МЕТИЛАМИД И БЕНЗИЛАМИД N-АЦЕТИЛ-3,5-ДИБРОМАНТРАНИЛОВОЙ КИСЛОТЫ, ПРОЯВЛЯЮЩИЕ ПРОТИВОВОСПАЛИТЕЛЬНУЮ И АНАЛЬГЕТИЧЕСКУЮ АКТИВНОСТИ Российский патент 2008 года по МПК C07C237/42 C07C237/30 A61K31/166 A61K31/167 

Изобретение относится к биологически активным соединениям, а именно метиламиду (I) и бензиламиду (II) N-ацетил-3,5-дибромантраниловой кислоты формулы дибромантраниловой кислоты формулы

являющимися малотоксичными, обладающими противовоспалительным и анальгетическим действием, что позволяет предположить их использование в медицине. Ближайшим структурным аналогом заявляемому соединению является гидразид N-ацетил-3,5-дибромантраниловой кислоты (III) формулы

[Суетина, Ю.В., Марданова, Л.Г., Коркодинова, Л.М. Противовоспалительная и анальгетическая активность замещенных амидов N-ацетил-3,5-дибромантраниловой кислоты. Т1. Новые материалы и химические технологии // Инновационный потенциал естественных наук: в 2 т. Труды междунар. науч. конф. Перм. ун-т; Естественно-научн. ин-т и др. Пермь, с.265-267, (2006)].

В лечебной практике применяется препарат ортофен, обладающий противовоспалительным и анальгетическим действием [Машковский М.Д. Лекарственные средства: практ пособие. - М.: Новая волна, с.170-171, (2005)], который взят нами в качестве эталона сравнения противовоспалительной активности соединений I и II.

Целью предлагаемого изобретения является поиск среди замещенных амидов N-ацил-3,5-дибромантраниловых кислот соединений с анальгетической и противовоспалительной активностями.

Поставленная цель достигается получением метиламида (I) и бензиламида (II) N-ацетил-3,5-дибромантраниловой кислоты. Описываемые соединения получают внутримолекулярной циклизацией N-ацетил-3,5-дибромантраниловой кислоты с последующим амидированием метиламином или бензиламином с выделением целевых продуктов в виде замещенных амидов.

6,8-Дибром-2-метил-4Н-3,1-бензоксазин-4-он получают из N-ацетил-3,5-дибромантраниловой кислоты внутримолекулярной циклизацией уксусным ангидридом

Методика получения 6,8-дибром-2-метил-4Н-3,1-бензоксазин-4-она. К 10,1 г (0,03 моль) N-ацетил-3,5-дибромантраниловой кислоты отмеривают 35 мл (37,8 г) (0,12 моль) уксусного ангидрида и кипятят 1 час. Реакционную массу охлаждают и отфильтровывают, промывают уксусным ангидридом. Выход: 8,1 г (85%). Т_пл.=173-175°C.

Далее с целью получения целевых продуктов проводят реакцию амидирования 6,8-дибром-2-метил-4Н-3,1-бензоксазин-4-она метиламином (I) или бензиламином (II).

Методика получения метиламида N-ацетил-3,5-дибромантраниловой кислоты (I). К раствору 9,54 г (0,03 моль) 6,8-дибром-2-метил-4Н-3,1-бензоксазин-4-она в 160 мл 96%-ного этанола прибавляют раствор из 0,93 г (0,03 моль) метиламина в 100 мл 96%-ного этанола при перемешивании. После перемешивания в течение 3 часов при 18°С выпадает белый осадок, который отфильтровывают, высушивают и перекристаллизовывают из этанола. Выход: 5,02 г (48%). Т_пл=222-224°C.

Методика получения бензиламида N-ацетил-3,5-дибромантраниловой кислоты (II). К раствору 9,54 г (0,03 моль) 6,8-дибром-2-метил-4Н-3,1-бензоксазин-4-она в 160 мл 96%-ного этанола прибавляют раствор из 3,21 г (0,03 моль) бензиламина в 100 мл 96%-ного этанола при перемешивании. После перемешивания в течение 3 часов при 18°С выпадает белый осадок, который отфильтровывают, высушивают и перекристаллизовывают из смеси вода: этанол, 1:2. Выход: 5,50 г (43%). Т_пл=240-242°C.

Заявляемые соединения представляют собой белые кристаллические вещества, нерастворимые в воде, растворимые в этаноле, ДМСО, ДМФА. В спектре ЯМР ¹H (Фурье-спектрометр BS-567A (100 МГц) в ДМСО-d₆, внутренний стандарт - ГМДС) соединения I имеются: два синглета трех протонов двух метильных групп: в области 1,90 м.д. (амидной группы) и 2,60 м.д. (NH - ацильной группы); мультиплет двух протонов бензольного кольца - 7,45-7,85 м.д.; квадруплет одного протона амидной (CONH) группы при 8,05 м.д. и синглет одного протона N-карбонил в области 9,40 м.д.. В ЯМР ¹H спектре соединения II прописываются: три протона метильной группы в виде синглета - 1,85 м.д.; метиленовая группа при 4,30 м.д.; мультиплет протонов двух бензольных колец - 7,15-7,85 м.д.; триплет амидной (CONH) группы при 8,60 м.д. и уширенный сигнал NHCO-группы - 9,40 м.д..

Острую токсичность изучали по Прозоровскому на белых мышах массой 18-22 г при однократном внутрибрюшинном введении соединений [Прозоровский В.В., Прозоровская М.П., Демченко В.М. Фармакол. токсикол., Т.41, №4, с.497-502, (1978)].

