ЗАМЕЩЕННЫЕ 2-[2-(3-ОКСОМОРФОЛИН-4-ИЛ)ЭТИЛТИО]БЕНЗИМИДАЗОЛЫ, ОБЛАДАЮЩИЕ АНКСИОЛИТИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТЬЮ Российский патент 2009 года по МПК C07D413/12 A61K31/5377 A61P25/00 

Описание патента на изобретение RU2373202C2

Изобретение относится к химии биологически активных соединений, а именно к гидрохлоридам замещенных 2-[2-(3-оксоморфолин-4-ил)этилтио]бензимидазолов общей формулы

где R1, R2, R3, R4, R5 - одинаковые или различные: Н, низшие алкилы или алкоксигруппы.

Заявляемые соединения обладают анксиолитическим действием и могут найти применение в медицине для лечения нервно-психических расстройств.

В литературе, начиная с 1958 г., описано получение большого числа производных 2-меркаптобензимидазола, содержащих заместители по атомам как серы и азота, так и в бензольном кольце, которые обладают разнообразными видами биологической активности: бактериостатической, инсектицидной, антигельминтной, противоязвенной, противовоспалительной и анальгетической и т.д. (Knobloch W. et al., Arch.Pharmaz., 1958, 291, 113-118; Nakajima S. et al., Jap.pat. 10978, 1961; Hideg К. et al., Brit.Pat. 1234058, 1971; Johnson C.A. et al., Med.Chem.Rec., 1992, 2(4), 247-255; Hasegawa Н. et al., Jap.Pat. 7441198, 1974).

Отечественный препарат «Бемитил» (2-этилтиобензимидазола гидробромид), описанный Бобковым Ю.Г. (Авт.св. СССР №1251374, 1986) и Незнамовым Г.Г. и др. (Физиологически активные вещества, 1993, 25, 40-49) как антигипоксант и психостимулятор, нашел применение в медицинской практике в качестве средства для лечения астенических и астено-депрессивных расстройств.

В 1996 г. был выдан патент РФ №2061686 (приоритет 10.06.1994; опубл. в Бюлл. изобр. №16, 1996), в котором описан большой ряд S-производных 2-меркаптобензимидазола, имеющих на конце алкильной цепочки диалкиламиногруппу или азотсодержащий гетероцикл. Данные вещества проявили селективные анксиолитические свойства. Одно из них, а именно 2-(2-морфолиноэтилтио)-5-этоксибензимидазола дигидрохлорид, получивший название АФОБАЗОЛ, после проведения широких клинических испытаний было зарегистрировано Фармакологическим комитетом МЗ и СР РФ в качестве селективного анксиолитического средства с активирующим компонентом. Действие АФОБАЗОЛА не сопровождается гипноседативными эффектами, присущими бензодиазепинам, у него отсутствуют миорелаксантные свойства, негативное влияние на показатели памяти и внимания. Благодаря всем этим важным качествам, обеспечивающим высокую терапевтическую активность, данный препарат успешно применяется в медицинской практике при лечении тревожных и тревожно-астенических расстройств (Незнамов Г.Г. и др., Exp.Clin.Pharm. 2001, Vol.64. №2. Р 15-19). В процессе изучения фармакокинетики и метаболизма АФОБАЗОЛА методами высокоэффективной жидкостной хроматографии и масс-спектрометрии был идентифицирован ряд метаболитов этого препарата, одним из которых явился 2-[2-(3-оксоморфолин-4-ил)этилтио]-5-этоксибензимидазол. Это обстоятельство инициировало решение синтезировать ранее не известное данное соединение, а также ряд родственных соединений, представленных общей формулой I.

Заявляемые соединения I синтезированы непосредственно в виде гидрохлоридов алкилированием 2-меркаптобензимидазолов соответствующими 4-(2-хлорэтил)морфолин-3-онами (II) в абсолютном спирте; серия N-алкильных производных I получена алкилированием галоидными алкилами в диметилформамиде в присутствии гидрида натрия соответствующих незамещенных продуктов I.

Используемые в качестве промежуточных продуктов - производные морфолин-3-она (II) были получены алкилированием мононатриевой соли диэтаноламина или его замещенных в диоксане соответствующими этиловыми эфирами α-бром(хлор)карбоновых кислот, последующей циклизацией в 4-(2-оксиэтил)морфолин-3-оны, дальнейшей заменой гидроксильной группы на хлор реакцией с хлористым тионилом в хлороформе.

Заявляемые соединения I были синтезированы по следующей схеме:

Экспериментальная химическая часть

Контроль за ходом реакции и чистотой полученных продуктов проводился с помощью тонкослойной хроматографии на силуфоле или алуфоле.

Спектры ПМР сняты на приборе «Bruker-AC 250», внутренний стандарт - ТМС.

Пример 1. 4-(Хлорэтил)морфолин-3-он (IIа) (R4=H).

