Способ определения суммы сесквитерпеновых кислот в пересчете на валереновую кислоту методом ВЭЖХ в лекарственных средствах Российский патент 2021 года по МПК A61K36/84 A61K9/20 A61K9/06 G01N1/28 G01N1/38 G01N30/06 G01N30/38 

Описание патента на изобретение RU2744231C1

Изобретение относится к области аналитической химии, в частности к способам количественного определения суммы сесквитерпеновых кислот в пересчете на валереновую кислоту методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) в лекарственном препарате «Валерианы настойка» в лекарственной форме «настойки», в лекарственном препарате «Валерианы экстракт» в лекарственной форме «таблетки, покрытые пленочной оболочкой» и в фармацевтической субстанции «Валерианы экстракт густой». Изобретение может быть использовано для контроля качества перечисленных лекарственных средств по показателю качества «Количественное определение».

По данным литературы корневища с корнями валерианы содержат эфирное масло (от 0,5 до 2,4 %), главными компонентами которого являются борнилизовалерианат, борнеол, пинен, терпинеол, сесквитерпеноиды (валереналь, валеренон, валереновая кислота); от 0,8 до 2,5 % валепотриатов (иридоиды: валтрат, изовалтрат, ацевалтрат, дигидровалтрат, валередин, валехлорин и др.); тритерпеновые гликозиды; дубильные вещества; алкалоиды (валерин, хатинин); органические кислоты (валериановая, изовалериановая кислоты) и свободные амины [1].

Фармакологическое действие валерианы обусловлено комплексом действующих веществ, локализованных в корневищах и корнях валерианы. Седативное действие валерианы обусловлено в основном эфирным маслом. Другой группой биологически активных веществ считаются валепотриаты. Валепотриаты являются нестойкими соединениями, в процессе сушки и хранения корневищ они подвергаются ферментативному расщеплению с образованием свободной изовалериановой кислоты и иридоида – балдриналя, придающих сырью специфический запах [1–4].

Для количественной оценки действующих веществ валерианы используется нормирование по индивидуальным веществам, сумме веществ в пересчете на индивидуальное вещество, содержанию эфирных масел или экстрактивных веществ.

Лекарственное растительное сырье и препараты валерианы, а также способы количественной оценки действующих веществ описаны в Государственной фармакопее СССР ХI издания (ГФ ХI), Европейской, Британской, Американской, Японской, Индийской, Украинской и Белорусской фармакопеях.

Аналогом заявляемого изобретения является методика, приведенная в Фармакопейной статье «Валерианы настойка» (ранее ФС 42-3865-99) [5]. Из лекарственного препарата смесью хлороформ-спирт (5:1) экстрагируют сумму сложных эфиров карбоновых кислот. Полученный фильтрат упаривают под вакуумом до сухого остатка. Далее проводят цветную реакцию с гидроксиламином, хлористоводородной кислотой и железа (III) хлоридом. Измеряют оптическую плотность полученного раствора на спектрофотометре в максимуме поглощения при длине волны 512 нм. Недостатками данной методики являются низкие специфичность и селективность, отсутствие четко выраженного максимума поглощения на спектре испытуемого раствора при длине волны 512 нм, оценка по удельному показателю поглощения без использования стандартного образца [5].

Прототипом заявляемого изобретения является способ определения сесквитерпеновых кислот методом ВЭЖХ в пересчете на валереновую кислоту с использованием в качестве стандартного образца валереновой кислоты в лекарственном растительном сырье «Валерианы лекарственной корневища с корнями» [6]. Недостатком прототипа является невозможность использования его для количественного определения действующих веществ в препаратах в лекарственной форме «настойки», лекарственной форме «таблетки, покрытые, пленочной оболочкой» и в фармацевтической субстанции «Валерианы экстракт густой», используемой для их приготовления. Лекарственное растительное сырье «Валерианы корневища и корни» представляет собой или цельные корневища и корни, или измельченные кусочки корней и корневищ, или порошок. Для проведения количественного определения действующих веществ в данном лекарственном растительном сырье, действующие вещества необходимо извлечь, для чего в пробоподготовке прототипа предусмотрены стадии взятия навески образца на весах и экстракции при нагревании с обратным холодильником. Настойки – это жидкая лекарственная форма, представляющая собой извлечения из лекарственного растительного сырья. Стадии взятия навески образца и экстракция при нагревании с обратным холодильником из методики пробоподготовки прототипа являются неприменимыми для препаратов в лекарственной форме «настойки». Аналогичным образом в данном случае стадия экстракции при нагревании с обратным холодильником является неприменимой для препаратов в лекарственной форме «таблетки, покрытые пленочной оболочкой» и фармацевтической субстанции «Валерианы экстракт густой».

