ШТАММ БАКТЕРИЙ SALMONELLA TYPHIMURIUM, УСТОЙЧИВЫЙ К СУЛЬФОНИЛМОЧЕВИНАМ И ТРИАЗОЛПИРИМИДИНАМ, ДЛЯ ВЫЯВЛЕНИЯ ПОТЕНЦИАЛЬНОЙ МУТАГЕННОСТИ ХИМИЧЕСКИХ ВЕЩЕСТВ В ТЕСТЕ ЭЙМСА Российский патент 2022 года по МПК C12N1/20 C12Q1/02 C12N15/00 C12R1/42 

Описание патента на изобретение RU2777987C1

Область техники

Настоящее изобретение относится к области биотехнологии, микробиологии и генетической токсикологии, конкретно к клеткам живых культур, и касается создания нового мутантного штамма бактерий Salmonella typhimurium ВКПМ В-14099, обладающего устойчивостью к высоким концентрациям сульфонилмочевин и триазолпиримидинов, который может быть использован в качестве тест-штамма для выявления потенциальной мутагенности химических веществ методом оценки обратных мутаций на бактериях (тест Эймса).

Уровень техники

Для оценки мутагенного потенциала химических соединений, применяемых в производстве товаров массового потребления, лекарственных препаратов, а также химических соединений, применяемых в сельском хозяйстве (как в открытом, так и в закрытом грунте), таких как пестициды и пр., используют тест Эймса. Тест Эймса - тест на мутагенность, в котором в качестве объекта тестирования применяют штаммы бактерий рода Salmonella - Salmonella typhimurium - ауксотрофы по гистидину.

Известно применение в тесте Эймса штаммов бактерий S. typhimurium ТА97, ТА98, ТА100 и ТА102 для биологической оценки мундштучной бумаги для сигарет [CN 102095842, 2011], а также штаммов бактерий S. typhimurium ТА98 и ТА100 для выявления мутагенности конденсата сигаретного дыма. Известно применение в тесте Эймса штаммов бактерий S. typhimurium ТА98 для оценки мутагенности красителей, применяемых в производстве товаров массового потребления [JPH 11124510, 1999]. Также известно применение в тесте Эймса индикаторных культур (тест-штаммов) S. typhimurium для оценки мутагенной активности лекарственных препаратов, например, противоопухолевого препарата глицифон [Г.В. Черепнев, И.В. Шалашова, А.А. Муслинкин, Б.М. Куриненко. Ученые записки Казанского государственного университета. Серия: Естественные науки. 2008, том 150, кн.2, с. 251-257].

Кроме того, бактерии S. typhimurium используют в качестве тест-микроорганизмов для оценки бактерицидной активности дезинфицирующих средств [ГОСТ Р 56990-2016]. Также известно применение штаммов бактерий S. typhimurium (ТА1535; ТА1537 или ТА97, или ТА97а; ТА98; ТА100; ТА102) для оценки мутагенности пестицидов [МУ 1.2.3364-16 «Оценка мутагенной активности пестицидов»].

Производные сульфонилмочевин (СФМ) и триазолпиримидинов (ТАЛ) используются в сельском хозяйстве в качестве пестицидов (гербицидов). Кроме того, производные СФМ применяются в фармацевтической промышленности в производстве лекарственных препаратов для лечения сахарного диабета 2 типа, таких как глибенкламид, гликвидон, гликлазид, глимепирид, глипизид, хлорпропамид [Регистр лекарственных средств России, https://www.rlsnet.ru/fg_index_id_292.htm; Недосугова Л.В. Препараты сульфонилмочевины в современной стратегии лечения сахарного диабета 2 типа. Сахарный диабет.2011:14(2):99-109. https://doi.org/10.14341/2072-0351-5645].

Задачей, на решение которой направлено настоящее изобретение, является получение резистентного индикаторного штамма бактерий Salmonella typhimurium, обладающего устойчивостью к высоким концентрациям химических веществ из классов СФМ и ТАП; расширение номенклатуры микроорганизмов, которые могут быть использованы в тесте Эймса для оценки мутагенности химических веществ из классов СФМ и ТАП, а также для подтверждения эквивалентности технических продуктов пестицидов указанных химических классов оригинальным действующим веществам по критерию «мутагенность».

