ФАРМАЦЕВТИЧЕСКАЯ КОМПОЗИЦИЯ АНТИГЛИКИРУЮЩЕГО ДЕЙСТВИЯ В ТВЕРДОЙ ЛЕКАРСТВЕННОЙ ФОРМЕ В ВИДЕ КАПСУЛ И СПОСОБ ЕЕ ПОЛУЧЕНИЯ Российский патент 2020 года по МПК A61K31/53 A61P3/10 

Описание патента на изобретение RU2738804C1

1. Область техники, к которой относится изобретение

Изобретение относится к химико-фармацевтической промышленности, медицине, фармакологии и касается производства средств антигликирующего действия.

2. Уровень техники

Сахарный диабет (СД) - хроническое неинфекционное заболевание, темпы роста распространенности которого приобрели масштаб мировой эпидемии [DiabetesAtlas 7thEdition // InternationalDiabetesFederation. 2015. 144 p.; Dedov I.I., Shestakova M.V., Vikulova O.K. Epidemiology of diabetes mellitus in Russian Federation: clinical and statistical report according to the federal diabetes registry // Diabetes Mellit. 2017. Vol. 20, №1. P. 13-41]. Заболевание характеризуется прогрессирующим течением и развитием ряда острых и поздних осложнений, зачастую приводящих к временной потере трудоспособности, инвалидизации и ранней смерти [Дедов, Шестакова. Сахарный диабет: диагностика, лечение, профилактика. Москва: ООО «Издательство «Медицинское информационное агентство», 2011. 808 р.]. Поэтому вопрос профилактики и лечения осложнений СД - один из важнейших в современной медицине.

Одним из патогенетических факторов развития поздних осложнений сахарного диабета считают неферментативное взаимодействие между свободными аминогруппами белков и карбонильными группами восстановленных Сахаров и других карбонильных соединений, приводящее к формированию протеазоустойчивых аддуктов, известных как конечные продукты гликирования (КПГ) (AGE) [Ramasamy R. Advanced glycation end products and RAGE: a common thread in aging, diabetes, neurodegeneration, and inflammation // Glycobiology. 2005. Vol. 15, №7. P. 16R-28R.]. КПГ препятствуют действию оксида азота [Bierhaus A. etal. AGEs and their interaction with AGE-receptors in vascular disease and diabetes mellitus. I. The AGE concept. // Cardiovasc. Res. 1998. Vol. 37, №3. P. 586-600] и способны индуцировать перекисное окисление липидов [Gasic-Milenkovic J., Loske С., G. Advanced glycation end products cause lipid peroxidation in the human neuronal cell line // J. Alzheimer's Dis. 2003. Vol. 5, №1. P. 25-30.]. Наконец, существует рецептор-опосредованный путь, связанный с индукцией и активацией рецепторов к КПГ (RAGE), запускающих провоспалительные и прокоагулянтные сигнальные пути [Schmidt A.M. et al. The multiligand receptor RAGE as a progression factor amplifying immune and inflammatory responses // J. Clin. Invest. 2001. Vol. 108, №7. P. 949-955]. Активация RAGE участвует не только в патогенезе сахарного диабета, но и в почечной недостаточности [Deane R.J.R. et al. A multimodal RAGE-specific inhibitor reduces amyloid β-mediated brain disorder in a mouse model of Alzheimer disease // J. Clin. Invest. 2012. Vol. 122, №4. P. 1377-1392]. Формирование КПГ в процессе старения и при сахарном диабете обладает выраженным провоспалительным эффектом и приводит к повышению сердечно-сосудистого риска [Hanssen N.M.J, et al. Plasma Advanced Glycation End Products Are Associated With Incident Cardiovascular Events in Individuals With Type 2 Diabetes: A Case-Cohort Study With a Median Follow-up of 10 Years (EPIC-NL) // Diabetes. 2015. Vol. 64, №1. P. 257-265]. Накопление КПГ характерно для всех осложнений диабета, включая нефропатию, ретинопатию, атеросклероз и нейропатию [Vlassara Н., Uribarri J. Advanced Glycation End Products (AGE) and Diabetes: Cause, Effect, or Both? // Curr. Diab. Rep. 2014. Vol. 14, №1 P. 453; Singh V.P. et al. Advanced glycation end products and diabetic complications // Korean J. Physiol. Pharmacol. 2014. Vol. 18, №1. P. 1-14]. Ha основании этого можно утверждать, что, используя ингибиторы образования КПГ, можно существенно уменьшить риск развития осложнений СД.

В последнее десятилетие опубликованы многочисленные работы, посвященные синтетическим низкомолекулярным ингибиторам КПГ и их терапевтическому потенциалу [Sourris K.С., Harcourt В.Е., Forbes J.M. A New Perspective on Therapeutic Inhibition of Advanced Glycation in Diabetic Microvascular Complications: Common Downstream Endpoints Achieved Through Disparate Therapeutic Approaches? // Am. J. Nephrol. 2009. Vol. 30, №4. P. 323-335; Schalkwijk C.G., Miyata T. Early- and advanced non-enzymatic glycation in diabetic vascular complications: the search for therapeutics // Amino Acids. 2012. Vol. 42, №4. P. 1193-1204].

