РОДСТВЕННЫЕ ЗАЯВКИ
[0001] Настоящая заявка испрашивает приоритет предварительной заявки на патент США 62/348,410, поданной 10 июня 2016 года, все содержание которой включено в настоящую заявку посредством отсылки.
СПИСОК ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЕЙ
[0002] Настоящая заявка содержит Список последовательностей, представленный вместе с настоящим документом, и который настоящим полностью включен посредством отсылки.
ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИ, К КОТОРОЙ ОТНОСИТСЯ ИЗОБРЕТЕНИЕ
[0003] В настоящем документе предложены конъюгированные с лизином иммуноглобулины и способы их получения.
УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ
[0004] Область применения моноклональных антител простирается от фундаментальных исследований до терапевтических и диагностических применений. Возможность конъюгировать антитела с функциональными средствами еще больше расширяет их функциональность. Производство конъюгированных антител обычно включает конъюгирование линкера, лекарственного средства или другого функционального средства с реакционноспособными остатками лизина цистеина на тяжелой (HC) и легкой (LC) цепях моноклонального антитела (мАт). См. Deonarain, et al., "Emerging formats for next-generation antibody drug conjugates", Expert Opinion in Drug Discovery (2015), 10(5): 463-481. Конъюгирование лизина обычно проводят с применением химических методов на основе сукцинимида (NHS) или изотиоцианата. Конъюгирование на основе цистеина требует частичного восстановления антитела с разрывом некоторых межцепочечных дисульфидных связей, в результате чего образуются свободные тиольные боковые цепи. Затем тиол-реактивные функциональные средства могут реагировать со свободными тиольными группами на антителе с получением конъюгатов антитела-лекарственного средства (ADC). Оба указанных способа приводят к модификации множества лизинов или цистеинов с получением гетерогенных смесей ADC, имеющих некое распределение отношений антитела-лекарственного средства (DAR), и модификациям лекарственного средства в случайных положениях.
[0005] Недавнее продвижение в использовании технологий сайт-специфического конъюгирования в качестве способа получения гомогенного ADC продукта с определенным DAR позволило разработать несколько способов, включающих инженерию непарных цистеинов, включение неприродных аминокислот и сайт-специфическую ферментативную модификацию. Хотя эти способы дают гомогенные продукты, каждый из них обладает собственными недостатками. Конъюгирование на основе цистеина требует дополнительной стадии удаления кэпирующего цистеина, глутатиона или даже легкой цепи с неспаренного цистеина. См., например, Junutula, et al., "Site-Specific Conjugation of a Cytotoxic Drug to an Antibody Improves Therapeutic Index", Nature Biotechnology, (2008) 26:925-932; Chen, et al., "Charge-based Analysis of Antibodies with Engineered Cysteines", MAbs (2009) 1(6): 563-571; Gomez, et al., "Effect of temperature, pH, dissolved oxygen, and hydrolysate on the formation of triple light chain antibodies in cell culture" Biotechnol Progress (2010), 26: 1438-1445. Кроме того, была продемонстрирована нестабильность в сыворотке химии на основе малеимида, используемой в настоящее время для конъюгатов на основе цистеина, что повышает риск потери активности или нецелевой токсичности. Alley, et al., "Contribution of Linker Stability to the Activities of Anticancer Immunoconjugates", Bioconjugate Chemistry (2008) 19(3): 759-765; Shen, et al., "Conjugation site modulates the in vivo stability and therapeutic activity of antibody-drug conjugates", Nature Biotechnology (2012) 30: 184-189. Включение неприродных аминокислот требует экспрессии либо в системе на основе генетически модифицированной клетки, либо в бесклеточной системе. Hallam, et al., "Unnatural Amino Acids in Novel Antibody Conjugates", Future Med. Chem. (2014) 6(11): 1309-1324. Кроме того, присутствие неприродной аминокислоты может вызывать иммуногенную реакцию у пациентов. Впрочем, при сайт-специфических ферментативных модификациях могут потенциально использовать нативную аминокислоту дикого типа в последовательности антитела, что сведет к минимуму вероятность иммуногенности. Кроме того, посттрансляционные связи, которые обычно создаются модифицирующими белок ферментами, очень стабильны.
[0006] Сайт-специфическую ферментную модификацию белков исследовали с использованием семейства белков, называемых трансглутаминазами, которые катализируют образованием стабильной изопептидной связи между γ-карбоксамидной группой (донором ацила) глутамина и ε-амино группой (акцептором ацила) лизина (см. ФИГ. 1) (см., например, Yokoyama, et al., " Properties and Applications of Microbial Transglutaminase", Appl. Microbiol. Biotech. (2004) 64: 47-454; Strop, "Versatility of Microbial Transglutaminase", Bioconjugate Chemistry, (2014) 25(5): 855-862; Kieliszek et al., "Microbial Transglutaminase and its Application in the Food Industry", Folia Microbiol (2014) 59:241-250). Недавно несколько групп исследовали применение трансглутаминазы в качестве средства для получения ADC (см., например, Josten et al., "Use of Microbial Transglutaminase for the Enzymatic Biotinylation of Antibodies", J. Immunol Methods, (2000) 240:47-54; Mindt et al., "Modification of Different IgG1 Antibodies via Glutamine and Lysine Using Bacterial and Human Tissue Transglutaminase", Bioconjugate Chemistry (2008) 19(1): 271-278); Jeger, et al., "Site-specific and stoichiometric modification of antibodies by bacterial transglutaminase" Angew. Chem. Int. Ed. Engl. (2010) 49: 9995-9997; Strop et al., "Location Matters: Site of Conjugation Modulates Stability and Pharmacokinetics of Antibody Drug Conjugates", Chem Biol (2013) 20(2):161-167; Dennler et al., "Transglutaminase-Based Chemo-Enzymatic Conjugation Approach Yields Homogeneous Antibody-Drug Conjugates", Bioconjugate Chemistry (2014) 25(3): 569-578; Siegmund, et al., "Locked by Design: A Conformationally Constrained Transglutaminase Tag Enables Efficient Site-Specific Conjugation", Angew. Chem. Int. Ed. Engl. (2015) 54(45):13420-13424). Трансглутаминазы обнаружены в различных организмах, от бактерий до людей, и являются структурно и функционально подобными, но при этом каждая из них участвует в определенных клеточных процессах. Микробную трансглутаминазу (микробную трансглутаминазу), выделенную из бактерии Streptomyces mobaraensis, использовали в пищевой промышленности для сшивания белков для различных применений. Помимо своей низкой стоимости производства, это - привлекательный метод конъюгирования из-за способности трансглутаминазы функционировать в широком диапазоне pH, концентраций солей и температурных условий.
[0007] Несмотря на исследования в течение более чем двух десятилетий, не удалось четко определить субстратную специфичность микробной трансглутаминазы. Как правило, предпочтительными являются глутамины или лизины на внешних петлях с гидрофобными или положительно заряженными смежными остатками. См., Taguchi et al., "Substrate specificity analysis of microbial transglutaminase using proteinaceous protease inhibitors as natural model substrates", J. Biochem. (2000) 128:415-425; Sugimura et al., "Identification of preferred substrate sequences of microbial transglutaminase from Streptomyces mobaraensis using a phage-displayed peptide library", Arch. Biochem. Biophys. (2008) 477:379-383; Tagami et al., "Substrate specificity of microbial transglutaminase as revealed by three-dimensional docking simulation and mutagenesis", Protein Eng. Des. Sel. (2009) 22:747-752. Ситуация, связанная с глутамином в качестве донора ацила, как обнаружили, была более важной, чем в случае лизина как акцептора ацила. См., например, Ohtsuka et al., "Substrate specificities of microbial transglutaminase for primary amines", J. Agric. Food Chem. (2000) 48: 6230-6233; Ohtsuka et al., "Comparison of substrate specificities of transglutaminases using synthetic peptides as acyl donors", Biosci. Biotechnol. Biochem. (2000) 64: 2608-2613; Gundersen et al., "Microbial transglutaminase displays broad acyl-acceptor substrate specificity", Appl. Microbiol. Biotechnol. (2013) 98:219-230. Фактически, минимальный субстрат-донор ацила должен иметь N-концевую N-карбоксибензилокси (CBZ) группу, после которой следует глутамин и C-концевой глицин (CBZ-L-глутаминилглицин или Z-Gln-Gly), тогда как минимальным акцептором ацила является аммиак.
[0008] Из-за более низкой специфичности микробной трансглутаминазы к амину в качестве акцептора ацила, до настоящего времени исследование было сосредоточено, главным образом, на трансамидировании остатков глутамина антитела. См., Josten et al., Mindt et al., Jeger et al., Strop et al., Dennler et al. и Siegmund et al., указанные выше. Вопреки более раннему отчету (Josten et al. 2000), описание мТГаза-опосредованного биотинилирования антитела с использованием субстратов-акцепторов ацила, несколько групп недавно показали минимальную модификацию (или ее отсутствие) мТГазой антител дикого типа с такими же или подобными субстратами. Эти данные подтвердили, что, несмотря на присутствие доступных для растворителя глутаминов, ни один из них не находился в подходящих условиях для трансамидирования мТГазой (Mindt et al. 2008; Jeger et al. 2010; Strop et al. 2013).
[0009] Также предположили, что использование субстрата на основе донора амина для трансамидирования лизина может давать гетерогенный продукт ADC из-за присутствия множества реакционноспособных лизинов на поверхности IgG (Josten et al. 2000; Jeger et al. 2010). Человеческий IgG в среднем состоит из 80 лизинов, 80-90% которых предположительно доступны для растворителя (Gautier et al., "Lysine Conjugated Properties in Human IgGs Studied by Integrating High-Resolution Native Mass Spectrometry and Bottom-Up Proteomics", Proteomics (2015) 15(16):2756-2765; данные не показаны), при этом C-концевым кодоном IgG1, IgG2, IgG3 и IgG4 является лизин (Ellison et al., DNA (1981) 1:11-18; Ellison et al. ("Ellison et al. 2"), Proc. Nat. Acad. Sci. USA, (1982) 79:1984-1988; Ellison et al., Nucleic Acid Res. (1982) 10:4071-4079). Впрочем, полученный из сыворотки IgG не содержит лизин (Wang et al., J. Immunol. (1980) 125:1048-1054; Edelman et al., Proc Natl Acad. Sci. USA (1969) 63:78-85; Frangione et al., Biochemistry (1980) 19:4304-4308; Pink et al., Biochem. J. (1970) 117:33-47). То же наблюдали в случае IgD (White et al., Science (1985) 228:733-737; Lin et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, (1981) 78:504-508; Shinoda et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA (1981) 78:785-789). Рекомбинантная экспрессия IgG1 в клетках HEK293 и CHO также дает белок, не имеющий C-концевого Lys447 (Ellison et al.; Harris et al., Eur. J. Biochem. (1990) 194:611-620; Harris, J. Chromatogr. A (1995) 705:129-134; Dick et al., Biotechnol. Bioeng. (2008) 100:1132-1143).
[0010] На сегодняшний день большинство специалистов в данной области считают, что применение субстрата на основе донора амина для трансамидирования лизина может давать гетерогенный ADC продукт из-за присутствия множества реакционноспособных лизинов на поверхности IgG (Josten et al. и Jeger et al.), в результате чего применение субстрата на основе донора амина для трансамидирования остатков лизина на иммуноглобулинах не находило одобрения.
[0011] Таким образом, существует потребность в сайт-специфических ферментативных модификациях иммуноглобулинов для получения конъюгатов, которые обладают ожидаемым уровнем конъюгирования. Это позволит получать ADC конъюгаты с относительно однородным показателем DAR.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
НЕПАТЕНТНЫЕ ИСТОЧНИКИ (NPL)
[0012] NPL 1: Deonarain, et al., "Emerging formats for next-generation antibody drug conjugates", Expert Opinion in Drug Discovery (2015), 10(5): 463-481
NPL 2: Junutula, et al., "Site-Specific Conjugation of a Cytotoxic Drug to an Antibody Improves Therapeutic Index", Nature Biotechnology, (2008) 26:925-932
NPL 3: Chen, et al., "Charge-based Analysis of Antibodies with Engineered Cysteines", MAbs (2009) 1(6): 563-571
NPL 4: Gomez, et al., "Effect of temperature, pH, dissolved oxygen, and hydrolysate on the formation of triple light chain antibodies in cell culture" Biotechnol Progress (2010), 26: 1438-1445
NPL 5: Alley, et al., "Contribution of Linker Stability to the Activities of Anticancer Immunoconjugates", Bioconjugate Chemistry (2008) 19(3): 759-765
NPL 6: Shen, et al., "Conjugation site modulates the in vivo stability and therapeutic activity of antibody-drug conjugates", Nature Biotechnology (2012) 30: 184-189
NPL 7: Hallam, et al., "Unnatural Amino Acids in Novel Antibody Conjugates", Future Med. Chem. (2014) 6(11): 1309-1324
NPL 8: Yokoyama, et al., "Properties and Applications of Microbial Transglutaminase", Appl. Microbiol. Biotech. (2004) 64: 47-454
NPL 9: Strop, "Versatility of Microbial Transglutaminase", Bioconjugate Chemistry, (2014) 25(5): 855-862
NPL 10: Kieliszek et al., "Microbial Transglutaminase and its Application in the Food Industry", Folia Microbiol (2014) 59:241-250
NPL 11: Josten et al., "Use of Microbial Transglutaminase for the Enzymatic Bi-otinylation of Antibodies", J. Immunol Methods, (2000) 240:47-54
NPL 12: Mindt et al., "Modification of Different IgGl Antibodies via Glutamine and Lysine Using Bacterial and Human Tissue Transglutaminase", Bioconjugate Chemistry (2008) 19(1): 271-278
NPL 13: Jeger, et al., "Site-specific and stoichiometric modification of antibodies by bacterial transglutaminase" Angew. Chem. Int. Ed. Engl. (2010) 49: 9995-9997
NPL 14: Strop et al., "Location Matters: Site of Conjugation Modulates Stability and Pharmacokinetics of Antibody Drug Conjugates", Chem Biol (2013) 20(2):161-167
NPL 15: Dennler et al., "Transglutaminase-Based Chemo-Enzymatic Conjugation Approach Yields Homogeneous Antibody-Drug Conjugates", Bioconjugate Chemistry (2014) 25(3): 569-578
NPL 16: Siegmund, et al., "Locked by Design: A Conformationally Constrained Transglutaminase Tag Enables Efficient Site-Specific Conjugation", Angew. Chem. Int. Ed. Engl. (2015) 54(45): 13420-13424
NPL 17: Taguchi et al., "Substrate specificity analysis of microbial transglutaminase using proteinaceous protease inhibitors as natural model substrates", J. Biochem. (2000) 128:415-425
NPL 18: Sugimura et al., "Identification of preferred substrate sequences of microbial transglutaminase from Streptomyces mobaraensis using a phage-displayed peptide library", Arch. Biochem. Biophys. (2008) 477:379-383
NPL 19: Tagami et al., "Substrate specificity of microbial transglutaminase as revealed by three-dimensional docking simulation and mutagenesis", Protein Eng. Des. Sel. (2009) 22:747-752
NPL 20: Ohtsuka et al., "Substrate specificities of microbial transglutaminase for primary amines", J. Agric. Food Chem. (2000) 48: 6230-6233
NPL 21: Ohtsuka et al., "Comparison of substrate specificities of transglutaminases using synthetic peptides as acyl donors", Biosci. Biotechnol. Biochem. (2000) 64: 2608-2613
NPL 22: Gundersen et al., "Microbial transglutaminase displays broad acyl-acceptor substrate specificity", Appl. Microbiol. Biotechnol. (2013) 98:219-230
NPL 23: Gautier et al., "Lysine Conjugated Properties in Human IgGs Studied by Integrating High-Resolution Native Mass Spectrometry and Bottom-Up Proteomics", Proteomics (2015) 15(16):2756-2765
NPL 24: Ellison et al., DNA (1981) 1:11-18
NPL 25: Ellison et al., ("Ellison et al., 2"), Proc. Nat. Acad. Sci. USA, (1982) 79:1984-1988
NPL 26: Ellison et al., Nucleic Acid Res. (1982) 10:4071-4079
NPL 27: Wang et al., J. Immunol. (1980) 125:1048-1054
NPL 28: Edelman et al., Proc Natl Acad. Sci. USA (1969) 63:78-85
NPL 29: Frangione et al, Biochemistry (1980) 19:4304-4308
NPL 30: Pink et al, Biochem. J. (1970) 117:33-47
NPL 31: White et al., Science (1985) 228:733-737
NPL 32: Lin et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, (1981) 78:504-508
NPL 33: Shinoda et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA (1981) 78:785-789
NPL 34: Harris et al, Eur. J. Biochem. (1990) 194:611-620
NPL 35: Harris, J. Chromatogr. A (1995) 705:129-134
NPL 36: Dick et al, Biotechnol. Bioeng. (2008) 100:1132-1143
СУЩНОСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ
РЕШЕНИЕ ЗАДАЧИ
[0013] В настоящем изобретении, несмотря на то, что модификации лизинов в иммуноглобулинах дикого типа при воздействии микробной трансглутаминазы не наблюдали, неожиданно раскрыто, что при генно-инженерном введении остатка лизина в иммуноглобулин или его антигенсвязывающую часть микробная трансглутаминаза способна использовать введенный остаток лизина в качестве акцептора ацила. Неожиданно конъюгирование введенного остатка лизина с помощью микробной трансглутаминазы приводит к сайт-специфическому и предсказуемому включению конъюгированных функциональных средств. Кроме того, введенные в константную область остатки лизина имеют широкую применимость для любого иммуноглобулина или его антигенсвязывающей части, независимо от его вариабельных областей и специфичности связывания.
[0014] В одном аспекте в настоящем документе раскрыт способ получения конъюгированного иммуноглобулина, включающий контакт иммуноглобулина или его антигенсвязывающего фрагмента с микробной трансглутаминазой и функциональным средством, включающим ацил-донорный субстрат, и где иммуноглобулин или его антигенсвязывающий фрагмент включают генно-инженерно модифицированный остаток лизина, где генно-инженерно модифицированный остаток лизина является вставкой остатка лизина или природным аминокислотным остатком, который был подвергнут мутации с заменой на остаток лизина, где ацил-донорный субстрат включает остаток глутамина, и где функциональное средство является терапевтическим средством или диагностическим средством, где микробная трансглутаминаза конъюгирует генно-инженерно модифицированный остаток лизина иммуноглобулина или его антигенсвязывающего фрагмента с остатком глутамина ацил-донорного субстрата на функциональном средстве, с получением в результате конъюгированного иммуноглобулина.
[0015] В другом аспекте в настоящем документе раскрыт способ получения конъюгированного иммуноглобулина, включающий: i) контакт иммуноглобулина или его антигенсвязывающего фрагмента с микробной трансглутаминазой и ацил-донорным субстратом, где иммуноглобулин или его антигенсвязывающий фрагмент включают генно-инженерно модифицированный остаток лизина, и где генно-инженерно модифицированный остаток лизина является вставкой остатка лизина или природным аминокислотным остатком, который был подвергнут мутации с заменой на остаток лизина, и где ацил-донорный субстрат включает остаток глутамина и реакционноспособную группу, где микробная трансглутаминаза конъюгирует генно-инженерно модифицированный остаток лизина иммуноглобулина или его антигенсвязывающего фрагмента с остатком глутамина ацил-донорного субстрата, и ii) конъюгирование функционального средства с реакционноспособной группой ацил-донорного субстрата, где функциональное средство является терапевтическим средством или диагностическим средством, с получением в результате конъюгированного иммуноглобулина. В одном варианте осуществления генно-инженерно модифицированный остаток лизина присутствует в тяжелой цепи. В одном варианте осуществления генно-инженерно модифицированный остаток лизина присутствует в константной области тяжелой цепи. В одном варианте осуществления генно-инженерно модифицированный остаток лизина присутствует в легкой цепи. В другом варианте осуществления генно-инженерно модифицированный остаток лизина присутствует в константной области легкой цепи. В одном варианте осуществления генно-инженерно модифицированный остаток лизина присутствует в каппа легкой цепи. В одном варианте осуществления генно-инженерно модифицированный остаток лизина присутствует в константной области каппа легкой цепи. В одном варианте осуществления генно-инженерно модифицированный остаток лизина присутствует в лямбда легкой цепи. В одном варианте осуществления генно-инженерно модифицированный остаток лизина присутствует в константной области лямбда легкой цепи. В одном варианте осуществления генно-инженерно модифицированный остаток лизина присутствует в вариабельной области. В одном варианте осуществления генно-инженерно модифицированный остаток лизина не присутствует в вариабельной области.
[0016] В одном варианте осуществления реакционноспособная группа ацил-донорного субстрата конъюгирована с функциональным средством с помощью клик-химии.
[0017] В одном варианте осуществления природный аминокислотный остаток, который был подвергнут мутации с заменой на остаток лизина, выбран из группы, состоящей из: Треонина 135 (T135K), Серина 136 (S136K), Лейцина 193 (L193K), Аспарагиновой кислоты 221 (D221K), Треонина 223 (T223K), Гистидина 224 (H224K), Треонина 225 (T225K), Метионина 252 (M252K), Аспарагина 297 (N297K) или Пролина 445 (P445K) на тяжелой цепи иммуноглобулина или его антигенсвязывающего фрагмента, Лейцина 201 (L201K) или Серина 202 (S202K) на каппа легкой цепи иммуноглобулина или его антигенсвязывающего фрагмента, или Глутаминовой кислоты 213 (E213K) на лямбда легкой цепи иммуноглобулина или его антигенсвязывающего фрагмента. В одном варианте осуществления тяжелая цепь (до мутации) включает аминокислотную последовательность, представленную как SEQ ID NO:18. В другом варианте осуществления каппа легкая цепь (до мутации) включает аминокислотную последовательность, представленную как SEQ ID NO:19. В другом варианте осуществления лямбда легкая цепь (до мутации) включает последовательность, представленную как SEQ ID NO:20.
[0018] В одном варианте осуществления тяжелая цепь дополнительно включает аминокислотный остаток, который был присоединен к ее C-концу в положении 448, и где указанный аминокислотный остаток не является пролином или кислотным аминокислотным остатком. В другом варианте осуществления аминокислотный остаток, который был добавлен на C-конец в положении 448, является лейцином.
[0019] В одном варианте осуществления вставка остатка лизина является остатком лизина, который был вставлен между Серином 191 и Серином 192 или между Серином 192 и Лейцином 193 на тяжелой цепи иммуноглобулина или его антигенсвязывающего фрагмента.
[0020] В одном варианте осуществления иммуноглобулин является антигенсвязывающим фрагментом (Fab'), и где природный аминокислотный остаток, который был подвергнут мутации с заменой на остаток лизина, выбран из группы, состоящей из: Аспарагиновой кислоты 221 (D221K), Треонина 223 (T223K), Гистидина 224 (H224K), Треонина 225 (T225K), Пролина 228 (P228K), Пролина 230 (P230K) и Глутаминовой кислоты 233 (E233K) на тяжелой цепи иммуноглобулина или его антигенсвязывающего фрагмента. В другом варианте осуществления Fab' включает полноразмерную шарнирную область. В другом варианте осуществления Fab' включает усеченную шарнирную область.
[0021] В одном варианте осуществления иммуноглобулин или его антигенсвязывающий фрагмент дополнительно включают второй генно-инженерно модифицированный остаток лизина, где второй генно-инженерно модифицированный остаток лизина является второй вставкой остатка лизина или вторым природным аминокислотным остатком, который был подвергнут мутации с заменой на остаток лизина, и где микробная трансглутаминаза конъюгирует второй генно-инженерно модифицированный остаток лизина иммуноглобулина или его антигенсвязывающего фрагмента с остатком глутамина ацил-донорного субстрата. В другом варианте осуществления природный аминокислотный остаток, который был подвергнут мутации с заменой на генно-инженерно модифицированный остаток лизина, является Серином 136 (S136K) на тяжелой цепи иммуноглобулина или его антигенсвязывающего фрагмента, и второй природный аминокислотный остаток, который был подвергнут мутации с заменой на второй генно-инженерно модифицированный остаток лизина, является Серином 202 (S202K) на каппа легкой цепи иммуноглобулина или его антигенсвязывающего фрагмента. В другом варианте осуществления природный аминокислотный остаток, который был подвергнут мутации с заменой на генно-инженерно модифицированный остаток лизина, является Треонином 135 (T135K) на тяжелой цепи иммуноглобулина или его антигенсвязывающего фрагмента, и второй природный аминокислотный остаток, который был подвергнут мутации с заменой на второй генно-инженерно модифицированный остаток лизина, является Лейцином 201 (L201K) на каппа легкой цепи иммуноглобулина или его антигенсвязывающего фрагмента. В еще одном варианте осуществления природный аминокислотный остаток, который был подвергнут мутации с заменой на генно-инженерно модифицированный остаток лизина, является Треонином 135 (T135K) на тяжелой цепи иммуноглобулина или его антигенсвязывающего фрагмента, и второй природный аминокислотный остаток, который был подвергнут мутации с заменой на второй генно-инженерно модифицированный остаток лизина, является Серином 202 (S202K) на каппа легкой цепи иммуноглобулина или его антигенсвязывающего фрагмента. В другом варианте осуществления тяжелая цепь дополнительно включает аминокислотный остаток, который был присоединен к ее C-концу в положении 448, и где указанный аминокислотный остаток не является пролином или кислотным аминокислотным остатком. В еще одном аспекте аминокислотный остаток, который был добавлен на C-конец в положении 448, является лейцином.
[0022] В одном варианте осуществления иммуноглобулин дополнительно включает третий генно-инженерно модифицированный остаток лизина, где третий генно-инженерно модифицированный остаток лизина является третьей вставкой остатка лизина или третьим природным аминокислотным остатком, который был подвергнут мутации с заменой на остаток лизина, и где микробная трансглутаминаза конъюгирует третий генно-инженерно модифицированный остаток лизина иммуноглобулина или его антигенсвязывающего фрагмента с остатком глутамина ацил-донорного субстрата. В одном варианте осуществления первый природный аминокислотный остаток, который был подвергнут мутации с заменой на генно-инженерно модифицированный остаток лизина, является Серином 136 (S136K) на тяжелой цепи иммуноглобулина или его антигенсвязывающего фрагмента, второй природный аминокислотный остаток, который был подвергнут мутации с заменой на второй генно-инженерно модифицированный остаток лизина, является Аспарагином 297 (N297K) на тяжелой цепи иммуноглобулина или его антигенсвязывающего фрагмента, и третий природный аминокислотный остаток, который был подвергнут мутации с заменой на третий генно-инженерно модифицированный остаток лизина, является Серином 202 (S202K) на каппа легкой цепи иммуноглобулина или его антигенсвязывающего фрагмента.
[0023] В одном варианте осуществления иммуноглобулин или его антигенсвязывающий фрагмент дополнительно включают четвертый генно-инженерно модифицированный остаток лизина, где четвертый генно-инженерно модифицированный остаток лизина является четвертой вставкой остатка лизина или четвертым природным аминокислотным остатком, который был подвергнут мутации с заменой на остаток лизина, и где микробная трансглутаминаза конъюгирует четвертый генно-инженерно модифицированный остаток лизина иммуноглобулина или его антигенсвязывающего фрагмента с остатком глутамина ацил-донорного субстрата. В другом варианте осуществления первый природный аминокислотный остаток, который был подвергнут мутации с заменой на генно-инженерно модифицированный остаток лизина, является Серином 136 (S136K) на тяжелой цепи иммуноглобулина или его антигенсвязывающего фрагмента, второй природный аминокислотный остаток, который был подвергнут мутации с заменой на второй генно-инженерно модифицированный остаток лизина, является Аспарагином 297 (N297K) на тяжелой цепи иммуноглобулина или его антигенсвязывающего фрагмента, третий природный аминокислотный остаток, который был подвергнут мутации с заменой на третий генно-инженерно модифицированный остаток лизина, является Серином 202 (S202K) на каппа легкой цепи иммуноглобулина или его антигенсвязывающего фрагмента, и четвертый природный аминокислотный остаток, который был подвергнут мутации с заменой на четвертый генно-инженерно модифицированный остаток лизина, является Пролином 445 (P445K) на тяжелой цепи иммуноглобулина или его антигенсвязывающего фрагмента.
[0024] В одном варианте осуществления аминокислотный остаток после генно-инженерно модифицированного остатка лизина не является пролином или кислотным аминокислотным остатком. В другом варианте осуществления аминокислотный остаток перед генно-инженерно модифицированным остатком лизина не является кислотным аминокислотным остатком. В другом варианте осуществления мутация аминокислотного остатка после генно-инженерно модифицированного остатка лизина с заменой на любую аминокислоту кроме пролина или кислотного аминокислотного остатка и мутация аминокислотного остатка перед генно-инженерно модифицированным остатком лизина с заменой на любую аминокислоту кроме кислотного аминокислотного остатка дают оптимальную последовательность для сконструированного ацил-акцепторного лизинового сайта.
[0025] В одном варианте осуществления аминокислотный остаток перед генно-инженерно модифицированным остатком лизина является вставкой некислотного аминокислотного остатка или природным кислотным аминокислотным остатком, который был подвергнут мутации с заменой на некислотный аминокислотный остаток. В одном варианте осуществления аминокислотный остаток после генно-инженерно модифицированного остатка лизина является вставкой аминокислотного остатка, где вставка аминокислотного остатка является вставкой некислотного аминокислотного и вставкой непролинового остатка, или природным кислотным аминокислотным остатком или природным пролиновым остатком, который был подвергнут мутации с заменой на некислотный аминокислотный остаток и непролиновый остаток. В одном варианте осуществления некислотным аминокислотным остатком является лизин, аргинин, гистидин, серин, треонин, аспарагин, глутамин, цистеин, глицин, пролин, аланин, валин, изолейцин, лейцин, метионин, фенилаланин, тирозин или триптофан. В одном варианте осуществления вставка некислотного аминокислотного остатка является вставкой лизина, аргинина, гистидина, серина, треонина, аспарагина, глутамина, цистеина, глицина, пролина, аланина, валина, изолейцина, лейцина, метионина, фенилаланина, тирозина или триптофана. В одном варианте осуществления некислотным аминокислотным и непролиновым остатком является лизин, аргинин, гистидин, серин, треонин, аспарагин, глутамин, цистеин, глицин, аланин, валин, изолейцин, лейцин, метионин, фенилаланин, тирозин или триптофан. В одном варианте осуществления природным кислотным аминокислотным остатком является аспарагиновая кислота или глутаминовая кислота.
[0026] В одном варианте осуществления иммуноглобулин или его антигенсвязывающий фрагмент включают тяжелую цепь, которая дополнительно включает по меньшей мере один аминокислотный остаток, который был присоединен к ее C-концу в положении 448, и где указанный по меньшей мере один аминокислотный остаток не является пролином или кислотным аминокислотным остатком. В другом варианте осуществления по меньшей мере один аминокислотный остаток, который был добавлен на C-конец в положении 448, является лейцином.
[0027] В одном варианте осуществления иммуноглобулин или его антигенсвязывающий фрагмент включают легкую цепь, которая включает вставку одной - четырех дополнительных аминокислот после цистеина 214, где вставка остатка лизина является остатком лизина, который был вставлен после одной - четырех дополнительных аминокислот, и где остаток лейцина был вставлен после остатка лизина. В другом варианте осуществления вставка одной - четырех дополнительных аминокислот после цистеина 214, остаток лизина, который был вставлен после одной - четырех дополнительных аминокислот, и остаток лейцина, который был вставлен после остатка лизина, включает последовательность, выбранную из группы, состоящей из: GKL, GGKL, GGSKL и GGSGKL. В одном варианте осуществления иммуноглобулин или его антигенсвязывающий фрагмент включают легкую цепь, которая включает вставку последовательности GGSGKL после цистеина 214.
[0028] В одном варианте осуществления функциональное средство, включающее ацил-донорный субстрат, соответствует Формулам (I) или (II):
(Z)m-Gln-(L)n-(Y) (I)
(Y)-(L)n-Gln-(Z)m (II)
[0029] где Z является карбоксибензилокси (CBZ) группой или аминокислотным остатком; Gln является остатком аминокислоты глутамина; каждый L независимо является нормальным или разветвленным линкером, содержащим от 1 до 20 атомов углерода, где один или более атомов углерода необязательно и независимо могут быть заменены атомом азота, кислорода или серы, и где каждый атом углерода и азота необязательно может быть замещен; или каждый L необязательно и независимо является аминокислотным остатком; m является целым числом от 0 до 5; n является целым числом от 0 до 5; и Y является функциональным средством.
[0030] В одном варианте осуществления функциональное средство, включающее ацил-донорный субстрат, соответствует формуле (I), и где Z является CBZ группой; где L является полиэтиленгликолевой группой (ПЭГ) (-O((CH2)2)-), этиламином (-NH((CH2)2)-) или пропиламином (-NH((CH2)3)-); и где n является 0, 1, 2 или 3. В одном варианте осуществления L является полиэтиленгликолевой группой (ПЭГ). В другом варианте осуществления L включает одну или более аминокислот и полиэтиленгликолевую группу (ПЭГ). В другом варианте осуществления функциональное средство, включающее ацил-донорный субстрат, соответствует формуле (I), где Z является CBZ группой, и где L является аминокислотой. В одном варианте осуществления L является Gly; m является 1; и n является 1. В другом варианте осуществления функциональное средство, включающее ацил-донорный субстрат, соответствует формуле (II), где Z является CBZ группой; m является 1; n является 2, 3 или 4; и по меньшей мере один L является Gly; и по меньшей мере один L является ПЭГ группой. В другом варианте осуществления функциональное средство, включающее ацил-донорный субстрат, соответствует формуле (II), где Z является CBZ группой; m является 1; n является 4; один L является Gly, и остальные три группы L является ПЭГ группами. В другом варианте осуществления функциональным средством Y является ауристатин F.
[0031] В одном варианте осуществления ацил-донорный субстрат соответствует Формулам (III) или (IV):
(Z)m-Gln-(L)n-(X) (III)
(X)-(L)n-Gln-(Z)m (IV)
где Z является карбоксибензилокси (CBZ) группой или аминокислотным остатком; Gln является остатком аминокислоты глутамина; каждый L независимо является нормальным или разветвленным линкером, содержащим от 1 до 20 атомов углерода, где один или более атомов углерода необязательно и независимо могут быть заменены атомом азота, кислорода или серы, и где каждый атом углерода и азота необязательно может быть замещен; или каждый L необязательно и независимо является аминокислотным остатком; m является целым числом от 0 до 5; n является целым числом от 0 до 5; и X является реакционноспособной группой.
[0032] В одном варианте осуществления L является полиэтиленгликолевой группой (ПЭГ). В другом варианте осуществления, когда n является 2-5, по меньшей мере один L включает одну или более аминокислот, и другой L является полиэтиленгликолевой (ПЭГ) группой. В одном варианте осуществления ацил-донорный субстрат соответствует формуле (III), и где Z является CBZ группой; где L является полиэтиленгликолевой (ПЭГ) группой (O((CH2)2)-), этиламином (-NH((CH2)2)-) или пропиламином (-NH((CH2)3)-); и где n является 0, 1, 2 или 3. В другом варианте осуществления ацил-донорный субстрат соответствует формуле (III), где Z является CBZ группой, и где L является аминокислотой. В одном варианте осуществления L является Gly; n является 1; и m является 1. В другом варианте осуществления ацил-донорный субстрат соответствует формуле (IV), где Z является CBZ группой; m является 1; n является 1, 2 или 3; и по меньшей мере один L является Gly.
[0033] В другом варианте осуществления X является реакционноспособной группой, выбранной из группы, состоящей из (1R,8S,9s)-бицикло[6.1.0]нон-4-ин-9-илметанола (BCN),
[Chem.1]
(дибензоциклооктина; DBCO), транс-циклооктена (TCO), азидо (N3), алкина, тетразин метилциклопропена, норборнена, гидразида/гидразина и альдегида.
[0033] В одном варианте осуществления терапевтическое средство является антителом или его антигенсвязывающим фрагментом, химиотерапевтическим средством, лекарственным средством, радиоактивным средством, цитотоксическим средством, антибиотиком, малой молекулой, нуклеиновой кислотой или полипептидом. В другом варианте осуществления диагностическое средство является флуорофором, флуоресцентным красителем, радионуклидом или ферментом.
[0035] В одном варианте осуществления микробная трансглутаминаза получена из Streptomyces mobaraensis.
[0036] В одном варианте осуществления иммуноглобулин или его антигенсвязывающий фрагмент является иммуноглобулином IgG1 или его антигенсвязывающим фрагментом. В другом варианте осуществления иммуноглобулин или его антигенсвязывающий фрагмент является иммуноглобулином IgG2, IgG3 или IgG4 или их антигенсвязывающим фрагментом. В одном варианте осуществления иммуноглобулин является иммуноглобулином IgA1, IgA2 или IgM. В одном варианте осуществления иммуноглобулином или его антигенсвязывающий фрагмент является иммуноглобулином IgD или IgE или их антигенсвязывающим фрагментом.
[0037] В одном варианте осуществления иммуноглобулин или его антигенсвязывающий фрагмент, является человеческим иммуноглобулином или его антигенсвязывающим фрагментом, или гуманизированным иммуноглобулином или его антигенсвязывающим фрагментом. В одном варианте осуществления иммуноглобулин или его антигенсвязывающий фрагмент является химерным иммуноглобулином или нечеловеческим иммуноглобулином или их антигенсвязывающим фрагментом.
[0038] В одном варианте осуществления иммуноглобулин или его антигенсвязывающий фрагмент включают две тяжелых цепи и две легких цепи. В одном варианте осуществления отсутствует внутримолекулярное сшивание, т.е. отсутствует дисульфидная связь (связи), между двумя тяжелыми цепями иммуноглобулина или его антигенсвязывающего фрагмента.
[0039] В одном варианте осуществления отношение функционального средства к иммуноглобулину или его антигенсвязывающему фрагменту составляет от 1:1 до 200:1 или от 1:1 до 100:1.
[0040] В другом аспекте в настоящем документе описан конъюгированный иммуноглобулин, включающий иммуноглобулин или его антигенсвязывающий фрагмент и функциональное средство, где иммуноглобулин включает генно-инженерно модифицированный остаток лизина, и где генно-инженерно модифицированный остаток лизина является вставкой остатка лизина или природным аминокислотным остатком, который был подвергнут мутации с заменой на остаток лизина, функциональное средство включает ацил-донорный субстрат, где ацил-донорный субстрат включает остаток глутамина, и функциональное средство является терапевтическим средством или диагностическим средством, где генно-инженерно модифицированный остаток лизина иммуноглобулина или его антигенсвязывающего фрагмента конъюгирован с остатком глутамина ацил-донорного субстрата функционального средства. В одном варианте осуществления генно-инженерно модифицированный остаток лизина присутствует в тяжелой цепи. В одном варианте осуществления генно-инженерно модифицированный остаток лизина присутствует в константной области тяжелой цепи. В одном варианте осуществления генно-инженерно модифицированный остаток лизина присутствует в легкой цепи. В другом варианте осуществления генно-инженерно модифицированный остаток лизина присутствует в константной области легкой цепи. В одном варианте осуществления генно-инженерно модифицированный остаток лизина присутствует в каппа легкой цепи. В одном варианте осуществления генно-инженерно модифицированный остаток лизина присутствует в константной области каппа легкой цепи. В одном варианте осуществления генно-инженерно модифицированный остаток лизина присутствует в лямбда легкой цепи. В одном варианте осуществления генно-инженерно модифицированный остаток лизина присутствует в константной области лямбда легкой цепи. В одном варианте осуществления генно-инженерно модифицированный остаток лизина присутствует в вариабельной области. В одном варианте осуществления генно-инженерно модифицированный остаток лизина не присутствует в вариабельной области.
[0041] В другом аспекте в настоящем документе описан конъюгированный иммуноглобулин, включающий иммуноглобулин или его антигенсвязывающий фрагмент и функциональное средство, где иммуноглобулин или его антигенсвязывающий фрагмент включают генно-инженерно модифицированный остаток лизина, и где генно-инженерно модифицированный остаток лизина является вставкой остатка лизина или природным аминокислотным остатком, который был подвергнут мутации с заменой на остаток лизина, генно-инженерно модифицированный остаток лизина конъюгирован с остатком глутамина на ацил-донорном субстрате, где ацил-донорный субстрат дополнительно включает реакционноспособную группу, реакционноспособная группа конъюгирована с функциональным средством, где функциональное средство является терапевтическим средством или диагностическим средством. В одном варианте осуществления генно-инженерно модифицированный остаток лизина присутствует в тяжелой цепи. В одном варианте осуществления генно-инженерно модифицированный остаток лизина присутствует в константной области тяжелой цепи. В одном варианте осуществления генно-инженерно модифицированный остаток лизина присутствует в легкой цепи. В другом варианте осуществления генно-инженерно модифицированный остаток лизина присутствует в константной области легкой цепи. В одном варианте осуществления генно-инженерно модифицированный остаток лизина присутствует в каппа легкой цепи. В одном варианте осуществления генно-инженерно модифицированный остаток лизина присутствует в константной области каппа легкой цепи. В одном варианте осуществления генно-инженерно модифицированный остаток лизина присутствует в лямбда легкой цепи. В одном варианте осуществления генно-инженерно модифицированный остаток лизина присутствует в константной области лямбда легкой цепи. В одном варианте осуществления генно-инженерно модифицированный остаток лизина присутствует в вариабельной области. В одном варианте осуществления генно-инженерно модифицированный остаток лизина не присутствует в вариабельной области.
