ФАРМАЦЕВТИЧЕСКАЯ КОМПОЗИЦИЯ ДЛЯ УСИЛЕНИЯ ПРОТИВООПУХОЛЕВОГО ЭФФЕКТА ИНГИБИТОРА ИММУННОЙ КОНТРОЛЬНОЙ ТОЧКИ Российский патент 2021 года по МПК A61K31/197 A61K33/26 A61K39/395 A61P35/00 

Область техники, к которой относится изобретение

Настоящее изобретение относится к новому применению 5-аминолевулиновой кислоты (далее также называемой просто «АЛК») или ее производного, в частности, к применению 5-аминолевулиновой кислоты или ее производного для усиления противоопухолевого эффекта ингибитора иммунной контрольной точки.

Предшествующий уровень техники

Опухоли, возникшие в организме человека, удаляются с помощью врожденного иммунного механизма, прежде чем они пролиферируют до такой степени, что оказывают вредное воздействие на организм человека. Следующее явление известно в качестве этого механизма. В частности, белок (опухолевый антиген), специфичный для раковых клеток, связывается с белком, называемым молекулой I класса МНС (главного комплекса гистосовместимости), в раковых клетках и презентируется на поверхности клетки. Когда этот белок I класса МНС и опухолевый антиген связываются с белком TCR (Т-клеточного рецептора) на поверхности Т-клеток, ответственных за иммунитет, Т-клетка распознает эту клетку как раковую. Т-клетка, которая распознала раковую клетку, инициирует пролиферацию и повреждает раковую клетку, презентирующую опухолевый антиген.

Однако известно, что когда раковая клетка экспрессирует мембранный белок, называемый PD-L1, вместе с белком I класса МНС, то при связывании с мембранным белком, называемым PD-1, который экспрессируется в Т-клетке, активация вышеуказанной Т-клетки подавляется. Поскольку эта раковая клетка, которая приобрела механизм ускользания от иммунного ответа, который в норме служит для подавления избыточного иммунитета, продолжает пролиферировать, ингибирование связывания между PD-L1 и PD-1 было избрано в качестве мишени для нового противоракового агента (Патентная литература 1). Следует отметить, что PD-L1 также экспрессируется в «профессиональных антиген-презентирующих клетках», таких как дендритные клетки, которые специализируются на презентации антигенов Т-клеткам. В последние годы были разработаны и применены в качестве противораковых агентов анти-PD-1-антитела ниволумаб (Opdivo®) и пембролизумаб (Keytruda®); кроме того, также были разработаны и применены на практике анти-PD-L1-антитела атезолизумаб, дурвалумаб, авелумаб (Bavencio™) и тому подобные.

С другой стороны, при презентации антигена раковыми клетками (или профессиональными антиген-презентирующими клетками) Т-клеткам также известны другие механизмы подавления иммунной реакции (иммунные контрольные точки), представителем которых является комбинация молекулы семейства B7 с антиген-презентирующей стороны и CTLA4 со стороны Т-клеток, а также фармацевтические препараты, такие как ипилимумаб (Yervoy®) и тремелимумаб. Кроме того, известны CD137L-CD137, MHC-LAG-3/KIR, CD48-CD244, GAL9-TIM3, HVEM-BTLA/CD160, CD40L-CD40, OX40L-OX40, GITRL-GITR и тому подобные (во всех них первая часть является молекулой с антиген-презентирующей стороны) (Непатентная литература 1 и 2).

Недавно появилось сообщение о том, что противоопухолевый эффект анти-PD-1 антитела связан с генерацией активного кислорода в Т-клетках, и что указанный противоопухолевый эффект усиливается путем внутриклеточной передачи сигнала и активации митохондрий путем добавления генератора активного кислорода в низкой концентрации. Кроме того, в то же время сообщается, что противоопухолевый эффект анти-PD-1 антитела также усиливается в фармацевтических препаратах, которые имитируют эту внутриклеточную трансдукцию сигнала (Непатентная литература 3).

Авторы настоящего изобретения обнаружили, что АЛК или ее производное является эффективным для терапии рака благодаря предполагаемому механизму, который усиливает гем или цитохром в митохондриях раковой клетки или клетки, почти ставшей раковой клеткой, имеющей аномалию в ядре, улучшает митохондриальную активность, такую как активность цепи переноса электронов и цикла трикарбоновых кислот, и индуцирует системы Bax и Bak к апоптозу, зависимому от каспазы IX, когда имеется нарушение в ядре, которое невозможно восстановить (Патентная литература 2).

С другой стороны, АЛК вместе с произвольным натрия-железа цитратом (НЖЦ) образует гем в организме, и этот гем расщепляется ферментом, называемым гемоксигеназой-1 (ГО-1), с превращением в билирубин и монооксид углерода (Непатентная литература 4). Известно, что этот билирубин и монооксид углерода обладают высокой антиоксидантной активностью и могут напрямую/косвенно уничтожать активные формы кислорода (АФК) (Непатентная литература 5).

