СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ АТОПИЧЕСКОГО ДЕРМАТИТА У ДЕТЕЙ Российский патент 2012 года по МПК G01N33/50 G01N33/49 

Описание патента на изобретение RU2459210C1

Изобретение относится к медицине, конкретно к дерматологии, и касается способа диагностики атопического дерматита у детей.

Структурно-функциональной единицей живого организма является клетка, основу функционирования которой определяет клеточная мембрана. Клеточная мембрана обеспечивает избирательное проникновение в клетку и из нее молекул и ионов, необходимых для выполнения специфических функций клетки, поддерживает трансмембранную разницу электрического потенциала, специфику межклеточных контактов. Перенос ионов через клеточную мембрану с помощью переносчиков белковой структуры, включающий активный транспорт и облегченную диффузию, является неотъемлемой частью жизнедеятельности всех клеток организма человека в норме и при патологии. Изменение ионного транспорта связано с патологией атопического дерматита у детей. Одной из ион-транспортных систем является натрий-литиевый противотранспорт (НЛПТ) через мембрану эритроцита.

Поиск патентной и научной литературы показал, что в настоящее время ближайших аналогов этому способу диагностики атопического дерматита у детей не имеется.

Известен способ определения гиперчувствительности фагоцитов к гистамину у больных атопическим дерматитом по заявке №94036342. Однако данный способ как аналог отдаленный, близких обнаружить не удалось.

Техническим результатом является создание способа, позволяющего диагностировать атопический дерматит у детей по скорости натрий-литиевого противотранспорта в мембране эритроцитов.

Проницаемость мембраны эритроцитов для натрия оценивают по максимальной скорости натрий-литиевого противотранспорта в эритроцитах.

Способ диагностики осуществляется следующим образом.

Кровь в количестве трех миллилитров забирают утром из вены ребенка в смоченные гепарином с фосфатным буфером (20 ЕД на 1 мл крови) пластиковые пробирки. Содержимое перемешивают и пробирки немедленно помещают в контейнер с тающим льдом. Эритроциты осаждают на рефрижераторной центрифуге с вертикальным ротором при достижении 3000g в течение 5 минут, далее плазму и эритроциты удаляют путем отсасывания. Эритроциты дважды промывают трехкратным объемом холодной среды промывки (температура тающего льда), 0,25 мл упакованных эритроцитов помещают в 1,25 мл в следующую среду при 37°С и предынкубируют 3 часа при той же температуре с периодическим встряхиванием автоматически каждые 15 минут по 15 секунд, суспензию осаждают и для удаления наружного лития эритроциты промывают 4 раза 4-кратным объемом среды промывки; в этот период происходит выход лития в натриевую и безнатриевую (магниевую) среды за счет обмена лития на натрий и магний, осуществляемого благодаря работе белка-переносчика в условиях ингибирования натрий-калиевой АТФ-азы уабином. Упакованные эритроциты по 0,1 мл переносят в среду 1 мл, свободную от натрия, фактически это среда промывки, содержащая изоосмотическую смесь MgCl2 и сахарозы, но с добавлением 0,1 мМ уабаина и в среду, богатую натрием, содержащая (мМ): 150 - NaCl; 10 - глюкоза; 10 - HEPES-трис (рН 7,4); 0,1 уабаин, инкубацию продолжают 60 минут при температуре 37 градусов Цельсия с периодическим встряхиванием. На 60 минуте инкубации отбирают 0,45 мл суспензии эритроцитов из обеих сред, производят центрифугирование в течение двух минут, надосадочную жидкость (супернатант) в количестве 0,3 мл осторожно набирают и разбавляют в 3 раза тридистилированной водой. Измерение содержания лития в магниевой и натриевой средах проводят методом атомной абсорбционной спектрофотометрии в режиме эмиссии на спектрофотометре СА-455. Калибровочные растворы готовят на средах инкубации с учетом разведения пробы. Используют следующие параметры аппаратуры: длина волны 670,6 нм, состав пламени - ацетилен-воздух, стехиометрия пламени - окисляющая, чувствительность 10-7 моль/литр. Программа измерения концентрации элемента в исследуемом растворе в эмиссионном режиме состоит в сравнении интенсивности светового потока эталонного раствора известной концентрации с интенсивностью потока исследуемого раствора. Информация со спектрофотометра поступает на специализированное вычислительное устройство «Электроника ДЗ-28», которое вычисляет концентрацию исследуемого элемента, а результаты выдает на цифровое табло. Скорость натрий-литиевого противотранспорта (V) в микромолях лития на 1 литр клеток в час определяют как разность между концентрацией лития в среде, богатой натрием, и в среде, свободной от натрия, через 60 минут инкубации по формуле V=(ANa-AMg)*К, где К (коэффициент) = 33. И при значении скорости натрий-литиевого противотранспорта в мембране эритроцита, превышающем 258 mkM Li/л кл./час, диагностируют атопический дерматит у детей.

