АНТИДИАБЕТИЧЕСКОЕ СРЕДСТВО Российский патент 2002 года по МПК A61K35/78 A61P3/10 

Изобретение относится к области фармакологии, в частности к новым антидиабетическим средствам.

Известны традиционные антидиабетические средства. При инсулинзависимом диабете применяют инсулин. При инсулиннезависимом проводят лечение синтетическими препаратами, такими как производные сульфонилмочевины, бигуаниды, ингибиторы альфа-глюкозидазы и др. [1]. При легких формах течения диабета метаболический контроль заболевания может достигаться при применении экстрактов лекарственных растений в качестве сахароснижающих препаратов [2]. При диабете средней степени тяжести фитотерапия применяется в качестве дополнения к лечению синтетическими препаратами и инсулином [2].

Известны сахароснижающие свойства водно-этанольных экстрактов корня женьшеня [4;5], корней и корневищ элеутерококка [3-5], листьев Averrhoa bilimbi [7], клубней Dioscorea dumetomm [8].

При всех преимуществах известных растительных сахароснижающих средств возможность широкого использования препаратов данной группы в значительной мере лимитируется культуральными особенностями растений, являющихся сырьем для приготовления лекарственных форм (длительный вегетационный цикл, низкая продуктивность), а также их произрастанием вне пределов Европейской территории Российской Федерации.

Целью настоящего изобретения является создание высокоэффективного широко доступного растительного антидиабетического средства для парентерального применения.

Указанная цель достигается использованием в качестве антидиабетического средства сухого экстракта клубней растения Cyperus esculentus L. (чуфа, сыть съедобная), приготовленного путем экстрагирования 40% этанолом. Антидиабетический эффект сухого экстракта клубней растения проявляется в дозе 10 мг/кг массы тела в сутки при подкожном способе введения.

Клубни растения Cyperus esculentus L. в китайской народной медицине используются как средство при болях в желудке, а также как антидепрессивное средство [6]. В доступной литературе отсутствуют сведения о применении экстрактов растения Cyperus esculentus L. в медицине.

Заявляемое решение является патентоспособным, так как предложен новый лекарственный препарат (сухой экстракт клубней Cyperus esculentus L.) в качестве антидиабетического средства. Заявляемое решение широко применимо, так как культура Cyperus esculentus L. освоена на Европейской территории, в т. ч. на территории Российской Федерации. Примеры, подтверждающие антидиабетическое действие сухого экстракта Cyperus esculentus L. и способ его получения приведены ниже.

Пример 1. Получение сухого экстракта клубней растения Cyperus esculentus.

Свежесобранные клубни растения Cyperus esculentus промывали проточной горячей водой в течение 15 мин, затем помещали на хлопчатобумажную ткань и высушивали в течение 1 мес в хорошо проветриваемом помещении при температуре воздуха 20-25^oС до постоянной массы.

Затем клубни измельчали с использованием установки МУБ-030 до порошкообразного состояния с размером частиц 150-250 мкм.

Полученный порошок заливали экстрагентом (40%-ным этанолом) в соотношении 1:5. Экстракцию проводили при температуре 37^oС в течение 7 сут в защищенном от света месте.

Экстрактивные компоненты растения отделяли от растворителя в вакуумном ротационном испарителе Unipal type 350 при температуре 60^oС до постоянной массы.

Пример 2. Влияние сухого экстракта клубней растения Cyperus esculentus на уровень глюкозы здоровых животных.

Изучение сахароснижающих свойств сухого экстракта клубней растения Cyperus esculentus провели на здоровых самцах белых крыс весом 190-230 г в стандартных условиях (температура воздуха - 20-22^oС, влажность - 70-80%). Предварительно крысы были подвергнуты пищевой депривации на 16 ч при свободном доступе к воде. Уровень глюкозы крови определяли глюкозооксидазным методом. Забор крови проводили из хвостовой вены. Крысам контрольной группы (n=6) после исходного определения уровня глюкозы подкожно инъецировали 0,5 мл 0,9%-ного раствора хлорида натрия, опытным группам (n=6) - 0,5 мл водного раствора сухого экстракта C.esculentus из расчета 1,0, 10,0 и 100,0 мг сухого вещества на 1 кг массы тела. Результаты, представленные в табл. 1, позволяют сделать вывод о непосредственном сахароснижающем эффекте препарата.

Пример 3. Эффективность однократного применения сухого экстракта Cyperus esculentus L. при аллоксановом сахарном диабете крыс.

