ВЫДЕЛЕННОЕ АНТИТЕЛО (ВАРИАНТЫ), СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ АНТИТЕЛА, ВЫДЕЛЕННАЯ НУКЛЕИНОВАЯ КИСЛОТА, ЭКСПРЕССИОННАЯ КАССЕТА (ВАРИАНТЫ), ПЛАЗМИДА (ВАРИАНТЫ), КЛЕТКА-ХОЗЯИН, ФАРМАЦЕВТИЧЕСКИЙ ПРЕПАРАТ, НАБОР, СПОСОБ ЛЕЧЕНИЯ БОЛЬНОГО, ПОДВЕРЖЕННОГО РИСКУ ИЛИ СТРАДАЮЩЕГО ОТ ИНФЕКЦИИ E.COLI, И СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ИНФЕКЦИЙ E.COLI Российский патент 2020 года по МПК C07K16/12 A61K39/395 G01N33/569 C12N15/13 C12N15/63 C12N5/10 A61P31/04 

Область техники, к которой относится изобретение

Изобретение относится к выделенному антителу, которое специфически связывается с антигеном O25b штаммов Е. coli и характеризуется специфическими последовательностями CDR.

Уровень техники

Липополисахарид (ЛПС) является наиболее распространенным антигеном на поверхности энтеробактериальных патогенов. Какправило, ЛПС состоит из трех структурных фрагментов: i) липида А (также известного как эндотоксин), ii) корового олигосахарида, iii) О-антигена. Последний состоит из повторяющихся субъединиц 3-6 сахаров (в зависимости от серотипа). Липид А и коровый ОС являются относительно консервативными в одном энтеробактериальном виде, однако их доступность для антител ограничена. С другой стороны, О-антигены являются высокодоступными, однако очень разнообразными в отношении их структуры (в Е. coli существует ~180 различных О-типов).

Антитела к О-антигенам способны связываться с поверхностью Е. coli, в связи с чем они применяются как для диагностики (напр., О-типирования для эпидемиологических исследований), так и в качестве терапевтических средств. Тем не менее, с учетом высокой структурной изменчивости защита широкого спектра с применением антител, специфических к О-антигену, является проблематичной.

Инфекции внекишечной локализации, вызванные Е.coli, являются распространенными причинами заболеваемости и смертности. Мультирезистентные (MP) штаммы E.coli, которые появились в последнее время, вызывают значительную часть инфекций E.coli.

Методы лечения от этих MP штаммов становятся крайне ограниченными в связи с развитием у них устойчивости к большинству классов клинически значимых антибиотиков. В связи с этим крайне многообещающими в перспективе являются альтернативные методы лечения, напр., пассивная иммунизация моноклональными антителами (мкАТ).

За прошедшие годы появилась хорошо изученная клональная линия MP E.coli ST131-O25b:H4, вызывающая приблизительно 10% всех инфекций внекишечной локализации, вызванных E.coli в целом, и около половины инфекций, вызванных MP E.coli (Peirano et al. Int J Antimicrob Agents 2010 Apr; 35(4): 316-21; Rogers et al. J Antimicrob Chemother 2011 Jan; 66(1): 1-14; Woodford et al. FEMS Microbiol Rev 2011 Sep; 35(5): 736-55). Штаммы, принадлежащие к этой линии, демонстрируют ограниченную гетерогенность, в связи с чем их можно рассматривать как очень схожие в отношении антигенного спектра. Значительное большинство штаммов, принадлежащих к данному кластеру, экспрессируют антиген O25b, и в связи с этим специфический ген (в локусе синтеза ЛПС), кодирующий ферменты, синтезирующие этот антиген, используются для идентификации данного клона (Clermont et al. J Antimicrob Chemother 2008 May; 61 (5): 1024-8). В альтернативном варианте возможно применение агглютинации с сывороткой для типирования O25, несмотря на то, что О-антиген этой линии отличается от классического антигена O25 (в связи с чем он получил обозначение O25b), на что указывают генетические различия. Однако сыворотка для типирования O25 не обеспечивает установление различий между преимущественно не-МР клонами O25 и MP клонами O25b.

Rogers et al. (J Antimicrob Chemother 2011 Jan; 66(1): 1-14) описывает определение штамма E.coli O25b-ST131 по трем основным характеристикам, а именно его серологической группе (O25b), филогенетической группе (В2) и типу последовательности (ST131). Согласно раскрытым данным, каждая из этих характеристик обеспечивает свой вклад в определении. Описан ряд молекулярных методик, напр., МЛСТ, методы быстрого определения на основе ПЦР, ПЦР повторяющихся последовательностей и ГЭПП. Поликлональную антисыворотку (против штамма O25a), включающую ряд иммуноглобулинов, использовали для определения антигена O25 без установления различий между подтипами.

Jadhav et al. (PLOS ONE 2011; 6(3): e18063) описывает характеристики вирулентности и генетическое родство штаммов, которые были положительными для подгруппы O25b, связанной с вирулентным/мультирезистентным типом B2-O25b-ST131-СТХ-М-15. Человеческие клинические изоляты были подвергнуты анализу и классифицированы по серотипам, а также были получены профили маркеров вирулентности. O25-положительные штаммы определяли путем серотипирования с использованием поликлональной антисыворотки против О-антигенов - O1-O173. O25-положительные штаммы далее подвергали генотипированию с применением аллель-специфической ПЦР, направленной на выявление генного локуса подгруппы rfbO25b.

Mora et al. (Int. J. Antimicrobial Agents 2011; 37(1): 16-21) описывают появление некоторых клональных групп среди CTX-M-14-продуцирующих клинических изолятов Е.coli, в том числе O25b: H4-B2-ST131. О-типирование выполняли с применением О-специфической антисыворотки (поликлональной).

Clermont et al. (J Antimicrob Chemother 2008 May; 61 (5): 1024-8) раскрывает аллель-специфический ПЦР-анализ pabB, специфический для O25b ST131 Е.coli.

Szijarto et al, (FEMS Microbiol Lett 2012; 332: 131-6) описывает молекулярное типирование изолятов штамма Е.coli на основании коровой структуры молекулы ЛПС. Тип кора изолятов определяли по методу ПЦР с использованием праймеров, нацеленных на гены в коровом опероне и специфических к типам коров R1-4 и K-12 соответственно.

Раскрытие изобретения

Цель настоящего изобретения заключается в предложении антитела, направленного против Е.coli, в частности, MP штаммов, с улучшенной специфичностью для использования в целях профилактики или лечения инфекций Е.coli, вызванных штаммами, несущими ЛПС O25b. Далее цель заключается в предложении средств и способов, обеспечивающих возможность диагностирования бактерий Е.coli, таких как MP штаммы, быстрым и надежным образом.

Данная цель достигается посредством предмета настоящего изобретения.

В соответствии с изобретением предлагается выделенное антитело, которое специфически связывается с антигеном O25b штаммов Е.coli, включающее по крайней мере вариабельную область тяжелой цепи антитела (VH), которая включает любую из последовательностей CDR1-CDR3, перечисленных на фигуре 1, или функционально активный вариант любой из этих CDR.

В соответствии с изобретением предлагается выделенное антитело, которое специфически связывается с антигеном O25b штаммов Е.coli, включающее по крайней мере вариабельную область тяжелой цепи антитела (VH), которая включает любую из последовательностей CDR1-CDR3, перечисленных в таблице 1, которые обозначены в соответствии с номенклатурой Кэбота, или перечисленных в таблице 2, которые обозначены в соответствии с номенклатурой IMGT, или функционально активный вариант любой из этих CDR.

В частности, штаммы Е.coli являются MP штаммами.

Далее по тексту, если не указано иное, приведены последовательности CDR с нумерацией по Кэботу, т.е. определенные в соответствии с номенклатурой Кэбота (см. Kabat et al., Sequences of Proteins of Immunological Interest, 5^th Ed. Public Health Service, U.S. Department of Health and Human Services. (1991)), и, в частности, последовательности CDR, перечисленные в таблице 1 (SEQ ID 1-97). Хорошо понятно, что изобретение и объем притязаний также охватывают те же антитела и CDR, однако с различной нумерацией и обозначениями областей CDR, как приведено в таблице 2 (SEQ ID 98-183 и SEQ ID 39), в которой области CDR определены в соответствии с системой IMGT (The international ImMunoGeneTics, Lefranc et al., 1999, Nucleic Acids Res. 27: 209-212).

В частности, антитело

А)

выбрано из группы, включающей элементы i-xiv, в которой

i)

антитело, которое содержит

а) CDR1, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 1, и

б) CDR2, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 2, и

в) CDR3, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 3;

ii)

антитело, которое содержит

а) CDR1, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 7, и

б) CDR2, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 8, и

в) CDR3, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 9;

iii)

антитело, которое содержит

а) CDR1, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 11, и

б) CDR2, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 12, и

в) CDR3, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 13;

iv)

антитело, которое содержит

а) CDR1, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 17, и

б) CDR2, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 18, и

в) CDR3, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 19;

v)

антитело, которое содержит

а) CDR1, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 23, и

б) CDR2, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 24, и

в) CDR3, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 25;

vi)

антитело, которое содержит

а) CDR1, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 29, и

б) CDR2, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 30, и

в) CDR3, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 31;

vii)

антитело, которое содержит

а) CDR1, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 34, и

б) CDR2, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 35, и

в) CDR3, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 36;

viii)

антитело, которое содержит

а) CDR1, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 29, и

б) CDR2, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 40, и

в) CDR3, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 41;

ix)

антитело, которое содержит

а) CDR1, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 44, и

б) CDR2, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 45, и

в) CDR3, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 46;

x)

антитело, которое содержит

а) CDR1, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 50, и

б) CDR2, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 51, и

в) CDR3, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 52;

xi)

антитело, которое содержит

а) CDR1, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 50, и

б) CDR2, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 55, и

в) CDR3, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 56;

xii)

антитело, которое содержит

а) CDR1, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 57, и

б) CDR2, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 58, и

в) CDR3, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 59;

xiii)

антитело, которое содержит

а) CDR1, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 61, и

б) CDR2, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 62, и

в) GDR3, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 63;

xiv)

антитело, которое содержит

а) CDR1, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 66, и

б) CDR2, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 67, и

в) CDR3, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 68;

или

В) антитело, которое является функционально активным вариантом родительского антитела, являющегося любым из членов группы А, которая включает по крайней мере один функционально активный вариант любой из CDR1, CDR2 или CDR3 родительского антитела.

В частности, функционально активный вариант является функционально активным вариантом CDR, который содержит по крайней мере одну точковую мутацию в родительской последовательности CDR и содержит или состоит из аминокислотной последовательности, которая обладает по крайней мере 60% идентичностью последовательности с родительской последовательностью CDR, предпочтительно по крайней мере 70%, по крайней мере 80%, по крайней мере 90% идентичностью последовательности.

В соответствии с конкретным аспектом антитело изобретения включает

а) аминокислотную последовательность VH, выбранную из любой из последовательностей VH, как изображено на фигуре 2, предпочтительно аминокислотную последовательность тяжелой цепи (ТЦ) антитела, которая является любой из SEQ ID 184 - SEQ ID 231 или любой из SEQ ID 312 - SEQ ID 315;

б) аминокислотную последовательность тяжелой цепи (ТЦ) антитела, которая является любой из SEQ ID 184 - SEQ ID 231 или любой из SEQ ID 312 - SEQ ID 315; или

в) аминокислотную последовательность тяжелой цепи (ТЦ), антитела, которая является любой из SEQ ID 184 - SEQ ID 231 или любой из SEQ ID 312 - SEQ ID 315 и которая далее содержит делецию С-концевой аминокислоты и/или точковую мутацию Q1E, если первой аминокислотой последовательности VH является Q.

Например, такой функционально активный вариант родительского антитела является O25b-специфическим антителом, которое специфически связывается только с антигеном O25b. Типовые родительские антитела приведены на фигуре 1, это антитела группы 1, напр., гуманизированный вариант родительского тела 8А1, 3Е9 или 2А7, как показано на фиг. 2. При этом последовательности VH или ТЦ таких вариантов могут быть замещены последовательностями VH и ТЦ другого варианта соответственно, в частности, когда другой вариант представляет собой любой другой вариант того же родительского антитела.

В соответствии с конкретным аспектом антитело изобретения дополнительно также включает вариабельную область легкой цепи антитела (VL), которая включает любую из последовательностей CDR4-CDR6, перечисленных в таблице 1, которые обозначены в соответствии с номенклатурой Кэбота, или перечисленных в таблице 2, которые обозначены в соответствии с номенклатурой IMGT, или функционально активный вариант любой из этих CDR.

В частности, антитело

А)

выбрано из группы, включающей элементы i-xiv, в которой

i)

антитело, которое содержит

а) CDR4, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 4, и

б) CDR5, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 5, и

в) CDR6, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 6;

ii)

антитело, которое содержит

а) CDR4, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 10, и

б) CDR5, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 5, и

в) CDR6, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 6;

iii)

антитело, которое содержит

а) CDR4, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 14, и

б) CDR5, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 15, и

в) CDR6, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 16;

iv)

антитело, которое содержит

а) CDR4, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 20, и

б) CDR5, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 21, и

в) CDR6, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 22;

v)

антитело, которое содержит

а) CDR4, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 26, и

б) CDR5, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 27, и

в) CDR6, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 28;

vi)

антитело, которое содержит

а) CDR4, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 20, и

б) CDR5, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 32, и

в) CDR6, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 33;

vii)

антитело, которое содержит

а) CDR4, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 37, и

б) CDR5, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 27, и

в) CDR6, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 38;

viii)

антитело, которое содержит

а) CDR4, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 42, и

б) CDR5, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 32, и

в) CDR6, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 43;

ix)

антитело, которое содержит

а) CDR4, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 47, и

б) CDR5, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 48, и

в) CDR6, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 49;

х)

антитело, которое содержит

а) CDR4, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 53, и

б) CDR5, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 32, и

в) CDR6, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 54;

xi)

антитело, которое содержит

а) CDR4, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 57, и

б) CDR5, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 32, и

в) CDR6, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 54;

xii)

антитело, которое содержит

а) CDR4, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 26, и

б) CDR5, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 27, и

в) CDR6, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 60;

xiii)

антитело, которое содержит

а) CDR4, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 64, и

б) CDR5, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 65, и

в) CDR6, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 38;

xiv)

антитело, которое содержит

а) CDR4, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 69, и

б) CDR5, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 70, и

в) CDR6, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 71;

или

В) антитело, которое является функционально активным вариантом родительского антитела, являющегося любым из членов группы А, которая включает по крайней мере один функционально активный вариант любой из CDR4, CDR5 или CDR6 родительского антитела.

В частности, антитело содержит аминокислотную последовательность VL, выбранную из любой из последовательностей VL, как изображено на фигуре 2, предпочтительно аминокислотную последовательность легкой цепи (ЛЦ) антитела, которая является любой из SEQ ID 248 - SEQ ID 295 или любой из SEQ ID 316 - SEQ ID 319, или содержит аминокислотную последовательность легкой цепи (ЛЦ) антитела, которая является любой из SEQ ID 248 - SEQ ID 295 или любой из SEQ ID 316 - SEQ ID 319.

В соответствии с конкретным аспектом антитело изобретения является перекрестно специфическим в отношении связывания с эпитопом, общим для антигенов O25a и O25b, напр., с равной, больше чем равной, аналогичной или различной аффинностью.

В частности, антитело изобретения является перекрестно специфическим в отношении связывания с антигенами O25b и O25a и/или предпочтительно связывается с антигеном O25b по отношению к антигену O25a Е.coli, предпочтительно с более высокой аффинностью по сравнению со связыванием антигена O25b поликлональной сывороткой против штаммов O25 (теперь известных и обозначенных как O25a) Е.coli, как определено посредством иммуноанализа, по сравнению с поликлональной сывороткой для типирования против штаммов O25a, предпочтительно при этом антитело обладает по крайней мере равной аффинностью к обоим антигенам O25b и O25a, как определено с применением иммуноанализа, предпочтительно иммуноблоттинга, ИФА или других иммунологических методов.

Если антитело изобретения отдельно не обозначено как "перекрестно специфическое", в настоящем документе под ним понимается O25b-специфическое, т.е. антитело, которое специфически распознает только антиген O25b, напр., любое из антител группы 1 в таблице 1, или перекрестно специфическое антитело, т.е. антитело, которое специфически распознает эпитоп, общий для антигенов O25b и O25a, напр., любое из антител группы 2 в таблице 1. Соответственно термин "антитело изобретения" охватывает как O25b-специфическое, так и перекрестно специфическое к O25b/O25a антитело. Антитело изобретения, в частности, далее характеризуется тем, что оно не реагирует перекрестно с любым другим антигеном Е.coli, и/или антитело связывается с любым другим антигеном Е.coli с более низкой аффинностью, напр., когда различие в Kd для предпочтительного связывания с антигеном O25b и другими антигенами Е.coli (не являющимися антигенами O25b или O25a) составляет по крайней мере 2 логарифмические единицы, предпочтительно по крайней мере 3 логарифмические единицы.

В частности, перекрестно реагирующее антитело

А)

выбрано из группы, включающей элементы i-vii, в которой

i)

антитело, которое содержит

а) CDR1, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 72, и

б) CDR2, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 73, и

в) CDR3, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 74;

ii)

антитело, которое содержит

а) CDR1, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 77, и

б) CDR2, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 78, и

в) CDR3, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 79;

iii)

антитело, которое содержит

а) CDR1, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 81, и

б) CDR2, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 82, и

в) CDR3, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 83;

iv)

антитело, которое содержит

а) CDR1, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 84, и

б) CDR2, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 85, и

в) CDR3, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 86;

v)

антитело, которое содержит

а) CDR1, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 77, и

б) CDR2, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 89, и

в) CDR3, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 90;

vi)

антитело, которое содержит

а) CDR1, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 92, и

б) CDR2, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 93, и

в) CDR3, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 94;

vii)

антитело, которое содержит

а) CDR1, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 95, и

б) CDR2, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 96, и

в) CDR3, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 97;

или

В) антитело, которое является функционально активным вариантом родительского антитела, являющегося любым из членов группы А, которая включает по крайней мере один функционально активный вариант любой из CDR1, CDR2 или CDR3 родительского антитела.

В частности, антитело содержит

а) аминокислотную последовательность VH, выбранную из любой из последовательностей VH, как изображено на фигуре 2, предпочтительно аминокислотную последовательность тяжелой цепи (ТЦ) антитела, которая является любой из SEQ ID 232 - SEQ ID 247 или любой из SEQ ID 312 - SEQ ID 315;

б) аминокислотную последовательность тяжелой цепи (ТЦ) антитела, которая является любой из SEQ ID 232 - SEQ ID 247 или любой из SEQ ID 312 - SEQ ID 315; или

в) аминокислотную последовательность тяжелой цепи (ТЦ), антитела, которая является любой из SEQ ID 232 - SEQ ID 247 или любой из SEQ ID 312 - SEQ ID 315 и которая далее содержит делецию С-концевой аминокислоты и/или точковую мутацию Q1E, если первой аминокислотой последовательности VH является Q.

Например, такой функционально активный вариант родительского антитела является перекрестно специфическим антителом. Типовые родительские антитела приведены на фигуре 1, это антитела группы 2, напр., гуманизированный вариант родительского тела 4D5, как показано на фиг. 2. При этом последовательности VH или ТЦ таких вариантов могут быть замещены последовательностями VH и ТЦ другого варианта соответственно, в частности, когда другой вариант представляет собой любой другой вариант того же родительского антитела.

В соответствии с конкретным аспектом перекрестно специфическое антитело изобретения дополнительно также включает вариабельную область легкой цепи антитела (VL), которая включает любую из последовательностей CDR4-CDR6, перечисленных в таблице 1, которые обозначены в соответствии с номенклатурой Кэбота, или перечисленных в таблице 2, которые обозначены в соответствии с номенклатурой IMGT, или функционально активный вариант любой из этих CDR, в частности, включая последовательности CDR любого перекрестно реагирующего антитела.

В частности, перекрестно реагирующее антитело

А)

выбрано из группы, включающей элементы i-vi, в которой

i)

антитело, которое содержит

а) CDR4, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 75, и

б) CDR5, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 32, и

в) CDR6, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 76;

ii)

антитело, которое содержит

а) CDR4, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 75, и

б) CDR5, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 32, и

в) CDR6, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 80;

iii)

антитело, которое содержит

а) CDR4, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 69, и

б) CDR5, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 70, и

в) CDR6, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 71;

iv)

антитело, которое содержит

а) CDR4, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 42, и

б) CDR5, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 87, и

в) CDR6, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 88;

v)

антитело, которое содержит

а) CDR4, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 37, и

б) CDR5, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 27, и

в) CDR6, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 91;

vi)

антитело, которое содержит

а) CDR4, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 42, и

б) CDR5, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 32, и

в) CDR6, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 88;

или

В) антитело, которое является функционально активным вариантом родительского антитела, являющегося любым из членов группы А, которая включает по крайней мере один функционально активный вариант любой из CDR4, CDR5 или CDR6 родительского антитела.

В частности, функционально активный вариант является функционально активным вариантом CDR, который содержит по крайней мере одну точковую мутацию в родительской последовательности CDR и содержит или состоит из аминокислотной последовательности, которая обладает по крайней мере 60% идентичностью последовательности с родительской последовательностью CDR, предпочтительно по крайней мере 70%, по крайней мере 80%, по крайней мере 90% идентичностью последовательности.

В соответствии с конкретным аспектом перекрестно реагирующее антитело изобретения содержит аминокислотную последовательность VL, выбранную из любой из последовательностей VL, как изображено на фигуре 2, предпочтительно аминокислотную последовательность легкой цепи (ЛЦ) антитела, которая является любой из SEQ ID 296 - SEQ ID 311 или любой из SEQ ID 316 - SEQ ID 319, или содержит аминокислотную последовательность легкой цепи (ЛЦ) антитела, которая является любой из SEQ ID 296 - SEQ ID 311 или любой из SEQ ID 316 - SEQ ID 319.

В соответствии с конкретным вариантом осуществления антитело изобретения, в частности, включает

а) последовательности CDR1-CDR6 любого из антител, перечисленных в таблице 1, или

б) последовательности VH и VL любого из антител, приведенных на фигуре 2, или

в) последовательности ТЦ и ЛЦ любого из антител, приведенных на фигуре 2, или

г) которое является функционально активным вариантом родительского антитела, характеризующегося последовательностями а-в,

предпочтительно при этом

i. функционально активный вариант содержит по крайней мере один из функционально активных вариантов любой из CDR1-CDR6 родительского антитела, и/или

ii. функционально активный вариант содержит по крайней мере одну точковую мутацию в каркасной области любой из последовательностей VH и VL и/или последовательностей ТЦ и ЛЦ родительского антитела, необязательно содержащих точковую мутацию Q1E, если первая аминокислота каркасной области VH (VH FR1) является Q;

и далее при этом

iii. функционально активный вариант обладает специфичностью к связыванию того же эпитопа, что и родительское антитело, и/или

iv. функционально активный вариант является человеческим, гуманизированным, гибридным или мышиным вариантом и/или вариантом с созревшей аффинностью родительского антитела.

В соответствии с конкретным аспектом антитело изобретения включает комбинации CDR, перечисленные в таблице 1, при условии, что антитело сохраняет функциональную активность.

В частности, антитело изобретения включает CDR1-6 любого из антител, как перечислено в таблице 1. Однако в соответствии с альтернативным вариантом осуществления антитело может включать различные комбинации CDR, напр., когда антитело, как перечислено в таблице 1, включает по крайней мере одну последовательность CDR из 1, 2, 3, 4, 5 или 6 последовательностей CDR одного антитела и по крайней мере еще одну последовательность CDR другого антитела или любого из антител, как перечислено в таблице 1. В соответствии с конкретным примером антитело включает 1, 2, 3, 4, 5 или 6 последовательностей CDR, при этом последовательности CDR являются комбинациями CDR более чем 1 антитела, напр., 2, 3, 4, 5 или 6 различных антител. Например, последовательности CDR могут быть комбинированы, предпочтительно включая 1, 2 или все 3 CDR1-3 любого из антител, как перечислено в таблице 1, и 1, 2 или все 3 CDR4-6 того же или любого другого антитела, перечисленных в таблице 1.

В настоящем описании, в частности, понимается, что CDR под номерами CDR1, 2 и 3 представляют область связывания домена VH, a CDR4, 5 и 6 представляют область связывания домена VL.

В соответствии с конкретным аспектом антитело изобретения включает любые комбинации аминокислотной последовательности ТЦ и ЛЦ, как изображено на фигуре 2, или участок связывания, образованный такой комбинацией аминокислотных последовательностей ТЦ и ЛЦ. В альтернативном варианте могут использоваться цепи иммуноглобулина двух различных антител при условии, что антитело сохраняет функциональную активность. Например, последовательность ТЦ одного антитела может быть комбинирована с последовательностью ЛЦ другого антитела. В соответствии с дальнейшими конкретными вариантами осуществления любая из каркасных областей, как приведено на фигуре 2, может представлять собой каркас любой из последовательностей CDR и/или комбинаций VH/VL, как описано в настоящем документе.

При этом подразумевается, что антитело изобретения дополнительно включает такие аминокислотные последовательности с фигуры 2 с соответствующей сигнальной последовательностью или без нее или с альтернативной сигнальной или лидерной последовательностями.

В соответствии с конкретным аспектом каждая из последовательностей с фигуры 2 может иметь удлиненный конец или делецию в константной области, напр., делецию одной или нескольких С-концевых аминокислот.

В частности, каждая из последовательностей ТЦ с фигуры 2, которая включает С-концевой лизиновый остаток, предпочтительно содержит делецию такого С-концевого лизинового остатка.

На фигуре 2 показаны различные последовательности ТЦ и различные последовательности ЛЦ, и она поддерживает любую комбинацию ТЦ/ЛЦ, соответственно ряд различных комбинаций ТЦ/ЛЦ для каждого из родительских антител. В связи с этим конкретные варианты каждого родительского антитела могут включать любую комбинацию ТЦ/ЛЦ каждого из вариантов антител, показанных на фигуре 2, полученных из одного родительского антитела.

В частности, на фигуре 2 показаны четыре различные последовательности ТЦ и четыре различные последовательности ЛЦ, которые являются вариантами каждого из родительских антител 8А1, 3Е9 (1G8) или 2А7 из группы 1, которые специфически распознают только антиген O25b, и родительского антитела 4D5 из группы 2, которое специфически связывается с антигенами O25b и O25a. Для каждого из родительских антител показаны шестнадцать различных комбинаций ТЦ/ЛЦ.

Кроме того, на фигуре 2 показаны еще две различные последовательности ТЦ и еще две различные последовательности ЛЦ, которые являются вариантами родительского антитела 3E9 (1G8) из группы 1, которое специфически распознает только антиген O25b.

Кроме того, на фигуре 2 показаны еще две различные последовательности ТЦ и еще две различные последовательности ЛЦ, которые являются вариантами родительского антитела 4D5 из группы 2, которое перекрестно специфически связывается с антигенами O25b и O25a.

Последовательности CDR идентичны соответствующим последовательностям CDR, приведенным на фигуре 1: Последовательности CDR родительского антитела 8А1, 1G8, 2А7 или 4D5 идентичны соответствующим последовательностям антител 8A1-1G8, 3E9-G11, 2A7-F1 и 4D5-D4 с фигуры 1 соответственно.

В частности, SEQ ID 184 - SEQ ID 247 и SEQ ID 312 - SEQ ID 315 демонстрируют последовательности ТЦ, которые включают аминокислотные последовательности VH, указанные на фигуре 2, при это N-конец каждой последовательности ТЦ может быть удлинен сигнальной последовательностью. При этом подразумевается, что специфическое антитело включает такую аминокислотную последовательность VH или ТЦ с соответствующей сигнальной последовательностью или без нее или с альтернативной сигнальной или лидерной последовательностями.

В частности, SEQ ID 248 - SEQ ID 311 и SEQ ID 316 - SEQ ID 319 демонстрируют последовательности ЛЦ, которые включают аминокислотные последовательности VL, указанные на фигуре 2, при это N-конец каждой последовательности ЛЦ может быть удлинен сигнальной последовательностью. При этом подразумевается, что специфическое антитело включает такую аминокислотную последовательность VL или ЛЦ с соответствующей сигнальной последовательностью или без нее или с альтернативной сигнальной или лидерной последовательностями.

Изобретение далее предлагает способ получения функционально активных вариантов родительского антитела, которое является любым из антител изобретения, напр., антителом, приведенным в таблице 1, которое включает любые комбинации аминокислотных последовательностей ТЦ и ЛЦ, как показано на фигуре 2, или участок связывания, образованный такой комбинацией аминокислотных последовательностей ТЦ и ЛЦ, при этом способ включает конструирование по крайней мере одной точковой мутации в любой из каркасных областей (FR) или константных доменов, или определяющих комплементарность областей (CDR1-CDR6) для получения варианта антитела и определение функциональной активности варианта антитела, в частности, по аффинности к связыванию с O25b с Kd меньше 10^-6М, предпочтительно меньше 10^-7М или меньше 10^-8М, или меньше 10^-9М, даже меньше 10^-10М или меньше 10^-11М, напр., с аффинностью в пикомолярном диапазоне. После определения функциональной активности функционально активные варианты выбираются для дальнейшего использования и дополнительно для производства с применением рекомбинантного способа.

Предпочтительные варианты CDR включают мутации мотивов, которые предрасположены к гликозилированию или дезамидированию. Например, в мотиве N-связанного гликозилирования NXS/T в любой из последовательностей CDR, где X - любая аминокислота, N в данном мотиве может быть мутирован до любой другой аминокислоты, предпочтительно Q, S или D для устранения потенциала гликозилирования. Дальнейшие примеры относятся к аминокислотным мотивам NG или NN в любой из последовательностей CDR, которые могут быть предрасположены к дезамидированию аспарагинов в аспарагиновую кислоту. Аспарагин в других мотивах менее предрасположен к дезамидированию.

Например, аминокислотный мотив SNG, выявленный в VLCDR1 (CDR4) в 4D5, может быть предрасположен к дезамидированию аспарагина в аспарагиновую кислоту. В связи с этим "очищающая" мутация N в мотиве SNG в VL CDR1 мкАТ 4D5 должна обеспечивать мутацию до любой другой аминокислоты, предпочтительно Q, S или D для устранения потенциального участка дезамидирования.

В соответствии с конкретным аспектом вариант антитела связывается с тем же эпитопом, что и родительское антитело.

В соответствии с дальнейшим конкретным аспектом вариант антитела связывается с тем же участком связывания, что и родительское антитело.

Функционально активные варианты антител могут иметь отличия в любой из последовательностей VH или VL или иметь общие последовательности VH и VL и включать модификации в соответствующих FR. Вариант антитела, полученный из родительского антитела мутагенезом, может быть произведен с применением способов, хорошо известных в данной области.

Типовые родительские антитела описаны в разделе примеров ниже и на фигуре 1 (в таблице 1) и фигуре 2. В частности, антитело является функционально активным производным родительского антитела, как указано в таблице 1. Могут быть сконструированы варианты с одной или несколькими модифицированными последовательностями CDR и/или одной или несколькими последовательностями FR, такими как последовательности FR1, FR2, FR3 или FR4, или модифицированной последовательностью константного домена.

Например, в соответствии с изобретением предлагаются функционально активные варианты антител, которые указаны на фигуре 2, являются производными родительских антител, перечисленных в таблице 1, и были получены методами мутагенеза, в частности, путем созревания аффинности и/или гуманизации. Несмотря на то, что варианты антител с фигуры 2 сохраняют общие последовательности VH и VL соответствующего родительского антитела, также допустимо получение вариантов цепей VH и VL, напр., с модификациями в соответствующих последовательностях FR или CDR, которые являются функционально активными.

Типовые варианты родительского антитела включают по крайней мере одну точковую мутацию в любой из последовательностей CDR1-CDR6 и по крайней мере одну точковую мутацию в области FR, предпочтительно при этом антитело обладает специфичностью к связыванию того же эпитопа, что и родительское антитело.

В определенных аспектах изобретение предлагает такие функционально активные варианты антител, предпочтительно моноклональные антитела, наиболее предпочтительно человеческие антитела, включающие тяжелую цепь и легкую цепь, при этом любая из легкой цепи или вариабельной области VL или соответствующих CDR включает аминокислотную последовательность, полученную из родительского антитела, которое является антителом, обозначенным 8D5-1G10 или 4D5-D4, или любым другим антителом, указанным в таблице 1 или на фигуре 2, посредством модификации по крайней мере одной из последовательностей FR или CDR.

Антитело, обозначенное 4D5-D4 и приведенное в таблице 1, включает те же последовательности CDR, что и антитело 8D10-C8 (которые характеризуются зарегистрированным материалом, как указано ниже), и даже те же последовательности VH/VL, однако имеет отличия в константных доменах или области, т.е. содержит по крайней мере одну модификацию в любом из константных доменов.

В соответствии с конкретным вариантом осуществления антитело изобретения является любым другим антителом, за исключением тел, обозначенных 8D5-1G10 или 8D10-C8. По такими антителами, в частности, подразумеваются содержащие всего один или два вариабельных домена VH/VL и определенные в соответствии с зарегистрированным материалом VH/VL, как описано далее в настоящем документе. Однако конкретные варианты антител, обозначенные 8D5-1G10 или 8D10-C8, в частности, включены в предмет настоящей формулы изобретения, включая, но не ограничиваясь, варианты CDR, варианты FR, мышиные, гибридные, гуманизированные или человеческие варианты или любую комбинацию доменов антител, помимо комбинации, состоящей из одной или двух VH/VL, включая полноразмерные антитела различных типов, Fab, scFv и т.д.

Конкретные варианты осуществления относятся к антителам 4D5-D4 (4D5) или 8A1-1G8 (8А1), которые характеризуются последовательностями CDR и вариабельными доменами соответствующего антитела, приведенного на фигуре 1 и далее указанного на фигуре 2, при этом антитела включают вариабельные и константные домены, напр., полноразмерные антитела, и являются мышиными, гибридными, гуманизированными или человеческими антителами.

Однако антитело, обозначенное как 8D5-1G10 или 8D10-C8, можно использовать в качестве родительского антитела для конструирования его функционально активного варианта. В частности, антитело, обозначенное 8D5-1G10 или 8D10-C8, или любой его функционально активный вариант могут быть получены с включением последовательностей, как приведено в настоящем документе, рекомбинантными способами, дополнительно с дальнейшими последовательностями иммуноглобулинов, напр., для получения антитела IgG. В частности, функционально активный вариант такого антитела, обозначенного 8D5-1G10 или 8D10-C8, может быть получен путем модификации по крайней мере одной последовательности FR или CDR.

В соответствии с конкретным аспектом изобретение предлагает выделенное моноклональное антитело, которое специфически связывается с антигеном O25b мультирезистентных (MP) штаммов Е.coli, содержит антигенсвязывающий участок антитела 8D5-1G10 или получено из антитела 8D5-1G10 или функционально активного варианта антитела 8D5-1G10, предпочтительно при этом антитело 8D5-1G10 характеризуется

а) вариабельной областью легкой цепи антитела, продуцированной клеткой-хозяином, зарегистрированной под номером DSM 26763, и/или

б) вариабельной областью тяжелой цепи антитела, продуцированной клеткой-хозяином, зарегистрированной под номером DSM 26762;

в) или применением функционально активного варианта (а) и/или (б).

В частности, антитело, обозначенное как 8D5-1G10, состоит из легкой цепи антитела, включающей вариабельную область, закодированную кодирующей последовательностью плазмиды, содержащейся в клетке-хозяине Е.coli, зарегистрированной под номером DSM 26763, и тяжелой цепи антитела, содержащей вариабельную область, закодированную кодирующей последовательностью плазмиды, содержащейся в клетке-хозяине E.coli, зарегистрированной под номером DSM 26762.

В соответствии с конкретным аспектом изобретение предлагает выделенное моноклональное антитело, которое является перекрестно специфическим в отношении связывания с эпитопом, общим для антигенов O25a и O25b, и которое содержит антигенсвязывающий участок антитела 8D10-C8 или получено из антитела 8D10-C8 или функционально активного варианта антитела 8D10-C8, предпочтительно при этом антитело 8D10-C8 характеризуется

а) вариабельной областью легкой цепи антитела, продуцированной клеткой-хозяином, зарегистрированной под номером DSM 28171, и/или

б) вариабельной областью тяжелой цепи антитела, продуцированной клеткой-хозяином, зарегистрированной под номером DSM 28172;

в) или применением функционально активного варианта (а) и/или (б).

В частности, антитело, обозначенное 8D10-C8, состоит из легкой цепи антитела, включающей вариабельную область, закодированную кодирующей последовательностью плазмиды, содержащейся в клетке-хозяине Е.coli, зарегистрированной под номером DSM 28171, и тяжелой цепи антитела, содержащей вариабельную область, закодированную кодирующей последовательностью плазмиды, содержащейся в клетке-хозяине Е.coli, зарегистрированной под номером DSM 28172.

