Изобретение относится к области органической химии, к применению биологически активных соединений класса 2-тиоксогексагидропиримидина, а именно метил 5-бензоил-4-гидрокси-6-(4-хлорфенил)-2-тиоксогексагидропиримидин-4-карбоксилату формулы (1):
(1)
обладающему анальгетическим и противовоспалительным действием, что позволяет предложить его использование в фармакологии и медицине в качестве лекарственного средства, а также для синтеза новых гетероциклических систем.
Способ синтеза метил 6-арил-5-ароил-4-гидрокси-2-тиоксогексагидропиримидин-4-карбоксилатов известен из уровня техники [Синтез и строение метил-6-арил-5-ароил-4-гидрокси-2-оксо(тиоксо)гекса-гидропиримидин-4-карбоксилатов / В.Л. Гейн, Т.М. Замараева, Е.В. Горгопина, М.В. Дмитриев // Журнал общей химии. - 2022. Т. 92, № 10. С. 1514-1519.]
Известен структурный аналог к заявляемому соединению из класса 2-тиоксогексагидропиримидина, проявляющий противовоспалительное действие [Патент RU 2786805 С1 Применение метил 5-бензоил-6-(4-фторфенил)-4-метокси-2-тиоксогексагидропиримидин-4-карбоксилата в качестве средства, обладающего противовоспалительной активностью / В.Л. Гейн, Т.М. Замараева, И.П. Рудакова, Е.В Горгопина. - № 2022118362; заявл. 06.07.2022; опубл. 26.12.2022, Бюл. 36].
Анальгетическое и противовоспалительное действия заявляемого соединения - метил 5-бензоил-4-гидрокси-6-(4-хлорфенил)-2-тиоксогексагидропиримидин-4-карбоксилата ранее не были исследованы.
Задачей изобретения является изыскание новых соединений, обладающих анальгетическим и противовоспалительным действием, и расширение арсенала средств воздействия на живой организм.
Поставленная задача решается тем, что соединение - метил 5-бензоил-4-гидрокси-6-(4-хлорфенил)-2-тиоксогексагидропиримидин-4-карбоксилат (1) с низкой острой токсичностью проявляет анальгетическое и противовоспалительное действия, эффекты которых превышают действия препаратов сравнения, используемых в медицинской практике лекарственных средств.
Синтезируют заявляемое соединение путем взаимодействия метил 2,4-диоксо-4-фенилбутаноата, 4-хлорбензальдегида, тиомочевины в метаноле по схеме:
Схема 1
Изобретение иллюстрируется следующими примерами.
Пример 1. Получение заявляемого соединения (1).
Соединение (1) получают взаимодействием 0.01 моль (2.06 г) 2,4-диоксо-4-фенилбутаноата, 0.01 моль (1.4 г) 4-хлорбензальдегида, 0.015 моль (1.14 г) тиомочевины при кипячении в 15 мл метанола в течение 1 часа. Осадок отфильтровывали, перекристаллизовывали из метилового спирта.
Выход соединения (1) составляет 2,60 г (64%).
Заявляемое соединение (1) представляет собой бесцветное кристаллическое вещество, растворимое в ДМФА, ДМСО, при нагревании - в уксусной кислоте, устойчивое при хранении. Тпл. 179-181°С.
Спектр ЯМР 1Н (ДМСО-d6), δ, м.д.: 3.19 с (3Н, CH3OCO), 4.41 д (1H, H-5, J 11 Гц), 4.99 д (1H, H-6, J 11 Гц), 6.72 уш. с (1H, OH), 7.27 т (2Н, Ar), 7.37-7.42 м (4Н, Ar), 7.53 т (1Н, Ar), 7.63 д (2Н, Ar), 8.65 уш. с (1H, H-1), 8.81 уш. с (1H, H-3).С19H17ClN2O4S. Вычислено, %: С, 56.37; Н, 4.23; N, 6.92%. Найдено, %: С, 56.64; Н, 4.32; N, 6.71%.
