СПОСОБ ИЗГОТОВЛЕНИЯ ВАКЦИНЫ ПРОТИВ МИКРОСПОРИИ ДОМАШНИХ ЖИВОТНЫХ Российский патент 2003 года по МПК A61K39/00 

Изобретение относится к области ветеринарной микологии и может быть использовано при изготовлении вакцин против дерматомикозов сельскохозяйственных и домашних животных.

Актуальность изобретения заключается в том, что при изготовлении вакцины используется новая биотехнология, ускоряющая процесс выпуска вакцины в несколько раз, создается такой технологический цикл, который позволяет готовить вакцину многократно в течение года в количествах, необходимых потребителю, избегая каждый раз 60-дневного технологического цикла, сводя его к 1 дню.

Известен способ изготовления вакцины против трихофитии КРС - ТФ-130, технологический процесс, который состоит из 7 циклов: подготовка помещения и оборудования (2-3 дня), мойка и стерилизация посуды (3 дня), приготовление питательной среды (6 дней), приготовление матричной культуры (20-25 дней), выращивание культуры (18 дней), съем и гомогенизация грибной массы и цеховой контроль грибной суспензии (15 дней), после чего гомогенат разводят физиологическим раствором до рабочей концентрации вакцины, фасуют по 200 мл во флаконы и закатывают алюминиевыми колпачками. Цикл составляет 60-64 дня. Срок хранения 3 месяца (1).

Известен также способ изготовления вакцины МИККАНИС против микроспории кошек и других восприимчивых животных, состоящий из 6 циклов: подготовка помещения и оборудования (2-3 дня), приготовление питательной среды (6 дней), выращивание культуры (20-25 дней) проводят на сусло-агаре, съем, гомогенизация и контроль качества грибной суспензии (качество гомогената проверяют путем высева его на МПБ и МПА). Гомогенат разводят 2-3% раствором NаСl, добавляют 1-2 мл геля гидроокиси алюминия на 100 г разведенной солевым раствором вакцины и фасуют по 2 мл в ампулы и запаивают. Срок хранения 1 год. Цикл 35-40 дней (2).

В задачу наших исследований входило разработать способ получения вакцин против микроспории животного, создать такой технологический цикл, который позволяет готовить вакцину многократно в течение года в необходимых количествах, необходимых потребителю, избегая каждый раз длительного технологического цикла, сводя его к 1 дню.

Это удалось нам достичь благодаря тому, что при изготовлении вакцины после посева гомогената на чистоту его разливают по 15-20 мл во флаконы и помещают в морозильную камеру холодильника при температуре не выше -4^oC и используют в течение длительного времени (1 год - срок наблюдения).

Предложенный способ изготовления заключается в следующем.

Вариант 1.

Для изготовления вакцины против микроспории животных на 6 тыс. доз выращивают культуру Microsp. canis 473 на сусло-агаре, производят съем и гомогенизацию грибной массы (приготовление гомогената, проверка, качества его путем высева на МПБ и МПА), разливают по 15-20 мл во флаконы и замораживают при температуре -4^oС. По мере необходимости достают флакон замороженного гомогената, разводят 2-3% раствором поваренной соли до 300 мл на 1 флакон размороженного гомогената, добавляют 1 мл геля на 100 мл разведенного гомогената до концентрации рабочего разведения вакцины, что составляет 15 мл гомогената +300 мл солевого раствора и 3 мл геля гидроокиси алюминия. Полученную суспензию разливают по 2 мл в 5 мл ампулы и запаивают.

Полученную вакцину применили с положительным эффектом на 173 кошках и котятах и 83-х собаках с эффективностью 97,8% в 1999 году.

Вариант 2.

Для изготовления вакцины против микроспории животных из расчета на 50 тыс. доз выращивают культуру M. canis 473 на сусло-агаре, производят съем и гомогенизацию грибной массы (приготовление гомогената, контроль качества его проверяют путем высева на МПБ и МПА), разливают по 15-20 мл (получается 150-200 флаконов с гомогенатом), содержащих 50 тыс. доз. Замораживание проводят аналогично примеру 1, но при температуре минус 6 градусов.

По мере необходимости гомогенат флакона разводят, как указано выше (аналогично варианту 1).

Вариант 3.

Из приготовленного гомогената, как в 1 и 2 вариантах, исследовали жизнеспособность иммуногенных клеток - микроконидий через:
- сразу после приготовления гомогената: активных, способных к прорастанию живых клеток - 83-90%;
- замораживание проводят аналогично примеру 1, но при температуре минус 8^oС;
- после замораживания на второй день: активных, способных к прорастанию живых клеток - 80-90%;
- после замораживания через 3 месяца хранения в замороженном состоянии: 80-90%;
- после замораживания через 6 месяцев - 80-85%;
- через 12 месяцев после замораживания гомогената - 75-85%.

Жизнеспособность иммуногенных клеток проверяют путем высева на предметные стекла с полужидким агаром во влажных камерах и просматривают под микроскопом через 2-3 дня после высева.

Вакцина, изготовленная предложенным способом, при заморозке гомогената при (-4)-(-8)^oС обеспечивает сохранение в количестве 75-85% жизнеспособных микроконидий, что дает напряженный иммунитет у животных.

Предложенный способ чрезвычайно экономичный, позволяющий значительно ускорять технологические циклы (прототип 60 рабочих дней на приготовление гомогената за цикл) и тем самым удешевлять себестоимость вакцины.

Предложенный способ найдет применение в биофабричном, опытно-промышленном, особенно в опытном (лабораторном) изготовлении вакцины, когда количественная потребность невелика (10-100 доз) при небольших партиях изготовления.

Источники информации
1. A.C. СССР 268593, кл. C 12 K 5/00, 1970.

2. Патент 2084241, РФ, кл. 161 K 39/00, 1997.

Изобретение относится к области ветеринарной микологии. Способ включает посев культур вакцины штаммов на питательную среду, выращивание, получение гомогената, контроль его на чистоту, концентрацию и жизнеспособность клеток, разведение гомогената до нужной концентрации и получение готовой вакцины. После контроля гомогената на чистоту его помещают в морозильник и хранят при температуре не выше -4^oС. Способ позволяет сократить ряд технологических операций и время на изготовление вакцин.

Способ изготовления вакцины против микроспории домашних животных, включающий посев культур вакцинных штаммов на питательную среду, выращивание, получение гомогената, контроль качества гомогената на чистоту, определение концентрации жизнеспособных клеток и разведение гомогената, отличающийся тем, что после контроля гомогената на чистоту его помещают в морозильник и хранят при температуре не выше -4^oС.