СРЕДСТВО РАСТИТЕЛЬНОГО ПРОИСХОЖДЕНИЯ, ОБЛАДАЮЩЕЕ ГЕПАТОЗАЩИТНЫМ ДЕЙСТВИЕМ Российский патент 2015 года по МПК A61K36/185 A61P1/16 

Изобретение относится к медицине, а именно к фармакологии, и может быть использовано для лечения и профилактики заболеваний печени. Средство обладает патогенетической направленностью и препятствует воздействию на печень повреждающих факторов.

Конечной целью применения препаратов данной группы является уменьшение воспалительных и дистрофических изменений в ткани печени, усиление репаративных процессов в гепатоцитах, уменьшение гистологических изменений ткани печени и, как следствие, - снижение риска осложнений печеночных заболеваний.

Существуют несколько групп фармакологических препаратов, обладающих гепатозащитным действием: препараты растительного происхождения; препараты животного происхождения; препараты, содержащие эссенциальные фосфолипиды, и препараты разных групп.

Благодаря менее выраженным побочным эффектам большой популярностью обладают препараты растительного происхождения.

Широкое применение в медицинской практике получили препараты, содержащие естественные флавоноиды расторопши: «Легален», «Карсил», «Гепабене», «Силибор», «Гепатофальк-планта».

«Легален» - оригинальный препарат на основе расторопши пятнистой (Германия). Он проявляет антиоксидантное действие, взаимодействует со свободными радикалами в клетках печени, образуя менее агрессивные соединения. Подавляет перекисное окисление липидов (ПОЛ), оказывающее деструктивное действие на гепатоцит. Снижает в крови уровень малонового диальдегида (маркера оксидантного стресса), что свидетельствует о прерывании цепных радикальных реакций ПОЛ. Приводит к восстановлению запасов эндогенного глутатиона. «Легален» обладает мембраностабилизирующим действием, тормозит абсорбцию токсинов поверхностью клеток печени, стабилизирует клеточную мембрану. Препарат проявляет противовоспалительный эффект путем угнетения образования лейкотриенов, подавляет формирование новых активных форм кислорода. «Легален» замедляет активацию звездчатых ретикулоцитов, снижает коллагенообразование, проявляя антифиброзное действие. Гепатопротективные свойства препарата обусловлены частичным структурным сходством молекулы силибинина со стероидными гормонами. Действие локализуется на клеточной мембране гепатоцитов и внутриклеточно. Силибинин образует комплекс с цитоплазматическими рецепторами и транспортируется внутрь ядра клетки, где активирует РНК-полимеразу А, стимулирует транскрипцию и скорость синтеза РНК, что приводит к образованию структурных функциональных белков, которые поддерживают процесс регенерации гепатоцитов. «Легален» - препарат, стандартизированный по силибинину, содержание которого составляет не менее 70 мг.

«Гепабене» - комбинированный препарат растительного происхождения, содержит сухой экстракт травы дымянки лекарственной, сухой экстракт плодов расторопши пятнистой с содержанием в нем силибинина не менее 22 мг. Экстракт травы дымянки лекарственной, содержащий алкалоид фумарин, нормализует количество секретируемой желчи, снимает спазм желчного пузыря и желчных протоков, облегчая поступление желчи в кишечник. «Гепабене» проявляет гепатопротекторное действие при острых и хронических интоксикациях, оказывает антиоксидантное действие за счет связывания свободных радикалов и токсических веществ в ткани печени, обладает мембраностабилизирующей активностью, стимулирует синтез белка, способствует восстановлению гепатоцитов. Препарат нормализует функцию печени при различных острых и хронических патологических состояниях.

Также к группе препаратов растительного происхождения относятся средства, содержащие естественные флавоноиды других растений. Такие как «Хофитол», содержащий сухой водный экстракт из артишока полевого (листья), обладающий гепатопротективной и нефропротективной активностью; «ЛИВ-52» - многокомпонентный препарат из индийских и китайских трав, в состав которого входят тропические малоизученные растения, не включенные в ГФХI и государственный реестр ЛРС РФ, обладающие желчегонным, гепатопротективным действием.