Аминогуанидин (Pimagedine) был первым выявленным ингибитором образования КПГ и изучен наиболее подробно [Brownlee М. et al. Aminoguanidine prevents diabetes-induced arterial wall protein cross-linking. // Science. 1986. Vol. 232, №4758. P. 1629-1632.]. Рандомизированные плацебо-контролируемые исследования оценивали эффективность аминогуанидина у пациентов с диабетом 1 и 2 типа. В клиническом исследовании III фазы у пациентов с СД1 аминогуанидин уменьшал протеинурию и прогрессирование ретинопатии [Bolton W.K. et al. Randomized Trial of an Inhibitor of Formation of Advanced Glycation End Products in Diabetic Nephropathy // Am. J. Nephrol. 2004. Vol. 24, №1. P. 32-40]. Это было первым клиническим доказательством эффективности ингибирования образования КПГ для борьбы с серьезными осложнениями СД1. Однако в силу неудовлетворительного профиля безопасности, выявленных прооксидантных свойств [Suji G., Sivakami S. DNA damage by free radical production by aminoguanidine. // Ann. N.Y. Acad. Sci. 2006. Vol. 1067. P. 191-199] он не может использоваться для терапевтических целей. Тем не менее, аминогуанидин продолжает служить веществом сравнения при разработке новых ингибиторов образования КПГ.

Пиридоксамин, производное витамина В6, предотвращает образование КПГ из промежуточных продуктов Амадори [Ahmad S. et al. Inhibitory Effect of Metformin and Pyridoxamine in the Formation of Early, Intermediate and Advanced Glycation End-Products // PLoS One / ed. Agarwal P.K. 2013. Vol. 8, №9. P. е72128]. Он замедляет прогрессирование заболевания почек, снижает гиперлипидемию и окислительно-восстановительный дисбаланс у крыс с экспериментальным СД1 [Degenhardt Т.Р. et al. Pyridoxamine inhibits early renal disease and dyslipidemia in the streptozotocin-diabetic rat. // Kidney Int. 2002. Vol. 61, №3. P. 939-950]. В исследованиях II фазы у пациентов с диабетической нефропатией пиридоксамин значительно нормализовал содержание креатинина в сыворотке, тогда как различий в экскреции альбумина в моче не наблюдалось [Williams М.Е. et al. Effects of pyridoxamine in combined phase 2 studies of patients with type 1 and type 2 diabetes and overt nephropathy. // Am. J. Nephrol. 2007. Vol. 27, №6. P. 605-614]. Однако маловероятно, что этот эффект обусловлен витамином В6 и, тем самым, компрометирует использование пиридоксамина [Thornalley P.J., Rabbani N. Therapy: Vitamin B6, B9 and В12 in diabetic nephropathy-beware. // Nat. Rev. Endocrinol. 2010. Vol. 6, №9. P. 477-478].

3. Сущность изобретения

Задачей изобретения является создание фармацевтической композиции для перорального введения лекарственного средства, действующего на конечные продукты гликирования коллагена (AGE), в форме желатиновых капсул, содержащих фармакологически приемлемую дозу натриевой соли диэтилового эфира 4-оксо-1,4-дигидропиразоло[5,1-с]-1,2,4-триазин-3,8-дикарбоновой кислоты моногидрата (Натрия 3,8-диэтоксикарбонил-4-оксо-4Н-1,2,4-триазоло[5,1-с][1,2,4]триазинид моногидрата).

Сущность изобретения поясняется следующими материалами: При выборе лекарственной формы необходимо было учитывать, что добавление вспомогательных веществ должно быть минимальным, чтобы не увеличивать ее размер, ухудшающий проглатывание. Также нежелательно использовать в качестве наполнителей производные углеводов, т.к. они нивелируют антигликирующий эффект. Наиболее удобными в этом плане являются капсулы, которые в отличие от таблеток, содержат минимальный набор вспомогательных веществ.

Изучение технологических свойств субстанции натриевой соли диэтилового эфира 4-оксо-1,4-дигидропиразоло[5,1-с]-1,2,4-триазин-3,8-дикарбоновой кислоты моногидрата (Натрия 3,8-диэтоксикарбонил-4-оксо-4Н-1,2,4-триазоло[5,1-с][1,2,4]триазинид моногидрата) показало, что она обладает мелкокристаллической структурой, неудовлетворительной сыпучестью, неоднородным размером частиц, в связи с чем получение содержимого капсул необходимо проводить с использованием предварительного влажного гранулирования с последующим добавлением антифрикционных веществ.

Установленная в ходе фармакологических исследований средне-терапевтическая доза субстанции составила 300 мг на прием.

На Фиг. 1 представлена таблица №1, в которой приведены установленные в ходе экспериментов основные технологические свойства субстанции натриевой соли диэтилового эфира 4-оксо-1,4-дигидропиразоло[5,1-с]-1,2,4-триазин-3,8-дикарбоновой кислоты моногидрата (Натрия 3,8-диэтоксикарбонил-4-оксо-4Н-1,2,4-триазоло[5,1-с][1,2,4]триазинид моногидрата).

Планируемый размер капсул должен быть в пределах №1 (вместимость 0,5 см3). Из таблицы №1 следует, что при насыпном объеме даже с уплотнением в капсулу №1 может поместиться 0,644×0,5=0,322 г субстанции, т.е. на долю вспомогательных веществ остается не более 22 мг. При этом основной задачей было обеспечение равномерности фракционного состава, увеличение насыпного объема, прочности гранул и их сыпучести.