Более того, известно, что АЛК вместе с произвольным НЖЦ обладает эффектом индукции иммунологической толерантности, который подавляет иммунитет. Предполагается, что этот механизм заключается в том, что в дендритной клетке, которая представляет собой антиген-презентирующую клетку, вышеописанная ГО-1 (или билирубин и монооксид углерода) превращает (дифференцирует) дендритную клетку в клетку, называемую толерогенной дендритной клеткой. Известно, что толерогенная клетка проявляет высокую экспрессию PD-L1 и осуществляет специфическую иммунологическую толерантность (иммуносупрессию) к антигену, презентированному на Т-клетке, и фактически наблюдается увеличение мРНК PD-L1 в клетке, которая распознается как дендритная клетка, при применении АЛК и НЖЦ (Непатентная литература 6).

Список цитирования

[Патентная литература 1] Патент JP № 5885764

[Патентная литература 2] Патент JP № 5611548

[Непатентная литература 1] Nat Rev Cancer. 2012 Mar 22; 12(4): 252-64.

[Непатентная литература 2] Ann Transl Med. 2015 Oct; 3(18): 267.

[Непатентная литература 3] Proc Natl Acad Sci USA. 2017 Jan 31; 114(5): E761-E770.

[Непатентная литература 4] Am J Physiol Renal Physiol. 2013 Oct 15; 305(8)F1149-57.

[Непатентная литература 5] Am J Physiol Cell Physiol. 2015 Apr 15; 308(8)C665-72.

[Непатентная литература 6] J Heart Lung Transplant. 2015 Feb; 34(2): 254-63.

Изложение сущности изобретения

Проблемы, решаемые изобретением

Как описано выше, были созданы агенты для лечения рака, которые содержат анти-PD-1 антитело или анти-PD-L1 антитело в качестве активного ингредиента, и кроме того, привлек внимание способ комбинированной терапии этими агентами для лечения рака и ранее существовавшими фармацевтическими препаратами. Фактически, было запланировано клиническое испытание комбинации фармацевтических препаратов, которые имитируют вышеуказанную сигнальную трансдукцию (лекарственного средства для снижения уровня липидов безафибрата, активирующего фактор транскрипции PPAR (рецепторов, активируемых пролифератором пероксисом), и анти-PD-1 антитела. В частности, существует потребность в поиске или создании лекарственного средства или фармацевтической композиции, которые имеют высокую корреляцию с ингибиторами иммунных контрольных точек, такими как анти-PD-1 антитело или анти-PD-L1 антитело, и которые могут усиливать противоопухолевый эффект ингибитора иммунной контрольной точки.

Соответственно, целью настоящего изобретения является обеспечение фармацевтической композиции для усиления противоопухолевого эффекта ингибиторов иммунных контрольных точек, таких как анти-PD-1 антитело или анти-PD-L1 антитело.

Средства для решения проблем

В результате повторного обширного исследования для решения вышеуказанной проблемы авторы настоящего изобретения обнаружили, что 5-аминолевулиновая кислота (АЛК) может значительно усиливать противоопухолевый эффект ингибитора иммунной контрольной точки. Как указано выше, хотя сама АЛК может быть полезна для терапии рака, принимая во внимание высокое антиоксидантное действие билирубина и монооксида углерода (СО) в результате введения АЛК или эффект иммунологической толерантности АЛК, когда АЛК применяли во время терапии рака ингибиторами иммунных контрольных точек, такими как анти-PD-1 антитело или анти-PD-L1 антитело, полагали, что эффект ингибитора иммунной контрольной точки скорее будет нейтрализован из-за того, что АЛК вызывает увеличение экспрессирующих PD-L1 дендритных клеток, или из-за удаления активного кислорода в Т-клетках билирубином и СО, и, таким образом, этот результат был неожиданным.

В частности, настоящее изобретение охватывает следующие характеристики:

[1] Фармацевтическая композиция для усиления противоопухолевого эффекта ингибитора иммунной контрольной точки, включающая соединение, показанное следующей формулой (I):

[Химическая формула 1]

(где R¹ представляет собой атом водорода или ацильную группу, а R² представляет собой атом водорода, линейную или разветвленную алкильную группу, циклоалкильную группу, арильную группу или аралкильную группу),

или его соль или сложный эфир.

[2] Фармацевтическая композиция по [1], где указанный ингибитор иммунной контрольной точки представляет собой по меньшей мере один, выбранный из группы, состоящей из анти-PD-1 антитела, анти-PD-L1 антитела, анти-CTLA4 антитела, анти-B7 антитела, анти-C27 антитела, анти-KIR антитела, ингибитора IDO (индоламин-2,3-диоксигеназы), анти-CD137 антитела и анти-TIM3 антитела.

