Настоящее изобретение относится к способу прогнозирования терапевтического эффекта химиотерапии с применением противоопухолевого агента, содержащего ингибитор LSD1; противоопухолевому агенту; и набору.
Модификация метилирования гистона является одним из эпигенетических механизмов, которые регулируют экспрессии генов. Модификация метилирования гистона регулирует различные процессы, включая поддерживание, рост и дифференциацию клеток.
LSD1 (KDM1A), один из ферментов, которые регулируют модификацию метилирования гистона, представляет собой ФАД (флавинадениндинуклеотид)-зависимую гистондеметилазу и в основном деметилирует лизиновый остаток в положении 4 (K4) и лизиновый остаток в положении 9 (K9) на гистоне H3 (не патентная литература (не патентная литература 1). Полагают, что, имея такие функции, LSD1 положительно или отрицательно регулирует различные генные транскрипции, и регулирует самообновление стволовых клеток и дифференциацию клеток в каждой нормальной ткани.
В общем, полагают, что аномалии в способности клеток к самообновлению или дифференциации приводят к канцеризации клеток. Таким образом, нарушенный контроль LSD1, который играет ключевую роль в этих процессах, возможно, может вызывать канцеризацию клеток. Фактически, что касается различных солидных раков и раков крови, множество докладов было сделано относительно корреляции сверхэкспрессии LSD1 и их прогноза (не патентная литература 2). Также в колониях клеток из карцином или в не клинических моделях было показано, что ингибирование LSD1 вызывало индукцию клеточной дифференциации, ингибирование роста и in vivo противоопухолевый эффект (непатентная литература 3 и 4), что дает веские основания предполагать, что LSD1 является одной из важных целевых молекул в противораковой терапии. Эти карциномы, в которые вовлечен LSD1, такие как мелкоклеточный рак легких (МКРЛ) и острый миелоидный лейкоз (ОМЛ), имеют крайне короткое время жизни, и существующие терапевтические способы не могут дать удовлетворительного терапевтического эффекта.
Следовательно, ожидается, что лекарственные средства, ингибирующие LSD1, будут эффективными терапевтическими средствами, основанными на новых механизмах лечения не подающихся лечению раков, для которых в настоящее время не существует терапевтических способов.
Инсулинома-ассоциированный 1 (INSM1) является фактором транскрипции, принадлежащим к семейству SNAG, и он глубоко вовлечен в дифференциацию нейроэндокринных клеток (непатентная литература 5). Кроме того, его экспрессия в нормальных тканях практически не наблюдается, за исключением стадии формирования. С другой стороны, известна его высокая экспрессия в опухолях, полученных из нейроэндокринных клеток, таких как МКРЛ (непатентная литература 6). Также Snail и Gfi-1/1b известны, как факторы транскрипции, принадлежащие к семейству SNAG. Они оба образуют комплекс с LSD1, и известно, что они вовлечены в эпителиально-мезенхимальную транскрипцию и дифференциацию клеток крови, соответственно (непатентная литература 7 и 8). Также известно, что INSM1 связывается с LSD1. Было высказано предположение, что транскрипционная регулирующая функция INSM1 требует связывания относительно LSD1 через SNAG домен (непатентная литература 9).
Кроме того, было описано, что INSM1 может применяться в качестве маркера для нейроэндокринного рака и нейроэпителиального рака клеток (непатентная литература 10 и 11).
Список цитат
Непатентная литература
Непатентная литература 1: Biochim. Biophys. Acta, 1829 (10), pp. 981-986 (2013)
Непатентная литература 2: Epigenomics, 7 (4), pp. 609-626 (2015)
Непатентная литература 3: Cancer Cell, 21 (4), pp. 473-487 (2012)
Непатентная литература 4: Cancer Cell, 28 (1), pp. 57-69 (2015)
Непатентная литература 5: Nucleic Acids Res., 30 (4), p. 1038-1045 (2002)
Непатентная литература 6: FASEB J., 23 (7), p. 2024-2033 (2009)
Непатентная литература 7: Oncogene, 29, p. 4896-4904 (2010)
Непатентная литература 8: Mol. Cell, 27 (4), p. 562-572 (2007)
Непатентная литература 9: Development, 140, p. 4947-4958 (2013)
Непатентная литература 10: Am. J. Clin. Pathol., 144 (4), p. 579-591 (2015)
Непатентная литература 11: Cancer Res., 53 (18), p. 4169-4171 (1993)
Сущность изобретения
Техническая проблема
Целью настоящего изобретения является предоставление способа прогнозирования терапевтического эффекта ингибитора LSD1 на основе экспрессии INSM1, чтобы обеспечить химиотерапию, обеспечивающую превосходные терапевтические эффекты для пациентов с раком.
Решение проблемы
Авторы настоящего изобретения провели обширные исследования для достижения указанной выше цели и обнаружили, что ингибиторы LSD1 обеспечивают значительно высокие противоопухолевые эффекты у пациентов с раком при высоком уровне экспрессии INSM1. С этим открытием изобретатели завершили данное изобретение.
В настоящем изобретении предоставлены следующие варианты.
Пункт 1: Способ прогнозирования терапевтического эффекта химиотерапии с применением противоопухолевого агента, содержащего ингибитор LSD1, у пациента с раком, на основе уровня экспрессии INSM1 в образце, выделенном у пациента с раком.
Пункт 2: Способ по пункту 1, где способ прогнозирует, что химиотерапия с применением противоопухолевого агента, содержащего ингибитор LSD1, с высокой вероятностью обеспечивает достаточный эффект у патента с раком, если уровень экспрессии INSM1 в образце, выделенном у пациента с раком, является высоким.
Пункт 3: Способ по пункту 1 или 2, включающий стадии (1) и (2) ниже:
(1) стадия измерения экспрессии INSM1 в образце, содержащем опухолевые клетки, выделенные у пациента с раком; и
(2) стадия прогнозирования того, что химиотерапия с применением противоопухолевого агента, содержащего ингибитор LSD1, с высокой вероятностью обеспечивает достаточный эффект у пациента с раком, если уровень экспрессии INSM1, полученный на стадии (1), равен или выше, чем заданная точка завершения сбора данных.
Пункт 4: Способ по любому из пунктов 1-3, где ингибитором LSD1 является соединение бифенила, представленное формулой (I) ниже
где кольцо A является моноциклической, мостиковой циклической или спироциклической 4-14-членной азотсодержащей насыщенной гетероциклической группой, имеющей 1-3 атома азота, 0-1 атом серы и 0-2 атома кислорода в качестве гетероатомов;
кольцо B является моноциклическим или бициклическим 5-14-членным ненасыщенным углеводородом или моноциклической или бициклической 5-14-членной ненасыщенной гетероциклической группой, которая может быть замещена оксо, которая имеет 0-4 атома азота, 0-2 атома серы и 0-3 атома кислорода в качестве гетероатомов, и которая имеет, по меньшей мере, один из азота, серы и кислорода;
R1 является нитро или циано,
R2 является галогеном,
R3 является амино, моно- или ди(C1-C6 алкил)амино, (C3-C7 циклоалкил)амино или C1-C6 алкилом, и
R4 является галогеном, нитро, циано, карбокси, замещенным или незамещенным C1-C8 алкилом, замещенным или незамещенным C2-C6 алкенилом, замещенным или незамещенным C1-C6 алкокси, замещенным или незамещенным C3-C7 циклоалкилом, моно- или ди(C1-C6 алкил)амино или замещенным или незамещенным карбамоилом;
где если, по меньшей мере, один R4 является замещенным C1-C8 алкилом, замещенным C2-C6 алкенилом, замещенным C1-C6 алкокси, замещенным C3-C7 циклоалкилом или замещенным карбамоилом, заместителем является галоген, карбокси, C1-C6 алкокси, гидрокси, C1-C6 алкил, который может быть замещен гидрокси, моноциклический 5-10-членный ненасыщенный углеводород, карбамоил, который может быть замещен C1-C6 алкилом или моноциклическим 5-10-членным ненасыщенным углеводородом, (C2-C7 ацил)окси, амино, который может быть замещен C1-C6 алкилом или C2-C7 ацилом, C3-C7 циклоалкил, который может быть замещен гидрокси, или (C1-C6 алкокси)(C1-C6 алкил), и если присутствуют два или более заместителей, заместители могут быть одинаковыми или разными;
R5 и R6 могут быть одинаковыми или разными, и каждый является водородом или C1-C6 алкилом; R5 и R6 также вместе могут образовывать оксо или тиоксо;
если R5 и R6 являются одинаковыми или разными, и каждый является водородом или C1-C6 алкилом, по меньшей мере, один из R5 и R6 являются водородом;
l является целым числом от 0 до 2,
m является целым числом от 0 до 2, и
n является целым числом от 0 до 5,
где если l равен 2, два R2 могут быть одинаковыми или разными;
если m равно 2, два R3 могут быть одинаковыми или разными;
если n равно 2-5, от двух до пяти R4 могут быть одинаковыми или разными;
или его соль, GSK2879552, ORY-1001 или GSK690.
Пункт 5. Способ по пункту 4, где соединением бифенила, представленным формулой (I), является соединение, в котором кольцо A является пирролидинилом, пиперидинилом, пиперазинилом, азепанилом, диазепанилом,
2,7-диазаспиро[3.4]октанилом, 3,7-диазаспиро[3.4]октанилом, 2,7-диазаспиро[3.5]нонанилом, 2,8-диазаспиро[3.5]нонанилом, 3,7-диазаспиро[3.5]нонанилом, 3,8-диазаспиро[4.4]нонанилом, 3,8-диазаспиро[4.5]деканилом или 9-оксадиазаспиро[3.5]нонанилом,
кольцом B является фенил, нафтил, пиридил, пиразолопиридил, пиразолопиримидинил, индолил, индолинил, 2-оксоиндолинил, индазолил, бензоимидазолил, бензоизоксазолил, бензотиазолил, бензотриазолил, имидазопиридинил, хинолинил, изохинолинил, хиназолинил, хиноксалинил, фталазинил, 2-оксо-2,3-дигидробензо[d]оксазолил, 1,3-дигидроизобензофуранил, дигидробензооксазинил, бензодиоксолил, дигидробензодиоксинил или 2-оксо-2,3-дигидробензо[d]тиазолил,
R1 является нитро или циано,
R2 является фтором, и присутствует в положении орто относительно R1 в фениле,
R3 является амино, метиламино, этиламино, изопропиламино, диметиламино, циклобутиламино или метилом (если присутствуют два или более R3, R3 могут быть одинаковыми или разными);
R4 является фтором, хлором, бромом, йодом, нитро, циано, карбокси, метилом, этилом, н-пропилом, изопропилом, трет-бутилом, дифторметилом, трифторметилом, фторэтилом, аминоэтилом, гидроксиметилом, гидроксиэтилом, гидроксипропилом, гидроксидиметилэтилом, гидроксиметилпропилом, гидроксиметилбутилом, гидроксиэтилбутилом, карбоксиметилом, карбамоилметилом, метилкарбамоилметилом, диметилкарбамоилметилом, ацетиламиноэтилом, метоксиэтилом, гидроксициклопропилметилом, гидроксициклопропилэтилом, гидроксициклобутилметилом, метилкарбонилоксиэтилом, изобутенилом, метокси, гидроксипропокси, циклопропилом, гидроксиметилциклопропилом, метоксиметилциклопропилом, гидроксициклопропилциклопропилом, фенилкарбамоилциклопропилом, бензилокси, диметиламино, карбамоилом, метилкарбамоилом или диметилкарбамоилом (если присутствуют два или более R4, R4 могут быть одинаковыми или разными);
R5 и R6 могут быть одинаковыми или разными, и каждый является водородом или C1-C6 алкилом; R5 и R6 в других случаях могут образовывать оксо или тиоксо вместе;
если R5 и R6 являются одинаковыми или разными, и каждый является водородом или C1-C6 алкилом, по меньшей мере, один из R5 и R6 являются водородом;
n является целым числом от 0 до 3; и
если n равно 2-3, от двух до трех R4 могут быть одинаковыми или разными.
Пункт 6: способ по пункту 5, где соединение бифенила, представленное формулой (I), является соединением, в котором кольцо А является пирролидинилом,
кольцо В является фенилом, индазолилом или бензотриазолилом;
R1 является циано;
R2 является фтором и присутствует в положении орто относительно R1 в фениле;
R3 является амино (если присутствуют два или более R3, R3 могут быть одинаковыми или разными);
R4 является фтором, бромом, гидроксиметилпропилом или гидроксиэтилбутилом;
R5 и R6 могут быть водородом или образовывать оксо вместе;
l равно целому числу от 0 до 2;
m равно целому числу от 0 до 2;
n равно целому числу от 0 до 3;
если m равно 2, два R3 могут быть одинаковыми или разными; и
если n равно от 2 до 3, от двух до трех R4 могут быть одинаковыми или разными.
Пункт 7. Способ по пункту 6, где соединением бифенила, представленными формулой (I), является соединение согласно любому из следующих соединений (1)-(9):
(1) 4-[5-[(3S)-3-аминопирролидин-1-карбонил]-2-[2-фтор-4-(2-гидрокси-2-метилпропил)фенил]фенил]-2-фторбензонитрил;
(2) 4-[5-[(3-эндо)-3-амино-8-азабицикло[3.2.1]октан-8-карбонил]-2-[2-фтор-4-(2-гидрокси-2-метилпропил)фенил]фенил]-2-фторбензонитрил;
(3) 5'-((3-эндо)-3-амино-8-азабицикло[3.2.1]октан-8-карбонил)-2'-(6,7-дифтор-1-(2-гидрокси-2-метилпропил)-1H-бензо[d][1,2,3]триазол-5-ил)-3-фтор-[1,1'-бифенил]-4-карбонитрил;
(4) 5'-((1S,2S,4R)-рел-2-амино-7-азабицикло[2.2.1]гептан-7-карбонил)-2'',3-дифтор-4''-(2-гидрокси-2-метилпропил)-[1,1':2',1''-терфенил]-4-карбонитрил-изомер-B;
(5) 5'-((1S,2S,4R)-рел-2-амино-7-азабицикло[2.2.1]гептан-7-карбонил)-3-фтор-2'-(6-фтор-1-(2-гидрокси-2-метилпропил)-1H-индазол-5-ил)-[1,1'-бифенил]-4-карбонитрил-изомер-B;
(6) 5'-((1S,2S,4R)-рел-2-амино-7-азабицикло[2.2.1]гептан-7-карбонил)-2'-(6,7-дифтор-1-(2-гидрокси-2-метилпропил)-1H-бензо[d][1,2,3]триазол-5-ил)-3-фтор-[1,1'-бифенил]-4-карбонитрил-изомер-B;
(7) 5'-((1S,2S,4R)-рел-2-амино-7-азабицикло[2.2.1]гептан-7-карбонил)-2'-(1-(2-этил-2-гидроксибутил)-6,7-дифтор-1H-бензо[d][1,2,3]триазол-5-ил)-3-фтор-[1,1'-бифенил]-4-карбонитрил-изомер-X;
(8) 5'-((1S,2S,4R)-рел-2-амино-7-азабицикло[2.2.1]гептан-7-карбонил)-2'-(7-бром-6-фтор-1-(2-гидрокси-2-метилпропил)-1H-бензо[d][1,2,3]триазол-5-ил)-3-фтор-[1,1'-бифенил]-4-карбонитрил-изомер-X;
(9) 5'-(((1S,2S,4R)-рел-2-амино-7-азабицикло[2.2.1]гептан-7-ил)метил)-2'-(6,7-дифтор-1-(2-гидрокси-2-метилпропил)-1H-бензо[d][1,2,3]триазол-5-ил)-3-фтор-[1,1'-бифенил]-4-карбонитрил-изомер-X.
Пункт 8: Набор, содержащий реагент для измерения уровня экспрессии INSM1 для прогнозирования терапевтического эффекта химиотерапии с применением противоопухолевого агента, содержащего ингибитор LSD1, у пациента с раком, на основе уровня экспрессии INSM1 в образце, выделенном у пациента с раком.
Пункт 9: Набор по пункту 8, где набор применяют для прогнозирования терапевтического эффекта химиотерапии с применением противоопухолевого агента, содержащего ингибитор LSD1, у пациента с раком, посредством способа прогнозирования терапевтического эффекта химиотерапии с применением противоопухолевого агента, содержащего ингибитор LSD1, у пациента с раком, включающего следующие стадии (1) и (2):
1) стадия измерения экспрессии INSM1 в образце, содержащем опухолевые клетки, выделенные у пациента с раком; и
(2) стадия прогнозирования того, что химиотерапия с применением противоопухолевого агента, содержащего ингибитор LSD1, с высокой вероятностью обеспечивает достаточный эффект у пациента с раком, если уровень экспрессии INSM1, полученный на стадии (1), равен или выше, чем заданная точка завершения сбора данных.
Пункт 10: Антитело, которое специфически распознает белок INSM1, и которое применяют для прогнозирования терапевтического эффекта химиотерапии с применением противоопухолевого агента, содержащего ингибитор LSD1.
Пункт 11: Способ лечения рака, включающий:
стадию прогнозирования терапевтического эффекта химиотерапии с применением противоопухолевого агента, содержащего ингибитор LSD1, у пациента с раком на основе уровня экспрессии INSM1 в образце, выделенном у пациента с раком; и
стадию проведения химиотерапии у пациента с раком, у которого был спрогнозирован с высокой вероятностью терапевтический эффект на вышеуказанной стадии.
Пункт 12: Способ по пункту 11, включающий:
стадию прогнозирования того, что химиотерапия с применением противоопухолевого агента, содержащего ингибитор LSD1, с высокой вероятностью обеспечит достаточный терапевтический эффект у пациента с раком, если уровень экспрессии INSM1 в образце, выделенном у пациента с раком, высок; и
стадию проведения химиотерапии у пациента, у которого был спрогнозирован с высокой вероятностью высокий терапевтический эффект на вышеуказанной стадии.
Пункт 13: Способ по пункту 11 или 12, включающий следующие стадии (1)-(3):
1) стадия измерения экспрессии INSM1 в образце, содержащем опухолевые клетки, выделенные у пациента с раком;
(2) стадия прогнозирования того, что химиотерапия с применением противоопухолевого агента, содержащего ингибитор LSD1, с высокой вероятностью обеспечивает достаточный эффект у пациента с раком, если уровень экспрессии INSM1, полученный на стадии (1), равен или выше, чем заданная точка завершения сбора данных; и
(3) стадия проведения химиотерапии у пациента с раком, у которого был спрогнозирован с высокой вероятностью достаточный терапевтический эффект на стадии (2).
Пункт 14: Противоопухолевый агент, содержащий ингибитор LSD1, для применения в химиотерапии с применением противоопухолевого агента, содержащего ингибитор LSD1, у пациента с раком, которому спрогнозировано с высокой вероятностью получение терапевтическиих эффектов способом прогнозирования терапевтического эффекта химиотерапии у пациента с раком на основе уровня экспрессии INSM1 в образце, выделенном у пациента с раком.
Пункт 15: Противоопухолевый агент по пункту 14, где противоопухолевый агент применяют для проведения химиотерапии с применением противоопухолевого агента, содержащего ингибитор LSD1, в отношении пациента с раком, которому спрогнозировано с высокой вероятностью получение терапевтических эффектов способом прогнозирования терапевтического эффекта химиотерапии у пациента с раком, включающим следующие стадии (1) и (2):
(1) стадия измерения экспрессии INSM1 в образце, содержащем опухолевые клетки, выделенные у пациента с раком; и
(2) стадия прогнозирования того, что химиотерапия с применением противоопухолевого агента, содержащего ингибитор LSD1, с высокой вероятностью обеспечивает достаточный эффект у пациента с раком, если уровень экспрессии INSM1, полученный на стадии (1), равен или выше, чем заданная точка завершения сбора данных.
Пункт 16: Применение ингибитора LSD1 для производства противоопухолевого агента, применяемого для проведения химиотерапии с применением противоопухолевого агента, содержащего ингибитор LSD1, у пациента с раком, которому спрогнозировано с высокой вероятностью получение терапевтических эффектов способом прогнозирования терапевтического эффекта химиотерапии у пациента с раком на основе уровня экспрессии INSM1 в образце, выделенном у пациента с раком.
Пункт 17: Применение ингибитора LSD1 по пункту 16, где ингибитор LSD1 применяют для производства противоопухолевого агента, применяемого для проведения химиотерапии с применением противоопухолевого агента, содержащего ингибитор LSD1, у пациента с раком, которому спрогнозировано с высокой вероятностью получение достаточного терапевтического эффекта от химиотерапии у пациента с раком, если уровень экспрессии INSM1 в образце, выделенном у пациента с раком, высок.
Пункт 18: Применение ингибитора LSD1 для производства противоопухолевого агента, применяемого для проведения химиотерапии с применением противоопухолевого агента, содержащего ингибитор LSD1, у пациента с раком, которому спрогнозировано с высокой вероятностью получение терапевтических эффектов способом прогнозирования терапевтического эффекта химиотерапии у пациента с раком, включающим следующие стадии (1) и (2):
(1) стадия измерения экспрессии INSM1 в образце, содержащем опухолевые клетки, выделенные у пациента с раком; и
(2) стадия прогнозирования того, что химиотерапия с применением противоопухолевого агента, содержащего ингибитор LSD1, с высокой вероятностью обеспечивает достаточный эффект у пациента с раком, если уровень экспрессии INSM1, полученный на стадии (1), равен или выше, чем заданная точка завершения сбора данных.
Настоящее изобретение также относится к следующим вариантам.
Способ проверки того, оказывает ли химиотерапия с применением ингибитора LSD1 терапевтические эффекты в отношении пациента с раком, включающий следующие стадии (1) и (2):
(1) стадия измерения экспрессии INSM1 в образце, содержащем опухолевые клетки, выделенные у пациента с раком; и
(2) стадия сравнения уровня экспрессии INSM1, полученного на стадии (1), с заданной точкой завершения сбора данных где, если уровень экспрессии INSM1 равен или выше заданной точки завершения сбора данных, уровень экспрессии показывает, что пациент с высокой вероятностью получает достаточные эффекты от химиотерапии с применением противоопухолевого агента, содержащего ингибитор LSD1 в отношении пациента.
Способ тестирования того, оказывает ли химиотерапия с применением противоопухолевого агента, содержащего ингибитор LSD1, терапевтические эффекты в отношении пациента с раком, включающий следующие стадии (1) и (2):
(1) стадия измерения экспрессии INSM1 в образце, содержащем опухолевые клетки, выделенные у пациента с раком; и
(2) стадия сравнения уровня экспрессии INSM1, полученного на стадии (1), с заданной точкой завершения сбора данных где, если уровень экспрессии INSM1 равен или выше заданной точки завершения сбора данных, уровень экспрессии показывает, что пациент с высокой вероятностью получает достаточные эффекты от химиотерапии с применением противоопухолевого агента, содержащего ингибитор LSD1 в отношении пациента.
Ингибитор LSD1 для лечения пациента с раком, если уровень экспрессии INSM1 у пациента с раком является высоким.
Ингибитор LSD1 для лечения пациента с раком, если уровень экспрессии INSM1 в образце, выделенном у пациента с раком, является высоким.
Ингибитор LSD1 для лечения пациента с раком, если уровень экспрессии INSM1 в образце, выделенном у пациента с раком, равен или больше заданной точки завершения сбора данных.
Способ измерения уровня экспрессии INSM1 в образце, выделенном у пациента с раком, и применение уровня экспрессии как показателя чувствительности к ингибитору LSD1.
Способ измерения уровня экспрессии INSM1 в образце, выделенном у пациента с раком, и определение того, вводить ли ингибитор LSD1 пациенту с раком, на основе уровня экспрессии.
Способ измерения уровня экспрессии INSM1 в образце, выделенном у пациента с раком, для прогнозирования терапевтического эффекта химиотерапии с применением противоопухолевого агента, содержащего ингибитор LSD1, у пациента с раком.
Способ измерения уровня экспрессии INSM1 в образце, выделенном у пациента с раком, для прогнозирования того, что химиотерапия с применением противоопухолевого агента, содержащего ингибитор LSD1, с высокой вероятностью обеспечивает достаточный эффект у пациента с раком, если уровень экспрессии INSM1 в образце, выделенном у пациента с раком, является высоким.
Преимущественные эффекты изобретения
В данном изобретении представлен новый способ прогнозирования терапевтического эффекта ингибитора LSD1 у пациента с раком. Более конкретно, способ прогнозирования в соответствии с данным изобретением делает возможным прогнозировать, на основе уровня экспрессии INSM1, пациента с раком, который будет демонстрировать значительную чувствительность к ингибиторам LSD1. Это позволяет выбирать подходящие лекарственные средства или предотвращать введение ненужных лекарственных средств при лечении рака, тем самым позволяя составлять подходящий план лечения. Это также предпочтительно с точки зрения экономики здравоохранения, так как позволяет избежать введения ненужных лекарственных средств.
Краткое описание чертежей
На фиг. 1 показана экспрессия белков (INSM1, LSD1, Gfi-1 и актина) в клетках МКРЛ.
На фиг. 2 показано сравнение уровня экспрессии белка (INSM1, LSD1 и Gfi-1) между клетками, которые чувствительны к ингибиторам LSD1, цисплатину или паклитакселу, и клеток, которые не чувствительны к ингибиторам LSD1, цисплатину или паклитакселу.
На фиг. 2a показано сравнение уровня экспрессии INSM1 в клетках, которые чувствительны к ингибиторам LSD1, и клетках, которые не чувствительны к ингибиторам LSD1. На фиг. 2b показано сравнение уровня экспрессии INSM1 в клетках, которые чувствительны к цисплатину, и клетках, которые не чувствительны к цисплатину. На фиг. 2c показано сравнение уровня экспрессии INSM1 в клетках, которые чувствительны к паклитакселу, и клетках, которые не чувствительны к паклитакселу. На фиг. 2d показано сравнение уровня экспрессии Gfi-1 в клетках, которые чувствительны к ингибиторам LSD1, и клетках, которые не чувствительны к ингибиторам LSD1. На фиг. 2e показано сравнение уровня экспрессии LSD1 в клетках, которые чувствительны к ингибиторам LSD1, и клетках, которые не чувствительны к ингибиторам LSD1.
На фиг. 3 показан эффект ингибирования роста клеток типовыми соединениями 41, 214 и 285 на клетках NCI-H1417.
На фиг. 4 показан эффект ингибирования роста клеток типовыми соединениями 41, 214 и 285 на клетках DMS79.
На фиг. 5 показан анализ экспрессии INSM1 согласно иммуногистохимическому окрашиванию. a: клетки Lu-135, b: клетки NCI-H146, c: клетки DMS79, d: клетки NCI-H196.
Описание вариантов
Способ прогнозирования в соответствии с настоящим изобретением позволяет прогнозировать или проверять терапевтический эффект химиотерапии с применением противоопухолевого агента, содержащего ингибитор LSD1, у пациента с раком, на основе уровня экспрессии INSM1 в образце, содержащем опухолевые клетки, выделенные у пациента с раком.
“Ингибитор LSD 1” в соответствии с настоящим изобретением особенно не ограничен, если он является терапевтическим агентом, обладающим активностью ингибирования деметилирования гистонов LSD1. Предпочтительно, чтобы ингибирующая активность ингибитора была специфической. С другой стороны, ингибитор также может обладать ингибирующей активностью в отношении целевых молекул, отличных от LSD1 (предпочтительно, небольшого количества целевых молекул около 1-5 или 1-3). Термин “ингибитор” в данном описании включает не только терапевтические агенты для ингибирования активности целевых молекул, но также терапевтические агенты для ингибирования экспрессии целевых молекул. Тип ингибитора LSD1 особо не ограничен, и примеры включают низкомолекулярные соединения, антитела, антисмысловые олигонуклеотиды, миРНК, кшРНК, мкРНК и аптамеры.
В предпочтительном варианте настоящего изобретения конкретные примеры ингибиторов LSD1 включают соединение бифенила, представленное формулой (I), и его соли.
