НАТРИЕВАЯ СОЛЬ ПОЛИ(ПАРАДИГИДРОКСИ- ПАРАФЕНИЛЕН)ТИОСУЛЬФОКИСЛОТЫ В КАЧЕСТВЕ РЕГУЛЯТОРА МЕТАБОЛИЗМА КЛЕТОК И АНТИГИПОКСАНТА, ФАРМАЦЕВТИЧЕСКАЯ КОМПОЗИЦИЯ НА ЕЕ ОСНОВЕ Российский патент 2005 года по МПК A61K31/185 A61P3/00 

ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИ

Изобретение относится к фармакологии и медицине, а также может быть использовано в косметологии и пищевой промышленности, и касается препаратов, регулирующих метаболизм отдельно взятых клеток и их сообщества в биологических тканях.

ПРЕДПОСЫЛКИ СОЗДАНИЯ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Исследования последних трех десятилетий показали, что в регулировании клеточного гомеостаза особо важное значение имеет поддержание баланса между энергопродуцирующими и энергопотребляющими функциями клеток. Особенно остро данная проблема возникает в случае возникновения в тканях или в организме в целом состояния гипоксии, связанного с недостаточным поступлением кислорода или нарушением механизмов его утилизации. Показано, что гипоксия вызывает сильнейший клеточный стресс и приводит к появлению обратимых или необратимых клеточных повреждений в зависимости от продолжительности и силы воздействия стрессового фактора (Deguchi J., Negoro S., Kishimoto S. // Biochem. & Biophys. Communs., 1987, Vol.149, No.3, p.1093-1098, [1]). Восстановление снабжения кислородом тканей после гипоксии (реоксигенация) сопровождается дополнительным повреждением элементов клеточных структур.

Для защиты тканей от повреждающего воздействия гипоксии или реоксигенации предложено использовать антигипоксанты. В настоящее время выделяют 5 типов подобных препаратов (Смирнов А.В., Криворучко Б.И. Сб.: Применение инфузионных антигипоскантов и искусственных переносчиков кислорода в хирургии, - СПб.: 1999, с.53-62, [2]).

К первой группе относят препараты типа гутимина и амтизола, которые усиливают гликолиз и повышают синтез аденозинтрифосфата (АТФ) в результате процесса анаэробного окисления субстрата.

Вторую группу антигипоксантов составляют вещества макроэргической природы (креатинфосфат, АТФ).

Остальные три группы антигипоксантов составляют препараты, регулирующие активность главной энергопродуцирующей системы клеток - митохондриальной дыхательной цепи. В частности, в третью группу включены препараты, поддерживающие высокую активность одного из двух субстратных участков дыхательной цепи - сукцинатоксидазного. К этой группе относится янтарная кислота, оксибутират натрия, препараты мексидол и муфасол.

К четвертой группе антигипоксантов относят синтетические препараты с электроноакцепторными свойствами, представляющие собой производные хинонов.

В пятую группу антигипоксантов включены цитохром С и убихинон Q₁₀ (коэнзим Q₁₀), являющиеся естественными компонентами митохондриальной дыхательной цепи.

Среди перечисленных антигипоксантов особый интерес представляет убихинон Q₁₀, поскольку в митохондриальной цепи он играет ключевую роль в переносе электронов от субстратных участков (никотинамидадениндинуклеотид оксидазы (НАДН-оксидазы) или сукцинатоксидазы) на цитохромную цепь.

Дефицит убихинона Q₁₀ блокирует перенос электронов по дыхательной цепи и ведет к прекращению синтеза АТФ.