[0042] В одном варианте осуществления природный аминокислотный остаток, который был подвергнут мутации с заменой на остаток лизина, выбран из группы, состоящей из: Треонина 135 (T135K), Серина 136 (S136K), Лейцина 193 (L193K), Аспарагиновой кислоты 221 (D221K), Треонина 223 (T223K), Гистидина 224 (H224K), Треонина 225 (T225K), Метионина 252 (M252K), Аспарагина 297 (N297K) или Пролина 445 (P445K) на тяжелой цепи иммуноглобулина или его антигенсвязывающего фрагмента, Лейцина 201 (L201K) или Серина 202 (S202K) на каппа легкой цепи иммуноглобулина или его антигенсвязывающего фрагмента или Глутаминовой кислоты 213 (E213K) на лямбда легкой цепи иммуноглобулина или его антигенсвязывающего фрагмента. В одном варианте осуществления тяжелая цепь (до мутации) включает аминокислотную последовательность SEQ ID NO:18. В одном варианте осуществления каппа легкая цепь (до мутации) включает аминокислотную последовательность SEQ ID NO:19. В одном варианте осуществления лямбда легкая цепь (до мутации) включает аминокислотную последовательность SEQ ID NO:20.
[0043] В одном варианте осуществления тяжелая цепь дополнительно включает аминокислотный остаток, который был присоединен к ее C-концу в положении 448, и где указанный аминокислотный остаток не является пролином или кислотным аминокислотным остатком. В другом варианте осуществления по меньшей мере один аминокислотный остаток, который был добавлен на C-конец в положении 448, является лейцином.
[0044] В другом варианте осуществления иммуноглобулин или его антигенсвязывающий фрагмент включают легкую цепь, которая включает по меньшей мере один аминокислотный остаток, который был добавлен на C-конец после положения 214, где по меньшей мере один аминокислотный остаток является GGSGKL (глицин глицин серин глицин лизин лейцин). В другом варианте осуществления иммуноглобулин или его антигенсвязывающий фрагмент включают легкую цепь, которая дополнительно включает по меньшей мере один аминокислотный остаток, который был добавлен на C-конец после положения 214, где по меньшей мере один аминокислотный остаток является GGSGKL. В одном варианте осуществления иммуноглобулин или его антигенсвязывающий фрагмент включают легкую цепь, которая включает вставку последовательности GGSGKL после цистеина 214.
[0045] В одном варианте осуществления вставка остатка лизина является остатком лизина, который был вставлен между Серином 191 и Серином 192 или между Серином 192 и Лейцином 193 на тяжелой цепи иммуноглобулина или его антигенсвязывающего фрагмента.
[0046] В одном варианте осуществления иммуноглобулин или его антигенсвязывающий фрагмент является антигенсвязывающим фрагментом (Fab), и где природный аминокислотный остаток, который был подвергнут мутации с заменой на остаток лизина, выбран из группы, состоящей из: Аспарагиновой кислоты 221 (D221K), Треонина 223 (T223K), Гистидина 224 (H224K), Треонина 225 (T225K), Пролина 228 (P228K), Пролина 230 (P230K) и Глутаминовой кислоты 233 (E233K) на тяжелой цепи иммуноглобулина или его антигенсвязывающего фрагмента. В другом варианте осуществления Fab включает всю шарнирную область. В другом варианте осуществления Fab включает усеченную шарнирную область.
[0047] В одном варианте осуществления иммуноглобулин или его антигенсвязывающий фрагмент дополнительно включают второй природный аминокислотный остаток, который был подвергнут мутации с заменой на второй остаток лизина, и где микробная трансглутаминаза конъюгирует второй остаток лизина иммуноглобулина или его антигенсвязывающего фрагмента с остатком глутамина ацил-донорного субстрата. В другом варианте осуществления первый природный аминокислотный остаток, который был подвергнут мутации с заменой на остаток лизина, является Серином 136 (S136K) на тяжелой цепи иммуноглобулина или его антигенсвязывающего фрагмента, и второй природный аминокислотный остаток, который был подвергнут мутации с заменой на второй остаток лизина, является Серином 202 (S202K). В другом варианте осуществления природный аминокислотный остаток, который был подвергнут мутации с заменой на генно-инженерно модифицированный остаток лизина, является Треонином 135 (T135K) на тяжелой цепи иммуноглобулина или его антигенсвязывающего фрагмента, и второй природный аминокислотный остаток, который был подвергнут мутации с заменой на второй генно-инженерно модифицированный остаток лизина, является Лейцином 201 (L201K) на каппа легкой цепи иммуноглобулина или его антигенсвязывающего фрагмента. В еще одном варианте осуществления природный аминокислотный остаток, который был подвергнут мутации с заменой на генно-инженерно модифицированный остаток лизина, является Треонином 135 (T135K) на тяжелой цепи иммуноглобулина или его антигенсвязывающего фрагмента, и второй природный аминокислотный остаток, который был подвергнут мутации с заменой на второй генно-инженерно модифицированный остаток лизина, является Серином 202 (S202K) на каппа легкой цепи иммуноглобулина или его антигенсвязывающего фрагмента.
[0048] В другом варианте осуществления тяжелая цепь дополнительно включает по меньшей мере один аминокислотный остаток, который был присоединен к ее C-концу в положении 448, и где по меньшей мере один аминокислотный остаток не является пролином или кислотным аминокислотным остатком. В одном варианте осуществления по меньшей мере один аминокислотный остаток, который был добавлен на C-конец в положении 448, является лейцином.
[0049] В одном варианте осуществления иммуноглобулин дополнительно включает третий природный аминокислотный остаток, который был подвергнут мутации с заменой на третий остаток лизина, и где микробная трансглутаминаза конъюгирует третий остаток лизина иммуноглобулина или его антигенсвязывающего фрагмента с остатком глутамина ацил-донорного субстрата. В другом варианте осуществления первый природный аминокислотный остаток, который был подвергнут мутации с заменой на остаток лизина, является Серином 136 (S136K) на тяжелой цепи иммуноглобулина или его антигенсвязывающего фрагмента, второй природный аминокислотный остаток, который был подвергнут мутации с заменой на второй остаток лизина, является Аспарагином 297 (N297K) на тяжелой цепи иммуноглобулина или его антигенсвязывающего фрагмента, и третий природный аминокислотный остаток, который был подвергнут мутации с заменой на третий остаток лизина, является Серином 202 (S202K) на каппа легкой цепи иммуноглобулина или его антигенсвязывающего фрагмента.
[0050] В одном варианте осуществления иммуноглобулин или его антигенсвязывающий фрагмент дополнительно включают четвертый природный аминокислотный остаток, который был подвергнут мутации с заменой на четвертый остаток лизина, и где микробная трансглутаминаза конъюгирует четвертый остаток лизина иммуноглобулина или его антигенсвязывающего фрагмента с остатком глутамина ацил-донорного субстрата. В другом варианте осуществления первый природный аминокислотный остаток, который был подвергнут мутации с заменой на остаток лизина, является Серином 136 (S136K) на тяжелой цепи иммуноглобулина или его антигенсвязывающего фрагмента, второй природный аминокислотный остаток, который был подвергнут мутации с заменой на второй остаток лизина, является Аспарагином 297 (N297K) на тяжелой цепи иммуноглобулина или его антигенсвязывающего фрагмента, третий природный аминокислотный остаток, который был подвергнут мутации с заменой на третий остаток лизина, является Серином 202 (S202K) на каппа легкой цепи иммуноглобулина или его антигенсвязывающего фрагмента, и четвертый природный аминокислотный остаток, который был подвергнут мутации с заменой на четвертый остаток лизина, является Пролином 445 (P445K) на тяжелой цепи иммуноглобулина или его антигенсвязывающего фрагмента.
[0051] В одном варианте осуществления аминокислотный остаток после генно-инженерно модифицированного остатка лизина не является пролином или кислотным аминокислотным остатком. В другом варианте осуществления аминокислотный остаток перед генно-инженерно модифицированным остатком лизина не является кислотным аминокислотным остатком. В другом варианте осуществления мутация аминокислотного остатка после генно-инженерно модифицированного остатка лизина с заменой на любую аминокислоту кроме пролина или кислотного аминокислотного остатка и мутация аминокислотного остатка перед генно-инженерно модифицированным остатком лизина с заменой на любую аминокислоту кроме кислотного аминокислотного остатка дают оптимальную последовательность для сконструированного ацил-акцепторного лизинового сайта.
[0052] В одном варианте осуществления аминокислотный остаток перед генно-инженерно модифицированным остатком лизина является вставкой некислотного аминокислотного остатка или природным кислотным аминокислотным остатком, который был подвергнут мутации с заменой на некислотный аминокислотный остаток. В одном варианте осуществления аминокислотный остаток после генно-инженерно модифицированного остатка лизина является вставкой аминокислотного остатка, где вставка аминокислотного остатка является некислотным аминокислотным остатком и вставкой непролинового остатка или природным кислотным аминокислотным остатком или природным остатком пролина, который был подвергнут мутации с заменой на некислотный аминокислотный остаток и непролиновый остаток. В другом варианте осуществления некислотным аминокислотным остатком является лизин, аргинин, гистидин, серин, треонин, аспарагин, глутамин, цистеин, глицин, пролин, аланин, валин, изолейцин, лейцин, метионин, фенилаланин, тирозин или триптофан. В другом дополнительном варианте осуществления вставка некислотного аминокислотного остатка является вставкой лизина, аргинина, гистидина, серина, треонина, аспарагина, глутамина, цистеина, глицина, пролина, аланина, валина, изолейцина, лейцина, метионина, фенилаланина, тирозина или триптофана. В еще одном другом варианте осуществления некислотным аминокислотным и непролиновым остатком является лизин, аргинин, гистидин, серин, треонин, аспарагин, глутамин, цистеин, глицин, аланин, валин, изолейцин, лейцин, метионин, фенилаланин, тирозин или триптофан. В еще одном дополнительном варианте осуществления природный кислотный аминокислотный остаток является аспарагиновой кислотой или глутаминовой кислотой.
[0053] В одном варианте осуществления иммуноглобулин или его антигенсвязывающий фрагмент включают тяжелую цепь, которая дополнительно включает по меньшей мере один аминокислотный остаток, который был присоединен к ее C-концу в положении 448, и где по меньшей мере один аминокислотный остаток не является пролином или кислотным аминокислотным остатком. В другом варианте осуществления по меньшей мере один аминокислотный остаток, который был добавлен на C-конец в положении 448, является лейцином.
[0054] В одном варианте осуществления иммуноглобулин или его антигенсвязывающий фрагмент включают легкую цепь, которая включает вставку одной - четырех дополнительных аминокислот после цистеина 214, где вставка остатка лизина является остатком лизина, который был вставлен после одной - четырех дополнительных аминокислот, и где остаток лейцина был вставлен после остатка лизина. В другом варианте осуществления вставка одной - четырех дополнительных аминокислот после цистеина 214, остаток лизина, который был вставлен после одной - четырех дополнительных аминокислот и остаток лейцина, который был вставлен после остатка лизина, включают последовательность, выбранную из группы, состоящей из: GKL, GGKL, GGSKL и GGSGKL.
[0055] В одном варианте осуществления функциональное средство, включающее ацил-донорный субстрат, соответствует Формулам (I) или (II):
(Z)m-Gln-(L)n-(Y) (I)
(Y)-(L)n-Gln-(Z)m (II)
[0056] где Z является карбоксибензилокси (CBZ) группой или аминокислотным остатком; Gln является остатком аминокислоты глутамина; каждый L независимо является нормальным или разветвленным линкером, содержащим от 1 до 20 атомов углерода, где один или более атомов углерода необязательно и независимо могут быть заменены атомом азота, кислорода или серы, и где каждый атом углерода и азота необязательно может быть замещен; или каждый L необязательно и независимо является аминокислотным остатком; m является целым числом от 0 до 5; n является целым числом от 0 до 5; и Y является функциональным средством.
[0057] В одном варианте осуществления функциональное средство, включающее ацил-донорный субстрат, соответствует формуле (I), и где Z является CBZ группой; где L является полиэтиленгликолевой (ПЭГ) группой (-O((CH2)2)-), этиламином (-NH((CH2)2)-) или пропиламином (-NH((CH2)3)-); и где n является 0, 1, 2 или 3. В другом варианте осуществления функциональное средство, включающее ацил-донорный субстрат, соответствует формуле (I), где Z является CBZ группой, и где L является аминокислотой. В одном варианте осуществления L является Gly; m является 1; и n является 1. В одном варианте осуществления функциональное средство, включающее ацил-донорный субстрат, соответствует формуле (II), где Z является CBZ группой; m является 1; n является 1, 2 или 3; и по меньшей мере один L является Gly. В одном варианте осуществления L является полиэтиленгликолевой (ПЭГ) группой. В другом варианте осуществления L включает одну или более аминокислот и полиэтиленгликолевую (ПЭГ) группу. В другом варианте осуществления функциональное средство Y является ауристатином F.
[0058] В одном варианте осуществления ацил-донорный субстрат соответствует Формулам (III) или (IV):
(Z)m-Gln-(L)n-(X) (III)
(X)-(L)n-Gln-(Z)m (IV)
[0059] где Z является карбоксибензилокси (CBZ) группой или аминокислотным остатком; Gln является остатком аминокислоты глутамина; каждый L независимо является нормальным или разветвленным линкером, содержащим от 1 до 20 атомов углерода, где один или более атомов углерода необязательно и независимо могут быть заменены атомом азота, кислорода или серы, и где каждый атом углерода и азота необязательно может быть замещен; или каждый L необязательно и независимо является аминокислотным остатком; m является целым числом от 0 до 5; n является целым числом от 0 до 5; и X является реакционноспособной группой.
[0060] В одном варианте осуществления ацил-донорный субстрат соответствует формуле (III), и где Z является CBZ группой; где L является полиэтиленгликолевой (ПЭГ) группой (-O((CH2)2)-), этиламином (-NH((CH2)2)-) или пропиламином (-NH((CH2)3)-); и где n является 0, 1, 2 или 3. В другом варианте осуществления ацил-донорный субстрат соответствует формуле (III), где Z является CBZ группой, и где L является аминокислотой. В одном варианте осуществления L является Gly; m является 1; и n является 1. В другом варианте осуществления ацил-донорный субстрат соответствует формуле (IV), где Z является CBZ группой; m является 1; n является 1, 2 или 3; и по меньшей мере один L является Gly. В одном варианте осуществления L является полиэтиленгликолевой (ПЭГ) группой. В другом варианте осуществления, когда n является 2-5, то тогда по меньшей мере один L включает одну или более аминокислот, и один или более L включает полиэтиленгликолевую (ПЭГ) группу.
[0061] В одном варианте осуществления X является реакционноспособной группой, выбранной из группы, состоящей из (1R,8S,9s)-бицикло[6.1.0]нон-4-ин-9-илметанола (BCN),
[Chem.2]
(дибензоциклооктина; DBCO), транс-циклооктена (TCO), азидо (N3), алкина, тетразин метилциклопропена, норборнена, гидразида/гидразина и альдегида.
[0062] В одном варианте осуществления терапевтическое средство является антителом или его антигенсвязывающим фрагментом, химиотерапевтическим средством, лекарственным средством, радиоактивным средством, цитотоксическим средством, антибиотиком, малой молекулой, нуклеиновой кислотой или полипептидом. В другом варианте осуществления диагностическим средством является флуорофор, флуоресцентный краситель, радионуклид или фермент.
[0063] В одном варианте осуществления микробная трансглутаминаза получена из Streptomyces mobaraensis.
[0064] В одном варианте осуществления иммуноглобулин или его антигенсвязывающий фрагмент является иммуноглобулином IgG1 или его антигенсвязывающим фрагментом. В другом варианте осуществления иммуноглобулин или его антигенсвязывающий фрагмент является иммуноглобулином IgG2, IgG3 или IgG4 или их антигенсвязывающим фрагментом. В одном варианте осуществления иммуноглобулин или его антигенсвязывающий фрагмент является иммуноглобулином IgA1, IgA2 или IgM или их антигенсвязывающим фрагментом. В одном варианте осуществления иммуноглобулин или его антигенсвязывающий фрагмент является иммуноглобулином IgD или IgE или их антигенсвязывающим фрагментом.
[0065] В одном варианте осуществления иммуноглобулин или его антигенсвязывающий фрагмент является человеческим иммуноглобулином или его антигенсвязывающим фрагментом, или гуманизированным иммуноглобулином или его антигенсвязывающим фрагментом. В одном варианте осуществления иммуноглобулин или его антигенсвязывающий фрагмент является химерным иммуноглобулином или нечеловеческим иммуноглобулином или его антигенсвязывающим фрагментом.
[0066] В одном варианте осуществления иммуноглобулин или его антигенсвязывающий фрагмент включает две тяжелых цепи и две легких цепи. В одном варианте осуществления отсутствует внутримолекулярное сшивание между двумя тяжелыми цепями иммуноглобулина или его антигенсвязывающего фрагмента.
[0067] В одном варианте осуществления отношение функционального средства к иммуноглобулину или его антигенсвязывающему фрагменту составляет от 1:1 до 200:1 или от 1:1 до 100:1.
[0068] В одном варианте осуществления функциональное средство является антителом или его антигенсвязывающим фрагментом, и где иммуноглобулин или его антигенсвязывающий фрагмент и функциональное средство связывают один и тот же антиген или связывают разные антигены.
[0069] В другом аспекте в настоящем документе описана нуклеиновая кислота, кодирующая конъюгируемый иммуноглобулин. В другом аспекте в настоящем документе описана плазмида, включающая нуклеиновую кислоту. В другом варианте осуществления в настоящем документе описана выделенная клетка, включающая плазмиду.
[0070] В другом аспекте в настоящем документе описана фармацевтическая композиция, включающая конъюгированный иммуноглобулин и фармацевтически приемлемый носитель.
[0071] В одном аспекте в настоящем документе описан конъюгированный иммуноглобулин, полученный любым из способов, описанных в настоящем документе. В одном варианте осуществления способ дополнительно включает этап очистки иммуноглобулина, конъюгированного с остатком глутамина ацил-донорного субстрата, перед конъюгированием функционального средства с реакционноспособной группой ацил-донорного субстрата. В одном варианте осуществления этап очистки включает методы на основе размера, такие как хроматографию или диафильтрацию. В другом варианте осуществления этап очистки включает разделение на основе заряда, такое как катионообменную или анионообменную хроматографию. В другом варианте осуществления этап очистки включает этап на основе аффинности, такой как хроматографию с белком A или белком G и хроматографию гидрофобного взаимодействия (HIC).
[0072] Краткое описание, а также следующее подробное описание становится более понятным при прочтении в сочетании с прилагаемыми чертежами. В целях иллюстрации раскрытых способов и конъюгированных иммуноглобулинов, на чертежах показаны примеры осуществления; однако способы и конъюгированные иммуноглобулины не ограничиваются конкретными раскрытыми вариантами осуществления. На чертежах:
КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ЧЕРТЕЖЕЙ
[0073] [фиг. 1] На ФИГ. 1 показана реакция трансглутаминазы, где трансглутаминаза катализирует образование изопептидной связи между ацил-донорным глутамином и ацил-акцепторным лизином с выделением молекулы аммиака.
[фиг. 2] На ФИГ. 2 показаны структуры примерных Z-Gln-Gly ацил-донорных субстратов.
[фиг. 3] На ФИГ. 3 показаны возможные пути синтеза примерных Z-Gln-Gly ацил-донорных субстратов.
[фиг. 4] На ФИГ. 4А, 4B и 4C показаны доступные для растворителя лизины (стержневая модель) в кристаллических структурах Fab и Fc человеческого IgG1; (ФИГ. 4A) VH-CH1 и Vκ-Cκ Fab, (ФИГ. 4B) VH-CH1 и Vλ-Cλ Fab и (ФИГ. 4C) CH2 и CH3 Fc определяли при использовании Discovery Studio 4.5 с молекулярным радиусом 1,4 
.
[фиг. 5] На ФИГ. 5А, 5B, 5C, 5D, 5E и 5F показан ЭРИ-МС анализ антител при контакте с донором ацила и микробной трансглутаминазой. Антитела подвергали контакту с 50-кратным молярным избытком Z-Gln-Gly-CAD-биотин и 1 Ед/мл микробной трансглутаминазы в течение ночи при 37°C. После расщепления IdeS и восстановления, массы LC, Fd и Fc определяли с помощью ЭРИ-МС.
[фиг. 6] На ФИГ. 6 показаны последовательности человеческого IgG1, каппа и лямбда константных доменов. Доступные для растворителя лизины в константных доменах на основе кристаллических структур 1FC1 (Fcγ), 4F3F (CH1 и Cκ) и 4HK0 (Cλ) выделены жирным шрифтом; лизины в петлях подчеркнуты. Константные домены пронумерованы согласно системе нумерации EU.
[фиг. 7-1] На ФИГ. 7-1 и ФИГ. 7-2 показаны уровни конъюгирования очищенных мутантных по CH1 и шарнирной области мАт, подвергнутых скринингу на трансамидирование путем инкубирования мТГазы с Z-Gln-Gly-CAD-биотином в течение ночи при 37°C. Биотинилированные мАт обнаруживали с помощью ИФА, как подробно описано в разделе Материалы и методы, при этом анализировали относительные единицы флуоресценции (RFU). Массы HC и LC анализаровали с помощью ЭРИ-МС (данные не показаны) и определяли процент конъюгирования.
[фиг. 7-2] На ФИГ. 7-1 и ФИГ. 7-2 показаны уровни конъюгирования очищенных мутантных по CH1 и шарнирной области мАт, подвергнутых скринингу на трансамидирование путем инкубирования мТГазы с Z-Gln-Gly-CAD-биотином в течение ночи при 37°C. Биотинилированные мАт обнаруживали с помощью ИФА, как подробно описано в разделе Материалы и методы, при этом анализировали относительные единицы флуоресценции (RFU). Массы HC и LC анализаровали с помощью ЭРИ-МС (данные не показаны) и определяли процент конъюгирования.
[фиг. 8] На ФИГ. 8 показаны уровни конъюгирования мутантных по CH1, CH2, CH3 и шарнирной области мАт, ранее идентифицированных как обладающих наиболее высокой эффективностью конъюгирования. МАт инкубировали с Z-Gln-Gly-CAD-биотином и мТГазой при 37°C в течение ночи. Образцы расщепляли IdeS, восстанавливали и исследовали с помощью ЭРИ-МС, и определяли процент конъюгирования с Z-Gln-Gly-CAD-биотином (Δмасс=631 Да). DAR определяли путем деления Δмасс на массу Z-Gln-Gly-CAD-биотина.
[фиг. 9] На ФИГ. 9 показана эффективность конъюгирования мАт с множеством акцепторов ацила с различными донорами ацила. МАт инкубировали с Z-Gln-Gly-N3, Z-Gln-Gly-PEG2-BCN или Z-Gln-Gly-PEG2-AuF и мТГазой при 37°C в течение ночи. Массы восстановленных LC исследовали с помощью ЖХ-МС (данные не показаны), и определяли процент конъюгирования с Z-Gln-Gly-CAD-биотином (Δмасс=631 Да).
[фиг. 10] На ФИГ. 10 показано выравнивание изотипов IgG Fc. Выровнены первичные аминокислотные последовательности Fc IgG1, 2, 3 и 4 человека и подчеркнуты различия. Остатки Met252, Asn297 и Pro445 в IgG1 обозначены X.
[фиг. 11] На ФИГ. 11 показаны Fab-фрагменты с акцептором ацила, конъюгированные с Q295 и/или Q297 ацил-донорным сайтом в мутантном мАт. Антитело 01-N297Q инкубировали с Fab' лизиновыми мутантами и мТГазой в течение ночи при 37°C. Образцы восстанавливали и анализировали с помощью ДСН-ПААГЭ при использовании 4-12% Бис-Трис полиакриламидного геля. Масса димера FabCH1-HC составляет приблизительно 75 кДа, и тример FabCH1-HC-FabCH1 имеет массу приблизительно 100 кДа.
[фиг. 12] ФИГ. 12 представлены сконструированные ацил-акцепторные сайты, расположенные в мАт. Положения остатков, введенных с ацил-акцепторными сайтами, были подчеркнуты в (A) Fab (4F3F) HC и LC и (B) Fc (1FC1).
Описание вариантов осуществления
ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ
[0074] Раскрытые способы и конъюгированные иммуноглобулины могут быть лучше поняты при обращении к следующему подробному описанию, рассматриваемому в сочетании с сопровождающими фигурами, которые являются частью настоящего описания. Следует понимать, что раскрытые способы и конъюгированные иммуноглобулины не ограничиваются определенными вариантами осуществления, описанными и/или показанными в настоящем документе, и что терминология, используемая в настоящем документе, представлена в рамках описания конкретных вариантов осуществления исключительно в качестве примера и не должна рассматриваться как ограничение заявленных способов или конъюгированных иммуноглобулинов.
[0075] Если прямо не указано иное, любое описание в отношении возможного механизма или способа действия или причины улучшения должно быть исключительно иллюстративным, при этом раскрытые способы и конъюгированные иммуноглобулины не должны ограничиваться правильностью или неправильностью любого подобного предполагаемого механизма или способа действия или причины улучшения.
[0076] По всему тексту настоящего документа, описания относятся к конъюгированным иммуноглобулинам и способам их получения. В случае, когда в настоящем документе описан или заявлен признак или вариант осуществления, связанный с конъюгированным иммуноглобулином, такой признак или вариант осуществления в равной степени применим к способам его получения. Аналогичным образом, в случаях, когда в настоящем документе описан или заявлен признак или вариант осуществления, связанный со способом получения конъюгированного иммуноглобулина, такой признак или вариант осуществления в равной степени применим к конъюгированному иммуноглобулину.
[0077] Ссылка на конкретное числовое значение включает, по меньшей мере, конкретное значение, если из контекста прямо не следует иное. В случае, когда указан диапазон значений, другой вариант осуществления включает от одного конкретного значения и/или до другого конкретного значения. Кроме того, ссылка на значения, указанные в диапазонах, включает каждое значение в таком диапазоне. Все диапазоны являются включительными и комбинируемыми.
[0078] В случае, когда значения выражены как приближения при использовании условия "приблизительно", следует понимать, что конкретное значение формирует другой вариант осуществления.
[0079] Следует понимать, что некоторые признаки раскрытых способов и конъюгированных иммуноглобулинов, которые, в целях ясности, описаны в настоящем документе в контексте отдельных вариантов осуществления, также могут быть представлены в комбинации в одном варианте осуществления. С другой стороны, различные признаки раскрытых способов и конъюгированных иммуноглобулинов, которые, в целях краткости, описаны в контексте одного варианта осуществления, также могут быть представлены отдельно или в любой субкомбинации.
[0080] При использовании в настоящем документе, формы единственного числа (указанные артиклями "a," "an" и "the" в оригинальном тексте заявки) включают множественные ссылки.
[0081] Различные термины, связанные с аспектами описания, используются по всему тексту настоящего описания и формулы изобретения. Такие термины должны иметь свое обычное значение в уровне техники, если не указано иное. Другие конкретно определенные термины следует рассматривать в соответствии с определениями, представленными в настоящем документе.
[0082] Термин "приблизительно" при использовании в отношении числовых диапазонов, сокращений или определенных значений используется для указания того, что указанные значения могут изменяться в пределах до 10% от указанного значения. Таким образом, термин "приблизительно" используется для включения изменений ±10% или меньше, изменений ±5% или меньше, изменений ±1% или меньше, изменений ±0,5% или меньше или изменений ±0,1% или меньше от указанного значения.
[0083] В целом термин "сконструированный" относится к манипуляции с молекулами нуклеиновых кислот или полипептидов с помощью синтетических способов (например, рекомбинантных технологий, пептидного синтеза in vitro, ферментативного или химического сшивания пептидов или других способов, обычно используемых в данной области).
[0084] При использовании в настоящем документе термин "генно-инженерно модифицированный аминокислотный остаток", относится к неприродному аминокислотному остатку в контексте последовательности. При использовании в настоящем документе термин "генно-инженерно модифицированный остаток нуклеиновой кислоты" относится к неприродному остатку нуклеиновой кислоты в контексте последовательности. Эти термины включают, например, полипептидную последовательность или последовательность нуклеиновой кислоты, которая включает одну или более аминокислотных или нуклеотидных изменений, в том числе присоединений, делеций или замен, по сравнению с соответствующей природной полипептидной последовательностью или последовательностью нуклеиновой кислоты, где такие изменения были введены с помощью технологий рекомбинантных ДНК. Например, "генно-инженерно модифицированный остаток лизина" является остатком лизина, который не существовал в соответствующей природной полипептидной последовательности или полипептидной последовательности дикого типа и был введен в полипептид либо в результате мутации существующего аминокислотного остатка, либо путем вставки остатка лизина, когда последовательности дикого типа и сконструированный вариант выровнены. Генно-инженерно модифицированный аминокислотный остаток не является синтетическим аминокислотным остатком. Например, генно-инженерно модифицированный остаток лизина не является синтетическим остатком лизина.
[0085] В одном варианте осуществления "генно-инженерно модифицированный аминокислотный остаток" является вставкой аминокислотного остатка. Например, аминокислотный остаток или остатки могут быть вставлены между двумя природными аминокислотными остатками. В другом варианте осуществления "генно-инженерно модифицированный аминокислотный остаток" является природным аминокислотным остатком, который был подвергнут мутации с заменой на другой аминокислотный остаток. Например, генно-инженерно модифицированный остаток лизина может быть природным аминокислотным остатком (например, гистидином, изолейцином, лейцином, метионином, фенилаланином, треонином, триптофаном, валином, аланином, аргинином, аспарагином, аспарагиновой кислотой, цистеином, глутаминовой кислотой, глутамином, глицином, пролином, серином или тирозином), который был подвергнут мутации, например, с использованием технологий рекомбинации ДНК, с заменой на остаток лизина. Специалисты в данной области могут с легкостью получить сконструированную полипептидную последовательность, применимую согласно данному аспекту изобретения. Сконструированные полипептидные последовательности могут быть получены любым образом, включая, например, синтез пептидов, полипептидов или белков.
[0086] При использовании в настоящем документе термин "вставка" или "присоединение" относится к изменению аминокислотной или нуклеотидной последовательности, приводящему к добавлению одного или более аминокислотных остатков или нуклеотидов, соответственно, по сравнению с природной молекулой (например, последовательностью дикого типа). Вставка или добавление одного или более аминокислотных остатков могут происходить между внутренними аминокислотными остатками. В альтернативе вставка может происходить на N-конце аминокислотной последовательности. В альтернативе вставка может происходить на C-конце аминокислотной последовательности.
[0087] Термин "природная аминокислота", "природный аминокислотный остаток", "существующая в природе аминокислота" или "существующий в природе аминокислотный остаток" относятся к природным аминокислотам, которые, как правило, присутствуют в контексте полипептидной последовательности дикого типа. Другими словами, "природная аминокислота" не была подвергнута мутации или изменению каким-либо образом, в результате чего она отличается от аминокислотного остатка, присутствующего в исходной последовательности, например природной последовательности. "Природная аминокислота" включает аминокислоты в любом положении в полипептидной последовательности (например, внутренние аминокислотные остатки), а также любую аминокислоту на N-конце или C-конце полипептидной последовательности.
[0088] Термин "ацил-донорный субстрат" относится к группе с концевой ацильной группой на ней. Предпочтительно "ацил-донорный субстрат" включает остаток глутамина. Ацил-донорный субстрат может необязательно содержать другую реакционноспособную группу. В первом варианте осуществления ацил-донорный субстрат ковалентно связан с функциональным средством. Во втором варианте осуществления ацил-донорный субстрат не связан с функциональным средством. В одном варианте осуществления ацил-донорный субстрат включает остаток глутамина и реакционноспособную группу. В другом варианте осуществления ацил-донорный субстрат включает один или более линкеров, как описано далее в настоящем документе. В любом из представленных выше вариантов осуществления необязательно присутствует линкер между ацил-донорным субстратом и функциональным средством или между ацил-донорным субстратом и реакционноспособной группой.
[0089] Термин "антитело" при использовании в настоящем документе в широком смысле относится к любой молекуле иммуноглобулина (Ig), состоящей из четырех полипептидных цепей, двух тяжелых (H) цепей и двух легких (L) цепей. Термин "антитело" при использовании в настоящем документе также относится к любому антигенсвязывающему фрагменту, мутанту, варианту или производному молекулы иммуноглобулина, которые по существу сохраняют эпитопсвязывающие свойства молекулы Ig. Такие форматы мутантов, вариантов или производных антитела известны в уровне техники, и их неограничивающие варианты осуществления обсуждаются в настоящем документе. В одном варианте осуществления антитело является гуманизированным антителом. В другом варианте осуществления антитело является человеческим антителом. В другом варианте осуществления антитело является химерным антителом. В другом варианте осуществления антитело является нечеловеческим антителом.
[0090] В полноразмерном антителе каждая тяжелая цепь состоит из вариабельной области тяжелой цепи (сокращенно указанной в настоящем документе как HCVR или VH) и константной области тяжелой цепи. Константная область тяжелой цепи состоит из трех доменов, CH1, CH2 и CH3. Каждая легкая цепь состоит из вариабельной области легкой цепи (сокращенно указанной в настоящем документе как LCVR или VL) и константной области легкой цепи. Константная область легкой цепи состоит из одного домена, CL. Области VH и VL могут быть также подразделены на области гипервариабельности, называемые определяющими комплементарность областями (CDR), которые чередуются с областями, которые являются более консервативными, называемыми каркасными областями (FR). Каждая VH и VL состоит из трех CDR и четырех FR, расположенных от N-конца к C-концу в следующем порядке: FR1, CDR1, FR2, CDR2, FR3, CDR3, FR4. Молекулы иммуноглобулина могут быть любого типа (например, IgG, IgT, IgM, IgD, IgA и IgY), класса (например, IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, IgA1 и IgA2) или субкласса.
[0091] Термин "антигенсвязывающий фрагмент" антитела (или просто "фрагмент антитела") при использовании в настоящем документе относится к одному или более фрагментам антитела, которые сохраняют способность специфично связываться с антигеном. Было показано, что антигенсвязывающую функцию антитела могут выполнять фрагменты полноразмерного антитела. Такие варианты осуществления антитела также могут иметь биспецифичный, двухспецифичный или мультиспецифичный формат; специфично связываться с двумя или более разными антигенами. Примеры связывающих фрагментов, охваченных термином "антигенсвязывающий фрагмент" антитела, включают: (i) Fab-фрагмент, моновалентный фрагмент, состоящий из VL, VH, CL и CH1 доменов; (ii) Fab'-фрагмент, Fab, содержащий шарнирную область, не связанную дисульфидной связью либо в результате мягкого восстановления, либо мутации или удаления цистеинов; (iii) F(ab')2-фрагмент, бивалентный фрагмент, включающий два Fab-фрагмента, связанных дисульфидной связью в шарнирной области; (iv) Fd-фрагмент, состоящий из VH и CH1 доменов; (v) Fv-фрагмент, состоящий из VL и VH доменов одного плеча антитела, (vi) dAb-фрагмент (Ward et al., (1989) Nature 341:544-546, Winter et al., публикация PCT WO 90/05144 A1, включенная в настоящую заявку посредством отсылки), который включает один вариабельный домен; и (vii) выделенную определяющую комплементарность область (CDR). Кроме того, хотя два домена Fv-фрагмента, VL и VH, кодируются отдельными генами, они могут быть соединены при использовании рекомбинантных методов, синтетического линкера, который позволяет получать их в виде одной белковой цепи, в которой области VL и VH спарены, образуя моновалентные молекулы (известные как одноцепочечный Fv (scFv); см., например, Bird et al. (1988) Science 242:423-426; и Huston et al. (1988) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 85:5879-5883). Такие одноцепочечные антитела также должны быть охвачены термином "антигенсвязывающий фрагмент" антитела. Также охвачены другие формы одноцепочечных антител, такие как диатела. Диатела представляют собой бивалентные, биспецифичные антитела, в которых VH и VL домены экспрессируются на одной полипептидной цепи, но с использованием линкера, который слишком короткий, чтобы допускать спаривание между двумя доменами на одной цепи, в результате чего домены вынуждены спариваться с комплементарными доменами другой цепи и образовывать два антигенсвязывающих участка (см., например, Holliger, P., et al. (1993) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 90:6444-6448; Poljak, R. J., et al. (1994) Structure 2:1121-1123). Такие связывающие части антител известны в уровне техники (Kontermann and Dubel eds., Antibody Engineering (2001) Springer-Verlag. New York. 790 pp. (ISBN 3-540-41354-5).
[0092] "Кислотная аминокислота" относится к аминокислоте, имеющей отрицательный заряд при физиологическом pH. Генетически кодируемые кислотные аминокислоты включают аспарагиновую кислоту (Asp; D) и глутаминовую кислоту (Glu; E).
[0093] "Некислотная аминокислота" относится к аминокислоте, которая не является кислотной аминокислотой. Некислотные аминокислоты включают аргинин (Arg; R), гистидин (His; H), лизин (Lys; K), серин (Ser; S); треонин (Thr; T), аспарагин (Asn; N), глутамин (Gln; Q), цистеин (Cys; C), глицин (Gly; G), пролин (Pro; P), аланин (Ala; A), валин (Val; V); изолейцин (Ile; I), лейцин (Leu; L), метионин (Met; M), фенилаланин (Phe; F), тирозин (Tyr; Y) и триптофан (Trp; W).
[0094] "Основная аминокислота" относится к аминокислоте, имеющей положительный заряд при физиологическом pH. Генетически кодируемые основные аминокислоты включают гистидин (His; H), лизин (Lys, K) и аргинин (Arg; R).
[0095] При использовании в настоящем документе термин "биологический образец" относится к образцу, полученному у субъекта, в том числе образцу биологической ткани или жидкости, полученному in vivo или in vitro. Такие образцы могут быть, без ограничения перечисленными, физиологической жидкостью (например, кровью, плазмой крови, сывороткой, молоком, спинномозговой жидкостью, асцитной жидкостью или мочой), органами, тканями, фракциями и клетками, выделенными у млекопитающих, включая людей. Биологические образцы также могут включать срезы биологического образца, включающего ткани (например, срезы органа или ткани). Биологические образцы также могут включать экстракты из биологического образца, например, антиген из биологической жидкости (например, крови или мочи).
[0096] Термин "клик-химия" относится к особым реакциям для синтеза белка и/или конъюгирования, которые отличаются высоким выходом, высокой селективностью, надежностью и чистотой. См., например, King et al., "Developments in the Field of Bioorthagonal Bond Forming Reactions - Past and Present Trends", Bioconjug. Chem., (2014) 25(5): 825-839; McKay et al., "Click Chemistry in Complex Mixtures: Bioorthagonal Bioconjugation", Chem. Biol., (2014) 21(9): 1075-1101.
[0097] Термин "химеризированный", "химерный", "химерное антитело" и подобные термины относятся к иммуноглобулину, включающему вариабельную область тяжелой цепи и вариабельную область легкой цепи, т.е. антигенсвязывающую область, из одного источника или вида, и по меньшей мере часть константной области тяжелой цепи и константной области легкой цепи, полученной из другого источника или вида. Такие части могут быть соединены химически с помощью стандартных методов (например, синтетических) или получены в виде непрерывного полипептида с помощью методов генной инженерии (например, ДНК, кодирующая белковые фрагменты химерного антитела, может экспрессироваться с продукцией непрерывной полипептидной цепи). Другие формы "химерных иммуноглобулинов", охваченных настоящим описанием, являются такими иммуноглобулинами, в которых класс или субкласс были модифицированы или изменены по сравнению с исходным иммуноглобулином (также называемыми "иммуноглобулинами с переключенным классом"). В тексте настоящего описания химерные иммуноглобулины обозначены "xi." В настоящем документе "химерный иммуноглобулин" и подобные термины относятся к последовательности иммуноглобулина, а не к способу, применяемому для получения антитела.
[0098] При использовании в настоящем документе "функциональное средство" относится к средству, обладающему терапевтическим, диагностическим или другим функциональным свойством(ами). В одном варианте осуществления функциональное средство может быть терапевтическим средством. В другом варианте осуществления функциональное средство может быть диагностическим средством. Функциональные средства могут быть макромолекулами или малыми молекулами. Макромолекулярные функциональные средства включают, без ограничения перечисленным, антитело и его антигенсвязывающие фрагменты. Низкомолекулярные функциональные средства включают, без ограничения перечисленным, химиотерапевтические средства, цитотоксические средства, антибиотики, другие органические соединения, которые могут регулировать биологический процесс (например, лекарственные средства), и полипептиды.
[0099] Термин "гуманизированный", "гуманизированный иммуноглобулин" и подобные термины относятся к иммуноглобулинам, в которых каркасные или "определяющие комплементарность области" (CDR) были модифицированы путем включения CDR из иммуноглобулина с другой специфичностью по сравнению с исходным иммуноглобулином. В большинстве случаев гуманизированные иммуноглобулины являются человеческими иммуноглобулинами (реципиентным иммуноглобулином), в которых остатки из гипервариабельной области реципиента заменены остатками из гипервариабельной области не относящегося к человеку вида (донорного иммуноглобулина), такого как мышь, крыса, кролик или не относящийся к человеку примат, обладающей требуемой специфичностью, аффинностью и активностью. В некоторых случаях FR остатки человеческого иммуноглобулина заменяют соответствующими нечеловеческими остатками. Кроме того, гуманизированные иммуноглобулины могут включать остатки, которые не присутствуют в реципиентном иммуноглобулине или в донорном иммуноглобулине. Такие модификации производят для дополнительного улучшения эффективности иммуноглобулина. Как правило, гуманизированный иммуноглобулин будет включать по существу все из по меньшей мере одного, и как правило двух, вариабельных доменов, в которых все или по существу все гипервариабельные петли соответствуют гипервариабельным петлям из нечеловеческого иммуноглобулина, и все или по существу все FR-области являются FR-областями из последовательности человеческого иммуноглобулина. Гуманизированный иммуноглобулин необязательно также может включать, по меньшей мере, часть константной области иммуноглобулина (Fc), как правило, из человеческого иммуноглобулина. См., например, Riechmann, L., et al., Nature 332 (1988) 323-327; and Neuberger, M. S., et al., Nature 314 (1985) 268-270. В настоящем документе "гуманизированный иммуноглобулин" и подобные термины относятся к последовательности иммуноглобулина, а не к способу, применяемому для получения иммуноглобулина.