На Фиг. 2 представлена таблица №2, в которой приведены 5 модельных прописей гранулятов для выбора количественного и качественного состава вспомогательных веществ. Выбор вспомогательных веществ проводили направленно: брали наиболее часто употребляемые наполнители, связывающие и скользящие вещества, получали грануляты изучали их свойства, при получении неудовлетворительных результатов переходили к следующему составу и т.д. В таблице №2 содержание связывающих веществ дано в пересчете на сухое вещество (для подсчета средней массы капсулы), но показаны концентрации использованных растворов, таким образом можно рассчитать количество увлажнителя.

Грануляты получали следующим образом: субстанцию и вспомогательные вещества, просеянные сквозь сито 0,5 мм, смешивали, увлажняли раствором ВМВ. Необходимое количество увлажнителя устанавливалось опытным путем. Затем влажную массу гранулировали сквозь сито 3 мм, сушили при температуре 35-40°С, вновь протирали сквозь сито 1 мм, опудривали стеаратом кальция или магния. Указанные в таблице №2 грануляты подвергались оценке по наиболее важным физико-химическим и технологическим показателям по методикам ГФ XIV издания [Государственная фармакопея Российской Федерации / МЗ РФ. - XIV изд. - Т. 2. - Москва, 2018].

На Фиг. 3 в таблице №3 приведены результаты оценки технологических показателей модельных прописей гранулята для капсул натриевой соли диэтилового эфира 4-оксо-1,4-дигидропиразоло[5,1-с]-1,2,4-триазин-3,8-дикарбоновой кислоты моногидрата (Натрия 3,8-диэтоксикарбонил-4-оксо-4Н-1,2,4-триазоло[5,1-с][1,2,4]триазинид моногидрата) Как следует из таблицы №3, по совокупности показателей, находящихся в интервале оптимальных значений, наиболее приемлемыми характеристиками обладал гранулят состава №5, содержащий на одну дозу 300 мг (97%) натриевой соли диэтилового эфира 4-оксо-1,4-дигидропиразоло[5,1-с]-1,2,4-триазин-3,8-дикарбоновой кислоты моногидрата, 6,8 мг (2,2%) пласдона марки К 29/32 и 2,5 мг (0,8%) магния стеарата.

Технологическая схема получения капсулированного препарата натриевой соли диэтилового эфира 4-оксо-1,4-дигидропиразоло[5,1-с]-1,2,4-триазин-3,8-дикарбоновой кислоты моногидрата (Натрия 3,8-диэтоксикарбонил-4-оксо-4Н-1,2,4-триазоло[5,1-с][1,2,4]триазинид моногидрата) включала подготовку ингредиентов (измельчение, просеивание), увлажнение субстанции раствором ВМВ из ряда производных поливинилпирролидона, гранулирование влажной массы, сушку, дробление и ситовою калибровку высушенных гранул, опудривание антифрикционными агентами, выбранными из ряда стеаратов, фасовку полученной сухой массы в количестве 309,3 мг в желатиновые капсулы размера №1.

Техническим результатом настоящего изобретения является фармацевтическая композиция в твердой лекарственной форме (капсулы), действующая на конечные продукты гликирования коллагена (AGE), предназначенная для профилактики и лечения осложнений сахарного диабета.

Фармакокинетические свойства соединения в твердой лекарственной форме

Методы исследования фармакокинетических свойств соединения

Эксперименты выполнены на кроликах-самцах породы «Шиншилла», массой 3-4 кг. Субстанцию натриевой соли диэтилового эфира 4-оксо-1,4-дигидропиразоло[5,1-с]-1,2,4-триазин-3,8-дикарбоновой кислоты, моногидрата (Натрия 3,8-диэтоксикарбонил-4-оксо-4Н-1,2,4-триазоло[5,1-с][1,2,4]триазинид моногидрата) и композицию твердой лекарственной формы вводили перорально с помощью интрагастрального зонда в дозе 20,0 мг/кг из расчета на действующую субстанцию (экспериментально, доказанная терапевтическая доза). За 12 часов до проведения исследования животные лишались доступа к пище без ограничения потребления воды.

Использована методика ВЭЖХ с ультрафиолетовым детектированием, позволяющая определять изучаемую субстанцию в биологическом материале и проводить фармакокинетические исследования. В работе использован жидкостный хроматограф Shimadzu LC-20 с ультрафиолетовым детектором Shimadzu SPD10-Avp (Shimadzu, Япония). Определение действующего вещества натриевой соли диэтилового эфира 4-оксо-1,4-дигидропиразоло[5,1-с]-1,2,4-триазин-3,8-дикарбоновой кислоты, моногидрата (Натрия 3,8-диэтокси-карбонил-4-оксо-4Н-1,2,4-триазоло[5,1-с][1,2,4]триазинид моногидрата) осуществлялось при помощи ультрафиолетового детектора на колонке SupelcoSil LC-18 15 cm × 4,6 mm, 5 μm. Оптимальные условия количественного определения субстанции: длина волны - 205 нм, температура - 30°С, скорость элюента - 1 мл/мин. Элюент - смесь 0.05М калий-фосфатного буфера (рН=3.0) и ацетонитрила в соотношении 72:28. Нижний предел количественного определения - 0.5 мкг/мл.

Для оценки фармакокинетических свойств изучаемых лекарственных веществ рассчитывали ряд параметров.

1) Площадь под фармакокинетической кривой "концентрация - время" (AUC) является основным фармакокинетическим параметром и характеризует биологическую доступность лекарственного средства. Данный параметр рассчитывали модельно - независимым методом статистических моментов в программе MicrosoftExcel:

где

где

Константа элиминации (Kel), характеризующая снижение концентрации препарата на конечном (моноэкспоненциальном) участке фармакокинетической кривой:

где Cmax и Tmax - максимальная концентрация и время ее достижения, Спосл и Тпосл - последнее значение концентрации и время ее определения.

