НОВЫЕ ИНГИБИТОРЫ МЕПРИНА АЛЬФА И БЕТА Российский патент 2021 года по МПК C07C259/06 C07D207/16 C07D213/36 C07D317/58 C07D317/64 C07D319/18 A61K31/16 A61K31/36 A61P1/04 A61P11/00 A61P13/00 A61P17/02 A61P25/28 A61P29/00 A61P35/00 

Область техники, к которой относится изобретение

Настоящее изобретение касается новых производных гидроксамовой кислоты в качестве ингибиторов меприна β и/или α, фармацевтических композиций, содержащих такие соединения, способов лечения или профилактики заболеваний или патологических состояний, в особенности касающихся меприна β и/или α, и соединений и фармацевтических композиций для применения в таких способах.

Предшествующий уровень техники

Меприн α и β оба представляют собой цинкозависимые металлопротеазы астацинового семейства и метцинкинового надсемейства. У них сходная структура домена, и человеческие энзимы на 45% последовательности гомологичны друг другу. Меприн β - это трансмембранный белок 1 типа с внеклеточной протеазной активностью, в то время как меприн α неактивен во время секреторного пути и секретируется во внеклеточное пространство. Оба энзима экспрессируются как зимогены с высоким уровнем экспрессии в эпителиальных клетках почек и кишечника, и они были найдены в кишечных лейкоцитах, коже и некоторых раковых клетках.

Меприны показывают выраженную специфичность к субстрату, с предпочтением к кислым аминокислотам в положении P1' (Becker-Pauly, C.; Barre, O.; Schilling, O.; auf dem Keller, U.; Ohler, A.; Broder, C. et al. (2011), Mol.Cell Proteomics, doi: 10.1074/mcp.M111.009233). Был идентифицирован ряд in vitro субстратов, включая белки внеклеточного матрикса, пептидные гормоны и цитокины. Известные in vitro субстраты для меприна β включают оркокинин, гастрин 17, Белок YY, кинетензин, остеопонтин, интерлейкин 1β, APP, MUC 2 муцин, и регулятор трансмембранной проводимости при муковисцидозе E-кадгерин, в то время как известные in vitro субстраты для меприна α включают бомбезин, нейротензин, вещество P, ангиотензин I, гормон, стимулирующий высвобождение лютеинизирующего гормона, валозин, вазоактивный пептид кишечника, брадикинин, α-меланоцито-стимулирующий гормон, MCP-1 и окклюдин. Известными in vitro субстратами для обоих - меприна β и α - являются, например, гастрин-высвобождающий пептид и холецистокинин.

Хотя функция мепринов in vivo все ещё нуждается в исследовании, имеются растущие доказательства их роли в формировании коллагена, воспалении, иммунной реакции тонкого кишечника и нейродегенерации.

Было показано, что меприн β работает как β-секретаза белка-предшественника амилоида с образованием амилоид β (Aβ) белков in vitro (Bien, Jessica; Jefferson, Tamara; Causević, Mirsada; Jumpertz, Thorsten; Munter, Lisa; Multhaup, Gerd et al. (2012), The Journal of biological chemistry 287 (40), pp. 33304-33313). Aβ белок, который в большом количестве найден в мозге пациентов, страдающих от болезни Альцгеймера, является центральным в патогенезе данного заболевания. Указанное исследование показало, что, в отличие от BACE I, меприн β способен формировать N-терминально процессированный Aβ и поэтому может участвовать в генерировании потенциально более токсичных видов Aβ. Соответственно, меприн β, по всей видимости, участвует в патогенезе и/или развитии такого заболевания, как, например, болезнь Альцгеймера.

Было показано, что недостаток меприна β и α у мышей или применение актинонина (ингибитор меприна) защищает от повреждения почек и воспаления мочевого пузыря (Bylander, John; Li, Qing; Ramesh, Ganesan; Zhang, Binzhi; Reeves, W. Brian; Bond, Judith S. (2008), American journal of physiology. Renal physiology 294 (3), pp. F480-90; Yura, Renee E.; Bradley, S. Gaylen; Ramesh, Ganesan; Reeves, W. Brian; Bond, Judith S. (2009), American journal of physiology. Renal physiology 296 (1), pp. F135-44). Соответственно, меприн β и α, по всей видимости, участвуют в патогенезе и/или прогрессировании заболеваний, например, нефрита, повреждения почек, ишемии почки, ишемического острого тубулярного некроза, острой почечной недостаточности и воспаления мочевого пузыря.

Было показано, что оба эти энзима являются C- и N-проколлаген протеиназами и вызывают созревание и сборку коллагена (Biasin, Valentina; Marsh, Leigh M.; Egemnazarov, Bakytbek; Wilhelm, Jochen; Ghanim, Bahil; Klepetko, Walter et al. (2014), The Journal of pathology 233 (1), pp. 7-17; Prox, Johannes; Arnold, Philipp; Becker-Pauly, Christoph (2015), Matrix biology 44-46, pp. 7-13). При фиброзных состояниях (келоиды, легочная гипертензия) в этих исследованиях была обнаружена сверхэкспрессия данных энзимов. Соответственно, меприн β и α, по всей видимости, участвуют в патогенезе и/или прогрессировании заболеваний, например, фиброза и фиброзных состояний (келоиды, легочная гипертензия) и интерстициальной легочной болезни (ILD).

Было показано, что меприн α является геном предрасположенности к воспалительному заболеванию кишечника (ВЗК) (болезнь Крона, язвенный колит), и что его недостаток усиливает хроническое воспаление, в то время как меприн β обладает провоспалительной активностью, и его недостаток приводит к некоторой защите от повреждения (Banerjee, Sanjita; Jin, Ge; Bradley, S. Gaylen; Matters, Gail L.; Gailey, Ryan D.; Crisman, Jacqueline M.; Bond, Judith S. (2011), Am. J. Physiol. Gastrointest. Liver Physiol. 300 (2), pp. G273-82). Соответственно, меприн β и α, по всей видимости, участвуют в патогенезе и/или прогрессировании, например, хронического воспаления, болезни Крона, язвенного колита и воспалительного заболевания кишечника (ВЗК).

Было показана проангиогенная активность и неполяризованная секреция меприна α, которая повышает инвазивность рака толстой и прямой кишок (Lottaz, Daniel; Maurer, Christoph A.; Noël, Agnès; Blacher, Silvia; Huguenin, Maya; Nievergelt, Alexandra et al. (2011), PloS one 6 (11), p. e26450). Соответственно, меприн α, по всей видимости, участвует в патогенезе и/или прогрессировании рака, в особенности рака толстой и прямой кишок.

Было выявлено несколько ингибиторов широкого спектра металлопротеаз и MMP, обладающих ингибирующей активностью в отношении меприна α и β (Broder, Claudia; Becker-Pauly, Christoph (2013), The Biochemical Journal 450, 253-264). Хотя некоторые соединения показали ингибирование меприна α, для всех соединений ингибирование меприна β было намного слабее (константы ингибирования в микромолярном диапазоне), либо не хватало приемлемых для лекарственных соединений свойств (Madoux F, Tredup C, Spicer TP, Scampavia L, Chase PS, Hodder PS, Fields GB, Becker-Pauly C, Minond D (2014), Biopolymers 102 (5), pp. 396-406). В работе Broder C., Characterization of the metalloproteases meprin α and meprin β within the protease web (August 2013; Doctoral dissertation; Universitätsbibliothek Kiel; Accession No. urn:nbn:de:gbv:8-диss-146034; pp. 29, 53) описан фосфиновый ингибитор меприна β (PMI).

Проблемы, на решение которых направлено изобретение

В свете предшествующего уровня техники, главным объектом настоящего изобретения является разработка сильных ингибиторов меприна β и/или α. Первым объектом настоящего изобретения является разработка селективных ингибиторов меприна β. Вторым объектом настоящего изобретения является разработка селективных ингибиторов меприна α. Третьим объектом настоящего изобретения является разработка двойных ингибиторов меприна β и α. Четвертым объектом настоящего изобретения является разработка ингибиторов меприна согласно любому из перечисленных выше объектов, где ингибиторы имеют приемлемые для лекарственного средства характеристики.

Пятым объектом настоящего изобретения является разработка фармацевтической композиции, содержащей ингибитор меприна согласно любому из перечисленных выше объектов, которая подходит для введения субъекту, нуждающемуся в этом.

Шестым объектом настоящего изобретения является разработка способа получения ингибиторов меприна согласно любому из перечисленных выше объектов.

Седьмым объектом настоящего изобретения является разработка способа лечения или профилактики у человека или животного и соединения или фармацевтической композиции для применения в таком способе.

Восьмым объектом настоящего изобретения является разработка способа лечения или профилактики у субъекта, страдающего или имеющего риск развития заболевания или патологического состояния, связанного с меприном β и/или α.

Девятым объектом настоящего изобретения является разработка способа лечения или профилактики у субъекта, страдающего или имеющего риск развития заболевания или патологического состояния, такого как болезнь Альцгеймера, нефрит, повреждение почки, ишемия почки, ишемический острый тубулярный некроз, острая почечная недостаточность, воспаление мочевого пузыря, воспалительное заболевание кишечника (ВЗК), болезнь Крона, язвенный колит, хроническое воспаление, колит, фиброз, фиброзные состояния, келоиды, легочная гипертензия, интерстициальное заболевание легкого или рак, в особенности рак толстой и прямой кишок, и/или соединения для применения в таком способе.

Краткое описание изобретения

В качестве решения сформулированных выше проблем, в настоящем изобретении описано соединение, имеющее приведенную ниже формулу I, его индивидуальные энантиомеры, его индивидуальные диастереомеры, его гидраты, его сольваты, его кристаллические формы, его индивидуальные таутомеры или его фармацевтически приемлемая соль,

,

где:

n = 1-3, предпочтительно 1 или 2;

R¹, R³ и R⁴ независимо выбраны из H и группы, состоящей из алкила, алкенила, алкинила, карбоциклила, арила, арилалкила, гетероциклила, гетероарила и гетероарилалкила, каждый из которых необязательно может иметь заместители;

R² выбран из группы, состоящей из алкила, алкенила, алкинила, карбоциклила, арила, арилалкила, гетероциклила, гетероарила и гетероарилалкила, каждый из которых имеет заместители;

где любые два из R¹, R², R³ и R⁴ могут быть соединены друг с другом, формируя цикл;

R⁴ предпочтительно представляет собой H;

X представляет собой -CH₂-.

В настоящем изобретении также описана фармацевтическая композиция, содержащая соединение, имеющее приведенную выше формулу I, его индивидуальные энантиомеры, его индивидуальные диастереомеры, его гидраты, его сольваты, его кристаллические формы, его индивидуальные таутомеры или его фармацевтически приемлемую соль; и фармацевтически приемлемое вспомогательное вещество.

В настоящем изобретении также описан способ получения указанных выше соединений.

В настоящем изобретении также описан способ лечения или профилактики у человека или животного хирургическим или терапевтическим способом, включающий введение терапевтически эффективного количества описанного выше соединения или фармацевтической композиции субъекту, нуждающемуся в этом, и/или соединение или фармацевтическая композиция для применения в таком способе.

В настоящем изобретении также описан способ лечения или профилактики болезни Альцгеймера, нефрита, повреждения почки, ишемии почки, ишемического острого тубулярного некроза, острой почечной недостаточности, воспаления мочевого пузыря, воспалительного заболевания кишечника (ВЗК), болезни Крона, язвенного колита, хронического воспаления, колита, фиброза, фиброзных состояний, келоидов, легочной гипертензии, интерстициального заболевания легкого или рака, в особенности рака толстой и прямой кишок, включающий введение терапевтически эффективного количества описанного выше соединения или фармацевтической композиции субъекту, нуждающемуся в этом, и/или соединение или фармацевтическая композиция для применения в таком способе.

Подробное описание изобретения

Термин "субъект", при использовании в настоящем тексте, относится к животному, предпочтительно млекопитающему, наиболее предпочтительно - к человеку, который является или являлся объектом лечения, профилактики, наблюдения или эксперимента.

Термин "терапевтически эффективное количество", при использовании в настоящем тексте, означает количество действующего вещества или фармацевтического агента, которое обуславливает биологический или медицинский ответ в системе тканей, животном или человеке, который является целевым для исследователя, ветеринара, врача или другого клинициста, который включает облегчение симптомов заболевания или нарушения, подвергающегося лечению.

Термин "алкил", при использовании в настоящем тексте, если не ограничено особым образом, означает C_1-12 алкильную группу, например C_1-8 алкильную группу, например C_1-6 алкильную группу, например C_1-4 алкильную группу. Алкильные группы могут быть линейными или разветвленными. Подходящие алкильные группы включают, например, метил, этил, пропил (например, н-пропил и изопропил), бутил (например, н-бутил, изобутил, втор-бутил и трет-бутил), пентил (например, н-пентил), гексил (например, н-гексил), гептил (например, н-гептил) и октил (например, н-октил).

Термин "алкил", при использовании в настоящем тексте, охватывает также циклоалкильные группы. Термин "циклоалкил", если не ограничено особым образом, означает C_3-10 циклоалкильную группу (т.е. 3 - 10 атомов углерода в кольце), более предпочтительно C_3-8 циклоалкильную группу, например C_3-6 циклоалкильную группу. Иллюстративные циклоалкильные группы включают циклопропил, циклобутил, циклопентил, циклогексил, циклогептил и циклооктил. Наиболее предпочтительное число атомов углерода в кольце составляет от 3 до 6.

Термин "алк", например в терминах "алкокси", "галогеналкил" и "тиоалкил", следует понимать в значении "алкил". Иллюстративные алкокси-группы включают метокси, этокси, пропокси (например, н-пропокси), бутокси (например, н-бутокси), пентокси (например, н-пентокси), гексокси (например, н-гексокси), гептокси (например, н-гептокси) и октокси (например, н-октокси). Иллюстративные тиоалкильные группы включают метилтио-группу. Иллюстративные галогеналкильные группы включают фторалкил, например CF₃; иллюстративные галогеналкокси-группы включают фторалкил, например OCF₃. Термины “фтор(C_1-6 алкил)” и “фтор(C_1-6 алкокси)” означают C_1-6 алкил и C_1-6 алкокси-группу, соответственно, каждая из которых замещена одним или больше атомами фторами.

Термин "алкенил", если не ограничено особым образом, означает C_2-12 алкенильную группу, например C_2-6 алкенильную группу, например C_2-4 алкенильную группу, которая содержит по меньшей мере одну двойную связь в любом желаемом положении и не содержит тройных связей. Алкенильные группы могут быть линейными или разветвленными. Иллюстративные алкенильные группы, содержащие одну двойную связь, включают пропенил и бутенил. Иллюстративные алкенильные группы, содержащие две двойные связи, включают пентадиенил, например (1E,3E)-пентадиенил.

Термин "алкенил", при использовании в настоящем тексте, охватывает также циклоалкенильные группы. Термин "циклоалкенил", если не ограничено особым образом, означает C_5-10 циклоалкенильную группу (т.е. 5 - 10 атомов углерода в кольце), более предпочтительно C_3-6 циклоалкенильную группу, например C_5-6 циклоалкенильную группу. Иллюстративные циклоалкенильные группы включают циклопропенил, циклогексенил, циклогептенил и циклооктенил. Наиболее предпочтительное число атомов углерода в кольце составляет от пяти до семи.

Термин "алкинил", если не ограничено особым образом, означает C_2-12 алкинильную группу, например C_2-6 алкинильную группу, например C_2-4 алкинильную группу, которая содержит по меньшей мере одну тройную связь в любом желаемом положении и может содержать или не содержать одну или больше двойных связей. Алкинильные группы могут быть линейными или разветвленными. Иллюстративные алкинильные группы включают пропинил и бутинил.

Термин "алкилен" означает цепь, имеющую формулу -(CH₂)_n-, где n представляет собой целое число, например 2-5, если не ограничено особым образом.

Термин "карбоциклил", если не ограничено особым образом, означает любую циклическую систему, в которой все атомы в цикле представляют собой атомы углерода и которая содержит от трех до двенадцати атомов углерода, например от трех до десяти атомов углерода, и более предпочтительно от трех до восьми атомов углерода. Карбоциклильные группы могут быть насыщенными или частично ненасыщенными, но не включают ароматические циклы. Примеры карбоциклильных групп включают моноциклические, бициклические и трициклические кольцевые системы, в частности моноциклические и бициклические кольцевые системы. Другие карбоциклильные группы включают мостиковые кольцевые системы (например, бицикло[2.2.1 ]гептенил). Частным примером карбоциклильной группы является циклоалкильная группа. Другим примером карбоциклильной группы является циклоалкенильная группа.

Термин "арил", если не ограничено особым образом, означает C_6-12 арильную группу, например C_6-10 арильную группу, более предпочтительно C_6-8 арильную группу. Арильные группы содержат по меньшей мере одно ароматическое кольцо (например, одно, два или три кольца). Примером типичной арильной группы с одним ароматическим кольцом является фенил. Примером типичной арильной группы с двумя ароматическими кольцами является нафтил.

Термин "арилалкил", если не ограничено особым образом, означает арильный остаток, который присоединен через алкиленовый фрагмент, например, через C_1-4 алкиленовый фрагмент.