где
кольцо A является моноциклической, мостиковой циклической или спироциклической 4-14-членной азотсодержащей насыщенной гетероциклической группой, имеющей 1-3 атома азота, 0-1 атом серы и 0-2 атома кислорода в качестве гетероатомов;
кольцо B является моноциклическим или бициклическим 5-14-членным ненасыщенным углеводородом или моноциклической или бициклической 5-14-членной ненасыщенной гетероциклической группой, которая может быть замещена оксо, которая имеет 0-4 атома азота, 0-2 атома серы и 0-3 атома кислорода в качестве гетероатомов, и которая имеет, по меньшей мере, один из азота, серы и кислорода;
R1 является нитро или циано,
R2 является галогеном,
R3 является амино, моно- или ди(C1-C6 алкил)амино, (C3-C7 циклоалкил)амино или C1-C6 алкилом, и
R4 является галогеном, нитро, циано, карбокси, замещенным или незамещенным C1-C8 алкилом, замещенным или незамещенным C2-C6 алкенилом, замещенным или незамещенным C1-C6 алкокси, замещенным или незамещенным C3-C7 циклоалкилом, моно- или ди(C1-C6 алкил)амино или замещенным или незамещенным карбамоилом;
где если, по меньшей мере, один R4 является замещенным C1-C8 алкилом, замещенным C2-C6 алкенилом, замещенным C1-C6 алкокси, замещенным C3-C7 циклоалкилом или замещенным карбамоилом, заместителем является галоген, карбокси, C1-C6 алкокси, гидрокси, C1-C6 алкил, который может быть замещен гидрокси, моноциклический 5-10-членный ненасыщенный углеводород, карбамоил, который может быть замещен C1-C6 алкилом или моноциклическим 5-10-членным ненасыщенным углеводородом, (C2-C7 ацил)окси, амино, который может быть замещен C1-C6 алкилом или C2-C7 ацилом, C3-C7 циклоалкил, который может быть замещен гидрокси, или (C1-C6 алкокси)(C1-C6 алкил), и если присутствуют два или более заместителей, заместители могут быть одинаковыми или разными;
R5 и R6 могут быть одинаковыми или разными, и каждый является водородом или C1-C6 алкилом; R5 и R6 также вместе могут образовывать оксо или тиоксо;
если R5 и R6 являются одинаковыми или разными, и каждый является водородом или C1-C6 алкилом, по меньшей мере, один из R5 и R6 являются водородом;
l является целым числом от 0 до 2,
m является целым числом от 0 до 2, и
n является целым числом от 0 до 5,
где если l равен 2, два R2 могут быть одинаковыми или разными;
если m равно 2, два R3 могут быть одинаковыми или разными;
если n равно 2-5, от двух до пяти R4 могут быть одинаковыми или разными.
В данном описании, если не указано иначе, примеры “заместителя” включают галоген, гидрокси, циано, нитро, алкил, гидроксиалкил, галогеналкил, циклоалкил, гидроксициклоалкил, циклоалкилалкил, аралкил, алкенил, алкинил, алкокси, галогеноалкокси, циклоалкокси, циклоалкилалкокси, ненасыщенное углеводородное кольцо-алкокси, алкилтио, циклоалкилалкилтио, амино, моно- или ди-алкиламино, циклоалкиламино, циклоалкилалкиламино, ацил, ацилокси, оксо, карбокси, алкоксикарбонил, аралкилоксикарбонил, карбамоил, который может быть замещен ненасыщенным углеводородным кольцом, насыщенную или ненасыщенную гетероциклическую группу, ненасыщенное углеводородное кольцо (например, ароматический углеводород), насыщенный гетероциклический окси, и подобные. Количество заместителей, если присутствуют, обычно составляет один, два или три.
В данном описании, примеры “галогена” включают фтор, хлор, бром, йод, и подобные, где фтор, хлор, бром или йод предпочтительны, и фтор, хлор или бром более предпочтительны.
В данном описании, “алкил” может быть прямым или разветвленным. Примеры включают C1-C6 алкил, такой как метил, этил, н-пропил, изопропил, н-бутил, изобутил, втор-бутил, трет-бутил, н-пентил, изопентил, трет-пентил и н-гексил.
В данном описании, примеры “гидроксиалкила” включают перечисленные выше алкильные группы, имеющие, по меньшей мере, одну гидроксигруппу (например, одну или две гидроксигруппы). Конкретные примеры включают гидроксиметил, 2-гидроксиэтил, 1-гидроксиэтил, 3-гидроксипропил, 2-гидроксипропил, 1-метил-2-гидроксиэтил, 4-гидроксибутил, изобутил, 2,2-диметил-2-гидроксиэтил, 5-гидроксипентил, 3,3-диметил-3-гидроксипропил, 6-гидроксигексил, дигидроксиметил, 1,2-дигидроксиэтил, 2,3-дигидроксипропил, 3,4-дигидроксибутил, 4,5-дигидроксипентил, 5,6-дигидроксигексил, и подобные, где гидроксиалкил, имеющий одну гидроксигруппу, предпочтителен.
В данном описании, “галогеноалкил” является прямым или разветвленным C1-C6 алкилом, имеющим от 1 до 13 атомов галогена (галоген C1-C6 алкил). Примеры включают галоген C1-C6 алкил, такой как фторметил, дифторметил, трифторметил, трихлорметил, фторэтил, 1,1,1-трифторэтил, монофтор-н-пропил, перфтор-н-пропил и перфторизопропил, где галоген C1-C4 алкил предпочтителен, и галоген C1-C4 алкил, имеющий 1-7 атомов галогена, более предпочтителен.
В данном описании, конкретные примеры “циклоалкила” включают C3-C7 циклоалкил, такой как циклопропил, циклобутил, циклопентил, циклогексил и циклогептил.
В данном описании, примеры “гидроксициклоалкила” включают перечисленные выше C3-C7 циклоалкильные группы, которые имеют, по меньшей мере, одну гидроксигруппу (например, одну или две гидроксигруппы). Конкретные примеры включают 1-гидроксициклопропил, 2-гидроксициклопропил, 1-гидроксициклобутил, 3-гидроксициклобутил, 1-гидроксициклопентил, 3,4-дигидроксициклопентил, 1-гидроксициклогексил, 4-гидроксициклогексил, 1-гидроксициклогептил, и подобные, где гидроксициклоалкил, имеющий одну гидроксигруппу, предпочтителен.
В данном описании, примеры “циклоалкилалкила” включают C3-C7 циклоалкил, замещенный C1-C4 алкилом, такой как циклопропилметил, циклобутилметил, циклопентилметил, циклогексилметил и циклогептилметил.
В данном описании, примеры “аралкил” включают C7-C13 аралкил, такой как бензил, фенетил, нафтилметил и флуоренилметил.
В данном описании, “алкенил” может быть прямым, разветвленным или циклическим и относится к ненасыщенному углеводороду, имеющему, по меньшей мере, одну двойную связь (например, одну или две двойные связи). Примеры включают C2-C6 алкенил, такой как винил, аллил, 1-пропенил, 2-метил-2-пропенил, изопропенил, 1-бутенил, 2-бутенил, 3-бутенил, изобутенил, 2-пенетнил, 3-пенетнил, 4-пенетнил, 2-метил-2-бутенил, 3-метил-2-бутенил, 5-гексенил, 1-циклопенетнил, 1-циклогексенил и 3-метил-3-бутенил.
В данном описании, “алкинил” может быть прямым, разветвленным или циклическим и относится к ненасыщенному углеводороду, имеющему, по меньшей мере, одну тройную связь (например, одну или две тройные связи). Примеры включают C2-C6 алкинил, такой как этинил, 1-пропинил, 2-пропинил, 1-бутинил, 2-бутинил, 3-бутинил и 1-метил-2-пропинил.
В данном описании, “алкокси” может быть прямым или разветвленным. Примеры включают C1-C6 алкокси, такой как метокси, этокси, н-пропокси, изопропокси, н-бутокси, изобутокси, втор-бутокси, трет-бутокси, пентилокси, изопентилокси и гексилокси.
В данном описании, “галогеноалкокси” относится к прямому или разветвленному C1-C6 алкокси, имеющему 1-13 атомов галогена (галоген C1-C6 алкокси). Примеры включают галоген C1-C6 алкокси, такой как фторметокси, дифторметокси, трифторметокси, трихлорметокси, фторэтокси, 1,1,1-трифторэтокси, монофтор-н-пропокси, перфтор-н-пропокси и перфторизопропокси, где галоген C1-C4 алкокси предпочтителен, и галоген C1-C4 алкокси, имеющий 1-7 атомов галогена, более предпочтителен.
В данном описании, примеры “циклоалкокси” включают C3-C7 циклоалкокси, такой как циклопропокси, циклобутокси, циклопентилокси, циклогексилокси и циклогептилокси.
В данном описании, примеры “циклоалкилалкокси” включают C3-C7 циклоалкил, замещенный C1-C4 алкокси, такой как циклопропилметокси, циклобутилметокси, циклопентилметокси, циклогексилметокси и циклогептилметокси.
В данном описании, “алкилтио” может быть прямым или разветвленным. Примеры включают C1-C6 алкилтио, такой как метилтио, этилтио, н-пропилтио, изопропилтио, н-бутилтио, изобутилтио, трет-бутилтио, н-пентилтио, изопентилтио и гексилтио.
В данном описании, примеры “циклоалкилалкилтио” включают C3-C7 циклоалкил-замещенный C1-C4 алкилтио, такой как циклопропилметилтио, циклобутилметилтио, циклопентилметилтио, циклогексилметилтио и циклогептилметилтио.
В данном описании, примеры “моноалкиламино” включают амино, монозамещенный прямым или разветвленным C1-6 алкилом, такой как метиламино, этиламино, н-пропиламино, изопропиламино, н-бутиламино, изобутиламино, трет-бутиламино, н-пентиламино, изопентиламино и гексиламино.
В данном описании, примеры “диалкиламино” включают амино, дизамещенный одинаковыми или разными прямыми или разветвленными C1-C6 алкильными группами, такой как диметиламино, диэтиламино, ди(н-пропил)амино, диизопропиламино, ди(н-бутил)амино, диизобутиламино, ди(трет-бутил)амино, ди(н-пентил)амино, диизопентиламино, дигексиламино, метилэтиламино и метилизопропиламино.
В данном описании, примеры “циклоалкиламино” включают амино, имеющий одну или две циклоалкильные группы, указанные выше. Конкретные примеры включают N-циклопропиламино, N, N-дициклопропиламино, N-циклобутиламино, N-циклопентиламино, N-циклогексиламино, N-циклогептиламино и подобные.
В данном описании, примеры “циклоалкилалкиламино” включают C3-C7 циклоалкилзамещенный C1-C4 алкиламино, такой как циклопропилметиламино, циклобутилметиламино, циклопентилметиламино, циклогексилметиламино и циклогептилметиламино.
В данном описании, “ацил” относится к алкилкарбонилу или арилкарбонилу.
В данном описании, примеры “алкилкарбонила” включают прямой или разветвленный (C1-C6 алкил)карбонил, такой как метилкарбонил, этилкарбонил, н-пропилкарбонил, изопропилкарбонил, н-бутилкарбонил, изобутилкарбонил, трет-бутилкарбонил, н-пентилкарбонил, изопентилкарбонил и гексилкарбонил.
В данном описании, примеры “арилкарбонила” включают (C6-C13 арил)карбонил, такой как фенилкарбонил, нафтилкарбонил, флуоренилкарбонил, антрилкарбонил, бифенилилкарбонил, тетрагидронафтилкарбонил, хроманилкарбонил, 2,3-дигидро-1,4-диоксанафталенилкарбонил, инданилкарбонил и фенантрилкарбонил.
В данном описании, “ациламино” относится к алкилкарбониламино или арилкарбониламино.
В данном описании, примеры “алкилкарбониламино” включают прямой или разветвленный (C1-C6 алкил)карбониламино, такой как метилкарбониламино, этилкарбониламино, н-пропилкарбониламино, изопропилкарбониламино, н-бутилкарбониламино, изобутилкарбониламино, трет-бутилкарбониламино, н-пентилкарбониламино, изопентилкарбониламино и гексилкарбониламино.
В данном описании, примеры “арилкарбониламино” включают (C6-C13 арил)карбониламино, такой как фенилкарбониламино, нафтилкарбониламино, флуоренилкарбониламино, антрилкарбониламино, бифенилилкарбониламино, тетрагидронафтилкарбониламино, хроманилкарбониламино, 2,3-дигидро-1,4-диоксанафталенилкарбониламино, инданилкарбониламино и фенантрилкарбониламино.
В данном описании, “ацилокси” относится к алкилкарбонилокси или арилкарбонилокси.
В данном описании, примеры “алкилкарбонилокси” включают прямой или разветвленный (C1-C6 алкил)карбонилокси, такой как метилкарбонилокси, этилкарбонилокси, н-пропилкарбонилокси, изопропилкарбонилокси, н-бутилкарбонилокси, изобутилкарбонилокси, трет-бутилкарбонилокси, н-пентилкарбонилокси, изопентилкарбонилокси и гексилкарбонилокси.
В данном описании, примеры “арилкарбонилокси” включают (C6-C13 арил)карбонилокси, такой как фенилкарбонилокси, нафтилкарбонилокси, флуоренилкарбонилокси, антрилкарбонилокси, бифенилилкарбонилокси, тетрагидронафтилкарбонилокси, хроманилкарбонилокси, 2,3-дигидро-1,4-диоксанафталенилкарбонилокси, инданилкарбонилокси и фенантрилкарбонилокси.
В данном описании, “алкоксикарбонил” может быть прямым или разветвленным. Примеры включают (C1-C6 алкокси)карбонил, такой как метоксикарбонил, этоксикарбонил, пропоксикарбонил, изопропоксикарбонил, бутоксикарбонил, изобутоксикарбонил, трет-бутоксикарбонил, пентилоксикарбонил, изопентилоксикарбонил и гексилоксикарбонил.
В данном описании, примеры “аралкилоксикарбонила” включают (C7-C13 аралкил)оксикарбонил, такой как бензилоксикарбонил, фенэтилоксикарбонил, нафтилметилоксикарбонил и флуоренилметилоксикарбонил.
В данном описании, “насыщенная гетероциклическая группа” относится к моноциклической или полициклической насыщенной гетероциклической группе, имеющей один или более (предпочтительно, 1-3) гетероатома, выбранных из азота, кислорода и серы. Конкретные примеры включают морфолинил, пирролидинил, пиперидинил, пиперазинил, азепанил, диазепанил, тетрагидрофуранил, тетрагидропиранил, тетрагидротиофенил, тиазолидинил, оксазолидинил и подобные.
В данном описании, “ненасыщенная гетероциклическая группа” относится к моноциклической или полициклической, полностью или частично ненасыщенной гетероциклической группе, содержащей один или более (предпочтительно, 1-3) гетероатома, выбранных из азота, кислорода и серы. Конкретные примеры включают имидазолил, тиенил, фурил, пирролил, оксазолил, изоксазолил, тиазолил, изотиазолил, тиадиазолил, пиразолил, триазолил, тетразолил, пиридил, пиразолил, пиримидинил, пиридазинил, пиразолопиридил, пиразолопиримидинил, индолил, изоиндолил, индазолил, триазолопиридил, бензоимидазолил, бензоксазолил, бензоизоксазолил, бензотиазолил, бензотиенил, бензофуранил, 1,3-дигидроизобензофуранил, пуринил, бензотриазолил, имидазопиридинил, хинолинил, изохинолинил, хиназолинил, хиноксалинил, фталазинил, метилендиоксифенил, этилендиоксифенил, дигидробензофуранил, и подобные.
В данном описании, примеры “ненасыщенного углеводорода” включают моноциклическое или полициклическое C5-С14 углеводородное кольцо, имеющее, по меньшей мере, одну ненасыщенную связь (например, 1-8 ненасыщенных связей), и подобные. “Ненасыщенным углеводородом” предпочтительно является ароматический углеводород или моноциклический или бициклический 5-14-членный ненасыщенный углеводород.
В данном описании, примеры “ароматического углеводорода” включают C6-C14 ароматические углеводороды, такие как фенил, нафтил, антраценил, фенантрил, флуоренил и тетрагидронафтил.
В данном описании, примеры “моноциклического или бициклического 5-14-членного ненасыщенного углеводорода” включают циклопентадиентил, фенил, нафтил, тетрагидронафтил, азуленил, гепталенил и подобные.
В данном описании, примеры “моноциклического 5-10-членного ненасыщенного углеводорода” включают циклопентадиенил, фенил, циклооктатетраенил, и подобные.
В данном описании, “насыщенный гетероциклический окси” относится к насыщенному гетероциклическому окси, имеющему гетероатом, выбранный из азота, кислорода и серы. Конкретные примеры включают морфолинилокси, 1-пирролидинилокси, пиперидинилокси, пиперазинилокси, 4-метил-1-пиперазинилокси, тетрагидрофуранилокси, тетрагидропиранилокси, тетрагидротиофенилокси, тиазолидинилокси и оксазолидинилокси, где насыщенный гетероциклический окси, имеющий 1-3 гетероатома, выбранных из азота, кислорода и серы, предпочтителен.
В данном описании, термин “CA-CB”, применяемый при описании группы, означает, что группа имеет A-B количество атомов углерода. Например, “C1-C6 алкил” относится к алкилу, имеющему 1-6 атомов углерода, и “C6-C14 ароматический углеводород окси” относится к окси, к которому присоединен C6-C14 ароматический углеводород. Далее, термин “A-B-членный” означает, что количество атомов (количество членов кольца), которые составляют кольцо, равно A-B. Например, “4-10-членная азотсодержащая насыщенная гетероциклическая группа” относится к азотсодержащей насыщенной гетероциклической группе, содержащей 4-10 членов в кольце.
В соединении, представленном формулой (I) в соответствии с данным изобретением, кольцо A относится к азотсодержащей насыщенной гетероциклической группе, которая может быть поперечно сшитой или спироциклической. Как показано в формуле (I) выше, азот в кольце A связан с карбонилом, карботионилом или метиленом.
Примеры моноциклической азотсодержащей насыщенной гетероциклической группы в “моноциклической, мостиковой циклической или спироциклической азотсодержащей насыщенной гетероциклической группе”, представленной кольцом A, включают моноциклические азотсодержащие насыщенные гетероциклические группы, такие как пирролидинил, пиперидинил, пиперазинил, азепанил, диазепанил, и подобные. Предпочтительно, моноциклической азотсодержащей насыщенной гетероциклической группой является моноциклическая азотсодержащая насыщенная гетероциклическая группа, имеющая от 1 до 3 атомов азота, от 0 до 1 атома серы и от 0 до 2 атомов кислорода в качестве гетероатомов. Более предпочтительно, моноциклической азотсодержащей насыщенной гетероциклической группой является моноциклическая азотсодержащая насыщенная гетероциклическая группа, имеющая от 1 до 2 атомов азота в качестве гетероатомов. Более предпочтительно, моноциклической азотсодержащей насыщенной гетероциклической группой является моноциклическая 4-10-членная азотсодержащая насыщенная гетероциклическая группа, имеющая от 1 до 2 атомов азота в качестве гетероатомов, более предпочтительно, моноциклическая 5-7-членная азотсодержащая насыщенная гетероциклическая группа, имеющая от 1 до 2 атомов азота в качестве гетероатомов, и более предпочтительно, пирролидинил, пиперидинил, пиперазинил, азепанил или диазепанил. Более предпочтительно, моноциклической азотсодержащей насыщенной гетероциклической группой является пирролидинил.
Примеры мостиковой циклической азотсодержащей насыщенной гетероциклической группы в “моноциклической, мостиковой циклической или спироциклической азотсодержащей насыщенной гетероциклической группы” представленной кольцом A, включают
.
и подобные. Мостиковой циклической азотсодержащей насыщенной гетероциклической группой предпочтительно является
более предпочтительно,
более предпочтительно,
более предпочтительно,
и более предпочтительно,
Примеры спироциклической азотсодержащей насыщенной гетероциклической группы в “моноциклической, мостиковой циклической или спироциклической азотсодержащей насыщенной гетероциклической группе”, представленной кольцом A, включают спироциклические группы, имеющие 0-2 атома кислорода, в которых любые две 4-7-членные азотсодержащие насыщенные гетероциклические группы связаны друг с другом. Спироциклической азотсодержащей насыщенной гетероциклической группой предпочтительно является 7-12-членная спироциклическая группа, имеющая 2 атома азота и 0-1 атом кислорода, в которой любые две 4-7-членные азотсодержащие насыщенные гетероциклические группы связаны друг с другом, более предпочтительно диазаспирогептанил, диазаспирооктанил, диазаспирононанил, диазаспиродеканил, диазаспироундеканил, оксадиазаспирогептанил, оксадиазаспирооктанил, оксадиазаспирононанил, оксадиазаспиродеканил или оксадиазаспироундеканил, более предпочтительно, диазаспирооктанил, диазаспирононанил, диазаспиродеканил или оксадиазаспирононанил, более предпочтительно, 2,7-диазаспиро[3.4]октанил, 3,7-диазаспиро[3.4]октанил, 2,7-диазаспиро[3.5]нонанил, 2,8-диазаспиро[3.5]нонанил, 3,7-диазаспиро[3.5]нонанил, 3,8-диазаспиро[4.4]нонанил, 3,8-диазаспиро[3.5]деканил или 9-окса-диазаспиро[3.5]нонанил, более предпочтительно, 2,7-диазаспиро[3.4]октанил, 3,7-диазаспиро[3.4]октанил, 2,7-диазаспиро[3.5]нонанил, 2,8-диазаспиро[3.5]нонанил или 9-окса-диазаспиро[3.5]нонанил, более предпочтительно, 2,7-диазаспиро[3.4]октанил, 3,7-диазаспиро[3.4]октанил или 2,8-диазаспиро[3.5]нонанил, и более предпочтительно, 2,8-диазаспиро[3.5]нонанил.
“Моноциклической, мостиковой циклической или спироциклической азотсодержащей насыщенной гетероциклической группой”, представленной кольцом A, предпочтительно является моноциклическая, мостиковая циклическая или спироциклическая 4-14-членная азотсодержащая насыщенная гетероциклическая группа, содержащая 1-3 атома азота, 0-1 атома серы и 0-2 атома кислорода в качестве гетероатомов, более предпочтительно, моноциклическая 4-10-членная азотсодержащая насыщенная гетероциклическая группа, имеющая 1-2 атома азота в качестве гетероатомов, мостиковая циклическая азотсодержащая насыщенная гетероциклическая группа, такая как
или спироциклическая группа, имеющая 0-2 атома кислорода, в которой любые две 4-7-членные азотсодержащие насыщенные гетероциклические группы связаны друг с другом, более предпочтительно, моноциклическая 4-10-членная азотсодержащая насыщенная гетероциклическая группа, содержащая 1-2 атома азота в качестве гетероатомов, мостиковая циклическая азотсодержащая насыщенная гетероциклическая группа, такая как
или 7-12-членная спироциклическая группа, имеющая 2 атома азота и 0-1 атом кислорода, в которой любые два 4-7-членных азотсодержащих насыщенных гетероциклических кольца связаны друг с другом, более предпочтительно, пирролидинил, пиперидинил, пиперазинил, азепанил, диазепанил,
2,7-диазаспиро[3.4]октанил, 3,7-диазаспиро[3.4]октанил, 2,7-диазаспиро[3.5]нонанил, 2,8-диазаспиро[3.5]нонанил, 3,7-диазаспиро[3.5]нонанил, 3,8-диазаспиро[4.4]нонанил, 3,8-диазаспиро[4.5]деканил или 9-оксадиазаспиро[3.5]нонанил, более предпочтительно, пирролидинил, пиперидинил, азепанил, диазепанил,
2,7-диазаспиро[3.4]октанил, 3,7-диазаспиро[3.4]октанил, 2,7-диазаспиро[3.5]нонанил, 2,8-диазаспиро[3.5]нонанил или 9-окса-диазаспиро[3.5]нонанил, более предпочтительно, пирролидинил,
или 2,8-диазаспиро[3.5]нонанил, более предпочтительно, пирролидинил,
.
В соединении, представленном формулой (I) в соответствии с данным изобретением кольцо B является моноциклическим или бициклическим ненасыщенным углеводородом или моноциклической или бициклической ненасыщенной гетероциклической группой, которая может быть замещена оксо.
“Моноциклическим или бициклическим ненасыщенным углеводородом”, представленным кольцом B, предпочтительно является моноциклический или бициклический 5-14-членный ненасыщенный углеводород, более предпочтительно, фенил или нафтил, и более предпочтительно, фенил.
“Моноциклическая или бициклическая ненасыщенная гетероциклическая группа”, представленная кольцом B, относится к моноциклической или бициклической, полностью или частично ненасыщенной гетероциклической группе, имеющей гетероатом, выбранный из азота, кислорода и серы, предпочтительно, 5-14-членной моноциклической или бициклической, полностью ненасыщенной гетероциклической группе или частично ненасыщенной гетероциклической группе, имеющей 0-4 атома азота, 0-2 атома серы и 0-3 атома кислорода в качестве гетероатомов, и имеющей, по меньшей мере, один из азота, серы и кислорода, более предпочтительно, имидазолилу, тиенилу, фурилу, пирролилу, оксазолилу, изоксазолилу, тиазолилу, изотиазолилу, тиадиазолилу, пиразолилу, триазолилу, тетразолилу, пиридилу, пиразилу, пиримидинилу, пиридазинилу, пиразолопиридилу, пиразолопиримидинилу, индолилу, изоиндолилу, индолинилу, индазолилу, триазолопиридилу, бензоимидазолилу, бензоксазолилу, бензоизоксазолилу, бензотиазолилу, бензотриазолилу, бензотиенилу, бензофуранилу, пуринилу, имидазопиридинилу, хинолинилу, изохинолинилу, хиназолинилу, хиноксалинилу, фталазинилу, метилендиоксифенилу, этилендиоксифенилу, дигидробензофуранилу, 1,3-дигидроизобензофуранилу, дигидробензоксазолилу (например, 2,3-дигидробензо[d]оксазолилу), дигидробензооксазинилу (например, 3,4-дигидро-2H-бензо[b][1.4]оксазинилу), бензодиоксолилу (например, бензо[d][1,3]диоксолилу), дигидробензодиоксинилу (например, 2,3-дигидробензо[b][1.4]диоксинилу) или дигидробензотиазолилу (например, 2,3-дигидробензо[d]тиазолилу), более предпочтительно, пиридилу, пиразолопиридилу, пиразолопиримидинилу, индолилу, индолинилу, индазолилу, бензимидазолилу, бензоизоксазолилу, бензотиазолилу, бензотриазолилу, имидазопиридинилу, хинолинилу, изохинолинилу, хиноксалинилу, хиназолинилу, фталазинилу, дигидробензоксазолилу, 1,3-дигидроизобунзофуранилу, дигидробензооксазинилу, бензодиоксолилу, дигидробензодиоксинилу или дигидробензотиазолилу, более предпочтительно, пиридилу, пиразолопиридилу, индолилу, индолинилу, индазолилу, бензоимидазолилу, бензоизоксазолилу, бензотриазолилу, хинолинилу, дигидробензоксазолилу, 1,3-дигидроизобензофуранилу, дигидробензооксазинилу или дигидробензотиазолилу, более предпочтительно, индолилу, индазолилу, бензоизоксазолилк или бензотриазолилу, и более предпочтительно, бензотриазолилу. Моноциклическая или бициклическая ненасыщенная гетероциклическая группа, представленная кольцом B, может быть замещена оксо. Примеры моноциклической или бициклической ненасыщенной группы, которая замещена оксо, включают 2-оксо-индолинил, 
, 2-оксо-2,3-дигидробензо[d]оксазолил, 
, 2-оксо-2,3-дигидробензо[d]тиазолил, 
и подобные. Моноциклической или бициклической ненасыщенной гетероциклической группой, которая замещена оксо, предпочтительно является 2-оксоиндолинил, 2-оксо-2,3-дигидробензо[d]оксазолил или 2-оксо-2,3-дигидробензо[d]тиазолил, и более предпочтительно, 2-оксо-2,3-дигидробензо[d]оксазолил или 2-оксо-2,3-дигидробензо[d]тиазолил.
Кольцом B предпочтительно является моноциклическая или бициклическая 5-14-членная ненасыщенная углеводородная группа или моноциклическая или бициклическая 5-14-членная ненасыщенная гетероциклическая группа, которая может быть замещена оксо; которая имеет 0-4 атома азота, 0-2 атома серы и 0-3 атома кислорода в качестве гетероатомов; и которая имеет, по меньшей мере, один из азота, серы и кислорода, более предпочтительно, фенил, нафтил, пиридил, пиразолопиридил, пиразолопиримидинил, индолил, индолинил, 2-оксоиндолинил, индазолил, бензоимидазолил, бензоизоксазолил, бензотиазолил, бензотриазолил, имидазопиридинил, хинолинил, изохинолинил, хиназолинил, хиноксалинил, фталазинил, 2-оксо-2,3-дигидробензо[d]оксазолил, 1,3-дигидроизобензофуранил, дигидробензооксазинил, бензодиоксолил, дигидробензодиоксинил или 2-оксо-2,3-дигидробензо[d]тиазолил, более предпочтительно, фенил, нафтил, пиридил, пиразолопиридил, индолил, индолинил, индазолил, бензоимидазолил, бензоизоксазолил, бензотриазолил, хинолинил, 2-оксо-2,3-дигидробензо[d]оксазолил, 1,3-дигидроизобензофуранил, дигидробензооксазинил или 2-оксо-2,3-дигидробензо[d]тиазолил, и более предпочтительно, фенил, индолил, индазолил, бензоизоксазолил или бензотриазолил, и более предпочтительно, бензотриазолил.
