2-(1,2-ДИФЕНИЛ-2-ОКСОЭТИЛИДЕНГИДРАЗИНО)-4-(4-МЕТОКСИФЕНИЛ)-4-ОКСОБУТ-2-ЕНОВАЯ КИСЛОТА, ОБЛАДАЮЩАЯ ПРОТИВОВОСПАЛИТЕЛЬНОЙ И АНАЛЬГЕТИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТЬЮ Российский патент 2009 года по МПК C07C251/86 A61P29/00 A61K31/15 

Изобретение относится к области органической химии, к новым биологически активным веществам класса 4-арил-2,4-диоксобутановых кислот, а именно к 2-(1,2-дифенил-2-оксоэтилиденгидразино)-4-(4-метоксифенил)-4-оксобут-2-еновой кислоте (1) формулы

обладающей противовоспалительной и анальгетической активностью, что позволяет предположить ее использование в медицине в качестве лекарственного противовоспалительного и анальгетического средства.

Аналогом по структуре заявляемому соединению является 2-дифенилгидразино-4-(4-метоксифенил)-4-оксобут-2-еновая кислота (2) [Рубцов А.Е., Залесов В.В. Синтез и внутримолекулярная циклизация N-замещенных 2-амино-4-арил-4-оксобут-2-еновых кислот. ЖОрХ, 2003, т.39, вып.6, с.918-923] формулы

Данные по противовоспалительной и анальгетической активности структурного аналога в литературе отсутствуют.

Эталоном сравнения выбрана натриевая соль 2-[(2,6-дихлорфенил)-амино]-фенилуксусной кислоты (ортофен) (3) формулы

который широко применяется в лечебной практике и является аналогом по действию [Машковский М.Д. Лекарственные средства. - 15-е изд., перераб., испр. и доп. - М.: ООО «Новая волна», 2005. - с.170].

Задачей изобретения является поиск в ряду производных 4-арил-2,4-диоксобутановых кислот веществ с выраженным противовоспалительным и анальгетическим действием и низкой токсичностью.

Поставленная задача достигается получением 2-(1,2-дифенил-2-оксоэтиленгидразино)-4-(4-метоксифенил)-4-оксобут-2-еновой кислоты (1), обладающей противовоспалительной и анальгетической активностью.

Заявляемое соединение 1 синтезируют взаимодействием 4-(4-метоксифенил)-2,4-диоксобутановой кислоты с моногидразоном бензила в среде спирта этилового при комнатной температуре с последующим выделением целевого продукта известными методами по схеме:

Пример 1 получения соединения 1. К раствору 2.22 г (0.01 моль) 4-(4-метоксифенил)-2,4-диоксобутановой кислоты в 20 мл спирта этилового прибавляют раствор 2.24 г (0.01 моль) моногидразона бензила в 20 мл того же растворителя и выдерживают при комнатной температуре 24 часа. Смесь охлаждают до 0°С, выпавший осадок отфильтровывают и перекристаллизовывают из ацетонитрила. Выход 3.08 г (72%). Т.пл. 170-171°С.

Найдено, %: С 70.93; Н 4.32; N 6.18. С₂₅Н₂₀N₂O₅.

Вычислено, %: С 70.08; Н 4.70; N 6.54.

ИК-спектр (Specord M80, вазелиновое масло, ν, см-1):3275 (NH), 1700 (COOH), 1660 (C₆H₅CO), 1605 уш. (С⁴=О, С=С, C=N). Спектр ЯМР ¹H (Bruker DRX 500, ДМСО-d₆, ГМДС, δ, м.д.): 3.78 (с, 3Н, СН₃О); 6.28 (с, 1Н, СН); 7.15-7.85 (м, 14Н, 2С₆Н₅, С₆Н₄); 12.92 (с, 1Н, NH).

Полученное соединение 1 представляет собой светло-желтое кристаллическое вещество, растворимое в хлороформе, толуоле, ацетоне, нерастворимое в воде и гексане.

Противовоспалительная активность изучена в опытах на 30 белых беспородных крысах обоего пола массой 220-260 г. Соединение 1 вводили перорально в дозе 50 мг/кг в виде взвеси в 2% крахмальном растворе за час до моделирования острого каррагенинового воспаления. Каррагениновый отек вызывали субплантарной инъекцией 0.1 мл 1% раствора флогогена в заднюю лапу крысы. О противовоспалительной активности судили по изменению выраженности воспаления в динамике, которое регистрировали онкометрически через 1, 3 и 5 часов после моделирования воспаления [Методические рекомендации по экспериментальному изучению нестероидных противовоспалительных веществ, фармакологический комитет МЗ СССР, протокол №22 от 11 ноября 1982, Москва (1982)]. Контрольным животным вводили эквиобъемное количество 2% крахмального раствора. Препаратом сравнения служил ортофен в дозе 10 мг/кг. Результаты обработаны статистически с помощью программы Exel 2000 и представлены в таблице.

