Способ перкутанной аспирационной пункционной биопсии печени у крыс Российский патент 2019 года по МПК G09B23/28 

Описание патента на изобретение RU2684195C1

Изобретение относится к области медицины и ветеринарии, может быть использовано как способ получения биоптата у крыс для оценки стадии развития фиброза печени.

Впервые выполненная в 1884 году П. Эрлихом пункционная биопсия печени до настоящего времени остается «золотым стандартом» диагностики в изучении заболеваний печени.

Известен способ перкутанной аспирационной пункционной биопсии печени у крыс с использованием набора для пункционной биопсии по методу Menghini, заключающийся в применении доступа через брюшную стенку [1, 2]. Данный способ принят за аналог. При этом авторы утверждают, что «из-за анатомических особенностей крысы типичный межреберный доступ нельзя использовать» в связи с высокой вероятностью повреждения диафрагмы [1]. Этот доступ имеет и другие существенные недостатки: во-первых, прохождение пункционной иглой через брюшную стенку крайне затруднено по причине высокой подвижности мышц и слабой их фиксации к скелетному каркасу; во-вторых, высокая вероятность получения биоптата другой ткани в результате прокола пункционной иглой других органов; в-третьих, высокий риск летальных исходов экспериментальных животных в результате повреждения жизненно важных органов (легкие, брюшной отдел аорты, кишечник, желудок), связанный со случайным проколом печени насквозь в процессе прохождения пункционной иглой через брюшную стенку. Перечисленные факторы существенно затрудняют выполнение данной манипуляции.

Целью изобретения является повышение точности, эффективности и безопасности выполнения пункционной биопсии печени у экспериментальных крыс.

Поставленная цель реализуется в способе перкутанной аспирационной пункционной биопсии печени у крыс, в котором после предоперационной подготовки пальпаторно определяют мечевидный отросток и край правой реберной дуги, при помощи скальпеля с градуированной линейкой откладывают интервал 2 см от нижнего края мечевидного отростка в сторону правой области грудной клетки до точки D, затем выполняют разрез кожи скальпелем от вышеуказанной точки D в сторону реберной дуги по направлению к мечевидному отростку; затем определяют точку пункции (Р), которая находится на расстоянии 0,5 см от точки D в сторону края реберной дуги на протяжении разреза и соответствует межреберью VII и VIII ребра; затем при помощи троакара размером 1,6 мм в точке Р осуществляют прокол под прямым углом по направлению к нижнему краю мечевидного отростка до ощущения провала в брюшную полость; после этого троакар извлекают и используют пункционную иглу размером 18 G, которую вводят в пункционный канал до ощущения провала в брюшную полость; к пункционной игле присоединяют аспирационный шприц, в который предварительно набирают 5 мл физиологического раствора; предпосылая иглу перпендикулярно грудной клетке и смещая ее вправо на 10 градусов, осуществляют прокол капсулы печени на глубину приблизительно 1 см, при этом одновременно с проколом выполняют аспирацию поршнем шприца до защелки фиксатора; затем, не извлекая иглу из печени, отклоняют ее на 20-30 градусов относительно оси прокола, после чего возвращают иглу в прежнее положение и извлекают из пункционного канала.

Изобретение поясняется фиг. 1, на которой показана фиксация крысы на операционном столе; фиг. 2, на которой показано определение точки D; фиг. 3, на которой показано рассечение кожи скальпелем; фиг. 4, на которой показано топографическое расположение пункционной иглы в проекции межреберья VII и VIII ребра; фиг. 5, на которой показано использование точки Р для исключения вероятности повреждения диафрагмы; фиг. 6, на которой показана подготовка пункционного канала; фиг. 7, на которой показан прокол капсулы печени; фиг. 8, на которой показана аспирация биоптата и отделение его от основной ткани; фиг. 9-10, на которой приведен вид биоптата печени; фиг. 11, на которой показан гистологический препарат образца ткани печени, полученного при пункционной биопсии, окр. гематоксилином-эозином, ув. ×50. На фиг. 12. показано формирование нежных неваскуляризированных порто-портальных соединительно-тканных септ. Окр. гематоксилином-эозином, ув. ×100. На фиг. 13 показано формирование нежных неваскуляризированных порто-портальных соединительно-тканных септ. Окр. пикрофуксином по Ван Гизон, ув. ×100.

