Изобретение относится к области садоводства и может быть использовано для микроразмножения растений лилий in vitro.
Известен способ размножения лилий in vitro (Мазур A.M., Калашникова Е.А. Клональное микроразмножение ценных гибридов лилий // Сельскохозяйственная биотехнология. Избранные работы / Под ред. В. С.Шевелухи. - М.: Евразия, 2000. - 264 с.). В качестве первичного экспланта использовали чешуйки луковиц, которые стерилизовали 0,1%-ным раствором сулемы (HgCl2) в течение 10 минут, высаживали на среду Мурасиге и Скуга, дополненную сахарозой 20-60 г/л и регуляторами роста 1,5 мг/л 6-бензиламинопурина и 1,5 мг/л α-нафтилуксусной кислоты, и культивировали в световой комнате при температуре 25±1°С, 24-часовом освещении белыми люминесцентными лампами с интенсивностью света 3000 лк. Процесс ризогенеза индуцировали добавлением в питательную среду α-нафтилуксусной кислоты в концентрации от 0,2 мг/л до 0,5 мг/л.
Недостатком данного способа является невысокий коэффициент размножения.
Технический результат заключается в повышении выхода размножаемого материала за счет увеличения количества образующихся микролуковиц при положительном влиянии оптимальных концентраций регуляторов роста.
Технический результат достигается тем, что в способе размножения лилий in vitro, включающем отделение эксплантов, стерилизацию, посадку на питательную среду Мурасиге-Скуга, отделение микролуковиц от эксплантов, их укоренение на питательной среде Мурасиге-Скуга, перед стерилизацией экспланты обрабатывают раствором препарата эпибрассинолид в концентрации 0,1 мг/л и времени экспозиции 1 ч, экспланты высаживают на агаризованную питательную среду Мурасиге-Скуга с содержанием регуляторов роста 1,5 мг/л 6-бензиламинопурина и 0,5 мг/л индолилуксусной кислоты, затем микролуковицы отделяют от эксплантов и укореняют на агаризованной питательной среде Мурасиге-Скуга с добавлением 10-11 моль/л тидиазурона и 0,5 мг/л α-нафтилуксусной кислоты в темноте при температуре 14°С.
Способ осуществляют следующим образом.
Из луковицы лилии отделяют внутренние (сочные) чешуи, которые используют в качестве эксплантов, замачивают их в растворе препарата эпибрассинолид в концентрации 0,1 мг/л и времени экспозиции 1 ч. Длительность обработки и концентрация препарата эпибрассинолид подобраны на основании предварительных экспериментов (табл.1).
После этого чешуи стерилизуют и в стерильных условиях высаживают в пробирки на питательную среду Мурасиге-Скуга, содержащую 7,0 г/л агара, 60 г/л сахарозы и регуляторы роста - 1,5 мг/л 6-бензиламинопурина и 0,5 мг/л индолилуксусной кислоты. Состав среды, использованный при культивировании чешуи луковиц, является стандартным для микроразмножения растений в культуре in vitro, за исключением подобранных в предварительных опытах концентраций сахарозы (табл.2) и регуляторов роста (табл.3). Культивирование осуществляют при постоянном освещении люминесцентными лампами с интенсивностью около 3000 лк и при температуре 25°С (физические условия выращивания близки к оптимальным для культивировании эксплантов растений).
При выращивании эксплантов на агаризованной питательной среде Мурасиге-Скуга с добавлением сочетания 1,5 мг/л 6-бензиламинопурина и 0,5 мг/л индолилуксусной кислоты в течение 4 недель культивирования образуется максимальное число микролуковиц - 8 штук/эксплант (табл.3).
В последующем микролуковицы отделяют от чешуй и пересаживают на питательную среду для укоренения. Укоренение проводят на агаризованной питательной среде Мурасиге-Скуга, дополненной 10-11 моль/л тидиазурона и 0,5 мг/л α-нафтилуксусной кислоты в темноте при температуре 14°С. Эти условия были выбраны как наиболее способствующие укоренению пробирочных растений лилий (табл.4, 5). После укоренения размноженные растения переносят в почву и выращивают обычным способом.
В результате использования предложенного способа повышается выход размножаемого материала (8 штук/эксплант) за счет увеличения количества образующихся микролуковиц при положительном влиянии предобработки чешуй лилий препаратом эпибрассинолид с последующим их культивированием на питательной среде в присутствии сочетания регуляторов роста 1,5 мг/л 6-бензиламинопурина и 0,5 мг/л индоуксусной кислоты. Культивирование микролуковиц на агаризованной питательной среде Мурасиге-Скуга, дополненной 10-11 моль/л тидиазурона и 0,5 мг/л α-нафтилуксусной кислоты, в темноте при температуре 14°С приводит к 100% укоренению и высокой жизнеспособности растений - регенерантов при последующей высадке в почву.