При изучении соотношения между убихиноном и остальными партнерами по дыхательной цепи было обнаружено преобладание на порядок первого над остальными компонентами. Кажущаяся “расточительность” природы, использовавшей при конструировании дыхательной цепи большой избыток одного из элементов конструкции по сравнению с остальными, удалось понять, изучив более детально механизм функционирования коэнзима Q₁₀. Оказалось, что реальным партнером, непосредственно участвующим во взаимодействии с субстратными участками дыхательной цепи, является не убихинон Q₁₀, а его полувосстановленная свободнорадикальная форма - убисемихинон (Nohl H. Free Rad. Res. Communs, 1990, Vol.8, No.4-6, р.307-315, [3]). Поскольку пордолжительность жизни убисемихинона крайне мала, и он диспропорционирует на убихинон Q₁₀ и убихинол Q₁₀ (восстановленную форму убихинона), избыток коэнзима необходим для поддержания оптимальной концентрации убисемихинона.

Учитывая важную роль молекул, содержащих неспаренный электрон, в работе митохондриальной дыхательной цепи, одной из задач исследования было получение продукта, способного более продолжительное время по сравнению с убисемихиноном находиться в свободнорадикальном состоянии, и оценка эффективности его антигипоксической активности.

Наиболее близким структурным аналогом предложенного соединения является натриевая соль [поли-(2,5-дигидрокси-фенилен)]-4-тиосульфокислоты (мета НПФ), состоящей из последовательно соединенных между собой в мета-положении гидрохиноидных звеньев, имеющих в крайнем звене заместитель в виде натриевой соли тиосульфокислоты. Продукт получают взаимодействием пара-бензохинона с тиосульфатом натрия в водно-спиртовой среде при температуре выше 65°С. Показано, что продукт влияет на метаболизм клеток (Патент РФ №2105000, МПК⁶: С 07 С 381/02, C 08 G 61/10, А 61 К 31/05, [4]).

В современной фармакологии известны почти две тысячи различных регуляторов клеточного метаболизма, из которых только около ста являются препаратами фенольного типа (Машковский М.Д. Лекарственные средства. Изд. 13-е в двух томах. - Харьков: Торсинг, 1997, [5]).

СУЩНОСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Задачей настоящего изобретения является расширение спектра препаратов, регулирующих метаболическую активность клеток, в том числе проявляющих антигипоксическую активность.

В результате проведенных исследований было показано, что желаемой активностью - способностью регулировать метаболизм клеток, в том числе регулировать их энергетический обмен - обладает натриевая соль поли(пара-дигидроски-пара-фенилен)тиосульфокислоты (далее также для краткости называемая “пара-НПФ”), имеющая следующую структурную формулу:

где n=2-6.

Брутто-формула продукта: C_6nH_4n+1O_2n+3S₂Na.

Продукт был получен в результате реакции пара-бензохинона с тиосульфатом натрия в водной среде при нагревании от 50 до 100°С. Образующийся в результате реакции продукт отделяют от растворителя, очищают от низкомолекулярных примесей с помощью диэтилового эфира и сушат от экстрагента под вакуумом при температуре 50°С. Более подробно условия синтеза продукта и его свойства описаны в нижеследующих примерах.

Принципиальное отличие предложенного соединения от его аналога заключается в том, что известное соединение состоит из звеньев гидрохинона, соединенных между собой в мета-положении, тогда как в предложенном соединении эти звенья расположены в пара-положении. Как известно, изменение химической структуры вещества неизбежно связано с изменением его свойств. Из химии ароматических соединений известно, что заместители, расположенные в мета-положении ароматического ядра, оказывают слабое взаимное влияние друг на друга, тогда как заместители, расположенные в пара-положении, сильно влияют друг на друга и на молекулу в целом. Наиболее ярким проявлением особых свойств продукта, предложенного в соответствии с настоящим изобретением, по сравнению с аналогом является проявление характерного сигнала, регистрируемого с помощью метода спектроскопии электронного парамагнитного резонанса (ЭПР-спектроскопии), свидетельствующего о наличии в образцах пара-НПФ неспаренных электронов, которые не были зафиксированы в образцах аналога (Фиг.1). Важно отметить также, что в отличие от малостабильного убисемихинона, для регистрации спектра которого применяют замораживание, ЭПР-спектры образцов пара-НПФ сохраняют устойчивость месяцами в условиях комнатной температуры. Наличие стабильного сигнала ЭПР в образцах пара-НПФ связано с проявлением сильного взаимодействия между всеми фенильными ядрами, соединенными друг с другом в пара-положении, при этом образуется достаточно протяженная система сопряжения, обеспечивающая эффективную стабилизацию неспаренного электрона в пределах молекулы. Спектр ЭПР наблюдается как для твердого пара-НПФ (кривая 1 на Фиг.1), так и для его водного раствора (кривая 2 на Фиг.1).

