СПОСОБ ПРОГНОЗИРОВАНИЯ ТЕЧЕНИЯ НЕРВНО-ПСИХИЧЕСКИХ ЗАБОЛЕВАНИЙ Российский патент 2005 года по МПК G01N33/535 G01N33/563 

Описание патента на изобретение RU2258934C9

Область техники: медицина, иммунохимия, психиатрия, неврология

УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ

В настоящее время появляется все больше данных, свидетельствующих о тесной функциональной взаимосвязи нервной и иммунной систем организма. Описаны различные изменения в иммунной системе при различной патологии нервной системы, однако роль этих изменений во многом остается неясной (Крыжановский Г.Н., Магаева С.В., Макаров С.В. Нейроиммунопатология. - М.: типография при НИИ труда, 1997; Абрамов В.В. Взаимодействие нервной и иммунной систем. - Новосибирск: Наука, 1988. Shrikant P., Benveniste E.N. The central nervous system as an immunocompetent organ. Role of glial cells in antigen presentation. - J. Immunol. - 1996. - Vol. 157. -1 10. - P. 1819-1822).

В норме иммунная система продуцирует антитела практически ко всем антигенам организма, т.е. регуляторные аутоантитела (AT1) (Jerne N.K. The generative grammar of the immune system. Nobel Lecture, December 1984. - Bioscience Reports (Printed in Great Britain). - 1985. - Vol. 5. - P. 439-451). Исследования последних лет показали, что нейроантигены не являются исключением и в сыворотке крови присутствует определенный уровень аутоантител к ним, изменения которого как в сторону патологического повышения, так и аномального снижения могут иметь неблагоприятные последствия для нервной системы (Полетаев А.Б., Морозов С.Г., Клюшник Т.П., Будыкина Т.С., Вабищевич Н.К., Гнеденко Б.Б. "Способ определения степени риска развития нервно-психических заболеваний", патент на изобретение №2147128).

У AT1 есть свои "функциональные противовесы", или антиидиотипические антитела (АТ2), связывающие их подобно антигену. По нашему мнению, оценка состояния такой «иммунной сети» может иметь огромный диагностический потенциал, практически невостребованный в настоящее время.

Нами была разработана тест-система, обозначенная нами как ELI-N-1 (от ELISA, Neuropathology), которую можно использовать для прогнозирования течения нервно-психических заболеваний. С помощью данной тест-системы определяют уровень аутоантител к ряду белков нервной ткани (или их иммунохимическим аналогам) (AT1), уровень соответствующих специфических антиидиотипических антител (АТ2) и коэффициент I, характеризующий отношение АТ2/АТ1.

В качестве ближайшего аналога изобретения может быть работа Warren K.G. с соавторами (Warren K.G., Catz I. Purification of primary antibodies of the myelin basic protein antibody cascade from multiple sclerosis patients. Immunoreactivity studies with homologlus and heterologous antigens. // Clin. Invest. Med. - 1992. - V. 15. - N1. - P. 13-25), которые наглядно продемонстрировали повышенные титры идиотипических аутоантител (AT1) к основному белку миелина (ОБМ) у больных с рассеянным склерозом в стадии обострения. У больных, находящихся в стадии ремиссии, такого повышения не наблюдалось. В то же время данный метод обладает рядом недостатков.

Он не предусматривает определения AT1 к ОБМ с целью прогноза течения заболевания, а определяет наличие или отсутствие обострения заболевания лишь на момент обследования. Кроме того, авторы определяли лишь AT1 и не исследовали содержание соответствующих АТ2. Поэтому с помощью представленного метода не предоставлялась возможность делать заключение о балансе в системе идиотип-антиидиотип.

В отличие от метода, рассматриваемого в качестве аналога изобретения, предлагаемый способ позволяет:

- оценивать сывороточный уровень антител (AT1) не только к антигенам нервной ткани, но и к их иммунохимическим аналогам;

- оценивать сывороточный уровень антиидиотипических антител (АТ2) к используемым в работе антигенам или их иммунохимическим аналогам;

- определять значения коэффициента I, т.е. АТ2/АТ1;

- проводить динамическое наблюдение за пациентом;

- прогнозировать течение имеющихся нервно-психических заболеваний.