[0100] Термин "диагностическое средство" относится к соединению, которое может применяться для in vivo визуализационных исследований, таких как КТ, МРТ и рентген, и/или in vitro визуализационных исследований. Неограничивающие примеры диагностических средств включают флуорофор, флуоресцентный краситель, радионуклид и фермент.
[0101] Термин "донорный иммуноглобулин" относится к нечеловеческому иммуноглобулину, который предоставляет аминокислотные последовательности своих вариабельных областей, CDR или других функциональных фрагментов или аналогов гуманизированному иммуноглобулину и, таким образом, придает гуманизированному иммуноглобулину антигенную специфичность и нейтрализирующую активность, характерные для донорного иммуноглобулина.
[0102] Термин "реципиентный иммуноглобулин" относится к иммуноглобулину, гетерологичному по отношению к донорному иммуноглобулину, который предоставляет аминокислотные последовательности своих каркасных областей тяжелой и/или легкой цепи и/или своих константных областей тяжелой и/или легкой цепи гуманизированному иммуноглобулину. Реципиентный иммуноглобулин может быть получен у любого млекопитающего. В предпочтительных вариантах осуществления реципиентный иммуноглобулин является неиммуногенным при введении людям. Предпочтительно реципиентный иммуноглобулин является человеческим иммуноглобулином.
[0103] "Гуманизация" относится к процессу создания гуманизированного иммуноглобулина и включает любой способ создания гуманизированных иммуноглобулинов, имеющих вышеуказанные свойства, в том числе, без ограничения, гуманизацию in silico, инженерию чужих/своих CDR-областей в человеческих иммуноглобулинах, замену остатков в каркасных областях химерного иммуноглобулина, чтобы они совпадали с соответствующей человеческой каркасной областью, и т.д.
[0104] "Иммуноглобулин" при использовании в настоящем документе относится к белку, состоящему из одного или более полипептидов, по существу кодируемых иммуноглобулиновыми генами, включающему каппа и лямбда легкие цепи и альфа, гамма, дельта, эпсилон и мю тяжелые цепи. "Легкие цепи" полноразмерного иммуноглобулина (приблизительно 25 кДа или 214 аминокислот) кодируются геном вариабельной области на NH2-конце (приблизительно 110 аминокислот) и геном каппа или лямбда константной области на COOH-конце. "Тяжелые цепи" полноразмерного иммуноглобулина (приблизительно 50 кДа или 446 аминокислот) так же кодируются геном вариабельной области (приблизительно 116 аминокислот) и одним из других вышеуказанных генов константной области, например, гамма (кодирующим приблизительно 330 аминокислот). "Иммуноглобулины" включают: (a) иммуноглобулиновые полипептиды, т.е. полипептиды семейства иммуноглобулинов, которые содержат антигенсвязывающий участок, который специфично связывается со специфическим антигеном, включая все изотипы иммуноглобулина (IgG, IgA, IgE, IgM, IgD и IgY), классы (например, IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, IgA1, IgA2), субклассы и различные мономерные и полимерные формы каждого изотипа, если не определено иное; и (b) консервативно замененные варианты таких иммуноглобулиновых полипептидов, которые иммуноспецифично связываются с антигеном. Иммуноглобулины в общем описаны, например, в Harlow & Lane, Antibodies: A Laboratory Manual (Cold Spring Harbor Laboratory Press, 1988).
[0105] Термин "микробная трансглутаминаза" относится к типу трансферазы, которая катализирует реакцию переноса ацила. Предпочтительный вариант осуществления включает применение микробной трансглутаминазы для катализа реакции переноса ацила между первой молекулой, содержащей остаток глутамина (донором ацила), и второй молекулой, содержащей первичную аминогруппу (акцептором ацила). Предпочтительно реакционноспособный остаток глутамина доступен для растворителя.
[0106] Одна из форм иммуноглобулина, раскрытого в настоящем документе, составляет базовую структурную единицу антитела. Например, антитело может включать тетрамер и состоять из двух идентичных пар иммуноглобулиновых цепей, причем каждая пара имеет одну легкую цепь и одну тяжелую цепь. Обычно в каждой паре вариабельные области легкой цепи и тяжелой цепи вместе отвечают за связывание с антигеном, а константные области отвечают за эффекторные функции антитела.
[0107] В дополнение к антителам иммуноглобулины могут существовать во множестве других форм, включающих, например: антигенсвязывающие фрагменты или части полноразмерного иммуноглобулина, такие как Fv, Fab, (Fab')2 и Fv-фрагменты; и альтернативные форматы антител, такие как одноцепочечные иммуноглобулины (scFV и scFab), диатела, триатела, тетратела, линейные антитела и мультиспецифичные антитела и т.д. См., например, James D. Marks, Antibody Engineering, Chapter 2, Oxford University Press (1995) (Carl K. Borrebaeck, Ed.).
[0108] В одном варианте осуществления иммуноглобулин может включать Fab-фрагмент. В другом варианте осуществления иммуноглобулин может включать CH3 домен. В другом варианте осуществления иммуноглобулин может включать тяжелую цепь.
[0109] При использовании в настоящем документе термин "иммуноспецифично" относится к способности иммуноглобулина специфично связываться с антигеном, против которого иммуноглобулин был получен, и неспецифично связываться с другими пептидами или белками. Иммуноглобулин, который иммуноспецифично связывается с антигеном, против которого иммуноглобулин был получен, может не связываться с другими полипептидами или белками, или может связываться с другими полипептидами или белками с более низкой аффинностью связывания, чем антиген, против которого иммуноглобулин был получен, как определяют, например, с помощью иммуноанализов, BiaCore или других анализов, известных в уровне техники. Иммуноглобулин иммуноспецифично связывается с антигеном, против которого иммуноглобулин был получен, когда он связывается с антигеном с более высокой аффинностью связывания, чем с любым перекрестно-реактивным антигеном, как определяют при использовании экспериментальных методов, таких как, без ограничения, радиоиммуноанализы (РИА) и твердофазные иммуноферментные анализы (ИФА) (см., например, Paul, ed., Fundamental Immunology, 2nd ed., Raven Press, New York, стр. 332-336 (1989) по поводу обсуждения специфичности антител).
[0110] "Линкер" при использовании в настоящем документе относится к спейсеру, который может иметь линейную или разветвленную цепь, для соединения иммуноглобулина (через ацил-донорный субстрат) с функциональным средством или реакционноспособной группой. Такие линкеры могут быть расщепляемыми (например, кислотонеустойчивыми или расщепляемыми протеазами) или нерасщепляемыми. В одном варианте осуществления линкером является полиэтиленгликолевая (ПЭГ) группа. В другом варианте осуществления линкер включает одну или более аминокислот и полиэтиленгликолевую (ПЭГ) группу.
[0111] Термин "моноклональное антитело" относится к антителу, которое получено из одиночного клона клетки, в том числе клона любой эукариотической или прокариотической клетки, или клона бактериофага, а не к способу, которым оно получено. Моноклональное антитело демонстрирует одиночную специфичность связывания и аффинность к конкретному эпитопу. Термин "моноклональное антитело" не ограничен антителами, полученными с помощью технологии гибридом.
[0112] "Нативный" относится к последовательности иммуноглобулина дикого типа из вида, в котором получен иммуноглобулин.
[0113] При использовании в настоящем документе "процент идентичности" и подобные термины используются для описания сходства последовательности между двумя или более нуклеиновыми кислотами, полинуклеотидами, белками или полипептидами, и должны рассматриваться в отношении и в сочетании с терминами, включающими: (a) референсную последовательность, (b) окно сравнения, (c) идентичность последовательности и (d) процент идентичности последовательности.
(a) "Референсная последовательность" является определенной последовательностью, используемой в качестве основы для сравнения последовательностей. Референсная последовательность может быть частью или всей указанной последовательностью; например, сегментом полноразмерной кДНК или последовательности гена, или полной последовательностью кДНК или гена. В случае полипептидов примеры длины референсной последовательности полипептида включают по меньшей мере приблизительно 16 аминокислот, по меньшей мере приблизительно 20 аминокислот, по меньшей мере приблизительно 25 аминокислот, по меньшей мере приблизительно 35 аминокислот, по меньшей мере приблизительно 50 аминокислот или по меньшей мере приблизительно 100 аминокислот. В случае нуклеиновых кислот примерная длина референсной последовательности нуклеиновой кислоты включает по меньшей мере приблизительно 50 нуклеотидов, по меньшей мере приблизительно 60 нуклеотидов, по меньшей мере приблизительно 75 нуклеотидов, по меньшей мере приблизительно 100 нуклеотидов или по меньшей мере приблизительно 300 нуклеотидов, или любое целое число вблизи или между указанными значениями.
(b) "Окно сравнения" включает ссылку на непрерывный и указанный сегмент полинуклеотидной или полипептидной последовательности, в котором полинуклеотидная или полипептидная последовательность может сравниваться с референсной последовательностью, и где часть полинуклеотидной или полипептидной последовательности в окне сравнения может включать вставки, замены или делеции (т.е. пропуски) по сравнению с референсной последовательностью (которая не включает вставок, замен или делеций) для оптимального выравнивания двух последовательностей. Примерные окна сравнения могут иметь протяженность по меньшей мере 20 последовательных нуклеотидов или аминокислот и, необязательно, могут быть 30, 40, 50, 100 или больше. Специалистам в данной области известно, что для того, чтобы избежать ошибочно высокого подобия с референсной последовательностью из-за включения пропусков в полинуклеотидной или полипептидой последовательности, обычно вводится штраф за пропуск, который вычитается из количества совпадений.
(c) Методы выравнивания последовательностей для сравнения известны в уровне техники. Оптимальное выравнивание последовательностей для сравнения может быть проведено с помощью алгоритма локальной гомологии Смита и Ватермана (Smith and Waterman, Adv. Appl. Math., 2: 482, 1981); алгоритма выравнивания гомологии Нидлемана и Вунша (Needleman and Wunsch, J. Mol. Biol., 48: 443, 1970); метода поиска подобия Пирсона и Липмана (Pearson and Lipman, Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 8: 2444, 1988); машинной реализации указанных алгоритмов, в том числе, без ограничения: CLUSTAL в программе PC/Gene компании Intelligenetics, Mountain View, Calif.; GAP, BESTFIT, BLAST, FASTA и TFASTA в пакете программ Wisconsin Genetics Software Package, Genetics Computer Group (GCG), 7 Science Dr., Madison, Wis., USA; программа CLUSTAL подробно описана в публикациях Higgins and Sharp, Gene, 73: 237-244, 1988; Corpet, et al., Nucleic Acids Research, 16:881-90, 1988; Huang, et al., Computer Applications in the Biosciences, 8:1-6, 1992; и Pearson, et al., Methods in Molecular Biology, 24:7-331, 1994. Семейство ВЗРЫВА программ BLAST, которые могут применяться для поисков подобия в базах данных, включает: BLASTN для поиска нуклеотидных последовательностей в базах нуклеотидных последовательностей; BLASTX для поиска нуклеотидных последовательностей в базах белковых последовательностей; BLASTP для поиска белковых последовательностей в базах белковых последовательностей; TBLASTN для поиска белковых последовательностей в базы нуклеотидных последовательностей; и TBLASTX для поиска нуклеотидных последовательностей в базах нуклеотидных последовательностей. См., Current Protocols in Molecular Biology, Chapter 19, Ausubel, et al., Eds., Greene Publishing and Wiley-Interscience, New York, 1995. Новые версии вышеуказанных программ или новые программы в целом, несомненно, будут доступны в будущем и могут применяться с настоящим описанием.
(d) "Процент идентичности" представляет собой значение, определяемое при сравнении двух оптимально выровненных последовательности в окне сравнения, где часть полинуклеотидной или полипептидной последовательности в окне сравнения может включать вставки, замены или делеции (т.е. пропуски) по сравнению с референсной последовательностью (которая не включает вставок, замен или делеций) для оптимального выравнивания двух последовательностей. Процент вычисляют путем определения количества положений, в которых идентичное основание нуклеиновой кислоты или аминокислотный остаток присутствуют в обеих последовательностях, получая количество совпавших положений, деления количества совпавших положений на общее количество положений в окне сравнения и умножения результата на 100, с получением процента идентичности последовательности.
[0114] "Фармацевтически эффективное количество" относится к количеству иммуноглобулина, которое лечит субъекта.
[0115] "Фармацевтически приемлемый носитель" относится к компонентам фармацевтической композиции для иммуноглобулина, как описано в настоящем документе, для введения субъекту. Например, фармацевтически приемлемый носитель может быть на основе липосом, на основе липида и/или на основе наночастиц.
[0116] Термин "реакционноспособная группа" при использовании в настоящем документе относится к химической функциональной группе, которая может реагировать с другими соединениями, такими как функциональные средства, с образованием по меньшей мере одной ковалентной связи. В одном варианте осуществления реакционноспособные группы являются реакционноспособными в реакциях сочетания клик-химии. Неограничивающие примеры реакционноспособных групп включают (1R,8S,9s)-бицикло[6.1.0]нон-4-ин-9-илметанол (BCN),
[Chem.3]
(дибензоциклооктин; DBCO), транс-циклооктен (TCO), азидо (N3), алкин, тетразин метилциклопропен, норборнен, гидразид/гидразин и альдегид.
[0117] Термин "субъект" при использовании в настоящем документе относится к человеку или не относящемуся к человеку организму. Таким образом, способы, иммуноглобулины и конъюгированные иммуноглобулины, описанные в настоящем документе, применимы как к заболеваниям и состояниям человека, так и к ветеринарным заболеваниям и состояниям. Субъекты могут быть "пациентами", т.е. живыми людьми или не относящимся к человеку организмами, которые получают медицинскую помощь по поводу заболевания и состояния, или людьми или не относящимся к человеку организмами без определенного заболевания, которые проходят исследование на наличие проявлений патологии или присутствие/отсутствие конкретного состояния.
[0118] "Замена" относится к замене одного аминокислотного остатка другим. "Замена" включает, например, миссенс-мутации одной или более пар азотистых оснований ДНК, кодирующих аминокислотный остаток, или конструирование белка для замены одной аминокислоты другой.
[0119] При использовании в настоящем документе "лечение" и подобные термины относятся к уменьшению тяжести и/или частоты симптомов заболевания, устранению симптомов заболевания и/или первопричины указанных симптомов, уменьшению частоты или вероятности симптомов заболевания и/или их первопричины, и к улучшению или устранению повреждения, вызванного, прямо или косвенно, заболеванием.
[0120] Термин "терапевтическое средство" означает макромолекулу или малую молекулу, которая может быть введена нуждающемуся в этом субъекту для лечения состояния. Терапевтические средства могут вводить для лечения или предотвращения возникновения, замедления прогрессирования или облегчения одного или более симптомов заболевания у страдающих им субъектов. Терапевтические средства включают, без ограничения перечисленными, антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, химиотерапевтическое средство, радиоактивное средство, цитотоксическое средство, антибиотик и т.д. В одном варианте осуществления терапевтическое средство является малой молекулой. В другом варианте осуществления терапевтическое средство является полипептидом.
[0121] При использовании в настоящем документе "на 90% идентичный" охватывает по меньшей мере на 90% идентичный, на 91% идентичный, на 92% идентичный, на 93% идентичный, на 94% идентичный, на 95% идентичный, на 96% идентичный, на 97% идентичный, на 98% идентичный, на 99% идентичный или на 100% идентичный референсному объекту (например, биологической последовательности).
[0122] В тексте настоящего описания используются следующие сокращения: конъюгаты антитела-лекарственного средства (ADC); отношение лекарственного средства к антителу (DAR); каркасная область (FR); определяющая комплементарность область (CDR); ауристатин F (AuF); вариабельная область тяжелой цепи (VH); вариабельная область легкой цепи (VL); каппа вариабельная область (Vκ); гамма константная область (Cγ); каппа константная область (Cκ); моноклональное антитело (мАт); лизин в аминокислотном положении 447 тяжелой цепи иммуноглобулина, согласно нумерации с использованием системы нумерации EU (Lys447).
Получение конъюгированных иммуноглобулинов
[0123] В настоящем документе раскрыты способы получения конъюгированного иммуноглобулина, включающие: контакт иммуноглобулина или его антигенсвязывающего фрагмента с микробной трансглутаминазой и функциональным средством, включающим ацил-донорный субстрат, a) где иммуноглобулин или его антигенсвязывающий фрагмент включают генно-инженерно модифицированный остаток лизина, где генно-инженерно модифицированный остаток лизина является вставкой остатка лизина или природным аминокислотным остатком, который был подвергнут мутации с заменой на остаток лизина, b) где ацил-донорный субстрат включает остаток глутамина, и c) где функциональное средство является терапевтическим средством или диагностическим средством, где микробная трансглутаминаза конъюгирует генно-инженерно модифицированный остаток лизина иммуноглобулина или его антигенсвязывающего фрагмента с остатком глутамина ацил-донорного субстрата на функциональном средстве, с получением в результате конъюгированного иммуноглобулина.
[0124] Также в настоящем документе раскрыты способы получения конъюгированного иммуноглобулина, включающие: i) контакт иммуноглобулина или его антигенсвязывающего фрагмента с микробной трансглутаминазой и ацил-донорным субстратом, a) где иммуноглобулин или его антигенсвязывающий фрагмент включают генно-инженерно модифицированный остаток лизина, где генно-инженерно модифицированный остаток лизина является вставкой остатка лизина или природным аминокислотным остатком, который был подвергнут мутации с заменой на остаток лизина, b) где ацил-донорный субстрат включает остаток глутамина и реакционноспособную группу, где микробная трансглутаминаза конъюгирует генно-инженерно модифицированный остаток лизина иммуноглобулина или его антигенсвязывающего фрагмента с остатком глутамина ацил-донорного субстрата, и ii) конъюгирование функционального средства с реакционноспособной группой ацил-донорного субстрата, где функциональное средство является терапевтическим средством или диагностическим средством, с получением в результате конъюгированного иммуноглобулина.
[0125] Конъюгирование может быть выполнено при растворении функционального средства, включающего ацил-донорный субстрат, в растворе для растворения и контакте растворенного функционального средства с иммуноглобулином или его антигенсвязывающим фрагментом и микробной трансглутаминазой в буфере для конъюгирования. Конъюгирование также может быть выполнено при растворении ацил-донорного субстрата в растворе для растворения и контакте ацил-донорного субстрата с иммуноглобулином или его антигенсвязывающим фрагментом и микробной трансглутаминазой в буфере для конъюгирования.
[0126] В случае нерастворимых в воде функциональных средств и ацил-донорных субстратов, подходящие растворы для растворения включают органические, смешиваемые с водой растворители, такие как диметилсульфоксид (ДМСО). В случае водорастворимых функциональных средств и ацил-донорных субстратов, подходящие растворы для растворения включают, без ограничения перечисленными, воду или водные буферные растворы, такие как фосфатно-солевой буферный раствор, pH 7,2 (1×PBS) или DPBS.
[0127] Подходящие концентрации функционального средства или ацил-донорного субстрата включают от приблизительно 10 мкМ до приблизительно 800 мМ, от приблизительно 10 мМ до приблизительно 100 мМ, от приблизительно 25 мМ до приблизительно 100 мМ, от приблизительно 40 мМ до приблизительно 100 мМ, от приблизительно 55 мМ до приблизительно 100 мМ, от приблизительно 70 мМ до приблизительно 100 мМ, от приблизительно 10 мМ до приблизительно 90 мМ, от приблизительно 10 мМ до приблизительно 75 мМ, от приблизительно 10 мМ до приблизительно 60 мМ, от приблизительно 10 мМ до приблизительно 50 мМ, от приблизительно 10 мМ до приблизительно 40 мМ или от приблизительно 10 мМ до приблизительно 30 мМ.
[0128] В некоторых вариантах осуществления концентрация функционального средства или ацил-донорного субстрата может составлять приблизительно 10 мкМ. В некоторых вариантах осуществления концентрация функционального средства или ацил-донорного субстрата может составлять приблизительно 25 мкМ. В некоторых вариантах осуществления концентрация функционального средства или ацил-донорного субстрата может составлять приблизительно 50 мкМ. В некоторых вариантах осуществления концентрация функционального средства или ацил-донорного субстрата может составлять приблизительно 100 мкМ. В некоторых вариантах осуществления концентрация функционального средства или ацил-донорного субстрата может составлять приблизительно 250 мкМ. В некоторых вариантах осуществления концентрация функционального средства или ацил-донорного субстрата может составлять приблизительно 500 мкМ. В некоторых вариантах осуществления концентрация функционального средства или ацил-донорного субстрата может составлять приблизительно 750 мкМ. В некоторых вариантах осуществления концентрация функционального средства или ацил-донорного субстрата может составлять приблизительно 1 мМ. В некоторых вариантах осуществления концентрация функционального средства или ацил-донорного субстрата может составлять приблизительно 10 мМ. В некоторых вариантах осуществления концентрация функционального средства или ацил-донорного субстрата может составлять приблизительно 20 мМ. В некоторых вариантах осуществления концентрация функционального средства или ацил-донорного субстрата может составлять приблизительно 30 мМ. В некоторых вариантах осуществления концентрация функционального средства или ацил-донорного субстрата может составлять приблизительно 40 мМ. В некоторых вариантах осуществления концентрация функционального средства или ацил-донорного субстрата может составлять приблизительно 50 мМ. В некоторых вариантах осуществления концентрация функционального средства или ацил-донорного субстрата может составлять приблизительно 60 мМ. В некоторых вариантах осуществления концентрация функционального средства или ацил-донорного субстрата может составлять приблизительно 70 мМ. В некоторых вариантах осуществления концентрация функционального средства или ацил-донорного субстрата может составлять приблизительно 80 мМ. В некоторых вариантах осуществления концентрация функционального средства или ацил-донорного субстрата может составлять приблизительно 90 мМ. В некоторых вариантах осуществления концентрация функционального средства или ацил-донорного субстрата может составлять приблизительно 100 мМ. В некоторых вариантах осуществления концентрация функционального средства или ацил-донорного субстрата может составлять приблизительно 150 мМ. В некоторых вариантах осуществления концентрация функционального средства или ацил-донорного субстрата может составлять приблизительно 200 мМ. В некоторых вариантах осуществления концентрация функционального средства или ацил-донорного субстрата может составлять приблизительно 250 мМ. В некоторых вариантах осуществления концентрация функционального средства или ацил-донорного субстрата может составлять приблизительно 300 мМ. В некоторых вариантах осуществления концентрация функционального средства или ацил-донорного субстрата может составлять приблизительно 350 мМ. В некоторых вариантах осуществления концентрация функционального средства или ацил-донорного субстрата может составлять приблизительно 400 мМ. В некоторых вариантах осуществления концентрация функционального средства или ацил-донорного субстрата может составлять приблизительно 450 мМ. В некоторых вариантах осуществления концентрация функционального средства или ацил-донорного субстрата может составлять приблизительно 500 мМ. В некоторых вариантах осуществления концентрация функционального средства или ацил-донорного субстрата может составлять приблизительно 550 мМ. В некоторых вариантах осуществления концентрация функционального средства или ацил-донорного субстрата может составлять приблизительно 600 мМ. В некоторых вариантах осуществления концентрация функционального средства или ацил-донорного субстрата может составлять приблизительно 650 мМ. В некоторых вариантах осуществления концентрация функционального средства или ацил-донорного субстрата может составлять приблизительно 700 мМ. В некоторых вариантах осуществления концентрация функционального средства или ацил-донорного субстрата может составлять приблизительно 750 мМ. В некоторых вариантах осуществления концентрация функционального средства или ацил-донорного субстрата может составлять приблизительно 800 мМ.
[0129] Подходящие концентрации иммуноглобулина включают от приблизительно 0,1 мг/мл до приблизительно 100 мг/мл, от приблизительно 0,5 мг/мл до приблизительно 20 мг/мл, от приблизительно 1 мг/мл до приблизительно 20 мг/мл, от приблизительно 5 мг/мл до приблизительно 20 мг/мл, от приблизительно 10 мг/мл до приблизительно 20 мг/мл, от приблизительно 0,1 мг/мл до приблизительно 15 мг/мл, от приблизительно 0,1 мг/мл до приблизительно 12 мг/мл, от приблизительно 0,1 мг/мл до приблизительно 10 мг/мл, от приблизительно 0,1 мг/мл до приблизительно 5 мг/мл, или от приблизительно 0,1 мг/мл до приблизительно 2 мг/мл, от приблизительно 10 мг/мл до приблизительно 30 мг/мл, от приблизительно 20 мг/мл до приблизительно 45 мг/мл, от приблизительно 35 мг/мл до приблизительно 50 мг/мл, от приблизительно 45 мг/мл до приблизительно 60 мг/мл, от приблизительно 50 мг/мл до приблизительно 75 мг/мл, от приблизительно 60 мг/мл до приблизительно 85 мг/мл или от приблизительно 80 мг/мл до приблизительно 100 мг/мл. В некоторых вариантах осуществления концентрация иммуноглобулина может составлять приблизительно 0,1 мг/мл. В некоторых вариантах осуществления концентрация иммуноглобулина может составлять приблизительно 0,5 мг/мл. В некоторых вариантах осуществления концентрация иммуноглобулина может составлять приблизительно 1 мг/мл. В некоторых вариантах осуществления концентрация иммуноглобулина может составлять приблизительно 2 мг/мл. В некоторых вариантах осуществления концентрация иммуноглобулина может составлять приблизительно 5 мг/мл. В некоторых вариантах осуществления концентрация иммуноглобулина может составлять приблизительно 10 мг/мл. В некоторых вариантах осуществления концентрация иммуноглобулина может составлять приблизительно 15 мг/мл. В некоторых вариантах осуществления концентрация иммуноглобулина может составлять приблизительно 20 мг/мл. В некоторых вариантах осуществления концентрация иммуноглобулина может составлять приблизительно 25 мг/мл. В некоторых вариантах осуществления концентрация иммуноглобулина может составлять приблизительно 30 мг/мл. В некоторых вариантах осуществления концентрация иммуноглобулина может составлять приблизительно 35 мг/мл. В некоторых вариантах осуществления концентрация иммуноглобулина может составлять приблизительно 40 мг/мл. В некоторых вариантах осуществления концентрация иммуноглобулина может составлять приблизительно 45 мг/мл. В некоторых вариантах осуществления концентрация иммуноглобулина может составлять приблизительно 50 мг/мл. В некоторых вариантах осуществления концентрация иммуноглобулина может составлять приблизительно 55 мг/мл. В некоторых вариантах осуществления концентрация иммуноглобулина может составлять приблизительно 60 мг/мл. В некоторых вариантах осуществления концентрация иммуноглобулина может составлять приблизительно 65 мг/мл. В некоторых вариантах осуществления концентрация иммуноглобулина может составлять приблизительно 70 мг/мл. В некоторых вариантах осуществления концентрация иммуноглобулина может составлять приблизительно 75 мг/мл. В некоторых вариантах осуществления концентрация иммуноглобулина может составлять приблизительно 80 мг/мл. В некоторых вариантах осуществления концентрация иммуноглобулина может составлять приблизительно 85 мг/мл. В некоторых вариантах осуществления концентрация иммуноглобулина может составлять приблизительно 90 мг/мл. В некоторых вариантах осуществления концентрация иммуноглобулина может составлять приблизительно 95 мг/мл. В некоторых вариантах осуществления концентрация иммуноглобулина может составлять приблизительно 100 мг/мл.
[0130] Подходящие отношения функционального средства или ацил-донорного субстрата:иммуноглобулина включают от приблизительно 1:1 до 100:1. В одном варианте осуществления отношение функционального средства к ацил-донорному субстрату:иммуноглобулину составляет от приблизительно 25:1 до приблизительно 75:1. В другом варианте осуществления отношение функционального средства к ацил-донорному субстрату:иммуноглобулину составляет от приблизительно 40:1 до приблизительно 60:1. В некоторых вариантах осуществления отношение функционального средства или ацил-донорного субстрата:иммуноглобулина может составлять 1:1. В некоторых вариантах осуществления отношение функционального средства или ацил-донорного субстрата:иммуноглобулина может составлять 2:1. В некоторых вариантах осуществления отношение функционального средства или ацил-донорного субстрата:иммуноглобулина может составлять 3:1. В некоторых вариантах осуществления отношение функционального средства или ацил-донорного субстрата:иммуноглобулина может составлять 4:1. В некоторых вариантах осуществления отношение функционального средства или ацил-донорного субстрата:иммуноглобулина может составлять 5:1. В некоторых вариантах осуществления отношение функционального средства или ацил-донорного субстрата:иммуноглобулина может составлять 6:1. В некоторых вариантах осуществления отношение функционального средства или ацил-донорного субстрата:иммуноглобулина может составлять 7:1. В некоторых вариантах осуществления отношение функционального средства или ацил-донорного субстрата:иммуноглобулина может составлять 8:1. В некоторых вариантах осуществления отношение функционального средства или ацил-донорного субстрата:иммуноглобулина может составлять 9:1. В некоторых вариантах осуществления отношение функционального средства или ацил-донорного субстрата:иммуноглобулина может составлять 10:1. В некоторых вариантах осуществления отношение функционального средства или ацил-донорного субстрата:иммуноглобулина может составлять 11:1. В некоторых вариантах осуществления отношение функционального средства или ацил-донорного субстрата:иммуноглобулина может составлять 12:1. В некоторых вариантах осуществления отношение функционального средства или ацил-донорного субстрата:иммуноглобулина может составлять 13:1. В некоторых вариантах осуществления отношение функционального средства или ацил-донорного субстрата:иммуноглобулина может составлять 14:1. В некоторых вариантах осуществления отношение функционального средства или ацил-донорного субстрата:иммуноглобулина может составлять 15:1. В некоторых вариантах осуществления отношение функционального средства или ацил-донорного субстрата:иммуноглобулина может составлять 16:1. В некоторых вариантах осуществления отношение функционального средства или ацил-донорного субстрата:иммуноглобулина может составлять 17:1. В некоторых вариантах осуществления отношение функционального средства или ацил-донорного субстрата:иммуноглобулина может составлять 18:1. В некоторых вариантах осуществления отношение функционального средства или ацил-донорного субстрата:иммуноглобулина может составлять 19:1. В некоторых вариантах осуществления отношение функционального средства или ацил-донорного субстрата:иммуноглобулина может составлять 20:1. В некоторых вариантах осуществления отношение функционального средства или ацил-донорного субстрата:иммуноглобулина может составлять 25:1. В некоторых вариантах осуществления отношение функционального средства или ацил-донорного субстрата:иммуноглобулина может составлять 30:1. В некоторых вариантах осуществления отношение функционального средства или ацил-донорного субстрата:иммуноглобулина может составлять 35:1. В некоторых вариантах осуществления отношение функционального средства или ацил-донорного субстрата:иммуноглобулина может составлять 40:1. В некоторых вариантах осуществления отношение функционального средства или ацил-донорного субстрата:иммуноглобулина может составлять 45:1. В некоторых вариантах осуществления отношение функционального средства или ацил-донорного субстрата:иммуноглобулина может составлять 50:1. В некоторых вариантах осуществления отношение функционального средства или ацил-донорного субстрата:иммуноглобулина может составлять 60:1. В некоторых вариантах осуществления отношение функционального средства или ацил-донорного субстрата:иммуноглобулина может составлять 70:1. В некоторых вариантах осуществления отношение функционального средства или ацил-донорного субстрата:иммуноглобулина может составлять 80:1. В некоторых вариантах осуществления отношение функционального средства или ацил-донорного субстрата:иммуноглобулина может составлять 90:1. В некоторых вариантах осуществления отношение функционального средства или ацил-донорного субстрата:иммуноглобулина может составлять 100:1.
[0131] Контакт могут производить в различных подходящих буферах для конъюгирования, включающих, например, DPBS, 1×PBS, pH 7,2, фосфат натрия, фосфат калия, борат натрия, Трис и HEPES, и т.д. Концентрация буфера для конъюгирования включает от приблизительно 5 мМ до приблизительно 2 М, от приблизительно 5 мМ до приблизительно 1 М, от приблизительно 5 мМ до приблизительно 500 мМ, от приблизительно 5 мМ до приблизительно 100 мМ, от приблизительно 10 мМ до приблизительно 100 мМ, от приблизительно 20 мМ до приблизительно 100 мМ, от приблизительно 30 мМ до приблизительно 100 мМ, от приблизительно 45 мМ до приблизительно 100 мМ, от приблизительно 60 мМ до приблизительно 100 мМ, от приблизительно 75 мМ до приблизительно 100 мМ, от приблизительно 10 мМ до приблизительно 90 мМ, от приблизительно 10 мМ до приблизительно 75 мМ, от приблизительно 10 мМ до приблизительно 60 мМ, от приблизительно 10 мМ до приблизительно 45 мМ или от приблизительно 10 мМ до приблизительно 30 мМ. В некоторых вариантах осуществления концентрация буфера для конъюгирования может составлять приблизительно 10 мМ. В некоторых вариантах осуществления концентрация буфера для конъюгирования может составлять приблизительно 20 мМ. В некоторых вариантах осуществления концентрация буфера для конъюгирования может составлять приблизительно 30 мМ. В некоторых вариантах осуществления концентрация буфера для конъюгирования может составлять приблизительно 40 мМ. В некоторых вариантах осуществления концентрация буфера для конъюгирования может составлять приблизительно 50 мМ. В некоторых вариантах осуществления концентрация буфера для конъюгирования может составлять приблизительно 60 мМ. В некоторых вариантах осуществления концентрация буфера для конъюгирования может составлять приблизительно 70 мМ. В некоторых вариантах осуществления концентрация буфера для конъюгирования может составлять приблизительно 80 мМ. В некоторых вариантах осуществления концентрация буфера для конъюгирования может составлять приблизительно 90 мМ. В некоторых вариантах осуществления концентрация буфера для конъюгирования может составлять приблизительно 100 мМ. В некоторых вариантах осуществления концентрация буфера для конъюгирования может составлять приблизительно 250 мМ. В некоторых вариантах осуществления концентрация буфера для конъюгирования может составлять приблизительно 500 мМ. В некоторых вариантах осуществления концентрация буфера для конъюгирования может составлять приблизительно 750 мМ. В некоторых вариантах осуществления концентрация буфера для конъюгирования может составлять приблизительно 1 М. В некоторых вариантах осуществления концентрация буфера для конъюгирования может составлять приблизительно 1,25 М. В некоторых вариантах осуществления концентрация буфера для конъюгирования может составлять приблизительно 1,5 М. В некоторых вариантах осуществления концентрация буфера для конъюгирования может составлять приблизительно 1,75 М. В некоторых вариантах осуществления концентрация буфера для конъюгирования может составлять приблизительно 2 М.
[0132] Буфер для конъюгирования может дополнительно включать хлорид натрия. Подходящие концентрации хлорида натрия включают от приблизительно 0 мМ до приблизительно 2 М, от приблизительно 0 мМ до приблизительно 1 М, от приблизительно 1 М до приблизительно 2 М, от приблизительно 500 мМ до приблизительно 1,5 М, от приблизительно 25 мМ до приблизительно 500 мМ, от приблизительно 50 мМ до приблизительно 500 мМ, от приблизительно 75 мМ до приблизительно 500 мМ, от приблизительно 100 мМ до приблизительно 500 мМ, от приблизительно 150 мМ до приблизительно 500 мМ, от приблизительно 200 мМ до приблизительно 500 мМ, от приблизительно 250 мМ до приблизительно 500 мМ, от приблизительно 300 мМ до приблизительно 500 мМ, от приблизительно 350 мМ до приблизительно 500 мМ, от приблизительно 400 мМ до приблизительно 500 мМ, от приблизительно 0 мМ до приблизительно 400 мМ, от приблизительно 0 мМ до приблизительно 350 мМ, от приблизительно 0 мМ до приблизительно 300 мМ, от приблизительно 0 мМ до приблизительно 250 мМ, от приблизительно 0 мМ до приблизительно 200 мМ, от приблизительно 0 мМ до приблизительно 150 мМ, от приблизительно 0 мМ до приблизительно 100 мМ, от приблизительно 0 мМ до приблизительно 50 мМ или от приблизительно 0 мМ до приблизительно 25 мМ. В некоторых вариантах осуществления концентрация хлорида натрия может составлять приблизительно 25 мМ. В некоторых вариантах осуществления концентрация хлорида натрия может составлять приблизительно 50 мМ. В некоторых вариантах осуществления концентрация хлорида натрия может составлять приблизительно 75 мМ. В некоторых вариантах осуществления концентрация хлорида натрия может составлять приблизительно 100 мМ. В некоторых вариантах осуществления концентрация хлорида натрия может составлять приблизительно 150 мМ. В некоторых вариантах осуществления концентрация хлорида натрия может составлять приблизительно 200 мМ. В некоторых вариантах осуществления концентрация хлорида натрия может составлять приблизительно 250 мМ. В некоторых вариантах осуществления концентрация хлорида натрия может составлять приблизительно 300 мМ. В некоторых вариантах осуществления концентрация хлорида натрия может составлять приблизительно 350 мМ. В некоторых вариантах осуществления концентрация хлорида натрия может составлять приблизительно 400 мМ. В некоторых вариантах осуществления концентрация хлорида натрия может составлять приблизительно 500 мМ. В некоторых вариантах осуществления концентрация хлорида натрия может составлять приблизительно 750 мМ. В некоторых вариантах осуществления концентрация хлорида натрия может составлять приблизительно 1 М. В некоторых вариантах осуществления концентрация хлорида натрия может составлять приблизительно 1,25 М. В некоторых вариантах осуществления концентрация хлорида натрия может составлять приблизительно 1,5 М. В некоторых вариантах осуществления концентрация хлорида натрия может составлять приблизительно 1,75 М. В некоторых вариантах осуществления концентрация хлорида натрия может составлять приблизительно 2 М.
[0133] pH буфера для конъюгирования может составлять от приблизительно 4 до приблизительно 9. В некоторых вариантах осуществления pH буфера для конъюгирования может составлять от приблизительно 5 до приблизительно 8. В другом варианте осуществления pH буфера для конъюгирования может составлять от приблизительно 6 до приблизительно 7. В некоторых вариантах осуществления pH буфера для конъюгирования может составлять приблизительно 4. В некоторых вариантах осуществления pH буфера для конъюгирования может составлять приблизительно 4,5. В некоторых вариантах осуществления pH буфера для конъюгирования может составлять приблизительно 5. В некоторых вариантах осуществления pH буфера для конъюгирования может составлять приблизительно 5,5. В некоторых вариантах осуществления pH буфера для конъюгирования может составлять приблизительно 6,0. В некоторых вариантах осуществления pH буфера для конъюгирования может составлять приблизительно 6,5. В некоторых вариантах осуществления pH буфера для конъюгирования может составлять приблизительно 6,6. В некоторых вариантах осуществления pH буфера для конъюгирования может составлять приблизительно 6,7. В некоторых вариантах осуществления pH буфера для конъюгирования может составлять приблизительно 6,8. В некоторых вариантах осуществления pH буфера для конъюгирования может составлять приблизительно 6,9. В некоторых вариантах осуществления pH буфера для конъюгирования может составлять приблизительно 7,0. В некоторых вариантах осуществления pH буфера для конъюгирования может составлять приблизительно 7,1. В некоторых вариантах осуществления pH буфера для конъюгирования может составлять приблизительно 7,2. В некоторых вариантах осуществления pH буфера для конъюгирования может составлять приблизительно 7,3. В некоторых вариантах осуществления pH буфера для конъюгирования может составлять приблизительно 7,4. В некоторых вариантах осуществления pH буфера для конъюгирования может составлять приблизительно 7,5. В некоторых вариантах осуществления pH буфера для конъюгирования может составлять приблизительно 7,6. В некоторых вариантах осуществления pH буфера для конъюгирования может составлять приблизительно 7,7. В некоторых вариантах осуществления pH буфера для конъюгирования может составлять приблизительно 7,8. В некоторых вариантах осуществления pH буфера для конъюгирования может составлять приблизительно 7,9. В некоторых вариантах осуществления pH буфера для конъюгирования может составлять приблизительно 8,0. В некоторых вариантах осуществления pH буфера для конъюгирования может составлять приблизительно 8,1. В некоторых вариантах осуществления pH буфера для конъюгирования может составлять приблизительно 8,2. В некоторых вариантах осуществления pH буфера для конъюгирования может составлять приблизительно 8,3. В некоторых вариантах осуществления pH буфера для конъюгирования может составлять приблизительно 8,4. В некоторых вариантах осуществления pH буфера для конъюгирования может составлять приблизительно 8,5. В некоторых вариантах осуществления pH буфера для конъюгирования может составлять приблизительно 9.
[0134] Для улучшения растворимости функционального средства или ацил-донорного субстрата в буфере для конъюгирования конечная концентрация органического, смешивающегося с водой растворителя в буфере для конъюгирования может составлять от приблизительно 0% до приблизительно 20%, от приблизительно 2% до приблизительно 20%, от приблизительно 5% до приблизительно 20%, от приблизительно 8% до приблизительно 20%, от приблизительно 11% до приблизительно 20%, от приблизительно 16% до приблизительно 20%, от приблизительно 0% до приблизительно 18%, от приблизительно 0% до приблизительно 15%, от приблизительно 0% до приблизительно 12%, от приблизительно 0% до приблизительно 10%, от приблизительно 0% до приблизительно 8%, от приблизительно 0% до приблизительно 6% или от приблизительно 0% до приблизительно 2%.
