СПОСОБ ПРОГНОЗА ФОРМИРОВАНИЯ ЭССЕНЦИАЛЬНОЙ АРТЕРИАЛЬНОЙ ГИПЕРТЕНЗИИ У ЖЕНЩИН С ГИПЕРТЕНЗИВНЫМИ НАРУШЕНИЯМИ ПРИ БЕРЕМЕННОСТИ Российский патент 2013 года по МПК G01N33/53 

Область применения

Изобретение относится к области медицины, а именно к акушерству и гинекологии. Может быть использовано в терапии и кардиологии.

Артериальная гипертония (АГ) является одной из важнейших проблем мирового сообщества в целом и России, в частности. Распространенность эссенциальной АГ среди женщин России достигает 40,4% [4]. Эссенциальная АГ является наиболее значимой соматической патологией, играющей важную роль в структуре причин материнской и перинатальной заболеваемости и смертности [2, 3]. Эссенциальная АГ, или АГ, возникшая впервые при беременности (изолированно или в рамках преэклампсии), прежде всего нарушает состояние внутриутробного плода и негативно влияет на здоровье женщины [6]. Также повышенное артериальное давление (АД) является основным фактором риска сердечно-сосудистых заболеваний (ССЗ), не просто ухудшая качество здоровья женщины в следующие периоды жизни, а нередко приводя к инвалидизации. Показано, что процесс исчезновения такого симптома преэклампсии как АГ может продолжаться в течение 2-х и более лет после завершения беременности (у женщин, которые до беременности имели нормальные значения АД) [5].

Таким образом, необходим поиск предпосылок для формирования АГ как в период гестации, так и после его завершения у женщин репродуктивного возраста. Тестирование генов, контролирующих уровень АД, и свертывающей системы крови у женщин репродуктивного возраста может быть рекомендовано не только для прогнозирования осложнений беременности и разработки способов их профилактики, но и для прогнозирования наследственного риска развития эссенциальной АГ у данной категории пациенток в другие периоды жизни.

Уровень техники

Аналогом предлагаемого изобретения является прогнозирование развития эссенциальной АГ при помощи проведения молекулярно-генетических исследований полиморфизмов генов кинин-брадикининовой системы. Проведены исследования, доказывающие связь полиморфизма (-58Т>С) в гене BKR2 (ген рецептора 2 к брадикинину) с формированием хронической AГ [8].

Прототипом предлагаемого изобретения является генетическое тестирование, направленное на определение полиморфизмов генов ренин-ангиотензиновой системы: ACE инсерционно-делеционный (I/D) полиморфизм в интроне гена ACE (ангиотензин-превращающий фермент) и полиморфизм - 5312 С/Т в гене ReN ренина. Во многих исследованиях была показана ассоциация этих полиморфизмов с развитием эссенциальной АГ [1, 9, 10].

Эти исследования позволяют с высокой степенью достоверности определить предрасположенность к формированию эссенциальной АГ, но направлены на изучение только одного механизма повышения уровня АД.

Для повышения точности прогноза развития эссенциальной АГ необходимо учитывать отягощенную наследственность по развитию ССЗ, особенно в молодом возрасте, и особенности течения беременностей у женщин репродуктивного возраста.

Сущность изобретения

Цель изобретения заключается в разработке способа прогноза развития эссенциальной АГ у женщин репродуктивного возраста, имевших гипертензивные нарушения в период гестации.