Растворяют 1,15 г (0,005 м) металлического натрия в 5,25 г (4,77 мл; 0.005 м) свежеперегнанного диэтаноламина в 20 мл абсолютного диоксана при нагревании, затем охлаждают реакционную смесь до комнатной температуры и медленно прибавляют 6,12 г (5,2 мл; (0.005 м) этилового эфира хлоруксусной кислоты, постепенно доводят реакционную смесь до кипения и кипятят 1 час. После охлаждения отфильтровывают выделившуюся NaCl, промывают многократно диоксаном, диоксан отгоняют, оставшееся масло - 4-(2-оксиэтил)морфолин-3-он без очистки используют в следующей стадии.

К раствору масла (7 г) в 15 мл хлороформа прибавляют постепенно раствор 24 г (15 мл; 0,2 м) хлористого тионила в 20 мл хлороформа при температуре ниже 30°С, перемешивают 1 час, выливают в ледяную воду, промывают холодным раствором бикарбоната натрия, водой, сушат над Na2SO4, отгоняют растворитель, остаток перегоняют в вакууме, получают 5,23 г (64%, считая на диэтаноламин) IIа, т.кип. 144-6°С/10 мм. Найдено, %: Cl 21,50; N 8,32. C6H10ClNO2. Вычислено, %: Cl 21,67; N 8,56. ПМР-спектр (CDCl3), δ, м.д.:3,54 (2Н, т, NCH2 морфолона), 3,69 и 3,73 (4Н, два м, CH2CH2Cl), 3,89 (2Н, т, ОСН2СН2 морфолона), 4,17 (2Н, с, ОСН2СО морфолона).

Пример 2. 2-Метил-4-(2-хлорэтил)морфолин-3-он (IIб) (R4=Me).

Синтезирован аналогично предыдущему из 5,25 г (0,005 м) диэтаноламина и 1,15 г (0,005 м) металлического натрия, 9,05 г (0,005 м) этилового эфира α-бромпропионовой кислоты, с последующей обработкой 24 г хлористого тионила. Выход IIб - 4,8 г (54%, считая на диэтаноламин, т.кип. 142-4°С/10 мм. Найдено, %: N 7,70; Cl 19,80. C7H12ClNO2. Вычислено, %: N 7.89; Cl 19,96. ПМР-спектр (CDCl3), δ, м.д.: 1.42 (3Н, д, СН3); 3.34 и 3.96 (1Н, д.д.д. и 1Н, д.д.д. CH2N морфолона), 3.6-3.83 (6Н, м, СН2О морфолона, ClCH2CH2). 4.18 (3Н, кв, СНСН3 морфолона).

Пример 3. 2-[2-(3-Оксоморфолин-4-ил)этилтио]-5-этоксибензимидазола гидрохлорид (Ia) (R1=OEt, R2=R3=R4=R5=H).

Смесь 0,49 г (0,0025 м) 2-меркапто-5-этоксибензимидазола и 0,49 г (0,003 м) 4-(2-хлорэтил)морфолин-3-она (IIа) в 10 мл абсолютного спирта кипятят 1 час, отгоняют растворитель, осадок перекристаллизовывают из смеси метанол-эфир, получают 0.71 г (80%) соединения Iа, т.пл. 178-82°С (с разл.). Найдено, %: С 50,37; Н 5,65; Cl 10,00; N 12,02; S 9.22. C15H20ClN3O3S. Вычислено, %: С 50,34; Н 5,63; Cl 9,91; N 11,74; S 8,96. ПМР-спектр (D2O), δ, м.д.: 1.64 (3Н, т, ОСН2СН3), 3.72 (2Н, т, CH2N морфолона), 3.82 (2Н, т, CH2S), 3,98 (2Н, т, CH2N), 4.05 (2Н, т, ОСН2СН2 морфолона), 4.25 (2Н, с, ОСН2СО морфолона), 4,35 (2Н, кв, СН2СН3), 7,30 (1Н, д, 6-Н), 7,35 (1Н, уш.с, 4-Н), 7,74 (1Н, д, 7-Н).

Обрабатывают водный раствор Iа бикарбонатом натрия, экстрагируют этилацетатом, сушат сульфатом натрия, отгоняют растворитель, получают основание Iа в виде масла. ПМР-спектр (CDCl3), δ, м.д.: 1,4 (3Н, т, CH3CH2O), 3,30 (2Н, т, CH2S), 3,49 (2Н, т, CH2N морфолона), 3,70 (2Н, т, СН2СН2О морфолона), 4,04 (2Н, кв, ОСН2СН3), 4,21 (2Н, с, ОСН2СО морфолона), 6,84 (1Н, д.д., 6-Н, J6,7=2,5 Гц, J4,6=8,5 Гц), 7,01 (1Н, д, 4-Н, J4,6=2,5 Гц), 7,43 (1Н, д, 7-Н, J6,7=8,5 Гц).

