2-(1-(2-(2-ХЛОР-10Н-ФЕНОТИАЗИН-10-ИЛ)-2-ОКСОЭТИЛ)-5-МЕТИЛ-1Н-1,2,4-ТРИАЗОЛ-3-ИЛ)ФЕНОЛ, ОБЛАДАЮЩИЙ ГИПОТЕНЗИВНЫМ И АНТИАРИТМИЧЕСКИМ ДЕЙСТВИЕМ Российский патент 2010 года по МПК C07D417/12 A61P9/06 A61P9/12 

Изобретение относится к новым производным в ряду фенотиазина, а именно к 2-(1-(2-(2-хлор-10H-фенотиазин-10-ил)-2-оксоэтил)-5-метил-1H-1,2,4-триазол-3-ил)фенолу формула I:

обладающим гипотензивным и антиаритмическим действиями при внутрибрюшинном введении вещества.

Большинство лекарственных веществ фенотиазинового ряда обладают нейролептическим, противогистаминным (дипразин), холинолитическим (динезин), седативным, противорвотным (тиэтилперазин), антиаритмическим (этмозин, этацизин) и коронарорасширяющим действием (нонахлазин) [1].

Известно, что производные фенотиазина проявляют высокую антиокислительную, антирадикальную, нейропротекторную и противоопухолевую активности [2], [3].

Наиболее близкими по структуре к соединению I является гидрохлорид 2-хлор-10-(3-диэтиламинопропионил)-фенотиазина (хлорацизин) II [4], обладающий коронарорасширяющим действием.

Техническим результатом изобретения является новое соединение в ряду фенотиазина, проявляющее гипотензивное и антиаритмическое действие, более эффективное, чем у известного антиаритмического препарата - этацизина.

Технический результат изобретения достигается соединением I - 2-(1-(2-(2-хлор-10H-фенотиазин-10-ил)-2-оксоэтил)-5-метил-1H-1,2,4-триазол-3-ил)фенолом, обладающим гипотензивным и антиаритмическим действием. В таблице 1 показано влияние соединения I и этацизина на уровень МЛЖД, ЧСС, + dP/dt, - dP/dt, dp/dt/PI, dp/dt/PD, КДД у нормотензивных бодрствующих крыс в процентах к исходному уровню в дозе 1 мг/кг, где p<0,05 по сравнению с исходными данными (по t - критерию Стьюдента для независимых рядов), n - количество животных в опыте. В таблице 2 и 3 приведена острая токсичность I и таблеток этацизина по 0,5 г соответственно (D - показатель разницы между количеством двух соседних доз, Z - показатель разницы между количеством погибших животных при использовании двух соседних доз).

Первая стадия синтеза вещества I заключается во взаимодействии перхлорта 2-метил-4-оксо-1,3-бензоксазиния III с гидразин-гидратом при нагревании в уксусной кислоте с образованием продукта IV. Реакция происходит путем рециклизации по ANRORC механизму [5] с первоначальной атакой аминогруппой второго положения оксазинового цикла.

Дальнейшее кипячение триазола IV в ацетоне в присутствии поташа с 2-хлор-10-(хлорацетил)-10H-фенотиазином V приводит к веществу I - вторая стадия:

Ниже приведены методики синтеза предлагаемого соединения.

Стадия 1. 2-(3-Метил-1H-1,2,4-триазол-5-ил)фенол IV. Получен при нагревании перхлората 2-метил-4-оксо-1,3-бензоксазиния с гидразин-гидратом в ледяной уксусной кислоте [5].

Стадия 2. 2-{1-[2-(2-Хлор-10H-фенотиазин-10-ил)-2-оксоэтил]-5-метил-1H-1,2,4-триазол-3-ил} фенол I. К раствору 1.75 г (10 ммоль) триазола IV в 15 мл ацетона прибавляют 5.52 г (40 ммоль) прокаленного поташа, кипятят 15 мин, охлаждают и прибавляют 3.1 г (10 ммоль) 2-хлор-10-(хлорацетил)-10H-фенотиазина V. Реакционную смесь кипятят 1.5 ч, разбавляют водой. Выделившийся бесцветный осадок отфильтровывают (3.59 г, 83%). Т. пл. 188-190°С.