Метод реализуется следующим образом.

Крысам породы Wistar весом 250±50 г в условиях операционной, вводится общий анестетик диссоциативного действия Zoletil 100 (по 250 мг тилетамина гидрохлорида и золепама гидрохлорида) в дозе 20 мг/кг веса. После наступления анестезии у животного сбривается шерсть в области брюшка и грудной клетки справа, после чего осуществляется фиксация на операционном столе (фиг. 1).

Операционное поле обрабатывается антисептическим раствором по Филончикову-Гроссиху. Пальпаторно определяется мечевидный отросток и край правой реберной дуги. При помощи скальпеля с градуированной линейкой откладывается интервал 2 см от нижнего края мечевидного отростка в сторону правой области грудной клетки. Полученная точка D соответствует месту прикрепления диафрагмы к грудной клетке (фиг. 2).

Далее выполняется разрез кожи скальпелем от точки D в сторону реберной дуги по направлению к мечевидному отростку (фиг. 3).

Затем происходит определение точки пункции (Р), которая находится на расстоянии 0,5 см от точки D в сторону края реберной дуги на протяжении разреза и соответствует межреберью VII и VIII ребра (фиг. 4).

Используя точку Р, мы исключаем вероятность повреждения диафрагмы (фиг. 5).

При помощи троакара размером 1,6 мм в точке Р осуществляется прокол под прямым углом по направлению к нижнему краю мечевидного отростка до ощущения провала в брюшную полость. Данная манипуляция выполняется с целью подготовки канала для прохождения по нему пункционной иглы (фиг. 6).

После этого троакар извлекается и используется пункционная игла размером 18 G из набора для пункции печени тип Menghini, которая вводится в пункционный канал до ощущения провала в брюшную полость.

К пункционной игле присоединяется аспирационный шприц, в который предварительно набирается 5 мл физиологического раствора. Предпосылая иглу перпендикулярно грудной клетке и смещая ее вправо на 10 градусов, осуществляется прокол капсулы печени на глубину приблизительно 1 см при этом одновременно с проколом выполняется аспирация поршнем шприца до защелки фиксатора (фиг. 7).

Для отделения биоптата от основной ткани, необходимо, не извлекая иглу из печени, отклонить ее на 20-30 градусов относительно оси прокола, после чего вернуть иглу в прежнее положение. Игла извлекается из пункционного канала (фиг. 8).

Полученный биоптат под давлением, создаваемым поршнем в шприце, выдавливается из иглы, после чего помещается в пробирку с формалином (фиг. 9-10).

Края раны ушиваются с использованием рассасывающегося шовного материала, после чего обрабатываются 5% спиртовым раствором йода

С целью профилактики кровотечений крысе однократно вводится 0,1 мл 12,5% этамзилата, после чего животное укладывается животом на предварительно обернутый пеленкой пузырь со льдом на 20-30 минут. На завершающем этапе процедуры животное помещается в чистую клетку. Обработка операционного шва 5% спиртовым раствором йода выполняется один раз в сутки на протяжении 4 дней.

Для объективной оценки эффективности пункционной биопсии печени использовался гистологический метод. Образцы биоптата помещались в раствор 10% нейтрального формалина, в котором фиксировались в течение 24 часов. После фиксации образцы подвергались дегидратации путем инкубации в изопропиловых спиртах, имбибировались парафином по общепринятой методике. Из парафиновых блоков с помощью ротационного микротома изготавливались срезы ткани толщиной 4 мкм, окрашивались гематоксилином-эозином и пикрофуксином по Ван Гизон и заключались по покровные стекла (см. фиг. 11-13). Изучение гистологических препаратов осуществлялось с помощью бинокулярного микроскопа в проходящем свете при суммарном увеличении ×50, ×100, ×200, ×400. Полуколичественная оценка степени выраженности фиброза определялась по системе METAVIR [3] (где F0 -отсутствие фиброза, F1 - звездчатое расширение портальных трактов без образования септ, F2 - расширение портальных трактов с редкими порто-портальными септами, F3 - множественные порто-центральные септы без цирроза, F4 - цирроз).