Термин "гетероциклил", если не ограничено особым образом, относится к карбоциклильной группе, где один или больше (например 1, 2 или 3) атомов в цикле заменены на гетероатомы, выбранные из N, S и O. Частным примером гетероциклильной группы является циклоалкильная группа (например, циклопентил или циклогексил), где один или больше (например 1, 2 или 3, в частности 1 или 2, в особенности 1) атомов в цикле заменены на гетероатомы, выбранные из N, S или O. Иллюстративные гетероциклильные группы, содержащие один гетероатом, включают пирролидин, тетрагидрофуран и пиперидин, а иллюстративные гетероциклильные группы, содержащие два гетероатома, включают морфолин и пиперазин. Другим частным примером гетероциклильной группы является циклоалкенильная группа (например, циклогексенильная группа), где один или больше (например 1, 2 или 3, в частности 1 или 2, в особенности 1) атомов в цикле заменены на гетероатомы, выбранные из N, S и O. Примером такой группы является дигидропиранил (например, 3,4-дигидро-2H-пиран-2-ил-).

Термин "гетероарил", если не ограничено особым образом, означает арильный остаток, где один или больше (например, 1, 2, 3, или 4, например 1, 2 или 3) атомов в цикле заменены на гетероатомы, выбранные из N, S и O; или 5-членный ароматический цикл, содержащий один или больше (например, 1, 2, 3, или 4, например 1, 2 или 3) атомов в цикле, выбранных из N, S и O. Иллюстративные моноциклические гетероарильные группы, содержащие один гетероатом, включают: пятичленные циклы (например, пиррол, фуран, тиофен); и шестичленные циклы (например, пиридин, такой как пиридин-2-ил, пиридин-3-ил и пиридин-4-ил). Иллюстративные моноциклические гетероарильные группы, содержащие два гетероатома, включают: пятичленные циклы (например, пиразол, оксазол, тетразол, изоксазол, тиазол, изотиазол, имидазол, такой как имидазол-1-ил, имидазол-2-ил, имидазол-4-ил); шестичленные циклы (например, пиридазин, пиримидин, пиразин). Иллюстративные моноциклические гетероарильные группы, содержащие три гетероатома, включают: 1,2,3-триазол и 1,2,4-триазол. Иллюстративные моноциклические гетероарильные группы, содержащие четыре гетероатома, включают тетразол. Иллюстративные бициклические гетероарильные группы включают: индол (например, индол-6-ил), бензофуран, бензотиофен, хинолин, изохинолин, индазол, бензимидазол, бензотиазол, хиназолин и пурин.

Термин "гетероарилалкил", если не ограничено особым образом, означает гетероарильный остаток, который присоединен через алкиленовый фрагмент, например, через C1-4алкиленовый фрагмент.

Термин "галоген" или "гало" включает фтор (F), хлор (CI) и бром (Br).

Термин "амино" относится к группе -NH₂.

Термины ”необязательно замещенный” и “замещенный” означают (необязательное) замещение одной или несколькими группами, независимо выбранными из атома галогена, циано-группы, гидроксильной группы и карбоксильной группы. Эти термины относятся также к (необязательному) замещению одной или несколькими группами, независимо выбранными из -C(O)-O-(C_1-6 алкил), -C(O)-NH₂, C_1-6 алкилсульфоновой группы, C_1-6 алкокси-группы и C_1-6 алифатической, ароматической или гетероциклической группы, каждая из которых может быть дополнительно замещена одним или несколькими атомами галогена, карбоксилами, циано-группами и/или гидроксильными группами. Предпочтительно, замещенная алкильная группа не содержит кето-группу у атома С, который напрямую связан с атомом N в формуле I.

Термины “алкоксиарил”, “карбоксиарил”, “цианоарил”, “галогенарил”, “гидроксиарил” и “гетероариларил”, если не ограничено особым образом, означают арильный остаток, который замещен по меньшей мере одной алкокси-группой, карбокси-группой, циано-группой, галогеном, гидрокси-группой и гетероарильной группой, соответственно.

Термины “алкоксигетероарил”, “карбоксигетероарил”, “цианогетероарил”, “галогенгетероарил” и “гидроксигетероарил”, если не ограничено особым образом, означают гетероарильный остаток, который замещен по меньшей мере одной алкокси-группой, карбокси-группой, циано-группой, галогеном и гидрокси-группой, соответственно.

Термин “арилметил”, если не ограничено особым образом, означает арильный остаток, который присоединен через метиленовый фрагмент.

Термины “(алкоксиарил)метил”, “(гидроксиарил)метил”, “(карбоксиарил)метил”, “(гетероариларил)метил” “(алкоксигетероарил)метил”, “(гидроксигетероарил)метил” и “(карбоксигетероарил)метил”, если не ограничено особым образом, означают алкоксиарильный, гидроксиарильный, карбоксиарильный, гетероариларильный, алкоксигетероарильный, гидроксигетероарильный и карбоксигетероарильный остатки, соответственно, которые присоединены через метиленовый фрагмент.

Стереоизомеры

Все возможные стероизомеры заявленных соединений включены в настоящее изобретение.

Когда соединения по настоящему изобретению содержат по меньшей мере один хиральный центр, они, соответственно, могут существовать в виде энантиомеров. Когда соединения содержат два или больше хиральных центров, они могут дополнительно существовать в виде диастереомеров. Следует понимать, что все такие изомеры и их смеси входят в объем настоящего изобретения.

Получение и выделение стереоизомеров:

В тех случаях, когда способы получения соединений по настоящему изобретению дают смеси стереоизомеров, эти изомеры можно разделить общеизвестными методами, такими как препаративная хроматография. Соединения можно получать в рацемической форме, или индивидуальные энантиомеры можно получать энантиоспецифичным синтезом или посредством расщепления рацемата. Соединения можно, например, расщеплять на энантиомеры стандартными методами, такими как формирование диастереомерных пар посредством образования солей с оптически активной кислотой, такой как (-)-ди-п-толуолил-d-винная кислота и/или (+)-ди-п-толуолил-l-винная кислота, с последующей дробной кристаллизацией и регенерацией свободного основания, или посредством образования солей с оптически активным основанием, таким как хинин, хинидин, хинотоксин, цинкотоксин, (S)-фенилэтиламин, (1R,2S)-эфедрин, (R)-фенилглицинол, (S)-2-аминобутанол, с последующей дробной кристаллизацией и регенерацией свободной кислоты. Соединения можно расщеплять посредством образования диастереомерных сложных эфиров или амидов, с последующим хроматографическим расщеплением и удалением хиральной присадки. Альтернативно, соединения можно расщеплять с помощью хиральных ВЭЖХ колонок.

Полиморфные кристаллические формы

Кроме того, некоторые из кристаллических форм соединений могут существовать в виде полиморфов, и они тоже входят в объем настоящего изобретения. Кроме того, некоторые соединения могут быть сольватированы водой (т.е. представляют собой гидраты) или распространенными органическими растворителями, и такие сольваты тоже входят в объем настоящего изобретения. Соединения, включая их соли, могут также быть получены в форме их гидратов или включать другие растворители, применяемые для кристаллизации.

При использовании в настоящем тексте, термин “таутомер” относится к миграции протона между соседними простой и двойной связями. Процесс таутомеризации - обратимый. Описанные в настоящем тексте соединения могут претерпевать любую возможную таутомеризацию, находящуюся в рамках физических характеристик соединения.

При использовании в настоящем тексте, термин "фармацевтически приемлемый" охватывает и применение в отношении человека, и применение в ветеринарии. Например, термин "фармацевтически приемлемый" включает ветеринарно приемлемое соединение или соединение, приемлемое для применения в медицине в отношении человека.

Фармацевтически приемлемые соли

В свете близкой родственной связи между свободными соединениями и соединениями в форме их солей, гидратов или сольватов, в случае упоминания в настоящем контексте соединения по настоящему изобретению, охватывается также его соль, сольват или полиморф, при условии, что они возможные или приемлемые в конкретных обстоятельствах.

Соли, гидраты и сольваты соединений, имеющих формулу I, и их физиологически функциональных производных, которые приемлемы для применения в медицине, представляют собой такие, в которых противоион или связанный растворитель является фармацевтически приемлемым. Однако, соли, гидраты и сольваты, содержащие фармацевтически неприемлемые противоионы или связанные растворители, входят в объем настоящего изобретения, например, для применения в качестве промежуточных продуктов для получения других соединений и их фармацевтически приемлемых солей, гидратов и сольватов.

Подходящие соли по настоящему изобретению включают соли, образованные как с органическими, так и с неорганическими кислотами и основаниями. Фармацевтически приемлемые кислотно-аддитивные соли включают соли, образованные со следующими кислотами: хлористоводородная, бромистоводородная, серная, азотная, лимонная, винная, фосфорная, молочная, виноградная, уксусная, трифторуксусная, трифенилуксусная, сульфаминовая, сульфаниловая, янтарная, щавелевая, фумаровая, малеиновая, яблочная, миндальная, глутаминовая, аспарагиновая, щавелево-уксусная, метансульфоновая, этансульфоновая, арилсульфоновая (например, п-толуолсульфоновая, бензолсульфоновая, нафталинсульфоновая или нафталиндисульфоновая), салициловая, глутаровая, глюконовая, трикарбаллиловая, коричная, замещенная коричная (например, фенил-, метил-, метокси- или галоген-замещенная коричная кислота, включая 4-метил и 4-метоксикоричную кислоту), аскорбиновая, олеиновая, нафтоевая, гидроксинафтоевая, (например 1- или 3-гидрокси-2-нафтоевая), нафталинакриловая (например, нафталин-акриловая), бензойная, 4-метоксибензойная, 2- или 4-гидроксибензойная, 4-хлорбензойная, 4-фенилбензойная, бензолакриловая (например 1,4-бензолдиакриловая), изетионовые кислоты, перхлорная, пропионовая, гликолевая, гидроксиэтансульфоновая, памоевая, циклогексансульфаминовая, салициловая, сахариновая и трифторуксусная кислота. Соли с фармацевтически приемлемыми основаниями включают соли аммония, соли щелочных металлов, такие как соли натрия и калия, соли щелочно-земельных металлов, такие как соли кальция и магния, и соли с органическими основаниями, такими как дициклогексиламин и N-метил-D-глюкамин.

Все соли соединений по настоящему изобретению с фармацевтически приемлемыми кислотами входят в объем настоящего изобретения.

Пролекарства

Настоящее изобретение включает также в свой объем пролекарства соединений по настоящему изобретению. В целом, такие пролекарства являются функциональными производными соединений, которые легко превращаются in vivo в целевое терапевтически активное соединение. Таким образом, в этих вариантах способов лечения по настоящему изобретению, термин "введение" охватывает лечение различных описанных нарушений пролекарственными версиями одного или больше соединений по настоящему изобретению, которые превращаются в описанное выше соединение in vivo после введения субъекту. Обычные методики выбора и получения подходящих пролекарственных производных описаны, например, в работе "Design of Prodrugs", ed. H. Bundgaard, Elsevier, 1985.

При использовании в настоящем тексте, термин "композиция" включает продукт, содержащий описанные в настоящем тексте соединения в терапевтически эффективных количествах, а также любой продукт, который получается, напрямую или косвенно, при составлении комбинаций с описанными в настоящем изобретении соединениями.

Вспомогательные соединения (носители и добавки для галеновых препаратов):

Для жидких препаратов, предназначенных для перорального приема, таких как, например, суспензии, эликсиры и растворы, подходящие носители и добавки предпочтительно включают воду, гликоли, масла, спирты, ароматизаторы, консерванты, красители и т.п.; для твердых препаратов, предназначенных для перорального приема, таких как, например, порошки, капсулы, гель-капсулы и таблетки, подходящие носители и добавки включают крахмалы, сахара, разбавители, гранулирующие средства, лубриканты, связующие вещества, разрыхлители и т.п.

Носители, которые можно добавлять в смесь, включают необходимые и фармацевтические вспомогательные вещества, включая (но не ограничиваясь только ими) подходящие связующие вещества, суспендирующие агенты, лубриканты, отдушки, подсластители, консерванты, покрытия, разрыхлители, красители.

Подходящие полимеры в качестве нацеленных носителей лекарственных средств, включают поливинилпирролидон, пирановые сополимеры, полигидроксипропилметакриламид-фенол, полигидроксиэтиласпартамид-фенол или полиэтиленоксидполилизин, замещенный пальмитоильным остатком. Кроме того, соединения по настоящему изобретению можно связывать с классом биоразлагаемых полимеров, которые используют для обеспечения контролируемого высвобождения лекарственного средства, например, с полимолочной кислотой, поли-эпсилон-капролактоном, полигидроксимасляной кислотой, полиортоэфирами, полиацеталями, полидигидропиранами, полицианоакрилатами и сшитыми или амфифильными блок-сополимерами гидрогелей.

Подходящие связующие вещества включают (но не ограничиваются только ими) крахмал, желатин, природные сахара, такие как глюкоза или беталактоза, кукурузные подсластители, природные и синтетические смолы, такие как смола акации, трагакантовая камедь или олеат натрия, стеарат натрия, стеарат магния, бензоат натрия, ацетат натрия, хлорид натрия и т.п.

Разрыхлители включают (но не ограничиваются только ими) крахмал, метилцеллюлозу, агар, бентонит, ксанатановую камедь и т.п.

Защитные группы:

В любом способе получения соединений по настоящему изобретению может оказаться необходимым и/или желаемым защитить чувствительную или реакционноспособную группу в какой-либо из участвующих в реакции молекул. Это можно осуществить с помощью общеизвестных защитных групп, таких как описанные в работе Protective Groups in Organic Chemistry, ed. J.F.W. McOmie, Plenum Press, 1973; и T.W. Greene & P.G.M. Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis, John Wiley & Sons, 1991, которые полностью включены в настоящий текст посредством ссылки. Защитные группы можно удалить на подходящей последующей стадии, используя известные в данной области методики.

Защитную группу вводят в молекулу путем химической модификации функциональной группы с целью достижения селективности в последующей химической реакции. Защитные группы представляют собой, например, защитные группы для спиртов, защитные группы для аминов, защитные группы для карбонила, защитные группы для карбоксильных групп и защитные группы для фосфатов.

Примерами защитных групп для спиртов являются ацетил (Ac), бензоил (Bz), бензил (Bn, Bnl) β-метоксиэтоксиметиловый эфир (MEM), диметокситритил [бис-(4-метоксифенил)фенилметил, DMT], метоксиметиловый эфир (MOM), метокситритил [(4-метоксифенил)дифенилметил, MMT), п-метоксибензиловый эфир (PMB), метилтиометиловый эфир, пивалоил (Piv), тетрагидропиранил (THP), тритил (трифенилметил, Tr), силиловые эфиры (такие как триметилсилиловый эфир (TMS), трет-бутилдиметилсилиловый эфир (TBDMS), трет-бутилдиметилсилилоксиметиловый эфир (TOM) и триизопропилсилиловый эфир (TIPS)); метиловые эфиры и этоксиэтиловые эфиры (EE).

Примеры защитных групп для аминов выбраны из карбобензилокси-группы (Cbz), п-метоксибензилкарбонила (Moz или MeOZ), трет-бутилоксикарбонила (BOC), 9-флуоренилметилоксикарбонила (FMOC), ацетила (Ac), бензоила (Bz), бензила (Bn), п-метоксибензила (PMB), 3,4-диметоксибензила (DMPM), п-метоксифенила (PMP), тозила (Ts) и других сульфонамидов (нозил и Nps).

Подходящие защитные группы для карбонила выбраны из ацеталей и кеталей, ацилалей и дитианов.

Подходящие защитные группы для карбоновых кислот выбраны из метиловых эфиров, бензиловых эфиров, трет-бутиловых эфиров, силиловых эфиров, ортоэфиров и оксазолина.

Примерами защитных групп для фосфатов являются 2-цианоэтил и метил (Me).

Соединения, имеющие формулу I

В аспекте 1, в настоящем изобретении описано соединение, имеющее приведенную ниже формулу I, его индивидуальные энантиомеры, его индивидуальные диастереомеры, его гидраты, его сольваты, его кристаллические формы, его индивидуальные таутомеры или его фармацевтически приемлемая соль,

,

где:

n = 1-3, предпочтительно 1 или 2;

R¹, R³ и R⁴ независимо выбраны из H и группы, состоящей из алкила, арила, арилалкила, гетероарила и гетероарилалкила, каждый из которых необязательно может иметь заместители;

R² выбран из группы, состоящей из алкила, арила, арилалкила, гетероарила и гетероарилалкила, каждый из которых необязательно и предпочтительно может иметь заместители;

где любые два из R¹, R², R³ и R⁴ могут быть соединены друг с другом, формируя цикл;

R⁴ предпочтительно представляет собой H;

X представляет собой -CH₂-.