Раскрытие изобретения

Поставленная задача решалась путем создания резистентного индикаторного штамма Salmonella typhimurium, устойчивого к высоким концентрациям СФМ и ТАП.

Для получения резистентного индикаторного штамма в качестве исходной родительской культуры использован штамм из коллекции Национального Биоресурсного Центра Всероссийской коллекции промышленных микроорганизмов (НБЦ ВКПМ) Salmonella typhimurium ТА100 под регистрационным номером ВКПМ В-5300 (hisG46, rfa del, uvrB-bio, pKm101 Ap-r), применяемый в тесте Эймса для оценки мутагенности химических веществ.

Использован метод селекции, основанный на ступенчатом культивировании исходного микроорганизма в присутствии возрастающих концентраций антибактериального агента как селективного фактора. В качестве селективного фактора -цитотоксичного агента - применен тифенсульфуронметил (ТФСМ).

Путем ступенчатого отбора индуцированных мутантов получен новый, оригинальный, устойчивый (резистентный) к СФМ и ТАП штамм Salmonella typhimurium ТА100 SFmut_plsmd+. Штамм депонирован в НБЦ ВКПМ под регистрационным номером ВКПМ В-14099 и характеризуется следующими признаками.

Культурально-морфологические особенности заявляемого штамма Salmonella typhimurium ВКПМ В-14099 (ТА100 SFmut_plsmd+).

Морфология колоний штамма на среде LB через 24 часа роста: колонии округлые, выпуклые с ровным краем, бесцветные, слегка бежевые, диаметром 2-3 мм, непрозрачные с однородной структурой, поверхность гладкая, блестящая, консистенция мягкая, легко снимается петлей с агара, пигмент в среду не выделяют.

Морфология колоний штамма на среде ГРМ через 24 часа роста: колонии округлые, выпуклые с ровным краем, бесцветные, слегка бежевые, диаметром 3-4 мм, непрозрачные с однородной структурой, поверхность гладкая, блестящая, консистенция мягкая, легко снимается петлей с агара, пигмент в среду не выделяют.

Морфология колоний штамма на среде ГМФ через 24 часа роста: колонии округлые, выпуклые с ровным краем, бесцветные, слегка сероватые, диаметром 3-4 мм, поверхность гладкая, блестящая, непрозрачные с однородной структурой, консистенция мягкая, легко снимается петлей с агара, пигмент в среду не выделяют.

Морфология колоний штамма на среде Эндо через 24 часа роста: колонии округлые, выпуклые с ровным краем, темно-пурпурного цвета, диаметром 2-3 мм, поверхность гладкая, блестящая, непрозрачные с однородной структурой, консистенция мягкая, легко снимается петлей с агара, пигмент в среду не выделяют.

Морфология колоний штамма на висмут-сульфит агаре через 48 часов роста: колонии округлые с приподнятым центром и валиком по краям, темно-зеленые, диаметром 1-3 мм, поверхность гладкая, без металлического блеска, непрозрачные с однородной структурой и ровным краем, консистенция мягкая, легко снимается петлей с агара, среда под колонией слегка прокрашена.

Морфология колоний штамма на SS-arape (сальмонелла-шигелла агар) через 48 часов роста: колонии округлые, выпуклые с приподнятым центром и радиальной складчатостью края, бежевые, по краям более светлые, диаметром 4-5 мм, непрозрачные с зернистой структурой, консистенция мягкая, легко снимается петлей с агара, среда под колонией слегка прокрашена.

Морфология колоний штамма на среде Плоскирева через 48 часов роста: колонии округлые, выпуклые с ровным краем, бесцветные, слегка бежевые, диаметром 3-4 мм, поверхность гладкая, блестящая, непрозрачные с однородной структурой, консистенция мягкая, легко снимается петлей с агара, пигмент в среду не выделяют.

