Изобретение относится к области медицины, конкретно к экспериментальной медицине, и касается способа моделирования гипоксической энцефалопатии.
Известны способы моделирования гипоксической энцефалопатии, путем лигирования мозговых сосудов, временной остановки сердца, либо помещения животных в гермокамеру [1, 2], последний является наиболее близким по положительному эффекту способом моделирования гипоксической энцефалопатии - прототипом.
Однако данные способы весьма трудоемки, недостаточно воспроизводимы и зачастую не адекватны для изучения патогенеза заболеваний, связанных с гипоксией.
Задачей, решаемой данным изобретением, является упрощение способа, повышение степени воспроизводимости и расширение сферы применения модели гипоксической энцефалопатии.
Поставленная задача достигается тем, что лабораторным животным (мышам или крысам) однократно внутрибрюшинно либо внутривенно вводят в максимально переносимой дозе гемолитический яд, в качестве которого используют фенилгидразин в дозе 100-150 мг/кг.
Новым в предлагаемом изобретении является то, что для моделирования гипоксической энцефалопатии используют фенилгидразин в дозе 100-150 мг/кг.
Авторами не найдено в проанализированной литературе способа моделирования гипоксической энцефалопатии путем гемической гипоксии.
Сравнение предлагаемого изобретения с существующими способами моделирования энцефалопатии показало, что впервые предложено моделировать гипоксическую энцефалопатию с помощью введения животным максимально переносимой дозы гемолитического яда, в качестве которого используют фенилгидразин в дозе 100-150 мг/кг.
Фактор возможности получения желаемого результата с помощью введения животным максимально переносимой дозы гемолитического яда для специалиста не является очевидным. Эксперимент показал непредсказуемые результаты.
Таким образом, заявленное изобретение соответствует критериям изобретения “Новизна” и “Изобретательский уровень”, так как оно явным образом не следует для специалиста из уровня техники. Предлагаемое изобретение соответствует критерию “Промышленно применимо”, так как оно с успехом может использоваться в экспериментальной медицине (физиологии, патологической физиологии, фармакологии) для моделирования патологических состояний человека и животных.
Гипоксия, нарушая энергетический обмен, вызывает повреждение, в первую очередь структур ЦНС, определяемое спецификой метаболизма и функционирования нейронов. Основной особенностью последних, является сочетание высокого уровня метаболической активности, сопряженной с интенсивным потреблением кислорода и большой скоростью обновления фонда макроэргических веществ. Угнетение процессов аэробного окисления в тканях головного мозга при гипоксии существенно реорганизует центральную нервную систему, что создает предпосылки для изменения интегративно-пусковой деятельности нейронов и после воздействия, а в случае декомпенсации механизмов адаптации, запускает цепь патологических процессов, приводящих к прогрессирующим изменениям метаболических и функциональных показателей многих внутренних органов. С другой стороны, в постгипоксическом периоде, мозг сам становится объектом патогенных влияний органной патологии: системных нарушений гемодинамики, расстройств иммунного статуса, системы крови, гемостаза и т.д., что способствует усугублению повреждения центральной нервной системы.
Способ осуществляют следующим образом:
Животному однократно внутрибрюшинно либо внутривенно вводят в максимально переносимой дозе гемолитической яд, в качестве которого используют фенилгидразин в дозе 100-150 мг/кг.
Предлагаемый способ был изучен в экспериментах на мышах линии CBA/CaLac (животные 1 категории, конвенциональные линейные мыши) в количестве 80 штук, массой 18-20 г., и на 18-ти беспородных крысах. Животные получены из питомника отдела экспериментального биомедицинского моделирования НИИ фармакологии ТНЦ СО РАМН (сертификат имеется).
Пример 1.
Способ осуществляли следующим образом. Мышам линии СВА/ CaLac, массой 18-20 г., однократно внутрибрюшинно вводили фенилгидразин в дозе 150 мг/кг.
Пример 2.
Мышам линии СВА/ CaLac, массой 18-20 г., однократно внутривенно вводили фенилгидразин в дозе 100 мг/кг.
