БИОЛОГИЧЕСКИЙ ИНДИКАТОР ДЛЯ КОНТРОЛЯ СТЕРИЛИЗАЦИИ Российский патент 2016 года по МПК A61L2/00 

Область техники

Изобретение относится к микробиологии и может быть использовано для контроля стерилизации материалов и изделий, например, медицинского или ветеринарного назначения.

Предшествующий уровень техники

Ответственной технологической операцией в лечебных учреждениях, предприятиях пищевой и молочной промышленности, ветеринарии является стерилизация различных объектов: медицинских изделий, материалов и продуктов.

Стерилизация (иногда деконтоминация) - полное уничтожение любых (патогенных и непатогенных) микроорганизмов как на поверхности стерилизуемого объекта, так и внутри него различными способами обработки этого объекта (пар, горячий воздух, газ, инфракрасное излучение и т.д.) с возможностью сохранения стерильности объекта в обычных условиях (в упаковке) требуемое время.

Большое разнообразие способов обработки стерилизуемых объектов связано с большой номенклатурой этих объектов и материалов, из которых они изготовлены (жидкости, гели, ткани, металлы, пластмассы, стекло, продукты питания, различные лекарственные средства и т.д.) и их совместимостью (сохранение исходных физических и химических свойств) с тем или иным стерилизующим агентом.

Стерилизация является завершающим этапом полной асептической обработки объекта. Стерилизации предшествует мойка, дезинфекционная и предстерилизационная обработка. Стерилизация осуществляется в специальном оборудовании и требует системного контроля этого оборудования для исключения возможной непростерилизации объекта.

Контроль стерилизации осуществляется тремя способами: физическим; химическим; биологическим. Первые два способа применяются при каждом цикле стерилизации и дают результат контроля сразу после стерилизации. В связи с этим способы называются оперативными.

Оценка стерилизации осуществляется по вспомогательным факторам (температура в камере, давление, время выдержки объекта при стерилизации, качество пара и т.д.) и поэтому контроль 1-м и 2-м способами называется опосредствованным.

Единственный способ, который позволяет осуществить прямой контроль, - проверить гибель всех микроорганизмов в стерилизуемой среде, является 3-й способ - контроль стерилизации с помощью биологических тестов.

Принцип биологического контроля основан на инактивации (гибели) во время стерилизации наиболее устойчивых к тому или иному способу обработки микроорганизмов и дальнейшему подтверждению (или не подтверждению) этого результата.

Подтверждение инактивации свидетельствует об успешно проведенной стерилизации. Отсутствие полной гибели микроорганизмов (подтверждение наличия после стерилизации живых) свидетельствует о проблемах при проведении стерилизации и требует принятия мер по исключению повторения аварийной ситуации (профилактика оборудования, ремонт, замена и т.д.), а стерилизуемые объекты подвергаются повторной обработке.

В настоящее время самым надежным способом контроля режимов стерилизации изделий медицинского назначения является биотестирование. Применение биологических индикаторов создает условия с высокой степенью вероятности защиты пациентов от внутрибольничного инфицирования из-за некачественной стерилизации инструментария и материалов.

Биологический контроль осуществляется с помощью биологических тестов, представляющих собой инокулированный (обсемененный) устойчивыми к стерилизации микроорганизмами носитель, который во время стерилизации размещается вместе со стерилизуемыми объектами в стерилизационном оборудовании.

Устойчивые к стерилизации микроорганизмы называются культурой. Таким образом, если культура инактивирована (не восстанавливается), то стерилизация осуществлена успешно, если культура полностью не уничтожена (восстанавливается), то стерилизацию необходимо повторять.

Биологический контроль требует достаточно длительного времени после стерилизации для получения результатов контроля, поэтому он используется не каждый день и называется в отличие от первых двух периодическим методом контроля.

