ПРОТИВОВИРУСНОЕ СРЕДСТВО В ТАБЛЕТКАХ И СПОСОБ ЕГО ПОЛУЧЕНИЯ Российский патент 2012 года по МПК A61K31/4162 A61K31/53 A61K47/36 A61K47/02 A61K9/36 A61P31/12 

Описание патента на изобретение RU2446802C2

Заявляемое изобретение относится к химико-фармацевтической промышленности, в частности к составам лекарственных препаратов, обладающих противовирусным действием, преимущественно, выпускаемых в таблетках, а также к способам их получения.

Из уровня техники известно значительное количество противовирусных препаратов, таких как арбидол, амиксин (тилорон), рибавирин, ацикловир и другие, большинство из которых выпускается в виде твердых лекарственных форм, а именно таблеток и капсул (см., например, Машковский М.Д. Лекарственные средства. - 15-е изд. М.: OOO «Новая волна». - 2006 г.).

Из литературных данных известно, что желатиновые капсулы обладают целым рядом недостатков, например высокая чувствительность к влаге, поэтому для сохранения лекарственного препарата необходимо соблюдение определенных условий. Кроме того, желатиновые капсулы являются благоприятной средой для размножения микроорганизмов, для предотвращения воздействия которых в состав лекарственного препарата необходимо добавлять консерванты, такие как нипагин, сорбиновая кислота и другие (см., например, Чуешов В.И., Чернов М.Ю. Промышленная технология лекарств. - X.: МТК-Книга, 2002. - т.2).

Таблетированная лекарственная форма обладает целым рядом технологических и фармакологических преимуществ перед другими формами [см.н-р, Ершов Ф.И. Чижов Н.П. Тазулахова Э.Б. Противовирусные средства. СПб, 1993; Чижов Н.П. Аникин В.Б. Романцов М.Г.// "Врач". - 1993. - N3]:

- полная механизация процесса изготовления, обеспечивающая высокую производительность, чистоту и гигиеничность таблеток;

- точность дозирования лекарственных веществ;

- длительная сохранность лекарственных веществ в спрессованном состоянии;

- маскировка неприятных органолептических свойств (вкус, запах). Это достигается наложением оболочек из сахара; какао; шоколада;

- возможность сочетания лекарственных веществ, несовместимых по их физико-химическим свойствам в других формах;

- локализация действия препарата. Это свойство достигается путем нанесения оболочек специального состава, растворимых в кислой (желудок) или в щелочной (кишечник) среде;

- пролонгированное действие лекарственных веществ;

- регулирование последовательного всасывания нескольких лекарственных веществ из таблетки в определенные промежутки времени - создание многослойных таблеток.

Наиболее близким по технической сущности решением к заявляемому составу является противовирусное средство, содержащее амиксин в качестве активного вещества и вспомогательные вещества, выбранное в качестве прототипа (см. патент РФ на изобретение №2141314 «Противовирусный препарат «Амиксин» и способ его получения», дата подачи 12.05.1998, опубликовано 20.11.1999). В качестве наполнителя применяется основной карбонат магния или окись магния. В качестве увлажнителя - поливинилпирролидон или поливиниловый спирт. Для опудривания применяют стеарат кальция или стеарат алюминия. Оболочка содержит аэросил, воск, поливинилпирролидон, сахарозу или лактозу, вазелиновое или касторовое масло, тартразин, основной карбонат магния или окись магния, двуокись титана. Сахароза и лактоза придают препарату приятный вкус. Глянцевочная смесь придает препарату приятный внешний вид. Соотношение всех вышеперечисленных компонентов, мас.%:

Амиксин - 30,5-33,6

Основной карбонат магния или окись магния - 17,8-18,2

Поливинилпирролидон (ПВП) или поливиниловый спирт (ПВС) - 0,48-0,52

Стеарат магния или кальция - 0,48-0,52

Оболочка составляет, в среднем, 51,3% от общей массы таблетки и состоит из следующих компонентов, мас.%:

Аэросил - 0,62-0,67

Воск - 0,04-0,05

Основной карбонат магния или окись магния или карбонат кальция - 16,9-17,5

Вазелиновое или касторовое масло - 0,04-0,05

Поливинилпирролидон - 0,78-0,89

Сахароза, или лактоза - 27,5-28,8

Тальк - 0,12-0,13

Тартразин - 0,03-0,04

Двуокись титана - 1,25-1,36.

Недостатками известного состава являются использование в качестве наполнителя - основного карбоната магния и увлажнителя - поливинилпирролидона, а также нанесение многокомпонентной оболочки усложняет состав таблетки, что значительно удлиняет технологический процесс и ведет к удорожанию всего процесса производства.

Техническим результатом, на которое направлено заявляемое изобретение, является получение таблетированного лекарственного средства с улучшенными органолептическими свойствами, фармакологической безопасностью при условии полного соответствия требованиям фармакопеи, а также оптимизация способа получения средства и расширение ассортимента лекарственных средств, обладающих противовирусным действием.

Заявленный технический результат достигается тем, что в противовирусном средстве в таблетках, содержащих активное вещество, физиологически приемлемые вспомогательные добавки, а именно наполнитель, разрыхлитель, антифрикционное вещество, смазывающее вещество и защитную оболочку, согласно изобретению в качестве активного вещества используют натриевую соль 2-метил-6-нитро-1,2,4-триазоло[5,1-с]-1,2,4-триазин-7-она, дигидрат, в качестве наполнителя - крахмал картофельный и/или лактозу, в качестве разрыхлителя - гидроксипропилцеллюлозу с низкой степенью замещения и/или микрокристаллическую целлюлозу; в качестве антифрикционных веществ - тальк и аэросил; в качестве смазывающего компонента -стеарат магния; в качестве вещества для образования защитной оболочки - гипромеллоза при следующем соотношении компонентов, мас.%:

Натриевая соль 2-метил-6-нитро-1,2,4-триазоло [5,1-с]-1,2,4-триазин-7-она, дигидрат 60,0-90,0 Крахмал картофельный и/или лактоза 1,0-20,0 Гидроксипропилцеллюлоза с низкой степенью замещения и/или микрокристаллическая целлюлоза 0,5-20,0 Аэросил 0,2-3,0 Стеарат магния 0,2-3,0 Тальк 0,2-2,5 Гипромеллоза 1,0-10,0

Таблетки противовирусного средства выполнены массой 0,300-0,330 г, покрытые защитной оболочкой.

Заявляемое противовирусное средство обладает широким спектром вирусоингибирующей активности, в том числе в отношении вируса птичьего гриппа, вирусов лихорадки Рифт, парагриппа, вируса болезни Ауески, западного энцефаломиелита лошадей, венесуэльского энцефаломиелита лошадей, респираторно-синцитиального вируса.

