СПОСОБ РАЗМНОЖЕНИЯ ЛИЛИЙ IN VITRO Российский патент 2010 года по МПК A01H4/00 A01G7/00 

Описание патента на изобретение RU2384050C1

Изобретение относится к области садоводства и может быть использовано для микроразмножения растений лилий in vitro.

Известен способ размножения лилий in vitro (Мазур A.M., Калашникова Е.А. Клональное микроразмножение ценных гибридов лилий // Сельскохозяйственная биотехнология. Избранные работы / Под ред. В. С.Шевелухи. - М.: Евразия, 2000. - 264 с.). В качестве первичного экспланта использовали чешуйки луковиц, которые стерилизовали 0,1%-ным раствором сулемы (HgCl2) в течение 10 минут, высаживали на среду Мурасиге и Скуга, дополненную сахарозой 20-60 г/л и регуляторами роста 1,5 мг/л 6-бензиламинопурина и 1,5 мг/л α-нафтилуксусной кислоты, и культивировали в световой комнате при температуре 25±1°С, 24-часовом освещении белыми люминесцентными лампами с интенсивностью света 3000 лк. Процесс ризогенеза индуцировали добавлением в питательную среду α-нафтилуксусной кислоты в концентрации от 0,2 мг/л до 0,5 мг/л.

Недостатком данного способа является невысокий коэффициент размножения.

Технический результат заключается в повышении выхода размножаемого материала за счет увеличения количества образующихся микролуковиц при положительном влиянии оптимальных концентраций регуляторов роста.

Технический результат достигается тем, что в способе размножения лилий in vitro, включающем отделение эксплантов, стерилизацию, посадку на питательную среду Мурасиге-Скуга, отделение микролуковиц от эксплантов, их укоренение на питательной среде Мурасиге-Скуга, перед стерилизацией экспланты обрабатывают раствором препарата эпибрассинолид в концентрации 0,1 мг/л и времени экспозиции 1 ч, экспланты высаживают на агаризованную питательную среду Мурасиге-Скуга с содержанием регуляторов роста 1,5 мг/л 6-бензиламинопурина и 0,5 мг/л индолилуксусной кислоты, затем микролуковицы отделяют от эксплантов и укореняют на агаризованной питательной среде Мурасиге-Скуга с добавлением 10-11 моль/л тидиазурона и 0,5 мг/л α-нафтилуксусной кислоты в темноте при температуре 14°С.

Способ осуществляют следующим образом.

Из луковицы лилии отделяют внутренние (сочные) чешуи, которые используют в качестве эксплантов, замачивают их в растворе препарата эпибрассинолид в концентрации 0,1 мг/л и времени экспозиции 1 ч. Длительность обработки и концентрация препарата эпибрассинолид подобраны на основании предварительных экспериментов (табл.1).

После этого чешуи стерилизуют и в стерильных условиях высаживают в пробирки на питательную среду Мурасиге-Скуга, содержащую 7,0 г/л агара, 60 г/л сахарозы и регуляторы роста - 1,5 мг/л 6-бензиламинопурина и 0,5 мг/л индолилуксусной кислоты. Состав среды, использованный при культивировании чешуи луковиц, является стандартным для микроразмножения растений в культуре in vitro, за исключением подобранных в предварительных опытах концентраций сахарозы (табл.2) и регуляторов роста (табл.3). Культивирование осуществляют при постоянном освещении люминесцентными лампами с интенсивностью около 3000 лк и при температуре 25°С (физические условия выращивания близки к оптимальным для культивировании эксплантов растений).

Таблица 2 Концентрация сахарозы, г/л Микролуковицы, штук/эксплант 10 1,6 20 1,8 30 2,4 40 2,5 50 2,6 60 2,9 70 2,7

При выращивании эксплантов на агаризованной питательной среде Мурасиге-Скуга с добавлением сочетания 1,5 мг/л 6-бензиламинопурина и 0,5 мг/л индолилуксусной кислоты в течение 4 недель культивирования образуется максимальное число микролуковиц - 8 штук/эксплант (табл.3).

В последующем микролуковицы отделяют от чешуй и пересаживают на питательную среду для укоренения. Укоренение проводят на агаризованной питательной среде Мурасиге-Скуга, дополненной 10-11 моль/л тидиазурона и 0,5 мг/л α-нафтилуксусной кислоты в темноте при температуре 14°С. Эти условия были выбраны как наиболее способствующие укоренению пробирочных растений лилий (табл.4, 5). После укоренения размноженные растения переносят в почву и выращивают обычным способом.

Таблица 5 Длина светового дня, ч Процент укоренения 24 53,1±2,8 16 84,4±3,1 0 100±0,0 Температура, °С Процент укоренения 14 100±0,0 23 65,1±1,6

В результате использования предложенного способа повышается выход размножаемого материала (8 штук/эксплант) за счет увеличения количества образующихся микролуковиц при положительном влиянии предобработки чешуй лилий препаратом эпибрассинолид с последующим их культивированием на питательной среде в присутствии сочетания регуляторов роста 1,5 мг/л 6-бензиламинопурина и 0,5 мг/л индоуксусной кислоты. Культивирование микролуковиц на агаризованной питательной среде Мурасиге-Скуга, дополненной 10-11 моль/л тидиазурона и 0,5 мг/л α-нафтилуксусной кислоты, в темноте при температуре 14°С приводит к 100% укоренению и высокой жизнеспособности растений - регенерантов при последующей высадке в почву.