[3] Фармацевтическая композиция по [2], где ингибитор иммунной контрольной точки представляет собой анти-PD-L1 антитело или анти-PD-1 антитело.

[4] Фармацевтическая композиция по [1], в которой указанный ингибитор иммунной контрольной точки выбран из группы, состоящей из атезолизумаба, дурвалумаба, авелумаба, ниволумаба, пембролизумаба, пидилизумаба, BMS-936559, ипилимумаба, тремелимумаба, эноблитузумаба, варлилумаба, лирилумаба, эпакадостата, утомилумаба, урелумаба и TSR-022.

[5] Фармацевтическая композиция по любому из [1] - [4], которую применяют одновременно или в разное время с ингибитором иммунной контрольной точки.

[6] Фармацевтическая композиция по любому из [1] - [6], где:

R¹ выбран из группы, состоящей из атома водорода, алканоильной группы, имеющей 1-8 атомов углерода, и ароильной группы, имеющей 7-14 атомов углерода, и

R² выбран из группы, состоящей из атома водорода, линейной или разветвленной алкильной группы, имеющей 1-8 атомов углерода, циклоалкильной группы, имеющей 3-8 атомов углерода, арильной группы, имеющей 6-14 атомов углерода, и аралкильной группы, имеющей 7-15 атомов углерода.

[7] Фармацевтическая композиция по любому из [1]-[7], где R¹ и R² представляют собой атомы водорода.

[8] Фармацевтическая композиция по любому из [1]-[8], которая дополнительно содержит один, или два, или более типов металлсодержащих соединений.

[9] Фармацевтическая композиция по [8], где металлсодержащее соединение представляет собой соединение, содержащее железо, магний, цинк, никель, ванадий, медь, хром, молибден или кобальт.

[10] Фармацевтическая композиция по [9], где металлсодержащее соединение представляет собой соединение, содержащее железо, магний или цинк.

[11] Фармацевтическая композиция по [10], где металлсодержащее соединение представляет собой соединение, содержащее железо.

[12] Фармацевтическая композиция по [11], где указанное соединение, содержащее железо, представляет собой натрия-железа (II) цитрат.

[13] Применение соединения, показанного следующей формулой (I):

[Химическая формула 2]

(где R¹ представляет собой атом водорода или ацильную группу, а R² представляет собой атом водорода, линейную или разветвленную алкильную группу, циклоалкильную группу, арильную группу или аралкильную группу);

или его соли или сложного эфира при получении лекарственного средства для усиления противоопухолевого эффекта ингибитора иммунной контрольной точки.

[14] Способ усиления противоопухолевого эффекта ингибитора иммунной контрольной точки, включающий применение соединения, представленного следующей формулой (I):

[Химическая формула 3]

(где R¹ представляет собой атом водорода или ацильную группу, а R² представляет собой атом водорода, линейную или разветвленную алкильную группу, циклоалкильную группу, арильную группу или аралкильную группу);

или его соли или сложного эфира у субъекта, у которого применяли или применяют ингибитор иммунной контрольной точки.

Следует отметить, что изобретение любой комбинации одной или нескольких характеристик настоящего изобретения, описанных выше, также охватывается объемом настоящего изобретения.

Эффекты изобретения

Согласно настоящему изобретению, предложена фармацевтическая композиция для усиления противоопухолевого эффекта ингибитора иммунной контрольной точки.

Краткое описание чертежей

На фигуре 1 показан график применения каждого тестируемого агента в испытании из Примера 1.

На фигуре 2 показано сравнение между не получавшей лечения группой, группой с применением антитела против PD-L1, группой с применением антитела против PD-L1 + АЛК, и группой с применением антитела против PD-L1 + АЛК + НЖЦ в отношении объема опухоли после инокуляции опухоли. * показывает, что р <0,05 по критерию Стьюдента, когда дисперсии двух популяций не равны.

На фигуре 3 показан график применения каждого тестируемого агента в испытании из Примера 2.

На фигуре 4 показано сравнение между не получавшей лечения группой, группой с применением антитела против PD-1 и группой с применением антитела против PD-1 + АЛК + НЖЦ в отношении объема опухоли после инокуляции опухоли.

Описание вариантов осуществления

Настоящее изобретение далее будет описано подробно.

Настоящее изобретение относится к фармацевтической композиции для усиления противоопухолевого эффекта ингибитора иммунной контрольной точки (далее также называемой «фармацевтической композицией по настоящему изобретению»).

«Ингибитор иммунной контрольной точки» представляет собой противораковый агент, который подавляет пролиферацию рака путем связывания с молекулой иммунной контрольной точки, которая подавляет активность Т-клеток, обусловленную презентацией антигена, и ингибирует его сигнальную трансдукцию. Молекулы иммунной контрольной точки могут включать как рецепторы, так и лиганды, которые функционируют в качестве иммунных контрольных точек.