Спектр ЯМР 1Н зарегистрирован на спектрометре Bruker 500 (рабочая частота 500.13 МГц) в ДМСО-d6, внутренний стандарт - ТМС. Элементный анализ проведен на приборе Perkin Elmer 2400. Температура плавления определена на приборе М-565.
Пример 2. Исследование острой токсичности, анальгетической и противовоспалительной активностей заявляемого соединения (1).
Все исследовательские работы с лабораторными животными выполняли в соответствии с общепринятыми этическими нормами обращения с животными, с соблюдением Правил лабораторной практики при проведении доклинических исследований, действующих на территории РФ [Приказ Министерства здравоохранения Российской федерации от 1 апреля 2016 г № 199н. Зарегистрировано в Министерстве юстиций Российской Федерации 15 августа 2016 г. Регистрационный №43232].
В медицинской практике широко используют анальгетическое средство - метамизол натрия, нестероидное противовоспалительное лекарственное средство - нимесулид, которые взяты нами в качестве эталонов сравнения [Машковский, М.Д. Лекарственные средства: пособие для врачей / М.Д. Машковский. - 16-е изд., перераб., испр. и доп. - М.: Новая волна, 2012. - С. 848], как аналогичные по фармакологическому действию заявляемому соединению (1).
Острую токсичность (ЛД50, мг/кг) заявляемого соединения определяли по экспресс-методу В.Б. Прозоровского [Прозоровский, В. Б. Экспресс-метод определения средней эффективной дозы и её ошибки / В. Б. Прозоровский, М. П. Прозоровская, В. И. Демченко // Фармакология и токсикология. - 1978. - № 4. - С. 497-502.]. Внутрибрюшинное введение животным заявляемого соединения в высоких дозах не приводило к их гибели. Согласно классификации токсичности препаратов соединение (1) относится к классу относительно безвредных веществ [Сидоров, К. К. Фармакология новых промышленных химических веществ. - 1973. -13. - 47 - 51.]. Результаты исследования острой токсичности представлены в таблице 1.
Таблица 1
Острая токсичность соединения (1) и препаратов сравнения
в/б
(2160-3340)
* Пискарев А. В., Нестеренко В. С., Суминов С. И. Фармакол. и токсикол., № 1. - 1973. - 48 - C. 54.
** Колла, В. Э. Дозы лекарственных средств и химических соединений для лабораторных животных / В. Э. Колла, Б. Я. Сыропятов. - М.: Медицина. - 1998. - 263 с.
Анальгетическую активность заявляемого соединения (1) определяли на белых нелинейных мышах обоего пола массой 22-30 г по методике «Уксусные корчи» [Руководство по проведению доклинических исследований лекарственных средств / под ред. А.Н. Миронова, Н.Д. Бунятян, А.Н. Васильева, О.Л. Верстаковой, М.В. Журавлевой, В.К. Лепахина, Н.В. Коробова, В.А. Меркулова, С.Н. Орехова, И.В. Сакаевой, Д.Б. Утешева, А.Н. Яворского. - М.: Гриф и К, 2012. - Ч.1. - 944 с.].
Болевую реакцию в тесте «Уксусные корчи» вызывали внутрибрюшинным введением 0,75% уксусной кислоты (из расчета 0,1 мл на 10 г массы животного) через 30 мин после внутрибрюшинного введения заявляемого соединения (1) в дозе 50 мг/кг в виде взвеси в 2% растворе крахмала. В течение последующих 20 мин после инъекции уксусной кислоты подсчитывали количество «корчей» для каждого животного. Анальгетический эффект оценивали по уменьшению количества «корчей» в процентах по сравнению с контрольными животными. Контрольной группе животных вводили эквивалентный объем 2% крахмальной слизи. В опытную и контрольную группы было включено по 10 мышей.
Субстанцию метамизола натрия (ОАО «Борисовский завод медицинских препаратов», Беларусь) вводили опытным животным тем же путем и в той же дозе, что и заявляемое соединение (1).