В соединении, представленном формулой (I) в соответствии с данным изобретением, R1 является нитро или циано, и, предпочтительно, циано.
В соединении, представленном формулой (I) в соответствии с данным изобретением, R2 является галогеном и, предпочтительно, фтором. Если присутствуют два или более R2, R2 могут быть одинаковыми или разными.
В соединении, представленном формулой (I) в соответствии с данным изобретением, l является целым числом от 0 до 2, и, предпочтительно, целым числом от 0 до 1.
В соединении, представленном формулой (I) в соответствии с данным изобретением, R3 является замещенным или незамещенным амино, C1-C6 алкилом, галогеном, циано, оксо, гидрокси, карбамоилом, сульфо, C1-C6 алкокси или амино(C1-C6 алкилом). Если присутствуют два или более R3, R3 могут быть одинаковыми или разными.
“C1-C6 алкил”, представленный R3, может быть прямым или разветвленным. Примеры включают метил, этил, н-пропил, изопропил, н-бутил, изобутил, трет-бутил, н-пентил, изопентил, гексил и подобные, где C1-C4 алкил предпочтителен, и метил более предпочтителен.
Примеры “моно(C1-C6 алкил)амино”, представленного R3, включают метиламино, этиламино, н-пропиламино, изопропиламино, н-бутиламино, изобутиламино, трет-бутиламино, н-пентиламино, изопентиламино, гексиламино и подобные, где моно(C1-C4 алкил)амино предпочтителен, и метиламино, этиламино или изопропиламино более предпочтительны.
Примеры “ди(C1-C6 алкил)амино”, представленного R3, включают диметиламино, диэтиламино, ди(н-пропил)амино, диизопропиламино, ди(н-бутил)амино, диизобутиламино, ди(трет-бутил)амино, ди(н-пентил)амино, диизопентиламино, дигексиламино, метилэтиламино, метилизопропиламино и подобные. “Ди(C1-C6 алкил)амино” предпочтительно является диметиламино, диэтиламино, ди(н-пропил)амино, диизопропиламино, ди(н-бутил)амино, диизобутиламино, ди(трет-бутил)амино, ди(н-пентил)амино, диизопентиламино, дигексиламино, метилэтиламино или метилизопропиламино, более предпочтительно, ди(C1-C4 алкил)амино, и более предпочтительно, диметиламино.
Примеры “(C3-C7 циклоалкил)амино”, представленные R3, включают (C3-C7 циклоалкил)амино, такой как циклопропиламино, циклобутиламино, циклопентиламино, циклогексиламино и циклогептиламино. “(C3-C7 циклоалкил)амино” предпочтительно является циклопропиламино, циклобутиламино, циклопентиламино, циклогексиламино или циклогептиламино, и более предпочтительно, циклобутиламино.
R3 предпочтительно является замещенным или незамещенным амино, C1-C6 алкилом, галогеном, циано, оксо, гидрокси, карбамоилом, сульфо, C1-C6 алкокси или амино(C1-C6 алкилом), более предпочтительно, амино, который может быть замещен от одного до двух C1-C6 алкильными или C3-C7 циклоалкильными группами, C1-C6 алкилом, галогеном, циано, оксо, гидрокси, карбамоилом, сульфо, C1-C6 алкокси или амино(C1-C6 алкилом), более предпочтительно, амино, моно- или ди(C1-C6 алкил)амино, (C3-C7 циклоалкил)амино или C1-C6 алкилом, более предпочтительно, амино, метиламино, этиламино, изопропиламино, диметиламино, циклобутиламино или метилом, более предпочтительно, амино или метилом, и более предпочтительно, амино.
В соединении, представленном формулой (I) в соответствии с данным изобретением, m является целым числом от 0 до 2, и, предпочтительно, целым числом от 0 до 1.
В соединении, представленном формулой (I) в соответствии с данным изобретением, R4 является галогеном, гидрокси, нитро, циано, амино, карбокси, (C2-C7 ацил)амино, (C2-C7 ацил)окси, замещенным или незамещенным C1-C8 алкилом, замещенным или незамещенным C2-C6 алкенилом, замещенным или незамещенным C1-C6 алкокси, замещенным или незамещенным C3-C7 циклоалкилом, моно- или ди(C1-C6 алкил)амино, замещенным или незамещенным карбамоилом, замещенным или незамещенным C2-C6 алкинилом, замещенным или незамещенным (C1-C6 алкил)карбонилом, замещенной или незамещенной 4-14-членной азотсодержащей насыщенной гетероциклической группой, или замещенным или незамещенным C6-C14 ароматическим углеводородом. Если присутствуют два или более R4, R4 могут быть одинаковыми или разными.
В данном изобретении если, по меньшей мере, один R4 является замещенным C1-C8 алкилом, замещенным C2-C6 алкенилом, замещенным C1-C6 алкокси, замещенным C3-C7 циклоалкилом или замещенным карбамоилом, примеры заместителей включают галоген, карбокси, C1-C6 алкокси, гидрокси, C1-C6 алкил, который может быть замещен гидрокси, моноциклический 5-10-членный ненасыщенный углеводород, карбамоил, который может быть замещен C1-C6 алкилом, или моноциклический 5-10-членный ненасыщенный углеводород, (C2-C7 ацил)окси, амино, который может быть замещен C1-C6 алкилом или C2-C7 ацилом, C3-C7 циклоалкил, который может быть замещен гидрокси, (C1-C6 алкокси)(C1-C6 алкил), и подобные. Если присутствуют два или более заместителей, заместители могут быть одинаковыми или разными.
“C1-C8 алкил” в “замещенном или незамещенном C1-C8 алкиле”, представленном R4, предпочтительно является метилом, этилом, н-пропилом, изопропилом, н-бутилом, изобутилом, втор-бутилом, трет-бутилом, пентилом, гексилом, гептилом или октилом, более предпочтительно, C1-C6 алкилом, более предпочтительно, метилом, этилом, н-пропилом, изопропилом, н-бутилом, изобутилом, втор-бутилом, трет-бутилом, пентилом или гексилом, и более предпочтительно, метилом, этилом, н-пропилом, изопропилом, н-бутилом, изобутилом, втор-бутилом или трет-бутилом.
Заместителем в “замещенном или незамещенном C1-C8 алкиле”, представленном R4, может быть, например, заместитель из перечисленных выше, предпочтительно, галоген, амино, гидрокси, карбокси, карбамоил, алкилкарбамоил, ациламино, алкокси, гидроксициклоалкил или ацилокси, более предпочтительно, галоген, амино, гидрокси, карбокси, карбамоил, (C1-C6 алкил)карбамоил, (C2-C7 ацил)амино, C1-C6 алкокси, C3-C7 циклоалкил, гидрокси(C3-C7 циклоалкил) или (C2-C7 ацил)окси, более предпочтительно, галоген, амино, гидрокси, карбокси, карбамоил, (C1-C6 алкил)карбамоил, (C1-C6 алкил)карбониламино, C1-C6 алкокси, C3-C7 циклоалкил, гидрокси(C3-C7 циклоалкил) или (C1-C6 алкил)карбонилокси, и более предпочтительно, фтор, амино, гидрокси, карбокси, карбамоил, метилкарбамоил, диметилкарбамоил, ацетиламино, метокси, гидроксициклопропил или метилкарбонилокси.
“Замещенный или незамещенный C1-C8 алкил”, представленный R4, предпочтительно является незамещенным C1-C8 алкилом или C1-C8 алкилом, который может быть замещен галогеном, амино, гидрокси, карбокси, карбамоилом, (C1-C6 алкил)карбамоилом, (C1-C6 алкил)карбониламино, C1-C6 алкокси, C3-C7 циклоалкилом, гидрокси(C3-C7 циклоалкилом) или (C1-C6 алкил)карбонилокси, более предпочтительно метилом, этилом, н-пропилом, изопропилом, трет-бутилом, дифторметилом, трифторметилом, фторэтилом, аминоэтилом, гидроксиметилом, гидроксиэтилом, гидроксипропилом, гидроксидиметилэтилом, гидроксиметилпропилом, гидроксиметилбутилом, гидроксиэтилбутилом, карбоксиметилом, карбамоилметилом, метилкарбамоилметилом, диметилкарбамоилметилом, ацетиламиноэтилом, метоксиэтилом, гидроксициклопропилметилом, гидроксициклопропилэтилом, гидроксициклобутилметилом или метилкарбонилоксиэтилом, более предпочтительно, метилом, этилом, н-пропилом, трет-бутилом, дифторметилом, гидроксиэтилом, гидроксиметилпропилом, гидроксиметилбутилом, гидроксиэтилбутилом, карбамоилметилом, метилкарбамоилметилом, диметилкарбамоилметилом, метоксиэтилом, гидроксициклопропилметилом, гидроксициклобутилметилом или метилкарбонилоксиэтилом, более предпочтительно, метилом, дифторметилом, гидроксиметилпропилом, гидроксиметилбутилом, гидроксициклобутилметилом, метоксиэтилом или гидроксициклобутилметилом, и более предпочтительно, метилом, дифторметилом, гидроксиметилпропилом, гидроксиэтилбутилом или гидроксициклобутилметилом.
“Замещенным или незамещенным C2-C6 алкенилом”, представленным R4, предпочтительно является незамещенный C2-C6 алкенил, более предпочтительно, винил, аллил, 1-пропенил, 2-метил-2-пропенил, изопропенил, 1-, 2- или 3-бутенил, изобутенил, 2-, 3- или 4-пенетнил, 2-метил-2-бутенил, 3-метил-2-бутенил, 5-гексенил, 1-циклопенетнил, 1-циклогексенил или 3-метил-3-бутенил, и более предпочтительно, изобутенил.
Примеры “C2-C6 алкинила” в “замещенном или незамещенном C2-C6 алкиниле”, представленном R4, включают этинил, 1- или 2-пропинил, 1-, 2- или 3-бутинил, 1-метил-2-пропинил, и подобные. “Замещенным или незамещенным C2-C6 алкинилом” предпочтительно является незамещенный C2-C6 алкинил.
“C1-C6 алкокси” в “замещенном или незамещенном C1-C6 алкокси”, представленном R4, предпочтительно является метокси, этокси, н-пропокси, изопропокси, н-бутокси, изобутокси, втор-бутокси, трет-бутокси, пентилокси или гексилокси, и более предпочтительно, метокси, этокси, н-пропокси, изопропокси, н-бутокси, изобутокси, втор-бутокси и трет-бутокси.
Заместителем в “замещенном или незамещенном C1-C6 алкокси”, представленном R4, может быть, например, заместитель из указанных выше и является, предпочтительно, гидрокси или 5-14-членный ненасыщенный углеводород, более предпочтительно, гидрокси или моноциклический 5-10-членный ненасыщенный углеводород, и более предпочтительно, гидрокси или фенил.
“Замещенным или незамещенным C1-C6 алкокси”, представленным R4, предпочтительно является C1-C6 алкокси, который может быть замещен гидрокси или 5-14-членным ненасыщенным углеводородом, более предпочтительно, C1-C6 алкокси, который может быть замещен гидрокси или моноциклическим 5-10-членным ненасыщенным углеводородом, более предпочтительно, C1-C6 алкокси, который может быть замещен гидрокси или фенилом, и более предпочтительно, метокси, гидроксипропокси или бензилокси.
“Замещенным или незамещенным C3-C7 циклоалкилом” представленным R4, предпочтительно является C3-C7 циклоалкил, который может быть замещен гидроксиалкилом, алкоксиалкилом, гидроксициклоалкилом или ненасыщенным углеводородом карбамоилом, более предпочтительно, C3-C7 циклоалкилом, который может быть замещен гидрокси(C1-C4 алкилом), (C1-C4 алкокси)(C1-C4 алкилом), гидрокси(C3-C7 циклоалкилом) или (C6-C14 ароматический углеводород)карбамоилом, более предпочтительно, C3-C7 циклоалкилом, который может быть замещен гидрокси(C1-C4 алкилом), (C1-C4 алкокси)(C1-C4 алкилом), гидрокси(C3-C7 циклоалкилом) или фенилкарбамоилом, более предпочтительно циклопропилом, гидроксиметилциклопропилом, метоксиметилциклопропилом, гидроксициклопропилциклопропилом или фенилкарбамоилциклопропилом, более предпочтительно, циклопропилом или гидроксиметилциклопропилом, и более предпочтительно, циклопропилом.
“Моно- или ди(C1-C6 алкил)амино”, представленным R4, является, предпочтительно, метиламино, этиламино, н-пропиламино, изопропиламино, н-бутиламино, изобутиламино, трет-бутиламино, н-пентиламино, изопентиламино, гексиламино, диметиламино, диэтиламино, ди(н-пропил)амино, диизопропиламино, ди(н-бутил)амино, диизобутиламино, ди(трет-бутил)амино, ди(н-пентил)амино, диизопентиламино, дигексиламино, метилэтиламино или метилизопропиламино, более предпочтительно, метиламино, этиламино, н-пропиламино, изопропиламино и н-бутиламино, изобутиламино, трет-бутиламино, диметиламино, диэтиламино, ди(н-пропил)амино, диизопропиламино, ди(н-бутил)амино, диизобутиламино, ди(трет-бутил)амино, метилэтиламино или метилизопропиламино, и более предпочтительно, диметиламино.
“Замещенным или незамещенным карбамоилом”, представленным R4, является, предпочтительно, карбамоил, который может быть замещен алкилом, более предпочтительно, карбамоил, который может быть замещен C1-C6 алкилом, и более предпочтительно, карбамоил, метилкарбамоил или диметилкарбамоил.
Примеры алкилкарбонила в “замещенном или незамещенном (C1-C6 алкил)карбониле”, представленном R4, включают прямой или разветвленный (C1-C6 алкил)карбонил, такой как метилкарбонил, этилкарбонил, н-пропилкарбонил, изопропилкарбонил, н-бутилкарбонил, изобутилкарбонил, трет-бутилкарбонил, н-пентилкарбонил, изопентилкарбонил и гексилкарбонил.
Примеры “азотсодержащей насыщенной гетероциклической группы” в “замещенной или незамещенной 4-14-членной азотсодержащей насыщенной гетероциклической группе”, представленной R4, включают морфолинил, азетидинил, пирролидинил, пиперидинил, пиперазинил и подобные.
Примеры “замещенного или незамещенного C6-C14 ароматического углеводорода”, представленного R4, включают C6-C14 ароматический углеводород, который может быть замещен метилом, таким как фенил, толуил, ксилил, нафтил, антраценил, фенантирл, флуоренил и тетрагидронафтил.
R4 предпочтительно является галогеном, гидрокси, нитро, циано, амино, карбокси, (C2-C7 ацил)амино, (C2-C7 ацил)окси, замещенным или незамещенным C1-C8 алкилом, замещенным или незамещенным C2-C6 алкенилом, замещенным или незамещенным C1-C6 алкокси, замещенным или незамещенным C3-C7 циклоалкилом, моно- или ди(C1-C6 алкил)амино, замещенным или незамещенным карбамоилом, замещенным или незамещенным C2-C6 алкинилом, замещенным или незамещенным (C1-C6 алкил)карбонилом, замещенной или незамещенной 4-14-членной азотсодержащей насыщенной гетероциклической группой или замещенным или незамещенным C6-C14 ароматическим углеводородом, более предпочтительно, галогеном, нитро, циано, карбокси, замещенным или незамещенным C1-C8 алкилом, замещенным или незамещенным C2-C6 алкенилом, замещенным или незамещенным C1-C6 алкокси, замещенным или незамещенным C3-C7 циклоалкилом, моно- или ди(C1-C6 алкил)амино или замещенным или незамещенным карбамоилом, более предпочтительно, галогеном, нитро, циано, карбокси, C1-C6 алкилом, который может быть замещен галогеном, амино, гидрокси, карбокси, карбамоилом, (C1-C6 алкил)карбамоилом, (C1-C6 алкил)карбониламино, C1-C6 алкокси, C3-C7 циклоалкилом, гидрокси(C3-C7 циклоалкилом) или (C1-C6 алкил)карбонилокси, C2-C6 алкенилом, C1-C6 алкокси, который может быть замещен гидрокси или моноциклическим 5-10-членным ненасыщенным углеводородом, C3-C7 циклоалкилом, который может быть замещен гидрокси, гидрокси(C1-C4 алкилом), (C1-C4 алкокси)(C1-C4 алкилом), гидрокси(C3-C7 циклоалкилом) или (C6-C14 ароматический углеводород)-замещенным карбамоилом, моно- или ди(C1-C6 алкил)амино или карбамоилом, который может быть замещен C1-C6 алкилом, более предпочтительно, фтором, хлором, бромом, йодом, нитро, циано, карбокси, метилом, этилом, н-пропилом, изопропилом, трет-бутилом, дифторметилом, трифторметилом, фторэтилом, аминоэтилом, гидроксиметилом, гидроксиэтилом, гидроксипропилом, гидроксидиметилэтилом, гидроксиметилпропилом, гидроксиметилбутилом, гидроксиэтилбутилом, карбоксиметилом, карбамоилметилом, метилкарбамоилметилом, диметилкарбамоилметилом, ацетиламиноэтилом, метоксиэтилом, гидроксициклопропилметилом, гидроксициклопропилэтилом, гидроксициклобутилметилом, метилкарбонилоксиэтилом, изобутенилом, метокси, гидроксипропокси, циклопропилом, гидроксиметилциклопропилом, метоксиметилциклопропилом, гидроксициклопропилциклопропилом, фенилкарбамоилциклопропилом, бензилокси, диметиламино, карбамоилом, метилкарбамоилом или диметилкарбамоилом, более предпочтительно, фтором, хлором, бромом, нитро, циано, карбокси, метилом, этилом, н-пропилом, трет-бутилом, дифторметилом, гидроксиэтилом, гидроксиметилпропилом, гидроксиметилбутилом, гидроксиэтилбутилом, карбамоилметилом, метилкарбамоилметилом, диметилкарбамоилметилом, метоксиэтилом, гидроксициклопропилметилом, гидроксициклобутилметилом, метилкарбонилоксиэтилом, метокси, циклопропилом, гидроксиметилциклопропилом, диметиламино, карбамоилом, метилкарбамоилом или диметилкарбамоилом, более предпочтительно, фтором, хлором, бромом, циано, метилом, дифторметилом, гидроксиметилпропилом, гидроксиметилбутилом, гидроксиэтилбутилом, метоксиэтилом, гидроксициклобутилметилом или циклопропилом, и более предпочтительно, фтором, хлором, бромом, циано, метилом, дифторметилом, гидроксиметилпропилом, гидроксиэтилбутилом или гидроксициклобутилметилом.
В соединении, представленном формулой (I) в соответствии с данным изобретением, n является целым числом от 0 до 5 и предпочтительно, целым числом от 0 до 3.
В соединении, представленном формулой (I) в соответствии с данным изобретением, R5 и R6 могут быть одинаковыми или разными, и каждый является водородом или C1-C6 алкилом; R5 и R6 также вместе могут образовывать оксо или тиоксо. Если R5 и R6 являются одинаковыми или разными, и каждый представляет водород или С1-С6 алкил, по меньшей мере, один из R5 и R6 является водородом.
“C1-C6 алкил”, представленный R5 и R6, может быть прямым или разветвленным. Примеры включают метил, этил, н-пропил, изопропил, н-бутил, изобутил, трет-бутил, н-пентил, изопентил, гексил и подобные; где более предпочтительным является С1-С4 алкил, и более предпочтительным является метил.
R5 и R6 предпочтительно являются одинаковыми или разными, и каждый представляет водород или C1-C6 алкил; R5 и R6 также могут вместе образовывать оксо или тиоксо. Если R5 и R6 являются одинаковыми или разными, и каждый является водородом или C1-C6 алкилом, по меньшей мере, один из R5 и R6 является водородом; более предпочтительно, они являются водородом или могут образовывать оксо вместе.
Более предпочтительно, соединением бифенила, представленным формулой (I), является соединение или его соль, в котором, в формуле (I), кольцом A является моноциклическая, мостиковая циклическая или спироциклическая 4-14-членная азотсодержащая насыщенная гетероциклическая группа, имеющая 1-3 атома азота, 0-1 атом серы и 0-2 атома кислорода в качестве гетероатомов,
кольцом B является моноциклический или бициклический 5-14-членный ненасыщенный углеводород или моноциклическая или бициклическая 5-14-членная ненасыщенная гетероциклическая группа, которая может быть замещена оксо, которая имеет 0-4 атома азота, 0-2 атома серы и 0-3 атома кислорода в качестве гетероатомов, и которая имеет, по меньшей мере, один из азота, серы и кислорода,
R1 является нитро или циано,
R2 является галогеном,
R3 является амино, моно- или ди(C1-C6 алкил)амино, (C3-C7 циклоалкил)амино или C1-C6 алкилом,
R4 является галогеном, нитро, циано, карбокси, замещенным или незамещенным C1-C8 алкилом, замещенным или незамещенным C2-C6 алкенилом, замещенным или незамещенным C1-C6 алкокси, замещенным или незамещенным C3-C7 циклоалкилом, моно- или ди(C1-C6 алкил)амино или замещенным или незамещенным карбамоилом,
где если, по меньшей мере, один R4 является замещенным C1-C8 алкилом, замещенным C2-C6 алкенилом, замещенным C1-C6 алкокси, замещенным C3-C7 циклоалкилом или замещенным карбамоилом, заместителем является галоген, карбокси, C1-C6 алкокси, гидрокси, C1-C6 алкил, который может быть замещен гидрокси, моноциклический 5-10-членный ненасыщенный углеводород, карбамоил, который может быть замещен C1-C6 алкилом или моноциклическим, 5-10-членным ненасыщенным углеводородом, (C2-C7 ацил)окси, амино, который может быть замещен C1-C6 алкилом или C2-C7 ацилом, C3-C7 циклоалкил, который может быть замещен гидрокси, или (C1-C6 алкокси)(C1-C6 алкил), где, если присутствуют два или более заместителя, заместители могут быть одинаковыми или разными,
R5 и R6 могут быть одинаковыми или разными, и каждый представляет водород или C1-C6 алкил; R5 и R6 также могут вместе образовывать оксо или тиоксо;
если R5 и R6 являются одинаковыми или разными, и каждый является водородом или C1-C6 алкилом, по меньшей мере, один из R5 и R6 является водородом;
l является целым числом от 0 до 2,
m является целым числом от 0 до 2, и
n является целым числом от 0 до 5,
где если l равно 2, два R2 могут быть одинаковыми или разными, если m равно 2, два R3 могут быть одинаковыми или разными, и
если n равно 2-5, от двух до пяти R4 могут быть одинаковыми или разными.
Более предпочтительным является соединение, представленное формулой (I), или его соль, где
кольцом A является пирролидинил, пиперидинил, пиперазинил, азепанил, диазепанил,
2,7-диазаспиро[3.4]октанил, 3,7-диазаспиро[3.4]октанил, 2,7-диазаспиро[3.5]нонанил, 2,8-диазаспиро[3.5]нонанил, 3,7-диазаспиро[3.5]нонанил, 3,8-диазаспиро[4.4]нонанил, 3,8-диазаспиро[4.5]деканил или 9-окса-диазаспиро[3.5]нонанил,
кольцом B является моноциклический или бициклический 5-14-членный ненасыщенный углеводород или моноциклическая или бициклическая 5-14-членная ненасыщенная гетероциклическая группа, которая может быть замещена оксо, которая имеет 0-4 атома азота, 0-2 атома серы и 0-3 атома кислорода в качестве гетероатомов, и которая имеет, по меньшей мере, один из азота, серы и кислорода,
R1 является нитро или циано,
R2 является галоген,
R3 является амино, метиламино, этиламино, изопропиламино, диметиламино, циклобутиламино или метил,
R4 является галоген, нитро, циано, карбокси, замещенный или незамещенный C1-C8 алкил, замещенный или незамещенный C2-C6 алкенил, замещенный или незамещенный C1-C6 алкокси, замещенный или незамещенный C3-C7 циклоалкил, моно- или ди(C1-C6 алкил)амино или замещенный или незамещенный карбамоил,
где если, по меньшей мере, один R4 является замещенным C1-C8 алкилом, замещенным C2-C6 алкенилом, замещенным C1-C6 алкокси, замещенным C3-C7 циклоалкилом или замещенным карбамоилом, заместителем является галоген, карбокси, C1-C6 алкокси, гидрокси, C1-C6 алкил, который может быть замещен гидрокси, моноциклический 5-10-членный ненасыщенный углеводород, карбамоил, который может быть замещен C1-C6 алкилом или моноциклическим 5-10-членным ненасыщенным углеводородом, C2-C7 ацил, амино, который может быть замещен C1-C6 алкилом или C2-C7 ацилом, C3-C7 циклоалкил, который может быть замещен гидрокси или (C1-C6 алкокси)(C1-C6 алкилом),
где, если присутствуют, два или более заместителя, заместители могут быть одинаковыми или разными,
R5 и R6 могут быть одинаковыми или разными, и каждый представляет водород или C1-C6 алкил; R5 и R6 также могут вместе образовывать оксо или тиоксо;
если R5 и R6 являются одинаковыми или разными, и каждый является водородом или C1-C6 алкилом, по меньшей мере, один из R5 и R6 является водородом;
l является целым числом от 0 до 2,
m является целым числом от 0 до 2, и
n является целым числом от 0 до 5,
где если l равно 2, два R2 могут быть одинаковыми или разными,
если m равно 2, два R3 могут быть одинаковыми или разными, и
если n равно 2-5, от двух до пяти R4 могут быть одинаковыми или разными.
Более предпочтительным является соединение, представленное формулой (I), или его соль, где
кольцом A является пирролидинил, пиперидинил, пиперазинил, азепанил и диазепанил,
2,7-диазаспиро[3.4]октанил, 3,7-диазаспиро[3.4]октанил, 2,7-диазаспиро[3.5]нонанил, 2,8-диазаспиро[3.5]нонанил, 3,7-диазаспиро[3.5]нонанил, 3,8-диазаспиро[4.4]нонанил, 3,8-диазаспиро[4.5]деканил или 9-окса-диазаспиро[3.5]нонанил,
кольцом B является моноциклический или бициклический 5-14-членный ненасыщенный углеводород или моноциклический или бициклический 5-14-членная ненасыщенная гетероциклическая группа, которая может быть замещена оксо, которая имеет 0-4 атома азота, 0-2 атома серы и 0-3 атома кислорода в качестве гетероатомов, и которая имеет, по меньшей мере, один из азота, серы и кислорода,
R1 является нитро или циано,
R2 является галоген,
R3 является амино, метиламино, этиламино, изопропиламино, диметиламино, циклобутиламино или метил,
R4 является галоген, нитро, циано, карбокси, C1-C8 алкил, который может быть замещен галогеном, амино, гидрокси, карбокси, карбамоил, (C1-C6 алкил)карбамоил, (C1-C6 алкил)карбониламино, C1-C6 алкокси, (C1-C6 алкил)карбонил, C3-C7 циклоалкил, гидрокси(C3-C7 циклоалкил) или (C1-C6 алкил)карбонилокси, C2-C6 алкенил, C1-C6 алкокси, который может быть замещен гидрокси или моноциклическим 5-10-членным ненасыщенным углеводородом, C3-C7 циклоалкил, который может быть замещен гидрокси, гидрокси(C1-C4 алкил), (C1-C4 алкокси)(C1-C4 алкил), гидрокси(C3-C7 циклоалкил) или (C6-C14 ароматический углеводород)-замещенный карбамоил, моно- или ди(C1-C6 алкил)амино или карбамоил, который может быть замещен C1-C6 алкилом,
R5 и R6 могут быть одинаковыми или разными, и каждый представляет водород или C1-C6 алкил; R5 и R6 также могут вместе образовывать оксо или тиоксо;
если R5 и R6 являются одинаковыми или разными, и каждый является водородом или C1-C6 алкилом, по меньшей мере, один из R5 и R6 является водородом;
l является целым числом от 0 до 2,
m является целым числом от 0 до 2, и
n является целым числом от 0 до 5,
где если l равно 2, два R2 могут быть одинаковыми или разными,
если m равно 2, два R3 могут быть одинаковыми или разными, и
если n равно 2-5, от двух до пяти R4 могут быть одинаковыми или разными.