Пример 3.
Беспородным крысам, массой 250-300 г., однократно внутрибрюшинно вводили фенилгидразин в дозе 150 мг/кг.
Пример 4.
Беспородным крысам, массой 250-300 г., однократно внутривенно вводили фенилгидразин в дозе 100 мг/кг.
Гипоксическое воздействие моделировали путем однократного внутривенного введения фенилгидразина в дозе 100-150 мг/кг.
Оценку состояния центральной нервной системы животных производили по регистрации показателей психоневрологического статуса: условно-рефлекторной деятельности и ориентировочно-исследовательскому поведению животных в открытом поле.
Через 1 сутки после введения фенилгидразина во всех случаях у животных вырабатывался условный рефлекс пассивного избегания [3], проверка сохранности рефлекса осуществлялась на 7, 14, 21-е сут эксперимента. Регистрация показателей ориентировочно-исследовательского поведения в открытом поле производилась на 3, 7, 14-е и 21-е сут после воздействия [4].
Обработку результатов проводили методом вариационной статистики с использованием t-критерия Стьюдента и непараметрического U-критерия Вилкоксона-Манна-Уитни [5].
Результаты исследования.
В ходе эксперимента было показано, что внутрибрюшинное или внутривенное введение фенилгидразина в дозе 100-150 мг/кг приводило к достоверным изменениям двигательной активности животных в открытом поле и развитию выраженных нарушений мнестической функции центральной нервной системы мышей.
Так, изучение ориентировочно-исследовательского поведения после воздействия показало рост коэффициента асимметрии движений на 3, 7, 14, 21-е сут исследований, за счет увеличения количества горизонтальных перемещений животных на 7, 21-е сут, и падения числа обследований отверстий поля на 14-е сут опыта, а также уменьшение количества актов груминга на 3-е сут (табл. 1).
Кроме того, отмечались статистически значимое снижение уровня воспроизведения условного рефлекса пассивного избегания на 7, 14, 21-е сут исследования (до 0% на 21-е сут) и спонтанная гибель животных до 20% уже на 7-е сут эксперимента (табл. 2).
Таким образом, внутрибрюшинное или внутривенное введение фенилгидразина в дозе 100-150 мг/кг приводило к появлению признаков патологии центральной нервной системы, характерных для энцефалопатии.
Предлагаемый способ позволяет моделировать гипоксическую энцефалопатию путем введения экспериментальным животным в максимально переносимой дозе гемолитического яда, в качестве которого используют фенилгидразин в дозе 100-150 мг/кг, что позволило значительно упростить модель, повысить ее воспроизводимость и расширить сферу применения, в частности, использовать при гематологических исследованиях.
Литература
1. Методические рекомендации по скринигу и доклиническому испытанию антигипоксических средств./ Ю.Г.Бобков А.С.Лосев и др., М., 1989. - 20 с.
2. Суслов Н.И. Патогенетическое обоснование психофармакологических эффектов препаратов природного происхождения: Дис... докт. мед. наук. - Томск, 1995. - 406 с.
3. Буреш Я., Бурешова О., Хьюстон Дж. П.Методики и основные эксперименты по изучению мозга и поведения. / Пер. с англ. Под ред. проф. А.С.Батуева). - М.: Высшая школа, 1991. - 398 с.
4. Walsh R.N., Cummins R.A. The open-field test: a critical review. // Psychol. Bull. - 1976, V.83. - P. 482-504.
5. Лакин Г.Ф. Биометрия. - М.: Высшая школа, 1973. - 215с.
