СРЕДСТВО ДЛЯ ПРОПИТКИ ГИГИЕНИЧЕСКОГО ТАМПОНА, ОБЛАДАЮЩЕЕ АНТИМИКРОБНОЙ АКТИВНОСТЬЮ, И СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ФИТОТАМПОНА, ОБЛАДАЮЩЕГО АНТИМИКРОБНОЙ АКТИВНОСТЬЮ Российский патент 2021 года по МПК A61K36/38 A61K36/704 A61K36/73 A61P15/00 A61F13/15 

Область техники, к которой относится изобретение

Группа изобретений относится к области медицины, фармацевтической промышленности, а именно к составам на основе растительного сырья для лечебно-профилактических гигиенических тампонов и способам изготовления лечебно-профилактических тампонов, обладающих антибактериальной активностью и профилактическим действием в отношении развития бактериального вагиноза и обеспечивающих восстановление физиологического уровня кислотности влагалища.

Уровень техники

Из уровня техники известны различные тампоны и способы их изготовления, обеспечивающие гигиенические потребности пользователя и обладающие улучшенными технологическими характеристиками (например, патент RU2433809). Однако данные средства не содержат лечебно-профилактических ингредиентов.

Известен антибактериальный наполнитель для женской гигиенической прокладки или тампона, способ его получения и использования (Патент RU2286800). Наполнитель содержит 1% гидрогель хлоргидрата хитозана, в который входит метронидазол и диоксидин. Однако использование данного наполнителя предполагает необходимость самостоятельного его дозирования при нанесении на тампон или гигиеническую прокладку, что может привести к некорректной дозировке метронидазола и диоксидина, вследствие чего возможно формирование устойчивости отдельных штаммов анаэробных бактерий к данным средствам, а также возникновению рецидивов на фоне успешного лечения, которые, согласно литературным данным, возможны в течение восьми месяцев у 75-80 % пациенток (М.В. Мазуркевич, Т.А. Фирсова, М.В. Духанина. Патогенетическая коррекция дисбиоза влагалища. Pharm-sintez.ru). Кроме того, возможны аллергические реакции на заявленные в средстве ингредиенты.

Также известен антибактериальный состав для местного лечения бактериального вагиноза (Патент RU2236851), представляющий собой 3,5% гель хитозан-аскорбат, содержащий метронидазол в дозе 2 мг в 1 мл.

Однако данное средство обладает высокой вязкостью, что технически затрудняет введение данного состава в гигиеническую прокладку или тампон. Также следует отметить возможную лекарственную непереносимость метронидазола и аллергические реакции у части пациентов (Малашенкова Т.Е. Фармакоэпидемиология лекарственной аллергии в Ставропольском крае. Автореф. дисс. на соискание уч. ст. к.м.н. Волгоград 2008).

Известно лечебное средство для нанесения на тампон, в качестве которого используют цитратную буферную пару со значением рН 3,9-4,2, а также способ лечения бактериального вагиноза с помощью данного средства (Патент RU2113183). При этом на конце тампона закрепляют биополимерную рассасывающуюся губку, в которой импрегнирована буферная пара.

Недостатком данного решения является несовершенство и неудобство применения тампона с лечебным средством, предусматривающее закрепление на конце тампона губки, пропитанной буферной парой, при этом не указывается способ закрепления губки.

Наиболее близким к предлагаемому изобретению является способ изготовления лечебно-профилактического тампона и состав для тампона (Патент RU2682643), включающий корень дягиля, лист крапивы, плоды облепихи свежей, траву душицы, траву пустырника обыкновенного, плоды кориандра, водный экстракт корня одуванчика, водный экстракт корня алтея, сироп солодки, борнеол, взятые в определенном количестве. Сбор из трав прессуют и помещают в марлевую оболочку с формированием шарика диаметром 10-15 мм. Верхушку марлевого шарика завязывают нитью, которая при введении тампона во влагалище остается снаружи и предназначена для дальнейшего комфортного извлечения.

