Применение метил 5-бензоил-6-(4-фторфенил)-4-метокси-2-тиоксогексагидропиримидин-4-карбоксилата в качестве средства, обладающего противовоспалительной активностью Российский патент 2022 года по МПК C07D239/10 A61K31/505 A61P29/00 

Изобретение относится к области органической химии, к применению биологически активных соединений класса метил 5-бензоил-6-арил-4-метокси-2-тиоксогексагидропиримидин-4-карбоксилатов, а именно метил 5-бензоил-6-(4-фторфенил)-4-метокси-2-тиоксогексагидропиримидин-4-карбоксилату формулы (1):

1

обладающему противовоспалительной активностью, что позволяет предложить его использование в фармакологии и медицине в качестве противовоспалительного лекарственного средства, а также для синтеза новых гетероциклических систем.

Способ синтеза метил 5-бензоил-6-арил-4-метокси-2-тиоксогексагидропиримидин-4-карбоксилатов известен из уровня техники [A four-component Biginelli reaction: new opportunities for the synthesis of functionalized pyrimidines / Gein V. L., Zamaraeva T. M., Gorgopina E.V., Dmitriev M.V. // Химия гетероциклических соединений. - 2020. -Т. 56, № 3.- С. 339-346.]

Известны структурные аналоги к заявляемому соединению, проявляющие противовоспалительное действие [Synthesis and pharmacological investigation of 3-(substituted 1-phenylethanone)-4-(substituted phenyl)-1,2,3,4-tetrahydropyrimidine-5-carboxylates / R. V. Chikhale, R. P. Bhole, P. B. Khedekar, K.P. Bhusari // European Journal Medicinal Chemistry. - 2009. - Vol. 44. - P. 3645-3653.; Бузмакова, Н. А. Синтез и противовоспалительная активность N,6-диарил-4-метил-2-тиоксо-1,2,3,6-тетрагидропиримидин-5-карбоксамидов / Н.А. Бузмакова, И.П. Рудакова, Т.М. Замараева // Химико-фармацевтический журнал. - 2021. - Т. 55, № 8. - С. 21 - 24.].

Противовоспалительная активность заявляемого соединения - метил 5-бензоил-6-(4-фторфенил)-4-метокси-2-тиоксогексагидропиримидин-4-карбоксилата ранее не была исследована.

Задачей изобретения является изыскание новых соединений, обладающих противовоспалительной активностью, и расширение арсенала средств воздействия на живой организм.

Поставленная задача решается тем, что соединение - метил 5-бензоил-6-(4-фторфенил)-4-метокси-2-тиоксогексагидропиримидин-4-карбоксилат (1) проявляет высокую противовоспалительную активность при низкой токсичности.

Синтезируют заявляемое соединение путем взаимодействия метил 2,4-диоксо-4-фенилбутаноата, 4-фторбензальдегида, тиомочевины в присутствии натрия гидросульфата в метаноле по схеме:

Схема 1

Изобретение иллюстрируется следующими примерами.

Пример 1. Получение заявляемого соединения (1).

Соединение (1) получают взаимодействием 0.005 моль (1,03 г) метил 2,4-диоксо-4-фенилбутаноата, 0.005 моль (0,54 мл) 4-фторбензальдегида, 0.008 моль (0,60 г) тиомочевины в присутствии 0.0067 моль (0,6 г) натрия гидросульфата при кипячении в 15 мл метанола в течение 1 часа. Осадок отфильтровывали, промывали водой, перекристаллизовывали из метилового спирта.

Выход соединения (1) составляет 1,57 г (78%).

Заявляемое соединение (1) представляет собой бесцветное кристаллическое вещество, растворимое в ДМФА, ДМСО, при нагревании - в уксусной кислоте, устойчивое при хранении. Т_пл. 288-290°С.

Выход 3.13 г (78%). Т. пл. 288 - 290°C. Спектр ЯМР ¹Н (ДМСО-d₆), δ, м.д.: 3.14 (с, 3H, CH₃OCO), 3.23 (с, 3H, CH₃O), 4.42 (д, J 11 Гц, 1H, H-5), 4.99 (д, J 11 Гц, 1H, H-6), 7.04 (т, J 8.7 Гц, 2H, Ar H), 7.37-7.48 (м, 4H, Ar H), 7.54 (т, J 7.2 Гц, 1H, Ar H), 7.64 (д, J 7.2 Гц, 2H, Ar H), 8.71 (уш. с, 1H, H-1), 9.24 (уш. с, 1H, H-3). С₂₀H₁₉FN₂O₄S. Вычислено, %: С, 59.69; Н, 4.76; N, 6.96%. Найдено, %: С, 59.84; Н, 4.84; N, 6.83%.

ИК спектр соединения записан на спектрофотометре Specord M-80 в таблетках KBr. Спектр ЯМР ¹Н зарегистрирован на спектрометре Bruker 500 (рабочая частота 500.13 МГц) в ДМСО-d₆, внутренний стандарт - ТМС. Элементный анализ проведен на приборе Perkin Elmer 2400. Температура плавления определена на приборе М-565.

Пример 2. Исследование острой токсичности и противовоспалительной активности заявляемого соединения (1).

Все исследовательские работы с лабораторными животными выполняли в соответствии с общепринятыми этическими нормами обращения с животными, с соблюдением Правил лабораторной практики при проведении доклинических исследований, действующих на территории РФ [Приказ Министерства здравоохранения Российской федерации от 1 апреля 2016 г № 199н. Зарегистрировано в Министерстве юстиций Российской Федерации 15 августа 2016 г. Регистрационный №43232].

