ПРОИЗВОДНОЕ ИМИДАЗО-[1,2-А]-БЕНЗИМИДАЗОЛА - СРЕДСТВО, ОКАЗЫВАЮЩЕЕ ЦЕРЕБРОПРОТЕКТОРНОЕ ДЕЙСТВИЕ ПРИ РАДИАЦИОННЫХ ПОРАЖЕНИЯХ Российский патент 2004 года по МПК C07D235/04 A61K31/4184 A61P39/02 

Изобретение относится к фармацевтической промышленности и касается расширения спектра фармакологической активности синтетического производного имидазо-[1,2-а]-бензимидазола.

Наиболее близким по фармакологической активности и механизмам действия является известный корректор нарушений мозгового кровообращения кавинтон (винпоцетин).

Облучение животных проводили на стандартной γ-терапевтической установке Агат-С в дозе 2 Гр (грей) (мощность 0,0171 Гр/с, РИП 75 мм, поле 20×20, Со⁶⁰) [Гончаренко Е.Н., Кудряшов Ю.Б. Химическая защита от лучевого поражения. - М.: Изд-во МГУ, 1985. – 248 с.].

Исследование церебропротекторного действия производного имидазо-[1,2-а]-бензимидазола проводили на модели циркуляторной гипоксии мозга, вызываемой путем окклюзии обеих общих сонных артерий у наркотизированных внутримышечно (калипсол 5 мг/кг) белых крыс обоего пола, весом 160,0-170,0 г [Петров И.Р. Кислородное голодание мозга (экспериментальные материалы). - Л.: Медгиз, 1949. – 48 с.].

Соединение 1 и препарат сравнения кавинтон вводили облученным крысам внутрь в течение 14 дней.

Все животные были разделены на 3 группы:

1-я серия. 1 гр. - контроль (облученные); 2 гр. - препарат сравнения кавинтон (5 мг/кг); 3 гр. - соединение 1 в дозе 5 мг/кг.

О выраженности церебропротекторной активности судили по степени выживаемости животных через 24, 48, 72 часа после воспроизведения гипоксии.

Контрольные животные получали эквивалентный объем изотонического раствора хлорида натрия внутрибрюшинно или перорально.

Результаты опытов представлены в табл. 1.

Результаты проведенных исследований показывают, соединение 1 в дозе 5 мг/кг у облученных животных увеличивает их выживаемость в три раза по сравнению с контролем. При этом церебропротекторное действие изучаемого соединения было более выражено, чем у кавинтона (табл. 1).

Влияние соединения 1 на мозговой кровоток (МК), сопротивление сосудов мозга (ССМ) и системное артериальное давление (САД) изучали у наркотизированных (этаминал натрия, 40 мг/кг) облученных крыс полярографическим методом с регистрацией клиренса водорода в условиях искусственной вентиляции легких. Системное артериальное давление определяли прямым манометрическим методом, сопротивление сосудов мозга рассчитывали математически [Исследование мозгового кровотока у мелких лабораторных животных. / Гаевый М.Д., Верещагин В.К., Абдуль Вадуд Хазза Джазем, Мигруев P.P. // Физиол. журн. СССР. - 1985. - Т. 71, №9. - С.1173-1175].

Ауторегуляторные реакции сосудов головного мозга при ступенчатом снижении системного артериального давления оценивали по изменению объемной скорости мозгового кровотока и степени сопротивления сосудов мозга. Расчет коэффициента ауторегуляции (Кр) проводили по специальной формуле [Москаленко Ю.Е. Фукциональная устойчивость системы мозгового кровообращения. // Физиол. журн. СССР. - 1978. - Т. 64, №5, - С.589-597, 654-659].

Эксперименты проведены на 17 белых беспородных крысах-самцах массой (165,0±5,0) грамм, содержавшихся в стандартных условиях вивария. Исследуемое вещество вводили перорально в дозе 5 мг/кг в течение 2 недель.

Исследование влияния соединения 1 и кавинтона на мозговой кровоток и его ауторегуляцию у облученных животных проводили на 14-е сутки после лучевого воздействия при внутрибрюшинном введении исследуемых веществ в дозе 5 мг/кг.

