ПРИМЕНЕНИЕ ПРОИЗВОДНЫХ АЦЕТАЛЕЙ ПИРИДОКСИНА В КАЧЕСТВЕ АНТАГОНИСТОВ ПУРИНОРЕЦЕПТОРОВ Российский патент 2015 года по МПК C07D491/56 A61K31/4375 A61P9/00 

Изобретение относится к применению в качестве антагонистов пуринорецепторов синтетических биологически активных веществ гетероциклического ряда, представляющих собой продукты модификации пиридоксина, а именно n-(1,5-дигидро-3-R₁-3-R₂-8-метил-9-гидрокси-[1,3]диоксепино[5,6-с]пиридинил-6-азо)фенилсульфокислоты и их солевые формы общей формулы I:

, где R₁ - атом водорода или метил, R₂: метил, изо-пропил.

Ранее было показано, что соединения формулы (I) обладают антибактериальной активностью [патент РФ 2480471, МПК A61K 31/4375. Антибактериальные соединения на основе сульфаниловой кислоты и пиридоксина [Текст] / Штырлин Ю.Г., Петухов А.С., Стрельник А.Д., Никитина Е.В., Гарипов М.Р.; ВГАОУ ВПО К(П)ФУ. - Опубл. 27.04.2013], но данных об их антагонистической активности по отношению к пуринорецепторам не было известно.

Авторами было обнаружено, что соединения формулы (I) обладают высокой антагонистической активностью по отношению к пуринорецепторам (P2-рецепторы), и могут найти применение в медицине и ветеринарии.

P2 рецепторы представляют собой мишень для фармакологического воздействия и разработки новых лекарственных средств для лечения различных заболеваний. Разработка антагонистов Р2-рецепторов является перспективным направлением современной химии и фармакологии. Наиболее важным доказательством огромного значения пуринергической нейротрансмиссии является внедрение в клиническую практику лекарственных средств, воздействующих на Р2-рецепторы и успешно применяемых для лечения патологий сердечно-сосудистой системы [А.У. Зиганшин, Р2-рецепторы: перспективная мишень для будущих лекарств / Зиганшин А.У., Зиганшина Л.Е. // Гэотар-Медиа, Москва - 2009].

Несмотря на значительное количество синтезированных и исследованных антагонистов Р2-рецепторов различной химической структуры каждый из них обладает определенными недостатками, в частности низкой селективностью, эффективностью антагонизма, значительным влиянием на активность экто-АТФазы.

Наиболее близким по структуре аналогом заявляемых веществ является РРА08 (пиридоксальфосфат-6-азофенил-2′,4′-дисульфоновая кислота) - известный антагонист пуринорецепторов [J.В. Schachter, Second messenger cascade specificity and pharmacological selectivity of the human P2Y1-purinoceptor / J.B. Schachter, Q. Li, J.L. Boyer, et al. // Br. J. PharmacoL, 118, 167-173 (1996).]. PPADS послужил основой для создания целого ряда антагонистов пуринорецепторов [N. Syed, Pharmacology of P2X receptors / N. Syed, Ch. Kennedy // WIREs Membr Transp Signal, - 2012, - V. 1, - с. 16-30.], при этом модификации затрагивали, в основном, бензольное кольцо, а в третьем, четвертом положениях пиридинового цикла присутствовали фосфатные, фосфонатные, амино и альдегидные группы.

Следует отметить, что описанные выше соединения, по мнению заявителя, не могут рассматриваться в качестве аналогов к заявленному техническому решению вследствие того, что они не совпадают с заявляемыми соединениями по химической структуре. Заявителем не выявлены источники, содержащие информацию о технических решениях, идентичных настоящему изобретению, что позволяет сделать вывод о его соответствии критерию «новизна».

Задача заявленного технического решения состоит в создании биологически активных соединений с высокой антагонистической активностью в отношении пуринорецепторов.

Поставленная задача решается путем синтеза антагонистов пуринорецепторов общей формулы (I):

где R₁ - атом водорода или метил, R₂: метил, изо-пропил.

Заявляемые вещества общей формулы (I) могут применяться в виде нейтральных форм или в виде солей с катионами натрия, калия, лития, аммония, магния, кальция или другими фармакологически приемлемыми катионами.

Наиболее близким по химическому строению и назначению к заявленным веществам является PPADS, который был выбран в качестве реперного соединения для сравнения антагонистической активности.

Заявляемые вещества проявили высокую антагонистическую активность в отношении P2X-рецепторов на гладкомышечных клетках мочевого пузыря и семявыносящего протока и могут найти применение в медицине и ветеринарии.

Заявителем не выявлены источники, в которых содержались бы сведения о влиянии отличительных признаков изобретения на достигаемый технический результат. Указанное новое свойство объекта обусловливает, по мнению заявителя, соответствие изобретения критерию «изобретательский уровень».