Морфология колоний штамма на среде GM через 48 часов роста: колонии округлые с приподнятым центром и валиком по краям, бесцветные с бежевым оттенком, диаметром 2-3 мм, непрозрачные с однородной структурой, поверхность гладкая, блестящая, консистенция мягкая, легко снимается петлей с агара, пигмент в среду не выделяют. Среда Gm: 2% водный агар (750 мл), солевой концентрат (рН 7,2-7,4) (40 мл), 20% раствор глюкозы (20 мл), 1% раствор MgSO4 (12 мл), 0,2% биотин (2 мл), 0,5% гистидин (8 мл). Солевой концентрат: C6H5O7Na3×Н2О - 10 г/л; K2HPO4×3Н2О - 210 г/л; KH2PO4 - 90 г/л; аммоний сернокислый (NH4)2SO4 - 20 г/л; дистиллированная вода.

Физиолого-биохимические признаки микроорганизма

Аэроб/факультативный анаэроб, оптимальная температура для размножения 35-37°С. Оптимальный диапазон рН 7,2-7,4.

Способность штамма утилизировать различные субстраты оценена с помощью биохимического анализатора bioMerieux VITEK®2 (Франция) и коммерческих дифференцирующих карт. Ферментирует D-глюкозу, кумарат, D-мальтозу, D-маннозу, D-тагатозу, D-трегалозу, D-маннит, D-сорбит, цитрат натрия. Микроорганизм подщелачивает сукцинат, L-лактат, не ассимилирует L-малат, L-лактат, L-гистидин, L-арабит, адонитол; неустойчив к вибриостатическому агенту O/129; не образует сероводород, сбраживает глюкозу. Имеет место отсутствие ферментативной активности в тестах на утилизацию малоната, 5-кето-D-глюконата, палатинозы, D-целлобиозы, сахарозы. Тест Эллмана отрицательный. Отрицательная реакция на идентификационный субстрат (отсутствие ферментативной реакции) Ala-Phe-Pro-ариламидазы; L-пролинариламидазы; глицинар ил амидазы; Glu- Gly- Arg-ариламидазы; L-пирролидон-ариламидазы; глютамилариламидазы pNA; бета-аланинариламидазы pNA; альфаглюкозидазы; бета-глюкозидазы; бета-N-ацетил-глюкозаминидазы; бета-N-ацетилгалактозаминидазы; липазы; гамма-глютамил-трансферазы; бета-ксилозидазы; бета-глюкуронидазы; альфа-галактозидазы; бета-галактоз идазы; уреазы. Наличие позитивной активности орнитидин-декарбоксилазы; лизиндекарбоксилазы; фосфотазы. Неустойчивая активность тирозинариламидазы.

Техническим результатом является создание нового мутантного штамма бактерий Salmonella typhimurium ВКПМ В-14099 (ТА100 SFmut_plsmd+), обладающего устойчивостью к высоким концентрациям СФМ и ТАП, который может быть использован в тесте Эймса для выявления потенциальной мутагенности химических веществ.

Новый штамм S. typhimurium ВКПМ В-14099 (ТА100 SFmut_plsmd+) по настоящему изобретению обладает целевыми свойствами (учет мутационных событий), но при этом имеет очевидные преимущества в сравнении с родительским штаммом S.typhimurium ВКПМ В-5300 (ТА100).

Так, исходный штамм S. typhimurium ВКПМ В-5300 (ТА100) чувствителен к действию цитотоксичных технических продуктов пестицидов класса СФМ (например, римсульфурон, тифенсульфурон-метил, метсульфурон-метил, триасульфурон, хлорсульфурон) и класса ТАП (например, пеноксулам, флорасулам), максимальные нецитотоксичные концентрации которых не превышают 0,05-0,125 мг/чашка, что не позволяет оценить потенциальную мутагенность пестицида за счет примесей, присутствующих в небольших количествах. Напротив, применение нового мутантного резистентного штамма S. typhimurium ВКПМ В-14099 (ТА100 SFmut_plsmd+) при оценке химических соединений классов СФМ и ТАП позволяет проводить тестирование в диапазоне доз вплоть до максимальной - 5 мг/чашка, рекомендованной руководством ОЭСР №471 [https://www.oecd.org/chemicalsafety/risk-assessment/1948418.pdf]. Следует отметить, что эта особенность нового резистентного штамма может иметь большое значение в фармацевтической промышленности для выявления мутагенности примесей в субстанциях лекарственных препаратов, в частности, производных СФМ.