Найдено, %: С 63,80; Н 3,40; Cl 8,50; N 12,60; S 7,10.

C₂₃H₁₇ClN₄OS.

Вычислено, %: С 63,82; Н 3,93; Cl 8,21; N 12,95; S 7,40.

ИК-спектр (вазелин, масло), см^-1: 1710 (С=O); 1600 (С=С).

Спектр ¹Н ЯМР (ацетон-d₆, J/Гц), δ, м.д: 2.50 (3Н, с, СН₃); 5.45 (2Н, Д_ушир, N-CH₂, J=5.3); 6.81-7.96 (11Н, м, аром. Н); 10.95(1Н, с, O-Н).

Спектр ¹³С ЯМР (ДМСО-d₆, J/Гц), δ, м.д: 11.24 (1C, к, СН₃, J=130.4), 50.38 (1C, т, СН₂, J=143.6), 113.74 (1C, т, C_ap, J=7.02), 116.70 (1C, м, C_ap), 119.21 (1C, м, C_ap), 126.05 (1С_ар, д, J=6.9), 126.81 (1C, м, C_ap), 126.96 (2C, д, C_ap, J=4.5), 127.46 (1C, м, C_ap), 127.76 (2C, м, C_ap), 128.17 (1C, д, C_ap, J=8.4), 129.14 (1C, м, C_ap), 130.65 (1C, д, C_ap, J=5.0), 131.22 (1C, д, C_ap, J=6.6), 131.85 (1C, д, C_ap, J=8.9), 136.65 (1C, д, C_ap, J=9.0), 138.34 (1C, с, C_ap), 153.75 (1C, м, С_триаз, ²J=7.2 Гц, ³J=2.7), 156.09 т (1C, т, С=O, J=7.6), 158.35 (1C, д, С_триаз, J=4.5), 164.61 (1C, т, C_ap, J=4.8).

Все скрининговые исследования проводились согласно Руководству по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ с определением LD₅₀ [6].

Эксперименты проведены в соответствии со статьей 11-й Хельсинкской декларации Всемирной медицинской ассоциации (1964), "Международными рекомендациями по проведению медико-биологических исследований с использованием животных" (1985) и Правилами лабораторной практики в Российской Федерации (приказ МЗ РФ №267 от 19.06.2003 г.).

Эксперимент начали с изучения влияния исследуемого соединения в разных дозах на кардиогемодинамику лабораторных животных: на артериальное давление и работу сердца нормотензивных бодрствующих крыс (В.П.Фисенко. // Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ. М., 2004. - С.220-224).

Острую токсичность исследовали [определяли среднюю летальную (смертельную) дозу - LD₅₀] в опытах на мышах при внутрибрюшинном введении вещества предварительно суспендированного с твин-80, определяли средние летальные дозы (LD₅₀) [7], [8], [9]. Рассчитывали острую токсичность, соблюдая рекомендации государственного фармакологического комитета по изучению общетоксического действия биологически активных веществ [10]. В качестве препаратов сравнения с сопоставляемым соединением I был взят этацизин. Вещество I, как и этацизин, оказывает мягкий гипотензивный эффект, существенно не влияя на частоту сердечных сокращений (ЧСС) бодрствующих нормотензивных белых беспородных крыс. Выявлено, что в дозе 1 мг/кг (1/3000 от LD₅₀) изученное соединение I достоверно увеличивает скорость расслабления сердечной мышцы, показатель сократимости увеличивается, конечно - диастолическое давление достоверно уменьшается (табл.1). Препарат сравнения этацизин в дозе 0,002 мг/кг (1/3000 от LD₅₀) практически не влияет на показатели центральной гемодинамики: достоверно увеличивает показатель - dP/dt - скорость расслабления миокарда только на 5, 10, 15 мин; повышает показатель КДД, достоверно увеличивает показатель +dP/dt только на 45 и 60 мин эксперимента; не влияет на показатели dp/dt/PI - контрактильный индекс Верагута (КИВ) и dp/dt/PD - модифицированный индекс Верагута (табл.1).