В одном варианте осуществления настоящего изобретения «ингибитор иммунной контрольной точки» включает, например, любое антитело или соединение, которое может ингибировать связывание или взаимодействие между PD-1L и PD-1, связывание или взаимодействие между CD80/CD86 и CTLA4, связывание или взаимодействие между CD137L и CD137, связывание или взаимодействие между MHC и LAG-3/KIR, связывание или взаимодействие между CD48 и CD244, связывание или взаимодействие между GAL9 и TIM3, связывание или взаимодействие между HVEM и BTLA/CD160, связывание или взаимодействие между CD40L и CD40, связывание или взаимодействие между OX40L и OX40, и связывание или взаимодействие между GITRL и GITR, но не ограничивается этим.

В другом варианте осуществления настоящего изобретения «ингибитор иммунной контрольной точки» выбран из группы, состоящей из анти-PD-1 антитела, анти-PD-L1 антитела, анти-CTLA4 антитела, анти-B7 антитела, анти-C27 антитела, анти-KIR антитела, ингибитора IDO, анти-CD137 антитела и анти-TIM3 антитела, но не ограничиваясь этим.

В еще одном варианте осуществления настоящего изобретения «ингибитор иммунной контрольной точки» выбран из атезолизумаба, дурвалумаба, авелумаба, ниволумаба, пембролизумаба, пидилизумаба, BMS-936559, ипилимумаба, тремелимумаба, эноблитузумаба, варлилумаба, лирилумаба, эпакадостата, утомилумаба, урелумаба и TSR-022, но не ограничиваясь этим.

В еще одном варианте осуществления настоящего изобретения «ингибитор иммунной контрольной точки» представляет собой анти-PD-L1 антитело или анти-PD-1 антитело.

Фармацевтическая композиция по настоящему изобретению отличается тем, что в качестве активного ингредиента она содержит АЛК или её производное, соль или сложный эфир (далее также обозначаемые просто «АЛК»).

Используемый в настоящей заявке термин «АЛК» означает 5-аминолевулиновую кислоту. АЛК также обозначается как δ-аминолевулиновая кислота и представляет собой тип аминокислоты.

Соединение, показанное следующей формулой (I), может быть приведено в качестве примера производного АЛК. В формуле (I) R¹ представляет собой атом водорода или ацильную группу, а R² представляет собой атом водорода, линейную или разветвленную алкильную группу, циклоалкильную группу, арильную группу или аралкильную группу. Следует отметить, формула (I) соответствует АЛК, когда R¹ и R² представляют собой атомы водорода.

[Химическая формула 4]

Аминолевулиновые кислоты могут действовать в качестве активного ингредиента in vivo в форме АЛК формулы (I) или её производного, а также могут применяться в виде пролекарства (предшественника), которое разлагается ферментом in vivo.

Ацильная группа в R¹ формулы (I) может включать линейную или разветвленную алканоильную группу, имеющую 1-8 атомов углерода, такую как формильная, ацетильная, пропионильная, бутирильная, изобутирильная, валерильная, изовалерильная, пивалоильная, гексаноильная, октаноильная и бензилкарбонильная группа, или ароильную группу, имеющую 7-14 атомов углерода, такую как бензоильная, 1-нафтоильная, 2-нафтоильная группы.

Алкильная группа в R² формулы (I) может включать линейную или разветвленную алкильную группу, имеющую 1-8 атомов углерода, такую как метильная, этильная, пропильная, изопропильная, бутильная, изобутильная, втор-бутильная, трет-бутильная, пентильная, изопентильная, неопентильная, гексильная, гептильная и октильная группы.

Циклоалкильная группа в R² формулы (I) может включать циклоалкильную группу, имеющую 3-8 атомов углерода, которая может быть насыщенной или иметь частично ненасыщенные связи, такую как циклопропильная, циклобутильная, циклопентильная, циклогексильная, циклогептильная, циклооктильная, циклододецильная и 1-циклогексенильная группы.

Арильная группа в R² формулы (I) может включать арильную группу, имеющую 6-14 атомов углерода, такую как фенильная, нафтильная, антрильная и фенантрильная группы.

Примером аралкильной группы в R² формулы (I) могут быть те же арильные группы, что и у арильного фрагмента, указанные выше, и те же алкильные группы, что и у алкильного фрагмента, указанные выше, и они могут конкретно включать аралкильную группу, имеющую 7-15 атомов углерода, такую как бензильная, фенэтильная, фенилпропильная, фенилбутильная, бензгидрильная, тритильная, нафтилметильная и нафтилэтильная группы.

Предпочтительные производные АЛК включают соединения, где R¹ представляет собой формильную группу, ацетильную группу, пропионильную группу, бутирильную группу и тому подобное. Кроме того, предпочтительные производные АЛК также включают соединения, где вышеуказанный R² представляет собой метильную группу, этильную группу, пропильную группу, бутильную группу, пентильную группу и тому подобное. Кроме того, предпочтительные производные АЛК также включают соединения, где комбинацией вышеуказанных R¹ и R² является любая комбинация (формил и метил), (ацетил и метил), (пропионил и метил), (бутирил и метил), (формил и этил), (ацетил и этил), (пропионил и этил) и (бутирил и этил).