Задачей изобретения является разработка способа количественного определения суммы сесквитерпеновых кислот в пересчете на валереновую кислоту методом ВЭЖХ в лекарственном препарате «Валерианы настойка» в лекарственной форме «настойки», в лекарственном препарате «Валерианы экстракт» в лекарственной форме «таблетки, покрытые пленочной оболочкой» и в фармацевтической субстанции «Валерианы экстракт густой».

Поставленная задача решается благодаря:

- созданию нового способа пробоподготовки для приготовления растворов испытуемого образца заявляемых лекарственных средств, что позволяет проводить в них количественное определение суммы сесквитерпеновых кислот методом ВЭЖХ;

- созданию нового способа пробоподготовки для приготовления рабочих растворов стандартного образца валереновой кислоты так, чтобы их концентрация совпадала с концентрацией растворов испытуемого образца, что позволяет уменьшить погрешность определения;

- использованию исходного раствора стандартного образца валереновой кислоты длительного хранения, из которого в дальнейшем готовятся рабочие растворы стандартного образца с небольшим сроком годности, что позволяет сократить время пробоподготовки;

- использованию в качестве единого стандартного образца валереновой кислоты для заявляемых лекарственных средств, что позволяет проводить стандартизацию разных лекарственных препаратов и фармацевтической субстанции по одной группе активных веществ.

В заявляемом изобретении способ количественного определения суммы сесквитерпеновых кислот в пересчете на валереновую кислоту методом ВЭЖХ в лекарственных средствах реализуется следующим образом.

Пробоподготовка

Приготовление исходного раствора стандартного образца валереновой кислоты (общее для всех заявляемых лекарственных средств): около 0,005 г (точная навеска) стандартного образца валереновой кислоты растворяют в спирте этиловом 96 % в мерной колбе вместимостью 25 мл, доводят объем раствора спиртом этиловым 96 % до метки и перемешивают (срок годности раствора 1 мес.).

I. Для лекарственного препарата «Валерианы настойка» в лекарственной форме «настойки».

Приготовление рабочего раствора стандартного образца валереновой кислоты: 5,0 мл исходного раствора помещают в мерную колбу вместимостью 10 мл, доводят объем раствора спиртом этиловым 96 % до метки и перемешивают. Раствор используют без фильтрования (срок годности раствора 24 ч).

Приготовление раствора испытуемого образца: 5,0 мл лекарственного препарата фильтруют через мембранный нейлоновый фильтр (размер пор 0,45 мкм), первые 1–2 мл фильтрата отбрасывают.

II. Для лекарственного препарата «Валерианы экстракт» в лекарственной форме «таблетки, покрытые пленочной оболочкой».

Приготовление рабочего раствора стандартного образца валереновой кислоты: 1,0 мл исходного раствора помещают в мерную колбу вместимостью 10 мл, доводят объем раствора спиртом этиловым 96 % до метки и перемешивают. Раствор используют без фильтрования (срок годности раствора 24 ч).

Приготовление раствора испытуемого образца: около 1 г (точная навеска) лекарственного препарата, предварительно измельченного в ступке, помещают в коническую колбу объемом 25 мл, прибавляют 10 мл спирта этилового 50 %, тщательно перемешивают и помещают на УЗ-баню на 15 мин. Полученный раствор охлаждают до комнатной температуры и фильтруют через мембранный нейлоновый фильтр (размер пор 0,45 мкм), первые 1–2 мл фильтрата отбрасывают.

III. Для фармацевтической субстанции «Валерианы экстракт густой».

Приготовление рабочего раствора стандартного образца валереновой кислоты: 2,0 мл исходного раствора помещают в мерную колбу вместимостью 10 мл, доводят объем раствора спиртом этиловым 96 % до метки и перемешивают. Раствор используют без фильтрования (срок годности раствора 24 ч).

Приготовление раствора испытуемого образца: около 1 г (точная навеска) фармацевтической субстанции помещают в мерную колбу объемом 50 мл, прибавляют 35 мл спирта этилового 50 %, тщательно перемешивают и помещают на УЗ-баню на 15 мин. Полученный раствор охлаждают до комнатной температуры, доводят объем раствора спиртом этиловым 50 % до метки и фильтруют через мембранный нейлоновый фильтр (размер пор 0,45 мкм), первые 1–2 мл фильтрата отбрасывают.