В альтернативном варианте осуществления данного аспекта, R³ и R⁴ предпочтительно одинаковые, и более предпочтительно - соединены друг с другом с образованием карбоциклического или гетероциклического кольца. R³ предпочтительно представляет собой H или, предпочтительно, выбран из группы, состоящей из C_1-6 алкила, арила, арилалкила, гетероарила и гетероарилалкила, каждый из которых необязательно может иметь заместители; и более предпочтительно выбран из группы, состоящей из метила, этила, 1-пропила, 2-пропила, бензила, фенила, карбоксиметила и 2-карбоксиэтила. В одном предпочтительном варианте осуществления данного аспекта, n = 2. В другом предпочтительном варианте осуществления данного аспекта, n = 3. Наиболее предпочтительно, n = 1.

В аспекте 2, в настоящем изобретении описано соединение по аспекту 1, где R³ представляет собой H.

В аспекте 3, в настоящем изобретении описано соединение по любому из аспектов 1-2, где R¹ и R³ представляют собой H.

В аспекте 4, в настоящем изобретении описано соединение по любому из аспектов 1-3, где R¹ выбран из группы, состоящей из арилметила, (алкоксиарил)метила, (гидроксиарил)метила, (карбоксиарил)метила, (алкоксигетероарил)метила, (гетероариларил)метила, (гидроксигетероарил)метила и (карбоксигетероарил)метила, каждый из которых необязательно может иметь заместители.

В аспекте 5, в настоящем изобретении описано соединение по любому из аспектов 1-4, где R¹ имеет приведенную ниже формулу,

,

где:

(i) по меньшей мере один из R_P и R_m, предпочтительно R_m, представляет собой функциональную группу, имеющую кислотный атом водорода, и необязательно выбран из -COOH, -SO₃H, -P(O)(OH)₂, -C(O)-NH-OH, -OH и тетразол-5-ила; или

(ii) R_P и R_m представляют собой алкокси-группы, которые соединены между собой, формируя часть 5-8-членного гетероцикла; или

(iii) по меньшей мере один из R_P и R_m выбран из группы, состоящей из C_1-6 алкила, C_1-6 алкокси-группы, фтор(C_1-6 алкил), фтор(C_1-6 алкокси), -C(O)-NH₂, -C(O)-OCH₃, -C(O)-OCH₂CH₃, фтора, хлора, брома, иода и циано-группы;

где R¹ необязательно может иметь дополнительные заместители.

В аспекте 6, в настоящем изобретении описано соединение по любому из аспектов 1-5, где

R¹ выбран из группы, состоящей из (1,3-бензодиоксол-5-ил)метила, (3-карбоксифенил)метила, (4-карбоксифенил)метила,(2,4-дифтор-3-гидрокси-фенил)-метила, (3,5-дифтор-4-гидрокси-фенил)метила, (2,6-дифтор-3-гидрокси-фенил)метила, (4-фтор-3-гидрокси-фенил)метила, (2-фтор-3-гидрокси-фенил)метила, (4-хлор-2-фтор-3-гидрокси-фенил)-метила, (4-хлор-2-фтор-3-метокси-фенил)-метила, (2,4-дифтор-3-метокси-фенил)метила, (3-этоксикарбонилфенил)метила, (4-хлор-2-фтор-фенил)метила, (3,4,5-триметоксифенил)метила, 2,3-дигидро-1,4-бензодиоксин-6-ил-метила, (7-метокси-1,3-бензодиоксол-5-ил)метила и [3-(дифторметокси)фенил]метила; предпочтительно выбран из (3-карбоксифенил)метила, 2,4-дифтор-3-гидрокси-фенил)-метила, (4-хлор-2-фтор-3-гидрокси-фенил)-метила и 1,3-бензодиоксол-5-илметила.

В аспекте 7, в настоящем изобретении описано соединение по любому из аспектов 1-6, где R² выбран из группы, состоящей из арила, алкоксиарила, карбоксиарила, цианоарила, галогенарила, гидроксиарила, алкоксигетероарила, цианогетероарила, галогенгетероарила, гетероариларила, гидроксигетероарила и карбоксигетероарила, каждый из которых необязательно может иметь заместители.

В аспекте 8, в настоящем изобретении описано соединение по любому из аспектов 1-7, где R² имеет приведенную ниже формулу,

,

где:

(i) по меньшей мере один из R_P и R_m, предпочтительно R_m, представляет собой функциональную группу, имеющую кислотный атом водорода, и необязательно выбран из -COOH, -SO₃H, -P(O)(OH)₂, -C(O)-NH-OH, -OH и тетразол-5-ила; или

(ii) R_P и R_m представляют собой алкокси-группы, которые соединены между собой, формируя часть 5-8-членного гетероцикла; или

(iii) по меньшей мере один из R_P и R_m выбран из группы, состоящей из C_1-6 алкила, C_1-6 алкокси-группы, -C(O)-NH₂, -C(O)-OCH_3, -C(O)-OCH₂CH₃, фтор(C_1-6 алкил), фтор(C_1-6 алкокси), фтора, хлора, брома, иода и циано-группы;

где R² необязательно может иметь дополнительные заместители.

В аспекте 9, в настоящем изобретении описано соединение по любому из аспектов 1-8, где R² выбран из группы, состоящей из 1,3-бензодиоксол-5-ила, 3-карбоксифенила, 1,3-бензодиоксол-5-ила, 3-карбоксифенила, 4-карбоксифенила, 3-карбокси-4-метоксифенила, 3,5-дихлор-4-гидроксифенила, 4-хлорфенила, 4-цианофенила, 4-фторфенила, 2,6-дифтор-4-метоксифенила, 3-фтор-4-метоксифенила, 3-метоксифенила, 4-метоксифенила, 4-хлорфенила, 4-метилфенила, 2,4-дифтор-3-гидрокси-фенила, 3,5-дифтор-4-гидрокси-фенила, 2,6-дифтор-3-гидрокси-фенила, 4-фтор-3-гидрокси-фенила, 2-фтор-3-гидрокси-фенила, 4-хлор-2-фтор-3-гидрокси-фенила, 4-хлор-2-фтор-3-метокси-фенила, 2,4-дифтор-3-метокси-фенила, 3-этоксикарбонилфенила, 4-хлор-2-фтор-фенила, 3,4,5-триметоксифенил 2,3-дигидро-1,4-бензодиоксин-6-ила, 7-метокси-1,3-бензодиоксол-5-ила, 2,4-дифтор-3-гидрокси-фенила и 1,3-бензодиоксол-5-ила; предпочтительно выбран из 3-карбоксифенила, 2,4-дифтор-3-гидрокси-фенила, 4-хлор-2-фтор-3-гидрокси-фенила и 1,3-бензодиоксол-5-ила.

В аспекте 10, в настоящем изобретении описано соединение по любому из аспектов 1-9, где:

(i) R¹ представляет собой (3-карбоксифенил)метил, и R³ представляет собой H;

(ii) R² представляет собой 3-карбоксифенил, и R³ представляет собой H;

(iii) R¹ представляет собой (3-карбоксифенил)метил, и R³ и R⁴ представляют собой H; или

(iv) R² представляет собой 3-карбоксифенил, и R³ и R⁴ представляют собой H; или

(v) R¹ представляет собой (2,4-дифтор-3-гидрокси-фенил)метил, и R² 2,4-дифтор-3-гидрокси-фенил.

Соединения, имеющие формулу V (серия 4)

В аспекте 11, в настоящем изобретении описано соединение имеющие формулу V:

где R¹, R², R³ и R⁴ имеют значения, указанные выше для формулы I, при условии, что R¹ отличен от H. В альтернативном варианте осуществления данного аспекта, R¹ может представлять собой H.

В аспекте 12, в настоящем изобретении описано соединение по аспекту 11, где R³ представляет собой H.

В аспекте 13, в настоящем изобретении описано соединение по аспектам 11-12, где R³ и R⁴ представляют собой H.

В аспекте 14, в настоящем изобретении описано соединение по любому из аспектов 11-13, где R¹ выбран из группы, состоящей из арилметила, (алкоксиарил)метила, (гидроксиарил)метила, (карбоксиарил)метила, (алкоксигетероарил)метила, (гетероариларил)метила, (гидроксигетероарил)метила и (карбоксигетероарил)метила, каждый из которых необязательно может иметь заместители.

В аспекте 15, в настоящем изобретении описано соединение по любому из аспектов 11-14, где R¹ имеет приведенную ниже формулу,

,

где:

(i) по меньшей мере один из R_P и R_m, предпочтительно R_m, представляет собой функциональную группу, имеющую кислотный атом водорода, и необязательно выбран из -COOH, -SO₃H, -P(O)(OH)₂, -C(O)-NH-OH, -OH и тетразол-5-ила; или

(ii) R_P и R_m представляют собой алкокси-группы, которые соединены между собой, формируя часть 5-8-членного гетероцикла,

где R¹ необязательно может иметь дополнительные заместители.

В аспекте 16, в настоящем изобретении описано соединение по любому из аспектов 11-15, где R¹ выбран из группы, состоящей из (1,3-бензодиоксол-5-ил)метила, (3-карбоксифенил)метила и (4-карбоксифенил)метила; предпочтительно (3-карбоксифенил)метил.

В аспекте 17, в настоящем изобретении описано соединение по любому из аспектов 11-16, где R² выбран из группы, состоящей из арила, алкоксиарила, карбоксиарила, цианоарила, галогенарила, гидроксиарила, алкоксигетероарила, цианогетероарила, галогенгетероарила, гетероариларила, гидроксигетероарила и карбоксигетероарила, каждый из которых необязательно может иметь заместители.

В аспекте 45, в настоящем изобретении описано соединение по любому из аспектов 38-44, где R² имеет приведенную ниже формулу,

где:

(i) по меньшей мере один из R_P и R_m, предпочтительно R_m, представляет собой функциональную группу, имеющую кислотный атом водорода, и необязательно выбран из -COOH, -SO₃H, -P(O)(OH)₂, -C(O)-NH-OH, -OH и тетразол-5-ила; или

(ii) R_P и R_m представляют собой алкокси-группы, которые соединены между собой, формируя часть 5-8-членного гетероцикла; или

(iii) по меньшей мере один из R_P и R_m выбран из группы, состоящей из C_1-6 алкила, C_1-6 алкокси-группы, фтор(C_1-6 алкил), фтор(C_1-6 алкокси), фтора, хлора, брома, иода и циано-группы;

где R² необязательно может иметь дополнительные заместители.

В аспекте 18, в настоящем изобретении описано соединение по любому из аспектов 11-17, где R² выбран из группы, состоящей из 1,3-бензодиоксол-5-ила, 3-карбоксифенила, 1,3-бензодиоксол-5-ила, 3-карбоксифенила, 4-карбоксифенила, 3-карбокси-4-метоксифенила, 3,5-дихлор-4-гидроксифенила, 4-хлорфенила, 4-цианофенила, 4-фторфенила, 2,6-дифтор-4-метоксифенила, 3-фтор-4-метоксифенила, 3-метоксифенила, 4-метоксифенила, 4-хлорфенила и 4-метилфенила.

В аспекте 19, в настоящем изобретении описано соединение по любому из аспектов 11-18, где:

(i) R¹ представляет собой (3-карбоксифенил)метил, и R³ представляет собой H;

(ii) R² представляет собой 3-карбоксифенил, и R³ представляет собой H

(iii) R¹ представляет собой (3-карбоксифенил)метил, и R³ и R⁴ представляют собой H; или

(iv) R² представляет собой 3-карбоксифенил, и R³ и R⁴ представляют собой H.

Отдельные соединения

В аспекте 20, соединение по настоящему изобретению наиболее предпочтительно выбрано из группы, состоящей из:

или

(ii) выбрано из группы, состоящей из:

Фармацевтические композиции

В аспекте 21 настоящего изобретения описана фармацевтическая композиция, содержащая соединение по любому из предшествующих аспектов, его индивидуальные энантиомеры, его индивидуальные диастереомеры, его гидраты, его сольваты, его кристаллические формы, его индивидуальные таутомеры или его фармацевтически приемлемую соль; и указанное выше фармацевтически приемлемое вспомогательное вещество.

Способы лечения и соединения или композиции для применения в способах лечения или профилактики

В настоящем изобретении описано соединение или фармацевтическая композиция по любому из предшествующих аспектов для применения в способе лечения или профилактики у человека или животного хирургическим или терапевтическим способом.

В настоящем изобретении также описан способ лечения или профилактики у человека или животного хирургическим или терапевтическим способом, включающий введение терапевтически эффективного количества соединения или фармацевтической композиции по любому из предшествующих аспектов субъекту, нуждающемуся в этом.

В настоящем изобретении также описано соединение или фармацевтическая композиция по любому из предшествующих аспектов для применения в способе лечения или профилактики болезни Альцгеймера, нефрита, повреждения почки, ишемии почки, ишемического острого тубулярного некроза, острой почечной недостаточности, воспаления мочевого пузыря, воспалительного заболевания кишечника (ВЗК), болезни Крона, язвенного колита, хронического воспаления, колита, фиброза, фиброзных состояний, келоидов, легочной гипертензии, интерстициального заболевания легкого или рака, в особенности рака толстой и прямой кишок.

В настоящем изобретении также описан способ лечения или профилактики болезни Альцгеймера, нефрита, повреждения почки, ишемии почки, ишемического острого тубулярного некроза, острой почечной недостаточности, воспаления мочевого пузыря, воспалительного заболевания кишечника (ВЗК), болезни Крона, язвенного колита, хронического воспаления, колита, фиброза, фиброзных состояний, келоидов, легочной гипертензии, интерстициального заболевания легкого или рака, в особенности рака толстой и прямой кишок, включающий введение терапевтически эффективного количества соединения или фармацевтической композиции по любому из предшествующих аспектов, нуждающемуся в этом.

Способы получения соединений по настоящему изобретению

В настоящем изобретении также описаны приведенные ниже способы получения соединений, имеющих формулы I-V.

Метод A

Соединения, имеющие формулу I или V, можно получить реакцией соответствующей Fmoc-аминокислоты с тритилгидроксиламином в подходящем растворителе, таком как ДМФА, с последующим добавлением активатора, такого как TBTU, и основания, такого как DIPEA, добавлением воды, отделением образующегося остатка фильтрованием, необязательно промывкой осадка органическим растворителем, таким как диэтиловый эфир, и, необязательно, водным раствором основания. Остаток затем снова растворяют в подходящем органическом растворителе, таком как ТГФ, и добавляют основание, такое как DBU, затем необязательно удаляют растворитель и необязательно очищают полученный остаток от упаривания.

Метод B/C

Соединения, имеющие формулу I или V, можно получить реакцией при комнатной температуре (метод B) или при повышенной температуре (метод C), необязательно в микроволновой печи при 140°C, соответствующей тритил-замещенной гидроксамовой кислоты с основанием и соответствующим галогенидом, предпочтительно необязательно замещенным бензил галогенидом, и необязательно применяя: экстракцию органическим растворителем, высушивание объединенной органической фазы, удаление растворителя и очистку остатка от упаривания; с последующим добавлением к остатку триизопропилсилана и ТФУК; и необязательно применяя: экстракцию органическим растворителем, высушивание объединенной органической фазы, удаление растворителя и очистку остатка от упаривания.

Методы D/E/F

Соединения, имеющие формулу I или V, можно получить реакцией подходящего альдегида (в зависимости от R1) с тритил-замещенной гидроксамовой кислотой; затем добавлением боргидрида натрия; и необязательно применяя: экстракцию органическим растворителем, высушивание объединенной органической фазы, удаление растворителя и очистку остатка от упаривания, с получением тритил-замещенного производного гидроксамовой кислоты (метод D); далее реакция тритил-замещенного производного гидроксамовой кислоты с основанием и соответствующим галогенидом, предпочтительно необязательно замещенным бензил галогенидом, при комнатной температуре (метод E) или при повышенной температуре, необязательно в микроволновой печи при 140°C (метод F); и необязательно применяя: экстракцию органическим растворителем, высушивание объединенной органической фазы, удаление растворителя и очистку остатка от упаривания; с последующим добавлением к остатку триизопропилсилана и ТФУК; и необязательно применяя: экстракцию органическим растворителем, высушивание объединенной органической фазы, удаление растворителя и очистку остатка от упаривания.

Методы G/H

Соединения, имеющие формулу I или V, можно получить реакцией сложного эфира аминокислоты и соответствующего альдегида в подходящем растворителе, обработкой восстановителем, таким как триацетоксиборгидрид натрия, и необязательно каталитическим количеством уксусной кислоты, с последующим добавлением воды, экстракцией органическим растворителем, высушиванием объединенной органической фазы, удалением растворителя и очисткой остатка от упаривания (метод G). Соответствующее производное сложного эфира аминокислоты, полученное по методу G, растворяют в подходящем растворителе, с последующим добавлением гидроксиламина гидрохлорида и основания, такого как метоксид натрия, и предпочтительно нагревают смесь до окончания реакции, необязательно в микроволновой печи при 80°C, затем добавляют воду и проводят экстракцию органическим растворителем, высушивание объединенной органической фазы, удаление растворителя и очистку остатка от упаривания.