Среди АЛК соль АЛК или ее производное могут включать фармацевтически приемлемую соль добавления кислоты, соль металла, соль аммония, соль добавления органического амина и тому подобное. Примерами солей добавления кислот могут служить, например, любая из солей неорганических кислот, таких как гидрохлоридная соль, гидробромидная соль, гидройодидная соль, фосфатная соль, нитратная соль и сульфатная соль, и любая из солей добавления органических кислот, таких как формиатная соль, ацетатная соль, пропионатная соль, толуолсульфатная соль, сукцинатная соль, оксалатная соль, лактатная соль, тартратная соль, гликолятная соль, метансульфонатная соль, бутиратная соль, валератная соль, цитратная соль, фумаратная соль, малеатная соль и малатная соль. Примерами солей металлов могут быть любая из солей щелочных металлов, такая как соль лития, соль натрия и соль калия, любая из солей щелочноземельных металлов, таких как соль магния и соль кальция, и любая из солей таких металлов, как алюминий и цинк. Примерами солей аммония могут служить, например, соли аммония и соли алкиламмония, такие как соль тетраметиламмония. Примерами солей органических аминов могут служить любая из таких солей, как соль триэтиламина, соль пиперидина, соль морфолина и соль толуидина. Отмечаем, что эти соли также могут быть использованы в виде раствора во время применения.

Сложные эфиры АЛК могут включать метиловые эфиры, этиловые эфиры, пропиловые эфиры, бутиловые эфиры, пентиловые эфиры и тому подобное, но не ограничиваются ими.

Среди вышеуказанных АЛК наиболее предпочтительными являются АЛК и различные сложные эфиры, такие как метиловый эфир АЛК, этиловый эфир АЛК, пропиловый эфир АЛК, бутиловый эфир АЛК и пентиловый эфир АЛК, а также их гидрохлоридные соли, фосфатные соли, и сульфатные соли. В частности, гидрохлоридные соли АЛК и фосфатные соли АЛК могут быть приведены в качестве особо предпочтительных.

Вышеуказанные АЛК могут быть приготовлены, например, хорошо известными способами, такими как химический синтез, продукция микроорганизмами и продукция ферментами. Кроме того, вышеуказанные АЛК могут также формировать гидрат или сольват, и АЛК могут быть использованы по отдельности или в подходящей комбинации двух или более из них.

Когда вышеуказанные АЛК должны быть приготовлены в виде водного раствора, необходимо обратить внимание на то, чтобы водный раствор не стал щелочным, чтобы предотвратить разложение АЛК. В случае, если он становится щелочным, деградация может быть предотвращена путем удаления кислорода.

В одном варианте осуществления в фармацевтической композиции по настоящему изобретению один или несколько типов металлсодержащих соединений используются в комбинации. Соответственно, фармацевтическая композиция по настоящему изобретению может дополнительно содержать один или несколько типов металлсодержащих соединений. Металлическая часть такого металлсодержащего соединения может включать железо, магний, цинк, никель, ванадий, кобальт, медь, хром и молибден. В предпочтительном варианте осуществления металлическая часть металлсодержащего соединения предпочтительно представляет собой железо, магний или цинк, в частности железо.

В настоящем изобретении соединение железа может представлять собой органическую соль или неорганическую соль. Неорганические соли могут включать хлорид железа (III), сесквиоксид железа, сульфат железа и пирофосфат железа (II). Органические соли могут включать соли карбоновых кислот, такие как соли гидроксикарбоновых кислот, цитратные соли, такие как цитрат железа (II), цитрат железа-натрия, цитрат натрия-железа (II) (НЖЦ) и цитрат железа-аммония, соли органических кислот, такие как пирофосфат железа (III), гемовое железо, декстран железа, лактат железа, глюконат железа (II), железа-натрия диэтилентриаминпентаацетат, железа-аммония диэтилентриаминпентаацетат, железа-натрия этилендиаминтетраацетат, железа-аммония этилендиаминпентаацетат, железа-натрия дикарбоксиметилглутамат, железа-аммония дикарбоксиметилглутамат, железа (II) фумарат, железа ацетат, железа оксалат, железа (II) сукцинат, и железа-натрия сукцинат-цитрат, а также триэтилентетрамин железа, лактоферрин железа, трансферрин железа, натрия-железа хлорофиллин, ферритин железа, сахарат оксида железа и железа (II) глицинсульфат.

В настоящем изобретении соединение магния может включать магния цитрат, магния бензоат, магния ацетат, магния оксид, магния хлорид, магния гидроксид, магния карбонат, магния сульфат, магния силикат, магния нитрат, магния диаммония диэтилентриаминпентаацетат, магния динатрия этилендиаминтетраацетат и магния протопорфирин.