Методика

Фосфорная кислота концентрированная, раствор 5,0 г/л в воде

Аликвоту фосфорной кислоты концентрированной, взятую по массе или по объему, количественно переносят в мерную колбу вместимостью 1000 мл, доводят водой для хроматографии до метки и перемешивают. Проводят дегазацию и фильтрацию через мембранный фильтр с размером пор не более 0,45 мкм.

Проверка пригодности хроматографической системы

Результаты анализа считаются достоверными, если выполняются следующие условия:

- значение асимметрии пиков валереновой кислоты на хроматограммах раствора испытуемого образца и рабочего раствора стандартного образца валереновой кислоты должно быть не более 2,0;

- эффективность колонки по пику валереновой кислоты на хроматограммах раствора испытуемого образца и рабочего раствора стандартного образца валереновой кислоты должно быть не менее 2000 теоретических тарелок;

- относительное стандартное отклонение площади пика валереновой кислоты на хроматограммах рабочего раствора стандартного образца валереновой кислоты для 6 определений должно быть не более 5,0 %.

Испытание проводят в условиях градиентного элюирования.

Условия хроматографирования:

Колонка Размер 125 × 4,6 мм, сорбент октадецилсилилсиликагель (С18), 5 мкм Подвижная фаза А – ацетонитрил;
В – фосфорная кислота концентрированная, раствор 5,0 г/л в воде.
Способ элюирования программа градиента Время, мин А, об. % В, об. % 0–5 47 53 5–7 47→50 53→50 7–9 50 50   9–16 50→60 50→40 16–20 60 40 20–25 60→100 40→0 25–30 100→47 0→53 30–45 47 53 Скорость потока, мл/мин 1 Температура
колонки, °С
25
Детектор спектрофотометрический или диодная матрица Длина волны, нм 220 Объем вводимой пробы, мкл 10

Время удерживания пика валереновой кислоты – около 13 мин.

Относительное время удерживания пика ацетоксивалереновой кислоты – 0,45.

Хроматографируют рабочий раствор стандартного образца валереновой кислоты, получая не менее 6 хроматограмм. Результаты считаются достоверными, если выполняются требования теста «Проверка пригодности хроматографической системы».

Хроматографируют попеременно раствор испытуемого образца и рабочий раствор стандартного образца валереновой кислоты.

Расчет содержания суммы сесквитерпеновых кислот проводят методом внешнего стандарта. Обсчету подлежат основной пик валереновой кислоты и пик ацетоксивалереновой кислоты.

Содержание суммы сесквитерпеновых кислот в пересчете на валереновую кислоту в лекарственном препарате «Валерианы настойка» в лекарственной форме «настойки» в процентах (Х) вычисляют по формуле (1):

S – сумма площадей пиков валереновой и ацетоксивалереновой кислот на хроматограмме раствора испытуемого образца;

а о – навеска стандартного образца валереновой кислоты, г;

5 – аликвота исходного раствора стандартного образца, используемая для приготовления рабочего раствора стандартного образца, мл;

Р – содержание основного вещества в стандартном образце валереновой кислоты, %;

Sо – площадь пика валереновой кислоты на хроматограмме рабочего раствора стандартного образца;

25 – разведение исходного раствора стандартного образца;

10 – разведение рабочего раствора стандартного образца;

100 – коэффициент, переводящий содержание основного вещества в стандартном образце из % в г/г;

100 – коэффициент, переводящий результат расчета в %.

Содержание суммы сесквитерпеновых кислот в пересчете на валереновую кислоту в лекарственном препарате «Валерианы экстракт» в лекарственной форме «таблетки, покрытые пленочной оболочкой» в мг/таб (Х) вычисляют по формуле (2):

S – сумма площадей пиков валереновой и ацетоксивалереновой кислот на хроматограмме раствора испытуемого образца;

а о – навеска стандартного образца валереновой кислоты, г;

10 – разведение испытуемого раствора;

1 – аликвота исходного раствора стандартного образца, используемая для приготовления рабочего раствора стандартного образца, мл;

Р – содержание основного вещества в стандартном образце валереновой кислоты, %;

G – средняя масса таблетки, г;

1000 – коэффициент пересчета г в мг;

Sо – площадь пика валереновой кислоты на хроматограмме рабочего раствора стандартного образца;

a – навеска испытуемого образца, г;

25 – разведение исходного раствора стандартного образца;

10 – разведение рабочего раствора стандартного образца;

100 – коэффициент, переводящий содержание основного вещества в стандартном образце из % в г/г.