В частности, антитело включает функционально активный вариант CDR любой из последовательностей CDR, перечисленных в таблице 1, при этом функционально активный вариант CDR включает по крайней мере одно из следующего:

а) 1, 2 или 3 точковые мутации в родительской последовательности CDR и/или

б) 1 или 2 точковые мутации в любом из четырех С-концевых или четырех N-концевых, или четырех центральных положений аминокислот родительской последовательности CDR, и/или

в) по крайней мере 60% идентичность последовательности с родительской последовательностью CDR.

В частности, функционально активный вариант антитела включает по крайней мере один из функционально активных вариантов CDR изобретения. В частности, функционально активный вариант антитела, содержащий один или несколько функционально активных вариантов CDR, обладает специфичностью к связыванию того же эпитопа, что и родительское антитело.

В частности, функционально активный вариант является вариантом CDR, напр., который содержит CDR, более конкретно последовательность петли CDR с аминокислотной последовательностью, которая обладает по крайней мере 60% идентичностью последовательности, предпочтительно по крайней мере 70%, 80% или 90% идентичностью последовательности.

В соответствии с конкретным аспектом по крайней мере одна точковая мутация представляет собой любую аминокислотную замену, делецию и/или вставку одной или нескольких аминокислот.

В частности, функционально активный вариант отличается от родительского антитела по крайней мере одной точковой мутацией в аминокислотной последовательности, предпочтительно в CDR, при этом количество точковых мутаций в каждой из аминокислотных последовательностей CDR составляет 0, 1, 2 или 3.

В частности, антитело, полученное из таких антител, включающее соответствующие последовательности CDR, или мутантов CDR, включая функционально активные варианты CDR, напр., с 1, 2 или 3 точковыми мутациями в одной петле CDR, напр., на участке CDR длиной 5-18 аминокислот, напр., в области CDR длиной 5-15 аминокислот или 5-10 аминокислот. В альтернативном варианте возможно наличие 1-2 точковых мутаций в одной петле CDR, напр., на участке CDR длиной меньше 5 аминокислот, для получения антитела, включающего функционально активный вариант CDR. Специфические последовательности CDR могут быть короткими, напр., последовательностями CDR2 или CDR5. В соответствии с конкретным вариантом осуществления функционально активный вариант CDR включает 1 или 2 точковые мутации в любой последовательности CDR, состоящей меньше чем из 4 или 5 аминокислот.

В соответствии с конкретным аспектом антитело изобретения включает последовательности CDR и каркасные последовательности, при этом по крайней мере одна из последовательностей CDR и каркасных последовательностей включает человеческие, гуманизированные, гибридные, мышиные последовательности или последовательности с созревшей аффинностью, предпочтительно при этом, чтобы каркасные последовательности были взяты из антитела IgG, напр., из подтипа IgG1, IgG2, IgG3 или IgG4 или из антитела IgA1, IgA2, IgD, IgE или IgM.

Специфические антитела предлагаются как антитела с мутировавшими каркасными областями, напр., для улучшения технологичности или переносимости родительского антитела, напр., для предложения улучшенного (мутировавшего) антитела, которое имеет низкий иммуногенный потенциал, такого как гуманизированные антитела, с мутациями в любой из последовательностей CDR и/или каркасных последовательностей по сравнению с родительским антителом.

Далее специфические антитела предлагаются как антитела с мутировавшей CDR, напр., для улучшения аффинности антитела и/или прицельного воздействия на тот же эпитоп или эпитопы, прицельное воздействие на которые оказывает родительское антитело (сдвиг эпитопа).

Соответственно любое из антител, как указано в таблице 1 или на фигуре 2, может использоваться в качестве родительского антитела для конструирования улучшенных версий.

В соответствии с конкретным аспектом антитело изобретения обладает аффинностью к связыванию с антигеном O25b с Kd меньше 10^-6М, предпочтительно меньше 10^-7М или меньше 10^-8М. Варианты с созревшей аффинностью, как правило, обладают аффинностью к связыванию с антигеном O25b с Kd меньше 10^-8М.

В частности, антитело изобретения предпочтительно связывается с антигеном O25b по отношению к антигену O25a E.coli или обладает по крайней мере равной аффинностью к обоим антигенам.

В соответствии с конкретным вариантом осуществления антитело обладает по крайней мере двукратно большей аффинностью связывания антигена O25b по сравнению с аффинностью к антигену O25a, в частности, по крайней мере с двукратным различием или по крайней мере трехкратным, по крайней мере четырехкратным, по крайней мере 5-кратным или даже по крайней мере 10-кратным различием в связывании антигена O25b или O25a, напр., различием в аффинности и/или авидности.

В соответствии с конкретным аспектом специфическое связывание с O25b характеризуется более высокой аффинностью связывания антигена O25b по сравнению с аффинностью связывания антигена O25b поликлональной сыворотки против штаммов O25 или O25a Е.coli, как определено с применением иммуноанализа, предпочтительно иммуноблоттинга, ИФА или других иммунологических методов. Более высокая аффинность связывания, в частности, определяется по крайней мере двукратным различием или по крайней мере трехкратным, по крайней мере четырехкратным, по крайней мере 5-кратным или даже по крайней мере 10-кратным различием.

В частности, антиген O25b, являющийся мишенью антитела изобретения, является преобладающим в одном или нескольких и более конкретно присутствует в большинстве штаммов ST131.

В частности, эпитоп, распознаваемый антителом, присутствует на поверхности инкапсулированных и неинкапсулированных штаммов ST131-O25b:Н4, напр., мутантных штаммов.

В соответствии с дальнейшим конкретным аспектом антитело проявляет бактерицидную активность in vitro в образце сыворотки, содержащем живые MP штаммы E.coli дикого типа.

В соответствии с дальнейшим аспектом антитело стимулирует поглощение живых MP штаммов E.coli дикого типа фагоцитами in vitro.

В соответствии с дальнейшим аспектом антитело нейтрализует эндотоксическое действие конкретных молекул ЛПС in vitro.

В частности, антитело представляет собой полноразмерное моноклональное антитело, фрагмент данного антитела, включающий по крайней мере один домен антитела, содержащий антигенсвязывающий участок, или гибридный белок, включающий по крайней мере один домен антитела, содержащий антигенсвязывающий участок. Предпочтительно антитело выбрано из группы, включающей мышиные, гибридные, гуманизированные или человеческие антитела, антитела тяжелой цепи, Fab, Fd, scFv и однодоменные антитела, такие как VH, VHH или VL, предпочтительно человеческое антитело IgG1.

В соответствии с дальнейшим конкретным аспектом антитело имеет участок связывания полноразмерного моноклонального антитела или фрагмента данного антитела, включающего по крайней мере один домен антитела, содержащий участок связывания, при этом антитело предпочтительно является антителом, выбранным из группы, включающей, мышиные, ламовые, кроличьи, козьи, коровьи, гибридные, гуманизированные или человеческие антитела, антитела тяжелой цепи Fab, Fd, scFv и однодоменные антитела, такие как VH, VHH или VL, предпочтительно человеческое антитело IgG или мышиное антитело IgG.

В соответствии с изобретением антитело изобретения, в частности, предлагается для медицинского, диагностического или аналитического применения.

В соответствии с конкретным аспектом антитело изобретения предлагается для лечения больного, подверженного риску или страдающего от инфекции Е.coli, в частности, от инфекции MP штаммом Е.coli, включающего введение больному эффективного количество антитела для ограничения инфекции в организме больного или улучшения состояния заболевания, вызванного указанной инфекцией, предпочтительно для лечения или профилактики пиелонефрита, вторичной бактериемии, сепсиса, перитонита, менингита и ИВЛ-ассоциированной пневмонии.

Соответственно изобретение, в частности, предлагает способ лечения, при котором больной, подверженный риску или страдающий от инфекции Е.coli, получает лечение путем введения больному эффективного количества антитела.

В частности, предлагается антитело для бактерицидного уничтожения MP Е.coli, предпочтительно штамма ST131-O25b:H4, вне зависимости от капсульного полисахарида, экспрессируемого штаммом.

В соответствии с конкретным аспектом иммунотерапия с применением антитела изобретения способна обеспечивать эффективную защиту от пробы с заражением живыми бактериями, напр., как определено в различных животных моделях.

Антитело может специфически нейтрализовывать летальную эндотоксемию. Такое функциональное действие может быть определено в соответствующей модели in vivo (провокационная проба очищенным ЛПС).

Антитело является специфически эффективным против MP Е.coli за счет комплемент-опосредованного уничтожения, напр., как определено с применением анализа бактерицидной активности сыворотки (БАС) in vitro, напр., при уничтожении по крайней мере на 20% бактерий больше, чем для контрольных образцов (без антител или с добавлением контроля с нерелевантным мкАТ).

Антитело является специфически эффективным против MP Е.coli за счет антитело-опосредованного фагоцитоза, напр., как определено с применением опсонофагоцитирующего киллинг-анализа (ОФКА) in vitro, напр., при поглощении по крайней мере 20% введенных бактерий или результатах подсчета КОЕ по крайней мере на 20% ниже, чем для контрольных образцов (без антител или с добавлением контроля с нерелевантным мкАТ).

Антитело является специфически эффективным против MP Е.coli за счет функций нейтрализации эндотоксинов, напр., как определено с применением LAL-теста in vitro или анализа по гену-репортеру толл-подобного рецептора 4 (TLR4), напр., при снижении по крайней мере на 20% активности эндотоксинов по сравнению с контрольными образцами (без антител или с добавлением контроля с нерелевантным мкАТ).

Изобретение далее предлагает фармацевтический препарат, включающий антитело изобретения, предпочтительно включающий лекарственную форму для парентерального применения или нанесения на слизистую оболочку, необязательно содержащий фармацевтически приемлемый носитель или наполнитель.

Такой лекарственный препарат может содержать антитело в качестве единственного действующего вещества или в комбинации с другими действующими веществами, или в смеси действующих веществ, такой как комбинация или смесь по крайней мере двух или трех различных антител.

В соответствии с конкретным аспектом предлагается антитело изобретения для диагностического применения в целях определения инфекции Е.coli или бактериемии у больного, вызванной штаммом E.coli, в частности, инфекции, вызванной MP штаммом, экспрессирующим ЛПС O25b, такой как инфекции верхних и нижних мочевых путей, включая цистит или уретрит, восходящий или гематогенный пиелонефрит, особенно у пациентов с диабетом, а также с бактериемией, сепсисом, перитонитом или желудочно-кишечной колонизацией.

В частности, предлагается антитело для применения в соответствии с изобретением, в котором системная инфекция E.coli у больного определяется ex vivo посредством контакта образца жидкости организма указанного больного с антителом, при этом специфическая иммунная реакция антитела определяет инфекцию.

В частности, образец жидкости организма испытывается на специфическую иммунную реакцию, при этом образец выбирается из группы, включающей мочу, кровь, изоляты крови или культуру крови, аспират, мокроту, промывную жидкость интубированных больных и стул.

В частности, диагностическое применение в соответствии с изобретением относится к определению серотипа Е.coli in vitro в чистой культуре Е.coli, извлеченной из клинического образца.

В соответствии с дальнейшим аспектом изобретение предлагает диагностический препарат антитела изобретения, дополнительно содержащий антитело с меткой и/или дополнительным диагностическим реактивом с меткой, таким как реактив, специфически распознающим антитело или иммунный комплекс антитела с соответствующим антителом-мишенью, и/или твердую фазу для иммобилизации по крайней мере одного антитела и диагностического реактива.

Изобретение далее предлагает диагностический препарат, включающий антитело изобретения, содержащий антитело и дополнительный диагностический реактив в композиции или наборе частей, содержащей компоненты:

а) антитело и

б) дополнительный диагностический реактив;

в) и необязательно твердую фазу для иммобилизации по крайней мере одного антитела и диагностического реактива.

Изобретение далее предлагает способ диагностирования инфекции Е.coli или бактериемии у больного, вызванной штаммом E.coli, включающий

а) наличие антитело изобретения и

б) определение, вступает ли антитело в специфическую иммунную реакцию с антигеном O25b, напр., иммунную реакцию только с антигеном O25b или перекрестную иммунную реакцию с O25b и O25a, в испытываемом биологическом образце больного, напр., крови или сыворотке, предпочтительно с применением агглютинационной пробы, таким образом диагностируя вызванную MP E.coli инфекцию или бактериемию.

Подходящие биологические образцы больного могут быть, в частности, выбраны из группы, включающей кровь, сыворотку, изоляты крови или культуру крови, мочу, аспират, мокроту, промывную жидкость интубированных больных и стул.

Предпочтительные диагностические анализы изобретения включают антитело изобретения, иммобилизованное на твердой фазе, напр., латексных гранулах, частицах золота и т.д., напр., для пробы на агглютинацию антителами бактерий, экспрессирующих антиген O25b, или свободного (или выделенного) антигена O25b, полученного из испытываемого образца.

Некоторые диагностические анализы могут включать два различных антитела с различной специфичностью и/или аффинностью связывания O25b и/или O25a, для установления возможных различий между антигенами O25b и O25a.

В соответствии с конкретным аспектом изобретение предлагает сопутствующую диагностику для определения инфекции больного E.coli, в частности, MP Е.coli, с применением диагностики изобретения или способа диагностики изобретения для использования в качестве основы лечения терапевтическим средством такой инфекции, напр., использования иммунотерапии, такого как лечение антителом изобретения.

В соответствии с конкретным аспектом изобретение предлагает чувствительную диагностику у постели больного для диагностирования инфекции больного Е.coli, в частности, MP Е.coli, путем определения свободного ЛПС, напр., из клинического образца с ограниченным количеством живых бактерий. Чувствительность такого анализа, в частности, меньше 100 нг, предпочтительно меньше 10 нг ЛПС.

Изобретение далее предлагает выделенную нуклеиновую кислоту, кодирующую антитело изобретения.

Изобретение далее предлагает экспрессионную кассету или плазмиду, включающую кодирующую последовательность для экспрессии

а) VH и/или VL антитела изобретения или

б) ТЦ и/или ЛЦ антитела изобретения.

Изобретение далее предлагает клетку-хозяина, содержащую экспрессионную кассету или плазмиду изобретения.

В частности, исключены плазмида и клетка-хозяин, материал которых зарегистрирован под номером DSM 26763 или DSM 26762. Такой зарегистрированный материал представляет собой клетки-хозяева Е.coli, трансформированные плазмидой, при этом клетка-хозяин, зарегистрированная под номером DSM 26763, трансформирована плазмидой, содержащей нуклеотидную последовательность, кодирующую легкую цепь антитела, обозначенную 8D5-1G10-LC; а клетка-хозяин, зарегистрированная под номером DSM 26762, трансформирована плазмидой, содержащей нуклеотидную последовательность, кодирующую тяжелую цепь антитела, обозначенную 8D5-1G10-HC.

В частности, далее исключены плазмида и клетка-хозяин, материал которых зарегистрирован под номером DSM 28171 или DSM 28172. Такой зарегистрированный материал представляет собой клетки-хозяева E.coli, трансформированные плазмидой, при этом клетка-хозяин, зарегистрированная под номером DSM 28171, трансформирована плазмидой, содержащей нуклеотидную последовательность, кодирующую легкую цепь антитела, обозначенную 8D10-C8-LC; а клетка-хозяин, зарегистрированная под номером DSM 28172, трансформирована плазмидой, содержащей нуклеотидную последовательность, кодирующую тяжелую цепь антитела, обозначенную 8D10-C8-HC.

Изобретение далее предлагает способ получения антитела изобретения, в котором клетка-хозяин изобретения культивируется или поддерживается в условиях производства указанного антитела.

В соответствии с дальнейшим аспектом изобретение предлагает способ получения антитела изобретения, включающий

а) иммунизацию животного антигеном O25b E.coli и изоляцию В-клеток, продуцирующих антитела;

б) получение бессмертных линий клеток из выделенных В-клеток;

в) скрининг линий клеток для определения линии клеток, продуцирующей моноклональное антитело, которое специфически связывается с антигеном O25b и дополнительно с антигеном O25a, напр., который определяет предпочтительное связывание с O25b по сравнению с O25a, и

г) продуцирование моноклонального антитела или гуманизированной или человеческой формы антитела или ее производной с той же специфичностью связывания эпитопа, что и у моноклонального антитела.

Краткое описание чертежей

Фигура 1. Таблица 1 включает последовательности O25b-специфических антител (антитела группы 1, связывающиеся только с O25b) и антител, перекрестно специфических к O25b/O25a (антитела группы 2) с обозначением области CDR в соответствии с номенклатурой Кэбота; в таблице 2 перечислены те же антитела с обозначением области CDR в соответствии с номенклатурой IMGT. Номенклатура, используемая в таблицах 1 и 2, имеет следующее значение:

VH CDR1 - CDR1

VH CDR2 - CDR2

VH CDR3 - CDR3

VL CDR1 - CDR4

VL CDR2 - CDR5

VL CDR3 - CDR6

Фигура 2. Информация о последовательностях ТЦ и ЛЦ гуманизированных вариантов O25b-специфических антител группы 1 (фигура 1), т.е. родительских антител 8А1, 3E9 и 2А7, при этом варианты пронумерованы от 1 до 16 для родительского антитела 8А1, от 1 до 18 - для родительского антитела 3E9 и от 1 до 16 - для родительского антитела 2А7; информация о последовательностях ТЦ и ЛЦ гуманизированных вариантов антител, перекрестно специфических к O25b и O25a, группы 2 (фигура 1), которое представляет собой родительское антитело 4D5, при этом варианты пронумерованы от 1 до 18.

Фигура 3.

Фигура 3i: реактивность различных O25b-специфических (проявляющих и не проявляющих перекрестную реактивность к антигену O25a) мкАТ, а также специфических к кору ЛПС (т.е. перекрестно реагирующих со всеми молекулами ЛПС Е.coli) мкАТ WN1 в качестве контроля для очищенных молекул ЛПС O25a, O25b и O55 в анализе методом иммуноблоттинга.

Фигура 3ii: иммуноблоты с 025-специфическими мкАТ. Отделенный очищенный ЛПС типов O25a, O25b и O55 приводили в реакцию с гибридными или гуманизированными O25b-специфическими мкАТ и специфическими к кору ЛПС (т.е. перекрестно реагирующими) мышиными антителами WN-1 в качестве контроля.

Фигура 4.

Фигура 4i: измерения аффинности различных мкАТ O25b с применением анализа ForteBio с биотинилированным антигеном ПС O25b, связанным со стрептавидиновыми наконечниками.

Фигура 4ii: измерения по методу биослойной интерферометрии (БСИ). Связывание мкАТ O25b с полисахаридом O25b, выраженное в качестве аффинности, констант ассоциации и диссоциации, измеренных с применением системы ForteBio.

Фигура 5:

Фигура 5i: Окрашивание поверхности различных штаммов E.coli, экспрессирующих антигены O25b, O25a или O2, O25b-специфическими (проявляющими и не проявляющими перекрестную реактивность к антигену O25a) мкАТ.

Фигура 5ii: штамм ST131:O25b 3O, выращенный в ЛБ (А) или в человеческой сыворотке (В), окрашивали O25b-специфическими мкАТ с концентрацией в диапазоне 0,025-40 мкг/мл. Дополнительно испытывали панель штаммов ST131, принадлежащих к различным пульсотипам, на окрашивание поверхности тремя O25b-специфическими мкАТ с концентрацией 40 мкг/мл (С).

Фигура 6. Защита от бактериального заражения. Профилактическую защитную эффективность O25b-реагирующих гибридных (i) или гуманизированных (ii) мкАТ, а также изотипически сходных контрольных мкАТ испытывали в мышиной модели бактериемии. 100 мкг мкАТ вводили в/б за 24 ч до заражения смертельными дозами штамма ST131 81009, который вводили внутривенно. Летальность контролировали ежедневно.

Фигура 7.

Фигура 7i: анализ бактерицидной активности сыворотки. Комплемент-зависимое уничтожение бактерий, опосредованное O25b-специфическими мкАТ, оценивали как снижение числа КОЕ через 3 ч инкубации по отношению к исходному количеству бактерий.

Фигура 7ii: анализ бактерицидной активности сыворотки. Два различных штамма ST131:O25b выращивали в ЛБ (виды А, В и D) до середины логарифмического роста. После промывания бактерии инкубировали с 2,5 мкг/мл гуманизированных (А и В) или гибридных (D) мкАТ в течение 3 ч. В качестве альтернативы штамм 81009 выращивали в человеческой сыворотке и инкубировали с 10 мкг/мл мкАТ в течение 5 ч (вид С). Количество выживших бактерий определяли посредством посева на планшеты. Бактерицидная активность выражается в процентах уничтоженных бактерий по отношению к контрольной инкубации (без антител).

Фигура 8. Защита в модели эндотоксемии. Группы из 5 мышей пассивно иммунизировали с в/б введением 100 мкг (виды А и В) или 25 мкг (вид С) мкАТ. На следующие сутки мышей сенсибилизировали путем введения 20 мг/мышь D-GalN (в/б) и одновременно заражали смертельной дозой очищенного ЛПС O25b (в/б). Выживаемость контролировали ежедневно.

Фигура 9. Анализ нейтрализации эндотоксинов in vitro. TLR-4-сигнализацию очищенного ЛПС O25b оценивали с применением метода HEK-Blue (вид А). Потенциал дозозависимой нейтрализации представительных O25b-специфических мкАТ показан в сравнении с полимиксином В (вид В). Нейтрализующая активность, выраженная как концентрация IC₅₀ нескольких гуманизированных и гибридных O25b-специфических мкАТ, определенных в данной модели, приведена на виде С.

Фигура 10: (а) - структура повторяющейся единицы антигена Е.coli O25b; (b) - структура повторяющейся единицы Е.coli O25a (Kenne L, Lindberg В, Madden JK, Lindberg АА, Gemski Р Jr. Structural studies of the Escherichia coli O-antigen 25. Carbohydr Res. 28; 122(2): 249-56, 1983).

Осуществление изобретения

Термин "антитело", используемый в настоящем документе, относится к полипептидам или пептидам, которые состоят или включают домены антител, под которыми понимаются константные и/или вариабельные домены тяжелых и/или легких цепей иммуноглобулинов с линкерной последовательностью или без нее. Под полипептидами понимаются домены антител, включающие бета-складчатую структуру, состоящую по крайней мере из двух бета-нитей доменной структуры антитела, соединенных петлевой последовательностью. Домены антител могут иметь нативную структуру или модифицированную посредством мутагенеза или дериватизации, напр., для изменения свойств связывания с антигеном или любого иного свойства, такого как стабильность или функциональные свойства, такие как связыванием с Fc-рецепторами FcRn и/или Fc-гамма-рецептором.

Антитело в контексте настоящего документа имеет специфический участок связывания для связывания с одним или несколькими антигенами или одним или несколькими эпитопами таких антигенов, в частности, включает участок связывания CDR отдельного вариабельного домена антитела, такого как VH, VL или VHH, или участок связывания пар вариабельных доменов антитела, таких как пара VL/VH, антитело, включающее пару доменов VL/VH и константные домены антител, такое как Fab, F(ab'), (Fab)₂, scFv, Fv, или полноразмерное антитело.

Термин "антитело", используемый в настоящем документе, в частности, относится к форматам антител, включающим или состоящим из отдельного вариабельного домена антитела, такого как VH, VL или VHH, или комбинаций вариабельных и/или константных доменов антител с наличием или отсутствием линкерной последовательности или шарнирной области, включая пары вариабельных доменов антител, таких как пара VL/VH, антител, включающим или состоящим из пары доменов VL/VH и константных доменов, таким как антитела тяжелой цепи, Fab, F(ab'), (Fab)₂, scFv, Fd, Fv или полноразмерное антитело, напр., типа IgG (напр., подтип IgG1, IgG2, IgG3 или IgG4), антитело IgA1, IgA2, IgD, IgE или IgM. Термин "полноразмерное антитело" может использоваться по отношению к любой молекуле антитела, включающей по крайней мере большую часть Fc-домена и других доменов, обычно присутствующих в мономере встречающихся в природе антител. Эта фраза используется в настоящем документе, чтобы подчеркнуть, что конкретная молекула антитела не является фрагментом антитела.

Термин "антитело", в частности, включает антитела в выделенной форме, которые по существу не содержат другие антитела, направленные против отличных антигенов-мишеней или включающие различную структурную организацию доменов антитела. При это выделенное антитело может быть включено в состав комбинированного препарата, содержащего комбинацию выделенного антитела, напр., по крайней мере с одним другим антителом, таким как моноклональные антитела или фрагменты антител с различной специфичностью.

Термин "антитело" применяется к антителам животного происхождения, включая человека, таким как антитела млекопитающих, включая человека, мышь, кролика, козу, ламу, корову и лошадь, или птиц, таких как курица, каковой термин, в частности, включает рекомбинантные антитела на основе последовательности животного происхождения, напр., человеческой последовательности.

Термин "антитело" далее применяется к гибридным антителам с последовательностями, ведущими происхождение от различных видов, такими как последовательности мышиного и человеческого происхождения.

Термин "гибридный" при использовании по отношению к антителу относится к антителам, в которых одна часть каждой из аминокислотных последовательностей тяжелой и легкой цепей является гомологичной соответствующим последовательностям в антителах, производных от определенных видов или принадлежащих к определенному классу, тогда как остальной сегмент цепи гомологичен соответствующим последовательностям в другом виде или классе. Как правило, вариабельная область как легкой, так и тяжелой цепи отражает вариабельные области антител, производных от одного вида млекопитающих, тогда как константные части гомологичны последовательностям антител, производных от другого вида. Например, вариабельная область может быть получена из известных на текущий момент источников с использованием легко доступных В-клеток или гибридом животных организмов-хозяев в сочетании с константными областями, полученными, например, из препаратов клеток человека.

Термин "антитело" может далее применяться к гуманизированным антителам.

Термин "гуманизированный" при использовании по отношению к антителу относится к молекуле, имеющей антигенсвязывающий участок, который по существу получен из иммуноглобулина вида животных, при этом остальная структура молекулы иммуноглобулина основана на структуре и/или последовательности человеческого иммуноглобулина. Антигенсвязывающий участок может включать полные вариабельные домены, слитые с константными доменами, или только определяющие комплементарность области (CDR), привитые в соответствующие каркасные области вариабельных доменов. Антигенсвязывающие участки могут быть дикого типа или модифицированные, напр., одной или несколькими аминокислотными заменами, предпочтительно модифицированные для наиболее близкого сходства с человеческими иммуноглобулинами. Некоторые формы гуманизированных антител сохраняют все последовательности CDR (например, гуманизированное мышиное антитело, которое содержит все шесть CDR мышиного антитела). Другие формы имеют одну или несколько CDR, которые изменены по отношению к исходному антителу.

Термин "антитело" далее применяется к человеческим антителам.

Термин "человеческий" при использовании по отношению к антителу подразумевается как включающий антитела, имеющие вариабельные и константные области, полученные из последовательностей иммуноглобулина зародышевой линии человека. Человеческое антитело изобретения может включать аминокислотные остатки, не кодируемые последовательностями иммуноглобулина зародышевой линии человека (напр., мутации, внесенные случайным или сайт-специфическим мутагенезом in vitro или соматической мутацией in vivo), например, в CDR. Человеческие антитела включают антитела, выделенные из библиотек иммуноглобулинов человека или животных, трансгенных по одному или нескольким иммуноглобулинам человека.

Термин "антитело", в частности, применяется к антителам любого класса или подкласса. В зависимости от аминокислотной последовательности константного домена тяжелых цепей антитела могут быть отнесены к основным классам антител IgA, IgD, IgE, IgG и IgM, а некоторые из них могут быть далее подразделены на подкласса (изотипы), напр., IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, IgA1 и IgA2.

Этот термин далее применяется к моноклональным или поликлональным антителам, в частности, рекомбинантному антителу, при этом данный термин включает все антитела и структуры антител, которые приготовлены, экспрессированы, созданы или изолированы рекомбинантными способами, такие как антитела, полученные от животных, напр., млекопитающих, включая человека, которые включают гены или последовательности различного происхождения, напр., мышиные, гибридные, гуманизированные антитела или антитела, полученные из гибридомы. Другие примеры относятся к антителам, выделенным из клетки-хозяина, трансформированным для экспрессии антитела, или антителам, выделенным из рекомбинантной, комбинаторной библиотеки антител ил и доменов антител, или антителам, приготовленным, экспрессированным, созданным или выделенным любыми другими средствами, которые включают сплайсинг последовательностей генов антител с другими последовательностями ДНК.

При этом подразумевается, что термин "антитело" также относится к производным антитела, в частности, функционально активным производным. Под производным антитела понимается любая комбинация одного или нескольких доменов антител или антител и/или гибридного белка, в которой любой домен антитела может быть слит с любым положением одного или нескольких белков, таких как другие антитела, напр., связывающей структурой, содержащей петли CDR, рецепторным полипептидом, а также лигандами, каркасными белками, ферментами, токсинами и т.п. Производная антитела может быть получена путем ассоциации или связывания с другими веществами с применением различных химических методов, таких как ковалентное связывание, электростатическое взаимодействие, образование дисульфидных связей и т.д. Другие вещества, связывающиеся с антителом, могут представлять собой липиды, углеводы, нуклеиновые кислоты, органические и неорганические молекулы или их сочетания (напр., ПЭГ, пролекарственные препараты или лекарственные препараты). В конкретном варианте осуществления антитело является производной, состоящей из дополнительного маркера, обеспечивающего специфическое взаимодействие с биологически приемлемым соединением. Конкретные ограничения в отношении маркера, применяемого в настоящем изобретении, отсутствуют в связи с полным отсутствием или переносимым отрицательным воздействием связывания антитела с его мишенью. Примеры подходящих маркеров включают His-маркер, Myc-маркер, FLAG-маркер, Strep-маркер, кальмодулиновый маркер, GST-маркер, МВР-маркер и S-маркер. В другом конкретном варианте осуществления антитело является производным, содержащим метку. Термин "метка", используемый в настоящем документе, относится к обнаруживаемому соединению или композиции, которая непосредственно или косвенно конъюгировано с антителом с образованием "меченого" антитела. Метка может быть обнаруживаемой сама по себе, напр., радиоизотопные метки или флуоресцентные метки, или в случае ферментной метки могут катализировать химическое изменение субстратного соединения или композиции, которое является обнаруживаемым.

Предпочтительными производными, как описано в настоящем документе, являются функционально активные в отношении связывания с антигеном, которые проявляют способность к уничтожению MP Е.coli и их эндотоксина, напр., как определено с применением анализа БАС, ОФКА или LAL-теста, защите от бактериального заражения или нейтрализации смертельной эндотоксемии.

В частности, антитело, полученное из антитела изобретения, может включать по крайней мере одну или несколько областей CDR или вариантов CDR этого антитела, являясь функционально активным в отношении дифференциального связывания с антигеном O25b, напр., специфического или избирательного связывания с антигеном O25b.

Под антителами, производными от родительского антитела или последовательности антитела, такой как родительская последовательность CDR или FR, в настоящем документе, в частности, подразумеваются мутанты или варианты, полученные, напр., in silico или с применением методов рекомбинантной инженерии либо химической дериватизации или синтеза.

При этом подразумевается, что термин "антитело" также относится к вариантам антитела, включая антитела с функционально активными вариантами CDR родительской последовательности CDR и функционально активные варианты родительского антитела.

В частности, антитело, полученное из антитела изобретения может включать по крайней мере одну или несколько областей CDR или вариантов CDR этого антитела, напр., по крайней мере 3 CDR вариабельной области тяжелой цепи и/или по крайней мере 3 CDR вариабельной области легкой цепи по крайней мере с одной точковой мутацией по крайней мере в одной из областей CDR или FR либо в константной области ТЦ или ЛЦ, являясь функционально активным, напр., специфически связываясь с антигеном O25b и дополнительно связываясь с антигеном O25a с перекрестной специфичностью.

Термин "вариант", в частности, относится к антителам, таким как мутантные антитела или фрагменты антител, напр., полученные методами мутагенеза, в частности, делецией, обменом, введением вставки в специфическую аминокислотную последовательность или область либо химической дериватизацией аминокислотной последовательности, напр., в константных доменах для изменения стабильности антитела, эффекторной функции или времени полужизни или в вариабельных доменах для улучшения антигенсвязывающих свойств, напр., с применением методик созревания аффинности, доступных в данной области. Допускается применение любого известного метода мутагенеза, включая точковые мутации в необходимых положениях, напр., полученные с применением методов рандомизации. В некоторых случаях положения выбраны случайным образом, напр., с применением любой из возможных аминокислот или выбором предпочтительных аминокислот для рандомизации последовательностей антитела. Термин "мутагенез" относится к любому признанному в данной области методу для изменения полинуклеотидной или полипептидной цепочки. Предпочтительные типы мутагенеза включают мутагенез методом ПЦР в условиях пониженной точности, насыщающей мутагенез или другой сайт-специфический мутагенез.

Термин "вариант", в частности, распространяется на функционально активные варианты.

Термин "функционально активный вариант" последовательности CDR, используемый в настоящем документе, следует понимать как "функционально активный вариант CDR", а "функционально активный вариант" антитела, используемый в настоящем документе, следует понимать как "функционально активный вариант антитела". Функционально активный вариант означает последовательность, полученную в результате модификации данной последовательности (родительское антитело или родительская последовательность) путем вставки, делеции или замены одной или нескольких аминокислот либо химической дериватизации одного или нескольких аминокислотных остатков или нуклеотидов в нуклеотидной последовательности либо на одном или обоих дистальных концах последовательности, напр., в последовательности CDR N-концевых и/или С-концевых 1, 2, 3 или 4 аминокислот, и/или центральных 1, 2, 3 или 4 аминокислот (т.е. посередине последовательности CDR), при том, что такая модификация не влияет, в частности, не нарушает активность данной последовательности. В случае участка связывания, обладающего специфичностью к выбранному антигену-мишени, функционально активный вариант антитела сохраняет заданную специфичность связывания, несмотря на возможность его изменения, напр., изменения тонкой специфичности к конкретному эпитопу, аффинности, авидности, скоростей ассоциации (Kon) или диссоциации (Koff) и т.д. Например, под антителом с созревшей аффинностью, в частности, подразумевается функционально активный вариант антитела. Следовательно под модифицированной последовательностью CDR в антителе с созревшей аффинностью подразумевается функционально активный вариант CDR.

В частности, функционально активные варианты антитела изобретения обладают способностью к связыванию с антигеном O25b и специфичностью или избирательностью к предпочтительному связыванию с антигеном O25b по отношению к другим антигенам Е.coli, напр., связываясь с O25b и не связываясь с антигеном O25a Е.coli, или не связываясь значимо с антигеном O25a или перекрестно связываясь с обоими антигенами O25b и O25a, но не связываясь с другими антигенами Е.coli.

Функционально активные варианты могут быть получены, напр., посредством изменения последовательности родительского антитела, напр., антитела, как перечислено в таблице 1 или на фигуре 2, однако с модификациями в области антитела за пределами участка связывания, или полученного из такого родительского антитела посредством модификации на участке связывания, которая не нарушает связывание с антигеном, и предпочтительно обладающего биологической активностью, аналогичной родительскому антителу, включая способность специфически или избирательно связываться с антигеном O25b, напр., связываясь с O25b и не связываясь с антигеном O25a Е.coli, или не связываясь значимо с антигеном O25a или перекрестно связываясь с обоими антигенами O25b и O25a, но не связываясь с другими антигенами Е.coli. Дополнительно функционально активные варианты могут далее включать способность к комплемент-опосредованному уничтожению в соответствии с анализом БАС и/или дополнительно далее включать способность к антитело-опосредованному фагоцитозу в соответствии с анализом ОФКА, и/или дополнительно далее включать функцию нейтрализации эндотоксинов в соответствии с LAL-анализом, напр., с по существу аналогичной биологической активностью, как определено с применением анализа специфического связывания или функциональных испытаний прицельного воздействия на (MP) Е.coli.

Термин "по существу аналогичная биологическая активность", используемый в настоящем документе, относится к активности, определенной как по существу аналогичная активность, составляющая по крайней мере 20%, по крайней мере 50%, по крайней мере 75%, по крайней мере 90%, напр., по крайней мере 100% или по крайней мере 125%, или по крайней мере 150%, или по крайней мере до 200% активности, которая определена для сопоставимого или родительского антитела.