Преимущества использования предложенного метода подтверждается следующими фактами. При гистологическом исследовании материала, полученного от 30 крыс породы Wistar с использованием данного доступа, в 30 случаях (100%) определялись портальные тракты печени, позволяющие определить стадию фиброза печени. Летальные исходы у лабораторных животных зарегистрированы не были. Это дает возможность оценить динамику наступления фибротических изменений в печени у одного и того же животного.

Список литературы

1. Corbin, I.R. Serial percutaneous liver biopsies in laboratory rats / I.R. Corbin, G.Y. Minuk // Dig. Dis. Sci. - 2003. - V. 48. - №10. - P. 1939-1943.

2. Drews, G. Percutaneous liver core biopsy in rats: an alternative to minilaparotomy / G. Drews [et al.] // J. Exp. Anim. Sci. - 2000. - №41. - P. 115-120.

3. Bedossa, P. An algorithm for the grading of activity in chronic hepatitis С / P. Bedossa, T. Poynard; The METAVIR Cooperative Study Group // Hepatology. - 1996. - №24. - P. 289-293.

Похожие патенты RU2684195C1

название год авторы номер документа
СПОСОБ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОГО МОДЕЛИРОВАНИЯ ЭХИНОКОККОЗА ПЕЧЕНИ 2024
  • Гаврилюк Тимофей Васильевич
  • Жданов Константин Валерьевич
  • Козлов Сергей Сергеевич
  • Захаркив Юрий Федорович
  • Козлов Константин Вадимович
  • Саулевич Андрей Валерьевич
  • Карев Вадим Евгеньевич
  • Гудков Роман Владимирович
  • Ласкин Александр Викторович
  • Раджабов Ислам Магомедович
  • Жеребцов Евгений Сергеевич
  • Булавенко Ирина Олеговна
  • Турицин Владимир Сергеевич
RU2816989C1
СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ СТЕПЕНИ ФИБРОЗА ПЕЧЕНИ 2018
  • Бакулин Игорь Геннадьевич
  • Сайганов Сергей Анатольевич
  • Бакулина Наталья Валерьевна
  • Медведев Юрий Викторович
RU2675341C1
СПОСОБ ВЫПОЛНЕНИЯ ЧРЕСКОЖНОЙ ПУНКЦИОННОЙ БИОПСИИ 2007
  • Мизгирёв Денис Владимирович
  • Дуберман Борис Львович
  • Пономарёв Александр Николаевич
  • Мочалов Алексей Александрович
  • Черных Игорь Анатольевич
  • Софронов Сергей Михайлович
RU2362490C1
Способ тонкоигольной аспирационной биопсии парастернальных лимфатических узлов у больных раком молочной железы 2019
  • Сниткин Вячеслав Михайлович
  • Шолохов Владимир Николаевич
  • Бердников Сергей Николаевич
  • Махотина Мария Сергеевна
  • Карпова Марина Сергеевна
  • Валиев Рамиз Камраддинович
  • Петровский Александр Валерьевич
  • Синюкова Галина Тимофеевна
RU2701352C1
СПОСОБ ВЫПОЛНЕНИЯ ЛАПАРОСКОПИЧЕСКОЙ ФУНДОПЛИКАЦИИ В ЗАВИСИМОСТИ ОТ КОНСТИТУЦИОНАЛЬНОГО ТИПА ПАЦИЕНТА 2012
  • Буриков Максим Алексеевич
  • Шульгин Олег Владимирович
RU2529415C2
СПОСОБ ОПЕРАТИВНОГО ДОСТУПА К ПРАВОЙ ДОЛИ ПЕЧЕНИ 2003
  • Чикотеев С.П.
  • Корнилов Н.Г.
  • Панасюк А.И.
  • Прокопьев М.В.
RU2240732C1
СПОСОБ ДИФФЕРЕНЦИАЛЬНОЙ ДИАГНОСТИКИ ДИФФУЗНЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ ПЕЧЕНИ 2011
  • Борсуков Алексей Васильевич
  • Перегонцева Ольга Сергеевна
  • Буеверов Алексей Олегович
  • Ипатов Юрий Александрович
RU2482792C1
Способ проведения обезболивания при хроническом болевом синдроме у онкологических больных путем паравертебральной блокады под ультразвуковым контролем 2023
  • Миронов Петр Иванович
  • Хабибуллина Зиля Анваровна
  • Исламов Салават Ахметнурович
RU2819991C1
Способ интраоперационной координации во время проведения промежностной биопсии предстательной железы и комплект для его осуществления 2021
  • Чернышева Дарья Юрьевна
  • Попов Сергей Валерьевич
  • Орлов Игорь Николаевич
  • Нерадовский Вячеслав Александрович
  • Топузов Тимур Марленович
  • Малевич Сергей Михайлович
RU2776980C1
СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ ХРОНИЧЕСКОГО ВИРУСНОГО ГЕПАТИТА В+С НА ФОНЕ ОПИСТОРХОЗА 2002
  • Рачковский М.И.
  • Белобородова Э.И.
  • Белобородова Е.В.
  • Савченко И.В.
RU2226690C2