Клинические примеры

Пример 1. Больной Н. 13 лет. Обратился с жалобами на высыпания на коже. Диагноз при поступлении в стационар - псевдоаллергическая (неспецифическая) форма аллергии, стадия обострения. Скорость натрий-литиевого противотранспорта в мембране эритроцита на второй день госпитализации составила 347 микромоль лития на литр клеток в час. Через 97 дней, т.е. в условиях полной смены популяции эритроцитов, скорость натрий-литиевого противотранспорта составила 344 микромоль лития на литр клеток в час. Клинический диагноз - атопический дерматит.

Пример 2. Больной Т. 12 лет. Диагноз при поступлении в стационар - неинфекционно-аллергическая форма дерматита, стадия обострения. Скорость натрий-литиевого противотранспорта в мембране эритроцита на второй день госпитализации составила 361 микромоль лития на литр клеток в час. Через 102 дня, т.е. в условиях полной смены популяции эритроцитов, скорость натрий-литиевого противотранспорта составила 363 микромоль лития на литр клеток в час. Диагноз - атопический дерматит.

Таким образом, предлагаемый способ увеличивает эффективность диагностики атонического дерматита путем повышения точности и объективности диагностики по скорости натрий-литиевого противотранспорта в мембране эритроцитов.

Способ апробирован в стационарном отделении клиники КГМУ и может найти широкое клиническое применение в медицинской практике и эффективно использоваться в дерматологии.

Источники информации

1. Мачарадзе Д.Ш. Роль пищевой аллергии при атопическом дерматите у детей. Педиатрия. №4, 2004.

2. Заявка №94036342.

3. Патент 2282857.

4. Патент 2239837.