Указанное осуществляется с помощью определения в динамике уровня антител к ряду белков нервной ткани (или их иммунохимическим аналогам), соответствующих АТ2, и коэффициента АТ2/АТ1.

В качестве антигенов целесообразно взять, например, следующие белки: a) S100, б) GFAP (глиофибриллярный кислый белок), в) МР65, г) ФРН (фактор роста нервов); д) ОБМ (основной белок миелина) или их иммунохимические аналоги, например F(ab)2-фрагменты соответствующих АТ2, специфически связывающие AT1 к указанным белкам. В качестве антигенов нервной ткани могут быть использованы также различные фракции, полученные из ткани мозга.

В результате такого обследования определяют степень отклонения уровней всех определяемых AT1 и АТ2 как в сторону патологического повышения, так и патологического снижения, а также значений коэффициента I (AT2/AT1) от эмпирически найденного диапазона нормы.

Реализация существенных признаков предлагаемого изобретения осуществляется следующим образом.

I. На планшеты для иммуноферментного анализа (ИФА) сорбируют антигены нервной ткани или их иммунохимические аналоги, например F(ab)2-фрагменты специфических АТ2 к белкам S100, GFAP, MP65, МР-С, ФРН и ОБМ. Возможно использование одного, двух, трех, четырех или всех пяти указанных компонентов тест-системы, а также других антигенов нервной ткани или их иммунохимических аналогов.

II. На планшеты для ИФА сорбируют антитела (идиотипические) к антигенам нервной ткани (к тем, которые сорбировали на планшеты - см. п.I.) или их вариабельные участки, например F(ab)2-фрагменты антител к белкам S100, GFAP, MP65, ФРН и ОБМ.

III. На планшеты наносят образцы тестируемых сывороток и эталонной сыворотки.

IV. Выявляют связывающиеся из тестируемых сывороток антитела (идиотипические или антиидиотипические) с помощью конъюгатов антивидовых (вторичных) антител с ферментом, например пероксидазой хрена. Реакцию в лунках планшета проявляют субстратом, например о-фенилендиамином и Н2O2.

V. Обрабатывают полученные данные. Определяют интенсивности реакции в лунках, содержащих тестируемые сыворотки с лунками, содержащими эталонную сыворотку. Определяют коэффициент I, который представляет собой отношение AT2/AT1.

Не вытекает из известного уровня техники тот факт, что по комплексной оценке уровеней аутоантител к ряду белков нервной ткани или полученным из нее фракциям (или их иммунохимическим аналогам), уровней соответствующих АТ2 и коэффициентов AT2/AT1 можно судить о течении нервно-психических заболеваний.

СУЩНОСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ

ПОЛУЧЕНИЕ БЕЛКОВ НЕРВНОЙ ТКАНИ И ИХ ИММУНОХИМИЧЕСКИХ АНАЛОГОВ

В работе использовали коммерческие препараты белков S100, GFAP, ОБМ, ФРН фирмы Sigma (США).

Белок МР65 получали следующим способом. Из свежего мозга крупного рогатого скота любым методом выделяют фракцию клеточных мембран (например, мозг гомогенизируют в 0.15 М NaCl с 0.01 М трис-HCl рН 7.5; центрифугируют 5 мин при 1000 g; полученный осадок отбрасывают. К супернатанту добавляют сахарозу до 0.32 М; повторно центрифугируют 10 мин при 3000 g; осадок отбрасывают: к супернатанту добавляют равный объем 0,32 М сахарозы. Процедуру повторяют 2-3 раза. Затем супернатант разбавляют 2-кратно водой и центрифугируют 60 мин при 20000 g. Собирают осадок клеточных мембран. Полученные мембраны гомогенизируют в 0.01 М трис-HCl буфера рН 7,0 с 0,2 М NaCl. Центрифугируют, собирают осадок, отмывают его 0.01 М трис-HCl буфера рН 7.5. Гомогенизируют осадок в 0.01 М трис-HCl буфере рН 7.5 с 0.1% тритона Х-100 и 2 М мочевиной. Центрифугируют 60 мин при 20000 g. Супернатант наносят на колонку анионообменника, уравновешенную тем же буфером. Проводят ступенчатую элюцию белков, используя градиенты NaCl на том же буфере. Отбирают фракцию, элюируемую в диапазоне 0.1-0.3 М NaCl. После диализа против 0.01% тритона Х-100 с 1 М мочевиной на трис-HCl буфере рН 7.5 белки наносят на колонку анионообменника и проводят элюцию в линейном градиенте 0.01-0.6 М KSCN с 0.01% тритона Х-100 с УФ-детекцией на 280 нм. Собирают последний пик. Полученный материал используется в работе.

