СРЕДСТВО, ОБЛАДАЮЩЕЕ АНКСИОЛИТИЧЕСКИМ ДЕЙСТВИЕМ Российский патент 2010 года по МПК A61K36/73 A61P25/00 

Изобретение относится к медицине, а именно к клинической фармакологии, и касается анксиолитических средств, используемых для коррекции страха, тревоги, участвующих в патогенезе многих психоэмоциональных расстройств.

Несмотря на значительный набор противотревожных средств, в современной медицине поиск мощных анксиолитиков, не обладающих побочными эффектами для лечения патологической тревоги, остается актуальным.

Известно использование в качестве анксиолитиков различных синтетических средств, преимущественно бензодиазепинового ряда (феназепам, хлозепид, диазепам), нашедших широкое применение в клинической практике [1]. Однако они характеризуются большим числом побочных эффектов: седативное действие, миорелаксация, снотворное действие, нарушение внимания, памяти, феномен отмены.

Препараты растительного происхождения (корень валерианы и др.) широко применяются в амбулаторной практике, особенно при относительно легких невротических состояниях [1, 2]. Они не вызывают миорелаксации, атаксии, сонливости, явлений психической и физической зависимости, однако обладают менее выраженным успокаивающим и антифобическим эффектами по сравнению с синтетическими анксиолитиками.

Наиболее близким к предлагаемому решению является настойка корня валерианы Tinctura Valerianae, обладающая успокаивающим, противоневротическим действием (прототип) [3].

Задачей данного изобретения является расширение арсенала анксиолитических средств природного происхождения, обладающих выраженным противотревожным действием.

Поставленную задачу решают путем использования водного экстракта надземной части лабазника обыкновенного (Filipendula vulgaris) в качестве анксиолитического средства, не дающего побочных эффектов.

Новым является то, что впервые в качестве средства, обладающего анксиолитическим действием, используют водный экстракт надземной части лабазника обыкновенного (Filipendula vulgaris).

Лабазник обыкновенный (Filipendula vulgaris) - многолетнее растение с прямостоячими, слабо облиственными стеблями, 50-80 см высотой семейства Rosaceae. Надземная часть лабазника обыкновенного содержит следующие группы биологически активных веществ: простые фенолы, флавоноиды (лютеолин, апигенин, кверцетин, дигидрокверцетин, авикулярин, изокверцитрин), кумарины (кумарин, умбеллиферон), фенолкарбоновые кислоты (галловая, гентизиновая), дубильные вещества гидролизуемой группы, тритерпеновые сапонины, полисахариды (состоящие из D-глюкозы, D-галактозы и D-глюкуроновой кислоты), каротиноиды, аминокислоты и макро- и микроэлементы.

В проведенных ранее исследованиях показано, что водный экстракт надземной части лабазника обыкновенного (Filipendula vulgaris) обладает антиоксидантным действием, проявляет себя как ноотропное средство, обладающее антигипоксической активностью [4, 5]. В народной медицине лабазник обыкновенный (Filipendula vulgaris) используют как мочегонное и потогонное средство, а также в качестве обезболивающего, антисептического и противовоспалительного средства [2, 3]. В литературе отсутствуют данные о применении надземной части лабазника обыкновенного (Filipendula vulgaris) в качестве средства, обладающего анксиолитическим действием.

Использование водного экстракта надземной части лабазника обыкновенного (Filipendula vulgaris) в качестве анксиолитического средства стало возможным благодаря выявлению экспериментально его новых свойств, а именно способности снижать тревогу у животных в экспериментальных условиях.

Новое свойство обнаружено в результате проведенного экспериментального изучения анксиолитического действия водного экстракта надземной части лабазника обыкновенного (Filipendula vulgaris).

