СПОСОБ СОХРАНЕНИЯ ЖИЗНЕСПОСОБНЫХ КЛЕТОК КРОВИ ДЛЯ ХЕМИЛЮМИНЕСЦЕНТНЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ Российский патент 2012 года по МПК G01N33/48 G01N33/49 

Описание патента на изобретение RU2456595C2

Изобретение относится к биологии, а именно к иммунологии, и может быть использовано для хемилюминесцентного анализа в ветеринарии.

Для консервирования крови применяется Фаглюцид®, который используется в медицине только для консервации донорской крови, но не применяется в ветеринарии. Фаглюцид® раствор гемоконсерванта выпускается ОАО "Акционерное Курганское общество медицинских препаратов и изделий "Синтез". В 1 литре раствора содержится: аденин 0,34 г; декстроза (в пересчете на безводную) 30,0 г; лимонная кислота моногидрат 1,365 г; натрия ортофосфат додекагидрат 7,5 г; натрия цитрат (двузамещенный) 14,0 г; вода для инъекций до 1 л.

Из описанных в литературе наиболее близким к изобретению является патент RU 2280689 С2, от 05.05.2004 «Способ сохранения жизнеспособных лейкоцитов». Способ осуществляют следующим образом. Предварительно производят забор крови с 2,7% раствором трилоном Б (раствор натриевой соли этилендиаминтетрауксусной кислоты) в пробирки, обработанные 3% раствором полиметилсилоксановой жидкости в хлороформе. Разрушение эритроцитов осуществляют путем гипотонического лизиса. Центрифугируют при 1200 об/мин в течение 15 мин. Дополнительно лейкоциты отмывают 0,02% трилоном Б. Центрифугируют при вышеуказанном режиме, надосадочную жидкость сливают. Осадок суспензии клеток ресуспендируют в стабилизирующем растворе следующего состава; концентрат Хэнкса без фенолового красного в соотношении с водой 1:9.

Однако этот способ обладает следующими недостатками: соотношение объема 2,7% раствора трилона Б и крови крупного рогатого скота 1:10 обеспечивает необходимую для исследований концентрацию жизнеспособных лейкоцитов (90-95%) в течение четырех часов с момента взятия пробы крови (см. табл.1); трилон Б понижает содержание кальция в пробе крови, что приводит к искажению результатов исследования.

Целью изобретения является необходимость сохранить постоянство параметров клеток крови крупного рогатого скота и увеличить срок сохранения жизнеспособных лейкоцитов (90-95%) для проведении хемилюминесцентного анализа.

Поставленная цель достигается тем, что для консервирования крови используется гемоконсервант Фаглюцид®, который обеспечивает сохранение морфофункциональной полноценности крови крупного рогатого скота в течение 7 дней за счет поддержания физиологического уровня АТФ в эритроцитах, реологических свойств крови и величины рН на физиологическом уровне. Гемоконсервант Фаглюцид® смешивается с кровью в соотношении 1:6.

Способ осуществляют следующим образом. Производят забор крови в одноразовые пластиковые пробирки с гемоконсервантом Фаглюцидом® в соотношении 1:6, которые затем помещаются в изотермический контейнер с хладоэлементами и в таком виде доставляются в лабораторию. Заготовленная кровь хранится при температуре от 2 до 6°С.

Использование данного способа позволяет транспортировать кровь из отдаленных регионов для диагностических исследований в лаборатории. Использование Фаглюцида® в качестве гемоконсерванта в соотношении 1:6 позволяет повысить срок сохранения жизнеспособных лейкоцитов в концентрации 90-95% в течение 168 часов с момента взятия крови (см. табл.2), что в 42 раза превосходит показатели при использовании трилона Б.