Сопоставление результатов проведенных исследований по острой токсичности свидетельствует о том, что согласно табуляции классов токсичности [10], [11], [12] вещество I может быть отнесено по Hodge и Sterner и классификации К.К.Сидорова к 5 классу токсичности и является практически нетоксичным соединением, и это позволило обосновать целесообразность дальнейшего изучения его биологической активности (табл.2). Действительно, исходя из формулы:

,

(где n - количество животных в опыте, равное 12, LD₁₀₀ - минимальная доза изучаемого вещества, которая приводит к 100% гибели всей группы животных), для таблеток этацизина по 0,5 г (50 мг) , следовательно, LD₅₀=55 мг/кг (табл.3). Для вещества I

Таким образом, результаты изучения кардиотропной активности показали, что вещество I обладает существенным преимуществом по сравнению с препаратом сравнения этацизином и после проведения клинических испытаний в медицинских учреждениях может быть использовано в качестве лекарственного средства, обладающего гипотензивным и антиаритмическим действием.

Источники информации

1. Большая медицинская энциклопедия [В 30-ти Т. АМН СССР]. Гл. ред. Б.В.Петровский. - 3-е изд. - М.: Советская энциклопедия. - Т.5. 1985, 560 с., М.Д.Машковский. // Лекарственные средства: пособие для врачей. М., 2005. С.356-367.

2. К. Fukuzumi, N. Ikeda, М. Egawa, J. Am. Oil Chem. Soc., 1976, No 53, pp.623.

3. S. Nagy, G. Argyclan, J. Molnar, М. Kawase, N. Motohashi, Anticancer Res., 1996, No 16, pp.1916.

4. М.Д.Машковский. // Лекарственные средства. М., 1972, с.368-369.

5. Г.Н.Дорофеенко, Ю.И.Рябухин, С.Б.Булгаревич, В.В.Межерицкий, О.Ю.Рябухина. // ЖОрХ, 1977, т.13, №11, с.2459-2460.

6. Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ. // Под ред. Фисенко В.П. и др.- М.: ИАА «Ремедиум», 2004. - С.220-224.

7. М.П.Беленький. // Элементы количественной оценки фармакологического эффекта. Л., 1963, с.149.

8. Методические рекомендации по изучению общетоксического действия фармакологических средств. Утв. 25.12.97. // Вести, фармакоп.комитета. - 1998. - №1. - С.27-32.

9. И.В.Саноцкий. // Методы определения токсичности и опасности химических веществ. М., 1970, с.343.

10. К.К.Сидоров, К.К. Методы определения острой токсичности и опасности химических веществ. (Токсикология). / К.К.Сидоров. - М.: Медицина, 1970, 171 с.

11. Измеров Н.Ф. Параметры токсикометрии промышленных ядов при однократном воздействии. / Н.Ф.Измеров, И.В.Саноцкий, К.К.Сидоров. - М.: Медицина, 1977. - 197 с.