«Хофитол» является гепатопротектором (восстанавливает печеночные клетки), желчегонным средством, обладает легким мочегонным эффектом. Уменьшает количество мочевины в крови, нормализует обмен жиров и холестерина. Применяется в комбинации с другими средствами для устранения интоксикации. Удаляет из организма тяжелые металлы, алкалоиды и нитраты. Фармакологический эффект препарата обусловлен комплексом входящих в состав листьев артишока полевого биологически активных веществ. Цинарин в сочетании с фенолокислотами обладает желчегонным, а также гепатопротекторным действием. Содержащиеся в артишоке аскорбиновая кислота, каротин, витамины В1 и В2, инулин способствуют нормализации обменных процессов.

Наиболее близким аналогом изобретения является препарат гепатопротекторного действия «Карсил» (Болгария), содержащий сухой экстракт плодов расторопши пятнистой. Механизм действия препарата недостаточно ясен. Известно, что гепатопротекторное действие связано с конкурентным взаимодействием силимарина с токсинами за соответствующие рецепторы на мембране гепатоцитов; этим обусловлено мембраностабилизирующее действие. Воздействует на метаболизм и другие клеточные процессы за счет подавления 5-липооксигеназного пути (в особенности лейкотриена В4), связывания со свободными реактивными кислородными радикалами. Ускоряет регенеративные процессы за счет стимуляции синтеза белков (структурных и функциональных) и фосфолипидов в пораженных гепатоцитах. Улучшается общее состояние пациентов, уменьшается количество предъявляемых жалоб, связанных с ЖКТ. У пациентов со сниженным усвоением пищи, связанным с заболеванием печени, повышается аппетит и происходит увеличение массы тела. «Карсил» стандартизирован по силимарину, содержание которого не менее 35 мг [Регистр лекарственных средств России РЛС. Энциклопедия лекарств. - 21-й вып. / Гл. ред. Г.Л. Вышковский. - М.: ЛИБРОФАРМ, 2012].

Задачей изобретения является расширение области применения препаратов из травы первоцвета весеннего, а также расширение арсенала гепатозащитных средств растительного происхождения отечественной сырьевой базы.

Технический результат при использовании изобретения - получение средства с выраженным гепатозащитным действием.

Указанный технический результат достигается за счет применения густого экстракта из травы первоцвета весеннего (Primula veris L.) в качестве гепатозащитного средства.

Известны следующие фармакологические свойства препаратов из первоцвета: противовоспалительное, спазмолитическое, отхаркивающее, потогонное, мочегонное. Отмечена высокая антимикробная активность препаратов из первоцвета. Растение является богатым источником поливитаминов [В.К. Лавренов, Г.В. Лавренова. Важнейшие лекарственные растения. - Донецк: «Сталкер», 2004, с.324-325]. Ранее было отмечено антиоксидантное свойство густого экстракта травы первоцвета весеннего [Патент РФ 2342942, 2009 г.].

Данных о гепатозащитном воздействии препаратов из первоцвета весеннего в доступной научно-медицинской и патентной литературе не обнаружено.

Приготовление густого экстракта травы первоцвета весеннего (ГЭТПВ) производили методом перколяции, для чего 100,0 г измельченного растительного сырья экстрагировали 1000 мл 70% раствора этилового спирта. Полученные водно-спиртовые экстракты очищали от балластных веществ отстаиванием при t=8°C в течение трех суток с последующим фильтрованием для отделения смолистых веществ и хлорофилла. Объединенные очищенные экстракты упаривали под вакуумом на роторном испарителе модели «ИР-1М» для отгонки экстрагента. Далее доводили до состояния густого экстракта в выпарительных чашах в сушильном шкафу при температуре 60°С. Полученный экстракт травы первоцвета весеннего представлял собой густую вязкую массу темно-зеленого цвета с приятным специфическим запахом, горьковатого вкуса с влажностью не более 25%.

Проведенные нами исследования по изучению химического состава ГЭТПВ показал наличие в нем богатого комплекса биологически активных веществ: полифенольных соединений (флавоноидов, фенилпропаноидов, катехинов, оксикоричных кислот), обусловливающих антиаксидантную активность препарата; производных тритерпеноидов урсанового ряда и эсцина, аминокислот, органических кислот [Романова, З.Р. Фармакогностическое исследование первоцвета весеннего и первоцвета крупночашечного: Дис. … канд. фарм. наук. - Курск, 2010. - 138 с.]. Содержание тритерпеноида урсоловой кислоты в достаточно высокой концентрации в сырье до 5%, a y экстракта еще выше, позволило нам предположить наличие гепатозащитной активности у ГЭТПВ.