[0135] Буфер для конъюгирования может дополнительно включать пропиленгликоль для улучшения растворимости тиол-реактивного соединения в буфере для конъюгирования. Подходящие концентрации пропиленгликоля включают от приблизительно 1% до приблизительно 50%, от приблизительно 20% до приблизительно 50%, от приблизительно 30% до приблизительно 50%, от приблизительно 40% до приблизительно 50%, от приблизительно 10% до приблизительно 40%, от приблизительно 10% до приблизительно 30% или от приблизительно 10% до приблизительно 20%. В некоторых вариантах осуществления концентрация пропиленгликоля может составлять приблизительно 1% или приблизительно 5%. В некоторых вариантах осуществления концентрация пропиленгликоля может составлять приблизительно 10%. В некоторых вариантах осуществления концентрация пропиленгликоля может составлять приблизительно 20%. В некоторых вариантах осуществления концентрация пропиленгликоля может составлять приблизительно 30%. В некоторых вариантах осуществления концентрация пропиленгликоля может составлять приблизительно 40%. В некоторых вариантах осуществления концентрация пропиленгликоля может составлять приблизительно 50%.
[0136] Буфер для конъюгирования может дополнительно включать неионогенный детергент для улучшения растворимости конъюгированного иммуноглобулина в буфере для конъюгирования. Примеры неионогенных детергентов включают, без ограничения перечисленными, полисорбат 20 или полисорбат 80. Подходящие концентрации неионогенного детергента включают от приблизительно 0% до приблизительно 1%, от приблизительно 0,1% до приблизительно 1%, от приблизительно 0,3% до приблизительно 1%, от приблизительно 0,5% до приблизительно 1%, от приблизительно 0,7% до приблизительно 1%, от приблизительно 0% до приблизительно 0,8%, от приблизительно 0% до приблизительно 0,6%, от приблизительно 0% до приблизительно 0,4% или от приблизительно 0% до приблизительно 0,2%. В некоторых вариантах осуществления концентрация неионогенного детергента может составлять приблизительно 0,1%. В некоторых вариантах осуществления концентрация неионогенного детергента может составлять приблизительно 0,2%. В некоторых вариантах осуществления концентрация неионогенного детергента может составлять приблизительно 0,3%. В некоторых вариантах осуществления концентрация неионогенного детергента может составлять приблизительно 0,4%. В некоторых вариантах осуществления концентрация неионогенного детергента может составлять приблизительно 0,5%. В некоторых вариантах осуществления концентрация неионогенного детергента может составлять приблизительно 0,6%. В некоторых вариантах осуществления концентрация неионогенного детергента может составлять приблизительно 0,7%. В некоторых вариантах осуществления концентрация неионогенного детергента может составлять приблизительно 0,8%. В некоторых вариантах осуществления концентрация неионогенного детергента может составлять приблизительно 0,9%. В некоторых вариантах осуществления концентрация неионогенного детергента может составлять приблизительно 1,0%.
[0137] Контакт могут производить в течение от приблизительно 30 минут до приблизительно 48 часов, в течение от приблизительно 1 часа до приблизительно 48 часов, в течение от приблизительно 2 часов до приблизительно 24 часов, в течение от приблизительно 24 часов до приблизительно 48 часов, в течение от приблизительно 30 часов до приблизительно 48 часов, в течение от приблизительно 36 часов до приблизительно 48 часов, в течение от приблизительно 42 часов до приблизительно 48 часов, в течение от приблизительно 2 часов до приблизительно 42 часов, в течение от приблизительно 2 часов до приблизительно 36 часов, в течение от приблизительно 2 часов до приблизительно 30 часов, в течение от приблизительно 2 часов до приблизительно 24 часов, в течение от приблизительно 2 часов до приблизительно 18 часов, в течение от приблизительно 2 часов до приблизительно 12 часов, от приблизительно 30 минут до приблизительно 1 часа, от приблизительно 30 минут до приблизительно 2 часов или в течение от приблизительно 2 часов до приблизительно 6 часов. В некоторых вариантах осуществления контакт могут производить в течение от приблизительно 30 минут. В некоторых вариантах осуществления контакт могут производить в течение от приблизительно 1 часа. В некоторых вариантах осуществления контакт могут производить в течение от приблизительно 1,5 часов. В некоторых вариантах осуществления контакт могут производить в течение 2 часов. В некоторых вариантах осуществления контакт могут производить в течение 6 часов. В некоторых вариантах осуществления контакт могут производить в течение 12 часов. В некоторых вариантах осуществления контакт могут производить в течение 18 часов. В некоторых вариантах осуществления контакт могут производить в течение 24 часов. В некоторых вариантах осуществления контакт могут производить в течение 30 часов. В некоторых вариантах осуществления контакт могут производить в течение 36 часов. В некоторых вариантах осуществления контакт могут производить в течение 42 часов. В некоторых вариантах осуществления контакт могут производить в течение 48 часов.
[0138] Температура контакта может составлять от приблизительно 4°C до приблизительно 50°C, от приблизительно 18°C до приблизительно 37°C, от приблизительно 20°C до приблизительно 37°C, от приблизительно 22°C до приблизительно 37°C, от приблизительно 24°C до приблизительно 37°C, от приблизительно 26°C до приблизительно 37°C, от приблизительно 28°C до приблизительно 37°C, от приблизительно 30°C до приблизительно 37°C, от приблизительно 32°C до приблизительно 37°C, от приблизительно 34°C до приблизительно 37°C, от приблизительно 18°C до приблизительно 34°C, от приблизительно 18°C до приблизительно 32°C, от приблизительно 18°C до приблизительно 30°C, от приблизительно 18°C до приблизительно 28°C, от приблизительно 18°C до приблизительно 26°C или от приблизительно 18°C до приблизительно 24°C. В некоторых вариантах осуществления контакт могут производить при 4°C. В некоторых вариантах осуществления контакт могут производить при 18°C. В некоторых вариантах осуществления контакт могут производить при 20°C. В некоторых вариантах осуществления контакт могут производить при 22°C. В некоторых вариантах осуществления контакт могут производить при 24°C. В некоторых вариантах осуществления контакт могут производить при 26°C. В некоторых вариантах осуществления контакт могут производить при 28°C. В некоторых вариантах осуществления контакт могут производить при 30°C. В некоторых вариантах осуществления контакт могут производить при 32°C. В некоторых вариантах осуществления контакт могут производить при 34°C. В некоторых вариантах осуществления контакт могут производить при 37°C. В некоторых вариантах осуществления контакт могут производить при 50°C.
[0139] Неприсоединенное функциональное средство или ацил-донорный субстрат могут быть отделены от конъюгированного иммуноглобулина с помощью обессоливающей хроматографии при использовании ряда подходящих смол, включающих, без ограничения перечисленными, смолу G-25, смолу G-50, Biogel P10 или другие смолы с эксклюзионными пределами в диапазоне 5000-10000 Да. Хроматографию могут выполнять в формате колонки или формате центрифужной колонки, в зависимости от масштаба. Подходящие буферы для обессоливания включают, например, DPBS, 1×PBS, фосфат натрия, фосфат калия, борат натрия, Трис, или вместо 1×PBS могут использоваться буферы на основе HEPES.
[0140] В первом варианте осуществления функциональное средство, включающее ацил-донорный субстрат, который включает остаток глутамина, конъюгировано с генно-инженерно модифицированным остатком лизина через ацил-донорный субстрат. В этом первом варианте осуществления функциональное средство объединяют с ацил-донорным субстратом перед конъюгированием с иммуноглобулином посредством реакции реакционноспособной группы на ацил-донорном субстрате с функциональным средством. Во втором варианте осуществления ацил-донорный субстрат, включающий остаток глутамина и реакционноспособную группу, сначала конъюгируют с иммуноглобулином, а затем реакционноспособная группа соединяется с функциональным средством.
[0141] Ацил-донорные субстраты могут включать линкер "L". Линкеры могут быть нерасщепляемыми линкерами или расщепляемыми линкерами. Примеры линкеров включают, например, дисульфид-содержащие линкеры, линкеры на основе ацеталя и линкеры на основе кеталя. В некоторых аспектах линкер может быть нерасщепляемым линкером. Подходящие нерасщепляемые линкеры включают, без ограничения перечисленными, одну или более аминокислот, полиэтиленгликоль (ПЭГ) или алкил. В некоторых вариантах осуществления линкер может включать ПЭГ. В некоторых аспектах линкер может быть расщепляемым линкером. Подходящие расщепляемые линкеры включают, например, валин-цитруллин-пара-аминобензил. В некоторых аспектах линкер может быть дисульфид- содержащим линкером. В некоторых аспектах линкер может быть линкером на основе ацеталя. В некоторых аспектах линкер может быть линкером на основе кеталь. Линкер также может быть одной или более аминокислотами, отдельно или в комбинации с другим линкером, таким как одна или более групп ПЭГ.
[0142] Ацил-донорный субстрат, включающий остаток глутамина, может присутствовать в, являться частью или может быть присоединен к функциональному средству. Подходящие функциональные средства включают, например, флуорофоры, флуоресцентные красители, полипептиды, иммуноглобулины, антибиотики, нуклеиновые кислоты, радионуклиды, химические линкеры, малые молекулы, хелатообразователи, липиды, нуклеиновые кислоты (такие как ДНК или РНК) и лекарственные средства. В некоторых аспектах функциональное средство может включать флуорофор. В некоторых аспектах функциональное средство может включать флуоресцентный краситель. В некоторых аспектах функциональное средство может включать полипептид. В некоторых аспектах функциональное средство может включать иммуноглобулин. В некоторых аспектах функциональное средство может включать антибиотик. В некоторых аспектах функциональное средство может включать нуклеиновую кислоту (такую как ДНК или РНК). В некоторых аспектах функциональное средство может включать радионуклид. В некоторых аспектах функциональное средство может включать малую молекулу. В некоторых аспектах функциональное средство может включать хелатообразователь (например, DOTA, CHX-A''-DTPA, NOTA и другие). В некоторых аспектах функциональное средство может включать липид. В некоторых аспектах функциональное средство может включать лекарственное средство. В некоторых аспектах функциональное средство может включать комбинацию любого из вышеперечисленных функциональных средств.
[0143] Ацил-донорный субстрат (т.е. первый ацил-донорный субстрат) может быть связан со вторым ацил-донорным субстратом или линкером, причем второй ацил-донорный субстрат или линкер связаны со вторым иммуноглобулином, имеющим вторую вариабельную область тяжелой цепи и вторую вариабельную область легкой цепи, при этом вторая вариабельная область тяжелой цепи содержит генно-инженерно модифицированный остаток лизина. Например, первый ацил-донорный субстрат и второй ацил-донорный субстрат могут иметь первый и второй химический линкер в качестве первого и второго функционального средства, соответственно. Первый и второй химические линкеры могут быть связаны друг с другом посредством различных подходящих средств, включающих, например, клик-химию.
[0144] В одном варианте осуществления функциональное средство, включающее ацил-донорный субстрат, соответствует одной из формул (I) или (II):
(Z)m-Gln-(L)n-(Y) (I)
(Y)-(L)n-Gln-(Z)m (II)
где Z является карбоксибензилокси (CBZ) группой или аминокислотным остатком; Gln является остатком аминокислоты глутамина; каждый L независимо является нормальным или разветвленным линкером, содержащим от 1 до 20 атомов углерода, где один или более атомов углерода необязательно и независимо могут быть заменены атомом азота, кислорода или серы, и где каждый атом углерода и азота необязательно может быть замещен; или каждый L необязательно и независимо является аминокислотным остатком; m является целым числом от 0 до 5; n является целым числом от 0 до 5; и Y является функциональным средством.
[0145] В другом варианте осуществления ацил-донорный субстрат соответствует одной из формул (III) или (IV):
(Z)m-Gln-(L)n-(X) (III)
(X)-(L)n-Gln-(Z)m (IV)
где Z является карбоксибензилокси (CBZ) группой или аминокислотным остатком; Gln является остатком аминокислоты глутамина; каждый L независимо является нормальным или разветвленным линкером, содержащим от 1 до 20 атомов углерода, где один или более атомов углерода необязательно и независимо могут быть заменены атомом азота, кислорода или серы, и где каждый атом углерода и азота необязательно может быть замещен; или каждый L необязательно и независимо является аминокислотным остатком; m является целым числом от 0 до 5; n является целым числом от 0 до 5; и X является реакционноспособной группой.
[0146] В одном варианте осуществления Z является CBZ группой. В другом варианте осуществления Z является аминокислотным остатком.
[0147] В одном варианте осуществления L является аминокислотным остатком. В одном варианте осуществления n является 2-5, и каждый L независимо является аминокислотным остатком. В другом варианте осуществления L является нормальным или разветвленным линкером, содержащим от 1 до 20 атомов углерода, где один или более атомов углерода необязательно и независимо могут быть заменены атомом азота, кислорода или серы, и где каждый атом углерода и азота необязательно может быть замещен. В другом варианте осуществления L является полиэтиленгликолевой (ПЭГ) группой. В другом варианте осуществления n является 2-5, и один или более L включают одну или более аминокислот, и одна или более дополнительных групп L включает полиэтиленгликолевую (ПЭГ) группу.
[0148] В одном варианте осуществления m является 0. В другом варианте осуществления m является 1. В другом варианте осуществления m является 2. В другом варианте осуществления m является 3. В другом варианте осуществления m является 4. В другом варианте осуществления m является 5.
[0149] В одном варианте осуществления n является 0. В другом варианте осуществления n является 1. В другом варианте осуществления n является 2. В другом варианте осуществления n является 3. В другом варианте осуществления n является 4. В другом варианте осуществления n является 5.
[0150] В одном варианте осуществления X является (1R,8S,9s)-бицикло[6.1.0]нон-4-ин-9-илметанолом (BCN). В другом варианте осуществления X является:
[Chem.4]
(дибензоциклооктином; DBCO). В другом варианте осуществления X является транс-циклооктеном (TCO). В другом варианте осуществления X является азидо (N3). В другом варианте осуществления X является алкином. В другом варианте осуществления X является тетразин метилциклопропеном. В другом варианте осуществления X является норборненом. В другом варианте осуществления X является гидразидом/гидразином. В другом варианте осуществления X является альдегидом.
[0151] В одном варианте осуществления, для ацил-донорного субстрата согласно формуле (I), Z является CBZ группой; L является полиэтиленгликолевой (ПЭГ) группой (-O((CH2)2)-), этиламином (-NH((CH2)2)-) или пропиламином (-NH((CH2)3)-); и n является 0, 1, 2 или 3.
[0152] В другом варианте осуществления ацил-донорный субстрат соответствует формуле (I), где Z является CBZ группой, и L является аминокислотой. В одном варианте осуществления L является Gly. В одном аспекте этого варианта осуществления m является 1, и n является 1.
[0153] В одном варианте осуществления ацил-донорный субстрат соответствует формуле (II), где Z является CBZ группой; m является 1; n является 1, 2 или 3; и по меньшей мере один L является Gly.
[0154] В другом варианте осуществления функциональное средство Y является ауристатином F.
[0155] В одном варианте осуществления, для ацил-донорного субстрата согласно формуле (III), Z является CBZ группой; L является полиэтиленгликолевой (ПЭГ) группой (-O((CH2)2)-), этиламином (-NH((CH2)2)-) или пропиламином (-NH((CH2)3)-); и n является 0, 1, 2 или 3.
[0156] В другом варианте осуществления ацил-донорный субстрат соответствует формуле (III), где Z является CBZ группой, и L является аминокислотой. В одном варианте осуществления L является Gly. В одном аспекте этого варианта осуществления m является 1, и n является 1.
[0157] В одном варианте осуществления ацил-донорный субстрат соответствует формуле (IV), где Z является CBZ группой; m является 1; n является 1, 2 или 3; и по меньшей мере один L является Gly. В другом варианте осуществления функциональное средство Y является ауристатином F.
[0158] Раскрытые способы могут быть выполнены в отношении гуманизированного иммуноглобулина или его антигенсвязывающего фрагмента. Таким образом, в некоторых вариантах осуществления иммуноглобулин или его антигенсвязывающий фрагмент могут быть гуманизированным иммуноглобулином или его антигенсвязывающим фрагментом.
[0159] Раскрытые способы могут быть выполнены в отношении человеческого иммуноглобулина или его антигенсвязывающего фрагмента. Таким образом, в некоторых вариантах осуществления иммуноглобулин или его антигенсвязывающий фрагмент могут быть человеческим иммуноглобулином или его антигенсвязывающим фрагментом. В другом варианте осуществления иммуноглобулин или его антигенсвязывающий фрагмент могут быть нечеловеческим иммуноглобулином или его антигенсвязывающим фрагментом.
[0160] В одном варианте осуществления раскрытые способы могут быть выполнены в отношении иммуноглобулина IgG1, IgG2, IgG3 или IgG4 или его антигенсвязывающего фрагмента. В одном варианте осуществления способ выполняют в отношении иммуноглобулина IgG1 или его антигенсвязывающего фрагмента. В одном варианте осуществления способ выполняют в отношении иммуноглобулина IgG2 или его антигенсвязывающего фрагмента. В одном варианте осуществления способ выполняют в отношении иммуноглобулина IgG3 или его антигенсвязывающего фрагмента. В одном варианте осуществления способ выполняют в отношении иммуноглобулина IgG4 или его антигенсвязывающего фрагмента.
[0161] В одном варианте осуществления раскрытые способы могут быть выполнены в отношении иммуноглобулина IgA1, IgA2 или IgM или его антигенсвязывающего фрагмента. В одном варианте осуществления способ выполняют в отношении иммуноглобулина IgA1 или его антигенсвязывающего фрагмента. В одном варианте осуществления способ выполняют в отношении иммуноглобулина IgA2 или его антигенсвязывающего фрагмента. В одном варианте осуществления способ выполняют в отношении иммуноглобулина IgM или его антигенсвязывающего фрагмента. В одном варианте осуществления иммуноглобулин IgA или IgM или их антигенсвязывающий фрагмент имеет хвостовой участок. В другом варианте осуществления хвостовой участок иммуноглобулина IgA или IgM или его антигенсвязывающего фрагмента удален.
[0162] В одном варианте осуществления способ выполняют в отношении иммуноглобулина IgD или IgE или его антигенсвязывающего фрагмента. В одном варианте осуществления способ выполняют в отношении иммуноглобулина IgD или его антигенсвязывающего фрагмента. В одном варианте осуществления способ выполняют в отношении иммуноглобулина IgE или его антигенсвязывающего фрагмента.
[0163] В отношении способов, описанных в настоящем документе, в одном варианте осуществления микробная трансглутаминаза получена из Actinomadura sp. T-2, спор Bacillus subtilis, Corynebacterium ammoniagenes, Corynebacterium glutamicum, Enterobacter sp. C2361, Providencia sp. C1112, Streptoverticillium mobaraense (или Streptomyces mobaraensis), Streptomyces platensis M5218, Streptomyces hygroscopicus, Streptomyces lividans, Streptomyces lividans JT46/pAE053, Streptomyces lydicus, Streptomyces platensis, Streptomyces sioyansis, Streptoverticillium griseocarneum, Streptoverticillium ladakanum NRRL-3191, Streptoverticillium sp. s-8112 или Streptococcus suis. В одном варианте осуществления микробная трансглутаминаза получена из Streptomyces mobaraensis.
[0164] В отношении способов, описанных в настоящем документе, в одном варианте осуществления трансглутаминаза выделена из растения, выбранного из группы, состоящей из Medicago sativa, Beta vulgaris, Helianthus tuberosus, Zea mays, Glycine max, Arabidopsis thaliana, Nicotiana tabacum, Chlamydomonas reinhardtii, Dunaliella salina, Oryza sativa и Rosmarinus officinalis L.
[0165] В отношении способов, описанных в настоящем документе, в одном варианте осуществления трансглутаминаза получена из млекопитающего и выделена из Трансглутаминазы 1-7 и Фактора XIII.
[0166] В одном варианте осуществления трансглутаминаза по меньшей мере на 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% или 99% идентична микробной трансглутаминазе, описанной в настоящем документе. В одном варианте осуществления трансглутаминаза по меньшей мере на 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% или 99% идентична микробной трансглутаминазе из Streptomyces mobaraensis. Ферменты трансглутаминазы могут быть приобретены у Ajinomoto(R) или Zedira (номер продукта T001). В другом варианте осуществления трансглутаминаза очищена. В другом варианте осуществления трансглутаминаза рекомбинантно экспрессирована и затем очищена с применением способов, известных среднему специалисту в данной области.
[0167] В одном варианте осуществления фермент трансглутаминаза присутствует в способах, описанных в настоящем документе, в концентрации от приблизительно 0,1 единиц/мл до приблизительно 250 единиц/мл. В одном варианте осуществления фермент трансглутаминаза присутствует в способах, описанных в настоящем документе, в концентрации от приблизительно 1 единицы/мл до приблизительно 25 единиц/мл. В одном варианте осуществления фермент трансглутаминаза присутствует в способах, описанных в настоящем документе, в концентрации от приблизительно 1 единицы/мл до приблизительно 25 единиц/мл. В одном варианте осуществления фермент трансглутаминаза присутствует в способах, описанных в настоящем документе, в концентрации приблизительно 0,1 единицы/мл. В одном варианте осуществления фермент трансглутаминаза присутствует в способах, описанных в настоящем документе, в концентрации приблизительно 0,5 единицы/мл. В одном варианте осуществления фермент трансглутаминаза присутствует в способах, описанных в настоящем документе, в концентрации приблизительно 1 единица/мл. В одном варианте осуществления фермент трансглутаминаза присутствует в способах, описанных в настоящем документе, в концентрации приблизительно 5 единиц/мл. В одном варианте осуществления фермент трансглутаминаза присутствует в способах, описанных в настоящем документе, в концентрации приблизительно 10 единиц/мл. В одном варианте осуществления фермент трансглутаминаза присутствует в способах, описанных в настоящем документе, в концентрации приблизительно 15 единиц/мл. В одном варианте осуществления фермент трансглутаминаза присутствует в способах, описанных в настоящем документе, в концентрации приблизительно 20 единиц/мл. В одном варианте осуществления фермент трансглутаминаза присутствует в способах, описанных в настоящем документе, в концентрации приблизительно 25 единиц/мл. В одном варианте осуществления фермент трансглутаминаза присутствует в способах, описанных в настоящем документе, в концентрации приблизительно 50 единиц/мл. В одном варианте осуществления фермент трансглутаминаза присутствует в способах, описанных в настоящем документе, в концентрации приблизительно 75 единиц/мл. В одном варианте осуществления фермент трансглутаминаза присутствует в способах, описанных в настоящем документе, в концентрации приблизительно 100 единиц/мл. В одном варианте осуществления фермент трансглутаминаза присутствует в способах, описанных в настоящем документе, в концентрации приблизительно 150 единиц/мл, 200 единиц/мл или 250 единиц/мл.
[0168] В отношении способов, предложенных в настоящем документе, в одном варианте осуществления отношение функционального средства к иммуноглобулину составляет от приблизительно 1:1 до приблизительно 200:1. В одном варианте осуществления отношение функционального средства к иммуноглобулину составляет от приблизительно 1:1 до приблизительно 100:1. В одном варианте осуществления отношение функционального средства к иммуноглобулину составляет от приблизительно 1:1 до приблизительно 25:1. В одном варианте осуществления отношение функционального средства к иммуноглобулину составляет от приблизительно 1:1 до приблизительно 20:1. В одном варианте осуществления отношение функционального средства к иммуноглобулину составляет от приблизительно 1:1 до приблизительно 15:1. В одном варианте осуществления отношение функционального средства к иммуноглобулину составляет от приблизительно 1:1 до приблизительно 10:1. В одном варианте осуществления отношение функционального средства к иммуноглобулину составляет от приблизительно 1:1 до приблизительно 9:1. В одном варианте осуществления отношение функционального средства к иммуноглобулину составляет от приблизительно 1:1 до приблизительно 8:1. В одном варианте осуществления отношение функционального средства к иммуноглобулину составляет от приблизительно 1:1 до приблизительно 7:1. В одном варианте осуществления отношение функционального средства к иммуноглобулину составляет от приблизительно 1:1 до приблизительно 6:1. В одном варианте осуществления отношение функционального средства к иммуноглобулину составляет от приблизительно 1:1 до приблизительно 5:1. В одном варианте осуществления отношение функционального средства к иммуноглобулину составляет от приблизительно 1:1 до приблизительно 4:1. В одном варианте осуществления отношение функционального средства к иммуноглобулину составляет от приблизительно 1:1 до приблизительно 3:1. В одном варианте осуществления отношение функционального средства к иммуноглобулину составляет от приблизительно 1:1 до приблизительно 2:1. В одном варианте осуществления отношение функционального средства к иммуноглобулину о 1:1. В одном варианте осуществления отношение функционального средства к иммуноглобулину составляет от приблизительно 10:1 до приблизительно 100:1. В одном варианте осуществления отношение функционального средства к иммуноглобулину составляет от приблизительно 50:1 до приблизительно 200:1. В одном варианте осуществления отношение функционального средства к иммуноглобулину составляет от приблизительно 1:1 до приблизительно 50:1. В одном варианте осуществления отношение функционального средства к иммуноглобулину составляет от приблизительно 1:1 до приблизительно 100:1. В одном варианте осуществления отношение функционального средства к иммуноглобулину составляет от приблизительно 1:1 до приблизительно 150:1. В одном варианте осуществления отношение функционального средства к иммуноглобулину составляет от приблизительно 50:1 до приблизительно 100:1. В одном варианте осуществления отношение функционального средства к иммуноглобулину составляет от приблизительно 100:1 до приблизительно 200:1.
[0169] В одном варианте осуществления отношение функционального средства к иммуноглобулину составляет приблизительно 20:1. В одном варианте осуществления отношение функционального средства к иммуноглобулину известно и единообразно воспроизводится с применением следующих способов, раскрытых в настоящем документе. В некоторых вариантах осуществления отношение функционального средства:иммуноглобулина составляет приблизительно 1:1. В некоторых вариантах осуществления отношение функционального средства:иммуноглобулина составляет приблизительно 2:1. В некоторых вариантах осуществления отношение функционального средства:иммуноглобулина составляет приблизительно 3:1. В некоторых вариантах осуществления отношение функционального средства:иммуноглобулина составляет приблизительно 4:1. В некоторых вариантах осуществления отношение функционального средства:иммуноглобулина составляет приблизительно 5:1. В некоторых вариантах осуществления отношение функционального средства:иммуноглобулина составляет приблизительно 6:1. В некоторых вариантах осуществления отношение функционального средства:иммуноглобулина составляет приблизительно 7:1. В некоторых вариантах осуществления отношение функционального средства:иммуноглобулина составляет приблизительно 8:1. В некоторых вариантах осуществления отношение функционального средства:иммуноглобулина составляет приблизительно 9:1. В некоторых вариантах осуществления отношение функционального средства:иммуноглобулина составляет приблизительно 10:1. В некоторых вариантах осуществления отношение функционального средства:иммуноглобулина составляет приблизительно 11:1. В некоторых вариантах осуществления отношение функционального средства:иммуноглобулина составляет приблизительно 12:1. В некоторых вариантах осуществления отношение функционального средства:иммуноглобулина составляет приблизительно 13:1. В некоторых вариантах осуществления отношение функционального средства:иммуноглобулина составляет приблизительно 14:1. В некоторых вариантах осуществления отношение функционального средства:иммуноглобулина составляет приблизительно 15:1. В некоторых вариантах осуществления отношение функционального средства:иммуноглобулина составляет приблизительно 16:1. В некоторых вариантах осуществления отношение функционального средства:иммуноглобулина составляет приблизительно 17:1. В некоторых вариантах осуществления отношение функционального средства:иммуноглобулина составляет приблизительно 18:1. В некоторых вариантах осуществления отношение функционального средства:иммуноглобулина составляет приблизительно 19:1. В некоторых вариантах осуществления отношение функционального средства:иммуноглобулина составляет приблизительно 20:1. Отношение функционального средства к иммуноглобулину при использовании в настоящем документе вычисляют на основе среднего значения отношения конъюгирования функционального средства к иммуноглобулину в пуле антител в композиции.
[0170] В вариантах осуществления настоящего изобретения ацил-акцепторные сайты генно-инженерно введены в иммуноглобулин или его антигенсвязывающий фрагмент либо путем вставки лизина между двумя природными аминокислотными остатками, либо путем замены природной аминокислоты на лизин. Генно-инженерно модифицированные остатки лизина могут быть расположены в одном или более положениях последовательности иммуноглобулина. Оптимальный контекст для ацил-акцепторного сайта не только зависит от положения, но также требует, чтобы аминокислотный остаток, примыкающий к и расположенный непосредственно перед генно-инженерно модифицированным лизином, не был кислотным аминокислотным остатком; и чтобы аминокислотный остаток, примыкающий к и расположенный непосредственно после генно-инженерно модифицированного лизина, не был кислотным аминокислотным остатком или остатком пролина. В технологии конъюгирования МТГазой такие сконструированные сайты могут использоваться для конъюгирования множества функциональных средств, содержащих донор ацила, для получения конъюгатов антитела-лекарственного средства (ADC), биспецифичных антител, иммунотоксинов или других мАт-белковых комплексов. В другом варианте осуществления, комбинирующим множества сконструированных ацил-акцепторных сайтов, теоретическое отношение лекарственного средства к антителу (DAR) увеличивается для каждого сконструированного ацил-акцепторного сайта. Увеличение DAR в ADC приводит к доставке более функциональных средств субъекту на каждое моноклональное антитело, что позволяет получать определенные отношения DAR, добиваться более высокой гомогенности продукта и вводить пациенту более низкую дозу.
[0171] В предложенных в настоящем документе вариантах осуществления, где присутствуют по меньшей мере два дополнительных генно-инженерно модифицированных остатка лизина, отношение функционального средства к иммуноглобулину увеличено на основе количества дополнительных генно-инженерно модифицированных остатков лизина. Например, когда присутствуют два генно-инженерно модифицированных остатка лизина, это приводит к антителу с четырьмя сайтами трансамидирования и отношению функционального средства к иммуноглобулину от приблизительно 2:1 до приблизительно 4:1. В качестве другого примера, когда присутствуют три генно-инженерно модифицированных остатка лизина, это приводит к антителу с шестью сайтами трансамидирования и отношению функционального средства к иммуноглобулину от приблизительно 2:1 до приблизительно 6:1.
Конъюгированные иммуноглобулины
[0172] Также в настоящем документе раскрыты конъюгированные иммуноглобулины, включающие любой из иммуноглобулинов или их антигенсвязывающих фрагментов, раскрытых в настоящем документе, где генно-инженерно модифицированный остаток лизина является вставкой остатка лизина или природным аминокислотным остатком, который был подвергнут мутации с заменой на остаток лизина и конъюгирован с функциональным средством, включающим ацил-донорный субстрат, где ацил-донорный субстрат включает остаток глутамина. Дополнительные варианты осуществления включают конъюгированные иммуноглобулины, включающие любой из иммуноглобулинов или их антигенсвязывающих фрагментов, раскрытых в настоящем документе, где генно-инженерно модифицированный остаток лизина является вставкой остатка лизина или природным аминокислотным остатком, который был подвергнут мутации с заменой на остаток лизина и конъюгирован с ацил-донорным субстратом, где ацил-донорный субстрат включает остаток глутамина и реакционноспособную группу, где реакционноспособная группа может реагировать с функциональным средством после конъюгирования ацил-донорного субстрата с иммуноглобулином или его антигенсвязывающим фрагментом.
[0173] В одном варианте осуществления аминокислотные остатки, фланкирующие генно-инженерно модифицированный лизин, также генно-инженерно модифицированы, например, подвергнуты мутации, для оптимизации последовательности для сконструированного ацил-акцепторного лизинового сайта на иммуноглобулине. Например, аминокислотный остаток, примыкающий к и расположенный непосредственно после генно-инженерно модифицированного остатка лизина (например, аминокислотное положение +1), может быть подвергнут мутации с заменой на любой аминокислотный остаток кроме пролина или кислотного аминокислотного остатка. Аминокислотный остаток, примыкающий к и расположенный непосредственно перед генно-инженерно модифицированным остатком лизина (например, аминокислотное положение -1) может быть подвергнут мутации с заменой на любой аминокислотный остаток кроме кислотного аминокислотного остатка.
[0174] В одном варианте осуществления аминокислотный остаток, примыкающий к и расположенный непосредственно после, генно-инженерно модифицированного лизина (аминокислотное положение +1), может быть подвергнут мутации с заменой на лизин, аргинин, гистидин, серин, треонин, аспарагин, глутамин, цистеин, глицин, аланин, валин, изолейцин, лейцин, метионин, фенилаланин, тирозин или триптофан. В одном варианте осуществления подвергнутый мутации аминокислотный остаток, примыкающий к и расположенный непосредственно после генно-инженерно модифицированного лизина (аминокислотное положение +1), является глицином. В одном варианте осуществления подвергнутый мутации аминокислотный остаток, примыкающий к и расположенный непосредственно после генно-инженерно модифицированного лизина (аминокислотное положение +1), является лизином. В одном варианте осуществления подвергнутый мутации аминокислотный остаток, примыкающий к и расположенный непосредственно после генно-инженерно модифицированного лизина (аминокислотное положение +1), является аланином. В одном варианте осуществления подвергнутый мутации аминокислотный остаток, примыкающий к и расположенный непосредственно после генно-инженерно модифицированного лизина (аминокислотное положение +1), является валином. В одном варианте осуществления подвергнутый мутации аминокислотный остаток, примыкающий к и расположенный непосредственно после генно-инженерно модифицированного лизина (аминокислотное положение +1), является лейцином. В одном варианте осуществления подвергнутый мутации аминокислотный остаток, примыкающий к и расположенный непосредственно после генно-инженерно модифицированного лизина (аминокислотное положение +1), является изолейцином. В одном варианте осуществления подвергнутый мутации аминокислотный остаток, примыкающий к и расположенный непосредственно после генно-инженерно модифицированного лизина (аминокислотное положение +1), является метионином. В одном варианте осуществления подвергнутый мутации аминокислотный остаток, примыкающий к и расположенный непосредственно после генно-инженерно модифицированного лизина (аминокислотное положение +1), является фенилаланином. В одном варианте осуществления подвергнутый мутации аминокислотный остаток, примыкающий к и расположенный непосредственно после генно-инженерно модифицированного лизина (аминокислотное положение +1), является тирозином. В одном варианте осуществления подвергнутый мутации аминокислотный остаток, примыкающий к и расположенный непосредственно после генно-инженерно модифицированного лизина (аминокислотное положение +1), является триптофаном. В одном варианте осуществления подвергнутый мутации аминокислотный остаток, примыкающий к и расположенный непосредственно после генно-инженерно модифицированного лизина (аминокислотное положение +1), является серином. В одном варианте осуществления подвергнутый мутации аминокислотный остаток, примыкающий к и расположенный непосредственно после генно-инженерно модифицированного лизина (аминокислотное положение +1), является треонином. В одном варианте осуществления подвергнутый мутации аминокислотный остаток, примыкающий к и расположенный непосредственно после генно-инженерно модифицированного лизина (аминокислотное положение +1), является цистеином. В одном варианте осуществления подвергнутый мутации аминокислотный остаток, примыкающий к и расположенный непосредственно после генно-инженерно модифицированного лизина (аминокислотное положение +1), является аспарагином. В одном варианте осуществления подвергнутый мутации аминокислотный остаток, примыкающий к и расположенный непосредственно после генно-инженерно модифицированного лизина (аминокислотное положение +1), является глутамином. В одном варианте осуществления подвергнутый мутации аминокислотный остаток, примыкающий к и расположенный непосредственно после генно-инженерно модифицированного лизина (аминокислотное положение +1), является гистидином. В одном варианте осуществления подвергнутый мутации аминокислотный остаток, примыкающий к и расположенный непосредственно после генно-инженерно модифицированного лизина (аминокислотное положение +1), является аргинином. В одном варианте осуществления аминокислотный остаток, примыкающий к и расположенный непосредственно после генно-инженерно модифицированного лизина (аминокислотное положение +1), не является пролином, аспарагиновой кислотой или глутаминовой кислотой.
[0175] В одном варианте осуществления аминокислотный остаток, примыкающий к и расположенный непосредственно перед генно-инженерно модифицированным лизином (аминокислотное положение -1), может быть подвергнут мутации с заменой на лизин, аргинин, гистидин, серин, треонин, аспарагин, глутамин, цистеин, глицин, пролин, аланин, валин, изолейцин, лейцин, метионин, фенилаланин, тирозин или триптофан. В одном варианте осуществления подвергнутый мутации аминокислотный остаток, примыкающий к и расположенный непосредственно перед генно-инженерно модифицированным лизином (аминокислотное положение -1), является глицином. В одном варианте осуществления подвергнутый мутации аминокислотный остаток, примыкающий к и расположенный непосредственно перед генно-инженерно модифицированным лизином (аминокислотное положение -1), является лизином. В одном варианте осуществления подвергнутый мутации аминокислотный остаток, примыкающий к и расположенный непосредственно перед генно-инженерно модифицированным лизином (аминокислотное положение -1), является аланином. В одном варианте осуществления подвергнутый мутации аминокислотный остаток, примыкающий к и расположенный непосредственно перед генно-инженерно модифицированным лизином (аминокислотное положение -1), является валином. В одном варианте осуществления подвергнутый мутации аминокислотный остаток, примыкающий к и расположенный непосредственно перед генно-инженерно модифицированным лизином (аминокислотное положение -1), является лейцином. В одном варианте осуществления подвергнутый мутации аминокислотный остаток, примыкающий к и расположенный непосредственно перед генно-инженерно модифицированным лизином (аминокислотное положение -1), является изолейцином. В одном варианте осуществления подвергнутый мутации аминокислотный остаток, примыкающий к и расположенный непосредственно перед генно-инженерно модифицированным лизином (аминокислотное положение -1), является метионином. В одном варианте осуществления подвергнутый мутации аминокислотный остаток, примыкающий к и расположенный непосредственно перед генно-инженерно модифицированным лизином (аминокислотное положение -1), является фенилаланином. В одном варианте осуществления подвергнутый мутации аминокислотный остаток, примыкающий к и расположенный непосредственно перед генно-инженерно модифицированным лизином (аминокислотное положение -1), является тирозином. В одном варианте осуществления подвергнутый мутации аминокислотный остаток, примыкающий к и расположенный непосредственно перед генно-инженерно модифицированным лизином (аминокислотное положение -1), является триптофаном. В одном варианте осуществления подвергнутый мутации аминокислотный остаток, примыкающий к и расположенный непосредственно перед генно-инженерно модифицированным лизином (аминокислотное положение -1), является серином. В одном варианте осуществления подвергнутый мутации аминокислотный остаток, примыкающий к и расположенный непосредственно перед генно-инженерно модифицированным лизином (аминокислотное положение -1), является треонином. В одном варианте осуществления подвергнутый мутации аминокислотный остаток, примыкающий к и расположенный непосредственно перед генно-инженерно модифицированным лизином (аминокислотное положение -1), является цистеином. В одном варианте осуществления подвергнутый мутации аминокислотный остаток, примыкающий к и расположенный непосредственно перед генно-инженерно модифицированным лизином (аминокислотное положение -1), является аспарагином. В одном варианте осуществления подвергнутый мутации аминокислотный остаток, примыкающий к и расположенный непосредственно перед генно-инженерно модифицированным лизином (аминокислотное положение -1), является глутамином. В одном варианте осуществления подвергнутый мутации аминокислотный остаток, примыкающий к и расположенный непосредственно перед генно-инженерно модифицированным лизином (аминокислотное положение -1), является гистидином. В одном варианте осуществления подвергнутый мутации аминокислотный остаток, примыкающий к и расположенный непосредственно перед генно-инженерно модифицированным лизином (аминокислотное положение -1), является пролином. В одном варианте осуществления подвергнутый мутации аминокислотный остаток, примыкающий к и расположенный непосредственно перед генно-инженерно модифицированным лизином (аминокислотное положение -1), является аргинином. В одном варианте осуществления где аминокислотный остаток, примыкающий к и расположенный непосредственно перед генно-инженерно модифицированным лизином (аминокислотное положение +1), не является аспарагиновой кислотой или глутаминовой кислотой.
[0176] В некоторых вариантах осуществления иммуноглобулин может быть гуманизированным. В других вариантах осуществления иммуноглобулин является человеческим. В другом варианте осуществления иммуноглобулин является химерным.
[0177] Ацил-донорный субстрат, включающий остаток глутамина и реакционноспособную группу, также может включать линкер "L". Аналогичным образом, функциональные средства, которые содержат ацил-донорный субстрат, включающий остаток глутамина, могут содержать линкер между функциональным средством и ацил-донорным субстратом молекулы. Линкеры могут быть нерасщепляемыми линкерами или расщепляемыми линкерами. Примеры линкеров включают, например, дисульфид-содержащие линкеры, линкеры на основе ацеталя и линкеры на основе кеталя. В некоторых аспектах линкер может быть нерасщепляемым линкером. Подходящие нерасщепляемые линкеры включают, без ограничения перечисленными, полиэтиленгликоль (ПЭГ) или алкил. В некоторых вариантах осуществления линкер может включать ПЭГ. В некоторых аспектах линкер может быть расщепляемым линкером. Подходящие расщепляемые линкеры включают, например, валин-цитруллин-пара-аминобензил. В некоторых аспектах линкер может быть дисульфид-содержащим линкером. В некоторых аспектах линкер может быть линкером на основе ацеталя. В некоторых аспектах линкер может быть линкером на основе кеталя.