Более предпочтительно, соединением формулы (I) является соединение, где
кольцом A является пирролидинил, пиперидинил, пиперазинил, азепанил, диазепанил,
2,7-диазаспиро[3.4]октанил, 3,7-диазаспиро[3.4]октанил, 2,7-диазаспиро[3.5]нонанил, 2,8-диазаспиро[3.5]нонанил, 3,7-диазаспиро[3.5]нонанил, 3,8-диазаспиро[4.4]нонанил, 3,8-диазаспиро[4.5]деканил или 9-окса-диазаспиро[3.5]нонанил,
кольцом B является фенил, нафтил, пиридил, пиразолопиридил, пиразолопиримидинил, индолил, индолинил, 2-оксоиндолинил, индазолил, бензоимидазолил, бензоизоксазолил, бензотиазолил, бензотриазолил, имидазопиридинил, хинолинил, изохинолинил, хиноксалинил, хиназолинил, фталазинил, 2-оксо-2,3-дигидробензо[d]оксазолил, 1,3-дигидроизобензофуранил, дигидробензооксазинил, бензодиоксолил, дигидробензодиоксинил или 2-оксо-2,3-дигидробензо[d]тиазолил,
R1 является нитро или циано,
R2 является фтор, и он присутствует в положении орто относительно R1 в фениле,
R3 является амино, метиламино, этиламино, изопропиламино, диметиламино, циклобутиламино или метил (где, если присутствуют, два или более R3, R3 могут быть одинаковыми или разными),
R4 является фтор, хлор, бром, йод, нитро, циано, карбокси, метил, этил, н-пропил, изопропил, трет-бутил, дифторметил, трифторметил, фторэтил, аминоэтил, гидроксиметил, гидроксиэтил, гидроксипропил, гидроксидиметилэтил, гидроксиметилпропил, гидроксиметилбутил, гидроксиэтилбутил, карбоксиметил, карбамоилметил, метилкарбамоилметил, диметилкарбамоилметил, ацетиламиноэтил, метоксиэтил, гидроксициклопропилметил, гидроксициклопропилэтил, гидроксициклобутилметил, метилкарбонилоксиэтил, изобутенил, метокси, гидроксипропокси, циклопропил, гидроксиметилциклопропил, метоксиметилциклопропил, гидроксициклопропилциклопропил, фенилкарбамоилциклопропил, бензилокси, диметиламино, карбамоил, метилкарбамоил или диметилкарбамоил,
R5 и R6 могут быть одинаковыми или разными, и каждый представляет водород или C1-C6 алкил; R5 и R6 также могут вместе образовывать оксо или тиоксо;
если R5 и R6 являются одинаковыми или разными, и каждый является водородом или C1-C6 алкилом, по меньшей мере, один из R5 и R6 является водородом;
l является целым числом от 0 до 2,
m является целым числом от 0 до 2, и
n является целым числом от 0 до 3,
где, если m равно 2, два R3 могут быть одинаковыми или разными, и
если n равно 2-3, от двух до трех R4 могут быть одинаковыми или разными,
или его соль.
Более предпочтительным является соединение, представленное формулой (I), где
кольцом A является пирролидинил, пиперидинил, азепанил, диазепанил,
2,7-диазаспиро[3.4]октанил, 3,7-диазаспиро[3.4]октанил, 2,7-диазаспиро[3.5]нонанил, 2,8-диазаспиро[3.5]нонанил или 9-окса-диазаспиро[3.5]нонанил,
кольцом B является фенил, нафтил, пиридил, пиразолопиридил, индолил, индолинил, индазолил, бензоимидазолил, бензоизоксазолил, бензотриазолил, хинолинил, 2-оксо-2,3-дигидробензо[d]оксазолил, 1,3-дигидроизобензофуранил, дигидробензооксазинил или 2-оксо-2,3-дигидробензо[d]тиазолил,
R1 является циано,
R2 является фтор, и он присутствует в положении орто относительно R1 в фениле,
R3 является амино, метиламино, этиламино, изопропиламино, диметиламино, циклобутиламино или метил (где, если присутствуют два или более R3, R3 могут быть одинаковыми или разными),
R4 является фтор, хлор, бром, нитро, циано, карбокси, метил, этил, н-пропил, трет-бутил, дифторметил, гидроксиэтил, гидроксиметилпропил, гидроксиметилбутил, гидроксиэтилбутил, карбамоилметил, метилкарбамоилметил, диметилкарбамоилметил, метоксиэтил, гидроксициклопропилметил, гидроксициклобутилметил, метилкарбонилоксиэтил, метокси, циклопропил, гидроксиметилциклопропил, диметиламино, карбамоил, метилкарбамоил или диметилкарбамоил,
R5 и R6 могут быть одинаковыми или разными, и каждый представляет водород или C1-C6 алкил; R5 и R6 также могут вместе образовывать оксо или тиоксо;
если R5 и R6 являются одинаковыми или разными, и каждый является водородом или C1-C6 алкилом, по меньшей мере, один из R5 и R6 является водородом;
l является целым числом от 0 до 2,
m является целым числом от 0 до 2, и
n является целым числом от 0 до 3,
где если m равно 2, два R3 могут быть одинаковыми или разными, и
если n равно 2-3, от двух до трех R4 могут быть одинаковыми или разными,
или его соль.
Более предпочтительным является соединение, представленное формулой (I), или его соль, где
кольцом A является пирролидинил,
или 2,8-диазаспиро[3.5]нонанил,
кольцом B является фенил, индолил, индазолил, бензоизоксазолил или бензотриазолил,
R1 является циано,
R2 является фтор, и он присутствует в положении орто относительно R1 в фениле,
R3 является амино или метил (где, если присутствуют два или более R3, R3 могут быть одинаковыми или разными),
R4 является фтор, хлор, бром, циано, метил, дифторметил, гидроксиметилпропил, гидроксиметилбутил, гидроксиэтилбутил, метоксиэтил, гидроксициклобутилметил или циклопропил,
R5 и R6 каждый является водородом; R5 и R6 в другом случае могут образовывать оксо вместе;
l является целым числом от 0 до 2,
m является целым числом от 0 до 2, и
n является целым числом от 0 до 3,
где если m равно 2, два R3 могут быть одинаковыми или разными, и если n равно 2-3, от двух до трех R4 могут быть одинаковыми или разными.
Более предпочтительным является соединение, представленное формулой (I), или его соль, где кольцом A является пирролидинил,
кольцом B является фенил, индолил, индазолил, бензоизоксазолил или бензотриазолил,
R1 является циано,
R2 является фтор, и присутствует в положении орто относительно R1 в фениле,
R3 является амино (где, если присутствуют два или более R3, R3s могут быть одинаковыми или разными),
R4 является фтор, хлор, бром, циано, метил, дифторметил, гидроксиметилпропил, гидроксиэтилбутил или гидроксициклобутилметил,
R5 и R6 каждый является водородом; R5 и R6 в другом случае могут образовывать оксо вместе;
l является целым числом от 0 до 2,
m является целым числом от 0 до 2, и
n является целым числом от 0 до 3,
где если m равно 2, два R3 могут быть одинаковыми или разными, и если n равно 2-3, от двух до трех R4 могут быть одинаковыми или разными.
Более предпочтительно, соединением формулы (I) является соединение, где
кольцом A является пирролидинил,
кольцом B является фенил, индазолил или бензотриазолил,
R1 является циано,
R2 является фтор, и присутствует в положении орто относительно R1 в фениле,
R3 является амино (где, если присутствуют два или более R3, R3s могут быть одинаковыми или разными),
R4 является фтор, хлор, бром, циано, метил, дифторметил, гидроксиметилпропил, гидроксиэтилбутил или гидроксициклобутилметил,
R5 и R6 могут являться водородом или образовывать оксо вместе;
l является целым числом от 0 до 2,
m является целым числом от 0 до 2, и
n является целым числом от 0 до 3,
где если m равно 2, два R3 могут быть одинаковыми или разными,
если n равно 2-3, от двух до трех R4 могут быть одинаковыми или разными,
или его соль.
В одном варианте данного изобретения соединением бифенила, представленным формулой (I), предпочтительно является соединение, в котором, в формуле (I), кольцом A является моноциклическая или мостиковая циклическая 4-8-членная азотсодержащая насыщенная гетероциклическая группа, имеющая 1-3 атома азота в качестве гетероатомов;
кольцом B является моноциклическая 5-8-членный ненасыщенный углеводород или бициклическая 8-14-членная ненасыщенная гетероциклическая группа, имеющая 1-4 атома азота в качестве гетероатомов;
R1 является циано,
R2 является галогеном;
R3 является амино;
R4 является галогеном или C1-C8 алкилом, который может быть замещен гидрокси; если присутствуют два или более заместителей, заместители могут быть одинаковыми или разными;
R5 и R6 могут являться водородом или вместе образовывать оксо;
l является целым числом от 0 до 2,
m является целым числом от 0 до 2, и
n является целым числом от 0 до 3,
если l равно 2, два R2 могут быть одинаковыми или разными;
если m равно 2, два R3 могут быть одинаковыми или разными,
если n равно 2-3, от двух до трех R4 могут быть одинаковыми или разными,
или его соль.
Более предпочтительно, соединением формулы (I) является соединение, где:
кольцом A является пирролидинил,
кольцом B является фенил, индазолил или бензотриазолил,
R1 является циано,
R2 является галогеном,
R3 является амино,
R4 является галогеном или C1-C8 алкилом, который может быть замещен гидрокси; если присутствуют два или более заместителей, заместители могут быть одинаковыми или разными;
R5 и R6 могут являться водородом или образовывать оксо вместе;
l является целым числом от 0 до 2,
m является целым числом от 0 до 2,
n является целым числом от 0 до 3,
если l равно 2, два R2 могут быть одинаковыми или разными;
если m равно 2, два R3 могут быть одинаковыми или разными,
если n равно 2-3, от двух до трех R4 могут быть одинаковыми или разными,
или его соль.
Более предпочтительно, соединением формулы (I) является соединение, где:
кольцом A является пирролидинил,
кольцом B является фенил, индазолил или бензотриазолил,
R1 является циано,
R2 является фтор,
R3 является амино,
R4 является фтором, бромом или гидрокси(C1-C8 алкилом); если присутствуют два или более заместителей, заместители могут быть одинаковыми или разными;
R5 и R6 могут являться водородом или образовывать оксо вместе;
l является целым числом от 0 до 2,
m является целым числом от 0 до 1,
n является целым числом от 0 до 3,
если l равно 2, два R2 могут быть одинаковыми или разными;
если n равно 2-3, от двух до трех R4 могут быть одинаковыми или разными,
или его соль.
Более предпочтительно, соединением формулы (I) является соединение, где
кольцом A является пирролидинил,
кольцом B является фенил, индазолил или бензотриазолил,
R1 является циано,
R2 является фтор,
R3 является амино,
R4 является фтором, бромом или гидроксиметилпропилом или гидроксиэтилбутилом; если присутствуют два или более заместителей, заместители могут быть одинаковыми или разными;
R5 и R6 могут являться водородом или образовывать оксо вместе;
l является целым числом от 0 до 2,
m является целым числом от 0 до 1,
n является целым числом от 0 до 3,
если l равно 2, два R2 могут быть одинаковыми или разными; и
если n равно 2-3, от двух до трех R4 могут быть одинаковыми или разными,
или его соль.
Конкретные примеры соединений бифенила, представленных формулой (I), включают, но не ограничены ими, примеры соединений 1-295, полученные в примерах ниже.
Предпочтительные примеры соединений бифенила, представленных формулой (I), включают:
4-[5-[(3S)-3-аминопирролидин-1-карбонил]-2-[2-фтор-4-(2-гидрокси-2-метилпропил)фенил]фенил]-2-фторбензонитрил;
4-[5-[(3-эндо)-3-амино-8-азабицикло[3.2.1]октан-8-карбонил]-2-[2-фтор-4-(2-гидрокси-2-метилпропил)фенил]фенил]-2-фторбензонитрил;
5'-((3-эндо)-3-амино-8-азабицикло[3.2.1]октан-8-карбонил)-2'-(6,7-дифтор-1-(2-гидрокси-2-метилпропил)-1H-бензо[d][1,2,3]триазол-5-ил)-3-фтор-[1,1'-бифенил]-4-карбонитрил;
5'-((1S,2S,4R)-рел-2-амино-7-азабицикло[2.2.1]гептан-7-карбонил)-2'',3-дифтор-4''-(2-гидрокси-2-метилпропил)-[1,1':2',1''-терфенил]-4-карбонитрил-изомер-B;
5'-((1S,2S,4R)-рел-2-амино-7-азабицикло[2.2.1]гептан-7-карбонил)-3-фтор-2'-(6-фтор-1-(2-гидрокси-2-метилпропил)-1H-индазол-5-ил)-[1,1'-бифенил]-4-карбонитрил-изомер-B;
5'-((1S,2S,4R)-рел-2-амино-7-азабицикло[2.2.1]гептан-7-карбонил)-2'-(6,7-дифтор-1-(2-гидрокси-2-метилпропил)-1H-бензо[d][1,2,3]триазол-5-ил)-3-фтор-[1,1'-бифенил]-4-карбонитрил-изомер-B;
5'-((1S,2S,4R)-рел-2-амино-7-азабицикло[2.2.1]гептан-7-карбонил)-2'-(1-(2-этил-2-гидроксибутил)-6,7-дифтор-1H-бензо[d][1,2,3]триазол-5-ил)-3-фтор-[1,1'-бифенил]-4-карбонитрил-изомер-X;
5'-((1S,2S,4R)-рел-2-амино-7-азабицикло[2.2.1]гептан-7-карбонил)-2'-(7-бром-6-фтор-1-(2-гидрокси-2-метилпропил)-1H-бензо[d][1,2,3]триазол-5-ил)-3-фтор-[1,1'-бифенил]-4-карбонитрил-изомер-X; и
5'-(((1S,2S,4R)-рел-2-амино-7-азабицикло[2.2.1]гептан-7-ил)метил)-2'-(6,7-дифтор-1-(2-гидрокси-2-метилпропил)-1H-бензо[d][1,2,3]триазол-5-ил)-3-фтор-[1,1'-бифенил]-4-карбонитрил-изомер-X.
Далее описаны способы получения соединений бифенила, представленных формулой (I).
Соединение бифенила, представленное формулой (I) в соответствии с данным изобретением может быть получено, например, способами получения, представленными ниже, или способами, описанными в примерах. Однако способы получения соединения бифенила, представленного формулой (I), не ограничены этими примерами реакций.
На стадиях 1 -9, в формулах, L1, L2 и L3 каждый отдельно является уходящей группой, NH2 или OH; W является гидрокси, C1-C6 алкокси, или
,
Q1 является L1 или
,
Q2 является L2 или
,
и Х является атомом кислорода или атомом серы, и E1 является водородом или замещенным или незамещенным C1-C6 алкилом, где если E1 является замещенным или незамещенным C1-C6 алкилом, E1, вместе с BOO, может образовывать кольцо. Кольцо A, кольцо B, R1, R2, R3, R4, R5, R6, l, m и n такие, как определены выше.
Кроме того, R5a является С1-С6-алкилом.
Стадия 1: Реакция Сузуки
На этой стадии представлен способ получения соединения, представленного формулой (IV), реакцией Сузуки с применением соединения, представленного формулой (II).
Эту стадию проводят согласно общеизвестному способу (например, способу, описанному в Chemical Reviews, Vol. 95, p. 2457, 1995). Защита заместителя, удаление или превращение защитной группы и превращение уходящих групп L1, L2 и L3 проводят подходящим образом.
Примеры уходящих групп, представленных L1, L2 и L3, включают галоген, такой как хлор, бром и йод; органические сульфонилоксигруппы, такие как трифторметилсульфонилокси и п-толилсульфонилокси; и подобные.
Количество применяемой ароматической бороновой кислоты или сложного эфира ароматической бороновой кислоты (III) может быть от 0,5 до 10 молей и, предпочтительно, от 0,8 до 3 молей на моль соединения, представленного формулой (II).
Примеры катализаторов на основе переходных металлов включают палладиевые катализаторы, такие как ацетат палладия, тетракис(трифенилфосфин)палладий, дихлорид 1,1'-бис(дифенилфосфино)ферроцен-палладия(II), бис(дибензилиденацетон)дипалладий(0) и трис(дибензилиденацетон)дипалладий(0); никелевые катализаторы, такие как хлорид никеля; и подобные.
При необходимости может быть добавлен лиганд. Примеры лигандов включают трифенилфосфин, трициклогексилфосфин, (дифенилфосфино)ферроцен, 2-дициклогексилфосфино-2',4',6'-триизопропилбифенил, Silica-SMAP, и подобные. Количество катализатора на основе переходного металла варьируется в зависимости от типа катализатора. Количество катализатора на основе переходного металла обычно составляет от 0,0001 до 1 моля и, предпочтительно, от 0,001 до 0,5 молей на моль соединения, представленного формулой (II). Количество лиганда обычно составляет от 0,0001 до 4 молей и, предпочтительно, от 0,01 до 2 молей на моль соединения, представленного формулой (II).
Примеры оснований включают органические амины, такие как триэтиламин; соли щелочных металлов, такие как карбонат натрия, карбонат калия, карбонат цезия, фосфат натрия, трикалийфосфат, гидроксид натрия и гидроксид калия; алкоксиды щелочных металлов, такие как метоксид натрия, этоксид натрия, трет-бутоксид натрия и трет-бутоксид калия; и подобные. Количество основания обычно составляет от 0,1 до 10 молей и, предпочтительно, от 1 до 5 молей на моль соединения, представленного формулой (II).
Растворитель не ограничен, пока он не оказывает негативного действия на реакцию. Примеры включают толуол, ацетонитрил, 1,2-диметоксиэтан, тетрагидрофуран, 1,4-диоксан, этанол, N,N-диметилформамид, воду, смешанные растворители, и подобные. Время реакции составляет от 0,1 до 7 дней и, предпочтительно, от 0,5 до 24 часов. Температура реакции составляет от 0°C до температуры кипения растворителя и, предпочтительно, от 20°C до 160°C.
Полученное соединение, представленное формулой (IV), может быть обработано на следующей стадии после или без выделения и очистки известными методами выделения и очистки, такими как концентрация, вакуумная концентрация, кристаллизация, экстракция растворителя, повторное осаждение и хроматография.
Также возможно сначала проводить реакцию для превращения L2 в 
взаимодействием соединения, представленного формулой (V) или (VI) с соединением, представленным формулой (II), как на стадии 2, описанной ниже.
Стадия 2: реакция Сузуки
На этой стадии представлен способ получения соединения, представленного формулой (I') реакцией Сузуки с применением соединения, представленного формулой (IV).
Эта стадия может проводиться как стадия 1. Если L2 (если сначала проводят реакцию превращения L2 в , тогда L1) является производным бороновой кислоты или сложного эфира бороновой кислоты, соединение (VI) применяют для реакции.
L3 в (VI) является таким же, как L1 и L2 на стадии 1, и количество (VI) обычно составляет от 1 до 10 молей и, предпочтительно, от 1 до 5 молей на моль соединения, представленного формулой (IV).
Стадия 3: реакция эстерификации бороновой кислоты
На этой стадии представлен способ получения соединения, представленного формулой (IX), в котором L2 превращают в сложный эфир бороновой кислоты реакцией эстерификации бороновой кислоты с применением соединения, представленного формулой (IV) и соединения диборана (VIII) в присутствии катализатора на основе переходного металла и основания, необязательно с применением лиганда.
Количество соединения диборана (VIII) составляет от 1 до 10 молей и, предпочтительно, от 1 до 5 молей на моль соединения, представленного формулой (IV).
Катализатор на основе переходного металла может быть таким же, как на стадии 1.
В качестве основания может применяться ацетат калия, ацетат натрия и подобные, в дополнение к тем, которые указаны на стадии 1.
Лиганд может быть таким же, как на стадии 1, предпочтителен Silica-SMAP.
Растворитель может быть такой же, как на стадии 1.
Температура реакции обычно составляет от 0 до 200°C и, предпочтительно, от 50 до 160°C. Время реакции обычно составляет от 5 минут до 3 дней, предпочтительно, от 5 минут до 10 часов.
Перед проведением стадии 3 возможно сначала ввести в соединение, представленное формулой (II); затем реакция эстерификации бороновой кислоты относительно L1 может быть проведена как на стадии 3.
Стадия 4: реакция амидирования
На этой стадии представлен способ получения соединения, представленного формулой (XI), через реакцию амидирования с применением соединения карбоновой кислоты, представленного формулой (VII), соединения амина, представленного формулой (X) и конденсирующего агента.
Количество соединения амина (X) составляет от 0,5 до 10 молей и, предпочтительно, от 0,8 до 5 молей на моль соединения, представленного формулой (VII).
Примеры конденсирующих агентов включают соли бензотриазол-1-илокситрисдиметиламинофосфония, хлорид 4-(4,6-диметокси-1,3,5-триазин-2-ил)-4-метилморфолиния, комбинацию 1-этил-3-(3-диметиламинопропил)карбодиимида и 1-гидроксибензотриазола, гексафторфосфат O-(7-азабензотриазол-1-ил)-N,N,N',N'-тетраметилурония, и подобные. Количество обычно составляет от 1 до 100 молей и, предпочтительно, от 1 до 5 молей на моль соединения, представленного формулой (VII).
Основание обычно добавляют во время указанной выше реакции. Примеры оснований включают органические основания, такие как триэтиламин, диизопропилэтиламин и пиридин; и неорганические основания, такие как карбонат калия. Количество обычно составляет от 1 до 100 молей, предпочтительно, от 1 до 10 молей на моль соединения, представленного формулой (VII).
Растворитель особенно не ограничен, и может применяться растворитель, который не оказывает негативного действия на реакцию. Примеры растворителя включают толуол, хлороформ, тетрагидрофуран, N, N-диметилформамид, диметилацетамид, N-метилпирролидин-2-он, их смеси, и подобные.
Температура реакции обычно составляет от -78 до 200°C и, предпочтительно, от 0 до 50°C. Время реакции обычно составляет от 5 до 3 дней, предпочтительно, от 5 минут до 10 часов.
Полученное соединение, представленное формулой (XI), может быть обработано на следующей стадии после или без выделения или очистки известными способами выделения и очистки, такими как концентрация, вакуумная концентрация, кристаллизация, экстракция растворителя, повторное осаждение и хроматография.
Стадия 5: реакция тионирования
На этой стадии представлен способ получения соединения тиоамида, представленного формулой (XII), реакцией в которой применяют соединение, представленное формулой (XI), и тионирующий агент.
Примеры тионирующих реагентов включают реагент Ловессона и подобные. Количество этого реагента может составлять от 1 до 10 молей и, предпочтительно, от 1 до 5 молей на моль соединения, представленного формулой (XI).
Растворитель может быть такой же, как на стадии 1.
Температура реакции обычно составляет от 0 до 200°C и, предпочтительно, от 0 до 100°C. Время реакции обычно составляет от 5 минут до 3 дней и, предпочтительно, от 5 минут до 10 часов.
Полученное таким образом соединение, представленное формулой (XII), может быть обработано на следующей стадии после или без выделения или очистки известными способами выделения и очистки, такими как концентрация, вакуумная концентрация, кристаллизация, экстракция растворителя, повторное осаждение и хроматография.
Стадия 6: Реакция восстановления до первичного спирта
На этой стадии представлен способ получения соединения первичного спирта (XIII) реакцией с применением соединения карбоновой кислоты, представленного формулой (VII), и восстанавливающего агента. Примеры восстанавливающих агентов включают боран, алюмогидрид лития и подобные. Кроме того, боргидрид натрия, боргидрид лития подобные также представлены после образования активного сложного эфира в системе. Примеры активных агентов эстерификации включают WSCHCl и подобные, применяемые вместе с ГАТУ и ГОБт. Количество добавляемого восстанавливающего агента обычно составляет от 1 до 10 моль, и предпочтительно, от 1 до 5 моль на моль соединения, представленного формулой (VII). Количество добавляемого активного агента эстерификации обычно составляет от 1 до 10 моль, и, предпочтительно, от 1 до 5 моль на моль соединения, представленного формулой (VII). Растворитель может быть таким же, как на стадии 1. Температура реакции обычно составляет 0-200°C, и, предпочтительно, 0-100°C. Время реакции обычно составляет от 5 минут до 3 дней, предпочтительно, от 5 минут до 10 часов.
Полученное соединение, представленное формулой (XIII), может быть обработано на следующей стадии после или без выделения или очистки известными способами выделения и очистки, такими как концентрация, вакуумная концентрация, кристаллизация, экстракция растворителя, повторное осаждение и хроматография.
Стадия 7: Реакция алкилирования
Эта стадия представляет способ получения соединения вторичного спирта (XV) через реакцию, в которой применяют соединение альдегида, представленное формулой (XIV), и алкилметаллический реагент.
Примеры алкилметаллический реагентов включают алкиллитий, алкилмагний и подобные. Количество добавленного алкилметаллического реагента обычно составляет 1-10 моль, и предпочтительно, 1-5 моль на моль соединения, представленного формулой (XIV). Растворитель может быть такой же, как на стадии 5. Температура реакции обычно составляет -78-200°C, и предпочтительно, -78-0°C. Время реакции обычно составляет от 5 минут до 3 дней, предпочтительно, от 5 минут до 10 часов.
Полученное соединение, представленное формулой (XV), может быть обработано на следующей стадии после или без выделения или очистки известными способами выделения и очистки, такими как концентрация, вакуумная концентрация, кристаллизация, экстракция растворителя, повторное осаждение и хроматография.
Стадия 8: Реакция окисления до альдегида или кетона
Эта стадия представляет способ получения соединения альдегида или кетона, представленное формулой (XVII), с применением соединения спирта, представленного формулой (XVI), и окислителя.
Примеры окислителей включают диоксид марганца, перрутенат тетрапропиламмония, комплекс триоксида серы с пиридином, периодинан Десса-Мартина, хлорхромат пиридиния и подобные. Количество добавляемого оксиданта обычно составляет 1-10 моль, и предпочтительно, 1-5 моль на моль соединения, представленного формулой (XVI). Растворитель может быть такой же, как на стадии 5. Температура реакции обычно составляет -78-200°C, и предпочтительно, 0-100°C. Время реакции обычно составляет от 5 минут до 3 дней, предпочтительно, от 5 минут до 10 часов. Полученное соединение, представленное формулой (XVII), может быть обработано на следующей стадии после или без выделения или очистки известными способами выделения и очистки, такими как концентрация, вакуумная концентрация, кристаллизация, экстракция растворителя, повторное осаждение и хроматография.
Стадия 9: Реакция восстановительного аминирования
Эта стадия представляет способ получения соединения, представленного формулой (XVIII) с применением соединения амина, представленного формулой (X), и восстанавливающего агента с соединением альдегида или кетона, представленного формулой (XVII).
Примеры восстанавливающих агентов включают триацетоксиборгидрид натрия, цианоборгидрид натрия, боргидрид натрия и подобные. Количество добавляемого восстанавливающего агента обычно составляет 1-10 моль и, предпочтительно, 1-5 моль на моль соединения, представленного формулой (XVII).
Растворитель особенно не ограничен, и может применяться растворитель, который не оказывает негативного действия на реакцию. Примеры растворителя включают толуол, хлороформ, тетрагидрофуран, дихлорметан, метанол, этанол и подобные; а также смешанный растворитель.
Полученное соединение, представленное формулой (XVIII), может быть обработано на следующей стадии после или без выделения или очистки известными способами выделения и очистки, такими как концентрация, вакуумная концентрация, кристаллизация, экстракция растворителя, повторное осаждение и хроматография.
Превращение заместителей W и X и уходящих групп L1, L2 и L3, может быть проведено подходящим образом.
На любой из стадий 1-9, может подходящим образом проводиться защита заместителя и удаление или превращение защитной группы. Например, для функциональных групп, таких как амино, имино, гидрокси, карбокси, карбонильные и амидные группы, а также функциональных групп, имеющих активный протон, таких как индол, могут применяться защитные реагенты, или защитные группы могут быть введены в такие функциональные группы обычными способами; затем защитная группа может быть удалена на подходящей стадии в каждом способе получения.