Фармакологические исследования выполняли на белых беспородных крысах-самцах массой 200-250 грамм и белых беспородных мышах-самцах массой 25-30 грамм. Все животные 1 категории (конвенциональные линейные) получены из коллекционного фонда лаборатории экспериментального биомоделирования ГУ НИИ фармакологии Томского научного центра СО РАМН. Эксперименты проводили в осенне-зимний период. Работы в рамках экспериментальных методик выполняли с 10 ч утра и заканчивали к 15 ч. Животных содержали в виварии на обычном рационе кормления при свободном доступе к воде и пище (за исключением тех случаев, где иные условия оговариваются особо). Умерщвление животных осуществляли передозировкой эфирного наркоза.

Фармакологические эффекты водного экстракта надземной части лабазника обыкновенного (Filipendula vulgaris) оценивали по влиянию на поведение животных в условиях моделей «конфликтная ситуация» и «выработка и воспроизведение условного рефлекса пассивного избегания».

Отличительные признаки проявили в заявленной совокупности новые свойства, явным образом не вытекающие из уровня техники в данной области и неочевидные для специалиста. Впервые установлено, что в качестве средства, обладающего анксиолитическим действием, можно использовать водный экстракт надземной части лабазника обыкновенного (Filipendula vulgaris).

Идентичной совокупности признаков не обнаружено в патентной и научно-медицинской литературе.

Исходя из вышеизложенного, следует считать предлагаемое изобретение соответствующим условиям патентоспособности «Новизна», «Изобретательский уровень», «Промышленная применимость».

Изобретение будет понятно из следующего описания.

Пример 1. Поведение в конфликтной ситуации является одной из наиболее распространенных моделей невроза. Она позволяет с достаточной достоверностью предсказать противотревожные свойства экстракта [6]. Исследование проводили на белых беспородных крысах-самцах массой 200-250 грамм, I категории, полученных из коллекционного фонда лаборатории экспериментального биомоделирования НИИ фармакологии ТНЦ СО РАМН (сертификат имеется). Конфликтная ситуация моделировалась путем столкновения двух рефлексов: питьевого условного рефлекса и безусловного рефлекса избегания электроболевого раздражения [7]. Для этого животных предварительно оставляли на двое суток без воды, затем в течение 4-х суток на 20 минут ежедневно помещали в пластиковую камеру размерами 30×40×20 см, в одной из торцевых стенок которой была устроена ниша с поилкой, где крыса могла напиться. Препараты вводили, начиная с первого дня обучения, в желудок за 1 час до помещения в камеру, контрольным животным вводили воду. В день регистрации результатов через 1 час после очередного введения препарата крыс снова помещали в камеру и между металлическим полом камеры и электродом, опущенным в поилку, создавалась разность потенциалов так, что при попытке взятия воды животное получало удар током. Силу тока регулировали таким образом, чтобы она имела надпороговое значение, увеличивая ее при первом пробном тестировании на трех пробных животных до первых реакций избегания боли при касании языком воды. Количество взятий воды и количество подходов к поилке регистрировали визуально. Об анксиолитической активности препарата судили по разнице в числе взятий воды, несмотря на удар током (наказуемое взятие воды), в контрольной и опытных группах. Дополнительными показателями, характеризующими условно-рефлекторную, эмоциональную и смещенную активность, служили число подходов к поилке, горизонтальные перемещения по камере, груминг, число вертикальных стоек. Каждое животное наблюдали индивидуально в течение 20 минут.

Полученные экспериментальные данные обрабатывали статистически. О достоверности различий судили методом проверки вероятности нулевой гипотезы с использованием t критерия Стьюдента. Различия считали достоверными при р≤0,05 [10].

Препаратом сравнения служил синтетический анксиолитик феназепам.

Проведенное исследование (таблица 1) показало, что использование водного экстракта надземной части лабазника обыкновенного (Filipendula vulgaris) способствует увеличению числа наказуемых взятий воды и уменьшению фризинговых реакций. Использование настойки корня валерианы (Tinctura Valerianae) значительно менее повышало число наказуемых взятий воды, не снижая при этом двигательную активность животных. Применение феназепама увеличивало число наказуемых взятий воды, однако заметно снижало и двигательную активность. Данный факт указывает на наибольшую в условиях приведенного эксперимента эффективность снятия депрессии поведения, при применении водного экстракта надземной части лабазника обыкновенного (Filipendula vulgaris).

