ТЕРАПЕВТИЧЕСКОЕ СРЕДСТВО ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ ГЕПАТОЦЕЛЛЮЛЯРНОЙ КАРЦИНОМЫ Российский патент 2022 года по МПК A61K31/4545 A61P1/16 A61P35/00 

Область техники

[0001] Настоящее изобретение относится к терапевтическому средству для лечения гепатоцеллюлярной карциномы, содержащему моноциклическое производное пиридина, характеризующееся ингибирующей активностью по отношению к рецептору фактора роста фибробластов (FGFR), или его фармакологически приемлемую соль. Более конкретно, настоящее изобретение относится к терапевтическому средству для лечения гепатоцеллюлярной карциномы, содержащему 5-((2-(4-(1-(2-гидроксиэтил)пиперидин-4-ил)бензамид)пиридин-4-ил)окси)-6-(2-метоксиэтокси)-N-метил-1H-индол-1-карбоксамид или его фармакологически приемлемую соль.

Уровень техники

[0002]

[0003] Сообщали, что 5-((2-(4-(1-(2-гидроксиэтил)пиперидин-4-ил)бензамид)пиридин-4-ил)окси)-6-(2-метоксиэтокси)-N-метил-1H-индол-1-карбоксамид, представленный формулой (I), известен в качестве ингибитора FGFR1, FGFR2 или FGFR3 и характеризуется ингибирующей активностью по отношению к клеточной пролиферации при раке желудка, раке легкого, раке мочевого пузыря и раке эндометрия (патентный литературный источник 1). Сообщали, что приведенное выше соединение оказывает сильный терапевтический эффект по отношению к раку желчных протоков (патентный литературный источник 2) и раку молочной железы (патентный литературный источник 3). В качестве фармакологически приемлемой соли изложенного выше соединения известны сукцинат и малеат (патентный литературный источник 4).

[0004] Гепатоцеллюлярная карцинома развивается вследствие злокачественной трансформации клеток печени после хронического гепатита или цирроза печени. Примеры факторов, вызывающих развитие гепатоцеллюлярной карциномы, включают избыточное потребление алкоголя, избыток калорий в рационе, вирусную инфекцию и генетическую предрасположенность.

Примеры способов лечения гепатоцеллюлярной карциномы включают хирургическую резекцию, каутеризацию, эмболизацию печеночной артерии и терапию посредством инъекции этанола. Однако такие способы лечения имеют ограниченное применение в том случае, когда участок развития гепатоцеллюлярной карциномы является небольшим. В случае выявления множества раковых очагов или в случае распространения множества раковых очагов в других органах химиотерапию проводят посредством чреспеченочной артериальной инфузии или системного введения противоопухолевого средства. В качестве лекарственных средств, эффективных в лечении гепатоцеллюлярной карциномы, известны регорафениб, сорафениб (непатентные литературные источники 1 и 2) и т. п., но такие лекарственные средства часто вызывают побочные лекарственные реакции, такие как пневмония, гипертония и синдром "кисть-стопа", поэтому в будущем ожидается разработка нового лекарственного средства.

Список цитируемой литературы

Патентные литературные источники

[0005] Патентный литературный источник 1: US 2014-0235614 A

Патентный литературный источник 2: US 2018-0015079 A

Патентный литературный источник 3: публикация международной заявки № WO 2017/104739

Патентный литературный источник 4: US 2017-0217935 A

Непатентные литературные источники

[0006] Непатентный литературный источник 1: Kim K. et al., Regorafenib in advanced hepatocellular carcinoma (HCC): considerations for treatment, Cancer Chemotherapy and Pharmacology, 80, 945-954, 2017.

Непатентный литературный источник 2: Josep M. et al., Sorafenib in Advanced Hepatocellular Carcinoma, The New England Journal of Medicine, 359, 378-390, 2008.

Краткое описание изобретения

Техническая задача

[0007] Цель настоящего изобретения заключается в обеспечении нового терапевтического средства для лечения гепатоцеллюлярной карциномы.

Решение задачи

[0008] Принимая во внимания изложенные выше обстоятельства, в результате интенсивных исследований авторы настоящего изобретения выявили, что соединение, представленное формулой (I) выше, оказывает сильный терапевтический эффект по отношению к гепатоцеллюлярной карциноме, и таким образом реализовали настоящее изобретение.