Недостатком данного решения является использование композиции измельченного сырья, которое помещается в марлевую оболочку для непосредственного введения, при этом растительный порошок способен травмировать слизистую оболочку. Кроме того, в состав композиции вводится сироп солодки, состав которого включает сахарный сироп, что может способствовать микробной контаминации предлагаемого тампона.

Технической проблемой, решаемой группой изобретений, является необходимость расширения арсенала тампонов гигиенических, обладающих профилактическим антимикробным действием, в частности, препятствующих развитию бактериального вагиноза, на основе растительного сырья.

Раскрытие сущности изобретения

Техническим результатом группы изобретений является разработка средства для пропитки женского гигиенического тампона на основе растительного сырья, обладающего антибактериальной активностью, а также способа изготовления фитотампона с использованием данного средства, позволяющего сохранить биологически-активные вещества из пропитывающего средства в тампоне при его изготовлении и обеспечивающего максимальное извлечение действующих веществ при использовании тампона, что позволяет применять его для профилактики и лечения гинекологических заболеваний, связанных с ростом патогенных микроорганизмов во влагалище. Кроме того, изготовленный в соответствии с предлагаемым способом тампон, является простым в применении, не требует самостоятельного дозирования лекарственного средства или закрепления на нем дополнительных средств (губок), пропитанных лекарственным раствором, оказывает равномерное лечебное действие на слизистые и кожные покровы женских половых органов.

Технический результат достигается за счет создания средства для пропитки гигиенического тампона, обладающего антимикробной активностью, представляющего собой водно-спиртовое извлечение, полученное экстракцией 40% этанолом смеси растительного сырья, включающей траву зверобоя продырявленного, траву горца перечного, траву горца почечуйного и листья яблони лесной, измельченных до размера частиц, проходящих сквозь сито диаметром 1-3 мм, при соотношении сырье:экстрагент 1:5, при этом смесь растительного сырья используют при следующем соотношении компонентов, мас. %:

трава зверобоя продырявленного 20-40; трава горца перечного 20-40; трава горца почечуйного 20-40; листья яблони лесной 20-40.

Технический результат также достигается за счет создания способа получения гигиенического тампона, обладающего антимикробной активностью, согласно которому тампон гигиенический выдерживают в вышеуказанном пропитывающем средстве в течение не менее 10 мин с последующим его высушиванием до постоянной массы.

Оптимально подобранные компоненты пропитывающего средства обеспечивают подавление бактериальных гинекологических инфекций, позволяют восстановить физиологический уровень кислотности влагалища. Способ прост в реализации получения конечного продукта, который обладает выраженным антимикробным действием и позволяет сочетать в себе гигиенические свойства изделия и его антимикробную активность, в отличие от тампонов, импрегнированных лечебно-гигиеническими средствами, в качестве которых используют, например, цитратную буферную пару со значением рН 3,9-4,2.

Из предложенных видов сырья для получения извлечения три (трава зверобоя, трава горца перечного и почечуйного) являются фармакопейными (ФС.2.5.0015.15 Зверобоя трава; ГФ 11, т.2, ст.58. Трава горца почечуйного; ГФ 11, т.2. ст.57. Трава горца перечного (А.С. Чистякова. Фармакогностическое исследование травы горца почечуйного. Автореф.дисс.к.ф.н. 2017; А.А. Гудкова Фармакогностическое изучение представителей рода горец, как перспективного источника получения лекарственных препаратов. Автореф.дисс.д.ф.н. 2020). Листья яблони лесной (Malus sylvestris Mill) содержат разнообразные биологически-активные вещества, в том числе фенольные производные и флавоноиды и издавна применяются в качестве противовоспалительного средства (Н.В. Нестерова, И.А. Самылина. Изучение качественного состава и показателей качества листьев яблони лесной и домашней// Журнал «Здоровье и образование в XXI веке», 2015, №4, т. 17, с. 251-258).