Содержание суммы сесквитерпеновых кислот в пересчете на валереновую кислоту в фармацевтической субстанции «Валерианы экстракт густой» в процентах (Х) вычисляют по формуле (3):

S – сумма площадей пиков валереновой и ацетоксивалереновой кислот на хроматограмме раствора испытуемого образца;

а о – навеска стандартного образца валереновой кислоты, г;

50 – разведение испытуемого раствора;

2 – аликвота исходного раствора стандартного образца, используемая для приготовления рабочего раствора стандартного образца, мл;

Р – содержание основного вещества в стандартном образце валереновой кислоты, %;

Sо – площадь пика валереновой кислоты на хроматограмме рабочего раствора стандартного образца;

a – навеска испытуемого образца, г;

25 – разведение исходного раствора стандартного образца;

10 – разведение рабочего раствора стандартного образца;

100 – коэффициент, переводящий содержание основного вещества в стандартном образце из % в г/г;

100 – коэффициент, переводящий результат расчета в %.

Существенные отличительные признаки заявляемого изобретения:

1. Обеспечение возможности применения метода ВЭЖХ для количественного определения суммы сесквитерпеновых кислот в пересчете на валереновую кислоту и стандартизации заявляемых лекарственных препаратов и фармацевтической субстанции, для которых раньше он не применялся, за счет создания уникальной пробоподготовки.

2. Сокращение времени пробоподготовки за счет возможности длительного хранения исходного раствора стандартного образца (тем самым минуя стадии взятия навески и разведения), из которого в дальнейшем готовятся рабочие растворы стандартного образца с небольшим сроком годности.

3. Обеспечение возможности сравнения разных лекарственных средств по количественному содержанию суммы сесквитерпеновых кислот в пересчете на валереновую кислоту за счет использования одной методики для их стандартизации.

4. Уменьшение погрешности определения благодаря одинаковым концентрациям растворов испытуемого образца и рабочего раствора стандартного образца.

Краткое описание чертежей и иных материалов:

Фиг. 1. Хроматограмма рабочего раствора стандартного образца валереновой кислоты (для лекарственного препарата «Валерианы настойка» в лекарственной форме «настойки»).

Фиг. 2. Хроматограмма рабочего раствора стандартного образца валереновой кислоты (для фармацевтической субстанции «Валерианы экстракт густой»).

Фиг. 3. Хроматограмма раствора испытуемого образца лекарственного препарата «Валерианы настойка» в лекарственной форме «настойки».

Фиг. 4. Хроматограмма раствора испытуемого образца лекарственного препарата «Валерианы экстракт» в лекарственной форме «таблетки, покрытые пленочной оболочкой».

Фиг. 5. Хроматограмма раствора испытуемого образца фармацевтической субстанции «Валерианы экстракт густой».

На Фиг. 3–5 сравнение с хроматограммами рабочих растворов стандартного образца валереновой кислоты показывает, что присутствие сопутствующих веществ не влияет на время удерживания пика валереновой кислоты, а также пики ацетоксивалереновой кислоты и валереновой кислоты, учитываемые в расчетах, обладают удовлетворительными показателями асимметрии и разрешения. Следовательно, предлагаемые способы приготовления растворов в предлагаемых условиях хроматографирования являются пригодными для определения суммы сесквитерпеновых кислот в заявляемых лекарственных средствах.

Возможность осуществления заявляемого изобретения показана следующими примерами:

Пример 1. Определение суммы сесквитерпеновых кислот в пересчете на валереновую кислоту методом ВЭЖХ в лекарственном препарате «Валерианы настойка» в лекарственной форме «настойки» заявляемым способом.

Приготовление исходного раствора стандартного образца валереновой кислоты: 0,00509 г стандартного образца валереновой кислоты растворяют в спирте этиловом 96 % в мерной колбе вместимостью 25 мл, доводят объем раствора спиртом этиловым 96 % до метки и перемешивают.

Приготовление рабочего раствора стандартного образца валереновой кислоты соответствует описанию изобретения.

Приготовление раствора испытуемого образца: 3 раза по 5,0 мл испытуемого образца лекарственного препарата фильтруют через мембранный нейлоновый фильтр (размер пор 0,45 мкм), первые 2 мл фильтрата отбрасывают.

Методика и условия хроматографирования соответствуют описанию изобретения.

Хроматографируют рабочий раствор стандартного образца валереновой кислоты. Получают 6 хроматограмм. Результаты считают достоверными, так как выполняются требования теста «Проверка пригодности хроматографической системы». Хроматограмма рабочего раствора стандартного образца валереновой кислоты представлена на Фиг. 1.