Все животные были разделены на 3 группы: 1 гр. - контроль; 2 гр. - препарат сравнения - кавинтон (5 мг/кг); 3 гр. - исследуемое вещество (5 мг/кг). В каждой группе было по 6 животных.

Контрольной группе крыс вводили эквивалентный объем изотонического раствора хлорида натрия.

Результаты проведенных экспериментов показали, что у крыс на 14-е сутки после лучевого воздействия отмечается незначительное увеличение МК, при этом наблюдается достоверное увеличение САД в среднем на 18,5% с показателями необлученных животных (табл.2).

Исследуемое соединение статистически достоверно увеличивало МК в среднем на (41,9±6,8)% по сравнению с исходным уровнем. При этом ССМ уменьшалось на (33,0±2,9)%, а САД незначительно понижалось на (7,5±1,6)% (табл.3).

В этих же условиях кавинтон достоверно увеличивал МК на (46,0±3,9)%, уменьшая ССМ на (30,7±1,4)%, при этом наблюдалось незначительное снижение САД на (6,7±0,9)% (табл.4).

Ауторегуляторные реакции сосудов мозга регистрировали у облученных (14-е сутки после лучевого воздействия) животных.

На 14-е сутки после лучевого воздействия при снижении САД до 60 мм рт.ст. наблюдалось сохранение ауторегуляторных реакций сосудов головного мозга. Кр был равен (0,76±0,07). Дальнейшее снижение САД до 40 мм рт.ст. уменьшало МК и ССМ на (42,9±1,4)%, (55,3±4,3)% соответственно. При этом Кр равнялся (0,84±0,04). Понижение САД до 30 мм рт.ст. приводило к гибели животного (табл.5).

Введение исследуемого соединения способствовало сохранению ауторегуляторных реакций сосудов головного мозга, так снижение САД до 40 мм рт.ст. сопровождалось уменьшением МК и ССМ соответственно на (45,3±3,4)% и (46,3±6,5)%, при этом Кр равнялся (0,74±0,08) (табл. 6), что свидетельствовало о сохранении ауторегуляции МК.

В этих же условиях введение кавинтона также способствовало нормализации ауторегуляторных реакций МК. Снижение САД до 40 мм рт.ст. достоверно уменьшало МК и ССМ в среднем на (31,2±5,8)% и (64,1±3,7)% соответственно. Кр был равен (0,87±0,06) (табл. 7), что говорит о сохранении ауторегуляции МК.

Исследование влияния исследуемого соединения на структуру головного мозга облученных животных проводили методом светооптической микроскопии, на базе патогистологической лаборатории Пятигорского отделения бюро судебно-медицинской экспертизы Ставропольского края. Мортификацию животных осуществляли диэтиловым эфиром на 3 и 14-е сутки после лучевого воздействия. Аутаптаты головного мозга фиксировали в 10% нейтральном формалине и 70% этаноле. Приготовленные микротомные срезы окрашивали гематоксилин-эозином и по Нисслю в целях дифференциальной диагностики состояния белково-синтетической функции в нейроцитах [Меркулов Н.В. Курс гистологической техники. - М.: Медицина, 1962, 362 с].

Эксперименты проведены на 28 белых крысах самцах линии Wistar массой (162,5±2,5) грамм, содержавшихся в стандартных условиях вивария.

Исследуемые вещества вводили перорально в дозе 5 мг/кг в течение 3 и 14 дней после облучения.

У крыс на 3 и 14-е сутки после лучевого воздействия обнаруживаются нарушения церебральной гемодинамики, проявляющиеся в морфодисфункции интроцеребрально-субарахноидального шунтирования крови, выраженной артериоло-венулярно-капиллярной гиперемии, спонгиозе, очажковой геморрагии, спазмировании пиальных артериол, сладжировании и сепарации крови, агрегации эритроцитов. Появляются очажки некроза, деструктуризации нервных волокон. Обращает на себя внимание отсутствие микроглиальных клеток вокруг отдельных очажков некроза, выполняющих в ЦНС функцию системы фагоцитирующих мононуклеаров.