Опыты проводились на 31 белых беспородных половозрелых крысах обоего пола массой 170-200 г линии Wistar. Были сформированы следующие группы (таблица): 1 группа - получала густой экстракт травы первоцвета весеннего (1), 2 группа - препарат сравнения раствор карсила (2), 3 группа - контрольная группа животных с гепатитом не получала лечение (3), 4 группа - группа интактных животных (без лечения и без гепатита) (4).

Животные содержались в условиях вивария с естественным световым режимом на стандартной диете [ГОСТ Р 50258-92], с соблюдением "Европейской конвенции о защите позвоночных животных, используемых для экспериментов или в иных научных целях" [2007] и правил лабораторной практики при проведении доклинических исследований в РФ [ГОСТ Р 51000.3-96, ГОСТ Р 51000.4-96]. Забой животных проводился согласно требованиям "Международных рекомендаций по проведению медико-биологических исследований с использованием животных" [2007].

Изучение гепатозащитной активности проводили на модели острого CCl₄ - гепатита, который воспроизводили животным 1 и 2 групп путем 4-дневного внутрибрюшинного введения 50% раствора CCL₄ в дозе по 0,4 мл на 1000 г веса крысы [Хабриев Р.У. Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ, (ред), Москва, 2005].

Густой экстракт травы первоцвета весеннего (1) исследовали в дозе 21 мг/кг при пероральном способе введения. Карсил в дозе 25 мг/кг. Исследуемый экстракт и карсил вводили в дозах по следующей схеме: по 21 мг/кг (для экстракта) и по 25 мг/кг (для карсила) каждый день, начиная с третьего дня введения CCL₄ (в течение 2 дней) за 1 час до введения гепатотоксина, далее исследуемые соединения вводили в течение 8 дней (общий курс введения - 10 дней).

О влиянии исследуемого экстракта и карсила на течение гепатита определяли:

- по биохимическим показателям сыворотки крови крыс - уровню активности аланин- и аспартат-аминотрансфераз (АЛТ, ACT) - высчитывали коэффициент де Ритиса; щелочной фосфатазы и по уровню биллирубина [Биохимия для врача, А.Ш. Бышевская, О.А. Терсенов, Екатеренбург, 1994, с.252-255];

- по желчеобразовательной функции печени (определяли общий объем выделенной желчи в мг на 100 г массы животного за 3 часа);

- по изменению относительной массы печени.

В результате проведенных скрининговых исследований было установлено, что после 10-дневного введения густого экстракта травы первоцвета весеннего на фоне токсического гепатита, вызванного CCL₄ (таблица), наблюдали выраженный желчегонный эффект по сравнению с контрольной группой (гепатит), причем в группах 1, 2 наблюдали изменение относительной массы печени по отношению к группе контроля. Изменение относительной массы печени в группе контроля сопряжено с высоким уровнем трансаминаз (АЛТ и ACT), что достоверно выше, чем в группах леченных животных. Коэффициент де Ритиса (АСТ/АЛТ) в группах 1 и 2 в среднем был в 1,2 раза выше, чем в группе контроля (гепатит). В группах леченных животных уровень билирубина и щелочной фосфатазы был ниже, чем в группе контроля (гепатит), причем в 1 группе показатели были достоверно лучше, чем в группе сравнения. Таким образом, исследуемый экстракт травы первоцвета весеннего обладает гепатозащитным действием на фоне токсического поражения печени и сравним по эффективности с препаратом сравнения.

Изобретение относится к фармацевтической промышленности, а именно к гепатопротекторному средству. Применение густого экстракта травы первоцвета весеннего (Primula veris L.) в качестве гепатозащитного средства. Вышеописанное средство эффективно в качестве гепатопротектора. 1 табл.

Применение густого экстракта травы первоцвета весеннего (Primula veris L.) в качестве гепатозащитного средства.