Предпочтительные варианты или производные, как описано в настоящем документе, являются функционально активными по отношению к связыванию с антигеном, предпочтительно обладают способностью к специфическому связыванию с антигеном O25b и отсутствию связывания с антигеном O25a Е.coli, напр., связываясь с O25b и не связываясь с антигеном O25a Е.coli, или не связываясь значимо с антигеном O25a или перекрестно связываясь с обоими антигенами O25b и O25a, напр., предпочтительно связываясь с антигеном O25b по отношению к O25a или связываясь с O25b с более высокой активностью по сравнению с текущей поликлональной сывороткой для типирования против штаммов O25 (O25a). Предпочтительные варианты не связываются с другими антигенами Е.coli с различием в значении Kd по крайней мере 2 логарифмических единицы, предпочтительно по крайней мере 3 логарифмических единицы и дополнительно далее включают способность к комплемент-опосредованному уничтожению в соответствии с анализом БАС, напр., для достижения значимого снижения количества бактерий по сравнению с контрольными образцами, не содержащими антитело, и/или дополнительно далее включают способность к антитело-опосредованному фагоцитозу в соответствии с анализом ОФКА для достижения значимого снижения количества бактерий по сравнению с контрольными образцами, не содержащими антитело, и/или дополнительно далее включают функцию нейтрализации эндотоксинов в соответствии с LAL-тестом или анализом TLR4-сигнализации для достижения значимого снижения свободного ЛПС, напр., с по существу аналогичной биологической активностью, как определено с применением анализа специфического связывания или функциональных испытаний прицельного воздействия на (MP) E.coli. Значимое снижение аналитов в различных анализах, как правило, означает снижение по крайней мере 50%, предпочтительно по крайней мере 60%, 70%, 80%, 90%, 95% или 98% до полного снижения около 100% (+/-1%).

В предпочтительном варианте осуществления функционально активный вариант родительского антитела

а) является биологически активным фрагментом антитела, фрагментом, включающим по крайней мере 50% последовательности молекулы, предпочтительно по крайней мере 60%, по крайней мере 70%, по крайней мере 80%, по крайней мере 90% или по крайней мере 95% и более предпочтительно по крайней мере 97%, 98% или 99%;

б) получен из антитела путем по крайней мере одной замены, добавления и/или делеции аминокислоты, при этом функционально активный вариант обладает идентичностью последовательности с молекулой или частью молекулы, такой как антитело, составляющей по крайней мере 50% идентичность последовательности, предпочтительно по крайней мере 60%, более предпочтительно по крайней мере 70%, более предпочтительно по крайней мере 80%, еще более предпочтительно по крайней мере 90%, еще более предпочтительно по крайней мере 95% и наиболее предпочтительно по крайней мере 97%, 98% или 99%; и/или

в) состоит из антитела или его функционально активного варианта и дополнительно по крайней мере одной аминокислоты или нуклеотида, гетерологичного полипептидной или нуклеотидной последовательности.

В одном предпочтительном варианте осуществления изобретения функционально активный вариант антитела в соответствии с изобретением является в сущности идентичным вышеописанному варианту, однако отличается от его полипептидной или нуклеотидной последовательности соответственно в том, что он получен из гомологичной последовательности другого вида. Такие варианты именуются встречающимися в природе вариантами или аналогами.

Термин "функционально активный вариант" также включает встречающиеся в природе аллельные варианты, а также мутантов или другие не встречающиеся в природе варианты. Как известно в данной области, аллельный вариант является альтернативной формой (поли) пептида, которая характеризуется наличием замены, делеции или добавления одной или нескольких аминокислот, которые в сущности не изменяют биологическую функцию полипептида.

Функционально активные варианты могут быть получены путем изменений последовательности в полипептидной или нуклеотидной последовательности, напр., посредством одной или нескольких точковых мутаций, при этом изменения последовательности сохраняют или улучшают функцию неизмененной полипептидной или нуклеотидной последовательности при использовании в комбинации изобретения. Такие изменения последовательности могут включать, но не ограничиваться, (консервативные) замены, добавления, делеции, мутации и вставки.

Конкретными функционально активными вариантами являются варианты CDR. Вариант CDR включает аминокислотную последовательность, с модификацией по крайней мере одной аминокислоты в области CDR, при этом указанная модификация может представлять собой химическое или частичное изменение аминокислотной последовательности, при этом модификация позволяет варианту сохранять биологические характеристики немодифицированной последовательности. Частичное изменение аминокислотной последовательности CDR может представлять собой делецию или замену одной или нескольких аминокислот, напр., 1, 2, 3, 4 или 5 аминокислот, или добавление или вставку одной или нескольких аминокислот, напр., 1, 2, 3, 4 или 5 аминокислот, или химическую дериватизацию одной или нескольких аминокислот, напр., 1, 2, 3, 4 или 5 аминокислот, либо их сочетания. Замены аминокислотных остатков могут представлять собой консервативные замены, например, замену одной гидрофобной аминокислоты альтернативной гидрофобной аминокислотой.

Консервативные замены представляют собой замены, которые происходят в рамках одного семейства аминокислот, являющихся родственными по своим боковым цепям и химическим свойствам. Примерами таких семейств являются аминокислоты с основными боковыми цепями, с кислыми боковыми цепями, с неполярными алифатическими боковыми цепями, с неполярными ароматическими боковыми цепями, с незаряженными полярными боковыми цепями, с малыми боковыми цепями, с большими боковыми цепями и т.д.

Под точковой мутацией, в частности, подразумевается метод инженерии для получения полинуклеотида, который приводит к экспрессии аминокислотной последовательности, отличной от неизмененной аминокислотной последовательности, путем замены или обмена, делеции или вставки одной или нескольких одиночных (непоследовательных) или дублетов аминокислот для различных аминокислот.

Предпочтительные точковые мутации относятся к обмену аминокислот той же полярности и/или заряда. В данном отношении аминокислоты относятся к двадцати встречающимся в природе аминокислотам, закодированным шестьюдесятью четырьмя триплетными кодонами. Эти двадцать аминокислот можно подразделить на аминокислоты с нейтральным зарядом, положительным зарядом и отрицательным зарядом:

Ниже приведены "нейтральные" аминокислоты с соответствующим трехбуквенным и однобуквенным кодом и полярностью:

Алании (Ala, А) - неполярная, нейтральная;

Аспарагин (Asn, N) - полярная, нейтральная;

Цистеин (Cys, С) - неполярная, нейтральная;

Глутамин (Gln, Q) - полярная, нейтральная;

Глицин (Gly, G) - неполярная, нейтральная;

Изолейцин (Ile, I) - неполярная, нейтральная;

Лейцин (Leu, L) - неполярная, нейтральная;

Метионин (Met, М) - неполярная, нейтральная;

Фенилаланин (Phe, F) - неполярная, нейтральная;

Пролин (Pro, Р) - неполярная, нейтральная;

Серии (Ser, S) - полярная, нейтральная;

Треонин (Thr, Т) - полярная, нейтральная;

Триптофан (Trp, W) - неполярная, нейтральная;

Тирозин (Tyr, Y) - полярная, нейтральная;

Валин (Val, V) - неполярная, нейтральная;

Гистидин (His, Н) - полярная, положительная (10%) нейтральная (90%).

К "положительно" заряженным аминокислотам относятся:

Аргинин (Arg, R) - полярная, положительная;

Лизин (Lys, K) - полярная, положительная.

К "отрицательно" заряженным аминокислотам относятся:

Аспарагиновая кислота (Asp, D) - полярная, отрицательная;

Глутаминовая кислота (Glu, Е) - полярная, отрицательная.

"Процент (%) идентичности аминокислотной последовательности" по отношению к последовательностям антител и гомологам, описанным в настоящем документе, определяется как процентная доля аминокислотных остатков в рассматриваемой последовательности, которые идентичны аминокислотным остаткам в конкретной полипептидной последовательности после выравнивания последовательности и введения при необходимости пробелов для достижения максимального процента идентичности последовательностей и без учета каких-либо консервативных замен в качестве части идентичности последовательностей. Специалисты в данной области могут определить соответствующие параметры для измерения выравнивания, включая любые алгоритмы, необходимые для достижения максимального выравнивания на протяжении полной длины сравниваемых последовательностей.

В частности, подразумевается, что вариант антитела включает гомологи, аналоги, фрагменты, модификации или варианты с определенным профилем гликозилирования, напр., полученные гликоинженерией, которые являются функциональными и могут служить функциональными эквивалентами, напр., в отношении связывания со специфическими мишенями и функциональных свойств.

Антитело настоящего изобретения может проявлять или не проявлять эффекторную функцию Fc. Несмотря на то, что способ действия главным образом опосредован нейтрализующими антителами без эффекторных функций Fc, Fc-область может рекрутировать комплемент и поддерживать элиминацию антигена-мишени, такого как токсин, из кровообращения посредством образования иммунных комплексов.

Конкретные антитела могут быть лишены активного Fc-фрагмента, таким образом, они состоят из доменов антител, которые не содержат Fc-часть антитела или не содержат участок связывания Fc-гамма-рецептора, или включают домены антител, не имеющие эффекторных функций Fc-области, напр., в связи с модификациями для снижения эффекторных функций Fc-области, в частности, для аннулирования или снижения антитело-зависимой клеточно-опосредованной цитотоксичности (АЗКОЦ) и/или комплемент-зависимой цитотоксичности (КЗЦ). Альтернативные антитела могут быть сконструированы с включением модификаций для повышения эффекторных функций Fc-области, в частности, для повышения активности АЗКОЦ и/или КЗЦ.

Такие модификации могут быть реализованы посредством мутагенеза, напр., мутаций в участке связывания Fc-гамма-рецептора, ил и с применением производных или агентов для изменения активности АЗКОЦ и/или КЗЦ формата антитела в целях достижения снижения или повышения эффекторной функции Fc.

Под значительным снижением эффекторной функции Fc-области, как правило, подразумевается эффекторная функция Fc-области меньше 10% от немодифицированного формата (дикого типа), предпочтительно меньше 5% по результатам измерений активности АЗКОЦ и/или КЗЦ. Под значительным повышением эффекторной функции Fc-области, как правило, подразумевается повышение эффекторной функции Fc-области по крайней мере на 10% от немодифицированного формата (дикого типа), предпочтительно по крайней мере 20%, 30%, 40% или 50% по результатам измерений активности АЗКОЦ и/или КЗЦ.

Термин "гликоинженерные" варианты по отношению к последовательностям антител относятся к гликозилированным вариантам с модифицированными иммуногенными или иммуномодулирующими (напр., противовоспалительными) свойствами, АЗКОЦ и/или КЗЦ в результате гликоинженерии. Все антитела содержат углеводные структуры в консервативных положениях константных областей тяжелой цепи, при этом каждый изотип обладает выраженным набором N-связанных углеводных структур, которые оказывают переменное влияние на сборку белка, секрецию или функциональную активность. Антитела типа IgG1 представляют собой гликопротеины, которые имеют консервативный участок N-связанного гликозилирования в Asn297 в каждом домене СН2. Два сложных двухантенных олигосахарида, присоединенных к Asn297, располагаются между СН2 доменами, формируя плотные контакты с полипептидной цепью, и их присутствие является существенным для антител при осуществлении эффекторных функций, таких как антитело-зависимая клеточно-опосредованная цитотоксичность (АЗКОЦ). Удаление N-гликана в N297, напр., посредством мутации N297, напр., к А или Т299, как правило, приводит к получению агликозилированных форматов антител со сниженной АЗКОЦ. В частности, антитело изобретения может быть гликозилированным или гликоинженерным либо агликозилированным антителом.

Основные различия в гликозилировании антитела возникают между клеточными линиями, и незначительные различия наблюдаются даже для заданной клеточной линии, выращенной в различных условиях культивирования. Экспрессия в клетках бактерий, как правило, приводит к образованию агликозилированного антитела. Ранее установлено, что клетки ЯКХ с тетрациклин-регул ируемой экспрессией β(1,4)-Н-ацетилглюкозаминилтрансферазы 111 (GnTII17y), гликозилтрансферазы, катализирующей образование бисекционного GlcMAc, существенно повышает активность АЗКОЦ (Umana et al., 1999, Nature Biotech. 17: 176-180). Помимо выбора клеток-хозяев, факторы, оказывающие влияние на гликозилирование в процессе рекомбинантного производства антител, включают режим роста, состав среды, плотность культуры, оксигенацию, рН, схемы очистки и т.п.

Термин "антигенсвязывающий участок" или "участок связывания" относится к части антитела, которая принимает участие в связывании с антигеном. Антигенсвязывающий участок образуют аминокислотные остатки N-концевых вариабельных (V) областей тяжелой (Н) и/или легкой (L) цепей или их вариабельных доменов. Три сильно расходящихся участка в областях V тяжелой и легкой цепи, именуемые "гипервариабельными областями", перемежаются с более консервативными фланкирующими участками, известными как каркасные области, антигенсвязывающий участок предоставляет поверхность, которая комплементарна трехмерной поверхности связываемого эпитопа или антигена, и гипервариабельные области именуются как "определяющие комплементарность области", или "CDR". Участок связывания, включенный в CDR, в настоящем документе также именуется "участок связывания CDR".

Термин "антиген", используемый в настоящем документе взаимозаменяемым образом с терминами "мишень" или "антиген-мишень", относится ко всей молекуле-мишени или фрагменту такой молекулы, распознаваемой участком связывания антитела. В частности, подструктуры антигена, напр., полипептидная или углеводная структура, в целом именуемые как"эпитопы", напр., В-клеточные эпитопы и Т-клеточный эпитоп, которые являются иммунологически значимыми, могут распознаваться таким участком связывания. Специфические антигены, такие как антигены O25b или O25a, предлагаются как выделенные антигены или в виде клеток или клеточных фракций Е.coli.

Термин "эпитоп", используемый в настоящем документе, в частности, относится к молекулярной структуре, которая может полностью представлять специфического партнера по связыванию или часть специфического партнера по связыванию участка связывания антитела. Эпитоп может состоять из углеводной, пептидной структуры, жирной кислоты, органического, биохимического или неорганического вещества или их производных и любых комбинаций. Если эпитоп включен в пептидную структуру, такую как пептид, полипептид или белок, он, как правило, включает по крайней мере 3 аминокислоты, предпочтительно 5-40 аминокислот и более предпочтительно приблизительно 10-20 аминокислот. Эпитопы могут быть линейными или конформационными. Линейный эпитоп состоит из одного сегмента первичной последовательности полипептидной или углеводной цепи. Линейные эпитопы могут быть непрерывными или перекрывающимися.

Конформационные эпитопы состоят из аминокислот и углеводов, соединенных путем складывания полипептида с образованием третичной структуры, и аминокислоты не обязательно прилегают друг к другу в линейной последовательности. В частности и в отношении полипептидных антигенов конформационный или прерывистый эпитоп характеризуется наличием двух или нескольких более дискретных аминокислотных остатков, отделенных друг от друга в первичной последовательности, но собирающихся в плотную структуру на поверхности молекулы, когда полипептид складывается в нативный белок/антиген.

В настоящем документе термин "эпитоп", в частности, относится к отдельному эпитопу, распознаваемому антителом, или смеси эпитопов, включающих варианты эпитопов, каждый из которых распознается перекрестно реагирующим антителом.

Термин "экспрессия" понимается следующим образом. Молекулы нуклеиновых кислот, содержащие необходимую кодирующую последовательность продукта экспрессии, такого как, напр., антитело, как описано в настоящем документе, и контрольные последовательности, такие как, напр., промотор в оперативной связи, могут использоваться для целей экспрессии. Клетки-хозяева, трансформированные или трансфицированные с помощью этих последовательностей, способны продуцировать закодированные белки. Для осуществления трансформации экспрессирующая система может быть включена в вектор; однако соответствующая ДНК также может быть интегрирована в хромосому хозяина. В частности, термин относится к клетке-хозяину и совместимому вектору в подходящих условиях, напр., для экспрессии белка, закодированного чужеродной ДНК, перенесенной вектором и введенной в клетку-хозяина.

Кодирующая ДНК - это последовательность ДНК, которая кодирует определенную аминокислотную последовательность для определенного полипептида или белка, такого как, напр., антитело. Промоторная ДНК - это последовательность ДНК, которая инициирует, регулирует или иным образом опосредует или контролирует экспрессию кодирующей ДНК. Промоторная ДНК и кодирующая ДНК могут происходить из одного гена или из различных генов и от одного или различных организмов. Рекомбинантные клонирующие векторы часто включают одну или несколько систем репликации для клонирования или экспрессии, один или несколько маркеров для выбора хозяина, напр., устойчивость к антибиотикам, и одну или несколько экспрессионных кассет.

"Векторы" в настоящем документе определяются как последовательности ДНК, которые требуются для транскрипции клонированных рекомбинантных нуклеотидных поверхностей, т.е. рекомбинантных генов, и трансляции их иРНК в подходящий организм-хозяин.

"Экспрессионная кассета" относится как кодирующей последовательности ДНК или сегменту ДНК, кодирующему продукт экспрессии, который может быть вставлен в вектор в определенных участках рестрикции. Участки рестрикции кассеты спроектированы для обеспечения вставки кассеты в надлежащую рамку считывания. В целом чужеродная ДНК вставляется в один или несколько участков рестрикции векторной ДНК, а затем переносится вектором в клетку-хозяина с передаваемой векторной ДНК. Сегмент или последовательность ДНК с вставленной или добавленной ДНК, такой как экспрессионный вектор, также может именоваться как "конструкт ДНК".

Экспрессионные векторы включают экспрессионную кассету и дополнительно, как правило, включают источник для автономной репликации в клетках-хозяевах или участке интеграции в геноме, один или несколько селектируемых маркеров (напр., ген синтеза аминокислоты или ген, сообщающий устойчивость к антибиотикам, таким как зеоцин, канамицин, G418 или гигромицин), ряд участков расщепления рестрикционных ферментов, подходящую промоторную последовательность и терминатор транскрипции, при этом указанные компоненты оперативно связаны друг с другом. Термин "вектор", используемый в настоящем документе, включает автономно реплицирующиеся нуклеотидные последовательности, а также встраивающиеся в геном нуклеотидные последовательности. Вектором общего типа является "плазмида", которая в целом представляет собой автономную молекулу двухцепочечной ДНК, которая может легко принимать дополнительную (чужеродную) ДНК и которая может быть легко встроена в подходящую клетку-хозяина. Плазмидный вектор часто содержит кодирующую ДНК и промоторную ДНК и имеет один или несколько участков рестрикции, подходящих для вставки чужеродной ДНК. В частности, термин "вектор" или "плазмида" относится к проводнику, посредством которого последовательность ДНК или РНК (напр., чужеродный ген) может быть встроена в клетку-хозяина для трансформации хозяина и стимуляции экспрессии (напр., транскрипции и трансляции) встроенной последовательности.

Термин "клетка-хозяин", используемый в настоящем документе, относится к клеткам основного организма, трансформируемым для продуцирования определенного рекомбинантного белка, такого как антитело, описанное в настоящем документе, и любому потомству таких клеток. При этом подразумевается, что не все потомство является точно идентичным родительской клетке (в связи с преднамеренными или самопроизвольными мутациями или различиями в окружающих условиях), однако такое измененное потомство относится к указанному термину при условии, что потомство сохраняет ту же функциональность, что и первоначально трансформированная клетка. Термин "линия клеток-хозяев" относится к клеточной линии клеток-хозяев, используемой для экспрессии рекомбинантного гена для продуцирования рекомбинантных полипептидов, таких как рекомбинантные антитела. Термин "клеточная линия", используемый в настоящем документе, относится к полученному клону клеток определенного типа, которые приобрели способность к размножению на протяжении продолжительного периода времени. Такая клетка-хозяин или линия клеток-хозяев могут поддерживаться в клеточной культуре и/или культивироваться для продуцирования рекомбинантного полипептида.

Термин "выделенный" или "выделение", используемый в настоящем документе в отношении нуклеиновой кислоты, антитела или другого соединения, относится к такому соединению, которое было в достаточной степени отделено от среды, с которой оно связано естественным образом, для существования в "по существу чистой" форме. "Выделенный" не обязательно означает исключение искусственных или синтетических смесей с другими соединениями или материалами или наличия примесей, которые не снижают основную активность и которые могут присутствовать, например, в связи с неполной очисткой. В частности молекулы выделенных нуклеиновых кислот настоящего изобретения также подразумевают включение не встречающихся в природе, напр., кодон-оптимизированных нуклеиновых кислот или кДНК либо химически синтезированных.

Аналогичным образом выделенное антитело изобретения является, в частности, не встречающимся в природе, напр., включенным в состав комбинированного препарата с другим антителом или действующим веществом, причем комбинация не встречается в природе, или представляющим собой оптимизированный вариант или вариант с созревшей аффинностью встречающегося в природе антитела, или антитело с каркасной областью, которая сконструирована для улучшения технологичности антитела.

Со ссылкой на нуклеиновые кислоты изобретения иногда используется термин "выделенная нуклеиновая кислота". Этот термин в применении к ДНК относится к молекуле ДНК, которая отделена от последовательностей, непосредственно к ней прилежащих во встречающемся в природе геноме организма, из которого она происходит. Например, "выделенная нуклеиновая кислота" может включать молекулу ДНК, вставленную в вектор, такой как плазмида или вектор на основе вируса, или встроенную в геномную ДНК прокариотической или эукариотической клетки организма-хозяина. В применении к РНК термин "выделенная нуклеиновая кислота" относится прежде всего к молекуле РНК, закодированной выделенной молекулой ДНК, как определено выше. В альтернативном варианте термин может относиться к молекуле РНК, которая была в достаточной степени отделена от других нуклеиновых кислот, с которыми она будет связана в своем естественном состоянии (т.е. в клетках или тканях). "Выделенная нуклеиновая кислота" (ДНК или РНК) может далее представлять молекулу, продуцированную непосредственно биологическими или синтетическими средствами из других компонентов, присутствующих при ее продуцировании.

По отношению к полипептидам и белкам, таким как выделенные антитела или эпитопы изобретения, термин "выделенный", в частности, относится к соединениям, которые не содержат или по существу не содержат материал, с которым они связаны естественным образом, такой как другие соединения, в сочетании с которыми они присутствуют в естественных условиях или среде, в которой осуществляется их приготовление (напр., клеточная культура), когда такое приготовление выполняется с применением технологии рекомбинантной ДНК in vitro или in vivo. Выделенные соединения могут быть включены в лекарственную форму с разбавителями или наполнителями без потери выделенного состояния для практических целей - например, полипептиды или полинуклеотиды могут быть смешаны с фармацевтически приемлемыми носителями или наполнителями при использовании в диагностике или терапии. В частности, выделенное антитело изобретения отличается от препаратов поликлональной сыворотки против штаммов O25(a), поскольку оно предлагается в выделенной и очищенной форме, предпочтительно предлагается в виде препарата, включающего выделенное антитело в качестве единственного действующего вещества. Однако это не исключает возможность включения выделенного антитела в комбинированный лекарственный препарат, содержащий ограниченное количество далее хорошо изученных (выделенных) антител. Выделенные антитела также могут быть предложены на твердом, полужидком или жидком носителе, таком как гранулы.

Термин "нейтрализующий" или "нейтрализация" используется в настоящем документе в самом широком смысле и относится к любой молекуле, которая ингибирует инфицирование организма патогеном, таким как MP Е.coli, или ингибирует стимуляцию инфекции патогеном, обусловленную продуцированием сильных белковых токсинов, или ингибирует повреждение токсинами клетки-мишени организма вне зависимости от механизма, посредством которого достигается нейтрализация. Нейтрализация может достигаться, напр., антителом, которое ингибирует связывание и/или взаимодействие эндотоксина MP Е.coli с соответствующим рецептором на клетках-мишенях (напр., связывание с рецептором TLR4). Нейтрализация может далее достигаться путем удаления эндотоксина из кровообращения посредством Fc-опосредованных функций.

Нейтрализующая активность, как правило, определяется с применением стандартного анализа, напр., LAL-теста, в котором измеряется ингибирование биологической активности эндотоксина, напр., колориметрии.

Термин "MP Е.coli" понимается следующим образом: Инфекции мультирезистентными Е.coli, которые в значительной степени связаны с клональной линией ST131-O25b:H4, которая появилась только в последнее десятилетие и распространилась по всему миру как преобладающий резистентный клон. Под мультирезистентными Е.coli, в частности, подразумеваются штаммы, демонстрирующие устойчивость к трем или более классам антибиотиков, напр., следующим веществам/группам: пенициллины, цефалоспорины, карбапенемы, аминогликозиды, тетрациклины, фторхинолоны, нитрофурантоин, триметоприм (и его комбинации), фосфомицин, полимиксины, хлорамфеникол, азтеонам, тигециклин.

Кислый капсульный полисахарид (КПС) - это толстый, слизистый слой полисахарида, который окружает большинство болезнетворных Е.coli. В связи с этим поразительно, что специфический эпитоп, распознанный антителом изобретения, специфически доступен как на инкапсулированном, так и не неинкапсулированном штамме Е.coli.

Антитела, уничтожающие или нейтрализующие MP Е.coli, противодействуют патогенам и патогенным реакциям, таким образом, обеспечивая ограничение или профилактику инфекции и/или улучшение состояния заболевания, связанного с такой инфекцией, или ингибирование патогенеза MP Е.coli, в частности, распространения и репликации в стерильных тканях/участках тела носителя. В данном отношении под "защитными антителами" в настоящем документе подразумеваются антитела, которые отвечают за иммунитет к возбудителю инфекции, принимая участие в активном или пассивном иммунитете. В частности, защитные антитела, как описано в настоящем документе, могут использоваться для терапевтических целей, напр., для профилактики или терапии, облегчения, лечения или по крайней мере частичного купирования симптомов заболевания, побочных эффектов или развития заболевания, вызванного патогеном. В частности, защитные антитела способны уничтожать или подавлять репликацию живых клеток Е.coli, напр., вызывая бактерицидную или опсонофагоцитирующую активность сыворотки, или удалять цельные бактериальные клетки или их молекулы ЛПС со стерильных участков тела после терапевтического применения (т.е. при установленной инфекции). В качестве альтернативы профилактическое применение защитных антител ингибирует развитие инфекции (т.е. распространение Е.coli из нестерильных участков к стерильным тканям тела) в соответствии с одним из вышеуказанных или других механизмов.

Под термином "антиген O25b" в настоящем документе подразумевается О-антиген ЛПС со структурой, отраженной на фигуре 8 (а). Структура является аналогичной, но отличается от структуры антигена O25a. Под O25b в настоящем документе подразумевается серотип, который аналогичен, но отличается от O25a.

Под термином "антиген O25a" в настоящем документе подразумевается антиген, состоящий из повторяющейся единицы пентасахарида, описанной Kenne et al. До определения антигена O25b термин O25 означал O25a, как определено в настоящем документе (см. фигуру 8 (b)).

Термин "рекомбинантный", используемый в настоящем документе, означает "полученный с применением или результат генной инженерии". Рекомбинантный организм-хозяин, в частности, включает экспрессионный вектор или клонирующий вектор или был получен методом генной инженерии с содержанием последовательности рекомбинантной нуклеиновой кислоты, в частности, включающей нуклеотидную последовательность, чужеродную для организма-хозяина. Рекомбинантный белок продуцируется путем экспрессии соответствующей рекомбинантной нуклеиновой кислоты в организме-хозяине. Термин "рекомбинантное антитело", используемый в настоящем документе, включает антитела, которые были получены, экспрессированы, созданы или выделены рекомбинантными способами, например, (а)антитела, выделенные из животного (например, мыши), которое является трансгенным или трансхромосомным в отношении генов иммуноглобулина человека или полученной из них гибридомы, (б) антитела, выделенные из клетки-хозяина, трансформированной для экспрессии антитела, напр., из трансфектомы, (в) антитела, выделенные из библиотеки рекомбинантных, комбинаторных антител человека, и (г) антитела, полученные, экспрессированные, созданные или выделенные любым другим способом, включающим сплайсинг последовательностей генов иммуноглобулинов человека в другие ДНК-последовательности. Такие рекомбинантные антитела включают антитела, сконструированные с включением перестроек и мутаций, которые возникают, например, при созревании антитела.

Используемый в настоящем документе термин "специфичность" или "специфическое связывание" относится к реакции связывания, которая ограничивается соответствующим представляющим интерес лигандом в гетерогенной популяции молекул. Таким образом, при заданных условиях (напр., условиях иммуноанализа) антитело специфически связывается с определенной мишенью и не связывается в значительных количествах с другими молекулами, присутствующими в образце. Специфическое связывание означает, что связывание является выборочным в отношении родства мишени, высокой, средней или низкой аффинности или авидности связывания по выбору. Выборочное связывание, как правило, достигается, если для константы связывания или динамики связывания различие является по крайней мере 10-кратным (подразумевается различие по крайней мере 1 логарифмическая единица), предпочтительно различие является по крайней мере 100-кратным (подразумевается различие по крайней мере 3 логарифмических единицы) и более предпочтительно по крайней мере 1000-кратным (подразумевается различие по крайней мере 3 логарифмических единицы) по сравнению с другим антителом.

Используемый в настоящем документе термин "специфичность" или "специфическое связывание" относится к реакции связывания, которая ограничивается соответствующим представляющим интерес лигандом в гетерогенной популяции молекул. Таким образом, при заданных условиях (напр., условиях иммуноанализа) антитело специфически связывается с определенной мишенью и не связывается в значительных количествах с другими молекулами, присутствующими в образце. Специфическое связывание означает, что связывание является выборочным в отношении родства мишени, высокой, средней или низкой аффинности или авидности связывания по выбору. Избирательное связывание, как правило, достигается, если для константы связывания или динамики связывания различие является по крайней мере 10-кратным (подразумевается различие по крайней мере 1 логарифмическая единица), предпочтительно различие является по крайней мере 100-кратным (подразумевается различие по крайней мере 3 логарифмических единицы) и более предпочтительно по крайней мере 1000-кратным (подразумевается различие по крайней мере 3 логарифмических единицы). Термин "специфичность" или "специфическое связывание" также применяется к связывающим соединениям, которые связываются с одной или несколькими молекулами, напр., перекрестно связывающими соединениями.

Антитело изобретения, в частности, является избирательным, связываясь только с антигеном O25b или предпочтительно связываясь только с антигеном O25b по отношению к антигену O25a, или связываясь с O25b с более высокой аффинностью по сравнению с поликлональной сывороткой против штаммов O25a, при этом сыворотка связывается с антигеном O25b с низкой аффинностью. В связи с этим может подразумеваться, что антитело изобретения дифференциально связывается с этими антигенами, напр., по крайней мере с равной аффинностью или более чем равной аффинностью, с различием в значении Kd по крайней мере 1 логарифмическая единица, предпочтительно по крайней мере 2 логарифмические единицы, более предпочтительно по крайней мере 3 логарифмические единицы. Такое антитело, избирательно связывающееся с антигеном O25b по отношению к антигену O25a, предпочтительно используется для диагностических или терапевтических целей. Для некоторых диагностических целей, в частности, используется антитело, которое связывается только с антигеном O25b обнаруживаемым образом.

Дифференциальная аффинность связывания, определяющая предпочтительное связывание с антигеном O25b по отношению к другим антигенам Е.coli, напр., любым углеводным антигенам, помимо антигена O25 или любых коровых антигенов, является предпочтительно по крайней мере 10-кратно выше, т.е. с различием Kd по крайней мере 10-кратно, предпочтительно по крайней мере 100-кратно выше, более предпочтительно по крайней мере 1000-кратно выше.

Дифференциальная аффинность связывания, определяющая предпочтительное связывание с антигеном O25b, является, в частности, по крайней мере 5-кратно или по крайней мере 6-кратно, или по крайней мере 7-кратно, или по крайней мере 8-кратно, или по крайней мере 9-кратно, или по крайней мере 10-кратно выше по сравнению с коммерческой сывороткой для типирования, такой как насыщенная антисыворотка Е.coli O25 из Государственного института сывороток Дании (81369).

Дифференциальная аффинность связывания, определяющая предпочтительное связывание с антигеном O25b по отношению к антигену O25a, является, в частности, по крайней мере равной или более чем равной, напр., по крайней мере 1,5-кратно или по крайней мере 2-кратно, или по крайней мере 3-кратно, или по крайней мере 4-кратно, или по крайней мере 5-кратно, или по крайней мере 6-кратно, или по крайней мере 7-кратно, или по крайней мере 8-кратно, или по крайней мере 9-кратно, или по крайней мере 10-кратно выше.

Предпочтительные антитела изобретения связываются с любыми указанными отдельными антигенами, в частности, с антигеном O25b, с высокой аффинностью, в частности, с высокой и/или низкой скоростью диссоциации или высокой авидностью связывания. Аффинность связывания антитела, как правило, характеризуется по величине концентрации антитела, при которой заполнена половина участков связывания антигена, известной как константа диссоциации (Kd или K_D). Как правило, связывающее соединение считается высокоаффинным связывающим соединением при Kd<10^-7 М, в некоторых случаях, напр., для терапевтических целей с повышенной аффинностью, напр., при Kd<10^-8 М, предпочтительно при Kd<10^-9 М, еще более предпочтительно при Kd<10^-10 М.

Однако в особенно предпочтительном варианте осуществления аффинность связывания отдельных антигенов является средней аффинностью, напр., Kd меньше 10^-6 и до 10^-8 М, напр., при связывании по крайней мере с двумя антигенами.

В соответствии с изобретением могут быть предложены среднеаффинные связывающие соединения, предпочтительно в сочетании с процессом созревания аффинности при необходимости.

Созревание аффинности - это процесс, при котором продуцируются антитела с повышенной аффинностью к антигену-мишени. Любой один или несколько способов приготовления и/или использования библиотек созревания аффинности, доступных в данной области, может использоваться для получения антител с созревшей аффинностью в соответствии с различными вариантами осуществления изобретения, раскрытыми в настоящем документе. Типовые примеры таких способов и применений созревания аффинности, таких как случайный мутагенез, пассирование бактериальных мутаторных штаммов, сайт-специфический мутагенез, направленное воздействие на горячие точки мутации, экономный мутагенез, перетасовка цепей антитела, перетасовка легкой цепи, перетасовка тяжелой цепи, мутагенез CDR1 и/или CDR1, и способов получения и использования библиотек созревания аффинности, соответствующих реализации способов и применений в соответствии с различными вариантами осуществления изобретения, раскрытого в настоящем документе, включают, например, раскрытые в следующих публикациях: Prassler et al. (2009); Immunotherapy, Vol. 1(4), pp. 571-583; Sheedy et al. (2007), Biotechnol. Adv., Vol. 25(4), pp. 333-352; WO 2012/009568; WO 2009/036379; WO 2010/105256; US 2002/0177170; WO 2003/074679.

За счет структурных изменений антитела, включающих мутагенез аминокислот или последствия соматической мутации в сегментах гена иммуноглобулинов, обеспечивается получение участка связывания с антигеном и отбор по повышенной аффинности. Антитела с созревшей аффинностью могут обладать аффинностью, на несколько логарифмических единиц выше аффинности родительского антитела. Отдельные родительские антитела могут подлежать созреванию аффинности. В альтернативном варианте пулы антител с аналогичной аффинностью связывания с антигеном-мишенью могут рассматриваться как родительские структуры, которые изменяются для получения отдельных антител с созревшей аффинностью или пулов таких антител с созревшей аффинностью.

Предпочтительный вариант антитела с созревшей аффинностью в соответствии с изобретением демонстрирует по крайней мере 2-кратное повышение аффинности связывания, предпочтительно по крайней мере 5-кратное, предпочтительно по крайней мере 10-кратное, предпочтительно по крайней мере 50-кратное или предпочтительно по крайней мере 100-кратное повышение. Созревание аффинности может быть использовано в ходе реализации мероприятий отбора с применением соответствующих библиотек родительских молекул любого из антител со средней аффинностью связывания для получения антитела изобретения, обладающего свойством специфического связывания с мишенью при аффинности связывания с Kd<10^-8 М. В альтернативном варианте аффинность может быть еще более повышена посредством созревания аффинности антитела в соответствии с изобретением для получения высоких значений, соответствующих Kd меньше 10^-9 М, предпочтительно меньше 10^-10 М или даже меньше 10^-11 М, наиболее предпочтительно в пикомолярном диапазоне.

В определенных вариантах осуществления аффинность связывания определяется с применением анализа аффинности методом ИФА. В определенных вариантах осуществления аффинность связывания определяется с применением анализов BIAcore, ForteBio или MSD. В определенных вариантах осуществления аффинность связывания определяется с применением кинетического метода. В определенных вариантах осуществления аффинность связывания определяется с применением способа равномерного диализа.

Использование термина "имеющий ту же специфичность", "имеющий тот же участок связывания" или "связывающий тот же эпитоп" указывает на то, что эквивалентные моноклональные антитела проявляют те же или по существу те же, т.е. аналогичные характеристики иммунной реакции (связывания) и конкурируют за связывание с заранее заданной последовательностью связывания-мишенью. Относительная специфичность молекулы антитела к определенной мишени может быть определена с применением анализа конкурентного связывания, напр., как описано в публикации Harlow, et al., ANTIBODIES: A LABORATORY MANUAL, Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, N.Y., 1988).