[0178] Конъюгированные иммуноглобулины согласно изобретению включают функциональное средство. Подходящие функциональные средства включают, например, терапевтическое средство или диагностическое средство. Подходящие функциональные средства включают, например, флуорофоры, флуоресцентные красители, полипептиды, иммуноглобулины, антибиотики, нуклеиновые кислоты, радионуклиды, химические линкеры, малые молекулы, хелатообразователи, липиды и лекарственные средства. В некоторых аспектах функциональное средство может включать флуорофор. В некоторых аспектах функциональное средство может включать флуоресцентный краситель. В некоторых аспектах функциональное средство может включать полипептид. В некоторых аспектах функциональное средство может включать иммуноглобулин. В некоторых аспектах функциональное средство может включать антибиотик. В некоторых аспектах функциональное средство может включать нуклеиновую кислоту (такую как ДНК или РНК). В некоторых аспектах функциональное средство может включать радионуклид. В некоторых аспектах функциональное средство может включать малую молекулу. В некоторых аспектах функциональное средство может включать хелатообразователь (например, DOTA, CHX-A"-DTPA, NOTA и другие). В некоторых аспектах функциональное средство может включать липид. В некоторых аспектах функциональное средство может включать лекарственное средство. В некоторых аспектах функциональное средство может включать комбинацию любого из вышеперечисленных функциональных средств.
[0179] Таким образом, раскрытые конъюгированные иммуноглобулины включают, без ограничения перечисленными, конъюгаты иммуноглобулина-флуорофора, конъюгаты иммуноглобулина-флуоресцентного красителя, конъюгаты иммуноглобулина-полипептида, конъюгаты иммуноглобулина-иммуноглобулина, конъюгаты иммуноглобулина-антибиотика, конъюгаты иммуноглобулина-нуклеиновой кислоты, конъюгаты иммуноглобулина-радионуклид, конъюгаты иммуноглобулина-химического линкера, конъюгаты иммуноглобулина-малой молекулы, конъюгаты иммуноглобулина-хелатообразователя, конъюгаты иммуноглобулина-липида и конъюгаты иммуноглобулина-лекарственного средства.
[0180] Любой из иммуноглобулинов, раскрытых в настоящем документе, может быть конъюгирован с любым из функциональных средств, раскрытых в настоящем документе. Например, конъюгированный иммуноглобулин может включать флуорофор, флуоресцентный краситель, полипептид, иммуноглобулин, антибиотик, нуклеиновую кислоту, радионуклид, химический линкер, малую молекулу, хелатообразователь, липид или лекарственное средство.
[0181] В некоторых вариантах осуществления иммуноглобулин может быть конъюгирован с низкомолекулярным противоопухолевым средством, таким как ауристатин. В некоторых аспектах функциональное средство может быть ауристатином F (AuF). Таким образом, раскрытые конъюгированные иммуноглобулины включают любой из раскрытых выше иммуноглобулинов, конъюгированных с ауристатином F (конъюгат AuF-T135K).
Фармацевтические композиции
[0182] Также в настоящем документе предложены фармацевтические композиции. В некоторых вариантах осуществления фармацевтические композиции могут включать любой из иммуноглобулинов, раскрытых в настоящем документе. В некоторых вариантах осуществления фармацевтические композиции могут включать любой из конъюгированных иммуноглобулинов, раскрытых в настоящем документе. В одном варианте осуществления фармацевтическая композиция включает конъюгированный иммуноглобулин и фармацевтически приемлемый носитель.
Молекулы нуклеиновых кислот, кодирующие конъюгируемые иммуноглобулины, и включающие их клетки-хозяева
[0183] Также в настоящем документе предложены молекулы нуклеиновых кислот, кодирующие любой из конъюгируемых иммуноглобулинов или их антигенсвязывающих фрагментов, раскрытых в настоящем документе. В качестве примера, в одном варианте осуществления молекула нуклеиновой кислоты кодирует конъюгируемый иммуноглобулин, включающий вариабельную область тяжелой цепи и вариабельную область легкой цепи, и где кодируемый конъюгируемый иммуноглобулин включает генно-инженерно модифицированный остаток лизина, и где генно-инженерно модифицированный остаток лизина является вставкой остатка лизина или природным аминокислотным остатком, который был подвергнут мутации с заменой на остаток лизина. Генно-инженерно модифицированный остаток лизина иммуноглобулина или его антигенсвязывающих фрагментов, конъюгирован с остатком глутамина ацил-донорного субстрата, с получением в результате конъюгированного иммуноглобулина.
[0184] Также раскрыты клетки-хозяева, включающие любую из раскрытых молекул нуклеиновых кислот или плазмид, которые кодируют конъюгируемый иммуноглобулин или его антигенсвязывающие фрагменты. Подходящие клетки-хозяева включают, без ограничения перечисленными, клетки млекопитающих, бактериальные клетки, дрожжевые клетки, клетки насекомых и другие.
[0185] Следующие примеры представлены для дополнительного описания некоторых вариантов осуществления, раскрытых в настоящем документе. Примеры предназначены для иллюстрации, а не ограничения, раскрытых вариантов осуществления.
Примеры
[0186]
Пример 1:
[0187] Материалы и методы
Сайт-направленный мутагенез
[0188] Мутации вводили при использовании набора Stratagene QuikChange XL согласно методике производителя. Требуемые мутации подтверждали с помощью секвенирования ДНК.
Делеционный мутагенез
[0189] Фрагменты HC для экспрессии Fab получали при ПЦР-амплификации лидерной последовательности HC до шарнирной области, которая заканчивалась разными 3'-кодонами. Фрагменты ПЦР клонировали в плазмиду для экспрессии в клетках млекопитающих на основе pcDNA3.1 при использовании набора для клонирования Fusion HD согласно методике производителя (CLONTECH).
Трансфекция и получение стабильной клеточной линии
[0190] Для каждого миллилитра клеток, трансфицируемых при использовании ExpiFectamine, 333,3 нг плазмиды HC и 333,3 нг плазмиды LC подвергали контакту в течение 5-10 мин в 50 мкл Opti-MEM (ThermoFisher Scientific, Waltham, MA). Аналогичным образом, 2,67 мкл ExpiFectamine подвергали контакту в 50 мкл Opti-MEM. Раствор ExpiFectamine добавляли к смеси ДНК и инкубировали в течение 20-30 мин при комнатной температуре. Смесь ДНК:ExpiFectamine добавляли к клеткам при перемешивании и инкубировали при 37°C, 8% CO2, встряхивании при 125 об/мин. На следующий день 5 мкл энхансера 1 и 50 мкл энхансера 2 на мл клеток добавляли к трансфекции с длительным инкубированием в течение еще 7-10 дней.
[0191] Экспрессирующие антитело стабильные пулы отбирали, добавляя 1 мл трансфектантов в 14 мл DMEM в колбе T75 с 5 мкг/мл бластицидина и 400 мкг/мл зеоцина (Invivogen, San Diego, CA) через один - три дня после трансфекции. После того, как резистентные к лекарственным средствам клетки выросли до конфлюентности, среду заменяли средой для экспрессии FreeStyle 293 в течение 24-48 ч. Клетки физически отделяли, постукивая колбу (трипсинизация приводила к низкой жизнеспособности, данные не показаны), и затем сеяли при плотности 6×105 клеток/мл в 30 мл среды для экспрессии FreeStyle 293 в колбе для шейкера объемом 125 мл. Культуры инкубировали при 37°C в 8% CO2 с встряхиванием при 125 об/мин.
Получение мАт и Fab
[0192] Стабильно трансфицированные пулы линии клеток сеяли при плотности 0,6-1×106 клеток/мл в среде для экспрессии FreeStyle 293. Клетки инкубировали при 37°C, 8% CO2, встяхивали при 125 об/мин. Через два дня после того, как культура достигла плотности 1×106 клеток/мл, культуры подпитывали конечными концентрациями 10 г/л Select Soytone (BD Biosciences, San Jose, CA), 5 мМ валериановой кислоты (Sigma Aldrich, St. Louis, MO) и 1:100 CD Lipid Concentrate (ThermoFisher Scientific, Waltham, MA). Когда жизнеспособность клеток составила меньше 50% (7-10 дней), культуры центрифугировали в течение 1 ч при 8000 об/мин в роторе Beckman JLA8.1000. Затем супернатант фильтровали через 0,2 мкм PES фильтр и хранили при 4°C или -20°C до очистки.
Очистка мАт и Fab
[0193] МАт очищали при использовании одного из двух методов. Для супернатантов мАт и Fab объемом меньше 10 мл, проводили афинную хроматографию при использовании периодического метода очистки на смоле с белком A или смоле с антителами к каппа-цепи, соответственно. Супернатанты MAb и Fab объемом больше 25 мл очищали при использовании предварительно набитых колонок с белком A или колонок с антителами к каппа-цепи, соответственно.
Периодическая очистка
[0194] Смолу Prosep-vA High Capacity Protein A (Millipore, Billerica, MA) уравновешивали DPBS и 100 мкл добавляли к 3-6 мл образца. После инкубирования при 4°C в течение от 1 часа до всей ночи, смолу три раза промывали 1 мл DPBS и центрифугировали при 18000×g в течение 30 сек. Образец элюировали со смолы при добавлении 400 мкл 0,1 М глицина, pH 2,9, с последующим центрифугированием при 18000×g в течение 30 сек. Образец нейтрализовали 40 мкл 1 М Трис, pH 8,0. Буфер меняли при использовании 0,5 мл фильтров Amicon Ultra с отсечкой 10 кДа (Millipore, Billerica, MA), концентрируя образец до ~100 мкл при центрифугировании при 18000×g в течение 3-5 минут. Концентрированный образец разбавляли в 400 мкл DPBS с последующим центрифугированием. Процесс повторяли в общей сложности четыре раза.
Колоночная очистка
[0195] Колонку с белком A или HiTrap KappaSelect (GE Healthcare, Little Chalfont, UK) уравновешивали 10 объемами колонки (CV) 20 мМ фосфата натрия, 10 мМ ЭДТА, pH 7,2. Затем наносили образец с последующей промывкой несвязавшегося материала 10 CV уравновешивающего буфера. Образец элюировали при использовании 5 CV 0,1 М глицина, pH 2,9. Фракции, содержащие мАт, объединяли и подвергали диализу в DPBS при использовании кассет Slide-A-Lyzer с MWCO 20 кДа (ThermoFisher Scientific, Waltham, MA).
Синтез субстрата Z-Gln-Gly
[0196] Z-Gln-Gly приобретали в Bachem, и Z-Gln-Gly-CAD-биотин приобретали в ZEDIRA (ФИГ. 2).
Z-Gln-Gly-пентафторфениловый сложный эфир (Z-Gln-Gly-PFP)
[0197] Синтез проводили, как описано Пастернаком (Pasternack et al., 1997), с модификациями (ФИГ. 3). Z-Gln-Gly (328,8 мг, 0,975 ммоль) и пентафторфенол (Sigma, 183,3 мг, 0,996 ммоль) растворяли в 10 мл N,N'-диметилформамида (ДМФА).Затем добавляли EDAC-HCl (Sigma, 201 мг, 1,04 ммоль) и проводили реакцию при комнатной температуре под N2 в течение 2 ч. К реакции добавляли 100 мл холодного диэтилового эфира и оставляли для осаждения на ночь при -80°C. Неочищенный продукт собирали центрифугированием и подвергали перекристаллизации из 20 мл 60°C метанола. Конечный продукт промывали холодным диэтиловым эфиром и сушили в токе N2. Конечный выход составил 219,04 мг (44,7%). Масс-спектрометрия с электрораспылительной ионизацией (ЭРИ-МС) (прямая инфузия в 50% ацетонитрила в 0,1% муравьиной кислоте): m/z 504,0 ([M+H], 86%), 526,0 ([M+Na], 100%), 542,0 ([M+K], 22%).
Z-Gln-Gly-пропилазид (Z-Gln-Gly-N3)
[0198] Z-Gln-Gly-PFP (21,24 мг, 4,22×10-5 моль) и азидопропиламин (Click Chemistry Tools, 42,2 мкл 0,91 М стокового раствора в ДМФА, 3,84×10-5 моль) растворяли в конечном объеме 0,42 мл ДМФА. Реакцию перемешивали под N2 в течение ночи при комнатной температуре. Продукт очищали с помощью ВЭЖХ при использовании в качестве подвижной фазы 0,1% муравьиной кислоты в H2O/0,1% муравьиной кислоты в ацетонитриле. Продукт сушили в вакууме. Конечный выход составил 10,7 мг (60,4%). ЭРИ-МС (градиентная очистка): m/z 420,2 ([M+H], 100%), 442,1 ([M+Na], 32%).
Z-Gln-Gly-PEG2-бициклононин (Z-Gln-Gly-PEG2-BCN)
[0199] Z-Gln-Gly-PFP (18,4 мг, 3,66×10-5 моль) и N-[(1R,8S,9s)-бицикло[6.1.0]нон-4-ин-9-илметилоксикарбонил]-1,8-диамино-3,6-диоксаоктан (Sigma-Aldrich) растворяли в конечном объеме 0,37 мл ДМФА. Реакцию перемешивали под N2 в течение ночи при комнатной температуре. Продукт очищали с помощью ВЭЖХ при использовании в качестве подвижной фазы 0,1% муравьиной кислоты в H2O/0,1% муравьиной кислоты в ацетонитриле. Продукт сушили в вакууме. Конечный выход составил 0,6 мг (2%). ЭРИ-МС (градиентная очистка): m/z 688,2 ([M+H], 100%), 710,2 ([M+Na], 69%).
Z-Gln-Gly-PEG2-Ауристатин F (Z-Gln-Gly-PEG2-AuF)
[0200] Z-Gln-Gly-PFP (22,2 мг, 4,37×10-5 моль) растворяли в 0,85 мл ДМФА, добавляли 1,2-этилендиамин (2,3×10-5 л, 3,5×10-4 моль) и перемешивали. Реакцию перемешивали под N2 в течение ночи при комнатной температуре. Продукт очищали с помощью ВЭЖХ при использовании в качестве подвижной фазы 0,1% муравьиной кислоты в H2O/0,1% муравьиной кислоты в ацетонитриле. Продукт сушили в вакууме. Конечный выход Z-Gln-Gly-NH2 составил 3,8 мг (23%). ЭРИ-МС (градиентная очистка): m/z 380,1 ([M+H], 100%). Z-Gln-Gly-NH2 (3,8 мг, 1,01×10-5 моль) и NHS-PEG2-AuF (10,3 мг, 1,03×10-5 моль) растворяли в 0,2 мл ДМФА. Добавляли триэтиламин (14 мкл, 1×10-4 моль) и проводили реакцию под N2 в течение ночи при комнатной температуре. Половину реакционной смеси очищали с помощью ВЭЖХ при использовании в качестве подвижной фазы 0,1% муравьиной кислоты в H2O/0,1% муравьиной кислоты в ацетонитриле. Продукт сушили в вакууме. Конечный выход CBZ-Gln-Gly-PEG2-AuF составил 3,8 мг (60%). ЭРИ-МС (градиентная очистка): m/z 634,0 ([M+H]2+, 100%), 645,1 ([M+Na]2+, 45%), 1267,0 ([M+H], 16%).
Реакция с микробной трансглутаминазой
[0201] МАт при различных концентрациях от 100 мкг/мл до 2,5 мг/мл подвергали контакту с 785 мкМ Z-Gln-Gly-биотина (Zedira, Darmstadt, Germany), Z-Gln-Gly-N3, Z-Gln-Gly-PEG2-BCN или Z-Gln-Gly-PEG2-AuF с 1 Ед/мл микробной трансглутаминазы (Zedira, Darmstadt, Germany) в DPBS в течение по меньшей мере 16 ч при 37°C.
Высокопроизводительный анализ мТГазы
[0202] МАт при различных концентрациях от 500 нг/мл до 10 мкг/мл инкубировали с 60 мкМ Z-Gln-Gly-биотина и 0,1 Ед/мл мТГазы (Zedira) в DPBS в течение по меньшей мере 16 ч при 37°C. 96-луночный планшет покрывали 1 мкг/мл мАт козы против IgG Fcγ человека (Jackson ImmunoResesearch) в течение ночи при 4°C. После промывки планшетов, оставленные на ночь реакции с мТГазой разводили 1:10 в 50 мкл DPBS, добавляли в планшет и инкубировали в течение 1 ч при 22°C. Затем планшет промывали и добавляли в лунки 0,1 мкг/мл стрептавидина-пероксидазы хрена (HRP) (Jackson ImmunoResesearch). Планшет снова промывали и проводили количественный анализ стрептавидин-HRP-связанных биотинилированных образцов в относительных единицах флуоресценции (RFU) при использовании субстрата QuantaBlue (Thermo) согласно методике производителя.
Ультравысокоэффективная жидкостная хроматография (UPLC)/ЭРИ-МС анализ конъюгирования мАт
[0203] Очищенные антитела разводили до 1 мг/мл в DPBS (в случае концентрации ниже 1,0 мг/мл, образцы оставляли в исходной концентрации). Реакции, содержащие диметилсульфоксид (ДМСО), обессоливали при использовании обессоливающей центрифужной колонки Zeba. Затем мАт либо дегликозилировали при использовании ПНГазы F (NEB), либо расщепляли на Fab'2 и Fc-фрагменты при использовании IdeS (Promega). Для дегликозилирования мАт, к мАт (50 или 100 мкл) добавляли буфер G7 (5 или 10 мкл) и ПНГазу F (1 или 2 мкл). Реакцию инкубировали в микроволновом реакторе Discover (CEM) в 2 циклах: 1) мощность СВЧ 10 Вт, 37°C, 10 мин, и затем ожидание в течение 3-5 минут; 2) мощность СВЧ 2 Вт, 37°C, 10 мин. Часть дегликозилированного образца восстанавливали, добавляя дитиотреитол (DTT) до конечной концентрации 20 мМ, с последующим инкубированием при 60°C в течение 3 мин. Для получения Fab'2 и Fc-фрагментов, 50 Ед/мкл IdeS добавляли к 0,5 мг/мл мАт и инкубировали при 37°C в течение 0,5-1 ч. Образцы IdeS были восстановлены или не были восстановлены.
[0204] Затем образцы исследовали при использовании УВЭЖХ Waters Acquity и масс-спектрометра Q-Tof Premier. Образцы (по 0,5-2 мкг каждый) вводили в обессоливающую микроколонку MassPrep при 65°C, элюировали с колонки после 5 мин выравнивания в 95% подвижной фазы A, 10 мин градиента (5-90% B) и 10 мин повторного выравнивания в 95% подвижной фазы A, при 0,05 мл/мин. Подвижная фаза A - 0,1% муравьиной кислоты в воде. Подвижная фаза B - 0,1% муравьиной кислоты в ацетонитриле. Масс-спектрометр Q-Tof работал в режиме регистрации положительных ионов, V-режим с детектированием в диапазоне 500-4000 m/z. Параметры источника были следующими: напряжение на капилляре 2,25 кВ (интактное антитело)-2,50 кВ (восстановленное антитело); напряжение на пробоотборном конусе 65,0 В (интактное антитело) или 50,0 В (восстановленное антитело); исходная температура 100°C; температура десольватации 250°C; поток десольватирующего газа 550 л/ч. Деконволюцию белкового пика выполняли при использовании функции MassLynx MaxEnt 1.
Обращенно-фозовая жидкостная хроматография (ЖХ)-МС
[0205] Образцы исследовали с помощью обращенно-фазовой жидкостной хроматографии. Образцы, содержащие 100 мкл ADC при концентрации 1-2 мг/мл, восстанавливали 20 мМ DTT при 60°C в течение 3 минут. Образцы исследовали с помощью ВЭЖХ Waters Alliance с SQD и PDA детекторами. Каждый образец вводили в колонку Proteomix RP-1000 (5 мкм, 4,6×150 мм, Sepax) при 65°C. В случае LC и HC мутантов, разделение LC и HC проводили при уравновешивании 3,0 мин в 75% подвижной фазы A (0,1% ТФУ в воде) и градиенте 27 мин (25-55% подвижной фазы B [0,1% ТФУ в воде]) при скорости потока 1 мл/мин.
[0206] Масс-спектрометр SQD работал в режиме детектирования положительных ионов, V-режим с детектированием в диапазоне 200-2000 m/z. Параметры источника были следующие: напряжение на капилляре 3,20 кВ; напряжение на пробоотборном конусе 40°C; температура источника 150°C; температура десольватации 250°C; поток десольватирующего газа 700 л/ч. Время сканирования 1 секунда. Деконволюцию белкового пика выполняли при использовании функции MassLynx MaxEnt 1. Детектор PDA был установлен на 280 нм.
[0207] DAR вычисляли по относительной интенсивности сигнала неконъюгированной и конъюгированной LC и неконъюгированной и конъюгированной HC. Общее DAR вычисляли при использовании следующего уравнения: общее DAR=(DAR LC+DAR HC)×2.
Пример 2
[0208]
Анализ доступных для растворителя лизинов на IgG антителах
[0209] Для дополнительного исследования доступных для растворителя лизинов на IgG антителах, кристаллические структуры IgG1-каппа Fab (4F3F), IgG1-лямбда Fab (4HK0) и IgG1 Fc (1FC1) исследовали на наличие потенциальных ацил-акцепторных сайтов. Поскольку мТГаза избирательно воздействует на доступные для растворителя глутамины субстрата и лизины в петлях (Spolaore et al., 2012), доступные для растворителя лизины изучали при использовании Discovery Studio v4.5 с молекулярным радиусом 1,4 (ФИГ. 4). В VH Антитела 01 присутствуют 7 доступных для растворителя лизинов, причем 3 в изгибе или петле. Поскольку количество лизинов может изменяться в различных мАт из-за использования различных семейств вариабельных областей зародышевой линии и соматической гипермутации, доступность для растворителя лизинов в VH-области пяти других антител также исследовали на основе аналогичных положений остатков в 4F3F структуре. Такие VH-области потенциально содержат 1-5 доступных для растворителя лизинов, 1 или 2 из которых присутствуют в изгибе или петле. В Vκ Антитела 01 присутствует 6 доступных для растворителя лизинов, при этом 4 из них находятся в петлях или изгибах. VK-области из четырех других антител потенциально содержат 3-5 доступных для растворителя лизинов, 2 из которых присутствуют в петле или изгибе. В Антителе 05 используется лямбда-цепь, при этом доступность для растворителя лизинов определяли при использовании кристаллической структуры 4HK0 на основе подобия последовательности легкой цепи. Антитело 05 потенциально содержит 2 доступных для растворителя лизина в Vλ домене, при этом только 1 присутствует в петле. Константные домены IgG1 содержат 23 доступных для растворителя лизина, 13 из которых находятся в петлях или изгибах (ФИГ. 6). Каппа константная область содержит 8 лизинов, причем 5 - в изгибе или петле. Лямбда содержит 6 доступных для растворителя лизинов, причем половина из них расположены в петлях или изгибах. В общей сложности, проанализированные антитела содержат от 42 до 50 доступных для растворителя лизинов в петлях или изгибах, на каждое мАт.
[0210] Для определения, может ли микробная трансглутаминаза трансамидировать нативный остаток лизина на IgG антителе, антитела инкубировали с Z-Gln-Gly-CAD-биотином и мТГазой при 37°C в течение ночи. Образцы расщепляли IdeS и восстанавливали DTT, после чего массы LC, Fd и Fc-фрагментов определяли с помощью масс-спектрометрии. Два массовых пика, соответствующие гликоформам G0F (+1445 Да) и G1F (+1608 Да), наблюдали для каждого Fc. Антитело 04 также содержало сайт N-связанного гликозилирования в VH, при этом наблюдали два типа гликанов, и гликаны G2FS и G2FS2. Все образцы не имели C-концевого лизина (128 Да), что подтверждалось различием от -130 до -132 Да между наблюдаемой и теоретической массой Fc. Хотя в различных антителах присутствовало 42-50 потенциальных ацил-акцепторных лизинов, неожиданно ни HC, ни LC не были модифицированы ацил-донорным субстратом (ФИГ. 7; Таблица 1).
[Таблица 1]
[0211]
Пример 3
Мутация природных аминокислотных остатков лизина для получения ацил-акцепторного сайта
[0212] Поскольку никаких ацил-акцепторных сайтов в человеческих IgG1 мАт нет, проводили лизин-сканирующий мутагенез Антитела 01 для определения областей, которые можно было генно-инженерно модифицировать с введением ацил-акцепторного сайта(ов). Для повышения вероятности идентификации новых ацил-акцепторных сайтов, мутагенез ограничивали доступными для растворителя остатками в петлях или изгибах константных областей человеческих IgG1 HC и каппа и лямбда LC (ФИГ. 6). Мутантные мАт первоначально подвергали скринингу на трансамидирование с помощью анализа на основе ИФА, путем инкубирования мутантов с мТГазой и Z-Gln-Gly-CAD-биотином в течение ночи при 37°C. МАт захватывали на покрытом антителом к Fcγ планшете, и биотинилированные мАт детектировали HRP-конъюгированным стрептавидином. Антитело дикого типа 01 и Антитело 01-L (которое трансамидировано по Lys447) включали в качестве отрицательного и положительного контролей, соответственно. Сигнал для Антитела 01-L положительного контроля превышал 12000 RFU, а у мутантных мАт колебался в пределах от ~1100 RFU до ~11000 RFU (ФИГ. 7).
[0213] Трансамидирование всех мутантов по CH1 и верхней части шарнирной области с Z-Gln-Gly исследовали с помощью ЭРИ-МС, чтобы определить, соответствует ли процент конъюгирования с сигналом RFU, наблюдаемым в анализе ИФА. Образцы инкубировали с мТГазой и Z-Gln-Gly в течение ночи при 37°C, и их массы определяли с помощью ЭРИ-МС. Сигнал RFU из иФА в целом коррелировал с данными ЭРИ-МС, где значения RFU больше 7000 соответствовали >70% конъюгированию мутантов S136K, D221K, T223K и H224K (ФИГ. 7). Сигнал RFU для T135K и T225K был ниже 7000, но эти мутанты были конъюгированы на 80,4% и 100%, соответственно. Напротив, мутант G137K имел RFU 8616, но конъюгирован только на 38,9%. Таким образом, хотя сигнал RFU >7000 соответствовал высокому проценту трансамидирования, было несколько ложноположительных и ложноотрицательных результатов. Вместо того, чтобы проводить низкопроизводительный скрининг ЭРИ-МС остальных мутантов, порог >4000 RFU использовали для отбора CH2 и CH3 образцов для анализа. Поскольку только два образца каппа имели, и ни один образец лямбда не имел, больше 4000 RFU, также исследовали образцы, показавшие больше 3000 RFU.
[0214] Реакцию трансамидирования проводили путем инкубирования Z-Gln-Gly-CAD-биотина и мТГазы в течение ночи при 37°C с CH2 мутантами M252K, E283K, A287K и N297K; CH3 мутантами P343K, G385K, G420K, H433K, L443K, S444K и P445K; каппа мутантами D151K, L201K, S202K и E213K; и лямбда мутантами V147K, Q187K и E213K, и последующий анализ выполняли с помощью ЭРИ-МС (ФИГ. 7). Три дополнительных CH1 мутанта, S191K, S192K и L193K, исследовали с помощью ЭРИ-МС, но не включали в исходный скрининг ИФА. Из этих мутантов, CH1 мутант L193K, CH2 мутант M252K, CH3 мутант P445K, каппа мутанты L201K и S202K и лямбда мутант E213K были конъюгированы больше чем на 70% (ФИГ. 7). Результаты для CH2 мутанта N297K не были окончательными из-за очень слабого сигнала.
[0215] Мутантов, у которых обнаружили наиболее высокую эффективность конъюгирования, повторно исследовали в одном эксперименте при использовании субстрата Z-Gln-Gly-CAD-биотин. Область конъюгирования подтверждали при расщеплении образцов IdeS и восстановлении перед анализом ЭРИ-МС с получением Fd (CH1 и шарнирная область), Fc (CH2 и CH3) и LC фрагментов. Конъюгирование с N297K опять же было неокончательным из-за низкого сигнала Fc, несмотря на высокие сигналы Fd и LC. Трансамидирование всех образцов коррелировало с доменом, содержащим лизиновую мутацию. Мутанты T135K и P445K были конъюгированы на 100%, а конъюгирование с M252K составляло почти 100% (ФИГ. 8). Мутации S136K и S221K были конъюгированы больше чем на 80%. Остальные три мутанта по шарнирной области имели эффективность конъюгирования меньше 50%. Оба LC мутанта были конъюгированы больше чем на 80%.
Пример 4
[0216]
Вставка остатка лизина с получением ацил-акцепторного сайта
[0217] Остатки Ser190 - Thr195 формируют бета-изгиб, который соединяет бета-цепи E и F. Лизиновое сканирование в этой поверхностной области показало присутствие только одного сайта в положении 193, которое является приемлемым ацил-донорным сайтом. Эта область формирует альфа-спираль, причем эта вторичная структура, возможно, препятствует трансамидированию в данной области. Для возможности нарушения структуры в этой области, лизин вставляли между Ser191 и Ser192, Ser192 и Leu193 или Leu193 и Gly194. Образцы инкубировали с мТГазой и Z-Gln-Gly-CAD-биотином в течение ночи при 37°C, и их массы определяли с помощью ЭРИ-МС. Вставка лизина между Ser191 и Ser192 или Ser192 и Leu193 была на 100% трансамидирована, но не в случае вставки между Leu193 и Gly194 (Таблица 2).
[Таблица 2]
[0218]
Пример 5
Трансамидирование в результате присоединения лизина к C-концу LC
[0219] Ранее было продемонстрировано, что C-концевой остаток HC Lys447 является сайтом трансамидирования, когда расщепление Lys447 блокировано дополнительным C-концевым остатком в положении 448, см. предварительную заявку на патент США 62/269,138, поданную 18 декабря 2015 года, и PCT/US 2016/067165, поданную 16 декабря 2016 года, все содержание которых прямо включено в настоящий документ посредством отсылки. Лизин вводили на C-конец LC для определения, достаточно ли C-концевое присоединение одного лизина, чтобы действовать в качестве ацил-акцепторного сайта. В отличие от нативного C-концевого лизина в HC, C-концевой лизин на LC не расщеплялся карбоксипептидазой (Таблица 3). Однако этот генно-инженерно модифицированный лизин не был ацил-акцепторным сайтом. Дополнительный лейцин присоединяли к C-концу генно-инженерно модифицированного лизина (LC-KL), поскольку мотив Lys-Leu на C-конце HC эффективно трансамидируется. Однако LC-KL не был трансамидирован. Нативный C-концевой цистеин (Cys214) в LC образует межцепочечную дисульфидную связь с HC, и данная область является внутренней в кристаллических структурах этой области (данные не показаны). Вероятно, стерическое затруднение или отсутствие доступа растворителя препятствуют трансамидированию. Один лейцин добавляли между Cys214 и лизином в попытке сделать лизин более доступным для МТГазы. И снова не наблюдали расщепления C-концевого лизина, а также не наблюдали трансамидирования мотива LK. Однако 9,1% LC с мотивом LKL были трансамидированы. Чтобы отвести лизин еще дальше от интерфейса LC-HC, Gly-Ser линкер вводили между Cys214 и лизином. Такое присоединение привело к расщеплению C-концевого лизина (GGSGK). Защита от расщепления лизина при присоединении C-концевого лейцина (GGSGKL) привела к трансамидированию 77,8% LC.
[Таблица 3]
[0220]
Пример 6
Анализ дополнительных доноров ацила
[0221] Одним из применений конъюгирования с акцептором ацила на мАт является производство сайт-специфичных ADC-конъюгатов. Конъюгирование функциональных средств с мАт может быть выполнено одним из двух способов. Во-первых, двухстадийный способ может требовать конъюгирования лизина мТГазой с донором ацила, синтезированным с реакционноспособной группой, такой как BCN, DBCO, TCO, азидо (N3), алкин, тетразин или малеимид. Вторая стадия включает конъюгирование функционального средства с реакционноспособной группой при использовании, например, клик-химии, в которой не используются соединения меди, или тиол-реактивной химии. Z-Gln-Gly-N3 не доступен в продаже; поэтому аминопропил-N3 присоединяли к гидроксильной группе Z-Gln-Gly, как подробно описано в разделе Методы. Антитело 01 с лизиновыми мутациями в HC или LC инкубировали с Z-Gln-Gly-N3 или Z-Gln-Gly-PEG2-BCN и мТГазой, как описано выше. Образцы обессоливали и исследовали с помощью ЖХ-МС, чтобы определить присоединение субстрата к мАт. Z-Gln-Gly-N3 эффективно присоединялся (>75% конъюгирования или DAR 1,5) при большинстве лизиновых замен (Таблица 4). Наиболее предпочтительными сайтами трансамидирования являлись: HC-S135K, HC-L193K, HC-D221K, HC-M252K, HC-N297K, HC-P445K и LC-L201K. Все мутанты HC-T136K, HC-T223K, HC-T225K, LC-S202K и LC-GGSGKL были трансамидированы на >75% с Z-Gln-Gly-CAD-биотином (ФИГ. 7), но не с Z-Gln-Gly-N3. Поэтому не все доноры ацила одинаково трансамидируют один и тот же ацил-акцепторный сайт. Также было продемонстрировано Z-Gln-Gly-PEG2-BCN, где ни один ацил-акцепторный сайт не был эффективно трансамидирован (Таблица 4). В отличие от Z-Gln-Gly-N3, процент трансамидирования Z-Gln-Gly-PEG2-BCN значительно не отличался на ацил-акцепторных сайтах. Например, наблюдали 32% различие в трансамидировании T135K и S136K с Z-Gln-Gly-N3, но только 4% различие с Z-Gln-Gly-PEG2-BCN.
[Таблица 4]
[0222] Примечательно, что конъюгирование с D221K и N297K привело к множественным сайтам конъюгирования в HC. Мутация D221K примыкает к Lys222, который, как правило, не является ацил-акцепторным сайтом. Возможно, присутствие смежного лизина способствует низкому уровню трансамидирования Lys222. Следует отметить, что только субстрат Z-Gln-Gly-N3 конъюгируется больше чем на одном сайте в мутанте D221K. Структура Z-Gln-Gly-N3 меньше, чем у других тестируемых субстратов (ФИГ. 2), и возможно, что стерическое затруднение второго сайта конъюгирования блокирует его трансамидирование другими субстратами.
[0223] Мутация N297K удаляет сайт гликозилирования в Asn297. Негликозилированные мАт принимают другую структуру, нежели гликозилированные формы. Мутация N297Q также приводит к негликозилированному мАт и нарушает структуру таким образом, что Gln295 подвергается трансамидированию множеством ацил-акцепторных субстратов (Mindt, T.L. et al., 2008, Modification of different IgG1 antibodies via glutamine and lysine using bacterial and human tissue transglutaminase, Bioconjug. Chem 19:271-278; Jeger,S. et al., 2010, Site-specific and stoichiometric modification of antibodies by bacterial transglutaminase, Angew. Chem Int Ed Engl 49:9995-9997; Dennler, P.et al., 2014, Transglutaminase-based chemo-enzymatic conjugation approach yields homogeneous antibody-drug conjugates, Bioconjug. Chem 25:569-578). Вероятно, N297K изменяет конформацию CH2 области, что приводит к тому, что нативные лизины становятся ацил-акцепторными сайтами для Z-Gln-Gly-N3.
[0224] Второй способ конъюгирования включает одну стадию конъюгирования, поэтому функциональное средство синтезируют с ацил-донорной группой. Этот способ тестировали при синтезе Z-Gln-Gly группы на PEG2-Ауристатине F (Z-Gln-Gly-PEG2-AuF). Z-Gln-Gly-PEG2-AuF инкубировали с лизиновыми HC и LC мутантами Антитела 01 и мТГазой в течение ночи при 37°C. Образцы обессоливали и исследовали с помощью ЖХ-МС для определения присоединения субстрата к мАт. Все протестированные HC мутанты продемонстрировали различные уровни конъюгирования (Таблица 4). Эффективность конъюгирования на некоторых сайтах не соответствовала эффективности конъюгирования, наблюдаемой с Z-Gln-Gly-N3. Конъюгирование с Z-Gln-Gly-PEG2-AuF было низким для T135K, L193K и D221K, но высоким для Z-Gln-Gly-N3. L201K была наиболее эффективной с конъюгированием 92% LC с Z-Gln-Gly-PEG2-AuF. N297K снова продемонстрировал множественные сайты конъюгирования, но эффективность не была настолько высокой, как с Z-Gln-Gly-N3.
Пример 7
[0225]
Получение множества ацил-акцепторных сайтов на одном антителе
[0226] Мутантное мАт с одним сконструированным ацил-акцепторным сайтом дает теоретическое DAR 2. При комбинировании множества сконструированных ацил-акцепторных сайтов теоретическое DAR увеличивается на 2 для каждого сайта. Увеличение нагрузки лекарственного средства в ADC приводит к доставке большего количества цитотоксических препаратов в клетку-мишень на каждое мАт, что может позволить вводить пациенту более низкие дозы. Для определения, может ли множество ацил-акцепторных сайтов давать мАт с отношением функционального средства к иммуноглобулину больше 2, конструировали мАт, включающие мутантную LC L201K или S202K в комбинации с мутациями CH1 T135K или S136K, мутациями CH1-CH2 S136K-N297K, CH1-CH2-CH3 мутациями S136K-N297K-P445K или мутациями CH1-CH3 T135K-L448, с получением мАт 4, 6, 8 или 6 ацил-акцепторными сайтами, соответственно.
[0227] Образцы на основе T135K инкубировали с мТГазой и Z-Gln-Gly-CAD-биотином в течение ночи при 37°C, и их массы определяли с помощью ЖХ-МС после восстановления. LC L201K были конъюгированы на 100% во всех образцах (Таблица 5). LC S202K в одном мутанте T135KHC имела больше чем в два раза более высокую эффективность, чем двойной мутант T135K-L448HC (69,8% в сравнении с 31,8%). T135K был конъюгирован на 100% только с мутацией L201KLC, с получением DAR 4,0. В сочетании с мутацией S202KLC конъюгирование было снижено до 88,7% со средним DAR 3,17. Объединение T135K с мутацией L448HC привело к 100% конъюгированию с мАт. Однако DAR было неоднородным, причем 77,1% содержали 2 биотина на HC, а 22,9% содержали только 1 биотин, с получением среднего DAR 3,54. При объединении двойных HC мутаций с мутацией LC, эффективность конъюгирования с HC снижалась. Количество типов DAR 1 выросло более чем вдвое, а типов DAR 2 снизилось в 2,3-6,5 раз. Несмотря на это два мАт имели потенциальное DAR 6, среднее DAR было меньше 4.
[Таблица 5]
[0228] Образцы, содержащие мутацию S136KHC, инкубировали с мТГазой и Z-Gln-Gly-CAD-биотином в течение ночи при 37°C, и их массы определяли с помощью ЭРИ-МС после расщепления IdeS и восстановления. Во всех образцах CH1 и легкая цепь были трансамидированы (Таблица 5). S136K был конъюгирован на 84,5% - 88,1% для всех образцов. Трансамидирование S202K было выше в одиночном мутанте S136K по сравнению с двойными и тройными HC мутантами (72,5% и 56% или 59,7%). DAR для S136KHC/S202KLC составило 3,16 из 4 потенциальных сайтов. Сигнал ЭРИ-МС для Fc- фрагментов, содержащих мутацию N297K, был очень слабым, и эффективность конъюгирования не удалось определить. Поэтому значения DAR для двойных и тройных HC мутантов составляли по меньшей мере 2,95 и 2,8.
[0229] Также исследовали трансамидирование нескольких сайтов другими ацил-донорными субстратами. Мутанты на основе T135K инкубировали с Z-Gln-Gly-N3, Z-Gln-Gly-PEG2-BCN или Z-Gln-Gly-PEG2-AuF и мТГазой в течение ночи при 37°C. Конъюгирование с LC L201K и S202K сайтами каждого из субстратов было аналогичным для этих мАт с множественными мутациями и одиночными мутациями L201K и S202K, показанными в Таблице 4, за исключением того, что наблюдали отсутствие конъюгирования Z-Gln-Gly-PEG2-BCN с LC мутациями (ФИГ. 11). Два мутанта, содержащие одиночную мутацию T135K плюс одиночную мутацию LC, продемонстрировали эффективность конъюгирования с T135K, аналогичную одной T135K в Таблице 4 для всех ацил-донорных субстратов. Добавление второй мутации L448 привело к получению смесей образцов с DAR 1 и DAR 2 на HC. Наиболее эффективно трансамидированными образцами были T135KHC/L201KLC+Z-Gln-Gly-N3 (DAR 3,57 из 4), T135K-L448HC+Z-Gln-Gly-N3 (DAR 3,1 из 4), и T135K-L448HC/L201KLC+Z-Gln-Gly-N3 (DAR 5,04 из 6).
Пример 8
[0230]
Анализ лизиновых замен в других изотипах IgG
[0231] Fc IgG1, IgG2, IgG3 и IgG4 идентичны на 89,2% (ФИГ. 10, выравнивание последовательностей), поэтому было возможно, чтобы лизиновые вставки или замены в положениях в IgG2, IgG3 и IgG4, аналогичных IgG1, могли быть сконструированными ацил-акцепторными сайтами для мТГазы. Во-первых, IgG2, IgG3 и IgG4 дикого типа исследовали для определения присутствия каких-либо нативных ацил-акцепторных сайтов, специфических для этих изотипов. МАт инкубировали с мТГазой и Z-Gln-Gly-CAD-биотином в течение ночи при 37°C. Образцы расщепляли IdeS, и массы Fc-фрагментов определяли с помощью ЭРИ-МС. Как и в случае с IgG1, трансамидирование не присутствовало в IgG2, IgG3 или IgG4 дикого типа (Таблица 6).