Иллюстрации к изобретению RU 2 684 195 C1

Реферат патента 2019 года Способ перкутанной аспирационной пункционной биопсии печени у крыс

Изобретение относится к медицине, а именно к экспериментальной медицине и ветеринарии. После предоперационной подготовки пальпаторно определяют мечевидный отросток и край правой реберной дуги. При помощи скальпеля с градуированной линейкой откладывают интервал 2 см от нижнего края мечевидного отростка в сторону правой области грудной клетки - точка D. Затем выполняют разрез кожи скальпелем от точки D в сторону реберной дуги по направлению к мечевидному отростку. После чего определяют точку пункции Р, которая находится на расстоянии 0,5 см от точки D в сторону края реберной дуги на протяжении разреза и соответствует межреберью VII и VIII ребра. Далее, при помощи троакара размером 1,6 мм в сагиттальной плоскости, проходящей через точку Р под углом 45 градусов в направлении к нижнему краю мечевидного отростка, осуществляют прокол, на глубину 3-5 мм до ощущения провала в брюшную полость. После этого троакар извлекают и используют пункционную иглу размером 18 G, которую вводят в пункционный канал до ощущения провала в брюшную полость. К пункционной игле присоединяют аспирационный шприц, в который предварительно набирают 5 мл физиологического раствора; предпосылая иглу перпендикулярно грудной клетке и смещая ее вправо на 10 градусов, осуществляют прокол капсулы печени на глубину приблизительно 1 см, при этом одновременно с проколом выполняют аспирацию поршнем шприца до защелки фиксатора. Затем, не извлекая иглу из печени, отклоняют ее на 20-30 градусов относительно оси прокола, после чего возвращают иглу в прежнее положение и извлекают из пункционного канала. Способ позволяет повысить точность, эффективность и безопасность выполнения пункционной биопсии печени у экспериментальных крыс. 13 ил.