Хроматографируют попеременно раствор испытуемого образца и рабочий раствор стандартного образца валереновой кислоты. Хроматограмма раствора испытуемого образца представлена на Фиг. 3.

Расчет содержания суммы сесквитерпеновых кислот проводят методом внешнего стандарта. Обсчету подлежат основной пик валереновой кислоты и пик ацетоксивалереновой кислоты.

Содержание суммы сесквитерпеновых кислот в пересчете на валереновую кислоту вычисляют по формуле (1).

Расчеты:

где Х1, Х2, Х3 – содержание суммы сесквитерпеновых кислот в перечете на валереновую кислоту в испытуемом образце лекарственного препарата; в расчетах использованы средние значения площадей пиков.

Результаты количественного определения суммы сесквитерпеновых кислот в пересчете на валереновую кислоту в испытуемом образце лекарственного препарата «Валерианы настойка» в лекарственной форме «настойки» приведены в Таблице 1.

Таблица 1

Определяемая величина Стандартный образец валереновой кислоты Испытуемый образец Валереновая
кислота
Ацетоксивалереновая кислота
Площадь пика 3419,457
3421,181
3420,543
3422,855
3416,755
3420,219
Среднее значение: 3420,168
3450,746
3447,116
2449,916
2446,163
3440,127
3456,691
2442,859
2453,689
3438,789
3438,088
2440,570
2438,638
Сумма сесквитерпеновых кислот, % 0,01743
0,01743
0,01737
Среднее значение суммы сесквитерпеновых кислот, % 0,017 RSD, % 0,20

Содержание суммы сесквитерпеновых кислот в пересчете на валереновую кислоту в испытуемом образце лекарственного препарата составило 0,017 % (RSD = 0,20 %).

По результатам проведенного исследования показана пригодность использования заявляемого способа для количественного определения содержания суммы сесквитерпеновых кислот в пересчете на валереновую кислоту методом ВЭЖХ в лекарственном препарате «Валерианы настойка» в лекарственной форме «настойки».

Пример 2. Определение суммы сесквитерпеновых кислот в пересчете на валереновую кислоту методом ВЭЖХ в лекарственном препарате «Валерианы экстракт» в лекарственной форме «таблетки, покрытые пленочной оболочкой» заявляемым способом.

Приготовление исходного раствора стандартного образца валереновой кислоты: 0,00500 г стандартного образца валереновой кислоты растворяют в спирте этиловом 96 % в мерной колбе вместимостью 25 мл, доводят объем раствора спиртом этиловым 96 % до метки и перемешивают.

Приготовление рабочего раствора стандартного образца валереновой кислоты соответствует описанию изобретения.

Приготовление раствора испытуемого образца: три навески (1,01302 г, 1,00900 г, 1,00872 г) испытуемого образца лекарственного препарата, предварительно измельченного в ступке, помещают в три конические колбы объемом 25 мл, прибавляют по 10 мл спирта этилового 50 %, тщательно перемешивают и помещают на УЗ-баню на 15 мин. Полученные растворы охлаждают до комнатной температуры и фильтруют через мембранный нейлоновый фильтр (размер пор 0,45 мкм), первые 1–2 мл фильтрата отбрасывают.

Методика и условия хроматографирования соответствуют описанию изобретения.

Хроматографируют рабочий раствор стандартного образца валереновой кислоты. Получают 6 хроматограмм. Результаты считают достоверными, так как выполняются требования теста «Проверка пригодности хроматографической системы».

Хроматографируют попеременно раствор испытуемого образца и рабочий раствор стандартного образца валереновой кислоты. Хроматограмма раствора испытуемого образца представлена на Фиг. 4.

Расчет содержания суммы сесквитерпеновых кислот проводят методом внешнего стандарта. Обсчету подлежат основной пик валереновой кислоты и пик ацетоксивалереновой кислоты.

Содержание суммы сесквитерпеновых кислот в пересчете на валереновую кислоту в мг/таб (Х) вычисляют по формуле (2).

Расчеты:

где Х1, Х2, Х3 – содержание суммы сесквитерпеновых кислот в перечете на валереновую кислоту в испытуемом образце лекарственного препарата; в расчетах использованы средние значения площадей пиков.

Результаты количественного определения суммы сесквитерпеновых кислот в пересчете на валереновую кислоту в испытуемом образце лекарственного препарата «Валерианы экстракт» в лекарственной форме «таблетки, покрытые пленочной оболочкой» приведены в Таблице 2.

