ПРОТИВОХЕЛИКОБАКТЕРНОЕ БАКТЕРИЦИДНОЕ СРЕДСТВО И СПОСОБ ЕГО ПОЛУЧЕНИЯ Российский патент 2016 года по МПК A61K9/08 A61K31/155 A61K31/16 A61P31/04 

Изобретение относится к медицине, а именно к фармакологии, и может быть применено при создании высокоэффективных и безопасных лекарственных средств для эрадикации инфекции Helicobacter pylori.

Инфекция Helicobacter pylori (Hp) является самой распространенной среди терапевтических инфекций. В настоящее время ею инфицировано более 60% населения планеты. В Российской Федерации в зависимости от региона Helicobacter pylori инфицировано от 80 до 95% взрослого населения. Научным сообществом официально признанными заболеваниями хеликобактерной этиологии считаются хронический гастрит, язвенная болезнь и MALT-лимфома желудка. Инфекция Helicobacter pylori является главным фактором риска в желудочном канцерогенезе. В связи с этим противоинфекционная терапия и эрадикация (полное устранение инфекции Helicobacter pylori из организма) строго рекомендованы при ее наличии у больных с вышеперечисленными заболеваниями. Во всех международных и национальных рекомендациях предусмотрено проведение эрадикации с помощью 2-3 антибиотиков и антибактериальных средств на фоне антикислотосекреторной терапии. Эффективность стандартных схем при использовании в ургентной терапии и поликлинической практике антибиотиков не превышает 60-65%, т.к. на протяжении многих лет используются одни и те же антибиотики, созданные для лечения пневмоний, урогенитальных инфекций, но не специфические для Hp-инфекции. Поскольку эти препараты применяются по прямому назначению в виде монотерапии, прогрессивно возрастает количество резистентных к ним штаммов Hp. В связи этим создание новых эффективных и безопасных для организма человека антихеликобактерных бактерицидных средств является одной из весьма актуальных задач современной фармакологии.

Известно антисептическое средство широкого спектра антимикробного действия, действующим веществом которого является бензилдиметил[3-(миристоиламино)пропил]аммоний хлорид - замещенный амид миристиновой кислоты (далее по тексту - АМК) (патент РФ №2163119).

В основе биологического действия АМК лежит его воздействие на клеточные мембраны. Бактериальная клетка имеет оболочку и надмембранные структуры, состоящие из гликолипидов, гликопротеидов и высокодисперсных веществ, которые и являются объектом воздействия АМК.

Преобладающим механизмом является гидрофобное взаимодействие АМК, относящегося к ПАВ (поверхностно-активным веществам), с липидными структурами мембран микроорганизмов, приводящее к их фрагментации и разрушению. Неполярная часть молекулы АМК, погружаясь в гидрофобную часть мембраны, во-первых, разрушает надмембранный слой, разрыхляет мембрану, повышает ее проницаемость для крупномолекулярных веществ и, во-вторых, поскольку на мембранных структурах фиксируется большинство ферментов, АМК изменяет энзиматическую активность клетки, угнетая ферментативные системы. Гидрофобный радикал АМК соответствует максимальному связыванию детергента с клеточной мембраной микроорганизма, т.е. такое взаимодействие наиболее энергетически выгодно по сравнению с ПАВ-антисептиками, длина которых существенно ниже или выше. Катионный радикал АМК сначала уменьшает, а затем и нейтрализует заряд клеточной стенки. Таким образом, в результате воздействия АМК происходит нарушение структуры и функции мембран бактериальных клеток и вирусных клеток. АМК не воздействует на оболочки клеток человека, поскольку те имеют значительно большую длину липидных радикалов и гидрофобных взаимодействий с молекулами АМК не происходит (патент РФ №2163119).

Известны также композиции полигексаметиленгуанидинов и минеральных кислот, обладающие бактерицидным действием (патент РФ №2118175).

Полигексаметиленгуанидиновые композиции используются для медицинской и бытовой дезинфекции (1), для дезинфекции на предприятиях пищевой промышленности и продовольственной торговли (2), (3).

Бактерицидные свойства полигексаметиленгуанидинов (далее - ПГМГ) обусловлены наличием в их повторяющихся звеньях гуанидиновых группировок, являющихся активным началом некоторых природных и синтетических лекарственных средств и антибиотиков. Гидрофобные звенья, соединяющие гуанидиновые группировки, способствуют осаждению препарата на фосфолипидных мембранах клеток. Проникая в клетку инфектанта, препарат блокирует действие ферментов, препятствует репликации нуклеиновых кислот, угнетает дыхательную систему клетки, что приводит к ее гибели. Установлено также, что бактерицидная активность солей ПГМГ усиливается по мере увеличения молекулярной массы, температуры, pH среды и практически не изменяется в присутствии белковой нагрузки (4), (5).

Обладая высоким бактерицидным эффектом по отношению ко многим микроорганизмам, соли ПГМГ и АМК относятся к IV классу (малоопасные вещества) при кожном пути поступления в организм и к III классу (умеренно опасные вещества) при поступлении через желудок.

Эти изобретения: патент РФ №2163119 и патент РФ №2118175 прияты нами за наиболее близкие аналоги.

Целью изобретения является создание нового высокомолекулярного органического бактерицидного соединения, эффективного для эрадикации инфекции Helicobacter pylori и безопасного в отношении кишечной микрофлоры человека.

Поставленная цель достигается тем, что в качестве такого бактерицидного средства предлагается использовать раствор ПАВ-антисептика, включающий в качестве действующего вещества межмолекулярносвязанную композицию (МСК), синтезируемую в результате ионного взаимодействия в растворах молекул замещенного амида миристиновой кислоты (АМГ) и молекул полигексаметиленгуанидинов (ПГМГ).

