1-(3,4-ДИЭТОКСИФЕНИЛ)-2,3,5,6-ТЕТРАГИДРО-(3,4-ДИЭТОКСИБЕНЗО)[g]ХИНОКСАЛИНО[2,3-b]ИНДОЛИЗИНА ГИДРОХЛОРИД, ПРОЯВЛЯЮЩИЙ ПРЯМОЕ АНТИКОАГУЛЯНТНОЕ ДЕЙСТВИЕ Российский патент 2008 года по МПК C07D471/04 A61P7/02 

Изобретение относится к области органической химии, производным индолизина, а именно новому биологически активному 1-(3,4-диэтоксифенил)-2,3,5,6-тетрагидро-(3,4-диэтоксибензо)[g]хиноксалино[2,3-b]индолизина гидрохлориду (1) формулы:

обладающего прямым антикоагулянтным действием, что позволяет предположить его использование в медицине в качестве антикоагулянта прямого действия.

Ближайшим структурным аналогом к заявляемому соединению является конденсированный индолизин 2 [Михайловский А.Г., Шкляев B.C. Реакция енаминов ряда изохинолина и фенантридина с оксалилхлоридом // Химия гетероцикл. соедин. - 1994. - №7. - С.946-949].

Данных об его антикоагулянтной активности в литературе не имеется. Среди производных азотсодержащих гетероциклов с прямым антикоагулянтным действием известен папаверина гидрохлорид [Кремлева В.Ф., Ивлева А.Я. Влияние папаверина на систему свертывания крови // Фармакология и токсикология. - 1974. - Т.37. - №2. - С.232-235], который взят нами в качестве эталона сравнения по структуре соединения 1.

Целью предлагаемого изобретения является поиск среди производных индолизина соединений, обладающих прямой антикоагулянтной активностью. Поставленная цель достигается получением 1-(3,4-диэтоксифенил)-2,3,5,6-тетрагидро-(3,4-диэтоксибензо)[g]хиноксалино[2,3-b]индолизина гидрохлорида 1, который синтезируют по реакции известного 2,3-диоксопирроло[2,1-а]изохинолина [Михайловский А.Г. Реакция 2,3-диоксопирроло[2,1-а]изохинолинов с боргидридом натрия и свойства ее продуктов // Химия гетероцикл. соедин. - 1996. - №5. - С.685-692] с о-фенилендиамином с последующей обработкой основания хлористым водородом:

Для получения дикарбонильной составляющей используется основание дротаверина (но-шпы). Субстанция нош-шпы - относительно недорогой продукт промышленного производства, что делает данный метод перспективным. Все вспомогательные вещества также доступны и выпускаются промышленностью. Синтез основания соединения 1 описан [Полыгалова Н.Н., Михайловский А.Г., Вихарева Е.В., Сб. «Азотсодержащие гетероциклы». - М.: ICSPF-Press, 2006. T.2, с.417].

Методика получения 1-(3,4-диэтоксифенил)-2,3,5,6-тетрагидро-(3,4-диэтоксибензо)[g]хиноксалино[2,3-b]индолизина гидрохлорида 1.

К раствору 4,52 г (0,01 моль) 1-(3,4-диэтоксифенил)-2,3-диоксо-8,9-диэтокси-2,3,5,6-тетрагидропирроло[2,1-а]изохинолина в 15 мл ледяной уксусной кислоты добавляют 1,08 г (0,01 моль) о-фенилендиамина. Смесь кипятят 1 ч, охлаждают, разбавляют 100 мл 25% аммиака, выпавший осадок отфильтровывают, промывают водой, сушат, растворяют в 150 мл этилацетата и пропусканием сухого HCl получают гидрохлорид 1. При переходе вещества из основания в гидрохлорид желтая окраска переходит в ярко-красную. Полученное соединение перекристаллизовывают из изопропанола. Выход гидрохлорида 1 составляет 3,51 г (67%).

Заявляемое соединение представляет собой ярко-красное кристаллическое вещество, трудно растворимое в воде, растворимое в хлороформе, ДМСО, ДМФА. Т_пл 160-161°С. Вычислено, %: С 68,6; Н 6,1; N 7,5; Cl 6,3. C₃₂H₃₃N₃О₄·HCl. Найдено, %: С 68,5; Н 6,0; N 7,6; Cl 6,2.

В спектре ЯМР ¹Н (Varian Mercury 300, 300 МГц, внутренний стандарт - ГМДС) гидрохлорида 1, снятом в CDCl₃, имеются сигналы: четыре триплета протонов четырех групп СН₃CH₂О (1,20-1,80 м.д., J=6,7 Гц); один квадруплет протонов группы ОСН₂СН₃ в области 3,8 м.д. (J=3,6 Гц) и три квадруплета протонов остальных трех групп ОСН₂СН₃ в области 4,10-4,33 м.д. (J=3,6 Гц); 3,2 м.д., м, (2Н, 4-СН₂-С); 4,82 м.д., м, (2Н, СН₂-N); ароматические мультиплеты в области 6,72 - 7,23 м.д. (5Н дротаверина) и 7,70-8,23 м.д. (4Н хиноксалина); 9,1 с (NH⁺).