Таблица 2

Определяемая величина Стандартный образец валереновой кислоты Испытуемый образец Валереновая
кислота
Ацетоксивалереновая кислота
Площадь пика 713,738
711,977
712,554
709,483
709,888
708,074
Среднее значение: 710,952
110,607
110,529
553,267
551,009
112,305
113,418
554,131
555,759
111,571
111,128
552,311
552,897
Сумма сесквитерпеновых кислот, мг/таб 0,02058
0,02082
0,02071
Среднее значение суммы сесквитерпеновых кислот, мг/таб 0,021 RSD, % 0,58

Содержание суммы сесквитерпеновых кислот в пересчете на валереновую кислоту в испытуемом образце лекарственного препарата составило 0,021 мг/таб (RSD = 0,58 %).

По результатам проведенного исследования показана пригодность использования заявляемого способа для количественного определения содержания суммы сесквитерпеновых кислот в пересчете на валереновую кислоту в лекарственном препарате «Валерианы экстракт» в лекарственной форме «таблетки, покрытые пленочной оболочкой».

Пример 3. Определение суммы сесквитерпеновых кислот в пересчете на валереновую кислоту методом ВЭЖХ в фармацевтической субстанции «Валерианы экстракт густой» заявляемым способом.

Приготовление исходного раствора стандартного образца валереновой кислоты: 0,00500 г стандартного образца валереновой кислоты растворяют в спирте этиловом 96 % в мерной колбе вместимостью 25 мл, доводят объем раствора спиртом этиловым 96 % до метки и перемешивают.

Приготовление рабочего раствора стандартного образца валереновой кислоты соответствует описанию изобретения.

Приготовление раствора испытуемого образца: три навески (1,01615 г, 1,02956 г, 1,02305 г) испытуемого образца фармацевтической субстанции помещают в три мерные колбы объемом 50 мл, прибавляют по 35 мл спирта этилового 50 %, тщательно перемешивают и помещают на УЗ-баню на 15 мин. Полученные растворы охлаждают до комнатной температуры, доводят объем растворов спиртом этиловым 50 % до метки и фильтруют через мембранный нейлоновый фильтр (размер пор 0,45 мкм), первые 1–2 мл фильтрата отбрасывают.

Методика и условия хроматографирования соответствуют описанию изобретения.

Хроматографируют рабочий раствор стандартного образца валереновой кислоты. Получают 6 хроматограмм. Результаты считают достоверными, так как выполняются требования теста «Проверка пригодности хроматографической системы». Хроматограмма рабочего раствора стандартного образца валереновой кислоты представлена на Фиг. 2.

Хроматографируют попеременно раствор испытуемого образца и рабочий раствор стандартного образца валереновой кислоты. Хроматограмма раствора испытуемого образца представлена на Фиг. 5.

Расчет содержания суммы сесквитерпеновых кислот проводят методом внешнего стандарта. Обсчету подлежат основной пик валереновой кислоты и пик ацетоксивалереновой кислоты.

Содержание суммы сесквитерпеновых кислот в пересчете на валереновую кислоту в процентах (Х) вычисляют по формуле (3).

Расчеты:

где Х1, Х2, Х3 – содержание суммы сесквитерпеновых кислот в перечете на валереновую кислоту в испытуемом образце фармацевтической субстанции; в расчетах использованы средние значения площадей пиков.

Результаты количественного определения суммы сесквитерпеновых кислот в пересчете на валереновую кислоту в испытуемом образце фармацевтической субстанции «Валерианы экстракт густой» приведены в Таблице 3.

Таблица 3

Определяемая величина Стандартный образец валереновой кислоты Испытуемый образец Валереновая
кислота
Ацетоксивалереновая кислота
Площадь пика 1371,316
1372,208
1374,591
1374,247
1371,174
1373,119
Среднее значение: 1372,776
693,987
693,382
885,474
886,439
694,871
693,884
889,262
889,263
692,753
692,241
885,910
885,388
Сумма сесквитерпеновых кислот, % 0,22490
0,22253
0,22317
Среднее значение суммы сесквитерпеновых кислот, % 0,224 RSD, % 0,55

Содержание суммы сесквитерпеновых кислот в пересчете на валереновую кислоту в испытуемом образце фармацевтической субстанции составило 0,224 % (RSD = 0,55 %).

По результатам проведенного исследования показана пригодность использования заявляемого способа для количественного определения содержания суммы сесквитерпеновых кислот в пересчете на валереновую кислоту в фармацевтической субстанции «Валерианы экстракт густой».

Представленные примеры не ограничивают объем притязаний настоящего изобретения и служат только для цели иллюстрации.

Список литературы

1. Атлас лекарственных растений России. Быков В.А., ред. ВИЛАР, 2006. 345 с.