Получение F(ab)2-фрагментов молекул АТ2 к белкам нервной ткани, т.е. иммунохимических аналогов этих белков, проводили следующим образом. Кроликов породы "шиншилла" иммунизировали F(ab)2-фрагментами поликлональных антител к белкам нервной ткани, например к S100, GFAP, MP65, ФРН, ОБМ, а также к МР-С. Из получаемой антисыворотки с помощью иммуноаффинной хроматографии на колонке с иммобилизованными поликлональными антителами к какому-либо из указанных белков выделяли соответствующие АТ2 и в результате протеолитической обработки получали их F(ab)2-фрагменты, которые использовали для активации планшет (возможно также использование Fab-фрагментов и других аналогов).

Для получения поликлональных антител (AT1) и их F(ab)2-фрагментов использовали указанные выше белки.

ПРОВЕДЕНИЕ ТВЕРДОФАЗНОГО ИФА

1. Растворы каждого из компонентов тест-системы ELI-N-1 (например, F(ab)2-фрагменты AT1 и АТ2 к белкам S100, GFAP, MP65, ФРН, ОБМ, диализованные против карбонатного буфера рН 9,2-9,8, вносят в отдельные лунки стандартных 96-луночных плоскодонных планшет для ИФА. Затем планшеты инкубируют 12-18 ч при +2...+4°С.

2. Удаляют (стряхиванием) из лунок растворы с несвязавшимися компонентами и (без дополнительной отмывки) заливают в них блокирующий буфер (например, 0.5% раствор желатина на 0.15 М NaCl). Инкубируют 1 ч при 37°С.

3. Отмывают планшеты отмывочным буфером (с 0.05% твин-20).

4. Вносят на планшеты образцы тестируемых и эталонной сывороток в разведении 1:200 на отмывочном буфере. Инкубируют 12-18 ч при +4°С.

5. Отмывают планшеты отмывочным буфером.

6. Проявление реакции осуществляют следующим образом. Раствор конъюгата пероксидазы хрена (или иного фермента) с антивидовыми антителами к IgG человека вносят во все лунки планшета. Затем планшеты инкубируют 60-90 мин при 37°С или 12-16 ч при +2...+4°С, после чего конъюгат удаляют, а планшеты отмывают отмывочным буфером. Сразу после этого в лунки вносят раствор субстрата (например, 0.01-0.05% о-фенилендиамина с 0.001-0.005% перекиси водовода на 0.01-0.05 М цитрат-фосфатном буфере в случае применения пероксидазных конъюгатов). Инкубируют планшеты в темноте 10-20 мин при комнатной температуре.

7. По достижении оптимального уровня окрашивания реакцию останавливают добавлением 0.2-0.4 М серной кислоты.

8. Интенсивность окрашивания оценивают с помощью ИФА-ридера любой модели.

9. Обрабатывают полученные данные.

а) Из трех дублирующих друг друга значений результатов реакции эталонной и тестируемых образцов сыворотки выбирают среднее.

б) Рассчитывают относительную интенсивность реакции с компонентами тест-системы тестировавшихся сывороток по отношению к реакции эталонной сыворотки (в процентах) по полученным значениям оптической плотности лунок. Рассчитывают коэффициент I, представляющий собою отношение АТ2/АТ1. Коэффициент I рассчитывают для каждой пары АТ1-АТ2.

10. Интерпретируют полученные данные.

В случае, если интенсивность реакции исследуемой сыворотки с любым из компонентов тест-системы не выходит за пределы от 65% до 135% по сравнению с реакцией эталонной сыворотки, а все определяемые коэффициенты I в пределах 0,7-1,3, данную сыворотку относят к классификационной группе №1 - норма (прогноз течения нервно-психического заболевания относительно благоприятен).

