СРЕДСТВО, ОБЛАДАЮЩЕЕ АНКСИОЛИТИЧЕСКИМ ДЕЙСТВИЕМ Российский патент 2009 года по МПК A61K36/28 A61P25/10 

Изобретение относится к медицине, конкретно к клинической фармакологии, и может быть использовано для фармакологической коррекции заболеваний ЦНС, и касается лекарственных средств, обладающих анксиолитическим действием, получаемых из растительного сырья.

Применяемые для лечения данных заболеваний синтетические лекарственные средства имеют недостаточную терапевтическую эффективность, обладают рядом побочных эффектов, ограничивающих возможность их применения, особенно в условиях непрекращающейся трудовой деятельности [1]. Фитопрепараты могут сыграть существенную роль в решении этой проблемы.

Наиболее близким к предлагаемому решению является сухой экстракт корня шлемника байкальского Scutellaria baicalensis Georgi, обладающий анксиолитическим действием (прототип) [2].

Задачей данного изобретения является расширение арсенала средств защиты ЦНС, обладающих анксиолитическим действием, получаемых из растительного сырья.

Поставленную задачу решают применением в качестве средства, обладающего анксиолитическим действием, высушенных измельченных надземной и подземной частей видов рода альфредия (Alfredia), а также водных и водно-этанольных экстрактов надземной и подземной частей видов рода альфредия (Alfredia).

Новым является то, что впервые в качестве средства, обладающего анксиолитическим действием, используют высушенные измельченные надземную и подземную части видов рода альфредия (Alfredia), водные и водно-этанольные экстракты надземной и подземной частей видов рода альфредия (Alfredia).

В народной медицине альфредию поникшую (Alfredia cernua Cass.) используют при нервных заболеваниях, в качестве тонизирующего и болеутоляющего средства [3]. Ранее нами [4] обнаружена антиоксидантная активность экстрактов надземной и подземной частей альфредии поникшей (Alfredia cernua Cass.). В литературе отсутствуют данные о применении надземной и подземной частей видов рода альфредия (Alfredia), экстрактов надземной и подземной частей видов рода альфредия (Alfredia) в качестве средства, обладающего анксиолитическим действием.

Использование высушенной и измельченной надземной и подземной частей видов рода альфредия (Alfredia), экстрактов надземной и подземной частей видов рода альфредия (Alfredia) по предлагаемому назначению стало возможным благодаря выявлению экспериментально его новых свойств, а именно способности нормализовать функции ЦНС за счет анксиолитического действия.

Новое свойство обнаружено в результате проведенного экспериментального изучения анксиолитического действия высушенных измельченных надземной и подземной частей видов рода альфредия (Alfredia), водных и водно-этанольных экстрактов (25%, 40%, 70%, 95%) надземной и подземной частей видов рода альфредия (Alfredia).

Фармакологические исследования выполняли на белых беспородных крысах-самках массой 250-350 г. Все животные 1 категории (конвенциональные линейные крысы) получены из коллекционного фонда лаборатории экспериментального биологического моделирования ГУ НИИ фармакологии Томского научного центра СО РАМН. Эксперименты проводили в осенне-зимний период. Работы в рамках экспериментальных методик выполняли с 10 ч утра и заканчивали к 15 ч. Животных содержали в виварии на обычном рационе кормления при свободном доступе к воде и пище (за исключением тех случаев, где иные условия оговариваются особо). Умерщвление животных осуществляли передозировкой эфирного наркоза.

Фармакологические эффекты высушенных измельченных надземной и подземной частей видов рода альфредия (Alfredia), экстрактов надземной и подземной частей видов рода альфредия (Alfredia) оценивали по влиянию на поведение животных в условиях модели «конфликтная ситуация».

Отличительные признаки проявили в заявляемой совокупности новые свойства, явным образом не вытекающие из уровня техники в данной области и неочевидные для специалиста. Впервые установлено, что в качестве средства, обладающего анксиолитическим действием, можно использовать высушенные измельченные надземную и подземную части видов рода альфредия (Alfredia), экстракты надземной и подземной частей видов рода альфредия (Alfredia).