В предлагаемом составе соотношение активного компонента и целевых добавок, полученное опытным путем, является оптимальным и обеспечивает получение качественных таблеток. Предлагаемый состав противовирусного средства обеспечивает хорошее терапевтическое действие. Крахмал и/или лактоза влияют на показатель растворения, при этом увеличение крахмала и/или лактозы (более 20% масс.%) приводит к уменьшению прочности таблеток и увеличению истираемости таблеток. При этом применение крахмала и/или лактозы улучшает процесс растворения таблетки, тем самым легко высвобождается активный компонент, что обеспечивает высокую скорость абсорбции активного компонента в желудочно-кишечном тракте. Введение микрокристаллической целлюлозы и/или гидроксипропилцеллюлозы с низкой степенью замещения в выбранном количестве обеспечивает хорошую твердость таблеток и снижает их хрупкость. Помимо вышеуказанных свойств микрокристаллической целлюлозы и/или гидроксипропилцеллюлозы с низкой степенью замещения предотвращают воздействие влаги, которая может быть в других вспомогательных веществах, на активный компонент. В состав таблеток амиксина в качестве наполнителя входит основной карбонат магния, проявляющий максимальный эффект цементации у таблеток. В отличие от них у предложенного состава таблеток вышеуказанный эффект практически отсутствует. Введение гидроксипропилцеллюлозы с низкой степенью замещения и/или микрокристаллической целлюлозы в выбранном количестве обеспечивает отличную прочность таблеток, благодаря волокнистой структуре обеспечивается возможность таблетке оказывать сопротивление повреждающим воздействиям во всех направлениях. Поэтому лишь у менее 1% всех таблеток наблюдается эффект «кэппинга» (отслоение верхней части таблетки). Это, в свою очередь, снижает экономические убытки производства из-за уменьшения числа некондиционных таблеток. В качестве смазывающего компонента выбран стеарат магния, т.к. его смазывающая способность наивысшая (в отличие от стерата кальция в таблетках амиксина). Уменьшение количества опудривающих веществ - талька, аэросила и стерата магния - (менее 0,2 мас.%) ухудшает скользящие свойства гранулята в процессе таблетирования, что приводит к нетехнологичности процесса таблетирования. Заявленное средство не обладает способностью к прямому прессованию и поэтому для получения твердой лекарственной формы данного активного вещества необходим тщательный подбор вспомогательных веществ.

Таблетки амиксина покрываются многокомпонентной сахарной оболочкой, что усложняет весь технологический процесс. Покрытие таблеток предложенного состава пленочной оболочкой приводит к более быстрому высвобождению активного компонента из таблетки и, соответственно, к более быстрому началу действия лекарственного средства; помимо этого, меньшее количество вспомогательных веществ, входящих в сахарную оболочку, будет попадать в организм человека.

Как видно из вышеизложенного, только предложенные интервалы соотношений ингредиентов, полученные опытным путем, являются оптимальными и позволяют получить качественное противовирусное средство в виде таблеток, отвечающее требованиям на лекарственные препараты по всем показателям: по внешнему виду, распадаемости, растворению, однородности дозирования и другим показателям. Данная лекарственная форма стабильна при хранении и имеет срок годности более 3 лет.

Заявляемое соотношение известных компонентов является оптимальным, так как позволяет получать более высокий результат по сравнению с известными препаратами, в частности, расширяет арсенал лекарственных средств, обладающих широким спектром действия.

Технических решений, совпадающих с совокупностью существенных признаков заявляемого изобретения, не выявлено, что позволяет сделать вывод о соответствии заявляемого изобретения такому условию патентоспособности, как «новизна».

Заявляемые существенные признаки, предопределяющие получение указанного технического результата, явным образом не следуют из уровня техники, что позволяет сделать вывод о соответствии заявляемого изобретения такому условию патентоспособности, как «изобретательский уровень».

Условие патентоспособности «промышленная применимость» подтверждено на примере конкретного применения.

Заявляется способ получения противовирусного средства в таблетках.

Из уровня техники известен способ получения таблеток противовирусного средства, включающий увлажнение смеси амиксина с наполнителем с последующим влажным гранулированием, сушкой, сухим гранулированием, опудриванием, таблетированием, нанесением покрытия методом суспензионного дражирования. Субстанцию амиксина смешивают с наполнителем - основной карбонат магния. Затем добавляют увлажнитель в виде спиртового раствора поливинилпирролидона, приготовленного ранее. Приготовленную смесь пропускают через гранулятор с диаметром отверстий 2 мм. Полученный гранулят сушат и подают на сухое гранулирование с диаметром отверстий 1,5 мм. Опудривание осуществляют стеаратом кальция. Опудренные гранулы поступают в пресс для получения таблеток. Полученные таблетки поступают в дражжеровочный котел для последовательного нанесения сахарного сиропа, суспензии и окрашенного сиропа соответственно. Заключительным этапом является нанесение глянцевочной смеси для придания блеска таблеткам (см. патент РФ на изобретение №2141314 «Противовирусный препарат «Амиксин» и способ его получения», дата подачи 12.05.1998, опубликовано 20.11.1999).

Техническим результатом, на которое направлено заявляемое изобретение, является оптимизация технологии получения противовирусного средства широкого действия, обладающего хорошими органолептическими свойствами и фармакологической безопасностью, соответствующим показателям фармакопейной статье предприятия.

Указанный результат достигается тем, в способе получения противовирусного препарата в таблетках, осуществляемого с использованием активного вещества, физиологически приемлемых вспомогательных добавок: наполнителя, разрыхлителя, антифрикционного вещества, смазывающего вещества и защитной оболочки и включающий увлажнение, последующее влажное гранулирование, сушку, сухое гранулирование, опудривание, таблетирование и нанесение пленочного покрытия, при котором при смешивании активного вещества, наполнителя, разрыхлителя проводят влажное гранулирование получившейся массы, после которого осуществляют первичную протирку увлажненной массы через перфорированное устройство, сушат, при этом сушку проводят до остаточной влажности не более 0,5%; затем осуществляют вторичную протирку через перфорированное устройство, после чего полученный гранулят опудривают смесью талька, аэросила и стеарата магния, затем таблетируют и покрывают защитной оболочкой, при этом в качестве активного вещества используют натриевую соль 2-метил-6-нитро-1,2,4-триазоло[5,1-с]-1,2,4-триазин-7-она, дигидрат, в качестве наполнителя- крахмал картофельный и/или лактозу, в качестве разрыхлителя - гидроксипропилцеллюлозу с низкой степенью замещения и/или микрокристаллическую целлюлозу; в качестве антрифрикционных веществ - тальк и аэросил; в качестве смазывающего компонента - стеарат магния; в качестве вещества для образования защитной оболочки - гипромеллозу, при следующем соотношении компонентов, мас.%:

Натриевая соль 2-метил-6-нитро-1,2,4-триазоло [5,1-с]-1,2,4-триазин-7-она, дигидрат 60,0-90,0 Крахмал картофельный и/или лактоза 1,0-20,0 Гидроксипропилцеллюлоза с низкой степенью замещения и/или микрокристаллическая целлюлоза 0,5-20,0 Аэросил 0,2-3,0 Стеарат магния 0,2-3,0 Тальк 0,2-2,5 Гипромеллоза 1,0-10,0

При проведении влажного гранулирования используют 5%-й крахмальный клейстер. Применение 5% крахмального клейстера в качестве увлажнителя придает всей массе однородность и хорошую смачиваемость. Для хорошей растворимости таблеток необходим именно жидкий крахмальный клейстер, так как густой крахмальный клейстер увеличивает жесткость всей массы, что снижает растворимость таблеток. Способ производства таких таблеток значительно упрощается за счет применения одного компонента в качестве наполнителя и увлажнителя. Производство таких таблеток недорого за счет применения такого компонента, как крахмал. Использование стеарата магния в качестве скользящего вещества, аэросила и талька в качестве опудривающих веществ позволяет добиться хорошей текучести гранулята, обеспечивающей нормальное проведение процесса таблетирования. Введение гидроксипропилцеллюлозы с низкой степенью замещения и/или микрокристаллической целлюлозы обеспечивает необходимую прочность таблетки и снимает эффект «кэппинга»; снижает убытки производства.

Используют натриевую соль 2-метил-6-нитро-1,2,4-триазоло [5,1-с]-1,2,4-триазин-7-она, дигидрат, размер частиц которого находится в интервале 0,1-0,6 мм.

В качестве перфорированного устройства используют перфорированную пластину.

Первичную протирку осуществляют через перфорированную пластину с отверстиями 1,5 мм.

При вторичной протирке используют перфорированную пластину с отверстиями 0.5 мм.

Благодаря проведению влажной грануляции достигается однородность размера частиц массы.

Гранулят сушат при температуре 40-45°С до остаточной влажности не более 0,5%. Использовать полученный заявляемым способом гранулят с более высокими показателями влажности нецелесообразно, так как это приводит к ухудшению сыпучести (см. фиг.1).

Как видно из графика, наилучшие показатели получают при показателе остаточной влажности, равном 0,5%.

Вторичная протирка через перфорированную пластину, размер отверстий которой равен 0,5 мм, позволяет получить гранулы, обладающие улучшенной сыпучестью (см. фиг.2).

Определена максимальная сыпучесть у частиц с размером от 0,5 до 0,63 мм. Опудривание гранул тальком и аэросилом предотвращает их слипание.

Полученный гранулят таблетируют на роторном таблеточном прессе диаметром 9 мм на двояковогнутых пуансонах при 60 МПа, получая таблетки-ядра со средней массой 0,340 г. Таблетки-ядра поступают в обеспыливатель. Затем таблетки-ядра поступают в коатер (машина для нанесения пленочного покрытия) для нанесения 6% раствора гипромеллозы. Нанесение покрытия в количестве 5% от массы таблетки-ядра было достаточно, чтобы обеспечить защиту таблеток-ядер от внешней среды. Получены таблетки со средней массой 0,330 г, покрытые защитной оболочкой.

Технических решений, совпадающих с совокупностью существенных признаков заявляемого изобретения, не выявлено, что позволяет сделать вывод о соответствии заявляемого изобретения такому условию патентоспособности, как «новизна».

Заявляемые существенные признаки, предопределяющие получение указанного технического результата, явным образом не следуют из уровня техники, что позволяет сделать вывод о соответствии заявляемого изобретения такому условию патентоспособности, как «изобретательский уровень».

Условие патентоспособности «промышленная применимость» подтверждено на примере конкретного применения.

Пример конкретного способа выполнения:

Были использованы компоненты при следующем соотношении: натриевая соль 2-метил-6-нитро-1,2,4-триазоло[5,1-с]-1,2,4-триазин-7-она, дигидрат в количестве 1200-1800 г, в качестве наполнителя - крахмал картофельный в количестве 10-400 г, в качестве разрыхлителя - микрокристаллическая целлюлоза в количестве 10-400 г; в качестве антрифрикционных веществ - тальк в количестве 4-50 г, и аэросил - 4-60 г; в качестве смазывающего компонента - стеарат магния в количестве 4-60 г; в качестве вещества для образования защитной оболочки - гипромеллоза в количестве 20-200 г.

В высокоскоростной смеситель-гранулятор загружают 680 г натриевой соли 2-метил-6-нитро-1,2,4-триазоло[5,1-с]-1,2,4-триазин-7-она, дигидрата, 82 г крахмала и 150 г микрокристаллической целлюлозы и увлажняют 5% крахмальным клейстером. Увлажненную массу пропускают через гранулятор с диаметром отверстий 1,5 мм, гранулят сушат в сушилке при температуре 40-45 градусов до остаточной влажности не более 0,5-1,0%. Полученный гранулят пропускают через гранулятор с диаметром отверстий 0,5 мм. Гранулят загружают в опудриватель и опудривают смесью талька (5,5 г), аэросила (14 г) и стеарата магния (13,5 г). Полученный гранулят таблетируют на роторном таблеточном прессе диаметром 9 мм на двояковогнутых пуансонах при 60 МПа, получая таблетки-ядра со средней массой 0,300 г. Таблетки-ядра поступают в обеспыливатель. Затем таблетки-ядра поступают в коатер (машина для нанесения пленочного покрытия) для нанесения 6% раствора гипромеллозы. Получают таблетки со средней массой 0,315 г, покрытые защитной оболочкой, которые помещают в упаковку.

Благодаря заявляемому способу получения противовирусного препарата в таблетках создано лекарственное средство, обладающее выраженным вирусоингибирующим действием, улучшенными органолептическими свойствами и фармакологической безопасностью.

Все компоненты, входящие в состав противовирусного средства, разрешены к применению в медицинской практике и выпускаются в соответствии с требованиями, предъявляемыми Государственной фармакопеей.

Заявляемые составы противовирусного средства и способ его получения расширяют арсенал лекарственных средств широкого спектра действия, повышают стабильность препарата и оптимизируют процесс его получения. Препарат применяют для лечения заболеваний, вызываемых вирусами птичьего гриппа, вирусов лихорадки Рифт, парагриппа, вируса болезни Ауески, западного энцефаломиелита лошадей, венесуэльского энцефаломиелита лошадей, респираторно-синцитиального вируса.