Термин "больной", используемый в настоящем документе, относится к теплокровному млекопитающему, в частности, к человеку. В частности, медицинское применение изобретения или соответствующий метод лечения применяется к больному, нуждающемуся в профилактике или лечении состояния заболевания, связанного с инфекцией МР Е.coli, или страдающему от заболевания, включая заболевание на ранней стадии или на поздней стадии развития. Термин "пациент" относится к человеку и другим млекопитающим, которые получают профилактическое или терапевтическое лечение. Таким образом, под термином "лечение" подразумевается как профилактическое, так и терапевтическое лечение.

Больной, напр., получает лечение для профилактики или терапии состояний заболевания MP Е.coli. В частности, лечение получает больной, который подвержен риску инфекции или развития такого заболевания или рецидива заболевания, или больной, который страдает от такой инфекции и/или заболевания, связанного с такой инфекцией.

В частности, способ лечения, профилактики или задержки развития заболевания у больного, как описано в настоящем документе, осуществляется путем воспрепятствования патогенезу MP Е.coli как возбудителя указанного заболевания.

В частности, термин "профилактика" относится к профилактическим мерам, которые включают профилактику возникновения патогенеза или профилактические меры по снижению риска патогенеза.

Например, антитело настоящего изобретения может применяться профилактически для ингибирования развития инфекции MP Е.coli или терапевтически для лечения инфекции MP Е.coli, в частности, инфекций MP Е.coli, для которых установлена резистентность, или если для определенного больного подтверждена резистентность к лечению с применением другой традиционной антибиотикотерапии.

Термин "по существу чистый" или "очищенный", используемый в настоящем документе, относится к препарату, включающему по крайней мере 50% (по массе), предпочтительно по крайней мере 60%, 70%, 80%, 90% или 95% соединения, такого как молекула нуклеиновой кислоты или антитело. Чистота измеряется с применением методов, подходящих для данного соединения (напр., хроматографические методы, электрофорез в полиакриламидном геле, анализ ВЭЖХ и т.п.).

Термин "терапевтически эффективное количество", используемый в настоящем документе взаимозаменяемым образом с любым из терминов "эффективное количество" или "достаточное количество" соединения, напр., антитела настоящего изобретения, представляет количество или активность, достаточную при введении больному для достижения положительных или необходимых результатов, включая клинические результаты, и в связи с этим эффективное количество или его синоним зависит от контекста, в котором этот термин применяется.

Под эффективным количеством подразумевается то количество соединения, которое является достаточным для лечения, профилактики или ингибирования таких заболеваний или расстройства. В контексте заболевания терапевтически эффективные количества антитела, как описано в настоящем документе, используются, в частности, для лечения, снижения интенсивности, ослабления, улучшения состояния или влияния на заболевание или состояние, для которого достигается польза при ингибировании патогенеза (MP) Е.coli, например, адгезии и колонизации поверхностей слизистой оболочки, неконтролируемой репликации в стерильных тканях тела и токсичности бактериальных продуктов для клеток-хозяев.

Количество соединения, которое соответствует такому эффективному количеству, зависит от различных факторов, таких как заданный лекарственный препарат или соединение, лекарственная форма, способ введения, тип заболевания или расстройства, принадлежность получающего лечение больного или организма-хозяина и т.п., тем не менее, оно может быть определено в рабочем порядке специалистом в данной области.

Терапевтически эффективное количество антитела, как описано в настоящем документе, такое как вводимое нуждающемуся в нем пациенту-человеку, может, в частности, находиться в диапазоне 0,5-50 мг/кг, предпочтительно 5-40 мг/кг, еще более предпочтительно до 20 мг/кг, до 10 мг/кг, до 5 мг/кг, хотя могут быть показаны более высокие дозы, напр., для лечения острых состояний заболевания.

Кроме того, режим лечения или профилактики больного с терапевтически эффективным количеством антитела настоящего изобретения может состоять из одного введения или в альтернативном варианте включать серию применений. Например, антитело может быть введено по крайней мере раз в год, по крайней мере раз в полгода или по крайней мере раз в месяц. Однако в другом варианте осуществления антитело могут вводить больному от приблизительно одного раза в неделю до приблизительно один раз в сутки для заданного лечения. Продолжительность периода лечения зависит от ряда факторов, таких как степень тяжести заболевания, острого или хронического заболевания, возраста пациента, концентрации и активности формата антитела. Также следует принимать во внимание, что эффективная дозировка, используемая для лечения или профилактики, может быть повышена или снижена в ходе осуществления конкретного режима лечения или профилактики. Изменения в дозировке могут быть определены и становятся очевидными при выполнении стандартных диагностических анализов, известных в данной области. В некоторых случаях может потребоваться длительное применение.

В соответствии с конкретным аспектом изобретение предлагает типовые антитела, описанные на фигурах, представленных в настоящем документе, и дальнейшие варианты антител, в частности, включая варианты, связывающиеся по существу с тем же эпитопом, что и родительское антитело, которое характеризуется специфическим участком связывания, образованным аминокислотными последовательностями VH и VL или аминокислотными последовательностями ТЦ и ЛЦ фигуры 2, или участками связывания, образованными такими доменами VH/VL. Такие антитела могут, напр., являться функционально активными вариантами антител, полученными посредством модификации соответствующей CDR или последовательности родительского антитела. Хорошо понятно, что последовательность антитела, как описано в настоящем документе, считается "родительской" последовательностью, которая подлежит вариациям, напр., посредством точковых мутаций.

Типовые родительские антитела описаны в разделе примеров ниже и на фигурах 1 и 2. Антитела на фигуре 2 являются вариантами антител, полученными из родительских антител, приведенных в таблице 1, а именно антител, обозначенных 2А7, 8А1, 4D5 и 3E9 и соответствующих вариантов с различными комбинациями ТЦ/ЛЦ, которые получены гуманизацией и дополнительно созреванием аффинности. Эти варианты антител связываются с антигеном-мишенью, таким образом, считаются функционально активными. Также допустимо использование вариантов доменов VH или VL или вариантов цепей ТЦ или ЛЦ напр., с модификациями в соответствующих последовательностях FR или CDR, которые являются функционально активными, напр., связываясь с тем же эпитопом или содержащим тот же участок связывания, или обладающим теми же характеристиками связывания, что и родительское антитело. Также допускается возможность замены некоторых последовательностей FR или CDR антител, описанных в настоящем документе, последовательностями других антител, напр., антител, как перечислено на фигуре 1 или 2.

Для антител указывается, что они "связываются с тем же эпитопом" или "включают тот же участок связывания", или обладают "в сущности теми же характеристиками связывания", если антитела перекрестно конкурируют таким образом, что только одно антитело может связываться с эпитопом в заданный момент времени, т.е. одно антитело препятствует связыванию или регулирует эффект другого.

Термин "конкурирует" или "перекрестно конкурирует", используемый в настоящем документе по отношению к антителу, означает, что первое антитело или его антигенсвязывающая часть связывается с эпитопом в достаточной степени аналогично связыванию второго антитела или его антигенсвязывающей части таким образом, что результат связывания первого антитела с соответствующим эпитопом заметно снижается в присутствии второго антитела по сравнению со связыванием первого антитела при отсутствии второго антитела. Возможен альтернативный вариант, при котором связывание второго антитела с его эпитопом, также заметно снижается в присутствии первого антитела, однако это не является обязательным. То есть первое антитело может ингибировать связывание второго антитела с его эпитопом без ингибирования вторым антителом связывания первого антитела с его соответствующим эпитопом. Однако когда каждое антитело заметно ингибирует связывание другого антитела с его соответствующим эпитопом в той же, большей или меньшей степени, антитела определяются как "перекрестно конкурирующие" друг с другом в отношении связывания с соответствующими эпитопами. Как конкурирующие, так и перекрестно конкурирующие антитела охватываются настоящим изобретением.

Конкуренция в настоящем документе означает относительное ингибирование выше 30%, как определено с применением конкурентного анализа методом ИФА или анализа с применением системы ForteBio. Может быть желательным установить более высокий порог относительного ингибирования в качестве критериев подходящего уровня конкуренции в определенном контексте, напр., при использовании конкурентного анализа для выбора или скрининга новых антител, разработанных с предусмотренной функцией связывания антигена. Так, например, возможно установить критерии для конкурентного связывания, при этом для признания антитела достаточно конкурентным должно быть определено относительное ингибирование по крайней мере 40% или по крайней мере 50%, по крайней мере 60%, по крайней мере 70%, по крайней мере 80%, по крайней мере 90% или даже по крайней мере 100%.

Как описано в настоящем документе, в одном аспекте изобретение предлагает молекулы антител, характеризующиеся, напр., способностью конкурировать с любым из антител, перечисленных на фигуре 1 или 2, в отношении связывания с антигеном O25b.

Моноклональные антитела (мкАТ), высокоспецифические к O25b, имеют высокий потенциал в качестве диагностических реактивов для определения MP штаммов, принадлежащих к линии ST131. Кроме того, в частности, после гуманизации, эти мкАТ пригодны для применения в целях профилактики (напр., для групп повышенного риска) и лечения инфекций Е.coli, вызванных штаммами ST131-O25b:H4.

Углеводные антигены O25b и O25a рассматривались как идентичные или очень схожие на основании того факта, что иммунная сыворотка против O25 стандартно используются для диагностического определения штаммов Е.coli, экспрессирующих антигены O25b. Генетический фон синтеза О-антигена в штаммах ST131 изучен недостаточно, однако конкретный ген в кластере rfb (кодирующем синтез О-антигена) составляет основу ПЦР-определения штаммов O25b. Кроме того, на текущий момент отсутствуют структурные данные, поддерживающие какие-либо различия между антигенами O25a и O25b.

В связи с этим поразительно, что антитело изобретения в состоянии специфически связываться с антигеном O25b.

Для подтверждения генетических различий между штаммами Е.coli, экспрессирующими антигены O25b и O25a, был секвенирован кластер rfb, кодирующий синтез О-антигена, из клинического изолята штамма ST131-O25b:Н4 81009 (Szijarto et al, FEMS Microbiol Lett, 2012, 332: 131-6) с использованием метода блуждающей затравки начиная с олигонуклеотидов, специфических для консервативных фланкирующих генов gnd и galF. Полученный контиг оперона rfb имеет длину 11300 п.н. и лишь частично гомологичен кодирующему ферменты синтеза антигена O25 (номер доступа NCBI GU014554). Оказалось, что сегмент длиной 2043 п.н. на 3'-конце оперона rfb O25b не гомологичен соответствующей области оперона rfb O25, в которой этот сегмент замещен последовательностью длиной 6267 п.н., кодирующей синтез и транспорт фукозы.

Структура биологической повторяющейся единицы (ПЕ) О-специфического ПС, присутствующая в ЛПС, выделенном из Е.coli ST 131, была подробно проанализирована в очищенной фракции, состоящей из корового ОС, замещенного одной повторяющейся единицей (ПЕ). ПЕ ЛПС ST131 представляет собой О-ацетилированный пентасахарид со структурой, показанной на фиг. 8 (а).

По сути структура ПЕ О-ПС ST131 отличается от ПЕ ЛПС 025, опубликованной Kenne et al. (фиг. 8 (b)), и по имеющимся у нас сведениям это новый О-серотип среди липополисахаридов E.coli (Stenutz et al. FEMS Microbiol Rev. 2006 May; 30(3): 382-403. Review). Кроме того, предварительные результаты масс-спектрометрии ВП-МАЛДИ и анализов состава (анализ сахаров и метилирования) корового олигосахарида, выделенного из ЛПС ST131, поддержали тип K-12, что ранее было опубликовано V. et al. на основании генетических анализов (Szijarto et al, FEMS Microbiol Lett, 2012, 332: 131-6). Было показано, что ЛПС ST131 состоит из двух основных гликоформ коровых олигосахаридов (ОС). Типгликоформы зависит от наличия или отсутствия О-специфического полисахарида (ПС). Преобладающая гликоформа незамещенного корового ОС представляет собой усеченную версию корового олигосахарида K-12, которая не содержит дисахарид →7)-α-Hepp-(1→6)-α-Glcp. Наличие этого дисахарида составляет различие между коровым ОС с замещенным О-ПС и незамещенным коровым ОС.

Конкретный аспект относится к антителу изобретения, характеризующемуся специфической бактерицидной функциональной активностью, такой как комплемент-опосредованное уничтожение бактерий и опсонофагоцитирующее поглощение и уничтожение.

В соответствии с конкретным вариантом осуществления антитело изобретения обладает цитотоксической активностью в присутствии иммунных эффекторных клеток, как измерено в стандартном анализе БАС или ОФКА. Цитотоксическая активность, как определено с применением анализа БАС или ОФКА, может быть продемонстрирована для антитела изобретения при значимом повышении процента уничтожения бактерий по сравнению с контролем. Бактерицидная активность в отношении БАС или ОФКА предпочтительно измеряется как абсолютное увеличение процентной доли, которое составляет предпочтительно выше 5%, более предпочтительно выше 10%, еще более предпочтительно выше 20%, 30%, 40% или 50%.

Фагоцитарные эффекторные клетки могут быть активированы по другому пути, предусматривающему активацию комплемента. Антитела, которые связываются с поверхностными антигенами на микроорганизмах, притягивают первый компонент системы комплемента Fc-областью и инициируют активацию "классической" системы комплемента. Это приводит к стимуляции фагоцитарных эффекторных клеток, которые в конечном счете уничтожают мишень посредством комплемент-зависимой цитотоксичности (КЗЦ).

В соответствии с конкретным вариантом осуществления антитело изобретения обладает цитотоксической активностью в присутствии иммунных эффекторных клеток, как измерено в стандартном анализе АЗКОЦ или КЗЦ. Цитотоксическая активность, как определено с применением анализа АЗКОЦ или КЗЦ, может быть продемонстрирована для антитела изобретения при значимом повышении процента цитолиза по сравнению с контролем. Цитотоксическая активность в отношении АЗКОЦ или КЗЦ предпочтительно измеряется как абсолютное увеличение процентной доли, которое составляет предпочтительно выше 5%, более предпочтительно выше 10%, еще более предпочтительно выше 20%. Связывание комплемента, может быть, в частности, значимым, этот механизм может устранять токсины из очага инфекции или крови посредством удаления образующихся иммунных комплексов.

В соответствии с конкретным вариантом осуществления антитело изобретения обладает иммуномодулирующей функцией, сообщаемой Fc-частью IgG. Измененное гликозилирование, повышающее уровень сиалирования, напр., концевых галактозных остатков, возможно, оказывает противовоспалительное действие посредством активации сигнального пути DC-SIGN. Предпочтительное связывание с Fc-гамма-рецептором IIb (ингибирующее) перед Fc-гамма-рецепторами Ia, IIa и III, возможно, оказывает противовоспалительное действие.

Антитела настоящего изобретения могут быть определены или получены с применением гибридомного способа. В данном способе мышь или иное подходящее животное-хозяин, такое как хомяк, иммунизируют, как описано выше, для получения лимфоцитов, которые продуцируют или способны продуцировать антитела, которые должны специфически связываться с белком, используемым для иммунизации. В альтернативном варианте лимфоциты могут быть иммунизированы in vitro. Затем лимфоциты сливают с миеломными клетками с использованием подходящего агента для слияния, такого как полиэтилен гликоль, с образованием гибридомной клетки.

Культуральную среду, в которой выращивают гибридомные клетки, оценивают по производительности моноклональных антител против антигена. Предпочтительно специфичность связывания моноклональных антител, продуцируемых гибридомными клетками, определяют с помощью иммунопреципитации или с помощью in vitro связывающего анализа, такого как радиоиммуноанализ (РИА) или иммуноферментный анализ (ИФА).

Например, антитела настоящего изобретения могут быть получены из исходных (родительских) антител, напр., полученных путем иммунизации мыши неинкапсулированным мутантом представительного штамма ST131-O25b:Н4 81009 (напр., 81009Δkps::kan) посредством замещения kps (кодирующего синтез капсулы) кассетой, кодирующей устойчивость к канамицину. Далее возможен анализ образцов сыворотки, полученной у мышей, и использование селезенки мыши с выявленным наибольшим титром IgG против антигена O25b (с применением ИФА и вестерн-блоттинга) для получения гибридомы. После субклонирования возможен отбор клонов гибридомы, которые секретировали антитела, специфические к антигенам O25b, а также связывались с поверхностью живых штаммов Е.coli дикого типа, экспрессирующих антигены O25b. Эти мкАТ далее могут быть очищены из надосадочной жидкости гибридомы для дальнейших испытаний на специфическое связывание с антигеном O25b и, возможно, на дифференциальную аффинность связывания в отношении предпочтительного связывания с антигеном O25b по отношению к антигену O25a, а также конструирования антител, напр., для различных диагностических или терапевтических целей.

Дифференциально связывающиеся антитела, в настоящем документе также именуемые избирательными антителами, в некоторых случаях выявляются посредством скрининга против отдельных антигенов. Для повышения вероятности изоляции клонов с дифференциальным связыванием следует применять ряд селективных давлений посредством поступательного скрининга в отношении различных антигенов. Специальные стратегии отбора мкАТ включают применение компонентов токсинов O25b и O25a или других антигенов Е.coli чередующимся образом.

Способы скрининга для определения антител с необходимыми свойствами избирательного связывания могут представлять собой технологии отображения (с использованием фаговых клеток, клеток бактерий, дрожжей или млекопитающих). Реактивность может быть оценена на основании ИФА, вестерн-блоттинга или окрашивания поверхности с проточной цитометрией, напр., с использованием стандартных анализов.

Рекомбинантные антигены можно, напр., использовать для выбора антител из библиотеки антител, напр., библиотеки антител, представленных на поверхности дрожжевых клеток.

Например, изобретение, в частности, предлагает O25b-специфические антитела, которые получены с применением процесса определения антител со специфичностью к связыванию антигена O25b, напр., по схеме обнаружения и отбора специфичности. Соответственно для библиотеки антител, включающей антитела, проявляющие реактивность в отношении мишени O25b, может быть сначала выполнен отбор по реактивности в отношении мишени.

Изобретение далее, в частности, предлагает перекрестно специфические антитела, которые получены с применением процесса определения антител со специфичностью к связыванию двух мишеней, напр., антигенов O25b и O25a, например, по схеме обнаружения и отбора перекрестной реактивности. Соответственно для библиотеки антител, включающей антитела, проявляющие реактивность в отношении двух мишеней - мишеней А и В, может быть сначала выполнен отбор по реактивности в отношении одной из мишеней, напр., мишени А, с последующим отбором по реактивности в отношении другой мишени, напр., мишени В. Каждый последующий этап отбора укрепляет уровень реактивности итогового пула в отношении обеих мишеней. Соответственно этот способ особенно полезен для определения антител с перекрестной реактивностью, направленной против двух различных мишеней, и потенциалом перекрестной нейтрализации патогена. Способ может быть расширен для определения антител, проявляющих реактивность в отношении дальнейших мишеней, посредством включения дополнительных этапов обогащения в отношении дополнительной мишени (или мишеней).

В любом случае, избирательное связывание может быть далее улучшено с применением известных в данной области способов оптимизации антител. Например, к определенным областям вариабельных областей цепей иммуноглобулинов, описанным в настоящем документе, может быть применена одна или несколько стратегий оптимизации, включая перетасовку легкой цепи, сайт-специфический мутагенез, слияние CDR и направленный мутагенез выбранной CDR и/или каркасные области.

После установления дифференциально связывающих антител с необходимыми свойствами возможно определение доминантного эпитопа или эпитопов, распознаваемых антителами. Способы картирования эпитопа хорошо известны в данной области и раскрыты, например, в публикации Epitope Mapping: A Practical Approach, Westwood and Hay, eds., Oxford University Press, 2001.

Картирование эпитопов относится к определению эпитопа, с которым связывается антитело. Существует большое количество способов, известных специалистам в данной области, для определения положения эпитопов на белках или образованных углеводами, включая кристаллографический анализ комплекса антитело-антиген, конкурентные анализы, анализы экспрессии фрагментов генов и анализы на основе синтетических пептидов. Антитело, которое "связывается с тем же эпитопом", что и контрольное антитело, следующим образом. Когда два антитела распознают эпитопы, которые являются идентичными или стерически перекрывающимися эпитопами, антитела именуются связывающимися с теми же или в сущности теми же, или по существу теми же эпитопами. Общепринятым способом определения, связываются ли два антитела с идентичными или пространственно стерически эпитопами, является конкурентного анализа, который может использоваться для обнаружения любого показателя в любой форме, с применением меченого антигена или меченого антитела. Как правило, антиген иммобилизуют в 96-луночный планшет, а способность немеченых антител блокировать связывание меченых антител измеряют с использованием радиоактивных или ферментных меток.

После определения антител с требуемыми свойствами связывания такие антитела, включая фрагменты антител, могут быть получены с применением способов, известных в данной области, например, гибридомного способа или технологии рекомбинантной ДНК.

Рекомбинантные моноклональные антитела можно, например, получить путем изоляции ДНК, кодирующей требуемые цепи антител, и трансфекции рекомбинантной клетки-хозяина кодирующими последовательностями для экспрессии с использованием хорошо известных рекомбинантных экспресснойных векторов, напр., плазмид изобретения или экспрессионной кассеты (или кассет), включающей нуклеотидные последовательности, кодирующие последовательности антител. Рекомбинантные клетки-хозяева могут быть прокариотическими и эукариотическими клетками, такими как описано выше.

В соответствии с конкретным аспектом нуклеотидная последовательность может использоваться для генетических манипуляций для гуманизации антитела или улучшения аффинности или других характеристик антитела. Например, константная область может быть сконструирована для достижения большего сходства с константными областями человека для исключения иммунного ответа, если антитело используется в клинических исследованиях и лечении у человека. Может быть желательным осуществление генетических манипуляций с последовательностью антитела для достижения повышенной аффинности к мишени O25b и повышенной эффективности против MP Е.coli. Для специалиста в данной области должно быть очевидно, что в антитело может быть внесено одно или несколько изменений полинуклеотида при сохранении его связывающей способности к мишени O25b.

Производство молекул антител различными способами в целом хорошо изучено. В патенте США 6331415 (Cabilly et al.), например, описан способ рекомбинантного производства антител, при котором тяжелая и легкая цепи экспрессируются одновременно из одного вектора или двух отдельных векторов в одной клетке. Wibbenmeyer et al., (1999, Biochim Biophys Acta 1430(2): 191-202) и Lee and Kwak (2003, J. Biotechnology 101: 189-198) описывают производство моноклональных антител из отдельно продуцируемых тяжелой и легкой цепей с использованием плазмид, экспрессированных в отдельных культурах Е.coli. Ряд других способов, относящихся к производству антител, приведен, напр., в публикации Harlow, et al., ANTIBODIES: A LABORATORY MANUAL, Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, N.Y., (1988).

При необходимости антитело изобретения, напр., любое из антител, приведенных на фигуре 1 или фигуре 2, может быть секвенировано, после чего полинуклеотидная последовательность может быть клонирована в вектор для экспрессии или размножения. Последовательность, кодирующая антитело, может поддерживаться в векторе в клетке-хозяине, и эту клетку затем можно размножать и замораживать для будущего применения. Производство рекомбинантных моноклональных антител в клеточной культуре можно осуществлять посредством клонирования генов антитела из В-клеток способами, известными в данной области.

В другом аспекте изобретение предлагает выделенную нуклеиновую кислоту, включающую последовательность, которая кодирует продуцирование рекомбинантного антитела настоящего изобретения.

Нуклеиновая кислота, кодирующая антитело, может обладать любыми подходящими характеристиками и включать любые подходящие признаки или их комбинации. Так, например, нуклеиновая кислота, кодирующая антитело, может находиться в форме ДНК, РНК или их гибрида и может включать не встречающиеся в природе основания, модифицированный остов, напр., тиофосфатный остов, который повышает стабильность нуклеиновой кислоты или и то и другое. Нуклеиновая кислота предпочтительно может быть включена в экспрессионную кассету, вектор или плазмиду изобретения, включая признаки, которые улучшают необходимую экспрессию, репликацию и/или выбор в клетках-хозяевах, являющихся мишенями. Примеры таких признаков включают компонент начала репликации, компонент гена выбора, компонент промотора, компонент элемента усилителя, компонент последовательности полиаденилирования, компонент терминации и т.п., для которых известны многочисленные подходящие примеры.

В настоящем описании далее предложены рекомбинантные конструкты ДНК, включающие одну или несколько нуклеотидных последовательностей, описанных в настоящем документе. Эти рекомбинантные конструкты используются в сочетании с вектором, таким как плазмидный, фагмидный, фаговый или вирусный вектор, в который вставлена молекула ДНК, кодирующая любое раскрытое антитело.

Моноклональные антитела производятся с применением любого способа, который обеспечивает производство молекул антитела с помощью стабильных клеточных линий в культуре. Примеры подходящих способов для приготовления моноклональных антител включают гибридомные способы в соответствии с публикацией Kohler et al. (1975, Nature 256: 495-497) и способа человеческих В-клеточных гибридом (Kozbor, 1984, J. Immunol. 133: 3001; and Brodeur et al., 1987, Monoclonal Antibody Production Techniques and Applications, (Marcel Dekker, Inc., New York), pp. 51-63).

Кроме того, изобретение предлагает фармацевтические композиции, которые включают антитело, как описано в настоящем документе, и фармацевтически приемлемый носитель или наполнитель. Эти фармацевтические композиции допускают введение в соответствии с настоящим изобретением путем болюсного введения или вливания, или непрерывного вливания. Фармацевтические носители, подходящие для облегчения таких способов введения, хорошо известны в данной области.

Фармацевтически приемлемые носители в целом включают все без исключения подходящие растворители, дисперсные среды, покрытия, бактерицидные и противогрибковые средства, изотонические и задерживающие абсорбцию средства и другие, которые являются физиологически совместимыми с антителом или связанной композицией или комбинацией, предложенной изобретением. Другие примеры фармацевтически приемлемых носителей включают стерильную воду, физраствор, фосфатно-солевой буферный раствор, декстрозу, глицерин, этанол и другие, а также их комбинации.

В одном аспекте антитело может быть комбинировано с одним или более носителей, подходящих для требуемого способа введения, кантителам может быть, напр. добавлен любой носитель, выбранный из лактозы, сахарозы, крахмала, сложных эфиров целлюлозы и карбоновых кислот, стеариновой кислоты, талька, стеарата магния, оксида магния, натриевых и кальциевых солей ортофосфорной и серной кислот, камеди, желатина, альгината натрия, поливинилпирролидина, поливинилового спирта, и необязательно они могут быть далее таблетированы или включены в капсулу для целей традиционного введения. В альтернативном варианте антитело может быть растворено в физрастворе, воде, полиэтиленгликоле, пропиленгликоле, коллоидных растворах карбоксиметилцеллюлозы, в этаноле, кукурузном масле, арахисовом масле, хлопковом масле, кунжутном масле, трагантовой камеди и/или в различных буферах. Другие носители, наполнители и способы введения хорошо известны в фармацевтической области. Носитель может включать в себя с контролируемым высвобождением или материал, задерживающий высвобождение, такой как моностеарат глицерина или дистеарат глицерина отдельно или с воском, или другие материалы, хорошо известные в данной области.

Дополнительные фармацевтически приемлемые носители известны в данной области и описаны, напр., в справочнике REMINGTON'S PHARMACEUTICAL SCIENCES. Жидкие лекарственные формы могут представлять собой растворы, эмульсии или суспензии и могут включать вспомогательные вещества, такие как суспендирующие вещества, солюбилизаторы, поверхностно-активные вещества, консерванты и хелатообразующие вещества.

Предлагаются фармацевтические композиции, в которых антитело настоящего изобретения и одно или более терапевтически активных веществ включены в лекарственную форму. Стабильные лекарственные формы антитела настоящего изобретения приготавливают для хранения смешиванием указанного иммуноглобулина, обладающего необходимой степенью чистоты, с дополнительными фармацевтически приемлемыми носителями, наполнителями или стабилизаторами в виде лиофилизированных лекарственных форм или водных растворов. Лекарственные формы, используемые для введения in vivo, в частности, являются стерильными, предпочтительно в форме стерильного водного раствора. Это легко достигается путем фильтрации через стерильные фильтрующие мембраны или с применением других способов. Антитело и другие терапевтически активные вещества, раскрытые в настоящем изобретении, также могут быть включены в такие лекарственные формы, как иммунолипосомы, или заключены в микрокапсулы.

Введение фармацевтической композиции, включающей антитело настоящего изобретения, может быть осуществлено с применением ряда различных способов, в том числе, перорального, подкожного, внутривенного, интраназального, внутриушного, чрескожного, на слизистую оболочку, местного, напр., гели, мази, лосьоны, кремы и т.д., внутрибрюшинного, внутримышечного, внутрилегочного, напр., с применением ингаляционных технологий или ингаляционных систем доставки, вагинального, парентерального, ректального или внутриглазного.

Типовые лекарственные формы, используемые для парентерального введения, включают подходящие для подкожного, внутримышечного или внутривенного введения, такие как, например, стерильный раствор, эмульсия или суспензия.

В одном варианте осуществления антитело настоящего изобретения является единственным терапевтически активным веществом, вводимым больному, напр., в качестве болезнь-модифицирующей или профилактической монотерапии.

В другом варианте осуществления антитело настоящего изобретения комбинировано с другими антителами в смесь, напр., комбинированы в смесь или набор частей для целевого воздействия на Е.coli таким образом, что смесь содержит больше одного терапевтически активного средства, вводимого больному, напр., в качестве болезнь-модифицирующего или профилактического комбинированного лечения.

Далее антитело настоящего изобретения может быть введено в комбинации с одним или более другими терапевтическими или профилактическими средствами, включая, но не ограничиваясь, стандартное лечение, напр., антибиотики, стероидные и нестероидные ингибиторы воспаления, и другую терапию антителами, напр., с применением бактерицидных или противовоспалительных средств.

Комбинированное лечение, в частности, включает стандартный режим, напр., для использования при лечении инфекции MP Е.coli. Оно может включать антибиотики, напр., тигециклин, линезолид, метициллин и/или ванкомицин.

В комбинированном лечении антитело может вводиться как смесь или параллельно с одним или несколькими другими терапевтическими режимами, напр., до, одновременно или после сопутствующей терапии.

Биологические свойства антитела или соответствующих фармацевтических препаратов изобретения могут быть охарактеризованы ех vivo в экспериментах в клетке, ткани и организме в целом. Как известно в данной области, лекарственные препараты часто испытываются in vivo на животных, включая, но не ограничиваясь, на мышах, крысах, кроликах, собаках, кошках, свиньях и обезьянах, для измерения эффективности лечения лекарственного препарата для лечения заболевания или в модели заболевания или измерения фармакокинетики, фармакодинамики, токсичности и других свойств лекарственного препарата. Животные могут рассматриваться как модели заболевания. Терапевтические средства часто испытывают на мышах, включая, но не ограничиваясь, безтимусных мышах, мышах с ТКИН, ксенотрансплантатных мышах и трансгенных мышах (включая нокины и нокауты). Такие эксперименты могут предоставлять значимые данные для определения потенциала антитела для использования в качестве терапевтического или профилактического средства с соответствующим временем полужизни, эффекторной функцией, (перекрестно-) нейтрализующей активностью и/или иммунным ответом при активной или пассивной иммунотерапии. Для испытаний может использоваться любой организм, предпочтительно млекопитающие. Например, в связи с генетическим сходством с человеком, подходящими терапевтическими моделями являются приматы, нечеловекообразные обезьяны, которые могут использоваться для испытаний эффективности, токсичности, фармакокинетики, фармакодинамики, времени полужизни или других свойств составляющего предмет изобретения средства или композиции. Испытания на людях требуются прежде всего для утверждения лекарственных препаратов, в связи с чем предполагается выполнение таких экспериментов. Таким образом, антитело и соответствующие фармацевтические композиции настоящего изобретения могут испытываться на людях для определения их терапевтической или профилактической эффективности, токсичности, иммуногенности, фармакокинетики и/или других клинических свойств.

Изобретение также предлагает антитело, представляющее предмет изобретения, для диагностических целей, напр., для применения в способах обнаружения и количественного определения концентрации бактериальной нагрузки или антитела как иммунореагента, или мишени в образце биологической жидкости.

Изобретение также предлагает способы определения степени сепсиса или инфекции MP Е.coli в биологическом образце, напр., нагрузки MP Е.coli в образце, таком как жидкость организма, включая этап контакта образца с антителом изобретения. Для антитела изобретения могут использоваться любые известные способы анализа, такие как конкурентно-связывающие анализы, прямой или косвенный сэндвич-анализы, анализы иммунопреципитации и иммуноферментные анализы (ИФА).

Предпочтительный диагностический анализ выполняется следующим образом. Антитела, специфические к антигену-мишени, иммобилизуют на латексных гранулах, которые инкубируют в с бактериями, присутствующими в жидкостях организма или выделенными из них. Положительная реакция может быть определена невооруженным взглядом в связи с агрегацией (с возможным окрашиванием) латексных гранул в присутствии соответствующего родственного антигена, экспрессируемого на поверхности бактерий.

Жидкость организма, используемая в соответствии с настоящим изобретением, включает биологические образцы больного, такие как экстракт из ткани, моча, кровь, сыворотка, стул и мокрота.

В одном варианте осуществления способ включает контакт твердой подложки с избытком фрагмента антитела определенного типа, который, в частности, образует комплекс с мишенью при условиях, обеспечивающих прикрепление антитела к поверхности твердой подложки. Полученная твердая подложка, к которой прикреплено антитело, далее контактирует с образцом биологической жидкости таким образом, что мишень в биологической жидкости связывается с антителом и образует комплекс мишень-антитело. Комплекс может быть меченым обнаруживаемым маркером. В альтернативном варианте мишень или антитело может быть помечено перед образованием комплекса. Например, обнаруживаемый маркер (метка) может быть конъюгировано с антителом. Далее комплекс может быть обнаружен и количественно определен, обеспечивая таким образом обнаружение и количественное определение концентрации мишени в образце биологической жидкости.

Для конкретных случаев применения антитело изобретения конъюгируется с меткой или репортерной группой, выбранной из группы, включающей органические молекулы, ферментные метки, радиоактивные метки, цветовые метки, флуоресцентные метки, хромогенные метки, люминесцентные метки, гаптены, дигоксигенин, биотин, комплексы металлов, металлы, коллоидное золото и их смеси. Антитела, конъюгированные с метками или репортерными группами, могут использоваться, например, в системах анализа или диагностических методах, напр., для диагностики инфекции Е.coli или связанных с ними состояний заболевания.

Антитело изобретения может быть конъюгировано с другими молекулами, которые обеспечивают простое обнаружение указанного конъюгата, например, в анализах связывания (напр., ИФА) и исследованиях связывания.

Другой аспект настоящего изобретения предлагает набор, содержащий антитело, который может включать, помимо одного или более антител, различные диагностические или терапевтические средства. Набор также может включать инструкции по применению в диагностическом или терапевтическом способе. Такие инструкции могут быть, например, приведены на изделии, включенном в набор, напр., на инструментах или изделии для приготовления биологического образца для диагностических целей, таких как разделение клеточной и/или белоксодержащей фракции перед определением соответствующего нагрузки MP Е.coli для диагностирования заболевания. Предпочтительно такой набор включает антитело и диагностическое средство или реактив, который может использоваться в одном или более диагностических способах, описанных в настоящем документе. В другом предпочтительном варианте осуществления набор включает антитело, напр., в лиофилизированной форме, необязательно включая инструкцию и среду для разведения лиофилизата, и/или в сочетании с фармацевтически приемлемым носителем (или носителями), которое может быть смешано перед применением для получения инъекционной композиции для применения в ближайшие сроки.

Антитела, обозначенные 8D5-1G10 и 8D10-C8, в частности, любая легкая цепь и/или тяжелая цепь антитела, далее характеризуются биологическим материалом, зарегистрированным в DSMZ - Deutsche Sammlung von Mikroorganismen und Zellkulturen, Mascheroder Weg 1b / Inhoffenstraβe 7B, 38124 Braunschweig (DE).

Номера регистрации относятся к трансформированным культурам Е.coli, каждая из которых содержит плазмиду, клонированную со вставкой представляющего интерес гена. Представляющие интерес гены являются вариабельными доменами тяжелых и легких цепей мышиного моноклонального антитела 8D5-1G10 (IgG3) и тяжелых и легких цепей мышиного моноклонального антитела 8D10-C8 (IgG2b).

DSM 26763 представляет собой клетку-хозяина Е.coli, трансформированную плазмидой, включающей кодирующую последовательность вариабельного домена легкой цепи 8D5-1G10 (8D5-1G10-LC). Escherichia coli 8D5-1G10-VL = DSM 26763, дата регистрации: 15 января 2013 г.; лицо, представляющее для регистрации: Arsanis Biosciences GmbH, Вена, Австрия.

DSM 26762 представляет собой клетку-хозяина Е.coli, трансформированную плазмидой, включающей кодирующую последовательность вариабельного домена тяжелой цепи 8D5-1G10 (8D5-1G10-HC). Escherichia coli 8D5-1G10-VH = DSM 26762, дата регистрации: 15 января 2013 г.; лицо, представляющее для регистрации: Arsanis Biosciences GmbH, Вена, Австрия.