2) Период полувыведения (Т1/2), отражающий время, в течение которого концентрация ЛВ в крови снижается вдвое:

3) Среднее время удерживания, характеризующее среднее время пребывания в организме молекулы препарата (MRT):

где AUMC - площадь под кривой "произведение времени на концентрацию лекарственного вещества - время".

4) Общий (кажущийся) клиренс (cl), отражающий скорость освобождения от препарата единицы объема биожидкости, как отношение дозы (D) к AUC:

5) Общий (кажущийся) объем распределения (Vd), под которым понимают такой объем, при распределении в котором препарат имел бы ту же концентрацию, что и в плазме крови, как отношение клиренса (cl) к константе элиминации (Kel):

6) Относительная биодоступность рассчитывалась как отношение AUC при пероральном введении ГЛФ к AUC при пероральном введении субстанции изучаемого соединения кроликам.

Для всех данных применялась описательная статистика с использованием подходящих критериев парного или множественного сравнения данных соответствующая Гауссовскому распределению данных, которые представлены в итоговых таблицах.

Тестируемые образцы:

1) Субстанция натриевой соли диэтилового эфира 4-оксо-1,4-дигидропиразоло[5,1-с]-1,2,4-триазин-3,8-дикарбоновой кислоты, моногидрат (Натрия 3,8-диэтоксикарбонил-4-оксо-4Н-1,2,4-триазоло[5,1-с][1,2,4]триазинид моногидрат) (введение животным перорально в дозе 20,0 мг/кг и взятие проб плазмы крови в течение 5 периодов полувыведения).

2) Композиция в твердой лекарственной форме (введение животным в дозе 20,0 мг/кг в пересчете на действующую субстанцию) и взятие проб плазмы крови в течение 5 периодов полувыведения.

Результаты исследования:

На Фиг. 4 представлен рисунок №1, на котором приведена фармакокинетическая кривая содержания диэтилового эфира 4-оксо-1,4-дигидропиразоло[5,1-с]-1,2,4-триазин-3,8-дикарбоновой кислоты, моногидрат (Натрия 3,8-диэтоксикарбонил-4-оксо-4Н-1,2,4-триазоло[5,1-с][1,2,4]триазинид моногидрат) в крови кроликов после внутрижелудочного введения композиции готовой лекарственной формы (ГЛФ) в дозе 20,0 мг/кг (в расчете на действующую субстанцию) в сравнении с фармакокинетической кривой, полученной при введении фармацевтической субстанции (ФС), введенной в дозе 20,0 мг/кг в зависимости от времени.

На Фиг. 5 представлена таблица №4, в которой приведены фармакокинетические параметры (М±m) действующего вещества у кроликов при пероральном введении субстанции и композиции твердой лекарственной формы в дозе 20,0 мг/кг.

Таким образом, на основании приведенных данных установлено, что субстанция и композиция готовой лекарственной формы близки по фармакокинетическим профилям. При детальном анализе фармакокинетических параметров композиции ГЛФ в сравнении с субстанцией статистически значимых отличий выявлено не было.

Установлено, что для композиции ГЛФ характерна высокая относительная биодоступность (Фиг. 5, таблица №4).

Фармакодинамические свойства соединения в твердой лекарственной форме

Моделирование экспериментального стрептозотоцинового сахарного диабета

Эксперименты проводили на 75-ти половозрелых крысах-самцах Sprague-Dawley массой 250-320 г, которых содержали в условиях вивария Волгоградского государственного медицинского университета с естественным световым режимом на полнорационной сбалансированной по содержанию питательных веществ диете для лабораторных животных, согласно ГОСТ Р50258-92. Экспериментальный сахарный диабет (ЭСД) моделировали путем однократного внутривенного введения стрептозотоцина («Sigma», США), растворенного в 0,1 М цитратном буфере с рН 4,5 в дозе 45 мг/кг [Kaur, R. Etal. Renoprotective effect of lansoprazole in streptozotocin-induced diabetic nephropathy in wistar rats / R. Kaur, R. Kaur Sodhi, N. Aggarwal, J. Kaur, U.K. Jain // Naunyn-Schmiedeberg's Arch. Pharmacol. 2016. - Vol. 389(1). - PP. 73-85]. Количественное определение глюкозы в крови проводили через сутки после введения цитотоксина и далее еженедельно, в утреннее время, натощак, в течение всего срока эксперимента длительностью 12 недель, с использованием глюкометра «Глюкокард Сигма-Мини» (Россия). В эксперимент брали животных с уровнем глюкозы натощак более 17 ммоль/л. Через неделю после введения стрептозотоцина животных распределяли на группы по 15 крыс. Контрольным группам: интактным животных и крысам с ЭСД вводили воду дистиллированную (1 мл/100 г); опытным группам - изучаемую субстанцию и композицию твердой лекарственной формы натриевой соли диэтилового эфира 4-оксо-1,4-дигидропиразоло[5,1-с]-1,2,4-триазин-3,8-дикарбоновой кислоты, моногидрат (Натрия 3,8-диэтоксикарбонил-4-оксо-4Н-1,2,4-триазоло[5,1-с][1,2,4]триазинид моногидрат) вводили перорально в дозе 20,0 мг/кг из расчета на действующую субстанцию и вещество сравнения аминогуанидин (50,0 мг/кг). Введение воды дистиллированной и растворов изучаемых веществ осуществляли через интрагастральный зонд ежедневно 1 раз в сутки. Уровень гликозилированного гемоглобина определяли с использованием набора «ДИАБЕТ-ТЕСТ» («Фосфосорб», Россия). Содержание конечных продуктов гликирования (AGEs) в сыворотке крови определяли иммунохимическим методом с помощью наборов реактивов для иммуноферментного анализа RatAGEs ELISA Kit (кат. номер CSB-E09413r) («Cusabio», КНР) на многофункциональном микропланшетном ридере Infinite 200 PRO («Tecan», Австрия) и выражали в мкг/мл сыворотки. Определение растворимости коллагена сухожилий хвоста крыс определяли на многофункциональном микропланшетном ридере Infinite 200 PRO («Tecan», Австрия) по методу [KochakianM., etal. Chronic Dosing With Aminoguanidine and Novel Advanced Glycosylation End Product-Formation Inhibitors Ameliorates Cross-Linking of Tail Tendon Collagen in STZ-Induced Diabetic Rats // M. Kochakian, B.N. Manjula, J.J. Egan / Diabetes. - 1996. - Vol. 45. - PP. 1694-1700.].

