Применение 4-[4-гидрокси-3-(4-метилбензоил)-5-оксо-2-(3-хлорфенил)-2,5-дигидро-1Н-пиррол-1-ил]бензойной кислоты в качестве противовоспалительного средства Российский патент 2025 года по МПК A61K31/402 A61K31/4015 A61P29/00 C07D207/38 

Изобретение относится к противовоспалительному средству на основе 4-[4-гидрокси-3-(4-метилбензоил)-5-оксо-2-(3-хлорфенил)-2,5-дигидро-1Н-пиррол-1-ил]бензойной кислоты формулы (I):

что позволяет предположить возможность его применения в медицине в качестве лекарственного средства для лечения заболеваний, связанных с возникновением воспалительных процессов.

Ближайшими аналогами по структуре являются 4-(2-арил-3-ацил-4-гидрокси-5-оксо-2,5-дигидро-1H-пиррол-1-ил)бензойные кислоты (II–VI) [Синтез и анальгетическая активность 4-(2-арил-3-ацил-4-гидрокси-5-оксо-2,5-дигидро-1H-пиррол-1-ил)бензойных кислот / В.Л. Гейн, Д.В. Чалков, А.В. Романова, О.В. Бобровская, С.В. Чащина // Химико-фармацевтический журнал. – 2024. – Т. 58, №5. – С. 14-17] формулы:

R = CH₃ (II), C₆H₅ (III, IV), 4-CH₃OC₆H₄ (V), R = 3,4-(CH₃O)₂C₆H₃ (VI);

R¹ = H (II, III), 4-F (IV), 2-Br (V), 4-Cl (VI).

Структурные аналоги (II–VI) не были изучены на наличие противовоспалительной активности.

В медицинской практике широко используется нимесулид, аналогичный по фармакологическому действию заявляемому соединению (I), который взят нами в качестве эталона сравнения [Машковский, М.Д. Лекарственные средства / М.Д. Машковский. – 16-е изд., перераб., испр. и доп. – М.: Новая волна, 2012. – С. 185].

Задачей изобретения является поиск новых соединений с высоким противовоспалительным действием и низкой токсичностью в ряду 4-(2-арил-3-ароил-4-гидрокси-5-оксо-2,5-дигидро-1H-пиррол-1-ил)бензойных кислот.

Поставленная задача решается применением 4-[4-гидрокси-3-(4-метилбензоил)-5-оксо-2-(3-хлорфенил)-2,5-дигидро-1Н-пиррол-1-ил]бензойной кислоты (I), которая обладает высокой противовоспалительной активностью и низкой токсичностью.

Соединение (I) синтезируют взаимодействием метилового эфира 4-метилбензоилпировиноградной кислоты с 3-хлорбензальдегидом и 4-аминобензойной кислотой в эквимолярных количествах по методике [Синтез и анальгетическая активность 4-(2-арил-3-ацил-4-гидрокси-5-оксо-2,5-дигидро-1H-пиррол-1-ил)бензойных кислот / В.Л. Гейн, Д.В. Чалков, А.В. Романова, О.В. Бобровская, С.В. Чащина // Химико-фармацевтический журнал. – 2024. – Т. 58, №5. – С. 14-17] по следующей схеме:

Изобретение иллюстрируется следующими примерами.

Пример 1. Получение соединения (I)