Защитная группа аминогруппы или защитная группа иминогруппы особенно не ограничены, пока они обладают защитным действием. Примеры таких защитных групп включают аралкильные группы, такие как бензил, п-метоксибензил, 3,4-диметоксибензил, о-нитробензил, п-нитробензил, бензгидрид, тритил и кумил; низшие алканоильные группы, такие как формил, ацетил, пропионил, бутурил, пивалоил, трифторацетил и трихлорацетил; бензоил; арилалканоильные группы, такие как фенилацетил и феноксиацетил; низшие алкоксикарбонильные группы, такие как метоксикарбонил, этоксикарбонил, пропилоксикарбонил и трет-бутоксикарбонил; аралкилоксикарбонильные группы, такие как п-нитробензилоксикарбонил и фенэтилоксикарбонил; низшие алкилсилильные группы, такие как триметилсилил и трет-бутилдиметилсилил; тетрагидропиранил; триметилсилилэтоксиметил; низшие алкилсульфонильные группы, такие как метилсульфонил, этилсульфонил и трет-бутилсульфонил; низшие алкилсульфинильные группы, такие как трет-бутилсульфинил; арилсульфонильные группы, такие как бензолсульфонил и толуолсульфонил; и имидогруппы, такие как фталимидо. В частности, трифторацетил, ацетил, трет-бутоксикарбонил, бензилоксикарбонил, триметилсилилэтоксиметил, кумил и подобные предпочтительны.
Защитная группа гидроксигруппы особенно не ограничена, пока она обладает защитным действием. Примеры таких защитных групп включают низшие алкильные группы, такие как метил, этил, пропил, изопропил и трет-бутил; низшие алкилсилильные группы, такие как триметилсилил и трет-бутилдиметилсилил; низшие алкоксиметильные группы, такие как метоксиметил и 2-метоксиэтоксиметил; тетрагидропиранил; триметилсилилэтоксиметил; аралкильные группы, такие как бензил, п-метоксибензил, 2,3-диметоксибензил, о-нитробензил, п-нитробензил и тритил; и ацильные группы, такие как формил, ацетил и трифторацетил. В частности, метил, метоксиметил, тетрагидропиранил, триметилсилилэтоксиметил, трет-бутилдиметилсилил и ацетил предпочтительны.
Защитная группа карбоксигруппы особенно не ограничена, пока она обладает защитным действием. Примеры таких защитных групп включают низшие алкильные группы, такие как метил, этил, пропил, изопропил и трет-бутил; низшие галоалкильные группы, такие как 2,2,2-трихлорэтил; низшие алкенильные группы, такие как аллил; триметилсилилэтоксиметил; и аралкильные группы, такие как бензил, п-метоксибензил, п-нитробензил, бензгидрил и тритил. В частности, метил, этил, трет-бутил, аллил, бензил, п-метоксибензил, триметилсилилэтоксиметил, и подобные предпочтительны.
Защитная группа карбонильной группы особенно не ограничена, пока она обладает защитным действием. Примеры таких защитных групп включают этиленкеталь, триметиленкеталь, диметилкеталь, этиленацеталь, триметиленацеталь, диметилацеталь и подобные кетали и ацетали.
Защитная группа амидной группы или защитная группа функциональной группы, имеющей активный протон, такой как индол, особенно не ограничена, пока она обладает защитным действием. Примеры таких защитных групп включают низшие алкильные группы, такие как метил, этил, пропил, изопропил и трет-бутил; низшие алкилсилильные группы, такие как триметилсилил и трет-бутилдиметилсилил; низшие алкоксиметильные группы, такие как метоксиметил и 2-метоксиэтоксиметил; тетрагидропиранил; триметилсилилэтоксиметил; аралкильные группы, такие как бензил, п-метоксибензил, 2,3-диметоксибензил, о-нитробензил, п-нитробензил и тритил; и ацильные группы, такие как формил, ацетил и трифторацетил. В частности, метил, метоксиметил, тетрагидропиранил, триметилсилилэтоксиметил, трет-бутилдиметилсилил и ацетил предпочтительны.
Способ удаления таких защитных групп может варьироваться в зависимости от типа защитной группы, стабильности целевого соединения и т.д. Например, могут применяться следующие способы: сольволиз с применением кислоты или основания способом, описанным в публикации (Protective Groups in Organic Synthesis, third edition, T.W. Green, John Wiley & Sons (1999)) или подобным способом, например, способом, включающим взаимодействие с 0,01 моля или большим избытком кислоты, предпочтительно трифторуксусной кислоты, муравьиной кислоты или хлористоводородной кислоты, или от эквимолярного до большого избытка основания, предпочтительно, гидроксида калия или гидроксида кальция; химическое восстановление с применением металлгидридного комплекса и т.д.; или каталитическое восстановление с применением палладий-углеродного катализатора, катализатора на основе никеля Ренея и т.д.
Соединение бифенила, представленное формулой (I), может быть легко выделено и очищено обычными методами выделения и очистки. Примеры таких методов включают экстракцию растворителя, перекристаллизацию, препаративную высокоэффективную жидкостную хроматографию с обращенной фазой, хроматографию на колонке, препаративную тонкослойную хроматографию и подобные.
Если соединение бифенила, представленное формулой (I), имеет изомеры, такие как оптические изомеры, стереоизомеры, ротамеры и таутомеры, любые изомеры и их смеси включены в объем соединения в соответствии с данным изобретением, если не указано иначе. Например, если соединение бифенила, представленное формулой (I), имеет оптические изомеры, оптический изомер, выделенный из рацемической смеси, также включен в объем соединения в соответствии с данным изобретением, если не указано иначе. Каждый такой изомер может быть получен в виде отдельного соединения известными методами синтеза и разделения (например, концентрацией, экстрагированием растворителя и хроматографией на колонке, перекристаллизацей).
Как указано выше, если не указано иначе, соединение бифенила, представленное формулой (I), включает все энантиомеры и их смеси. Соединение бифенила, представленное формулой (I), может быть смесью R и S энантиомеров. Такой смесью может быть смесь, содержащая 90% или более, 95% или более или 99% или более R энантиомера; смесь, содержащая 90% или более, 95% или более или 99% или более S энантиомера; или подобная.
Способы хирального разделения включают, например: диастереомерный способ, заставляющий хиральный разделяющий агент действовать на соединение бифенила, представленное формулой (I), с получением соли и отделением одного из энантиомеров с помощью разницы в растворимости и т.д. полученной соли; способ избирательной кристаллизации путем добавления одного из энантиомеров в сверхнасыщенный раствор рацемата в качестве затравки для кристаллизации; и хроматографию на колонке, такую как ВЭЖХ с применением хиральной колонки. Хиральный разделяющий агент, который может применяться в диастереомерном способе, может быть подходящим образом выбран из, например, кислотных разделяющих агентов, таких как винная кислота, яблочная кислота, молочная кислота, миндальная кислота, 10-камфорсульфоновая кислота и их производные; и основных разделяющих агентов, таких как бруцин, стрихнин, хинин и подобные алкалоиды, производные аминокислоты, цинхонидин и α-метилбензиламин. Один из энантиомеров соединения бифенила, представленного формулой (I), отдельно может быть получен не только через получение соединения бифенила, представленного формулой (I), в виде смеси энантиомеров с последующим хиральным разделением, описанным выше, но также получением одного энантиомера соединения бифенила, представленного формулой (I), через хиральное разделение, описанное выше или другими способами с последующим применением его в качестве синтетического исходного сырья соединения бифенила, представленного формулой (I). Кроме того, способы получения одного из энантиомеров соединения бифенила, представленного формулой (I), или его сырья включают способ селективного получения одного из энантиомеров корректировкой условий реакции для катализатора или подобных на стадии реакции создания асимметричного атома углерода.
Соединение бифенила, представленное формулой (I), или его соль могут быть в виде кристаллов. Отдельные кристаллы и полиморфные кристаллические смеси включены в объем соединения или его соли. Такие кристаллы могут быть получены кристаллизацией способом кристаллизации, известным per se в данной области техники. Соединение бифенила, представленное формулой (I), или его соль могут быть сольватом (например, гидратом) или не сольватом. Любые такие формы включены в объем соединения бифенила, представленного формулой (I), или его соли. Соединения, помеченные как изотоп (например, 3H, 14C, 35S и 125I), также включены в объем соединения бифенила, представленного формулой (I), или его соли.
Соли соединений бифенила, представленных формулой (I), или их промежуточные соединения являются обычными солями, применяемыми в области органической химии. Соли предпочтительно являются фармацевтически приемлемыми солями. Примеры таких солей включают основно-аддитивные соли карбоксигруппы, если соединение имеет карбоксигруппу, и кислотно-аддитивные соли амино или основной гетероциклической группы, если соединение имеет амино или основную гетероциклическую группу.
Примеры основно-аддитивных солей включают соли щелочного металла, такие как натриевые соли и калиевые соли; соли щелочноземельного металла, такие как кальциевые соли и магниевые соли; аммониевые соли; и соли органического амина, такие как триметиламиновые соли, триэтиламиновые соли, дициклогексиламиновые соли, этаноламиновые соли, диэтаноламиновые соли, триэтаноламиновые соли, прокаиновые соли и N, N'-дибензилэтилендиаминовые соли.
Примеры кислотно-аддитивных солей включают соли неорганической кислоты, такие как гидрохлорид, сульфат, нитрат, фосфат и перхлорат; соли органической кислоты, такие как ацетат, формиат, малеат, фумарат, тартрат, цитрат, аскорбат и трифторацетат; и сульфонаты, такие как метансульфонат, изетионат, бензолсульфонат и п-толуолсульфонат.
Благодаря их превосходной ингибирующей активности в отношении LSD1 соединения бифенила, представленные формулой (I), или их соли применяют в качестве фармацевтического препарата для профилактики и лечения, предпочтительно, лечения, LSD1-связанных заболеваний.
В другом предпочтительном варианте данного изобретения, конкретные примеры ингибиторов LSD1 включают GSK2879552, ORY-1001, IMG-7289, 4SC-202, транилципромин, ET-1002, INCB59872, CC-90011, T-3775440, GSK690, SP-2577, паргилин, NCD38, RN-1, JBI-097, RASP-201, соединения, описанные в брошюре Международной публикации № WO2015/089192, и соединения, описанные в брошюре Международной публикации № WO2015/168466. Эти ингибиторы LSD1 коммерчески доступны, а также могут быть получены типовыми известными методами.
Ингибитором LSD1 в соответствии с данным изобретением предпочтительно является соединение бифенила, представленное формулой (I), или его соль, GSK2879552, ORY-1001, GSK690 или соединение, описанное в Международной публикации № WO2015/089192 или WO2015/168466; более предпочтительно, соединение, представленное формулой (I) или его соль, GSK2879552, ORY-1001 или GSK690; и более предпочтительно, соединение бифенила, представленное формулой (I) ниже:
где
кольцо A является моноциклической, мостиковой циклической или спироциклической 4-14-членной азотсодержащей насыщенной гетероциклической группой, имеющей 1-3 атома азота, 0-1 атом серы и 0-2 атома кислорода в качестве гетероатомов;
кольцо B является моноциклическим или бициклическим 5-14-членным ненасыщенным углеводородом или моноциклической или бициклической 5-14-членной ненасыщенной гетероциклической группой, которая может быть замещена оксо, которая имеет 0-4 атома азота, 0-2 атома серы и 0-3 атома кислорода в качестве гетероатомов, и которая имеет, по меньшей мере, один из азота, серы и кислорода;
R1 является нитро или циано,
R2 является галогеном,
R3 является амино, моно- или ди(C1-C6 алкил)амино, (C3-C7 циклоалкил)амино или C1-C6 алкилом;
R4 является галогеном, нитро, циано, карбокси, замещенным или незамещенным C1-C8 алкилом, замещенным или незамещенным C2-C6 алкенилом, замещенным или незамещенным C1-C6 алкокси, замещенным или незамещенным C3-C7 циклоалкилом, моно- или ди(C1-C6 алкил)амино или замещенным или незамещенным карбамоилом;
где если, по меньшей мере, один R4 является замещенным C1-C8 алкилом, замещенным C2-C6 алкенилом, замещенным C1-C6 алкокси, замещенным C3-C7 циклоалкилом или замещенным карбамоилом, заместителем является галоген, карбокси, C1-C6 алкокси, гидрокси, C1-C6 алкил, который может быть замещен гидрокси, моноциклический 5-10-членный ненасыщенный углеводород, карбамоил, который может быть замещен C1-C6 алкилом или моноциклическим 5-10-членным ненасыщенным углеводородом, (C2-C7 ацил)окси, амино, который может быть замещен C1-C6 алкилом или C2-C7 ацилом, C3-C7 циклоалкил, который может быть замещен гидрокси, или (C1-C6 алкокси)(C1-C6 алкил), и если присутствуют два или более заместителей, заместители могут быть одинаковыми или разными;
R5 и R6 могут быть одинаковыми или разными, и каждый является водородом или C1-C6 алкилом; R5 и R6 также вместе могут образовывать оксо или тиоксо;
если R5 и R6 являются одинаковыми или разными, и каждый является водородом или C1-C6 алкилом, по меньшей мере, один из R5 и R6 являются водородом;
l является целым числом от 0 до 2,
m является целым числом от 0 до 2, и
n является целым числом от 0 до 5,
где если l равен 2, два R2 могут быть одинаковыми или разными;
если m равно 2, два R3 могут быть одинаковыми или разными;
если n равно 2-5, от двух до пяти R4 могут быть одинаковыми или разными;
или его соль, GSK2879552, ORY-1001 или GSK690, более предпочтительно, соединение, представленное формулой (I) ниже:
где
кольцо А является пирролидинилом,
кольцо В является фенилом, индазолилом или бензотриазолилом;
R1 является циано;
R2 является фтором; и присутствует в положении орто относительно R1 в фениле;
R3 является амино (если присутствуют два или более R3, R3 могут быть одинаковыми или разными);
R4 является фтором, бромом, гидроксиметилпропилом или гидроксиэтилбутилом;
R5 и R6 могут быть одинаковыми или разными, и каждый является водородом или С1-С6 алкилом; R5 и R6 в другом случае могут образовывать оксо или тиоксо вместе;
если R5 и R6 являются одинаковыми или разными, и каждый является водородом или C1-C6 алкилом, по меньшей мере, один из R5 и R6 являются водородом;
l равно целому числу от 0 до 2;
m равно целому числу от 0 до 2;
n равно целому числу от 0 до 3;
если m равно 2, два R3 могут быть одинаковыми или разными; и
если n равно от 2 до 3, от двух до трех R4 могут быть одинаковыми или разными,
или его соль, GSK2879552, ORY-1001 или GSK690; более предпочтительно, соединением бифенила, представленным формулой (I), является одно из соединений (1)-(9) ниже или соли соединений (1)-(9).
(1) 4-[5-[(3S)-3-аминопирролидин-1-карбонил]-2-[2-фтор-4-(2-гидрокси-2-метилпропил)фенил]фенил]-2-фторбензонитрил;
(2) 4-[5-[(3-эндо)-3-амино-8-азабицикло[3.2.1]октан-8-карбонил]-2-[2-фтор-4-(2-гидрокси-2-метилпропил)фенил]фенил]-2-фторбензонитрил;
(3) 5'-((3-эндо)-3-амино-8-азабицикло[3.2.1]октан-8-карбонил)-2'-(6,7-дифтор-1-(2-гидрокси-2-метилпропил)-1H-бензо[d][1,2,3]триазол-5-ил)-3-фтор-[1,1'-бифенил]-4-карбонитрил;
(4) 5'-((1S,2S,4R)-рел-2-амино-7-азабицикло[2.2.1]гептан-7-карбонил)-2'',3-дифтор-4''-(2-гидрокси-2-метилпропил)-[1,1':2',1''-терфенил]-4-карбонитрил-изомер-B;
(5) 5'-((1S,2S,4R)-рел-2-амино-7-азабицикло[2.2.1]гептан-7-карбонил)-3-фтор-2'-(6-фтор-1-(2-гидрокси-2-метилпропил)-1H-индазол-5-ил)-[1,1'-бифенил]-4-карбонитрил-изомер-B;
(6) 5'-((1S,2S,4R)-рел-2-амино-7-азабицикло[2.2.1]гептан-7-карбонил)-2'-(6,7-дифтор-1-(2-гидрокси-2-метилпропил)-1H-бензо[d][1,2,3]триазол-5-ил)-3-фтор-[1,1'-бифенил]-4-карбонитрил-изомер-B;
(7) 5'-((1S,2S,4R)-рел-2-амино-7-азабицикло[2.2.1]гептан-7-карбонил)-2'-(1-(2-этил-2-гидроксибутил)-6,7-дифтор-1H-бензо[d][1,2,3]триазол-5-ил)-3-фтор-[1,1'-бифенил]-4-карбонитрил-изомер-X;
(8) 5'-((1S,2S,4R)-рел-2-амино-7-азабицикло[2.2.1]гептан-7-карбонил)-2'-(7-бром-6-фтор-1-(2-гидрокси-2-метилпропил)-1H-бензо[d][1,2,3]триазол-5-ил)-3-фтор-[1,1'-бифенил]-4-карбонитрил-изомер-X;
(9) 5'-(((1S,2S,4R)-рел-2-амино-7-азабицикло[2.2.1]гептан-7-ил)метил)-2'-(6,7-дифтор-1-(2-гидрокси-2-метилпропил)-1H-бензо[d][1,2,3]триазол-5-ил)-3-фтор-[1,1'-бифенил]-4-карбонитрил-изомер-X.
В одном варианте данного изобретения ингибитором LSD1 в соответствии с данным изобретением предпочтительно является соединение бифенила, представленное формулой (I).
Опухолью, на которое нацелено данное изобретение, предпочтительно является LSD1-связанная злокачественная опухоль. Если ингибитором LSD1 является соединение бифенила, представленное формулой (I) или его соль, опухолью предпочтительно является опухоль, на которую соединение бифенила или его соль оказывает противоопухолевое действие.
Примеры “LSD1-связанных злокачественных опухолей” включают злокачественные опухоли, наступление которых может быть снижено, и симптомы которых могут быть ослаблены, облегчены и/или полностью вылечены исключением, подавлением и/или ингибированием функции LSD1. Примеры таких злокачественных опухолей включают, но не ограничены ими, раки головы и шеи, рак пищевода, рак желудка, рак толстой кишки, рак прямой кишки, рак печени, рак желчного пузыря, холангиосаркому, рак желчевыводящих путей, рак поджелудочной железы, рак легких, рак груди, рак яичников, рак шейки матки, рак эндометрия, рак почек, рак мочевого пузыря, рак простаты, рак яичек, остеосаркому, саркому мягких тканей, лейкоз, миелодиспластический синдром, хроническое миелопролиферативное заболевание, злокачественную лимфому, множественную миелому, рак кожи, рак мозга, мезотелиому и подобные. Предпочтительные примеры включают рак толстой кишки, рак прямой кишки, рак груди, рак простаты, немелкоклеточный рак легких, мелкоклеточный рак легких, лейкоз, миелодиспластический синдром и подобные. Другие предпочтительные примеры включают рак легких (не мелкоклеточный рак легких, мелкоклеточный рак легких) и подобные.
В качестве противоопухолевого агента, содержащего ингибитор LSD1, ингибитор LSD1 (например, соединение бифенила или его соль) в качестве активного ингредиента смешивают с фармацевтическим носителем по необходимости, с получением одной или более подходящих лекарственных форм для целей профилактики и лечения. Примеры лекарственных форм включают пероральные препараты, инъекции, суппозитории, мази, пластыри и подобные. Для соединения бифенила или его соли предпочтительны пероральные препараты. Такие дозированные формы могут быть получены способами, известными специалистам в данной области техники.
В качестве фармацевтического носителя могут применяться разные обычные органические или неорганические носители, применяемые в качестве материалов для препаратов. Например, такие материалы могут быть смешаны в виде эксципиента, связующего агента, разрыхлителя, смазывающего агента или покрытия в твердых препаратах; или в виде растворителя, солюбилизирующего агента, суспендирующего агента, изотонизирующего агента, рН корректора, буфера или смягчающего агента в жидких препаратах. Более того, также могут применяться добавки к фармацевтическим препаратам, такие как антисептики, антиоксиданты, красители, агенты, исправляющие вкус или вкусовые добавки и стабилизаторы, при необходимости.
При получении пероральных твердых препаратов, могут быть добавлены эксципиент, связующий агент, разрыхлитель, смазывающий агент, краситель, агент, исправляющий вкус или вкусовая добавка и т.д.; и полученную смесь составляют в таблетки, таблетки в оболочке, гранулы, порошки, капсулы или подобные, обычными способами.
Примеры эксципиентов включают лактозу, сахарозу, D-маннит, глюкозу, крахмал, карбонат кальция, каолин, микрокристаллическую целлюлозу и ангидрид кремниевой кислоты. Примеры связующих агентов включают воду, этанол, 1-пропанол, 2-пропанол, простой сироп, жидкую глюкозу, жидкий α-крахмал, жидкий желатин, D-маннит, карбоксиметилцеллюлозу, гидроксипропилцеллюлозу, гидроксипропиловый крахмал, метилцеллюлозу, этилцеллюлозу, шеллак, фосфат кальция, поливинилпирролидон и подобные. Примеры разрыхляющих агентов включают сухой крахмал, альгинат натрия, порошковый агар, гидрокарбонат натрия, карбонат кальция, лаурилсульфат натрия, моноглицерид стеариновой кислоты, лактозу и подобные. Примеры смазывающих агентов включают очищенный тальк, натриевую соль стеариновой кислоты, стеарат магния, буру, полиэтиленгликоль и подобные. Примеры красителей включают оксид титана, оксид железа и подобные. Примеры исправляющих вкус или вкусовых добавок включают сахарозу, померанцевую корку, лимонную кислоту, винную кислоту и подобные.
Если получают жидкий препарат для перорального введения, исправляющий вкус агент, буфер, стабилизатор, вкусовой агент и подобные могут быть добавлены; и полученная смесь может быть составлена в пероральный жидкий препарат, сироп, эликсир и т.д. обычным способом.
В этом случае может применяться агент, исправляющий вкус или вкусовая добавка, указанные выше. Примеры буфера включают цитрат натрия и подобные и примеры стабилизатора включают трагакант, аравийскую камедь, желатин и подобные. При необходимости эти препараты для перорального введения могут быть покрыты способами, известными в данной области техники, энтеросолюбильным покрытием или другим покрытием для целей, например, устойчивости эффектов. Примеры таких покрытий включают гидроксипропилметилцеллюлозу, этилцеллюлозу, гидроксиметилцеллюлозу, гидроксипропилцеллюлозу, полиоксиэтиленгликоль и Tween 80 (зарегистрированная торговая марка).
При приготовлении инъекции, pH корректор, буфер, стабилизатор, изотонирующий агент, местный анестетик и подобные могут быть добавлены; и полученная смесь может быть составлена в подкожные, внутримышечные и внутривенные инъекции обычным способом.
Примеры применяемых pH корректоров и буферов включают цитрат натрия, ацетат натрия, фосфат натрия и подобные. Примеры применяемых стабилизаторов включают пиросульфит натрия, ЭДТК, тиогликолевую кислоту и тиомолочную кислоту и подобные. Примеры применяемых местных анестетиков включают гидрохлорид прокаина гидрохлорид лидокаина и подобные. Примеры применяемых изотонизирующих агентов включают хлорид натрия, глюкозу, D-маннит, глицерин и подобные.
Препараты одного или более других противоопухолевых агентов также включают систему доставки лекарственного средства (СДЛС) для них. Например, «пактитаксел» включает альбумин-связанный паклитаксел (например, Абраксан), мицеллы с паклитакселом (например, NK105) и подобные; и «цисплатин» включает мицеллы с цисплатином (например, NC-6004) и подобные.
Количество ингибитора LSD1 (например, соединения бифенила), добавляемое в каждую из таких дозированных единичных форм, зависит от состояния пациента, которому вводят соединение, дозированной формы и т.д. В общем, для перорального агента, инъекции и суппозитория, количество соединения бифенила предпочтительно составляет от 0,05 до 1000 мг, от 0,01 до 500 мг и от 1 до 1000 мг, соответственно, на дозированную единичную форму.
Суточная доза лекарственного средства в такой дозированной форме зависит от состояния, массы тела, возраста, пола и т.д. пациента и не может быть обобщена. Например, суточная доза ингибитора LSD1 (например, соединения бифенила) для взрослого человека (масса тела: 50 кг) может составлять обычно от 0,05 до 5000 мг и, предпочтительно, от 0,1 до 1000 мг; и, предпочтительно, вводится одной дозой или двумя или тремя разделенными дозами в сутки.
Достаточно, чтобы химиотерапия с применением противоопухолевого агента, содержащего ингибитор LSD1, включала противоопухолевый агент, содержащий ингибитор LSD1. Например, это может быть сочетанием ингибитора LSD1 и одного или более противоопухолевых агентов. Сочетание ингибитора LSD1 и других противоопухолевых агентов может быть препаратом 1 (т.е. смешанным агентом) или объединенным введением двух или более отдельных препаратов.
В данном изобретении “INSM1” включает INSM1 человека или не человекообразного млекопитающего, и, предпочтительно, человеческий INSM1. Кроме того, “INSM1” включает изоформу. Примеры последовательности генов человеческого INSM1 включают последовательность, представленную GenBank Accession Number: NM_002196. Примеры последовательности аминокислот человеческого INSM1 включают последовательно, представленную GenBank Accession Number: NP_002187. Основная последовательность и последовательность аминокислот, показанные выше, могут содержать полиморфную мутацию. Предпочтительно, чтобы эти полиморфные мутации имели функцию как у фактора транскрипции для INSM1. Полиморфной мутацией является, например, молчащая мутация, которая не вызывает изменения в аминокислотном остатке; или мутация делецией, замещением или вставкой 1 или более (например, около 1-5 или 1-3) аминокислотных остатков.
“Терапевтические эффекты” в соответствии с данным изобретением могут быть оценены эффектами сокращения опухоли, эффектами подавления рецидивов или метастазов, эффектами продления жизни и другими эффектами. Фраза “пациент с раком получает достаточный терапевтический эффект от химиотерапии с применением противоопухолевого агента, содержащего ингибитор LSD1” означает, что терапевтические эффекты у пациента с раком с высокой экспрессией INSM1 значительно превосходят терапевтические эффекты у пациентов с низкой экспрессией INSM1, со статистически значимым различием между ними. В качестве способа оценки статистической значимости может применяться известный аналитический способ, который позволяет определить присутствие или отсутствие значимости, при необходимости. Например, может применяться параметрический t-критерий Стьюдента или критерий множественного сравнения.
В данном изобретении, “образец” включает не только биологический образец (например, клетки, ткани, органы, жидкости тела (кровь, лимфу и подобные), желудочный сок, мочу), но также экстракт нуклеиновой кислоты (например, экстракты геномной ДНК, экстракты мРНК, препарат кДНК или препарат кРНК, полученные из экстрактов мРНК, и подобные) или белковый экстракт, полученный из этих биологических образцов. Кроме того, образец может быть подвергнут фиксации формалином, фиксации спиртом, замораживанию или заливке в парафин. Образец предпочтительно содержит опухолевые клетки. Способ получения биологического образца может быть подходящим образом выбран, в зависимости от типа биологического образца.
В способе прогнозирования в соответствии с данным изобретением нет конкретных ограничений в отношении того, что измеряется при измерении уровня экспрессии, при условии, что уровень экспрессии может быть количественно или полуколичественно измерен. Примеры включают уровень экспрессии мРНК, количество копий ДНК и уровень экспрессии белка. Уровень экспрессии белка является предпочтительным.
Уровень экспрессии мРНК, при выборе для измерения, может быть измерен с применением праймера или пробы, которая специфически гибридизируется с мРНК INSM1 в соответствии с обычно применяемым методом измерения уровня экспрессии мРНК, таким как нозерн-блоттинг, ОТ-ПЦР, ПЦР в режиме реального времени, ДНК-микрочип и гибридизация in situ.
Количество копий ДНК, при выборе для измерения, может быть измерено с применением пробы, которая специфически гибридизируется с ДНК INSM1 в соответствии с обычно применяемым методом измерения количества копий ДНК таким как гибридизация in situ, матричная СГГ, ДНК-микрочип и саузерн-блоттинг.
Уровень экспрессии белка, при выборе для измерения, может быть измерен с применением антитела, которое специфически распознает белок INSM1 в соответствии с обычно применяемым способом, таким как ELISA, вестерн-блоттинг и иммуногистохимическое окрашивание. Уровень экспрессии белка при иммуногистохимическом окрашивании может быть рассчитан из коэффициента окрашивания (положительная занятость клеток) и интенсивности окрашивания.