Статистическая обработка экспериментальных данных проводилась с расчетом базовых статистических показателей (среднего арифметического М, стандартной ошибки среднего арифметического m, парного t-критерия Стьюдента и непараметрического критерия Манна-Уитни (Mann-Whitney, U-test) с поправкой Бонферрони [Реброва О.Ю. Статистический анализ медицинских данных. Применение пакета прикладных программ STATISTICA. - М.: МедиаСфера, 2006. - 312 с.] с использованием пакетов программ Statistica 6,0 («StatSoft», USA), GraphPadPrism 5.0 и MicrosoftExcel (Microsoft, США).

Тестируемые образцы:

1. Субстанция диэтилового эфира 4-оксо-1,4-дигидропиразоло[5,1-с]-1,2,4-триазин-3,8-дикарбоновой кислоты, моногидрат (Натрия 3,8-диэтоксикарбонил-4-оксо-4Н-1,2,4-триазоло[5,1-с][1,2,4]триазинид моногидрат)) (введение животным перорально в дозе 20,0 мг/кг в течение 3х месяцев).

2. Композиция в твердой лекарственной форме (введение животным перорально в дозах 20,0 мг/кг (из расчета на действующую субстанцию) в течение 3х месяцев).

3. Аминогуанидин (введение животным перорально в дозе 50,0 мг/кг в течение 3х месяцев).

Результаты исследования:

В результате было показано, что после введения стрептозотоцина наблюдали достоверное увеличение уровня глюкозы в крови выше 15 ммоль/л у крыс с ЭСД по отношению к показателям интактных животных. Развитие диабета сопровождалось полидипсией, полиурией, животные были вялы и апатичны. Уровень глюкозы в крови у крыс всех экспериментальных групп с сахарным диабетом оставался достоверно высоким на протяжении всего эксперимента, превышая значения интактной группы животных в среднем в 4,9 раза - 1-й месяц, в 5,8 раза - 2-й месяц, в 5,26 раза - 3-й месяц (р<0,05). Полученные результаты подтверждались статистически значимым увеличением уровня гликированного гемоглобина во всех экспериментальных группах крыс со стрептозотоциновым диабетом длительностью 3 месяца относительно интактных животных в среднем в 2,8 раза (р<0,05).

На Фиг. 6 представлена таблица №5, в которой приведено влияние субстанции диэтилового эфира 4-оксо-1,4-дигидропиразоло[5,1-с]-1,2,4-триазин-3,8-дикарбоновой кислоты, моногидрата (Натрия 3,8-диэтоксикарбонил-4-оксо-4Н-1,2,4-триазоло[5,1-с][1,2,4]триазинид моногидрата), композиции в твердой лекарственной форме и препарата сравнения - аминогуанидина, при внутрижелудочном введении на содержание гликозилированного гемоглобина (HbA1c) у крыс через 3 месяца после развития экспериментального сахарного диабета (М±m), мкг/мл.

Примечание: * - различия статистически значимы относительно показателей Интактного контроля, t-критерий Стьюдента и непараметрический критерий Манна-Уитни (Mann-Whitney, U-test) с поправкой Бонферрони (р<0,05); # - различия статистически значимы относительно показателей ЭСД, t-критерий Стьюдента и непараметрический критерий Манна-Уитни (Mann-Whitney, U-test) с поправкой Бонферрони (р<0,05); ЭСД - экспериментальный сахарный диабет.

Кроме того, формирование конечных продуктов гликирования (КПГ) подтверждалось статистически значимым увеличением их концентрации в сыворотке крови крыс с ЭСД по отношению к интактной группе на 45,9%, а растворимость коллагена хвоста при этом в группе ЭСД снижалась на 38,9% (р<0,05) относительно интактного контроля.

На Фиг. 7 представлена таблица №6, в которой приведено влияние субстанции диэтилового эфира 4-оксо-1,4-дигидропиразоло[5,1-с]-1,2,4-триазин-3,8-дикарбоновой кислоты, моногидрата (Натрия 3,8-диэтоксикарбонил-4-оксо-4Н-1,2,4-триазоло[5,1-с][1,2,4]триазинид моногидрата), композиции в твердой лекарственной форме и препарата сравнения - аминогуанидина, при внутрижелудочном введении на содержание КПГ в крови крыс через 3 месяца после развития экспериментального сахарного диабета (М±m), мкг/мл.