12. Hodge H.C., Sterner L.H., Am. industr. Hyg, Ass. Quart., 1943, 10, 4, 93.

Таблица 1 Влияние I и этацизина на уровень МЛЖД, ЧСС, +dP/dt, -dP/dt, dp/dt/PI, dp/dt/PD, КДД у нормотензивных бодрствующих крыс в процентах к исходному уровню в дозе 1 мг/кг (М± m, n=6, Δ%) Вещество Исходное МЛЖД, мм рт.ст. Через 5 мин Через 10 мин Через 15 мин Через 30 мин Через 45 мин Через 60 мин Через 90 мин Этацизин 120,6±12,1 -2,4±2,3 -0,3±1,5 -1,5±2,2 -0,1±2,1 1,0±1,0 0,0±1,2 1,6±1,1 I 144,1±8,4 -2,2±2,4 -4,6±2,7 -5,5±2,8 -7,8±4,2 -9,3±4,2* -7,9±2,7* -5,8±1,6*   Исходное ЧСС, уд./мин               Этацизин 376,4±18,9 -1,8±1,1 -0,6±0,8 -0,3±0,8 -0,2±0,4 -0,4±0,5 -1,0±0,5 -0,2±0,7 I 408,3±11,1 1,3±1,4 -2,8±5,6 -4,8±6,1 -0,5±7,4 -3,3±6,6 0,8±5,1 2,5±4,7   Исходное +dP/dt, мм рт.ст./сек               Этацизин 9776,2±2475,4 2,2±5,9 7,8±5,6 5,9±6,0 7,8±5,2 10,5±3,5* 9,0±4,4* 2,2±7,2 I 10872/7±1118,8 -4,5±6,3 -5,4±6,9 -9,5±6,9 -12,2±8,б -11,5±7,5 -4,9±3,8 -3,5±1,7   Исходное -dP/dt, мм рт.ст./сек               Этацизин -6560,5d±1468,4 10,6±2,2* 8,3±1,9* 9,6±2,4* 7,3±3,5 5,3±3,8 7,0±3,3 5,7±2,6 I -7962,4±1031,7 9,1±3,3* 10,5±3,7* 12,1±3,9* 21,1±4,8* 21,0±8,3* 17,8±7,6* 13,4±4,6*

Продолжение таблицы 1   Исходное dp/dt/PI, 1/с               Этацизин 209,4±25,2 -0,6±0,8 -1,1±1,9 -2,2±1,3 -1,7±1,8 0,8±2,4 0,2±1,7 1,3±1,9 I 169,7±14,8 -2,6±3,9 3,3±5,4 0,3±4,6 4,1±5,2 4,1±7,0 8,3±3,1* 11,7±5,7   Исходное dp/dt/PD, 1/с               Этацизин 229,6±20,9 -0,1±0,7 1,9±0,9 -0,1±0,9 0,7±1,4 -1,2±1,4 -0,6±1,7 -0,6=1,4 I 204,6±16,4 -3,4±4,3 -2,8±5,9 -4,0±6,8 -1,3±8,5 -5,2±1,4 -3,0±6,4 -0,2±4,7   Исходное КДД мм рт.ст.               Этацизин 8,6±2,1 16,8±16,9 17,2±17,2 10,3±1,4 12,4±10,4 -1,8±5,6 6,9±2,5* 12,9±3,9* I 10,6±2,3 20,7±32,1 3,2±25,2 2,7±19,7 -16,3±20,9 -44,1±12,1* -45,2±13,0* -8,2±32,1

Таблица 2 Определение острой токсичности соединения I Результат Доза мг/кг 10 100 500 1000 3100 Количество животных 12 12 12 12 12 Выжило 12 12 12 12 12 Погибло 0 0 0 0 0 D - 90 400 500 2000 Z - 0 0 0 0 DZ - 0 0 0 0 Таблица 3 Определение острой токсичности таблеток этацизина по 0,5 г (50 мг) Результат Доза, мг/кг 60 55 50 45 40 Количество животных 12 12 12 12 12 Выжило 0 6 8 11 12 Погибло 12 6 4 1 0 D - 5 5 5 5 Z - 6 2 3 1 DZ - 30 10 15 5

Описывается новое производное фенотиазина, а именно 2-(1-(2-(2-хлор-10H-фенотиазин-10-ил)-2-оксоэтил)-5-метил-1Н-1,2,4-триазол-3-ил)фенол формулы I:

обладающий гипотензивным и антиаритмическим действием при внутрибрюшинном введении вещества. 3 табл.

2-(1-(2-(2-Хлор-10H-фенотиазин-10-ил)-2-оксоэтил)-5-метил-1H-1,2,4-триазол-3-ил)фенол формулы I

обладающий гипотензивным и антиаритмическим действием.