Формула изобретения RU 2 684 195 C1

Способ перкутанной аспирационной пункционной биопсии печени у крыс, отличающийся тем, что после предоперационной подготовки пальпаторно определяют мечевидный отросток и край правой реберной дуги, при помощи скальпеля с градуированной линейкой откладывают интервал 2 см от нижнего края мечевидного отростка в сторону правой области грудной клетки - точка D, затем выполняют разрез кожи скальпелем от точки D в сторону реберной дуги по направлению к мечевидному отростку; после чего определяют точку пункции Р, которая находится на расстоянии 0,5 см от точки D в сторону края реберной дуги на протяжении разреза и соответствует межреберью VII и VIII ребра; далее при помощи троакара размером 1,6 мм в сагиттальной плоскости, проходящей через точку Р под углом 45 градусов в направлении к нижнему краю мечевидного отростка, осуществляют прокол на глубину 3-5 мм до ощущения провала в брюшную полость; после этого троакар извлекают и используют пункционную иглу размером 18 G, которую вводят в пункционный канал до ощущения провала в брюшную полость; к пункционной игле присоединяют аспирационный шприц, в который предварительно набирают 5 мл физиологического раствора; предпосылая иглу перпендикулярно грудной клетке и смещая ее вправо на 10 градусов, осуществляют прокол капсулы печени на глубину приблизительно 1 см, при этом одновременно с проколом выполняют аспирацию поршнем шприца до защелки фиксатора; затем, не извлекая иглу из печени, отклоняют ее на 20-30 градусов относительно оси прокола, после чего возвращают иглу в прежнее положение и извлекают из пункционного канала.

Документы, цитированные в отчете о поиске Патент 2019 года RU2684195C1

CORBIN I.R
et al
Serial percutaneous liver biopsies in laboratory rats
Dig
Dis
Sci., 2003, V
Приспособление для автоматической односторонней разгрузки железнодорожных платформ 1921
  • Новкунский И.И.
SU48A1
СПОСОБ ДИФФЕРЕНЦИАЛЬНОЙ ДИАГНОСТИКИ ЗАБОЛЕВАНИЙ ПЕЧЕНИ 2009
  • Борсуков Алексей Васильевич
  • Перегудов Игорь Вячеславович
RU2406434C2
СПОСОБ ПРОГНОЗИРОВАНИЯ РАЗВИТИЯ ПЕЧЕНОЧНОЙ НЕДОСТАТОЧНОСТИ ПРИ МЕХАНИЧЕСКОЙ ЖЕЛТУХЕ В ЭКСПЕРИМЕНТЕ 2016
  • Воронова Елена Александровна
  • Пахомова Регина Александровна
  • Нагорнов Юрий Сергеевич
  • Кочетова Людмила Викторовна
  • Винник Юрий Семёнович
RU2631596C1
СПОСОБ ОЦЕНКИ СОСТОЯНИЯ ПЕЧЕНИ ПРИ ЛЕЧЕНИИ ОПИСТОРХОЗА 2003
  • Поддубная Ольга Александровна
  • Белобородова Эльвира Ивановна
  • Пурлик Игорь Леонидович
RU2283493C2
ЛАЗАРЕНКО Н.В
и др
Гистологическая характеристика ткани печени у крыс, длительно получавших карпрофен
The Journal of scientific articles "Health and Education Millennium", 2017, V
Способ изготовления электрических сопротивлений посредством осаждения слоя проводника на поверхности изолятора 1921
  • Андреев Н.Н.
  • Ландсберг Г.С.
SU19A1
Аппарат для нагревания окружающей его воды 1920
  • Соколов Н.Н.
SU257A1
ШИЛОВ А
М
Влияние неонатопластики на течение экспериментального цирроза печени у крыс
Дисс.на соиск
Уч
степ
КВН, Москва, 2005, с.161.

RU 2 684 195 C1

Авторы

Саулевич Андрей Валерьевич

Жданов Константин Валерьевич

Карев Вадим Евгеньевич

Захаренко Сергей Михайлович

Шахманов Дмитрий Михайлович

Козлов Константин Вадимович

Захаркив Юрий Федорович

Козлов Сергей Сергеевич

Кравцов Вячеслав Юрьевич

Сукачев Виталий Сергеевич

Попов Денис Владимирович

Карякин Сергей Сергеевич

Габдрахманов Ильнур Адисович

Яременко Михаил Васильевич

Гудков Роман Владимирович

Булавенко Ирина Олеговна

Турицин Владимир Сергеевич

Даты

2019-04-04Публикация

2018-03-12Подача