Примечание: * - различия статистически значимы относительно показателей Интактного контроля, t-критерий Стьюдента и непараметрический критерий Манна-Уитни (Mann-Whitney, U-test) с поправкой Бонферрони (p<0,05); # - различия статистически значимы относительно показателей ЭСД, t-критерий Стьюдента и непараметрический критерий Манна-Уитни (Mann-Whitney, U-test) с поправкой Бонферрони (р<0,05); ЭСД - экспериментальный сахарный диабет.

Введение фармацевтической субстанции диэтилового эфира 4-оксо-1,4-дигидропиразоло[5,1-с]-1,2,4-триазин-3,8-дикарбоновой кислоты, моногидрата (Натрия 3,8-диэтокси-карбонил-4-оксо-4Н-1,2,4-триазоло[5,1-с][1,2,4]триазинид моногидрата) и композиции готовой лекарственной формы внутрижелудочноприводилок значимому уменьшению содержания гликозилированного гемоглобина на 51,5% и 49,8% (р<0,05), препарат сравнения аминогуанидин снижал HbA1c на 37,9% (р<0,05) по отношению к группе ЭСД (Фиг. 6). Изучаемые субстанция и композиция готовой лекарственной формы снижали концентрацию КПГ по отношению к показателю животных с ЭСД на 21,9% и 34,6% (р<0,05) соответственно, а препарат сравнения аминогуанидин снижал КПГ на 24,3% относительно крыс с ЭСД (Фиг. 7). Под влиянием субстанции и композиции готовой лекарственной формы у крыс с ЭСД несколько повышалась растворимость коллагена хвоста на 9,1% и 8,07% соответственно, препарат сравнения аминогуанидин повышал растворимость коллагена хвоста на 29,8% (р<0,05) относительно группы ЭСД.

Таким образом, на основании приведенных данных установлено, что субстанция и композиция готовой лекарственной формы близки по фармакодинамическим свойствам.

Следовательно, предлагаемая композиция в твердой лекарственной форме (капсулы), действующая на конечные продукты гликирования коллагена (AGE), может быть использована как средство для профилактики и лечения осложнений сахарного диабета.

Изобретение иллюстрируется следующими примерами.

Пример 1. Субстанция натриевой соли диэтилового эфира 4-оксо-1,4-дигидропиразоло[5,1-с]-1,2,4-триазин-3,8-дикарбоновой кислоты, моногидрат - 970,0 г увлажняется 10% водным раствором поливинилпирролидона К30, добавляемым в количестве 220,0 г. Затем влажная масса гранулируется через сетку с размером отверстий 3,0 мм, влажный гранулят сушат при температуре не выше 40°С до остаточной влажности не выше 2%. Высушенный гранулят протирают сквозь сетку с диаметром отверстий 1 мм и опудривают 8,0 г магния стеарата, получается около 1 кг готовой капсулируемой массы.

Массу капсулируют на ручной капсулонаполняющей машинке «Optima 300» с использованием капсул размера №1 вместимостью 0,5 см3. Средняя масса содержимого капсулы 0,309±7,5% г, содержание активной субстанции 300 мг. Из 1 кг массы для капсулирования получают 3200 капсул.

Пример 2. Субстанция натриевой соли диэтилового эфира 4-оксо-1,4-дигидропиразоло[5,1-с]-1,2,4-триазин-3,8-дикарбоновой кислоты, моногидрат - 970,0 г увлажняется 10% водным раствором пласдона К 29/32, добавляемым в количестве 220,0 г. Затем влажная масса гранулируется через сетку с размером отверстий 3,0 мм, влажный гранулят сушат при температуре не выше 40°С до остаточной влажности не выше 2%. Высушенный гранулят протирают сквозь сетку с диаметром отверстий 1 мм и опудривают 8,0 г магния стеарата, получается около 1 кг готовой капсулируемой массы.

Массу капсулируют на ручной капсулонаполняющей машинке «Optima 300» с использованием капсул размера №3 вместимостью 0,30 см3. Средняя масса содержимого капсулы 0,206±10% г, содержание активной субстанции 200 мг. Из 1 кг массы для капсулирования получают 4850 капсул.

