Известен способ стерилизации микробиологических объектов, например плазмы крови, вирусных вакцин, гомотрансилантатов и других с помощью р-пропиолактона.
Предлагаемый способ стерилизации компонентов питательных бактериологических сред удобен в полевых условиях, а также в обычной лабораторной и производственной практике, где значительно упрощает технологию и аппаратурное оформление.
Отличительная особенность способа - применение р-пропиолактона в качестве стерилизатора компонентов питательных бактериологических сред.
Способ стерилизации компонентов питательных бактериологических сред заключается в добавлении к стерилизуемому компоненту питательной бактериологической среды (белковых, углеводных и других биологических жидкостей и препаратов) раствора р-пропиолактона в дистиллированной воде с последующим выдерживанием в термостате при, 37° в течение нескольких часов. Рекомендуемая стерилизующая концентрация р-пропиолактона, обеспечивающая надежное обеспложивание, около 0,5%.
Для осуществления способа предварительно энергичным смешиванием (3-пропиолактона и дистиллированной воды на ледяной бане готовят 10%-ный рабочий раствор р-пропиолактона. Биологические жидкости и препараты (сыворотка крови, желчь, асцитическая жидкость и т. д.) могут быть взяты от трупа или от животного без соблюдения строгой асептики.
В СВ513И с образованием кислы,х. продуктов, ;идролиза р.-пропиолактона к стерилизуемому биологическому компоненту в зависимости от требуемого оптимального рН приготовляемой питательной бактериологической среды необходимо добавить в качестве буфера двузамещен№ 145989- 2 ный фосфат натрия Na2HPO4 или бикарбонат натрия NaHCOs, учитывая, что в дистиллированной воде при стерилизующей концентрации р-пропиолактона 0,5% рН снижается на 3,57, в питательном бульоне - на 3,25, а при стерилизации сыворотки, желчи и асцитической жидкости-в среднем на 2,91. Рассчитанный объем 10%-ного рабочего раствора р-пропиолактона прибавляют к биологическому компоненту среды цри комнатной температуре, сосуд энергично встряхивают в течение нескольких секунд для того, чтобы продезинфицировать внутреннюю поверхность сосуда и пробку, и помещают в термостат или водяную баню при 37° на три часа. В указанный промежуток времени жидкость становится стерильной, р-пропиолактон исчезает за счет гидролиз,а,, и дальнейщую работу по приготовлению специальных сред проводят со строгим соблюдением асептики. Стерилизованные таким путем материалы могут храниться в течение нескольких дней до их использования.
Для приготовления специальных сред используют питательный бульон или агар, приготовленные на основном растворе Хоттингера,, стерилизованные автоклавированием. В зависимости от приготовляемой среды добавляют стерильно в необходимом количестве тот или иной, обработанный р-пропиолактоном компонент.
Предмет изобретения
Способ стерилизации компонентов питательных бактериологических, сред, отличающийся тем, что, с целью упрощения технологии и аппаратурного оформления, в качестве стерилизатора используют р-прапиолактон.