Примеры

Подробное описание методов синтеза

Метод A

Соответствующую Fmoc-аминокислоту (1 экв.) растворяли в ДМФА (1 мл/ммоль). Тритилгидроксиламин (1 экв.), TBTU (1 экв.) и DIPEA (2 экв.) добавляли, и смесь перемешивали при комнатной температуре 1,5 часа. Реакционную смесь гасили водой. Выпавший осадок отделяли фильтрованием и промывали диэтиловым эфиром и небольшим количеством насыщенного водного раствора NaHCO₃. Остаток снова растворяли в ТГФ (2 мл/ммоль) и добавляли DBU (1,5 экв.). Смесь перемешивали при комнатной температуре до окончания реакции (ТСХ-мониторинг, обычно около 30 минут). Растворитель упаривали, и остаток очищали методом флэш-хроматографии (силикагель, CHCl₃/MeOH градиент).

Метод B

Соответствующую тритил-замещенную гидроксамовую кислоту (1 экв.), полученную по методу A, растворяли в ДМФА (5 мл/ммоль). Триэтиламин (2,2 экв.) и соответствующий бензил галогенид (2,2 экв.) добавляли, и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Реакционную смесь гасили водой и экстрагировали этилацетатом (3x25 мл). Объединенные органические слои сушили над Na₂SO₄ и упаривали. В остаток добавляли CH₂Cl₂/ТФУК (1:1 об/об, 5 мл) и триизопропилсилан (1,5 экв.) и перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. Летучие компоненты упаривали, и остаток очищали методом полупрепаративной ВЭЖХ (Varian Prostar, колонка Phenomenex Luna C₁₈(2), градиент H₂O/MeCN с 0,04% ТФУК).

Метод C

Соответствующую тритил-замещенную гидроксамовую кислоту (1 экв.), полученную по A, растворяли в ДМФА (3-5 мл/ммоль). Триэтиламин (4 экв.) и соответствующий бензил галогенид (2,2 экв.) добавляли, и смесь нагревали в микроволновой печи при 140°C в течение 20 мин. Реакционную смесь гасили водой и экстрагировали этилацетатом (3x25 мл). Объединенные органические слои сушили над Na₂SO₄ и упаривали. В остаток добавляли CH₂Cl₂/ТФУК (1:1 об/об, 5 мл) и триизопропилсилан (1,5 экв.) и перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. Летучие компоненты упаривали, и остаток очищали методом полупрепаративной ВЭЖХ (Varian Prostar, колонка Phenomenex Luna C₁₈(2), градиент H₂O/MeCN с 0,04% ТФУК).

Синтетический пример 2

3-[[(3-Карбоксифенил)метил-[2-(гидроксиамино)-2-оксо-этил]амино]метил]бензойная кислота

Стадия 1:2-Амино-N-тритилокси-ацетамид

Данное соединение синтезировали исходя из Fmoc-Gly-OH (2,97 г, 10 ммоль, 1 экв.), тритилгидроксиламина (2,8 г, 10 ммоль, 1 экв.), TBTU (3,21 г, 10 ммоль, 1 экв.), DIPEA (3,5 мл, 20 ммоль, 2 экв.) и DBU (2,2 мл, 15 ммоль, 1,5 экв.) согласно методу A. Выход: 1,4 г (42,1%), ESI-MS: m/z 243,2 [Тритил]⁺, 333,3 [M+H]⁺; ВЭЖХ (градиент 2): время удерживания (rt) 12,24 мин (100%).

Стадия 2: 3-[[(3-Карбоксифенил)метил-[2-(гидроксиамино)-2-оксо-этил]амино]метил] бензойная кислота

Данное соединение синтезировали исходя из 2-амино-N-тритилокси-ацетамида (332 мг, 1 ммоль, 1экв.), трет-бутил 3-(хлорметил)бензоата (499 мг, 2,2 ммоль, 2,2 экв.) и ТЭА (305 мкл, 2,2 ммоль, 2,2 экв.), с последующим кислотным удалением защитной группы и очисткой методом полупрепаративной ВЭЖХ, как описано в методе B. Выход: 43 мг (12%, соль с ТФУК); ESI-MS: m/z 359,1 [M+H]⁺; ВЭЖХ (градиент 2): время удерживания (rt) 7,73 мин (97,4%); ¹H-ЯМР, 400 МГц, ДМСО d6: δ 3,59 (с, 1,5H), 3,91 (с, 0,5H), 4,24-4,28 (м, 2H), 7,55-7,59 (м, 1H), 7,70-7,74 (м, 1H), 7,95-7,99 (м, 1H), 8,13-8,15 (м, 1H), 9,21-9,58 (м, 3H), 10,69 (с, 0,2H), 10,94 (с, 0,8H), 13,19 (ушир.с, 1H).

Метод D

Соответствующую тритил-замещенную гидроксамовую кислоту (1 экв.), полученную по методу A, растворяли в MeOH (10 мл/ммоль). Трет-бутил 3-формилбензоат (1,1 экв.), или другой соответствующий альдегид добавляли, и смесь перемешивали при комнатной температуре. После 3 часов боргидрид натрия (1,2 экв.) добавляли осторожно небольшими порциями. Реакционную смесь перемешивали при той же температуре ещё 30 мин. Смесь гасили водой и экстрагировали этилацетатом (3x25 мл). Растворитель упаривали и остаток очищали методом флэш-хроматографии (силикагель, CHCl₃/MeOH градиент).

Метод E

Тритил-замещенное производное гидроксамовой кислоты (1 экв.), полученное по методу D, растворяли в ДМФА (5 мл/ ммоль). Добавляли триэтиламин (1,1 экв.) и соответствующий бензил галогенид (1,1 экв.), и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Реакционную смесь разбавляли водой и экстрагировали этилацетатом (3x25 мл). Объединенные органические слои сушили над Na₂SO₄ и упаривали. В остаток добавляли CH₂Cl₂/ТФУК (1:1 об/об, 5 мл) и триизопропилсилан (1,5 экв.). После перемешивания при комнатной температуре в течение 2 часов, летучие компоненты упаривали. Остаток очищали методом полупрепаративной ВЭЖХ (Varian Prostar, колонка Phenomenex Luna C₁₈(2), градиент H₂O/MeCN с 0,04% ТФУК) или методом флэш-хроматографии (силикагель, CHCl₃/MeOH градиент).

Метод F

Тритил-замещенное производное гидроксамовой кислоты (1 экв.), полученное по методу D, растворяли в ДМФА (5 мл/ ммоль). Добавляли триэтиламин (1,1 экв.) и соответствующий бензил галогенид (1,1 экв.), и смесь нагревали до 120°C в микроволновой печи 15 мин. После охлаждения до комнатной температуры, реакционную смесь разбавляли водой и экстрагировали этилацетатом (3x25 мл). Объединенные органические слои сушили над Na₂SO₄ и упаривали. В остаток добавляли CH₂Cl₂/ТФУК (1:1 об/об, 5 мл) и триизопропилсилан (1,5 экв.). После перемешивания при комнатной температуре в течение 2 часов, летучие компоненты упаривали. Остаток очищали методом полупрепаративной ВЭЖХ (Varian Prostar, колонка Phenomenex Luna C₁₈(2), градиент H₂O/MeCN с 0,04% ТФУК) или методом флэш-хроматографии (силикагель, CHCl₃/MeOH градиент).

Синтетический пример 7

3-[[(4-Карбоксифенил)метил-[2-(гидроксиамино)-2-оксо-этил]амино]метил]бензойная кислота

Данное соединение синтезировали исходя из трет-бутил 3-[[[2-оксо-2-(тритилоксиамино)этил]амино]-метил]бензоата (метод D - см. выше, 410 мг, 0,78 ммоль, 1 экв.), трет-бутилового эфира 4-бромметилбензойной кислоты (234 мг, 0,86 ммоль, 1,1 экв.) и ТЭА (120 мкл, 0,86 ммоль, 1,1 экв.) и очищали методом полупрепаративной ВЭЖХ согласно методу E. Выход: 35 мг (12,5%, ТФУК-соль); ESI-MS: m/z 359,1 [M+H]⁺; ВЭЖХ (градиент 1): время удерживания (rt) 7,01 мин (100%); ¹H-ЯМР, 400 МГц, ДМСО d6: δ 3,18 (м, 2H), 4,00 (м, 4H), 7,49-7,63 (м, 3H), 7,69-7,75 (м, 1H), 7,89-7,99 (м, 3H), 8,02-8,14 (м, 1H), 9,35-9,37 (м, 1H), 10,60 (ушир.с, 1H), 13,04 (ушир.с, 2H).

Метод G:

Сложный эфир аминокислоты (1 экв.) и соответствующий альдегид (3 экв.) суспендировали в дихлорметане (20 мл/ммоль) и добавляли триацетоксиборгидрид натрия (4 экв.) и каталитическое количество уксусной кислоты. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Реакционную смесь гасили добавлением воды и экстрагировали этилацетатом (3x25 мл). Объединенные органические слои сушили над Na₂SO₄ и упаривали. Остаток очищали методом флэш-хроматографии (силикагель, градиент гептан/диэтиловый эфир).

Метод H

Соответствующее производное сложного эфира аминокислоты (1 экв.), полученное по методу G, растворяли в MeOH (6-10 мл). Добавляли гидроксиламин гидрохлорид (3 экв.) и метоксид натрия (6 экв.), и смесь нагревали в микроволновой печи (Biotage® initiator+) при 80°C до завершения реакции (обычно 6-10 мин). После охлаждения до комнатной температуры, смесь разбавляли водой. Значение рН доводили до ≈8 с помощью разбавленного водного раствора HCl, и смесь экстрагировали этилацетатом (3x25 мл). Объединенные органические слои сушили над Na₂SO₄ и упаривали. Остаток очищали методом полупрепаративной ВЭЖХ (Varian Prostar, колонка Phenomenex Luna C₁₈(2), градиент H₂O/MeCN с 0,04% ТФУК).

Синтетический пример 63

2-[бис(2,3-дигидро-1,4-бензодиоксин-6-илметил)амино]этангидроксамовая кислота (660)

Стадия 1: Метил 2-[бис(2,3-дигидро-1,4-бензодиоксин-6-илметил)амино]ацетат

Данное соединение синтезировали исходя из гидрохлорида метилового эфира глицина (126 мг, 1 ммоль, 1 экв.), 1,4-бензодиоксан-6-карбальдегида (492 мг, 3 ммоль, 3 экв.) и триацетоксиборгидрида натрия (848 мг, 4 ммоль 4 экв.) согласно методу G. Выход: 322 мг (83,5 %), ESI-MS: m/z 386,9 [M+H]⁺; ВЭЖХ (градиент 2): время удерживания (rt) 11,09 мин (97,2%).

Стадия 2: 2-[бис(2,3-дигидро-1,4-бензодиоксин-6-илметил)амино]этангидроксамовая кислота

Данное соединение синтезировали исходя из метил 2-[бис(2,3-дигидро-1,4-бензодиоксин-6-илметил)амино]ацетата (322 мг, 0,84 ммоль, 1 экв.), NH₂OH*HCl (175 мг, 2,5 ммоль, 3 экв.) и метоксида натрия (0,9 мл 30%-ного раствора в MeOH, 5 ммоль, 6 экв.) согласно методу H. Выход: 35 мг (10,9%, ТФУК-соль); ESI-MS: m/z 387,1 [M+H]⁺; ВЭЖХ (градиент 2): время удерживания (rt) 9,75 мин (97,7%); ¹H-ЯМР, 400 МГц, ДМСО d6: δ 3,41 (ушир.с, 2H), 4,12 (ушир.с, 4H), 4,26 (с, 8H), 6,89-6,99 (м, 4H), 7,04-7,09 (м, 2H), 10,88 (ушир.с, 1H).

Другие примеры

Серия 4

Пример 1. 4-[[(4-Карбоксифенил)метил-[2-(гидроксиамино)-2-оксо-этил]амино] метил]бензойная кислота

Данное соединение синтезировали согласно описанному выше методу B. Выход: 12 мг (3,3%); ESI-MS: m/z 359,3 [M+H]⁺; ВЭЖХ (градиент 2): время удерживания (rt) 7,39 мин (100%); ¹H-ЯМР, 400 МГц, ДМСО d6: δ 3,10 (с, 2H), 3,90 (с, 4H), 7,54-7,56 (м, 4H), 7,91-7,93 (м, 4H), 10,52 (ушир.с, 1H), 12,94 (ушир.с, 2H).

Пример 2. 3-[[(3-Карбоксифенил)метил-[2-(гидроксиамино)-2-оксо-этил]амино] метил]бензойная кислота

Данное соединение синтезировали согласно описанным выше методам A и B. Выход: 43 мг (12,0%); ESI-MS: m/z 359,1 [M+H]⁺; ВЭЖХ (градиент 2): время удерживания (rt) 7,73 мин (97,4%); ¹H-ЯМР, 400 МГц, ДМСО d6: δ 3,24 (ушир.с, 1H), 4,07 (ушир.с, 3,1 H), 4,43 (ушир.с, 0,9 H), 7,49-7,58 (м, 2H), 7,68-7,74 (м, 2H), 7,89-7,97 (м, 2H), 8,03 (ушир.с, 1,6H), 8,14 (ушир.с, 0,4H), 10,64 (с, 1H), 13,06 (ушир.с, 2H).

Пример 3. 3-[[[2-(Гидроксиамино)-2-оксо-этил]амино]-метил]бензойная кислота

Побочный продукт, образующийся в Примере 2. Выход: 24 мг (10,7%); ESI-MS: m/z 224,9 [M+H]⁺; ВЭЖХ (градиент 2): время удерживания (rt) 3,84 мин (99,1%); ¹H-ЯМР, 400 МГц, ДМСО d6: δ 3,59 (с, 1,5H), 3,91 (с, 0,5H), 4,24-4,28 (м, 2H), 7,55-7,59 (м, 1H), 7,70-7,74 (м, 1H), 7,95-7,99 (м, 1H), 8,13-8,15 (м, 1H), 9,21-9,58 (м, 3H), 10,69 (с, 0,2H), 10,94 (с, 0,8H), 13,19 (ушир.с, 1H).

Пример 4. 2-[бис(1,3-бензодиоксол-5-илметил)амино]-этангидроксамовая кислота

Данное соединение синтезировали согласно описанному выше методу B. Выход: 56 мг (11,9%); ESI-MS: m/z 359,1 [M+H]⁺; ВЭЖХ (градиент 2): время удерживания (rt) 10,03 мин (100%); ¹H-ЯМР, 400 МГц, ДМСО d6: δ 3,40 (с, 2H), 4,12 (ушир.с, 3H), 4,33 (ушир.с, 1H), 6,06-6,07 (м, 4H), 6,96-7,03 (м, 4H), 7,09-7,13 (м, 2H), 9,51 (ушир.с, 1H), 10,67-10,85 (м, 1H).

Пример 5. 2-[бис[(3-Метоксифенил)метил]амино]-этангидроксамовая кислота

Данное соединение синтезировали согласно описанному выше методу B. Выход: 102 мг (23,0%); ESI-MS: m/z 331,1 [M+H]⁺; ВЭЖХ (градиент 2): время удерживания (rt) 10,85 мин (100%); ¹H-ЯМР, 400 МГц, ДМСО d6: δ 3,35 (ушир.с, 2H), 3,77 (с, 6H), 4,10 (ушир.с, 3H), 4,38 (ушир.с, 1H), 6,94-7,13 (м, 6H), 7,31-7,38 (м, 2H), 10,78 (ушир.с, 1H).

Пример 6. 3-[[[2-(Гидроксиамино)-2-оксо-этил]-[(4-метоксифенил)метил]амино]-метил]бензойная кислота

Данное соединение синтезировали согласно описанным выше методам D и E. Выход: 84 мг (36,7%); ESI-MS: m/z 345,5 [M+H]⁺; ВЭЖХ (градиент 2): время удерживания (rt) 8,72 мин (98,2%); ¹H-ЯМР, 400 МГц, ДМСО d6: δ 3,30-3,43 (м, 2H), 3,78 (с, 3H), 4,07-4,49 (м, 4H), 6,96-7,01 (м, 2H), 7,39-7,47 (м, 1H), 7,52-7,59 (м, 2H), 7,71-7,78 (м, 1H), 7,94-8,00 (м, 1H), 8,09-8,19 (м, 1H), 9,02-9,43 (м, 1H), 10,62-10,75 (м, 1H), 13,12 (ушир.с, 1H).

Пример 7. 3-[[(4-Карбоксифенил)метил-[2-(гидроксиамино)-2-оксо-этил]амино] метил]бензойная кислота

Данное соединение синтезировали согласно описанным выше методам D и E. Выход: 35 мг (12,5%); ESI-MS: m/z 359,1 [M+H]⁺; ВЭЖХ (градиент 1): время удерживания (rt) 7,01 мин (100%); ¹H-ЯМР, 400 МГц, ДМСО d6: δ 3,18 (м, 2H), 4,00 (м, 4H), 7,49-7,63 (м, 3H), 7,69-7,75 (м, 1H), 7,89-7,99 (м, 3H), 8,02-8,14 (м, 1H), 9,35-9,37 (м, 1H), 10,60 (ушир.с, 1H), 13,04 (ушир.с, 2H).