2. Талашова С.В. Фармакогностическое изучение, стандартизация и комплексная переработка валерианы лекарственной: автореф. дис. … канд. фарм. наук. М., 1996. 24 с.

3. Коновалова О.А., Рыбалко К.С. Биологически активные вещества подземных органов Valeriana officinalis L.s.l. Растительные ресурсы. 1991. Т. 27. Вып. 1. С. 146–169.

4. Коновалова О.А., Шейченко В.И., Рыбалко К.С. О химическом составе корневищ с корнями Valeriana wolgensis из цикла Valeriana officinalis L. Химия природных соединений. 1991. № 1. С. 141–143.

5. Фармакопейная статья «Валерианы настойка», на 07.05.2020 доступна по адресу:

6. Государственная Фармакопея Российской Федерации XIV издания. Фармакопейная статья ФС.2.5.0009.15 «Валерианы лекарственной корневища с корнями» на 07.05.2020 доступна по адресу: http://femb.ru/femb/pharmacopea.php

Похожие патенты RU2744231C1

название год авторы номер документа
СРЕДСТВО СЕДАТИВНОГО И СПАЗМОЛИТИЧЕСКОГО ДЕЙСТВИЯ И СПОСОБ ЕГО ПОЛУЧЕНИЯ 2015
  • Дулькис Мария Дмитриевна
  • Воронова Татьяна Николаевна
  • Кузьмина Ирина Валерьевна
RU2633064C2
Способ количественного определения папаверина гидрохлорида и его родственных примесей в лекарственных средствах 2021
  • Антонова Наталия Петровна
  • Шефер Елена Павловна
  • Семенова Наталья Евгеньевна
  • Прохватилова Светлана Степановна
  • Калинин Артем Михайлович
  • Кучугурин Сергей Александрович
  • Макухин Виктор Николаевич
  • Голомазова Татьяна Александровна
RU2772608C1
Способ количественного определения аскорбиновой кислоты в лекарственных растительных препаратах 2023
  • Голомазова Татьяна Александровна
  • Шефер Елена Павловна
  • Прохватилова Светлана Степановна
  • Антонова Наталия Петровна
RU2801885C1
ФАРМАЦЕВТИЧЕСКАЯ КОМПОЗИЦИЯ СЕДАТИВНОГО И АНКСИОЛИТИЧЕСКОГО ДЕЙСТВИЯ 2020
  • Гомжин Андрей Михайлович
  • Карпов Алексей Николаевич
  • Кузнецов Кирилл Юрьевич
  • Сакварелидзе Сергей Нодарович
RU2737701C1
Способ определения алкалоидов в экстракте термопсиса 2022
  • Моргунов Игорь Михайлович
  • Антонова Наталия Петровна
  • Прохватилова Светлана Степановна
  • Шефер Елена Павловна
  • Голомазова Татьяна Александровна
RU2796599C1
Способ определения арбутина в листьях толокнянки 2023
  • Моргунов Игорь Михайлович
  • Антонова Наталия Петровна
  • Шефер Елена Павловна
  • Прохватилова Светлана Степановна
  • Голомазова Татьяна Александровна
  • Евдокимова Ольга Владимировна
RU2802173C1
АНТИГИПОКСИЧЕСКОЕ И ГИПОЛИДЕМИЧЕСКОЕ ФАРМАЦЕВТИЧЕСКОЕ СРЕДСТВО, УЛУЧШАЮЩЕЕ КОРОНАРНЫЙ И МОЗГОВОЙ КРОВОТОК 2013
  • Сидорин Дмитрий Николаевич
  • Рогова Наталья Викторовна
  • Акишин Михаил Александрович
RU2536275C1
СПОСОБ КОЛИЧЕСТВЕННОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ НАРЦИССИНА В ЦВЕТКАХ КАЛЕНДУЛЫ ЛЕКАРСТВЕННОЙ 2015
  • Куркин Владимир Александрович
  • Куркина Анна Владимировна
  • Афанасьева Полина Валериевна
RU2599016C1
Способ количественного определения алоэнина в свежих листьях алоэ древовидного 2021
  • Куркин Владимир Александрович
  • Рязанова Татьяна Константиновна
  • Шмыгарева Анна Анатольевна
  • Глущенко Светлана Николаевна
  • Саньков Анатолий Николаевич
RU2780977C1
Способ количественного определения 4,4'-(пропандиамидо)дибензоата натрия в биологических объектах 2021
  • Сипкина Надежда Юрьевна
  • Генералова Юлия Эдуардовна
  • Яковлев Игорь Павлович
RU2780870C1