К раствору 1.37 г (10 ммоль) 4-аминобензойной кислоты и 1.13 мл (10 ммоль) 3-хлорбензальдегида в 15 мл ледяной уксусной кислоты прибавляли 2.20 г (10 ммоль) метилового эфира 4-метилбензоилпировиноградной кислоты, растворённого в 10 мл ледяной уксусной кислоты. Реакционную смесь кипятили в течение 5 мин. Выпавший при охлаждении осадок отфильтровывали и перекристаллизовывали из этилацетата. Выход 3.00 г (67%). Т. пл. 291–292°С. Найдено, %: С 66.92; Н 4.12; N 3.22. C₂₅H₁₈ClNO₅. Вычислено, %: C 67.04; H 4.05; N 3.13. ИК спектр (Фурье-спектрометр инфракрасный «ИнфраЛЮМ ФТ-08», в таблетках с KBr, ν, см^-1: 3154 (=C–OH, COOH), 1682 (COOH), 1668 (N–С=О), 1623 (C=O). Спектр ЯМР ¹Н (Bruker Avance III HD (400 МГц), DMSО-d₆, ТМS, δ, м.д.): 2.34 с (3H, CH₃), 6.39 с (1H, C²H), 7.16–7.91 м (12Н, CH_Ar), 11.84 уш. с (1H, =C–OH), 12.79 уш. с (1H, СООН). Спектр ЯМР ¹³C (Bruker Avance III HD (100 МГц), DMSО-d₆, ТМS, δ, м.д.): 21.05, 60.35, 120.16, 121.42, 125.97, 127.13, 127.80, 128.00, 128.70, 128.91, 129.91, 130.17, 132.82, 135.07, 138.84, 139.97, 143.24, 149.28, 164.87, 166.50, 188.68.

Соединение (I) представляет собой белое мелкокристаллическое вещество, растворимое в диметилформамиде, диметилсульфоксиде, при нагревании – в ледяной уксусной кислоте, ацетонитриле, диоксане, мало растворимое в этаноле, хлороформе, этилацетате, ацетоне и нерастворимое в воде.

Пример 2. Исследование противовоспалительной активности и острой токсичности соединения (I)

Острую токсичность (ЛД₅₀, мг/кг) соединения (I) изучали на белых нелинейных мышах-самках массой 20-22 г. Для определения средней летальной дозы использовали экспресс-метод Прозоровского В.Б. [Прозоровский, В.Б. Статистическая обработка результатов фармакологических исследований / В.Б. Прозоровский // Психофармакология и биологическая наркология. – 2007. – №7. – С. 2090-2120]. Исследуемое соединение (I) вводили перорально (п/о) в виде взвеси в 1% растворе крахмала в возрастающих дозах, для расчетов использовали четыре последовательных дозы. Каждую дозу вводили двум животным. За животными вели наблюдение в течение 14 суток, фиксируя поведение, интенсивность и характер двигательной активности, наличие судорог, координацию движений, тонус скелетной мускулатуры, реакции на тактильные, звуковые и световые раздражители, частоту и глубину дыхательных движений, ритм сердечных сокращений, состояние волосяного и кожного покрова, окраску видимых слизистых оболочек, потребление воды и пищи, изменение массы тела.

Рассчитывали острую токсичность, соблюдая рекомендации государственного фармакологического комитета по изучению общетоксического действия биологически активных веществ [Методические рекомендации по изучению общетоксического действия фармакологических средств. Утв. 25. 12. 97 / Вестн. фармакоп. комитета. – 1998. – №1. – С. 27-32].

Установлено, что ЛД₅₀ соединения (I) при пероральном введении составляет 4170,0±400,0 мг/кг (табл. 1). Следовательно, заявляемое соединение (I) менее токсично, чем эталон сравнения нимесулид, ЛД₅₀ которого при этом же пути введения составляет 392 мг/кг [U.S. National Library of Medicine [Электронный ресурс] – Режим доступа: https://chem.nlm.nih.gov/chemidplus/name/nimesulide] и отличается в 10,6 раза.

Согласно классификации токсичности химических веществ заявляемое соединение (I) относится к 5 классу опасности [ГОСТ 32419-2013. Классификация опасности химической продукции. Общие требования. Утверждён и введён в действие Приказом Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии от 22 ноября 2013 г. № 833-ст.], что соответствует 4 классу малотоксичных веществ по классификации Hodge и Sterner [Березовская, И.В. Классификация химических веществ по параметрам острой токсичности при парентеральных способах введения / И.В. Березовская // Химико-фармацевтический журнал. – 2003. – Т. 37, № 3. – С. 32-34].