Введение исследуемых соединений после лучевого воздействия приводит к доминированию компенсаторных процессов в цитовазальных взаимоотношениях структур головного мозга над альтеративными. Компенсаторно-приспособительные реакции заключались в активном функционировании субарахноидально-интракапиллярных коллекторов, муфтообразных сфинктеров вокруг их устьев, регулирующих кровоток; формировании периколлекторных пространств, сообщающихся с субарахноидальными. Появляются признаки париетометаморфоза: стенки коллекторов по структуризации напоминают строение пахионовых грануляций и сосудистых сплетений желудочков мозга. Это, по-видимому, обеспечивает дренирование жидкой части крови. Нормализуется, судя по морфологическим данным, и реология крови: отсутствует сладжсиндром, сепарация и стаз крови. В результате стабилизации сосудистой стенки резко снижается отек нейропиля. Среди нейронов доминируют клетки с отчетливо верифицируемым хроматином ядер и сохранением белково-синтетической функции. Вокруг единичных темных нейроцитов видны очажки сателлизации. Тинкториальные свойства нервных волокон практически не изменены. Вблизи миелиновых проводников наблюдается консолидация олигодендроцитов, участвующих в синтезе миелина. Альтеративные изменения структур мозга носят минимальный характер.

По степени морфо-фармакологической активности их можно выстроить в следующем порядке: РУ-185 > кавинтон.

Антиоксидантное действие соединения 1 и кавинтона изучали по степени накопления продуктов перекисного окисления липидов (в частности, малонового диальдегида), образующих окрашенные продукты с тиобарбитуровой кислотой. Влияние соединения 1 на содержание ТБК-активных продуктов в артериальной и венозной крови облученных животных оценивали спектрофотометрически.

Все животные были разделены на 4 группы: 1 гр. - необлученные животные; 2 гр. - облученные животные; 3 гр. - препарат сравнения кавинтон (5 мг/кг); 4 гр. - исследуемое вещество (5 мг/кг). В каждой группе было по 6 крыс.

Для определения антиоксидантного действия исследуемые вещества вводили в течение 2 недель после лучевого воздействия. Показатели определяли на 14-е сутки после лучевого воздействия.

Результаты опытов показали, что в контроле у крыс на 14-е сутки после лучевого воздействия отмечалось достоверное увеличение содержания ТБК-активных продуктов в артериальной и венозной крови в среднем на 30,5 и 27,9% соответственно по сравнению с группой необлученных животных (табл. 8).

Исследуемое соединение 1 достоверно снижает концентрацию ТБК-активных продуктов в артериальной крови в среднем на 47,5 и 49,8% по отношению к контролю. В венозной крови концентрация ТБК-активных продуктов снижалась на 32,0 и 39,2% соответственно (табл.8).

Аналогичное введение кавинтона вызывало достоверное снижение концентрации ТБК-активных продуктов в среднем на 22,4-22,2% (табл.8).

Таким образом, соединение РУ-185 и в меньшей степени кавинтон при пероральном введении оказывали выраженное снижение концентрации ТБК-активных продуктов в крови облученных животных.

Результаты проведенных исследований показывают, что изучаемое соединение повышает функциональную устойчивость системы мозгового кровообращения к острой гипотензии и ишемии мозга в условиях радиационных воздействий. При этом соединение оказывает более выраженное церебропротекторное и антиоксидантное действие, чем кавинтон.

Изобретение относится к области органической химии и медицины и касается производного имидазо-[1,2-a]-бензимидазола, конкретно: 9-диэтиламиноэтил-2-(3,4-диоксифенил)-имидазо-[1,2-а]-бензимидазола дигидробромида формулы (I), оказывающего церебропротекторное действие при радиационных поражениях. Соединение обладает повышенной активностью. 8 табл.

Производное 9-диэтиламиноэтил-2-(3,4-диоксифенил)-имидазо-[1,2-a]-бензимидазола дигидробромид

оказывающее церебропротекторное действие при радиационных поражениях.