Пример 2. Методика условного рефлекса пассивного избегания (УРПИ) основана на подавлении врожденного рефлекса предпочтения темного пространства, имеющегося у грызунов [8, 9]. Исследование выполнялось на белых беспородных мышах-самцах массой 25-30 грамм, I категории, полученных из коллекционного фонда лаборатории экспериментального биомоделирования НИИ фармакологии ТНЦ СО РАМН (сертификат имеется). Экспериментальная установка представляла собой камеру, состоящую из двух отсеков: большого - освещенного и малого - темного. Животное помещалось в светлый отсек и вскоре (через 10-30 секунд), в силу врожденного рефлекса предпочтения темного пространства, переходило в малый отсек, после чего дверка, соединяющая оба отсека, перекрывалась и на пол темного отсека, состоящего из параллельных чередующихся электродов, подавали электрический ток импульсами продолжительностью 50 мс, частотой 5 Гц и амплитудой 50 мА. Через 10 секунд дверку открывали, и животное могло выскочить в светлый отсек с обычным полом. В результате описанной процедуры у животных вырабатывался условный рефлекс избегания темного пространства. При проверке воспроизводимости рефлекса животных помещали в светлый отсек в угол, противоположный от входа в темный отсек, и наблюдали в течение 3-х минут. Регистрировали время первого захода в темный отсек (латентное время), суммарное время пребывания в темном отсеке. Рефлекс считался выработанным, если в течение 3-х минут наблюдения животное ни разу не посетило темный отсек или латентное время захода превышало 150 с. О качестве рефлекса судили по доле животных с наличием рефлекса (% сохранности рефлекса). Дополнительными показателями, характеризующими условно-рефлекторную деятельность и поведенческий статус, служили количество подходов к входу в темную камеру, количество заходов в темную камеру, время первого подхода к входу в темную камеру, суммарная двигательная активность, которая включала в себя: горизонтальные перемещения, количество вертикальных стоек, эпизодов груминга и число болюсов дефекаций. Животные, которые после помещения в светлый отсек сохраняли неподвижность при подсчете результатов, не учитывались. Проверку рефлекса осуществляли через 48 часов после выработки, 7 и 14 суток после нее. В дни проверки сохранности рефлекса животным вводили препарат, чтобы исключить влияние феномена диссоциации.

Полученные в эксперименте результаты представлены в таблицах 2-5. Анксиолитическое действие водного экстракта надземной части лабазника обыкновенного (Filipendula vulgaris) наиболее выражено при оценке% сохранности рефлекса (табл.5). Уже через 48 часов этот показатель в группе, получавшей водный экстракт надземной части лабазника обыкновенного (Filipendula vulgaris), составил только 36%, дойдя до значения 0% на 14 день. Феназепам и настойка корня валерианы (Tinctura Valerianae) также снижали % сохранности рефлекса в динамике, но меньше чем водный экстракт надземной части лабазника обыкновенного (Filipendula vulgaris). Время пребывания в темной камере у мышей, получавших водный экстракт надземной части лабазника обыкновенного (Filipendula vulgaris) также заметно выше, чем в других группах (табл.2-4).

Обладая анксиолитическим действием, водный экстракт надземной части лабазника обыкновенного (Filipendula vulgaris) не снижает двигательную активность мышей, в отличие от феназепама. Показатели, характеризующие двигательную активность у мышей, получавших водный экстракт надземной части лабазника обыкновенного (Filipendula vulgaris) сохранялись достаточно высокими во все дни проверок сохранности рефлекса.

Как показывают экспериментальные исследования, водный экстракт надземной части лабазника обыкновенного (Filipendula vulgaris) обладает более выраженным анксиолитическим действием по сравнению с настойкой корня валерианы, что приведет к более высокому эффекту в клинической практике.

Положительный эффект достигнут благодаря использованию водного экстракта надземной части лабазника обыкновенного (Filipendula vulgaris) в качестве анксиолитического средства, что позволило расширить арсенал средств растительного происхождения, обладающих анксиолитическим действием, с повышенным специфическим действием.