[Таблица 6]
[0232] Лизиновые замены вводили в положения, аналогичные IgG1 (M252, N297 и P445). За исключением IgG4, который кодирует лейцин в положении 445, между изотипами нет никаких различий в этих остатках (ФИГ. 10). Мутантные мАт инкубировали с мТГазой и Z-Gln-Gly-CAD-биотином в течение ночи при 37°C. Образцы расщепляли IdeS, и массы Fc-фрагментов определяли с помощью ЭРИ-МС. Мутанты N297K и M252K были эффективно трансамидированы, причем мутанты N297K давали больше одного сайта конъюгирования на HC, как и в случае IgG1 (Таблица 7). IgG2-N297K и IgG4-N297K содержали 2 ацил-акцепторных сайта, тогда как IgG3 содержал 3. Мутант P445K был эффективно трансамидирован только в случае изотипа IgG2. Трансамидирование P445K составляло только 62,6% и 50,6% для IgG3 и IgG4, соответственно.
[Таблица 7]
Пример 9
[0233]
Сайты трансамидирования в Fab'-области
[0234] Шарнирная область IgG является гибким линкером между CH1 и CH2, и поэтому возможно, что эта гибкость может позволять провести трансамидирование акцепторов ацила в этой области (Zhang, et al., 3D Structural Fluctuation of IgG1 Antibody Revealed by Individual Particle Electron Tomography, Sci Rep, (2015) 5:9803). Действительно, мутанты верхней части шарнирной области, D221K, T223K, H224K и T225K, эффективно трансамидируются; однако трансамидирование отсутствует в мутантах, содержащих мутации в средней или нижней части шарнирной области. Такое отсутствие трансамидирования может быть вызвано структурными ограничениями межцепочечных дисульфидных связей и близостью к CH2, соответственно. Чтобы определить, могут ли эти остатки трансамидироваться при снятии каких-либо структурных ограничений, лизиновые мутации вводили в контексте Fab', содержащего всю шарнирную область с мутациями Cys226 и Cys229 с заменой на аланин (DTHTAPPAPAPELL).
[0235] Трансаминирование мутантных Fab'-фрагментов определяли с помощью ЭРИ-МС, как описано выше, при использовании Z-Gln-Gly-CAD-биотина в качестве донора ацила. Массы HC части Fab'-фрагментов совпадали с ожидаемыми значениями за исключением мутанта L235K. Эта мутация приводит к C-концевому остатку лизина, который отщепляется, вероятно, вследствие активности карбоксипептидазы B, как и в случае с полноразмерным IgG (Harris et al., Structural characterization of a recombinant CD4-IgG hybrid molecule, Eur J Biochem, (1990) 194:611-620; Harris, Processing of C-terminal lysine and arginine residues of proteins isolated from mammalian cell culture, J Chromatogr, (1995) 705:129-134; Dick, Jr. et al., C-terminal lysine variants in fully human monoclonal antibodies: investigation of test methods and possible causes, Biotechnol. Bioeng., (2008) 100:1132-1143). Хотя никакого трансамидирования полноразмерного IgG не наблюдали, отмечали незначительный уровень трансамидирования (4,7%) в Fab' дикого типа, возможно по Lys222 (ФИГ. 9). Сканирование методом лизинового мутагенеза Fab' показало присутствие нескольких ацил-акцепторных сайтов в положениях D221, T223, H224, T225, P230 и E233. Эти Fab'-фрагменты были трансамидированы 1 или 2 биотинами, при этом один присутствовал на генно-инженерно модифицированном лизине, а второй на нативном лизине.
[0236] Поскольку вторичная структура играет значительную роль при определении, является ли лизин трансамидированным, и вторичная структура шарнирной области в различных Fab'-мутантах вряд ли будет значительно отличаться, было неожиданно, что нативный Lys222 и мутанты C226K, P227K, C229K, A231K, P232K, L234K и L235K не были трансамидированы. Исследовали первичные последовательности, окружающие лизиновые мутации. Ранее было продемонстрировано, что C-концевой остаток (+1) по отношению к акцептору ацила влияет на трансамидирование; в частности, +1 кислотный остаток или остаток пролина приводят к слабому или к полному отсутствию трансамидирования, см., например, предварительную заявку на патент США 62/269,138 поданную 18 декабря 2015 года, и PCT/US2016/067165, поданную 16 декабря 2016 года, все содержание которых прямо включено в настоящий документ посредством отсылки. Все мутанты C226K, P227K, C229K и A231K содержат +1 пролин, а P232K содержит +1 глутамат. Кроме того, Lys222 и L234K содержат -1 кислотный остаток. Возможно, что любой кислотный остаток, который фланкирует акцептор ацила, ингибирует трансамидирование. Поэтому аланиновые мутации вводили с целью мутации либо -1, либо +1 кислотного остатка, либо +1 пролина. Действительно, мутация кислотных остатков и остатков пролина приводила к эффективному трансамидированию лизиновых замен (Таблица 8). Мутация D221A повышала трансамидирование с 5% до 66%. Аналогичным образом, мутация -1 или +1 кислотного остатка в P232K, E233A и E233A,L234K Fab'-фрагментах приводила к увеличению трансамидирования с 46% до 93% и с 62% до 86%, соответственно. Мутация +1 пролина привела к подобным результатам для лизиновых мутантов C226K (с 52% до 71%), P227K (с 57% до 81%), C229K (с 33% до 91%) и A231K (с 22% до 93%).
[0237] Влияние длины шарнирной области на трансамидирование мутантов T223K, H224K, T225K, P228K, P230K и E233K исследовали путем удаления всех кроме смежного +1 остатка. Удаление C-концевых остатков шарнирной области не оказывало никакого отрицательного влияния на трансамидирование сконструированного ацил-акцепторного сайта в случае мутантов T223K, H224K и T225K, и увеличивало трансамидирование мутантов P228K, P230K и E233K (Таблица 8).
[Таблица 8]
[0238]
Пример 10
Получение димерных молекул антител
[0239] В дополнение к опосредованному мТГазой трансамидированию между низкомолекулярным донором ацила и макромолекулярным акцептором ацила, исследовали трансамидирование мутантных Fab-фрагментов с мАт, содержащим донор ацила. Мутантное N297Q мАт содержит два ацил-донорных сайта в положениях 295 и 297 (Jeger et al., Site-specific and stoichiometric modification of antibodies by bacterial transglutaminase, Angew. Chem Int Ed Engl, (2010) 49:9995-9997). Fab'-мутанты D221K, H224K, T225K, P228K, P230K и E233K инкубировали с N297Q и мТГазой в течение ночи при 37°C. Образцы восстанавливали и исследовали с помощью ДСН-ПААГЭ. Неконъюгированное мАт и Fab' дают полосы, соответствующие 23 кДа (LC), 25 кДа (Fab-Vh-CH1), 38 кДа (мТГаза) и 49 кДа (HC). Одиночное конъюгирование мАт-Fab' приводит к полосе 73 кДа, и конъюгирование двух Fab'-фрагментов с мАт приводит к полосе 98 кДа. Действительно, все образцы содержат полосы, соответствующие ~75 и ~100 кДа (ФИГ. 11).
Выводы к Примерам
[0240] Учитывая количество нативных лизинов в поверхностных петлях и изгибах в антителе, стало неожиданностью, что не удалось обнаружить подходящих акцепторов ацила на каком-либо тестируемом антителе. Эти результаты находятся в прямом противоречии с предыдущим рассуждением в этой области, в том числе предположениями в публикации Mindt et al., 2008, в которой предположительно продемонстрировали конъюгирование в среднем 0,3 молекулы флуоресцентного красителя с природным остатком лизина на антитела chCE7. Миндт также предположительно сообщил о низком уровне (0,1 молекулы/антитело) трансамидирования ацил-акцепторного субстрата с тем же антителом, chCE7. Однако многочисленные последующие публикации не смогли воспроизвести результаты Миндта (см. Strop et al., 2013; Jeger et al., 2010; Siegmund et al., 2015). В частности, Джегер отметил, что "модификация нативного chCE7 или RTX не наблюдалась ни с одним из субстратов" (см. Jeger et al., 2010). Поэтому результаты, раскрытые в публикации Миндта, вероятно, обусловлены либо фоновой флуоресценцией в анализе, либо являются специфическими для акцептора или донора ацила, расположенных в вариабельных областях chCE7.
[0241] Хотя на моноклональных антителах дикого типа акцепторы ацила не были обнаружены, замещения одиночных аминокислот лизином неожиданно выявили несколько положений на антителе, которые можно модифицировать в качестве акцепторов ацила. По меньшей мере один сайт идентифицировали в каждом из доменов константной области в HC и LC (ФИГ. 12). Помимо их расположения в доступных для растворителя петлях или изгибах, не было четкой консенсусной последовательности, окружающей ацил-акцепторные сайты. Примерами последовательностей сайтов, которые подвергались трансамидированию более чем на 70%, были KSK135SG, STK136GG, SSK193GT, TLK252IS, QYK297ST, LSK445G*, QGK201SS, GLK202SP, PTK213CS. Аналогичные последовательности обнаружены в окружающих лизинах, которые не были трансамидированы, например, в CH1 (SSK133ST), CH3 (LTK360NQ) и каппа (QLK126SG, LSK183AD)
[0242] Кислотный или пролиновый остаток, фланкирующий лизин, препятствовал эффективному трансамидированию, как продемонстрировали мутации в шарнирной области Fab-фрагментов. В дополнение к мутации остатка на лизин, ацил-акцепторный сайт может быть сконструирован путем мутации остатков, фланкирующих присутствующий лизин. На основе трансамидирования Lys222 в Fab-мутанте D221A возможна мутация других остатков пролина или кислотных остатков, фланкирующих нативный лизин во всей последовательности мАт. Например, лизины IgG1 PK246P, PK248D, TK290P, GK317E и DK414S, каппа лизины SK169D и EK188H и лямбда лизин EK207T фланкированы кислотными и пролиновыми остатками, и мутация с заменой на любой остаток кроме кислотного остатка или остатка пролина может создавать ацил-акцепторный сайт на таком лизине. Кроме того, существует возможность того, что некоторые сайты были пропущены в сканировании методом лизинового мутагенеза из-за того, что мутантный лизин находится рядом с кислотным остатком или остатком пролина, как это было в случае нескольких Fab шарнирных мутантов.
[0243] Также было показано, что структура, окружающая остаток, влияла на трансамидирование. При освобождении центральной области и нижней части шарнирной области любой структуры, вводимой CH2 и/или межцепочечными дисульфидными связями посредством образования Fab-фрагментов, лизины, которые не подвергались трансамидированию в контексте мАт, были трансамидированы в Fab. В контексте полноразмерного мАт с межцепочечными дисульфидными связями на цистеинах 226 и 229, P230K и E233K не подвергались трансамидированию. Однако в случае Fab-фрагмента и межцепочечных дисульфидных связей эти остатки подвергались трансамидированию. Дисульфидная связь, фланкирующая ацил-акцепторный сайт, сама по себе не препятствует трансамидированию, поскольку положение +1 в лямбда мутанте E213K является межцепочечной дисульфидной связью, а мутант подвергался трансамидированию. Таким образом, изменение трехмерной структуры шарнирной области при удалении межцепочечных дисульфидных связей и/или удаление возможных стерических ограничений ближайшего домена CH2 позволяло проходить трансамидированию лизинов в этих сайтах.
[0244] МТГаза ранее была исследована в качестве средства для трансамидирования глутаминов при конструировании мАт с применением одного из двух методов (Josten, et al., Use of microbial transglutaminase for the enzymatic biotinylation of antibodies, J Immunol.Methods, (2000) 240:47-54; Mindt, et al., Modification of different IgG1 antibodies via glutamine and lysine using bacterial and human tissue transglutaminase, Bioconjug.Chem, (2008) 19:271-278; Jeger, et al., Site-specific and stoichiometric modification of antibodies by bacterial transglutaminase, Angew.Chem Int Ed Engl, (2010) 49:9995-9997; Strop, et al., Location matters: site of conjugation modulates stability and pharmacokinetics of antibody drug conjugates, Chem Biol, (2013) 20:161-167). Хотя оба метода эффективны при конъюгировании субстратов на основе аминов на мАт, они имеют недостатки. Первый подход требует дегликозилирования мАт либо ферментативно, либо путем мутагенеза (Mindt, et al., Modification of different IgG1 antibodies via glutamine and lysine using bacterial and human tissue transglutaminase, Bioconjug.Chem, (2008) 19:271-278; Jeger, et al., Site-specific and stoichiometric modification of antibodies by bacterial transglutaminase, Angew.Chem Int Ed Engl, (2010) 49:9995-9997). Агликозилированные мАт подвергаются конформационному изменению, которое снижает термическую стабильность, повышает чувствительость к протеазам и увеличивает скорость агрегации (Mimura, et al., The influence of glycosylation on the thermal stability and effector function expression of human IgG1-Fc: properties of a series of truncated glycoforms, Mol Immunol., (2000) 37:697-706; Kwon, et al., Effect of glycosylation on the stability of alpha1-antitrypsin toward urea denaturation and thermal deactivation, Biochim.Biophys.Acta, (1997) 1335:265-272; Wang, et al., pH dependent effect of glycosylation on protein stability, Eur J Pharm Sci, (2008) 33:120-127; Yamaguchi, et al., Glycoform-dependent conformational alteration of the Fc region of human immunoglobulin G1 as revealed by NMR spectroscopy, Biochim.Biophys.Acta, (2006) 1760:693-700; Arnold, et al., The impact of glycosylation on the biological function and structure of human immunoglobulins, Annu Rev Immunol., (2007) 25:21-50; Zheng, et al., The impact of glycosylation on monoclonal antibody conformation and stability, MAbs., (2011) 3:568-576). Замещение N297K привело к сайту трансамидирования, и применение этого сайта также имеет такой же недостаток, что и мутация N297Q.
[0245] Второй подход включает в себя конструирование глутаминовой метки LLQG из 4 аминокислот, либо на концах, либо в доступной для растворителя области мАт (Strop, et al., Location matters: site of conjugation modulates stability and pharmacokinetics of antibody drug conjugates, Chem Biol, (2013) 20:161-167). Добавление 4 аминокислот увеличивает вероятность иммуногенного ответа у пациента, что снижает эффективность ADC. Напротив, в модификациях, описанных в настоящем документе, используются одиночные аминокислотные замены или вставки одной аминокислоты, например лизина, в качестве сайтов конъюгирования, что уменьшает вероятность индукции иммунного ответа у пациентов. Кроме того, могут использоваться несколько сайтов в константных доменах IgG, каппа и лямбда, если обнаружено, что один сайт придает нежелательное свойство мАт, такое как повышенную агрегацию или иммуногенность.
[0246] Таким образом, ацил-акцепторные сайты могут быть сконструированы в антителе или антигенсвязывающем фрагменте либо путем введения лизина между двумя нативными остатками, либо путем замены лизина в различных положениях во всей последовательности IgG1-4, каппа или лямбда. Оптимальный контекст для ацил-акцепторного сайта не только зависит от положения, но также не требует присутствия кислотного остатка в положении -1 или +1, или пролина в позиции +1. В технологии конъюгирования, основанной на применении микробной трансглутаминазы, такие сконструированные сайты могут использоваться для конъюгирования различных функциональных средств, содержащих донор ацила, для создания ADC-конъюгатов, биспецифичных антител, иммунотоксинов или других мАт-белковых комплексов.
[0247] Специалистам в данной области техники будет очевидно, что в предпочтительные варианты осуществления изобретения могут быть внесены многочисленные изменения и модификации, и что такие изменения и модификации могут быть сделаны без отступления от сущности изобретения. Поэтому предполагается, что прилагаемая формула изобретения охватывает все такие эквивалентные варианты, которые соответствуют истинной сущности и объему изобретения.
НЕФОРМАЛЬНЫЙ СПИСОК ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЕЙ
[0248]
[Таблица9-1]
--->
СПИСОК ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЕЙ
<110> EISAI R&D MANAGEMENT CO., LTD.
<120> КОНЪЮГИРОВАННЫЕ С ЛИЗИНОМ ИММУНОГЛОБУЛИНЫ
<130> EIS001PCT
<140> PCT/JP2017/021672
<141> 2017-06-12
<150> US 62/348,410
<151> 2016-06-10
<160> 339
<170> PatentIn version 3.5
<210> 1
<211> 231
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: 4F3F-VH
<400> 1
Gln Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Pro Glu Leu Glu Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Ser Phe Thr Gly Tyr
20 25 30
Thr Met Asn Trp Val Lys Gln Ser His Gly Lys Ser Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Leu Ile Thr Pro Tyr Asn Gly Ala Ser Ser Tyr Asn Gln Lys Phe
50 55 60
Arg Gly Lys Ala Thr Leu Thr Val Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Asp Leu Leu Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Phe Cys
85 90 95
Ala Arg Gly Gly Tyr Asp Gly Arg Gly Phe Asp Tyr Trp Gly Ser Gly
100 105 110
Thr Pro Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe
115 120 125
Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu
130 135 140
Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp
145 150 155 160
Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu
165 170 175
Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser
180 185 190
Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro
195 200 205
Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys
210 215 220
Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
225 230
<210> 2
<211> 213
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: 4F3F-VK
<400> 2
Asp Ile Glu Leu Thr Gln Ser Pro Ala Ile Met Ser Ala Ser Pro Gly
1 5 10 15
Glu Lys Val Thr Met Thr Cys Ser Ala Ser Ser Ser Val Ser Tyr Met
20 25 30
His Trp Tyr Gln Gln Lys Ser Gly Thr Ser Pro Lys Arg Trp Ile Tyr
35 40 45
Asp Thr Ser Lys Leu Ala Ser Gly Val Pro Gly Arg Phe Ser Gly Ser
50 55 60
Gly Ser Gly Asn Ser Tyr Ser Leu Thr Ile Ser Ser Val Glu Ala Glu
65 70 75 80
Asp Asp Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Trp Ser Lys His Pro Leu Thr
85 90 95
Phe Gly Ser Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala Pro
100 105 110
Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly Thr
115 120 125
Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys
130 135 140
Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln Glu
145 150 155 160
Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser
165 170 175
Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr Ala
180 185 190
Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe
195 200 205
Asn Arg Gly Glu Cys
210
<210> 3
<211> 237
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: 4HK0-VH
<400> 3
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Gly Tyr
20 25 30
Tyr Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Trp Ile Asn Pro Asn Ser Gly Gly Thr Asn Tyr Ala Gln Lys Phe
50 55 60
Gln Gly Trp Val Thr Met Thr Arg Asp Thr Ser Ile Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Arg Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Gly Gly Leu Glu Pro Arg Ser Val Asp Tyr Tyr Tyr Tyr Gly
100 105 110
Met Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Ala Ser
115 120 125
Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr
130 135 140
Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro
145 150 155 160
Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val
165 170 175
His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser
180 185 190
Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile
195 200 205
Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val
210 215 220
Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys His His His His His His
225 230 235
<210> 4
<211> 214
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: 4HK0-VK
<400> 4
Gln Ser Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Val Ser Val Ala Pro Gly Gln
1 5 10 15
Thr Ala Arg Ile Thr Cys Gly Gly Asn Asn Ile Gly Ser Lys Ser Val
20 25 30
His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Val Leu Val Val Tyr
35 40 45
Asp Asp Ser Asp Arg Pro Ser Gly Ile Pro Glu Arg Phe Ser Gly Ser
50 55 60
Asn Ser Gly Asn Thr Ala Thr Leu Thr Ile Ser Arg Val Glu Ala Gly
65 70 75 80
Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Gln Val Trp Asp Ser Ser Ser Asp His
85 90 95
Val Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly Gln Pro Lys
100 105 110
Ala Ala Pro Ser Val Thr Leu Phe Pro Pro Ser Ser Glu Glu Leu Gln
115 120 125
Ala Asn Lys Ala Thr Leu Val Cys Leu Ile Ser Asp Phe Tyr Pro Gly
130 135 140
Ala Val Thr Val Ala Trp Lys Ala Asp Ser Ser Pro Val Lys Ala Gly
145 150 155 160
Val Glu Thr Thr Thr Pro Ser Lys Gln Ser Asn Asn Lys Tyr Ala Ala
165 170 175
Ser Ser Tyr Leu Ser Leu Thr Pro Glu Gln Trp Lys Ser His Arg Ser
180 185 190
Tyr Ser Cys Gln Val Thr His Glu Gly Ser Thr Val Glu Lys Thr Val
195 200 205
Ala Pro Thr Glu Cys Ser
210
<210> 5
<211> 224
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: 1FC1
<400> 5
Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro
1 5 10 15
Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser
20 25 30
Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp
35 40 45
Pro Gln Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Gln Val His Asn
50 55 60
Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Gln Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val
65 70 75 80
Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asn Trp Leu Asp Gly Lys Glu
85 90 95
Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys
100 105 110
Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr
115 120 125
Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr
130 135 140
Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu
145 150 155 160
Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu
165 170 175
Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys
180 185 190
Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu
195 200 205
Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly
210 215 220
<210> 6
<211> 330
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 02HC
<400> 6
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225 230 235 240
Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 7
<211> 107
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 02LC
<400> 7
Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu
1 5 10 15
Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe
20 25 30
Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln
35 40 45
Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser
50 55 60
Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu
65 70 75 80
Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser
85 90 95
Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys
100 105
<210> 8
<211> 330
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 03HC
<400> 8
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225 230 235 240
Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Phe Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 9
<211> 107
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 03LC
<400> 9
Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu
1 5 10 15
Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe
20 25 30
Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln
35 40 45
Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser
50 55 60
Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu
65 70 75 80
Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser
85 90 95
Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys
100 105
<210> 10
<211> 330
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01HC
<400> 10
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225 230 235 240
Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 11
<211> 107
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01LC
<400> 11
Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu
1 5 10 15
Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe
20 25 30
Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln
35 40 45
Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser
50 55 60
Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu
65 70 75 80
Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser
85 90 95
Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys
100 105
<210> 12
<211> 330
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 04HC
<400> 12
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225 230 235 240
Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 13
<211> 107
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 04LC
<400> 13
Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu
1 5 10 15
Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe
20 25 30
Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln
35 40 45
Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser
50 55 60
Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu
65 70 75 80
Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser
85 90 95
Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys
100 105
<210> 14
<211> 330
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 05HC
<400> 14
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225 230 235 240
Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 15
<211> 106
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 05LC
<400> 15
Gly Gln Pro Lys Ala Ala Pro Ser Val Thr Leu Phe Pro Pro Ser Ser
1 5 10 15
Glu Glu Leu Gln Ala Asn Lys Ala Thr Leu Val Cys Leu Ile Ser Asp
20 25 30
Phe Tyr Pro Gly Ala Val Thr Val Ala Trp Lys Ala Asp Ser Ser Pro
35 40 45
Val Lys Ala Gly Val Glu Thr Thr Thr Pro Ser Lys Gln Ser Asn Asn
50 55 60
Lys Tyr Ala Ala Ser Ser Tyr Leu Ser Leu Thr Pro Glu Gln Trp Lys
65 70 75 80
Ser His Arg Ser Tyr Ser Cys Gln Val Thr His Glu Gly Ser Thr Val
85 90 95
Glu Lys Thr Val Ala Pro Thr Glu Cys Ser
100 105
<210> 16
<211> 330
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 06HC
<400> 16
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225 230 235 240
Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 17
<211> 107
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 06LC
<400> 17
Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu
1 5 10 15
Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe
20 25 30
Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln
35 40 45
Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser
50 55 60
Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu
65 70 75 80
Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser
85 90 95
Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys
100 105
<210> 18
<211> 330
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: человеческая гамма 1
<400> 18
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225 230 235 240
Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 19
<211> 107
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: человеческая каппа
<400> 19
Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu
1 5 10 15
Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe
20 25 30
Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln
35 40 45
Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser
50 55 60
Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu
65 70 75 80
Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser
85 90 95
Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys
100 105
<210> 20
<211> 106
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: человеческая лямбда
<400> 20
Gly Gln Pro Lys Ala Ala Pro Ser Val Thr Leu Phe Pro Pro Ser Ser
1 5 10 15
Glu Glu Leu Gln Ala Asn Lys Ala Thr Leu Val Cys Leu Ile Ser Asp
20 25 30
Phe Tyr Pro Gly Ala Val Thr Val Ala Trp Lys Ala Asp Ser Ser Pro
35 40 45
Val Lys Ala Gly Val Glu Thr Thr Thr Pro Ser Lys Gln Ser Asn Asn
50 55 60
Lys Tyr Ala Ala Ser Ser Tyr Leu Ser Leu Thr Pro Glu Gln Trp Lys
65 70 75 80
Ser His Lys Ser Tyr Ser Cys Gln Val Thr His Glu Gly Ser Thr Val
85 90 95
Glu Lys Thr Val Ala Pro Thr Glu Cys Ser
100 105
<210> 21
<211> 330
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01HC-A118K
<400> 21
Lys Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225 230 235 240
Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 22
<211> 330
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01HC-S119K
<400> 22
Ala Lys Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225 230 235 240
Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 23
<211> 330
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01HC-T120K
<400> 23
Ala Ser Lys Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225 230 235 240
Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 24
<211> 330
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01HC-G122K
<400> 24
Ala Ser Thr Lys Lys Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225 230 235 240
Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 25
<211> 330
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01HC-S131K
<400> 25
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Lys Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225 230 235 240
Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 26
<211> 330
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01HC-S132K
<400> 26
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Lys Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225 230 235 240
Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 27
<211> 330
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01HC-S134K
<400> 27
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Lys Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225 230 235 240
Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 28
<211> 330
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01HC-T135K
<400> 28
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Lys Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225 230 235 240
Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 29
<211> 330
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01HC-S136K
<400> 29
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Lys Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225 230 235 240
Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 30
<211> 330
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01HC-G137K
<400> 30
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Lys Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225 230 235 240
Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 31
<211> 330
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01HC-G138K
<400> 31
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Lys Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225 230 235 240
Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 32
<211> 330
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01HC-T139K
<400> 32
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Lys Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225 230 235 240
Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 33
<211> 330
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01HC-E152K
<400> 33
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Lys Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225 230 235 240
Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 34
<211> 330
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01HC-P153K
<400> 34
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Lys Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225 230 235 240
Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 35
<211> 330
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01HC-S160K
<400> 35
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Lys Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225 230 235 240
Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 36
<211> 330
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01HC-A162K
<400> 36
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Lys Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225 230 235 240
Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 37
<211> 330
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01HC-L163K
<400> 37
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Lys Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225 230 235 240
Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 38
<211> 330
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01HC-T164K
<400> 38
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Lys Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225 230 235 240
Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 39
<211> 330
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01HC-S165K
<400> 39
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Lys
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225 230 235 240
Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 40
<211> 330
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01HC-G166K
<400> 40
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Lys Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225 230 235 240
Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 41
<211> 330
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01HC-V167K
<400> 41
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Lys His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225 230 235 240
Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 42
<211> 330
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01HC-S176K
<400> 42
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Lys Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225 230 235 240
Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 43
<211> 330
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01HC-S177K
<400> 43
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Lys Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225 230 235 240
Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 44
<211> 330
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01HC-G178K
<400> 44
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Lys Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225 230 235 240
Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 45
<211> 330
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01HC-L179K
<400> 45
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Lys Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225 230 235 240
Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 46
<211> 330
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01HC-P189K
<400> 46
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Lys Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225 230 235 240
Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 47
<211> 330
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01HC-S190K
<400> 47
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Lys Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225 230 235 240
Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 48
<211> 330
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01HC-S191K
<400> 48
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Lys Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225 230 235 240
Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 49
<211> 330
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01HC-S192K
<400> 49
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Lys Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225 230 235 240
Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 50
<211> 330
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01HC-L193K
<400> 50
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Lys Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225 230 235 240
Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 51
<211> 330
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01HC-G194K
<400> 51
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Lys Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225 230 235 240
Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 52
<211> 330
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01HC-T195K
<400> 52
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Lys Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225 230 235 240
Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 53
<211> 330
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01HC-Q196K
<400> 53
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225 230 235 240
Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 54
<211> 330
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01HC-T197K
<400> 54
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Lys
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225 230 235 240
Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 55
<211> 330
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01HC-P206K
<400> 55
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Lys Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225 230 235 240
Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 56
<211> 330
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01HC-S207K
<400> 56
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Lys Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225 230 235 240
Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 57
<211> 330
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01HC-E216K
<400> 57
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Lys Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225 230 235 240
Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 58
<211> 330
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01HC-P217K
<400> 58
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Lys Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225 230 235 240
Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 59
<211> 330
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01HC-S219K
<400> 59
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Lys Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225 230 235 240
Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 60
<211> 330
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01HC-D221K
<400> 60
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Lys Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225 230 235 240
Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 61
<211> 330
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01HC-T223K
<400> 61
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Lys His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225 230 235 240
Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 62
<211> 330
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01HC-H224K
<400> 62
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr Lys Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225 230 235 240
Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 63
<211> 330
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01HC-T225K
<400> 63
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Lys Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225 230 235 240
Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 64
<211> 330
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01HC-C226K
<400> 64
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Lys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225 230 235 240
Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 65
<211> 330
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01HC-P227K
<400> 65
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Lys Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225 230 235 240
Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 66
<211> 330
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01HC-P228K
<400> 66
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Lys Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225 230 235 240
Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 67
<211> 330
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01HC-C229K
<400> 67
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Lys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225 230 235 240
Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 68
<211> 330
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01HC-P230K
<400> 68
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Lys Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225 230 235 240
Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 69
<211> 330
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01HC-A231K
<400> 69
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Lys Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225 230 235 240
Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 70
<211> 330
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01HC-P232K
<400> 70
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Lys Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225 230 235 240
Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 71
<211> 330
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01HC-E233K
<400> 71
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Lys Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225 230 235 240
Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 72
<211> 330
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01HC-L234K
<400> 72
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Lys Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225 230 235 240
Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 73
<211> 330
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01HC-L235K
<400> 73
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Leu Lys Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225 230 235 240
Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 74
<211> 330
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01HC-G236K
<400> 74
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Lys Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225 230 235 240
Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 75
<211> 330
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01HC-G237K
<400> 75
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Lys Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225 230 235 240
Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 76
<211> 330
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01HC-P247K
<400> 76
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Lys Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225 230 235 240
Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 77
<211> 330
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01HC-M252K
<400> 77
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Lys Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225 230 235 240
Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 78
<211> 330
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01HC-I253K
<400> 78
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Lys Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225 230 235 240
Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 79
<211> 330
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01HC-S254K
<400> 79
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Lys Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225 230 235 240
Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 80
<211> 330
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01HC-R255K
<400> 80
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Lys Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225 230 235 240
Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 81
<211> 330
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01HC-T256K
<400> 81
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Lys Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225 230 235 240
Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 82
<211> 330
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01HC-D265K
<400> 82
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Lys Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225 230 235 240
Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 83
<211> 330
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01HC-S267K
<400> 83
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Lys His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225 230 235 240
Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 84
<211> 330
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01HC-H268K
<400> 84
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser Lys Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225 230 235 240
Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 85
<211> 330
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01HC-E269K
<400> 85
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Lys Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225 230 235 240
Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 86
<211> 330
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01HC-D270K
<400> 86
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Lys Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225 230 235 240
Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 87
<211> 330
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01HC-P271K
<400> 87
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Lys Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225 230 235 240
Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 88
<211> 330
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01HC-E272K
<400> 88
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Lys Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225 230 235 240
Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 89
<211> 330
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01HC-D280K
<400> 89
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Lys Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225 230 235 240
Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 90
<211> 330
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01HC-G281K
<400> 90
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Lys Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225 230 235 240
Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 91
<211> 330
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01HC-V282K
<400> 91
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Lys Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225 230 235 240
Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 92
<211> 330
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01HC-E283K
<400> 92
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Lys Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225 230 235 240
Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 93
<211> 330
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01HC-V284K
<400> 93
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Lys His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225 230 235 240
Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 94
<211> 330
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01HC-H285K
<400> 94
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val Lys Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225 230 235 240
Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 95
<211> 330
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01HC-N286K
<400> 95
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Lys Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225 230 235 240
Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 96
<211> 330
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01HC-A287K
<400> 96
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Lys Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225 230 235 240
Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 97
<211> 330
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01HC-T289K
<400> 97
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Lys Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225 230 235 240
Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 98
<211> 330
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01HC-Q295K
<400> 98
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Lys Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225 230 235 240
Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 99
<211> 330
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01HC-Y296K
<400> 99
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Lys Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225 230 235 240
Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 100
<211> 330
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01HC-N297K
<400> 100
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Lys Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225 230 235 240
Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 101
<211> 330
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01HC-S298K
<400> 101
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Lys Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225 230 235 240
Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 102
<211> 330
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01HC-L309K
<400> 102
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Lys
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225 230 235 240
Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 103
<211> 330
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01HC-H310K
<400> 103
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
Lys Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225 230 235 240
Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 104
<211> 330
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01HC-Q311K
<400> 104
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Lys Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225 230 235 240
Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 105
<211> 330
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01HC-D312K
<400> 105
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Lys Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225 230 235 240
Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 106
<211> 330
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01HC-L314K
<400> 106
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Lys Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225 230 235 240
Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 107
<211> 330
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01HC-N315K
<400> 107
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Lys Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225 230 235 240
Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 108
<211> 330
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01HC-G316K
<400> 108
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Lys Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225 230 235 240
Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 109
<211> 330
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01HC-E318K
<400> 109
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Lys Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225 230 235 240
Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 110
<211> 330
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01HC-A327K
<400> 110
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Lys Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225 230 235 240
Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 111
<211> 330
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01HC-P329K
<400> 111
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Lys Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225 230 235 240
Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 112
<211> 330
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01HC-A330K
<400> 112
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Lys Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225 230 235 240
Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 113
<211> 330
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01HC-P331K
<400> 113
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Lys Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225 230 235 240
Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 114
<211> 330
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01HC-S337K
<400> 114
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Lys Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225 230 235 240
Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 115
<211> 330
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01HC-A339K
<400> 115
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Lys Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225 230 235 240
Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 116
<211> 330
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01HC-G341K
<400> 116
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Lys
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225 230 235 240
Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 117
<211> 330
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01HC-Q342K
<400> 117
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Lys Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225 230 235 240
Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 118
<211> 330
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01HC-P343K
<400> 118
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Lys Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225 230 235 240
Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 119
<211> 330
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01HC-R344K
<400> 119
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Lys Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225 230 235 240
Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 120
<211> 330
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01HC-E345K
<400> 120
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Lys Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225 230 235 240
Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 121
<211> 330
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01HC-R355K
<400> 121
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Lys Asp Glu
225 230 235 240
Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 122
<211> 330
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01HC-D356K
<400> 122
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Lys Glu
225 230 235 240
Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 123
<211> 330
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01HC-L358K
<400> 123
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225 230 235 240
Lys Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 124
<211> 330
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01HC-T359K
<400> 124
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225 230 235 240
Leu Lys Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 125
<211> 330
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01HC-N361K
<400> 125
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225 230 235 240
Leu Thr Lys Lys Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 126
<211> 330
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01HC-Q362K
<400> 126
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225 230 235 240
Leu Thr Lys Asn Lys Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 127
<211> 330
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01HC-S375K
<400> 127
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225 230 235 240
Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Lys Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 128
<211> 330
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01HC-D376K
<400> 128
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225 230 235 240
Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Lys Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 129
<211> 330
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01HC-E382K
<400> 129
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225 230 235 240
Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Lys Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 130
<211> 330
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01HC-N384K
<400> 130
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225 230 235 240
Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Lys Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 131
<211> 330
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01HC-G385K
<400> 131
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225 230 235 240
Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Lys Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 132
<211> 330
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01HC-Q386K
<400> 132
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225 230 235 240
Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Lys Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 133
<211> 330
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01HC-P387K
<400> 133
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225 230 235 240
Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Lys Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 134
<211> 330
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01HC-N389K
<400> 134
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225 230 235 240
Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Lys
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 135
<211> 330
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01HC-N390K
<400> 135
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225 230 235 240
Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Lys Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 136
<211> 330
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01HC-L398K
<400> 136
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225 230 235 240
Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Lys Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 137
<211> 330
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01HC-S400K
<400> 137
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225 230 235 240
Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Lys Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 138
<211> 330
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01HC-D401K
<400> 138
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225 230 235 240
Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Lys Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 139
<211> 330
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01HC-G402K
<400> 139
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225 230 235 240
Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Lys Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 140
<211> 330
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01HC-D413K
<400> 140
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225 230 235 240
Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Lys Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 141
<211> 330
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01HC-S415K
<400> 141
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225 230 235 240
Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Lys Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 142
<211> 330
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01HC-R416K
<400> 142
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225 230 235 240
Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Lys Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 143
<211> 330
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01HC-Q418K
<400> 143
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225 230 235 240
Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Lys Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 144
<211> 330
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01HC-Q419K
<400> 144
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225 230 235 240
Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Lys Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 145
<211> 330
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01HC-G420K
<400> 145
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225 230 235 240
Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Lys Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 146
<211> 330
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01HC-N421K
<400> 146
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225 230 235 240
Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Lys
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 147
<211> 330
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01HC-V422K
<400> 147
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225 230 235 240
Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Lys Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 148
<211> 330
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01HC-A431K
<400> 148
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225 230 235 240
Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Lys Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 149
<211> 330
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01HC-H433K
<400> 149
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225 230 235 240
Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu Lys Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 150
<211> 330
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01HC-N434K
<400> 150
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225 230 235 240
Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Lys His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 151
<211> 330
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01HC-H435K
<400> 151
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225 230 235 240
Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn Lys Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 152
<211> 330
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01HC-Y436K
<400> 152
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225 230 235 240
Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Lys Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 153
<211> 330
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01HC-S442K
<400> 153
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225 230 235 240
Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Lys Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 154
<211> 330
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01HC-L443K
<400> 154
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225 230 235 240
Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Lys Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 155
<211> 330
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01HC-S444K
<400> 155
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225 230 235 240
Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Lys Pro Gly Lys
325 330
<210> 156
<211> 330
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01HC-P445K
<400> 156
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225 230 235 240
Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Lys Gly Lys
325 330
<210> 157
<211> 330
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01HC-G446K
<400> 157
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225 230 235 240
Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Lys Lys
325 330
<210> 158
<211> 107
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01LC-R108K
<400> 158
Lys Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu
1 5 10 15
Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe
20 25 30
Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln
35 40 45
Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser
50 55 60
Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu
65 70 75 80
Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser
85 90 95
Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys
100 105
<210> 159
<211> 107
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01LC-T109K
<400> 159
Arg Lys Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu
1 5 10 15
Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe
20 25 30
Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln
35 40 45
Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser
50 55 60
Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu
65 70 75 80
Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser
85 90 95
Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys
100 105
<210> 160
<211> 107
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01LC-V110K
<400> 160
Arg Thr Lys Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu
1 5 10 15
Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe
20 25 30
Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln
35 40 45
Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser
50 55 60
Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu
65 70 75 80
Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser
85 90 95
Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys
100 105
<210> 161
<211> 107
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01LC-A112K
<400> 161
Arg Thr Val Ala Lys Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu
1 5 10 15
Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe
20 25 30
Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln
35 40 45
Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser
50 55 60
Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu
65 70 75 80
Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser
85 90 95
Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys
100 105
<210> 162
<211> 107
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01LC-D122K
<400> 162
Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Lys Glu
1 5 10 15
Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe
20 25 30
Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln
35 40 45
Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser
50 55 60
Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu
65 70 75 80
Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser
85 90 95
Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys
100 105
<210> 163
<211> 107
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01LC-E123K
<400> 163
Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Lys
1 5 10 15
Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe
20 25 30
Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln
35 40 45
Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser
50 55 60
Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu
65 70 75 80
Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser
85 90 95
Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys
100 105
<210> 164
<211> 107
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01LC-S127K
<400> 164
Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu
1 5 10 15
Gln Leu Lys Lys Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe
20 25 30
Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln
35 40 45
Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser
50 55 60
Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu
65 70 75 80
Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser
85 90 95
Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys
100 105
<210> 165
<211> 107
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01LC-G128K
<400> 165
Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu
1 5 10 15
Gln Leu Lys Ser Lys Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe
20 25 30
Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln
35 40 45
Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser
50 55 60
Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu
65 70 75 80
Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser
85 90 95
Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys
100 105
<210> 166
<211> 107
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01LC-T129K
<400> 166
Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu
1 5 10 15
Gln Leu Lys Ser Gly Lys Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe
20 25 30
Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln
35 40 45
Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser
50 55 60
Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu
65 70 75 80
Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser
85 90 95
Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys
100 105
<210> 167
<211> 107
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01LC-R142K
<400> 167
Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu
1 5 10 15
Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe
20 25 30
Tyr Pro Lys Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln
35 40 45
Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser
50 55 60
Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu
65 70 75 80
Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser
85 90 95
Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys
100 105
<210> 168
<211> 107
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01LC-E143K
<400> 168
Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu
1 5 10 15
Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe
20 25 30
Tyr Pro Arg Lys Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln
35 40 45
Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser
50 55 60
Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu
65 70 75 80
Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser
85 90 95
Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys
100 105
<210> 169
<211> 107
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01LC-D151K
<400> 169
Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu
1 5 10 15
Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe
20 25 30
Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Lys Asn Ala Leu Gln
35 40 45
Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser
50 55 60
Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu
65 70 75 80
Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser
85 90 95
Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys
100 105
<210> 170
<211> 107
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01LC-N152K
<400> 170
Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu
1 5 10 15
Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe
20 25 30
Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Lys Ala Leu Gln
35 40 45
Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser
50 55 60
Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu
65 70 75 80
Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser
85 90 95
Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys
100 105
<210> 171
<211> 107
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01LC-A153K
<400> 171
Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu
1 5 10 15
Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe
20 25 30
Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Lys Leu Gln
35 40 45
Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser
50 55 60
Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu
65 70 75 80
Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser
85 90 95
Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys
100 105
<210> 172
<211> 107
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01LC-L154K
<400> 172
Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu
1 5 10 15
Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe
20 25 30
Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Lys Gln
35 40 45
Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser
50 55 60
Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu
65 70 75 80
Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser
85 90 95
Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys
100 105
<210> 173
<211> 107
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01LC-Q155K
<400> 173
Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu
1 5 10 15
Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe
20 25 30
Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Lys
35 40 45
Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser
50 55 60
Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu
65 70 75 80
Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser
85 90 95
Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys
100 105
<210> 174
<211> 107
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01LC-S156K
<400> 174
Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu
1 5 10 15
Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe
20 25 30
Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln
35 40 45
Lys Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser
50 55 60
Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu
65 70 75 80
Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser
85 90 95
Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys
100 105
<210> 175
<211> 107
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01LC-G157K
<400> 175
Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu
1 5 10 15
Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe
20 25 30
Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln
35 40 45
Ser Lys Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser
50 55 60
Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu
65 70 75 80
Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser
85 90 95
Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys
100 105
<210> 176
<211> 107
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01LC-E165K
<400> 176
Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu
1 5 10 15
Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe
20 25 30
Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln
35 40 45
Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Lys Gln Asp Ser Lys Asp Ser
50 55 60
Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu
65 70 75 80
Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser
85 90 95
Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys
100 105
<210> 177
<211> 107
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01LC-D167K
<400> 177
Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu
1 5 10 15
Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe
20 25 30
Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln
35 40 45
Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Lys Ser Lys Asp Ser
50 55 60
Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu
65 70 75 80
Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser
85 90 95
Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys
100 105
<210> 178
<211> 107
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01LC-S168K
<400> 178
Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu
1 5 10 15
Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe
20 25 30
Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln
35 40 45
Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Lys Lys Asp Ser
50 55 60
Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu
65 70 75 80
Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser
85 90 95
Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys
100 105
<210> 179
<211> 107
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01LC-D170K
<400> 179
Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu
1 5 10 15
Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe
20 25 30
Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln
35 40 45
Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Lys Ser
50 55 60
Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu
65 70 75 80
Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser
85 90 95
Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys
100 105
<210> 180
<211> 107
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01LC-S182K
<400> 180
Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu
1 5 10 15
Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe
20 25 30
Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln
35 40 45
Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser
50 55 60
Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Lys Lys Ala Asp Tyr Glu
65 70 75 80
Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser
85 90 95
Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys
100 105
<210> 181
<211> 107
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01LC-A184K
<400> 181
Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu
1 5 10 15
Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe
20 25 30
Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln
35 40 45
Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser
50 55 60
Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Lys Asp Tyr Glu
65 70 75 80
Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser
85 90 95
Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys
100 105
<210> 182
<211> 107
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01LC-E187K
<400> 182
Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu
1 5 10 15
Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe
20 25 30
Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln
35 40 45
Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser
50 55 60
Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Lys
65 70 75 80
Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser
85 90 95
Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys
100 105
<210> 183
<211> 107
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01LC-H189K
<400> 183
Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu
1 5 10 15
Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe
20 25 30
Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln
35 40 45
Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser
50 55 60
Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu
65 70 75 80
Lys Lys Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser
85 90 95
Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys
100 105
<210> 184
<211> 107
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01LC-V191K
<400> 184
Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu
1 5 10 15
Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe
20 25 30
Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln
35 40 45
Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser
50 55 60
Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu
65 70 75 80
Lys His Lys Lys Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser
85 90 95
Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys
100 105
<210> 185
<211> 107
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01LC-Q199K
<400> 185
Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu
1 5 10 15
Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe
20 25 30
Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln
35 40 45
Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser
50 55 60
Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu
65 70 75 80
Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Lys Gly Leu Ser Ser
85 90 95
Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys
100 105
<210> 186
<211> 107
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01LC-G200K
<400> 186
Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu
1 5 10 15
Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe
20 25 30
Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln
35 40 45
Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser
50 55 60
Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu
65 70 75 80
Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Lys Leu Ser Ser
85 90 95
Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys
100 105
<210> 187
<211> 107
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01LC-L201K
<400> 187
Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu
1 5 10 15
Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe
20 25 30
Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln
35 40 45
Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser
50 55 60
Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu
65 70 75 80
Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Lys Ser Ser
85 90 95
Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys
100 105
<210> 188
<211> 107
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01LC-S202K
<400> 188
Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu
1 5 10 15
Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe
20 25 30
Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln
35 40 45
Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser
50 55 60
Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu
65 70 75 80
Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Lys Ser
85 90 95
Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys
100 105
<210> 189
<211> 107
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01LC-S203K
<400> 189
Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu
1 5 10 15
Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe
20 25 30
Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln
35 40 45
Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser
50 55 60
Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu
65 70 75 80
Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Lys
85 90 95
Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys
100 105
<210> 190
<211> 107
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01LC-P204K
<400> 190
Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu
1 5 10 15
Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe
20 25 30
Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln
35 40 45
Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser
50 55 60
Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu
65 70 75 80
Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser
85 90 95
Lys Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys
100 105
<210> 191
<211> 107
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01LC-N210K
<400> 191
Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu
1 5 10 15
Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe
20 25 30
Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln
35 40 45
Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser
50 55 60
Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu
65 70 75 80
Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser
85 90 95
Pro Val Thr Lys Ser Phe Lys Arg Gly Glu Cys
100 105
<210> 192
<211> 107
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01LC-R211K
<400> 192
Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu
1 5 10 15
Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe
20 25 30
Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln
35 40 45
Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser
50 55 60
Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu
65 70 75 80
Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser
85 90 95
Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Lys Gly Glu Cys
100 105
<210> 193
<211> 107
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01LC-G212K
<400> 193
Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu
1 5 10 15
Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe
20 25 30
Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln
35 40 45
Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser
50 55 60
Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu
65 70 75 80
Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser
85 90 95
Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Lys Glu Cys
100 105
<210> 194
<211> 107
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01LC-E213K
<400> 194
Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu
1 5 10 15
Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe
20 25 30
Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln
35 40 45
Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser
50 55 60
Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu
65 70 75 80
Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser
85 90 95
Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Lys Cys
100 105
<210> 195
<211> 106
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 05LC-G110K
<400> 195
Lys Gln Pro Lys Ala Ala Pro Ser Val Thr Leu Phe Pro Pro Ser Ser
1 5 10 15
Glu Glu Leu Gln Ala Asn Lys Ala Thr Leu Val Cys Leu Ile Ser Asp
20 25 30
Phe Tyr Pro Gly Ala Val Thr Val Ala Trp Lys Ala Asp Ser Ser Pro
35 40 45
Val Lys Ala Gly Val Glu Thr Thr Thr Pro Ser Lys Gln Ser Asn Asn
50 55 60
Lys Tyr Ala Ala Ser Ser Tyr Leu Ser Leu Thr Pro Glu Gln Trp Lys
65 70 75 80
Ser His Arg Ser Tyr Ser Cys Gln Val Thr His Glu Gly Ser Thr Val
85 90 95
Glu Lys Thr Val Ala Pro Thr Glu Cys Ser
100 105
<210> 196
<211> 106
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 05LC-Q111K
<400> 196
Gly Lys Pro Lys Ala Ala Pro Ser Val Thr Leu Phe Pro Pro Ser Ser
1 5 10 15
Glu Glu Leu Gln Ala Asn Lys Ala Thr Leu Val Cys Leu Ile Ser Asp
20 25 30
Phe Tyr Pro Gly Ala Val Thr Val Ala Trp Lys Ala Asp Ser Ser Pro
35 40 45
Val Lys Ala Gly Val Glu Thr Thr Thr Pro Ser Lys Gln Ser Asn Asn
50 55 60
Lys Tyr Ala Ala Ser Ser Tyr Leu Ser Leu Thr Pro Glu Gln Trp Lys
65 70 75 80
Ser His Arg Ser Tyr Ser Cys Gln Val Thr His Glu Gly Ser Thr Val
85 90 95
Glu Lys Thr Val Ala Pro Thr Glu Cys Ser
100 105
<210> 197
<211> 106
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 05LC-P112K
<400> 197
Gly Gln Lys Lys Ala Ala Pro Ser Val Thr Leu Phe Pro Pro Ser Ser
1 5 10 15
Glu Glu Leu Gln Ala Asn Lys Ala Thr Leu Val Cys Leu Ile Ser Asp
20 25 30
Phe Tyr Pro Gly Ala Val Thr Val Ala Trp Lys Ala Asp Ser Ser Pro
35 40 45
Val Lys Ala Gly Val Glu Thr Thr Thr Pro Ser Lys Gln Ser Asn Asn
50 55 60
Lys Tyr Ala Ala Ser Ser Tyr Leu Ser Leu Thr Pro Glu Gln Trp Lys
65 70 75 80
Ser His Arg Ser Tyr Ser Cys Gln Val Thr His Glu Gly Ser Thr Val
85 90 95
Glu Lys Thr Val Ala Pro Thr Glu Cys Ser
100 105
<210> 198
<211> 106
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 05LC-A115K
<400> 198
Gly Gln Pro Lys Ala Lys Pro Ser Val Thr Leu Phe Pro Pro Ser Ser
1 5 10 15
Glu Glu Leu Gln Ala Asn Lys Ala Thr Leu Val Cys Leu Ile Ser Asp
20 25 30
Phe Tyr Pro Gly Ala Val Thr Val Ala Trp Lys Ala Asp Ser Ser Pro
35 40 45
Val Lys Ala Gly Val Glu Thr Thr Thr Pro Ser Lys Gln Ser Asn Asn
50 55 60
Lys Tyr Ala Ala Ser Ser Tyr Leu Ser Leu Thr Pro Glu Gln Trp Lys
65 70 75 80
Ser His Arg Ser Tyr Ser Cys Gln Val Thr His Glu Gly Ser Thr Val
85 90 95
Glu Lys Thr Val Ala Pro Thr Glu Cys Ser
100 105
<210> 199
<211> 106
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 05LC-S125K
<400> 199
Gly Gln Pro Lys Ala Ala Pro Ser Val Thr Leu Phe Pro Pro Ser Lys
1 5 10 15
Glu Glu Leu Gln Ala Asn Lys Ala Thr Leu Val Cys Leu Ile Ser Asp
20 25 30
Phe Tyr Pro Gly Ala Val Thr Val Ala Trp Lys Ala Asp Ser Ser Pro
35 40 45
Val Lys Ala Gly Val Glu Thr Thr Thr Pro Ser Lys Gln Ser Asn Asn
50 55 60
Lys Tyr Ala Ala Ser Ser Tyr Leu Ser Leu Thr Pro Glu Gln Trp Lys
65 70 75 80
Ser His Arg Ser Tyr Ser Cys Gln Val Thr His Glu Gly Ser Thr Val
85 90 95
Glu Lys Thr Val Ala Pro Thr Glu Cys Ser
100 105
<210> 200
<211> 106
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 05LC-E126K
<400> 200
Gly Gln Pro Lys Ala Ala Pro Ser Val Thr Leu Phe Pro Pro Ser Ser
1 5 10 15
Lys Glu Leu Gln Ala Asn Lys Ala Thr Leu Val Cys Leu Ile Ser Asp
20 25 30
Phe Tyr Pro Gly Ala Val Thr Val Ala Trp Lys Ala Asp Ser Ser Pro
35 40 45
Val Lys Ala Gly Val Glu Thr Thr Thr Pro Ser Lys Gln Ser Asn Asn
50 55 60
Lys Tyr Ala Ala Ser Ser Tyr Leu Ser Leu Thr Pro Glu Gln Trp Lys
65 70 75 80
Ser His Arg Ser Tyr Ser Cys Gln Val Thr His Glu Gly Ser Thr Val
85 90 95
Glu Lys Thr Val Ala Pro Thr Glu Cys Ser
100 105
<210> 201
<211> 106
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 05LC-L128K
<400> 201
Gly Gln Pro Lys Ala Ala Pro Ser Val Thr Leu Phe Pro Pro Ser Ser
1 5 10 15
Glu Glu Lys Gln Ala Asn Lys Ala Thr Leu Val Cys Leu Ile Ser Asp
20 25 30
Phe Tyr Pro Gly Ala Val Thr Val Ala Trp Lys Ala Asp Ser Ser Pro
35 40 45
Val Lys Ala Gly Val Glu Thr Thr Thr Pro Ser Lys Gln Ser Asn Asn
50 55 60
Lys Tyr Ala Ala Ser Ser Tyr Leu Ser Leu Thr Pro Glu Gln Trp Lys
65 70 75 80
Ser His Arg Ser Tyr Ser Cys Gln Val Thr His Glu Gly Ser Thr Val
85 90 95
Glu Lys Thr Val Ala Pro Thr Glu Cys Ser
100 105
<210> 202
<211> 106
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 05LC-Q129K
<400> 202
Gly Gln Pro Lys Ala Ala Pro Ser Val Thr Leu Phe Pro Pro Ser Ser
1 5 10 15
Glu Glu Leu Lys Ala Asn Lys Ala Thr Leu Val Cys Leu Ile Ser Asp
20 25 30
Phe Tyr Pro Gly Ala Val Thr Val Ala Trp Lys Ala Asp Ser Ser Pro
35 40 45
Val Lys Ala Gly Val Glu Thr Thr Thr Pro Ser Lys Gln Ser Asn Asn
50 55 60
Lys Tyr Ala Ala Ser Ser Tyr Leu Ser Leu Thr Pro Glu Gln Trp Lys
65 70 75 80
Ser His Arg Ser Tyr Ser Cys Gln Val Thr His Glu Gly Ser Thr Val
85 90 95
Glu Lys Thr Val Ala Pro Thr Glu Cys Ser
100 105
<210> 203
<211> 106
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 05LC-A130K
<400> 203
Gly Gln Pro Lys Ala Ala Pro Ser Val Thr Leu Phe Pro Pro Ser Ser
1 5 10 15
Glu Glu Leu Gln Lys Asn Lys Ala Thr Leu Val Cys Leu Ile Ser Asp
20 25 30
Phe Tyr Pro Gly Ala Val Thr Val Ala Trp Lys Ala Asp Ser Ser Pro
35 40 45
Val Lys Ala Gly Val Glu Thr Thr Thr Pro Ser Lys Gln Ser Asn Asn
50 55 60
Lys Tyr Ala Ala Ser Ser Tyr Leu Ser Leu Thr Pro Glu Gln Trp Lys
65 70 75 80
Ser His Arg Ser Tyr Ser Cys Gln Val Thr His Glu Gly Ser Thr Val
85 90 95
Glu Lys Thr Val Ala Pro Thr Glu Cys Ser
100 105
<210> 204
<211> 106
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 05LC-N131K
<400> 204
Gly Gln Pro Lys Ala Ala Pro Ser Val Thr Leu Phe Pro Pro Ser Ser
1 5 10 15
Glu Glu Leu Gln Ala Lys Lys Ala Thr Leu Val Cys Leu Ile Ser Asp
20 25 30
Phe Tyr Pro Gly Ala Val Thr Val Ala Trp Lys Ala Asp Ser Ser Pro
35 40 45
Val Lys Ala Gly Val Glu Thr Thr Thr Pro Ser Lys Gln Ser Asn Asn
50 55 60
Lys Tyr Ala Ala Ser Ser Tyr Leu Ser Leu Thr Pro Glu Gln Trp Lys
65 70 75 80
Ser His Arg Ser Tyr Ser Cys Gln Val Thr His Glu Gly Ser Thr Val
85 90 95
Glu Lys Thr Val Ala Pro Thr Glu Cys Ser
100 105
<210> 205
<211> 106
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 05LC-G145K
<400> 205
Gly Gln Pro Lys Ala Ala Pro Ser Val Thr Leu Phe Pro Pro Ser Ser
1 5 10 15
Glu Glu Leu Gln Ala Asn Lys Ala Thr Leu Val Cys Leu Ile Ser Asp
20 25 30
Phe Tyr Pro Lys Ala Val Thr Val Ala Trp Lys Ala Asp Ser Ser Pro
35 40 45
Val Lys Ala Gly Val Glu Thr Thr Thr Pro Ser Lys Gln Ser Asn Asn
50 55 60
Lys Tyr Ala Ala Ser Ser Tyr Leu Ser Leu Thr Pro Glu Gln Trp Lys
65 70 75 80
Ser His Arg Ser Tyr Ser Cys Gln Val Thr His Glu Gly Ser Thr Val
85 90 95
Glu Lys Thr Val Ala Pro Thr Glu Cys Ser
100 105
<210> 206
<211> 106
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 05LC-A146K
<400> 206
Gly Gln Pro Lys Ala Ala Pro Ser Val Thr Leu Phe Pro Pro Ser Ser
1 5 10 15
Glu Glu Leu Gln Ala Asn Lys Ala Thr Leu Val Cys Leu Ile Ser Asp
20 25 30
Phe Tyr Pro Gly Lys Val Thr Val Ala Trp Lys Ala Asp Ser Ser Pro
35 40 45
Val Lys Ala Gly Val Glu Thr Thr Thr Pro Ser Lys Gln Ser Asn Asn
50 55 60
Lys Tyr Ala Ala Ser Ser Tyr Leu Ser Leu Thr Pro Glu Gln Trp Lys
65 70 75 80
Ser His Arg Ser Tyr Ser Cys Gln Val Thr His Glu Gly Ser Thr Val
85 90 95
Glu Lys Thr Val Ala Pro Thr Glu Cys Ser
100 105
<210> 207
<211> 106
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 05LC-V147K
<400> 207
Gly Gln Pro Lys Ala Ala Pro Ser Val Thr Leu Phe Pro Pro Ser Ser
1 5 10 15
Glu Glu Leu Gln Ala Asn Lys Ala Thr Leu Val Cys Leu Ile Ser Asp
20 25 30
Phe Tyr Pro Gly Ala Lys Thr Val Ala Trp Lys Ala Asp Ser Ser Pro
35 40 45
Val Lys Ala Gly Val Glu Thr Thr Thr Pro Ser Lys Gln Ser Asn Asn
50 55 60
Lys Tyr Ala Ala Ser Ser Tyr Leu Ser Leu Thr Pro Glu Gln Trp Lys
65 70 75 80
Ser His Arg Ser Tyr Ser Cys Gln Val Thr His Glu Gly Ser Thr Val
85 90 95
Glu Lys Thr Val Ala Pro Thr Glu Cys Ser
100 105
<210> 208
<211> 106
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 05LC-S155K
<400> 208
Gly Gln Pro Lys Ala Ala Pro Ser Val Thr Leu Phe Pro Pro Ser Ser
1 5 10 15
Glu Glu Leu Gln Ala Asn Lys Ala Thr Leu Val Cys Leu Ile Ser Asp
20 25 30
Phe Tyr Pro Gly Ala Val Thr Val Ala Trp Lys Ala Asp Lys Ser Pro
35 40 45
Val Lys Ala Gly Val Glu Thr Thr Thr Pro Ser Lys Gln Ser Asn Asn
50 55 60
Lys Tyr Ala Ala Ser Ser Tyr Leu Ser Leu Thr Pro Glu Gln Trp Lys
65 70 75 80
Ser His Arg Ser Tyr Ser Cys Gln Val Thr His Glu Gly Ser Thr Val
85 90 95
Glu Lys Thr Val Ala Pro Thr Glu Cys Ser
100 105
<210> 209
<211> 106
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 05LC-S156K
<400> 209
Gly Gln Pro Lys Ala Ala Pro Ser Val Thr Leu Phe Pro Pro Ser Ser
1 5 10 15
Glu Glu Leu Gln Ala Asn Lys Ala Thr Leu Val Cys Leu Ile Ser Asp
20 25 30
Phe Tyr Pro Gly Ala Val Thr Val Ala Trp Lys Ala Asp Ser Lys Pro
35 40 45
Val Lys Ala Gly Val Glu Thr Thr Thr Pro Ser Lys Gln Ser Asn Asn
50 55 60
Lys Tyr Ala Ala Ser Ser Tyr Leu Ser Leu Thr Pro Glu Gln Trp Lys
65 70 75 80
Ser His Arg Ser Tyr Ser Cys Gln Val Thr His Glu Gly Ser Thr Val
85 90 95
Glu Lys Thr Val Ala Pro Thr Glu Cys Ser
100 105
<210> 210
<211> 106
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 05LC-P157K
<400> 210
Gly Gln Pro Lys Ala Ala Pro Ser Val Thr Leu Phe Pro Pro Ser Ser
1 5 10 15
Glu Glu Leu Gln Ala Asn Lys Ala Thr Leu Val Cys Leu Ile Ser Asp
20 25 30
Phe Tyr Pro Gly Ala Val Thr Val Ala Trp Lys Ala Asp Ser Ser Lys
35 40 45
Val Lys Ala Gly Val Glu Thr Thr Thr Pro Ser Lys Gln Ser Asn Asn
50 55 60
Lys Tyr Ala Ala Ser Ser Tyr Leu Ser Leu Thr Pro Glu Gln Trp Lys
65 70 75 80
Ser His Arg Ser Tyr Ser Cys Gln Val Thr His Glu Gly Ser Thr Val
85 90 95
Glu Lys Thr Val Ala Pro Thr Glu Cys Ser
100 105
<210> 211
<211> 106
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 05LC-A160K
<400> 211
Gly Gln Pro Lys Ala Ala Pro Ser Val Thr Leu Phe Pro Pro Ser Ser
1 5 10 15
Glu Glu Leu Gln Ala Asn Lys Ala Thr Leu Val Cys Leu Ile Ser Asp
20 25 30
Phe Tyr Pro Gly Ala Val Thr Val Ala Trp Lys Ala Asp Ser Ser Pro
35 40 45
Val Lys Lys Gly Val Glu Thr Thr Thr Pro Ser Lys Gln Ser Asn Asn
50 55 60
Lys Tyr Ala Ala Ser Ser Tyr Leu Ser Leu Thr Pro Glu Gln Trp Lys
65 70 75 80
Ser His Arg Ser Tyr Ser Cys Gln Val Thr His Glu Gly Ser Thr Val
85 90 95
Glu Lys Thr Val Ala Pro Thr Glu Cys Ser
100 105
<210> 212
<211> 106
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 05LC-G161K
<400> 212
Gly Gln Pro Lys Ala Ala Pro Ser Val Thr Leu Phe Pro Pro Ser Ser
1 5 10 15
Glu Glu Leu Gln Ala Asn Lys Ala Thr Leu Val Cys Leu Ile Ser Asp
20 25 30
Phe Tyr Pro Gly Ala Val Thr Val Ala Trp Lys Ala Asp Ser Ser Pro
35 40 45
Val Lys Ala Lys Val Glu Thr Thr Thr Pro Ser Lys Gln Ser Asn Asn
50 55 60
Lys Tyr Ala Ala Ser Ser Tyr Leu Ser Leu Thr Pro Glu Gln Trp Lys
65 70 75 80
Ser His Arg Ser Tyr Ser Cys Gln Val Thr His Glu Gly Ser Thr Val
85 90 95
Glu Lys Thr Val Ala Pro Thr Glu Cys Ser
100 105
<210> 213
<211> 106
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 05LC-S171K
<400> 213
Gly Gln Pro Lys Ala Ala Pro Ser Val Thr Leu Phe Pro Pro Ser Ser
1 5 10 15
Glu Glu Leu Gln Ala Asn Lys Ala Thr Leu Val Cys Leu Ile Ser Asp
20 25 30
Phe Tyr Pro Gly Ala Val Thr Val Ala Trp Lys Ala Asp Ser Ser Pro
35 40 45
Val Lys Ala Gly Val Glu Thr Thr Thr Pro Ser Lys Gln Lys Asn Asn
50 55 60
Lys Tyr Ala Ala Ser Ser Tyr Leu Ser Leu Thr Pro Glu Gln Trp Lys
65 70 75 80
Ser His Arg Ser Tyr Ser Cys Gln Val Thr His Glu Gly Ser Thr Val
85 90 95
Glu Lys Thr Val Ala Pro Thr Glu Cys Ser
100 105
<210> 214
<211> 106
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 05LC-N172K
<400> 214
Gly Gln Pro Lys Ala Ala Pro Ser Val Thr Leu Phe Pro Pro Ser Ser
1 5 10 15
Glu Glu Leu Gln Ala Asn Lys Ala Thr Leu Val Cys Leu Ile Ser Asp
20 25 30
Phe Tyr Pro Gly Ala Val Thr Val Ala Trp Lys Ala Asp Ser Ser Pro
35 40 45
Val Lys Ala Gly Val Glu Thr Thr Thr Pro Ser Lys Gln Ser Lys Asn
50 55 60
Lys Tyr Ala Ala Ser Ser Tyr Leu Ser Leu Thr Pro Glu Gln Trp Lys
65 70 75 80
Ser His Arg Ser Tyr Ser Cys Gln Val Thr His Glu Gly Ser Thr Val
85 90 95
Glu Lys Thr Val Ala Pro Thr Glu Cys Ser
100 105
<210> 215
<211> 106
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 05LC-N173K
<400> 215
Gly Gln Pro Lys Ala Ala Pro Ser Val Thr Leu Phe Pro Pro Ser Ser
1 5 10 15
Glu Glu Leu Gln Ala Asn Lys Ala Thr Leu Val Cys Leu Ile Ser Asp
20 25 30
Phe Tyr Pro Gly Ala Val Thr Val Ala Trp Lys Ala Asp Ser Ser Pro
35 40 45
Val Lys Ala Gly Val Glu Thr Thr Thr Pro Ser Lys Gln Ser Asn Lys
50 55 60
Lys Tyr Ala Ala Ser Ser Tyr Leu Ser Leu Thr Pro Glu Gln Trp Lys
65 70 75 80
Ser His Arg Ser Tyr Ser Cys Gln Val Thr His Glu Gly Ser Thr Val
85 90 95
Glu Lys Thr Val Ala Pro Thr Glu Cys Ser
100 105
<210> 216
<211> 106
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 05LC-T184K
<400> 216
Gly Gln Pro Lys Ala Ala Pro Ser Val Thr Leu Phe Pro Pro Ser Ser
1 5 10 15
Glu Glu Leu Gln Ala Asn Lys Ala Thr Leu Val Cys Leu Ile Ser Asp
20 25 30
Phe Tyr Pro Gly Ala Val Thr Val Ala Trp Lys Ala Asp Ser Ser Pro
35 40 45
Val Lys Ala Gly Val Glu Thr Thr Thr Pro Ser Lys Gln Ser Asn Asn
50 55 60
Lys Tyr Ala Ala Ser Ser Tyr Leu Ser Leu Lys Pro Glu Gln Trp Lys
65 70 75 80
Ser His Arg Ser Tyr Ser Cys Gln Val Thr His Glu Gly Ser Thr Val
85 90 95
Glu Lys Thr Val Ala Pro Thr Glu Cys Ser
100 105
<210> 217
<211> 106
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 05LC-E186K
<400> 217
Gly Gln Pro Lys Ala Ala Pro Ser Val Thr Leu Phe Pro Pro Ser Ser
1 5 10 15
Glu Glu Leu Gln Ala Asn Lys Ala Thr Leu Val Cys Leu Ile Ser Asp
20 25 30
Phe Tyr Pro Gly Ala Val Thr Val Ala Trp Lys Ala Asp Ser Ser Pro
35 40 45
Val Lys Ala Gly Val Glu Thr Thr Thr Pro Ser Lys Gln Ser Asn Asn
50 55 60
Lys Tyr Ala Ala Ser Ser Tyr Leu Ser Leu Thr Pro Lys Gln Trp Lys
65 70 75 80
Ser His Arg Ser Tyr Ser Cys Gln Val Thr His Glu Gly Ser Thr Val
85 90 95
Glu Lys Thr Val Ala Pro Thr Glu Cys Ser
100 105
<210> 218
<211> 106
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 05LC-Q187K
<400> 218
Gly Gln Pro Lys Ala Ala Pro Ser Val Thr Leu Phe Pro Pro Ser Ser
1 5 10 15
Glu Glu Leu Gln Ala Asn Lys Ala Thr Leu Val Cys Leu Ile Ser Asp
20 25 30
Phe Tyr Pro Gly Ala Val Thr Val Ala Trp Lys Ala Asp Ser Ser Pro
35 40 45
Val Lys Ala Gly Val Glu Thr Thr Thr Pro Ser Lys Gln Ser Asn Asn
50 55 60
Lys Tyr Ala Ala Ser Ser Tyr Leu Ser Leu Thr Pro Glu Lys Trp Lys
65 70 75 80
Ser His Arg Ser Tyr Ser Cys Gln Val Thr His Glu Gly Ser Thr Val
85 90 95
Glu Lys Thr Val Ala Pro Thr Glu Cys Ser
100 105
<210> 219
<211> 106
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 05LC-S190K
<400> 219
Gly Gln Pro Lys Ala Ala Pro Ser Val Thr Leu Phe Pro Pro Ser Ser
1 5 10 15
Glu Glu Leu Gln Ala Asn Lys Ala Thr Leu Val Cys Leu Ile Ser Asp
20 25 30
Phe Tyr Pro Gly Ala Val Thr Val Ala Trp Lys Ala Asp Ser Ser Pro
35 40 45
Val Lys Ala Gly Val Glu Thr Thr Thr Pro Ser Lys Gln Ser Asn Asn
50 55 60
Lys Tyr Ala Ala Ser Ser Tyr Leu Ser Leu Thr Pro Glu Gln Trp Lys
65 70 75 80
Lys His Arg Ser Tyr Ser Cys Gln Val Thr His Glu Gly Ser Thr Val
85 90 95
Glu Lys Thr Val Ala Pro Thr Glu Cys Ser
100 105
<210> 220
<211> 106
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 05LC-H191K
<400> 220
Gly Gln Pro Lys Ala Ala Pro Ser Val Thr Leu Phe Pro Pro Ser Ser
1 5 10 15
Glu Glu Leu Gln Ala Asn Lys Ala Thr Leu Val Cys Leu Ile Ser Asp
20 25 30
Phe Tyr Pro Gly Ala Val Thr Val Ala Trp Lys Ala Asp Ser Ser Pro
35 40 45
Val Lys Ala Gly Val Glu Thr Thr Thr Pro Ser Lys Gln Ser Asn Asn
50 55 60
Lys Tyr Ala Ala Ser Ser Tyr Leu Ser Leu Thr Pro Glu Gln Trp Lys
65 70 75 80
Ser Lys Arg Ser Tyr Ser Cys Gln Val Thr His Glu Gly Ser Thr Val
85 90 95
Glu Lys Thr Val Ala Pro Thr Glu Cys Ser
100 105
<210> 221
<211> 106
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 05LC-E201K
<400> 221
Gly Gln Pro Lys Ala Ala Pro Ser Val Thr Leu Phe Pro Pro Ser Ser
1 5 10 15
Glu Glu Leu Gln Ala Asn Lys Ala Thr Leu Val Cys Leu Ile Ser Asp
20 25 30
Phe Tyr Pro Gly Ala Val Thr Val Ala Trp Lys Ala Asp Ser Ser Pro
35 40 45
Val Lys Ala Gly Val Glu Thr Thr Thr Pro Ser Lys Gln Ser Asn Asn
50 55 60
Lys Tyr Ala Ala Ser Ser Tyr Leu Ser Leu Thr Pro Glu Gln Trp Lys
65 70 75 80
Ser His Arg Ser Tyr Ser Cys Gln Val Thr His Lys Gly Ser Thr Val
85 90 95
Glu Lys Thr Val Ala Pro Thr Glu Cys Ser
100 105
<210> 222
<211> 106
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 05LC-G202K
<400> 222
Gly Gln Pro Lys Ala Ala Pro Ser Val Thr Leu Phe Pro Pro Ser Ser
1 5 10 15
Glu Glu Leu Gln Ala Asn Lys Ala Thr Leu Val Cys Leu Ile Ser Asp
20 25 30
Phe Tyr Pro Gly Ala Val Thr Val Ala Trp Lys Ala Asp Ser Ser Pro
35 40 45
Val Lys Ala Gly Val Glu Thr Thr Thr Pro Ser Lys Gln Ser Asn Asn
50 55 60
Lys Tyr Ala Ala Ser Ser Tyr Leu Ser Leu Thr Pro Glu Gln Trp Lys
65 70 75 80
Ser His Arg Ser Tyr Ser Cys Gln Val Thr His Glu Lys Ser Thr Val
85 90 95
Glu Lys Thr Val Ala Pro Thr Glu Cys Ser
100 105
<210> 223
<211> 106
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 05LC-S203K
<400> 223
Gly Gln Pro Lys Ala Ala Pro Ser Val Thr Leu Phe Pro Pro Ser Ser
1 5 10 15
Glu Glu Leu Gln Ala Asn Lys Ala Thr Leu Val Cys Leu Ile Ser Asp
20 25 30
Phe Tyr Pro Gly Ala Val Thr Val Ala Trp Lys Ala Asp Ser Ser Pro
35 40 45
Val Lys Ala Gly Val Glu Thr Thr Thr Pro Ser Lys Gln Ser Asn Asn
50 55 60
Lys Tyr Ala Ala Ser Ser Tyr Leu Ser Leu Thr Pro Glu Gln Trp Lys
65 70 75 80
Ser His Arg Ser Tyr Ser Cys Gln Val Thr His Glu Gly Lys Thr Val
85 90 95
Glu Lys Thr Val Ala Pro Thr Glu Cys Ser
100 105
<210> 224
<211> 106
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 05LC-P211K
<400> 224
Gly Gln Pro Lys Ala Ala Pro Ser Val Thr Leu Phe Pro Pro Ser Ser
1 5 10 15
Glu Glu Leu Gln Ala Asn Lys Ala Thr Leu Val Cys Leu Ile Ser Asp
20 25 30
Phe Tyr Pro Gly Ala Val Thr Val Ala Trp Lys Ala Asp Ser Ser Pro
35 40 45
Val Lys Ala Gly Val Glu Thr Thr Thr Pro Ser Lys Gln Ser Asn Asn
50 55 60
Lys Tyr Ala Ala Ser Ser Tyr Leu Ser Leu Thr Pro Glu Gln Trp Lys
65 70 75 80
Ser His Arg Ser Tyr Ser Cys Gln Val Thr His Glu Gly Ser Thr Val
85 90 95
Glu Lys Thr Val Ala Lys Thr Glu Cys Ser
100 105
<210> 225
<211> 106
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 05LC-T212K
<400> 225
Gly Gln Pro Lys Ala Ala Pro Ser Val Thr Leu Phe Pro Pro Ser Ser
1 5 10 15
Glu Glu Leu Gln Ala Asn Lys Ala Thr Leu Val Cys Leu Ile Ser Asp
20 25 30
Phe Tyr Pro Gly Ala Val Thr Val Ala Trp Lys Ala Asp Ser Ser Pro
35 40 45
Val Lys Ala Gly Val Glu Thr Thr Thr Pro Ser Lys Gln Ser Asn Asn
50 55 60
Lys Tyr Ala Ala Ser Ser Tyr Leu Ser Leu Thr Pro Glu Gln Trp Lys
65 70 75 80
Ser His Arg Ser Tyr Ser Cys Gln Val Thr His Glu Gly Ser Thr Val
85 90 95
Glu Lys Thr Val Ala Pro Lys Glu Cys Ser
100 105
<210> 226
<211> 106
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 05LC-E213K
<400> 226
Gly Gln Pro Lys Ala Ala Pro Ser Val Thr Leu Phe Pro Pro Ser Ser
1 5 10 15
Glu Glu Leu Gln Ala Asn Lys Ala Thr Leu Val Cys Leu Ile Ser Asp
20 25 30
Phe Tyr Pro Gly Ala Val Thr Val Ala Trp Lys Ala Asp Ser Ser Pro
35 40 45
Val Lys Ala Gly Val Glu Thr Thr Thr Pro Ser Lys Gln Ser Asn Asn
50 55 60
Lys Tyr Ala Ala Ser Ser Tyr Leu Ser Leu Thr Pro Glu Gln Trp Lys
65 70 75 80
Ser His Arg Ser Tyr Ser Cys Gln Val Thr His Glu Gly Ser Thr Val
85 90 95
Glu Lys Thr Val Ala Pro Thr Lys Cys Ser
100 105
<210> 227
<211> 106
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 05LC-S215K
<400> 227
Gly Gln Pro Lys Ala Ala Pro Ser Val Thr Leu Phe Pro Pro Ser Ser
1 5 10 15
Glu Glu Leu Gln Ala Asn Lys Ala Thr Leu Val Cys Leu Ile Ser Asp
20 25 30
Phe Tyr Pro Gly Ala Val Thr Val Ala Trp Lys Ala Asp Ser Ser Pro
35 40 45
Val Lys Ala Gly Val Glu Thr Thr Thr Pro Ser Lys Gln Ser Asn Asn
50 55 60
Lys Tyr Ala Ala Ser Ser Tyr Leu Ser Leu Thr Pro Glu Gln Trp Lys
65 70 75 80
Ser His Arg Ser Tyr Ser Cys Gln Val Thr His Glu Gly Ser Thr Val
85 90 95
Glu Lys Thr Val Ala Pro Thr Glu Cys Lys
100 105
<210> 228
<211> 331
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01HC-S191.K.S192
<400> 228
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Lys Ser Leu Gly Thr Gln
65 70 75 80
Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp
85 90 95
Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro
100 105 110
Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro
115 120 125
Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr
130 135 140
Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn
145 150 155 160
Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg
165 170 175
Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val
180 185 190
Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser
195 200 205
Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys
210 215 220
Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp
225 230 235 240
Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe
245 250 255
Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu
260 265 270
Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe
275 280 285
Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly
290 295 300
Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr
305 310 315 320
Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 229
<211> 331
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01HC-S192.K.L193
<400> 229
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Lys Leu Gly Thr Gln
65 70 75 80
Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp
85 90 95
Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro
100 105 110
Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro
115 120 125
Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr
130 135 140
Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn
145 150 155 160
Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg
165 170 175
Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val
180 185 190
Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser
195 200 205
Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys
210 215 220
Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp
225 230 235 240
Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe
245 250 255
Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu
260 265 270
Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe
275 280 285
Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly
290 295 300
Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr
305 310 315 320
Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 230
<211> 331
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01HC-L193.K.G194
<400> 230
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Lys Gly Thr Gln
65 70 75 80
Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp
85 90 95
Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro
100 105 110
Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro
115 120 125
Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr
130 135 140
Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn
145 150 155 160
Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg
165 170 175
Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val
180 185 190
Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser
195 200 205
Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys
210 215 220
Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp
225 230 235 240
Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe
245 250 255
Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu
260 265 270
Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe
275 280 285
Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly
290 295 300
Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr
305 310 315 320
Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 231
<211> 108
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01-LC-K
<400> 231
Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu
1 5 10 15
Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe
20 25 30
Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln
35 40 45
Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser
50 55 60
Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu
65 70 75 80
Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser
85 90 95
Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys Lys
100 105
<210> 232
<211> 109
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01-LC-KL
<400> 232
Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu
1 5 10 15
Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe
20 25 30
Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln
35 40 45
Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser
50 55 60
Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu
65 70 75 80
Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser
85 90 95
Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys Lys Leu
100 105
<210> 233
<211> 109
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01-LC-LK
<400> 233
Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu
1 5 10 15
Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe
20 25 30
Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln
35 40 45
Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser
50 55 60
Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu
65 70 75 80
Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser
85 90 95
Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys Leu Lys
100 105
<210> 234
<211> 110
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01-LC-LKL
<400> 234
Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu
1 5 10 15
Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe
20 25 30
Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln
35 40 45
Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser
50 55 60
Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu
65 70 75 80
Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser
85 90 95
Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys Leu Lys Leu
100 105 110
<210> 235
<211> 112
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01-LC-GGSGK
<400> 235
Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu
1 5 10 15
Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe
20 25 30
Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln
35 40 45
Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser
50 55 60
Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu
65 70 75 80
Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser
85 90 95
Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys Gly Gly Ser Gly Lys
100 105 110
<210> 236
<211> 113
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01-LC-GGSGKL
<400> 236
Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu
1 5 10 15
Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe
20 25 30
Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln
35 40 45
Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser
50 55 60
Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu
65 70 75 80
Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser
85 90 95
Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys Gly Gly Ser Gly Lys
100 105 110
Leu
<210> 237
<211> 331
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01HC-T135K-L448HC
<400> 237
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Lys Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225 230 235 240
Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys Leu
325 330
<210> 238
<211> 330
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01HC-S136K-N297K
<400> 238
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Lys Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Lys Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225 230 235 240
Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 239
<211> 330
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01HC-S136K-N297K-P445K
<400> 239
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Lys Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Lys Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225 230 235 240
Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Lys Gly Lys
325 330
<210> 240
<211> 212
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: hu IgG2
<400> 240
Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu
1 5 10 15
Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser
20 25 30
His Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu
35 40 45
Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr
50 55 60
Phe Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Val His Gln Asp Trp Leu Asn
65 70 75 80
Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ala Pro
85 90 95
Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Thr Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln
100 105 110
Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val
115 120 125
Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val
130 135 140
Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro
145 150 155 160
Pro Met Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr
165 170 175
Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val