Результаты биологического контроля получают следующим образом. Биологические тесты после стерилизации проращивают (активируют биотест), то есть обработанную в стерилизаторе культуру помещают в питательную среду (бульон) и выдерживают (термостатируют) длительное время в подогретом до определенной температуры бульоне. Если культура не полностью уничтожена в стерилизаторе, то она начинает размножаться (расти) и меняет индикаторный цвет питательной среды, что свидетельствует о неудачной стерилизационной обработке. Если культура полностью уничтожена в стерилизаторе, то она не растет и индикаторный цвет питательной среды не меняется, что свидетельствует об успешной стерилизационной обработке.

Этап перемещения биологического теста после стерилизационной обработки из стерилизатора до места дальнейших манипуляций с биотестом для получения результата контроля (а это могут быть территориально удаленные объекты и время), а также помещение культуры в питательную среду и термостатирование (работа непосредственно с биотестом и время) требует жестких условий асептики (фактически стерильных условий).

Нарушение этих условий приводит к повторному обсеменению биологического теста микроорганизмами из внешней среды (повторная контаминация) после стерилизации до получения результата биологического контроля. И, как следствие, повторно контаминированный биотест при термостатировании прорастает и сигнализирует контролеру о «неудачной» стерилизации. Фактически останавливается работа нормально работающего стерилизатора из-за нарушения правил асептики при работе с биотестом.

В условиях массовой и повсеместной стерилизации объектов этап перемещения биотеста, его активация и термостатирование должен быть надежно защищен от возможности повторной контаминации для получения однозначного результата прямого контроля стерилизации.

В настоящее время эта проблема решена для низкотемпературных и среднетемпературных способов стерилизации (до 134°C) путем размещения культуры и питательной среды в одном герметически закрытом пространстве (контейнере - полиамидной пробирке), как, например, это описано в полезной модели RU №129814, опубл. 10.07.2013. До активации культура и питательная среда разделены между собой (питательная среда помещена в стеклянную легколомаемую ампулу). После стерилизации, во время активации биотеста через полужесткий контейнер стеклянную ампулу ломают и питательная среда «проливается» на культуру (помещают культуру в питательную среду), условия асептики не нарушаются - контейнер деформируется, но остается герметично закрытым. После этого полиамидную пробирку целиком термостатитуют. Так как полиамид фактически прозрачен, то после термостатирования через полиамид видно индикаторный цвет питательной среды.

Такой биотест называют автономным (ни культура, ни питательная среда после стерилизации не контактируют с окружающей средой).

Однако этот способ обеспечения условий асептики для биотеста после стерилизации не подходит для высокотемпературной (свыше 140°C) стерилизации, температура которой достигает 160°C, 180°C, 200°C, 220°C, так как полиамид начинает разрушаться после 140°C.

На сегодняшний день не существует автономных биотестов для высокотемпературных способов стерилизации.

Предлагаемый способ автономности (сохранения условий асептики при работе с биотестом после стерилизации) при высоких температурах стерилизационной обработки решает проблему отсутствия автономных биологических индикаторов для высокотемпературной стерилизации. Этот способ можно использовать и при создании условий автономности и для биотестов для низко- и среднетемпературных стерилизаций.

Суть способа заключается в следующем.

В связи с невозможностью использования полиамида при высоких температурах, в качестве контейнера используют стекло (инсулиновый пузырек), который обсеменяется и является инокулированным носителем.

Так как стекло не деформируется как полиамид, то питательную среду нельзя заранее изолированно разместить в том же контейнере, где находится культура. Поэтому при работе с таким биотестом после стерилизации необходимо предложить такой механизм введения заранее подготовленной (простерилизованной) питательной среды, чтобы во время введения питательной среды и при термостатировании культуры, помещенной в бульон, сохранить условия асептики внутри контейнера биотеста.