название | год | авторы | номер документа |
---|---|---|---|
СПОСОБ РАЗМНОЖЕНИЯ РАСТЕНИЙ ФРИТИЛЛЯРИЙ МЕТОДОМ КУЛЬТУРЫ in vitro | 2014 |
|
RU2584581C2 |
СПОСОБ РАЗМНОЖЕНИЯ ЦИМБИДИУМА in vitro | 2012 |
|
RU2523604C2 |
ПИТАТЕЛЬНАЯ СРЕДА ДЛЯ КЛОНАЛЬНОГО МИКРОРАЗМНОЖЕНИЯ ЛИЛИЙ (LILIUM L.) В УСЛОВИЯХ IN VITRO | 2021 |
|
RU2760493C1 |
СПОСОБ РАЗМНОЖЕНИЯ ГЛАДИОЛУСА IN VITRO | 2005 |
|
RU2286053C2 |
СПОСОБ РАЗМНОЖЕНИЯ ГВОЗДИКИ IN VITRO | 2014 |
|
RU2553545C1 |
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ МИКРОЛУКОВИЦ ТЮЛЬПАНОВ ИЗ ИЗОЛИРОВАННЫХ ЗАРОДЫШЕЙ В УСЛОВИЯХ IN VITRO | 1996 |
|
RU2123256C1 |
СПОСОБ РАЗМНОЖЕНИЯ ПЕПЕРОМИИ in vitro | 2014 |
|
RU2564123C1 |
Способ клонального микроразмножения гибридов карельской березы | 1990 |
|
SU1752284A1 |
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПОЛНОЦЕННЫХ РАСТЕНИЙ-РЕГЕНЕРАНТОВ ТЮЛЬПАНОВ КУЛЬТИВИРОВАНИЕМ СЕМЯПОЧЕК IN VITRO | 2004 |
|
RU2273987C2 |
Способ получения микрорастений лекарственного растения Stephania glabra (Roxb.) Miers | 2021 |
|
RU2757318C1 |
Изобретение относится к области садоводства. В способе отделяют экспланты, обрабатывают их раствором препарата эпибрассинолид в концентрации 0,1 мг/л и времени экспозиции 1 ч, подвергают их стерилизации. Затем высаживают экспланты на агаризованную питательную среду Мурасиге-Скуга с содержанием регуляторов роста 1,5 мг/л 6-бензиламинопурина и 0,5 мг/л индолилуксусной кислоты. Затем отделяют микролуковицы от эксплантов и укореняют на питательной среде Мурасиге-Скуга с добавлением 10-11 моль/л тидиазурона и 0,5 мг/л α-нафтилуксусной кислоты в темноте при температуре 14°С. Изобретение позволяет повысить выход размножаемого материала за счет увеличения количества образующихся микролуковиц при положительном влиянии оптимальных концентраций регуляторов роста. 5 табл.
Способ размножения лилий in vitro, включающий отделение эксплантов, стерилизацию, посадку на питательную среду Мурасиге-Скуга, отделение микролуковиц от эксплантов, их укоренение на питательной среде Мурасиге-Скуга, отличающийся тем, что перед стерилизацией экспланты обрабатывают раствором препарата эпибрассинолид в концентрации 0,1 мг/л и времени экспозиции 1 ч, экспланты высаживают на агаризованную питательную среду Мурасиге-Скуга с содержанием регуляторов роста 1,5 мг/л 6-бензиламинопурина и 0,5 мг/л индолилуксусной кислоты, затем микролуковицы отделяют от эксплантов и укореняют на агаризованной питательной среде Мурасиге-Скуга с добавлением 10-11 моль/л тидиазурона и 0,5 мг/л α-нафтилуксусной кислоты в темноте при температуре 14°С.
МАЗУР A.M., КАЛАШНИКОВА Е.А | |||
Клональное микроразмножение ценных гибридов лилий // Сельскохозяйственная биология | |||
/Под ред | |||
В.С.Шевелухи, т.1, Воскресенье.- М., 2000, с.99-105 | |||
СТИМУЛЯТОР РОСТА И РАЗВИТИЯ РАСТЕНИЙ | 2005 |
|
RU2307506C2 |
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ТРАНСГЕННЫХ РАСТЕНИЙ С ПОВЫШЕННОЙ УСТОЙЧИВОСТЬЮ К ФИТОПАТОГЕНАМ | 2002 |
|
RU2261275C2 |
TOMITA M., CHONO H., TSUTSUI К | |||
Interspecific differences in the effects of medium conditions on organogenesis in the |
Авторы
Даты
2010-03-20—Публикация
2008-12-08—Подача