DSM 28171 представляет собой клетку-хозяина Е.coli, трансформированную плазмидой, включающей кодирующую последовательность вариабельного домена легкой цепи 8D10-C8 (8D10-C8-LC). Escherichia coli 8D10-C8-VL = DSM 28171, дата регистрации: 11 декабря 2013 г.; лицо, представляющее для регистрации: Arsanis Biosciences GmbH, Вена, Австрия.

DSM 28172 представляет собой клетку-хозяина Е.coli, трансформированную плазмидой, включающей кодирующую последовательность вариабельного домена тяжелой цепи 8D10-C8 (8D10-C8-НС). Escherichia coli 8D10-C8-VH = DSM 28172, дата регистрации: 11 декабря 2013 г.; лицо, представляющее для регистрации: Arsanis Biosciences GmbH, Вена, Австрия.

Предмет следующих определений следует рассматривать как варианты осуществления настоящего изобретения:

1. Выделенное антитело, которое специфически связывается с антигеном O25b штаммов Е.coli, включающее по крайней мере вариабельную область тяжелой цепи антитела (VH), которая включает любую из последовательностей CDR1-CDR3, перечисленных в таблице 1, которые обозначены в соответствии с номенклатурой Кэбота, или перечисленных в таблице 2, которые обозначены в соответствии с номенклатурой IMGT, или функционально активный вариант любой из этих CDR.

2. Антитело по определению 1, которое

А)

выбрано из группы, включающей элементы i-xiv, в которой

i)

антитело, которое содержит

а) CDR1, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 1, и

б) CDR2, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 2, и

в) CDR3, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 3;

ii)

антитело, которое содержит

а) CDR1, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 7, и

б) CDR2, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 8, и

в) CDR3, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 9;

iii)

антитело, которое содержит

а) CDR1, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 11, и

б) CDR2, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 12, и

в) CDR3, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 13;

iv)

антитело, которое содержит

а) CDR1, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 17, и

б) CDR2, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 18, и

в) CDR3, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 19;

v)

антитело, которое содержит

а) CDR1, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 23, и

б) CDR2, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 24, и

в) CDR3, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 25;

vi)

антитело, которое содержит

а) CDR1, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 29, и

б) CDR2, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 30, и

в) CDR3, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 31;

vii)

антитело, которое содержит

a) CDR1, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 34, и

б) CDR2, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 35, и

в) CDR3, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 36;

viii)

антитело, которое содержит

а) CDR1, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 29, и

б) CDR2, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 40, и

в) CDR3, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 41;

ix)

антитело, которое содержит

а) CDR1, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 44, и

б) CDR2, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 45, и

в) CDR3, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 46;

х)

антитело, которое содержит

a) CDR1, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 50, и

б) CDR2, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 51, и

в) CDR3, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 52;

xi)

антитело, которое содержит

а) CDR1, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 50, и

б) CDR2, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 55, и

в) CDR3, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 56;

xii)

антитело, которое содержит

а) CDR1, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 57, и

б) CDR2, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 58, и

в) CDR3, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 59;

xiii)

антитело, которое содержит

а) CDR1, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 61, и

б) CDR2, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 62, и

в) CDR3, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 63;

xiv)

антитело, которое содержит

а) CDR1, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 66, и

б) CDR2, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 67, и

в) CDR3, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 68; или

В) антитело, которое является функционально активным вариантом родительского антитела, являющегося любым из членов группы А, которая включает по крайней мере один функционально активный вариант любой из CDR1, CDR2 или CDR3 родительского антитела.

3. Антитело по определению 1 или 2, включающее

а) аминокислотную последовательность VH, выбранную из любой из последовательностей VH, как изображено на фигуре 2, предпочтительно аминокислотную последовательность тяжелой цепи (ТЦ) антитела, которая является любой из SEQ ID 184 - SEQ ID 231 или любой из SEQ ID 312 - SEQ ID 315;

б) аминокислотную последовательность тяжелой цепи (ТЦ) антитела, которая является любой из SEQ ID 184 - SEQ ID 231 или любой из SEQ ID 312 - SEQ ID 315; или

в) аминокислотную последовательность тяжелой цепи (ТЦ), антитела, которая является любой из SEQ ID 184 - SEQ ID 231 или любой из SEQ ID 312 - SEQ ID 315 и которая далее содержит делецию С-концевой аминокислоты и/или точковую мутацию Q1E, если первой аминокислотой последовательности VH является Q.

4. Антитело по любому из определений 1-3, которое далее включает вариабельную область легкой цепи антитела (VL), которая включает любую из последовательностей CDR4-CDR6, перечисленных в таблице 1, которые обозначены в соответствии с номенклатурой Кэбота, или перечисленных в таблице 2, которые обозначены в соответствии с номенклатурой IMGT, или функционально активный вариант любой из этих CDR.

5. Антитело по определению 4, которое

А)

выбрано из группы, включающей элементы i-xiv, в которой

i)

антитело, которое содержит

а) CDR4, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 4, и

б) CDR5, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 5, и

в) CDR6, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 6;

ii)

антитело, которое содержит

a) CDR4, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 10, и

б) CDR5, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 5, и

в) CDR6, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 6;

iii)

антитело, которое содержит

а) CDR4, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 14, и

б) CDR5, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 15, и

в) CDR6, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 16;

iv)

антитело, которое содержит

а) CDR4, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 20, и

б) CDR5, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 21, и

в) CDR6, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 22;

v)

антитело, которое содержит

а) CDR4, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 26, и

б) CDR5, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 27, и

в) CDR6, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 28;

vi)

антитело, которое содержит

а) CDR4, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 20, и

б) CDR5, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 32, и

в) CDR6, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 33;

vii)

антитело, которое содержит

а) CDR4, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 37, и

б) CDR5, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 27, и

в) CDR6, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 38;

viii)

антитело, которое содержит

а) CDR4, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 42, и

б) CDR5, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 32, и

в) CDR6, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 43;

ix)

антитело, которое содержит

а) CDR4, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 47, и

б) CDR5, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 48, и

в) CDR6, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 49;

х)

антитело, которое содержит

а) CDR4, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 53, и

б) CDR5, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 32, и

в) CDR6, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 54;

xi)

антитело, которое содержит

а) CDR4, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 57, и

б) CDR5, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 32, и

в) CDR6, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 54;

xii)

антитело, которое содержит

а) CDR4, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 26, и

б) CDR5, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 27, и

в) CDR6, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 60;

xiii)

антитело, которое содержит

а) CDR4, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 64, и

б) CDR5, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 65, и

в) CDR6, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 38;

xiv)

антитело, которое содержит

а) CDR4, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 69, и

б) CDR5, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 70, и

в) CDR6, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 71;

или

В) антитело, которое является функционально активным вариантом родительского антитела, являющегося любым из членов группы А, которая включает по крайней мере один функционально активный вариант любой из CDR4, CDR5 или CDR6 родительского антитела.

6. Антитело по определению 4 или 5, включающее аминокислотную последовательность VL, выбранную из любой из последовательностей VL, как изображено на фигуре 2, предпочтительно аминокислотную последовательность легкой цепи (ЛЦ) антитела, которая является любой из SEQ ID 248 - SEQ ID 295 или любой из SEQ ID 316 - SEQ ID 319, или содержит аминокислотную последовательность легкой цепи (ЛЦ) антитела, которая является любой из SEQ ID 248 - SEQ ID 295 или любой из SEQ ID 316 - SEQ ID 319.

7. Антитело по определению 1, которое является перекрестно специфическим в отношении связывания с эпитопом, общим для антигенов O25a и O25b.

8. Антитело по определению 7, которое

А)

выбрано из группы, включающей элементы i-vii, в которой

i)

антитело, которое содержит

а) CDR1, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 72, и

б) CDR2, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 73, и

в) CDR3, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 74;

ii)

антитело, которое содержит

а) CDR1, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 77, и

б) CDR2, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 78, и

в) CDR3, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 79;

iii)

антитело, которое содержит

а) CDR1, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 81, и

б) CDR2, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 82, и

в) CDR3, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 83;

iv)

антитело, которое содержит

а) CDR1, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 84, и

б) CDR2, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 85, и

в) CDR3, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 86;

v)

антитело, которое содержит

а) CDR1, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 77, и

б) CDR2, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 89, и

в) CDR3, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 90;

vi)

антитело, которое содержит

а) CDR1, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 92, и

б) CDR2, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 93, и

в) CDR3, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 94;

vii)

антитело, которое содержит

а) CDR1, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 95, и

б) CDR2, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 96, и

в) CDR3, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 97;

или

В) антитело, которое является функционально активным вариантом родительского антитела, являющегося любым из членов группы А, которая включает по крайней мере один функционально активный вариант любой из CDR1, CDR2 или CDR3 родительского антитела.

9. Антитело по определению 7 или 8, включающее

а) аминокислотную последовательность VH, выбранную из любой из последовательностей VH, как изображено на фигуре 2, предпочтительно аминокислотную последовательность тяжелой цепи (ТЦ) антитела, которая является любой из SEQ ID 232 - SEQ ID 247 или любой из SEQ ID 312 - SEQ ID 315;

б) аминокислотную последовательность тяжелой цепи (ТЦ) антитела, которая является любой из SEQ ID 232 - SEQ ID 247 или любой из SEQ ID 312 - SEQ ID 315; или

в) аминокислотную последовательность тяжелой цепи (ТЦ), антитела, которая является любой из SEQ ID 232 - SEQ ID 247 или любой из SEQ ID 312 - SEQ ID 315 и которая далее содержит делецию С-концевой аминокислоты и/или точковую мутацию Q1E, если первой аминокислотой последовательности VH является Q.

10. Антитело по любому из определений 7-9, которое далее включает вариабельную область легкой цепи антитела (VL), которая включает любую из последовательностей CDR4-CDR6, перечисленных в таблице 1, которые обозначены в соответствии с номенклатурой Кэбота, или перечисленных в таблице 2, которые обозначены в соответствии с номенклатурой IMGT, или функционально активный вариант любой из этих CDR.

11. Антитело по определению 10, которое

А)

выбрано из группы, включающей элементы i-vi, в которой

i)

антитело, которое содержит

а) CDR4, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 75, и

б) CDR5, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 32, и

в) CDR6, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 76;

ii)

антитело, которое содержит

а) CDR4, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 75, и

б) CDR5, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 32, и

в) CDR6, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 80;

iii)

антитело, которое содержит

а) CDR4, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 69, и

б) CDR5, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 70, и

в) CDR6, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 71;

iv)

антитело, которое содержит

а) CDR4, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 42, и

б) CDR5, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 87, и

в) CDR6, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 88;

v)

антитело, которое содержит

а) CDR4, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 37, и

б) CDR5, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 27, и

в) CDR6, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 91;

vi)

антитело, которое содержит

а) CDR4, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 42, и

б) CDR5, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 32, и

в) CDR6, содержащую аминокислотную последовательность с SEQ ID 88;

или

В) антитело, которое является функционально активным вариантом родительского антитела, являющегося любым из членов группы А, которая включает по крайней мере один функционально активный вариант любой из CDR4, CDR5 или CDR6 родительского антитела.

12. Антитело по определению 10 или 11, включающее аминокислотную последовательность VL, выбранную из любой из последовательностей VL, как изображено на фигуре 2, предпочтительно аминокислотную последовательность легкой цепи (ЛЦ) антитела, которая является любой из SEQ ID 296 - SEQ ID 311 или любой из SEQ ID 316 - SEQ ID 319, или содержит аминокислотную последовательность легкой цепи (ЛЦ) антитела, которая является любой из SEQ ID 296 - SEQ ID 311 или любой из SEQ ID 316 - SEQ ID 319.

13. Антитело по любому из определений 1-12, которое включает

а) последовательности CDR1-CDR6 любого из антител, перечисленных в таблице 1, или

б) последовательности VH и VL любого из антител, приведенных на фигуре 2, или

в) последовательности ТЦ и ЛЦ любого из антител, приведенных на фигуре 2, или

г) которое является функционально активным вариантом родительского антитела, характеризующегося последовательностями а-в,

предпочтительно при этом

i. функционально активный вариант содержит по крайней мере один из функционально активных вариантов любой из CDR1-CDR6 родительского антитела, и/или

ii. функционально активный вариант содержит по крайней мере одну точковую мутацию в каркасной области любой из последовательностей VH и VL и/или последовательностей ТЦ и ЛЦ родительского антитела, необязательно содержащих точковую мутацию Q1E, если первая аминокислота каркасной области VH (VH FR1) является Q;

и далее при этом

iii. функционально активный вариант обладает специфичностью к связыванию того же эпитопа, что и родительское антитело, и/или

iv. функционально активный вариант является человеческим, гуманизированным, гибридным или мышиным вариантом и/или вариантом с созревшей аффинностью родительского антитела.

14. Антитело по определению 13, которое является функционально активным производным антитела, обозначенного 8D5-1G10 или 8D10-C8, которое включает по крайней мере одну точковую мутацию в любой из последовательностей CDR1-CDR6, предпочтительно при этом антитело обладает специфичностью к связыванию того же эпитопа, что и антитело, обозначенное 8D5-1G10 и 8D10-C8 соответственно.

15. Антитело по любому из определений 1-14, включающее функционально активный вариант CDR любой из последовательностей CDR, перечисленных в таблице 1, в котором функционально активный вариант CDR включает по крайней мере одно из следующего:

а) 1, 2 или 3 точковые мутации в родительской последовательности CDR и/или

б) 1 или 2 точковые мутации в любом из четырех С-концевых или четырех N-концевых, или четырех центральных положений аминокислот родительской последовательности CDR, и/или

в) по крайней мере 60% идентичность последовательности с родительской последовательностью CDR.

16. Антитело по определению 15, в котором функционально активный вариант CDR включает 1 или 2 точковые мутации в любой последовательности CDR, состоящей меньше чем из 4 или 5 аминокислот.

17. Антитело по любому из определений 1-16, которое включает последовательности CDR и каркасные последовательности и в котором по крайней мере одна из последовательностей CDR и каркасных последовательностей включает человеческие, гуманизированные, гибридные, мышиные последовательности или последовательности с созревшей аффинностью, предпочтительно в котором каркасные последовательности взяты из антитела IgG.

18. Антитело по любому из определений 1-17, которое обладает аффинностью к связыванию с антигеном O25b с Kd меньше 10^-6М, предпочтительно меньше 10^-7М или меньше 10^-8М.

19. Антитело по любому из определений 1-18, которое предпочтительно связывается с антигеном O25b по отношению к антигену O25a Е.coli или обладает по крайней мере равной аффинностью к обоим антигенам.

20. Антитело по любому из определений 1-19, которое представляет собой полноразмерное моноклональное антитело, фрагмент данного антитела, включающий по крайней мере один домен антитела, содержащий антигенсвязывающий участок, или гибридный белок, включающий по крайней мере один домен антитела, содержащий антигенсвязывающий участок.

21. Применение антитела по любому из определений 1-19 при лечении больного, подверженного риску или страдающего от инфекции Е.coli, включающего введение больному эффективного количество антитела для ограничения инфекции в организме больного или улучшения состояния заболевания, вызванного указанной инфекцией, предпочтительно для лечения или профилактики пиелонефрита, вторичной бактериемии, сепсиса, перитонита, менингита и ИВЛ-ассоциированной пневмонии.

22. Фармацевтический препарат, включающий антитело по любому из определений 1-20, предпочтительно включающий лекарственную форму для парентерального применения или нанесения на слизистую оболочку, необязательно содержащий фармацевтически приемлемый носитель или наполнитель.

23. Антитело по любому из определений 1-20 для диагностического применения в целях определения инфекции Е.coli или бактериемии у больного, вызванной штаммом Е.coli, такой как инфекции верхних и нижних мочевых путей, включая цистит или уретрит, восходящий или гематогенный пиелонефрит, особенно у пациентов с диабетом, а также с бактериемией, сепсисом, перитонитом или желудочно-кишечной колонизацией.

24. Диагностический препарат антитела по любому из определений 1-20, включающий антитело и дополнительный диагностический реактив в композиции или наборе частей, содержащей компоненты:

а) антитело и

б) дополнительный диагностический реактив;

в) и необязательно твердую фазу для иммобилизации по крайней мере одного антитела и диагностического реактива.

25. Способ диагностирования инфекции E.coli или бактериемии у больного, вызванной штаммом E.coli, включающий

а) наличие антитела по любому из определений 1-20 и

б) определение, вступает ли антитело в специфическую иммунную реакцию с антигеном O25b в испытываемом биологическом образце больного, предпочтительно с применением агглютинационной пробы, таким образом диагностируя вызванную MP E.coli инфекцию или бактериемию.

26. Выделенная нуклеиновая кислота, кодирующая антитело по любому из определений 1-20.

27. Экспрессионная кассета или плазмида, включающая кодирующую последовательность для экспрессии

а) VH и/или VL антитела по любому из определений 1-20 или

б) ТЦ и/или ЛЦ антитела по любому из определений 1-20.

28. Клетка-хозяин, содержащая экспрессионную кассету или плазмиду по определению 27.

29. Способ производства антитела в соответствии с любым из определений 1-20, при котором клетка-хозяин в соответствии с определением 28 культивируется или поддерживается в условиях производства указанного антитела.

Предшествующее описание будет более понятно со ссылкой на следующие примеры. Однако такие примеры являются исключительно иллюстративными для способов реализации одного или более вариантов осуществления настоящего изобретения и не должны рассматриваться как ограничивающие объем изобретения.

ПРИМЕРЫ

Пример 1. Получение O25b-специфических антител

Неинкапсулированный мутант представительного штамма ST131-O25b:Н4 81009 (81009Δkps::kan, [Szijarto et al, FEMS Microbiol Lett, 2012]) получали путем замещения кластера kps (кодирующего синтез капсулы) кассетой, кодирующей устойчивость к канамицину. Сублетальные дозы живых или инактивированных формальдегидом клеток данного мутанта, а также сублетальные дозы родительского штамма дикого типа использовали для иммунизации 4 мышей с двухнедельным интервалом. Далее образцы сыворотки, полученной у мышей, анализировали и селезенку мыши с выявленным наибольшим титром IgG против антигена O25b (с применением ИФА, иммуноблоттинга и окрашивания поверхности) использовали для получения гибридомы. После субклонирования отбирали несколько клонов гибридомы, которые секретировали антитела, специфические к очищенным антигенам O25b, а также связывались с поверхностью живых штаммов E.coli дикого типа, экспрессирующих антигены O25b. Полученные мышиные антитела охватывали все возможные мышиные изотипы, т.е. IgG1, IgG2a, IgG2b, and IgG3. Вариабельные домены тяжелой (ТЦ) и легкой (ЛЦ) цепей O25b-специфических мкАТ амплифицировали из клонов гибридомы с использованием ПЦР-РВ с вырожденными праймерами тяжелой и легкой цепи и секвенировали. Последовательности анализировали с применением программы BLAST для базы данных Ig, а также IMGT/V-QUEST, и определяли области CDR в соответствии с номенклатурой Кэбота (фигура 1, таблица 1).

Выбранные клоны гибридомы экспрессировали как гибридные мкАТ (т.е. мышиные вариабельные области сливали с человеческими константными доменами IgG1, а также легкими каппа-цепями). Кроме того, гуманизированные мкАТ получали путем трансплантации гипервариабельных мышиных последовательностей (CDR) в человеческие каркасные последовательности, которые были по прогнозам in silico определены как наиболее совместимые с исходными мышиными каркасами. Гибридные и гуманизированные мкАТ были экспрессированы клетками млекопитающих, очищены на колонках с белком А и использованы в анализах, приведенных в последующих примерах (см. ниже).

Пример 2. Характеристики связывания

Специфичность гибридных и гуманизированных антител был подтверждена иммуноблоттингом с использованием очищенного ЛПС (фигура 3). Все мкАТ распознавали молекулы ЛПС из штаммов ST131, содержащих антиген O25b, однако проявляли различный потенциал перекрестного реагирования на антигены ЛПС O25a. Тогда как некоторые мкАТ реагировали исключительно с антигеном O25b, другие (из линии 4D5 - фиг. 4ii; средний вид) перекрестно реагировали на O25a. Ни одно из мкАТ не реагировало с молекулами ЛПС, несущими несвязанный О-антиген (напр., O55). Характеристики связывания антител далее исследовали по методу биослойной интерферометрии (БСИ). Связывание мкАТ O25b (гибридных и гуманизированных) с биотинилированным полисахаридом O25b выполняли путем иммобилизации биотинилированного антигена на стрептавидиновых сенсорах (ForteBio, Pall Life Sciences) и контроля ассоциации мкАТ (8-10 мкг/мл) с предварительно нагруженными сенсорами в течение 10 мин в ФБС, содержащей 1% БСА, с последующей диссоциацией (5 минут) в том же буфере. Значения K_d, k_on и k_off определяли с применением программного обеспечения Data Analysis 7 (ForteBio, Pall Life Sciences). Все исследованные мкАТ продемонстрировали аффинность авидного связывания 9,5-211 нМ в данной модели (фиг. 4).

Связывание мкАТ с нативным антигеном на бактериальной поверхности испытывали с применением проточной цитометрии. Все антитела связывались с несколькими различными клиническими изолятами, определенными как штаммы ST131-O25b:H4. В отношении связывания со штаммами, экспрессирующими антиген O25a, были определены два типа мкАТ. Одна группа не связывалась с поверхностью штаммов O25a, тогда как другая группа мкАТ перекрестно реагировала со штаммами, экспрессирующими родственные штаммы O25a. Однако ни одно из мкАТ не связывалось с любыми штаммами Е.coli, экспрессирующими неродственные антигены О-типов (фиг. 5i). Наблюдалась хорошая корреляция между перекрестной реактивностью, выявленной с применением проточно-цитометрических измерений (фигура 5i) и иммуноблоттинга (фигура 3).

Для более подробного исследования поверхностного связывания штамм ST131 3O (Novais A. et al, Antimicrob Agents Chemother 2012 56(5): 2763-6) культивировали в ЛБ (т.е. стандартной лабораторной питательной среде) или инактивированной человеческой сыворотке (для имитации in vivo-подобных условий роста) до середины логарифмического роста и после промывания окрашивали очищенными O25b-реагирующими мкАТ в диапазоне разбавления 0,025-40 мкг/мл. После промывания меченые Alexa 488 антитела класса IgG применяли в концентрации 4 мкг/мл и измеряли интенсивность флуоресценции с применением проточной цитометрии (проточный цитометр BD Accuri С6). Представительный эксперимент, показанный на фиг. 5ii А подтвердил, что все испытанные мкАТ были способны связываться с поверхностью исследуемого штамма дозозависимым образом. Интенсивность связывания несколько снижалась при росте бактерий в сыворотке (по сравнению с ЛБ), однако оставалась высоко значимой для всех испытанных мкАТ (фиг. 5ii В). Для подтверждения того, что поверхностное связывание не зависит от генетических различий между штаммами ST131-O25b, исследовали хорошо охарактеризованную панель штаммов ST131, включающую различные пульсотипы (Peirano et al, Antimicrob. Agents Chemother. 2014, 58(7): 3762). Данные, приведенные на фиг. Fig. 5ii С, подтвердили, что все три исследованных мкАТ, сильно окрашивали поверхность всех представительных штаммов, за исключением пульсотипа О, который согласно опубликованным данным принадлежит к линии ST131:O16. В связи с этим эксперименты с проточной цитометрией доказывают широкий спектр связывания в пределах линии ST131:O25b, и это связывание сохранялось при выращивании бактерий в человеческой сыворотке (т.е. in vivo-подобных условиях).

Пример 3. Бактерицидное действие O25b-специфических мкАТ

Потенциальное защитное действие выбранных O25b-специфических гибридных мкАТ и гуманизированных мкАТ (проявляющих и не проявляющих перекрестную реактивность к O25a) испытывали на мышиной летальной модели бактериемии. Группам из 5 мышей вводили 100 мкг очищенных мкАТ в ФБС внутрибрюшинно. Через 24 ч мышей заражали внутривенно смертельной дозой (ранее определенной в контрольном эксперименте) штамма Е.coli ST131 81009 ([Szijarto et al, (FEMS Microbiol Lett 2012; 332: 131-6)), экспрессирующего антиген O25b. Через 24 ч мышей заражали внутривенно смертельной дозой (10⁸ КОЕ, как определено в контрольном эксперименте) штамма Е.coli ST131 81009 (Szijarto et al. FEMS Microbiol Lett 2012; 332: 131-6) с подтвержденной экспрессией антигена O25b. Летальность мышей контролировали ежедневно. На фиг. 6i показано, что несмотря на смертельный результат 100% мышей, иммунизированных 100 мкг контрольных мкАТ с нерелевантной специфичностью, вследствие заражения, все испытанные O25b-специфические мкАТ показали статистически значимое (логарифмический ранговый критерий) повышение выживаемости за период более 14 суток после заражения.

Для подтверждения этих данных in vivo бактерицидное действие очищенных мкАТ также испытывали in vitro. Бактерии культивировали до середины фазы логарифмического роста в бульоне Луриа-Бертани (ЛБ) или термоинактивированной сыворотке здорового человека. 2 мл бактериальных культур дважды промывали в ФБС. Анализ бактерицидной активности сыворотки (БАС) выполняли в истощенной на 50% смеси сывороток человека, разбавленной ФСБД, дополненным кальцием и магнием. Реакционная смесь содержала ~5×10³ КОЕ из бактериальной суспензии в середине логарифмического роста, выращенной в ЛБ или сыворотке, и 2,5 или 10 мкг/мл мкАТ соответственно. Смеси без каких-либо антител и с изотипически сходным нерелевантным мкАТ были включены в качестве контроля. Бактерии были пронумерованы путем посева на планшет соответствующих разведений через 3 ч (в случае бактерий, выращенных в ЛБ) или 5 ч (в случае бактерий, выращенных в сыворотке) инкубации при 37°С со встряхиванием при 410 об/мин. Уничтожение, опосредованное специфическими мкАТ, выражали в процентах по отношению к инокуляту (начальное число КОЕ) (фиг. 7i) или

(фиг. 7ii).

Как показано на фиг. 7i, все испытанные мкАТ были способны значимо снизить КОЕ за 3-часовой период исследования. Напротив, бактерии, смешанные с нерелевантным мкАТ, или без антител показали рост в данной среде. В случае инактивации комплемента в образцах сыворотки (путем инкубации в течение 30 мин при 56°С) уничтожение бактерий не наблюдалось для всех мкАТ (данные не показаны). Эти результаты подтверждают, что O25b-специфические мкАТ (проявляющие или не проявляющие перекрестную реактивность к O25a) могут вызывать комплемент-опосредованное бактерицидное действие.

Дополнительные эксперименты подтвердили эту активность (фиг. 7ii). При том, что изотипически сходное нерелевантное мкАТ не проявляет бактерицидное действие, все мкАТ к O25b были способны обеспечивать значимое снижение КОЕ за 3-часовой период исследования в отношении обоих испытанных штаммов ST131-O25b (фиг. 7iiA, В и D). Уничтожение бактерий не наблюдалось для всех мкАТ в случае термоинактивации комплемента в образцах сыворотки (путем инкубации в течение 30 мин при 56°С, данные не показаны). Эти результаты подтверждают, что O25b-специфические мкАТ (проявляющие или не проявляющие перекрестную реактивность к O25a) могут вызывать комплемент-опосредованное бактерицидное действие. Для подтверждения значимости данного механизма действия для наблюдаемой защиты in vivo (см. выше) нами был выполнен тот же анализ с использованием бактерий, выращенных в сыворотке человека (в отличие от среды культивирования бактерий, т.е. ЛБ). Значимость роста бактерий в "in vivo-подобных" условиях заключается в том, что поверхность бактерий и соответственно доступность антигенов могут значительно отличаться при росте в различных условиях в связи с изменением положений экспрессии поверхностных бактериальных компонентов (Miajlovic Н et al., Infect. Immun. 82: 298-305, 2014.) Как показано на фигуре 7iiC, O25b-специфические гуманизированные мкАТ были способны проявить значимое уничтожение бактерий даже после предварительного кондиционирования (т.е. роста) бактерий в сыворотке человека. Однако для максимального бактерицидного действия потребовалась увеличенная доза мкАТ (10 мкг/мл) и более продолжительный период инкубации (5 ч).

Пример 4. Потенциал нейтрализации эндотоксинов O25b-специфических мкАТ

Поскольку ЛПС обладает эндотоксическим потенциалом, мы сочли значимым выполнить испытания потенциальной нейтрализующей активности мкАТ, связывающихся с антигеном O25b через молекулы ЛПС.

Мыши являются наследственно более устойчивыми к эндотоксину, чем люди, однако их можно сделать восприимчивыми к незначительным количествам очищенного ЛПС путем введения гепатотоксического углевода D-GalN (Galanos C et al., Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A 76: 5939-5943, 1979). Мышей иммунизировали путем введения 100 или 25 мкг профилактически за 24 ч до одновременного применения в/б сенсибилизации с 20 мг/мышь D-GalN и в/в заражения смертельной дозой (1 нг) очищенного ЛПС O25b. На фигуре 8 показаны представительные эксперименты для гуманизированных мкАТ, демонстрирующие значимую и дозозависимую защиту от летальной эндотоксемии.

Для дальнейшего прояснения данного механизма действия гуманизированные O25b-специфические мкАТ исследовали в анализах нейтрализации in vitro. ЛПС передает сигналы через рецепторный комплекс толл-подобный рецептор-4 (TLR-4) / MD2, который отвечает за вызывание септического шока in vivo. Для оценки нейтрализации сигнализации ЛПС через комплекс TLR-4 мы использовали коммерческую систему HEK-Blue (InvivoGen). В данном анализе используются клетки HEK, трансформированные для экспрессии человеческого комплекса TLR-4. Сигнализацию через этот рецептор индуцирует секрецию фермента, которая выражается количественно через хромогенный субстрат. На фиг. 9А показано, что очищенный ЛПС O25b в данном анализе проявляет дозозависимую активность. Нейтрализующие мкАТ способны дозозависимым образом ингибировать сигнал, вызываемый стандартной концентрацией эндотоксина (фиг. 9В). Значения IC50 (концентрация мкАТ, обеспечивающая нейтрализацию в размере 50% от максимального действия) делают возможным сравнение потенциала нейтрализации различных мкАТ. На фиг. 9С представлены данные по нейтрализующей эффективности представительных гуманизированных O25b-реагирующих антител.

--->

ПЕРЕЧЕНЬ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЕЙ

<110> АРЗАНИС Байэусайнсис Гмбх

<120> ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ АНТИТЕЛ, СПЕЦИФИЧЕСКИХ К E. COLI

