Штамм лактобактерий Lacticaseibacillus paracasei 14-2020 ВКПМ - В-13841, используемый для производства кисломолочных продуктов Российский патент 2022 года по МПК C12N1/20 

Изобретение относится к биотехнологии, в частности может быть использовано в пищевой промышленности.

Известен штамм Lactobacillus paracasei LK-26 выделен от здорового ребенка грудного возраста, депонирован в ВКПМ, ФГУП ГосНИИгенетика, коллекционный № В10985 (патент №2453594 от 20.06.2012 г.); применяемый для приготовления кисломолочных, ферментированных и неферментированных пищевых продуктов, гигиенических и косметических средств, биологически активных добавок и бактерийных препаратов, характеризуемый достаточной антагонистической активностью.

Однако данный штамм обладает более низкой скоростью сквашивания молока, по сравнению с предлагаемым штаммом.

Техническая задача - выделение высокопродуктивного нового местного штамма лактобактерий путем селекции.

Техническим результатом заявленного изобретения является получение чистой культуры молочнокислого микроорганизма Lacticaseibacillus paracasei, обладающего высокими технологическими и антагонистическими свойствами.

Для достижения данной цели использован штамм лактобактерий Lacticaseibacillus paracasei 14-2020 ВКПМ - В-13841, выделенный с поверхности листьев черной смородины путем многократных пересевов.

Идентификацию штамма проводили по методике Банниковой Л.А. Он депонирован в ВКПМ под номером В-13841.

Lacticaseibacillus paracasei 14-2020 ВКПМ - В-13841:

1. Культурально-морфологические особенности:

- палочковидная форма клеток, расположенные в виде коротких цепочках;

- грамположительные;

- неподвижные;

- эндоспор не образующие.

На поверхности агаризованной среды (из гидролизованного молока и MRS) через 24 часа при температуре 37°С образуют мелкие колонии.

2. Технологические свойства:

- скорость сквашивания молока - 7,5 часов.

- предел кислотообразования - 290°Т.

Продукт, синтезируемый штаммом - молочная кислота, антибиотические вещества.

3. Антибиотическая активность:

- диаметр зоны подавления роста по отношению к представителю патогенной микрофлоры Staphylococcus aureus составил - 20 мм;

- диаметр зоны подавления роста по отношению к представителю условно-патогенной микрофлоры Escherichia coli составил - 22 мм.

Определение антибиотической активности штамма Lacticaseibacillus paracasei 14-2020 ВКПМ - В-13841 проводили на плотной питательной среде (МПА) методом диффузии в агар.

Способ, условия и состав сред для длительного хранения штамма - лиофилизация; хранение при температуре 4-6°С; питательные среды: MRS-агар; Rogosa et.al.; молоко с мелом; молоко с дрожжевым автолизатом, глюкозой, лакмусом, печеночным экстрактом и СаСО₃.

Способ, условия и состав сред для размножения штамма - при температуре 37°С; среды: MRS-агар; обезжиренное молоко, несоленая подсырная молочная сыворотка с содержанием не менее 4,0% сахара.

Оптимальные условия и состав среды для ферментации - температура 37°С; среды: MRS-агар; несоленая подсырная молочная сыворотка с содержанием не менее 4,0% сахара; молоко коровье.

Пример. Использование штамма Lacticaseibacillus paracasei 14-2020 ВКПМ - В-13841, для приготовления кисломолочного продукта.

1 пассаж: лиофилизированный штамм вносят в среду культивирования и титруют методом десятикратных разведений. Инкубируют при 37±2 градусах по Цельсию до образования видимого роста в последних разведениях. Или сухую лиофилизированную биомассу лактобактерий вносят в количестве 1-2 дозы в пробирку с 30 мл питательной среды. Культивируют при температуре 37±2 градусов по Цельсию до получения биомассы с содержанием живых лактобактерий не менее 10⁹ КОЕ/мл.

2 пассаж: выросшую культуру штамма Lacticaseibacillus paracasei 14-2020 ВКПМ - В-13841 из последних разведений или из пробирки с выросшей биомассой вносят в среду накопления объемом до 5% и культивируют при температуре 37±2 градусов по Цельсию до получения биомассы с содержанием лактобактерий не менее 10⁹ КОЕ/мл.

3 пассаж: полученную биомассу штамма Lacticaseibacillus paracasei 14-2020 ВКПМ - В-13841 в объеме до 5% вносят в стерильное молоко, культивируют до образования сгустка (кисломолочный продукт). Количество пассажей №2 может быть увеличено в зависимости от объема производства.

Предлагаемый новый штамм Lacticaseibacillus paracasei 14-2020 ВКПМ - В-13841 выделенный с поверхности листьев черной смородины, хорошо приспособлен к местным условиям. Неприхотлив в культивировании и хранении, обладает высокой предельной кислотностью и скоростью свертывания молока, что позволяет повысить экономическую эффективность при производстве (за счет ускорения свертывания молока).

Штамм проявляет высокую антагонистическую способность по отношению к условно-патогенной и патогенной микрофлоре.

Предлагаемый новый штамм лактобактерий Lacticaseibacillus paracasei 14-2020 ВКПМ - В-13841 обладает высокой биологической активностью и является основой для получения пробиотической закваски.

Изобретение относится к биотехнологии. Изобретение представляет собой штамм лактобактерий Lacticaseibacillus paracasei 14-2020 ВКПМ - В-13841, обладающий высокими технологическими и антагонистическими свойствами, депонирован в ВКПМ под номером В-13841 и является основой для получения пробиотической закваски. 1 пр.

Штамм лактобактерий Lacticaseibacillus paracasei 14-2020 ВКПМ - В-13841, используемый для производства кисломолочных продуктов, выделенный из естественного субстрата путем селекции – продуцент молочной кислоты и антибиотических веществ.