Похожие патенты RU2456595C2

название год авторы номер документа
СПОСОБ ВЫДЕЛЕНИЯ ЛЕЙКОЦИТОВ КРОВИ ДЛЯ ХЕМИЛЮМИНЕСЦЕНТНОГО АНАЛИЗА 2002
  • Дюсенова Г.М.
  • Ощепков В.Г.
RU2232395C2
Способ прижизненной диагностики туберкулёза крупного рогатого скота 2020
  • Дюсенова Гульзайра Мухамеджановна
RU2738133C1
СПОСОБ ПРИЖИЗНЕННОЙ ДИАГНОСТИКИ ТУБЕРКУЛЕЗА 2004
  • Дюсенова Гульзайра Мухамеджановна
  • Ощепков Владимир Григорьевич
RU2296334C2
СПОСОБ ПРИЖИЗНЕННОЙ ДИАГНОСТИКИ ТУБЕРКУЛЕЗА 2008
  • Ощепков Владимир Григорьевич
  • Дюсенова Гульзайра Мухамеджановна
RU2389020C2
КРИОПРОТЕКТОР ДЛЯ ЦЕЛЬНОЙ КРОВИ 2023
  • Андрусенко Светлана Федоровна
  • Власов Александр Александрович
  • Рыбчинская Эльвира Евгеньевна
  • Сорокина Ульяна Евгеньевна
RU2816446C1
СПОСОБ ОТБОРА КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА НА УСТОЙЧИВОСТЬ К ТУБЕРКУЛЕЗУ 1995
  • Захаров В.М.
  • Орлова А.Р.
RU2080061C1
СПОСОБ СОХРАНЕНИЯ ЖИЗНЕСПОСОБНЫХ ЛЕЙКОЦИТОВ КРОВИ 2004
  • Дюсенова Гульзайра Мухамеджановна
  • Ощепков Владимир Григорьевич
RU2280689C2
СПОСОБ ПОДГОТОВКИ БИОМАТЕРИАЛА ДЛЯ ПЦР ДИАГНОСТИКИ ВИРУСА ЛЕЙКОЗА КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА (ВЛ КРС) 2013
  • Шкуратова Ирина Алексеевна
  • Донник Ирина Михайловна
  • Хрунык Юлия Ярославовна
  • Ряпосова Марина Витальевна
  • Татарчук Александр Терентьевич
  • Шилова Евгения Николаевна
  • Вялых Иван Владимирович
  • Петропавловский Максим Валерьевич
RU2566071C2
Способ послеубойной диагностики лейкоза крупного рогатого скота 2020
  • Мустафаев Аркиф Рамазанович
RU2744706C1
Способ диагностики инфицированности плодов овец вирусом лейкоза крупного рогатого скота 1989
  • Бурба Леонтий Григорьевич
  • Гулюкин Михаил Иванович
  • Иванова Людмила Александровна
  • Колина Светлана Викторовна
  • Васин Алексей Владимирович
  • Кудрявцева Людмила Александровна
SU1703120A1

Реферат патента 2012 года СПОСОБ СОХРАНЕНИЯ ЖИЗНЕСПОСОБНЫХ КЛЕТОК КРОВИ ДЛЯ ХЕМИЛЮМИНЕСЦЕНТНЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ

Изобретение относится к биологии, а именно к иммунологии, и может быть использовано для хемилюминесцентного анализа в ветеринарии. Способ сохранения жизнеспособных клеток крови для хемилюминесцентных исследований включает взятие пробы крови и ее консервирование, причем забор крови проводят в одноразовые пластиковые пробирки и в качестве гемоконсерванта используют Фаглюцид® в соотношении 1:6, заготовленная кровь хранится при температуре от 2 до 6°С. Способ обеспечивает увеличение срока сохранения жизнеспособных лейкоцитов (90-95%) для проведении хемилюминесцентного анализа, сохранение морфофункциональной полноценности и реологических свойств крови крупного рогатого скота в течение 168 часов и величины рН на физиологическом уровне, что позволяет транспортировать кровь для диагностических исследований из отдаленных регионов в лаборатории. 2 табл.

Формула изобретения RU 2 456 595 C2

Способ сохранения жизнеспособных клеток крови для хемилюминесцентных исследований, включающий взятие пробы крови и ее консервирование, отличающийся тем, что забор крови проводят в одноразовые пластиковые пробирки и в качестве гемоконсерванта используют Фаглюцид® в соотношении 1:6, заготовленная кровь хранится при температуре от 2 до 6°С.

Документы, цитированные в отчете о поиске Патент 2012 года RU2456595C2

СПОСОБ СОХРАНЕНИЯ ЖИЗНЕСПОСОБНЫХ ЛЕЙКОЦИТОВ КРОВИ 2004
  • Дюсенова Гульзайра Мухамеджановна
  • Ощепков Владимир Григорьевич
RU2280689C2
СПОСОБ ВЫДЕЛЕНИЯ ЛЕЙКОЦИТОВ КРОВИ ДЛЯ ХЕМИЛЮМИНЕСЦЕНТНОГО АНАЛИЗА 2002
  • Дюсенова Г.М.
  • Ощепков В.Г.
RU2232395C2
Способ консервирования лейкоцитов крови 1977
  • Луговой Владимир Иосифович
  • Кравченко Лидия Петровна
  • Полякова Анна Ильинична
  • Лобынцева Галина Степановна
SU645633A1

RU 2 456 595 C2

Авторы

Дюсенова Гульзайра Мухамеджановна

Ощепков Владимир Григорьевич

Слепченко Андрей Дмитриевич

Даты

2012-07-20Публикация

2010-10-04Подача