Способ осуществляют следующим образом. У женщин, имевших гипертензивные нарушения при беременности, выявляют отягощенную наследственность по развитию ССЗ в молодом возрасте (для мужчин - до 55 лет; для женщин - до 65 лет). Уточняют наличие преэклампсии средней или тяжелой степени тяжести и/или ее раннее начало (20-30 недель беременности). Далее проводят забор буккального эпителия для получения образцов ДИК с использованием набора реагентов и протоколов для выделения ДНК из различного биологического материала фирмы ООО «НПО ДНК-Технология». Для оценки количества геномной ДНК человека и контроля используют комплект КМВ (комплект реагентов для ПЦР-амплификации геномной ДНК человека в режиме «реального времени») производства ООО НПО «ДНК-Технология» (Россия, регистрационное удостоверение МЗ СР РФ ФСР №2010/08412). Далее на полученных образцах проводят полимеразную цепную реакцию (ПЦР) в режиме «реального времени» с использованием комплектов реагентов и протоколов фирмы ООО «НПО ДНК-Технология» (Россия, регистрационное удостоверение МЗ СР РФ ФСР №2007/01250). Детекция и анализ результатов осуществляются на приборе ДТ-96 (Россия, регистрационное удостоверение МЗ СР РФ ФСР №2007/01250).

Для достижения поставленной цели проводят исследование полиморфизмов генов-кандидатов, регулирующих уровень АД и сосудистый тонус, и генетических полиморфизмов, ассоциированных с риском развития тромбофилии.

Наиболее информативными оказались следующие полиморфизмы:

1. AGTR2 - полиморфизм 1675G>A в гене AGTR2 (рецептора 2-го типа к ангиотензину II);

2. ITGB3 - полиморфизм 1565 Т>С в гене ITGB3 (рецептора тромбоцитарного гликопротеина GPIIIa/IIb);

3. ITGA2 - полиморфизм 807 Т>С в гене ITGA2 (α-2интегрина, тромбоцитарного рецептора к коллагену).

При математической обработке данных (дискриминантный анализ) было сформировано решающее правило прогнозирования развития эссенциальной АГ у женщин репродуктивного возраста на основании алгоритма распознавания, имеющего следующий вид:

D=1,68×OH+0,71×ITGB3+0,60×AGTR2-0,61×ITGA2+0,56×П+1,53×АГ-2,25,

где D - прогностический индекс;

- OH - наличие у пациентки отягощенной наследственности по развитию ССЗ в молодом возрасте: OH=1 - наследственность отягощена; OH=0 - наследственность не отягощена;

- ITGB3 - наличие полиморфизма 1565 Т>С в гене ITGB3:

ITGB3=1 - наличие аллеля 1565С в гомозиготном состоянии (СС);

ITGB3=2 - наличие аллеля 1565С в гетерозиготном состоянии (ТС);

ITGB3=0 - наличие аллеля 1565Т в гомозиготном состоянии (ТТ);

- AGTR2 - наличие полиморфизма 1675G>A в гене AGTR2:

AGTR2=1 - наличие аллеля 1675А в гомозиготном состоянии (АА);

AGTR2=2 - наличие аллеля 1675А в гетерозиготном состоянии (GA);

AGTR2=0 - наличие аллеля 1675G в гомозиготном состоянии (GG);

- ITGA2 - наличие полиморфизма C807C>Т:

ITGA2=1 - наличие аллеля 807Т в гомозиготном состоянии (ТТ);

ITGA2=2 - наличие аллеля 807Т в гетерозиготном состоянии (СТ);

ITGA2=0 - наличие аллеля 807С в гомозиготном состоянии (СС);

- П - наличие у пациентки в анамнезе преэклампсии средней и тяжелой степени тяжести и/или ее раннего начала: П=1 - есть; П=0 - нет;

- AT - наличие у пациентки в анамнезе эпизодов повышения АД до 140/90 мм рт.ст. при клинических измерениях: АГ=1 - есть; АГ=0 - нет.

Далее установлено, что при D>0 имеет место высокий риск формирования эссенциальной АГ, при D<0 у пациенток отсутствует риск развития эссенциальной АГ.

Чувствительность метода составляет 86%, специфичность - 83,6%, эффективность - 84,5%.