Похожие патенты RU2459210C1

название год авторы номер документа
СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ АТОПИЧЕСКОГО ДЕРМАТИТА У ДЕТЕЙ 2012
  • Газиев Айрат Рифович
  • Вахитов Хаким Муратович
  • Ослопов Владимир Николаевич
  • Шамов Булат Альфредович
  • Хазова Елена Владимировна
  • Газиева Эллина Гумаровна
  • Данилушкина Елена Алексеевна
  • Минуллин Искандэр Кагапович
  • Файзуллина Резеда Абдулахатовна
  • Бильдюк Евгения Владимировна
  • Газиев Эдгар Айратович
  • Корейба Константин Александрович
  • Кыртымова Айсель Нусратовна
  • Мамяшева Диана Шамилевна
RU2521400C2
Способ диагностики тяжелых форм псориаза у взрослых 2017
  • Газиев Айрат Рифович
  • Ослопов Владимир Николаевич
  • Мустафин Ильшат Ганиевич
  • Вахитов Хаким Муратович
  • Хасанов Нияз Рустемович
  • Газиева Эллина Гумаровна
  • Газиев Эдгар Айратович
  • Газиев Ренат Айратович
RU2661610C1
СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ ТЯЖЕЛЫХ ФОРМ ПСОРИАЗА У ВЗРОСЛЫХ 2014
  • Газиев Айрат Рифович
  • Корейба Константин Александрович
  • Мустафин Ильшат Ганиевич
  • Хасанов Нияз Рустемович
  • Минуллин Искандер Кагапович
  • Бильдюк Евгения Владимировна
  • Тимофеева Аделия Геннадьевна
  • Макаров Максим Анатольевич
  • Сафина Фирдавез Габдулловна
  • Егорова Ольга Викторовна
  • Андрианова Ольга Николаевна
  • Савельев Геннадий Иванович
  • Газиев Эдгар Айратович
  • Набиуллина Роза Муллаяновна
  • Газиева Эллина Гумаровна
  • Хазова Елена Владимировна
  • Чугунова Диана Наилевна
RU2586291C1
СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ ПСОРИАЗА 2014
  • Газиев Айрат Рифович
  • Ослопов Владимир Николаевич
  • Шамов Булат Альфредович
  • Мустафин Ильшат Ганиевич
  • Вахитов Хаким Муратович
  • Корейба Константин Александрович
  • Хасанов Нияз Рустемович
  • Минуллин Искандер Кагапович
  • Бильдюк Евгения Владимировна
  • Тимофеева Аделия Геннадьевна
  • Макаров Максим Анатольевич
  • Сафина Фирдавез Габдулловна
  • Савельев Геннадий Иванович
  • Газиев Эдгар Айратович
  • Набиуллина Роза Муллаяновна
  • Газиева Эллина Гумаровна
  • Чугунова Диана Наилевна
RU2594250C2
СПОСОБ ОЦЕНКИ ВЛИЯНИЯ ЛЕКАРСТВЕННЫХ ВЕЩЕСТВ НА ПРОНИЦАЕМОСТЬ КЛЕТОЧНЫХ МЕМБРАН ПО НАТРИЮ 2012
  • Ослопов Владимир Николаевич
  • Орлова Ольга Валериановна
RU2494403C2
СПОСОБ ИНДИВИДУАЛЬНОГО ПРОГНОЗИРОВАНИЯ РАЗВИТИЯ СОЧЕТАННЫХ ФОРМ АТОПИЧЕСКОГО ДЕРМАТИТА У ДЕТЕЙ 2005
  • Шамов Булат Альфредович
  • Шамова Афина Гумеровна
  • Газиев Айрат Рифович
  • Газиева Эллина Гумаровна
RU2297796C1
Способ диагностики у школьников атопического дерматита, ассоциированного с комплексным воздействием техногенных химических соединений: формальдегида и бенз(а)пирена, с наличием негативных факторов образовательной среды и образа жизни и с нарушением структуры питания 2022
  • Валина Светлана Леонидовна
  • Штина Ирина Евгеньевна
  • Макарова Венера Галимзяновна
  • Кобякова Ольга Алексеевна
  • Маклакова Ольга Анатольевна
  • Устинова Ольга Юрьевна
RU2784352C1
СПОСОБ ЛЕЧЕНИЯ ДЕРМАТОЗОВ И ДЕЗИНТОКСИКАЦИОННОЕ СРЕДСТВО ДЛЯ НЕГО 2013
  • Попилов Михаил Андреевич
  • Газиев Айрат Рифович
  • Ослопов Владимир Николаевич
  • Вахитов Хаким Муратович
  • Корейба Константин Александрович
  • Шамов Булат Альфредович
  • Юсупова Луиза Афгатовна
  • Гараева Зухра Шамильевна
  • Мустафин Ильшат Ганиевич
  • Минуллин Искандер Каганович
  • Бильдюк Евгения Владимировна
  • Чугунова Диана Наилевна
  • Сафина Фирдавез Габдулловна
  • Егорова Ольга Викторовна
  • Андрианова Ольга Николаевна
  • Савельев Геннадий Иванович
  • Газиева Эллина Гумаровна
RU2558827C2
НОВЫЙ ЛИГАНД РЕЦЕПТОРА ЦИТОКИНА ZCYTOR17 2003
  • Спрешер Синди А.
  • Кейпер Йозеф Л.
  • Дасович Мария М.
  • Грант Фрэнсис Дж.
  • Хэммонд Анджела К.
  • Новак Джулия Е.
  • Гросс Джейн А.
  • Диллон Стейси Р.
RU2490276C2
АНТИТЕЛА К OX40L И СПОСОБЫ ИХ ПРИМЕНЕНИЯ 2006
  • Мартин Флейвиус
RU2426744C2

Реферат патента 2012 года СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ АТОПИЧЕСКОГО ДЕРМАТИТА У ДЕТЕЙ

Изобретение относится к медицине, конкретно к дерматологии, и касается способа диагностики атопического дерматита у детей. Сущность способа заключается в том, что осуществляют забор венозной крови ребенка, далее эритроциты осаждают и промывают холодной средой промывки, предынкубируют 3 часа при 37°С, суспензию осаждают и промывают эритроциты для удаления наружного лития. Далее эритроциты по 0,1 мл переносят в среду 1 мл, свободную от натрия, инкубируют при температуре 37°С, на 60 минуте инкубации отбирают суспензию эритроцитов, производят центрифугирование в течение двух минут, супернатант осторожно набирают и разбавляют тридистилированной водой, измерение содержания лития в магниевой и натриевой средах проводят методом атомной абсорбционной спектрофотометрии в режиме эмиссии на спектрофотометре и при величине скорости натрий-литиевого противотранспорта в мембране эритроцита, превышающей 258 mkM Li/л.кл./час, диагностируют атопический дерматит у детей. Использование способа позволяет с высокой точностью диагностировать атопический дерматит у детей. 2 пр.