[0009] В частности, в настоящем изобретение предусмотрено следующее [1] - [10]:

[1] терапевтическое средство для лечения гепатоцеллюлярной карциномы, содержащее соединение, представленное формулой (I), или его фармакологически приемлемую соль:

.

[2] Применение соединения, представленного формулой (I), или его фармакологически приемлемой соли для лечения гепатоцеллюлярной карциномы.

[3] Соединение, представленное формулой (I), или его фармакологически приемлемая соль для лечения гепатоцеллюлярной карциномы.

[4] Способ лечения гепатоцеллюлярной карциномы, предусматривающий введение соединения, представленного формулой (I), или его фармакологически приемлемой соли нуждающемуся в этом пациенту.

[5] Композиция для лечения гепатоцеллюлярной карциномы, содержащая соединение, представленное формулой (I), или его фармакологически приемлемую соль.

[6] Композиция для лечения гепатоцеллюлярной карциномы, содержащая соединение, представленное формулой (I), или его фармакологически приемлемую соль и вспомогательное вещество.

[7] Терапевтическое средство, применение, соединение, способ или композиция, изложенные выше, где гепатоцеллюлярная карцинома является метастатической гепатоцеллюлярной карциномой или рецидивирующей гепатоцеллюлярной карциномой.

[8] Терапевтическое средство, применение, соединение, способ или композиция, изложенные выше, где при гепатоцеллюлярной карциноме экспрессируется FGFR.

[9] Терапевтическое средство, применение, соединение, способ или композиция, изложенные выше, где FGFR представляет собой FGFR1, FGFR2 или FGFR3.

[10] Терапевтическое средство, применение, соединение, способ или композиция, изложенные выше, где фармакологически приемлемая соль соединения, представленного формулой (I), представляет собой сесквисукцинат.

Полезные эффекты настоящего изобретения

[0010] Соединение, представленное формулой (I), может оказывать эффект, проявляющийся в уменьшении объема опухоли, по отношению к гепатоцеллюлярной карциноме.

Краткое описание графических материалов

[0011] На фигуре 1 представлен график, показывающий результаты, полученные в примере 4. На оси ординат показан объем опухоли, а на оси абсцисс показаны дни после введения.

Описание вариантов осуществления

[0012] Соединение, представленное формулой (I), или его фармакологически приемлемую соль в соответствии с настоящим изобретением можно получить посредством способа, раскрытого в патентном литературном источнике 1.

[0013] В описании настоящего изобретения примеры фармакологически приемлемой соли включают соль неорганической кислоты, соль органической кислоты и соль кислой аминокислоты.

[0014] Предпочтительные примеры соли неорганической кислоты включают соли хлористоводородной кислоты, бромистоводородной кислоты, серной кислоты, азотной кислоты и фосфорной кислоты.

[0015] Предпочтительные примеры соли органической кислоты включают соли уксусной кислоты, янтарной кислоты, фумаровой кислоты, малеиновой кислоты, винной кислоты, лимонной кислоты, молочной кислоты, стеариновой кислоты, бензойной кислоты, метансульфоновой кислоты, этансульфоновой кислоты и п-толуолсульфоновой кислоты.

[0016] Предпочтительные примеры соли кислой аминокислоты включают соли аспарагиновой кислоты и глутаминовой кислоты.

[0017] Предпочтительная фармакологически приемлемая соль представляет собой сукцинат или малеат, но более предпочтительной солью является сукцинат. В частности, предпочтительно, чтобы соль была сесквисукцинатом.

[0018] Терапевтическое средство для лечения гепатоцеллюлярной карциномы в соответствии с настоящим изобретением можно вводить перорально в форме твердого препарата, такого как таблетка, гранулы, тонкодисперсные частицы, порошок или капсула, жидкости, желе, сиропа или т. п. Кроме того, терапевтическое средство для лечения гепатоцеллюлярной карциномы в соответствии с настоящим изобретением можно вводить парентерально в виде инъекции, суппозитория, мази, компресса или т. п.

[0019] Терапевтическое средство для лечения гепатоцеллюлярной карциномы в соответствии с настоящим изобретением может быть составлено посредством способа, описанного в семнадцатом издании Японской фармакопеи.

[0020] Дозу соединения, представленного формулой (I), или его фармакологически приемлемой соли можно соответствующим образом выбрать в зависимости от тяжести симптомов, возраста, пола, веса тела и различной чувствительности пациента, пути введения, времени введения, интервалов между введениями, типа фармацевтического препарата и т. п. Как правило, в случае перорального введения взрослому (вес тела: 60 кг) доза составляет от 100 мкг до 10 г, предпочтительно от 500 мкг до 10 г и, кроме того, еще более предпочтительно от 1 мг до 5 г в день. Данную дозу можно вводить 1-3 раздельными частями в день.