Клинический пример 1

Больная П., 33 года. В анамнезе 1 регрессирующая беременность в сроке 8 недель и преждевременные оперативные роды в сроке 30-31 неделя беременности по поводу преэклампсии тяжелой степени тяжести. По материнской линии имеет отягощенную наследственность в плане развития ССЗ в молодом возрасте: бабушка перенесла 2 инсульта в возрасте 45 и 52 лет, страдала АГ, умерла в 56 лет. Мать пациентки страдает эссенциальной АГ с 30 лет. В течение 5 лет перед обращением в институт у пациентки регистрировались эпизоды повышения АД до 140/90 мм рт.ст. Не обследовалась, антигипертензивные препараты не принимала. При проведении суточного мониторирования АД выявлена АГ I степени по уровню систолического АД и II степени по уровню диастолического АД. При проведении генетического тестирования были получены следующие результаты: ITGA2: 807 CT; ITGB3: 1565 ТТ; AGTR2: 1675 GA.

При расчете прогноза развития АГ по формуле:

D=1,68×1+0,71×0+0,60×2+0,61×2+0,56×1+1,53×1-2,25=3,94.

Таким образом, у пациентки D>0, то есть имеет место высокий риск формирования эссенциальной АГ, что было подтверждено при дальнейшем наблюдении.

Клинический пример 2

Больная С., 27 лет. В анамнезе 1 беременность, закончившаяся срочными родами в 39-40 недель. При данной беременности имела место гестационная АГ, по поводу которой назначались антигипертензивные препараты. У родителей эссенциальная АГ: у матери с 30 лет; у отца после 40 лет. Пациентке проведено генетическое тестирование, получены следующие результаты: ITGA2: 807 ТТ; ITGB3: 1565 ТС; AGTR2: 1675 АА.

При расчете прогноза развития АГ по формуле:

D=1,68×1+0,71×2+0,60×1+0,61×1+0,56×1+1,53×1-2,25=4,15.

Таким образом, у пациентки D>0, то есть имеет место высокий риск формирования эссенциальной АГ.

Клинический пример 3

Больная М., 36 лет. В анамнезе 3 срочных родов и 1 регрессирующая беременность. Уровень АД в пределах нормальных значений. У родителей эссенциальная АГ после 60 лет. Пациентке проведено генетическое тестирование, получены следующие результаты: ITGA2: 807 СС; ITGB3: 1565 ТТ; AGTR2: 1675 GA.

При расчете прогноза развития АГ по формуле:

D=1,68×0+0,71×0+0,60×2+0,61×0+0,56×0+1,53×0-2,25=-1,05.

У данной пациентки D<0, то есть отсутствует высокий риск формирования эссенциальной АГ в репродуктивном возрасте и в следующие периоды жизни.

Таким образом, предлагаемый способ прогнозирования развития эссенциальной артериальной гипертензии в репродуктивном возрасте и в последующие периоды жизни у пациенток, имевших гипертензивные нарушения в период гестации, может быть использован в медицинской практике, несмотря на то что данное заболевание является многофакторным и в его развитии, кроме генетической предрасположенности, играют значение и многочисленные средовые воздействия.

Литература

1. Генетический паспорт - основа индивидуальной и предиктивной медицины. Под ред. Баранова B.C. СПб.: издательство Н-Л, 2009; 528 с.

2. Серов В.Н. Гестоз: современная лечебная тактика. Фарматека 2004; 1: 67-71.

3. Шалина Р.И. Гестоз. Современное состояние вопроса. Акушерство и гинекология 2007; 5: 27-32.

4. Шальнова С.А. Артериальная гипертония: распространенность, осведомленность, прием антигипертензивных препаратов и эффективность лечения среди населения Российской Федерации. Российский кардиологический журнал 2006; 6: 45-50.

5. Berks D., Steegers E.A.P., Molas M. et al. Resolution of Hypertension and Proteinuria After Preeclampsia. Obstet Gynecol. 2009; 114: 1307-1314.

6. Brown M.A., Hague W.M., Higgins J. et al. The detection, investigation and management of hypertension in pregnancy: executive summary. Consensus statement from the Australasian Society for the Study of Hypertension in Pregnancy. Am J Obstet Gynecol 2000; 40: 133-138.