Предлагаемые в данном изобретении соединения формулы (I) получали согласно нижеприведенной схеме:

Соединения пиридоксина I(а-в) были получены по описанным в литературе методикам [патент РФ 2480471, МПК A61K 31/4375. Антибактериальные соединения на основе сульфаниловой кислоты и пиридоксина [Текст] / Штырлин Ю.Г., Петухов А.С., Стрельник А.Д., Никитина Е.В., Гарипов М.Р.; ВГАОУ ВПО К(П)ФУ. - Опубл. 27.04.2013].

Результаты исследования антагонистической активности в отношении пуринорецепторов приведены в примерах конкретного выполнения (табл 1, 2).

Пример конкретного выполнения заявленного технического решения

Исследование антагонистической активности синтезированных соединений по отношению к Р2-рецепторам.

Соединения I(а-в) были испытаны на биологическую активность в виде растворимых в воде натриевых солей. Исследование антагонистической активности синтезированных соединений по отношению к Р2-рецепторам в концентрации 10^-2 М изучали in vitro на самцах крыс линии Wistar массой 150-200 г (питомник «Пущино», Московская область). Все эксперименты выполнены в соответствии с правилами соблюдением проведения работ с использованием экспериментальных животных. Применяли метод исследования механической активности изолированных органов [Зиганшин А.У., Зиганшина Л.Е. Фармакология рецепторов АТФ. - М.: Гэотар-Медицина, 1999. - 210 с]. Для изучения Р2Х-рецептор-опосредуемых сокращений объектами исследования являлись препараты мочевого пузыря и семявыносящего протока. Для сравнения активности исследуемых соединений в одних условиях во всех экспериментах оценивалась активность известного антагониста Р2-рецепторов - PPADS (Tocris, Великобритания). Для исключения влияния холино- и адренорецепторов эксперименты проводились в присутствии М-холиноблокатора атропина и α-адреноблокатора фентоламина (Sigma, США). Проводилась стимуляция электрическим полем частотой 0,5-32 Гц. О величине антагонистической активности веществ судили по величинам сократительного ответа. Приведены результаты экспериментов, полученные при стимуляции частотой 4 и 8 Гц.

Изучение антагонистического действия синтезированных соединений показало наличие значительной активности в отношении пуринорецепторов у вещества Ia (табл. 1, 2), превышающей эффект известного антагониста PPADS.

Заявителем не выявлены источники, содержащие информацию о технических решениях, идентичных настоящему изобретению, что позволяет сделать вывод о его соответствии критерию «новизна».

Таблица 1 Антагонисты пуринорецепторов на основе новых производных пиридоксина (Оценка первичной антагонистической активности синтезированных соединений (препараты мочевого пузыря)) Соединение Частота, Гц Первичная стимуляция Стимуляция на фоне атропина Опыт Контроль Ia 4 2,54±0,32 1,92±0,13 1,82±0,16 1,89±0,35 8 3,56±0,22 2,52±0,15 2,20±0,25 2,29±0,31 Iб 4 1,61±0,17 1,32±0,15 1,11±0,15 1,1±0,28 8 2,4±0,23 1,8±0,25 1,44±0,14 1,28±0,18 Iв 4 0,47±0,06 0,31±0,05 0,29±0,03 0,25±0,04 8 0,7±0,11 0,54±0,03 0,33±0,02 0,23±0,04

Таблица 2 Антагонисты пуринорецепторов на основе новых производных пиридоксина (Оценка первичной антагонистической активности синтезированных соединений (препараты семявыносящего протока)) Соединение Частота, Гц Первичная стимуляция Стимуляция на фоне фентоламина Опыт Контроль 1а 4 2,97±0,12 1,94±0,13 1,17±0,11 1,19±0,13 8 3,3±0,15 2,23±0,22 1,34±0,26 1,46±0,16 16 4 1,6±0,15 1,14±0,12 1,1±0,13 0,86±0,12 8 2,23±0,16 1,73±0,22 1,7±0,23 1,22±0,17 1в 4 0,3±0,02 0,27±0,22 0,26±0,07 0,16±0,03 8 0,46±0,03 0,41±0,05 0,32±0,04 0,25±0,01

Изобретение относится к применению в качестве антагонистов пуринорецепторов синтетических биологически активных веществ гетероциклического ряда, обладающих антагонистической активностью по отношению к пуринорецепторам и представляющих собой продукты модификации пиридоксина, а именно n-(1,5-дигидро-3-R₁-3-R₂-8-метил-9-гидрокси-[1,3]диоксепино[5,6-с] пиридинил-6-азо)фенилсульфокислоты и их солевые формы общей формулы I, где R₁ - атом водорода или метил, R₂- метил, изо-пропил. Соединения формулы (I) обладают высокой антагонистической активностью по отношению к пуринорецепторам и могут найти применение в медицине и ветеринарии. 2 табл.

Применение n-(1,5-дигидро-3-R₁-3-R₂-8-метил-9-гидрокси-[1,3]диоксепино[5,6-с]пиридинил-6-азо)фенилсульфокислот и их солевых форм общей формулы I:

где R₁ - атом водорода или метил, R₂ - метил, изопропил, в качестве антагонистов пуринорецепторов.