В случае, если интенсивность реакции исследуемой сыворотки с любым из компонентов тест-системы выходит за пределы группы №1, но составляет не менее 40% и не более 180% по отношению к реакции эталонной сыворотки, или какой-либо из определяемых коэффициентов I выходит за пределы 0,7-1,3, но составляет не менее 0,5 и не более 1,5, данную сыворотку относят к классификационной группе №2 - умеренные отклонения (повышена вероятность обострения течения нервно-психического заболевания - оно наступило или его следует ожидать).

В случае, если интенсивность реакции исследуемой сыворотки с любым из компонентов тест-системы выходит за пределы групп №1 и №2 или коэффициент I выходит за пределы 0,5-1,5, данную сыворотку относят к классификационной группе №3 - резкие отклонения (высокая вероятность обострения течения нервно-психического заболевания - оно наступило или его следует ожидать).

Ниже представлены эмпирические данные, полученные при анализе корреляций между показателями, полученными с помощью тест-системы ELI-N-1, и клиническими наблюдениями.

Как видно из таблицы, характер течения нервно-психических заболеваний коррелирует со степенью отклонений исследуемых показателей (при условии, если при исследовании в динамике - на протяжении нескольких месяцев - показатели остаются в пределах одной группы). Чем более выражены эти отклонения, тем больше вероятность обострения течения заболевания (если оно уже не наступило). По-видимому, поддержание в крови физиологических концентраций аутоантител к нейроантигенам, соответствующих АТ2, а также определенного баланса между ними, необходимо для нормального функционирования нервной системы.

В качестве эталонной сыворотки брали пулированную сыворотку здоровых лиц определенного возраста: до 3 лет, от 3 до 10 лет, от 10 до 16 лет, от 16 до 50 лет, от 50 до 70 лет, свыше 70 лет, т.е. 5 эталонных сывороток для каждой возрастной группы. При обследовании пациентов и здоровых лиц для постановки использовали ту эталонную сыворотку, которую получали от аналогичной возрастной группы. Это связано с тем, что для каждой из этих возрастных групп характерен свой физиологический уровень исследуемых антител.

Чем больше используется предложенных компонентов тест-системы ELI-N-1, тем более точно определить риск развития нервно-психических заболеваний и оценить характер его течения, что увеличивает стоимость анализа. Мы считаем, что предложенные пять пар АТ1-АТ2 являются одним из наиболее оптимальных вариантов.

Положительный эффект от реализации изобретения сводится к получению тест-системы (диагностикума) ELI-N-1, с помощью которого можно выявить лиц (с различными нервно-психическими заболеваниями), сыворотки которых содержат аномальные уровни AT1 и АТ2 к нейроантигенам, аномальные соотношения между ними, что является признаком повышенного риска обострения заболевания.

Заявленный способ может быть применим для мониторинга течения широкого спектра заболеваний нервной системы, особенно тех, где имеет место деструктивный процесс. Так, данный способ был апробирован у больных с рассеянным склерозом, болезнью Паркинсона, эпилепсией, а также с шизофренией, невротической депрессией.

При проведении анализа ELI-N-1 следует учитывать, что наличие различных инфекционных, эндокринных и др. заболеваний может влиять на исследуемые параметры, что может привести к неточной интерпретации исследуемых показателей.

ПРИМЕРЫ

Пример-1

Пациент К., 34 года, страдает с 17 лет вялотекущей шизофренией.

Результаты теста ELI-N-1:

AT1 к S100АТ2 к S100IAT1 к GFAPАТ2 к GFAPIAT1 к
МР65
АТ2 к МР65IAT1 к ФРНАТ2 к ФРНIAT1 к ОБМАТ2 к ОБМI
91981,11241010,876851,11001041,01101291,2

Группа №1.

Исследуемые показатели спустя 1,5 мес:

AT1 к S100АТ2 к S100IAT1 к GFAPАТ2 к GFAPIAT1 к MP65АТ2 к MP65IAT1 к ФРНАТ2 к ФРНIAT1 к ОБМАТ2к ОБМI78901,2110970,977680,996961,01051111,1

Группа №1. В течение последующих 5 мес обострения заболевания не отмечалось.