Изучение антидиабетических свойств сухого экстракта Cyperus esculentus L. проводили на 56 белых беспородных крысах-самцах массой 150-170 г на модели аллоксанового диабета. Животных содержали в стандартных условиях (температура воздуха - 20-22^oС, влажность - 70-80%). После 12-часовой голодной диеты животным однократно подкожно вводили 2,6%-ный раствор аллоксана в дозе 130 мг/кг. Крысам опытной группы (n=23) за 2 ч до введения аллоксана подкожно инъецировали водный раствор сухого экстракта С. esculentus в дозе 10,0 мг/кг. Животным контрольной группы (n= 23) подкожно вводили 1,0 мл 0,9%-ного р-ра NaCl за 2 ч до инъекции аллоксана. Животным четвертой (интактной) группы (n= 10) с интервалом в 2 ч были произведены 2 подкожные инъекции 1,0 мл изотонического раствора NaCl.

За животными наблюдали в течение 14 дней, ежедневно регистрировали динамику глюкозы в крови, определяли наличие глюкозы в моче. Динамика гликемии представлена в табл. 2. Развитие аллоксанового диабета сопровождалось появлением всех признаков инсулинзависимого сахарного диабета (гипергликемия, глюкозурия, снижение массы тела, полиурия, полидипсия, полифагия и др.). Установлено, что однократное предварительное применение сухого экстракта клубней Cyperus esculentus L. благоприятно влияет на общее состояние больных диабетом животных, обеспечивает снижение степени проявления основных клинических симптомов заболевания, а также сокращает сроки выздоровления. Продолжительность выделения глюкозы с мочой животных опытной группы составила 2 сут против 6 сут в контроле.

Таким образом, сухой экстракт Cyperus esculentus L. при однократном подкожном профилактическом введении обладает антидиабетическими свойствами.

Пример 4. Влияние длительного профилактического применения сухого экстракта Cyperus esculentus L. при аллоксановом сахарном диабете.

На вышеописанной модели аллоксанового сахарного диабета крыс изучали влияние препаратов чуфы на развитие заболевания при их длительном профилактическом применении. В эксперименте использовали 40 самцов белых лабораторных крыс со средней массой тела 165,2±6,56 г. Крысам 3-х групп вводили раствор аллоксана в дозе 150,0 мг/кг, при этом животным 1-й опытной группы (n=10) ежедневно подкожно инъецировали водный раствор сухого экстракта Cyperus esculentus L. в дозе 10 мг/кг в течение 7 дней, животные 2-й опытной группы (n=10) получали экстракт с той же кратностью в той же дозе в течение 21 дня, контрольной группе (n= 10) в течение 7 сут до инъекции аллоксана вводили соответствующие объемы физиологического раствора. Интактные крысы (n=10) получали только физиологический раствор в объеме 1,0 мл. В течение 15 дней регистрировали заболеваемость животных, определяли концентрацию глюкозы в крови и моче. Результаты, представленные в табл. 3, свидетельствуют, что длительное предварительное введение препаратов чуфы снижает интенсивность проявления основных симптомов сахарного диабета (гипергликемия, глюкозурия), способствует сокращению сроков выздоровления. Наиболее эффективно профилактическое применение препарата в течение 21 дня.

Пример 5. Влияние длительного терапевтического применения сухого экстракта клубней чуфы при аллоксановом сахарном диабете.

Изучали терапевтическую эффективность сухого экстракта клубней Cyperus esculentus L. при аллоксановом диабете крыс. Для этого использовали 40 самцов белых лабораторных крыс с массой тела 144,5-172,0 г, содержащихся в стандартных условиях (температура воздуха - 20-22^oС, влажность - 70-80%). Все животные были разделены на 3 группы: - "опытная" (n=10); - "контрольная" (n= 20); - "интактная" (n=10). Крысам опытной и контрольной групп после 12-часовой голодной диеты однократно подкожно инъецировали раствор аллоксана в дозе 150,0 мг/кг массы, интактным животным аналогичным способом вводили физиологический раствор в объеме 1,0 мл. Начиная со 2 и до 20 сут от начала заболевания животным опытной группы ежедневно вводили подкожно 1 мл водного раствора сухого экстракта клубней чуфы в дозе 10,0 мг/кг, животным контрольной группы ежесуточно подкожно инъецировали физиологический раствор в объеме 1,0 мл. За животными наблюдали в течение 20 дней, регистрировали динамику гликемии. У всех животных уже через 24 ч после введения аллоксана развился симптомокомплекс сахарного диабета. Результаты лечебного применения сухого экстракта клубней Cyperus esculentus представлены в табл. 4 и свидетельствуют об антидиабетическом действии на модели аллоксанового сахарного диабета при терапевтическом применении.