Фармакологическая активность растительных объектов во многом обусловлена содержанием флавоноидов и фенолкарбоновых кислот, обеспечивающих противовоспалительное и антимикробное действие, наличие которых в извлечениях из сырья подтверждается формой специфического УФ-спектра. Для оценки полноты извлечения действующих веществ при использовании тампонов, полученных предлагаемым способом, проводилась экстракция в дистиллированную воду, с последующей оценкой полученных УФ-спектров.

Краткое описание чертежей

Изобретение поясняется иллюстрациями, где на Фиг. 1 представлен УФ-спектр водно-спиртового извлечения из смеси травы зверобоя, травы горца перечного, травы горца почечуйного, листьев яблони, на Фиг. 2 – УФ-спектр извлечения из тампонов, пропитанных предлагаемых средством.

Осуществление изобретения

Предлагаемый способ получения гигиенического фитотампона осуществляют следующим образом.

Предварительно высушенные траву зверобоя, траву горца перечного, траву горца почечуйного и листья яблони, взятых в соотношении от 20 до 40 мас.% каждого компонента измельчают до размера частиц, проходящих сквозь сито диаметром 1-3 мм, после чего смешивают. Полученную смесь заливают 40% этиловым спиртом в соотношении 1:5 (при соотношении сырья в мас.ч. и экстрагента в об.ч.) и настаивают в течение 2-3 суток при комнатной температуре, после чего фильтруют, остаток отжимают на прессе и присоединяют к вытяжке. Гигиенические тампоны промышленного выпуска выдерживают в течение не менее 10 минут (например, 10 - 20 минут) в полученном извлечении, после чего высушивают при температуре 30-35°С до постоянной массы. В качестве тампонов могут быть использованы любые известные из уровня техники гинекологические женские тампоны с аппликатором или без него, выполненные из абсорбирующего материала, например, вискозного волокна, хлопка или их сочетания, любой степени впитываемости (без оболочки). Тампоны могут применяться ежедневно в период воспалительного процесса и/или во время менструального цикла, со сменой тампонов через каждые 5-6 часов.

В таблице 1 приведены примеры составов исходного сырья для получения водно-спиртового извлечения.

Таблица 1.

Компоненты Количество компонентов, г Состав 1 Состав 2 Состав 3 Состав 4 Состав 5 трава зверобоя 5 5 5 10 6,25 трава горца перечного 5 5 10 5 6,25 трава горца почечуйного 5 10 5 5 6,25 листья яблони 10 5 5 5
6,25

Пример конкретного выполнения

Около 25 г подготовленного высушенного сырья – трава зверобоя, трава горца перечного, трава горца почечуйного, листья яблони (масса каждого компонента 6,25 г (точная навеска)) измельчали до размера частиц, проходящих сквозь сито диаметром 2 мм, после чего смешивали. Данную смесь растительных порошков заливали 40% этиловым спиртом в соотношении 1:5 и настаивали в течение 48 часов, после чего фильтровали, остаток отжимали на прессе и присоединяли к вытяжке.

Тампоны промышленного изготовления, сделанные из хлопкового или вискозного волокна (ГОСТ Р 53224-2016 ; ГОСТ 10546-80), помещали в полученное извлечение на 10 минут, после чего высушивали в сушильном шкафу в изотермическом режиме при температуре 30 °С в течение 60 минут. Для оценки перехода биологически-активных веществ из полученного экстракта в тампон, осуществляли сравнение УФ-спектров, полученных для исходных водно-спиртовых извлечений из смеси 4 видов сырья: трава зверобоя, трава горца перечного, трава горца почечуйного, листья яблони (Фиг.1) и спектров извлечений, полученных погружением предварительно обработанных экстрактом и высушенных тампонов в дистиллированную воду (Фиг.2), для сравнения идентичности получаемых спектров и доказательства выделения биологически-активных веществ из пропитанного тампона во влажную среду.

