СПОСОБ ВЫДЕЛЕНИЯ 1-О-2-(3,4-ДИМЕТОКСИБЕНЗИЛ)-3-КАРБОКСИ-4-(3-МЕТОКСИ-4-ОКСИФЕНИЛ)-БУТИЛ-β-D-ГАЛАКТОПИРАНОЗЫ ИЗ Onopordum acanthium L. Российский патент 2008 года по МПК C07H1/08 C07H15/18 

Предлагаемое изобретение относится к биоорганической химии и химии природных соединений, в частности к способу выделения 1-O-2-(3,4-диметоксибензил)-3-карбокси-4-(3-метокси-4-оксифенил)-бутил-β-D-галактопиранозы (1) из семян Onopordum acanthium L. общей формулы:

В последние годы фенилпропаноиды стали предметом пристального внимания исследователей в поиске перспективных биологически активных соединений (БАС) и создания на их основе эффективных лекарственных средств. В медицинскую практику внедрены желчегонные препараты на основе кофеоилхинных кислот артишока и бессмертника итальянского, гепатопротекторные лекарственные средства на основе флаволигнанов расторопши пятнистой; выявлены антимикробные, противовирусные, иммуностимулирующие свойства гидроксикоричных кислот и их производных, стимулирующие свойства гликозидов коричного спирта, содержащихся в корневищах родиолы розовой и элеутероккока колючего.

Известен способ выделения (Г.Г.Запесочная, В.А.Куркин, Т.В.Кудрявцева, Б.С.Карасартов, К.С.Чолпонбаев, Н.А.Тюкавкина, В.Е.Ручкин, Химия природ, соедин., 1992, 50) хлорогеновой кислоты (2) и цинарина(1,5-дикофеоилхинной кислоты) (3) из цветков бессмертника итальянского Helichrysum italicum Juss. С целью выделения дикофеоилхинных кислот цветки бессмертника экстрагировали 80%-ным этиловым спиртом при кипении. Объединенные экстракты упаривали до густого остатка и хроматографировали на силикагеле в системе растворителей хлороформ-метанол. Полученные фракции многократно рехроматографировали на разных сорбентах (полиамид, силикагель, сефадекс). Разделение контролировали методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ).

По литературным данным (В.А.Куркин, Фенилпропаноиды- перспективные природные биологически активные соединения, Изд-во СамГМУ, Самара, 1996, 80 с.), кофеоилхинные кислоты обладают выраженными желчегонными свойствами, причем активность дикофеоилхинной кислоты (цинарина) в 3 раза выше по сравнению с монокофеоилхинными кислотами.

Известен способ выделения (В.А.Куркин, Г.Г.Запесочная, А.Г.Дубичев, Е.Д.Воронцов, Химия природ, соедин., 1991, 481) триандрина (4), обладающего тонизирующим действием, и вималина (5) из родиолы розовой Rhodiola rosea L..

Воздушно-сухую биомассу родиолы розовой исчерпывающе экстрагировали 80%-ным этанолом в соотношении 1:10 (2 раза при 20°С и 2 раза при кипении). Экстракт упарили в вакууме, разбавили водой и обработали многократно хлороформом. Водный остаток упарили в вакууме, смешали с полиамидом и высушили. Полученный порошок хроматографировали на полиамиде, используя в качестве элюента воду, 50% и 96% этанол. Последующая хроматография упаренного 50%-ного элюата на силикагеле в системе растворителей хлороформ - метанол привела к получению фракций, содержащих соединения 4 и 5.

Таким образом, в литературе отсутствуют сведения о выделении 1-O-2-(3,4-диметоксибензил)-3-карбокси-4-(3-метокси-4-оксифенил)-бутил-β-D-галактопиранозы (1).

Авторами предлагается способ выделения 1-O-2-(3,4-диметоксибензил)-3-карбокси-4-(3-метокси-4-оксифенил)-бутил-β-D-галактопиранозы (1) из семян татарника колючего Onopordum acanthium L. Сущность способа заключается в исчерпывающей непрерывной экстракции измельченных воздушно-сухих семян Onopordum acanthium L. в аппарате Сокслета с помощью хлороформа в течение 2-х дней. При этом экстрагируемый материал обрабатывается порцией чистого растворителя, а экстрагируемое вещество накапливается в перегонной колбе. Данный метод применим для экстрагируемого вещества, выдерживающего длительное нагревание без разложения. К упаренному хлороформному экстракту семян Onopordum acanthium L. порционно (3×10 мл) добавляли гексан с периодичностью в 1 час и оставляли на 7 суток при температуре 10°С. Выпавшее в осадок вещество фильтровали, перекристаллизовывали и в результате получили 0,46 г соединения 1. Выход в пересчете на воздушно-сухое сырье составляет 0,1%.

Существенные отличия предлагаемого способа:

В предлагаемом способе в качестве исходного сырья используются семяна Onopordum acanthium L. Татарник колючий Onopordum acanthium L. - двухлетнее растение семейства сложноцветных (Asteraceae), химический состав которого изучен недостаточно. Данный способ позволяет получить 1-O-2-(3,4-диметоксибензил)-3-карбокси-4-(3-метокси-4-оксифенил)-бутил-β-D-галактопиранозу (1) непрерывной экстракцией хлороформом в аппарате Сокслета и высаждением с помощью гексана.