Пример-2

Пациент Р. 57 лет. Страдает 5 лет болезнью Паркинсона. Кровь взята во время ремиссии. Результаты теста ELI-N-1:

AT1 к S100АТ2 к S100IAT1 к GFAPАТ2 к GFAPIAT1 к MP65АТ2 к MP65IAT1 к ФРНАТ2 к ФРНIAT1 к ОБМАТ2 к ОБМI1301341,01001191,2991071,187991,198750,8

Результаты теста ELI-N-1 спустя 2 мес:

AT1 к S100АТ2 к S100IAT1 к GFAPАТ2 к GFAPIAT1 к МР65АТ2 к МР65IAT1 к ФРНАТ2 к ФРНIAT1 к ОБМАТ2 к ОБМI1961730,91201761,51261491,21031001,01541671,1

Группа №3. Результаты теста ELI-N-1 спустя 4 мес после первого анализа:

AT1 к S100АТ2 к S100IAT1 к GFAPАТ2 к GFAPIAT1 к MP65АТ2 к MP65IAT1 к ФРНАТ2 к ФРНIAT1 к ОБМАТ2 к ОБМI2102631,31391961,41351441,11211130,91571751,1

Группа №3. Спустя 1 мес после взятия последнего анализа у пациента наблюдали обострение заболевания.

Пример-3

Больной С., 17 лет. С 12 лет страдает эпилепсией. Результаты теста ELI-N-1:

AT1 к S100АТ2 к S100IAT1 к GFAPAT2 к GFAPIAT1 к MP65AT2 к MP65IAT1 к ФРНAT2 к ФРНIAT1 к ОБМAT2 к ОБМI89851,090820,961701,180941,290901,0

Группа №1.

Результаты теста ELI-N-1 спустя 3 мес:

AT1 к S100AT2 к S100IAT1 к GFAPAT2 к GFAPIAT1 к MP65AT2 к MP65IAT1 к ФРНAT2 к ФРНIAT1 к ОБМAT2 к ОБМI1542051,31811040,6187990,51561000,61191261,1

Группа №1. Спустя 2 нед после последнего анализа наблюдали обострение заболевания.

Пример-4

Больная П., 38 лет. С 21 года страдает рассеянным склерозом. Результаты теста ELI-N-1:

AT1 к S100AT2 к S100IAT1 к GFAPAT2 к GFAPIAT1 к MP65AT2 к MP65IAT1 к ФРНAT2 к ФРНIAT1 к ОБМAT2 к ОБМI1551320,91641550,91171301,1133800,61181191,0

Группа №2. Результаты теста ELI-N-1:

AT1 к S100AT2 к S100IAT1 к GFAPAT2 к GFAPIAT1 к MP65AT2 к MP65IAT1 к ФРНAT2 к ФРНIAT1 к ОБМAT2 к ОБМI79791,087991,11041241,21301110,91191311,1

Группа №2.

В течение последующих 3 мес обострения заболевания отмечено не было.

Пример-5

Пациент Н., 27 лет. Страдает ремитирующей формой рассеянного склероза. Во время ремиссии была взята кровь для анализа.

Результаты теста ELI-N-1:

В качестве антигенов для определения AT1 использовали нативные белковые препараты. Для определения АТ2 использовали препараты идиотипических антител.

AT1 к S100АТ2 к S100IAT1 к GFAPАТ2 к GFAPIAT1 к MP65АТ2к MP65IAT1 к ФРНАТ2 к ФРНIAT1 к ОБМАТ2 к ОБМI941001,167801,2101971,01121301,21211070,9

Группа №1.

С этим же препаратом крови провели аналогичный анализ. Только вместо нативных антигенов при определении AT1 использовали их иммунохимические аналоги, а именно -F(ab)2-фрагменты соответствующих антиидиотипических антител; при определении АТ2 использовали не сами препараты идиотипических антител, а их F(ab)2-фрагменты.

AT1 к S100АТ2 к S100IAT1 к GFAPАТ2 к GFAPIAT1 к MP65АТ2 к MP65IAT1 к ФРНАТ2 к ФРНIAT1 к ОБМАТ2 к ОБМI80710,9941111,21231080,979881,190981,1

Группа №1. В течение последующих 2 мес обострения рассеянного склероза не наблюдалось.