Пример 8. 3-[[[2-(Гидроксиамино)-2-оксо-этил]-[(4-бифенил)метил]амино]-метил] бензойная кислота

Данное соединение синтезировали согласно описанным выше методам D и E. Выход: 60 мг (40,3%); ESI-MS: m/z 391,9 [M+H]⁺; ВЭЖХ (градиент 1): время удерживания (rt) 11,57 мин (100%); ¹H-ЯМР, 400 МГц, ДМСО d6: δ 3,89-4,50 (м, 6H), 7,39-7,42 (м, 1H), 7,46-7,63 (м, 5H), 7,68-7,79 (м, 5H), 7,92-7,99 (м, 1H), 8,09-8,20 (м, 1H), 9,33 (ушир.с, 1H), 10,71 (с, 1H), 13,05 (ушир.с, 1H).

Пример 9. 3-[[[2-(Гидроксиамино)-2-оксо-этил]-[(4-пропоксифенил)метил]амино]-метил]бензойная кислота

Данное соединение синтезировали согласно описанным выше методам D и F. Выход: 110 мг (55,3%); ESI-MS: m/z 373,4 [M+H]⁺; ВЭЖХ (градиент 1): время удерживания (rt) 10,29 мин (97,34%); ¹H-ЯМР, 400 МГц, ДМСО d6: δ 0,98 (т, 3H, ³J = 7,5 Гц), 1,73 (кв, 2H, ³J = 7,5 Гц), 3,84-4,45 (м, 8H), 6,94-6,99 (м, 2H), 7,36-7,45 (м, 2H), 7,52-7,59 (м, 1H), 7,71-7,76 (м, 1H), 7,93-8,00 (м, 1H), 8,08-8,19 (м, 1H), 9,08 (ушир.с, 1H), 10,74 (с, 1H), 13,10 (ушир.с, 1H).

Пример 10. 3-[[(3-Фтор-4-метокси-фенил)метил-[2-(гидроксиамино)-2-оксо-этил] амино]метил]бензойная кислота

Данное соединение синтезировали согласно описанным выше методам D и F. Выход: 95 мг (34,3%); ESI-MS: m/z 363,1 [M+H]⁺; ВЭЖХ (градиент 1): время удерживания (rt) 8,40 мин (97,78%); ¹H-ЯМР, 400 МГц, ДМСО d6: δ 3,84-4,06 (м, 9H), 7,14-7,40 (м, 3H), 7,50-7,58 (м, 1H), 7,69-7,75 (м, 1H), 7,90-8,14 (м, 2H), 10,68 (с, 1H), 13,06 (ушир.с, 1H).

Пример 11. 3-[[(2,6-дифтор-4-метокси-фенил)метил-[2-(гидроксиамино)-2-оксо-этил] амино]метил]бензойная кислота

Данное соединение синтезировали согласно описанным выше методам D и F. Выход: 40 мг (17,0%); ESI-MS: m/z 380,9 [M+H]⁺; ВЭЖХ (градиент 1): время удерживания (rt) 9,36 мин (97,7%); ¹H-ЯМР, 400 МГц, ДМСО d6: δ 3,77-3,83 (м, 5H), 3,92-3,93 (м, 4H), 6,72-6,84 (м, 2H), 7,44-7,48 (м, 1H), 7,62-7,64 (м, 1H), 7,84-7,87 (м, 1H), 7,95-7,97 (м, 1H), 10,47 (с, 1H), 13,00 (ушир.с, 1H).

Пример 12. 3-[[(2R)-2-(Гидроксикарбамоил)пирролидин-1-ил]метил]бензойная кислота

Данное соединение синтезировали согласно описанным выше методам A и F. Выход: 31 мг (25,0%); ESI-MS: m/z 265,3 [M+H]⁺; ВЭЖХ (градиент 2): время удерживания (rt) 3,76 мин (99,9%); ¹H-ЯМР, 400 МГц, ДМСО d6: δ 1,82-1,90 (м, 2H), 2,02-2,14 (м, 1H), 2,33-2,43 (м, 1H), 3,48-3,54 (м, 2H), 3,93-4,02 (м, 1H), 4,36-4,60 (м, 2H), 7,57 (т, 1H, ³J = 7,5 Гц), 7,71-7,75 (м, 1H), 8,00 (д, 1H, ³J = 7,9 Гц), 8,12-8,15 (м, 1H), 9,29 (ушир.с, 1H), 11,08 (ушир.с, 1H), 13,19 (ушир.с, 1H).

Пример 13. 3-[[(2S)-2-(Гидроксикарбамоил)пирролидин-1-ил]метил]бензойная кислота

Данное соединение синтезировали согласно описанным выше методам A и F. Выход: 67 мг (42,2%); ESI-MS: m/z 265,2 [M+H]⁺; ВЭЖХ (градиент 2): время удерживания (rt) 3,71 мин (100%); ¹H-ЯМР, 400 МГц, ДМСО d6: δ 1,84-1,91 (м, 2H), 2,05-2,12 (м, 1H), 2,34-2,41 (м, 1H), 3,25-3,34 (м, 2H), 3,97-4,02 (м, 1H), 4,35-4,60 (м, 2H), 7,57 (т, 1H, ³J = 7,5 Гц), 7,71-7,75 (м, 1H), 8,00 (д, 1H, ³J = 7,5 Гц), 8,12-8,15 (м, 1H), 9,30 (ушир.с, 1H), 11,09 (с, 1H), 13,18 (ушир.с, 1H).

Пример 14: 3-[[[2-(Гидроксиамино)-2-оксо-этил]-[(3-метоксифенил)метил]амино]-метил]бензойная кислота

Данное соединение синтезировали согласно описанным выше методам D и F. Выход: 150 мг (36,7%); ESI-MS: m/z 345,1 [M+H]⁺; ВЭЖХ (градиент 1): время удерживания (rt) 8,21 мин (98,6%); ¹H-ЯМР, 400 МГц, ДМСО d6: δ 3,27 (с, 2H), 3,76-4,47 (м, 7H), 6,90-6,93 (м, 1H), 7,00-7,11 (м, 2H), 7,28-7,37 (м, 1H), 7,50-7,58 (м, 1H), 7,69-7,76 (м, 1H), 7,91-7,98 (м, 1H), 8,07-8,17 (м, 1H), 10,68 (с, 1H), 13,07 (ушир.с, 1H).

Пример 15. 2-[бис[(4-Метоксифенил)метил]амино]этан-гидроксамовая кислота

Данное соединение синтезировали согласно описанному выше методу B. Выход: 40 мг (7,7%); ESI-MS: m/z 331,4 [M+H]⁺; ВЭЖХ (градиент 1): время удерживания (rt) 9,63 мин (89,7%); ¹H-ЯМР, 400 МГц, ДМСО d6: δ 3,75-3,80 (м, 6H), 3,98-4,45 (м, 6H), 6,93-7,16 (м, 6H), 7,30-7,40 (м, 2H), 10,75 (ушир.с, 1H).

Пример 16. 2-[[[2-(Гидроксиамино)-2-оксо-этил]-[(4-метоксифенил)метил]амино]-метил]бензойная кислота

Данное соединение синтезировали согласно описанным выше методам D и F. Выход: 23 мг (6,7%); ESI-MS: m/z 345,3 [M+H]⁺; ВЭЖХ (градиент 2): время удерживания (rt) 9,31 мин (100%); ¹H-ЯМР, 400 МГц, ДМСО d6: δ 3,46-3,52 (м, 2H), 3,78-3,79 (м, 3H), 4,22-4,35 (м, 2H), 4,54-4,70 (м, 2H), 6,97-7,03 (м, 2H), 7,39-7,49 (м, 2H), 7,53-7,70 (м, 3H), 7,95-8,02 (м, 1H), 9,20-9,51 (м, 1H), 10,58-10,78 (м, 1H).

Пример 17. 3-[[Бензил-[2-(гидроксиамино)-2-оксо-этил]-амино]метил]бензойная кислота

Данное соединение синтезировали согласно описанным выше методам D и F. Выход: 160 мг (76,4%); ESI-MS: m/z 315,0 [M+H]⁺; ВЭЖХ (градиент 1): время удерживания (rt) 7,63 мин (100%); ¹H-ЯМР, 400 МГц, ДМСО d6: δ 4,01-4,39 (м, 6H), 7,34-7,76 (м, 7H), 7,91-8,18 (м, 2H), 8,98 (ушир.с, 1H), 10,65 (с, 1H), 13,08 (ушир.с, 1H).

Пример 18. 3-[[[2-(Гидроксиамино)-2-оксо-этил]-(п-толил-метил)амино]метил] бензойная кислота

Данное соединение синтезировали согласно описанным выше методам D и F. Выход: 150 мг (68,6%); ESI-MS: m/z 329,1 [M+H]⁺; ВЭЖХ (градиент 1): время удерживания (rt) 8,72 мин (100%); ¹H-ЯМР, 400 МГц, ДМСО d6: δ 2,31 (с, 3H), 3,70-4,44 (м, 6H), 7,18-7,40 (м, 4H), 7,49-7,57 (м, 1H), 7,69-7,76 (м, 1H), 7,89-8,15 (м, 2H), 8,98 (ушир.с, 1H), 10,61 (с, 1H), 13,05 (ушир.с, 1H).

Пример 19. 3-[[(4-Цианофенил)метил-[2-(гидроксиамино)-2-оксо-этил]амино]метил] бензойная кислота

Данное соединение синтезировали согласно описанным выше методам D и F. Выход: 200 мг (88,5%); ESI-MS: m/z 340,1 [M+H]⁺; ВЭЖХ (градиент 1): время удерживания (rt) 8,88 мин (100%); ¹H-ЯМР, 400 МГц, ДМСО d6: δ 3,10 (с, 2H), 3,88-3,92 (м, 4H), 7,44-7,53 (м, 1H), 7,61-7,71 (м, 3H), 7,81-8,06 (м, 4H), 10,54 (с, 1H), 12,98 (ушир.с, 1H).

Пример 20. 3-[[(4-Хлорфенил)метил-[2-(гидроксиамино)-2-оксо-этил]амино]метил] бензойная кислота

Данное соединение синтезировали согласно описанным выше методам D и F. Выход: 170 мг (71,0%); ESI-MS: m/z 349,2 [M+H]⁺; ВЭЖХ (градиент 1): время удерживания (rt) 9,55 мин (97,0%); ¹H-ЯМР, 400 МГц, ДМСО d6: δ 3,18 (с, 2H), 3,93-3,99 (м, 4H), 7,35-7,60 (м, 5H), 7,64-7,74 (м, 1H), 7,87-8,14 (м, 2H), 10,61 (с, 1H), 13,03 (ушир.с, 1H).

Пример 21. 3-[[(4-Фторфенил)метил-[2-(гидроксиамино)-2-оксо-этил]амино]метил] бензойная кислота

Данное соединение синтезировали согласно описанным выше методам D и F. Выход: 150 мг (59,0%); ESI-MS: m/z 333,2 [M+H]⁺; ВЭЖХ (градиент 1): время удерживания (rt) 8,21 мин (100%); ¹H-ЯМР, 400 МГц, ДМСО d6: δ 3,98-4,04 (м, 4H), 4,34-4,40 (м, 2H), 7,19-7,28 (м, 2H), 7,47-7,57 (м, 3H), 7,69-7,75 (м, 1H), 7,90-8,15 (м, 2H), 8,99 (ушир.с, 1H), 10,65 (с, 1H), 13,05 (ушир.с, 1H).

Пример 22. 3-[[1,3-Бензодиоксол-5-илметил-[2-(гидрокси-амино)-2-оксо-этил] амино]-метил]бензойная кислота

Данное соединение синтезировали согласно описанным выше методам D и F. Выход: 210 мг (76,6%); ESI-MS: m/z 359,2 [M+H]⁺; ВЭЖХ (градиент 1): время удерживания (rt) 7,95 мин (100%); ¹H-ЯМР, 400 МГц, ДМСО d6: δ 3,85-4,43 (м, 6H), 6,02-6,06 (м, 2H), 6,89-7,00 (м, 2H), 7,06-7,10 (м, 1H), 7,51-7,58 (м, 1H), 7,70-7,76 (м, 1H), 7,91-7,99 (м, 1H), 8,05-8,16 (м, 1H), 9,07 (ушир.с, 1H), 10,70 (с, 1H), 13,07 (м, 1H).

Пример 23. 2-[1,3-Бензодиоксол-5-илметил-[(4-этокси-фенил)метил]амино] этангидроксамовая кислота

Данное соединение синтезировали согласно описанным выше методам D и F. Выход: 195 мг (58,9%); ESI-MS: m/z 121,1 [M-C₁₀H₁₁N₂O₄]⁺; 345,3 [M+H]⁺; ВЭЖХ (градиент 1): время удерживания (rt) 9,07 мин (100%); ¹H-ЯМР, 400 МГц, ДМСО d6: δ 3,35-3,45 (м, 2H), 3,74-3,80 (м, 3H), 4,06-4,40 (м, 4H), 6,06-6,08 (м, 2H), 6,96-7,04 (м, 4H), 7,10-7,14 (м, 1H), 7,42-7,49 (м, 2H), 9,12 (ушир.с, 1H), 10,84 (ушир.с, 1H).

Пример 24. 2-[(4-Метоксифенил)метил-(п-толилметил)-амино]этангидроксамовая кислота

Данное соединение синтезировали согласно описанным выше методам D и F. Выход: 170 мг (56,3%); ESI-MS: m/z 121,1 [M-C₁₀H₁₃N₂O₂]⁺; 315,3 [M+H]⁺; ВЭЖХ (градиент 1): время удерживания (rt) 9,92 мин (100%); ¹H-ЯМР, 400 МГц, ДМСО d6: δ 2,33 (с, 3H), 3,33-3,40 (м, 2H), 3,71-3,83 (м, 3H), 4,05-4,45 (м, 4H), 6,98-7,02 (м, 2H), 7,24-7,28 (м, 2H), 7,38-7,49 (м, 4H), 9,16 (ушир.с, 1H), 10,82 (ушир.с, 1H).

Пример 25. 2-[(4-фторфенил)метил-[(4-метоксифенил)-метил]амино] этангидроксамовая кислота

Данное соединение синтезировали согласно описанным выше методам D и F. Выход: 210 мг (68,6%); ESI-MS: m/z 121,1 [M-C₉H₁₀FN₂O₂]⁺; 341,3 [M+Na]⁺; ВЭЖХ (градиент 1): время удерживания (rt) 9,15 мин (100%); ¹H-ЯМР, 400 МГц, ДМСО d6: δ 3,26-3,47 (м, 2H), 3,73-3,79 (м, 3H), 4,01-4,38 (м, 4H), 6,97-7,02 (м, 2H), 7,23-7,31 (м, 2H), 7,40-7,62 (м, 4H), 9,05 (ушир.с, 1H), 10,77 (ушир.с, 1H).

Пример 26. 2-[(4-Хлорфенил)метил-[(4-метоксифенил)-метил]амино] этангидроксамовая кислота

Данное соединение синтезировали согласно описанным выше методам D и F. Выход: 153 мг (47,5%); ESI-MS: m/z 121,1 [M-C₉H₁₀ClN₂O₂]⁺; 357,3 [M+Na]⁺; ВЭЖХ (градиент 1): время удерживания (rt) 10,29 мин (100%); ¹H-ЯМР, 400 МГц, ДМСО d6: δ 3,24-3,40 (м, 2H), 3,75-3,81 (м, 3H), 3,98-4,43 (м, 4H), 6,96-7,01 (м, 2H), 7,39-7,62 (м, 6H), 9,10 (ушир.с, 1H), 10,74 (ушир.с, 1H).

Пример 27. 2-[(3-Метоксифенил)метил-[(4-метоксифенил)-метил]амино] этангидроксамовая кислота

Данное соединение синтезировали согласно описанным выше методам D и F. Выход: 165 мг (52,0%); ESI-MS: m/z 121,1 [M-C₁₀H₁₃N₂O₃]⁺; 353,3 [M+Na]⁺; ВЭЖХ (градиент 1): время удерживания (rt) 14,59 мин (100%); ¹H-ЯМР, 400 МГц, ДМСО d6: δ 3,32-3,46 (м, 2H), 3,75-3,81 (м, 6H), 4,05-4,44 (м, 4H), 6,98-7,15 (м, 5H), 7,33-7,49 (м, 3H), 9,15 (ушир.с, 1H), 10,82 (ушир.с, 1H).

Пример 28. 3-[[[(1S)-2-(Гидроксиамино)-1-метил-2-оксо-этил]амино]метил] бензойная кислота

Данное соединение синтезировали согласно описанным выше методам A и D с последующим снятием защиты посредством смеси ТФУК/ДХМ (1:1 об/об). Выход: 52 мг (20,9%); ESI-MS: m/z 239,0 [M+H]⁺; ВЭЖХ (градиент 1): время удерживания (rt) 3,52 мин (100%); ¹H-ЯМР, 400 МГц, ДМСО d6: δ 1,36-1,51 (м, 3H), 3,67-3,78 (м, 1H), 4,06-4,26 (м, 2H), 7,54-7,62 (м, 1H), 7,67-7,75 (м, 1H), 7,96-8,03 (м, 1H), 8,11-8,18 (м, 1H), 9,14-9,59 (м, 3H), 11,14 (с, 1H), 13,21 (ушир.с, 1H).