Проверка возможного влияния пара-НПФ на аэробный энергетический метаболизм проводилась на изолированных митохондриях скелетных мышц. Оценивалось влияние препарата на скорости эндогенного дыхания митохондрий (V₀), дыхания митохондрий в метаболических состояниях 3 (V₃) и 4 (V₄) по Чансу, а также скорость разобщенного дыхания в присутствии разобщителя - 2,4-динитрофенола (V_ДНФ). Рассчитывался коэффициент дыхательного контроля по Чансу-Вильямсу (ДК_ч-в) и коэффициент фосфорилирования (АДФ/О) (Краковский М.Э., Аширметов А.X., Иноятова Ф.X. Вопр. мед. химии, 1986, т.32, №6, с.66-70, [6]). Результаты представлены в Таблице 1.

Таблица 1
Влияние препарата пара-НПФ на дыхание и фосфорилирование изолированных митохондрий скелетных мышц крысПоказателиКонтрольКонц пара-НПФ (мкМ/л)1,22,46,0V₀15,016,117,922,6V₃113,085,783,960,4V₄46,326,022,321,7V_ДНФ82,462,554,552,8ДК_Ч-В2,43,33,82,8АДФ/О1,751,942,631,85

Из Таблицы 1 следует, что пара-НПФ активно влияет на аэробный энергетический метаболизм, при этом достигаемый эффект зависит от дозы препарата. Значения дыхательного контроля (ДК_Ч-В) и коэффициента сопряженности окислительного фосфорилирования и дыхания (АДФ/О) по мере увеличения концентрации пара-НПФ вначале растут, что соответствует более эффективной энергопродуцирующей функции митохондрий, а затем падают (разобщающий эффект).

При внесении пара-НПФ в состав глюкозо-минеральной питательной среды, содержащей (г/л) глюкозу - 4, Na₂HPО₄ - 7, КН₂РО₄ - 3, NH₄Cl - 1, NaCl - 0,5, MgSO₄ - 0,2, СаСl₂ - 0,02, никотиновую кислоту - 0,005, пара-НПФ - 0,02, при культивировании факультативных аэробов Escherichia coli штамм М-17 время генерации микробной популяции на стадии логарифмического роста культуры сокращалось на 24±12% по сравнению с контролем (эффект стимуляции роста). Внесение 50 мг/л пара-НПФ в культуральную жидкость замедляет развитие микробных клеток (эффект ингибирования роста).

Представленные результаты показывают, что пара-НПФ участвует в регуляции метаболических процессов как в случае прокариотических, так и эукариотических клеток. Возможность повышения сопряженности процессов фосфорилирования и дыхания, подтвержденная на модели изолированных митохондрий скелетных мышц, позволяет рассматривать пара-НПФ в качестве активного антигипоксанта прямого действия.

Предложенная в соответствии с настоящим изобретением натриевая соль поли(пара-дигидрокси-пара-фенилен)тиосульфокислоты может быть применена в качестве антигипоксического препарата в составе фармацевтической композиции в любой подходящей фармацевтической форме, известной специалистам в данной области, например в форме таблетки, капсулы или раствора. Фармацевтическая композиция также может включать известные фармацевтически приемлемые наполнители, разбавители, связующие вещества и носители. Доза фармацевтической композиции должна содержать, в зависимости от назначения, по меньшей мере, терапевтически или профилактически эффективное количество активного соединения - натриевой соли поли(пара-дигидрокси-пара-фенилен)тиосульфокислоты.

КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ГРАФИЧЕСКИХ МАТЕРИАЛОВ

На Фиг.1 изображен спектр электронного парамагнитного резонанса (ЭПР-спектр) молекулы натриевой соли поли(пара-дигидроски-пара-фенилен)тиосульфокислоты (пара-НПФ). Кривая 1 представляет собой ЭПР-спектр порошка пара-НПФ, а кривая 2 - ЭПР-спектр, полученный при 20-кратном разбавлении пара-НПФ водой (ЭПР-спектр 5%-ного водного раствора пара-НПФ).

На Фиг.2 представлен ИК-спектр пара-НПФ в таблетке КВг.

На Фиг.3 изображены УФ-спектры поглощения водного раствора пара-НПФ (кривая 3) и водного раствора гидрохинона (кривая 4).

На Фиг.4 изображен ¹³С-ЯМР спектр пара-НПФ в твердой фазе.

ОПИСАНИЕ ПРИМЕРОВ ОСУЩЕСТВЛЕНИЯ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Для лучшего понимания сути изобретения приведены следующие примеры.

Пример 1.

В аппарат емкостью 2 л, снабженный мешалкой и рубашкой, помещают 76,6 г (0,31 М) тиосульфата натрия в 1 л дистиллированной воды. Раствор нагревают до температуры 50°С и при интенсивном перемешивании вводят 100 г (0,93 М) пара-бензохинона. Через 2,5 часа процесс прекращают и образовавшийся продукт сушат на распылительной сушилке. Сухой порошкообразный продукт помещают в аппарат Сокслетта и удаляют примеси с помощью диэтилового эфира в качестве экстрагента. Время экстракции - 24 часа. Затем продукт сушат под вакуумом при температуре 50°С. Выход целевого продукта 102,7 г. Молекулярная масса, определенная криоскопическим методом, равна 440. Содержание серы по данным элементного анализа составляет 16,2%.

На Фиг.2 представлен ИК-спектр образца в таблетке КВг. На нем видна широкая полоса поглощения в области 3600-2000 см^-1, относящаяся к валентным колебаниям НО-групп; полосы при 1200 и 1040 см^-1 относятся к валентным колебаниям SО₃-групп. Набор полос в области 1600-1500 см^-1 относится к валентным колебаниям связей С=С в ароматическом кольце, а полоса при 830 см^-1 связана с неплоскими деформационными колебаниями связи С-Н в тетразамещенном бензольном кольце.

На Фиг.3 представлены УФ-спектры растворов пара-НПФ (кривая 3) и гидрохинона (кривая 4) в воде. Гидрохинон можно рассматривать в качестве модельного соединения для элементарного звена пара-НПФ. Два слабо выраженных пика в области 45000 и 33000 см^-1, наблюдаемые в спектре пара-НПФ, смещены в более низкочастотную область по сравнению с характерными полосами поглощения гидрохинона 45200 и 32780 см^-1. Подобное смещение, а также непрерывное поглощение образца от ультрафиолетовой (УФ-) до видимой области спектра свидетельствует об эффективном сопряжении в синтезированном продукте.

Пример 2.

В аппарат, описанный в примере 1, помещают 23 г (0,093 М) тиосульфата натрия в 1 л дистиллированной воды, раствор нагревают до 90°С и вводят при интенсивном перемешивании 100 г (0,93 М) пара-бензохинона. Через 1,5 часа реакцию прекращают и содержимое сушат на распылительной сушилке. Выделенный сухой продукт экстрагируют диэтиловым эфиром в течение 24 часов, затем сушат под вакуумом при температуре 50°С. Выход целевого продукта 80,2 г. По данным элементного анализа содержание серы составляет 10,8%, молекулярная масса полученного продукта равна 750.