Идентичной совокупности признаков не обнаружено в патентной и научно-медицинской литературе.

Предлагаемое средство с успехом может быть использовано в практическом здравоохранении для коррекции заболеваний ЦНС.

Исходя из вышеизложенного, следует считать предлагаемое изобретение соответствующим условиям патентоспособности «Новизна», «Изобретательский уровень», «Промышленная применимость».

Изобретение будет понятно из следующего описания.

Поведение в конфликтной ситуации является одной из наиболее распространенных моделей невроза. Она позволяет с достаточной достоверностью предсказать противоневротические свойства экстракта [5]. Конфликтную ситуацию моделировали путем столкновения двух рефлексов: питьевого условного рефлекса и безусловного рефлекса избегания электроболевого раздражения [6]. Для этого животных предварительно оставляли надвое суток без воды, затем в течение 4 суток на 20 мин ежедневно помещали в пластиковую камеру размерами 30×40×20 см, в одной из торцевых стенок которой была устроена ниша с поилкой, где крыса могла напиться. Экстракт вводили, начиная с первого дня обучения. В день регистрации крыс помещали в камеру и между металлическим полом камеры и электродом, опущенным в поилку, создавали разность потенциалов в 80 Вт. Таким образом, при попытке взятия воды животное получало удар током. Об анксиолитической активности экстракта судили по разнице в числе взятий воды, несмотря на удар током (наказуемое взятие воды), в контрольной и опытной группах. Дополнительными показателями, характеризующими условно-рефлекторную, эмоциональную и смещенную активность, служили число подходов к поилке, горизонтальные перемещения по клетке, груминг, число вертикальных стоек. Каждое животное наблюдали индивидуально в течение 20 мин.

Полученные экспериментальные данные обрабатывали статистически. О достоверности различий судили методом проверки вероятности нулевой гипотезы с использованием t критерия Стьюдента и критерия Вилкоксона. Различия считали достоверными при р≤0,05 [7].

Высушенные измельченные надземную и подземную части видов рода альфредия (Alfredia), экстракты надземной и подземной частей видов рода альфредия (Alfredia) и препарат сравнения вводили животным курсом ежедневно в течение пяти дней однократно через зонд в желудок в виде раствора или взвеси в воде очищенной за 30 мин до тестирования. Высушенные надземную и подземную части видов рода альфредия (Alfredia) измельчали до мелкодисперсного порошка и вводили в дозе 500 мг/кг. Доза экстрактов составила 100 мг/кг. Данная доза соответствует количеству сырья (порошка альфредии) по содержанию экстрактивных веществ. Указанные дозы определены как наиболее активные в предварительных экспериментах. В качестве препарата сравнения (прототип) использовали сухой экстракт корня шлемника байкальского (Scutellaria baicalensis Georgi) в дозе 50 мг/кг. Животные контрольных групп получали эквивалентное количество воды очищенной.

При проведении экспериментальных исследований использовали порошок высушенных надземной и подземной частей альфредии поникшей Alfredia cernua Cass. (далее по тексту - ПАП); порошок высушенных надземной и подземной частей альфредии снежной Alfredia nivea Kar. et Kir. (далее по тексту - ПАС); экстракты надземной и подземной частей альфредии поникшей Alfredia cernua Cass. (далее по тексту - ЭАП); экстракты надземной и подземной частей альфредии снежной Alfredia nivea Kar. et Kir. (далее по тексту - ЭАС), полученных следующими способами:

Пример 1: надземную и подземную части альфредии поникшей (Alfredia cernua Cass.), высушенные воздушным способом, измельчают до мелкодисперсного порошка (влажность 8,3%) (ПАП).

