Способ прогнозирования риска ненаследственной дисплазии соединительной ткани у детей Российский патент 2021 года по МПК G01N33/49 

Изобретение относится к медицине, а именно к педиатрии и может быть использовано для оценки риска развития ненаследственной дисплазии соединительной ткани (ДСТ). Одной из отличительных сторон современной медицины вообще и педиатрии, в частности, является стремление к раннему выявлению и прогнозированию развития патологических состояний, чтобы предпринять меры профилактики их возникновения и прогрессирования.

Известно, что ДСТ - это гетерогенная группа заболеваний мульти-факторной природы с полигенным наследованием и/или результатом воздействия неблагоприятных факторов. Основу структуры соединительной ткани составляют экстрацеллюлярный матрикс и клеточные элементы. Внеклеточный матрикс состоит из фибриллярных белков, включающих коллагены различных типов, эластин, целый ряд адгезивных белков: витронектин, фибронектина, ламинина, тромбоспондина, протогликанов и др.

Ненаследственная форма ДСТ (НДСТ) выставляется тогда, когда клинические признаки дисплазии не укладываются ни в одно из наследственных моногенных заболеваний (Проект Российских рекомендаций: «Наследственные и многофакторные нарушения соединительной ткани у детей», 2015).

Актуальность изучения проблемы дисплазии соединительной ткани ненаследственного характера обусловлена высокой частотой встречаемости ее у детей, неоднозначной интерпретацией проявлений внешних фенотипических и внутренних (висцеральных) признаков дисплазии, малой изученностью аспектов прогнозирования. Учитывая широкий диапазон проявлений недифференцированных форм дисплазии соединительной ткани, прогрессирующий характер течения, полиорганность поражения и нередко неблагоприятный исход данной патологии, важным остается вопрос о прогнозировании течения заболевания и риска возможных осложнений.

Известны различные способы прогнозирования ДСТ, заключающиеся в обнаружении внешних фенотипических признаков и их количественной оце-ки: патент на изобретение №2558987, патент на изобретение № 2543166, патент на изобретение № 2461833, патент № 2578961 («Способ оценки риска развития недифференцированной дисплазии соединительной ткани»).

Недостатки этих способов.

Общим недостатком этих способов является, то, что отдельно взятые фенотипические признаки не являются строго специфичными для ДСТ и нуждаются в дополнительной клинической оценке.

В патенте на изобретение № 2665387 диагностика дисплазии соединительной ткани проводится с использованием уровней адреналина, АДФ, коллагена и рентгенографических признаков. Он характеризуется низкой информативность прогнозирования, отсутствием стандартизации в объективизации выявляемых биохимических признаков, наличием большего количество необходимых исследований.

В качестве прототипа принято исследование «Особенности состояния здоровья детей с признаками недифференцированной дисплазии соедини-тельной ткани (комплексное клинико-социальное исследование)» Сидоров Г.А. (автореф. канд.мед. наук ,2011).

В данной работе установлено, что по мере нарастания выраженности диспластических процессов, особенно при НДСТ III степени происходит изменение уровней кортизола, магния, секреторного иммуноглобулина А и лактатдегидрогеназы ниже референтных значений.

В этом исследовании используются большое количество биохимических показателей. Это затрудняет применение его в практике. Используемые биохимические маркеры адаптационных процессов (уровни кортизола, магния, лактатдегидрогеназы) и иммуноглобулина А не могут отражать объективно развитие диспластических процессов, происходящих при ДСТ в висцеральных органов (сердца и почек и др.). Исследование иммуноглобулина А определяет часть иммунной дисфункции и не позволяет оценить степень тяжести ДСТ.

Данный способ является недостаточно точным, т.к. не имеет убедительных сведений о корреляции уровней биохимических показателей, свидетельствующих о нарушении метаболизма соединительной ткани, и степени тяжести синдрома ДСТ.

Техническим результатом предлагаемого нами способа является создание точного способа прогнозирования риска дисплазии соединительной ткани, не требующего выполнения большого количества длительных и дорогостоящих диагностических исследований.