Присоединение гидрохиноидных звеньев в синтезированном образце в пара-положении друг относительно друга подтверждается данными спектроскопии ядерного магнитного резонанса ¹³С-ЯМР по наличию полосы поглощения при 147,87 м.д., характерной для С_аром.-С_аром. связи между бензольными кольцами (Фиг.4).

Пример 3. Оценка влияния пара-НПФ на метаболизм клеток

Для оценки влияния пара-НПФ, полученного в примере 1, на метаболическую активность клеток была использована культура гриба Aspergillus oryzae, являющегося продуцентом амилолитических ферментов. Данный гриб относится к строгим аэробам и выращивается на плотных питательных средах. Из-за ограничений с диффузией кислорода воздуха внутрь “коржа” эффективность продуцирования амилолитических ферментов прогрессивно снижается по мере увеличения толщины слоя плотной питательной среды. В таблице 2 приведены данные по амилолитической активности гриба из проб, взятых из образцов с толщиной “коржа” 1, 3 и 4 см.

Таблица 2
Влияние пара-НПФ на амилолитическую активность гриба Aspergillus oryzaeТолщина “коржа”, смКонцентрация пара-НПФ, мг/л2550100КонтрольОпытЭффект, %КонтрольОпытЭффект, %КонтрольОпытЭффект, %1394362-8394397-1327370153233299282332862321022684168156-71682464614117222

Из таблицы 2 видно, что вблизи поверхности плотной питательной среды, где условия аэрации максимально благоприятны для развития культуры, добавка пара-НПФ мало сказывается на амилолитической активности гриба. Однако по мере увеличения толщины “коржа” с ростом ограничений по диффузии кислорода амилолитическая активность гриба снижается. В этих условиях добавление пара-НПФ в питательную среду заметно повышает амилолитическую активность гриба Aspergillus oryzae.

Пример 4. Оценка антигипоксической активности пара-НПФ

В аппарат, описанный в примере 1, помещают 38,3 г (0,15 М) тиосульфата натрия в 1 л дистиллированной воды, раствор нагревают до 70°С и при интенсивном перемешивании вводят 100 г (0,93 М) пара-бензохинона. Через 2 часа реакцию прекращают и содержимое сушат на распылительной сушилке. Полученный продукт экстрагируют в течение суток диэтиловым эфиром и сушат от экстрагента под вакуумом при 50°С. Выход целевого продукта - 95,7 г. По данным элементного анализа содержание серы составляет 11,7%. Молекулярная масса полученного образца равна 650.

Оценку антигипоксического действия пара-НПФ проводили на модели гипоксической гипоксии при моделировании в барокамере подъема на высоту 12000 м над уровнем моря. В качестве подопытных животных использовались крысы. Использовалась барокамера с приточно-вытяжной вентиляцией, исключающей накопление углекислого газа. Был использован следующий режим “подъема” животных: первые 5000 м - за 3 минуты, каждые последующие 1000 м - за 1 минуту. На высоте 12000 м производили экспозицию крыс в течение 45 минут. Эффективность препарата оценивалась по следующим показателям: выживаемость животных (в %), продолжительность жизни на высоте (мин), коэффициент эффективности антигипоксического воздействия препарата (δ), определяемый по отношению продолжительности жизни на высоте животных, получивших препарат, к продолжительности жизни животных в контрольной группе контролю. В качестве эталонного препарата был использован убихинон Q_io. Результаты опыта представлены в Таблице 3.