Преимущества предлагаемого способа:

Способ позволяет получить 1-O-2-(3,4-диметоксибензил)-3-карбокси-4-(3-метокси-4-оксифенил)-бутил-β-D-галактопиранозу (1), данные о которой в литературе отсутствуют. Разработанный авторами способ отличается простотой проведения эксперимента и не требует применения многократной колоночной хроматографии и рехроматографии полученных фракций веществ с применением различных сорбентов и элюирующих смесей растворителей, а также применения ВЭЖХ для разделения сложной смеси природных соединений.

Способ поясняется примером:

Измельченное воздушно-сухое сырье (457 г) исчерпывающе экстрагировали в аппарате Сокслета хлороформом в течение 2 дней. Экстрагируемый материал (семена Onopordum acanthium L.) помещали в бумажном патроне в экстрактор. В колбу наливали 300 мл растворителя и нагревали его до кипения. Пары растворителя, поднимаясь, конденсировались в обратном холодильнике и растворитель каплями стекал на экстрагируемый материал. Когда экстрактор заполнялся растворителем до уровня сгиба сливной трубки сифона, экстракт сбрасывался по сифону в перегонную колбу и процесс повторялся. Полученный хлороформный экстракт семян упарили на роторном испарителе (до 200 мл) и при комнатной температуре добавили в него н-гексан (3×10 мл) с периодичностью в 1 час, оставив на 7 суток при 10°С. Выпавшие кристаллы фильтровали. Перекристаллизацию проводили 3 раза. В результате получили 0,46 г 1-O-2-(3,4-ди-метоксибензил)-3-карбокси-4-(3-метокси-4-оксифенил)-бутил-β-D-галактопиранозы(1) с выходом 0,1%.

Спектральные характеристики 1-O-2-(3,4-диметоксибензил)-3-карбокси-4-(3-метокси-4-оксифенил)-бутил-β-D-галактопиранозы (1):

С₂₇Н₃₆O₁₂; Т.пл. 78-80°С [α]^D ₂₅-23+2°(хлороформ)Найдено (%):С, 59.04; Н, 6.97; О, 33.99Вычислено (%):С, 58.69; Н, 6.57; О, 34.75

ИК-спектр (ν, см^-1): 750, 1410, 1450, 1500, 1580, 1750, 2900, 3000, 3400.

УФ-спектр (λ_max): 281 нм.

Спектр ЯМР ¹³С (м.д.; δ; DMSO): 33.54 (т, С-4); 36.86 (т, С-11); 40.76 (д, С-2); 45.56 (д, С-3); 55.43 (с, С-20, С-21); 55.69 (с, С-19); 61.20 (т, С-6^/); 69.70 (д, С-3^/); 70.68 (т, С-1); 73.24 (д, С-2^/); 76.88 (д, С-4^/); 76.99 (д, С-5^/); 100.31 (д. С-1^/); 111.93 (д, С-16); 112.48 (д, С-13); 113.92 (д, С-6); 115.24 (д, С-9); 120.45 (д, С-17); 121.34 (д, С-10); 131.20 (с, С-12); 131.83 (с, С-5); 145.36 (с, С-8); 147.37 (с, С-7); 148.72 (с, С-15); 148.73 (с, С-14); 178.38 (с, С-18).

Спектр ЯМР ¹H (м.д.; δ; J/Гц; DMSO): 2.42-2.52 (1Н, м, Н-2); 2.50 (1Н, м, Н_а-11); 2.55 (1Н, дд, ²J=12 и ³J, H_b-11); 2.71 (1Н, м, Н-3); 2.80 (2Н, м, Н-4); 3.18 (1Н, м, Н-3^/), 3.20-3.30 (3Н, м, Н-2^/, Н-4^/, Н-5^/); 3.48 (1Н, м, Н_а-6^/); 3.68 (1Н, м, H_b-6^/); 3.70 (6Н, с, Н-20, Н-21); 3.73 (3Н, с, Н-19); 3.87 (1Н, т, ³J=6, Н_а-1); 4.01 (1Н, т, ³J=6, Hb=1); 4.85 (1Н, д, ³J=6, H-1^/); 6.61 (1Н, д, ³J=3, Н-17); 6.66 (1Н, с, Н-13); 6.69(1Н, д, ³J=3, Н-10); 6.79(1Н, с, Н-6); 6.82(1Н. д, ³J=3, Н-16); 7.01 (1Н, д, ³J=3, Н-9).

Изобретение относится к способу выделения 1-O-2-(3,4-диметоксибензил)-3-карбокси-4-(3-метокси-4-оксифенил)-бутил-β-D-галактопиранозы общей формулы (1), заключающемуся в исчерпывающей непрерывной экстракции воздушно-сухих семян Татарника колючего Onopordum acanthium L. хлороформом в течение 2 дней в аппарате Сокслета, высаживании из экстракта с помощью 3-х кратной обработки н-гексаном с последующим выдерживанием при 10°С в течение 7 суток и дальнейшим фильтрованием.

Способ выделения 1-О-2-(3,4-диметоксибензил)-3-карбокси-4-(3-метокси-4-оксифенил)-бутил-β-D-галактопиранозы общей формулы (1)

заключающийся в исчерпывающей непрерывной экстракции воздушно-сухих семян Татарника колючего Onopordum acanthium L. хлороформом в течение 2 дней в аппарате Сокслета и высаживании из экстракта с помощью 3-кратной обработки н-гексаном с последующим выдерживанием при 10°С в течение 7 суток.