Пример 29. 3-[[[(1S)-1-(Гидроксикарбамоил)-2-метил-пропил]амино]метил] бензойная кислота

Данное соединение синтезировали согласно описанным выше методам A и D с последующим снятием защиты посредством смеси ТФУК/ДХМ (1:1 об/об). Выход: 25 мг (7,9%); ESI-MS: m/z 267,1 [M+H]⁺; ВЭЖХ (градиент 1): время удерживания (rt) 4,19 мин (100%); ¹H-ЯМР, 400 МГц, ДМСО d6: δ 0,91-1,01 (м, 6H), 2,09-2,2 (м, 1H), 4,03-4,20 (м, 2H), 7,53-7,60 (м, 1H), 7,2 (д, 1H, ³J = 7,69 Гц), 7,99 (д, 1H, ³J = 7,77 Гц), 8,09-8,16 (м, 1H), 8,83-9,57 (ушир.с, 3H), 11,11 (с, 1H), 13,08 (ушир.с, 1H).

Пример 30. 3-[[[(1S)-1-Бензил-2-(гидроксиамино)-2-оксо-этил]амино]метил] бензойная кислота

Данное соединение синтезировали согласно описанным выше методам A и D с последующим снятием защиты посредством смеси ТФУК/ДХМ (1:1 об/об). Выход: 75 мг (27,4%); ESI-MS: m/z 315,2 [M+H]⁺; ВЭЖХ (градиент 1): время удерживания (rt) 6,77 мин (100%); ¹H-ЯМР, 400 МГц, ДМСО d6: δ 3,00-3,09 (м, 1H), 3,15-3,23 (м, 1H), 3,72-3,82 (м, 1H), 4,10-4,23 (м, 2H), 7,16-7,22 (м, 2H), 7,24-7,34 (м, 3H), 7,53-7,64 (м, 1H), 7,66-7,73 (м, 1H), 7,95-8,03 (м, 1H) 8,1-8,16 (м, 1H), 9,26-9,78 (м, 3H), 10,99 (с, 1H), 13,11 (ушир.с, 1H).

Пример 31. 3-[[[3-(Гидроксиамино)-3-оксо-пропил]-[(4-метоксифенил)метил]амино]-метил]бензойная кислота

Данное соединение синтезировали согласно описанным выше методам A и D с последующим снятием защиты посредством смеси ТФУК/ДХМ (1:1 об/об). Выход: 28 мг (19,5%); ESI-MS: m/z 359,4 [M+H]⁺; ВЭЖХ (градиент 1): время удерживания (rt) 8,21 мин (95,4%); ¹H-ЯМР, 400 МГц, ДМСО d6: δ 3,00-3,31 (м, 3H), 3,74-3,87 (м, 4H), 4,08-4,57 (м, 4H), 6,93-7,09 (м, 2H), 7,3-7,5 (м, 2H), 7,5-7,67 (м, 1H), 7,67-7,84 (м, 1H), 7,87-8,22 (м, 1H), 8,56-9,4 (м, 1H), 9,67-10,02 (м, 1H), 10,58-10,81 (м, 1H), 13,18 (ушир.с, 1H).

Пример 32: 3-[[[2-(Гидроксиамино)-1,1-диметил-2-оксо-этил]амино]метил]бензойная кислота

Данное соединение синтезировали согласно описанным выше методам A и D с последующим снятием защиты посредством смеси ТФУК/ДХМ (1:1 об/об). Выход: 21 мг (5,5%); ESI-MS: m/z 253,2 [M+H]⁺; ВЭЖХ (градиент 1): время удерживания (rt) 4,19 мин (100%); ¹H-ЯМР, 400 МГц, ДМСО d6: δ 1,57 (с, 6H), 4,12 (с, 2H), 7,56-7,64 (м, 1H), 7,73 (д, 1H, ³J = 7,7 Гц), 8,00 (д, 1H, ³J = 7,8 Гц), 8,12-8,21 (м, 1H), 9,11-9,14 (м, 2H), 11,17 (с, 1H), 13,21 (ушир.с, 1H).

Пример 33. 3-[[[(1R)-2-(Гидроксиамино)-1-метил-2-оксо-этил]амино]метил] бензойная кислота

Данное соединение синтезировали согласно описанным выше методам A и D с последующим снятием защиты посредством смеси ТФУК/ДХМ (1:1 об/об). Выход: 53 мг (24,0%); ESI-MS: m/z 239,2 [M+H]⁺; ВЭЖХ (градиент 1): время удерживания (rt) 3,47 мин (100%); ¹H-ЯМР, 400 МГц, ДМСО d6: δ 1,38-1,52 (м, 3H), 3,65-3,74 (м, 1H), 4,05-4,31 (м, 2H), 7,55-7,62 (м, 1H), 7,67-7,75 (м, 1H), 7,99 (д, 1H, ³J = 7,77 Гц), 8,1-8,17 (м, 1H), 9,05-9,57 (м, 2H), 11,10 (с, 1H), 13,13 (ушир.с, 1H).

Пример 34. 3-[[[(1R)-1-(Гидроксикарбамоил)-2-метил-пропил]амино]метил] бензойная кислота

Данное соединение синтезировали согласно описанным выше методам A и D с последующим снятием защиты посредством смеси ТФУК/ДХМ (1:1 об/об). Выход: 10 мг (2,6%); ESI-MS: m/z 267,2 [M+H]⁺; ВЭЖХ (градиент 1): время удерживания (rt) 4,29 мин (100%); ¹H-ЯМР, 400 МГц, ДМСО d6: δ 0,83-1,05 (м, 6H), 2,09-2,22 (м, 1H), 4,00-4,21 (м, 2H), 7,53-7,61 (м, 1H), 7,7 (д, 1H, ³J = 7,57), 7,99 (д, 1H, ³J = 7,69), 8,09-8,17 (м, 1H), 8,96-9,55 (м, 2H), 11,11 (с, 1H), 13,09 (ушир.с, 1H).

Пример 35. 3-[[[(1R)-1-Бензил-2-(гидроксиамино)-2-оксо-этил]амино]метил] бензойная кислота

Данное соединение синтезировали согласно описанным выше методам A и D с последующим снятием защиты посредством смеси ТФУК/ДХМ (1:1 об/об). Выход: 70 мг (21,3%); ESI-MS: m/z 315,2 [M+H]⁺; ВЭЖХ (градиент 1): время удерживания (rt) 6,75 мин (100%); ¹H-ЯМР, 400 МГц, ДМСО d6: δ 2,97-3,27 (м, 2H), 3,71-3,81 (м, 1H), 4,04-4,24 (м, 2H), 7,15-7,22 (м, 2H), 7,24-7,38 (м, 3H), 7,53-7,62 (м, 1H), 7,65-7,74 (м, 1H), 7,96-8,02 (м, 1H), 8,11-8,16 (м, 1H), 9,16-9,98 (м, 3H), 10,99 (с, 1H), 13,11 (ушир.с, 1H).

Пример 36. 3-[[[(1R)-2-(Гидроксиамино)-2-оксо-1-фенил-этил]амино]метил] бензойная кислота

Данное соединение синтезировали согласно описанным выше методам A и D с последующим снятием защиты посредством смеси ТФУК/ДХМ (1:1 об/об). Выход: 4 мг (1,3%); ESI-MS: m/z 301,1 [M+H]⁺; ВЭЖХ (градиент 1): время удерживания (rt) 6,88 мин (100%); ¹H-ЯМР, 400 МГц, ДМСО d6: δ 4,00-4-20 (м, 2H), 4,73 (с, 1H), 7,44-7,59 (м, 6H), 7,61-7,68 (м, 1H), 7,96-8,01 (м, 1H), 8,08-8,13 (м, 1H), 9,28-9,41 (м, 1H), 9,81-10,12 (м, 2H), 11,26 (с, 1H), 13,16 (ушир.с, 1H).

Пример 37. 3-[[[(1S)-2-(Гидроксиамино)-2-оксо-1-фенил-этил]амино]метил] бензойная кислота

Данное соединение синтезировали согласно описанным выше методам G и D с последующим снятием защиты посредством смеси ТФУК/ДХМ (1:1 об/об). Выход: 26 мг (6,5%); ESI-MS: m/z 301,2 [M+H]⁺; ВЭЖХ (градиент 1): время удерживания (rt) 6,80 мин (100%); ¹H-ЯМР, 400 МГц, ДМСО d6: δ 4,00-4-20 (м, 2H), 4,74 (с, 1H), 7,45-7,59 (м, 6H), 7,62-7,68 (м, 1H), 7,96-8,01 (м, 1H), 8,08-8,15 (м, 1H), 9,20-9,50 (м, 1H), 9,70-10,20 (м, 2H), 11,28 (с, 1H), 13,16 (ушир.с, 1H).

Пример 38. 3-[[[4-(гидроксиамино)-4-оксо-бутил]-[(4-метоксифенил)метил]амино]-метил]бензойная кислота

Данное соединение синтезировали согласно описанным выше методам A и D с последующим снятием защиты посредством смеси ТФУК/ДХМ (1:1 об/об). Выход: 37,4 мг (6,8%); ESI-MS: m/z 373,4 [M+H]⁺; ВЭЖХ (градиент 1): время удерживания (rt) 8,40 мин (97,85%); ¹H-ЯМР, 400 МГц, ДМСО d6: δ 1,80-2,05 (м,4H), 2,90-3,05 (м, 2H), 3,75-3,85 (м, 3H), 4,20-4,6 (м, 4H), 6,90-7,10 (м, 2H), 7,35-7,50 (м, 2H), 7,55-7,65 (м, 1H), 7,70-7,80 (м, 1H), 9,95-8,20 (м, 2H), 8,70-9,00 (м, 1H), 9,95-10,10 (м, 1H), 10,52 (с, 1H), 13,20 (ушир.с, 1H).

Пример 39. 3-[[[(1S)-3-карбокси-1-(гидроксилкарбамоил)-пропил]амино]метил] бензойная кислота

Данное соединение синтезировали согласно описанным выше методам A и D с последующим снятием защиты посредством смеси ТФУК/ДХМ (1:1 об/об). Выход: 11 мг (3,1%); ESI-MS: m/z 297,2 [M+H]⁺; ВЭЖХ (градиент 1): время удерживания (rt) 3,63 мин (96,5%); ¹H-ЯМР, 400 МГц, ДМСО d6: δ 1,88-2,16 (м, 2H), 2,17-2,4 (м, 2H), 3,54-3,68 (м, 1H), 4,01-4,26 (м, 2H), 7,54-7,62 (м, 1H), 7,66-7,75 (м, 1H), 7,94-8,04 (м, 1H), 8,09-8,18 (м, 1H), 9,14-9,67 (м, 2H), 11,09-11,36 (м, 1H), 12,05-12,74 (ушир.с, 1H), 12,76-13,53 (ушир.с, 1H)

Пример 40. 2-[бис[(3-цианофенил)метил]амино]-этангидроксамовая кислота

Данное соединение синтезировали согласно описанным выше методам A и C. Выход: 52 мг (56,5%); ESI-MS: m/z 321,2 [M+H]⁺; ВЭЖХ (градиент 1): время удерживания (rt) 11,63 мин (98,2%); ¹H-ЯМР, 400 МГц, ДМСО d6: δ 3,09 (с, 3H), 3,72-3,89 (м, 4H), 7,53-7,62 (м, 2H), 7,68-7,83 (м, 4H), 7,90-7,98 (м, 2H), 10,62 (ушир.с, 1H)

Пример 41. 3-[[(3-карбамоилфенил)метил-[2-(гидроксиамино)-2-оксо-этил]амино] метил]бензамид

Данное соединение синтезировали согласно описанным выше методам A и C, исходя из метилового эфира 3-(бромметил)бензойной кислоты. Проводили аминолиз метилового эфира с помощью смеси NH₃/MeOH перед финальным снятием защиты. Выход: 44 мг (8,2%); ESI-MS: m/z 357,2 [M+H]⁺; ВЭЖХ (градиент 1): время удерживания (rt) 4,93 мин (98,7%); ¹H-ЯМР, 400 МГц, ДМСО d6: δ 3,95-4,12 (м, 4H), 4,24-4,47 (м, 2H), 7,42-7,68 (м, 6H), 7,78-8,18 (м, 6H), 9,24-9,42 (м, 1H), 10,56-10,71 (м, 1H).

Пример 42. метил 3-[[(3-карбамоилфенил)метил-[2-(гидроксиламино-2-оксо-этил] амино]метил]бензоат

Побочный продукт, образующийся в Примере 41. Выход: 16 мг (2,9%); ESI-MS: m/z 372,3 [M+H]⁺; ВЭЖХ (градиент 1): время удерживания (rt) 7,52 мин (96,8%); ¹H-ЯМР, 400 МГц, ДМСО d6: δ 3,88-3,89 (м, 3H), 3,98-4,15 (м, 4H), 4,26-4,36 (м, 2H), 7,42-7,70 (м, 4H), 7,72-8,17 (м, 6H), 9,32 (ушир.с, 1H), 10,66 (ушир.с, 1H).

Пример 43. 3-[[[2-(гидроксиамино)-2-оксо-этил]-[(3-метоксикарбонилфенил)метил] амино]метил]бензойная кислота

Побочный продукт, образующийся в Примере 41. Выход: 10 мг (1,8%); ESI-MS: m/z 373,3 [M+H]⁺; ВЭЖХ (градиент 1): время удерживания (rt) 8,69 мин (100%); ¹H-ЯМР, 400 МГц, ДМСО d6: δ 3,87 (с, 3H), 4,06-4,19 (м, 4H), 4,39-4,53 (м, 2H), 7,49-7,59 (м, 2H), 7,67-7,78 (м, 2H), 7,90-8,16 (м, 4H), 10,68 (с, 1H), 13,05 (ушир.с, 1H).

Пример 44. 3-[[[(1R)-3-карбокси-1-(гидроксикарбамоил)-пропил]амино]метил] бензойная кислота

Данное соединение синтезировали согласно описанным выше методам A и C с последующим снятием защиты посредством смеси ТФУК/ДХМ (1:1 об/об). Выход: 22 мг (8,7%); ESI-MS: m/z 297,2 [M+H]⁺; ВЭЖХ (градиент 1): время удерживания (rt) 3,63 мин (95,4%); ¹H-ЯМР, 400 МГц, ДМСО d6: δ 1,89-2,17 (м, 2H), 2,19-2,41(м, 2H), 3,59-3,68 (м, 1H), 3,98-4,29 (м, 2H), 7,54-7,62 (м, 1H), 7,67-7,74 (м, 1H), 7,97-8,02 (м, 1H), 8,10-8,16 (м, 1H), 9,03-9,86 (м, 3H), 11,25 (с, 1H), 11,89-13-56 (м, 2H).

Пример 45. 3-[[[(1S)-1-(карбоксиметил)-2-(гидроксиамино)-2-оксо-этил]амино] метил]бензойная кислота

Данное соединение синтезировали согласно описанным выше методам A и C с последующим снятием защиты посредством смеси ТФУК/ДХМ (1:1 об/об). Выход: 15 мг (3,1%); ESI-MS: m/z 283,1 [M+H]⁺; ВЭЖХ (градиент 1): время удерживания (rt) 3,36 мин (95,1%); ¹H-ЯМР, 400 МГц, ДМСО d6: δ 2,69-2,92 (м, 2H), 3,72-3,91 (м, 1H), 3,97-4,31 (м, 2H), 7,52-7,61 (м, 1H), 7,63-7,75 (м, 1H), 7,91-8,02 (м, 1H), 8,03-8,15 (м, 1H), 8,58-9,90 (м, 2H), 11,01-11,29 (м, 1H), 11,34-14,42 (м, 2H).

Пример 46. 3-[[[(1R)-1-(карбоксиметил)-2-(гидроксиамино)-2-оксо-этил]амино] метил]бензойная кислота

Данное соединение синтезировали согласно описанным выше методам A и C с последующим снятием защиты посредством смеси ТФУК/ДХМ (1:1 об/об). Выход: 3 мг (0,7%); ESI-MS: m/z 283,1 [M+H]⁺; ВЭЖХ (градиент 1): время удерживания (rt) 3,44 мин (93,8%); ¹H-ЯМР, 400 МГц, ДМСО d6: δ 2,73-2,90 (м, 2H), 3,78-3,88 (м, 1H), 4,01-4,20 (м, 2H), 7,53-7,61 (м, 1H), 7,64-7,73 (м, 1H), 7,93-8,01 (м, 1H), 8,06-8,14 (м, 1H), 9,05-9,88 (м, 2H), 11,15 (с, 1H), 11,61-14,38 (м, 2H).

Пример 47. 2-[бис[(2,4-дифтор-3-гидрокси-фенил)-метил]амино]этангидроксамовая кислота

Данное соединение синтезировали согласно описанным выше методам A и C. Финальное снятие защиты проводили с применением трибромида бора (6 экв.) в дихлорметане (10 мл). Выход: 102 мг (58,6%); ESI-MS: m/z 375,5 [M+H]⁺; ВЭЖХ (градиент 1): время удерживания (rt) 7,89 мин (100%); ¹H-ЯМР, 400 МГц, ДМСО d6: δ 3,13 (с, 2H), 4,12-4,28 (м, 4H), 6,87-7,12 (м, 4H), 9,25 (ушир.с, 1H), 10,14 (ушир.с, 2H), 10,45 (ушир.с, 1H).