Пример 4. 2-(2-(3-Оксоморфолин-4-ил)этилтио]-5,6-диметилбензимидазола гидрохлорид (Iб) (R1=R2=Me, R3=R4=R5=H)

Синтезирован аналогично предыдущим из 0,45 г (0,0025 м) 2-меркапто-5,6-диметилбензимидазола и 0,49 г (0,003 м) соединения IIа, в 10 мл абсолютного спирта. Выход соединения Iб - 0,73 г (86%), т.пл. 236-8°С. Найдено, %: С 52,72; Н 6,12; Cl 10,06; N 12,49; S 9,28. C15H20ClN3O2S. Вычислено, %: С 52,70; Н 5,90; Cl 10,37; N 12,29; S 9,38. ПМР-спектр (D2O), δ, м.д.: 2,5 (6Н, с, 2СН3); 3,68 (2Н, т, CH2N морфолона), 3,76 (2Н, т, CH2S), 3,95 (2Н, т, CH2N), 4,04 (2Н, т, ОСН2СН2 морфолона), 4,22 (2Н, с, ОСН2СО морфолона), 7,49 (2Н, с, ArH).

Пример 5. 2-[2-(2-Метил-3-оксоморфолин-4-ил)этилтио]-5-этоксибензимидазола гидрохлорид (Iв) (R1=OEt, R2=R3=R5=H, R4=Me).

Синтезирован аналогично предыдущему из 0,58 г (0,003 м) 2-меркапто-5-этоксибензимидазола и 0,71 г (0.004 м) хлорида IIб в 15 мл абсолютного спирта. Выход Iв - 0,95 г (85%), т.пл. 86-8°С (с разд.). Найдено, %: Cl 9,54; N 11,34; S 8,68. C16H22ClN3O3S. Вычислено, %: Cl 9,53; N 11,30; S 8,62. ПМР-спектр (D2O), δ, м.д.: 1,5 (3Н, д, СНСН3 морфолона), 1,61 (3Н, т, OCH2CH3), 3,60 и 4,20 (1Н, д.д.д. и 1Н, д.д.д CH2N морфолона), 3,80-4.08 (6Н, м, CH2CH2O морфолона, SCH2CH2N), 4,3 (2Н, кв, OCH2CH3), 4,39 (1Н, кв, СНСН3 морфолона), 7,25 (1Н, д.д. 6-Н), 7,26 (1Н, д, 4-Н), 7,62 (1Н, д, 7-Н).

Пример 6. 2-[2-(2-Метил-3-оксоморфолин-4-ил)этилтио]-5,6-диметилбензимидазола гидрохлорид (Iг) (R1=R2=R4=Me, R3=R5=H).

Синтезирован аналогично по приведенной выше методике из 0,45 г (0,0025 м) 2-меркапто-5,6-диметилбензимидазола и 0,53 г (0,003 м) соединения IIб в 10 мл абсолютного спирта. Выход соединения Iг - 0,78 г (87%), т.пл. 194-6°С (с разл.). Найдено, %: С 53,83; Н 6,35; Cl 10,02; N 11,97. C16H22ClN3O2S. Вычислено, %: С 54,00; Н 6,23; Cl 9,96; N 11,81. ПМР-спектр (D2O), δ, м.д.: 1,46 (3Н, д, СНСН3 морфолона), 2,5 (6Н, с, 2СН3), 3,59 и 4,18 (1Н, д.д.д и 1Н, д.д.д. CH2N морфолона), 3,75-4,00 (6Н, м, СН2СН2О морфолона, SCH2CH2N), 4,30 (1Н, кв, СНСН3 морфолона), 7,5 (2Н, с, ArH).

Пример 7. 2-[2-(3-Оксоморфолин-4-ил)этилтио]бензимидазола гидрохлорид (Iд) (R1=R2=R3=R4=R5=H)

Синтезирован аналогично предыдущему из 0,45 г (0,003 м) 2-меркаптобензимидазола и 0,65 г (0,004 м) соединения IIа в 15 мл абсолютного спирта. Выход соединения Iд - 0,62 г (80%), т.пл. 182-4°С (с разл.). Найденов, %: С 49,52; Н 4,96; N 13,2; Cl 11,05. Вычислено, %: С 49,76; Н 5,14; N 13,39; Cl 11,30. ПМР-спектр (D2O), δ, м.д.: 3,74 (2Н, т, CH2N морфолона), 3.82 (2Н, т, CH2S), 4.00 (2Н, т, CH2N). 4.08 (2Н, т, ОСН2СН2 морфолона), 4.22 (2Н, с, ОСН2СО морфолона); 7.72-7.76 (3Н, м, 4Н-6Н), 7.8 (1Н, д.д., 7-Н).

Пример 8. 1,5,6-Триметил-2-(2-(3-оксоморфолин-4-ил)этилтио]бензимидазола гидрохлорид (Ie) (R1=R2=R3=Me, R4=R5=H).

К 7 мл абсолютного диметилформамида прибавляют 0,12 г (0.03 м) 60% гидрида натрия, через 30 мин при перемешивании прибавляют раствор соединения Iб в 5 мл абс ДМФА. Смесь перемешивают 1 час, прибавляют 1 мл (0,23 г, 0.016 м) йодистого метила, перемешивают 0,5 часа. Реакционную смесь выливают в воду, экстрагируют хлороформом, экстракт сушат сульфатом магния, растворитель отгоняют, остаток растворяют в абсолютном эфире, фильтруют и обрабатывают эфирным раствором хлористого водорода. Выпавший осадок отфильтровывают, перекристаллизовывают из смеси метанол-эфир, получают 0,3 г (83%) соединения Ie, т.пл. 132-4°С (с разл.). Найдено, %: Cl 10,03; N 12,00; S 9,25. C16H22C1N3O2S. Вычислено, %: Cl 9,96; N 11,81; S 9,01. ПМР-спектр (D2O), δ, м.д.: 2,59 и 2,61 (3Н, с. и 3Н, с, 2СН3), 3,70 (2Н, т, CH2N морфолона), 3,82 (2Н, т, CH2S), 3,97 (2Н, т, CH2N), 4,00 (3Н, с, NCH3), 4,10 (2Н, т, ОСН2СН2 морфолона), 4,25 (2Н, д, OCH2CO морфолона), 7,65 (6Н, с, ArH)