Как видно из Фиг.1 и Фиг.2, совпадение максимумов поглощения свидетельствует об идентичности состава веществ, извлекаемых из тампона и веществ, входящих в исходное извлечение. При проведении анализа качественного состава флавоноидов и фенолкарбоновых кислот методом ТСХ были использованы пластинки «Сорбфил-П-А-УФ-254», система растворителей н-бутанол-уксусная кислота-вода (4:1:2). Фронт прохождения растворителей около 13 см. Для обнаружения зон адсорбции, соответствующих флавоноидам и фенолкарбоновым кислотам, осуществлялось наблюдение в УФ- свете (365 нм) до и после обработки 3% спиртовым раствором алюминия хлорида с выдерживанием хроматограмм 2-3 мин в сушильном шкафу при температуре 100°С. В ходе анализа использовались стандартные образцы - рутин, гиперозид, галловая и кофейная кислоты. Флавоноидные соединения обнаруживали по их собственной флуоресценции в УФ-свете (зоны адсорбции от светло-желтого до коричневатого цвета). После проявления хроматограмм 3% спиртовым раствором алюминия хлорида и нагревания в сушильном шкафу флуоресценция зон усиливалась и зоны флавоноидной природы приобретали желто-зеленый окрас. В УФ-свете зоны абсорбции фенолкарбоновых кислот имели голубую окраску. На хроматограммах исходного водно-спиртового извлечения из четырех видов сырья-трава зверобоя, трава горца перечного, трава горца почечуйного, листья яблони, а также извлечения из тампона обнаружено 18 зон адсорбции, из которых 13 соответствовали по окраске веществам флавоноидной природы, а 5-фенолкарбоновым кислотам. По значениям Rf и сравнением со значениями стандартных образцов идентифицированы: гиперозид (Rf -0,33), рутин (Rf-0,49), галловая ( Rf-0,44) и кофейная (Rf-0,28) кислоты. Состав обнаруженных веществ на хроматограммах исходного извлечения и извлечения в водную среду из тампона, пропитанного исходным извлечением, совпадал.

При исследовании антимикробной активности полученного тампона, использовали способ, основанный на свойствах биологически-активных веществ диффундировать в агар, зараженный тест-культурами микроорганизмов и подавлять рост последних. (справочник по микробиологическим и вирусологическим методам исследования под ред.Биргера М.О. – М.:Медицина 1982, С 172-177). Для анализа использовались чистые культуры микроорганизмов (таблица 2), предварительно культивированные на мясо-пептонном агаре (МПА) при температуре 37°С в течение 24 часов. Стандартную бактериальную суспензию получали на простерилизованном растворе натрия хлорида 0,9%. Для этого бактериологической петлей вносили исследуемую культуру в простерилизованный флакон со стерильным физиологическим раствором и доводили концентрацию микроорганизмов до значения 0,5 единиц стандарта мутности по McFarland. МПА расплавляли, остужали до температуры 56°С и разливали по чашкам Петри. На застывший агар с применением автоматической пипетки в стерильных условиях вносили исследуемые взвеси микроорганизмов. После равномерного распределения микроорганизмов чашки инкубировали при комнатной температуре в течение 15-20 минут. Затем формировали лунки, в которые вносились исследуемые пробы исходного извлечения из смеси четырех видов сырья и извлечения, полученного из тампона. Пробы инкубировали при температуре 37°С в течение 16 часов. Учет результатов осуществляли по отсутствию роста бактерий вокруг лунок с извлечениями путем измерения диаметра зоны вокруг лунки в миллиметрах. Результаты анализа представлены в таблице 2.