Известны биологические индикаторы автономного типа, в частности, раскрытые в патентах US №№4,717,661; 5,736,355; 5,405,580, в которых тест-организм и питательная среда-индикатор, разделенные между собой, помещены в одну упаковку и стерилизуются вместе. Перед инкубированием с помощью различных конструктивных исполнений питательная среда-индикатор переносится на трест-организм чаще всего путем разрушения ампулы с питательной средой-индикатором. Биоиндикаторы автономного типа не исключают возможность ухудшения ростовых свойств (уменьшения чувствительности) питательной среды и деградации Ph индикатора, что ведет к снижению надежности тестирования.

Наиболее близким к заявленному изобретению является биологический индикатор, описанный в патенте на изобретение RU №2123353, опубликованном 20.12.1998, состоящий из емкости с культурой и емкости с питательной средой-индикатором. Каждая емкость герметично закрыта крышкой, выполненной в виде мембраны, которая имеет форму петли. Внутренняя часть мембраны соединена герметично по периметру с торцевой стенкой емкости, а ее наружная часть имеет свободный конец, выступающий за боковую стенку емкости. В значительной степени повышается качество контроля режима стерилизации изделий.

Существенным недостатком биоиндикаторов раздельного типа является необходимость создания асептических условий для переноса тест-организма (культуры) после стерилизации в питательную среду, что связано с подготовкой стерильных инструментов и деталей и не всегда возможно в условиях лечебно-профилактических учреждений. Нарушение указанных условий вызывает контаминацию биотеста, что значительно снижает надежность индикации режимов стерилизации. Кроме того, недостатком известных биологических индикаторов автономного типа является сложность конструкции и трудоемкость в изготовлении крышки контейнера.

Раскрытие изобретения

Технический результат, достигаемый при реализации заявленного изобретения, заключается в обеспечении асептических условий для переноса тест-организма после стерилизации в питательную среду без дополнительных инструментов и условий, в том числе для высокотемпературных видов стерилизации. Полностью исключается контаминация тест-организмов, дегидратация питательной среды-индикатора, которая может влиять на срок инкубации. Кроме того, конструкция биотеста проста в исполнении и использовании.

Указанный технический результат достигается тем, что в биологическом индикаторе для контроля стерилизации, состоящем из контейнера с крышкой для культуры и контейнера с питательной средой, отличающийся тем, что контейнер с питательной средой выполнен в виде стрипа с дозатором, а крышка выполнена в виде резиновой пробки с каналом переменного сечения внутри, вводная часть канала имеет диаметр, равный внешнему диаметру дозатора стрипа, а выводная часть имеет диаметр, равный внутреннему диаметру дозатора стрипа, с внешней стороны пробки выводная часть канала выполнена в виде наплыва со сквозным надрезом. Стрип с дозатором выполнен из пластика (например, полипропилен, полиэтилен). Контейнер с культурой выполнен из стекла. Пробка выполнена с клапаном для закрывания вручную вводной части канала.

Краткое описание чертежей

Сущность изобретения поясняется чертежами, где:

на фиг. 1 показан общий вид биологического индикатора;

на фиг. 2 показана пробка биологического индикатора (главный вид в разрезе);

на фиг. 3 - пробка биологического индикатора, вид А.

Осуществление изобретения

В качестве контейнера 1 используют стеклянный инсулиновый пузырек, который обсеменяется культурой 2 и является инокулированным носителем.

Питательную среду 3 разливают в специальный стрип 4 с «носиком» (дозатором) 5 определенного диаметра. Стрип стерилизуют низкотемпературным способом стерилизации. При разливе стрип герметично закрывают «головкой» (на фиг. 1, 2 не показано). Питательная среда готова к применению в биотесте.

Саму культуру размещают в стеклянном контейнере и закрывают резиновой пробкой 6, выдерживающей температуру до 250°C. В центре пробки выполнен канал переменного сечения (дюза). Вводная (наружная) часть канала 7 имеет диаметр, равный внешнему диаметру дозатора стрипа, а выводная (внутренняя) часть 8 имеет диаметр, равный внутреннему диаметру дозатора стрипа. Вводная часть канала закрыта от окружающей среды клапаном (на фиг. 1, 2 не показан), который легко открывается вручную. Выводная часть канала в пробке закрыта наплывом 9 каплеобразной формы, в котором выполнен надрез 10.