В настоящем изобретении соединение цинка может включать цинка хлорид, цинка оксид, цинка нитрат, цинка карбонат, цинка сульфат, цинка диаммония диэтилентриаминпентаацетат, цинка динатрия этилендиаминтетраацетат, цинка протопорфирин и дрожжи, содержащие цинк.

Доза металлсодержащего соединения для субъекта может быть 0-100 кратной по молярному отношению к дозе АЛК для субъекта, предпочтительно 0,01-10 кратной и более предпочтительной в 0,1-8 кратной.

АЛК и металлсодержащее соединение, содержащееся в фармацевтической композиции по настоящему изобретению, можно применять в виде композиции, включающей АЛК и металлсодержащее соединение, или каждое из них можно применять по отдельности, хотя предпочтительно, чтобы даже при применении каждого по отдельности их применяли в одно и то же время. «В то же время» здесь означает не только одновременное применение, но также, даже если оно не является одновременным, применение осуществляют без существенного интервала между ними, так что применение АЛК и металлсодержащего соединения может проявлять аддитивный эффект, предпочтительно синергетический эффект.

Способ применения АЛК и металлсодержащего соединения в настоящем изобретении не ограничен и может представлять собой системное применение или местное применение. Пути применения могут включать, например, пероральное применение, включая сублингвальное применение, или парентеральное применение, такое как ингаляционное применение, внутривенное применение, включая инфузию, трансдермальное применение, например, посредством пластырей, суппозитория или применение путем принудительного энтерального питания с использованием назогастральной трубки, назоинтестинальной трубки, гастростомической трубки или энтеростомической трубки. Кроме того, как описано выше, АЛК и металлсодержащее соединение могут применяться разными путями.

Лекарственная форма фармацевтической композиции по настоящему изобретению может быть надлежащим образом определена в зависимости от указанного пути введения и может включать инъекции, инфузии, таблетки, капсулы, мелкие гранулы, порошки, жидкости, растворы, растворенные в сиропах и т.д., пластыри, суппозитории и тому подобное, но не ограничивается ими.

Другие необязательные ингредиенты, такие как другие лекарственные ингредиенты, питательные вещества и носители, могут быть добавлены, если необходимо, к фармацевтической композиции в соответствии с настоящим изобретением. Например, в качестве необязательных ингредиентов могут быть использованы различные ингредиенты для приготовления лекарств, такие как фармацевтически приемлемые обычные носители, например, кристаллическая целлюлоза, желатин, лактоза, крахмал, стеарат магния, тальк, растительный и животный жир, масло, камедь и полиалкиленгликоль, связующие агенты, стабилизаторы, растворители, дисперсионные среды, средства увеличения объема, наполнители, разбавители, рН-буферы, дезинтегранты, солюбилизаторы, солюбилизирующие агенты и изотонические агенты.

Субъектом, у которого применяют фармацевтическую композицию по настоящему изобретению, является субъект, у которого применяли или применяют ингибитор иммунной контрольной точки, обычно субъект, страдающий раком. Тип рака, подлежащего лечению, может меняться в зависимости от используемого ингибитора иммунной контрольной точки.

Дозировка АЛК для применения посредством фармацевтической композиции по настоящему изобретению, в зависимости от роста, массы тела, возраста и симптомов субъекта, может находиться в диапазоне от 1 мг до 1000 мг, предпочтительно от 5 мг до 100 мг, более предпочтительно 10 мг - 30 мг, еще более предпочтительно 15 мг - 25 мг на кг массы тела субъекта, в пересчете в АЛК (то есть в пересчете на массу, где R¹ и R² являются атомами водорода в формуле (I)).

Подходящее количество применений и частота применения для фармацевтической композиции по настоящему изобретению могут быть соответствующим образом определены специалистами в данной области техники с учетом условий применения ингибитора иммунной контрольной точки, используемого в комбинации (интервала применения, количества введений, и продолжительности применения). В одном варианте осуществления настоящего изобретения фармацевтическую композицию по настоящему изобретению применяют каждый день перед введением, во время введения или после введения ингибитора иммунной контрольной точки.

В настоящем изобретении эффективное количество каждой фармацевтической композиции по настоящему изобретению и ингибитора иммунной контрольной точки может применяться у субъекта в одно и то же время или в разное время, непрерывно или с интервалами. Фармацевтическая композиция по настоящему изобретению и ингибитор иммунной контрольной точки могут применяться у пациента с опухолью в одном и том же цикле применения, или каждый из них может применяться в разных циклах применения. В одном варианте осуществления настоящего изобретения каждое из фармацевтической композиции по настоящему изобретению и ингибитора иммунной контрольной точки применяют в разных циклах введения.

