранее полученные данные о низкой чувствительности мышей Balb/c к действию стандартных психостимуляторов и о высокой чувствительности к их эффектам мышей линии C57B1/6 (Машковский М.Д., Середенин С. Б. , Альтшуллер В.А. и соавт. /Генетическая зависимость фармакологических эффектов некоторых психотропных препаратов. / Хим.-фарм. журнал, 1980, N 5, с. 7-9).

Таким образом, комплексный анализ полученных данных, выполненный на основе стандартных методов фармакологической оценки, позволяют сделать однозначное заключение о наличии анксиолитического эффекта в спектре психотропной активности ладастена, что выгодно отличает его как от известных психостимуляторов (фенамин, сиднокарб), так и от типичных транквилизаторов (диазепам, феназепам, альпрозолам) и позволяет характеризовать его как психотропное средство нового типа, сочетающее психостимулирующее и анксиолитическое действие.

Изобретение относится к медицине, в частности к фармакологии. Предложено применение (адамант-2-ил)-(пара-бромфенил)амина в качестве анксиолитического средства. Препарат сочетает анксиолитическое и психостимулирующее действие и расширяет арсенал средств указанного назначения. 7 табл.

Применение (адамант-2-ил)-(пара-бромфенил)амина (ладастена) в качестве анксиолитического средства.