СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ АКТИВИЗАЦИИ ВЫРАБОТКИ КОРТИЗОЛА У БЕРЕМЕННЫХ ПРИ ИНДУЦИРОВАНИИ СИНТЕЗА АДРЕНОКОРТИКОТРОПНОГО ГОРМОНА, ВЫЗВАННОГО ОБОСТРЕНИЕМ ЦИТОМЕГАЛОВИРУСНОЙ ИНФЕКЦИИ В ПЕРИОД ГЕСТАЦИИ Российский патент 2016 года по МПК G01N33/48 

1. Цель изобретения - разработать способ выявления причины повышенного содержания кортизола в крови беременной при обострении цитомегаловирусной инфекции (ЦМВИ) в период гестации.

2. Изобретение относится к медицине, а именно к разработке способа, позволяющего выяснить причину повышенного содержания кортизола в периферической крови беременных при обострении ЦМВИ в период гестации, что создает угрозу формирования фетоплацентарной системе и развития плода.

3. Раскрытие изобретения.

При обострении ЦМВИ с титром антител к ЦМВ 1:1600 в период гестации в периферической крови беременных наблюдается резкое повышение кортизола. Так, на 5-6 неделях гестации в крови беременной отмечается нарастание содержания кортизола до 756,80±38,67 нмоль/л (контроль - 145,30±1,75 нмоль/л). Если обострение ЦМВИ приходится на третий период гестации, количество кортизола в крови беременной увеличивается до 1320,20±25,00 нмоль/л (контроль - 995,00±15,80 нмоль/л). Повышенное содержание кортизола нарушает метаболические процессы как в организме беременной, так и в тканях развивающегося плода [1]. Повышенное содержание кортизола приводит к разрушению мышечных тканей, нарушается снабжение глюкозой головного мозга в организме, нарушается жировой обмен [3, 4, 6]. Фактором, стимулирующим синтез кортизола в надпочечниках, является адренокортикотропный гормон (АКТГ), вырабатываемый клетками аденогипофиза. Адренокортикотропный гормон регулирует синтез гормонов коры надпочечников, особенно выработку кортизола. Секреция АКТГ на некоторое время опережает повышение уровня кортизола в крови [2-5].

4. Новая техническая задача

Разрабатывается способ оценки причин повышения содержания в крови беременных содержания кортизола в связи с обострением ЦМВИ в период гестации, что составляет угрозу формирования фетоплацентарной системы и развития плода.

5. Наиболее часто регистрируется, что причиной повышения активности АКТГ являются стрессовые ситуации в организме (Горизонтов П.Д., Протасов Т.Н., 1968) [2]. В отличие от разработанной концепции мы считаем, что индуцирующее действие на гипофиз оказывает ЦМВИ, особенно, когда ее обострение в организме беременной происходит на первых неделях гестации. При такой ситуации повышенная под влиянием АКТГ выработка надпочечниками кортизола может привести к гибели эмбриона, а на поздних этапах (третий триместр) к нарушению формирования фетоплацентарной системы и развитию плода.

6. Осуществление изобретения

6.1. Обследовано 20 беременных в возрасте 18-25 лет с хронической цитомегаловирусной инфекцией (ХЦМВИ) в стадии обострения на 5-6 неделе гестации и 15 беременных, не болевших ЦМВИ, а также 20 беременных с обострением на 25-26 неделях гестации и 15 беременных без таковой патологии (контрольная группа). Диагноз обострения ХЦМВИ устанавливался при комплексном исследовании периферической крови на наличие IgM к ЦМВ или четырехкратного и более нарастания титра антител IgG в парных сыворотках в динамике через 10 дней, индекса авидности более 65%, а также наличия ДНК ЦМВ. Исследования проводились с учетом требований Хельсинской декларации Всемирной медицинской ассоциации «Этические принципы проведения научных исследований с участием человека» с поправками 2008 г. и правилами клинической практики в Российской Федерации, утвержденными приказом Министерства РФ №266 от 19.06.2003.

Верификация ЦМВ, определение типоспецифических антител, индекс авидности осуществлялись методами ИФА на спектрофотометре «Stat-Fax-2100» (США) с использованием тест-систем ЗАО «Вектор-Бест» (Новосибирск), методами ПЦР на аппарате ДТ-96 использованием наборов НПО «ДНК-технология» (Москва).