Для подтверждения достижения заявленного технического результата при осуществлении изобретения были использованы составы с содержанием ингредиентов в заявленном интервале значений количественных признаков, мас.%, в частности:

Состав №1:

Натриевая соль 2-метил-6-нитро-1,2,4-триазоло [5,1-с]-1,2,4-триазин-7-она, дигидрат 76,0 Крахмал картофельный 4,0 Гидроксипропилцеллюлоза с низкой степенью замещения 8,0 Аэросил 2,0 Стеарат магния 2,0 Тальк 2,0 Гипромеллоза 6,0

Состав №2:

Натриевая соль 2-метил-6-нитро-1,2,4-триазоло [5,1-с]-1,2,4-триазин-7-она, дигидрат 71,5 лактоза 10 микрокристаллическая целлюлоза 12 Аэросил 3,0 Стеарат магния 0,5 Тальк 1,0 Гипромеллоза 2,0

Осуществление изобретения подтверждено на примерах конкретного выполнения.

Пример 1. Схема синтеза натриевой соли 2-метил-6-нитро-1,2,4-триазоло[5,1-с]-1,2,4-триазин-7-она, дигидрата следующая: к раствору, охлажденному до 0°С, содержащему 13 г (0,1 моль) 5-амино-3-метилтио-1,2,4-триазола в 16 мл азотной кислоты и 100 мл воды, добавляют раствор, содержащий 8 г нитрита натрия в 50 мл воды в течение 15 мин, выдерживают 10 мин и добавляют порциями охлажденную смесь, содержащую 11 мл (0,1 моль) этилнитроацетата в 150 мл 2 М раствора карбоната натрия. Перемешивают в течение 2 часов при 0-5°С, образовавшийся осадок отфильтровывают, затем последовательно кристаллизуют из раствора 20%-ной уксусной кислоты, воды и сушат на воздухе. Выход: 21,2 г (74%).

Пример 2.

Изучение противовирусной эффективности заявляемого средства на основе структурных аналогов пуриновых в отношении возбудителя гриппа A (H5N1)

В работе использовали вирус гриппа, штамм А (H5N1), выделенный из биопроб, доставленных из очага заболевания (пало и было уничтожено более 460 тысяч кур).

Использованы перевиваемые культуры клеток почек свиньи - СПЭВ и почек собаки - MDCK. В качестве ростовой среды и среды поддержания использовали полусинтетическую среду (ПС-4) на растворе Хенкса, содержащую 7,5% и 2% сыворотки крупного рогатого скота соответственно.

Использованы составы №1 и 2

Контрольные препараты: Озельтамивир (тамифлю) - производства фирмы Хоффманн - Ля Рош Лтд., Швейцария; арибидол - производства ЗАО «Мастерлек», Россия, ремантадин - производства OOO «РОЗФАРМ», Россия.

Противовирусную эффективность препаратов in vitro оценивали по следующим показателям:

- снижение уровня накопления вируса под воздействием препарата (Δ, Ig);

- коэффициент ингибирования (Ки, %);

- подавление цитотоксической активности вируса (%).

Критериями эффективности препаратов являются: снижение инфекционного титра возбудителя более чем на 1,8 Ig, Ки более 98,3% соответственно.

Основными критериями оценки эффективности in vivo являлись:

- показатели защиты лабораторных животных от гибели;

- среднее время жизни животных в группе (см., например, Методические подходы к поиску антивирусных препаратов, их испытание и оценка / II. А.Лагушкин, Н.И.Митин, В.А.Старовойтова и др. // Вирусные ингибиторы и механизм их действия. - Рига, 1977. - С.138-149).

Статистическую обработку полученных результатов проводили общепринятыми методами (см., например, Лакин Г.Ф. Биометрия. - М.: «Высшая школа». - 1990).

В качестве объекта исследования использовались 9-10-суточные развивающиеся куриные эмбрионы (РКЭ), белые мыши массой 12-14 г и цыплята 6-8-недельного возраста.

Оценку эффективности различных составов №1 и 2 в заявленном интервале значений количественных признаков заявленного средства в отношении вируса гриппа, штамм A (H5N1), проводили in vitro в культуре клеток МДСК. В качестве инфицирующего препарата использовали аллантоисную жидкость инфицированных РКЭ с биологической активностью 5,5 lg ЦПД/мл. Множественность инфицирования составила 0,01 ЦПД/клетку. Адсорбцию вируса проводили в течение 60 мин при температуре плюс (37,0±0,5)°С. После адсорбции вируса монослой трижды промывали питательной средой типа ПС-4 на растворе Хенкса, содержащей 2% сыворотки КРС и по 100 ЕД/мл пенициллина и стрептомицина, затем вносили свежую среду, содержащую препараты в исследуемых концентрациях, и инкубировали в течение 3-х суток при температуре плюс (37,0±0,5)°С. В течение всего срока наблюдения визуально учитывали цитопатический эффект, вызванный в культуре клеток вирусом, с использованием светового микроскопа (объектив ×10, окуляр ×15), а также определяли уровень специфического гемагглютинина. В качестве референс-препаратов использовали тамифлю, ремантадин и арбидол. На каждую дозу препарата использовали не менее 10 пробирок с монослоем культуры клеток двухсуточного возраста.

Результаты изучения подавления репродукции вируса гриппа, штамм А (H5N1) в динамике, представленные в таблицах 1 и 2, свидетельствуют о том, что заявленное средство (состав №1) в культуре клеток MDCK в концентрации, соответствующей МПК (128 мкг/мл), полностью подавляет цитопатическую активность вируса гриппа, штамм А (H5N1), при внесении препарата через 1 час после инфицирования монослоя клеток. В концентрациях 64 мкг/мл и 32 мкг/мл Средство подавляет 90% цитопатической активности вируса.

Как видно из Таблицы 1, наиболее низкую противовирусную эффективность выявил арбидол. В максимально переносимой концентрации коэффициент ингибирования составил 30%.

Озельтамивир в максимально переносимой концентрации полностью подавляет цитопатическую активность вируса гриппа птиц, а эффективность ремантадина составила 87%.

В результате изучения способности заявленного средства подавлять формирование специфического гемагглютинина выявлено, что оно в максимально переносимой концентрации подавляет репродукцию вируса гриппа на 93,8%, в концентрации 64 мкг/мл - на 89,6%, в дозе 32 мкг/мл - на 87,5%. Наиболее эффективно подавляет тамифлю репродукцию вируса в максимально переносимой концентрации.

Как видно из Таблицы 2, заявляемое средство в высоких концентрациях эффективно подавляет репродукцию вируса гриппа, штамм A (H5N1), в культуре клеток MDCK.

Результаты изучения подавления репродукции вируса гриппа, штамм А (H5N1), представленные в таблице 2, свидетельствуют о том, что средство в культуре клеток MDCK в концентрации, соответствующей 1/16 МПК (8 мкг/мл), подавляет цитопатическую активность вируса гриппа, штамм А (H5N1).

Наиболее низкую противовирусную эффективность выявил арбидол. В максимально переносимой концентрации коэффициент ингибирования составил 50%. Озельтамивир и ремантадин в максимально переносимой концентрации полностью подавляют цитопатическую активность вируса гриппа птиц.