Таблица 1. Сравнение анксиолитической активности суммарного экстракта лабазника обыкновенного (50 мг/кг) и настойки корня валерианы лекарственной (50 мг/кг) на поведение животных в конфликт-камере, препарат сравнения - феназепам (1 мг/кг).   Количество подходов Число взятий Горизонтальные перемещения Вертикальные стойки Число эпизодов груминга Число болюсов дефекаций Суммарная двигательная
активность Интактный контроль 5,3±0,83 151,2±38,6 37,2±5,48 14,8±1,5 12,4±1,69 1,0±0,73 65,4±6,14 Лабазник 5,5±0,43 350,11±34,28 33,6±3,71 15,1±2,64 12,3±1,73 0,5±0,4 61,5±6,13 обыкновенный + *   +     + Настойка корня валерианы 4,9±0,24
+ 198,6±29,11 34,4±2,9 12,7±1,92 10,3±2,0 0,8±0,3 58,2±5,32
+ Феназепам 3,6±0,54 351,9±38,66 22,2±3,99 8,0±1,74 9,1±1,57 0,6±0,6 39,9±5,91     * * *     * * - отличия достоверны по сравнению с интактным контролем, + - отличия достоверны по сравнению с феназепамом.

Таблица 5. Процент сохранности рефлекса УРПИ при действии суммарного экстракта лабазника обыкновенного (50 мг/кг) и настойки корня валерианы лекарственной (50 мг/кг), препарат сравнения - феназепат (1 мг/кг).   % сохранности рефлекса 48 часов % сохранности рефлекса 7 дней % сохранности рефлекса 14 дней Интактный контроль 90 80 60 Лабазник обыкновенный 36 18 0 Настойка корня валерианы 80 70 60 Феназепам 70 75 50 * - отличия достоверны по сравнению с интактным контролем, + - отличия достоверны по сравнению с феназепамом.

Литература

1. Машковский М.Д. Лекарственные средства. М.: Медицина, 1986, Т.1, с.36-47.

2. Кьосев П.А. Полный справочник лекарственных растений. - М.: Эксмо, 2007. - 992 с.

3. Васильев А.С., Калинкина Г.И., Тихонов В.Н. Лекарственные средства растительного происхождения: под ред. проф. С.Е.Дмитрука // Справочное пособие. Томск. - 2004. с.18.

4. Патент RU 2314115 С1, 10.01.2008. Ноотропное средство, обладающее антигипоксической активностью.

5. Патент RU 2325179 С1, 27.05.2008. Средство, обладающее антиоксидантным действием.

6. Вихляев Ю.И., Воронина Т.А., Гарибова Т.Л. и др. Феназепам. - Киев: Наукова Думка, 1982. - 452 с.

7. Клыгуль Т.А., Кривопалов В.А. Установка с автоматической регистрацией поведения крыс для оценки малых транквилизаторов // Фармакология и токсикология. - 1966. - №2. - С.241-244.

8. Буреш Я., Бурешова О., Хьюстон Д.П. Методики и основные эксперименты по изучению мозга и поведения: под ред. А.С.Батуева. / Пер. с англ. Е.Н.Живописцевой. - М.: Высш. шк., 1991. - 399 с.

9. Воронина Т.А., Островская Р.У. Методические указания по изучению ноотропной активности фармакологических веществ // Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ. М. - 200. - С.153-158.

10. Беленький М.Л. Элементы количественной оценки фармакологического эффекта. - Л.: Медицина, 1963. - С.81-147.

Изобретение относится к химико-фармацевтической промышленности, а именно к созданию средства, обладающего анксиолитическим действием, содержащее водный экстракт надземной части лабазника обыкновенного (Filipendula vulgaris). Средство расширяет арсенал средств растительного происхождения, обладающих анксиолитическим действием. 5 табл.

Применение водного экстракта надземной части лабазника обыкновенного (Filipendula vulgaris) в качестве средства, обладающего анксиолитическим действием.