Таблица 3
Сравнительная антигипоксическая активность пара-НПФ и убихинона Q₁₀ в оптимальных дозах на модели гипоксической гипоксии (крысы)Условия опытаЧисло крысДоза препарата, мг/кгВремя введения препарата до подъемаВыживаемость, %Продолжительность жизни крыс, минδКонтроль20045012±1,73,5±0,3Пара-НПФ2010458041,5±2,2Контроль20о8009,6±1,72,3±0,4Убихинон Q₁₀2020080022,8±0,6

На модели гипоксической гипоксии преимущество пара-НПФ по сравнению с убихиноном Q₁₀ проявилось как в увеличении продолжительности жизни животных при экспозиции “на высоте” 12000 м, так и в выживаемости 80% крыс, тогда как все контрольные животные и животные, получившие убихинон Q₁₀, погибли.

В таблице 4 представлены результаты сравнительной эффективности пара-НПФ и убихинона Q₁₀ на модели гистотоксической гипоксии. В эксперименте использовали мышей, которым вначале вводили внутрибрюшинно антигипоксанты, а через 45 минут - летальную дозу цианида калия, составляющую 15 мг/кг массы.

Таблица 4
Сравнительная антигипоксическая активность пара-НПФ и убихинона Q₁₀ на модели гистотоксической гипоксии (доза цианида калия 15 мг/кг, внутрибрюшинно)Условия опытаЧисло животныхДоза препарата, мг/кгЧисло выживших животныхПродолжительность жизни животных, минδКонтроль68002,53±0,18-Пара-НПФ141503,81±0,261,5103515,08±0,512,04570185,38±0,482,1Убихинон Q₁₀1210002,55±0,141,01620003,43±0,201,4

Таким образом, защитный эффект пара-НПФ при введении летальной дозы цианистого калия оказался более высоким по сравнению с убихиноном Q₁₀.

В Таблице 5 представлены результаты сравнительной эффективности пара-НПФ и убихинона Q₁₀ на модели циркуляционной гипоксии, вызванной кровопотерей. Опыты поставлены на крысах, у которых из общей сонной артерии отбирали кровь в объеме 3 мл крови на 100 г массы животного. Препараты вводили внутрибрюшинно за 45 мин до кровопотери. Отслеживали количество выживших животных через 6, 12 и 24 часа после кровопотери.

Таблица 5
Сравнительная антигипоксическая активность пара-НПФ и убихинона Q₁₀ на модели циркуляционной гипоксии, вызванной кровопотерейУсловия опытаЧисло крысВыживаемость крыс после кровопотери, %6 час12 час24 часКонтроль30000пара-НПФ30706060Убихинон Q₁₀302000

Нетрудно видеть, что на модели циркуляционной гипоксии, вызванной кровопотерей, антигипоксический эффект пара-НПФ существенно превосходит аналогичный эффект убихинона Q₁₀.

Пример 5. Оценка острой и хронической токсичности пара-НПФ

Острую токсичность препарата определяли на мышах-самцах массой 20-25 г при внутрибрюшинном введении 7%-ного водного раствора пара-НПФ. Летальную дозу ЛД₅₀ рассчитывали по методу Беренса. Оказалось, что летальная доза зависит от молекулярной массы препарата. Для образца пара-НПФ, описанного в примере 1 (молекулярная масса М=440), летальная доза ЛД₅₀ составляет 520 мг/кг, для образца пара-НПФ, описанного в примере 2 (М=750), летальная доза ЛД₅₀ составляет 920 мг/кг, а для образца пара-НПФ, описанного в примере 4 (М=650), летальная доза ЛД₅₀ составляет 810 мг/кг.

Хроническую токсичность препарата определяли на крысах-самцах. При введении образца пара-НПФ, описанного в примере 4 (М=650), в дозе 20 мг/кг ежедневно в течение 1 года видимых изменений в поведении животных не выявлено. Проведенные гистологический исследования образцов легких, сердца, печени, почек, селезенки, щитовидной железы, скелетной мышцы не выявили патологических изменений по сравнению с контролем.