Пример 6. Применение сухого экстракта клубней чуфы для профилактики стрептозотоцинового диабета.

Антидиабетические свойства сухого экстракта клубней Cyperus esculentus изучали на модели стрептозотоцинового диабета крыс. Исследование проводили на 18 самцах нелинейных лабораторных крыс возраста 10-12 недель, массой 170-190 г. Стрептозотоциновый диабет получали путем двукратного внутрибрюшинного введения стрептозотоцина в суммарной дозе 60 мг/кг (по 30 мг/кг с интервалом в 24 ч). Животных содержали в стандартных условиях (температура воздуха - 20-22^oС, влажность - 70-80%). Опытной группе за 1 ч до каждой инъекции стрептозотоцина вводили 0,5 мл водного раствора сухого экстракта С. esculentus из расчета 10 мг/кг массы тела. Контрольным животным за час до введения стрептозотоцина инъецировали такой же объем дистиллированной воды. Животные интактной группы в течение 2 дней дважды с интервалом 1 ч получали инъекции дистиллированной воды. Развитие стрептозотоцинового диабета сопровождалось появлением всех признаков сахарного диабета. За животными наблюдали в течение 12 дней, 1 раз в 2 дня определяли концентрацию глюкозы в крови. Результаты представлены в табл. 5.

Установлено, что однократное предварительное применение экстракта чуфы обеспечивает полную защиту от диабетогенного действия стрептозотоцина 33% животных, а также сокращает сроки выздоровления крыс, у которых на 2-й день заболевания наблюдали гипергликемию. При этом гликемия выше 6 мМ/л наблюдалась на 4 день у 33% крыс опытной группы, на 6 и 8 день - у 16,5%, на 12 день - у всех животных соответствовала видовой норме.

Таким образом, сухой экстракт клубней растения С. esculentus L. при однократном профилактическом введении подкожно в дозе 10 мг/кг за 1 ч до стрептозотоцина обладает антидиабетическими свойствами и на модели стрептозотоцинового диабета.

Сухой экстракт клубней Cyperus esculentus L. обладает антидиабетическим действием. Применение экстракта снижает уровень глюкозы у здоровых животных, снижает степень проявления основных клинических и лабораторных симптомов аллоксанового диабета при профилактическом и лечебном применении, защищает организм лабораторных животных от диабетогенного действия стрептозотоцина.

Литература
1. Балаболкин М.И. Диабетология. - М.: Медицина, 2000.-671 с.

2. Богданович В.Л. Сахарный диабет (лечение и профилактика). - Н.Новгород: НГМА, 1998.-192 с.

3. Брехман И.И. Элеутерококк. - Л.: Наука, 1979.-186с.

4. Дардымов И.В. Женьшень, элеутерококк. - М.: Наука, 1976.-184 с.

5. Молоковский Д. С., Давыдов В.В., Тюленев В.В. Действие адаптогенных фитопрепаратов при экспериментальном аллоксановом диабете. // Пробл.эндокринологии.-1989.- 6.-С. 82-87.

6. Perry L.M., Metzger J. Medicinal Plants of East and Southeast Asia: attributed properties and uses.-Cambridge: MIT Press, 1980.-620 c.

7. Pushparaj P. , Tan С.Н., Tan В.К. Effects of Averrhoa bilimbi leaf extract on blood glucose and lipids in streptozotocin-diabetic rats. // J Ethnopharmacol.- 2000.- 1-2.-С. 69-76.

8. Undie A.S., Akubue P.I. Pharmacological evaluation of Dioscorea dumetorum tuber used in traditional antidiabetic therapy. // J Ethnopharmacol-1986.- 2.-С. 133-144.

Изобретение относится к медицине, а именно к фармакологии, к новым антидиабетическим средствам. Предложено антидиабетическое средство, представляющее собой сухой экстракт клубней сыти съедобной. Антидиабетический эффект проявляется при подкожном введении водного раствора в дозе 10 мг/кг массы тела. Препарат является эффективным сахароснижающим средством. 5 табл.

Антидиабетическое средство на основе растительного сырья, отличающееся тем, что оно представляет собой сухой экстракт клубней сыти съедобной (чуфа, Cyperus esculentus L. )