Пример-6

Пациентка К., 49 лет. Страдает приступообразно-прогредиентной шизофренией. Кровь взята во время ремиссии.

Результаты теста ELI-N-1:

В качестве антигенов для определения AT1 использовали нативные белковые препараты. Для определения АТ2 использовали препараты идиотипических антител.

AT1 к S100АТ2 к S100IAT1 к GFAPАТ2 к GFAPIAT1 к MP65АТ2 к MP65IAT1 к ФРНАТ2 к ФРНIAT1 к ОБМАТ2 к ОБМI2351160,52001450,71231781,41771640,92891120,4

Группа №3.

С этим же препаратом крови провели аналогичный анализ. Только вместо нативных антигенов при определении AT1 использовали их иммунохимические аналоги, а именно -F(ab)2-фрагменты соответствующих антиидиотипических антител; при определении АТ2 использовали не сами препараты идиотипических антител, а их F(ab)2-фрагменты.

AT1 к S100АТ2 к S100IAT1 к GFAPАТ2 к GFAPIAT1 к МР65АТ2 к МР65IAT1 к ФРНАТ2 к ФРНIAT1 к ОБМАТ2 к ОБМI2471240,52211670,81441601,11791570,93001240,4

Группа №3.

Спустя 3 нед после взятия анализа у пациента наблюдали обострение заболевания, т.е. наблюдали острый приступ шизофрении.

Пример-7

Больной Л., 67 лет. Страдает болезнью Паркинсона. Результаты теста ELI-N-1:

В качестве антигенов для определения AT1 использовали нативные белковые препараты. Для определения АТ2 использовали препараты идиотипических антител.

AT1 к S100АТ2 к S1001AT1 к GFAPАТ2 к GFAP1AT1 к MP65АТ2 к MP651AT1 к ФРНАТ2 к ФРН1AT1 к ОБМАТ2 к ОБМ11781140,61311281,01421230,91501471,01721200,7

Группа №2.

С этим же препаратом крови провели аналогичный анализ. Только вместо нативных антигенов при определении AT1 использовали их иммунохимические аналоги, а именно - Fab-фрагменты соответствующих антиидиотипических антител; при определении АТ2 использовали не сами препараты идиотипических антител, а их Fab-фрагменты.

AT1 к S100АТ2 к S100IAT1 к GFAPАТ2 к GFAPIAT1 к MP65АТ2 к MP65IAT1 к ФРНАТ2 к ФРНIAT1 к ОБМАТ2 к ОБМI1701080,61471310,91531290,81551561,01781250,7

Группа №2. У пациента наблюдается умеренно прогредиентное течение заболевания.

ТЕХНИКО-ЭКОНОМИЧЕСКАЯ И СОЦИАЛЬНАЯ ЗНАЧИМОСТЬ

Применение диагностической тест-системы ELI-N-1 позволяет проводить прогнозирование течения нервно-психических заболеваний. Это может дать возможность клиницистам своевременно проводить профилактику обострений различной патологии нервной системы.

Исследование проводится в лаборатории для иммуноферментного анализа.