Пример 2: надземную и подземную части альфредии поникшей (Alfredia cernua Cass.), высушенные воздушным способом, измельчают и просеивают через сито с диаметром отверстий 2 мм (влажность 8,3%). 50 г измельченного сырья помещают в стеклянную колбу, заливают 700 мл воды очищенной и нагревают при температуре 85°С на водяной бане с обратным холодильником в течение 60 мин. Полученное извлечение фильтруют, сырье отжимают. Экстракт упаривают под вакуумом при температуре не выше 60°С досуха (Водный ЭАП).

Пример 3: надземную и подземную части альфредии поникшей (Alfredia cernua Cass.), высушенные воздушным способом, измельчают и просеивают через сито с диаметром отверстий 2 мм (влажность 8,3%). 50 г измельченного сырья помещают в стеклянную колбу, заливают 700 мл 25% этанола и нагревают при температуре 85°С на водяной бане с обратным холодильником в течение 60 мин. Полученное извлечение фильтруют, сырье отжимают. Экстракт упаривают под вакуумом при температуре не выше 60°С досуха (ЭАП на 25% этаноле).

Пример 4: надземную и подземную части альфредии поникшей (Alfredia cernua Cass.), высушенные воздушным способом, измельчают и просеивают через сито с диаметром отверстий 2 мм (влажность 8,3%). 50 г измельченного сырья помещают в стеклянную колбу, заливают 700 мл 40% этанола и нагревают при температуре 85°С на водяной бане с обратным холодильником в течение 60 мин. Полученное извлечение фильтруют, сырье отжимают. Экстракт упаривают под вакуумом при температуре не выше 60°С досуха (ЭАП на 40% этаноле).

Пример 5: надземную и подземную части альфредии поникшей (Alfredia cernua Cass.), высушенные воздушным способом, измельчают и просеивают через сито с диаметром отверстий 2 мм (влажность 8,3%). 50 г измельченного сырья помещают в стеклянную колбу, заливают 700 мл 70% этанола и нагревают при температуре 85°С на водяной бане с обратным холодильником в течение 60 мин. Полученное извлечение фильтруют, сырье отжимают. Экстракт упаривают под вакуумом при температуре не выше 60°С досуха (ЭАП на 70% этаноле).

Пример 6: надземную и подземную части альфредии поникшей (Alfredia cernua Cass.), высушенные воздушным способом, измельчают и просеивают через сито с диаметром отверстий 2 мм (влажность 8,3%). 50 г измельченного сырья помещают в колбу, заливают 700 мл 95% этанола и нагревают при температуре 80°С на водяной бане с обратным холодильником в течение 60 мин. Полученное извлечение фильтруют, сырье отжимают. Экстракт упаривают под вакуумом при температуре не выше 60°С досуха (ЭАП на 95% этаноле).

Пример 7: надземную и подземную части альфредии снежной (Alfredia nivea Kar. et Kir.), высушенные воздушным способом, измельчают до мелкодисперсного порошка (влажность 7,5%) (ПАС).

Пример 8: надземную и подземную части альфредии снежной (Alfredia nivea Kar. et Kir.), высушенные воздушным способом, измельчают и просеивают через сито с диаметром отверстий 2 мм (влажность 7,5%). 50 г измельченного сырья помещают в стеклянную колбу, заливают 500 мл воды очищенной и нагревают при температуре 85°С на водяной бане с обратным холодильником в течение 60 мин. Полученное извлечение фильтруют, сырье отжимают. Экстракт упаривают под вакуумом при температуре не выше 60°С досуха (Водный ЭАС).

Пример 9: надземную и подземную части альфредии снежной (Alfredia nivea Kar. et Kir.), высушенные воздушным способом, измельчают и просеивают через сито с диаметром отверстий 2 мм (влажность 7,5%). 50 г измельченного сырья помещают в стеклянную колбу, заливают 500 мл 25% этанола и нагревают при температуре 85°С на водяной бане с обратным холодильником в течение 60 мин. Полученное извлечение фильтруют, сырье отжимают. Экстракт упаривают под вакуумом при температуре не выше 60°С досуха (ЭАС на 25% этаноле).