180 185 190
Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu
195 200 205
Ser Pro Gly Lys
210
<210> 241
<211> 212
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: hu IgG3
<400> 241
Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu
1 5 10 15
Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser
20 25 30
His Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Lys Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu
35 40 45
Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr
50 55 60
Phe Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn
65 70 75 80
Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro
85 90 95
Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Thr Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln
100 105 110
Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val
115 120 125
Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val
130 135 140
Glu Trp Glu Ser Ser Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Asn Thr Thr Pro
145 150 155 160
Pro Met Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr
165 170 175
Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Ile Phe Ser Cys Ser Val
180 185 190
Met His Glu Ala Leu His Asn Arg Phe Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu
195 200 205
Ser Pro Gly Lys
210
<210> 242
<211> 212
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: hu IgG4
<400> 242
Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu
1 5 10 15
Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser
20 25 30
Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu
35 40 45
Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr
50 55 60
Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn
65 70 75 80
Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser
85 90 95
Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln
100 105 110
Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val
115 120 125
Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val
130 135 140
Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro
145 150 155 160
Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Thr
165 170 175
Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val
180 185 190
Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu
195 200 205
Ser Leu Gly Lys
210
<210> 243
<211> 326
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01IgG2HC
<400> 243
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg
1 5 10 15
Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Asn Phe Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Thr Val Glu Arg Lys Cys Cys Val Glu Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
100 105 110
Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp
115 120 125
Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp
130 135 140
Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly
145 150 155 160
Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn
165 170 175
Ser Thr Phe Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Val His Gln Asp Trp
180 185 190
Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro
195 200 205
Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Thr Lys Gly Gln Pro Arg Glu
210 215 220
Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn
225 230 235 240
Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile
245 250 255
Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr
260 265 270
Thr Pro Pro Met Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys
275 280 285
Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys
290 295 300
Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu
305 310 315 320
Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325
<210> 244
<211> 326
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01IgG2HC-M252K
<400> 244
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg
1 5 10 15
Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Asn Phe Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Thr Val Glu Arg Lys Cys Cys Val Glu Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
100 105 110
Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp
115 120 125
Thr Leu Lys Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp
130 135 140
Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly
145 150 155 160
Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn
165 170 175
Ser Thr Phe Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Val His Gln Asp Trp
180 185 190
Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro
195 200 205
Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Thr Lys Gly Gln Pro Arg Glu
210 215 220
Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn
225 230 235 240
Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile
245 250 255
Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr
260 265 270
Thr Pro Pro Met Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys
275 280 285
Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys
290 295 300
Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu
305 310 315 320
Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325
<210> 245
<211> 326
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01IgG2HC-N297K
<400> 245
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg
1 5 10 15
Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Asn Phe Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Thr Val Glu Arg Lys Cys Cys Val Glu Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
100 105 110
Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp
115 120 125
Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp
130 135 140
Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly
145 150 155 160
Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Lys
165 170 175
Ser Thr Phe Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Val His Gln Asp Trp
180 185 190
Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro
195 200 205
Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Thr Lys Gly Gln Pro Arg Glu
210 215 220
Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn
225 230 235 240
Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile
245 250 255
Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr
260 265 270
Thr Pro Pro Met Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys
275 280 285
Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys
290 295 300
Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu
305 310 315 320
Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325
<210> 246
<211> 326
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01IgG2HC-P445K
<400> 246
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg
1 5 10 15
Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Asn Phe Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Thr Val Glu Arg Lys Cys Cys Val Glu Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
100 105 110
Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp
115 120 125
Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp
130 135 140
Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly
145 150 155 160
Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn
165 170 175
Ser Thr Phe Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Val His Gln Asp Trp
180 185 190
Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro
195 200 205
Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Thr Lys Gly Gln Pro Arg Glu
210 215 220
Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn
225 230 235 240
Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile
245 250 255
Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr
260 265 270
Thr Pro Pro Met Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys
275 280 285
Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys
290 295 300
Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu
305 310 315 320
Ser Leu Ser Lys Gly Lys
325
<210> 247
<211> 377
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01IgG3HC
<400> 247
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Thr Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Arg Val Glu Leu Lys Thr Pro Leu Gly Asp Thr Thr His Thr Cys Pro
100 105 110
Arg Cys Pro Glu Pro Lys Ser Cys Asp Thr Pro Pro Pro Cys Pro Arg
115 120 125
Cys Pro Glu Pro Lys Ser Cys Asp Thr Pro Pro Pro Cys Pro Arg Cys
130 135 140
Pro Glu Pro Lys Ser Cys Asp Thr Pro Pro Pro Cys Pro Arg Cys Pro
145 150 155 160
Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys
165 170 175
Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val
180 185 190
Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Lys Trp Tyr
195 200 205
Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu
210 215 220
Gln Tyr Asn Ser Thr Phe Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His
225 230 235 240
Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys
245 250 255
Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Thr Lys Gly Gln
260 265 270
Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met
275 280 285
Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro
290 295 300
Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Ser Gly Gln Pro Glu Asn Asn
305 310 315 320
Tyr Asn Thr Thr Pro Pro Met Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu
325 330 335
Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Ile
340 345 350
Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn Arg Phe Thr Gln
355 360 365
Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
370 375
<210> 248
<211> 377
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01IgG3HC-M252K
<400> 248
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Thr Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Arg Val Glu Leu Lys Thr Pro Leu Gly Asp Thr Thr His Thr Cys Pro
100 105 110
Arg Cys Pro Glu Pro Lys Ser Cys Asp Thr Pro Pro Pro Cys Pro Arg
115 120 125
Cys Pro Glu Pro Lys Ser Cys Asp Thr Pro Pro Pro Cys Pro Arg Cys
130 135 140
Pro Glu Pro Lys Ser Cys Asp Thr Pro Pro Pro Cys Pro Arg Cys Pro
145 150 155 160
Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys
165 170 175
Pro Lys Asp Thr Leu Lys Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val
180 185 190
Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Lys Trp Tyr
195 200 205
Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu
210 215 220
Gln Tyr Asn Ser Thr Phe Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His
225 230 235 240
Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys
245 250 255
Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Thr Lys Gly Gln
260 265 270
Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met
275 280 285
Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro
290 295 300
Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Ser Gly Gln Pro Glu Asn Asn
305 310 315 320
Tyr Asn Thr Thr Pro Pro Met Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu
325 330 335
Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Ile
340 345 350
Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn Arg Phe Thr Gln
355 360 365
Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
370 375
<210> 249
<211> 377
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01IgG3HC-N297K
<400> 249
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Thr Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Arg Val Glu Leu Lys Thr Pro Leu Gly Asp Thr Thr His Thr Cys Pro
100 105 110
Arg Cys Pro Glu Pro Lys Ser Cys Asp Thr Pro Pro Pro Cys Pro Arg
115 120 125
Cys Pro Glu Pro Lys Ser Cys Asp Thr Pro Pro Pro Cys Pro Arg Cys
130 135 140
Pro Glu Pro Lys Ser Cys Asp Thr Pro Pro Pro Cys Pro Arg Cys Pro
145 150 155 160
Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys
165 170 175
Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val
180 185 190
Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Lys Trp Tyr
195 200 205
Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu
210 215 220
Gln Tyr Lys Ser Thr Phe Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His
225 230 235 240
Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys
245 250 255
Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Thr Lys Gly Gln
260 265 270
Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met
275 280 285
Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro
290 295 300
Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Ser Gly Gln Pro Glu Asn Asn
305 310 315 320
Tyr Asn Thr Thr Pro Pro Met Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu
325 330 335
Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Ile
340 345 350
Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn Arg Phe Thr Gln
355 360 365
Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
370 375
<210> 250
<211> 377
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01IgG3HC-P445K
<400> 250
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Thr Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Arg Val Glu Leu Lys Thr Pro Leu Gly Asp Thr Thr His Thr Cys Pro
100 105 110
Arg Cys Pro Glu Pro Lys Ser Cys Asp Thr Pro Pro Pro Cys Pro Arg
115 120 125
Cys Pro Glu Pro Lys Ser Cys Asp Thr Pro Pro Pro Cys Pro Arg Cys
130 135 140
Pro Glu Pro Lys Ser Cys Asp Thr Pro Pro Pro Cys Pro Arg Cys Pro
145 150 155 160
Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys
165 170 175
Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val
180 185 190
Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Lys Trp Tyr
195 200 205
Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu
210 215 220
Gln Tyr Asn Ser Thr Phe Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His
225 230 235 240
Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys
245 250 255
Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Thr Lys Gly Gln
260 265 270
Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met
275 280 285
Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro
290 295 300
Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Ser Gly Gln Pro Glu Asn Asn
305 310 315 320
Tyr Asn Thr Thr Pro Pro Met Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu
325 330 335
Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Ile
340 345 350
Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn Arg Phe Thr Gln
355 360 365
Lys Ser Leu Ser Leu Ser Lys Gly Lys
370 375
<210> 251
<211> 327
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01IgG4HC
<400> 251
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg
1 5 10 15
Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr
65 70 75 80
Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Ser Cys Pro Ala Pro
100 105 110
Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys
115 120 125
Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val
130 135 140
Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp
145 150 155 160
Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe
165 170 175
Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp
180 185 190
Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu
195 200 205
Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg
210 215 220
Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys
225 230 235 240
Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp
245 250 255
Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys
260 265 270
Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser
275 280 285
Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser
290 295 300
Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser
305 310 315 320
Leu Ser Leu Ser Leu Gly Lys
325
<210> 252
<211> 327
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01IgG4HC-M252K
<400> 252
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg
1 5 10 15
Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr
65 70 75 80
Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Ser Cys Pro Ala Pro
100 105 110
Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys
115 120 125
Asp Thr Leu Lys Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val
130 135 140
Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp
145 150 155 160
Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe
165 170 175
Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp
180 185 190
Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu
195 200 205
Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg
210 215 220
Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys
225 230 235 240
Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp
245 250 255
Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys
260 265 270
Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser
275 280 285
Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser
290 295 300
Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser
305 310 315 320
Leu Ser Leu Ser Leu Gly Lys
325
<210> 253
<211> 327
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01IgG4HC-N297K
<400> 253
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg
1 5 10 15
Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr
65 70 75 80
Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Ser Cys Pro Ala Pro
100 105 110
Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys
115 120 125
Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val
130 135 140
Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp
145 150 155 160
Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe
165 170 175
Lys Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp
180 185 190
Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu
195 200 205
Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg
210 215 220
Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys
225 230 235 240
Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp
245 250 255
Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys
260 265 270
Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser
275 280 285
Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser
290 295 300
Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser
305 310 315 320
Leu Ser Leu Ser Leu Gly Lys
325
<210> 254
<211> 327
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01IgG4HC-L445K
<400> 254
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg
1 5 10 15
Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr
65 70 75 80
Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Ser Cys Pro Ala Pro
100 105 110
Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys
115 120 125
Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val
130 135 140
Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp
145 150 155 160
Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe
165 170 175
Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp
180 185 190
Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu
195 200 205
Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg
210 215 220
Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys
225 230 235 240
Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp
245 250 255
Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys
260 265 270
Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser
275 280 285
Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser
290 295 300
Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser
305 310 315 320
Leu Ser Leu Ser Lys Gly Lys
325
<210> 255
<211> 119
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01FabHC
<400> 255
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Lys Ser Leu Gly Thr Gln
65 70 75 80
Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp
85 90 95
Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Ala Pro Pro
100 105 110
Ala Pro Ala Pro Glu Leu Leu
115
<210> 256
<211> 119
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01FabHC-D221A
<400> 256
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Lys Ser Leu Gly Thr Gln
65 70 75 80
Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp
85 90 95
Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Ala Lys Thr His Thr Ala Pro Pro
100 105 110
Ala Pro Ala Pro Glu Leu Leu
115
<210> 257
<211> 119
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01FabHC-D221K
<400> 257
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Lys Ser Leu Gly Thr Gln
65 70 75 80
Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp
85 90 95
Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Lys Lys Thr His Thr Ala Pro Pro
100 105 110
Ala Pro Ala Pro Glu Leu Leu
115
<210> 258
<211> 119
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01FabHC-T223K
<400> 258
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Lys Ser Leu Gly Thr Gln
65 70 75 80
Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp
85 90 95
Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Lys His Thr Ala Pro Pro
100 105 110
Ala Pro Ala Pro Glu Leu Leu
115
<210> 259
<211> 108
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01FabHC-T223K-H
<400> 259
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Lys Ser Leu Gly Thr Gln
65 70 75 80
Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp
85 90 95
Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Lys His
100 105
<210> 260
<211> 119
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01FabHC-H224K
<400> 260
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Lys Ser Leu Gly Thr Gln
65 70 75 80
Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp
85 90 95
Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr Lys Thr Ala Pro Pro
100 105 110
Ala Pro Ala Pro Glu Leu Leu
115
<210> 261
<211> 109
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01FabHC-H224K-T
<400> 261
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Lys Ser Leu Gly Thr Gln
65 70 75 80
Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp
85 90 95
Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr Lys Thr
100 105
<210> 262
<211> 119
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01FabHC-T225K
<400> 262
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Lys Ser Leu Gly Thr Gln
65 70 75 80
Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp
85 90 95
Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Lys Ala Pro Pro
100 105 110
Ala Pro Ala Pro Glu Leu Leu
115
<210> 263
<211> 110
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01FabHC-T225K-A
<400> 263
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Lys Ser Leu Gly Thr Gln
65 70 75 80
Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp
85 90 95
Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Lys Ala
100 105 110
<210> 264
<211> 119
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01FabHC-C226K
<400> 264
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Lys Ser Leu Gly Thr Gln
65 70 75 80
Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp
85 90 95
Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Lys Pro Pro
100 105 110
Ala Pro Ala Pro Glu Leu Leu
115
<210> 265
<211> 119
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01FabHC-C226K,P228A
<400> 265
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Lys Ser Leu Gly Thr Gln
65 70 75 80
Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp
85 90 95
Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Lys Ala Pro
100 105 110
Ala Pro Ala Pro Glu Leu Leu
115
<210> 266
<211> 119
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01FabHC-P227K
<400> 266
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Lys Ser Leu Gly Thr Gln
65 70 75 80
Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp
85 90 95
Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Ala Lys Pro
100 105 110
Ala Pro Ala Pro Glu Leu Leu
115
<210> 267
<211> 119
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01FabHC-P227K,P228A
<400> 267
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Lys Ser Leu Gly Thr Gln
65 70 75 80
Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp
85 90 95
Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Ala Lys Ala
100 105 110
Ala Pro Ala Pro Glu Leu Leu
115
<210> 268
<211> 119
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01FabHC-P228K
<400> 268
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Lys Ser Leu Gly Thr Gln
65 70 75 80
Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp
85 90 95
Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Ala Pro Lys
100 105 110
Ala Pro Ala Pro Glu Leu Leu
115
<210> 269
<211> 113
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01FabHC-P228K-A
<400> 269
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Lys Ser Leu Gly Thr Gln
65 70 75 80
Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp
85 90 95
Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Ala Pro Lys
100 105 110
Ala
<210> 270
<211> 119
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01FabHC-C229K
<400> 270
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Lys Ser Leu Gly Thr Gln
65 70 75 80
Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp
85 90 95
Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Ala Pro Pro
100 105 110
Lys Pro Ala Pro Glu Leu Leu
115
<210> 271
<211> 119
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01FabHC-C229K,P230A
<400> 271
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Lys Ser Leu Gly Thr Gln
65 70 75 80
Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp
85 90 95
Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Ala Pro Pro
100 105 110
Lys Ala Ala Pro Glu Leu Leu
115
<210> 272
<211> 119
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01FabHC-P230K
<400> 272
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Lys Ser Leu Gly Thr Gln
65 70 75 80
Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp
85 90 95
Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Ala Pro Pro
100 105 110
Ala Lys Ala Pro Glu Leu Leu
115
<210> 273
<211> 115
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01FabHC-P230K-A
<400> 273
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Lys Ser Leu Gly Thr Gln
65 70 75 80
Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp
85 90 95
Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Ala Pro Pro
100 105 110
Ala Lys Ala
115
<210> 274
<211> 119
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01FabHC-A231K
<400> 274
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Lys Ser Leu Gly Thr Gln
65 70 75 80
Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp
85 90 95
Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Ala Pro Pro
100 105 110
Ala Pro Lys Pro Glu Leu Leu
115
<210> 275
<211> 119
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01FabHC-A231K,P232A
<400> 275
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Lys Ser Leu Gly Thr Gln
65 70 75 80
Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp
85 90 95
Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Ala Pro Pro
100 105 110
Ala Pro Lys Ala Glu Leu Leu
115
<210> 276
<211> 119
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01FabHC-P232K
<400> 276
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Lys Ser Leu Gly Thr Gln
65 70 75 80
Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp
85 90 95
Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Ala Pro Pro
100 105 110
Ala Pro Ala Lys Glu Leu Leu
115
<210> 277
<211> 119
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01FabHC-P232K,E233A
<400> 277
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Lys Ser Leu Gly Thr Gln
65 70 75 80
Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp
85 90 95
Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Ala Pro Pro
100 105 110
Ala Pro Ala Lys Ala Leu Leu
115
<210> 278
<211> 119
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01FabHC-E233K
<400> 278
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Lys Ser Leu Gly Thr Gln
65 70 75 80
Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp
85 90 95
Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Ala Pro Pro
100 105 110
Ala Pro Ala Pro Lys Leu Leu
115
<210> 279
<211> 118
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01FabHC-E233K-L
<400> 279
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Lys Ser Leu Gly Thr Gln
65 70 75 80
Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp
85 90 95
Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Ala Pro Pro
100 105 110
Ala Pro Ala Pro Lys Leu
115
<210> 280
<211> 119
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01FabHC-L234K
<400> 280
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Lys Ser Leu Gly Thr Gln
65 70 75 80
Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp
85 90 95
Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Ala Pro Pro
100 105 110
Ala Pro Ala Pro Glu Lys Leu
115
<210> 281
<211> 119
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01FabHC-E233A,L234K
<400> 281
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Lys Ser Leu Gly Thr Gln
65 70 75 80
Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp
85 90 95
Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Ala Pro Pro
100 105 110
Ala Pro Ala Pro Ala Lys Leu
115
<210> 282
<211> 119
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01FabHC-L235K
<400> 282
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Lys Ser Leu Gly Thr Gln
65 70 75 80
Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp
85 90 95
Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Ala Pro Pro
100 105 110
Ala Pro Ala Pro Glu Leu Lys
115
<210> 283
<211> 330
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Антитело 01HC-N297Q
<400> 283
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Gln Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225 230 235 240
Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 284
<211> 19
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: Сигнальная последовательность
<400> 284
Met Gly Trp Ser Cys Ile Ile Leu Phe Leu Val Ala Thr Ala Thr Gly
1 5 10 15
Val His Ser
<210> 285
<211> 4
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: пептид
<400> 285
Gly Gly Lys Leu
1
<210> 286
<211> 5
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: пептид
<400> 286
Gly Gly Ser Lys Leu
1 5
<210> 287
<211> 6
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: пептид
<400> 287
Gly Gly Ser Gly Lys Leu
1 5
<210> 288
<211> 330
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<220>
<221> прочие_признаки
<222> (1)..(330)
<223> hu C(гамма)
<400> 288
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225 230 235 240
Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 289
<211> 107
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<220>
<221> прочие_признаки
<222> (1)..(107)
<223> hu C(каппа)
<400> 289
Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu
1 5 10 15
Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe
20 25 30
Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln
35 40 45
Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser
50 55 60
Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu
65 70 75 80
Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser
85 90 95
Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys
100 105
<210> 290
<211> 106
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<220>
<221> прочие_признаки
<222> (1)..(106)
<223> hu C(лямбда)
<400> 290
Gly Gln Pro Lys Ala Ala Pro Ser Val Thr Leu Phe Pro Pro Ser Ser
1 5 10 15
Glu Glu Leu Gln Ala Asn Lys Ala Thr Leu Val Cys Leu Ile Ser Asp
20 25 30
Phe Tyr Pro Gly Ala Val Thr Val Ala Trp Lys Ala Asp Ser Ser Pro
35 40 45
Val Lys Ala Gly Val Glu Thr Thr Thr Pro Ser Lys Gln Ser Asn Asn
50 55 60
Lys Tyr Ala Ala Ser Ser Tyr Leu Ser Leu Thr Pro Glu Gln Trp Lys
65 70 75 80
Ser His Lys Ser Tyr Ser Cys Gln Val Thr His Glu Gly Ser Thr Val
85 90 95
Glu Lys Thr Val Ala Pro Thr Glu Cys Ser
100 105
<210> 291
<211> 212
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<220>
<221> прочие_признаки
<222> (1)..(212)
<223> hu IgG1
<400> 291
Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu
1 5 10 15
Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser
20 25 30
His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu
35 40 45
Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr
50 55 60
Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn
65 70 75 80
Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro
85 90 95
Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln
100 105 110
Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val
115 120 125
Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val
130 135 140
Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro
145 150 155 160
Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr
165 170 175
Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val
180 185 190
Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu
195 200 205
Ser Pro Gly Lys
210
<210> 292
<211> 212
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<220>
<221> прочие_признаки
<222> (1)..(212)
<223> hu IgG2
<400> 292
Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu
1 5 10 15
Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser
20 25 30
His Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu
35 40 45
Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr
50 55 60
Phe Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Val His Gln Asp Trp Leu Asn
65 70 75 80
Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ala Pro
85 90 95
Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Thr Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln
100 105 110
Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val
115 120 125
Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val
130 135 140
Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro
145 150 155 160
Pro Met Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr
165 170 175
Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val
180 185 190
Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu
195 200 205
Ser Pro Gly Lys
210
<210> 293
<211> 212
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<220>
<221> прочие_признаки
<222> (1)..(212)
<223> hu IgG3
<400> 293
Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu
1 5 10 15
Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser
20 25 30
His Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Lys Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu
35 40 45
Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr
50 55 60
Phe Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn
65 70 75 80
Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro
85 90 95
Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Thr Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln
100 105 110
Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val
115 120 125
Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val
130 135 140
Glu Trp Glu Ser Ser Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Asn Thr Thr Pro
145 150 155 160
Pro Met Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr
165 170 175
Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Ile Phe Ser Cys Ser Val
180 185 190
Met His Glu Ala Leu His Asn Arg Phe Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu
195 200 205
Ser Pro Gly Lys
210
<210> 294
<211> 212
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<220>
<221> прочие_признаки
<222> (1)..(212)
<223> hu IgG4
<400> 294
Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu
1 5 10 15
Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser
20 25 30
Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu
35 40 45
Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr
50 55 60
Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn
65 70 75 80
Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser
85 90 95
Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln
100 105 110
Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val
115 120 125
Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val
130 135 140
Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro
145 150 155 160
Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Thr
165 170 175
Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val
180 185 190
Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu
195 200 205
Ser Leu Gly Lys
210
<210> 295
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: пептид
<400> 295
Ser Ser Lys Ser Leu Gly Thr
1 5
<210> 296
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: пептид
<400> 296
Ser Ser Ser Lys Leu Gly Thr
1 5
<210> 297
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: пептид
<400> 297
Ser Ser Ser Leu Lys Gly Thr
1 5
<210> 298
<211> 5
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: пептид
<400> 298
Gly Gly Ser Gly Lys
1 5
<210> 299
<211> 14
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: пептид
<400> 299
Asp Thr His Thr Ala Pro Pro Ala Pro Ala Pro Glu Leu Leu
1 5 10
<210> 300
<211> 15
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: M9-Fab, T223K
<400> 300
Asp Lys Lys His Thr Ala Pro Pro Ala Pro Ala Pro Glu Leu Leu
1 5 10 15
<210> 301
<211> 15
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: D221A
<400> 301
Ala Lys Thr His Thr Ala Pro Pro Ala Pro Ala Pro Glu Leu Leu
1 5 10 15
<210> 302
<211> 15
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: D221K
<400> 302
Lys Lys Thr His Thr Ala Pro Pro Ala Pro Ala Pro Glu Leu Leu
1 5 10 15
<210> 303
<211> 4
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: T223K-H
<400> 303
Asp Lys Lys His
1
<210> 304
<211> 15
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: H224K
<400> 304
Asp Lys Thr Lys Thr Ala Pro Pro Ala Pro Ala Pro Glu Leu Leu
1 5 10 15
<210> 305
<211> 5
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: H224K-T
<400> 305
Asp Lys Thr Lys Thr
1 5
<210> 306
<211> 15
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: T225K
<400> 306
Asp Lys Thr His Lys Ala Pro Pro Ala Pro Ala Pro Glu Leu Leu
1 5 10 15
<210> 307
<211> 6
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: T225K-A
<400> 307
Asp Lys Thr His Lys Ala
1 5
<210> 308
<211> 15
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: C226K
<400> 308
Asp Lys Thr His Thr Lys Pro Pro Ala Pro Ala Pro Glu Leu Leu
1 5 10 15
<210> 309
<211> 15
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: C226K,P228A
<400> 309
Asp Lys Thr His Thr Lys Ala Pro Ala Pro Ala Pro Glu Leu Leu
1 5 10 15
<210> 310
<211> 15
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: P227K
<400> 310
Asp Lys Thr His Thr Ala Lys Pro Ala Pro Ala Pro Glu Leu Leu
1 5 10 15
<210> 311
<211> 15
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: P227K,P228A
<400> 311
Asp Lys Thr His Thr Ala Lys Ala Ala Pro Ala Pro Glu Leu Leu
1 5 10 15
<210> 312
<211> 15
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: P228K
<400> 312
Asp Lys Thr His Thr Ala Pro Lys Ala Pro Ala Pro Glu Leu Leu
1 5 10 15
<210> 313
<211> 9
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: P228K-A
<400> 313
Asp Lys Thr His Thr Ala Pro Lys Ala
1 5
<210> 314
<211> 15
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: C229K
<400> 314
Asp Lys Thr His Thr Ala Pro Pro Lys Pro Ala Pro Glu Leu Leu
1 5 10 15
<210> 315
<211> 15
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: C229K,P230A
<400> 315
Asp Lys Thr His Thr Ala Pro Pro Lys Ala Ala Pro Glu Leu Leu
1 5 10 15
<210> 316
<211> 15
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: P230K
<400> 316
Asp Lys Thr His Thr Ala Pro Pro Ala Lys Ala Pro Glu Leu Leu
1 5 10 15
<210> 317
<211> 11
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: P230K-A
<400> 317
Asp Lys Thr His Thr Ala Pro Pro Ala Lys Ala
1 5 10
<210> 318
<211> 15
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: A231K
<400> 318
Asp Lys Thr His Thr Ala Pro Pro Ala Pro Lys Pro Glu Leu Leu
1 5 10 15
<210> 319
<211> 15
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: A231K,P232A
<400> 319
Asp Lys Thr His Thr Ala Pro Pro Ala Pro Lys Ala Glu Leu Leu
1 5 10 15
<210> 320
<211> 15
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: P232K
<400> 320
Asp Lys Thr His Thr Ala Pro Pro Ala Pro Ala Lys Glu Leu Leu
1 5 10 15
<210> 321
<211> 15
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: P232K,E233A
<400> 321
Asp Lys Thr His Thr Ala Pro Pro Ala Pro Ala Lys Ala Leu Leu
1 5 10 15
<210> 322
<211> 15
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: E233K
<400> 322
Asp Lys Thr His Thr Ala Pro Pro Ala Pro Ala Pro Lys Leu Leu
1 5 10 15
<210> 323
<211> 14
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: E233K-L
<400> 323
Asp Lys Thr His Thr Ala Pro Pro Ala Pro Ala Pro Lys Leu
1 5 10
<210> 324
<211> 15
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: L234K
<400> 324
Asp Lys Thr His Thr Ala Pro Pro Ala Pro Ala Pro Glu Lys Leu
1 5 10 15
<210> 325
<211> 15
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: E233A,L234K
<400> 325
Asp Lys Thr His Thr Ala Pro Pro Ala Pro Ala Pro Ala Lys Leu
1 5 10 15
<210> 326
<211> 15
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: L235K
<400> 326
Asp Lys Thr His Thr Ala Pro Pro Ala Pro Ala Pro Glu Leu Lys
1 5 10 15
<210> 327
<211> 5
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: пептид
<400> 327
Lys Ser Lys Ser Gly
1 5
<210> 328
<211> 5
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: пептид
<400> 328
Ser Thr Lys Gly Gly
1 5
<210> 329
<211> 5
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: пептид
<400> 329
Ser Ser Lys Gly Thr
1 5
<210> 330
<211> 5
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: пептид
<400> 330
Thr Leu Lys Ile Ser
1 5
<210> 331
<211> 5
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: пептид
<400> 331
Gln Tyr Lys Ser Thr
1 5
<210> 332
<211> 4
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: пептид
<400> 332
Leu Ser Lys Gly
1
<210> 333
<211> 5
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: пептид
<400> 333
Gln Gly Lys Ser Ser
1 5
<210> 334
<211> 5
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: пептид
<400> 334
Gly Leu Lys Ser Pro
1 5
<210> 335
<211> 5
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: пептид
<400> 335
Pro Thr Lys Cys Ser
1 5
<210> 336
<211> 5
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: пептид
<400> 336
Ser Ser Lys Ser Thr
1 5
<210> 337
<211> 5
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: пептид
<400> 337
Leu Thr Lys Asn Gln
1 5
<210> 338
<211> 5
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: пептид
<400> 338
Gln Leu Lys Ser Gly
1 5
<210> 339
<211> 5
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая: пептид
<400> 339
Leu Ser Lys Ala Asp
1 5
<---
Группа изобретений относится к области биотехнологии, в частности к конъюгатам иммуноглобулинов. Изобретение позволяет в ходе ферментативной реакции, катализируемой микробной трансглутаминазой, получить конъюгат содержащего модифицированный или мутантный остаток лизина в константной области иммуноглобулина с функциональным средством, содержащим ацил-донорный субстрат с остатком глутамина. Использование сайт-специфичной ферментативной реакции для объединения фрагментов антитела и функционального средства в рамках единой молекулы позволяет получать конъюгаты антитело-лекарственное средство (ADC-конъюгаты) с относительно однородным показателем распределения отношений антитело-лекарственного средство (DAR). 4 н. и 7 з.п. ф-лы, 10 пр., 9 табл., 12 ил.
1. Конъюгированный иммуноглобулин, включающий иммуноглобулин или его антигенсвязывающий фрагмент и функциональное средство, где:
a) иммуноглобулин или его антигенсвязывающий фрагмент включает генно-инженерно модифицированный остаток лизина в константной области иммуноглобулина, где генно-инженерно модифицированный остаток лизина является природным аминокислотным остатком, который был подвергнут мутации с заменой на остаток лизина,
где природный аминокислотный остаток, который был подвергнут мутации с заменой на остаток лизина, выбирают из группы, состоящей из:
треонина 135 (T135K), серина 136 (S136K), лейцина 193 (L193K), аспарагиновой кислоты 221 (D221K), треонина 223 (T223K), гистидина 224 (H224K), треонина 225 (T225K), метионина 252 (M252K), аспарагина 297 (N297K) или пролина 445 (P445K) на тяжелой цепи иммуноглобулина или его антигенсвязывающего фрагмента,
лейцина 201 (L201K) или серина 202 (S202K) на каппа легкой цепи иммуноглобулина или его антигенсвязывающего фрагмента или
глутаминовой кислоты 213 (E213K) на лямбда легкой цепи иммуноглобулина или его антигенсвязывающего фрагмента; и
b) функциональное средство включает ацил-донорный субстрат, где ацил-донорный субстрат включает остаток глутамина,
где функциональное средство, содержащее ацил-донорный субстрат, соответствует Формулам (I) или (II):
(Z)m-Gln-(L)n-(Y), (I)
(Y)-(L)n-Gln-(Z)m, (II)
где Z является карбоксибензилокси (CBZ) группой или аминокислотным остатком;
Gln является остатком аминокислоты глутамина;
каждый L независимо является нормальным или разветвленным линкером, содержащим от 1 до 20 атомов углерода, где один или более атомов углерода необязательно и независимо могут быть заменены атомом азота, кислорода или серы и где каждый атом углерода и азота необязательно может быть замещен; или каждый L необязательно и независимо является аминокислотным остатком;
m является целым числом от 0 до 5;
n является целым числом от 0 до 5; и
Y является функциональным средством;
где генно-инженерно модифицированный остаток лизина иммуноглобулина или его антигенсвязывающего фрагмента конъюгирован с остатком глутамина ацил-донорного субстрата функционального средства; и
где конъюгированный иммуноглобулин способен специфически связываться с антигеном, против которого иммуноглобулин был получен.
2. Конъюгированный иммуноглобулин, включающий иммуноглобулин или его антигенсвязывающий фрагмент и функциональное средство, где:
a) иммуноглобулин или его антигенсвязывающий фрагмент включает генно-инженерно модифицированный остаток лизина в константной области иммуноглобулина, где генно-инженерно модифицированный остаток лизина является природным аминокислотным остатком, который был подвергнут мутации с заменой на остаток лизина,
где природный аминокислотный остаток, который был подвергнут мутации с заменой на остаток лизина, выбирают из группы, состоящей из:
треонина 135 (T135K), серина 136 (S136K), лейцина 193 (L193K), аспарагиновой кислоты 221 (D221K), треонина 223 (T223K), гистидина 224 (H224K), треонина 225 (T225K), метионина 252 (M252K), аспарагина 297 (N297K) или пролина 445 (P445K) на тяжелой цепи иммуноглобулина или его антигенсвязывающего фрагмента,
лейцина 201 (L201K) или серина 202 (S202K) на каппа легкой цепи иммуноглобулина или его антигенсвязывающего фрагмента или
глутаминовой кислоты 213 (E213K) на лямбда легкой цепи иммуноглобулина или его антигенсвязывающего фрагмента; и
b) генно-инженерно модифицированный остаток лизина конъюгирован с остатком глутамина на ацил-донорном субстрате, где ацил-донорный субстрат дополнительно включает реакционноспособную группу,
где ацил-донорный субстрат соответствует Формулам (III) или (IV):
(Z)m-Gln-(L)n-(X), (III)
(X)-(L)n-Gln-(Z)m, (IV)
где Z является карбоксибензилокси (CBZ) группой или аминокислотным остатком;
Gln является остатком аминокислоты глутамина;
каждый L независимо является нормальным или разветвленным линкером, содержащим от 1 до 20 атомов углерода, где один или более атомов углерода необязательно и независимо могут быть заменены атомом азота, кислорода или серы и где каждый атом углерода и азота необязательно может быть замещен; или каждый L необязательно и независимо является аминокислотным остатком;
m является целым числом от 0 до 5;
n является целым числом от 0 до 5; и
X является реакционноспособной группой; и
c) реакционноспособная группа конъюгирована с терапевтическим средством или диагностическим средством; и
где конъюгированный иммуноглобулин способен специфически связываться с антигеном, против которого иммуноглобулин был получен.
3. Конъюгированный иммуноглобулин по п.1 или 2, где иммуноглобулин или его антигенсвязывающий фрагмент дополнительно включает второй генно-инженерно модифицированный остаток лизина, где второй генно-инженерно модифицированный остаток лизина является второй вставкой остатка лизина или вторым природным аминокислотным остатком, который был подвергнут мутации с заменой на остаток лизина, и где второй генно-инженерно модифицированный остаток лизина конъюгирован с остатком глутамина ацил-донорного субстрата.
4. Конъюгированный иммуноглобулин по п.1 или 2, где аминокислотный остаток после генно-инженерно модифицированного остатка лизина:
(i) не является остатком пролина или кислотным аминокислотным остатком;
(ii) является вставкой аминокислотного остатка, где вставка аминокислотного остатка является некислотным аминокислотным остатком или вставкой непролинового остатка; или
(iii) является природным кислотным аминокислотным остатком или природным остатком пролина, который был подвергнут мутации с заменой на некислотный аминокислотный остаток или непролиновый остаток; и/или
где аминокислотный остаток перед генно-инженерно модифицированным остатком лизина:
(i) не является кислотным аминокислотным остатком;
(ii) является вставкой некислотного аминокислотного остатка; или
(iii) является природным кислотным аминокислотным остатком, который был подвергнут мутации с заменой на некислотный аминокислотный остаток.
5. Конъюгированный иммуноглобулин по п.1 или 2, где иммуноглобулин или его антигенсвязывающий фрагмент включает тяжелую цепь, которая дополнительно включает по меньшей мере один аминокислотный остаток, который был присоединен к ее C-концу в положении 448, и где по меньшей мере один аминокислотный остаток не является пролином или кислотным аминокислотным остатком.
6. Конъюгированный иммуноглобулин по п.1, где функциональное средство, включающее ацил-донорный субстрат:
(i) соответствует формуле (I), где Z является CBZ группой, где каждый L независимо является полиэтиленгликолевой (ПЭГ) группой (-O((CH2)2)-), этиламином (-NH((CH2)2)-) или пропиламином (-NH((CH2)3)-) и где n является 0, 1, 2, 3, 4 или 5; или
(ii) соответствует формуле (I), где Z является CBZ группой и L является аминокислотой; или
(iii) соответствует формуле (II), где Z является CBZ группой, m является 1, n является 1, 2 или 3 и по меньшей мере один L является Gly.
7. Конъюгированный иммуноглобулин по п.2, где ацил-донорный субстрат:
(i) соответствует формуле (III), где Z является CBZ группой, где каждый L независимо является полиэтиленгликолевой (ПЭГ) группой (-O((CH2)2)-), этиламином (-NH((CH2)2)-) или пропиламином (-NH((CH2)3)-) и где n является 0, 1, 2, 3, 4 или 5; или
(ii) соответствует формуле (III), где Z является CBZ группой и где один или более L являются аминокислотой; или
(iii) соответствует формуле (IV), где Z является CBZ группой, m является 1, n является 1, 2 или 3 и по меньшей мере один L является Gly.
8. Конъюгированный иммуноглобулин по п.1 или 2, где терапевтическим средством является антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, химиотерапевтическое средство, лекарственное средство, радиоактивное средство, цитотоксическое средство, антибиотик, малая молекула, нуклеиновая кислота или полипептид или
где диагностическим средством является флуорофор, флуоресцентный краситель, радионуклид или фермент.
9. Способ получения конъюгированного иммуноглобулина по пп.1 и 6, включающий:
контакт иммуноглобулина или его антигенсвязывающего фрагмента с микробной трансглутаминазой и функциональным средством, включающим ацил-донорный субстрат,
a) где иммуноглобулин или его антигенсвязывающий фрагмент включает генно-инженерно модифицированный остаток лизина в константной области иммуноглобулина, где генно-инженерно модифицированный остаток лизина является природным аминокислотным остатком, который был подвергнут мутации с заменой на остаток лизина,
где природный аминокислотный остаток, который был подвергнут мутации с заменой на остаток лизина, выбирают из группы, состоящей из:
треонина 135 (T135K), серина 136 (S136K), лейцина 193 (L193K), аспарагиновой кислоты 221 (D221K), треонина 223 (T223K), гистидина 224 (H224K), треонина 225 (T225K), метионина 252 (M252K), аспарагина 297 (N297K) или пролина 445 (P445K) на тяжелой цепи иммуноглобулина или его антигенсвязывающего фрагмента,
лейцина 201 (L201K) или серина 202 (S202K) на каппа легкой цепи иммуноглобулина или его антигенсвязывающего фрагмента или
глутаминовой кислоты 213 (E213K) на лямбда легкой цепи иммуноглобулина или его антигенсвязывающего фрагмента; и
b) где ацил-донорный субстрат включает остаток глутамина,
где функциональное средство, содержащее ацил-донорный субстрат, соответствует Формулам (I) или (II):
(Z)m-Gln-(L)n-(Y), (I)
(Y)-(L)n-Gln-(Z)m, (II)
где Z является карбоксибензилокси (CBZ) группой или аминокислотным остатком;
Gln является остатком аминокислоты глутамина;
каждый L независимо является нормальным или разветвленным линкером, содержащим от 1 до 20 атомов углерода, где один или более атомов углерода необязательно и независимо могут быть заменены атомом азота, кислорода или серы и где каждый атом углерода и азота необязательно может быть замещен; или каждый L необязательно и независимо является аминокислотным остатком;
m является целым числом от 0 до 5;
n является целым числом от 0 до 5; и
Y является функциональным средством;
где микробная трансглутаминаза конъюгирует генно-инженерно модифицированный остаток лизина иммуноглобулина или его антигенсвязывающего фрагмента с остатком глутамина ацил-донорного субстрата на функциональном средстве, с получением в результате конъюгированного иммуноглобулина.
10. Способ получения конъюгированного иммуноглобулина по любому из пп.2 и 7, включающий:
i) контакт иммуноглобулина или его антигенсвязывающего фрагмента с микробной трансглутаминазой и ацил-донорным субстратом,
a) где иммуноглобулин или его антигенсвязывающий фрагмент включает генно-инженерно модифицированный остаток лизина в константной области иммуноглобулина, где генно-инженерно модифицированный остаток лизина является природным аминокислотным остатком, который был подвергнут мутации с заменой на остаток лизина,
где природный аминокислотный остаток, который был подвергнут мутации с заменой на остаток лизина, выбирают из группы, состоящей из:
треонина 135 (T135K), серина 136 (S136K), лейцина 193 (L193K), аспарагиновой кислоты 221 (D221K), треонина 223 (T223K), гистидина 224 (H224K), треонина 225 (T225K), метионина 252 (M252K), аспарагина 297 (N297K) или пролина 445 (P445K) на тяжелой цепи иммуноглобулина или его антигенсвязывающего фрагмента,
лейцина 201 (L201K) или серина 202 (S202K) на каппа легкой цепи иммуноглобулина или его антигенсвязывающего фрагмента или
глутаминовой кислоты 213 (E213K) на лямбда легкой цепи иммуноглобулина или его антигенсвязывающего фрагмента; и
b) где ацил-донорный субстрат включает остаток глутамина и реакционноспособную группу,
где ацил-донорный субстрат соответствует Формулам (III) или (IV):
(Z)m-Gln-(L)n-(X), (III)
(X)-(Ln-Gln-(Z)m, (IV)
где Z является карбоксибензилокси (CBZ) группой или аминокислотным остатком;
Gln является остатком аминокислоты глутамина;
каждый L независимо является нормальным или разветвленным линкером, содержащим от 1 до 20 атомов углерода, где один или более атомов углерода необязательно и независимо могут быть заменены атомом азота, кислорода или серы и где каждый атом углерода и азота необязательно может быть замещен; или каждый L необязательно и независимо является аминокислотным остатком;
m является целым числом от 0 до 5;
n является целым числом от 0 до 5; и
X является реакционноспособной группой; и
где микробная трансглутаминаза конъюгирует генно-инженерно модифицированный остаток лизина иммуноглобулина или его антигенсвязывающего фрагмента с остатком глутамина ацил-донорного субстрата, и
ii) конъюгирование терапевтического или диагностического средства с реакционноспособной группой ацил-донорного субстрата с получением в результате конъюгированного иммуноглобулина.
11. Способ по п.10, где реакционноспособная группа ацил-донорного субстрата конъюгирована с функциональным средством с помощью клик-химии.
| DENNLER P | |||
| et al.: Transglutaminase-based chemo-enzymatic conjugation approach yields homogeneous antibody-drug conjugates, BIOCONJUGATE CHEM | |||
| Способ защиты переносных электрических установок от опасностей, связанных с заземлением одной из фаз | 1924 |
|
SU2014A1 |
| MINDT T.L | |||
| Печь для непрерывного получения сернистого натрия | 1921 |
|
SU1A1 |
| Станок для изготовления деревянных ниточных катушек из цилиндрических, снабженных осевым отверстием, заготовок | 1923 |
|
SU2008A1 |