Пример 48. 2-[бис[(3,5-дифтор-4-гидрокси-фенил)метил]-амино]этангидроксамовая кислота

Данное соединение синтезировали согласно описанным выше методам A и C. Финальное снятие защиты проводили с применением трибромида бора (6 экв.) в дихлорметане (10 мл). Выход: 105 мг (54%); ESI-MS: m/z 374,9 [M+H]⁺; ВЭЖХ (градиент 1): время удерживания (rt) 7,47 мин (98,6%); ¹H-ЯМР, 400 МГц, ДМСО d6: δ 3,15-3,23 (м, 2H), 3,78-3,99 (м, 4H), 7,12-7,23 (м, 4H), 10,30 (ушир.с, 2H), 10,68 (ушир.с,1H).

Пример 49. 2-[бис[(2,6-дифтор-3-гидрокси-фенил)метил]-амино]этангидроксамовая кислота

Данное соединение синтезировали согласно описанным выше методам A и C. Финальное снятие защиты проводили с применением трибромида бора (6 экв.) в дихлорметане (10 мл). Выход: 73 мг (40,8%); ESI-MS: m/z 375,4 [M+H]⁺; ВЭЖХ (градиент 1): время удерживания (rt) 9,52 мин (100%); ¹H-ЯМР, 400 МГц, ДМСО d6: δ 3,08 (с, 2H), 3,85-3,92 (м, 4H), 6,83-6,93 (м, 4H), 9,88 (ушир.с, 2H), 10,05 (ушир.с, 1H).

Пример 50. 2-[бис[(4-фтор-3-гидрокси-фенил)метил]-амино]этангидроксамовая кислота

Данное соединение синтезировали согласно описанным выше методам A и C. Финальное снятие защиты проводили с применением трибромида бора (6 экв.) в дихлорметане (10 мл). Выход: 59 мг (39,6%); ESI-MS: m/z 339,1 [M+H]⁺; ВЭЖХ (градиент 1): время удерживания (rt) 7,36 мин (100%); ¹H-ЯМР, 400 МГц, ДМСО d6: δ 3,28 (с, 2H), 3,72-4,11 (м, 4H), 6,87-6,98 (м, 2H), 7,04-7,24 (м, 4H), 8,70-9,58 (м, 1H), 9,80-10,27 (м, 2H), 10,53-10,84 (м, 1H).

Пример 51. 2-[бис[(2-фтор-3-гидрокси-фенил)метил]-амино]этангидроксамовая кислота

Данное соединение синтезировали согласно описанным выше методам A и C. Финальное снятие защиты проводили с применением трибромида бора (6 экв.) в дихлорметане (10 мл). Выход: 63 мг (75,7%); ESI-MS: m/z 339,1 [M+H]⁺; ВЭЖХ (градиент 1): время удерживания (rt) 6,83 мин (100%); ¹H-ЯМР, 400 МГц, ДМСО d6: δ 3,20 (с, 2H), 3,97 (с, 4H), 6,86-7,08 (м, 6H), 9,20-9,42 (м, 1H), 9,71-10,14 (м, 2H), 10,51 (ушир.с, 1H).

Пример 52. 2-[бис[(4-хлор-2-фтор-3-гидрокси-фенил)-метил]амино] этангидроксамовая кислота

Данное соединение синтезировали согласно описанным выше методам A и C. Финальное снятие защиты проводили с применением трибромида бора (6 экв.) в дихлорметане (10 мл). Выход: 62 мг (56,4%); ESI-MS: m/z 406,9 [M+H]⁺; ВЭЖХ (градиент 1): время удерживания (rt) 10,48 мин (100%); ¹H-ЯМР, 400 МГц, ДМСО d6: δ 3,10 (с, 2H), 3,85 (с, 4H), 6,95-6,98 (м, 2H), 7,16-7,24 (м, 2H), 10,10-10,60 (м, 3H).

Пример 53. 2-[(2,4-дифтор-3-гидрокси-фенил)метил-[(4-метоксифенил)метил] амино]этангидроксамовая кислота

Данное соединение синтезировали согласно описанным выше методам A, D и F. Финальное снятие защиты проводили с применением трибромида бора (6 экв.) в дихлорметане (10 мл). Выход: 66 мг (35,7%); ESI-MS: m/z 353,1 [M+H]⁺; ВЭЖХ (градиент 1): время удерживания (rt) 8,37 мин (100%); ¹H-ЯМР, 400 МГц, ДМСО d6: δ 3,32 (с, 2H), 3,77 (с, 3H), 4,07-4,10 (м, 3H), 4,35-4,41 (м, 1H), 6,96-7,14 (м, 4H), 7,39-7,49 (м, 2H), 9,05-9,60 (м, 1H), 10,26-10,41 (м, 1H), 10,62-10,76 (м, 1H)/

Пример 54. Этил 3-[[(3-этоксикарбонилфенил)метил-[2-(гидроксиамино)-2-оксо-этил]амино]метил]бензоат

Данное соединение синтезировали согласно описанным выше методам A и C. Выход: 50 мг (8%); ESI-MS: m/z 415,0 [M+H]⁺; ВЭЖХ (градиент 1): время удерживания (rt) 12,93 мин (100%); ¹H-ЯМР, 400 МГц, ДМСО d6: δ 1,32-1,35 (м, 6H), 3,18-3,40 (м, 2H), 3,90-4,08 (м, 4H), 4,30-4,36 (м, 4H), 7,48-7,56 (м, 2H), 7,64-7,75 (м, 2H), 7,86-8,10 (м, 4H), 10,59 (ушир.с, 1H).

Пример 55. 2-[бис[(4-цианофенил)метил]амино]-этангидроксамовая кислота

Данное соединение синтезировали согласно описанным выше методам A и C. Выход: 30 мг (9,3%); ESI-MS: m/z 321,0 [M+H]⁺; ВЭЖХ (градиент 1): время удерживания (rt) 12,83 мин (100%); ¹H-ЯМР, 400 МГц, ДМСО d6: δ 3,05 (с, 2H), 3,84 (с, 4H), 7,61-7,63 (м, 4H), 7,80-7,83 (м, 4H), 10,51 (ушир.с, 1H).

Пример 56. 2-[бис[(4-хлор-2-фтор-3-метокси-фенил)-метил]амино] этангидроксамовая кислота

Данное соединение синтезировали согласно описанным выше методам A и C. Выход: 33 мг (8,5%); ESI-MS: m/z 435,9 [M+H]⁺; ВЭЖХ (градиент 1): время удерживания (rt) 17,12 мин (99,3%); ¹H-ЯМР, 400 МГц, ДМСО d6: δ 3,11 (с, 2H), 3,83 (с, 4H), 3,85 (с, 6H), 7,24-7,30 (м, 4H), 10,43 (ушир.с, 1H).

Пример 57. 3-[бис[(4-цианофенил)метил]амино]-пропангидроксамовая кислота

Данное соединение синтезировали согласно описанным выше методам A и C. Выход: 65 мг (19,6%); ESI-MS: m/z 335,0 [M+H]⁺; ВЭЖХ (градиент 1): время удерживания (rt) 9,01 мин (100%); ¹H-ЯМР, 400 МГц, ДМСО d6: δ 2,30-2,34 (м, 2H), 2,80 (ушир.с, 2H), 3,85 (ушир.с, 4H), 7,59-7,61 (м, 4H), 7,83-7,85 (м, 4H), 10,49 (ушир.с, 1H).

Пример 58. 2-[бис[(2,4-дифтор-3-метокси-фенил)метил]-амино]этангидроксамовая кислота

Данное соединение синтезировали согласно описанным выше методам A и C. Выход: 26 мг (6,4%); ESI-MS: m/z 403,0 [M+H]⁺; ВЭЖХ (градиент 1): время удерживания (rt) 14,45 мин (100%); ¹H-ЯМР, 400 МГц, ДМСО d6: δ 3,18 (с, 2H), 3,82 (с, 4H), 3,89 (с, 6H), 7,08-7,13 (м, 2H), 7,20-7,25 (м, 2H), 10,43 (ушир.с, 1H).

Пример 59. 3-[[(3-этоксикарбонилфенил)метил-[2-(гидроксиамино)-2-оксо-этил]амино]метил]бензойная кислота

Данное соединение синтезировали согласно описанным выше методам A, D и F. Выход: 77 мг (16,3%); ESI-MS: m/z 387,0 [M+H]⁺; ВЭЖХ (градиент 1): время удерживания (rt) 9,84 мин (98,2%); ¹H-ЯМР, 400 МГц, ДМСО d6: δ 1,34 (т, 3H, ³J = 7,1 Гц), 3,26 (с, 2H), 3,84-4,24 (м, 4H), 4,33 (кв, 2H, ³J = 7,1 Гц), 7,49-7,63 (м, 2H), 7,67-7,83 (м, 2H), 7,90-8,15 (м, 4H), 9,28-9,55 (м, 1H), 10,52-10,66 (м, 1H), 13,04 (ушир.с, 1H).

Пример 60. 2-[бис[(4-хлор-2-фтор-фенил)метил]-амино]этангидроксамовая кислота

Данное соединение синтезировали согласно описанным выше методам A и C. Выход: 22 мг (5,8%); ESI-MS: m/z 375,9 [M+H]⁺; ВЭЖХ (градиент 1): время удерживания (rt) 17,44 мин (100%); ¹H-ЯМР, 400 МГц, ДМСО d6: δ 3,08 (с, 2H), 3,82 (с, 4H), 7,28 (дд, 2H, ⁴J = 1,7 Гц, ³J = 8,3 Гц), 7,38 (дд, 2H, ⁴J = 1,7 Гц, ³J = 10,0 Гц), 7,53-7,57 (м, 2H), 10,44 (ушир.с, 1H).

Пример 61. 2-[бис[(3,4,5-триметоксифенил)метил]-амино]-этангидроксамовая кислота

Данное соединение синтезировали согласно описанным выше методам A и C. Выход: 29 мг (6,4%); ESI-MS: m/z 450,9 [M+H]⁺; ВЭЖХ (градиент 1): время удерживания (rt) 10,17 мин (100%); ¹H-ЯМР, 400 МГц, ДМСО d6: δ 3,45 (ушир.с, 2H), 3,67 (с, 6H), 3,79 (с, 12H), 4,13-4,36 (м, 4H), 6,79-6,84 (м, 4H), 10,90 (ушир.с, 1H).

Пример 62. 3-[бис[(4-хлор-2-фтор-фенил)метил]-амино]пропангидроксамовая кислота

Данное соединение синтезировали согласно описанным выше методам A и C. Выход: 97 мг (24,9%); ESI-MS: m/z 389,0 [M+H]⁺; ВЭЖХ (градиент 1): время удерживания (rt) 11,59 мин (99,5%); ¹H-ЯМР, 400 МГц, ДМСО d6: δ 2,34 (с, 2H), 2,87 (ушир.с, 2H), 3,86-4,41 (м, 4H), 7,31-7,55 (м, 6H), 10,51 (ушир.с, 1H).

Пример 63. 2-[бис(2,3-дигидро-1,4-бензодиоксин-6-ил-метил)амино] этангидроксамовая кислота

Данное соединение синтезировали согласно описанным выше методам G и H. Выход: 35 мг (10,9%); ESI-MS: m/z 387,1 [M+H]⁺; ВЭЖХ (градиент 1): время удерживания (rt) 9,75 мин (97,7%); ¹H-ЯМР, 400 МГц, ДМСО d6: δ 3,41 (ушир.с, 2H), 4,12 (ушир.с, 4H), 4,26 (с, 8H), 6,89-6,99 (м, 4H), 7,04-7,09 (м, 2H), 10,88 (ушир.с, 1H).

Пример 64. 3-[бис[(2,4-дифтор-3-метокси-фенил)метил]-амино] пропангидроксамовая кислота

Данное соединение синтезировали согласно описанным выше методам A и C. Выход: 43 мг (10,2%); ESI-MS: m/z 416,9 [M+H]⁺; ВЭЖХ (градиент 1): время удерживания (rt) 10,85 мин (100%); ¹H-ЯМР, 400 МГц, ДМСО d6: δ 2,38 (ушир.с, 2H), 2,96 (ушир.с, 2H), 3,91-4,09 (м, 12H), 7,17-7,23 (м, 4H), 10,57 (ушир.с, 1H).

Пример 65. 3-[бис[(4-хлор-2-фтор-3-метокси-фенил)-метил]амино] пропангидроксамовая кислота

Данное соединение синтезировали согласно описанным выше методам A и C. Выход: 57 мг (12,8%); ESI-MS: m/z 449,0 [M+H]⁺; ВЭЖХ (градиент 1): время удерживания (rt) 12,52 мин (100%); ¹H-ЯМР, 400 МГц, ДМСО d6: δ 2,35 (ушир.с, 2H), 2,93 (ушир.с, 2H), 3,87-3,92 (м, 10H), 7,23-7,33 (м, 4H), 10,53 (ушир.с, 1H).

Пример 66. 3-[бис[(3,4,5-триметоксифенил)метил]амино]-пропангидроксамовая кислота

Данное соединение синтезировали согласно описанным выше методам A и C. Выход: 67 мг (14,4%); ESI-MS: m/z 465,2 [M+H]⁺; ВЭЖХ (градиент 1): время удерживания (rt) 9,57 мин (100%); ¹H-ЯМР, 400 МГц, ДМСО d6: δ 2,58 (ушир.с, 2H), 3,28 (ушир.с, 2H), 3,68 (с, 6H), 3,79 (с, 12H), 4,28-4,35 (м, 4H), 6,82 (с, 4H), 10,72 (ушир.с, 1H).

Пример 67. 2-(дибензиламино)этангидроксамовая кислота

Данное соединение синтезировали согласно описанным выше методам G и H. Выход: 15 мг (26%); ESI-MS: m/z 271,1 [M+H]⁺; ВЭЖХ (градиент 1): время удерживания (rt) 8,64 мин (100%); ¹H-ЯМР, 400 МГц, ДМСО d6: δ 3,32 (ушир.с, 2H), 4,10-4,40 (м, 4H), 7,37-7,56 (м, 10H), 10,74 (ушир.с, 1H).

Пример 68. 2-[бис[(7-метокси-1,3-бензодиоксол-5-ил)метил]амино] этангидроксамовая кислота

Данное соединение синтезировали согласно описанным выше методам G и H. Выход: 59 мг (36,5%); ESI-MS: m/z 419,1 [M+H]⁺; ВЭЖХ (градиент 1): время удерживания (rt) 10,29 мин (100%); ¹H-ЯМР, 400 МГц, ДМСО d6: δ 3,39 (ушир.с, 2H), 3,84 (с, 6H), 4,08 (ушир.с, 4H), 6,03-6,05 (м, 4H), 6,78-6,85 (м, 4H), 10,87 (ушир.с, 1H).

Пример 69. 3-[бис(2,3-дигидро-1,4-бензодиоксин-6-илметил)амино] пропангидроксамовая кислота

Данное соединение синтезировали согласно описанным выше методам G и H. Выход: 43 мг (43,7%); ESI-MS: m/z 401,2 [M+H]⁺; ВЭЖХ (градиент 1): время удерживания (rt) 9,92 мин (100%); ¹H-ЯМР, 400 МГц, ДМСО d6: δ 3,15 (ушир.с, 2H), 3,85 (ушир.с, 4H), 4,19-4,27 (м, 8H), 6,94-7,03 (м, 6H), 9,63 (ушир.с, 1H), 10,71 (ушир.с, 1H).

Пример 70. 3-[бис[(3-цианофенил)метил]амино]-пропангидроксамовая кислота

Данное соединение синтезировали согласно описанным выше методам A и C. Выход: 44 мг (13,2%); ESI-MS: m/z 335,2 [M+H]⁺; ВЭЖХ (градиент 1): время удерживания (rt) 9,92 мин (100%); ¹H-ЯМР, 400 МГц, ДМСО d6: δ 2,37 (ушир.с, 2H), 2,89 (ушир.с, 2H), 3,99-4,53 (м, 8H), 7,58-7,98 (м, 8H), 10,55 (ушир.с, 1H).

Пример 71. 3-(дибензиламино)пропангидроксамовая кислота

Данное соединение синтезировали согласно описанным выше методам G и H. Выход: 22 мг (31,2%); ESI-MS: m/z 285,1 [M+H]⁺; ВЭЖХ (градиент 1): время удерживания (rt) 8,77 мин (100%); ¹H-ЯМР, 400 МГц, ДМСО d6: δ 2,54-2,57 (т, 2H, ³J = 6,8 Гц), 3,27-3,35 (м, 2H), 4,21-4,30 (м, 4H), 7,45-7,48 (м, 10H), 9,97 (ушир.с, 1H).

Пример 72. 2-[бис[[3-(дифторметокси)фенил]метил]-амино]этангидроксамовая кислота

Данное соединение синтезировали согласно описанным выше методам A и C. Выход: 58 мг (10%); ESI-MS: m/z 403,1 [M+H]⁺; ВЭЖХ (градиент 1): время удерживания (rt) 13,68 мин (100%); ¹H-ЯМР, 400 МГц, ДМСО d6: δ 3,16 (с, 2H), 3,78-3,95 (м, 4H), 7,04-7,47 (м, 9H), 10,61 (ушир.с, 1H).