Иллюстрации к изобретению RU 2 744 231 C1

Реферат патента 2021 года Способ определения суммы сесквитерпеновых кислот в пересчете на валереновую кислоту методом ВЭЖХ в лекарственных средствах

Изобретение относится к способу количественного определения суммы сесквитерпеновых кислот в лекарственном препарате «Валерианы настойка» в лекарственной форме «настойки», или в лекарственном препарате «Валерианы экстракт» в лекарственной форме «таблетки, покрытые пленочной оболочкой», или в фармацевтической субстанции «Валерианы экстракт густой» методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ), включающему использование спирта этилового 50 % в качестве растворителя для приготовления растворов испытуемого образца лекарственного препарата «Валерианы экстракт» в лекарственной форме «таблетки, покрытые пленочной оболочкой», и фармацевтической субстанции «Валерианы экстракт густой», колонки для ВЭЖХ с октадецилсилилсиликагельным сорбентом, градиентный способ элюирования с двумя подвижными фазами: ацетонитрилом и фосфорной кислоты концентрированной раствором 5,0 г/л в воде, спектрофотометрическое детектирование при длине волны 220 нм, использование валереновой кислоты в качестве стандартного образца. Способ позволяет количественно определять действующие вещества в лекарственном препарате «Валерианы настойка» в лекарственной форме «настойки», или в лекарственном препарате «Валерианы экстракт» в лекарственной форме «таблетки, покрытые пленочной оболочкой», или в фармацевтической субстанции «Валерианы экстракт густой». 3 табл., 5 ил.

Формула изобретения RU 2 744 231 C1

Способ количественного определения суммы сесквитерпеновых кислот в лекарственном препарате «Валерианы настойка» в лекарственной форме «настойки», или в лекарственном препарате «Валерианы экстракт» в лекарственной форме «таблетки, покрытые пленочной оболочкой», или в фармацевтической субстанции «Валерианы экстракт густой» методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ), включающий использование спирта этилового 50 % в качестве растворителя для приготовления растворов испытуемого образца лекарственного препарата «Валерианы экстракт» в лекарственной форме «таблетки, покрытые пленочной оболочкой», и фармацевтической субстанции «Валерианы экстракт густой», колонки для ВЭЖХ с октадецилсилилсиликагельным сорбентом, градиентный способ элюирования с двумя подвижными фазами: ацетонитрилом и фосфорной кислоты концентрированной раствором 5,0 г/л в воде, спектрофотометрическое детектирование при длине волны 220 нм, использование валереновой кислоты в качестве стандартного образца, где содержание суммы сесквитерпеновых кислот в пересчете на валереновую кислоту в лекарственном препарате «Валерианы настойка» в лекарственной форме «настойки» в процентах (Х) вычисляют по формуле (1)

,

содержание суммы сесквитерпеновых кислот в пересчете на валереновую кислоту в лекарственном препарате «Валерианы экстракт» в лекарственной форме «таблетки, покрытые пленочной оболочкой», в мг/таб (Х) вычисляют по формуле (2)

,

содержание суммы сесквитерпеновых кислот в пересчете на валереновую кислоту в фармацевтической субстанции «Валерианы экстракт густой» в процентах (Х) вычисляют по формуле (3)

,

где S – сумма площадей пиков валереновой и ацетоксивалереновой кислот на хроматограмме раствора испытуемого образца;

– навеска стандартного образца валереновой кислоты, г;

Р – содержание основного вещества в стандартном образце валереновой кислоты, %;

Sо – площадь пика валереновой кислоты на хроматограмме рабочего раствора стандартного образца;

– навеска испытуемого образца, г;

G – средняя масса таблетки, г.

Документы, цитированные в отчете о поиске Патент 2021 года RU2744231C1

Ю.А
Шерякова и др
Переносная печь для варки пищи и отопления в окопах, походных помещениях и т.п. 1921
  • Богач Б.И.
SU3A1
Устройство для выпрямления многофазного тока 1923
  • Ларионов А.Н.
SU50A1
Ю.А
Шерякова и др
"Идентификация и количественное определение суммы сесквитерпеновых кислот корневищ с корнями валерианы в лекарственных средствах методом ВЭЖХ"

RU 2 744 231 C1

Авторы

Антонова Наталия Петровна

Шефер Елена Павловна

Калинин Артем Михайлович

Семенова Наталья Евгеньевна

Прохватилова Светлана Степановна

Моргунов Игорь Михайлович

Даты

2021-03-03Публикация

2020-05-15Подача