Получение и использование штамма Salmonella typhimurium ВКПМ В-14099 (ТА100 SFmut_plsmd+) проиллюстрировано следующими примерами.

Культура S. typhimurium В-5300 (ТА100 (hisG46, rfa del, uvrB-bio, pKm101 Ap-r)) получена из НБЦ ВКПМ в лиофилизированном виде. Выделение, хранение и проверку генотипа культуры осуществляли согласно методике, описанной в [Mortelmans К., Zeiger Е. The Ames Salmonella/microsome mutagenicity assay. Mutation Research/Fundamental and Molecular Mechanisms of Mutagenesis. 2000; 455 (1-2): 29-60].

В работе использованы следующие готовые коммерческие среды: ГМФ-агар (производитель ЗАО НИЦФ, Санкт-Петербург); ГРМ-агар, Эндо-ГРМ, Висмут-сульфит агар, среда Плоскириева, SS-arap, (производитель ФБУН ГНЦ МПБ, Оболенск).

При приготовлении питательных сред для культивирования родительского штамма в качестве селективного фактора использован технический продукт ТФСМ с содержанием основного вещества 97,4%, который растворяли в диметилсульфоксиде (ДМСО).

При генетическом анализе в состав агаризованной среды LB (15 г/л агара) включали ампициллин в концентрации 50 мкг/мл.

В таблицах 1-4 приведены некоторые примеры оценки мутагенной активности цитотоксичных соединений классов СФМ и ТАП лишь для иллюстрации технического результата применимости нового мутантного штамма по настоящему изобретению и его преимуществ по сравнению с родительской культурой.

Пример 1. Получение мутантного штамма Salmonella typhimurium В-14099 (ТА100 SFmut_plsmd+), устойчивого к действию СФМ.

Исходный штамм Salmonella typhimurium В-5300 (ТА100) из замороженной рабочей культуры засевали на жидкую LB-среду (1,25%, об/об) следующего состава (г/л): пептон -10; дрожжевой экстракт 5; NaCl 10; дистиллированная вода. Инкубировали при 37°С без встряхивания в течение 16 час. Полученный инокулят вносили (5%, об./об) в жидкую LB-среду, содержащую 0,5 мг/мл ТФСМ, и культивировали при 37°С и встряхивании при 140 об/мин в течение 3 час до плотности приблизительно 2,0 ОпЕд.

Культуральную жидкость (КЖ) высевали на агаризованную среду ГМФ (ЗАО «НИЦФ»), содержащую ТФСМ (0,05-5,0 мг/чашка). Штамм (100 мкл) вносили на плотную ростовую среду в верхнем агаре без гистидина и биотина (1,5 мл), содержащем 0,2 М калий фосфатный буфер (500 мкл) и 50-100 мкл раствора ТФСМ в концентрациях 0,5; 1,25; 2,5 или 5,0 мг/чашка. В качестве контроля вносили 100 мкл ДМСО. После инкубации в течение 21 час при 37°С оценивали визуально рост культуры на чашках. Для последующей селекции использовали вариант с максимальной нагрузкой ТФСМ: 0,5 мг/чашка в плотной среде + 5,0 мг/чашка в составе верхнего агара.

Оценка спонтанного фона мутирования штамма S. typhimurium В-5300 (ТА100), выращенного в присутствии ТФСМ, показала, что число спонтанных ревертантов (91±2) укладывается в диапазон колебаний исторического контроля для родительского штамма. Но колонии по сравнению с родительским штаммом были мельче, скорость роста культуры на селективном агаре - медленнее.