Пример 10: надземную и подземную части альфредии снежной (Alfredia nivea Kar. et Kir.), высушенные воздушным способом, измельчают и просеивают через сито с диаметром отверстий 2 мм (влажность 7,5%). 50 г измельченного сырья помещают в стеклянную колбу, заливают 500 мл 40% этанола и нагревают при температуре 85°С на водяной бане с обратным холодильником в течение 60 мин. Полученное извлечение фильтруют, сырье отжимают. Экстракт упаривают под вакуумом при температуре не выше 60°С досуха (ЭАС на 40% этаноле).

Пример 11: надземную и подземную части альфредии снежной (Alfredia nivea Kar. et Kir.), высушенные воздушным способом, измельчают и просеивают через сито с диаметром отверстий 2 мм (влажность 7,5%). 50 г измельченного сырья помещают в стеклянную колбу, заливают 500 мл 70% этанола и нагревают при температуре 85°С на водяной бане с обратным холодильником в течение 60 мин. Полученное извлечение фильтруют, сырье отжимают. Экстракт упаривают под вакуумом при температуре не выше 60°С досуха (ЭАС на 70% этаноле).

Пример 12: надземную и подземную части альфредии снежной (Alfredia nivea Kar. et Kir.), высушенные воздушным способом, измельчают и просеивают через сито с диаметром отверстий 2 мм (влажность 7,5%). 50 г измельченного сырья помещают в колбу, заливают 500 мл 95% этанола и нагревают при температуре 80°С на водяной бане с обратным холодильником в течение 60 мин. Полученное извлечение фильтруют, сырье отжимают. Экстракт упаривают под вакуумом при температуре не выше 60°С досуха (ЭАС на 95% этаноле).

Проведенные нами исследования (табл.1, 2) показали, что все порошки высушенного растительного сырья и экстракты видов рода альфредия (Alfredia) способствуют увеличению наказуемых взятий воды и уменьшению продолжительности фризинговых реакций. При этом в группе животных, получавших экстракт шлемника байкальского (прототип), значимых отличий данных показателей от групп животных, получавших исследуемые ПАП, ПАС и все их экстракты, не наблюдали. Однако двигательная активность у животных, получавших порошки высушенного растительного сырья и экстракты видов рода альфредия (Alfredia), значимо выше, чем у животных, получавших экстракт шлемника байкальского (прототип). Данный факт указывает на большую эффективность снятия депрессии поведения, вызванную конфликтной ситуацией, при применении порошков высушенного растительного сырья и экстрактов видов рода альфредия (Alfredia).

Как показывают экспериментальные исследования, высушенные измельченные надземная и подземная части видов рода альфредия (Alfredia), экстракты надземной и подземной частей видов рода альфредия (Alfredia) обладают более выраженным анксиолитическим действием по сравнению с сухим экстрактом корня шлемника байкальского, что приведет к более высокому эффекту в клинической практике.

Положительный эффект достигнут благодаря использованию высушенных измельченных надземной и подземной частей видов рода альфредия (Alfredia), экстрактов надземной и подземной частей видов рода альфредия (Alfredia) в качестве анксиолитического средства, что позволило расширить арсенал средств растительного происхождения, обладающих анксиолитическим действием, с повышенным специфическим действием.

Литература

1. Машковский М.Д. Лекарственные средства. - М.: Новая Волна, 2002. - Т.1. - С.86-142.

2. Гольдберг Е.Д., Дыгай A.M., Литвиненко В.И., Попова Т.П., Суслов Н.И. Шлемник байкальский. Фитохимия и фармакологические свойства. - Томск: Изд-во Томского ун-та, 1994. - С.151-180.

3. Растительные ресурсы СССР: Цветковые растения, их химический состав, использование; Семейство Asteraceae (Compositae). - СПб.: Наука, 1993. - С.19-20.