Пример 9. 1,5,6-Триметил-2-[2-(2-метил-3-оксоморфолин-4-ил)этил-тио]бензимидазола гидрохлорид (Iж) (R1=R2=R3=R4=Me, R5=H).

Синтезирован аналогично предыдущему из 0,36 г (0,001 м) соединения Iг, 0.12 г (0,03 м) 60% гидрида натрия и 0,1 мл (0,016 м) йодистого метила в абсолютном диметилформамиде. Выход соединения Iж - 0,32 г (86%), т.пл. 124-6°С (с разл.). Найдено, %: Cl 9,25; N 11,15; S 8.63. C17H24ClN3O2S. Вычислено, %: Cl 9.58; N 11,36; S 8,67. ПМР-спектр (D2O), δ, м.д.: 1,51 (3Н, д, СНСН3 морфолона), 2,54 и 2,55 (3Н, с и 3Н, с, 2СН3), 2,60 и 4,20 (1Н, д.д.д. и 1Н, д.д.д. CH2N морфолона), 3,75-4,05 (6Н, м, CH2CH2O морфолона, SCH2CH2N), 4,00 (3Н, с, NCH3), 4,30 (1Н, кв, СНСН3 морфолона), 7,62 (2Н, с, ArH).

Результаты фармакологического изучения соединений

1. Влияние соединений серии I на поведение мелких лабораторных животных в тесте «открытое поле» (Archer J. Tests for emotionality in rats and mice: a review. // Anim. Behav. - 1973. - 21. - 205-235).

В работе были использованы мелкие лабораторные животные-самцы массой 20-22 г и 180-200 г, которых содержали в условиях лабораторного вивария по 6 особей в клетке на стандартной диете при свободном доступе к воде не менее 10 дней до начала эксперимента при обычном 12-часовом световом режиме. Все эксперименты проводили в период с 9:00-13:00.

Через 30 мин после внутрибрюшинного (в/б) введения соединений в дозе 1,0 мг/кг животное сначала помещали на 1 мин в темную камеру, а затем - на один из периферических квадратов ОП, которое представляет из себя белую круглую арену диаметром 200 см с белыми бортами. Арена равномерно освещена 4-мя лампами по 100 Вт каждая, расположенными на высоте 100 см над поверхностью поля, разделенного 3-мя концентрическими окружностями, которые в свою очередь разбиты радиусами на сектора так, что пол состоит из 16 одинаковых периферических и 8 центральных сегментов. Наблюдение проводили в течение 5 мин. Регистрировали следующие параметры:

- число пересечений периферических сегментов ОН (ПДА);

- число пересечений центральных сегментов и заходов в центр (ЦДА);

- число вставаний на задние лапы (ВА);

- эмоциональность определяли по числу дефекаций в процессе тестирования (ЭМ);

- общую двигательную активность (ОДА) оценивали как сумму показателей ПДА, ЦДА и ВА.

Статистическую обработку проводили с использованием непараметрического анализа для независимых переменных (U-тест Манна-Уитни).

Установлено, что из изученных соединений активирующим (анксиолитическим) действием обладали соединения Iа и Iв, после введения которых у животных увеличивалась общая двигательная активность (ОДА) за счет пересечений периферических и центральных сегментов, последнее статистически достоверно (таблица 1).

2. Влияние соединений серии I на поведение мелких лабораторных животных в тесте "приподнятый крестообразный лабиринт" (Pellow S., Chopin P., Pile S., Briley M. Validation of open: closed arm entries in elevated plas-maze as a nuasure of anxiety in the rat // Neurosci. Meth J., №14, p.149-167 (1985)).

В работе были использованы мелкие лабораторные животные-самцы массой 20-22 г и 180-200 г, которых содержали в условиях лабораторного вивария по 6 особей в клетке на стандартной диете при свободном доступе к воде не менее 10 дней до начала эксперимента при обычном 12-часовом световом режиме. Все эксперименты проводили в период с 9:00 до 13:00.

Для оценки анксиолитического действия веществ был использован приподнятый крестообразный лабиринт (ПКЛ) и методика оценки поведения животных согласно Pellow и соавт. (1985). Лабиринт представляет собой перекрещенные полоски размером 50×10 см. Два противоположных отсека имеют вертикальные стенки высотой 40 см. Лабиринт приподнят от пола на 50 см. В месте перекрестка плоскостей находится центральная платформа 10×10 см. Через 30 мин после внутрибрюшинного (в/б) введения соединений Ia-Iг, Ie, Iж в дозе 1,0 мг/кг животное помещали на центральную площадку хвостом к открытому рукаву. Регистрировали время, проведенное животным в открытых, закрытых рукавах и на центральной площадке, а также число заходов в открытые и закрытые рукава. Общее время наблюдения для каждого животного составляло 5 минут. В качестве критерия анксиолитического действия использовали показатель времени, проведенного в открытых рукавах установки. Число пересечений центральной платформы (общее число заходов в темный и светлый рукава лабиринта) использовали для оценки влияния соединений на двигательную активность лабораторных животных.