В медицинской практике широко используется нимесулид в качестве нестероидного противовоспалительного лекарственного средства, аналогичный по фармакологическому действию заявляемому соединению (1), который взят нами в качестве эталона сравнения [Машковский, М.Д. Лекарственные средства: пособие для врачей / М.Д. Машковский. - 16-е изд., перераб., испр. и доп. - М.: Новая волна, 2012. - С. 848].

Острую токсичность (ЛД₅₀, мг/кг) заявляемого соединения определяли по экспресс-методу В.Б. Прозоровского [Прозоровский, В. Б. Экспресс-метод определения средней эффективной дозы и её ошибки / В. Б. Прозоровский, М. П. Прозоровская, В. И. Демченко // Фармакология и токсикология. - 1978. - № 4. - С. 497-502.]. Внутрибрюшинное введение животным заявляемого соединения в высоких дозах не приводило к их гибели. Согласно классификации токсичности препаратов соединение (1) относится к классу относительно безвредных веществ [Сидоров, К. К. Фармакология новых промышленных химических веществ. - 1973. -13. - 47 - 51.]. Результаты исследования острой токсичности представлены в таблице 1.

Таблица 1

Острая токсичность соединения (1) и препарата сравнения

Соединение ЛД₅₀, мг/кг
в/б метил 5-бензоил-6-(4-фторфенил)-4-метокси-2-тиоксогексагидропиримидин-4-карбоксилат >4000 Нимесулид 216*

*-данные литературы:

Колла, В. Э. Дозы лекарственных средств и химических соединений для лабораторных животных / В. Э. Колла, Б. Я. Сыропятов. - М.: Медицина. - 1998. - 263 с.

Исследование противовоспалительной активности проводилось на белых нелинейных крысах обоего пола массой 180-250 г. (контрольная и опытная группы включали по 6 животных) на модели острого воспалительного отёка, вызванного субплантарным (под подошвенный апоневроз) введением в заднюю лапу крысы 0,1 мл 1% раствора каррагенина (сульфатированный полисахарид из ирландского морского мха). Увеличение объёма стопы, свидетельствующее о развитии отёка, оценивали онкометрически [Руководство по проведению доклинических исследований лекарственных средств / под ред. А.Н. Миронова, Н.Д. Бунятян, А.Н. Васильева, О.Л. Верстаковой, М.В. Журавлевой, В.К. Лепахина, Н.В. Коробова, В.А. Меркулова, С.Н. Орехова, И.В. Сакаевой, Д.Б. Утешева, А.Н. Яворского. - М.: Гриф и К, 2012. - Ч.1. - 944 с.] до введения и через 3 часа после введения каррагенина. Заявляемое соединения вводили внутрибрюшинно в дозе 50 мг/кг за 30 мин до введения флогогенного агента. Контрольным животным вводили эквиобъёмное количество 2% раствора крахмала. Полученные данные обрабатывали методами математической статистики с помощью t-критерия Стьюдента. Эффект считали достоверным при P<0,05.

На основе полученных результатов определяли эффект торможения воспаления в процентах к контрольному уровню.

Результаты испытаний противовоспалительной активности заявляемого соединения (1) представлены в таблице 2.

Таблица 2
Противовоспалительная активность метил 5-бензоил-6-(4-фторфенил)-4-метокси-2-тиоксогексагидропиримидин-4-карбоксилата Соединение Прирост объема стопы через 3 часа, % % торможения реакции через 3 часа р по сравнению с контролем метил 5-бензоил-6-(4-фторфенил)-4-метокси-2-тиоксогексагидропиримидин-4-карбоксилат 6,8 ± 1,9 89,7% p<0,001 Нимесулид 33,9 ± 6,8 48,7% р<0,001 Контроль 66,1 ± 6,7 - -

Введение флогогенного агента животным вызывало существенное увеличение объема стопы животных к 3-ему часу наблюдения, прирост достигал 66,1% и был принят за контрольную величину. Использование препарата сравнения нимесулида (Нимесил, Лабораториос Менарини С.А., Испания) при аналогичном способе введения и в аналогичной дозе, показало, что процент нарастания каррагенинового отека статистически достоверно снижается по сравнению с контролем до 33,9%. Профилактическое введение заявляемого соединения (1) вызывало торможение воспалительной реакции по сравнению с контролем. Под его действием процент нарастания каррагенинового отека статистически достоверно снижался до 6,8%, процент торможения воспалительной реакции составил 89,7%, что достоверно превосходит противовоспалительный эффект нимесулида в 1,8 раза (p<0,01), под действием которого уровень торможения отека стопы у крыс составил 48,7%.

Таким образом, предлагаемое соединение - метил 5-бензоил-6-(4-фторфенил)-4-метокси-2-тиоксогексагидропиримидин-4-карбоксилат проявляет более высокую противовоспалительную активность по сравнению с эталоном сравнения, а также является относительно безвредным, что делает возможным использование соединения (1) для создания нового лекарственного средства, обладающего противовоспалительной активностью.

Изобретение относится к применению метил 5-бензоил-6-(4-фторфенил)-4-метокси-2-тиоксогексагидропиримидин-4-карбоксилата формулы (1) в качестве средства, обладающего противовоспалительной активностью. Технический результат - противовоспалительная активность метил 5-бензоил-6-(4-фторфенил)-4-метокси-2-тиоксогексагидропиримидин-4-карбоксилата. 2 табл., 2 пр.

(1)

Применение метил 5-бензоил-6-(4-фторфенил)-4-метокси-2-тиоксогексагидропиримидин-4-карбоксилата (1)

1

в качестве средства, обладающего противовоспалительной активностью.