Масс-спектр основания соединения 1 содержит пик молекулярного иона M=523 (100%) (прибор MAT-311, 70 эв, ЭУ).

Соединение 1 исследовали на наличие прямой антикоагулянтной активности. Исследования проведены с помощью коагулометра «Минилаб 701». Для исследования использовали нитратную (3,8%) кровь (9:1). Влияние соединения и эталона сравнения по структуре папаверина гидрохлорида на свертывание крови изучали в одинаковой концентрации 1 мг/мл. В качестве эталона прямой антикоагулянтной активности использовали гепарин, который испытывали в концентрации 1 ЕД/мл крови.

ТаблицаВлияние на свертывающую систему крови заявляемого соединения и эталонов сравненияСоединениеВремя свертывания, с% изменения свертываемостиРКонтрольопыт1-(3,4-диэтоксифенил)-2,3,5,6-тетрагидро-(3,4-диэтоксибензо)[g]хиноксалино[2,3-b]индолизина гидрохлорид57,9±2,4778,5±3,38-35,6<0,001Папаверина гидрохлорид40,9±3,1247,8±3,17-16,8<0,05Гепарин29,9±0,4836,6±1,82-22,4<0,01

Как видно из таблицы, исследуемое соединение достоверно увеличивает время свертывания цитратной крови на 35,6%, папаверина гидрохлорид в той же концентрации - на 16,8%.

Острую токсичность определяли на нелинейных белых мышах массой 20-25 г. Исследуемое вещество вводили внутрибрюшинно в виде водного раствора из расчета 0,5 мл на 10 г массы животного в возрастающих дозах. Результаты обрабатывали по Прозоровскому с вычислением средней смертельной дозы (ЛД₅₀) при Р=0,05 [Прозоровский В.В., Прозоровская М.П., Демченко В.М. // Фармакология и токсикология. - 1978. - Т.41. - №4. - С.497-502].

Острая токсичность (ЛД₅₀) заявляемого соединения составила 355,0 (310,0÷400,9) мг/кг, папаверина гидрохлорида - 96,0 (78,0÷119,0) мг/кг.

Таким образом, заявляемое соединение - 1-(3,4-диэтоксифенил)-2,3,5,6-тетрагидро-(3,4-диэтоксибензо)[g]хиноксалино[2,3-b]индолизина гидрохлорид - проявляет прямое антикоагулянтное действие, превосходящее по уровню активности аналог по структуре папаверина гидрохлорид при меньшей токсичности, поэтому может найти применение в медицине в качестве антикоагулянта прямого действия.

БИБЛИОГРАФИЧЕСКИЙ СПИСОК

1. Михайловский А.Г., Шкляев B.C. Реакция енаминов ряда изохинолина и фенантридина с оксалилхлоридом // Химия гетероцикл. соедин. - 1994. - №7. - С.946-949.

2. Кремлева В.Ф., Ивлева А.Я. Влияние папаверина на систему свертывания крови // Фармакология и токсикология. - 1974. - Т.37. - №2. - С.232-235.

3. Михайловский А.Г. Реакция 2,3-диоксопирроло[2,1-а]изохинолинов с боргидридом натрия и свойства ее продуктов // Химия гетероцикл. соедин. - 1996. - №5. - С.685-692.

4. Полыгалова Н.Н., Михайловский А.Г., Вихарева Е.В. Сб. «Азотсодержащие гетероциклы». - М.: ICSPF-Press, 2006. Т.2, с.417.

5. Прозоровский В.В., Прозоровская М.П., Демченко В.М. // Фармакология и токсикология. - 1978. - Т.41. - №4. - С.497-502.

Изобретение относится к новому 1-(3,4-диэтоксифенил)-2,3,5,6-тетрагидро-(3,4-диэтоксибензо)[g]хиноксалино[2,3-b]индолизина гидрохлориду формулы:

который проявляет прямое антикоагулянтное действие, достоверно увеличивая время свертывания нитратной крови и процент изменения свертываемости в концентрации 1 мг/мл на 36,5%. ЛД₅₀ при внутрибрюшинном введении белым мышам составила 355,0 (310,0÷410,0) мг/кг. Т_пл 160-161°С (изопропанол). 1 табл.

1-(3,4-Диэтоксифенил)-2,3,5,6-тетрагидро-(3,4-диэтоксибензо)[g]хиноксалино[2,3-b]индолизина гидрохлорид, проявляющий прямое антикоагулянтное действие