В результате изучения способности заявленного средства подавлять формирование специфического гемагглютинина выявлено, что препарат в 1/16 максимально переносимой концентрации подавляет репродукцию вируса гриппа полностью, составы №1 и 2. Тамифлю и ремантадин эффективно подавляют репродукцию вируса в максимально переносимой концентрации.

Таким образом, оценка противовирусной эффективности различных составов заявленного средства показала их воспроизводимость в процессе подавления репродукции вируса гриппа.

Пример 3.

Изучение эффективности заявленного средства в отношении вируса гриппа, штамм A (H5N1) in vivo

Оценку эффективности заявляемого средства в отношении вируса гриппа, штамм А (H5N1), проводили in vivo с использованием белых мышей массой 12-15 г. В качестве инфицирующего препарата использовали аллантоисную жидкость инфицированных РКЭ с биологической активностью 5,5 lg ЦПД50/мл, 8,3 lg ЭЛД50/мл, 6,3 lg ЛД50/мл.

Препараты вводили белым мышам перорально по профилактической и лечебной схемам, а также по схеме экстренной профилактики.

Полученные результаты изучения профилактической эффективности Средства в отношении экспериментальной формы гриппа у белых мышей, интраназально инфицированных вирусом гриппа, представлены в Таблице 4.

Защита от гибели при использовании этого соединения в дозе 100 мг/кг массы животного составила в среднем 35,0%, увеличение среднего времени жизни (СВЖ) - 2,6 суток.

Использование Средства по профилактической схеме в дозе 50 мг/кг защищало от гибели инфицированных животных в среднем 31,7%; в дозе 10 мг/кг - 33,3%; 1 мг/кг - 45,0%. Увеличение показателя СВЖ составило, в среднем, по результатам опытов на 2,4 суток, 2,6 суток и 2,8 суток соответственно.

Для выбора наиболее эффективной схемы применения Средства препарат вводили животным перорально за 2 суток и сутки до инфицирования. Результаты исследования представлены в Таблице 5.

При применении Средства двукратно за 48 часов и 24 часа до инфицирования более эффективную защиту животным препарат оказывал в дозах 1 и 10 мг/кг. Защита от гибели составила 40,0%, а увеличение показателя СВЖ - 3 суток. Противовирусная эффективность Средства сопоставима с таким же показателем для арбидола. При этом следует подчеркнуть, что доза препарата была значительно ниже, чем референс-препарата арбидол, и на сутки больше СВЖ в группе.

При применении Средства за сутки и 1 час до инфицирования показатель защитной эффективности Средства снизился на 10%.

В качестве референс-препаратов использовали арбидол и тамифлю. Арбидол в дозе 30 мг/кг (соответствует профилактической дозе для человека - 200 мг/сутки) защищал от гибели в среднем 38% инфицированных белых мышей. Увеличение среднего времени жизни составило в среднем 2,2 суток. В дозе 60 мг/кг (соответствует равноэффективной дозе человека - 400 мг/сутки) защитная эффективность в среднем составила 45%, увеличение показателя среднего времени жизни - 2,6 суток.

Защитная эффективность тамифлю в дозе 10 мг/кг составила в среднем 51%, в дозе 13 мг/кг (соответствует 1/2 дозы для человека - 75 мг/сутки) - 62%, в дозе 50 мг/кг - 86%. При этом наблюдали удлинение среднего времени жизни на 3,4; 4,3 и 4,7 суток соответственно.

Следовательно, наибольший противовирусный эффект Средство проявило при применении его в диапазоне доз от 1 до 10 мг/кг массы животного по профилактическим схемам за 5 суток до инфицирования, ежедневно и на 2 суток до инфицирования ежедневно.

При применении Средства по схеме экстренной профилактики в дозе 50 мг/кг массы препарат защищал от гибели в среднем 42,5% инфицированных животных, в дозе 100 мг/кг - 47,5%. При этом наблюдали увеличение СВЖ на 2,7 суток и 3,0 суток соответственно.

Арбидол в дозе 135 мг/кг при использовании его по схеме экстренной профилактики защищал от гибели 30% инфицированных вирусом гриппа белых мышей. Увеличение СВЖ составило в среднем 1,7 суток.

Пример 4.

Испытания противовирусной активности заявленного средства в отношении вируса «свиного» гриппа

Исследование протективной активности Средства в отношении вируса «свиного» гриппа проведены на базе НИИ гриппа. В задачи исследования входило воспроизведение инфекционного процесса, вызванного этим вирусом, у белых мышей, и тестирование противовирусной активности Средства в сравнении с противовирусным препаратом Ремантадин.

В работе аликвоты Средства разводили в среде для клеточных культур Игла MEM. Из полученного раствора были приготовлены необходимые разведения на среде MEM для экспериментов на животных. В качестве референс-препарата использовали Ремантадин (1-(1-адамантил)-аминоэтил гидрохлорид, Aldrich Chem. Co.). В качестве модельного вируса использовали вирус гриппа A/California/07/09 (H1N1) из коллекции вирусных штаммов НИИ гриппа. Вирус пассировали в аллантоисной полости 10-12 дневных куриных эмбрионов в течение 48 часов при 36°С.

Исследуемые препараты вводили животным внутрибрюшинно в объеме 0,2 мл в следующих дозах: Средство 200 и 70 мг/кг, Ремантадин - 50 мг/кг. Препараты вводили по лечебно-профилактической схеме: за 24 часа и 1 час до заражения и через 24, 48 и 72 часа после заражения. В качестве плацебо контрольной группе животных вводили физиологический фосфатный буфер. В качестве отрицательного контроля использовали интактных животных, которые содержались в тех же условиях, что и опытные группы. Вирусы вводили животным интраназально под легким эфирным наркозом в дозе 1 LD50. В каждую группу наблюдения брали по 15 мышей. На 3 день после заражения 5 животных из каждой группы умерщвляли, вскрывали и изолировали легкие. Легкие замораживали и хранили при температуре -20°С до постановки соответствующих экспериментов.

Наблюдение за оставшимися животными осуществляли в течение 14 дней, т.е. срока, в течение которого при экспериментальном гриппе отмечается смертность животных. Ежедневно фиксировали смертность животных в контрольных и опытных группах. На основании полученных показателей смертности в каждой группе рассчитывали процент смертности (М, отношение числа павших за 14 дней животных к общему числу зараженных животных в группе), индекс защиты (IP, отношение разницы процентов смертности в контрольной и опытной группах к проценту смертности в контрольной группе) и вирусом, у белых мышей, и тестирование противовирусной активности Средства в сравнении с противовирусным препаратом Ремантадин.