Структурные формулы полученных нами межмолекулярносвязанных органических композиций (МСК) приведены на Рис.1.

Ниже приведены примеры предлагаемых способов получения растворов бактерицидного средства МСК различной концентрации.

Пример 1. Бактерицидное средство МСК готовят путем смешения 15%-ного раствора бензилдиметил[3-(миристоиламино)пропил]аммоний хлорида - (замещенного амида миристиновой кислоты - АМК) с 20% раствором полигексаметиленгуанидина (ПГМГ), перемешивая при комнатной температуре в течение 10-15 минут при следующем соотношении объемов растворов: 66,67 мл АМК / 25,0 мл ПГА и доведя добавлением воды очищенной до 100 мл, получают 100 мл раствора межмолекулярносвязанного органического соединения с массовой долей МСК в растворе, равной 15% - концентрат «МСК-15».

Пример 2. Бактерицидное средство МСК готовят путем смешения 15%-ного раствора бензилдиметил[3-(миристоиламино)пропил]аммоний хлорида (АМК) с 7,5% раствором полигексаметиленгуанидина (ПГМГ), перемешивая при комнатной температуре в течение 10-15 минут при следующем соотношении объемов растворов: 200 мл 15%-ного раствора АМК и 100 мл 7,5% раствора ПГМГ, получая в результате 300 мл водного концентрата с массовой долей действующего вещества (МСК) в растворе, равной 12,5% - концентрат «МСК-12,5», и доведя добавлением воды очищенной до 150 л, получают 150 л готового препарата - раствора межмолекулярносвязанного органического соединения с массовой долей МСК в растворе равной 0,00025%. Дальнейшим 2-кратным разбавлением раствора добавлением воды очищенной получают до 300 л готового препарата - раствора межмолекулярносвязанного органического соединения с массовой долей МСК в растворе, равной 0,000125%.

Полученные в экспериментах in vitro сравнительные данные по бактерицидному воздействию препарата МСК на Helicobacter pylori и микрофлору кишечника приведены в Табл. 1 и 2.

Примечание: (-) -отсутствие роста культуры H-pylori. Получено, что живые бактерии (+) в растворе МСК сохраняются при концентрации препарата не более 0,000125%, но и при такой концентрации препарата через 1,5 часа инкубации жизнеспособность сохраняют не более 1% бактерий. Различий в ингибировании роста между штаммами не наблюдалось.

Значения 6,0 для бумажных дисков (А) - зона задержки роста отсутствует.

Сравнительный анализ воздействия растворов МСК на бактерии Helicobacter pylori и микрофлору кишечника организма человека подтверждает селективность бактерицидного действия этого инновационного препарата на бактерии Helicobacter pylori и безопасность его применения в концентрациях от 0,000125 до 0,00025% для микрофлоры кишечника.

В научно-технической и патентной литературе не известны технические решения, аналогичные заявляемому, т.е. предложение соответствует критерию "новизна".

Нами впервые установлено, что использование нового межмолекулярносвязанного соединения МСК в заявленных концентрациях позволяет получить новые эффекты - повышение бактерицидности и селективность бактерицидного действия в отношении Helicobacter pylori, т.е. предложение соответствует критерию "изобретательский уровень".

Используемые для синтеза МСК реактивы: бензилдиметил[3-(миристоиламино)пропил]аммоний хлорид и полигексаметиленгуанидин выпускаются отечественной промышленностью, т.е. предложение «промышленно применимо».

Литература

1. Дезсредства. Справочник под ред. А.А. Монисова и М.Г. Шандалы. М., ТОО Рарорь, 1996 г.

2. Экологически безопасные полимерные биоциды: Сб. статей ИЭТП. М., 2000 г.

3. Проблемы дезинфекции и стерилизации. ВНИИДиС, вып. 23, 1974 г., стр. 96.; вып. 24, 1975 г., стр. 58.

4. Н.П. Баркова и др. Тез. IX Всесоюзного семинара по изысканию лекарственных средств. Рига, 1991 г., стр. 56. С.А. Кондратов. Гигиена и санитария, N3, 11, 1992 г.

5. К.М. Ефимов, П.А. Гембицкий, А.Г. Снежко. Полигуанидины - класс малотоксичных дезсредств пролонгированного действия. Ж-л «Дезинфекционное дело». №4, М., 2000 г.

Изобретение относится к медицине и фармацевтической промышленности и представляет собой противохеликобактерное бактерицидное средство, представляющее собой раствор ПАВ-антисептика, включающий в качестве действующего вещества межмолекулярносвязанную композицию (МСК), синтезируемую в результате ионного взаимодействия в растворах молекул бензилдиметил[3-(миристоиламино)пропил]аммоний хлорида и молекул полигексаметиленгуанидина. Изобретение обеспечивает повышение и селективность бактерицидного действия в отношении Helicobacter pylori и безопасность применения для микрофлоры кишечника. 1 з.п. ф-лы, 2 табл., 1 ил.

1. Противохеликобактерное бактерицидное средство, представляющее собой раствор ПАВ-антисептика, включающий в качестве действующего вещества межмолекулярносвязанную композицию (МСК), синтезируемую в результате ионного взаимодействия в растворах молекул бензилдиметил[3-(миристоиламино)пропил]аммоний хлорида и молекул полигексаметиленгуанидина.

2. Бактерицидное средство по п. 1, отличающееся тем, что для эрадикации инфекции Helicobacter pylori используются растворы МСК в концентрации от 0,000125 до 0,00025%.