Пример 73. 2-[бис(3-пиридилметил)амино]этангидроксамовая кислота

Данное соединение синтезировали согласно описанным выше методам G и H. Выход: 30 мг (28,8%); ESI-MS: m/z 273,1 [M+H]⁺; ВЭЖХ (градиент 3): время удерживания (rt) 2,35 мин (100%); ¹H-ЯМР, 400 МГц, ДМСО d6: δ 3,16 (с, 2H), 3,97 (с, 4H), 7,82-7,85 (дд, 2H, ⁴J = 2,0 Гц, ³J = 5,9 Гц), 8,38-8,40 (м, 2H), 8,66-8,67 (м, 2H), 8,87 (с, 2H).

Пример 74. 3-[бис(1,3-бензодиоксол-5-илметил)амино]-пропангидроксамовая кислота

Данное соединение синтезировали согласно описанным выше методам A и C. Выход: 83 мг (22,3%); ESI-MS: m/z 373,2 [M+H]⁺; ВЭЖХ (градиент 1): время удерживания (rt) 9,49 мин (100%); ¹H-ЯМР, 400 МГц, ДМСО d6: δ 2,51-2,55 (т, 2H, ³J = 6,8 Гц), 3,26-3,39 (м, 2H), 4,16-4,19 (м, 4H), 6,01 (с, 4H), 6,88-6,96 (м, 6H), 9,90 (ушир.с, 1H).

Аналитические методы

ВЭЖХ: Аналитическая ВЭЖХ-система состояла из прибора Merck-Hitachi (модель LaChrom) с аналитической колонкой LUNA RP 18 (5 мкм) (длина: 125 мм, диаметр: 4 мм) и диодно-матричным детектором (DAD) с λ = 214 нм в качестве отчетной длины волны. Соединения анализировали с применением градиента при скорости потока 1 мл/мин; где элюент (A) представлял собой ацетонитрил, элюент (B) представлял собой воду, оба элюента содержат 0,04% (об/об) трифторуксусной кислоты; применялся один из следующих градиентных режимов:

Градиент 1. 0 мин - 5 мин -> 5% (A), 5 мин - 15 мин -> 5 - 60% (A), 15 мин - 20 мин 60 - 95% (A), 20 мин - 30 мин 95% (A).

Градиент 2. 0 мин - 15 мин 5 - 50 % (A), 15 мин - 20 мин -> 50 - 95 % (A), 20 мин - 23 мин 95 % (A).

Градиент 3. 0 мин - 5 мин 1 % (A), 5 мин - 20 мин -> 1 - 20 % (A), 20 мин - 30 мин 20 - 95 % (A), 30 мин - 34 мин 95% (A).

Чистоту всех полученных соединений определяли по проценту площади под кривой при длине волны 214 нм.

Масс-спектрометрия, ЯМР-спектроскопия: Масс-спектры с ионизацией электрораспылением (ESI) регистрировали на спектрометре SCIEX API 1200 (Perkin Elmer) или expressionCMS (Advion). ¹H ЯМР-спектры записывали на спектрометре Agilent DD2 400-МГц. Значения химических сдвигов (δ) приведены в миллионных долях (м.д.) относительно тетраметилсилана. Мультиплетность сигналов указана следующим образом: с (синглет), д (дублет), дд (дублет дублетов), т (триплет), м (мультиплет) и ушир. (уширенный сигнал).

Энзиматические тесты

Определение энзиматической активности основано на расщеплении пептидных субстратов с внутренним тушением флуоресценции. Типичный анализ с общим объемом 250 мкл в черном 96-луночном планшете состоял из 100 мкл буфера, 50 мкл энзима в финальной концентрации от 5e-8 M до 5e-9 M, 50 мкл субстрата (0,15 - 80 мкМ, в буфере, 0,5% ДМСО) и 50 мкл раствора ингибитора (в буфере, 1% ДМСО). В случае объема исследуемого раствора 125 мкл (черные 96-луночные планшеты) все объемы делили пополам. Энзиматическую активность ADAM измеряли в 364-луночных планшетах с общим объемом исследуемого раствора 60 мкл, состоящим из 20 мкл ингибитора, 20 мкл буфера, 10 мкл энзима и 10 мкл субстрата.

Значения Ki определяли, комбинируя 4 концентрации субстрата (5-40 мкM) с по меньшей мере 5 концентрациями ингибитора. Для определения значений IC50 исследовали влияние 12 концентраций ингибитора в диапазоне от 0 до 5e-5 M на активность энзима, в присутствии одной стандартной концентрации субстрата (10 мкМ). Определяли начальные скорости и переводили в единицы концентрации, применяя стандартную кривую, полученную после полной конверсии различных концентраций субстрата в условиях эксперимента. Все измерения проводили с использованием сканирующего спектрофотометра для прочтения планшетов (FLUOstar OPTIMA, BMG Labtech) при 30°C. Кинетические параметры определяли по меньшей мере в двух повторах в разные дни. Длина волны возбуждения/испускания составляла 340/420 нм. Кинетические данные обсчитывали с помощью программы GraFit (версия 7.0,3, Erithacus Software).

MMP активировали перед тестом посредством добавления APMA (ацетат п-аминофенилртути) согласно инструкциям производителя (R&D systems).

Таблица 1. Пептидные субстраты и условия анализа, применяемые для определения энзиматической активности

Энзим Субстрат Буфер Объем раствора hMeprin β Abz-YVAEAPK(Dnp)G-OH 40 мМ Tris pH 8,0 250 мкл hMeprin α Abz-YVADAPK(Dnp)G-OH 40 мМ HEPES pH 7,4 250 мкл hMMPs 2, 9 и 13
(R&D systems) Mca-PLGL-(DapDnp)-AR-NH₂ 50 мМ Tris, 2 мкM ZnCl₂, 150 мМ NaCl, pH 7,5 125 мкл hADAMs 10 и 17
(R&D systems) Abz-LANAVRSSSR-(DapDnp)-NH₂ 25 мМ Tris, 2 мкM ZnCl₂, 150 мМ NaCl, pH 9,0 60 мкл

(Abz = 2-аминобензоил; Dnp = 2,4-динитрофенил; Mca = 7-метоксикумарин; Dap = 2,3-диаминопропионовая кислота; hMeprin = человеческий меприн; hMMPs = человеческие матриксные металлопротеазы, hADAMs = человеческие ADAM-протеазы (дизинтегрин и металлопротеиназы).

Ингибирование меприна бета и альфа

Приведенные ниже соединения по настоящему изобретению были синтезированы с использованием описанных выше методик. Значения IC50 и K_i для подавления меприна β и α, определенные в ходе описанных выше энзиматических тестов, приведены ниже в Таблицах. IC50 - это средние значения IC50, определенные как описано выше, SD (IC50) - это стандартное отклонение средних значений IC50, Ki -это средние значения Ki, определенные как описано выше, и SD(Ki) - это стандартное отклонение средних значений Ki.

Ингибирование некоторых металлопротеаз

Остаточная активность энзима при 200 мкM ингибитора Номер соединения MMP2 MMP9 MMP13 ADAM10 ADAM17 Пример 2 64 74 78 93 76 Пример 6 68 85 94 87 60 Пример 7 98 92 79 90 71 Пример 10 74 84 64 94 64 Пример 11 10 24 7 84 52 Пример 18 93 85 59 82 60 Пример 19 50 85 70 98 59 Пример 20 69 88 78 95 57 Пример 21 110 96 91 91 64 Пример 22 62 85 60 91 59 Пример 31 82 79 50 96 71 Пример 47 67 94 102 99 82 Пример 48 87 87 99 92 76 Пример 52 41 81 93 97 82 Пример 53 75 73 63 91 59

--->

СПИСОК ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЕЙ

<110> Fraunhofer-Gesellschaft zur Foerderung der angewandten

Forschung e.V.

<120> Novel inhibitors of meprin alpha and beta

<130> 196236

<150> EP16165804.2

<151> 2016-04-18

<160> 4

<170> PatentIn version 3.5

<210> 1

<211> 8

<212> PRT

<213> Artificial Sequence

<220>

<223> Substrate

<220>

<221> Site

<222> (7)..(7)

<223> Xaa corresponds to Lys modified with Dnp (2,4-dinitrophenyl)

<400> 1

Tyr Val Ala Glu Ala Pro Xaa Gly

1 5

<210> 2

<211> 8

<212> PRT

<213> Artificial Sequence

<220>

<223> Substrate

<220>

<221> Site

<222> (7)..(7)

<223> Xaa corresponds to Lys modified with Dnp (2,4-dinitrophenyl)

<400> 2

Tyr Val Ala Asp Ala Pro Xaa Gly

1 5

<210> 3

<211> 7

<212> PRT

<213> Artificial Sequence

<220>

<223> Substrate

<220>

<221> Site

<222> (5)..(5)

<223> Xaa corresponds to DprDnp, i.e. Dpr (2,3-diaminopropionic acid) modified with Dnp (2,4-dinitrophenyl)

<400> 3

Pro Leu Gly Leu Xaa Ala Arg

1 5

<210> 4

<211> 11

<212> PRT

<213> Artificial Sequence

<220>

<223> Substrate

<220>

<221> Site

<222> (11)..(11)

<223> Xaa corresponds to DprDnp, i.e. Dpr (2,3-diaminopropionic

acid) modified with Dnp (2,4-dinitrophenyl)

<400> 4

Leu Ala Asn Ala Val Arg Ser Ser Ser Arg Xaa

1 5 10

<---

Изобретение относится к соединениям, имеющим приведенную ниже формулу I, или его фармацевтически приемлемым солям, которые являются ингибиторами меприна β и/или α. В формуле I n = 1–3; R¹ выбран из группы, состоящей из С_6-8арилметила и С_6-8гетероарилметила, каждый из которых необязательно может быть замещен 1-3 заместителями, независимо выбранными из группы, включающей -OH, -C(O)-NH₂, циано, -COOH, -C(O)-O-(C_1-4алкил), галоген, C_1-6алкокси, фтор(C_1-6алкокси), где два соседних алкоксизаместителя могут быть соединены с образованием части 5-8-членного гетероцикла, где в указанном 5-8-членном гетероцикле и указанном C_6-8-гетероариле 1, 2 или 3 кольцевых атома заменены гетероатомами, выбранными из N, S и O; R³ и R⁴ представляют собой H; R² выбран из группы, состоящей из С_6-8арила, С_6-8гетероарила, где указанный С_6-8арил дополнительно замещен 1-3 заместителями, независимо выбранными из группы, включающей -OH, -C(O)-NH₂, циано, -COOH, -C(O)-O-(C_1-4алкил), галоген, C_1-6алкокси, фтор(C_1-6алкокси), С_6-8арил, где два соседних алкоксизаместителя могут быть соединены с образованием части 5-8-членного гетероцикла и где в указанном C_6-8-гетероариле 1, 2 или 3 кольцевых атома заменены гетероатомами, выбранными из N, S и O; X представляет собой -CH₂-. Изобретение относится также к фармацевтической композиции и способу лечения или профилактики заболевания или патологического состояния, опосредуемого ингибированием меприна β и/или α, с использованием указанных соединений. 3 н. и 8 з.п. ф-лы, 3 табл., 74 пр.

1. Соединение, имеющее приведенную ниже формулу I, или его фармацевтически приемлемая соль:

,

где n = 1–3, предпочтительно 1 или 2;

R¹ выбран из группы, состоящей из С_6-8арилметила и С_6-8гетероарилметила, каждый из которых необязательно может быть замещен 1-3 заместителями, независимо выбранными из группы, включающей -OH, -C(O)-NH₂, циано, -COOH, -C(O)-O-(C_1-4алкил), галоген, C_1-6алкокси, фтор(C_1-6алкокси), где два соседних алкоксизаместителя могут быть соединены с образованием части 5-8-членного гетероцикла, где в указанном 5-8-членном гетероцикле и указанном C_6-8-гетероариле 1, 2 или 3 кольцевых атома заменены гетероатомами, выбранными из N, S и O;

R³ и R⁴ представляют собой H;

R² выбран из группы, состоящей из С_6-8арила, С_6-8гетероарила, где указанный С_6-8арил дополнительно замещен 1-3 заместителями, независимо выбранными из группы, включающей -OH, -C(O)-NH₂, циано, -COOH, -C(O)-O-(C_1-4алкил), галоген, C_1-6алкокси, фтор(C_1-6алкокси), С_6-8арил, где два соседних алкоксизаместителя могут быть соединены с образованием части 5-8-членного гетероцикла и где в указанном C_6-8-гетероариле 1, 2 или 3 кольцевых атома заменены гетероатомами, выбранными из N, S и O;

и X представляет собой -CH₂-.

2. Соединение по п. 1, где R¹ имеет приведенную ниже формулу

,

где

(i) по меньшей мере один из R_P и R_m, предпочтительно R_m, представляет собой функциональную группу, имеющую кислотный атом водорода, и необязательно выбран из -COOH, -C(O)-NH₂, и –OH; или

(ii) R_P и R_m представляют собой С_1-2алкокси-группы, которые соединены между собой, формируя часть 5- или 6-членного гетероцикла,

где R¹ необязательно может иметь дополнительные заместители.

3. Соединение по п. 2, где R¹ выбран из группы, состоящей из (1,3-бензодиоксол-5-ил)метила, (3-карбоксифенил)метила и (4-карбоксифенил)метила; предпочтительно (3-карбоксифенил)метила.

4. Соединение по любому из пп. 1-3, где R² выбран из группы, состоящей из арила, алкоксиарила, карбоксиарила, цианоарила, галогенарила и гидроксиарила, каждый из которых необязательно может иметь заместители.

5. Соединение по любому из пп. 1-4, где R² имеет приведенную ниже формулу

,

где

(i) по меньшей мере один из R_P и R_m, предпочтительно R_m, представляет собой функциональную группу, имеющую кислотный атом водорода, и необязательно выбран из -COOH, -C(O)-NH₂, и –OH; или

(ii) R_P и R_m представляют собой С_1-2алкокси-группы, которые соединены между собой, формируя часть 5-6-членного гетероцикла; или

(iii) по меньшей мере один из R_P и R_m выбран из группы, состоящей из C_1–6алкокси-группы, фтор(C_1–6алкокси), фтора, хлора, брома, иода и циано-группы;

где R² необязательно может иметь дополнительные заместители.

6. Соединение по любому из пп. 1-5, где R² выбран из группы, состоящей из 1,3-бензодиоксол-5-ила, 3-карбоксифенила, 4-карбоксифенила, 3-карбокси-4-метоксифенила, 3,5-дихлор-4-гидроксифенила, 4-хлорфенила, 4-цианофенила, 4-фторфенила, 2,6-дифтор-4-метоксифенила, 3-фтор-4-метоксифенила, 3-метоксифенила, 4-метоксифенила, 4-хлорфенила и 4-метилфенила.

7. Соединение по любому из пп. 1-6, где

(i) R¹ представляет собой (3-карбоксифенил)метил и R³ представляет собой H; или

(ii) R² представляет собой 3-карбоксифенил и R³ представляет собой H.

8. Соединение по п. 1, которое

(i) выбрано из группы, состоящей из:

или

(ii) выбрано из группы, состоящей из:

9. Фармацевтическая композиция, содержащая терапевтически эффективное количество соединения по любому из пп. 1-8 или его фармацевтически приемлемую соль и фармацевтически приемлемое вспомогательное вещество, где указанное соединение по любому из пп. 1-8 является ингибитором меприна β и/или ингибитором меприна α.

10. Соединение по любому из пп. 1-8 или фармацевтическая композиция по п. 9 для применения в способе лечения или профилактики заболевания, опосредуемого ингибированием меприна β и/или α, где заболевание выбрано из группы, состоящей из болезни Альцгеймера, нефрита, повреждения почки, ишемии почки, ишемического острого тубулярного некроза, острой почечной недостаточности, воспаления мочевого пузыря, воспалительного заболевания кишечника (ВЗК), болезни Крона, язвенного колита, хронического воспаления, колита, фиброза, фиброзных состояний, келоидов, легочной гипертензии, интерстициального заболевания легкого или рака, в особенности рака толстой и прямой кишок, где указанный способ включает введение терапевтически эффективного количества соединения по любому из пп. 1-8 или фармацевтической композиции по п. 9 субъекту, нуждающемуся в этом.

11. Способ лечения или профилактики заболевания или патологического состояния, опосредуемого ингибированием меприна β и/или α, где указанное заболевание или патологическое состояние выбрано из группы, состоящей из болезни Альцгеймера, нефрита, повреждения почки, ишемии почки, ишемического острого тубулярного некроза, острой почечной недостаточности, воспаления мочевого пузыря, воспалительного заболевания кишечника (ВЗК), болезни Крона, язвенного колита, хронического воспаления, колита, фиброза, фиброзных состояний, келоидов, легочной гипертензии, интерстициального заболевания легкого и рака, в особенности рака толстой и прямой кишок, включающий введение терапевтически эффективного количества соединения по любому из пп. 1-8 или фармацевтической композиции по п. 9 субъекту, нуждающемуся в этом.