В одном варианте осуществления настоящего изобретения применение фармацевтической композиции по настоящему изобретению у субъекта начинают до начала применения ингибитора иммунной контрольной точки. Например, фармацевтическую композицию по настоящему изобретению можно применять каждый день за одну неделю до начала применения ингибитора иммунной контрольной точки.

В другом варианте осуществления настоящего изобретения применение фармацевтической композиции по настоящему изобретению субъекту начинают в тот же день, что и применение ингибитора иммунной контрольной точки. Например, фармацевтическую композицию по настоящему изобретению можно применять каждый день со дня начала применения ингибитора иммунной контрольной точки. Когда фармацевтическую композицию по настоящему изобретению и ингибитор иммунной контрольной точки применяют одновременно, они могут быть приготовлены и введены в виде одной композиции или могут одновременно применяться в отдельных путях введения.

В еще одном варианте осуществления настоящего изобретения применение фармацевтической композиции по настоящему изобретению субъекту начинают после применения ингибитора иммунной контрольной точки. Например, фармацевтическую композицию по настоящему изобретению можно применять каждый день после применения ингибитора иммунной контрольной точки. До тех пор, пока противоопухолевый эффект от ингибитора иммунной контрольной точки может быть усилен, момент начала применения фармацевтической композиции по настоящему изобретению конкретно не ограничен, и предпочтительно, чтобы не истек длительный период времени, например, один месяц или более, предпочтительно три недели или более, более предпочтительно две недели или более, и более предпочтительно десять дней или более, с момента начала применения ингибитора иммунной контрольной точки.

Используемые в настоящей заявке термины, за исключением тех, которые конкретно определены, используются для описания конкретных вариантов осуществления и не предназначены для ограничения изобретения.

Кроме того, термин «содержащий», используемый в данном документе, если содержание явно не указывает на то, что следует понимать иначе, подразумевает наличие описанных частей (таких как компоненты, этапы, элементы и числа) и не исключает присутствие других частей (например, компоненты, шаги, элементы и числа).

Если не указано иное, все используемые здесь термины (включая технические и научные термины) имеют те же значения, что и те, которые широко известны специалистам в области техники, к которой относится настоящее изобретение. Используемые в настоящей заявке термины, если явно не определено иное, должны толковаться как имеющие значения, согласующиеся со значениями в данном документе и в смежных технических областях, и не должны толковаться как имеющие идеализированные или чрезмерно формальные значения.

Настоящее изобретение далее будет описано более подробно со ссылкой на Примеры. Однако настоящее изобретение может быть осуществлено с различными аспектами и не должно рассматриваться как ограниченное описанными здесь примерами.

Примеры

<Пример 1> Усиление противоопухолевого эффекта при комбинированном использовании АЛК и антитела против PD-L1

Экспериментальный метод

Мышам C57BL/6 инокулировали 3×10⁵ штамма клеток меланомы мыши B16F10 в бок, и опухоли давали расти в течение 28 дней. На 10-й и 15-й день после инокуляции интраперитонеально вводили 200 мкг на мышь антитела против PD-L1 мыши (клон: MIH5) в группе, получавшей только антитело против PD-L1, в группе, получавшей антитело против PD-L1 + АЛК, и группе, получавшей антитело против PD-L1 + АЛК + НЖЦ (Фигура 1). Для группы, получавшей анти-PD-L1 антитело + АЛК + НЖЦ, 100 мг/кг гидрохлоридной соли АЛК (от neo ALA CO., LTD.) и 157 мг/кг натрия-железа (II) цитрата (SFC; от KOMATSUYA CORPORATION) перорально вводили один раз в сутки с 10 по 16 дня после инокуляции. Кроме того, для группы, получавшей антитело против PD-L1 + АЛК, 100 мг/кг гидрохлоридной соли АЛК (от neo ALA CO., LTD.) вводили перорально один раз в сутки, с 10 по 16 день после инокуляции. Группу без лечения после инокуляции использовали в качестве контрольной группы.

Диаметр опухоли измеряли каждые два дня, и регистрировали объем опухоли v, где v = (малая ось, мм)² x (большая ось, мм)/2 (мм³). Значение N составило 13 мышей для контрольной группы (8 мышей были живы на 16-й день), 10 мышей для группы с применением только антитела против PD-L1 (9 мышей были живы на 16-й день), 4 мыши для группы с применением антитела против PD-L1 + АЛК (все мыши были живы на 16-й день) и 9 мышей для группы с применением антитела против PD-L1 + АЛК + НЖЦ (все мыши были живы на 16-й день).

Результат

На 16-й день после инокуляции группа с применением анти-PD-L1 антитела + АЛК имела явно меньшие объемы опухолей по сравнению с группой, в которой применяли только анти-PD-L1 антитела (фиг.2). Кроме того, эффект от антитела против PD-L1 был более значительным, когда добавляли АЛК и далее вводили НЖЦ (группа, получавшая анти-PD-L1 антитело + АЛК + НЖЦ). Этот результат указывает на то, что противоопухолевый эффект антитела против PD-L1 усиливается комбинированным использованием АЛК + НЖЦ, и ожидается, что он будет способствовать дальнейшему увеличению выживаемости мышей.