Противовоспалительную активность соединения (I) исследовали на белых нелинейных крысах-самцах массой 200–210 г (группа включала 6 животных) на модели острого воспалительного отека, вызванного субплантарным введением в заднюю лапу крысы 0,1 мл 1% водного раствора каррагенина [Руководство по проведению доклинических исследований лекарственных средств / под ред. А.Н. Миронова, Н.Д. Бунятян, А.Н. Васильева, О.Л. Верстаковой, М.В. Журавлевой, В.К. Лепахина, Н.В. Коробова, В.А. Меркулова, С.Н. Орехова, И.В. Сакаевой, Д.Б. Утешева, А.Н. Яворского. – М.: Гриф и К, 2012. – Ч. 1. – 944 с]. Исследуемые соединения вводили внутрижелудочно в виде взвеси в 1% растворе крахмала в дозе 50 мг/кг за 1 час до индукции воспаления. В качестве эталона сравнения использовали нимесулид (Нимесил (МНН: нимесулид), Лабораториос Менарини С.А., Испания) в дозе 50 мг/кг, вводимый аналогичным образом. Объем стопы оценивали онкометрически до введения и через 3 часа после введения каррагенина. Выраженность воспалительной реакции в контрольной и опытных группах оценивали по увеличению объема стопы в процентах по отношению к исходной величине. Противовоспалительный эффект оценивали по показателю торможения отека, который выражали в процентах к показателям контрольной группы.

Статистическую обработку результатов проводили с использованием методов вариационной статистики в программе MS. Достоверность различий между группами оценивали по t-критерию Стьюдента. Данные представлены в виде выборочного среднего М, ошибки среднего m и достигнутого уровня значимости р. Минимальный уровень значимости различий принимали соответствующим р ≤ 0,05 [Беленький, М.Л. Элементы количественной оценки фармакологического эффекта / М.Л. Беленький. – 2-е изд. – Ленинград: Медгиз, 1963. – С. 81-106].

Полученные результаты заявляемого соединения (I) по противовоспалительной активности сравнивали с данными эталона сравнения нимесулида (табл. 1). Результаты испытаний противовоспалительной активности и острой токсичности представлены в табл. 1.

Таблица 1

Противовоспалительная активность и острая токсичность соединения (I)

Соединение Доза
мг/кг, (п/о) Острая токсичность соединений
ЛД₅₀, мг/кг, (п/о) Торможение отека к контролю после введения флогогена через 3 ч, % Заявляемое соединение (I) 50 4170,0±400,0 63,64±5,12*^, ** Нимесулид 50 392*** 48,99±4,08* Контроль – – – * – значимое отличие показателей от контроля (при р < 0,05),
** – значимое отличие показателей от нимесулида (при р < 0,05).

Примечание: *** – данные литературы: U.S. National Library of Medicine [Электронный ресурс] – Режим доступа: https://chem.nlm.nih.gov/chemidplus/name/nimesulide.

Как видно из табл. 1, заявляемое соединение (I) на модели каррагенинового отека обнаруживает выраженную противовоспалительную активность в дозе 50 мг/кг и в 1,3 раза превосходит активность нимесулида в этой же дозе.

Таким образом, заявляемое соединение 4-[4-гидрокси-3-(4-метилбензоил)-5-оксо-2-(3-хлорфенил)-2,5-дигидро-1Н-пиррол-1-ил]бензойная кислота (I) проявляет высокую противовоспалительную активность, которая превышает эффект эталонного препарата нимесулида, а также является малотоксичным соединением и может найти применение в медицине в качестве потенциального противовоспалительного лекарственного средства.

Изобретение относится к медицине. Предложено применение 4-[4-гидрокси-3-(4-метилбензоил)-5-оксо-2-(3-хлорфенил)-2,5-дигидро-1Н-пиррол-1-ил]бензойной кислоты формулы (I) в качестве противовоспалительного средства. Изобретение обеспечивает лечение заболеваний, связанных с возникновением воспалительных процессов, посредством применения 4-[4-гидрокси-3-(4-метилбензоил)-5-оксо-2-(3-хлорфенил)-2,5-дигидро-1Н-пиррол-1-ил]бензойной кислоты. 1 табл., 2 пр. I

Применение 4-[4-гидрокси-3-(4-метилбензоил)-5-оксо-2-(3-хлорфенил)-2,5-дигидро-1Н-пиррол-1-ил]бензойной кислоты формулы (I) в качестве противовоспалительного средства.