Для обеспечения автономности (условий асептики) при работе с биотестом в обычных условиях после стерилизации у резиновой пробки контейнера открывают клапан, а у стрипа «сворачивают головку». Дозатор стрипа вставляют в дюзу пробки и внешняя поверхность дозатора стрипа (обсемененная в силу асептических условий хранения стрипа) плотно входит в вводную часть канала дюзы и упирается кольцом носика дозатора в выводную часть дюзы. Выводная часть дюзы по диаметру совпадает с внутренним диаметром дозатора стрипа, что при введении питательной среды из стрипа в стеклянный контейнер гарантирует невозможность контакта стерильной питательной среды с окружающей средой. Дополнительно, возможность повторной контаминации предотвращает стрип, который с помощью дозатора плотно помещен в пробку контейнера.

Для обеспечения возможности проникновения питательной среды в контейнер и в дальнейшем асептической защиты термостатируемой культуры используют принцип «ниппеля». В каплеобразном наплыве резиновой пробки делается тонкий надрез, который плотно сомкнут за счет того, что резиновая пробка плотно вставлена в стеклянный контейнер.

Для того чтобы ввести питательную среду в контейнер, энергично нажимают на «тело» стрипа, создавая тем самым локальное избыточное давление в дозаторе стрипа и вытесняя питательную среду из «тела» стрипа. За счет избыточного давления питательная среда расширяет надрез в пробке (открывает «ниппель») и проникает в контейнер. После окончания введения питательной среды давление выравнивается и «ниппель» закрывается, изолируя тем самым содержимое контейнера от окружающей среды (созданы условия асептики). Для дополнительной надежности после извлечения стрипа из пробки ее закрывают специальной резиновой заглушкой, внутренняя часть которой представляет собой «хоботок», диаметр которого совпадает с вводной частью дюзы, полностью замещающий в пробке место дозатора.

Изобретение относится к области медицины, а именно к микробиологии, и предназначено для контроля стерилизации материалов и изделий. Биологический индикатор для контроля стерилизации состоит из контейнера для культуры с резиновой цилиндрической пробкой и контейнера с питательной средой, выполненного в виде стрипа с дозатором. Пробка выполнена с каналом переменного сечения внутри. Вводная часть канала имеет диаметр, равный внешнему диаметру дозатора стрипа. Выводная часть имеет диаметр, равный внутреннему диаметру дозатора стрипа. С внешней стороны пробки выводная часть канала выполнена в виде наплыва с надрезом. Использование изобретения обеспечивает асептические условия для переноса культуры после стерилизации в питательную среду без дополнительных инструментов и условий, в том числе для высокотемпературных видов стерилизации. Также исключается контаминация тест-организмов, дегидратация питательной среды-индикатора, которая может влиять на срок инкубации. 4 з.п. ф-лы, 3 ил.

1. Биологический индикатор для контроля стерилизации, состоящий из контейнера с крышкой для культуры и контейнера с питательной средой, отличающийся тем, что контейнер с питательной средой выполнен в виде стрипа с дозатором, а крышка выполнена в виде резиновой пробки с каналом переменного сечения внутри, вводная часть канала имеет диаметр, равный внешнему диаметру дозатора стрипа, а выводная часть имеет диаметр, равный внутреннему диаметру дозатора стрипа, с внешней стороны пробки выводная часть канала выполнена в виде наплыва со сквозным надрезом.

2. Биологический индикатор по п. 1, отличающийся тем, что стрип с дозатором выполнен из пластика.

3. Биологический индикатор по п. 1, отличающийся тем, что пробка выполнена цилиндрической.

4. Биологический индикатор по п. 1, отличающийся тем, что пробка выполнена с клапаном для закрывания вводной части канала.

5. Биологический индикатор по п. 1, отличающийся тем, что контейнер для культуры выполнен из стекла.