4. Патент РФ №2292214 «Средство, обладающее антиоксидантной активностью» от 27.01.2007 г. / Шилова И.В., Краснов Е.А., Кувачева Н.В., Новожеева Т.П.

5. Вихляев Ю.И., Воронина Т.А., Гарибова Т.Л. и др. Феназепам. - Киев: Наукова Думка, 1982. - 452 с.

6. Клыгуль Т.А., Кривопалов В.А. Установка с автоматической регистрацией поведения крыс для оценки действия малых транквилизаторов. // Фармакология и токсикология. - 1966. - №2. - С.241-244.

7. Беленький М.Л. Элементы количественной оценки фармакологического эффекта. - Л.: Медицина, 1963. - С.81-147.

Таблица 1
Влияние высушенной измельченной надземной и подземной части альфредии поникшей (Alfredia cernua Cass.) и ее экстрактов на показатели поведения крыс в конфликтной ситуации в сравнении с экстрактом корня шлемника байкальского в условных единицах ( n=8) Группа наблюдения Двигательная активность Время замирания Количество подходов к поилке Количество наказуемых взятий воды Контроль 77±16 316±29 8,5±1,9 82±9 ПАП 160±10*# 85±12* 11,5±0,9 169±12* Водный ЭАП 173±11*# 97±12* 11,9±1,0 175±10* ЭАП на 25% этаноле 179±9*# 107±14* 13,7±1,8 184±11* ЭАП на 40% этаноле 175±11*# 87±15* 11,4±0,8 173±11* ЭАП на 70% этаноле 184±15*# 75±11* 12,5±1,1 167±13* ЭАП на 95% этаноле 183±13*# 79±11* 12,4±1,0 189±13* Прототип 139±14* 96±14* 11,5±1,0 202±21* Примечание: * - различия достоверны в отношении контроля; # - различия достоверны по отношению к группе, получавшей прототип; достоверность различий оценивали при р≤0,05.

Таблица 2
Влияние высушенной измельченной надземной и подземной части альфредии снежной Alfredia nivea Kar. et Kir. и ее экстрактов на показатели поведения крыс в конфликтной ситуации в сравнении с экстрактом корня шлемника байкальского в условных единицах ( n=8) Группа наблюдения Двигательная активность Время замирания Количество подходов к поилке Количество наказуемых взятий воды Контроль 64±12 297±42 7,8±1,7 97±10 ПАС 158±9*# 83±11* 10,6±0,5 187±14* Водный ЭАС 169±10*# 84±12* 11,2±0,8 163±15* ЭАС на 25% этаноле 173±13*# 67±12* 11,6±0,6 189±13* ЭАС на 40% этаноле 176±16*# 80±11* 11,7±0,8 177±11* ЭАС на 70% этаноле 182±11*# 73±13* 12,3±1,0 182±12* ЭАС на 95% этаноле 181±8*# 77±12* 12,5±1,0 194±13* Прототип 107±11* 103±11* 11,5±1,0 217±11* Примечание: * - различия достоверны в отношении контроля; # - различия достоверны по отношению к группе, получавшей прототип; достоверность различий оценивали при р≤0,05.

Изобретение относится к медицине, конкретно к клинической фармакологии, и может быть использовано для фармакологической коррекции заболеваний ЦНС, и касается лекарственных средств, обладающих анксиолитическим действием, получаемых из растительного сырья. Предложено применение высушенных измельченных надземной и подземной частей видов рода альфредия (Alfredia) или их водных или водно-этанольных экстрактов в качестве средства, обладающего анксиолитическим действием. Данное средство оказывает большую эффективность снятия депрессии поведения, вызванное конфликтной ситуацией, по сравнению с применением экстракта шлемника байкальского. 2 табл.

Применение высушенных измельченных надземной и подземной частей видов рода альфредия (Alfredia) или их водных или водно-этанольных экстрактов в качестве средства, обладающего анксиолитическим действием.