Технический результат достигается тем, что проводится одновременное определение уровней эластина и ламинина в сыворотке крови у детей, и при изменениях эластина от 5,2 нг/мл до 9,2 нг/мл и ламинина от 23,4 пг/ мл до 42,0 пг/мл прогнозируют низкий риск развития ненаследственной дисплазии; а при уровнях эластина выше 9,3 нг/мл и ламинина выше 42,1 пг/ мл прогнозируют высокий риск развития дисплазии у детей.

Уровни эластина меньше 5,2 нг/мл и ламинина меньше 23,4 пг/мл встречаются в единичных случаях и не могут использоваться для прогнозирования. При следующих уровнях изучаемых белков: эластина 9,3 нг/мл и ламинина 42,1 пг/мл появляется возможность прогнозирования, которая может сохраняться при нарастании этих значений. Это обуславливает ведение этих пограничных величин.

Преимуществом данного способа, основанного на одновременном определении уровней эластина и ламинина сыворотки крови, является высокая чувствительность и специфичность, а также широкие прогностический диапазон при ДСТ у детей.

Признаки дисплазии можно увидеть в детском возрасте (отчетливые признаки появляются к 5 годам) и в дальнейшем с возрастом признаки ДСТ могут нарастать или регрессировать. В то же время, при оптимальной реабилитационной терапии можно предотвратить ее прогрессирование. В патогенезе ДСТ ведущим являются нарушения синтеза и/или распад белков внеклеточного матрикса. Определенный интерес при этом представляют неколлагеновые белки (ламинин, эластин и др.)

Эластин - основной компонент эластических волокон. Он составляет приблизительно 50% сухого веса артерий. В отличие от коллагенов эластин представлен только одним геном - ELN на хромосоме 7. Мутации данного гена приводят к стенозу аорты и других артерий. Изменения уровней эластина могут играть важную роль в развитии диспластических процессах в почках.

Ламинин наиболее распространенный неколлагеновый гликопротеин базальных мембран, состоящий из 3-х полипептидных цепей А, В₁ и В₂.Он может взаимодействовать со всеми структурными компонентами базальных мембран, включая коллаген IV типа, фиброэластин и др. Главная функция ламинина способность его связывать клетки и модулировать их. Он может влиять на ритм, дифференцировку и подвижность клеток, на состояние соединительнотканных структур паренхиматозных органов и вероятно почек.

Эластин и ламинин сравнительно малоисследованные белки, которые регулируют взаимоотношение между эластиновой сердцевиной и микрофибриллами, а также позволяют осуществлять тонкую подстройку эластичности волокон ДСТ, Использование определения дисбаланса уровней ламинина и эластина может значительно улучшить прогностические возможности при ДСТ у детей.

Положительный эффект предлагаемого способа достигается ис-пользованием в прогнозировании одновременного определения двух не-коллагеновых белков ДСТ: эластина и ламинина, активно участвующих в метаболизме диспластических процессов соединительной ткани. Иссле-дование этих белков проводится с применением высокочувствительного метода. Точность предлагаемого способа составляет 95%.

Предложенный способ успешно апробирован у 27 детей. Ниже приводятся результаты апробации в отделениях детской уронефрологии и детской кардиологии Областной детской клинической больницы им. Н.Н. Силищевой г. Астрахани.

Клинический пример №1

Пациентка К. рождена от 1-ой беременности, первых срочных родов. Роды срочные. На 1-2 годах росла и развивалась по возрасту, прививки по календарю. В дальнейшем, в возрасте 4-х лет не выявлено диспластических изменений со стороны различных органов и систем.

Для определения ДСТ использовались критерии, предложенные российскими экспертами (2009,2015) на основании международных рекомендаций по диагностике ДСТ. Обращалось внимание на различные органы и системы: костно-суставную, мышечную, состояние кожи, гипермобильности суставов и др.

У данного ребенка обнаружено два признака стигматизации. При инструментальном обследовании не выявлено висцеральных признаков ДСТ. Для прогнозирования риска развития ненаследственной ДСТ проведено определение уровней эластина и ламинина в сыворотке крови с помощью ИФА с использованием наборов для определения количественного уровня эластина (серия HBE337Hu №4DF58C0861) и ламинина (серия HBE082Hu №7B578DDCCD) компании «Cloud-Clone Corp». Выявлены следующие значения изучаемых показателей: эластин 5,4 нг /мл и ламинина 23,5 пг/мл , что позволило прогнозировать низкий риск развития ДСТ. В динамике через 2 года это было подтверждено отсутствием фенотипических и висцеральных признаков ДСТ.