Похожие патенты RU2258934C9

название год авторы номер документа
СПОСОБ ВЫЯВЛЕНИЯ ГРУПП РИСКА РАЗВИТИЯ НЕРВНО-ПСИХИЧЕСКИХ ЗАБОЛЕВАНИЙ 2002
  • Морозов С.Г.
  • Гнеденко Б.Б.
  • Полещук В.В.
  • Клюшник Т.П.
  • Иванова-Смоленская И.А.
  • Усанова М.П.
  • Беседина М.В.
  • Грибова И.Е.
  • Зиньковский К.А.
RU2218569C1
СПОСОБ СКРИННИНГОВОГО ВЫЯВЛЕНИЯ ЛИЦ ГРУППЫ РИСКА РАЗВИТИЯ ПАТОЛОГИИ НЕРВНОЙ СИСТЕМЫ И МОНИТОРИНГА ЗА СОСТОЯНИЕМ БОЛЬНЫХ, СТРАДАЮЩИХ НЕРВНО-ПСИХИЧЕСКИМИ ЗАБОЛЕВАНИЯМИ 2003
  • Полетаев А.Б.
  • Абросимова А.А.
  • Соколов М.А.
RU2259567C2
СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ СТЕПЕНИ РИСКА РАЗВИТИЯ НЕРВНО-ПСИХИЧЕСКИХ ЗАБОЛЕВАНИЙ 1997
  • Полетаев А.Б.
  • Морозов С.Г.
  • Клюшник Т.П.
  • Будыкина Т.С.
  • Вабищевич Н.К.
  • Гнеденко Б.Б.
RU2147128C1
СПОСОБ ЛАБОРАТОРНОГО ВЫЯВЛЕНИЯ ПОСЛЕДСТВИЙ ПЕРИНАТАЛЬНЫХ ПОРАЖЕНИЙ ЦЕНТРАЛЬНОЙ НЕРВНОЙ СИСТЕМЫ И ОПРЕДЕЛЕНИЯ СТЕПЕНИ ИХ ТЯЖЕСТИ У ДЕТЕЙ 2010
  • Клюшник Татьяна Павловна
  • Морозов Сергей Георгиевич
  • Отман Ирина Николаевна
  • Сарманова Зоя Викторовна
  • Беседина Марина Валерьевна
  • Рыбаков Антон Станиславович
  • Аникина Оксана Михайловна
  • Камплицкая Оксана Владимировна
RU2425371C1
СПОСОБ ПРОГНОЗИРОВАНИЯ ТЕЧЕНИЯ СТАФИЛОДЕРМИЙ 2004
  • Волкова Е.Н.
  • Бутов Ю.С.
  • Гнеденко Б.Б.
  • Морозов С.Г.
RU2260806C1
СПОСОБ ОЦЕНКИ ТЯЖЕСТИ ТЕЧЕНИЯ СТРЕПТОДЕРМИЙ 2004
  • Волкова Е.Н.
  • Бутов Ю.С.
  • Гнеденко Б.Б.
  • Морозов С.Г.
RU2262702C1
СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ ОПИЙНОЙ НАРКОМАНИИ И ЕЕ ДЛИТЕЛЬНОСТИ 2002
  • Полетаев А.Б.
  • Будыкина Т.С.
  • Чуркин А.А.
RU2221251C1
СПОСОБ МОНИТОРИНГА ЗА СОСТОЯНИЕМ БОЛЬНЫХ САХАРНЫМ ДИАБЕТОМ И РАЗВИТИЕМ НЕВРОЛОГИЧЕСКИХ И СОСУДИСТЫХ ЕГО ОСЛОЖНЕНИЙ 2004
  • Полетаев Александр Борисович
  • Абросимова Алина Анатольевна
  • Соколов Михаил Анатольевич
RU2291437C2
СПОСОБ СКРИНИНГОВОГО ОБСЛЕДОВАНИЯ ЖЕНЩИН ДЕТОРОДНОГО ВОЗРАСТА С ПОМОЩЬЮ ТЕСТ-СИСТЕМЫ ELI-P ДЛЯ ПРОГНОЗА РАЗВИТИЯ ЭМБРИОНА/ПЛОДА И РОЖДЕНИЯ ЗДОРОВОГО ЛИБО АНОМАЛЬНОГО РЕБЕНКА 1995
  • Полетаев А.Б.
  • Вабищевич Н.К.
  • Морозов С.Г.
RU2107913C1
Способ прогнозирования неблагоприятного течения эпилепсии у детей на первом году жизни 2022
  • Созаева Диана Измаиловна
  • Бережанская Софья Борисовна
  • Афонин Александр Алексеевич
  • Лебеденко Александр Анатольевич
  • Лукьянова Елена Анатольевна
  • Чурюкина Элла Витальевна
  • Логинова Ирина Георгиевна
  • Абдурагимова Марина Худавердиевна
  • Кравченко Лариса Вахтанговна
RU2787512C1

Реферат патента 2005 года СПОСОБ ПРОГНОЗИРОВАНИЯ ТЕЧЕНИЯ НЕРВНО-ПСИХИЧЕСКИХ ЗАБОЛЕВАНИЙ

Изобретение относится к области биохимии и может быть использовано для прогнозирования течения нервно-психических заболеваний. Сущность изобретения состоит в том, что тестируют образцы сыворотки крови в иммуноферментном анализе с использованием тест-системы ELI-N-1, компонентами которой являются антигены нервной ткани или их иммунохимические аналоги, специфически связывающие антитела с направленностью к антигенам нервной ткани, а также идиотипические антитела к ним, или их вариабельные участки. Прогнозирование осуществляют по уровню идиотипических и антиидиотипических аутоантител к антигенам нервной ткани, а также по их соотношению. Техническим результатом является разработка новой тест-системы, позволяющей прогнозировать течение имеющихся нервно-психических заболеваний. 2 н.п. ф-лы.

