ПРЕПАРАТ ДЛЯ ЗАЩИТЫ ЖИВОТНЫХ И РАСТЕНИЙ Российский патент 2003 года по МПК A61K35/70 A61K9/08 A01N63/00 

Изобретение относится к области защиты животных и растений от паразитов и более конкретно к производству препаратов на основе авермектинов, получаемых путем микробиологического синтеза.

Известно, что актиномицет Streptomyces avermitilis при культивировании в присутствии источников углерода, азота и фосфора при постоянной аэрации продуцирует восемь близких по строению веществ, названных авермектинами, которые обладают резко выраженным антипаразитарным действием (патент GB 1573955, 1980 г. ). Все авермектины по химическому строению являются 16-членными макролидами и отличаются между собой заместителями у 5 и 26 атомов углеродного кольца. Индивидуальные авермектины, получившие обозначения A_1a, A_1b, А_2а, А_2b, B_1a, B_1b, B_2a и В_2b, имеют различную биологическую активность. Наиболее активными являются авермектины B₁, особенно B_1a.

Развитие технологии получения авермектинов происходит по нескольким направлениям, к числу которых относятся получение штаммов, продуцирующих повышенные количества авермектинов, совершенствование процесса выделения авермектинов из мицелия штаммов Streptomyces avermitilis и другие.

Известен штамм Streptomyces аvermitilis ATCC 31272, продуцирующий в среднем 500 мкг/мл авермектинов (патент US 4310519, 1982 г.). Продуктивность штамма Streptomyces avermitilis ВНИИСХМ-51 (патент RU 2048250, 1995 г.) составляет 700 мкг/мл. Штамм Streptomyces avermitilis ВНИИСХМ-54 продуцирует уже 1500 мкг/мл авермектинов (патент RU 2054483, 1996 г.), причем содержание авермектина B_1a достигает 35% и более. Штамм Streptomyces avermitilis CCM 4697, депонированный в Чешской коллекции микроорганизмов в Брно, продуцирует в среднем 2300 мкг/мл авермектинов при размахе изменчивости 2000-3000 мкг/мл. Во всех приведенных случаях авермектины выделяют из мицелия одновременно экстракцией индивидуальным органическим растворителем, смешивающимся с водой, с последующим разделением, например хроматографическим.

Предлагаемое изобретение позволяет получать препараты для защиты животных и растений на основе трех комплексов авермектинов с различным содержанием индивидуальных авермектинов. Препараты содержат активное вещество на твердом носителе. Активным веществом является комплекс авермектинов в концентрации 0,1-0,3%, а твердым носителем служат перлит, цеолит, или отработанный мицелий S. avermitilis. Первые два носителя предпочтительны для получения противопаразитарных ветеринарных препаратов перорального применения. Препараты для защиты растений, в частности от галловых нематод, готовят с любым из трех носителей.

Для выделения авермектиновых комплексов различного компонентного состава используют сухую биомассу, полученную при выращивании продуцента в глубинных условиях на известных питательных средах.

Экстракцию авермектинов из биомассы осуществляют смесью, состоящей из воды и низко- и высококипящих растворителей, смешивающихся с водой в неограниченном соотношении. В качестве низкокипящих используют растворители с температурой кипения, не превышающей температуру кипения воды, например этиловый, метиловый и изопропиловый спирты или ацетон, в качестве высококипящих - полиэтиленгликоль с молекулярной массой 200 (ПЭГ-200), полиэтиленгликоль с молекулярной массой 400 (ПЭГ-400), диметилсульфоксид (ДМСО) и др. Экстракты очищают от пигментов и неорганических примесей с помощью катионообменных и анионообменных смол. Затем отгоняют воду и низкокипящий растворитель. Путем отстаивания оставшейся части экстракта в высококипящем растворителе отделяют примеси липидного характера.

Далее из раствора можно в одном случае осадить при помощи воды сразу все присутствующие авермектины и получить суммарный авермектиновый комплекс. В другом случае в присутствии воды и этилового спирта осаждают только часть авермектинов с преимущественным содержанием авермектинов В_1а и В_1b. Маточный раствор, оставшийся после отделения части авермектинов, смешивают с водой, осаждая оставшиеся авермектины.

При этом получают:
1) суммарный авермектиновый комплекс, получивший название аверсектин С, содержащий 8 авермектиновых компонентов в соотношении, %:
Авермектин А_1a - 6-12
Авермектин А_1b - Следы
Авермектин А_2a - 15-25
Авермектин А_2b - 2-4
Авермектин В_1a - 30-40
Авермектин В_1b - 2-12
Авермектин В_2a - 14-24
Авермектин В_2b - 1-2
или
2) комплекс, получивший название аверсектин В, содержащий в основном авермектины B_1a и В_1b, в %:
Авермектин В_1a - 76-83
Авермектин В_1b - 12-16
Авермектин В_2a - 0,8-6
Авермектин А_1a - 1-6
Остальные авермектины - Следы
и
3) комплекс, названный аверсектином АВ, следующего состава, в %:
Авермектин А_1a - 4-10
Авермектин А_1b - Следы
Авермектин А_2a - 25-45
Авермектин А_2b - 2,1-4,5
Авермектин В_1a - 12-18
Авермектин В_1b - 3-9
Авермектин В_2a - 25-45
Авермектин В_2b - 2,5-5,5
Препараты для защиты животных и растений с авермектинами в качестве активного начала могут быть как в жидкой, так и в твердой порошкообразной форме.