Последующая селекция включала несколько этапов пассирования культуры на богатых и голодных питательных средах, содержащих возрастающие концентрации ТФСМ, с инкубацией при 37°С. Отбирали колонии с лучшими фенотипическими признаками (размер колонии, ее форма).

Клетки микроорганизма после ресуспендирования в стерильной дистиллированной воде (0,7 ОпЕд), засевали на твердую ГРМ среду, содержащую ТФСМ (25 мг/чашка), и инкубировали в течение 16,5 час. Полученную культуру петлей переносили в жидкую LB-среду с 1,0 мг/мл ТФСМ (инкубация 15 час при перемешивании 130 об/мин до плотности 3,5 ОпЕд) с последующим разведением КЖ 1:50 и высевом на Gm-среду [Mortelmans К. and Zeiger Е. The Ames Salmonella/microsome mutagenicity assay. Mutation Research 455 (2000) 29-60], содержащую 13 - 113 мг ТФСМ на чашку. Для последующей селекции использовали культуру, выращенную на твердой голодной среде, содержащей ТФСМ (35 мг /чашка). После хранения в течение 2 мес.при 4-6°С мутантный штамм повторно пассировали штрихом на Gm среду с ТФСМ (35 мг/чашка), культивировали в течение 4 суток при 37°С. Полученную культуру мутантного штамма обозначили как S. typhimurium ТА100 SFmutj»lsmd+.

Пример 2. Оценка мутантного штамма S. typhimurium ТА100 SFmut_plsmd+на соответствие генетическим характеристикам и устойчивости к высоким концентрациям ТФСМ в тесте Эймса.

Оценка фенотипа мутантного штамма S. typhimurium ТА100 SFmut_plsmd+включала проверку ауксотрофности по гистидину, наличие/отсутствие плазмид R-фактора, присутствие специфических мутаций rfa и uvrB, анализ спонтанного фона реверсии и получение доказательств выраженной дозозависимой активности соединений с доказанной мутагенностью в условиях метаболической активации и без нее.

Аликвоты КЖ после культивирования на среде LB хранили при минус 80°С с использованием 1% ДМСО в качестве крио протектор а и использовали в дальнейшем для получения рабочих культур.

Пример 3. Сравнительная оценка мутагенной активности химических соединений родительским штаммом Salmonella typhimurium В-5300 (ТА100) и штаммом Salmonella typhimurium ВКПМ В-14099 (ТА100 SFmut_plsmd+).

При оценке мутагенной активности химических соединений использовали стандартный чашечный тест Эймса без метаболической активации и в присутствии микросомной активирующей смеси с содержанием постмитохондриальной фракции (S9) 20-30% (15-22 мг/мл белка) [Egorova O.V., Ilyushina N.A., Rakitskii V.N. Mutagenicity evaluation of pesticide analogs using standard and 6-well miniaturized bacterial reverse mutation tests. Toxicology in Vitro. 2020. T. 69. C. 105006].

Тестировали технические продукты действующих веществ пестицидов: тифенсульфуронметил (97,4%), метсульфуронметил (96,2%), триасульфуронметил (98,0%), хлорсульфурон (95,0%), каптан (95,1%), тирам (95,2%), диметоат (98,7%), дикват (40,8%), флорасулам (98,1%), цимоксанил (98,5%), римсульфурон (98,3%), пеноксулам (98,5%).

В качестве отрицательного контроля использовали варианты с растворителем (ДМСО). Положительными контролями служили 2-аминоантрацен (2АА) и азид натрия (NaN3).

Соединение рассматривали, как цитотоксичное, если имело место 40% снижение фона спонтанного мутирования [A. Hamel, M.Roy, R. Proudlock. The bacterial reverse mutation test. Chapter 4. In Genetic Toxicology Testing. A Laboratory Manual. 2016]. Вещество считали мутагенным согласно критериям, описанным в [Egorova O.V., Ilyushina N.A., Rakitskii V.N. Mutagenicity evaluation of pesticide analogs using standard and 6-well miniaturized bacterial reverse mutation tests. Toxicology in Vitro. 2020. T. 69. C. 105006].