Пример 6. Сравнение биологической активности пара-НПФ и мета-НПФ

Задачей исследования было сравнение биологической активности соединения согласно изобретению (пара-НПФ) и его ближайшего структурного аналога - мета-НПФ, описанного в упомянутом выше патенте РФ №2105000. Биологическая активность мета-НПФ описана также в патенте РФ № 2124888. В качестве экстремального фактора была выбрана острая гипоксическая гипоксия.

Методика

Исследование выполнено на беспородных белых крысах-самцах массой 180-200 г в условиях хронического эксперимента. Предварительно у крыс исследовали индивидуальную устойчивость к острой гипоксической гипоксии. Для этого изучали время выживания их "на высоте" 12000 м, скорость "подъема" на высоту составляла 75 м/с. Согласно методике В.А.Березовского, определяли время устойчивости от момента достижения высоты 12000 м и до появления атонального дыхания или приступа судорог. Животные, имеющие низкую устойчивость к гипоксии, из эксперимента исключались. За неделю до основного эксперимента ежедневно внутрибрюшинно крысам I (контрольной) группы вводили 1 мл 0,9% раствора хлорида натрия (15 животных), II группы - мета-НПФ 1 мл 4% раствора (14 животных), III группы - пара-НПФ 1 мл 4% раствора (16 животных). Для всех трех препаратов доза составила 40 мг/кг. Доза мета-НПФ и пара-НПФ была предварительно подобрана в тесте физической работоспособности. Через три дня после теста с гипоксической гипоксией у животных изучали в крови маркеры неспецифической резистентности.

В нижеследующих таблицах количество животных в группе обозначено “п”.

Результаты

Приведенные в Таблице 6 результаты исследования показали, что пара-НПФ проявляет большую эффективность в отношении устойчивости к гипоксической гипоксии.

Таблица 6ГруппыКоличество животныхВремя устойчивости к гипоксии (с)МинимальноеМаксимальноеСреднееОшибка среднегоПроцент от контроляI (контроль)153114477,319,05100II (мета-НПФ)1444217114,223,44147III (пара-НПФ)164821912823,7166

Результаты исследования показателей нейроэндокринной регуляции представлены в Таблице 7, белков сыворотки крови - в Таблице 8, углеводного обмена - в Таблице 9, процессов пероксидации и состояния антиоксидантной системы - в Таблице 10.

Таблица 7
Показатели нейроэндокринной регуляции (X±х)ПоказателиГруппы животныхI (контроль)
п=15II (мета-НПФ)
п=14III (пара-НПФ)
п=16Катехоламины (мкг/л)2,13±0,142,67±0,06*1,72±0,13*Адреналин (мкг/л)1,1+0,080,92±0,051,06±0,13Норадреналин (мкг/л)1,83±0,071,05±0,051,56±0,07*Норадреналин (усл. ед.) Адреналин1,86±0,082,0±0,161,59±0,2Ацетилхолин (мкг/л)2,14±0,062,11±0,041,90±0,05Катехоламины (усл. ед.) Ацетилхолин1,67±0,080,80±0,03*1,47±0,06*Ацетилхолин (усл. ед.) Норадреналин1,43±0,052,01±0,08*1,14±0,09*Примечание: * - различия достоверны