Уровень экспрессии белка при иммуногистохимическом окрашивании может быть, например, численным значением способа Н-оценки, полученным из следующей формулы расчета (Am. J. Clin. Pathol., 90 (3): 233-9 (1988)).
H-оценка=Σ (интенсивность окрашивания × положительная занятость клеток (%))
(0: нет окрашивания, 1: слабая интенсивность окрашивания, 2: средняя интенсивность окрашивания, 3: сильная интенсивность окрашивания)
Кроме способа H-оценки, могут применяться значения, полученные другими способами оценки, такими как способ Оллреда (Allred DC et al., Mod. Pathol., 11: 155-68 (1998)), в котором значения получают по следующей формуле расчета: Оценка Оллреда=оценка положительной занятости клеток+оценка интенсивности окрашивания (оценка положительной занятности клеток; 0: нет окрашивания, 1: менее 1%, 2: не менее 1% и менее 10%, 3: не менее 10% и менее 1/3, 4: не менее 1/3 и менее 2/3, 5: не менее 2/3) (интенсивность окрашивания; 0: нет окрашивания, 1: слабая интенсивность окрашивания, 2: средняя интенсивность окрашивания, 3: сильная интенсивность окрашивания); способ J-оценки (Kenbikyo, 44 (1): 30-34 (2009)) (J-оценка 0: нет окрашивания, J-оценка 1: положительная занятость клеток менее 1%, J-оценка 2: положительная занятость клеток не менее 1% и менее 10%, J-оценка 3: положительная занятость клеток не менее 10%), который проводит оценку с применением только положительной занятности клеток (%); и т.д.
При иммуногистохимическом окрашивании уровень экспрессии INSM1 может быть классифицирован на 4 оценки, состоящие из 0, 1+, 2+ и 3+, на основе коэффициента окрашивания INSM1. Например, значение верхнего предела (“менее”) и значение нижнего предела (“не менее”) каждой оценки, если образец окрашен анти-INSM1 антителом, может быть установлено на такой интервал, что коэффициент окрашивания верхнего предела оценки 0 и нижнего предела оценки 1+ составляет 1-10%, коэффициент окрашивания верхнего предела оценки 1+ и нижнего предела оценки 2+ составляет 2-50%, и коэффициент окрашивания верхнего предела оценки 2+ и нижнего предела оценки 3+ составляет 5-80%. Более предпочтительно, коэффициент окрашивания верхнего предела оценки 0 и нижнего предела оценки 1+ составляет 1-5%, коэффициент окрашивания верхнего предела оценки 1+ и нижнего предела оценки 2+ составляет 2-30%, и коэффициент окрашивания верхнего предела оценки 2+ и нижнего предела оценки 3+ составляет 10-70%. Кроме того, также возможно устанавливать “нет окрашивания” как 0, устанавливать коэффициент окрашивания верхнего предела оценки 1 и нижнего предела оценки 2+ 1-50%, и устанавливать коэффициент окрашивания верхнего предела оценки 2+ и нижнего предела оценки 3+ 5-80%. Более предпочтительно, также возможно устанавливать “нет окрашивания” как 0, устанавливать коэффициент окрашивания верхнего предела оценки 1 и нижнего предела оценки 2+ 2-30% и устанавливать коэффициент окрашивания верхнего предела оценки 2+ и нижнего предела оценки 3+ 10-70%.
Коэффициент окрашивания представляет собой, например, соотношение ядер клеток, окрашенных анти-INSM1 антителом и ядер клеток, окрашенных окрашивающим агентом для ядер клеток (таким как гематоксилин).
Коэффициент окрашивания INSM1 классифицируют на 4 шкалы (нет окрашивания: 0, слабая интенсивность окрашивания: 1+, средняя интенсивность окрашивания: 2+, сильная интенсивность окрашивания: 3+); например, только соотношение клеток с сильной интенсивностью окрашивания может применяться в качестве показателя, или соотношение клеток с сильной интенсивностью окрашивания и слеток со средней интенсивностью окрашивания может применяться в качестве показателя.
Далее, уровень экспрессии INSM1 также может быть рассчитан из суммы продукта интенсивности окрашивания и коэффициента окрашивания. Например, значения, полученные следующей формулой, могут быть определены как уровень экспрессии: (сильная интенсивность окрашивания) × (доля клеток с сильной интенсивностью окрашивания в раковой ткани (%)), (сильная интенсивность окрашивания) × (доля клеток с сильной интенсивностью окрашивания в раковой ткани (%)) + (средняя интенсивность окрашивания) × (доля клеток со средней интенсивностью окрашивания в раковой ткани (%)) или (сильная интенсивность окрашивания) × (доля клеток с сильной интенсивностью окрашивания в раковой ткани (%)) + (средняя интенсивность окрашивания) × (доля клеток со средней интенсивностью окрашивания в раковой ткани (%)) + (слабая интенсивность окрашивания) × (доля клеток со слабой интенсивностью окрашивания в раковой ткани (%)).
Праймер и пробу в соответствии с данным изобретением готовят на основе известной информации последовательность ДНК или мРНК человеческого INSM1 (GenBank Accession Number: NM_002196) общеизвестным способом, таким как полинуклеотид, который специфически гибридизируется с ДНК и мРНК человеческого INSM1. Базовая длина праймера составляет 10-50 оснований, предпочтительно, 15-50 оснований, и более предпочтительно, 18-35 оснований.
Праймер и проба не обязательно имеют превосходную комплементарность, пока они специфически гибридизируются с ДНК и мРНК INSM1. Каждый праймер и проба является полинуклеотидом, который имеет, по меньшей мере, 70%, предпочтительно, по меньшей мере, 80%, более предпочтительно, по меньшей мере, 90%, еще более предпочтительно, по меньшей мере, 95%, и особенно предпочтительно, по меньшей мере, 98% идентичность с соответствующей основной последовательностью.
Фраза “специфически гибридизируется” в соответствии с данным изобретением означает, что в жестких условиях гибридизации образуется специфический гибрид, и не специфический гибрид не образуется. В качестве жестких условий гибридизации могут применяться, например, условия, описанные в Molecular Cloning: A Laboratory Manual (Second Edition, J. Sambrook et al., 1989) и подобные. Более конкретно, примеры включают условие сохранения раствора, содержащего 6×РЦХН (композиция 1×РЦХН: 0,15M хлорида натрия, 0,015M цитрата натрия, pH 7.0), 0,5% ДСН, 5×раствор Денхарта и 100 мг/мл ДНК спермы сельди вместе с пробой при постоянной температуре 65°C в течение 8-16 часов для гибридизации, и подобные.
Праймер или проба могут быть мечены обычно применяемым радиоактивным веществом, флуоресцентным веществом, хемилюминесцентным веществом или ферментом для простоты обнаружения.
Антитело в соответствии с данным изобретением особенно не ограничено, пока оно специфически распознает белок INSM1 (анти-INSM1 антитело). Примеры включают иммуноглобулины (IgA, IgD, IgE, IgG, IgM, IgY и т.д.), фрагменты Fab, фрагменты F(ab')2, одноцепочечные фрагменты антитела (scFv), однодоменные антитела, диатела и подобные. Примеры этих антител включают, но не ограничены ими, поликлональные антитела и моноклональные антитела (мышиные антитела, антитела ламы, куриные антитела, химерные антитела, гуманизированные антитела, человеческие антитела и подобные).
Эти антитела могут быть получены с применением различных известных способов. Способы получения особенно не ограничены. Примеры известных способов включают способ инокулирования полной цепи или фрагмента белка иммунизируемому животному для активации иммунной системы животного, сбор сыворотки животного и получение ее в качестве поликлонального антитела; или способ получения моноклональных антител способом гибридомы, способом фагового отображения или подобным. Альтернативно, также могут применяться коммерчески доступные антитела. Примеры включают Анти-INSMl антитело (abeam, ab30940), IA-1 поликлональное антитело (Thermo Fisher Scientific, РА5-40471), INSM1 (A-8) антитело (Santa Cruz, sc-271408), INSM1 антитело (ProSci, 27-468) и INSM1 антитело (GenWay, GWB-6EE1CD).
В способе прогнозирования в соответствии с данным изобретением, если высокий уровень экспрессии INSM1 наблюдается в образце, полученном у пациента с раком, прогнозируют, что пациент с раком с высокой вероятностью получит достаточный терапевтический эффект от химиотерапии с применением противоопухолевого агента, содержащего ингибитор LSD1.
Фраза "высокий уровень экспрессии INSM1" означает, что уровень экспрессии INSM1 в образце, полученном у пациента с раком, относительно высок; более конкретно, уровень экспрессии INSM1 равен или выше заданной точки завершения сбора данных.
Точка завершения сбора данных в данном описании варьируется в зависимости от разных условий, таких как тип измеряемого объекта и тип способа измерения. Таким образом, данное изобретение охватывает широкий спектр изобретений с применением произвольной точки завершения сбора данных, которая может варьироваться в зависимости от этих условий, и точка завершения сбора данных не ограничена конкретным значением. Определенная точка завершения сбора данных может быть определена в соответствии с различными методами статистического анализа с применением ранее измеренных уровней экспрессии INSM1 у пациентов с раком. Примеры включают среднее значение и медианное значение уровня экспрессии INSM1 у пациентов с раком; точку завершения сбора данных для разделения группы с высокой экспрессией INSM1 и группы с низкой экспрессией INSM1 среди пациентов с раком, которая является значением, при котором значение Р становится минимальным и меньше стандартного значения (например, значением, при котором значение Р составляет не более 0,1 или не более 0,05) в логранговом критерии относительно терапевтических эффектов (эффекты сокращения опухоли, эффекты продления выживания без развития и подобные) химиотерапии с применением противоопухолевого агента, содержащего ингибитор LSD1, в группе с высокой экспрессией INSM1 и группе с низкой экспрессией INSM1; точку завершения сбора данных для разделения группы с высокой экспрессией INSM1 и группы с низкой экспрессией INSM1 среди пациентов с раком, которая является значением, определенным из соотношения между уровнем экспрессии INSM1 у пациента, который проходил химиотерапию с применением противоопухолевого агента, содержащего ингибитор LSD1, и присутствием или отсутствием терапевтических эффектов (эффекты сокращения опухоли, эффекты продления выживания без развития и подобные) химиотерапии с применением ингибитора LSD1 до определенной степени или более так, что сумма чувствительности и специфичности становится максимальной на основе анализа ROC (рабочих характеристик приемника); и точку завершения сбора данных для разделения группы с высокой экспрессией INSM1 и группы с низкой экспрессией INSM1 среди пациентов с раком, которая является значением, при котором значение Р становится минимальным и меньше стандартного значения (например, значения, при котором значение Р составляет не более 0,1 или не более 0,05) в тесте хи-квадрат относительно терапевтических эффектов (эффекты сокращения опухоли, эффекты продления выживания без развития и подобные) химиотерапии с применением противоопухолевого агента, содержащего ингибитор LSD1, в группе с высокой экспрессией INSM1 и группе с низкой экспрессией INSM1, и подобные. Среди них предпочтительны среднее значение и медианное значение уровня экспрессии INSM1 у пациентов с раком, и более предпочтительно среднее значение уровня экспрессии INSM1 у пациентов с раком.
В данном изобретении также представлен противоопухолевый агент, содержащий ингибитор LSD1, для лечения пациента, у которого спрогнозировано или определено с высокой вероятностью получение достаточного терапевтического эффекта от химиотерапии с применением противоопухолевого агента, содержащего ингибитор LSD1, способом прогнозирования в соответствии с данным изобретением. В данном изобретении также представлен способ лечения пациента, включающий введение противоопухолевого агента, содержащего ингибитор LSD1, пациенту с раком, которому спрогнозировано или определено с высокой вероятностью получение достаточного терапевтического эффекта от химиотерапии с применением противоопухолевого агента, содержащего ингибитор LSD1, способом прогнозирования в соответствии с данным изобретением.
В данном изобретении также представлен набор для прогнозирования терапевтического эффекта химиотерапии с применением противоопухолевого агента, содержащего ингибитор LSD1, у пациента с раком, на основе уровня экспрессии INSM1 в образце, выделенном у пациента с раком. Набор в соответствии с данным изобретением подходящим образом применяют для прогнозирования, способом прогнозирования в соответствии с данным изобретением, описанным выше, терапевтического эффекта химиотерапии.
Набор в соответствии с данным изобретением отличается содержанием реагента для измерения уровня экспрессии INSM1. Примеры реагента для измерения уровня экспрессии INSM1 включают пробу, которая специфически гибридизируется с ДНК или мРНК INSM1, антитело, которое специфически распознает белок INSM1, и подобные; где предпочтительно антитело, которое специфически распознает белок INSM1. Набор в соответствии с данным изобретением может содержать другие реагенты и/или инструменты для измерения уровня экспрессии INSM1, отрицательный или положительный контроль для измерения уровня экспрессии и подобные.
Если реагентом для измерения уровня экспрессии INSM1 является антитело, набор в соответствии с данным изобретением может содержать средство для определения антитела, которое специфически распознает белок INSM1 как первичное антитело, такое как вторичное антитело. При необходимости, вторичное антитело может быть мечено ферментом, таким как пероксидаза или щелочная фосфатаза; или флуоресцентным или люминесцентным веществом, таким как флуоресцеин изотиоцианат (ФИТЦ) или карбоксиметилиндоцианин (Cy3) и подобные. Если вторичное антитело мечено ферментом, набор в соответствии с данным изобретением предпочтительно дополнительно содержит хромогенный субстрат, такой как 3,3'-диаминобензидин (ДАБ), 3,3',5,5'-тетраметилбензидин (ТМБ) или подобные.
Набор в соответствии с данным изобретением также может содержать инструкцию по применению, методическое руководство или подобное, описывающее методику практического применения способа прогнозирования в соответствии с данным изобретением.
Примеры
Данное изобретение описано ниже более подробно со ссылкой на примеры. Однако объем данного изобретения не ограничен этими примерами. Данное изобретение полностью описано ниже в примерах; однако понятно, что возможны различные изменения и модификации специалистом в данной области техники. Поэтому такие изменения и модификации включены в объем данного изобретения в той степени, в которой они не выходят за рамки объема изобретения.
Различные реагенты, применяемые в примерах, получают от коммерческих поставщиков, если не указано иначе. Для хроматографии на колонке с силикагелем применяют колонку, наполненную двуокисью кремния, SNAP-Ultra (зарегистрированная торговая марка) производства Biotage. Альтернативно, для основной хроматографии на колонке с силикагелем применяют заполненную колонку KP-NH (зарегистрированная торговая марка) производства Biotage. ЯМР спектр измеряют с применением AL400 (400 МГц; производства JEOL), Mercury 400 (400 МГц; производства Agilent Technologies, Inc.) или 500-MГц Bruker Avance III HD NMR Spectrometer (500 МГц; Bruker). Если дейтерированный растворитель содержит тетраметилсилан, тетраметилсилан применяют в качестве внутреннего стандарта. В других случаях, ЯМР растворитель применяют в качестве внутреннего стандарта. Все значения δ даны в ч./млн. Микроволновую реакцию проводят с применением Initiator производства Biotage.
ЖХМС спектр измеряют с применением Acquity SQD (квадрупольного) производства Waters Corporation в следующих условиях.
Колонка: Acquity UPLC (зарегистрированная торговая марка) BEH C18, 2,1×50 мм, 1,7 мкм (производства Waters Corporation)
МС определение: ИЭР положительная
УФ определение: 254 и 280 нм
Скорость потока колонки: 0,5 мл/мин
Подвижная фаза: вода/ацетонитрил (0,1% муравьиной кислоты)
Объем впрыска: 1 мкл
Градиент
Очистку препаративной ВЭЖХ с обращенной фазой проводят в следующих условиях с применением препаративной системы разделения, доступной от Gilson, Inc.
Колонка: Xselect CSH Prep C18 5 мкм OBD (19×50 мм) + (19×100 мм), производства Waters Corporation
УФ определение: 254 нм
Скорость потока колонки: 18 мл/мин
Подвижная фаза: вода/ацетонитрил (0,1% муравьиной кислоты)
Объем впрыска: 0,1-0,5 мл
Символами обозначены следующие термины:
с: синглет
д: дублет
т: триплет
кв: квартет
дд: двойной дублет
дт: двойной триплет
тд: тройной дублет
тт: тройной триплет
ддд: двойной двойной дублет
ддт: двойной двойной триплет
дтд: двойной тройной дублет
тдд: тройной двойной дублет
м: мультиплет
уш: уширенный
ушс: уширенный синглет
ТГФ: тетрагидрофуран
ДМФ: N,N-диметилформамид
ДМЭ: 1,2-Диметоксиэтан
ДМСО: Диметилсульфоксид
ГАТУ: фторфосфат O-(7-азабензотриазол-1-ил)-N,N,N',N'-тетраметилгексаурония
ТЭА: Триэтиламин
WSC HCl: гидрохлорид 1-Этил-3-(3-диметиламинопропил)карбодиимида
t-BuOH: третичный бутанол
ДМАП: N,N-диметиламинопиридин
Pd(PPh3)4: тетракис(трифенилфосфин)палладий(0)
Pd(dba)2: бис(дибензилиденацетон)палладий(0)
PCy3: трициклогексилфосфин
ТФК: Трифторуксусная кислота
Pd(OAc)2: ацетат палладия
KOAc: ацетат калия
PdCl2(dppf): дихлорид [1,1'-бис(дифенилфосфино)ферроцен]палладия(II)
PdCl2(dppf)CH2Cl2: комплекс дихлорметана с дихлоридом [1,1'-бис(дифенилфосфино)ферроцен]палладия(II)
ДМЭАД: ди-2-метоксиэтилазодикарбоксилат
PPh3: трифенилфосфин
ДМА: Диметилацетамид
MeMgBr: бромид метилмагния
EtMgBr: бромид этилмагния
МТБЭ: метил-трет-бутиловый эфир
ДХМ: дихлорметан
Boc2O: ди-трет-бутилдикарбонат
NBS: N-бромсукцинимид
X-phos: 2-дициклогексилфосфино-2',4',6'-триизопропилбифенил
MeOH: метанол
EtOH: этанол
ИПЭ: диизопропиловый эфир
ФТБА: фторид тетрабутиламмония
Pd2(dba)3: трис(дибензилиденацетон)дипалладий (0)
PdCl2(PPh3)2: хлорид бистрифенилфосфата палладия
S-Phos: 2-дициклогексилфосфино-2,6-диметоксибифенил
ГОБт: 1-Гидроксибензотриазол
Pd/C: палладия на углероде
NMP: N-метил-2-пирролидинон.
Пример 1: Синтез 4-[5-[(3S)-3-аминопирролидин-1-карбонил]-2-(п-толил)фенил]бензонитрила
Стадия 1
3-Бром-4-хлорбензойную кислоту (19 г) растворяют в ДМФ (160 мл). При 25°C туда добавляют ДМАП (20 г) и WSC HCl (31 г), затем добавляют t-BuOH (38 мл). Полученную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение ночи. Туда добавляют этилацетат, и полученную смесь промывают последовательно водой и насыщенным раствором соли. После того, как органический слой сушат над сульфатом натрия, растворитель отгоняют. Остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем (подвижная фаза: гексан/этилацетат) с получением трет-бутил-3-бром-4-хлорбензоата.
Стадия 2
Трет-бутил-3-бром-4-хлорбензоат (1,3 г), полученный на стадии 1 выше, растворяют в 1,4-диоксане (8,7 мл). При комнатной температуре туда добавляют (4-цианофенил)бороновую кислоту (768 мг), Pd(PPh3)4 (151 мг) и 2M водный раствор карбоната натрия (5,4 мл), и реакционную смесь перемешивают в микроволновом реакторе при 120°C в течение 30 минут. Реакционную смесь затем концентрируют в вакууме, и остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем (подвижная фаза: гексан/этилацетат) с получением трет-бутил-4-хлор-3-(4-цианофенил)бензоата.
Стадия 3
Трет-бутил-4-хлор-3-(4-цианофенил)бензоат (1,1 г), полученный на стадии 2 выше, растворяют в 1,4-диоксане (17 мл). При комнатной температуре туда добавляют п-толилбороновую кислоту (932 мг), Pd(dba)2 (157 мг), трикалийфосфат (1,5 г) и раствор 1 M PCy3 в ТГФ (0,57 мл), и реакционную смесь перемешивают в микроволновом реакторе при 160°C в течение 30 минут. После добавления хлороформа, нерастворимое вещество отфильтровывают и растворитель отгоняют. Остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем (подвижная фаза: гексан/этилацетат) и растворитель отгоняют. Остаток растворяют в ТФК (2 мл). Растворитель отгоняют. Туда добавляют этилацетат, и смесь промывают последовательно водой и насыщенным раствором соли. После того, как органический слой сушат над сульфатом натрия, растворитель отгоняют с получением 3-(4-цианофенил)-4-(п-толил)бензойной кислоты.
Стадия 4
3-(4-Цианофенил)-4-(п-толил)бензойную кислоту (10 мг), полученную на стадии 3 выше, трет-бутил-N-[(3S)-пирролидин-3-ил]карбамат (6 мг) и ГАТУ (24 мг) растворяют в ТГФ (0,5 мл). При комнатной температуре туда добавляют ТЭА (0,013 мл), затем перемешивают при 50°C в течение ночи. Реакционную смесь концентрируют в вакууме, и растворитель отгоняют. Остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем (подвижная фаза: гексан/этилацетат) с получением трет-бутил-N-[(3S)-1-[3-(4-цианофенил)-4-(п-толил)бензоил]пирролидин-3-ил]карбамата.
Стадия 5
Трет-бутил-N-[(3S)-1-[3-(4-цианофенил)-4-(п-толил)бензоил]пирролидин-3-ил]карбамат (15 мг), полученный на стадии 4 выше, растворяют в ТФК (0,3 мл) и прогресс реакции подтверждают ЖХМС с последующей вакуумной концентрацией. Остаток очищают ВЭЖХ с обращенной фазой (подвижная фаза: вода/ацетонитрил) с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 2: Синтез 4-[5-[(3S)-3-аминопирролидин-1-карботиоил]-2-(п-толил)фенил]бензонитрила
4-[5-[(3S)-3-Аминопирролидин-1-карбонил]-2-(п-толил)фенил]бензонитрил (6 мг), полученный в Примере 1 (стадия 5), растворяют в ТГФ (0,8 мл). При комнатной температуре туда добавляют Реагент Лавессона (3,8 мг) с последующим перемешиванием при комнатной температуре в течение 30 минут. Туда добавляют хлороформ, и смесь разделяют бикарбонатом натрия и водой. После того, как органический слой сушат над сульфатом натрия, растворитель отгоняют. Остаток очищают ВЭЖХ с обращенной фазой (подвижная фаза: вода/ацетонитрил) с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 3: Синтез 4-[5-(4-аминопиперидин-1-карбонил)-2-(п-толил)фенил]бензонитрила
3-(4-Цианофенил)-4-(п-толил)бензойную кислоту, (20 мг) полученную в примере 1 (стадия 3), растворяют в ТГФ (1 мл). При комнатной температуре туда добавляют трет-бутил-N-(4-пиперидил)карбамат (13 мг), ГАТУ (49 мг) и ТЭА (0,027 мл), затем перемешивают при 50°C в течение ночи. Реакционную смесь концентрируют в вакууме и растворитель отгоняют. Остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем (подвижная фаза: гексан/этилацетат) с получением трет-бутил-N-[1-[3-(4-цианофенил)-4-(п-толил)бензоил]-4-пиперидил]карбамата.
Стадия 2
Трет-бутил-N-[1-[3-(4-цианофенил)-4-(п-толил)бензоил]-4-пиперидил]карбамат (30 мг), полученный на стадии 1 выше, растворяют в ТФК (0,3 мл) и прогресс реакции подтверждают ЖХМС, с последующей вакуумной концентрацией. Остаток очищают ВЭЖХ с обращенной фазой (подвижная фаза: вода/ацетонитрил) с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 4: Синтез 4-[5-(2,8-диазаспиро[3.5]нонан-2-карбонил)-2-(п-толил)фенил]бензонитрила
Методику стадий 1-5 из Примера 1 проводят с применением гидрохлорида трет-бутил-2,8-диазаспиро[3.5]нонан-8-карбоксилата вместо трет-бутил-N-[(3S)-пирролидин-3-ил]карбамата с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 5: Синтез 4-[5-(2,7-диазаспиро[3.4]октан-7-карбонил)-2-(п-толил)фенил]бензонитрила
Методику стадий 1-5 из Примера 1 проводят с применением трет-бутил-2,7-диазаспиро[3.4]октан-2-карбоксилата вместо трет-бутил-N-[(3S)-пирролидин-3-ил]карбамата с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 6: Синтез 4-[5-(3,8-диазаспиро[4.4]нонан-8-карбонил)-2-(п-толил)фенил]бензонитрила
Методику стадий 1-5 из Примера 1 проводят с применением трет-бутил-3,8-диазаспиро[4.4]нонан-8-карбоксилата вместо трет-бутил-N-[(3S)-пирролидин-3-ил]карбамата с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 7: Синтез 4-[5-[(3-экзо)-3-амино-8-азабицикло[3.2.1]октан-8-карбонил]-2-(п-толил)фенил]бензонитрила
Стадия 1
3-Бром-4-хлор-бензойную кислоту (500 мг) растворяют в ДМА (5,3 мл). При комнатной температуре туда добавляют ГАТУ (1 г), ТЭА (0,59 мл) и трет-бутил-N-[(3-экзо)-8-азабицикло[3.2.1]октан-3-ил]карбамат (480 мг), с последующим перемешиванием при комнатной температуре в течение 1 часа. Туда добавляют этилацетат, и полученную смесь промывают последовательно водой и насыщенным раствором соли. После того, как органический слой сушат над сульфатом натрия, растворитель отгоняют. Остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем (подвижная фаза: гексан/этилацетат) с получением трет-бутил-N-[(3-экзо)-8-(3-бром-4-хлор-бензоил)-8-азабицикло[3.2.1]октан-3-ил]карбамата.
Стадия 2
Трет-бутил-N-[(3-экзо)-8-(3-бром-4-хлорбензоил)-8-азабицикло[3.2.1]октан-3-ил]карбамата (200 мг), полученный на стадии 1 выше, растворяют в 1,4-диоксан (2,3 мл). При комнатной температуре туда добавляют (4-цианофенил)бороновую кислоту (60 мг), Pd(PPh3)4 (16 мг) и 2 M Na2CO3 водный раствор (1,1 мл), и реакционную смесь перемешивают в микроволновом реакторе при 120°C в течение 30 минут. Растворитель отгоняют, и остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем (подвижная фаза: гексан/этилацетат) с получением трет-бутил-N-[(3-экзо)-8-[4-хлор-3-(4-цианофенил)бензоил]-8-азабицикло[3.2.1]октан-3-ил]карбамата.
Стадия 3
Трет-бутил-N-[(3-экзо)-8-[4-хлор-3-(4-цианофенил)бензоил]-8-азабицикло[3.2.1]октан-3-ил]карбамат (15 мг), полученный на стадии 2 выше, растворяют в 1,4-диоксане (0,322 мл). При комнатной температуре туда добавляют п-толилбороновую кислоту (5,3 мг), Pd(dba)2 (0.93 мг), раствор 1 M PCy3 в ТГФ (0,003 мл) и трикалийфосфат (21 мг), и реакционную смесь перемешивают в микроволновом реакторе при 160°C в течение 30 минут. Растворитель отгоняют, и остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем (подвижная фаза: гексан/этилацетат) с получением трет-бутил-N-[(3-экзо)-8-[3-(4-цианофенил)-4-(п-толил)бензоил]-8-азабицикло[3.2.1]октан-3-ил]карбамата.