Таким образом, разработанное противовирусное средство в форме таблеток обладает выраженным вирусингибирующим действием, фармакологической безопасностью и улучшенными органолептическими свойствами.

Таблица 1 Результаты оценки эффективности Средства по подавлению цитопатической активности вируса гриппа, штамм A (H5N1), в культуре клеток MDCK через 48 часов после инфицирования (п=3) Препарат Доза препарата, мкг/мл Частота выявления ЦПД, Х Коэффициент подавления ЦПД %, X Заявляемое Средство, состав №1 128,0 0/30 100 64,0 3/30 90 32,0 3/30 90 Арбидол 25,0 21/30 30 Тамифлю 100,0 0/30 100 Ремантадин 50,0 4/30 87 Контроль без препарата 100 -

Таблица 2 Результаты оценки эффективности Средства по подавлению образования специфического гемагглютинина вируса гриппа, штамм А (H5N1), в культуре клеток MDCK через 48 часов после инфицирования (п=3) Препарат Доза препарата, мкг/мл Уровень гемагглютинина, ГА, X±σx Коэффициент подавления ГА, %. Х±ах Заявляемое Средство состав №1 128,0 8,0±0,0 93,8±0,0 64,0 13,2±2,5 89,5±2,1 32,0 16,0±0,0 87,5±0,0 Арбидол 25,0 53,2±10,6 58,2±8,3 Тамифлю 100,0 отсутствует 100,0±0,0 Ремантадин 50,0 1,3±0,7 98,9±0,5 Контроль (без препарата) 128±0,0 -

Таблица 3 Оценка противовирусной эффективности различных составов Средства в отношении вируса гриппа, штамм A (H5N1) в культуре клеток MDCK (по цитопатической активности) (п=3) Препарат Доза препарата. мкг/мл Частота выявления ЦПД, Х Коэффициент подавления ЦПД %. X±σx Заявляемое Средство, Состав №1 8,0 6/30 80 4,0 9/30 70 2,0 12/30 60 1,0 15/30 50 0,5 18/60 40 Заявляемое Средство, Состав №2 8,0 3/30 90 4,0 18/30 80 2,0 12/30 60 1,0 15/30 50 0,5 15/30 50 Арбидол 25 15/30 50 Тамифлю 100 0/30 100 Ремантадин 50 0/30 100 I Контроль - 30/30 -

Таблица 4 Изучение профилактической эффективности Средства в отношении экспериментальной формы гриппа у белых мышей, интраназально инфицированных вирусом гриппа, штамм А (H5N1) Препарат Схема введения препарата Доза препарата, мг/кг Частота гибели животных Защитная эффективность от гибели, % Среднее время жизни животных в группе, дни Увеличение средней продолжительности жизни, Δ, дни Заявляемое Средство. Состав №2 - 120 ч, - 96 ч; - 72 ч; - 48 ч; - 24 ч; - 1 ч 100 10/20 50 11,2 2,7 50 14/20 30 10,8 2,3 10 13/20 35 10,8 2,3 1 10/20 50 11,4 2,9 Тамифлю 50 4/20 80 10,0 4,0 13 8/20 60 12,5 4,0 10 10/20 50 11,5 3,0 Арбидол контроль дозы - 24 ч, - 1 ч 60 11/20 45 11,1 2,62,5 30 12/20 40 11,0 Контроль дозы - - 20/20 - 8,5 - Контроль стада - - 0/20 - 14,0 - Примечание 1 Инфицирующая доза составляла 10 ЛД50

Таблица 5 Изучение профилактической эффективности Средства в отношении экспериментальной формы гриппа у белых мышей, интраназально инфицированных вирусом гриппа, штамм A (H5N1) Препарат Схема введения препарата Доза препарата, мг/кг Частота гибели животных Защитная эффективность от гибели, % Среднее время жизни животных в группе, дни Увеличение средней продолжительности жизни, Δ,дни Заявляемое Средство, состав №2 - 24 ч, 100 15/20 25 11,0 2,3 50 14/20 30 11,2 2,5 10 14/20 30 11,3 2,6 1 14/20 30 11,4 2,7 Тамифлю - 120 ч, - 96 ч, - 78 ч, - 48 ч, - 24 ч, - 1 ч 50 2/20 90 13,6 4,9 13 7/20 65 13,2 4,5 10 10/20 50 12,5 3,8 Арбидол - 24 ч, - 1 ч 60 11/20 45 11,5 2,8 30 12/20 40 11,0 2,3 Контроль дозы - - 20/20 - 8,7 - Контроль стада 0/20 14,0

Таблица 6 Показатели патологического процесса при гриппозной пневмонии белых мышей, вызванной вирусом гриппа A/California/7/09 (H1N1), в условиях применения заявляемого Средства Препарат, мг/кг Средняя продолжительность жизни Смертность, % Индекс защиты, % Увеличение средней продолжительности жизни Заявляемое Средство, состав №1 200 мг/кг 13,7 20 60 3,1 Заявляемое Средство, состав №1, 70 мг/кг 12,8 30 40 2,2 Ремантадин 11,5 40 20 0,9 Контроль вируса 10,6 50 - 0