Таблица 8
Содержание белков в сыворотке крови (Х±х)ПоказателиГруппы животныхI (контроль)
п=15II (мета-НПФ)
п=14III (пара-НПФ)
п=16Общий белок (г/л)68,7±1,473,2±1,8*79,8±1,5*Альбумин (г/л)32,8±1,040,8±1,8*36,3±1,7*α1 - глобулины (%)4,3±0,44,5±0,55,3±0,2α2 - глобулины (%)12,2±0,812,1±0,911,6±0,3β - глобулины (%)12,3±0,612,5±0,712,1±0,4γ - глобулины (%)20,3±0,519,5±0,622,8±0,6α1 - глобулины (%)4,3±0,44,5±0,55,3±0,2α2 - глобулины (%)12,2±0,812,1±0,911,6±0,3β - глобулины (%)12,3±0,612,5±0,712,1±0,4γ - глобулины (%)20,3±0,519,5±0,622,8±0,6Примечание: * - различия достоверныТаблица 9
Показатели углеводного обмена (Х±х)ПоказателиГруппы животныхI (контроль)
п=15II (мета-НПФ)
п=14III (пара-НПФ)
п=16Глюкоза (ммоль/л)2,7±0,074,51±0,09*4,28±0,08*Лакт (ммоль/л)183±18,5185,0±20,0151,0±17,0*Пируват (ммоль/л)9,7±1,8910,31±0,8113,3±1,6*Гликоген (отн. ед.)0,28±0,090,15±0,010,19±0,01*Г-6*ФДГ(отн. ед.)53,2±3,954,0±6,043,5±3,8ЩФ (отн. ед.)121±6,5121,0±2,0105,0±6,08*Примечание: * - различия достоверны

Таблица 10
Показатели процессов пероксидации и состояния антиоксидантной системы(Х±х)ПоказателиГруппы животныхI (контроль)
п=15II (мета-НПФ)
п=14III (пара-НПФ)
п=16Малоновый диальдегид (мкмол/л)3,3±0,133,6±0,156,1±0,36*Супероксиддисмутаза (уел. ед.)1,83±0,062,09±0,242,1±0,19Витамин “Е” (мкмоль/л)3,7±0,165,31±0,51*7,6±0,35*Дегидроаскорбиновая кислота (мкмоль/л)4,2±0,177,6±0,62*6,8±0,34*Аскорбиновая кислота (мкмоль/л)3,9±0,1417,7±1,31*17,66±0,78Общая аскорбиновая кислота (мкмоль/л)18,6±1,229,3±1,25*24,6±1,62*Аскорбиновая / Дегидроаскорбиновая кислота (усл.ед.)2,1±0,123,12±0,383,21±0,24*Бета-каротин (мкг/дл)12,3±0,917,9±4,15*21,3±0,59*Ретинол (мкг/дл)8,7±0,77,7±1,2912,5±3,1*Восстановленный глутатион (мкмоль/л)1,0±0,061,1±0,031,39±0,07Окисленный глутатион (мкмоль/л)3,1±0,52,6±0,021,7±0,06*Общий глутатион (мкмоль/л)12,5±0,513,4±0,0418,6±0,07*Примечание: * - различия достоверны

ВЫВОДЫ

1. Пара-НПФ обеспечивает более выраженный антигипоксический эффект, чем мета-НПФ.

2. Действие экстремального фактора после введения в организм мета-НПФ или пара-НПФ приводит к увеличению неспецифической резистентности, при этом повышение неспецифической резистентности более выражено при использовании пара-НПФ, что свидетельствует о том, что пара-НПФ обладает более выраженным стресспротективным действием.

3. Механизм действия пара-НПФ при действии экстремальных факторов заключается в оптимизации нейроэндокринной регуляции, усилении белкового синтеза, анаэробного окисления.

4. Пара-НПФ обладает более выраженным защитным противоокислительным действием, чем мета-НПФ.

Изобретение относится к фармакологии и медицине, а также может быть использовано в косметологии и пищевой промышленности, и касается препаратов, регулирующих метаболизм отдельно взятых клеток и их сообщества в биологических тканях.Предложена натриевая соль поли (пара-дигидрокси-пара-фенилен) тиосульфокислоты общей формулы

где n = 2-6,

в качестве регулятора метаболизма клеток и антигипоксанта. Также предложена фармацевтическая композиция на основе указанного соединения. Использование соединения обеспечивает выраженный антигипоксический эффект. 2 н. и 2 з.п. ф-лы, 10 табл., 4 ил.

1. Натриевая соль поли(парадигидрокси-парафенилен)тиосульфокислоты общей формулы

где n = 2 ÷ 6,

в качестве регулятора метаболизма клеток.