[0021] В настоящем описании гепатоцеллюлярная карцинома означает доброкачественную или злокачественную опухоль, развившуюся из клеток печени. Гепатоцеллюлярная карцинома включает метастатическую гепатоцеллюлярную карциному в ткани органа, отличного от печени, или рецидивирующую гепатоцеллюлярную карциному.

Примеры

[0022] Далее по тексту настоящее изобретение дополнительно подробно описано со ссылкой на примеры.

[0023] Пример получения 1

Посредством способа, раскрытого в описании из US 2017-0217935 A, получали сесквисукцинат 5-((2-(4-(1-(2-гидроксиэтил)пиперидин-4-ил)бензамид)пиридин-4-ил)окси)-6-(2-метоксиэтокси)-N-метил-1H-индол-1-карбоксамида (далее в данном документе, называемый соединением A).

[0024] Пример 1. Показатель IC₅₀ для соединения A по отношению к пролиферации клеточной линии гепатоцеллюлярной карциномы

В качестве клеточной линии гепатоцеллюлярной карциномы человека использовали SNU-398, Li-7, Hep3B2.1-7 и HuH-7. При этом SNU-398 и Hep3B2.1-7 получали из Американской коллекции типовых культур (ATCC), Li-7 получали из Центра клеточных ресурсов для биомедицинских исследований, Института исследования развития, старения и рака Университета Тохоку, и HuH-7 получали из банка клеток JCRB соответственно.

В случае каждой клеточной линии поддержание культуры проводили с использованием следующих сред.

(1) SNU-398 и Li-7

Среда RPMI-1640(Wako Pure Chemical Industries, Ltd.), содержащая 10% фетальной бычьей сыворотки (FBS) и пенициллин/стрептомицин.

(2) HuH-7

Среда DMEM с низким содержанием глюкозы (Wako Pure Chemical Industries, Ltd.), содержащая 10% FBS и пенициллин/стрептомицин.

(3) Hep3B2.1-7

Среда EMEM с низким содержанием глюкозы (Wako Pure Chemical Industries, Ltd.), содержащая 10% FBS и пенициллин/стрептомицин.

[0025] В каждую лунку 96-луночного черного планшета с прозрачным дном (Corning Incorporated, номер по каталогу: 3904) добавляли суспензию каждого вида клеток в количестве 80-90 мкл, которую готовили так, чтобы количество клеток составляло 0,75-1,25×10⁴ клеток/мл, и затем клетки культивировали в течение ночи в инкубаторе с 5% CO₂ (37°C). К полученным культивируемым клеткам добавляли соединение A, разведенное в каждой среде, содержащей 10% FBS, в количестве 10-20 мкл так, чтобы смесь была доведена до количества жидкости 100 мкл, а затем полученную смесь культивировали в течение 6 дней в инкубаторе с 5% CO₂ (37°C).

[0026] Количество клеток в каждой лунке после культивирования рассчитывали путем измерения уровня внутриклеточного АТФ по интенсивности испускания с использованием CellTiter Glo-2.0 (Promega Corporation, номер по каталогу: G9243).

CellTiter Glo-2.0 добавляли в количестве 50 мкл в каждую лунку, и смесь смешивали в течение 10 минут с использованием перемешивающего устройства для планшетов. После этого обеспечивали прохождение реакции со смесью при комнатной температуре в течение 10 минут, и затем измеряли люминесценцию с помощью Multilabel Reader (ARVO X4, PerkinElmer, Inc.). Соотношение значений люминесценции в присутствии соединения A определяли исходя из того, что значение люминесценции в случае, когда соединение А не добавляли, принимали за 100%, а значение люминесценции в лунке, в которой отсутствовали клетки, принимали за 0%. Для тестируемого вещества рассчитывали концентрацию, требуемую для ингибирования пролиферации клеток на 50% (значение IC₅₀). Результаты показаны в таблице 1.

