Способ моделирования светлоклеточного рака почки Российский патент 2017 года по МПК G09B23/28 

Изобретение относится к медицине, к экспериментальной онкологии, и может быть использовано в качестве модели светлоклеточного рака почки.

Известен способ моделирования электролитной нефронатии у крыс, основанный на использовании специальной полусиитетической диеты, нагруженной солями двузамещенного фосфорнокислого водного натрия при дефиците калия и магния, ежедневных внутримышечных введений суспензии гидрокортизона ацетата с одновременной заменой питьевой воды 1%-ным раствором хлорида натрия. Данный способ позволяет получить новую экспериментальную модель, отражающую электролитные, липидные и морфологические изменения в почках крыс, в основе которой лежит электролитная нефропатия (1 - Патент РФ №2256953, 2003, G09B 23/28). Данный способ принят за аналог.

Известен способ моделирования нефротического синдрома у крыс. После однократного внутривенного введения адриамицина в дозе 7,5 мг/кг протеинурия начинается через 4-5 дней. Полное выражение синдрома развивается на 13-15 день, когда находили замещение уплощенной эпителиальной цитоплазмы. Эти ультраструктурные изменения стали распространены на 28 день наблюдения (2 - Bertani Т., Poggi A. el al.: Adriamycin-induced nephrotic syndrome in rats:sequence of pathologic events / Lab. Invest. 1982, Jan: 46(1): 16-23). Данный способ принят за аналог.

Способ-прототип моделирования светлоклеточного рака почки не выявлен. Целью изобретения является обеспечение моделирования светлоклеточного рака почки.

Технический результат достигается тем, что крысам самкам проводят внутрибрюшинное введение формальдегида в дозе 1-1,5 мг/кг и фуросемида в дозе 0,8-1,7 мг/кг один раз в неделю в течение 2-3 недель и спустя 6 месяцев выявляют рак.

Способ реализуется следующим образом.

Фиксированной крысе, самке, весом 200-220 г, внутрибрюшинно один раз в неделю в течение 2-3 недель вводят формальдегид в дозе 1-1,5 мг/кг и фуросемид в дозе 0,8-1,7 мг/кг. Спустя 6 месяцев крысе в щадящих условиях производят нефрэктомию. Из ткани почки вырезают фрагменты, которые фиксируют в растворе 9% формалина, обезвоживают в спиртах возрастающей концентрации 70-98%, заключают в парафин, готовят гистологические срезы, окрашивают гематоксилином и эозином и выявляют наличие светлоклеточного рака почки.

Гистологически обнаруживают крупные светлые клетки с оптически пустой цитоплазмой, содержащей липиды и гликоген, клетки с округлыми, довольно мономорфными ядрами формируют альвеолярные, ацинарные, солидные и солидно-железистые структуры с недостаточностью гликогенолиза и липолиза, которая определяется утратой взаимодействия аденилатциклазы опухолевых клеток с гликогеном. Клетки содержат оксифильные включения гиалина, напоминающие тельца Маллори. Могут иметь место полиморфизм ядер (анизокариоз) и клеток (анизоцитоз). Структуры опухолевой паренхимы разделяются фиброваскулярными прослойками стромы, в которых могут располагаться группы липидосодержащих макрофагов (ксантомных клеток). Гистологически отмечают наличие светлоклеточного рака почки.

Способ подтверждается следующими примерами.

Пример 1

Крысе, самке, весом 200 г, содержащейся в условиях свободного доступа к пище и воде, внутрибрюшинно один раз в неделю в течение 2 недель вводят формальдегид в дозе 1,5 мг/кг и фуросемид в дозе 1,7 мг/кг. Спустя 6 месяцев крысе в щадящих условиях производят нефрэктомию. Из ткани почки вырезают фрагменты, которые фиксируют в растворе 9% формалина, обезвоживают в спиртах возрастающей концентрации 70-98%, заключают в парафин, готовят гистологические срезы, окрашивают гематоксилином и эозином.

Гистологически обнаруживают крупные светлые клетки с оптически пустой цитоплазмой, содержащей липиды и гликоген, клетки с округлыми, довольно мономорфными ядрами формируют альвеолярные, ацинарные, солидные и солидно-железистые структуры с недостаточностью гликогенолиза и липолиза. Клетки содержат оксифильные включения гиалина, напоминающие тельца Маллори. Могут иметь место полиморфизм ядер (анизокариоз) и клеток (анизоцитоз). Структуры опухолевой паренхимы разделяются фиброваскулярными прослойками стромы, в которых могут располагаться группы липидосодержащих макрофагов (ксантомных клеток). Гистологически через 6 недель отмечают наличие светлоклеточного рака почки.

Пример 2

Фиксированной крысе, самке, весом 220 г, внутрибрюшинно один раз в неделю в течение 3 недель вводят формальдегид в дозе 1 мг/кг и фуросемид в дозе 0,8 мг/кг. Спустя 6 месяцев крысе в щадящих условиях производят нефрэктомию. Из ткани почки вырезают фрагменты, которые фиксируют в растворе 9% формалина, обезвоживают в спиртах возрастающей концентрации 70-98%, заключают в парафин, готовят гистологические срезы, окрашивают гематоксилином и эозином.

Гистологически обнаруживают крупные светлые клетки с оптически пустой цитоплазмой, содержащей липиды и гликоген, клетки с округлыми ядрами формируют альвеолярные, ацинарные, солидные и солидно-железистые структуры с недостаточностью гликогенолиза и липолиза. Клетки содержат оксифильные включения гиалина, напоминающие тельца Маллори. Могут иметь место полиморфизм ядер (анизокариоз) и клеток (анизоцитоз). Структуры опухолевой паренхимы разделяются фиброваскулярными прослойками стромы, в которых могут располагаться группы липидосодержащих макрофагов (ксантомных клеток). Гистологически отмечают наличие светлоклеточного рака почки.

Осуществлено моделирование светлоклеточного рака почки у 14 крыс. Заявленная совокупность признаков позволяет достичь цель изобретения - обеспечение возможности моделирования светлоклеточного рака почки.

Источники информации

1. Патент РФ №2256953, 2003, G09B 23/28.

2. Bertani Т., Poggi A. et al.: Adriamycin-induced nephrotic syndrome in rats: sequence of pathologic events / Lab. Invest. 1982, Jan: 46(1): 16-23.

Изобретение относится к медицине, к экспериментальной онкологии, и может быть использовано для моделирования светлоклеточного рака почки. Способ заключается в том, что крысам самкам проводят внутрибрюшинное введение формальдегида в дозе 1-1,5 мг/кг и фуросемида в дозе 0,8-1,7 мг/кг один раз в неделю в течение 2-3 недель. Спустя 6 месяцев выявляют рак. Способ обеспечивает создание достоверной модели заболевания. Целью изобретения является обеспечение моделирования светлоклеточного рака почки. Технический результат достигается тем, что экспериментальным животным однократно в неделю в течение 2-3 недель вводят формальдегид в дозе 1-1,5 мг/кг и фурасемид в дозе 0,8-1,7 мг/кг. 2 пр.

Способ моделирования светлоклеточного рака почки, заключающийся в том, что крысам самкам проводят внутрибрюшинное введение формальдегида в дозе 1-1,5 мг/кг и фуросемида в дозе 0,8-1,7 мг/кг один раз в неделю в течение 2-3 недель и спустя 6 месяцев выявляют рак.