Стадия 4
Трет-бутил-N-[(3-экзо)-8-[3-(4-цианофенил)-4-(п-толил)бензоил]-8-азабицикло[3.2.1]октан-3-ил]карбамат (15 мг), полученный на стадии 3 выше, растворяют в ТФК (0,3 мл) и прогресс реакции подтверждают ЖХМС, с последующей вакуумной концентрацией. Остаток очищают ВЭЖХ с обращенной фазой (подвижная фаза: вода/ацетонитрил) с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 8: Синтез 4-[5-[(3S)-3-амино-3-метил-пирролидин-1-карбонил]-2-(п-толил)фенил]бензонитрила
Методику стадий 1-5 из Примера 1 проводят с применением трет-бутил-N-[(3S)-3-метилпирролидин-3-ил]карбамата вместо трет-бутил-N-[(3S)-пирролидин-3-ил]карбамата с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 9: Синтез 4-[5-[(3S)-3-аминопирролидин-1-карбонил]-2-(2-хлор-4-метилфенил)фенил]бензонитрила
Стадия 1
3-Бром-4-хлорбензойную кислоту (10 г) растворяют в ДМА (85 мл). При комнатной температуре туда добавляют ГАТУ (24 г), ТЭА (12 мл) и трет-бутил-N-[(3S)-пирролидин-3-ил]карбамат (8,7 г) с последующим перемешиванием при комнатной температуре в течение 1 часа. Туда добавляют этилацетат, и полученную смесь промывают последовательно водой и насыщенным раствором соли. После того, как органический слой сушат над сульфатом натрия, растворитель отгоняют. Остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем (подвижная фаза: гексан/этилацетат) с получением трет-бутил-N-[(3S)-1-(3-бром-4-хлорбензоил)пирролидин-3-ил]карбамата.
Стадия 2
Трет-бутил-N-[(3S)-1-(3-бром-4-хлорбензоил)пирролидин-3-ил]карбамат (2,2 г) полученный на стадии 1 выше растворяют в 1,4-диоксане (13,6 мл). При комнатной температуре туда добавляют 4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензонитрил (1,5 г), Pd(PPh3)4 (189 мг) и 2 M Na2CO3 водный раствор (6,8 мл), и реакционную смесь перемешивают в микроволновом реакторе при 120°C в течение 30 минут. Туда добавляют этилацетат, и полученную смесь промывают последовательно водой и насыщенным раствором соли. После того, как органический слой сушат над сульфатом натрия, растворитель отгоняют. Остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем (подвижная фаза: гексан/этилацетат) с получением трет-бутил-N-[(3S)-1-[4-хлор-3-(4-цианофенил)бензоил]пирролидин-3-ил]карбамата.
Стадия 3
Трет-бутил-N-[(3S)-1-[4-хлор-3-(4-цианофенил)бензоил]пирролидин-3-ил]карбамат (500 мг), полученный на стадии 2 выше, растворяют в 1,4-диоксане (9,8 мл). При комнатной температуре туда добавляют Pd(OAc)2 (26 мг), KOAc (346 мг), бис(пинаколато)диборон (596 мг) и Silica-SMAP (150 мг), затем перемешивают при 160°C в течение ночи. Смесь пропускают через Целит и фильтрат концентрируют в вакууме. Остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем (подвижная фаза: гексан/этилацетат) с получением трет-бутил-N-[(3S)-1-[3-(4-цианофенил)-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензоил]пирролидин-3-ил]карбамата.
Стадия 4
Трет-бутил-N-[(3S)-1-[3-(4-цианофенил)-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензоил]пирролидин-3-ил]карбамат (15 мг), полученный на стадии 3 выше, 1-бром-2-хлор-4-метилбензол (12 мг) и Pd(PPh3)4 (1,7 мг) суспендируют в 1,4-диоксане (1,5 мл). При комнатной температуре туда добавляют 2 M Na2CO3 водный раствор (0,7 мл), затем перемешивают при 120°C в течение 30 минут. После фильтрации реакционной смеси, растворитель отгоняют с получением трет-бутил-N-[(3S)-1-[4-(2-хлор-4-метилфенил)-3-(4-цианофенил)бензоил]пирролидин-3-ил]карбамата.
Стадия 5
Трет-бутил-N-[(3S)-1-[4-(2-хлор-4-метилфенил)-3-(4-цианофенил)бензоил]пирролидин-3-ил]карбамат (15 мг), полученный на стадии 4 выше, растворяют в ТФК (0,3 мл), и прогресс реакции подтверждают ЖХМС, с последующей вакуумной концентрацией. Остаток очищают ВЭЖХ с обращенной фазой (подвижная фаза: вода/ацетонитрил) с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 10: Синтез 4-[5-[(3S)-3-аминопирролидин-1-карбонил]-2-(3-хлор-4-метилфенил)фенил]бензонитрила
Методику стадий 1-5 из Примера 9 проводят с применением 4-бром-2-хлор-1-метилбензола вместо 1-бром-2-хлор-4-метилбензола с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 11: Синтез 4-[5-[(3S)-3-аминопирролидин-1-карбонил]-2-[3-фтор-4-(трифторметил)фенил]фенил]бензонитрила
Методику стадий 1-5 из Примера 9 проводят с применением 4-бром-2-фтор-1-(трифторметил)бензола вместо 1-бром-2-хлор-4-метилбензола с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 12: Синтез 4-[5-[(3S)-3-аминопирролидин-1-карбонил]-2-(4-метил-2-нитрофенил)фенил]бензонитрила
Стадия 1
Трет-бутил-N-[(3S)-1-[4-хлор-3-(4-цианофенил)бензоил]пирролидин-3-ил]карбамат (15 мг), полученный в примере 9 (стадия 2), пинаколовый эфир 4-метил-2-нитрофенилбороновой кислоты (18 мг), Pd(dba)2 (1,6 мг), раствор 1 M PCy3 в ТГФ (0,003 мл) и трикалийфосфат (15 мг) добавляют туда, и реакционную смесь перемешивают в микроволновом реакторе при 160°C в течение 30 минут. Растворитель отгоняют, и остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем (подвижная фаза: гексан/этилацетат) с получением трет-бутил-N-[(3S)-1-[3-(4-цианофенил)-4-(4-метил-2-нитрофенил)бензоил]пирролидин-3-ил]карбамата.
Стадия 2
Трет-бутил-N-[(3S)-1-[3-(4-цианофенил)-4-(4-метил-2-нитрофенил)бензоил]пирролидин-3-ил]карбамат (10 мг), полученный на стадии 1 выше, растворяют в ТФК (0,3 мл), и прогресс реакции подтверждают ЖХМС с последующей вакуумной концентрацией. Остаток очищают ВЭЖХ с обращенной фазой (подвижная фаза: вода/ацетонитрил) с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 13: Синтез 4-[5-[(3S)-3-аминопирролидин-1-карбонил]-2-[4-(дифторметил)фенил]фенил]бензонитрила
Методику стадий 1-5 из Примера 9 проводят с применением 1-бром-4-(дифторметил)бензола вместо 1-бром-2-хлор-4-метилбензола с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 14: Синтез 4-[5-[(3S)-3-аминопирролидин-1-карбонил]-2-[4-(трифторметил)фенил]фенил]бензонитрила
Методику стадий 1-2 из Примера 12 проводят с применением [4-(трифторметил)фенил]бороновой кислоты вместо пинаколового эфира 4-метил-2-нитрофенилбороновой кислоты с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 15: Синтез 4-[5-[(3S)-3-аминопирролидин-1-карбонил]-2-(2-фтор-4-метилфенил)фенил]бензонитрила
Стадия 1
Трет-бутил-N-[(3S)-1-[4-хлор-3-(4-цианофенил)бензоил]пирролидин-3-ил]карбамат (1,7 г), полученный в примере 9 (стадия 2), растворяют в 1,4-диоксане (20 мл). При комнатной температуре туда добавляют (2-фтор-4-метил-фенил)бороновую кислоту (980 мг), Pd(dba)2 (110 мг), раствор 1 M PCy3 в ТГФ (0.4 мл) и трикалийфосфат (2,5 г), и реакционную смесь перемешивают в микроволновом реакторе при 160°C в течение 45 минут. Смесь очищают NH-силикагелем и промывают метанолом/этилацетатом, и растворитель отгоняют с получением трет-бутил-N-[(3S)-1-[3-(4-цианофенил)-4-(2-фтор-4-метилфенил)бензоил]пирролидин-3-ил]карбамата.
Стадия 2
Трет-бутил-N-[(3S)-1-[3-(4-цианофенил)-4-(2-фтор-4-метилфенил)бензоил]пирролидин-3-ил]карбамат (1,7 г), полученный на стадии 1 выше, растворяют в ТФК (44 мл) с последующим перемешиванием в течение 10 минут. Растворитель отгоняют, и остаток очищают ВЭЖХ с обращенной фазой (подвижная фаза: вода/ацетонитрил) с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 16: Синтез 4-[5-[(3S)-3-аминопирролидин-1-карбонил]-2-(п-толил)фенил]-2-фторбензонитрила
Стадия 1
Трет-бутил-N-[(3S)-1-(3-бром-4-хлорбензоил)пирролидин-3-ил]карбамат (14 г), полученный в примере 9 (стадия 1), растворяют в 1,4-диоксане (87 мл). При комнатной температуре туда добавляют (4-циано-3-фторфенил)бороновую кислоту (6,3 г), Pd(PPh3)4 (1,2 г) и 2 M Na2CO3 водный раствор (44 мл), затем перемешивают при 90°C в течение ночи. Туда добавляют этилацетат, и полученную смесь промывают последовательно водой и насыщенным раствором соли. После того, как органический слой сушат над сульфатом натрия, растворитель отгоняют. Остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем (подвижная фаза: гексан/этилацетат) с получением трет-бутил-N-[(3S)-1-[4-хлор-3-(4-циано-3-фторфенил)бензоил]пирролидин-3-ил]карбамата.
Стадия 2
Трет-бутил-N-[(3S)-1-[4-хлор-3-(4-циано-3-фторфенил)бензоил]пирролидин-3-ил]карбамат (48 мг), полученный на стадии 1 выше, растворяют в 1,4-диоксане (0,5 мл). При комнатной температуре туда добавляют п-толилбороновую кислоту (29 мг), Pd(dba)2 (3,1 мг), раствор 1 M PCy3 в ТГФ (0,005 мл) и трикалийфосфат (68 мг), и реакционную смесь перемешивают в микроволновом реакторе при 160°C в течение 45 минут. Смесь очищают NH-силикагелем и промывают метанолом/этилацетатом, и растворитель отгоняют с получением трет-бутил-N-[(3S)-1-[3-(4-циано-3-фторфенил)-4-(п-толил)бензоил]пирролидин-3-ил]карбамата.
Стадия 3
ТФК (1,2 мл) добавляют к трет-бутил-N-[(3S)-1-[3-(4-циано-3-фторфенил)-4-(п-толил)бензоил]пирролидин-3-ил]карбамату (48 мг), полученному на стадии 2 выше, с последующим перемешиванием в течение 10 минут. Растворитель отгоняют, и остаток очищают ВЭЖХ с обращенной фазой (подвижная фаза: вода/ацетонитрил) с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 17: Синтез 4-[5-[(3-эндо)-3-амино-8-азабицикло[3.2.1]октан-8-карбонил]-2-(п-толил)фенил]-2-фторбензонитрила
Стадия 1
3-Бром-4-хлорбензойную кислоту (700 мг) растворяют в ТГФ (15 мл). При комнатной температуре туда добавляют ГАТУ (1,2 г), ТЭА (0,83 мл) и трет-бутил-N-[(3-эндо)-8-азабицикло[3.2.1]октан-3-ил]карбамат (700 мг), затем перемешивают при 50°C в течение 1 часа. Растворитель отгоняют, и остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем (подвижная фаза: гексан/этилацетат) с получением трет-бутил-N-[(3-эндо)-8-(3-бром-4-хлорбензоил)-8-азабицикло[3.2.1]октан-3-ил]карбамата.
Стадия 2
Трет-бутил-N-[(3-эндо)-8-(3-бром-4-хлорбензоил)-8-азабицикло[3.2.1]октан-3-ил]карбамат (1,2 г), полученный на стадии 1 выше, растворяют в 1,4-диоксане (6,7 мл). При комнатной температуре туда добавляют (4-циано-3-фторфенил)бороновую кислоту (461 мг), PdCl2(dppf) (58 мг) и 2 M Na2CO3 водный раствор (3,3 мл), затем перемешивают при 95°C в течение ночи. Туда добавляют этилацетат, и полученную смесь промывают последовательно водой и насыщенным раствором соли. После того, как органический слой сушат над сульфатом натрия, растворитель отгоняют. Остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем (подвижная фаза: гексан/этилацетат) с получением трет-бутил-N-[(3-эндо)-8-[4-хлор-3-(4-циано-3-фторфенил)бензоил]-8-азабицикло[3.2.1]октан-3-ил]карбамата.
Стадия 3
Трет-бутил-N-[(3-эндо)-8-[4-хлор-3-(4-циано-3-фторфенил)бензоил]-8-азабицикло[3.2.1]октан-3-ил]карбамат (17 мг), полученный на стадии 2 выше, растворяют в 1,4-диоксане (0,5 мл). При комнатной температуре туда добавляют п-толилбороновую кислоту (9,6 мг), Pd(dba)2 (1,6 мг), трикалийфосфат (15 мг) и раствор 1 M PCy3 в ТГФ (0,004 мл), и смесь перемешивают в микроволновом реакторе при 160°C в течение 30 минут. Реакционную смесь фильтруют через NH-силикагель, и растворитель фильтрата отгоняют с получением трет-бутил-N-[(3-эндо)-8-[3-(4-циано-3-фторфенил)-4-(п-толил)бензоил]-8-азабицикло[3.2.1]октан-3-ил]карбамата.
Стадия 4
Трет-бутил-N-[(3-эндо)-8-[3-(4-циано-3-фторфенил)-4-(п-толил)бензоил]-8-азабицикло[3.2.1]октан-3-ил]карбамат (15 мг), полученный на стадии 3 выше, растворяют в ТФК (0,3 мл), и прогресс реакции подтверждают ЖХМС с последующей вакуумной концентрацией. Остаток очищают ВЭЖХ с обращенной фазой (подвижная фаза: вода/ацетонитрил) с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 18: Синтез 4-[5-[(3-экзо)-3-амино-8-азабицикло[3.2.1]октан-8-карбонил]-2-(1-метилиндол-5-ил)фенил]-2-фторбензонитрила
Стадия 1
Трет-бутил-N-[(3-экзо)-8-(3-бром-4-хлорбензоил)-8-азабицикло[3.2.1]октан-3-ил]карбамат (300 мг), полученный в примере 7 (стадия 1), растворяют в 1,4-диоксане (1,7 мл). При комнатной температуре туда добавляют (4-циано-3-фторфенил)бороновую кислоту (123 мг), PdCl2(dppf) (17 мг) и 2 M Na2CO3 водный раствор (0,85 мл), и реакционную смесь перемешивают в микроволновом реакторе при 120°C в течение 30 минут. Туда добавляют этилацетат, и полученную смесь промывают последовательно водой и насыщенным раствором соли. После того, как органический слой сушат над сульфатом натрия, растворитель отгоняют. Остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем (подвижная фаза: гексан/этилацетат) с получением трет-бутил-N-[(3-экзо)-8-[4-хлор-3-(4-циано-3-фторфенил)бензоил]-8-азабицикло[3.2.1]октан-3-ил]карбамата.
Стадия 2
Трет-бутил-N-[(3-экзо)-8-[4-хлор-3-(4-циано-3-фторфенил)бензоил]-8-азабицикло[3.2.1]октан-3-ил]карбамат (10 мг), полученный на стадии 1 выше, растворяют в 1,4-диоксане (0,5 мл). При комнатной температуре туда добавляют (1-метилиндол-5-ил)бороновую кислоту (7,2 мг), Pd(dba)2 (0,9 мг), трикалийфосфат (8,8 мг) и раствор 1 M PCy3 в ТГФ (0,002 мл), и реакционную смесь перемешивают в микроволновом реакторе при 160°C в течение 30 минут. Реакционную смесь фильтруют через NH-силикагель, и растворитель фильтрата отгоняют. Остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем (подвижная фаза: гексан/этилацетат) с получением трет-бутил-N-[(3-экзо)-8-[3-(4-циано-3-фторфенил)-4-(1-метилиндол-5-ил)бензоил]-8-азабицикло[3.2.1]октан-3-ил]карбамата.
Стадия 3
Трет-бутил-N-[(3-экзо)-8-[3-(4-циано-3-фторфенил)-4-(1-метилиндол-5-ил)бензоил]-8-азабицикло[3.2.1]октан-3-ил]карбамат (15 мг), полученный на стадии 2 выше, растворяют в ТФК (0,3 мл) и прогресс реакции подтверждают ЖХМС с последующей вакуумной концентрацией. Остаток очищают ВЭЖХ с обращенной фазой (подвижная фаза: вода/ацетонитрил) с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 19: Синтез 4-[5-[(3S)-3-аминопирролидин-1-карбонил]-2-(п-толил)фенил]-2,6-дифторбензонитрила
Стадия 1
4-Бром-3-хлорбензойную кислоту (2 г) растворяют в ДМА (17 мл). При комнатной температуре туда добавляют ГАТУ (4,8 г), ТЭА (2.4 мл) и трет-бутил-N-[(3S)-пирролидин-3-ил]карбамат (1,7 г) с последующим перемешиванием при комнатной температуре в течение 1 часа. Туда добавляют этилацетат, и полученную смесь промывают последовательно водой и насыщенным раствором соли. После того, как органический слой сушат над сульфатом натрия, растворитель отгоняют. Остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем (подвижная фаза: гексан/этилацетат) с получением трет-бутил-N-[(3S)-1-(4-бром-3-хлорбензоил)пирролидин-3-ил]карбамата.
Стадия 2
Трет-бутил-N-[(3S)-1-(4-бром-3-хлорбензоил)пирролидин-3-ил]карбамат, полученный на стадии 1 выше, растворяют в 1,4-диоксане (10,6 мл). При комнатной температуре туда добавляют Pd(PPh3)4 (147 мг), 2 M Na2CO3 водный раствор (5,3 мл) и п-толилбороновую кислоту (693 мг), и реакционную смесь перемешивают в микроволновом реакторе при 120°C в течение 30 минут. Туда добавляют этилацетат, и полученную смесь промывают последовательно водой и насыщенным раствором соли. После того, как органический слой сушат над сульфатом натрия, растворитель отгоняют. Остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем (подвижная фаза: гексан/этилацетат) с получением трет-бутил-N-[(3S)-1-[3-хлор-4-(п-толил)бензоил]пирролидин-3-ил]карбамата.
Стадия 3
Трет-бутил-N-[(3S)-1-[3-хлор-4-(п-толил)бензоил]пирролидин-3-ил]карбамат (666 мг), полученный на стадии 2 выше, растворяют в 1,4-диоксане (16 мл). При комнатной температуре туда добавляют Pd(OAc)2 (36 мг), KOAc (473 мг), бис(пинаколато)диборон (815 мг) и раствор 1 M PCy3 в ТГФ (0,24 мл). После дегазации и замещения азотом смесь перемешивают при 80°C в течение ночи. Реакционную смесь пропускают через Целит, и растворитель фильтрата отгоняют. Остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем (подвижная фаза: гексан/этилацетат) с получением трет-бутил-N-[(3S)-1-[4-(п-толил)-3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензоил]пирролидин-3-ил]карбамата.
Стадия 4
Трет-бутил-N-[(3S)-1-[4-(п-толил)-3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензоил]пирролидин-3-ил]карбамат (15 мг), полученный на стадии 3 выше, 4-бром-2,6-дифторбензонитрил (12,9 мг) и Pd(PPh3)4 (1,7 мг) суспендируют в 1,4-диоксане (1,5 мл). При комнатной температуре туда добавляют 2 M Na2CO3 водный раствор (0,7 мл), и реакционную смесь перемешивают в микроволновом реакторе при 120°C в течение 30 минут. Реакционную смесь фильтруют, и растворитель отгоняют с получением трет-бутил-N-[(3S)-1-[3-(4-циано-3,5-дифторфенил)-4-(п-толил)бензоил]пирролидин-3-ил]карбамата.
Стадия 5
Трет-бутил-N-[(3S)-1-[3-(4-циано-3,5-дифторфенил)-4-(п-толил)бензоил]пирролидин-3-ил]карбамат (15 мг), полученный на стадии 4 выше, растворяют в ТФК (0,3 мл), и прогресс реакции подтверждают ЖХМС с последующей вакуумной концентрацией. Остаток очищают ВЭЖХ с обращенной фазой (подвижная фаза: вода/ацетонитрил) с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 20: Синтез 4-[5-[(3S)-3-аминопирролидин-1-карбонил]-2-[2-фтор-4-(2-метоксиэтил)фенил]фенил]-2-фторбензонитрила
Стадия 1
1-Бром-2-фтор-4-(2-метоксиэтил)бензол (4,5 г) суспендируют в 1,4-диоксане (48 мл) с последующим перемешиванием. Затем туда добавляют бис(пинаколато)диборон (7,4 г), KOAc (3,8 г) и PdCl2(dppf) (0,71 г), затем перемешивают при 90°C в течение ночи. Туда добавляют этилацетат, смесь пропускают через Целит и фильтрат промывают последовательно водой и насыщенным раствором соли. После того, как органический слой сушат над сульфатом натрия, растворитель отгоняют. Остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем (подвижная фаза: гексан/этилацетат) с получением 2-[2-фтор-4-(2-метоксиэтил)фенил]-4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолана.
Стадия 2
Трет-бутил-N-[(3S)-1-[4-хлор-3-(4-циано-3-фторфенил)бензоил]пирролидин-3-ил]карбамат (150 мг), полученный в примере 16 (стадия 1), 2-[2-фтор-4-(2-метоксиэтил)фенил]-4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан (189 мг), полученный на стадии 1 выше, Pd(dba)2 (15 мг), трикалийфосфат (144 мг) и раствор 1 M PCy3 в ТГФ (0,034 мл) растворяют в 1,4-диоксане (3,8 мл). Реакционную смесь перемешивают в микроволновом реакторе при 160°C в течение 45 минут. Реакционную смесь фильтруют через NH-силикагель, и растворитель фильтрата отгоняют. Остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем (подвижная фаза: гексан/этилацетат) с получением трет-бутил-N-[(3S)-1-[3-(4-цианофенил)-4-[2-фтор-4-(2-метоксиэтил)фенил]бензоил]пирролидин-3-ил]карбамата.
Стадия 3
Трет-бутил-N-[(3S)-1-[3-(4-цианофенил)-4-[2-фтор-4-(2-метоксиэтил)фенил]бензоил]пирролидин-3-ил]карбамат (150 мг), полученный на стадии 2 выше, растворяют в ТФК (10 мл), и прогресс реакции подтверждают ЖХМС с последующей вакуумной концентрацией. Остаток очищают ВЭЖХ с обращенной фазой (подвижная фаза: вода/ацетонитрил) с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 21: Синтез 4-[5-[(3-эндо)-3-амино-8-азабицикло[3.2.1]октан-8-карбонил]-2-(2-фтор-4-метилфенил)фенил]-2-фторбензонитрила
Методику стадий 1-4 из Примера 17 проводят с применением (2-фтор-4-метилфенил)бороновой кислоты вместо п-толилбороновой кислоты с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 22: Синтез 4-[5-[(3-эндо)-3-амино-8-азабицикло[3.2.1]октан-8-карбонил]-2-[2-фтор-4-(2-метоксиэтил)фенил]фенил]-2-фторбензонитрила
Стадия 1
Трет-бутил-3-бром-4-хлорбензоат (1,00 г), полученный в примере 1 (стадия 1), растворяют в 1,4-диоксане (8,6 мл). При комнатной температуре туда добавляют (4-циано-3-фторфенил)бороновую кислоту (509 мг), Pd(PPh3)4 (119 мг) и 2 M Na2CO3 водный раствор (4,3 мл), и реакционную смесь перемешивают в микроволновом реакторе при 120°C в течение 30 минут. Реакционную смесь фильтруют и растворитель отгоняют. Остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем (подвижная фаза: гексан/этилацетат) с получением трет-бутил-4-хлор-3-(4-циано-3-фторфенил)бензоата.
Стадия 2
Трет-бутил-4-хлор-3-(4-циано-3-фторфенил)бензоат (1,00 г), полученный на стадии 1 выше, растворяют в 1,4-диоксане (15 мл). При комнатной температуре туда добавляют 2-[2-фтор-4-(2-метоксиэтил)фенил]-4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан (1,69 г), полученный в примере 20 (стадия 1), Pd(dba)2 (138 мг), трикалийфосфат (1,28 г) и раствор 1 M PCy3 в ТГФ (0,30 мл), и реакционную смесь перемешивают в микроволновом реакторе при 160°C в течение 30 минут. После добавления хлороформа нерастворимое вещество отфильтровывают и растворитель отгоняют. Остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем (подвижная фаза: гексан/этилацетат) и растворитель отгоняют. Остаток растворяют в ТФК (2 мл) и растворитель отгоняют. Туда добавляют этилацетат, и смесь промывают последовательно водой и насыщенным раствором соли. После того, как органический слой сушат над сульфатом натрия, растворитель отгоняют с получением 3-(4-циано-3-фторфенил)-4-[2-фтор-4-(2-метоксиэтил)фенил]бензойной кислоты.
Стадия 3
3-(4-Циано-3-фторфенил)-4-[2-фтор-4-(2-метоксиэтил)фенил]бензойную кислоту (10 мг), полученную на стадии 2 выше, трет-бутил-N-[(3-эндо)-8-азабицикло[3.2.1]октан-3-ил]карбамат (5,8 мг) и ГАТУ (19 мг) растворяют в ТГФ (0,5 мл). При комнатной температуре туда добавляют ТЭА (0,007 мл), затем перемешивают при 50°C в течение ночи. Реакционную смесь концентрируют в вакууме и растворитель отгоняют. Остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем (подвижная фаза: гексан/этилацетат) с получением трет-бутил-N-[(3-эндо)-8-[3-(4-циано-3-фторфенил)-4-[2-фтор-4-(2-метоксиэтил)фенил]бензоил]-8-азабицикло[3.2.1]октан-3-ил]карбамата.
Стадия 4
Трет-бутил-N-[(3-эндо)-8-[3-(4-циано-3-фторфенил)-4-[2-фтор-4-(2-метоксиэтил)фенил]бензоил]-8-азабицикло[3.2.1]октан-3-ил]карбамат (10,9 мг), полученный на стадии 3 выше, растворяют в ТФК (0,3 мл) и прогресс реакции подтверждают ЖХМС с последующей вакуумной концентрацией. Остаток очищают ВЭЖХ с обращенной фазой (подвижная фаза: вода/ацетонитрил) с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 23: Синтез 4-[5-[(3-экзо)-3-амино-8-азабицикло[3.2.1]октан-8-карбонил]-2-(6-фтор-1-метилиндол-5-ил)фенил]-2-фторбензонитрила
Стадия 1
Трет-бутил-N-[(3-экзо)-8-[4-хлор-3-(4-циано-3-фторфенил)бензоил]-8-азабицикло[3.2.1]октан-3-ил]карбамат (270 мг), полученный в примере 18 (стадия 1), растворяют в 1,4-диоксане (2,8 мл). При комнатной температуре туда добавляют Pd(OAc)2 (2,5 мг), KOAc (164 мг), бис(пинаколато)диборон (283 мг) и Silica-SMAP (4,6 мг), затем перемешивают при 150°C в течение ночи. Смесь пропускают через Целит, и фильтрат концентрируют в вакууме. Остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем (подвижная фаза: гексан/этилацетат) с получением трет-бутил-N-[(3-экзо)-8-[3-(4-циано-3-фторфенил)-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензоил]-8-азабицикло[3.2.1]октан-3-ил]карбамата.
Стадия 2
Трет-бутил-N-[(3-экзо)-8-[3-(4-циано-3-фторфенил)-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензоил]-8-азабицикло[3.2.1]октан-3-ил]карбамат (10 мг), полученный на стадии 1 выше, 5-бром-6-фтор-1-метилиндол (4,8 мг) и PdCl2(dppf) (0,71 мг) суспендируют в 1,4-диоксане (0,5 мл). При комнатной температуре туда добавляют трикалийфосфат (11 мг), затем перемешивают при 125°C в течение 45 минут. После фильтрации реакционной смеси растворитель отгоняют с получением трет-бутил-N-[(3-экзо)-8-[3-(4-циано-3-фторфенил)-4-(6-фтор-1-метилиндол-5-ил)бензоил]-8-азабицикло[3.2.1]октан-3-ил]карбамата.