Противовоспалительную активность изучали на модели каррагенинового воспаления. Величину воспалительной реакции определяли онкометрически [Салямон Л.С. Лекарственная регуляция воспалительного процесса. Л., с.11-43, (1958)].

Для оценки анальгетического действия была использована методика "горячей пластинки" [Eddy N.В., Liembach D.J. Studies of anastetics // Pharm. and Exp. Ther., p.385-393, (1953)].

Препаратами сравнения противовоспалительного и анальгетического действия служили ортофен и аналог по структуре - гидразид N-ацетил-3,5-дибромантраниловой кислоты. Исследуемые вещества и аналог по структуре вводили внутрибрюшинно в виде взвеси в 2% крахмальной слизи в дозе 50 мг/кг, а ортофен - 10 мг/кг. Контрольным животным вводили эквиобьемное количество крахмальной слизи. Результаты опытов подвергали статистической обработке с использованием коэффициента Стьюдента [Сернов Л.Н., Гацура В.В. Элементы экспериментальной фармакологии // Всероссийский научный центр по безопасности биологически активных веществ. Москва, с.311-312 (2000)] и считали достоверными при р≤0,05. Результаты испытаний представлены в таблице.

Как видно из таблицы, соединения I и II (заявляемые) по противовоспалительной активности через час после введения каррагенина превосходят в 1,8 и 1,4 раза аналог по структуре и в 1,9 и 1,5 раз ортофен. Заявляемые соединения I и II проявляют сравнимое с ортофеном и аналогом по структуре противовоспалительное действие и через 4 часа после введения каррагенина. Они обладают высокой анальгетической активностью, в то время как ортофен (10 мг/кг) и аналог по структуре (50 мг/кг) таковой не обладают.

Соединения I и II более чем в 20 раз менее токсичны, а по условной широте фармакологического действия (УШФД) в 4 раза превышают по противовоспалительному и анальгетическому действию препарат сравнения.

Таким образом, метиламид N-ацетил-3,5-дибромантраниловой кислоты (I) и бензиламид N-ацетил-3,5-дибромантраниловой кислоты (II) проявляют высокую противовоспалительную и анальгетическую активности и более чем в 20 раз превосходят по ЛД₅₀ ортофен.

Следовательно, заявляемые соединения I и II могут найти применение в медицине в качестве лекарственного средства, обладающего противовоспалительным и анальгетическим действием.

ТаблицаОстрая токсичность, противовоспалительное и анальгетическое действия заявляемых соединений (I и II), его аналога по структуре (III) и ортофена СоединениеЛД₅₀, мг/кгТорможение отека стопы по сравнению с контролем, % Анальгетическая активность, исследованная по методике "горячая пластинка"УШФДчерез 1 ччерез 4 чI>150072,1 (p¹<0,001, p²<0,001)53,5
(p²<0,1, p³<0,25)21,4±1,5
(p¹<0,001)>30II>150055,1 (p¹<0,001, p³<0,001)34,1 (p²<0,01, p³<0,001)27,4±1,1
(p¹<0,001)>30III>150039,256,516,4±0,2
(p¹<0,01)>30ортофен74,037,861,317,4±1,6
(р¹<0,002)7,4контроль   11,4±0,2 Примечание: р¹ - в сравнении с контролем;
р² - в сравнении с аналогом по структуре;
р³ - в сравнении с ортофеном.

Источники информации

1. Суетина Ю.В., Марданова Л.Г., Коркодинова Л.М. Противовоспалительная и анальгетическая активность замещенных амидов N-ацетил-3,5-дибромантраниловой кислоты. Т1. Новые материалы и химические технологии // Инновационный потенциал естественных наук: в 2 т. Труды междунар. науч. конф., Перм. ун-т; Естественно-науч. ин-т и др.. Пермь, с.265-267, (2006).

2. Машковский М. Д. Лекарственные средства: практ пособие. - М.: Новая волна, с.170-171 (2005).

3. Прозоровский В.В., Прозоровская М.П., Демченко В.М. Фармакол. токсикол., Т.41, №4, с.497-502, (1978).

4. Салямон Л.С. Лекарственная регуляция воспалительного процесса. Л., с.11-43, (1958).

5. Eddy N.В., Liembach D.J. Studies of anastetics // Pharm. and Exp. Ther., p.385-393, (1953).

6. Сернов Л.H., Гацура В.В. Элементы экспериментальной фармакологии // Всероссийский научный центр по безопасности биологически активных веществ. Москва, с.311-312, (2000).

Описываемые соединения получают внутримолекулярной циклизацией N-ацетил-3,5-дибромантраниловой кислоты с последующим амидированием метиламином или бензиламином с выделением целевых продуктов в виде замещенных амидов. Метиламид (I) и бензиламид (II) N-ацетил-3,5-дибромантраниловой кислоты формулы

могут быть использованы в медицине в качестве лекарственного средства, обладающего противовоспалительным и анальгетическим действием, малотоксичные. Соединения представляют собой белые кристаллические вещества с Т_пл=222-224°С (I) и Т_пл=240-242°С (II), нерастворимые в воде, растворимые в этаноле, ДМСО, ДМФА. Структура подтверждена спектром ЯМР ¹Н. Соединения обладают противовоспалительным и анальгетическим действием, малотоксичные. ЛД₅₀ при внутрибрюшинном введении белым мышам составила >1500 мг/кг. 1 табл.

Метиламид(I) и бензиламид(II) N-ацетил-3,5-дибромантраниловой кислоты формулы

проявляющие противовоспалительную и анальгетическую активности.