Формула изобретения RU 2 459 210 C1

Способ диагностики атопического дерматита у детей, включающий забор крови и исследование эритроцитов, отличающийся тем, что кровь в количестве трех миллилитров забирают утром из вены ребенка в смоченные гепарином с фосфатным буфером (20 ед. на 1 мл крови) пластиковые пробирки, перемешивают и пробирки немедленно помещают в контейнер с тающим льдом, эритроциты осаждают на рефрижераторной центрифуге с вертикальным ротором при достижении 3000 g в течение 5 мин, далее плазму и эритроциты удаляют путем отсасывания, эритроциты дважды промывают трехкратным объемом холодной среды промывки (температура тающего льда), 0,25 мл упакованных эритроцитов помещают в 1,25 мл в следующую среду при температуре 37°С и прединкубируют 3 ч при той же температуре с периодическим встряхиванием автоматически каждые 15 мин по 15 с, суспензию осаждают и для удаления наружного лития эритроциты промывают 4 раза 4-кратным объемом среды промывки; в этот период происходит выход лития в натриевую и безнатриевую (магниевую) среды за счет обмена лития на натрий и магний, осуществляемого благодаря работе белка-переносчика в условиях ингибирования натрий-калиевой АТФ-азы уабином, упакованные эритроциты по 0,1 мл переносят в среду 1 мл, свободную от натрия, фактически это среда промывки, содержащая изоосмотическую смесь MgCl2 и сахарозы, но с добавлением 0,1 мМ уабаина и в среду, богатую натрием, содержащая (мМ): 150 - NaCl; 10 - глюкоза; 10 - HEPES-трис (рН 7,4); 0,1 уабаин, инкубацию продолжают 60 мин при температуре 37°С с периодическим встряхиванием, на 60 мин инкубации отбирают 0,45 мл суспензии эритроцитов из обеих сред, производят центрифугирование в течение двух минут, надосадочную жидкость (супернатант) в количестве 0,3 мл осторожно набирают и разбавляют в 3 раза тридистилированной водой, измерение содержания лития в магниевой и натриевой средах проводят методом атомной абсорбционной спектрофотометрии в режиме эмиссии на спектрофотометре СА-455, калибровочные растворы готовят на средах инкубации с учетом разведения пробы, используют следующие параметры аппаратуры: длина волны 670,6 нм, состав пламени - ацетилен-воздух, стехиометрия пламени - окисляющая, чувствительность 10-7 моль/л; программа измерения концентрации элемента в исследуемом растворе в эмиссионном режиме состоит в сравнении интенсивности светового потока эталонного раствора известной концентрации с интенсивностью потока исследуемого раствора, информация со спектрофотометра поступает на специализированное вычислительное устройство «Электроника ДЗ-28», которое вычисляет концентрацию исследуемого элемента, а результаты выдает на цифровое табло, скорость натрий-литиевого противотранспорта (V) в микромолях лития на 1 л клеток в час определяют как разность между концентрацией лития в среде, богатой натрием, и в среде, свободной от натрия через 60 мин инкубации по формуле V=(ANa-AMg)·K, где К(коэффициент)=33, ANa - 468 mkM Li/л.кл./ч; AMg - 210 mkM Li/л.кл./ч, при этом при величине скорости натрий-литиевого противотранспорта в мембране эритроцита, превышающей 258 mkM Li/л.кл./ч диагностируют атопический дерматит у детей.

Документы, цитированные в отчете о поиске Патент 2012 года RU2459210C1

МАЧАРАДЗЕ Д.Ш
Атопический дерматит у детей: руководство / - М., ГЭОТАР-медиа, 2007, 384 с
СПОСОБ ОЦЕНКИ ТЯЖЕСТИ ТЕЧЕНИЯ СОЧЕТАННЫХ ФОРМ АТОПИЧЕСКОГО ДЕРМАТИТА У ДЕТЕЙ 2005
  • Шамов Булат Альфредович
  • Шамова Афина Гумеровна
  • Газиев Айрат Рифович
RU2282857C1
СПОСОБ ОЦЕНКИ СТЕПЕНИ ТЯЖЕСТИ АТОПИЧЕСКОГО ДЕРМАТИТА У ДЕТЕЙ РАННЕГО ВОЗРАСТА 2001
  • Филиппов Н.Е.
  • Сучкова Г.Д.
  • Шиляев Р.Р.
  • Чемоданов В.В.
  • Фадеева О.Ю.
RU2203491C2

RU 2 459 210 C1

Авторы

Файзуллина Резеда Абдулахатовна

Ослопов Владимир Николаевич

Шамов Булат Альфредович

Газиева Эллина Гумаровна

Шахтарин Артем Викторович

Сибгатуллина Амина Касимовна

Вахитов Хаким Муратович

Газиев Айрат Рафович

Данилушкина Елена Алексеевна

Даты

2012-08-20Публикация

2011-05-30Подача