Похожие патенты RU2446802C2

название год авторы номер документа
ПРОТИВОВИРУСНОЕ СРЕДСТВО В КАПСУЛАХ И СПОСОБ ЕГО ПОЛУЧЕНИЯ 2011
  • Петров Александр Юрьевич
  • Сорокин Павел Владимирович
  • Шаблакова Анна Сергеевна
RU2451514C1
ФАРМАЦЕВТИЧЕСКАЯ КОМПОЗИЦИЯ В ФОРМЕ ТАБЛЕТКИ И СПОСОБ ЕЕ ПОЛУЧЕНИЯ 2014
  • Небольсин Владимир Евгеньевич
RU2546002C1
ПРОТИВОВИРУСНОЕ ЛЕКАРСТВЕННОЕ СРЕДСТВО В ВИДЕ КАПСУЛ И СПОСОБ ЕГО ПОЛУЧЕНИЯ 2014
  • Лапенков Михаил Иванович
  • Бубело Владимир Дмитриевич
  • Бариев Эдуард Альфитович
  • Полковникова Елена Викторовна
  • Смирнова Елена Николаевна
  • Дмитренко Ирина Олеговна
  • Батищева Ирина Вениаминовна
RU2633085C2
ЛЕКАРСТВЕННОЕ СРЕДСТВО, ОБЛАДАЮЩЕЕ ПРОТИВОВИРУСНЫМ ДЕЙСТВИЕМ И СОДЕРЖАЩЕЕ 2-МЕТИЛТИО-5-МЕТИЛ-6-НИТРО-1,2,4-ТРИАЗОЛО[1,5-a]ПИРИМИДИН-7(3Н)-ОН 2007
  • Русинов Владимир Леонидович
  • Уломский Евгений Нарциссович
  • Чарушин Валерий Николаевич
  • Чупахин Олег Николаевич
  • Логинова Светлана Яковлевна
  • Борисевич Сергей Владимирович
  • Хамитов Равиль Авгатович
  • Максимов Владимир Алексеевич
RU2365591C2
АМИД 1,2,4-ТРИАЗОЛ-3-ИЛТИОГЛИКОЛЕВОЙ КИСЛОТЫ, ОБЛАДАЮЩИЙ ПРОТИВОВИРУСНОЙ АКТИВНОСТЬЮ, ИЛИ ЕГО ФАРМАЦЕВТИЧЕСКИ ПРИЕМЛЕМЫЕ СОЛИ, ФАРМАЦЕВТИЧЕСКИЕ КОМПОЗИЦИИ И ИХ ПРИМЕНЕНИЕ ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ И ПРОФИЛАКТИКИ ГРИППА 2014
  • Федичев Петр Олегович
RU2626003C2
НАТРИЕВАЯ СОЛЬ 5-МЕТИЛ-6-НИТРО-1,2,4,-ТРИАЗОЛО[1,5-a]ПИРИМИДИН-7-ОНА ДИГИДРАТ 2006
  • Чупахин Олег Николаевич
  • Русинов Владимир Леонидович
  • Уломский Евгений Нарциссович
  • Чарушин Валерий Николаевич
  • Петров Александр Юрьевич
  • Киселев Олег Иванович
RU2330036C1
ФАРМАЦЕВТИЧЕСКАЯ КОМПОЗИЦИЯ ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ ТЯЖЕЛЫХ ФОРМ ВИРУСНЫХ ИНФЕКЦИЙ В ВИДЕ ТАБЛЕТОК 2014
  • Марков Илья Александрович
  • Маркова Елена Алексеевна
  • Гапонюк Полина Петровна
  • Маркова Инна Николаевна
  • Гапонюк Петр Яковлевич
  • Варданян Нина Васильевна
  • Денисов Лев Александрович
RU2559179C1
НАТРИЕВАЯ СОЛЬ 2-МЕТИЛТИО-6-НИТРО-1,2-4-ТРИАЗОЛО[5,1-C]-1,2,4-ТРИАЗИН-7(4H)-ОНА, ДИГИДРАТ, ОБЛАДАЮЩАЯ ПРОТИВОВИРУСНОЙ АКТИВНОСТЬЮ 2005
  • Чупахин Олег Николаевич
  • Русинов Владимир Леонидович
  • Уломский Евгений Нарциссович
  • Чарушин Валерий Николаевич
  • Петров Александр Юрьевич
  • Киселев Олег Иванович
RU2294936C1
НАТРИЕВАЯ СОЛЬ 2-ЭТИЛТИО-6-НИТРО-1,2,4-ТРИАЗОЛО[5,1-c]-1,2,4-ТРИАЗИН-7-ОНА ДИГИДРАТ 2008
  • Чупахин Олег Николаевич
  • Русинов Владимир Леонидович
  • Уломский Евгений Нарциссович
  • Чарушин Валерий Николаевич
  • Медведева Наталья Розыевна
  • Киселев Олег Иванович
  • Деева Элла Германовна
  • Логинова Светлана Яковлевна
  • Борисевич Сергей Владимирович
  • Бондарев Владимир Петрович
RU2404182C2
ШТАММ А/Salekhard/01/2009(H1N1)v ВИРУСА ГРИППА А СУБТИПА H1N1 ДЛЯ ИССЛЕДОВАНИЯ ЛЕЧЕБНОЙ И ПРОФИЛАКТИЧЕСКОЙ ЭФФЕКТИВНОСТИ ПРЕПАРАТОВ ПРОТИВ ВИРУСА ГРИППА 2011
  • Агафонов Александр Петрович
  • Терновой Владимир Александрович
  • Шишкина Лариса Николаевна
  • Булычев Леонид Егорович
  • Сергеев Артемий Александрович
  • Скарнович Максим Олегович
  • Демина Ольга Константиновна
  • Кабанов Алексей Сергеевич
  • Шиков Андрей Николаевич
  • Семенцова Александра Олеговна
  • Сергеев Александр Николаевич
RU2457242C1

Иллюстрации к изобретению RU 2 446 802 C2

Реферат патента 2012 года ПРОТИВОВИРУСНОЕ СРЕДСТВО В ТАБЛЕТКАХ И СПОСОБ ЕГО ПОЛУЧЕНИЯ

Группа изобретений относится к фармацевтической промышленности, конкретно к противовирусному средству в таблетках. Средство содержит, мас.%: в качестве активного вещества - натриевую соль 2-метил-6-нитро-1,2,4-триазоло[5,1-с]-1,2,4-триазин-7-она, дигидрат (60,0-90,0), в качестве наполнителя - крахмал картофельный и/или лактозу (1,0-20,0), в качестве разрыхлителя - гидроксипропилцеллюлозу с низкой степенью замещения и/или микрокристаллическую целлюлозу (0,5-20,0), в качестве антрифрикционных веществ - тальк (0,2-2,5) и аэросил (0,2-3,0), в качестве смазывающего компонента - стеарат магния (0,2-3,0), в качестве вещества для образования защитной оболочки - гипромеллозу (1,0-10,0). Заявляемое средство обладает вирусоингибирующей активностью в отношении вируса птичьего гриппа, вирусов лихорадки долины Рифт, парагриппа, вируса болезни Ауески, западного энцефаломиелита лошадей, венесуэльского энцефаломиелита лошадей, респираторно-синцитиального вируса. Также предложен способ получения указанного средства в таблетках. Группа изобретений обеспечивает расширение ассортимента противовирусных лекарственных средств благодаря получению таблетированного средства, обладающего выраженным вирусоингибирующим действием и улучшенными органолептическими свойствами. 2 н. и 8 з.п. ф-лы, 2 ил., 6 табл., 4 пр.

Формула изобретения RU 2 446 802 C2

1. Противовирусное средство в таблетках, содержащее активное вещество, физиологически приемлемые вспомогательные добавки, а именно наполнитель, разрыхлитель, антифрикционное вещество, смазывающее вещество и защитную оболочку, отличающийся тем, что в качестве активного вещества используют натриевую соль 2-метил-6-нитро-1,2,4-триазоло[5,1-с]-1,2,4-триазин-7-она, дигидрат, в качестве наполнителя - крахмал картофельный и/или лактозу, в качестве разрыхлителя - гидроксипропилцеллюлозу с низкой степенью замещения и/или микрокристаллическую целлюлозу; в качестве антифрикционных веществ - тальк и аэросил; в качестве смазывающего компонента - стеарат магния; в качестве вещества для образования защитной оболочки - гипромеллозу, при следующем соотношении компонентов, мас.%:
Натриевая соль 2-метил-6-нитро-1,2,4-триазоло [5,1-с]-1,2,4-триазин-7-она, дигидрат 60,0-90,0 Крахмал картофельный и/или лактоза 1,0-20,0 Гидроксипропилцеллюлоза с низкой степенью замещения и/или микрокристаллическая целлюлоза 0,5-20,0 Аэросил 0,2-3,0 Стеарат магния 0,2-3,0 Тальк 0,2-2,5 Гипромеллоза 1,0-10,0

2. Противовирусное средство в таблетках по п.1, отличающееся тем, что размер гранул средства находится в диапазоне от 0,5 до 0,63 мм.