Достоинством порошкообразных форм на основе аверсектинов на твердых носителях с развитой поверхностью является их универсальность. Так, если инъекционные формы нельзя применять для лечения лошадей (они чувствительны к авермектинам при таком способе введения), птиц, диких животных, то порошкообразные формы можно применять с кормом для всех животных. Жидкие формы авермектинов могут применяться в качестве средств защиты растений от вредителей, исключая галловые нематоды из-за их условий обитания. Поскольку галловые нематоды находятся в почве, то применение жидких форм авермектинов малоэффективно из-за того, что авермектины в жидкой форме, попадая на поверхность почвы, прочно связываются с ней и не проникают на глубину 15-30 см, где в основном обитают почвенные нематоды.

Применяемые для этих целей порошкообразные формы на основе аверсектинов на твердых носителях не имеют указанных недостатков, так как после заделывания в почву с помощью фрезы достигают глубины до 30 см.

В качестве носителей для получения порошкообразных форм ветеринарного назначения можно использовать цеолиты и перлиты разных марок. Для приготовления препаратов для борьбы с галловыми нематодами могут быть использованы цеолиты, перлиты и мицелиальные отходы культуры Streptomyces avermitilis.

Изготовление и применение препаратов на основе аверсектинов С, В и АВ иллюстрируется следующими примерами.

Пример 1.

В смеситель емкостью 500 л внесли 50 л спирта этилового ректификата, 100 г аверсектина С и 2 л ПЭГ-400. Смесь перемешали до полного растворения и добавили 97,9 кг перлита с размером частиц 0,6-5,0 мм. Содержимое смесителя перемешивали в течение 1,5-2,0 ч до полного смачивания перлита. Полученный таким образом препарат высушили в конвекционном потоке теплого воздуха. В результате получили порошкообразный препарат на перлите, содержащий 0,1% аверсектина С.

Аналогично готовили препараты на основе аверсектина В или аверсектина АВ на цеолите или отработанной мицелиальной биомассе культуры Streptomyces avermitilis.

Препарат, содержащий 0,2% действующею вещества, используют для профилактики и лечения нематодозов, арахноэнтомозов домашних и диких жвачных, лошадей, пушных зверей и гусей. Препарат применяют ко всем видам животных и птиц групповым методом в смеси с сухим или увлажненным кормом в утреннее кормление два или семь дней подряд в дозах, указанных в табл. 1.

Общая доза корма с препаратом не должна превышать половину положенного количества по рациону. Эффективность препарата составляет не менее 35%. Противопаразитарный ветеринарный препарат для перорального применения на основе аверсектина В и перлита и цеолита будет предпочтительнее при нематодозах, а на основе аверсектина АВ - при эктопаразитозах. Препарат, содержащий аверсектин С на перлите и цеолите, будет предпочтительнее при перефеляриозе лошадей.

Оптимальные условия применения предлагаемого препарата для защиты растений от галловых нематод приведены в табл. 2.

Мицелиальная форма препарата на основе перлита и цеолита независимо от формы аверсектинов будет эффективна в борьбе с галловыми нематодами. Различия между ними будут в сроках защитного действия.

Срок защитного действия (время обработки препарата до появления первых галлов) составляет не менее 4-х месяцев.

Изобретение относится к защите животных и растений от паразитов, в частности к препаратам на основе авермектинов, полученных путем микробиологического синтеза. Препарат для защиты животных и растений содержит активное вещество и твердый носитель. Активным веществом является комплекс авермектинов в концентрации 0,1-0,3%, а твердым носителем является перлит, или цеолит, или отработанный мицелий S.avermitilis. В зависимости от условий применения препараты изготавливают на основе трех комплексов авермектинов с различным содержанием индивидуальных авермектинов. Эффективность препарата составляет не менее 35%. Срок защиты действия растений составляет не менее 4 месяцев. 2 табл.

1. Препарат для защиты животных и растений, содержащий активное вещество и твердый носитель, отличающийся тем, что активным веществом является комплекс авермектинов в концентрации 0,1-0,3%, а твердым носителем является перлит, или цеолит, или отработанный мицелий Streptomyces avermitilis. 2. Препарат по п. 1, отличающийся тем, что активным веществом является комплекс авермектинов, содержащий индивидуальные компоненты в следующем соотношении, мас. %:
Авермектин A_1a - 6-12
Авермектин A_1b - Следы
Авермектин А_2a - 15-25
Авермектин А_2b - 2-4
Авермектин В_1a - 30-40
Авермектин B_1b - 2-12
Авермектин В_2a - 14-24
Авермектин В_2b - 1-2
3. Препарат по п. 1, отличающийся тем, что активным веществом является комплекс авермектинов, содержащий индивидуальные компоненты в следующем соотношении, мас. %:
Авермектин В_1a - 76-83
Авермектин B_1b - 12-16
Авермектин В_2a - 0,8-6
Авермектин A_1a - 1-6
Остальные авермектины - Следы
4. Препарат по п. 1, отличающийся тем, что активным веществом является комплекс авермектинов, содержащий индивидуальные компоненты в следующем соотношении, мас. %:
Авермектин A_1a - 4-10
Авермектин A_1b - Следы
Авермектин А_2a - 25-45
Авермектин А_2b - 2,1-4,5
Авермектин В_1a - 12-18
Авермектин B_1b - 3-9
Авермектин В_2a - 25-45
Авермектин В_2b - 2,5-5,5