Клинический пример №2.

У ребенка С. в возрасте 2,5 лет обнаружено два признака стигма-тизации, умеренно выраженные проявления гипермобильности суставов.

При инструментальном обследовании сердца выявлен пролапс митрального клапана с регургитацией 1-ой степени. Наличие этих фенотипических и висцеральных признаков не позволяло с уверенностью прогнозировать ДСТ почек. В связи с этим проведено определение уровней эластина и ламинина в сыворотке крови как указано в примере №1. Выявленное изменение уровней изучаемых показателей (9,1 нг/мл; 41,5 пг/мл соответственно) позволило прогнозировать низкий риск развития ДСТ. В дальнейшем это было подвержено данными клинического наблюдения и данных инструментальных исследований в динамике через 1 год. У ребенка сохранялась прежняя степень регургитации пролапса митрального клапана.

Клинический пример №3

Девочка Л. рождена от 1-ой беременности, первых срочных родов. Беременность у матери протекала на фоне анемии, хронического пиелонефрита, угрозы прерывания. Роды срочные, быстрые. С рождения обнаружено три признака стигматизации на лице и кистях рук. На 1-2 годах росла и развивалась по возрасту, прививки по календарю. В дальнейшем в возрасте 3-х лет, при инструментальном обследовании сердца выявлен пролапс митрального клапана с регургитацией 1-ой. Наличие этих фенотипических и висцеральных признаков не позволяло с высокой точностью прогнозировать риск развития ненаследственной ДСТ. В связи с этим, проведено определение уровней эластина и ламинина в сыворотке крови как указано в примере №1. Их уровни оказались повышенными (9,4 нг/ мл; 42,5 пг/мл соответственно), что позволило прогнозировать высокий риск развития ДСТ. В дальнейшем, в динамике через 2 года этот прогноз подтвержден прогрессированием развития пролапса митрального клапана и наличием нефроптоза 1-2 степени.

Таким образом, заявленный способ прогнозирования риска дисплазии соединительной ткани у детей является более точным, чем способ-прототип. Предлагаемый способ может быть использован в клинической практике, что обеспечит раннее, своевременное прогнозирование риска ненаследственной дисплазии соединительной ткани.

Применение этого способа поможет грамотно подходить к прогнозированию риска развития ненаследственной дисплазии соединительной ткани и предотвращать негативное влияние её на организм ребенка. Это позволит получить значительный экономический эффект (снижение заболеваемости на 30-35%).

Изобретение относится к медицине, а именно к педиатрии, и может быть использовано для прогнозирования риска развития ненаследственной дисплазии соединительной ткани (ДСТ). Способ включает исследование полученных образцов сыворотки крови методом иммуноферментного анализа. Определяют количественные значения уровней эластина и ламинина у детей, и при уровнях эластина от 5,2 нг/мл до 9,2 нг/мл и ламинина от 23,4 пг/мл до 42,0 пг/мл прогнозируют низкий риск развития ненаследственной дисплазии соединительной ткани у детей; при уровнях эластина выше 9,3 нг/мл и ламинина выше 42,1 пг/мл прогнозируют высокий риск развития ненаследственной дисплазии соединительной ткани у детей. Использование изобретения позволяет своевременно прогнозировать риск ненаследственной дисплазии соединительной ткани за счет повышения точности исследования. 3 пр.

Способ прогнозирования риска ненаследственной дисплазии соединительной ткани у детей путем биохимического исследования крови, отличающийся тем, что исследуют полученные образцы сыворотки крови методом иммуноферментного анализа и определяют количественные значения уровней эластина и ламинина у детей, и при уровнях эластина от 5,2 до 9,2 нг/мл и ламинина от 23,4 до 42,0 пг/мл прогнозируют низкий риск развития ненаследственной дисплазии соединительной ткани у детей, при уровнях эластина выше 9,3 нг/мл и ламинина выше 42,1 пг/мл прогнозируют высокий риск развития ненаследственной дисплазии соединительной ткани у детей.