Полученные данные обрабатывали методами математической статистики с помощью t-критерия Стьюдента. Эффект считали достоверным при P<0,05.
Результаты испытаний анальгетической активности заявляемого соединения (1) и препарата сравнения методом «уксусных корчей» представлены в таблице 2.
Таблица 2
Анальгетическая активность метил 5-бензоил-4-гидрокси-6-(4-хлорфенил)-2-тиоксогексагидропиримидин-4-карбоксилата и препарата сравнения по методу «уксусных корчей»
Анальгетический эффект заявляемого соединения (1) достоверно превосходит (p<0,05) эффект препарата сравнения.
Исследование противовоспалительной активности проводилось на белых нелинейных крысах обоего пола массой 180-250 г. (контрольная и опытная группы включали по 6 животных) на модели острого воспалительного отёка, вызванного введением в заднюю лапу крысы 0,1 мл 1% раствора каррагенина. Увеличение объёма стопы, свидетельствующее о развитии отёка, оценивали онкометрически [Руководство по проведению доклинических исследований лекарственных средств / под ред. А.Н. Миронова, Н.Д. Бунятян, А.Н. Васильева, О.Л. Верстаковой, М.В. Журавлевой, В.К. Лепахина, Н.В. Коробова, В.А. Меркулова, С.Н. Орехова, И.В. Сакаевой, Д.Б. Утешева, А.Н. Яворского. - М.: Гриф и К, 2012. - Ч.1. - 944 с.] до введения и через 3 часа после введения каррагенина. Заявляемое соединение вводили внутрибрюшинно в дозе 50 мг/кг за 30 мин до введения флогогенного агента. Контрольным животным вводили эквиобъёмное количество 2% раствора крахмала.
Препарат сравнения - нимесулид (Нимесил, Лабораториос Менарини С.А., Испания) использовали при аналогичном способе введения и в аналогичной дозе.
Полученные данные обрабатывали методами математической статистики с помощью t-критерия Стьюдента. Эффект считали достоверным при P<0,05.
На основе полученных результатов определяли эффект торможения воспаления в процентах к контрольному уровню.
Результаты испытаний противовоспалительной активности заявляемого соединения (1) и препарата сравнения представлены в таблице 3.
Таблица 3
Противовоспалительная активность метил 5-бензоил-4-гидрокси-6-(4-хлорфенил)-2-тиоксогексагидропиримидин-4-карбоксилата и препарата сравнения
Противовоспалительный эффект заявляемого соединения (1) достоверно превосходит (p<0,05) эффект препарата сравнения.
Как видно из таблиц 1 - 3, заявляемое соединение (1) обладает меньшей токсичностью, чем препараты сравнения, его анальгетическое действие в 1,4 раза превышает эффект метамизола натрия, а противовоспалительное действие в 1,6 раз превосходит эффект нимесулида.
Таким образом, предлагаемое соединение - метил 5-бензоил-4-гидрокси-6-(4-хлорфенил)-2-тиоксогексагидропиримидин-4-карбоксилат проявляет более выраженное анальгетическое и противовоспалительное действия по сравнению с эталонами сравнения, а также является относительно безвредным, что делает возможным использование соединения (1) для создания нового лекарственного средства, обладающего анальгетическим и противовоспалительным действием.
Изобретение относится к области медицины и фармацевтики и раскрывает применение метил 5-бензоил-4-гидрокси-6-(4-хлорфенил)-2-тиоксогексагидропиримидин-4-карбоксилата (1) в качестве средства, обладающего анальгетическим и противовоспалительным действием. Изобретение обеспечивает эффективное анальгетическое и противовоспалительное действие. 3 табл., 2 пр.
(1)
Применение метил 5-бензоил-4-гидрокси-6-(4-хлорфенил)-2-тиоксогексагидропиримидин-4-карбоксилата (1)
(1)
в качестве средства, обладающего анальгетическим и противовоспалительным действием.