[0027] [Таблица 1]

Название клеток IC₅₀ (нмоль/л) SNU-398 26 Hep3B2.1-7 77 HuH-7 249 Li-7 63

[0028] Пример 2. Противоопухолевая активность соединения A по отношению к клеточной линии гепатоцеллюлярной карциномы человека (HuH-7)

Пять голых мышей (CAnN.Cg-Foxn1nu/CrlCrlj, самок, CHARLES RIVER LABORATORIES JAPAN, INC.) использовали для каждой группы, и противоопухолевый эффект оценивали в том случае, когда вводили соединение A.

[0029] Клеточную линию гепатоцеллюлярной карциномы человека HuH-7 (полученной из банка клеток JCRB) суспендировали в среде DMEM (Wako Pure Chemical Industries, Ltd.), содержащей 10% бычьей сыворотки, так, чтобы концентрация клеток составила 8,0×10⁷ клеток/мл. В суспензию добавляли матрицу Matrigel^TM (Becton, Dickinson and Company, Япония) в объеме, равном объему суспензии, и полученную смесь перемешивали в достаточной степени. Смесь в количестве 0,1 мл подкожно трансплантировали в правый бок каждой мыши и оценивали противоопухолевый эффект у мыши.

[0030] Через 11 дней после трансплантации измеряли наиболее длинный диаметр и короткую ось опухоли с помощью электронного цифрового штангенциркуля (штангенциркулем Digimatic^TM, Mitutoyo Corporation). Мышей разделяли на группы таким образом, что средние значения объемов опухолей в соответствующих группах были практически равными. Кроме того, объем опухоли рассчитывали в соответствии со следующим уравнением:

объем опухоли (мм³) = (наиболее длинный диаметр (мм)) × (короткая ось (мм)) × (короткая ось (мм))/2.

[0031] Соединение А растворяли в очищенной воде так, чтобы концентрация соединения А составила 2,5 мг/мл.

Соединение A вводили каждой из мышей в соответствующих группах в дозе 50 мг/кг один раз в день в течение 5 дней. После чего введение соединения A прекращали на 2 дня, а затем его вводили перорально в течение 3 дней. При этом объем, подлежащий введению, составлял 20 мл/кг, и контрольной группе вводили очищенную воду в том же объеме.

[0032] Измеренные значения объемов опухолей в контрольной группе и в группе введения соединения A показаны в таблице 2.

[0033] [Таблица 2]

Дата измерения День 0 День 3 День 7 День 10 Контрольная группа (мм³) 147,3 500,7 1168,7 1767,0 Группа введения соединения A (мм³) 148,1 409,2 939,9 1400,9

[0034] Пример 3. Противоопухолевая активность соединения A по отношению к клеточной линии гепатоцеллюлярной карциномы человека (Hep3B2.1-7)

Пять голых мышей (CAnN.Cg-Foxn1nu/CrlCrlj, самок, CHARLES RIVER LABORATORIES JAPAN, INC.) использовали для каждой группы, и противоопухолевый эффект оценивали в том случае, когда вводили соединение A.

[0035] Клетки линии гепатоцеллюлярной карциномы человека Hep3B2.1-7 (полученной из ATCC) суспендировали в сбалансированном солевом растворе Хенка (HBSS) так, чтобы концентрация клеток составила 4×10⁷ клеток/мл. В суспензию добавляли матрицу Matrigel^TM (Becton, Dickinson and Company, Япония) в объеме, равном объему суспензии, и полученную смесь перемешивали в достаточной степени. Смесь в количестве 0,1 мл подкожно трансплантировали в правый бок каждой мыши и оценивали противоопухолевый эффект у мыши.

[0036] В день 19 после трансплантации измеряли наиболее длинный диаметр и короткую ось опухоли с помощью электронного цифрового штангенциркуля (штангенциркулем Digimatic^TM, Mitutoyo Corporation). Мышей разделяли на группы таким образом, что средние значения объемов опухолей в соответствующих группах были по сути равными. Кроме того, объем опухоли рассчитывали в соответствии со следующим уравнением:

объем опухоли (мм³) = (наиболее длинный диаметр (мм)) × (короткая ось (мм)) × (короткая ось (мм))/2.

[0037] Соединение А растворяли в очищенной воде так, чтобы концентрация соединения А составила 5 мг/мл.

Соединение A вводили каждой из мышей в соответствующих группах в дозе 100 мг/кг один раз в день в течение 5 дней. После чего введение соединения A прекращали на 2 дня, а затем его вводили перорально в течение 4 дней. При этом объем, подлежащий введению, составлял 20 мл/кг, и контрольной группе вводили очищенную воду в том же объеме.

[0038] Измеренные значения объемов опухолей в контрольной группе и в группе введения соединения A показаны в таблице 3.