6.2. Статистический анализ и обработку данных проводили с использованием пакета прикладных программ STATISTICA v. 6.0 (StatSoft Inc., США). Для определения достоверности различий использовали непарный параметрический критерий Стьюдента. Для определения достоверности различий в случае негауссовых распределений - непараметрические критерии Колмогорова-Смирнова и Манна-Уитни. Критический уровень значимости был принят за 5% (0,05). Данные представлены как среднее арифметическое (М)±стандартная ошибка среднего арифметического (m).

6.3. Содержание кортизола в периферической крови беременных определяли методом иммуноферментного анализа, используя наборы ЗАО «Алкор Био» (Санкт-Петербург). Содержание АКТГ в крови определяли методом иммуноферментного анализа, используя наборы фирмы «Biomedica».

7. Полученные данные

Исследования показали, что при обострении ХЦМВИ в первые недели гестации до титра антител к ЦМВ 1:1600 у беременной определялось на 5-6 неделях в крови 756,8±38,67 нмоль/л кортизола (контроль -145,30±1,75 нмоль/л). На третьем триместре гестации количество кортизола в периферической крови достигало до 1320,20±25,00 нмоль/л (контроль - 995,0±15,80 нмоль/л). Одновременно определяли в периферической крови и содержание АКТГ. На 5-6 неделях гестации при обострении ЦМВИ содержание АКТГ в периферической крови беременных, перенесших обострение ЦМВИ с титром антител к ЦМВ 1:1600, достигало 150,0±1,6 пг/мл (контроль - 32,50±0,95 пг/мл). На третьем триместре содержание в периферической крови беременных, перенесших обострение ЦМВИ на 25-26 неделях гестации, содержание АКТГ составило 180,50±2,50 пг/мл. Следовательно, как на первых неделях гестации, так и на третьем триместре при обострении ЦМВИ до титра антител к ЦМВ 1:1600 резко повышается в периферической крови беременных содержание АКТГ, что влечет за собой интенсивный синтез кортизола, содержание которого увеличивается в крови беременных на первом триместре до 756,8±38,67 нмоль/л, а при обострении ЦМВИ на третьем триместре до 1320,20±25,00 нмоль/л, что создает угрозу нарушения формирования фетоплацентарной системы и развития плода.

Литература

1. Быстрицкая Т.С., Луценко М.Т., Лысяк Д.С., Колосов В.П. Плацентарная недостаточность. Благовещенск, 2010, 135 с.

2. Горизовтов П.Д., Протасов Т.Н. Роль АКТГ и кортикостероидов в патологии. М., 1968, 205 с.

3. Лифшиц В.М., Сидельникова В.И. Биохимические анализы в клинике. М.: Медицинское информационное агентство, 2001, 303 с.

4. Назаренко Г.И., Кишкун А.А. Клиническая оценка результатов лабораторных исследований. М.: ГЭОТАР-Медиа, 2007, 822 с.

5. Панков Ю.А. Химия АКТГ и механизм регуляции его секреции // Успехи современной биологии. 1959. Т. 47, №3. С. 10-15.

6. Schwyzer R. Chemistry and metabolic action of on nonsteroid hormones // Annual. Review of Biochemistry. 1964. V. 33. P. 259-285.

Изобретение относится к медицине, а именно к диагностике, и может быть использовано для оценки угрозы нарушения формирования фетоплацентарной системы и развития плода при обострении цитомегаловирусной инфекции на первом и третьем триместре гестации. Для этого измеряют титр антител к ЦМВ, и при его значении 1:1600, повышении содержания в периферической крови беременной на 5-6 неделе гестации АКТГ до 150,01±,6 нг/мл и на третьем триместре до 180,50±2,50 нг/мл, кортизола на 5-6 неделе гестации до 756,80±38,67 нмоль/л и на третьем триместре до 1320,20±25,00 нмоль/л создается угроза нарушения формирования фетоплацентарной системы и развития плода.

Способ оценки угрозы нарушения формирования фетоплацентарной системы и развития плода при обострении цитомегаловирусной инфекции на первом и третьем триместре гестации, включающий измерение в периферической крови титра антител к цитомегаловирусу, содержания в периферической крови беременных адренокортикотропного гормона, а также кортизола, и при титре антител к цитомегаловирусу 1:1600, повышении содержания адренокортикотропного гормона на 5-6 неделях гестации до 150,0±1,6 нг/мл и на третьем триместре до 180,50±2,50 нг/мл, а кортизола на 5-6 неделях беременности до 756,80±38,67 нмоль/л и в третьем триместре до 1320,20±25,00 нмоль/л создается угроза нарушения формирования фетоплацентарной системы и развития плода.