Похожие патенты RU2384050C1

название год авторы номер документа
СПОСОБ РАЗМНОЖЕНИЯ РАСТЕНИЙ ФРИТИЛЛЯРИЙ МЕТОДОМ КУЛЬТУРЫ in vitro 2014
  • Эрст Анна Алексеевна
  • Кульханова Динара Серыкбаевна
RU2584581C2
СПОСОБ РАЗМНОЖЕНИЯ ЦИМБИДИУМА in vitro 2012
  • Мокшин Евгений Владимирович
  • Лукаткин Александр Степанович
  • Вельмяйкин Иван Николаевич
RU2523604C2
ПИТАТЕЛЬНАЯ СРЕДА ДЛЯ КЛОНАЛЬНОГО МИКРОРАЗМНОЖЕНИЯ ЛИЛИЙ (LILIUM L.) В УСЛОВИЯХ IN VITRO 2021
  • Пугачева Галина Михайловна
  • Тремко Никита Васильевич
RU2760493C1
СПОСОБ РАЗМНОЖЕНИЯ ГЛАДИОЛУСА IN VITRO 2005
  • Мокшин Евгений Владимирович
  • Лукаткин Александр Степанович
RU2286053C2
СПОСОБ РАЗМНОЖЕНИЯ ГВОЗДИКИ IN VITRO 2014
  • Мокшин Евгений Владимирович
  • Лукаткин Александр Степанович
  • Дудкин Евгений Александрович
RU2553545C1
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ МИКРОЛУКОВИЦ ТЮЛЬПАНОВ ИЗ ИЗОЛИРОВАННЫХ ЗАРОДЫШЕЙ В УСЛОВИЯХ IN VITRO 1996
  • Коломиец Т.М.
  • Мохно В.С.
RU2123256C1
СПОСОБ РАЗМНОЖЕНИЯ ПЕПЕРОМИИ in vitro 2014
  • Мокшин Евгений Владимирович
  • Лукаткин Александр Степанович
  • Дудкин Евгений Александрович
RU2564123C1
Способ клонального микроразмножения гибридов карельской березы 1990
  • Байбурина Римма Кашаповна
  • Старова Наталья Владимировна
  • Ермаков Владимир Иванович
SU1752284A1
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПОЛНОЦЕННЫХ РАСТЕНИЙ-РЕГЕНЕРАНТОВ ТЮЛЬПАНОВ КУЛЬТИВИРОВАНИЕМ СЕМЯПОЧЕК IN VITRO 2004
  • Коломиец Татьяна Михайловна
  • Мохно Валентина Сергеевна
RU2273987C2
Способ получения микрорастений лекарственного растения Stephania glabra (Roxb.) Miers 2021
  • Горпенченко Татьяна Юрьевна
  • Верещагина Юлия Витальевна
  • Чернодед Галина Кирилловна
RU2757318C1

Реферат патента 2010 года СПОСОБ РАЗМНОЖЕНИЯ ЛИЛИЙ IN VITRO

Изобретение относится к области садоводства. В способе отделяют экспланты, обрабатывают их раствором препарата эпибрассинолид в концентрации 0,1 мг/л и времени экспозиции 1 ч, подвергают их стерилизации. Затем высаживают экспланты на агаризованную питательную среду Мурасиге-Скуга с содержанием регуляторов роста 1,5 мг/л 6-бензиламинопурина и 0,5 мг/л индолилуксусной кислоты. Затем отделяют микролуковицы от эксплантов и укореняют на питательной среде Мурасиге-Скуга с добавлением 10-11 моль/л тидиазурона и 0,5 мг/л α-нафтилуксусной кислоты в темноте при температуре 14°С. Изобретение позволяет повысить выход размножаемого материала за счет увеличения количества образующихся микролуковиц при положительном влиянии оптимальных концентраций регуляторов роста. 5 табл.

Формула изобретения RU 2 384 050 C1

Способ размножения лилий in vitro, включающий отделение эксплантов, стерилизацию, посадку на питательную среду Мурасиге-Скуга, отделение микролуковиц от эксплантов, их укоренение на питательной среде Мурасиге-Скуга, отличающийся тем, что перед стерилизацией экспланты обрабатывают раствором препарата эпибрассинолид в концентрации 0,1 мг/л и времени экспозиции 1 ч, экспланты высаживают на агаризованную питательную среду Мурасиге-Скуга с содержанием регуляторов роста 1,5 мг/л 6-бензиламинопурина и 0,5 мг/л индолилуксусной кислоты, затем микролуковицы отделяют от эксплантов и укореняют на агаризованной питательной среде Мурасиге-Скуга с добавлением 10-11 моль/л тидиазурона и 0,5 мг/л α-нафтилуксусной кислоты в темноте при температуре 14°С.

Документы, цитированные в отчете о поиске Патент 2010 года RU2384050C1

МАЗУР A.M., КАЛАШНИКОВА Е.А
Клональное микроразмножение ценных гибридов лилий // Сельскохозяйственная биология
/Под ред
В.С.Шевелухи, т.1, Воскресенье.- М., 2000, с.99-105
СТИМУЛЯТОР РОСТА И РАЗВИТИЯ РАСТЕНИЙ 2005
  • Тюрин Сергей Ананьевич
  • Грицевич Юлий Григорьевич
  • Дебабов Владимир Георгиевич
RU2307506C2
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ТРАНСГЕННЫХ РАСТЕНИЙ С ПОВЫШЕННОЙ УСТОЙЧИВОСТЬЮ К ФИТОПАТОГЕНАМ 2002
  • Шестибратов К.А.
  • Долгов С.В.
RU2261275C2
TOMITA M., CHONO H., TSUTSUI К
Interspecific differences in the effects of medium conditions on organogenesis in the

RU 2 384 050 C1

Авторы

Мокшин Евгений Владимирович

Лукаткин Александр Степанович

Даты

2010-03-20Публикация

2008-12-08Подача