7. Keavney В., McKenzie С., Parish S. et al. Large-scale test of hypothesized associations between the angiotensin-converting-ensime incertion/deletion polymorphism and myocardial infarction in about 5000 cases and 6000 controls. International Studies of Infarct Survival (ISIS) Collaborators. Lancet 2000; 355: 9202: 434-442.

8. Lifton R.P. Molecular mechanisms of human hypertension 2001; 104: 4: 545-556.

9. Moore N., Dicker P., O'Brien J.K. et al. Renin gene polymorphismis and haplotypes, blood pressure and responses to rennin-angiotensis system inhibition. Hypertension 2007; 50: 2: 340-347.

10. Naber C.K. Genetics of human arterial hypertension. Minerva. Med. 2004; 95: 5: 347-356.

Способ прогноза формирования эссенциальной артериальной гипертензии у женщин с гипертензивными нарушениями при беременности, имеющих отягощенную наследственность в плане развития ССЗ в молодом возрасте и эпизоды повышенного АД при случайных измерениях вне беременности на основании генетического тестирования. Сущность способа: проводят забор буккального эпителия для получения образцов ДНК, на которых проводят полимеразную цепную реакцию. По результатам анализов отбирают информативные признаки и вычисляют прогностический индекс D по формуле: D=1,68×OH+0,71×ITGB3+0,60×AGTR2-0,61×ITGA2+0,56×П+1,53×АГ-2,25. При D менее 0 судят об отсутствии риска развития эссенциальной артериальной гипертензии, а при D более 0 прогнозируют высокий риск развития эссенциальной артериальной гипертензии. 3 пр.

Способ прогноза формирования эссенциальной артериальной гипертензии у женщин репродуктивного возраста с гипертензивными нарушениями при беременности, отличающийся тем, что у пациенток с артериальной гипертензией в период гестации выявляют отягощенную наследственность по развитию сердечно-сосудистых заболеваний, наличие преэклампсии средней или тяжелой степени и/или ее раннее начало, проводят забор буккального эпителия для получения образцов ДНК, на полученных образцах проводят полимеразную цепную реакцию, по результатам анализов отбирают информативные признаки и вычисляют прогностический индекс D по формуле:
D=1,68·OH+0,71·ITGB3+0,60·AGTR2-0,61·ITGA2+0,56·П+1,53·АГ-2,25,
где OH - наличие отягощенной наследственности по развитию сердечно-сосудистых заболеваний в молодом возрасте: если есть =1; если нет =0;
ITGB3 - наличие полиморфизма 1565 Т>С в гене ITGB3: наличие аллеля 1565С в гомозиготном состоянии =1; наличие аллеля 1565С в гетерозиготном состоянии =2; наличие аллеля 1565Т в гомозиготном состоянии =0;
AGTR2 - наличие полиморфизма 1675G>A в гене AGTR2: наличие аллеля 1675А в гомозиготном состоянии =1; наличие аллеля 1675А в гетерозиготном состоянии =2; наличие аллеля 1675G в гомозиготном состоянии =0;
ITGA2 - наличие полиморфизма С807С>Т в гене ITGA2: наличие аллеля 807Т в гомозиготном состоянии =1; наличие аллеля 807Т в гетерозиготном, состоянии =2; наличие аллеля 807С в гомозиготном состоянии =0;
П - наличие у пациентки в анамнезе преэклампсии средней и тяжелой степени тяжести и\или ее раннего начала: если есть =1; если нет =0;
АГ - наличие у пациентки в анамнезе эпизодов повышения АД до 140\90 мм рт.ст. при клинических измерениях: если есть =1; если нет =0 и при D менее 0 судят об отсутствии риска развития эссенциальной артериальной гипертензии, а при D более 0 прогнозируют высокий риск развития эссенциальной артериальной гипертензии.