Динамика показателей ориентировочно-исследовательского поведения в открытом поле мышей линии CBA/CaLac при введении солянокислого фенилгидразина, в усл. ед., (Х±m)
ФГ - фенилгидразин
* - отмечена достоверность различия показателя от его значения у интактных животных при р<0,05
Влияние введения солянокислого фенилгидразина на воспроизведение условно-рефлекторного навыка у мышей линии CBA/CaLac, (X±m)
*
*
*
ФГ - фенилгидразин
* - отмечена достоверность различия показателя от его значения у интактных животных при р<0,05
название | год | авторы | номер документа |
---|---|---|---|
СПОСОБ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЙ ТЕРАПИИ ЭНЦЕФАЛОПАТИИ | 2004 |
|
RU2284060C1 |
СПОСОБ КОРРЕКЦИИ НАРУШЕНИЙ ЭРИТРОПОЭЗА ПРИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЙ ЭНЦЕФАЛОПАТИИ | 2005 |
|
RU2302664C2 |
СПОСОБ КОРРЕКЦИИ НАРУШЕНИЙ ЭРИТРОПОЭЗА ПРИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЙ ГИПОКСИИ | 2005 |
|
RU2285300C1 |
СРЕДСТВО, ОБЛАДАЮЩЕЕ ГЕМОСТИМУЛИРУЮЩИМ, АНТИМУТАГЕННЫМ, ПРОТИВООПУХОЛЕВЫМ, ЦЕРЕБРОПРОТЕКТОРНЫМ, АНТИГИПОКСИЧЕСКИМ, НООТРОПНЫМ, АНКСИОЛИТИЧЕСКИМ И ПРОТИВОНЕВРОТИЧЕСКИМ ДЕЙСТВИЕМ | 2010 |
|
RU2438691C1 |
СПОСОБ МОДЕЛИРОВАНИЯ ПОСТГИПОКСИЧЕСКОЙ ЭНЦЕФАЛОПАТИИ И СВЯЗАННЫХ С НЕЙ НАРУШЕНИЙ В СИСТЕМЕ КРОВИ | 2003 |
|
RU2240604C1 |
СПОСОБ МОДЕЛИРОВАНИЯ ПОСТГЕМОРРАГИЧЕСКОЙ ЭНЦЕФАЛОПАТИИ | 2003 |
|
RU2257620C1 |
Способ моделирования энцефалопатии у потомства при воздействии нетоксичных доз марганца в пренатальный период | 2022 |
|
RU2794816C1 |
СПОСОБ ОЦЕНКИ ГРАНУЛОЦИТОПОЭЗСТИМУЛИРУЮЩЕЙ АКТИВНОСТИ ФАРМАКОЛОГИЧЕСКИХ ВЕЩЕСТВ | 2006 |
|
RU2332667C1 |
СРЕДСТВА, СТИМУЛИРУЮЩИЕ РЕГЕНЕРАЦИЮ ТКАНЕЙ | 2013 |
|
RU2599289C2 |
СРЕДСТВО, ОБЛАДАЮЩЕЕ ИММУНОТРОПНОЙ АКТИВНОСТЬЮ | 2009 |
|
RU2406524C1 |
Изобретение относится к области медицины, а именно к экспериментальной медицине. Лабораторным животным однократно внутрибрюшинно или внутривенно вводят фенилгидразин в дозе 100-150 мг/кг. Способ позволяет более достоверно воспроизвести гипоксическую энцефалопатию. 1 з.п. ф-лы, 2 табл.
ПЕРШИНА О.В | |||
и др | |||
Влияние препаратов природного происхождения на систему крови и когнитивные функции при гипоксическом воздействии | |||
Бюллетень экспериментальной биологии и медицины | |||
Топчак-трактор для канатной вспашки | 1923 |
|
SU2002A1 |
Печь для непрерывного получения сернистого натрия | 1921 |
|
SU1A1 |
ЦЕРЕБРОПРОТЕКТОР ПРИ ЭНЦЕФАЛОПАТИИ | 1998 |
|
RU2141330C1 |
СПОСОБ РАННЕЙ ДИАГНОСТИКИ ХРОНИЧЕСКОЙ ИНТОКСИКАЦИИ БЕНЗОЛОМ И ЕГО СОЕДИНЕНИЯМИ | 2000 |
|
RU2180960C2 |
Способ моделирования энцефалопатии | 1978 |
|
SU767820A1 |
Авторы
Даты
2005-05-27—Публикация
2003-07-03—Подача