Формула изобретения RU 2 258 934 C9

1. Способ прогнозирования течения нервно-психических заболеваний, включающий забор крови и получение сыворотки, отличающийся тем, что получают тест-систему ELI-N-1 - сорбированные на планшеты для иммуноферментного анализа антигены нервной ткани или их иммунохимические аналоги, специфически связывающие аутоантитела с направленностью к антигенам нервной ткани, а также идиотипические антитела или их вариабельные участки, специфически связывающие соответствующие антигены нервной ткани, проводят иммуноферментный анализ и скрининг пациентов по уровню определяемых аутоантител, определяют в динамике уровень сывороточных антител к антигенам нервной ткани (ATI), уровень соответствующих антиидиотипических антител (АТ2), коэффициент I, представляющий собой отношение АТ2/АТ1, при этом, если интенсивность реакции исследуемой сыворотки с любым из компонентов тест-системы не выходит за пределы от 65 до 135% по сравнению с реакцией эталонной сыворотки, а все определяемые коэффициенты I находятся в пределах 0,7-1,3, то данную сыворотку относят к группе №1 - норма - благоприятный прогноз; если интенсивность реакции выходит за пределы группы №1, но составляет не менее 40 и не более 180% по отношению к реакции эталонной сыворотки, или какой-либо из определяемых коэффициентов I выходит за пределы 0,7-1,3, но составляет не менее 0,5 и не более 1,5, то данную сыворотку относят к группе №2 - умеренные отклонения - повышенная вероятность обострения течения нервно-психических заболеваний; если интенсивность реакции выходит за пределы групп №1 и №2 или коэффициент I выходит за пределы 0,5-1,5, то данную сыворотку относят к группе №3 - резкие отклонения - высокая вероятность обострения течения нервно-психических заболеваний. 2. Тест-система для определения иммунореактивности сывороточных идиотипических и антиидиотипических аутоантител к антигенам нервной ткани, содержащая стандартные плоскодонные планшеты для иммуноферментного анализа, отмывочный буфер, сыворотку-эталон, раствор конъюгата фермента с антивидовыми антителами к иммуноглобулинам человека, раствор субстрата и раствор 0,2-0,4М серной кислоты для остановки реакции, отличающийся тем, что планшеты содержат сорбированные антигены нервной ткани или их иммунохимические аналоги, специфически связывающие аутоантитела с направленностью к антигенам нервной ткани, а также идиотипические антитела или их вариабельные участки, специфически связывающие соответствующие антигены нервной ткани.

Документы, цитированные в отчете о поиске Патент 2005 года RU2258934C9

СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ СТЕПЕНИ РИСКА РАЗВИТИЯ НЕРВНО-ПСИХИЧЕСКИХ ЗАБОЛЕВАНИЙ 1997
  • Полетаев А.Б.
  • Морозов С.Г.
  • Клюшник Т.П.
  • Будыкина Т.С.
  • Вабищевич Н.К.
  • Гнеденко Б.Б.
RU2147128C1
ПОЛЕТАЕВ А.Б
и др
Исследование аутоиммунных процессов нервно-психических заболеваний с помощью количественного иммуноферментного анализа, Иммунология, 1985, т.4, №2, С
Фальцовая черепица 0
  • Белавенец М.И.
SU75A1
ЧЕХОНИН В.П
и др
Иммунохимический анализ нейроспецифических антигенов, М.: Медицина, 2000, с.251-257.

RU 2 258 934 C9

Авторы

Морозов С.Г.

Гнеденко Б.Б.

Соболев В.А.

Клюшник Т.П.

Полещук В.В.

Грибова И.Е.

Осипова И.В.

Даты

2005-08-20Публикация

2003-08-26Подача