Похожие патенты RU2738804C1

название год авторы номер документа
НАТРИЕВАЯ СОЛЬ ДИЭТИЛОВОГО ЭФИРА 4-ОКСО-1,4-ДИГИДРОПИРАЗОЛО[5,1-C]-1,2,4-ТРИАЗИН-3,8-ДИКАРБОНОВОЙ КИСЛОТЫ, МОНОГИДРАТ 2015
  • Русинов Владимир Леонидович
  • Чупахин Олег Николаевич
  • Чарушин Валерий Николаевич
  • Сапожникова Ирина Михайловна
  • Близник Анастасия Михайловна
  • Спасов Александр Алексеевич
  • Петров Владимир Иванович
  • Кузнецова Валентина Андреевна
  • Соловьева Ольга Александровна
  • Мацевич Анастасия Игоревна
RU2612300C1
НАТРИЕВАЯ СОЛЬ 3-НИТРО-4-ОКСО-1,4-ДИГИДРОПИРАЗОЛО[5,1-с]-1,2,4-ТРИАЗИН-8-КАРБОНОВОЙ КИСЛОТЫ, ДИГИДРАТ 2016
  • Русинов Владимир Леонидович
  • Чупахин Олег Николаевич
  • Чарушин Валерий Николаевич
  • Сапожникова Ирина Михайловна
  • Близник Анастасия Михайловна
  • Спасов Александр Алексеевич
  • Петров Владимир Иванович
  • Кузнецова Валентина Андреевна
  • Ковалева Анастасия Игоревна
  • Васильев Павел Михайлович
  • Ворфоломеева Виктория Викторовна
RU2641107C1
ПРИМЕНЕНИЕ НАТРИЕВОЙ СОЛИ ДИЭТИЛОВОГО ЭФИРА 4-ОКСО-1,4-ДИГИДРОПИРАЗОЛО[5,1-С]-1,2,4-ТРИАЗИН-3,8-ДИКАРБОНОВОЙ КИСЛОТЫ, МОНОГИДРАТА В КАЧЕСТВЕ СРЕДСТВА ЛЕЧЕНИЯ И ПРОФИЛАКТИКИ ПОЗДНИХ ОСЛОЖНЕНИЙ САХАРНОГО ДИАБЕТА 2019
  • Бабкова Валентина Андреевна
  • Говорова Юлия Александровна
  • Гурова Наталия Алексеевна
  • Котовская Светлана Константиновна
  • Литвинов Роман Александрович
  • Науменко Людмила Владимировна
  • Петров Владимир Иванович
  • Русинов Владимир Леонидович
  • Сапожникова Ирина Михайловна
  • Смирнов Алексей Владимирович
  • Спасов Александр Алексеевич
  • Шмидт Максим Вячеславович
RU2765117C2
2-(5-НИТРОНИЛФУРАН-2-ИЛ)-5-МЕТИЛ-6-НИТРО-1,2,4-ТРИАЗОЛО[1,5-А]ПИРИМИДИН-7(4Н)-ОН И ЕГО СОЛИ 2018
  • Чупахин Олег Николаевич
  • Чарушин Валерий Николаевич
  • Русинов Владимир Леонидович
  • Саватеев Константин Валерьевич
  • Уломский Евгений Нарциссович
  • Федотов Виктор Владимирович
  • Петров Владимир Иванович
  • Спасов Александр Алексеевич
  • Бабкова Валентина Андреевна
  • Бабков Денис Александрович
RU2716715C2
3-ГУАНИДИНОАЗОЛО[1,2,4,5]ТЕТРАЗИНЫ, ОБЛАДАЮЩИЕ АНТИГЛИКИРУЮЩЕЙ АКТИВНОСТЬЮ И СПОСОБ ИХ ПОЛУЧЕНИЯ 2017
  • Ишметова Рашида Иршотовна
  • Игнатенко Нина Константиновна
  • Русинов Геннадий Леонидович
  • Чарушин Валерий Николаевич
  • Спасов Александр Алексеевич
  • Петров Владимир Иванович
  • Сысоева Валентина Андреевна
RU2668971C1
НАТРИЕВАЯ СОЛЬ 2-МЕТИЛТИО-6-ЦИАНО-1,2,4-ТРИАЗОЛО[5,1-с]-1,2,4-ТРИАЗИН-7(4Н)-ОНА, ТРИГИДРАТ 2015
  • Русинов Владимир Леонидович
  • Чупахин Олег Николаевич
  • Чарушин Валерий Николаевич
  • Сапожникова Ирина Михайловна
  • Медведева Наталья Розыевна
  • Уломский Евгений Нарциссович
  • Киселев Олег Иванович
  • Деева Элла Германовна
  • Коновалова Надежда Игоревна
  • Васин Андрей Владимирович
RU2607628C1
БИС[1,2,4]ТРИАЗОЛО[4,3-b:3',4'-f][1,2,4,5]ТЕТРАЗИНЫ, ОБЛАДАЮЩИЕ АНТИГЛИКИРУЮЩЕЙ, АНТИГЛИКОКСИДАЦИОННОЙ И АНТИАГРЕГАНТНОЙ АКТИВНОСТЬЮ 2020
  • Чарушин Валерий Николаевич
  • Коротина Анна Владимировна
  • Толщина Светлана Геннадьевна
  • Русинов Геннадий Леонидович
  • Литвинов Роман Александрович
  • Бабкова Валентина Андреевна
  • Сиротенко Виктор Сергеевич
  • Бабков Денис Александрович
  • Спасов Александр Алексеевич
RU2755897C1
НАТРИЕВАЯ СОЛЬ 2-МЕТИЛТИО-6-НИТРО-1,2-4-ТРИАЗОЛО[5,1-C]-1,2,4-ТРИАЗИН-7(4H)-ОНА, ДИГИДРАТ, ОБЛАДАЮЩАЯ ПРОТИВОВИРУСНОЙ АКТИВНОСТЬЮ 2005
  • Чупахин Олег Николаевич
  • Русинов Владимир Леонидович
  • Уломский Евгений Нарциссович
  • Чарушин Валерий Николаевич
  • Петров Александр Юрьевич
  • Киселев Олег Иванович
RU2294936C1
ИНЪЕКЦИОННЫЙ ИЛИ ИНФУЗИОННЫЙ РАСТВОР L-АРГИНИНИЕВОЙ СОЛИ 5-МЕТИЛ-6-НИТРО-1,2,4-ТРИАЗОЛО[1,5-а]ПИРИМИДИН-7-ОНА МОНОГИДРАТА ДЛЯ ТЕРАПИИ ГРИППА И ДРУГИХ ВИРУСНЫХ ИНФЕКЦИЙ 2014
  • Киселев Олег Иванович
  • Чупахин Олег Николаевич
  • Чарушин Валерий Николаевич
  • Русинов Владимир Леонидович
  • Деева Элла Германовна
  • Уломский Евгений Нарциссович
RU2586283C1
СПОСОБ КОЛИЧЕСТВЕННОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ ТРИАЗАВИРИНА МЕТОДОМ ВОЛЬТАМПЕРОМЕТРИИ (ВАРИАНТЫ) 2015
  • Малахова Наталия Александровна
  • Козицина Алиса Николаевна
  • Иванова Алла Владимировна
  • Цмокалюк Антон Николаевич
  • Сараева Светлана Юрьевна
  • Матерн Анатолий Иванович
RU2614022C1