Установлено, что соединения Iа, Iб, Iг, Iе и Iж вызывали статистически значимое увеличение пребывания экспериментальных животных в открытых рукавах лабиринта за счет сокращения пребывания в закрытых рукавах, что однозначно свидетельствует о наличии анксиолитической активности (таблица 2).

3. Влияние соединения Iа на поведение мышей линии Balb/c в условиях эмоционально-стрессового воздействия в тесте «открытое поле» (С.Б.Середенин, А.А.Ведерников / Влияние психотропных препаратов на поведение инбредных мышей в условиях открытого поля / Бюлл. Эксп.Биол. Мед. - 1979. - Т.88, №7, с.38-40).

Для исследования анксиолитического действия и дозовой зависимости соединения Iа был использован метод измерения двигательной активности в тесте «открытое поле». О наличии анксиолитического действия судили по выявлению активирующего эффекта на двигательную активность у животных с «пассивным» типом ЭСР (линия Balb/c).

В работе были использованы мыши - самцы линий Balb/c массой 20-22 г (питомник "Столбовая"). Животных содержали в условиях лабораторного вивария в клетках по 10 особей в каждой, в течение не менее двух недель до начала эксперимента, на стандартной диете, при свободном доступе к воде, при нормальном 12-часовом световом режиме. Все эксперименты проводили в период времени с 9.00 до 13.00.

Через 30 минут после внутрибрюшинного введения соединения 1а животное выдерживали в темноте в течение 1 минуты и затем помещали в один из периферических квадратов "открытого поля", которое представляет из себя белую круглую арену диаметром 1 метр с белыми бортами высотой 50 см. Арена равномерно освещена 4-мя лампами по 75 Вт каждая, расположенными на высоте 1 м над поверхностью поля. Все пространство арены равномерно разделено 4-мя концентрическими окружностями, которые в свою очередь разбиты радиусами на сектора так, что периферическая окружность состоит из 16 одинаковых криволинейных квадратов. Наблюдение за животным производили в течение 3 минут, раздельно фиксировали число пересеченных квадратов на периферии и в центральных областях, а также число стоек. Суммарное число пересеченных квадратов вместе с числом стоек обозначали как общую активность.

Статистическую обработку полученных результатов проводили, используя однофакторный дисперсионный анализ и непараметрический анализ для независимых переменных (U-тест Манна-Уитни).

В условиях эмоционально-стрессового воздействия в тесте «открытое поле» при внутрибрюшинном введении соединения Iа в дозах 0,1; 0,5; 1,0; 5,0 и 10,0 мг/кг обнаружено достоверное дозозависимое повышение периферической, центральной и общей двигательной активности мышей линии Balb/c по сравнению с контролем в диапазоне доз 0,1-5,0 мг/кг. Максимальное увеличение общей ДА выявлено при использовании препарата в дозах 0,5 и 1,0 мг/кг (таблица 3).

Таким образом, соединение Iа в широком диапазоне доз при внутрибрюшинном способе введения обладает ярко выраженным анксиолитическим действием у мышей Balb/с. Данная активация происходила за счет увеличения периферической и центральной двигательной активности, что характерно для соединений, обладающих анксиолитическим действием.

Дозовый диапазон соединения Iа, в котором он проявляет фармакологическую активность, совпадает с аналогичным фармакологическим эффектом Афобазола при внутрибрюшинном введении используемых линий мышей.

4. Влияние соединения Iа на поведение мышей линии Balb/c в тесте "приподнятый крестообразный лабиринт"

(Pellow S.E., Johnston A.L., File S.E. - J. Pharm.Pharmacol. - 1987, - v.37 - pp.917-928).

Метод приподнятого крестообразного лабиринта (ПКЛ), предложенный известным психофармакологом S. File, общепринятый в настоящее время для оценки анксиолитического действия (File S.E. - J. Pharm. PharmacoL, 1984, 36, pp.837-840). Сущность метода заключается в анализе соотношения реакции страха животных в незнакомом пространстве и высоты с одной стороны и поисковой активности в новой обстановке с другой.

Установка ПКЛ представляла собой две взаимопересекающиеся под прямым углом (крестообразно) горизонтальные дорожки (коридоры) 22×5 см, приподнятые на высоту 60 см, одна из которых была защищена на противоположных концах вертикальными непрозрачными стенками высотой 15 см (темные или «защищенные» рукава). Центральная площадка 5×5 см (центр ПКЛ), на которую животное помещалось в начале эксперимента, давала возможность животному переместиться в темные, либо светлые рукава лабиринта - в зависимости от преобладания тревоги (боязнь высоты, открытого пространства) или исследовательской активности (что побуждало животное выходить из «защищенных» рукавов). Освещение стандартное. Время наблюдения составляло 5 минут после предварительного выдерживания животного в затемненном пространстве 1 минуту.