Таблица 2. Диаметр зон ингибирования роста тест-культур микроорганизмов исследуемыми извлечениями

Тест-культуры микроорганизмов Диаметр зоны задержки роста тест-культур микроорганизмов, мм Объединенное извлечение из травы зверобоя, горца почечуйного, горца перечного и листьев яблони лесной Водное извлечение из исследуемых тампонов Bacillus anthracoides – 1. 31±1 15±2 Bacillus subtilis L2 27±1 13±1 Echerisch ia coli 675 28±1 15±1 Salmonella galenarum 26±1 12±1 Staphylococcus aureus (209) 31±2,5 16±1 Staphylococcus aureus (Tupe) 30±1,5 14±1 Staphylococcus epidermidis Wood - 46 31±1 14±1 Proteus vulgaris 28±1 13±1

Из данных таблицы 2 следует наличие у исследуемого извлечения выраженного антимикробного действия в отношении всех представленных микроорганизмов, а также умеренное антимикробное действие водного извлечения из обработанных указанной смесью тампонов.

Были также проведены исследования извлечений с другим количественным содержанием исходных растительных компонентов (таблица 1), которые также показали антибактериальную активность и максимальное выделение биологически-активных веществ из тампона, что показывает существенность именно указанных интервалов значений признаков.

Как известно, факультативно-анаэробные микроорганизмы, такие как Echerichia coli, являются возбудителями не менее 23,4% случаев бактериальных вагинозов (Н.Н. Володин, В.М. Коршунов. Бактериальные вагинозы. Женское здоровье. В мире лекарств, 2000, №2, стр. 23-28), что позволяет рассматривать предлагаемые тампоны не только как профилактическое, но и лечебное средство. Также известно, что анаэробные бактерии, ответственные за выработку первичных аминов, вызывают существенное увеличение показателя рН влагалищного отделяемого, в норме не превышающего значение 4,5. Значение рН водного извлечения из тампона составляет 3,6-3,8, то есть находится в кислой области, вследствие содержания в растительных объектах, используемых при получении извлечения для пропитки тампона, фенолкарбоновых кислот, в числе которых методом ТСХ были выявлены галловая и кофейная кислоты, что благоприятно воздействует на слизистую и способствует восстановлению физиологического уровня кислотности влагалища.

Изобретение относится к фармацевтической промышленности, а именно к средству для пропитки гигиенического тампона и способу получения гигиенического тампона. Средство для пропитки гигиенического тампона, обладающее антимикробной активностью, представляет собой водно-спиртовое извлечение, полученное экстракцией этанолом смеси растительного сырья, включающей траву зверобоя продырявленного, траву горца перечного, траву горца почечуйного и листья яблони лесной, взятые в определённых количествах. Способ получения гигиенического тампона включает выдерживание тампона гигиенического в вышеописанном пропитывающем средстве с последующим его высушиванием до постоянной массы. Вышеописанное средство и способ позволяют сохранить биологически-активные вещества из пропитывающего средства в тампоне при его изготовлении и обеспечивают максимальное извлечение действующих веществ при использовании тампона, что позволяет применять тампон для профилактики и лечения гинекологических заболеваний, связанных с ростом патогенных микроорганизмов во влагалище. 2 н.п. ф-лы, 2 ил., 2 табл., 1 пр.

1. Средство для пропитки гигиенического тампона, обладающее антимикробной активностью, представляющее собой водно-спиртовое извлечение, полученное экстракцией 40% этанолом смеси растительного сырья, включающей траву зверобоя продырявленного, траву горца перечного, траву горца почечуйного и листья яблони лесной, измельченных до размера частиц, проходящих сквозь сито диаметром 1-3 мм, при соотношении сырье : экстрагент 1:5, при этом смесь растительного сырья используют при следующем соотношении компонентов, мас. %:

трава зверобоя продырявленного 20-40 трава горца перечного 20-40 трава горца почечуйного 20-40 листья яблони лесной 20-40

2. Способ получения гигиенического тампона, обладающего антимикробной активностью, включающий выдерживание тампона гигиенического в пропитывающем средстве по п. 1 в течение не менее 10 мин с последующим его высушиванием до постоянной массы.