<Пример 2> Усиление противоопухолевого эффекта при комбинированном применении АЛК и антитела против PD-1.

Экспериментальный метод

Мышам C57BL/6 инокулировали 3×10⁵ штамма клеток меланомы мыши B16F10 в бок, и опухоли давали расти в течение 16 дней. На 8-й и 12-й день после инокуляции интраперитонеально вводили 200 мкг/мышь антитела против PD-1 мыши (клон: RMP1-14) в группе, получавшей только антитело против PD-1, в группе, получавшей антитело против PD-1 + АЛК, и в группе, получавшей антитело против PD-1 + АЛК + НЖЦ (фиг.3). В группе, получавшей антитело против PD-1 + АЛК + НЖЦ, 100 мг/кг гидрохлоридной соли АЛК (от neo ALA CO., LTD.) и 157 мг/кг натрия-железа (II) цитрата (НЖЦ; от KOMATSUYA CORPORATION) перорально вводили один раз в сутки с 8 по 16 день после инокуляции. Группу без лечения после инокуляции использовали в качестве контрольной группы.

Диаметр опухоли измеряли каждые два дня, и регистрировали объем опухоли v, где v = (малая ось, мм)² x (большая ось, мм)/2 (мм³). Значения N составляли 18 мышей для контрольной группы (10 мышей были живы на 16-й день), 10 мышей для группы с применением только антитела против PD-1 (все мыши были живы на 16-й день) и 10 мышей для группы с применением антитела против PD-1 + АЛК + НЖЦ (9 мышей были живы на 16-й день).

Результат

На 16-й день после инокуляции группа с применением анти-PD-1-антитела + АЛК + НЖЦ имела явно меньшие объемы опухолей по сравнению с группой с применением только анти-PD-1-антитела (фиг.4). Этот результат указывает на то, что противоопухолевый эффект антитела против PD-1 усиливается комбинированным использованием АЛК + НЖЦ, и ожидается, что он будет способствовать дальнейшему увеличению выживаемости мышей.

Промышленная применимость

Согласно настоящему изобретению предложена фармацевтическая композиция для усиления противоопухолевого эффекта ингибитора иммунной контрольной точки. Соответственно, при использовании ингибитора иммунной контрольной точки и фармацевтической композиции в соответствии с настоящим изобретением в комбинации ожидается, что это приведет к увеличению продолжительности жизни и увеличению степени ремиссии у онкологических пациентов.

Кроме того, поскольку АЛК, которая является активным ингредиентом фармацевтической композиции по настоящему изобретению, представляет собой тип натуральных аминокислот, содержащихся in vivo, который широко распространен у животных, растений, грибов и т.д., она обладает тем преимуществом, что её можно безопасно использовать in vivo.

Группа изобретений относится к области медицины и фармацевтики. 1 объект представляет собой применение 5-аминолевулиновой кислоты или ее соли или сложного эфира для усиления противоопухолевого эффекта ингибитора иммунной контрольной точки, где ингибитор иммунной контрольной точки является анти-PD-L1 антителом или анти-PD-1 антителом и где указанную 5-аминолевулиновую кислоту или ее соль или сложный эфир вводят системно нуждающемуся в этом субъекту. 2 объект – применение 5-аминолевулиновой кислоты или ее соли или сложного эфира при получении лекарственного средства для усиления противоопухолевого эффекта анти-PD-L1 антитела или анти-PD-1 антитела. Технический результат заключается в усилении 5-аминолевулиновой кислотой противоопухолевого эффекта ингибиторов иммунных контрольных точек, таких как анти-PD-1 антитело или анти-PD-L1 антитело. 2 н. и 2 з.п. ф-лы, 4 ил., 2 пр.

1. Применение 5-аминолевулиновой кислоты или ее соли или сложного эфира для усиления противоопухолевого эффекта ингибитора иммунной контрольной точки, где ингибитор иммунной контрольной точки является анти-PD-L1 антителом или анти-PD-1 антителом и где указанную 5-аминолевулиновую кислоту или ее соль или сложный эфир вводят системно нуждающемуся в этом субъекту.

2. Применение по п. 1, в котором 5-аминолевулиновую кислоту или ее соль или сложный эфир применяют одновременно или в разное время с ингибитором иммунной контрольной точки.

3. Применение по п. 1 или 2, которое дополнительно включает введение натрия-железа (II) цитрата.

4. Применение 5-аминолевулиновой кислоты или ее соли или сложного эфира при получении лекарственного средства для усиления противоопухолевого эффекта ингибитора иммунной контрольной точки, где ингибитор иммунной контрольной точки является анти-PD-L1 антителом или анти-PD-1 антителом.