Статистическую обработку проводили с помощью программы SPSS Statistics v.22.0 (Корпорация IBM, Нью-Йорк, США). Для оценки результатов, полученных в тесте Эймса, использовали t-тест для независимых выборок (для сравнения двух групп), тест Даннетта (для трех и более групп). Различия между группами считали статистически значимыми при р≤0,05.

Результаты сравнительной оценки мутагенной активности некоторых цитотоксичных действующих веществ пестицидов классов СФМ ии ТАП родительским штаммом Salmonella typhimurium В-5300 (ТА100) и штаммом Salmonella typhimurium ВКПМ В-14099 (ТА100 SFmut_plsmd+) по настоящему изобретению представлены в таблицах 1-4.

Похожие патенты RU2777987C1

название год авторы номер документа
ШТАММ БАКТЕРИЙ SALMONELLA TYPHIMURIUM ВКПМ B-14359, УСТОЙЧИВЫЙ К СУЛЬФОНИЛМОЧЕВИНАМ И ТРИАЗОЛПИРИМИДИНАМ, ДЛЯ ВЫЯВЛЕНИЯ ПОТЕНЦИАЛЬНОЙ МУТАГЕННОСТИ ХИМИЧЕСКИХ ВЕЩЕСТВ В ТЕСТЕ ЭЙМСА 2023
  • Егорова Ольга Валерьевна
  • Илюшина Наталия Алексеевна
  • Кузьмин Сергей Владимирович
RU2814258C1
СПОСОБ ОЦЕНКИ ПОТЕНЦИАЛЬНОЙ МУТАГЕННОСТИ СУЛЬФОНИЛМОЧЕВИН И ТРИАЗОЛПИРИМИДИНОВ С ПРИМЕНЕНИЕМ ТЕСТА ЭЙМСА НА ИНДИКАТОРНЫХ ШТАММАХ SALMONELLA TYPHIMURIUM 2022
  • Егорова Ольга Валерьевна
  • Илюшина Наталия Алексеевна
  • Кузьмин Сергей Владимирович
RU2794797C1
Мутаген 1989
  • Васильева Светлана Васильевна
  • Кадоркина Гульнара Константиновна
  • Костяновский Рэмир Григорьевич
  • Махова Елена Валентиновна
  • Павлова-Резакова Анна Григорьевна
SU1723125A1
Мутаген микроорганизмов 1988
  • Худолей Вениамин Викторович
  • Майорова Ирина Генриховна
  • Мизгирев Игорь Викторович
SU1616672A1
СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ МУТАГЕННОЙ АКТИВНОСТИ ДОННЫХ ОТЛОЖЕНИЙ 1990
  • Чистяков В.А.
  • Корнилов В.Н.
SU1835924A1
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ L-АМИНОКИСЛОТ С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ БАКТЕРИИ СЕМЕЙСТВА ENTEROBACTERIACEAE 2007
  • Птицын Леонид Романович
  • Альтман Ирина Борисовна
  • Котлярова Вероника Александровна
  • Мохова Ольга Николаевна
  • Ямпольская Татьяна Абрамовна
  • Козлов Юрий Иванович
  • Терасита Масару
  • Усуда Йосихиро
  • Мацуи Казухико
RU2364628C2
ШТАММЫ БАКТЕРИЙ Bacillus subtilis И Bacillus amyloliquefaciens-ПРОДУЦЕНТЫ ИНОЗИНА И СПОСОБ ПРОДУКЦИИ ИНОЗИНА С ИХ ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ 2005
  • Лившиц Виталий Аркадьевич
  • Казаринова Людмила Анатольевна
  • Закатаева Наталия Павловна
  • Кутукова Екатерина Александровна
  • Херсонская Анастасия Михайловна
RU2333949C2
Штамм Escherichia coli - продуцент L-треонина 2023
  • Выборная Татьяна Владимировна
  • Бубнов Дмитрий Михайлович
  • Кудина Максим Дмитриевич
  • Степанова Агнесса Альбертовна
  • Хозов Андрей Александрович
  • Бондаренко Фёдор Владимирович
  • Молев Сергей Владимирович
  • Синеокий Сергей Павлович
RU2817252C1
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ НЕАРОМАТИЧЕСКИХ L-АМИНОКИСЛОТ С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ БАКТЕРИИ, ПРИНАДЛЕЖАЩЕЙ К РОДУ ESCHERICHIA, В КОТОРОЙ ИНАКТИВИРОВАН ГЕН csrA 2005
  • Гулевич Андрей Юрьевич
  • Зименков Данила Вадимович
  • Клячко Елена Витальевна
  • Ворошилова Эльвира Борисовна
  • Козлов Юрий Иванович
RU2311453C2
ШТАММЫ БАКТЕРИЙ BACILLUS SUBTILIS И BACILLUS LICHENIFORMIS, ИСПОЛЬЗУЕМЫЕ В КАЧЕСТВЕ КОМПОНЕНТОВ ПРЕПАРАТА ПРОТИВ ВИРУСНЫХ И БАКТЕРИАЛЬНЫХ ИНФЕКЦИЙ, И ПРЕПАРАТ НА ОСНОВЕ ЭТИХ ШТАММОВ 1997
  • Щелкунов С.Н.
  • Петренко В.А.
  • Рязанкина О.И.
  • Репин В.Е.
  • Андреева И.С.
  • Ильичев А.А.
  • Белявская В.А.
  • Сандахчиев Л.С.
  • Серпинский О.И.
  • Сиволобова Г.Ф.
  • Синяков А.Н.
  • Перминова Н.Г.
  • Тимофеев И.В.
  • Леляк А.И.
  • Ноздрин Г.А.
  • Катковский Л.П.
  • Данилюк Н.К.
  • Масычева В.И.
RU2142287C1