<130> AR009P

<160> 319

<170> PatentIn версия 3.5

<210> 1

<211> 9

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 1

Phe Ser Leu Thr Ser Tyr Gly Val Ser

1 5

<210> 2

<211> 16

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 2

Val Val Trp Gly Asp Gly Ser Thr Asn Tyr His Ser Ala Leu Ile Ser

1 5 10 15

<210> 3

<211> 9

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 3

Ala Lys Leu Gly Thr Gly Gly Asp Tyr

1 5

<210> 4

<211> 10

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 4

Ser Ala Thr Ser Ser Val Gly Tyr Met His

1 5 10

<210> 5

<211> 7

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 5

Asp Thr Ser Asn Leu Ala Ser

1 5

<210> 6

<211> 9

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 6

Phe Gln Gly Ser Gly Tyr Pro Phe Thr

1 5

<210> 7

<211> 9

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 7

Leu Ser Leu Thr Ser Tyr Gly Val Ser

1 5

<210> 8

<211> 16

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 8

Val Ile Trp Gly Asp Gly Ser Thr Asn Tyr His Ser Ala Leu Ile Ser

1 5 10 15

<210> 9

<211> 9

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 9

Ala Lys Ile Gly Thr Gly Gly Asp Tyr

1 5

<210> 10

<211> 10

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 10

Ser Ala Ser Ser Ser Val Ser Tyr Met His

1 5 10

<210> 11

<211> 9

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 11

Phe Ser Leu Thr Ser Tyr Gly Val His

1 5

<210> 12

<211> 16

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 12

Val Ile Trp Ala Asp Gly Asn Thr Asn His Asn Ser Ala Leu Met Ser

1 5 10 15

<210> 13

<211> 13

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 13

Val Arg Asp Gly Tyr Ser Thr Asp Tyr Ala Leu Asp Tyr

1 5 10

<210> 14

<211> 12

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 14

Ser Ala Ser Ser Ser Val Ser Ser Ser Tyr Leu His

1 5 10

<210> 15

<211> 7

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 15

Arg Thr Ser Asn Leu Ala Ser

1 5

<210> 16

<211> 9

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 16

Gln Gln Trp Ser Gly Tyr Pro Leu Thr

1 5

<210> 17

<211> 9

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 17

Phe Thr Phe Ser Asp Tyr Tyr Met Tyr

1 5

<210> 18

<211> 17

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 18

Thr Ile Ser Asp Gly Gly Thr Asn Ile Tyr Tyr Thr Asp Asn Val Lys

1 5 10 15

Gly

<210> 19

<211> 11

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 19

Ala Arg Ala Ala Trp Trp Phe Ala Val Asp Tyr

1 5 10

<210> 20

<211> 16

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 20

Arg Ser Ser Gln Ser Leu Val His Ser Asp Gly Asn Thr Tyr Leu His

1 5 10 15

<210> 21

<211> 7

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 21

Thr Val Ser Asn Arg Leu Ser

1 5

<210> 22

<211> 9

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 22

Ser Gln Ser Thr His Phe Pro Trp Thr

1 5

<210> 23

<211> 9

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 23

Phe Thr Phe Ser Thr Tyr Gly Met Ser

1 5

<210> 24

<211> 17

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 24

Thr Ile Ser Ser Gly Gly Asp Tyr Thr Tyr Tyr Arg Asp Phe Val Glu

1 5 10 15

Gly

<210> 25

<211> 15

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 25

Ala Arg Gln Gly Ile Tyr Asp Arg Thr Tyr Phe Ala Met Asp Tyr

1 5 10 15

<210> 26

<211> 17

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 26

Lys Ser Ser Gln Ser Leu Leu Asn Ser Gly Asn Gln Lys Asn Tyr Leu

1 5 10 15

Ala

<210> 27

<211> 7

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 27

Gly Ala Ser Thr Arg Glu Ser

1 5

<210> 28

<211> 9

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 28

Gln Asn Asp His Ser Tyr Pro Pro Thr

1 5

<210> 29

<211> 10

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 29

Tyr Ser Ile Thr Ser Gly Tyr Ala Trp His

1 5 10

<210> 30

<211> 16

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 30

Tyr Ile His Tyr Ser Gly Gly Thr Asp Tyr Asn Pro Ser Leu Lys Ser

1 5 10 15

<210> 31

<211> 10

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 31

Ala Arg Gly Asp Tyr Val Thr Phe Ala Tyr

1 5 10

<210> 32

<211> 7

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 32

Lys Val Ser Asn Arg Phe Ser

1 5

<210> 33

<211> 9

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 33

Ser Gln Gly Thr His Val Pro Tyr Thr

1 5

<210> 34

<211> 9

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 34

Phe Thr Phe Asn Ser Tyr Val Met Ser

1 5

<210> 35

<211> 17

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 35

Ala Ile Asn Asn Gly Gly Gly Tyr Thr Tyr Tyr Pro Asp Ser Val Lys

1 5 10 15

Gly

<210> 36

<211> 15

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 36

Ala Arg Gln Gly Ile Tyr Val Ser Thr His Tyr Ala Met Asp Tyr

1 5 10 15

<210> 37

<211> 17

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 37

Lys Ser Ser Gln Ser Leu Leu Asn Ser Gly Asn Gln Lys Asp Tyr Leu

1 5 10 15

Ala

<210> 38

<211> 9

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 38

Gln Asn Asp His Ser Tyr Pro Pro Thr

1 5

<210> 39

<211> 5

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 39

Ser Ser Val Gly Tyr

1 5

<210> 40

<211> 16

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 40

Tyr Ile His Tyr Ser Gly Asn Thr Asn Tyr Asn Pro Ser Leu Lys Ser

1 5 10 15

<210> 41

<211> 10

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 41

Ala Arg Gly Asp Tyr Val Thr Met Ala Tyr

1 5 10

<210> 42

<211> 16

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 42

Arg Ser Ser Gln Ser Leu Val His Ser Asn Gly Asn Thr Tyr Leu His

1 5 10 15

<210> 43

<211> 9

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 43

Ser Gln Ser Thr His Val Pro Tyr Thr

1 5

<210> 44

<211> 9

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 44

Leu Ser Leu Asn Asn Tyr Gly Ile Ser

1 5

<210> 45

<211> 16

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 45

Ile Ile Trp Gly Asp Gly Ser Thr Tyr Tyr His Ser Ala Leu Ile Ser

1 5 10 15

<210> 46

<211> 9

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 46

Ala Arg Ile Gly Thr Gly Gly Asp Tyr

1 5

<210> 47

<211> 10

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 47

Ser Ala Ile Ser Ser Val Ser Tyr Met His

1 5 10

<210> 48

<211> 7

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 48

Asp Thr Ser Lys Leu Ala Ser

1 5

<210> 49

<211> 9

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 49

Phe Gln Gly Ser Glu Tyr Pro Phe Thr

1 5

<210> 50

<211> 10

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 50

Tyr Ser Ile Thr Ser Gly Phe Ala Trp His

1 5 10

<210> 51

<211> 16

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 51

Tyr Ile His Tyr Ser Gly Ser Thr Asp Ser Ser Pro Ser Leu Lys Ser

1 5 10 15

<210> 52

<211> 10

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 52

Ala Arg Gly Asp Tyr Val Ile Pro Val Asn

1 5 10

<210> 53

<211> 16

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 53

Arg Ser Ser Gln Asn Ile Val His Ser Asp Gly Asn Thr Tyr Leu Gln

1 5 10 15

<210> 54

<211> 9

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 54

Phe Gln Gly Ser His Val Pro Arg Thr

1 5

<210> 55

<211> 16

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 55

Tyr Ile His Phe Ser Gly Ile Thr Asp Tyr Ile Pro Ser Leu Asn Ser

1 5 10 15

<210> 56

<211> 10

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 56

Ala Cys Gly Asp Phe Val Ile Pro Ala Tyr

1 5 10

<210> 57

<211> 9

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 57

Phe Thr Phe Ser Arg Tyr Val Met Ser

1 5

<210> 58

<211> 17

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 58

Ala Ile Ser Gly Asp Asn Tyr Tyr Thr Tyr Tyr Val Asp Ser Val Lys

1 5 10 15

Gly

<210> 59

<211> 15

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 59

Ala Arg Gln Gly Ile Tyr Asp Arg Thr His Tyr Ala Met Asp Asn

1 5 10 15

<210> 60

<211> 9

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 60

Gln Asn Asp Leu Thr Tyr Pro Pro Thr

1 5

<210> 61

<211> 9

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 61

Phe Thr Phe Ser Thr Tyr Val Met Ser

1 5

<210> 62

<211> 17

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 62

Ala Ile Ser Gly Gly Gly Thr Tyr Thr Tyr Phe Ser Asp Ile Val Lys

1 5 10 15

Gly

<210> 63

<211> 15

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 63

Ala Arg Gln Gly Ile Tyr Asp Arg Thr His Phe Ala Met Asp Tyr

1 5 10 15

<210> 64

<211> 17

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 64

Lys Ser Ser Gln Ser Leu Leu Asn Ser Ser Asn Gln Lys Asn Tyr Leu

1 5 10 15

Ala

<210> 65

<211> 7

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 65

Gly Ser Ser Thr Arg Glu Ser

1 5

<210> 66

<211> 9

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 66

Phe Thr Phe Ser Ser Tyr Val Met Ser

1 5

<210> 67

<211> 17

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 67

Ala Ile Asn Asn Gly Gly Gly Tyr Thr Tyr Tyr Pro Asp Ile Val Lys

1 5 10 15

Gly

<210> 68

<211> 15

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 68

Ala Arg Gln Gly Ile Phe Val Ser Thr His Tyr Ala Met Asp Tyr

1 5 10 15

<210> 69

<211> 11

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 69

Lys Ala Ser Gln Asp Val Asn Thr Ala Val Ala

1 5 10

<210> 70

<211> 7

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 70

Ser Ala Ser His Arg Ser Ala

1 5

<210> 71

<211> 9

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 71

Leu Gln His Tyr Gly Pro Pro Tyr Thr

1 5

<210> 72

<211> 9

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 72

Phe Ser Leu Thr Ser Tyr Gly Leu His

1 5

<210> 73

<211> 16

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 73

Val Ile Trp Ala Gly Gly Asp Thr Asp Tyr Asn Ser Ala Leu Met Ser

1 5 10 15

<210> 74

<211> 13

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 74

Val Arg Asp Gly Ser Ser Ser Asp Tyr Ala Met Asp Tyr

1 5 10

<210> 75

<211> 16

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 75

Arg Ser Ser Gln Ser Leu Val His Ser Asn Gly Asn Thr Tyr Leu His

1 5 10 15

<210> 76

<211> 8

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 76

Ser Gln Ser Met Tyr Val Pro Thr

1 5

<210> 77

<211> 9

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 77

Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr Trp Ile His

1 5

<210> 78

<211> 17

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 78

Lys Ile Asp Pro Ser Ser Ser Glu Ile Gly Leu Asn Gln Lys Phe Lys

1 5 10 15

Asp

<210> 79

<211> 11

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 79

Thr Arg Ser Pro Gly Tyr Trp Tyr Phe Asp Val

1 5 10

<210> 80

<211> 8

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 80

Ser Gln Ser Met Tyr Val Ile Thr

1 5

<210> 81

<211> 10

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 81

Tyr Ser Ile Thr Ser Asp Phe Ala Trp Asn

1 5 10

<210> 82

<211> 16

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 82

Tyr Ile Ser Tyr Ser Gly Ile Thr Ser Tyr Ser Pro Ser Leu Lys Ser

1 5 10 15

<210> 83

<211> 9

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 83

Ala Asn Arg Trp Leu Thr Leu Asp Tyr

1 5

<210> 84

<211> 9

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 84

Phe Ser Leu Ser Ser Tyr Gly Val His

1 5

<210> 85

<211> 16

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 85

Val Ile Trp Ala Asp Glu Asn Thr Asn Tyr Asn Ser Ala Leu Met Ser

1 5 10 15

<210> 86

<211> 13

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 86

Val Arg Asp Gly Tyr Thr Ser Asp Tyr Ala Met Asp Tyr

1 5 10

<210> 87

<211> 7

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 87

Arg Val Ser Asn Arg Phe Ser

1 5

<210> 88

<211> 8

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 88

Ser Gln Ser Ile His Phe Pro Thr

1 5

<210> 89

<211> 17

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 89

Glu Ile Asn Pro Ser Asn Gly Asp Thr Ile Phe Asn Glu Lys Phe Arg

1 5 10 15

Asn

<210> 90

<211> 11

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 90

Ala Thr Ser Leu Gly Tyr Tyr Gly Met Asp Phe

1 5 10

<210> 91

<211> 9

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 91

Gln Asn Asp His Thr Tyr Pro Pro Thr

1 5

<210> 92

<211> 9

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 92

Phe Ser Leu Asn Ser Tyr Gly Val His

1 5

<210> 93

<211> 16

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 93

Val Ile Trp Ala Asp Glu Asn Thr Asn Tyr Asp Ser Ala Leu Met Ser

1 5 10 15

<210> 94

<211> 13

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 94

Val Arg Asp Gly Tyr Ser Asn Asp Tyr Ala Met Asp Tyr

1 5 10

<210> 95

<211> 9

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 95

Phe Ser Leu Thr Ser Tyr Gly Val His

1 5

<210> 96

<211> 16

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 96

Val Ile Trp Ala Asp Glu Asn Thr Asn Tyr Asn Ser Ala Leu Met Ser

1 5 10 15

<210> 97

<211> 13

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 97

Val Arg Asp Gly Tyr Ser Ser Asp Tyr Ala Met Asp Tyr

1 5 10

<210> 98

<211> 8

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 98

Gly Phe Ser Leu Thr Ser Tyr Gly

1 5

<210> 99

<211> 7

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 99

Val Trp Gly Asp Gly Ser Thr

1 5

<210> 100

<211> 9

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 100

Ala Lys Leu Gly Thr Gly Gly Asp Tyr

1 5

<210> 101

<211> 5

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 101

Ser Ser Val Gly Tyr

1 5

<210> 102

<211> 3

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 102

Asp Thr Ser

1

<210> 103

<211> 9

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 103

Phe Gln Gly Ser Gly Tyr Pro Phe Thr

1 5

<210> 104

<211> 8

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 104

Gly Leu Ser Leu Thr Ser Tyr Gly

1 5

<210> 105

<211> 7

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 105

Ile Trp Gly Asp Gly Ser Thr

1 5

<210> 106

<211> 9

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 106

Ala Lys Ile Gly Thr Gly Gly Asp Tyr

1 5

<210> 107

<211> 7

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 107

Ile Trp Ala Asp Gly Asn Thr

1 5

<210> 108

<211> 13

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 108

Val Arg Asp Gly Tyr Ser Thr Asp Tyr Ala Leu Asp Tyr

1 5 10

<210> 109

<211> 7

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 109

Ser Ser Val Ser Ser Ser Tyr

1 5

<210> 110

<211> 3

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 110

Arg Thr Ser

1

<210> 111

<211> 9

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 111

Gln Gln Trp Ser Gly Tyr Pro Leu Thr

1 5

<210> 112

<211> 8

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 112

Gly Phe Thr Phe Ser Asp Tyr Tyr

1 5

<210> 113

<211> 8

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 113

Ile Ser Asp Gly Gly Thr Asn Ile

1 5

<210> 114

<211> 11

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 114

Ala Arg Ala Ala Trp Trp Phe Ala Val Asp Tyr

1 5 10

<210> 115

<211> 11

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 115

Gln Ser Leu Val His Ser Asp Gly Asn Thr Tyr

1 5 10

<210> 116

<211> 3

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 116

Thr Val Ser

1

<210> 117

<211> 9

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 117

Ser Gln Ser Thr His Phe Pro Trp Thr

1 5

<210> 118

<211> 8

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 118

Gly Phe Thr Phe Ser Thr Tyr Gly

1 5

<210> 119

<211> 8

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 119

Ile Ser Ser Gly Gly Asp Tyr Thr

1 5

<210> 120

<211> 15

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 120

Ala Arg Gln Gly Ile Tyr Asp Arg Thr Tyr Phe Ala Met Asp Tyr

1 5 10 15

<210> 121

<211> 12

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 121

Gln Ser Leu Leu Asn Ser Gly Asn Gln Lys Asn Tyr

1 5 10

<210> 122

<211> 3

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 122

Gly Ala Ser

1

<210> 123

<211> 9

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 123

Gln Asn Asp His Ser Tyr Pro Pro Thr

1 5

<210> 124

<211> 9

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 124

Gly Tyr Ser Ile Thr Ser Gly Tyr Ala

1 5

<210> 125

<211> 7

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 125

Ile His Tyr Ser Gly Gly Thr

1 5

<210> 126

<211> 10

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 126

Ala Arg Gly Asp Tyr Val Thr Phe Ala Tyr

1 5 10

<210> 127

<211> 3

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 127

Lys Val Ser

1

<210> 128

<211> 9

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 128

Ser Gln Gly Thr His Val Pro Tyr Thr

1 5

<210> 129

<211> 8

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 129

Gly Phe Thr Phe Asn Ser Tyr Val

1 5

<210> 130

<211> 8

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 130

Ile Asn Asn Gly Gly Gly Tyr Thr

1 5

<210> 131

<211> 15

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 131

Ala Arg Gln Gly Ile Tyr Val Ser Thr His Tyr Ala Met Asp Tyr

1 5 10 15

<210> 132

<211> 12

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 132

Gln Ser Leu Leu Asn Ser Gly Asn Gln Lys Asp Tyr

1 5 10

<210> 133

<211> 7

<212> ПРТ

<213> искусственная

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 133

Ile His Tyr Ser Gly Asn Thr

1 5

<210> 134

<211> 10

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 134

Ala Arg Gly Asp Tyr Val Thr Met Ala Tyr

1 5 10

<210> 135

<211> 11

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 135

Gln Ser Leu Val His Ser Asn Gly Asn Thr Tyr

1 5 10

<210> 136

<211> 9

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 136

Ser Gln Ser Thr His Val Pro Tyr Thr

1 5

<210> 137

<211> 8

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 137

Gly Leu Ser Leu Asn Asn Tyr Gly

1 5

<210> 138

<211> 9

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 138

Ala Arg Ile Gly Thr Gly Gly Asp Tyr

1 5

<210> 139

<211> 9

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 139

Phe Gln Gly Ser Glu Tyr Pro Phe Thr

1 5

<210> 140

<211> 9

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 140

Gly Tyr Ser Ile Thr Ser Gly Phe Ala

1 5

<210> 141

<211> 7

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 141

Ile His Tyr Ser Gly Ser Thr

1 5

<210> 142

<211> 10

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 142

Ala Arg Gly Asp Tyr Val Ile Pro Val Asn

1 5 10

<210> 143

<211> 11

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 143

Gln Asn Ile Val His Ser Asp Gly Asn Thr Tyr

1 5 10

<210> 144

<211> 9

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 144

Phe Gln Gly Ser His Val Pro Arg Thr

1 5

<210> 145

<211> 7

<212> ПРТ

<213> искусственная

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 145

Ile His Phe Ser Gly Ile Thr

1 5

<210> 146

<211> 10

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 146

Ala Cys Gly Asp Phe Val Ile Pro Ala Tyr

1 5 10

<210> 147

<211> 11

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 147

Gln Ser Ile Val His Ser Asp Gly Asp Thr Tyr

1 5 10

<210> 148

<211> 8

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 148

Gly Phe Thr Phe Ser Arg Tyr Val

1 5

<210> 149

<211> 8

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 149

Ile Ser Gly Asp Asn Tyr Tyr Thr

1 5

<210> 150

<211> 15

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 150

Ala Arg Gln Gly Ile Tyr Asp Arg Thr His Tyr Ala Met Asp Asn

1 5 10 15

<210> 151

<211> 9

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 151

Gln Asn Asp Leu Thr Tyr Pro Pro Thr

1 5

<210> 152

<211> 8

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 152

Gly Phe Thr Phe Ser Thr Tyr Val

1 5

<210> 153

<211> 8

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 153

Ile Ser Gly Gly Gly Thr Tyr Thr

1 5

<210> 154

<211> 12

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 154

Gln Ser Leu Leu Asn Ser Ser Asn Gln Lys Asn Tyr

1 5 10

<210> 155

<211> 3

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 155

Gly Ser Ser

1

<210> 156

<211> 8

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 156

Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr Val

1 5

<210> 157

<211> 6

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 157

Gln Asp Val Asn Thr Ala

1 5

<210> 158

<211> 3

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 158

Ser Ala Ser

1

<210> 159

<211> 9

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 159

Leu Gln His Tyr Gly Pro Pro Tyr Thr

1 5

<210> 160

<211> 7

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 160

Ile Trp Ala Gly Gly Asp Thr

1 5

<210> 161

<211> 13

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 161

Val Arg Asp Gly Ser Ser Ser Asp Tyr Ala Met Asp Tyr

1 5 10

<210> 162

<211> 11

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 162

Gln Ser Leu Val His Ser Asn Gly Asn Thr Tyr

1 5 10

<210> 163

<211> 8

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 163

Ser Gln Ser Met Tyr Val Pro Thr

1 5

<210> 164

<211> 8

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 164

Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr Trp

1 5

<210> 165

<211> 8

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 165

Ile Asp Pro Ser Ser Ser Glu Ile

1 5

<210> 166

<211> 11

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 166

Thr Arg Ser Pro Gly Tyr Trp Tyr Phe Asp Val

1 5 10

<210> 167

<211> 8

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 167

Ser Gln Ser Met Tyr Val Ile Thr

1 5

<210> 168

<211> 9

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 168

Gly Tyr Ser Ile Thr Ser Asp Phe Ala

1 5

<210> 169

<211> 7

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 169

Ile Ser Tyr Ser Gly Ile Thr

1 5

<210> 170

<211> 9

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 170

Ala Asn Arg Trp Leu Thr Leu Asp Tyr

1 5

<210> 171

<211> 8

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 171

Gly Phe Ser Leu Ser Ser Tyr Gly

1 5

<210> 172

<211> 7

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 172

Ile Trp Ala Asp Glu Asn Thr

1 5

<210> 173

<211> 13

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 173

Val Arg Asp Gly Tyr Thr Ser Asp Tyr Ala Met Asp Tyr

1 5 10

<210> 174

<211> 3

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 174

Arg Val Ser

1

<210> 175

<211> 8

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 175

Ser Gln Ser Ile His Phe Pro Thr

1 5

<210> 176

<211> 8

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 176

Ile Asn Pro Ser Asn Gly Asp Thr

1 5

<210> 177

<211> 11

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 177

Ala Thr Ser Leu Gly Tyr Tyr Gly Met Asp Phe

1 5 10

<210> 178

<211> 9

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 178

Gln Asn Asp His Thr Tyr Pro Pro Thr

1 5

<210> 179

<211> 8

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 179

Gly Phe Ser Leu Asn Ser Tyr Gly

1 5

<210> 180

<211> 13

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 180

Val Arg Asp Gly Tyr Ser Asn Asp Tyr Ala Met Asp Tyr

1 5 10

<210> 181

<211> 8

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 181

Ser Gln Ser Ile His Val Pro Thr

1 5

<210> 182

<211> 8

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 182

Gly Phe Ser Leu Thr Ser Tyr Gly

1 5

<210> 183

<211> 13

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность CDR

<400> 183

Val Arg Asp Gly Tyr Ser Ser Asp Tyr Ala Met Asp Tyr

1 5 10

<210> 184

<211> 445

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность ТЦ

<400> 184

Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu

1 5 10 15

Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Phe Ser Leu Thr Ser Tyr

20 25 30

Gly Val Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile

35 40 45

Gly Val Val Trp Gly Asp Gly Ser Thr Asn Tyr His Ser Ala Leu Ile

50 55 60

Ser Arg Val Thr Ile Ser Val Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Ser Leu

65 70 75 80

Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala

85 90 95

Lys Leu Gly Thr Gly Gly Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr

100 105 110

Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro

115 120 125

Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val

130 135 140

Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala

145 150 155 160

Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly

165 170 175

Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly

180 185 190

Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys

195 200 205

Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys

210 215 220

Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu

225 230 235 240

Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu

245 250 255

Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys

260 265 270

Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys

275 280 285

Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu

290 295 300

Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys

305 310 315 320

Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys

325 330 335

Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser

340 345 350

Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys

355 360 365

Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln

370 375 380

Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly

385 390 395 400

Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln

405 410 415

Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn

420 425 430

His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys

435 440 445

<210> 185

<211> 445

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность ТЦ

<400> 185

Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu

1 5 10 15

Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Phe Ser Leu Thr Ser Tyr

20 25 30

Gly Val Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile

35 40 45

Gly Val Val Trp Gly Asp Gly Ser Thr Asn Tyr His Ser Ala Leu Ile

50 55 60

Ser Arg Val Thr Ile Ser Val Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Ser Leu

65 70 75 80

Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala

85 90 95

Lys Leu Gly Thr Gly Gly Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr

100 105 110

Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro

115 120 125

Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val

130 135 140

Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala

145 150 155 160

Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly

165 170 175

Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly

180 185 190

Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys

195 200 205

Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys

210 215 220

Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu

225 230 235 240

Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu

245 250 255

Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys

260 265 270

Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys

275 280 285

Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu

290 295 300

Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys

305 310 315 320

Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys

325 330 335

Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser

340 345 350

Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys

355 360 365

Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln

370 375 380

Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly

385 390 395 400

Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln

405 410 415

Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn

420 425 430

His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys

435 440 445

<210> 186

<211> 445

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность ТЦ

<400> 186

Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu

1 5 10 15

Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Phe Ser Leu Thr Ser Tyr

20 25 30

Gly Val Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile

35 40 45

Gly Val Val Trp Gly Asp Gly Ser Thr Asn Tyr His Ser Ala Leu Ile

50 55 60

Ser Arg Val Thr Ile Ser Val Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Ser Leu

65 70 75 80

Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala

85 90 95

Lys Leu Gly Thr Gly Gly Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr

100 105 110

Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro

115 120 125

Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val

130 135 140

Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala

145 150 155 160

Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly

165 170 175

Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly

180 185 190

Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys

195 200 205

Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys

210 215 220

Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu

225 230 235 240

Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu

245 250 255

Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys

260 265 270

Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys

275 280 285

Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu

290 295 300

Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys

305 310 315 320

Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys

325 330 335

Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser

340 345 350

Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys

355 360 365

Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln

370 375 380

Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly

385 390 395 400

Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln

405 410 415

Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn

420 425 430

His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys

435 440 445

<210> 187

<211> 445

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность ТЦ

<400> 187

Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu

1 5 10 15

Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Phe Ser Leu Thr Ser Tyr

20 25 30

Gly Val Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile

35 40 45

Gly Val Val Trp Gly Asp Gly Ser Thr Asn Tyr His Ser Ala Leu Ile

50 55 60

Ser Arg Val Thr Ile Ser Val Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Ser Leu

65 70 75 80

Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala

85 90 95

Lys Leu Gly Thr Gly Gly Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr

100 105 110

Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro

115 120 125

Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val

130 135 140

Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala

145 150 155 160

Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly

165 170 175

Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly

180 185 190

Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys

195 200 205

Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys

210 215 220

Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu

225 230 235 240

Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu

245 250 255

Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys

260 265 270

Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys

275 280 285

Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu

290 295 300

Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys

305 310 315 320

Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys

325 330 335

Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser

340 345 350

Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys

355 360 365

Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln

370 375 380

Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly

385 390 395 400

Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln

405 410 415

Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn

420 425 430

His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys

435 440 445

<210> 188

<211> 445

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность ТЦ

<400> 188

Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu

1 5 10 15

Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Phe Ser Leu Thr Ser Tyr

20 25 30

Gly Val Ser Trp Ile Arg Gln Thr Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile

35 40 45

Gly Val Val Trp Gly Asp Gly Ser Thr Asn Tyr His Ser Ala Leu Ile

50 55 60

Ser Arg Val Thr Ile Ser Ile Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Ser Leu

65 70 75 80

Lys Leu Gly Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Phe Tyr Tyr Cys Ala

85 90 95

Lys Leu Gly Thr Gly Gly Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr

100 105 110

Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro

115 120 125

Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val

130 135 140

Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala

145 150 155 160

Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly

165 170 175

Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly

180 185 190

Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys

195 200 205

Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys

210 215 220

Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu

225 230 235 240

Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu

245 250 255

Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys

260 265 270

Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys

275 280 285

Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu

290 295 300

Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys

305 310 315 320

Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys

325 330 335

Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser

340 345 350

Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys

355 360 365

Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln

370 375 380

Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly

385 390 395 400

Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln

405 410 415

Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn

420 425 430

His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys

435 440 445

<210> 189

<211> 445

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность ТЦ

<400> 189

Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu

1 5 10 15

Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Phe Ser Leu Thr Ser Tyr

20 25 30

Gly Val Ser Trp Ile Arg Gln Thr Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile

35 40 45

Gly Val Val Trp Gly Asp Gly Ser Thr Asn Tyr His Ser Ala Leu Ile

50 55 60

Ser Arg Val Thr Ile Ser Ile Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Ser Leu

65 70 75 80

Lys Leu Gly Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Phe Tyr Tyr Cys Ala

85 90 95

Lys Leu Gly Thr Gly Gly Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr

100 105 110

Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro

115 120 125

Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val

130 135 140

Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala

145 150 155 160

Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly

165 170 175

Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly

180 185 190

Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys

195 200 205

Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys

210 215 220

Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu

225 230 235 240

Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu

245 250 255

Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys

260 265 270

Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys

275 280 285

Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu

290 295 300

Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys

305 310 315 320

Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys

325 330 335

Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser

340 345 350

Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys

355 360 365

Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln

370 375 380

Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly

385 390 395 400

Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln

405 410 415

Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn

420 425 430

His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys

435 440 445

<210> 190

<211> 445

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность ТЦ

<400> 190

Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu

1 5 10 15

Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Phe Ser Leu Thr Ser Tyr

20 25 30

Gly Val Ser Trp Ile Arg Gln Thr Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile

35 40 45

Gly Val Val Trp Gly Asp Gly Ser Thr Asn Tyr His Ser Ala Leu Ile

50 55 60

Ser Arg Val Thr Ile Ser Ile Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Ser Leu

65 70 75 80

Lys Leu Gly Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Phe Tyr Tyr Cys Ala

85 90 95

Lys Leu Gly Thr Gly Gly Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr

100 105 110

Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro

115 120 125

Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val

130 135 140

Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala

145 150 155 160

Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly

165 170 175

Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly

180 185 190

Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys

195 200 205

Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys

210 215 220

Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu

225 230 235 240

Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu

245 250 255

Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys

260 265 270

Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys

275 280 285

Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu

290 295 300

Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys

305 310 315 320

Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys

325 330 335

Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser

340 345 350

Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys

355 360 365

Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln

370 375 380

Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly

385 390 395 400

Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln

405 410 415

Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn

420 425 430

His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys

435 440 445

<210> 191

<211> 445

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность ТЦ

<400> 191

Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu

1 5 10 15

Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Phe Ser Leu Thr Ser Tyr

20 25 30

Gly Val Ser Trp Ile Arg Gln Thr Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile

35 40 45

Gly Val Val Trp Gly Asp Gly Ser Thr Asn Tyr His Ser Ala Leu Ile

50 55 60

Ser Arg Val Thr Ile Ser Ile Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Ser Leu

65 70 75 80

Lys Leu Gly Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Phe Tyr Tyr Cys Ala

85 90 95

Lys Leu Gly Thr Gly Gly Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr

100 105 110

Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro

115 120 125

Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val

130 135 140

Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala

145 150 155 160

Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly

165 170 175

Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly

180 185 190

Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys

195 200 205

Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys

210 215 220

Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu

225 230 235 240

Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu

245 250 255

Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys

260 265 270

Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys

275 280 285

Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu

290 295 300

Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys

305 310 315 320

Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys

325 330 335

Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser

340 345 350

Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys

355 360 365

Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln

370 375 380

Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly

385 390 395 400

Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln

405 410 415

Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn

420 425 430

His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys

435 440 445

<210> 192

<211> 445

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность ТЦ

<400> 192

Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu

1 5 10 15

Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Phe Ser Leu Thr Ser Tyr

20 25 30

Gly Val Ser Trp Val Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile

35 40 45

Gly Val Val Trp Gly Asp Gly Ser Thr Asn Tyr His Ser Ala Leu Ile

50 55 60

Ser Arg Val Thr Ile Ser Ile Asp Thr Ser Lys Ser Gln Phe Ser Leu

65 70 75 80

Asn Leu Arg Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala

85 90 95

Lys Leu Gly Thr Gly Gly Asp Tyr Trp Ala Gln Gly Thr Leu Val Thr

100 105 110

Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro

115 120 125

Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val

130 135 140

Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala

145 150 155 160

Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly

165 170 175

Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly

180 185 190

Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys

195 200 205

Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys

210 215 220

Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu

225 230 235 240

Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu

245 250 255

Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys

260 265 270

Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys

275 280 285

Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu

290 295 300

Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys

305 310 315 320

Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys

325 330 335

Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser

340 345 350

Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys

355 360 365

Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln

370 375 380

Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly

385 390 395 400

Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln

405 410 415

Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn

420 425 430

His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys

435 440 445

<210> 193

<211> 445

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность ТЦ

<400> 193

Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu

1 5 10 15

Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Phe Ser Leu Thr Ser Tyr

20 25 30

Gly Val Ser Trp Val Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile

35 40 45

Gly Val Val Trp Gly Asp Gly Ser Thr Asn Tyr His Ser Ala Leu Ile

50 55 60

Ser Arg Val Thr Ile Ser Ile Asp Thr Ser Lys Ser Gln Phe Ser Leu

65 70 75 80

Asn Leu Arg Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala

85 90 95

Lys Leu Gly Thr Gly Gly Asp Tyr Trp Ala Gln Gly Thr Leu Val Thr

100 105 110

Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro

115 120 125

Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val

130 135 140

Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala

145 150 155 160

Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly

165 170 175

Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly

180 185 190

Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys

195 200 205

Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys

210 215 220

Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu

225 230 235 240

Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu

245 250 255

Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys

260 265 270

Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys

275 280 285

Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu

290 295 300

Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys

305 310 315 320

Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys

325 330 335

Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser

340 345 350

Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys

355 360 365

Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln

370 375 380

Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly

385 390 395 400

Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln

405 410 415

Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn

420 425 430

His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys

435 440 445

<210> 194

<211> 445

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность ТЦ

<400> 194

Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu

1 5 10 15

Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Phe Ser Leu Thr Ser Tyr

20 25 30

Gly Val Ser Trp Val Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile

35 40 45

Gly Val Val Trp Gly Asp Gly Ser Thr Asn Tyr His Ser Ala Leu Ile

50 55 60

Ser Arg Val Thr Ile Ser Ile Asp Thr Ser Lys Ser Gln Phe Ser Leu

65 70 75 80

Asn Leu Arg Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala

85 90 95

Lys Leu Gly Thr Gly Gly Asp Tyr Trp Ala Gln Gly Thr Leu Val Thr

100 105 110

Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro

115 120 125

Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val

130 135 140

Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala

145 150 155 160

Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly

165 170 175

Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly

180 185 190

Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys

195 200 205

Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys

210 215 220

Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu

225 230 235 240

Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu

245 250 255

Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys

260 265 270

Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys

275 280 285

Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu

290 295 300

Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys

305 310 315 320

Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys

325 330 335

Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser

340 345 350

Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys

355 360 365

Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln

370 375 380

Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly

385 390 395 400

Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln

405 410 415

Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn

420 425 430

His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys

435 440 445

<210> 195

<211> 445

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность ТЦ

<400> 195

Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu

1 5 10 15

Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Phe Ser Leu Thr Ser Tyr

20 25 30

Gly Val Ser Trp Val Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile

35 40 45

Gly Val Val Trp Gly Asp Gly Ser Thr Asn Tyr His Ser Ala Leu Ile

50 55 60

Ser Arg Val Thr Ile Ser Ile Asp Thr Ser Lys Ser Gln Phe Ser Leu

65 70 75 80

Asn Leu Arg Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala

85 90 95

Lys Leu Gly Thr Gly Gly Asp Tyr Trp Ala Gln Gly Thr Leu Val Thr

100 105 110

Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro

115 120 125

Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val

130 135 140

Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala

145 150 155 160

Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly

165 170 175

Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly

180 185 190

Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys

195 200 205

Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys

210 215 220

Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu

225 230 235 240

Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu

245 250 255

Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys

260 265 270

Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys

275 280 285

Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu

290 295 300

Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys

305 310 315 320

Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys

325 330 335

Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser

340 345 350

Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys

355 360 365

Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln

370 375 380

Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly

385 390 395 400

Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln

405 410 415

Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn

420 425 430

His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys

435 440 445

<210> 196

<211> 445

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность ТЦ

<400> 196

Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu

1 5 10 15

Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Phe Ser Leu Thr Ser Tyr

20 25 30

Gly Val Ser Trp Ile Arg Gln Ser Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile

35 40 45

Gly Val Val Trp Gly Asp Gly Ser Thr Asn Tyr His Ser Ala Leu Ile

50 55 60

Ser Arg Val Thr Ile Ser Ala Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Ser Leu

65 70 75 80

Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Ile Tyr Tyr Cys Ala

85 90 95

Lys Leu Gly Thr Gly Gly Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr

100 105 110

Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro

115 120 125

Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val

130 135 140

Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala

145 150 155 160

Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly

165 170 175

Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly

180 185 190

Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys

195 200 205

Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys

210 215 220

Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu

225 230 235 240

Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu

245 250 255

Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys

260 265 270

Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys

275 280 285

Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu

290 295 300

Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys

305 310 315 320

Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys

325 330 335

Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser

340 345 350

Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys

355 360 365

Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln

370 375 380

Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly

385 390 395 400

Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln

405 410 415

Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn

420 425 430

His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys

435 440 445

<210> 197

<211> 445

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность ТЦ

<400> 197

Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu

1 5 10 15

Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Phe Ser Leu Thr Ser Tyr

20 25 30

Gly Val Ser Trp Ile Arg Gln Ser Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile

35 40 45

Gly Val Val Trp Gly Asp Gly Ser Thr Asn Tyr His Ser Ala Leu Ile

50 55 60

Ser Arg Val Thr Ile Ser Ala Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Ser Leu

65 70 75 80

Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Ile Tyr Tyr Cys Ala

85 90 95

Lys Leu Gly Thr Gly Gly Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr

100 105 110

Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro

115 120 125

Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val

130 135 140

Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala

145 150 155 160

Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly

165 170 175

Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly

180 185 190

Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys

195 200 205

Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys

210 215 220

Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu

225 230 235 240

Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu

245 250 255

Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys

260 265 270

Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys

275 280 285

Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu

290 295 300

Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys

305 310 315 320

Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys

325 330 335

Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser

340 345 350

Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys

355 360 365

Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln

370 375 380

Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly

385 390 395 400

Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln

405 410 415

Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn

420 425 430

His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys

435 440 445

<210> 198

<211> 445

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность ТЦ

<400> 198

Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu

1 5 10 15

Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Phe Ser Leu Thr Ser Tyr

20 25 30

Gly Val Ser Trp Ile Arg Gln Ser Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile

35 40 45

Gly Val Val Trp Gly Asp Gly Ser Thr Asn Tyr His Ser Ala Leu Ile

50 55 60

Ser Arg Val Thr Ile Ser Ala Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Ser Leu

65 70 75 80

Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Ile Tyr Tyr Cys Ala

85 90 95

Lys Leu Gly Thr Gly Gly Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr

100 105 110

Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro

115 120 125

Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val

130 135 140

Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala

145 150 155 160

Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly

165 170 175

Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly

180 185 190

Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys

195 200 205

Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys

210 215 220

Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu

225 230 235 240

Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu

245 250 255

Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys

260 265 270

Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys

275 280 285

Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu

290 295 300

Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys

305 310 315 320

Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys

325 330 335

Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser

340 345 350

Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys

355 360 365

Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln

370 375 380

Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly

385 390 395 400

Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln

405 410 415

Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn

420 425 430

His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys

435 440 445

<210> 199

<211> 444

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность ТЦ

<400> 199

Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu

1 5 10 15

Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Phe Ser Leu Thr Ser Tyr

20 25 30

Gly Val Ser Trp Ile Arg Gln Ser Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile

35 40 45

Gly Val Val Trp Gly Asp Gly Ser Thr Asn Tyr His Ser Ala Leu Ile

50 55 60

Ser Arg Val Thr Ile Ser Ala Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Ser Leu

65 70 75 80

Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Ile Tyr Tyr Cys Ala

85 90 95

Lys Leu Gly Thr Gly Gly Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr

100 105 110

Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro

115 120 125

Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val

130 135 140

Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala

145 150 155 160

Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly

165 170 175

Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly

180 185 190

Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys

195 200 205

Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys

210 215 220

Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu

225 230 235 240

Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu

245 250 255

Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys

260 265 270

Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys

275 280 285

Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu

290 295 300

Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys

305 310 315 320

Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys

325 330 335

Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser

340 345 350

Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys

355 360 365

Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln

370 375 380

Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly

385 390 395 400

Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln

405 410 415

Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn

420 425 430

His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly

435 440

<210> 200

<211> 448

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность ТЦ

<400> 200

Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Lys Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asp Tyr

20 25 30

Tyr Met Tyr Trp Val Arg Gln Thr Pro Asp Lys Arg Leu Glu Trp Val

35 40 45

Ala Thr Ile Ser Asp Gly Gly Thr Asn Ile Tyr Tyr Thr Asp Asn Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Ser Ser Leu Lys Ser Glu Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Ala Ala Trp Trp Phe Ala Val Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr

100 105 110

Met Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro

115 120 125

Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly

130 135 140

Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn

145 150 155 160

Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln

165 170 175

Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser

180 185 190

Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser

195 200 205

Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr

210 215 220

His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser

225 230 235 240

Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg

245 250 255

Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro

260 265 270

Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala

275 280 285

Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val

290 295 300

Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr

305 310 315 320

Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr

325 330 335

Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu

340 345 350

Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys

355 360 365

Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser

370 375 380

Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp

385 390 395 400

Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser

405 410 415

Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala

420 425 430

Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys

435 440 445

<210> 201

<211> 448

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность ТЦ

<400> 201

Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Lys Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asp Tyr

20 25 30

Tyr Met Tyr Trp Val Arg Gln Thr Pro Asp Lys Arg Leu Glu Trp Val

35 40 45

Ala Thr Ile Ser Asp Gly Gly Thr Asn Ile Tyr Tyr Thr Asp Asn Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Ser Ser Leu Lys Ser Glu Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Ala Ala Trp Trp Phe Ala Val Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr

100 105 110

Met Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro

115 120 125

Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly

130 135 140

Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn

145 150 155 160

Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln

165 170 175

Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser

180 185 190

Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser

195 200 205

Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr

210 215 220

His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser

225 230 235 240

Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg

245 250 255

Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro

260 265 270

Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala

275 280 285

Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val

290 295 300

Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr

305 310 315 320

Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr

325 330 335

Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu

340 345 350

Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys

355 360 365

Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser

370 375 380

Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp

385 390 395 400

Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser

405 410 415

Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala

420 425 430

Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys

435 440 445

<210> 202

<211> 448

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность ТЦ

<400> 202

Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Lys Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asp Tyr

20 25 30

Tyr Met Tyr Trp Val Arg Gln Thr Pro Asp Lys Arg Leu Glu Trp Val

35 40 45

Ala Thr Ile Ser Asp Gly Gly Thr Asn Ile Tyr Tyr Thr Asp Asn Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Ser Ser Leu Lys Ser Glu Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Ala Ala Trp Trp Phe Ala Val Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr

100 105 110

Met Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro

115 120 125

Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly

130 135 140

Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn

145 150 155 160

Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln

165 170 175

Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser

180 185 190

Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser

195 200 205

Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr

210 215 220

His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser

225 230 235 240

Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg

245 250 255

Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro

260 265 270

Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala

275 280 285

Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val

290 295 300

Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr

305 310 315 320

Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr

325 330 335

Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu

340 345 350

Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys

355 360 365

Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser

370 375 380

Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp

385 390 395 400

Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser

405 410 415

Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala

420 425 430

Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys

435 440 445

<210> 203

<211> 448

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность ТЦ

<400> 203

Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Lys Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asp Tyr

20 25 30

Tyr Met Tyr Trp Val Arg Gln Thr Pro Asp Lys Arg Leu Glu Trp Val

35 40 45

Ala Thr Ile Ser Asp Gly Gly Thr Asn Ile Tyr Tyr Thr Asp Asn Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Ser Ser Leu Lys Ser Glu Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Ala Ala Trp Trp Phe Ala Val Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr

100 105 110

Met Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro

115 120 125

Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly

130 135 140

Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn

145 150 155 160

Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln

165 170 175

Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser

180 185 190

Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser

195 200 205

Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr

210 215 220

His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser

225 230 235 240

Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg

245 250 255

Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro

260 265 270

Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala

275 280 285

Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val

290 295 300

Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr

305 310 315 320

Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr

325 330 335

Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu

340 345 350

Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys

355 360 365

Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser

370 375 380

Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp

385 390 395 400

Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser

405 410 415

Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala

420 425 430

Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys

435 440 445

<210> 204

<211> 448

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность ТЦ

<400> 204

Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asp Tyr

20 25 30

Tyr Met Tyr Trp Ile Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val

35 40 45

Ser Thr Ile Ser Asp Gly Gly Thr Asn Ile Tyr Tyr Thr Asp Asn Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Ala Ala Trp Trp Phe Ala Val Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr

100 105 110

Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro

115 120 125

Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly

130 135 140

Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn

145 150 155 160

Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln

165 170 175

Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser

180 185 190

Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser

195 200 205

Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr

210 215 220

+++

His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser

225 230 235 240

Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg

245 250 255

Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro

260 265 270

Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala

275 280 285

Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val

290 295 300

Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr

305 310 315 320

Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr

325 330 335

Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu

340 345 350

Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys

355 360 365

Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser

370 375 380

Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp

385 390 395 400

Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser

405 410 415

Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala

420 425 430

Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys

435 440 445

<210> 205

<211> 448

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность ТЦ

<400> 205

Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asp Tyr

20 25 30

Tyr Met Tyr Trp Ile Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val

35 40 45

Ser Thr Ile Ser Asp Gly Gly Thr Asn Ile Tyr Tyr Thr Asp Asn Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Ala Ala Trp Trp Phe Ala Val Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr

100 105 110

Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro

115 120 125

Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly

130 135 140

Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn

145 150 155 160

Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln

165 170 175

Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser

180 185 190

Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser

195 200 205

Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr

210 215 220

His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser

225 230 235 240

Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg

245 250 255

Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro

260 265 270

Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala

275 280 285

Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val

290 295 300

Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr

305 310 315 320

Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr

325 330 335

Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu

340 345 350

Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys

355 360 365

Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser

370 375 380

Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp

385 390 395 400

Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser

405 410 415

Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala

420 425 430

Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys

435 440 445

<210> 206

<211> 448

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность ТЦ

<400> 206

Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asp Tyr

20 25 30

Tyr Met Tyr Trp Ile Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val

35 40 45

Ser Thr Ile Ser Asp Gly Gly Thr Asn Ile Tyr Tyr Thr Asp Asn Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Ala Ala Trp Trp Phe Ala Val Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr

100 105 110

Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro

115 120 125

Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly

130 135 140

Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn

145 150 155 160

Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln

165 170 175

Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser

180 185 190

Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser

195 200 205

Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr

210 215 220

His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser

225 230 235 240

Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg

245 250 255

Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro

260 265 270

Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala

275 280 285

Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val

290 295 300

Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr

305 310 315 320

Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr

325 330 335

Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu

340 345 350

Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys

355 360 365

Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser

370 375 380

Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp

385 390 395 400

Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser

405 410 415

Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala

420 425 430

Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys

435 440 445

<210> 207

<211> 448

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность ТЦ

<400> 207

Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asp Tyr

20 25 30

Tyr Met Tyr Trp Ile Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val

35 40 45

Ser Thr Ile Ser Asp Gly Gly Thr Asn Ile Tyr Tyr Thr Asp Asn Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Ala Ala Trp Trp Phe Ala Val Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr

100 105 110

Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro

115 120 125

Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly

130 135 140

Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn

145 150 155 160

Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln

165 170 175

Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser

180 185 190

Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser

195 200 205

Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr

210 215 220

His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser

225 230 235 240

Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg

245 250 255

Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro

260 265 270

Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala

275 280 285

Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val

290 295 300

Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr

305 310 315 320

Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr

325 330 335

Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu

340 345 350

Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys

355 360 365

Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser

370 375 380

Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp

385 390 395 400

Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser

405 410 415

Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala

420 425 430

Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys

435 440 445

<210> 208

<211> 448

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность ТЦ

<400> 208

Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asp Tyr

20 25 30

Tyr Met Tyr Trp Ile Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val

35 40 45

Ser Thr Ile Ser Asp Gly Gly Thr Asn Ile Tyr Tyr Thr Asp Asn Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Thr Glu Asp Thr Ala Val Tyr Phe Cys

85 90 95

Ala Arg Ala Ala Trp Trp Phe Ala Val Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr

100 105 110

Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro

115 120 125

Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly

130 135 140

Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn

145 150 155 160

Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln

165 170 175

Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser

180 185 190

Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser

195 200 205

Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr

210 215 220

His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser

225 230 235 240

Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg

245 250 255

Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro

260 265 270

Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala

275 280 285

Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val

290 295 300

Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr

305 310 315 320

Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr

325 330 335

Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu

340 345 350

Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys

355 360 365

Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser

370 375 380

Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp

385 390 395 400

Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser

405 410 415

Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala

420 425 430

Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys

435 440 445

<210> 209

<211> 448

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность ТЦ

<400> 209

Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asp Tyr

20 25 30

Tyr Met Tyr Trp Ile Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val

35 40 45

Ser Thr Ile Ser Asp Gly Gly Thr Asn Ile Tyr Tyr Thr Asp Asn Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Thr Glu Asp Thr Ala Val Tyr Phe Cys

85 90 95

Ala Arg Ala Ala Trp Trp Phe Ala Val Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr

100 105 110

Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro

115 120 125

Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly

130 135 140

Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn

145 150 155 160

Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln

165 170 175

Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser

180 185 190

Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser

195 200 205

Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr

210 215 220

His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser

225 230 235 240

Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg

245 250 255

Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro

260 265 270

Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala

275 280 285

Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val

290 295 300

Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr

305 310 315 320

Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr

325 330 335

Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu

340 345 350

Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys

355 360 365

Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser

370 375 380

Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp

385 390 395 400

Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser

405 410 415

Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala

420 425 430

Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys

435 440 445

<210> 210

<211> 448

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность ТЦ

<400> 210

Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asp Tyr

20 25 30

Tyr Met Tyr Trp Ile Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val

35 40 45

Ser Thr Ile Ser Asp Gly Gly Thr Asn Ile Tyr Tyr Thr Asp Asn Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Thr Glu Asp Thr Ala Val Tyr Phe Cys

85 90 95

Ala Arg Ala Ala Trp Trp Phe Ala Val Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr

100 105 110

Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro

115 120 125

Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly

130 135 140

Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn

145 150 155 160

Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln

165 170 175

Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser

180 185 190

Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser

195 200 205

Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr

210 215 220

His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser

225 230 235 240

Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg

245 250 255

Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro

260 265 270

Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala

275 280 285

Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val

290 295 300

Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr

305 310 315 320

Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr

325 330 335

Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu

340 345 350

Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys

355 360 365

Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser

370 375 380

Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp

385 390 395 400

Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser

405 410 415

Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala

420 425 430

Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys

435 440 445

<210> 211

<211> 448

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность ТЦ

<400> 211

Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asp Tyr

20 25 30

Tyr Met Tyr Trp Ile Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val

35 40 45

Ser Thr Ile Ser Asp Gly Gly Thr Asn Ile Tyr Tyr Thr Asp Asn Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Thr Glu Asp Thr Ala Val Tyr Phe Cys

85 90 95

Ala Arg Ala Ala Trp Trp Phe Ala Val Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr

100 105 110

Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro

115 120 125

Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly

130 135 140

Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn

145 150 155 160

Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln

165 170 175

Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser

180 185 190

Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser

195 200 205

Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr

210 215 220

His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser

225 230 235 240

Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg

245 250 255

Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro

260 265 270

Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala

275 280 285

Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val

290 295 300

Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr

305 310 315 320

Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr

325 330 335

Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu

340 345 350

Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys

355 360 365

Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser

370 375 380

Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp

385 390 395 400

Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser

405 410 415

Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala

420 425 430

Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys

435 440 445

<210> 212

<211> 448

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность ТЦ

<400> 212

Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asp Tyr

20 25 30

Tyr Met Tyr Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val

35 40 45

Ser Thr Ile Ser Asp Gly Gly Thr Asn Ile Tyr Tyr Thr Asp Asn Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Phe Cys

85 90 95

Ala Arg Ala Ala Trp Trp Phe Ala Val Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr

100 105 110

Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro

115 120 125

Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly

130 135 140

Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn

145 150 155 160

Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln

165 170 175

Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser

180 185 190

Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser

195 200 205

Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr

210 215 220

His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser

225 230 235 240

Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg

245 250 255

Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro

260 265 270

Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala

275 280 285

Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val

290 295 300

Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr

305 310 315 320

Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr

325 330 335

Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu

340 345 350

Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys

355 360 365

Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser

370 375 380

Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp

385 390 395 400

Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser

405 410 415

Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala

420 425 430

Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys

435 440 445

<210> 213

<211> 448

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность ТЦ

<400> 213

Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asp Tyr

20 25 30

Tyr Met Tyr Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val

35 40 45

Ser Thr Ile Ser Asp Gly Gly Thr Asn Ile Tyr Tyr Thr Asp Asn Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Phe Cys

85 90 95

Ala Arg Ala Ala Trp Trp Phe Ala Val Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr

100 105 110

Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro

115 120 125

Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly

130 135 140

Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn

145 150 155 160

Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln

165 170 175

Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser

180 185 190

Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser

195 200 205

Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr

210 215 220

His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser

225 230 235 240

Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg

245 250 255

Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro

260 265 270

Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala

275 280 285

Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val

290 295 300

Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr

305 310 315 320

Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr

325 330 335

Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu

340 345 350

Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys

355 360 365

Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser

370 375 380

Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp

385 390 395 400

Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser

405 410 415

Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala

420 425 430

Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys

435 440 445

<210> 214

<211> 448

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность ТЦ

<400> 214

Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asp Tyr

20 25 30

Tyr Met Tyr Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val

35 40 45

Ser Thr Ile Ser Asp Gly Gly Thr Asn Ile Tyr Tyr Thr Asp Asn Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Phe Cys

85 90 95

Ala Arg Ala Ala Trp Trp Phe Ala Val Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr

100 105 110

Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro

115 120 125

Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly

130 135 140

Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn

145 150 155 160

Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln

165 170 175

Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser

180 185 190

Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser

195 200 205

Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr

210 215 220

His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser

225 230 235 240

Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg

245 250 255

Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro

260 265 270

Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala

275 280 285

Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val

290 295 300

Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr

305 310 315 320

Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr

325 330 335

Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu

340 345 350

Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys

355 360 365

Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser

370 375 380

Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp

385 390 395 400

Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser

405 410 415

Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala

420 425 430

Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys

435 440 445

<210> 215

<211> 448

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность ТЦ

<400> 215

Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asp Tyr

20 25 30

Tyr Met Tyr Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val

35 40 45

Ser Thr Ile Ser Asp Gly Gly Thr Asn Ile Tyr Tyr Thr Asp Asn Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Phe Cys

85 90 95

Ala Arg Ala Ala Trp Trp Phe Ala Val Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr

100 105 110

Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro

115 120 125

Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly

130 135 140

Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn

145 150 155 160

Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln

165 170 175

Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser

180 185 190

Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser

195 200 205

Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr

210 215 220

His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser

225 230 235 240

Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg

245 250 255

Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro

260 265 270

Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala

275 280 285

Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val

290 295 300

Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr

305 310 315 320

Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr

325 330 335

Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu

340 345 350

Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys

355 360 365

Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser

370 375 380

Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp

385 390 395 400

Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser

405 410 415

Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala

420 425 430

Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys

435 440 445

<210> 216

<211> 452

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность ТЦ

<400> 216

Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Lys Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Thr Tyr

20 25 30

Gly Met Ser Trp Val Arg Gln Thr Pro Asp Lys Arg Leu Glu Trp Val

35 40 45

Ala Thr Ile Ser Ser Gly Gly Asp Tyr Thr Tyr Tyr Arg Asp Phe Val

50 55 60

Glu Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Ser Ser Leu Lys Ser Glu Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Gln Gly Ile Tyr Asp Arg Thr Tyr Phe Ala Met Asp Tyr Trp

100 105 110

Gly Gln Gly Thr Met Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro

115 120 125

Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr

130 135 140

Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr

145 150 155 160

Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro

165 170 175

Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr

180 185 190

Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn

195 200 205

His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser

210 215 220

Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu

225 230 235 240

Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu

245 250 255

Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser

260 265 270

His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu

275 280 285

Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr

290 295 300

Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn

305 310 315 320

Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro

325 330 335

Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln

340 345 350

Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val

355 360 365

Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val

370 375 380

Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro

385 390 395 400

Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr

405 410 415

Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val

420 425 430

Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu

435 440 445

Ser Pro Gly Lys

450

<210> 217

<211> 452

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность ТЦ

<400> 217

Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Lys Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Thr Tyr

20 25 30

Gly Met Ser Trp Val Arg Gln Thr Pro Asp Lys Arg Leu Glu Trp Val

35 40 45

Ala Thr Ile Ser Ser Gly Gly Asp Tyr Thr Tyr Tyr Arg Asp Phe Val

50 55 60

Glu Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Ser Ser Leu Lys Ser Glu Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Gln Gly Ile Tyr Asp Arg Thr Tyr Phe Ala Met Asp Tyr Trp

100 105 110

Gly Gln Gly Thr Met Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro

115 120 125

Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr

130 135 140

Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr

145 150 155 160

Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro

165 170 175

Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr

180 185 190

Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn

195 200 205

His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser

210 215 220

Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu

225 230 235 240

Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu

245 250 255

Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser

260 265 270

His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu

275 280 285

Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr

290 295 300

Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn

305 310 315 320

Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro

325 330 335

Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln

340 345 350

Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val

355 360 365

Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val

370 375 380

Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro

385 390 395 400

Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr

405 410 415

Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val

420 425 430

Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu

435 440 445

Ser Pro Gly Lys

450

<210> 218

<211> 452

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность ТЦ

<400> 218

Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Lys Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Thr Tyr

20 25 30

Gly Met Ser Trp Val Arg Gln Thr Pro Asp Lys Arg Leu Glu Trp Val

35 40 45

Ala Thr Ile Ser Ser Gly Gly Asp Tyr Thr Tyr Tyr Arg Asp Phe Val

50 55 60

Glu Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Ser Ser Leu Lys Ser Glu Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Gln Gly Ile Tyr Asp Arg Thr Tyr Phe Ala Met Asp Tyr Trp

100 105 110

Gly Gln Gly Thr Met Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro

115 120 125

Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr

130 135 140

Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr

145 150 155 160

Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro

165 170 175

Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr

180 185 190

Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn

195 200 205

His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser

210 215 220

Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu

225 230 235 240

Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu

245 250 255

Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser

260 265 270

His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu

275 280 285

Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr

290 295 300

Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn

305 310 315 320

Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro

325 330 335

Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln

340 345 350

Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val

355 360 365

Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val

370 375 380

Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro

385 390 395 400

Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr

405 410 415

Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val

420 425 430

Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu

435 440 445

Ser Pro Gly Lys

450

<210> 219

<211> 452

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность ТЦ

<400> 219

Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Lys Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Thr Tyr

20 25 30

Gly Met Ser Trp Val Arg Gln Thr Pro Asp Lys Arg Leu Glu Trp Val

35 40 45

Ala Thr Ile Ser Ser Gly Gly Asp Tyr Thr Tyr Tyr Arg Asp Phe Val

50 55 60

Glu Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Ser Ser Leu Lys Ser Glu Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Gln Gly Ile Tyr Asp Arg Thr Tyr Phe Ala Met Asp Tyr Trp

100 105 110

Gly Gln Gly Thr Met Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro

115 120 125

Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr

130 135 140

Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr

145 150 155 160

Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro

165 170 175

Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr

180 185 190

Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn

195 200 205

His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser

210 215 220

Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu

225 230 235 240

Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu

245 250 255

Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser

260 265 270

His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu

275 280 285

Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr

290 295 300

Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn

305 310 315 320

Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro

325 330 335

Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln

340 345 350

Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val

355 360 365

Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val

370 375 380

Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro

385 390 395 400

Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr

405 410 415

Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val

420 425 430

Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu

435 440 445

Ser Pro Gly Lys

450

<210> 220

<211> 452

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность ТЦ

<400> 220

Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Thr Tyr

20 25 30

Gly Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val

35 40 45

Ser Thr Ile Ser Ser Gly Gly Asp Tyr Thr Tyr Tyr Arg Asp Phe Val

50 55 60

Glu Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Gln Gly Ile Tyr Asp Arg Thr Tyr Phe Ala Met Asp Tyr Trp

100 105 110

Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro

115 120 125

Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr

130 135 140

Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr

145 150 155 160

Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro

165 170 175

Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr

180 185 190

Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn

195 200 205

His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser

210 215 220

Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu

225 230 235 240

Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu

245 250 255

Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser

260 265 270

His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu

275 280 285

Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr

290 295 300

Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn

305 310 315 320

Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro

325 330 335

Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln

340 345 350

Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val

355 360 365

Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val

370 375 380

Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro

385 390 395 400

Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr

405 410 415

Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val

420 425 430

Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu

435 440 445

Ser Pro Gly Lys

450

<210> 221

<211> 452

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность ТЦ

<400> 221

Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Thr Tyr

20 25 30

Gly Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val

35 40 45

Ser Thr Ile Ser Ser Gly Gly Asp Tyr Thr Tyr Tyr Arg Asp Phe Val

50 55 60

Glu Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Gln Gly Ile Tyr Asp Arg Thr Tyr Phe Ala Met Asp Tyr Trp

100 105 110

Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro

115 120 125

Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr

130 135 140

Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr

145 150 155 160

Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro

165 170 175

Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr

180 185 190

Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn

195 200 205

His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser

210 215 220

Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu

225 230 235 240

Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu

245 250 255

Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser

260 265 270

His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu

275 280 285

Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr

290 295 300

Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn

305 310 315 320

Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro

325 330 335

Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln

340 345 350

Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val

355 360 365

Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val

370 375 380

Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro

385 390 395 400

Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr

405 410 415

Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val

420 425 430

Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu

435 440 445

Ser Pro Gly Lys

450

<210> 222

<211> 452

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность ТЦ

<400> 222

Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Thr Tyr

20 25 30

Gly Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val

35 40 45

Ser Thr Ile Ser Ser Gly Gly Asp Tyr Thr Tyr Tyr Arg Asp Phe Val

50 55 60

Glu Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Gln Gly Ile Tyr Asp Arg Thr Tyr Phe Ala Met Asp Tyr Trp

100 105 110

Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro

115 120 125

Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr

130 135 140

Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr

145 150 155 160

Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro

165 170 175

Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr

180 185 190

Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn

195 200 205

His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser

210 215 220

Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu

225 230 235 240

Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu

245 250 255

Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser

260 265 270

His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu

275 280 285

Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr

290 295 300

Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn

305 310 315 320

Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro

325 330 335

Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln

340 345 350

Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val

355 360 365

Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val

370 375 380

Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro

385 390 395 400

Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr

405 410 415

Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val

420 425 430

Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu

435 440 445

Ser Pro Gly Lys

450

<210> 223

<211> 452

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность ТЦ

<400> 223

Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Thr Tyr

20 25 30

Gly Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val

35 40 45

Ser Thr Ile Ser Ser Gly Gly Asp Tyr Thr Tyr Tyr Arg Asp Phe Val

50 55 60

Glu Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Gln Gly Ile Tyr Asp Arg Thr Tyr Phe Ala Met Asp Tyr Trp

100 105 110

Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro

115 120 125

Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr

130 135 140

Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr

145 150 155 160

Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro

165 170 175

Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr

180 185 190

Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn

195 200 205

His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser

210 215 220

Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu

225 230 235 240

Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu

245 250 255

Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser

260 265 270

His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu

275 280 285

Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr

290 295 300

Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn

305 310 315 320

Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro

325 330 335

Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln

340 345 350

Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val

355 360 365

Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val

370 375 380

Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro

385 390 395 400

Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr

405 410 415

Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val

420 425 430

Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu

435 440 445

Ser Pro Gly Lys

450

<210> 224

<211> 452

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность ТЦ

<400> 224

Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Thr Tyr

20 25 30

Gly Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val

35 40 45

Ser Thr Ile Ser Ser Gly Gly Asp Tyr Thr Tyr Tyr Arg Asp Phe Val

50 55 60

Glu Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr

65 70 75 80

Val Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Gln Gly Ile Tyr Asp Arg Thr Tyr Phe Ala Met Asp Tyr Trp

100 105 110

Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro

115 120 125

Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr

130 135 140

Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr

145 150 155 160

Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro

165 170 175

Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr

180 185 190

Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn

195 200 205

His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser

210 215 220

Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu

225 230 235 240

Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu

245 250 255

Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser

260 265 270

His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu

275 280 285

Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr

290 295 300

Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn

305 310 315 320

Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro

325 330 335

Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln

340 345 350

Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val

355 360 365

Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val

370 375 380

Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro

385 390 395 400

Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr

405 410 415

Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val

420 425 430

Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu

435 440 445

Ser Pro Gly Lys

450

<210> 225

<211> 452

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность ТЦ

<400> 225

Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Thr Tyr

20 25 30

Gly Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val

35 40 45

Ser Thr Ile Ser Ser Gly Gly Asp Tyr Thr Tyr Tyr Arg Asp Phe Val

50 55 60

Glu Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr

65 70 75 80

Val Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Gln Gly Ile Tyr Asp Arg Thr Tyr Phe Ala Met Asp Tyr Trp

100 105 110

Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro

115 120 125

Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr

130 135 140

Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr

145 150 155 160

Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro

165 170 175

Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr

180 185 190

Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn

195 200 205

His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser

210 215 220

Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu

225 230 235 240

Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu

245 250 255

Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser

260 265 270

His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu

275 280 285

Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr

290 295 300

Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn

305 310 315 320

Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro

325 330 335

Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln

340 345 350

Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val

355 360 365

Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val

370 375 380

Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro

385 390 395 400

Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr

405 410 415

Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val

420 425 430

Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu

435 440 445

Ser Pro Gly Lys

450

<210> 226

<211> 452

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность ТЦ

<400> 226

Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Thr Tyr

20 25 30

Gly Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val

35 40 45

Ser Thr Ile Ser Ser Gly Gly Asp Tyr Thr Tyr Tyr Arg Asp Phe Val

50 55 60

Glu Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr

65 70 75 80

Val Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Gln Gly Ile Tyr Asp Arg Thr Tyr Phe Ala Met Asp Tyr Trp

100 105 110

Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro

115 120 125

Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr

130 135 140

Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr

145 150 155 160

Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro

165 170 175

Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr

180 185 190

Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn

195 200 205

His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser

210 215 220

Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu

225 230 235 240

Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu

245 250 255

Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser

260 265 270

His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu

275 280 285

Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr

290 295 300

Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn

305 310 315 320

Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro

325 330 335

Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln

340 345 350

Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val

355 360 365

Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val

370 375 380

Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro

385 390 395 400

Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr

405 410 415

Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val

420 425 430

Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu

435 440 445

Ser Pro Gly Lys

450

<210> 227

<211> 452

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность ТЦ

<400> 227

Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Thr Tyr

20 25 30

Gly Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val

35 40 45

Ser Thr Ile Ser Ser Gly Gly Asp Tyr Thr Tyr Tyr Arg Asp Phe Val

50 55 60

Glu Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr

65 70 75 80

Val Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Gln Gly Ile Tyr Asp Arg Thr Tyr Phe Ala Met Asp Tyr Trp

100 105 110

Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro

115 120 125

Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr

130 135 140

Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr

145 150 155 160

Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro

165 170 175

Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr

180 185 190

Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn

195 200 205

His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser

210 215 220

Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu

225 230 235 240

Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu

245 250 255

Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser

260 265 270

His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu

275 280 285

Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr

290 295 300

Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn

305 310 315 320

Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro

325 330 335

Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln

340 345 350

Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val

355 360 365

Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val

370 375 380

Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro

385 390 395 400

Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr

405 410 415

Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val

420 425 430

Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu

435 440 445

Ser Pro Gly Lys

450

<210> 228

<211> 452

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность ТЦ

<400> 228

Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Thr Tyr

20 25 30

Gly Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val

35 40 45

Ser Thr Ile Ser Ser Gly Gly Asp Tyr Thr Tyr Tyr Arg Asp Phe Val

50 55 60

Glu Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Gln Gly Ile Tyr Asp Arg Thr Tyr Phe Ala Met Asp Tyr Trp

100 105 110

Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro

115 120 125

Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr

130 135 140

Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr

145 150 155 160

Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro

165 170 175

Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr

180 185 190

Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn

195 200 205

His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser

210 215 220

Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu

225 230 235 240

Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu

245 250 255

Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser

260 265 270

His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu

275 280 285

Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr

290 295 300

Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn

305 310 315 320

Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro

325 330 335

Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln

340 345 350

Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val

355 360 365

Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val

370 375 380

Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro

385 390 395 400

Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr

405 410 415

Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val

420 425 430

Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu

435 440 445

Ser Pro Gly Lys

450

<210> 229

<211> 452

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность ТЦ

<400> 229

Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Thr Tyr

20 25 30

Gly Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val

35 40 45

Ser Thr Ile Ser Ser Gly Gly Asp Tyr Thr Tyr Tyr Arg Asp Phe Val

50 55 60

Glu Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Gln Gly Ile Tyr Asp Arg Thr Tyr Phe Ala Met Asp Tyr Trp

100 105 110

Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro

115 120 125

Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr

130 135 140

Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr

145 150 155 160

Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro

165 170 175

Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr

180 185 190

Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn

195 200 205

His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser

210 215 220

Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu

225 230 235 240

Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu

245 250 255

Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser

260 265 270

His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu

275 280 285

Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr

290 295 300

Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn

305 310 315 320

Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro

325 330 335

Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln

340 345 350

Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val

355 360 365

Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val

370 375 380

Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro

385 390 395 400

Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr

405 410 415

Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val

420 425 430

Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu

435 440 445

Ser Pro Gly Lys

450

<210> 230

<211> 452

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность ТЦ

<400> 230

Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Thr Tyr

20 25 30

Gly Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val

35 40 45

Ser Thr Ile Ser Ser Gly Gly Asp Tyr Thr Tyr Tyr Arg Asp Phe Val

50 55 60

Glu Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Gln Gly Ile Tyr Asp Arg Thr Tyr Phe Ala Met Asp Tyr Trp

100 105 110

Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro

115 120 125

Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr

130 135 140

Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr

145 150 155 160

Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro

165 170 175

Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr

180 185 190

Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn

195 200 205

His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser

210 215 220

Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu

225 230 235 240

Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu

245 250 255

Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser

260 265 270

His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu

275 280 285

Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr

290 295 300

Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn

305 310 315 320

Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro

325 330 335

Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln

340 345 350

Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val

355 360 365

Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val

370 375 380

Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro

385 390 395 400

Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr

405 410 415

Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val

420 425 430

Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu

435 440 445

Ser Pro Gly Lys

450

<210> 231

<211> 452

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность ТЦ

<400> 231

Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Thr Tyr

20 25 30

Gly Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val

35 40 45

Ser Thr Ile Ser Ser Gly Gly Asp Tyr Thr Tyr Tyr Arg Asp Phe Val

50 55 60

Glu Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Gln Gly Ile Tyr Asp Arg Thr Tyr Phe Ala Met Asp Tyr Trp

100 105 110

Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro

115 120 125

Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr

130 135 140

Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr

145 150 155 160

Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro

165 170 175

Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr

180 185 190

Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn

195 200 205

His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser

210 215 220

Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu

225 230 235 240

Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu

245 250 255

Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser

260 265 270

His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu

275 280 285

Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr

290 295 300

Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn

305 310 315 320

Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro

325 330 335

Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln

340 345 350

Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val

355 360 365

Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val

370 375 380

Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro

385 390 395 400

Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr

405 410 415

Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val

420 425 430

Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu

435 440 445

Ser Pro Gly Lys

450

<210> 232

<211> 449

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность ТЦ

<400> 232

Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu

1 5 10 15

Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Phe Ser Leu Thr Ser Tyr

20 25 30

Gly Leu His Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile

35 40 45

Gly Val Ile Trp Ala Gly Gly Asp Thr Asp Tyr Asn Ser Ala Leu Met

50 55 60

Ser Arg Val Thr Ile Ser Val Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Ser Leu

65 70 75 80

Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Val

85 90 95

Arg Asp Gly Ser Ser Ser Asp Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly

100 105 110

Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe

115 120 125

Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu

130 135 140

Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp

145 150 155 160

Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu

165 170 175

Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser

180 185 190

Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro

195 200 205

Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys

210 215 220

Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro

225 230 235 240

Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser

245 250 255

Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp

260 265 270

Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn

275 280 285

Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val

290 295 300

Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu

305 310 315 320

Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys

325 330 335

Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr

340 345 350

Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr

355 360 365

Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu

370 375 380

Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu

385 390 395 400

Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys

405 410 415

Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu

420 425 430

Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly

435 440 445

Lys

<210> 233

<211> 449

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность ТЦ

<400> 233

Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu

1 5 10 15

Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Phe Ser Leu Thr Ser Tyr

20 25 30

Gly Leu His Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile

35 40 45

Gly Val Ile Trp Ala Gly Gly Asp Thr Asp Tyr Asn Ser Ala Leu Met

50 55 60

Ser Arg Val Thr Ile Ser Val Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Ser Leu

65 70 75 80

Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Val

85 90 95

Arg Asp Gly Ser Ser Ser Asp Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly

100 105 110

Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe

115 120 125

Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu

130 135 140

Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp

145 150 155 160

Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu

165 170 175

Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser

180 185 190

Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro

195 200 205

Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys

210 215 220

Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro

225 230 235 240

Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser

245 250 255

Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp

260 265 270

Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn

275 280 285

Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val

290 295 300

Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu

305 310 315 320

Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys

325 330 335

Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr

340 345 350

Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr

355 360 365

Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu

370 375 380

Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu

385 390 395 400

Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys

405 410 415

Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu

420 425 430

Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly

435 440 445

Lys

<210> 234

<211> 449

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность ТЦ

<400> 234

Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu

1 5 10 15

Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Phe Ser Leu Thr Ser Tyr

20 25 30

Gly Leu His Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile

35 40 45

Gly Val Ile Trp Ala Gly Gly Asp Thr Asp Tyr Asn Ser Ala Leu Met

50 55 60

Ser Arg Val Thr Ile Ser Val Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Ser Leu

65 70 75 80

Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Val

85 90 95

Arg Asp Gly Ser Ser Ser Asp Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly

100 105 110

Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe

115 120 125

Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu

130 135 140

Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp

145 150 155 160

Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu

165 170 175

Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser

180 185 190

Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro

195 200 205

Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys

210 215 220

Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro

225 230 235 240

Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser

245 250 255

Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp

260 265 270

Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn

275 280 285

Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val

290 295 300

Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu

305 310 315 320

Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys

325 330 335

Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr

340 345 350

Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr

355 360 365

Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu

370 375 380

Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu

385 390 395 400

Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys

405 410 415

Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu

420 425 430

Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly

435 440 445

Lys

<210> 235

<211> 449

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность ТЦ

<400> 235

Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu

1 5 10 15

Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Phe Ser Leu Thr Ser Tyr

20 25 30

Gly Leu His Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile

35 40 45

Gly Val Ile Trp Ala Gly Gly Asp Thr Asp Tyr Asn Ser Ala Leu Met

50 55 60

Ser Arg Val Thr Ile Ser Val Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Ser Leu

65 70 75 80

Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Val

85 90 95

Arg Asp Gly Ser Ser Ser Asp Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly

100 105 110

Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe

115 120 125

Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu

130 135 140

Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp

145 150 155 160

Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu

165 170 175

Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser

180 185 190

Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro

195 200 205

Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys

210 215 220

Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro

225 230 235 240

Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser

245 250 255

Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp

260 265 270

Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn

275 280 285

Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val

290 295 300

Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu

305 310 315 320

Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys

325 330 335

Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr

340 345 350

Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr

355 360 365

Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu

370 375 380

Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu

385 390 395 400

Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys

405 410 415

Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu

420 425 430

Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly

435 440 445

Lys

<210> 236

<211> 449

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность ТЦ

<400> 236

Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu

1 5 10 15

Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Phe Ser Leu Thr Ser Tyr

20 25 30

Gly Leu His Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Arg Ala Leu Glu Trp Ile

35 40 45

Gly Val Ile Trp Ala Gly Gly Asp Thr Asp Tyr Asn Ser Ala Leu Met

50 55 60

Ser Arg Val Thr Ile Ser Val Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Ser Leu

65 70 75 80

Arg Leu Thr Ser Leu Thr Ala Ala Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys Val

85 90 95

Arg Asp Gly Ser Ser Ser Asp Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly

100 105 110

Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe

115 120 125

Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu

130 135 140

Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp

145 150 155 160

Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu

165 170 175

Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser

180 185 190

Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro

195 200 205

Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys

210 215 220

Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro

225 230 235 240

Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser

245 250 255

Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp

260 265 270

Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn

275 280 285

Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val

290 295 300

Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu

305 310 315 320

Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys

325 330 335

Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr

340 345 350

Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr

355 360 365

Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu

370 375 380

Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu

385 390 395 400

Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys

405 410 415

Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu

420 425 430

Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly

435 440 445

Lys

<210> 237

<211> 449

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность ТЦ

<400> 237

Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu

1 5 10 15

Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Phe Ser Leu Thr Ser Tyr

20 25 30

Gly Leu His Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Arg Ala Leu Glu Trp Ile

35 40 45

Gly Val Ile Trp Ala Gly Gly Asp Thr Asp Tyr Asn Ser Ala Leu Met

50 55 60

Ser Arg Val Thr Ile Ser Val Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Ser Leu

65 70 75 80

Arg Leu Thr Ser Leu Thr Ala Ala Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys Val

85 90 95

Arg Asp Gly Ser Ser Ser Asp Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly

100 105 110

Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe

115 120 125

Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu

130 135 140

Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp

145 150 155 160

Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu

165 170 175

Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser

180 185 190

Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro

195 200 205

Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys

210 215 220

Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro

225 230 235 240

Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser

245 250 255

Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp

260 265 270

Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn

275 280 285

Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val

290 295 300

Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu

305 310 315 320

Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys

325 330 335

Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr

340 345 350

Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr

355 360 365

Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu

370 375 380

Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu

385 390 395 400

Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys

405 410 415

Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu

420 425 430

Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly

435 440 445

Lys

<210> 238

<211> 449

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность ТЦ

<400> 238

Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu

1 5 10 15

Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Phe Ser Leu Thr Ser Tyr

20 25 30

Gly Leu His Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Arg Ala Leu Glu Trp Ile

35 40 45

Gly Val Ile Trp Ala Gly Gly Asp Thr Asp Tyr Asn Ser Ala Leu Met

50 55 60

Ser Arg Val Thr Ile Ser Val Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Ser Leu

65 70 75 80

Arg Leu Thr Ser Leu Thr Ala Ala Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys Val

85 90 95

Arg Asp Gly Ser Ser Ser Asp Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly

100 105 110

Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe

115 120 125

Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu

130 135 140

Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp

145 150 155 160

Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu

165 170 175

Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser

180 185 190

Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro

195 200 205

Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys

210 215 220

Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro

225 230 235 240

Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser

245 250 255

Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp

260 265 270

Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn

275 280 285

Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val

290 295 300

Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu

305 310 315 320

Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys

325 330 335

Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr

340 345 350

Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr

355 360 365

Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu

370 375 380

Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu

385 390 395 400

Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys

405 410 415

Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu

420 425 430

Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly

435 440 445

Lys

<210> 239

<211> 449

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность ТЦ

<400> 239

Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu

1 5 10 15

Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Phe Ser Leu Thr Ser Tyr

20 25 30

Gly Leu His Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Arg Ala Leu Glu Trp Ile

35 40 45

Gly Val Ile Trp Ala Gly Gly Asp Thr Asp Tyr Asn Ser Ala Leu Met

50 55 60

Ser Arg Val Thr Ile Ser Val Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Ser Leu

65 70 75 80

Arg Leu Thr Ser Leu Thr Ala Ala Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys Val

85 90 95

Arg Asp Gly Ser Ser Ser Asp Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly

100 105 110

Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe

115 120 125

Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu

130 135 140

Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp

145 150 155 160

Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu

165 170 175

Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser

180 185 190

Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro

195 200 205

Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys

210 215 220

Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro

225 230 235 240

Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser

245 250 255

Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp

260 265 270

Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn

275 280 285

Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val

290 295 300

Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu

305 310 315 320

Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys

325 330 335

Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr

340 345 350

Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr

355 360 365

Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu

370 375 380

Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu

385 390 395 400

Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys

405 410 415

Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu

420 425 430

Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly

435 440 445

Lys

<210> 240

<211> 451

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность ТЦ

<400> 240

Gln Val Thr Leu Lys Glu Ser Gly Pro Gly Ile Leu Gln Pro Ser Gln

1 5 10 15

Thr Leu Ser Leu Thr Cys Ser Phe Ser Gly Phe Ser Leu Thr Ser Tyr

20 25 30

Gly Leu His Val Ser Trp Ile Arg Gln Pro Ser Gly Lys Gly Leu Glu

35 40 45

Trp Leu Ala Val Ile Trp Ala Gly Gly Asp Thr Asp Tyr Asn Ser Ala

50 55 60

Leu Met Ser Arg Leu Thr Ile Ser Lys Asp Thr Ser Ser Asn Gln Val

65 70 75 80

Phe Leu Lys Ile Thr Ser Val Asp Thr Arg Asp Thr Ala Thr Tyr Tyr

85 90 95

Cys Val Arg Asp Gly Ser Ser Ser Asp Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly

100 105 110

Glu Gly Thr Ser Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser

115 120 125

Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala

130 135 140

Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val

145 150 155 160

Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala

165 170 175

Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val

180 185 190

Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His

195 200 205

Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys

210 215 220

Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly

225 230 235 240

Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met

245 250 255

Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His

260 265 270

Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val

275 280 285

His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr

290 295 300

Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly

305 310 315 320

Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile

325 330 335

Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val

340 345 350

Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser

355 360 365

Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu

370 375 380

Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro

385 390 395 400

Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val

405 410 415

Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met

420 425 430

His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser

435 440 445

Pro Gly Lys

450

<210> 241

<211> 451

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность ТЦ

<400> 241

Gln Val Thr Leu Lys Glu Ser Gly Pro Gly Ile Leu Gln Pro Ser Gln

1 5 10 15

Thr Leu Ser Leu Thr Cys Ser Phe Ser Gly Phe Ser Leu Thr Ser Tyr

20 25 30

Gly Leu His Val Ser Trp Ile Arg Gln Pro Ser Gly Lys Gly Leu Glu

35 40 45

Trp Leu Ala Val Ile Trp Ala Gly Gly Asp Thr Asp Tyr Asn Ser Ala

50 55 60

Leu Met Ser Arg Leu Thr Ile Ser Lys Asp Thr Ser Ser Asn Gln Val

65 70 75 80

Phe Leu Lys Ile Thr Ser Val Asp Thr Arg Asp Thr Ala Thr Tyr Tyr

85 90 95

Cys Val Arg Asp Gly Ser Ser Ser Asp Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly

100 105 110

Glu Gly Thr Ser Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser

115 120 125

Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala

130 135 140

Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val

145 150 155 160

Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala

165 170 175

Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val

180 185 190

Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His

195 200 205

Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys

210 215 220

Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly

225 230 235 240

Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met

245 250 255

Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His

260 265 270

Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val

275 280 285

His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr

290 295 300

Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly

305 310 315 320

Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile

325 330 335

Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val

340 345 350

Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser

355 360 365

Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu

370 375 380

Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro

385 390 395 400

Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val

405 410 415

Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met

420 425 430

His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser

435 440 445

Pro Gly Lys

450

<210> 242

<211> 451

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность ТЦ

<400> 242

Gln Val Thr Leu Lys Glu Ser Gly Pro Gly Ile Leu Gln Pro Ser Gln

1 5 10 15

Thr Leu Ser Leu Thr Cys Ser Phe Ser Gly Phe Ser Leu Thr Ser Tyr

20 25 30

Gly Leu His Val Ser Trp Ile Arg Gln Pro Ser Gly Lys Gly Leu Glu

35 40 45

Trp Leu Ala Val Ile Trp Ala Gly Gly Asp Thr Asp Tyr Asn Ser Ala

50 55 60

Leu Met Ser Arg Leu Thr Ile Ser Lys Asp Thr Ser Ser Asn Gln Val

65 70 75 80

Phe Leu Lys Ile Thr Ser Val Asp Thr Arg Asp Thr Ala Thr Tyr Tyr

85 90 95

Cys Val Arg Asp Gly Ser Ser Ser Asp Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly

100 105 110

Glu Gly Thr Ser Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser

115 120 125

Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala

130 135 140

Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val

145 150 155 160

Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala

165 170 175

Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val

180 185 190

Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His

195 200 205

Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys

210 215 220

Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly

225 230 235 240

Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met

245 250 255

Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His

260 265 270

Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val

275 280 285

His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr

290 295 300

Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly

305 310 315 320

Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile

325 330 335

Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val

340 345 350

Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser

355 360 365

Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu

370 375 380

Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro

385 390 395 400

Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val

405 410 415

Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met

420 425 430

His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser

435 440 445

Pro Gly Lys

450

<210> 243

<211> 451

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность ТЦ

<400> 243

Gln Val Thr Leu Lys Glu Ser Gly Pro Gly Ile Leu Gln Pro Ser Gln

1 5 10 15

Thr Leu Ser Leu Thr Cys Ser Phe Ser Gly Phe Ser Leu Thr Ser Tyr

20 25 30

Gly Leu His Val Ser Trp Ile Arg Gln Pro Ser Gly Lys Gly Leu Glu

35 40 45

Trp Leu Ala Val Ile Trp Ala Gly Gly Asp Thr Asp Tyr Asn Ser Ala

50 55 60

Leu Met Ser Arg Leu Thr Ile Ser Lys Asp Thr Ser Ser Asn Gln Val

65 70 75 80

Phe Leu Lys Ile Thr Ser Val Asp Thr Arg Asp Thr Ala Thr Tyr Tyr

85 90 95

Cys Val Arg Asp Gly Ser Ser Ser Asp Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly

100 105 110

Glu Gly Thr Ser Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser

115 120 125

Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala

130 135 140

Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val

145 150 155 160

Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala

165 170 175

Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val

180 185 190

Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His

195 200 205

Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys

210 215 220

Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly

225 230 235 240

Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met

245 250 255

Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His

260 265 270

Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val

275 280 285

His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr

290 295 300

Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly

305 310 315 320

Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile

325 330 335

Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val

340 345 350

Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser

355 360 365

Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu

370 375 380

Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro

385 390 395 400

Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val

405 410 415

Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met

420 425 430

His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser

435 440 445

Pro Gly Lys

450

<210> 244

<211> 449

<212> ПРТ

<213> искусственная

<220>

<223> Последовательность ТЦ

<400> 244

Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Val Ala Ser Gly Phe Ser Leu Thr Ser Tyr

20 25 30

Gly Leu His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val

35 40 45

Ala Val Ile Trp Ala Gly Gly Asp Thr Asp Tyr Asn Ser Ala Leu Met

50 55 60

Ser Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Met Phe Leu

65 70 75 80

Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Val

85 90 95

Arg Asp Gly Ser Ser Ser Asp Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly

100 105 110

Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe

115 120 125

Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu

130 135 140

Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp

145 150 155 160

Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu

165 170 175

Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser

180 185 190

Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro

195 200 205

Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys

210 215 220

Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro

225 230 235 240

Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser

245 250 255

Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp

260 265 270

Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn

275 280 285

Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val

290 295 300

Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu

305 310 315 320

Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys

325 330 335

Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr

340 345 350

Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr

355 360 365

Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu

370 375 380

Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu

385 390 395 400

Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys

405 410 415

Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu

420 425 430

Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly

435 440 445

Lys

<210> 245

<211> 449

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность ТЦ

<400> 245

Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Val Ala Ser Gly Phe Ser Leu Thr Ser Tyr

20 25 30

Gly Leu His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val

35 40 45

Ala Val Ile Trp Ala Gly Gly Asp Thr Asp Tyr Asn Ser Ala Leu Met

50 55 60

Ser Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Met Phe Leu

65 70 75 80

Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Val

85 90 95

Arg Asp Gly Ser Ser Ser Asp Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly

100 105 110

Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe

115 120 125

Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu

130 135 140

Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp

145 150 155 160

Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu

165 170 175

Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser

180 185 190

Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro

195 200 205

Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys

210 215 220

Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro

225 230 235 240

Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser

245 250 255

Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp

260 265 270

Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn

275 280 285

Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val

290 295 300

Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu

305 310 315 320

Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys

325 330 335

Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr

340 345 350

Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr

355 360 365

Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu

370 375 380

Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu

385 390 395 400

Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys

405 410 415

Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu

420 425 430

Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly

435 440 445

Lys

<210> 246

<211> 449

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность ТЦ

<400> 246

Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Val Ala Ser Gly Phe Ser Leu Thr Ser Tyr

20 25 30

Gly Leu His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val

35 40 45

Ala Val Ile Trp Ala Gly Gly Asp Thr Asp Tyr Asn Ser Ala Leu Met

50 55 60

Ser Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Met Phe Leu

65 70 75 80

Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Val

85 90 95

Arg Asp Gly Ser Ser Ser Asp Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly

100 105 110

Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe

115 120 125

Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu

130 135 140

Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp

145 150 155 160

Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu

165 170 175

Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser

180 185 190

Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro

195 200 205

Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys

210 215 220

Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro

225 230 235 240

Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser

245 250 255

Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp

260 265 270

Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn

275 280 285

Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val

290 295 300

Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu

305 310 315 320

Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys

325 330 335

Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr

340 345 350

Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr

355 360 365

Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu

370 375 380

Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu

385 390 395 400

Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys

405 410 415

Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu

420 425 430

Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly

435 440 445

Lys

<210> 247

<211> 449

<212> ПРТ

<213> искусственная

<220>

<223> Последовательность ТЦ

<400> 247

Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Val Ala Ser Gly Phe Ser Leu Thr Ser Tyr

20 25 30

Gly Leu His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val

35 40 45

Ala Val Ile Trp Ala Gly Gly Asp Thr Asp Tyr Asn Ser Ala Leu Met

50 55 60

Ser Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Met Phe Leu

65 70 75 80

Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Val

85 90 95

Arg Asp Gly Ser Ser Ser Asp Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly

100 105 110

Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe

115 120 125

Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu

130 135 140

Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp

145 150 155 160

Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu

165 170 175

Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser

180 185 190

Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro

195 200 205

Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys

210 215 220

Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro

225 230 235 240

Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser

245 250 255

Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp

260 265 270

Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn

275 280 285

Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val

290 295 300

Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu

305 310 315 320

Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys

325 330 335

Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr

340 345 350

Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr

355 360 365

Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu

370 375 380

Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu

385 390 395 400

Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys

405 410 415

Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu

420 425 430

Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly

435 440 445

Lys

<210> 248

<211> 213

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность ЛЦ

<400> 248

Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly

1 5 10 15

Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Ser Ala Thr Ser Ser Val Gly Tyr Met

20 25 30

His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile Tyr

35 40 45

Asp Thr Ser Asn Leu Ala Ser Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly Ser

50 55 60

Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Glu Pro Glu

65 70 75 80

Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Phe Gln Gly Ser Gly Tyr Pro Phe Thr

85 90 95

Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala Pro

100 105 110

Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly Thr

115 120 125

Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys

130 135 140

Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln Glu

145 150 155 160

Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser

165 170 175

Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr Ala

180 185 190

Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe

195 200 205

Asn Arg Gly Glu Cys

210

<210> 249

<211> 213

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность ЛЦ

<400> 249

Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly

1 5 10 15

Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Ser Ala Thr Ser Ser Val Gly Tyr Met

20 25 30

His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile Tyr

35 40 45

Asp Thr Ser Asn Leu Ala Ser Gly Val Pro Ala Arg Phe Ser Gly Ser

50 55 60

Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Glu Pro Glu

65 70 75 80

Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Phe Gln Gly Ser Gly Tyr Pro Phe Thr

85 90 95

Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala Pro

100 105 110

Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly Thr

115 120 125

Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys

130 135 140

Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln Glu

145 150 155 160

Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser

165 170 175

Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr Ala

180 185 190

Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe

195 200 205

Asn Arg Gly Glu Cys

210

<210> 250

<211> 213

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность ЛЦ

<400> 250

Glu Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Ser Ala Thr Ser Ser Val Gly Tyr Met

20 25 30

His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile Tyr

35 40 45

Asp Thr Ser Asn Leu Ala Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser

50 55 60

Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu

65 70 75 80

Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Phe Gln Gly Ser Gly Tyr Pro Phe Thr

85 90 95

Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala Pro

100 105 110

Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly Thr

115 120 125

Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys

130 135 140

Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln Glu

145 150 155 160

Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser

165 170 175

Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr Ala

180 185 190

Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe

195 200 205

Asn Arg Gly Glu Cys

210

<210> 251

<211> 213

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность ЛЦ

<400> 251

Asp Val Val Met Thr Gln Ser Pro Ala Phe Leu Ser Val Thr Pro Gly

1 5 10 15

Glu Lys Val Thr Ile Thr Cys Ser Ala Thr Ser Ser Val Gly Tyr Met

20 25 30

His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Asp Gln Ala Pro Lys Leu Leu Ile Lys

35 40 45

Asp Thr Ser Asn Leu Ala Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser

50 55 60

Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Phe Thr Ile Ser Ser Leu Glu Ala Glu

65 70 75 80

Asp Ala Ala Thr Tyr Tyr Cys Phe Gln Gly Ser Gly Tyr Pro Phe Thr

85 90 95

Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala Pro

100 105 110

Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly Thr

115 120 125

Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys

130 135 140

Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln Glu

145 150 155 160

Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser

165 170 175

Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr Ala

180 185 190

Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe

195 200 205

Asn Arg Gly Glu Cys

210

<210> 252

<211> 213

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность ЛЦ

<400> 252

Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly

1 5 10 15

Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Ser Ala Thr Ser Ser Val Gly Tyr Met

20 25 30

His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile Tyr

35 40 45

Asp Thr Ser Asn Leu Ala Ser Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly Ser

50 55 60

Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Glu Pro Glu

65 70 75 80

Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Phe Gln Gly Ser Gly Tyr Pro Phe Thr

85 90 95

Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala Pro

100 105 110

Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly Thr

115 120 125

Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys

130 135 140

Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln Glu

145 150 155 160

Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser

165 170 175

Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr Ala

180 185 190

Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe

195 200 205

Asn Arg Gly Glu Cys

210

<210> 253

<211> 213

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность ЛЦ

<400> 253

Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly

1 5 10 15

Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Ser Ala Thr Ser Ser Val Gly Tyr Met

20 25 30

His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile Tyr

35 40 45

Asp Thr Ser Asn Leu Ala Ser Gly Val Pro Ala Arg Phe Ser Gly Ser

50 55 60

Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Glu Pro Glu

65 70 75 80

Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Phe Gln Gly Ser Gly Tyr Pro Phe Thr

85 90 95

Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala Pro

100 105 110

Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly Thr

115 120 125

Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys

130 135 140

Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln Glu

145 150 155 160

Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser

165 170 175

Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr Ala

180 185 190

Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe

195 200 205

Asn Arg Gly Glu Cys

210

<210> 254

<211> 213

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность ЛЦ

<400> 254

Glu Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Ser Ala Thr Ser Ser Val Gly Tyr Met

20 25 30

His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile Tyr

35 40 45

Asp Thr Ser Asn Leu Ala Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser

50 55 60

Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu

65 70 75 80

Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Phe Gln Gly Ser Gly Tyr Pro Phe Thr

85 90 95

Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala Pro

100 105 110

Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly Thr

115 120 125

Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys

130 135 140

Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln Glu

145 150 155 160

Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser

165 170 175

Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr Ala

180 185 190

Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe

195 200 205

Asn Arg Gly Glu Cys

210

<210> 255

<211> 213

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность ЛЦ

<400> 255

Asp Val Val Met Thr Gln Ser Pro Ala Phe Leu Ser Val Thr Pro Gly

1 5 10 15

Glu Lys Val Thr Ile Thr Cys Ser Ala Thr Ser Ser Val Gly Tyr Met

20 25 30

His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Asp Gln Ala Pro Lys Leu Leu Ile Lys

35 40 45

Asp Thr Ser Asn Leu Ala Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser

50 55 60

Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Phe Thr Ile Ser Ser Leu Glu Ala Glu

65 70 75 80

Asp Ala Ala Thr Tyr Tyr Cys Phe Gln Gly Ser Gly Tyr Pro Phe Thr

85 90 95

Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala Pro

100 105 110

Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly Thr

115 120 125

Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys

130 135 140

Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln Glu

145 150 155 160

Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser

165 170 175

Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr Ala

180 185 190

Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe

195 200 205

Asn Arg Gly Glu Cys

210

<210> 256

<211> 213

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность ЛЦ

<400> 256

Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly

1 5 10 15

Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Ser Ala Thr Ser Ser Val Gly Tyr Met

20 25 30

His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile Tyr

35 40 45

Asp Thr Ser Asn Leu Ala Ser Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly Ser

50 55 60

Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Glu Pro Glu

65 70 75 80

Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Phe Gln Gly Ser Gly Tyr Pro Phe Thr

85 90 95

Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala Pro

100 105 110

Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly Thr

115 120 125

Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys

130 135 140

Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln Glu

145 150 155 160

Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser

165 170 175

Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr Ala

180 185 190

Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe

195 200 205

Asn Arg Gly Glu Cys

210

<210> 257

<211> 213

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность ЛЦ

<400> 257

Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly

1 5 10 15

Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Ser Ala Thr Ser Ser Val Gly Tyr Met

20 25 30

His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile Tyr

35 40 45

Asp Thr Ser Asn Leu Ala Ser Gly Val Pro Ala Arg Phe Ser Gly Ser

50 55 60

Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Glu Pro Glu

65 70 75 80

Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Phe Gln Gly Ser Gly Tyr Pro Phe Thr

85 90 95

Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala Pro

100 105 110

Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly Thr

115 120 125

Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys

130 135 140

Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln Glu

145 150 155 160

Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser

165 170 175

Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr Ala

180 185 190

Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe

195 200 205

Asn Arg Gly Glu Cys

210

<210> 258

<211> 213

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность ЛЦ

<400> 258

Glu Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Ser Ala Thr Ser Ser Val Gly Tyr Met

20 25 30

His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile Tyr

35 40 45

Asp Thr Ser Asn Leu Ala Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser

50 55 60

Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu

65 70 75 80

Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Phe Gln Gly Ser Gly Tyr Pro Phe Thr

85 90 95

Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala Pro

100 105 110

Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly Thr

115 120 125

Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys

130 135 140

Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln Glu

145 150 155 160

Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser

165 170 175

Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr Ala

180 185 190

Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe

195 200 205

Asn Arg Gly Glu Cys

210

<210> 259

<211> 213

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность ЛЦ

<400> 259

Asp Val Val Met Thr Gln Ser Pro Ala Phe Leu Ser Val Thr Pro Gly

1 5 10 15

Glu Lys Val Thr Ile Thr Cys Ser Ala Thr Ser Ser Val Gly Tyr Met

20 25 30

His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Asp Gln Ala Pro Lys Leu Leu Ile Lys

35 40 45

Asp Thr Ser Asn Leu Ala Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser

50 55 60

Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Phe Thr Ile Ser Ser Leu Glu Ala Glu

65 70 75 80

Asp Ala Ala Thr Tyr Tyr Cys Phe Gln Gly Ser Gly Tyr Pro Phe Thr

85 90 95

Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala Pro

100 105 110

Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly Thr

115 120 125

Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys

130 135 140

Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln Glu

145 150 155 160

Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser

165 170 175

Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr Ala

180 185 190

Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe

195 200 205

Asn Arg Gly Glu Cys

210

<210> 260

<211> 213

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность ЛЦ

<400> 260

Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly

1 5 10 15

Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Ser Ala Thr Ser Ser Val Gly Tyr Met

20 25 30

His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile Tyr

35 40 45

Asp Thr Ser Asn Leu Ala Ser Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly Ser

50 55 60

Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Glu Pro Glu

65 70 75 80

Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Phe Gln Gly Ser Gly Tyr Pro Phe Thr

85 90 95

Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala Pro

100 105 110

Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly Thr

115 120 125

Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys

130 135 140

Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln Glu

145 150 155 160

Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser

165 170 175

Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr Ala

180 185 190

Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe

195 200 205

Asn Arg Gly Glu Cys

210

<210> 261

<211> 213

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность ЛЦ

<400> 261

Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly

1 5 10 15

Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Ser Ala Thr Ser Ser Val Gly Tyr Met

20 25 30

His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile Tyr

35 40 45

Asp Thr Ser Asn Leu Ala Ser Gly Val Pro Ala Arg Phe Ser Gly Ser

50 55 60

Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Glu Pro Glu

65 70 75 80

Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Phe Gln Gly Ser Gly Tyr Pro Phe Thr

85 90 95

Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala Pro

100 105 110

Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly Thr

115 120 125

Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys

130 135 140

Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln Glu

145 150 155 160

Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser

165 170 175

Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr Ala

180 185 190

Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe

195 200 205

Asn Arg Gly Glu Cys

210

<210> 262

<211> 213

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность ЛЦ

<400> 262

Glu Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Ser Ala Thr Ser Ser Val Gly Tyr Met

20 25 30

His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile Tyr

35 40 45

Asp Thr Ser Asn Leu Ala Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser

50 55 60

Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu

65 70 75 80

Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Phe Gln Gly Ser Gly Tyr Pro Phe Thr

85 90 95

Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala Pro

100 105 110

Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly Thr

115 120 125

Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys

130 135 140

Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln Glu

145 150 155 160

Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser

165 170 175

Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr Ala

180 185 190

Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe

195 200 205

Asn Arg Gly Glu Cys

210

<210> 263

<211> 213

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность ЛЦ

<400> 263

Asp Val Val Met Thr Gln Ser Pro Ala Phe Leu Ser Val Thr Pro Gly

1 5 10 15

Glu Lys Val Thr Ile Thr Cys Ser Ala Thr Ser Ser Val Gly Tyr Met

20 25 30

His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Asp Gln Ala Pro Lys Leu Leu Ile Lys

35 40 45

Asp Thr Ser Asn Leu Ala Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser

50 55 60

Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Phe Thr Ile Ser Ser Leu Glu Ala Glu

65 70 75 80

Asp Ala Ala Thr Tyr Tyr Cys Phe Gln Gly Ser Gly Tyr Pro Phe Thr

85 90 95

Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala Pro

100 105 110

Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly Thr

115 120 125

Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys

130 135 140

Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln Glu

145 150 155 160

Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser

165 170 175

Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr Ala

180 185 190

Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe

195 200 205

Asn Arg Gly Glu Cys

210

<210> 264

<211> 219

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность ЛЦ

<400> 264

Asp Val Val Met Thr Gln Ser Pro Leu Ser Leu Pro Val Thr Leu Gly

1 5 10 15

Gln Pro Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser Leu Val His Ser

20 25 30

Asp Gly Asn Thr Tyr Leu His Trp Phe Gln Gln Arg Pro Gly Gln Ser

35 40 45

Pro Arg Arg Leu Ile Tyr Thr Val Ser Asn Arg Leu Ser Gly Val Pro

50 55 60

Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile

65 70 75 80

Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Ser Gln Ser

85 90 95

Thr His Phe Pro Trp Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys

100 105 110

Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu

115 120 125

Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe

130 135 140

Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln

145 150 155 160

Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser

165 170 175

Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu

180 185 190

Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser

195 200 205

Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys

210 215

<210> 265

<211> 219

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность ЛЦ

<400> 265

Asp Val Val Met Thr Gln Ser Pro Leu Ser Leu Pro Val Ala Leu Gly

1 5 10 15

Gln Pro Thr Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser Leu Val His Ser

20 25 30

Asp Gly Asn Thr Tyr Leu His Trp Phe Gln Gln Arg Pro Gly Gln Ser

35 40 45

Pro Arg Arg Leu Ile Tyr Thr Val Ser Asn Arg Leu Ser Gly Val Pro

50 55 60

Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile

65 70 75 80

Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Phe Cys Ser Gln Ser

85 90 95

Thr His Phe Pro Trp Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys

100 105 110

Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu

115 120 125

Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe

130 135 140

Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln

145 150 155 160

Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser

165 170 175

Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu

180 185 190

Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser

195 200 205

Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys

210 215

<210> 266

<211> 219

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность ЛЦ

<400> 266

Asp Ile Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Pro Val Thr Pro Gly

1 5 10 15

Glu Pro Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser Leu Val His Ser

20 25 30

Asp Gly Asn Thr Tyr Leu His Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser

35 40 45

Pro Gln Leu Leu Ile Tyr Thr Val Ser Asn Arg Leu Ser Gly Val Pro

50 55 60

Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile

65 70 75 80

Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Ser Gln Ser

85 90 95

Thr His Phe Pro Trp Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys

100 105 110

Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu

115 120 125

Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe

130 135 140

Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln

145 150 155 160

Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser

165 170 175

Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu

180 185 190

Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser

195 200 205

Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys

210 215

<210> 267

<211> 219

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность ЛЦ

<400> 267

Asp Val Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Pro Val Thr Pro Gly

1 5 10 15

Glu Pro Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser Leu Val His Ser

20 25 30

Asp Gly Asn Thr Tyr Leu His Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser

35 40 45

Pro Gln Leu Leu Ile Tyr Thr Val Ser Asn Arg Leu Ser Gly Val Pro

50 55 60

Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile

65 70 75 80

Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Ser Gln Ser

85 90 95

Thr His Phe Pro Trp Thr Phe Gly Pro Gly Thr Lys Val Asp Ile Lys

100 105 110

Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu

115 120 125

Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe

130 135 140

Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln

145 150 155 160

Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser

165 170 175

Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu

180 185 190

Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser

195 200 205

Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys

210 215

<210> 268

<211> 219

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность ЛЦ

<400> 268

Asp Val Val Met Thr Gln Ser Pro Leu Ser Leu Pro Val Thr Leu Gly

1 5 10 15

Gln Pro Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser Leu Val His Ser

20 25 30

Asp Gly Asn Thr Tyr Leu His Trp Phe Gln Gln Arg Pro Gly Gln Ser

35 40 45

Pro Arg Arg Leu Ile Tyr Thr Val Ser Asn Arg Leu Ser Gly Val Pro

50 55 60

Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile

65 70 75 80

Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Ser Gln Ser

85 90 95

Thr His Phe Pro Trp Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys

100 105 110

Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu

115 120 125

Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe

130 135 140

Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln

145 150 155 160

Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser

165 170 175

Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu

180 185 190

Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser

195 200 205

Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys

210 215

<210> 269

<211> 219

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность ЛЦ

<400> 269

Asp Val Val Met Thr Gln Ser Pro Leu Ser Leu Pro Val Ala Leu Gly

1 5 10 15

Gln Pro Thr Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser Leu Val His Ser

20 25 30

Asp Gly Asn Thr Tyr Leu His Trp Phe Gln Gln Arg Pro Gly Gln Ser

35 40 45

Pro Arg Arg Leu Ile Tyr Thr Val Ser Asn Arg Leu Ser Gly Val Pro

50 55 60

Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile

65 70 75 80

Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Phe Cys Ser Gln Ser

85 90 95

Thr His Phe Pro Trp Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys

100 105 110

Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu

115 120 125

Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe

130 135 140

Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln

145 150 155 160

Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser

165 170 175

Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu

180 185 190

Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser

195 200 205

Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys

210 215

<210> 270

<211> 219

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность ЛЦ

<400> 270

Asp Ile Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Pro Val Thr Pro Gly

1 5 10 15

Glu Pro Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser Leu Val His Ser

20 25 30

Asp Gly Asn Thr Tyr Leu His Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser

35 40 45

Pro Gln Leu Leu Ile Tyr Thr Val Ser Asn Arg Leu Ser Gly Val Pro

50 55 60

Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile

65 70 75 80

Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Ser Gln Ser

85 90 95

Thr His Phe Pro Trp Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys

100 105 110

Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu

115 120 125

Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe

130 135 140

Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln

145 150 155 160

Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser

165 170 175

Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu

180 185 190

Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser

195 200 205

Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys

210 215

<210> 271

<211> 219

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность ЛЦ

<400> 271

Asp Val Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Pro Val Thr Pro Gly

1 5 10 15

Glu Pro Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser Leu Val His Ser

20 25 30

Asp Gly Asn Thr Tyr Leu His Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser

35 40 45

Pro Gln Leu Leu Ile Tyr Thr Val Ser Asn Arg Leu Ser Gly Val Pro

50 55 60

Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile

65 70 75 80

Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Ser Gln Ser

85 90 95

Thr His Phe Pro Trp Thr Phe Gly Pro Gly Thr Lys Val Asp Ile Lys

100 105 110

Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu

115 120 125

Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe

130 135 140

Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln

145 150 155 160

Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser

165 170 175

Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu

180 185 190

Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser

195 200 205

Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys

210 215

<210> 272

<211> 219

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность ЛЦ

<400> 272

Asp Val Val Met Thr Gln Ser Pro Leu Ser Leu Pro Val Thr Leu Gly

1 5 10 15

Gln Pro Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser Leu Val His Ser

20 25 30

Asp Gly Asn Thr Tyr Leu His Trp Phe Gln Gln Arg Pro Gly Gln Ser

35 40 45

Pro Arg Arg Leu Ile Tyr Thr Val Ser Asn Arg Leu Ser Gly Val Pro

50 55 60

Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile

65 70 75 80

Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Ser Gln Ser

85 90 95

Thr His Phe Pro Trp Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys

100 105 110

Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu

115 120 125

Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe

130 135 140

Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln

145 150 155 160

Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser

165 170 175

Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu

180 185 190

Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser

195 200 205

Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys

210 215

<210> 273

<211> 219

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность ЛЦ

<400> 273

Asp Val Val Met Thr Gln Ser Pro Leu Ser Leu Pro Val Ala Leu Gly

1 5 10 15

Gln Pro Thr Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser Leu Val His Ser

20 25 30

Asp Gly Asn Thr Tyr Leu His Trp Phe Gln Gln Arg Pro Gly Gln Ser

35 40 45

Pro Arg Arg Leu Ile Tyr Thr Val Ser Asn Arg Leu Ser Gly Val Pro

50 55 60

Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile

65 70 75 80

Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Phe Cys Ser Gln Ser

85 90 95

Thr His Phe Pro Trp Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys

100 105 110

Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu

115 120 125

Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe

130 135 140

Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln

145 150 155 160

Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser

165 170 175

Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu

180 185 190

Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser

195 200 205

Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys

210 215

<210> 274

<211> 219

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность ЛЦ

<400> 274

Asp Ile Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Pro Val Thr Pro Gly

1 5 10 15

Glu Pro Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser Leu Val His Ser

20 25 30

Asp Gly Asn Thr Tyr Leu His Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser

35 40 45

Pro Gln Leu Leu Ile Tyr Thr Val Ser Asn Arg Leu Ser Gly Val Pro

50 55 60

Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile

65 70 75 80

Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Ser Gln Ser

85 90 95

Thr His Phe Pro Trp Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys

100 105 110

Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu

115 120 125

Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe

130 135 140

Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln

145 150 155 160

Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser

165 170 175

Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu

180 185 190

Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser

195 200 205

Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys

210 215

<210> 275

<211> 219

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность ЛЦ

<400> 275

Asp Val Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Pro Val Thr Pro Gly

1 5 10 15

Glu Pro Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser Leu Val His Ser

20 25 30

Asp Gly Asn Thr Tyr Leu His Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser

35 40 45

Pro Gln Leu Leu Ile Tyr Thr Val Ser Asn Arg Leu Ser Gly Val Pro

50 55 60

Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile

65 70 75 80

Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Ser Gln Ser

85 90 95

Thr His Phe Pro Trp Thr Phe Gly Pro Gly Thr Lys Val Asp Ile Lys

100 105 110

Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu

115 120 125

Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe

130 135 140

Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln

145 150 155 160

Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser

165 170 175

Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu

180 185 190

Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser

195 200 205

Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys

210 215

<210> 276

<211> 219

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность ЛЦ

<400> 276

Asp Val Val Met Thr Gln Ser Pro Leu Ser Leu Pro Val Thr Leu Gly

1 5 10 15

Gln Pro Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser Leu Val His Ser

20 25 30

Asp Gly Asn Thr Tyr Leu His Trp Phe Gln Gln Arg Pro Gly Gln Ser

35 40 45

Pro Arg Arg Leu Ile Tyr Thr Val Ser Asn Arg Leu Ser Gly Val Pro

50 55 60

Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile

65 70 75 80

Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Ser Gln Ser

85 90 95

Thr His Phe Pro Trp Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys

100 105 110

Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu

115 120 125

Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe

130 135 140

Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln

145 150 155 160

Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser

165 170 175

Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu

180 185 190

Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser

195 200 205

Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys

210 215

<210> 277

<211> 219

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность ЛЦ

<400> 277

Asp Val Val Met Thr Gln Ser Pro Leu Ser Leu Pro Val Ala Leu Gly

1 5 10 15

Gln Pro Thr Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser Leu Val His Ser

20 25 30

Asp Gly Asn Thr Tyr Leu His Trp Phe Gln Gln Arg Pro Gly Gln Ser

35 40 45

Pro Arg Arg Leu Ile Tyr Thr Val Ser Asn Arg Leu Ser Gly Val Pro

50 55 60

Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile

65 70 75 80

Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Phe Cys Ser Gln Ser

85 90 95

Thr His Phe Pro Trp Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys

100 105 110

Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu

115 120 125

Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe

130 135 140

Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln

145 150 155 160

Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser

165 170 175

Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu

180 185 190

Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser

195 200 205

Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys

210 215

<210> 278

<211> 219

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность ЛЦ

<400> 278

Asp Ile Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Pro Val Thr Pro Gly

1 5 10 15

Glu Pro Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser Leu Val His Ser

20 25 30

Asp Gly Asn Thr Tyr Leu His Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser

35 40 45

Pro Gln Leu Leu Ile Tyr Thr Val Ser Asn Arg Leu Ser Gly Val Pro

50 55 60

Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile

65 70 75 80

Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Ser Gln Ser

85 90 95

Thr His Phe Pro Trp Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys

100 105 110

Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu

115 120 125

Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe

130 135 140

Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln

145 150 155 160

Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser

165 170 175

Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu

180 185 190

Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser

195 200 205

Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys

210 215

<210> 279

<211> 219

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность ЛЦ

<400> 279

Asp Val Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Pro Val Thr Pro Gly

1 5 10 15

Glu Pro Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser Leu Val His Ser

20 25 30

Asp Gly Asn Thr Tyr Leu His Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser

35 40 45

Pro Gln Leu Leu Ile Tyr Thr Val Ser Asn Arg Leu Ser Gly Val Pro

50 55 60

Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile

65 70 75 80

Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Ser Gln Ser

85 90 95

Thr His Phe Pro Trp Thr Phe Gly Pro Gly Thr Lys Val Asp Ile Lys

100 105 110

Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu

115 120 125

Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe

130 135 140

Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln

145 150 155 160

Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser

165 170 175

Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu

180 185 190

Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser

195 200 205

Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys

210 215

<210> 280

<211> 220

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность ЛЦ

<400> 280

Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Asp Ser Leu Ala Val Ser Leu Gly

1 5 10 15

Glu Arg Ala Thr Ile Asn Cys Lys Ser Ser Gln Ser Leu Leu Asn Ser

20 25 30

Gly Asn Gln Lys Asn Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln

35 40 45

Pro Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Gly Ala Ser Thr Arg Glu Ser Gly Val

50 55 60

Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr

65 70 75 80

Ile Ser Ser Leu Gln Ala Glu Asp Val Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Asn

85 90 95

Asp His Ser Tyr Pro Pro Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile

100 105 110

Lys Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp

115 120 125

Glu Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn

130 135 140

Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu

145 150 155 160

Gln Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp

165 170 175

Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr

180 185 190

Glu Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser

195 200 205

Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys

210 215 220

<210> 281

<211> 220

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность ЛЦ

<400> 281

Asp Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Asp Ser Leu Ala Val Ser Leu Gly

1 5 10 15

Glu Arg Ala Thr Ile Asn Cys Lys Ser Ser Gln Ser Leu Leu Asn Ser

20 25 30

Gly Asn Gln Lys Asn Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln

35 40 45

Pro Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Gly Ala Ser Thr Arg Glu Ser Gly Val

50 55 60

Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr

65 70 75 80

Ile Ser Ser Val Gln Ala Glu Asp Val Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Asn

85 90 95

Asp His Ser Tyr Pro Pro Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile

100 105 110

Lys Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp

115 120 125

Glu Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn

130 135 140

Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu

145 150 155 160

Gln Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp

165 170 175

Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr

180 185 190

Glu Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser

195 200 205

Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys

210 215 220

<210> 282

<211> 220

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность ЛЦ

<400> 282

Asp Ile Gln Leu Thr Gln Ser Pro Asp Ser Leu Ser Val Ser Leu Gly

1 5 10 15

Glu Arg Ala Thr Ile Asn Cys Lys Ser Ser Gln Ser Leu Leu Asn Ser

20 25 30

Gly Asn Gln Lys Asn Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln

35 40 45

Pro Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Gly Ala Ser Thr Arg Glu Ser Gly Val

50 55 60

Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr

65 70 75 80

Ile Ser Ser Leu Gln Ala Glu Asp Val Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Asn

85 90 95

Asp His Ser Tyr Pro Pro Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile

100 105 110

Lys Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp

115 120 125

Glu Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn

130 135 140

Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu

145 150 155 160

Gln Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp

165 170 175

Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr

180 185 190

Glu Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser

195 200 205

Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys

210 215 220

<210> 283

<211> 220

<212> ПРТ

<213> Искусственная последовательность

<220>