Иллюстрации к изобретению RU 2 738 804 C1

Реферат патента 2020 года ФАРМАЦЕВТИЧЕСКАЯ КОМПОЗИЦИЯ АНТИГЛИКИРУЮЩЕГО ДЕЙСТВИЯ В ТВЕРДОЙ ЛЕКАРСТВЕННОЙ ФОРМЕ В ВИДЕ КАПСУЛ И СПОСОБ ЕЕ ПОЛУЧЕНИЯ

Изобретение относится к медицине, а именно к фармакологии и фармации и касается производства лекарственного средства антигликирующего действия. Таким средством является фармацевтическая композиция в твердой лекарственной форме для перорального введения, содержащая в качестве активного компонента натриевую соль диэтилового эфира 4-оксо-1,4-дигидропиразоло[5,1-с]-1,2,4-триазин-3,8-дикарбоновой кислоты, моногидрата при следующем соотношении компонентов, масс. %: натриевая соль диэтилового эфира 4-оксо-1,4 дигидропиразоло[5,1-с]-1,2,4-триазин-3,8-дикарбоновой кислоты моногидрата 95-97,0%; пласдонК 29/32 1-5%; магния стеарат не более 1%. Композиция обеспечивает антигликирующее действие за счет ингибирующего влияния на конечные продукты гликирования коллагена. 2 н. и 1 з.п .ф-лы, 7 ил., 2 пр.

Формула изобретения RU 2 738 804 C1

1. Фармацевтическая композиция антигликирующего действия в виде твердой дозированной лекарственной формы , характеризующаяся тем, что в качестве активного компонента содержит субстанцию натриевой соли диэтилового эфира 4-оксо-1,4-дигидропиразоло[5,1-с]-1,2,4-триазин-3,8-дикарбоновой кислоты моногидрата, при следующем соотношении компонентов, масс. %:

Натриевая соль диэтилового эфира 4-оксо-1,4- дигидропиразоло[5,1-с]-1,2,4-триазин-3,8- 95-97,0 дикарбоновой кислоты моногидрата ПласдонК 29/32 1-5 Магния стеарат Не более 1

2. Способ получения фармацевтической композиции антигликирующего действия, включающий' измельчение и просеивание субстанции и вспомогательных веществ, увлажнение субстанции натриевой соли диэтилового эфира 4-оксо-1,4-дигидропиразоло[5,1-с]-1,2,4-триазин-3,8-дикарбоновой кислоты моногидрата раствором ВМВ из ряда производных поливинилпирролидона, гранулирование влажной массы, сушку, дробление и ситовую калибровку высушенных гранул, опудривание антифрикционными агентами, выбранными из ряда стеаратов, и фасовку полученной сухой массы в желатиновые капсулы.

3. Способ по п. 2, характеризующийся тем, что фармацевтическая композиция, обладающая антигликирующей активностью, выполнена в форме желатиновой капсулы для перорального приема.

Документы, цитированные в отчете о поиске Патент 2020 года RU2738804C1

ПРИМЕНЕНИЕ ГЕТЕРОЦИКЛИЧЕСКИХ ГИДРАЗОНОВ В КАЧЕСТВЕ СРЕДСТВ, ОБЛАДАЮЩИХ АНТИГЛИКИРУЮЩЕЙ АКТИВНОСТЬЮ 2016
  • Климочкин Юрий Николаевич
  • Беленькая Раиса Семеновна
  • Леонова Марина Валентиновна
  • Спасов Александр Алексеевич
  • Петров Владимир Иванович
  • Васильев Павел Михайлович
  • Кузнецова Валентина Андреевна
  • Ковалева Анастасия Игоревна
RU2658819C2
Одновальный, снабженный дробителем, торфяной пресс 1919
  • Ляуданский В.И.
SU261A1
Применение азопроизводных фенилсульфокислот в качестве ингибиторов образования конечных продуктов гликирования 2016
  • Спасов Александр Алексеевич
  • Штырлин Юрий Григорьевич
  • Балакин Константин Валерьевич
  • Зиганшин Айрат Усманович
  • Кузнецова Валентина Андреевна
  • Петров Владимир Иванович
  • Стрельник Алексей Дмитриевич
RU2628605C1
JP 2008056576,13.09.2008
КУЗНЕЦОВА В.А
и др
Метод оценки антигликирующей активности in vitro новых веществ
Волгоградский научно-медицинский журнал, 2014, 3, с.50-51.

RU 2 738 804 C1

Авторы

Косолапов Вадим Анатольевич

Котовская Светлана Константиновна

Петров Владимир Иванович

Русинов Владимир Леонидович

Сапожникова Ирина Михайловна

Смирнова Людмила Андреевна

Спасов Александр Алексеевич

Степанова Элеонора Федоровна

Шевченко Александр Михайлович

Даты

2020-12-17Публикация

2019-07-15Подача