Реферат патента 2022 года ШТАММ БАКТЕРИЙ SALMONELLA TYPHIMURIUM, УСТОЙЧИВЫЙ К СУЛЬФОНИЛМОЧЕВИНАМ И ТРИАЗОЛПИРИМИДИНАМ, ДЛЯ ВЫЯВЛЕНИЯ ПОТЕНЦИАЛЬНОЙ МУТАГЕННОСТИ ХИМИЧЕСКИХ ВЕЩЕСТВ В ТЕСТЕ ЭЙМСА

Изобретение относится к биотехнологии. Штамм Salmonella typhimurium ВКПМ В-14099, обладающий устойчивостью к высоким концентрациям химических соединений классов сульфонилмочевин и триазолпиримидинов. Изобретение обеспечивает расширение арсенала микроорганизмов, используемых в тесте Эймса для выявления потенциальной мутагенности химических веществ. 4 табл., 3 пр.

Формула изобретения RU 2 777 987 C1

Штамм бактерий Salmonella typhimurium ВКПМ В-14099, используемый в тесте Эймса для выявления потенциальной мутагенности химических соединений классов сульфонилмочевин и триазолпиримидинов.

Документы, цитированные в отчете о поиске Патент 2022 года RU2777987C1

Способ и приспособление для нагревания хлебопекарных камер 1923
  • Иссерлис И.Л.
SU2003A1
ИЛЮШИНА Н.А
и др
"Генотоксичность модельных комбинаций действующих веществ пестицидов в тестах на бактериях Salmonella typhimurium и эритроцитах костного мозга мышей in vivo"; Здравоохранение Российской Федерации, 2019, N 63(4), с.193-198
EGOROVA O.V
et al
"Mutagenicity evaluation of pesticide analogs using

RU 2 777 987 C1

Авторы

Егорова Ольга Валерьевна

Илюшина Наталия Алексеевна

Ракитский Валерий Николаевич

Кузьмин Сергей Владимирович

Даты

2022-08-12Публикация

2021-12-22Подача