Количественно оценивались следующие показатели: время пребывания в открытых и закрытых рукавах лабиринта (в секундах), время на центральной площадке лабиринта, число переходов в открытые и закрытые рукава.

Статистическую обработку полученных результатов проводили, используя однофакторный дисперсионный анализ и непараметрический анализ для независимых переменных (U-тест Манна-Уитни).

В соответствии с характеристиками для лабораторных мышей формами поведения реакция страха определяется стремлением животных находиться в закрытых рукавах лабиринта, снижением двигательной активности. Поисковая активность определяет пребывание животных в открытых рукавах, увеличением двигательной активности.

В работе были использованы мыши - самцы линий Balb/c с генетически детерминированной выраженной реакцией страха массой 20-22 г.

Соединение Iа, введенное внутрибрюшинно за 30 минут до эксперимента в дозах 0,1; 0,5 и 1,0 мг/кг, активировало поведение мышей линии Balb/c (таблица 4), увеличивая статистически значимо время пребывания в открытых рукавах, уменьшая время пребывания в закрытых рукавах по сравнению с контролем. Таким образом, в тесте ПКЛ показано, что соединение Iа оказывает достоверный анксиолитический эффект в диапазоне доз 0,1-1,0 мг/кг.

Таблица 1 Влияние соединений серии I на поведение мелких лабораторных животных в тесте «открытое поле» Группа n ОДА ПДА ЦДА ВА Эм Контроль 6 36,0±4,9 22,5±3,9 0,2±0,2 13,3±2,8 0,7±0,5 8 116,8±14,6 К 106,0±11,4 К 9,8±4,0 К 0,8±0,6 0,4±0,2 6 32,0±2,7 19,3±2,4 1,5±0,9 11,2±3,1 2,5±0,9 6 55,3±8,5 33,8±3,5 4,7±2,2 К 16,8±5,2 2,7±0,8 6 36,8±13,2 23,5±8,2 2,3±1,2 11,0±4,0 1,3±0,6 6 40,8±7,3 31,3±4,9 1,7±1,7 7,8±1,7 2,2±0,5 6 43,2±9,6 29,5±5,8 2,7±1,4 11,0±3,9 1,8±0,4 Примечание, n - число наблюдений; данные представлены в виде М±m, где М - среднее арифметическое; m - ошибка среднего арифметического; К - статистически значимые различия по сравнению с группой «Контроль» (р<0,01), согласно U-критерию Mann-Whitney.

Таблица 2 Влияние соединений серии I на поведение мелких лабораторных животных в тесте «приподнятый крестообразный лабиринт» Группа n Время, t (сек) Количество переходов В центре В открытых рукавах В закрытых рукавах В центре В открытых рукавах В закрытых рукавах Контроль 32 20,9±3,0 19,1±4,2 260,0±6,4 2,1±0,4 1,4±0,3 3,0±0,4 10 46,6±9,4 К 77,2±29,2 К 176,2±28,4 К 3,7±0,7 3,2±0,7 1,5±0,3 16 33,0±5,7 46,4±18,6 220,8±17,5 К 2,9±0,6 1,7±0,5 3,4±0,7 16 19,6±4,8 11,9±4,2 268,5±6,4 1,6±0,4 0,7±0,2 2,6±0,5 16 26,3±4,0 73,6±20,3 К 200,1±20,0 К 3,3±0,6 3,1±0,9 4,4±0,7 16 30,6±6,8 64,6±23,8 204,8±23,1 К 3,1±0,9 1,9±0,5 3,3±0,9 16 38,3±4,4 К 27,8±8,4 233,9±11,5 К 3,7±0,7 К 1,6±0,4 4,3±0,7 Примечание, n - число наблюдений; данные представлены в виде М±m, где М - среднее арифметическое; m - ошибка среднего арифметического; К - статистически значимые различия по сравнению с группой «Контроль» (р<0,05), согласно U-критерию Mann-Whitney.

Таблица 3 Влияние соединения la на поведение мышей линии Balb/c в тесте «открытое поле» Доза n ОДА ПДА ЦДА Центр Верт Деф Контроль 9 24,0±5,9 22,7±6,1 1,3±0,6 0,0±0,0 0,0±0,0 1,0±0,4 0,1 мг/кг 10 44,8±5,6 К 42,4±5,2 К 2,1±1,0 0,0±0,0 0,3±0,2 0,8±0,4 0,5 мг/кг 13 52,0±4,2 К 51,4±4,1 К 0,5±0,3 0,0±0,0 0,1±0,1 0,3±0,2 1,0 мг/кг 8 116,8±14,6 К 106,0±11,4 К 9,8±4,0 К 0,3±0,3 0,8±0,6 0,4±0,2 5,0 мг/кг 8 27,6±5,1 26,9±4,8 0,8±0,8 0,0±0,0 0,0±0,0 0,9±0,3 10,0 мг/кг 8 46,9±10,5 44,3±9,5 2,1±1,4 0,1±0,1 0,4±0,4 1,6±0,5 Примечание, n - число наблюдений; данные представлены в виде М±m, где М - среднее арифметическое; m - ошибка среднего арифметического; К - статистически значимые различия по сравнению с группой «Контроль» (р<0,01), согласно U-критерию Mann-Whitney.