[0039] [Таблица 3]

Дата измерения День 0 День 3 День 7 День 11 Контрольная группа (мм³) 411,9 645,5 811,7 1040,0 Группа введения соединения A (мм³) 417,4 504,0 630,4 862,3

[0040] Пример 4. Противоопухолевая активность соединения A по отношению к клеточной линии гепатоцеллюлярной карциномы человека (SNU-398)

Пять голых мышей (CAnN.Cg-Foxn1nu/CrlCrlj, самок, CHARLES RIVER LABORATORIES JAPAN, INC.) использовали для каждой группы, и противоопухолевый эффект оценивали в том случае, когда вводили соединение A.

[0041] Клетки линии гепатоцеллюлярной карциномы человека SNU-398 (полученной из ATCC) суспендировали в HBSS так, чтобы концентрация клеток составила 5×10⁷ клеток/мл. В суспензию добавляли матрицу Matrigel^TM (Becton, Dickinson and Company, Япония) в объеме, равном объему суспензии, и полученную смесь перемешивали в достаточной степени. Смесь в количестве 0,1 мл подкожно трансплантировали в правый бок каждой мыши и оценивали противоопухолевый эффект у мыши.

[0042] В день 9 после трансплантации измеряли наиболее длинный диаметр и короткую ось опухоли с помощью электронного цифрового штангенциркуля (штангенциркулем Digimatic^TM, Mitutoyo Corporation). Мышей разделяли на группы таким образом, что средние значения объемов опухолей в соответствующих группах были практически равными. Кроме того, объем опухоли рассчитывали в соответствии со следующим уравнением:

объем опухоли (мм³) = (наиболее длинный диаметр (мм)) × (короткая ось (мм)) × (короткая ось (мм))/2.

[0043] Соединение А растворяли в очищенной воде так, чтобы концентрация соединения А составила 1,25 мг/кг или 2,5 мг/мл.

Соединение A вводили перорально каждой из мышей в соответствующих группах в дозе 25 мг/кг или 50 мг/кг один раз в день в течение 11 дней. При этом объем, подлежащий введению, составил 20 мл/кг. Контрольную группу не подвергали обработке.

[0044] Измеренные значения объемов опухолей в контрольной группе и в группе введения соединения A показаны в таблице 4 и на фигуре 1. Увеличение объема опухоли замедлялось дозозависимым образом за счет введения соединения A.

[0045] [Таблица 4]

Дата измерения День 0 День 4 День 7 День 11 Контрольная группа (мм³) 154,5 566,0 1086,9 1868,0 Соединение A при 25 мг/кг/группа (мм³) 154,5 516,4 942,2 1280,1 Соединение A при 50 мг/кг/группа (мм³) 153,9 443,2 779,0 1066,1

Изобретение относится к применению 5-((2-(4-(1-(2-гидроксиэтил)пиперидин-4-ил)бензамид)пиридин-4-ил)окси)-6-(2-метоксиэтокси)-N-метил-1H-индол-1-карбоксамида или его фармакологически приемлемой соли сесквицукцината в качестве терапевтического средства для лечения гепатоцеллюлярной карциномы. Технический результат: раскрыта возможность применения 5-((2-(4-(1-(2-гидроксиэтил)пиперидин-4-ил)бензамид)пиридин-4-ил)окси)-6-(2-метоксиэтокси)-N-метил-1H-индол-1-карбоксамида для лечения гепатоцеллюлярной карциномы. 2 н. и 2 з.п. ф-лы, 4 табл., 4 пр. 1 ил.

1. Применение 5-((2-(4-(1-(2-гидроксиэтил)пиперидин-4-ил)бензамид)пиридин-4-ил)окси)-6-(2-метоксиэтокси)-N-метил-1H-индол-1-карбоксамида или его фармакологически приемлемой соли:

в качестве терапевтического средства для лечения гепатоцеллюлярной карциномы.

2. Применение по п. 1, где соль представляет собой сесквисукцинат.

3. Применение 5-((2-(4-(1-(2-гидроксиэтил)пиперидин-4-ил)бензамид)пиридин-4-ил)окси)-6-(2-метоксиэтокси)-N-метил-1H-индол-1-карбоксамида или его фармакологически приемлемой соли для изготовления фармацевтической композиции для лечения гепатоцеллюлярной карциномы.

4. Применение по п. 3, где соль представляет собой сесквисукцинат.