3. Противовирусное средство в таблетках по п.1, отличающееся тем, что таблетка выполнена массой от 0,300 до 0,330 г.

4. Противовирусное средство в таблетках по п.1, отличающееся тем, что обладает вирусоингибирующей активностью в отношении вируса птичьего гриппа, вирусов лихорадки долины Рифт, парагриппа, вируса болезни Ауески, западного энцефаломиелита лошадей, венесуэльского энцефаломиелита лошадей, респираторно-синцитиального вируса.

5. Способ получения противовирусного средства в таблетках, осуществляемый с использованием активного вещества, физиологически приемлемых вспомогательных добавок: наполнителя, разрыхлителя, антифрикционного вещества, смазывающего вещества и защитной оболочки и включающий увлажнение, последующее влажное гранулирование, сушку, сухое гранулирование, опудривание, таблетирование и нанесение пленочного покрытия, отличающийся тем, что при смешивании активного вещества, наполнителя, разрыхлителя проводят влажное гранулирование массы, после которого осуществляют первичную протирку увлажненной массы через перфорированное устройство, сушат, при этом сушку проводят до остаточной влажности не более 0,5%; затем осуществляют вторичную протирку через перфорированное устройство, после чего полученный гранулят опудривают смесью талька, аэросила и стеарата магния, затем таблетируют и покрывают защитной оболочкой, при этом в качестве активного вещества используют натриевую соль 2-метил-6-нитро-1,2,4-триазоло[5,1-с]-1,2,4-триазин-7-она, дигидрат, в качестве наполнителя - крахмал картофельный и/или лактозу, в качестве разрыхлителя - гидроксипропилцеллюлозу с низкой степенью замещения и/или микрокристаллическую целлюлозу; в качестве антифрикционных веществ - тальк и аэросил; в качестве смазывающего компонента - стеарат магния; в качестве вещества для образования защитной оболочки - гипромеллозу, при следующем соотношении компонентов, мас.%:
Натриевая соль 2-метил-6-нитро-1,2,4-триазоло [5,1 -с]-1,2,4-триазин-7-она, дигидрат 60,0-90,0 Крахмал картофельный и/или лактоза 1,0-20,0 Гидроксипропилцеллюлоза с низкой степенью замещения и/или микрокристаллическая целлюлоза 0,5-20,0 Аэросил 0,2-3,0 Стеарат магния 0,2-3,0 Тальк 0,2-2,5 Гипромеллоза 1,0-10,0

6. Способ получения по п.5, отличающийся тем, что при проведении влажного гранулирования используют 5%-ный крахмальный клейстер.

7. Способ получения по п.5, отличающийся тем, что используют натриевую соль 2-метил-6-нитро-1,2,4-триазоло[5,1-с]-1,2,4-триазин-7-она, дигидрат, размер частиц которой находится в интервале 0,1-0,6 мм.

8. Способ получения по п.5, отличающийся тем, что в качестве перфорированного устройства используют перфорированную пластину.

9. Способ получения по п.7, отличающийся тем, что первичную протирку осуществляют через перфорированную пластину с отверстиями 1,5 мм.

10. Способ получения по п.7, отличающийся тем, что при вторичной протирке используют перфорированную пластину с отверстиями 0,5 мм.

Документы, цитированные в отчете о поиске Патент 2012 года RU2446802C2

ПРОТИВОВИРУСНЫЙ ПРЕПАРАТ "АМИКСИН" И СПОСОБ ЕГО ПОЛУЧЕНИЯ 1998
  • Поплавский А.Н.
  • Дюмаев К.М.
  • Кузнецов А.В.
  • Шмельков Ю.А.
  • Козлов В.А.
  • Семенова Г.К.
RU2141314C1
НАТРИЕВАЯ СОЛЬ 2-МЕТИЛТИО-6-НИТРО-1,2-4-ТРИАЗОЛО[5,1-C]-1,2,4-ТРИАЗИН-7(4H)-ОНА, ДИГИДРАТ, ОБЛАДАЮЩАЯ ПРОТИВОВИРУСНОЙ АКТИВНОСТЬЮ 2005
  • Чупахин Олег Николаевич
  • Русинов Владимир Леонидович
  • Уломский Евгений Нарциссович
  • Чарушин Валерий Николаевич
  • Петров Александр Юрьевич
  • Киселев Олег Иванович
RU2294936C1
2-R-4-(АЛЛИЛОКСИМЕТИЛ)-6-НИТРО-1,2,4-ТРИАЗОЛО[5,1-С]-1,2,4-ТРИАЗИН-7(4Н)-ОНЫ И 2-R-4-(ПРОПАРГИЛОКСИМЕТИЛ)-6-НИТРО-1,2,4-ТРИАЗОЛО[5,1-С]-1,2,4-ТРИАЗИН7(4Н)-ОНЫ, ОБЛАДАЮЩИЕ ПРОТИВОВИРУСНЫМ ДЕЙСТВИЕМ 2006
  • Чупахин Олег Николаевич
  • Русинов Владимир Леонидович
  • Уломский Евгений Нарциссович
  • Деев Сергей Леонидович
  • Русинова Лариса Ивановна
  • Шестакова Татьяна Сергеевна
  • Киселев Олег Иванович
  • Деева Элла Германовна
RU2340614C2
4-((Z)-4'-ГИДРОКСИБУТЕН-2'-ИЛ)-2-R-6-ФЕНИЛ-1,2,4-ТРИАЗОЛО[5,1-c][1,2,4]ТРИАЗИН-7-ОНЫ 2008
  • Чупахин Олег Николаевич
  • Русинов Владимир Леонидович
  • Уломский Евгений Нарциссович
  • Чарушин Валерий Николаевич
  • Шестакова Татьяна Сергеевна
  • Деев Сергей Леонидович
  • Русинова Лариса Ивановна
  • Андронова Валерия Львовна
  • Галегов Георгий Артемьевич
  • Карпенко Инна Леонидовна
  • Ясько Максим Владимирович
  • Куханова Марина Константиновна
RU2376307C1

RU 2 446 802 C2

Авторы

Петров Александр Юрьевич

Сорокин Павел Владимирович

Шаблокова Анна Сергеевна

Даты

2012-04-10Публикация

2010-07-16Подача