Таблица 4 Влияние соединения Ia на поведение мышей линии Balb/c в тесте «приподнятый крестообразный лабиринт» Препарат n Время, t (сек) Количество переходов Количество дефекаций В центре В открытых рукавах В закрытых рукавах В открытых рукавах В закрытых рукавах Контроль 15 27,4±1,9 11,7±2,5 258,3±3,3 9,1±0,6 8,0±0,6 0,6±0,2 0,1 мг/кг 10 38,1±5,5 49,7±9,1 К 212,2±6,2 К 9,4±0,9 7,8±0,4 0,7±0,3 0,5 мг/кг 10 36,4±5,7 65,1±8,4 К 199,5±5,9 К 7,0±0,5 7,2±0,6 0,3±0,2 1,0 мг/кг 10 42,8±4,7 49,2±5,7 К 208,0±5,0 К 9,2±0,7 7,9±0,5 1,1±0,3 Примечание, n - число наблюдений; данные представлены в виде М±m, где М - среднее арифметическое; m - ошибка среднего арифметического; К - статистически значимые различия по сравнению с группой «Контроль» (р<0,01), согласно U-критерию Mann-Whitney.

Похожие патенты RU2373202C2

название год авторы номер документа
ПРОИЗВОДНЫЕ 2-МЕРКАПТОБЕНЗИМИДАЗОЛА, ОБЛАДАЮЩИЕ СЕЛЕКТИВНОЙ АНКСИОЛИТИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТЬЮ 1994
  • Середенин С.Б.
  • Бледнов Ю.А.
  • Савельев В.Л.
  • Можаева Т.Я.
  • Рагимов Х.С.
  • Яркова М.А.
RU2061686C1
5,5-ДИЗАМЕЩЕННЫЕ-2-МЕТИЛ-9,9-ДИОКСО-9-ТИАБИЦИКЛО[4.3.0]НОНАНЫ 2001
  • Шульц Э.Э.
  • Толстиков Г.А.
  • Сорокина И.В.
  • Толстикова Т.Г.
RU2184732C1
ПРОИЗВОДНЫЕ 1,4-БЕНЗОДИАЗЕПИНА, ОБЛАДАЮЩИЕ СЕЛЕКТИВНОЙ АНКСИОЛИТИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТЬЮ 1995
  • Середенин С.Б.(Ru)
  • Бледнов Ю.А.(Ru)
  • Андронати Сергей Андреевич
  • Павловский Виктор Иванович
  • Яворский Александр Степанович
RU2133248C1
Новые глипролины с ноотропной, антигипоксической, нейропротективной и анксиолитической активностью 2016
  • Середенин Сергей Борисович
  • Гудашева Татьяна Александровна
  • Колясникова Ксения Николаевна
  • Кузнецова Елена Александровна
  • Воронина Татьяна Александровна
  • Яркова Милада Альнордовна
  • Антипова Татьяна Алексеевна
  • Литвинова Светлана Александровна
  • Золотов Николай Николаевич
RU2646604C2
N-(2-(2-(ДИАЛКИЛАМИНО)ЭТОКСИ)ЭТИЛ)КАРБОКСАМИДЫ И ИХ ГИДРОХЛОРИДЫ, ОБЛАДАЮЩИЕ АНТИАРИТМИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТЬЮ, И ФАРМАЦЕВТИЧЕСКИЕ КОМПОЗИЦИИ НА ИХ ОСНОВЕ 2019
  • Борисова Надежда Юрьевна
  • Афанасьева Елена Юльевна
  • Борисова Елена Яковлевна
  • Арзамасцев Евгений Вениаминович
  • Крылов Александр Владимирович
  • Лесников Владислав Константинович
  • Виноградова Екатерина Евгеньевна
  • Виноградов Дмитрий Борисович
  • Асилова Нина Юрьевна
  • Калдыркаева Ольга Сергеевна
  • Терехова Ольга Александровна
  • Левицкая Елена Леонидовна
  • Кудрявцева Эльвира Валерьевна
  • Полуэктова Валентина Петровна
  • Гайсинюк Татьяна Владимировна
  • Амбарцумян Арега Шмавоновна
RU2712638C1
ЗАМЕЩЕННЫЕ 3-АРИЛСУЛЬФОНИЛ-ПИРАЗОЛО[1,5-а]ПИРИМИДИНЫ, АНТАГОНИСТЫ СЕРОТОНИНОВЫХ 5-HT РЕЦЕПТОРОВ, СПОСОБЫ ИХ ПОЛУЧЕНИЯ И ПРИМЕНЕНИЯ 2008
  • Иващенко Александр Васильевич
  • Савчук Николай Филиппович
  • Иващенко Андрей Александрович
RU2393158C1
Гидрогалогенид 1-(3,4-диметоксифенил)-2-(7,8-диметил-2,3,4,5-тетрагидро[1,3]диазепино[1,2-а]бензимидазол-11-ил)этанона, обладающий обезболивающей и анксиолитической активностью 2016
  • Диваева Людмила Николаевна
  • Спасов Александр Алексеевич
  • Мальцев Дмитрий Васильевич
  • Кузьменко Татьяна Андреевна
  • Морковник Анатолий Савельевич
  • Яковлев Дмитрий Сергеевич
  • Таран Алёна Сергеевна
  • Петров Владимир Иванович
  • Богославцева Мария Владимировна
RU2636785C1
Четвертичные аммониевые соли на основе производных витамина В6 2015
  • Штырлин Юрий Григорьевич
  • Штырлин Никита Валерьевич
  • Сапожников Сергей Витальевич
  • Никитина Елена Владимировна
  • Иксанова Альфия Габдулахатовна
  • Каюмов Айрат Рашитович
RU2607522C1
ПРОИЗВОДНЫЕ ХИНАЗОЛИНА, ОБЛАДАЮЩИЕ АНТИДЕПРЕССИВНОЙ, АНКСИОЛИТИЧЕСКОЙ И НООТРОПНОЙ АКТИВНОСТЬЮ 2012
  • Петров Владимир Иванович
  • Тюренков Иван Николаевич
  • Озеров Александр Александрович
RU2507199C1
3-ОКСОТИАЗОЛИДИНО [3,2-A] ПИПЕРАЗИНЫ ИЛИ ИХ ГИДРОХЛОРИДЫ, ОБЛАДАЮЩИЕ ТРАНКВИЛИЗИРУЮЩИМ ДЕЙСТВИЕМ 1991
  • Куроян Р.А.
  • Мкртчян А.К.
  • Маркосян А.И.
  • Джагацпанян И.А.
  • Асрян А.Б.
  • Сукасян Р.С.
SU1823452A1