Анальгетическая активность соединения 1 изучена на 12 белых мышах самцах массой 20-25 г по методу термического раздражения [Н.Б.Эдди, Д.Леймбах, Фармакология и токсикология, 1960, №4, с.311-315]. Исследуемое соединение 1 вводили в дозе 50 мг/кг перорально в виде взвеси в 2% крахмальном растворе за 1 час до помещения животных на горячую пластинку. Показателем болевой чувствительности служила длительность пребывания мышей на пластинке до наступления оборонительного рефлекса - облизывания лапок. Контрольным животным вводили эквиобъемное количество 2% крахмального раствора. Препаратом сравнения служил ортофен в дозе 10 мг/кг. Результаты обработаны статистически с помощью программы Exel 2000 и представлены в таблице.

Острую токсичность (ЛД₅₀) заявляемого соединения 1 определяли на 24 белых беспородных мышах обоего пола массой 18-22 г при внутрибрюшинном пути введения в виде взвеси в 2% крахмальном растворе по экспресс-методу В.Б.Прозоровского [Прозоровский В.Б., Прозоровская М.П., Демченко В.И. Фармакология и токсикология, 1978, №4, с.497-502].

Установлено, что ЛД₅₀ соединения 1 составляет 1000 мг/кг. Согласно классификации токсичности препаратов соединение 1 относится к классу практически нетоксичных веществ [Измеров И.Ф., Саноцкий И.В., Сидоров К.К., Параметры токсикометрии промышленных ядов. М.: Медицина, 1977, с.196-197]. Оно в 14 раз менее токсично, чем ортофен.

Таблица
Противовоспалительная, анальгетическая активность и острая токсичность соединения 1СоединениеДоза,
мг/кгЛД₅₀ мг/кг% торможения каррагенинового отекаЛатентный период оборонительного рефлекса, с1 час3 часа5 часовКонтроль--0,0±0,00,0±0,00,0±0,010,0±0,5150100061,3±3,4^1***52,0±2,4^1***46,5±4,7^1***Ортофен107422,0±7,456,0±7,3^1***63,0±1,5^1*26,2±0,6^1****=р<0,05, ^**=р<0,01, ^***=р<0,001
1 - по сравнению с контролем; 2-по сравнению с ортофеном.

Как видно из таблицы, соединение 1 проявило выраженную противовоспалительную активность в течение всего периода наблюдения, а на пике воспаления оно не уступает ортофену. Кроме того, соединение 1 показало значительную анальгетическую активность, превышающую таковую у эталона сравнения. Необходимо отметить, что эффективная доза ортофена составляет 0,14 от его ЛД₅₀, а у заявляемого соединения - 0,05 от его ЛД₅₀, что свидетельствует об определенных преимуществах соединения 1 перед ортофеном в плане его безопасности и эффективности.

Таким образом, 2-(1,2-дифенил-2-оксоэтилиденгидразино)-4-(4-метоксифенил)-4-оксобут-2-еновая кислота (1) более эффективна и менее токсична в сравнении с ортофеном, что делает возможным использование ее для создания новых лекарственных препаратов, обладающих противовоспалительной и анальгетической активностью.

ЛИТЕРАТУРА

1. Рубцов А.Е., Залесов В.В. Синтез и внутримолекулярная циклизация N-замещенных 2-амино-4-арил-4-оксобут-2-еновых кислот. ЖОрХ, 2003, т.39, вып.6, С.918-923.

2. Машковский М.Д. Лекарственные средства. - 15-е изд., перераб., испр. и доп. - М.: ООО «Новая волна», 2005. - с.170.

3. Методические рекомендации по экспериментальному изучению нестероидных противовоспалительных веществ, фармакологический комитет МЗ СССР, протокол №22 от 11 ноября 1982, Москва (1982).

4. Н.Б.Эдди, Д.Леймбах, Фармакология и токсикология, 1960, №4, с.311-315.

5. Прозоровский В.Б., Прозоровская М.П., Демченко В.И. Фармакология и токсикология, 1978, №4, с 497-502.

6. Измеров И.Ф., Саноцкий И.В., Сидоров К.К., Параметры токсикометрии промышленных ядов. М.: Медицина, 1977, с.196-197.

Изобретение относится к новому биологически активному соединению класса 4-арил-2,4-диоксобутановых кислот - 2-(1,2-дифенил-2-оксоэтилиденгидразино)-4-(4-метоксифенил)-4-оксобут-2-еновой кислоте формулы (I), обладающей противовоспалительной и анальгетической активностью, а также низкой токсичностью. 1 табл.

2-(1,2-Дифенил-2-оксоэтилиденгидразино)-4-(4-метоксифенил)-4-оксобут-2-еновая кислота, обладающая противовоспалительной и анальгетической активностью