Реферат патента 2009 года ЗАМЕЩЕННЫЕ 2-[2-(3-ОКСОМОРФОЛИН-4-ИЛ)ЭТИЛТИО]БЕНЗИМИДАЗОЛЫ, ОБЛАДАЮЩИЕ АНКСИОЛИТИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТЬЮ

Изобретение относится к биологически активным соединениям и касается замещенных 2-[2-(3-оксоморфолин-4-ил)этилтио]бензимидазолов общей формулы

где R1, R2, R3, R4, R5 - одинаковые или различные: Н, низшие алкилы или алкоксигруппы. Технический результат - получение новых соединений, обладающих анксиолитическими свойствами, что делает их перспективными для применения в медицине для лечения нервно-психических расстройств. 1 з.п. ф-лы, 4 табл.

Формула изобретения RU 2 373 202 C2

1. Замещенные 2-[2-(3-оксоморфолин-4-ил)этилтио]бензимидазолы общей формулы

где R1, R2, R3, R4, R5 - одинаковые или различные: Н, низшие алкилы или алкоксигруппы, обладающие анксиолитическим действием.

2. Соединение по п.1, где R1=OEt, R2=R3=R4=R5=H.

Документы, цитированные в отчете о поиске Патент 2009 года RU2373202C2

ДИГИДРОХЛОРИД 2-(2-МОРФОЛИНОЭТИЛТИО)-5-ЭТОКСИБЕНЗИМИДАЗОЛА, УСКОРЯЮЩИЙ ПРОЦЕССЫ ВОССТАНОВЛЕНИЯ ПОСЛЕ ФИЗИЧЕСКИХ НАГРУЗОК 1984
  • Томчин А.Б.
  • Дмитруха В.С.
  • Виноградов В.М.
  • Спивакова Р.П.
  • Катков В.Ф.
  • Бобков Ю.Г.
SU1262926A1
ПРОИЗВОДНЫЕ 2-МЕРКАПТОБЕНЗИМИДАЗОЛА, ОБЛАДАЮЩИЕ СЕЛЕКТИВНОЙ АНКСИОЛИТИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТЬЮ 1994
  • Середенин С.Б.
  • Бледнов Ю.А.
  • Савельев В.Л.
  • Можаева Т.Я.
  • Рагимов Х.С.
  • Яркова М.А.
RU2061686C1
ПРОИЗВОДНЫЕ 2-МЕРКАПТОБЕНЗИМИДАЗОЛА, ОБЛАДАЮЩИЕ ПРОТИВОИШЕМИЧЕСКОЙ, АНТИАРИТМИЧЕСКОЙ И ПРОТИВОФИБРИЛЛЯТОРНОЙ АКТИВНОСТЬЮ 1995
  • Середенин С.Б.
  • Савельев В.Л.
  • Можаева Т.Я.
  • Орлова Э.К.
  • Чичканов Г.Г.
  • Каверина Н.В.
  • Цорин И.Б.
  • Кирсанова Г.Ю.
RU2136667C1
GB 2173191 A, 08.10.1986.

RU 2 373 202 C2

Авторы

Середенин Сергей Борисович

Можаева Татьяна Яковлевна

Виглинская Анастасия Олеговна

Яркова Милада Альнордовна

Колыванов Геннадий Борисович

Жердев Владимир Павлович

Литвин Александр Алексеевич

Даты

2009-11-20Публикация

2007-10-12Подача