Стадия 3
Трет-бутил-N-[(3-экзо)-8-[3-(4-циано-3-фторфенил)-4-(6-фтор-1-метилиндол-5-ил)бензоил]-8-азабицикло[3.2.1]октан-3-ил]карбамат (8 мг), полученный на стадии 2 выше, растворяют в ТФК (0,3 мл) и прогресс реакции подтверждают ЖХМС с последующей вакуумной концентрацией. Остаток очищают ВЭЖХ с обращенной фазой (подвижная фаза: вода/ацетонитрил) с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 24: Синтез 4-[5-[(3-экзо)-3-амино-8-азабицикло[3.2.1]октан-8-карбонил]-2-(6-фтор-1-метилиндазол-5-ил)фенил]-2-фторбензонитрила
Стадия 1
Трет-бутил-N-[(3-экзо)-8-[3-(4-циано-3-фторфенил)-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензоил]-8-азабицикло[3.2.1]октан-3-ил]карбамат (10 мг), полученный в примере 23 (стадия 1), растворяют в 1,4-диоксане (0,5 мл). При комнатной температуре туда добавляют 5-бром-6-фтор-1-метилиндазол (4,8 мг), PdCl2(dppf) (0,71 мг) и трикалийфосфат (11 мг), и смесь перемешивают в микроволновом реакторе при 125°C в течение 45 минут. Реакционную смесь фильтруют, и растворитель отгоняют с получением трет-бутил-N-[(3-экзо)-8-[3-(4-циано-3-фторфенил)-4-(6-фтор-1-метилиндазол-5-ил)бензоил]-8-азабицикло[3.2.1]октан-3-ил]карбамата.
Стадия 2
Трет-бутил-N-[(3-экзо)-8-[3-(4-циано-3-фторфенил)-4-(6-фтор-1-метилиндазол-5-ил)бензоил]-8-азабицикло[3.2.1]октан-3-ил]карбамат (15 мг), полученный на стадии 1 выше, растворяют в ТФК (0,3 мл) и прогресс реакции подтверждают ЖХМС с последующей вакуумной концентрацией. Остаток очищают ВЭЖХ с обращенной фазой (подвижная фаза: вода/ацетонитрил) с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 25: Синтез 4-[5-[(3S)-3-амино-3-метилпирролидин-1-карбонил]-2-[2-фтор-4-(2-метоксиэтил)фенил]фенил]-2-фторбензонитрила
Стадия 1
3-(4-Циано-3-фторфенил)-4-[2-фтор-4-(2-метоксиэтил)фенил]бензойную кислоту (10 мг), полученную в примере 22 (стадия 2), и трет-бутил-N-[(3S)-3-метилпирролидин-3-ил]карбамат (5,1 мг) растворяют в ТГФ (0,5 мл). При комнатной температуре туда добавляют ТЭА (0,011 мл) и ГАТУ (19 мг), затем перемешивают при 50°C в течение ночи. Реакционную смесь концентрируют в вакууме, и растворитель отгоняют с получением трет-бутил-N-[(3S)-1-[3-(4-циано-3-фторфенил)-4-[2-фтор-4-(2-метоксиэтил)фенил]бензоил]-3-метилпирролидин-3-ил]карбамата.
Стадия 2
Трет-бутил-N-[(3S)-1-[3-(4-циано-3-фторфенил)-4-[2-фтор-4-(2-метоксиэтил)фенил]бензоил]-3-метилпирролидин-3-ил]карбамат (15 мг), полученный на стадии 1 выше, растворяют в ТФК (0,3 мл) и прогресс реакции подтверждают ЖХМС с последующей вакуумной концентрацией. Остаток очищают ВЭЖХ с обращенной фазой (подвижная фаза: вода/ацетонитрил) с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 26: Синтез 4-[5-[(3-экзо)-3-амино-8-азабицикло[3.2.1]октан-8-карбонил]-2-[2-фтор-4-(2-метоксиэтил)фенил]фенил]-2-фторбензонитрила
Стадия 1
3-(4-Циано-3-фторфенил)-4-[2-фтор-4-(2-метоксиэтил)фенил]бензойную кислоту (10 мг), полученную в примере 22 (стадия 2), и трет-бутил-N-[(3-экзо)-8-азабицикло[3.2.1]октан-3-ил]карбамат (5,8 мг) растворяют в ТГФ (0,5 мл). При комнатной температуре туда добавляют ТЭА (0,011 мл) и ГАТУ (19 мг), затем перемешивают при 50°C в течение ночи. Реакционную смесь концентрируют в вакууме, и растворитель отгоняют с получением трет-бутил-N-[(3-экзо)-8-[3-(4-циано-3-фторфенил)-4-[2-фтор-4-(2-метоксиэтил)фенил]бензоил]-8-азабицикло[3.2.1]октан-3-ил]карбамата.
Стадия 2
Трет-бутил-N-[(3-экзо)-8-[3-(4-циано-3-фторфенил)-4-[2-фтор-4-(2-метоксиэтил)фенил]бензоил]-8-азабицикло[3.2.1]октан-3-ил]карбамат (15 мг), полученный на стадии 1 выше, растворяют в ТФК (0,3 мл) и прогресс реакции подтверждают ЖХМС с последующей вакуумной концентрацией. Остаток очищают ВЭЖХ с обращенной фазой (подвижная фаза: вода/ацетонитрил) с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 27: Синтез 4-[5-(3,8-диазабицикло[3.2.1]октан-8-карбонил)-2-[2-фтор-4-(2-метоксиэтил)фенил]фенил]-2-фторбензонитрила
Методику стадий 1-4 из Примера 22 проводят с применением трет-бутил-3,8-диазабицикло[3.2.1]октан-3-карбоновой кислоты вместо трет-бутил-N-[(3-эндо)-8-азабицикло[3.2.1]октан-3-ил]карбамата с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 28: Синтез 4-[5-[(3-экзо)-3-амино-8-азабицикло[3.2.1]октан-8-карбонил]-2-[2-фтор-4-(2-гидрокси-2-метилпропил)фенил]фенил]-2-фторбензонитрила
Стадия 1
Метил-2-(4-бром-3-фторфенил)ацетат (500 мг) растворяют в ТГФ (2,2 мл). При -30°C туда по каплям добавляют раствор 3 M MeMgBr в простом эфире (5,40 мл) с последующим перемешиванием при комнатной температуре в течение ночи. Реакционную смесь вводят в водный раствор хлорида аммония, туда добавляют этилацетат и смесь промывают последовательно водой и насыщенным раствором соли. После того, как органический слой сушат над сульфатом натрия, растворитель отгоняют. Остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем (подвижная фаза: этилацетат/гексан=10%→50%) с получением 1-(4-бром-3-фторфенил)-2-метилпропан-2-ола.
Стадия 2
Трет-бутил-N-[(3-экзо)-8-[3-(4-циано-3-фторфенил)-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензоил]-8-азабицикло[3.2.1]октан-3-ил]карбамат (68 мг), полученный в примере 23 (стадия 1), 1-(4-бром-3-фторфенил)-2-метилпропан-2-ол (107 мг), полученный на стадии 1 выше, и Pd(PPh3)4 (6,42 мг) суспендируют в 1,4-диоксане (0,93 мл). При комнатной температуре туда добавляют 2 M Na2CO3 водный раствор (0,46 мл), затем перемешивают при 125°C в течение 45 минут. После фильтрации реакционной смеси, растворитель отгоняют с получением трет-бутил-N-[(3-экзо)-8-[3-(4-циано-3-фторфенил)-4-[2-фтор-4-(2-гидрокси-2-метилпропил)фенил]бензоил]-8-азабицикло[3.2.1]октан-3-ил]карбамата.
Стадия 3
Трет-бутил-N-[(3-экзо)-8-[3-(4-циано-3-фторфенил)-4-[2-фтор-4-(2-гидрокси-2-метилпропил)фенил]бензоил]-8-азабицикло[3.2.1]октан-3-ил]карбамат (90 мг), полученный на стадии 2 выше, растворяют в ТФК (0,3 мл), и прогресс реакции подтверждают ЖХМС с последующей вакуумной концентрацией. Остаток очищают ВЭЖХ с обращенной фазой (подвижная фаза: вода/ацетонитрил) с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 29: Синтез 4-[5-[(3S)-3-аминопирролидин-1-карбонил]-2-[4-(гидроксиметил)фенил]фенил]бензонитрил
Стадия 1
[4-(4,4,5,5-Тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенил]метанол (500 мг) и ДМАП (26 мг) растворяют в ТГФ (7,1 мл), затем добавляют ТЭА (0,74 мл). При комнатной температуре туда добавляют ацетилхлорид (0,23 мл) с последующим перемешиванием в течение 1 часа. Туда добавляют этилацетат и полученную смесь промывают последовательно водой и насыщенным раствором соли. После того, как органический слой сушат над сульфатом натрия, растворитель отгоняют. Остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем (подвижная фаза: гексан/этилацетат) с получением [4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенил]метилацетата.
Стадия 2
Трет-бутил-N-[(3S)-1-[4-хлор-3-(4-цианофенил)бензоил]пирролидин-3-ил]карбамат (100 мг), полученный в примере 9 (стадия 2), и [4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенил]метилацетат (130 мг), полученный на стадии 1 выше, растворяют в 1,4-диоксане (1,2 мл). При комнатной температуре туда добавляют Pd(dba)2 (6,8 мг), трикалийфосфат (100 мг) и раствор 1 M PCy3 в ТГФ (0,02 мл) и смесь перемешивают в микроволновом реакторе при 160°C в течение 1 часа. Реакционную смесь фильтруют через NH-силикагель и растворитель фильтрата отгоняют. Остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем (подвижная фаза: этилацетат/гексан=30%→100%) с получением [4-[4-[(3S)-3-(трет-бутоксикарбониламино)пирролидин-1-карбонил]-2-(4-цианофенил)фенил]фенил]метилацетата.
Стадия 3
[4-[4-[(3S)-3-(Трет-бутоксикарбониламино)пирролидин-1-карбонил]-2-(4-цианофенил)фенил]фенил]метилацетат (100 мг), полученный на стадии 2 выше, растворяют в MeOH (2 мл). При комнатной температуре туда добавляют K2CO3 (65 мг) с последующим перемешиванием при комнатной температуре в течение 30 минут. Туда добавляют хлороформ, смесь промывают последовательно насыщенным водным раствором хлорида аммония и насыщенным раствором соли и сушат над безводным сульфатом натрия, и растворитель отгоняют. Остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем (подвижная фаза: этилацетат/гексан=40%→100%) с получением трет-бутил-N-[(3S)-1-[3-(4-цианофенил)-4-[4-(гидроксиметил)фенил]бензоил]пирролидин-3-ил]карбамата.
Стадия 4
Трет-бутил-N-[(3S)-1-[3-(4-цианофенил)-4-[4-(гидроксиметил)фенил]бензоил]пирролидин-3-ил]карбамат (15 мг), полученный на стадии 3 выше, растворяют в ТФК (0,3 мл), и прогресс реакции подтверждают ЖХМС с последующей вакуумной концентрацией. Остаток очищают ВЭЖХ с обращенной фазой (подвижная фаза: вода/ацетонитрил) с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 30: Синтез 4-[5-[(3S)-3-аминопирролидин-1-карбонил]-2-[4-(2-метоксиэтил)фенил]фенил]бензонитрила
Стадия 1
1-Бром-4-(2-метоксиэтил)бензол (450 мг) растворяют в 1,4-диоксане (5,2 мл). Затем туда добавляют бис(пинаколато)диборон (797 мг), KOAc (411 мг) и PdCl2(dppf) (77 мг), затем перемешивают при 90°C в течение ночи. Туда добавляют этилацетат, смесь пропускают через Целит и фильтрат промывают последовательно водой и насыщенным раствором соли. После того, как органический слой сушат над сульфатом натрия, растворитель отгоняют. Остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем (подвижная фаза: этилацетат/гексан=2%→20%) с получением 2-[4-(2-метоксиэтил)фенил]-4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолана.
Стадия 2
Трет-бутил-N-[(3S)-1-[4-хлор-3-(4-цианофенил)бензоил]пирролидин-3-ил]карбамат (300 мг), полученный в примере 9 (стадия 2), и 2-[4-(2-метоксиэтил)фенил]-4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксабороланe (369 мг), полученный на стадии 1 выше, растворяют в 1,4-диоксане (2 мл). При комнатной температуре туда добавляют Pd(dba)2 (32 мг), трикалийфосфат (300 мг) и раствор 1 M PCy3 в ТГФ (0,07 мл), и смесь перемешивают в микроволновом реакторе при 160°C в течение 45 минут. Реакционную смесь пропускают через Целит, и растворитель фильтрата отгоняют. Остаток очищают ВЭЖХ с обращенной фазой (подвижная фаза: вода/ацетонитрил) с получением трет-бутил-N-[(3S)-1-[3-(4-цианофенил)-4-[4-(2-метоксиэтил)фенил]бензоил]пирролидин-3-ил]карбамата.
Стадия 3
Трет-бутил-N-[(3S)-1-[3-(4-цианофенил)-4-[4-(2-метоксиэтил)фенил]бензоил]пирролидин-3-ил]карбамат (15 мг), полученный на стадии 2 выше, растворяют в ТФК (0,3 мл) и прогресс реакции подтверждают ЖХМС с последующей вакуумной концентрацией. Остаток очищают ВЭЖХ с обращенной фазой (подвижная фаза: вода/ацетонитрил) с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 31: Синтез 4-[5-[(3S)-3-аминопирролидин-1-карбонил]-2-[4-(2-гидроксиэтил)фенил]фенил]бензонитрила
Методику стадий 1-4 из Примера 29 проводят с применением 2-[4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенил]этанола вместо [4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенил]метанола с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 32: Синтез 4-[5-[(3S)-3-аминопирролидин-1-карбонил]-2-[4-(3-гидроксипропил)фенил]фенил]бензонитрил
Методику стадий 1-4 из Примера 29 проводят с применением 3-[4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенил]пропан-1-ола вместо [4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенил]метанола с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 33: Синтез 4-[5-[(3S)-3-аминопирролидин-1-карбонил]-2-[4-[1-(гидроксиметил)циклопропил]фенил]фенил]бензонитрила
Методику стадий 1-5 из Примера 9 проводят с применением (1-(4-бромфенил)циклопропил)метанола вместо 1-бром-2-хлор-4-метилбензола с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 34: Синтез 4-[5-[(3S)-3-аминопирролидин-1-карбонил]-2-[4-(2-гидрокси-2-метилпропил)фенил]фенил]бензонитрила
Методику стадий 1-5 из Примера 9 проводят с применением 1-(4-бромфенил)-2-метилпропан-2-ола вместо 1-бром-2-хлор-4-метилбензола с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 35: Синтез 4-[5-[(3S)-3-аминопирролидин-1-карбонил]-2-[4-(2-гидроксипропокси)фенил]фенил]бензонитрила
Стадия 1
Методику стадии 1 из Примера 12 проводят с применением (4-бензилоксифенил)бороновой кислоты вместо пинаколового эфира 4-метил-2-нитрофенилбороновой кислоты с получением трет-бутил-N-[(3S)-1-[4-(4-бензилоксифенил)-3-(4-цианофенил)бензоил]пирролидин-3-ил]карбамата.
Стадия 2
Трет-бутил-N-[(3S)-1-[4-(4-бензилоксифенил)-3-(4-цианофенил)бензоил]пирролидин-3-ил]карбамат (800 мг), полученный на стадии 1 выше, и гидроксид палладия-углерод (160 мг) суспендируют в EtOH (20 мл) и проводят замещение водорода с последующим перемешиванием при комнатной температуре в течение 6 часов. Реакционную смесь пропускают через Целит, и растворитель отгоняют. Остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем (подвижная фаза: гексан/этилацетат) с получением трет-бутил-N-[(3S)-1-[3-(4-цианофенил)-4-(4-гидроксифенил)бензоил]пирролидин-3-ил]карбамата.
Стадия 3
Трет-бутил-N-[(3S)-1-[3-(4-цианофенил)-4-(4-гидроксифенил)бензоил]пирролидин-3-ил]карбамат (15 мг), полученный на стадии 2 выше, растворяют в ДМФ (0,5 мл). При комнатной температуре туда добавляют K2CO3 (6,4 мг) и 2-метилоксиран (5,4 мг), затем перемешивают при 120°C в течение 2 часов. Туда добавляют этилацетат, полученную смесь промывают последовательно водой и насыщенным раствором соли и сушат над безводным сульфатом натрия и растворитель отгоняют. Остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем (подвижная фаза: гексан/этилацетат) с получением трет-бутил-N-[(3S)-1-[3-(4-цианофенил)-4-[4-(2-гидроксипропокси)фенил]бензоил]пирролидин-3-ил]карбамата.
Стадия 4
Трет-бутил-N-[(3S)-1-[3-(4-цианофенил)-4-[4-(2-гидроксипропокси)фенил]бензоил]пирролидин-3-ил]карбамат (15 мг), полученный на стадии 3 выше, растворяют в ТФК (0,3 мл) и прогресс реакции подтверждают ЖХМС с последующей вакуумной концентрацией. Остаток очищают ВЭЖХ с обращенной фазой (подвижная фаза: вода/ацетонитрил) с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 36: Синтез 4-[5-[(3S)-3-аминопирролидин-1-карбонил]-2-(2-фтор-4-метилфенил)фенил]-2-фторбензонитрила
Методику стадий 1-3 из Примера 16 проводят с применением (2-фтор-4-метилфенил)бороновой кислоты вместо п-толилбороновой кислоты с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 37: Синтез 4-[5-[(3S)-3-аминопирролидин-1-карбонил]-2-[2-фтор-4-(2-гидрокси-2-метилпропил)фенил]фенил]-2-фторбензонитрила
Стадия 1
Трет-бутил-N-[(3S)-1-[4-хлор-3-(4-циано-3-фторфенил)бензоил]пирролидин-3-ил]карбамат (4 г), полученный в примере 16 (стадия 1), растворяют в 1,4-диоксане (45 мл). При комнатной температуре туда добавляют Pd(OAc)2 (0,40 г), KOAc (2,7 г), бис(пинаколато)диборон (4,6 г) и Silica-SMAP (0,72 г), затем перемешивают при 150°C в течение 18 часов. Реакционную смесь фильтруют и растворитель отгоняют. Остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем (подвижная фаза: гексан/этилацетат) с получением трет-бутил-N-[(3S)-1-[3-(4-циано-3-фторфенил)-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензоил]пирролидин-3-ил]карбамата.
Стадия 2
Трет-бутил-N-[(3S)-1-[3-(4-циано-3-фторфенил)-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензоил]пирролидин-3-ил]карбамат (30 мг), полученный на стадии 1 выше, и 1-(4-бром-3-фторфенил)-2-метилпропан-2-ол (28 мг), полученный в примере 28 (стадия 1), растворяют в 1,4-диоксане (0,8 мл). При комнатной температуре туда добавляют Pd(PPh3)4 (3,2 мг) и 2 M Na2CO3 водный раствор (0,4 мл), и смесь перемешивают в микроволновом реакторе при 120°C в течение 30 минут. Реакционную смесь фильтруют и растворитель отгоняют. Туда добавляют этилацетат, полученную смесь промывают последовательно водой и насыщенным раствором соли и сушат над безводным сульфатом натрия и растворитель отгоняют. Остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем (подвижная фаза: хлороформ/метанол) с получением трет-бутил-N-[(3S)-1-[3-(4-циано-3-фторфенил)-4-[2-фтор-4-(2-гидрокси-2-метилпропил)фенил]бензоил]пирролидин-3-ил]карбамата.
Стадия 3
Трет-бутил-N-[(3S)-1-[3-(4-циано-3-фторфенил)-4-[2-фтор-4-(2-гидрокси-2-метилпропил)фенил]бензоил]пирролидин-3-ил]карбамат (20 мг), полученный на стадии 2 выше, растворяют в MeOH (1 мл). При комнатной температуре туда добавляют 12 M HCl водный раствор (1 мл) с последующим перемешиванием при комнатной температуре в течение 30 минут. Реакционную смесь нейтрализуют добавлением воды (1 мл) и 2 M водного раствора гидроксида натрия (6 мл). Туда добавляют хлороформ, смесь промывают последовательно водой и насыщенным раствором соли и сушат над безводным сульфатом натрия. Затем растворитель отгоняют с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 38: Синтез 2-фтор-4-[2-[2-фтор-4-(2-метоксиэтил)фенил]-5-(9-окса-2,6-диазаспиро[3.5]нонан-2-карбонил)фенил]бензонитрил
Методику стадий 1-4 из Примера 22 проводят с применением трет-бутил-9-окса-2,6-диазаспиро[3.5]нонан-6-карбоновой кислоты вместо трет-бутил-N-[(3-эндо)-8-азабицикло[3.2.1]октан-3-ил]карбамата с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 39: Синтез 4-[5-(2,3,3a,4,6,6a-гексагидро-1H-пирроло[3,4-c]пиррол-5-карбонил)-2-[2-фтор-4-(2-метоксиэтил)фенил]фенил]-2-фторбензонитрила
Методику стадий 1-4 из Примера 22 проводят с применением трет-бутил-2,3,3a,4,6,6a-гексагидро-1H-пирроло[3,4-c]пиррол-5-карбоновой кислоты вместо трет-бутил-N-[(3-эндо)-8-азабицикло[3.2.1]октан-3-ил]карбамата с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 40: 4-[5-[(3S)-3-аминопирролидин-1-карбонил]-2-[4-(2-гидрокси-2-метилпропил)фенил]фенил]-2-фторбензонитрила
Методику стадий 1-3 из Примера 37 проводят с применением 1-(4-бромфенил)-2-метилпропан-2-ола вместо 1-(4-бром-3-фторфенил)-2-метил-пропан-2-ола с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 41: Синтез 4-[5-[(3-эндо)-3-амино-8-азабицикло[3.2.1]октан-8-карбонил]-2-[2-фтор-4-(2-гидрокси-2-метилпропил)фенил]фенил]-2-фторбензонитрила
Стадия 1
Трет-бутил-4-хлор-3-(4-циано-3-фторфенил)бензоат (300 мг), полученный в примере 22 (стадия 1), растворяют в 1,4-диоксане (5 мл). При комнатной температуре туда добавляют Pd(OAc)2 (40 мг), KOAc (300 мг), бис(пинаколато)диборон (500 мг) и Silica-SMAP (50 мг), затем перемешивают при 100°C в течение 26 часов. Реакционную смесь фильтруют и растворитель отгоняют. Остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем (подвижная фаза: гексан/этилацетат) с получением трет-бутил-3-(4-циано-3-фторфенил)-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензоата.
Стадия 2
Трет-бутил-3-(4-циано-3-фторфенил)-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензоат (100 мг), полученный на стадии 1 выше, растворяют в ДХМ (1,2 мл). При комнатной температуре туда добавляют ТФК (1,00 мл) с последующим перемешиванием при комнатной температуре в течение 30 минут. Реакционную смесь концентрируют в вакууме и растворитель отгоняют. Туда добавляют хлороформ, смесь промывают водой и сушат над безводным сульфатом натрия и растворитель отгоняют с получением 3-(4-циано-3-фторфенил)-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензойной кислоты.
Стадия 3
3-(4-Циано-3-фторфенил)-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензойную кислоту (500 мг), полученную на стадии 2 выше, и трет-бутил-N-[(3-эндо)-8-азабицикло[3.2.1]октан-3-ил]карбамат (308 мг) растворяют в ТГФ (4,5 мл). При комнатной температуре туда добавляют ТЭА (0,57 мл) и ГАТУ (1 г), затем перемешивают при 50°C в течение 1 часа. Реакционную смесь концентрируют в вакууме и остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем (подвижная фаза: гексан/этилацетат) с получением трет-бутил-N-[(3-эндо)-8-[3-(4-циано-3-фторфенил)-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензоил]-8-азабицикло[3.2.1]октан-3-ил]карбамата.
Стадия 4
Трет-бутил-N-[(3-эндо)-8-[3-(4-циано-3-фторфенил)-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензоил]-8-азабицикло[3.2.1]октан-3-ил]карбамат (30 мг), полученный на стадии 3 выше, и 1-(4-бром-3-фторфенил)-2-метил-пропан-2-ол (19 мг), полученный в примере 28 (стадия 1), растворяют в 1,4-диоксане (0,5 мл). При комнатной температуре туда добавляют Pd(PPh3)4 (18 мг) и 2 M Na2CO3 водный раствор (0,3 мл), и смесь перемешивают в микроволновом реакторе при 120°C в течение 30 минут. Надосадочную жидкость реакционной смеси собирают и фильтруют через NH-силикагель, и растворитель отгоняют с получением трет-бутил-N-[(3-эндо)-8-[3-(4-циано-3-фторфенил)-4-[2-фтор-4-(2-гидрокси-2-метилпропил)фенил]бензоил]-8-азабицикло[3.2.1]октан-3-ил]карбамата.
Стадия 5
Трет-бутил-N-[(3-эндо)-8-[3-(4-циано-3-фторфенил)-4-[2-фтор-4-(2-гидрокси-2-метилпропил)фенил]бензоил]-8-азабицикло[3.2.1]октан-3-ил]карбамат (15 мг), полученный на стадии 4 выше, растворяют в MeOH (0,5 мл). При комнатной температуре туда добавляют 12 M HCl водный раствор (0,5 мл) с последующим перемешиванием при комнатной температуре в течение 30 минут. Затем туда добавляют воду и 2 M водный раствор гидроксида натрия (3 мл), и смесь разделяют и экстрагируют хлороформом. После того, как органический слой сушат над сульфатом натрия, растворитель отгоняют. Остаток очищают ВЭЖХ с обращенной фазой (подвижная фаза: вода/ацетонитрил) с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 42: Синтез 4-[5-[(3S)-3-(метиламино)пирролидин-1-карбонил]-2-(п-толил)фенил]бензонитрила
Методику стадий 1-5 в Примере 1 проводят с применением (S)-трет-бутилметил(пирролидин-3-ил)карбамата вместо трет-бутил-N-[(3S)-пирролидин-3-ил]карбамата с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 43: Синтез 4-[5-[(3S)-3-аминопирролидин-1-карбонил]-2-(4-бензилоксифенил)фенил]бензонитрила
Методику стадий 1-5 из Примера 9 проводят с применением 1-(бензилокси)-4-бромбензола вместо 1-бром-2-хлор-4-метилбензола с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 44: Синтез 1-[4-[4-[(3S)-3-аминопирролидин-1-карбонил]-2-(4-цианофенил)фенил]фенил]-N-фенилциклопропанкарбоксамида
Методику стадий 1-5 из Примера 9 проводят с применением 1-(4-бромфенил)-N-фенилциклопропанкарбоксамида вместо 1-бром-2-хлор-4-метилбензола с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 45: Синтез 2-[4-[4-[(3S)-3-аминопирролидин-1-карбонил]-2-(4-цианофенил)фенил]фенил]этилацетата
Стадия 1
Методику стадии 1 из Примера 29 проводят с применением 2-(4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенил)этанола вместо [4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенил]метанола с получением 4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенэтилацетата.
Стадия 2
Методику стадий 1-2 из Примера 12 проводят с применением 4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенэтилацетата, полученного на стадии 1 выше, вместо пинаколового эфира 4-метил-2-нитрофенилбороновой кислоты с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 46: Синтез 4-[2-[4-(2-гидроксиэтил)фенил]-5-[(3S)-3-(метиламино)пирролидин-1-карбонил]фенил]бензонитрила
Стадия 1
Методику стадий 1-5 из Примера 1 проводят с применением 4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенэтилацетата, полученного в примере 45 (стадия 1), вместо п-толилбороновой кислоты и с применением (S)-трет-бутилметил(пирролидин-3-ил)карбамата вместо трет-бутил-N-[(3S)-пирролидин-3-ил]карбамата с получением 2-[4-[2-(4-цианофенил)-4-[(3S)-3-(метиламино)пирролидин-1-карбонил]фенил]фенил]этилацетата.
Стадия 2
Методику стадии 3 из Примера 29 проводят с применением 2-[4-[2-(4-цианофенил)-4-[(3S)-3-(метиламино)пирролидин-1-карбонил]фенил]фенил]этилацетата, полученного на стадии 1 выше, вместо [4-[4-[(3S)-3-(трет-бутоксикарбониламино)пирролидин-1-карбонил]-2-(4-цианофенил)фенил]фенил]метилацетата с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 47: Синтез 4-[2-[4-(2-метоксиэтил)фенил]-5-[(3S)-3-(метиламино)пирролидин-1-карбонил]фенил]бензонитрила
Стадия 1
Методику стадий 1-5 из Примера 1 проводят с применением (4-(2-метоксиэтил)фенил)бороновой кислоты вместо п-толилбороновой кислоты и с применением (S)-трет-бутилметил(пирролидин-3-ил)карбамата вместо трет-бутил-N-[(3S)-пирролидин-3-ил]карбамата с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 48: Синтез 4-[5-[(3S)-3-(диметиламино)пирролидин-1-карбонил]-2-[4-[1-(гидроксиметил)циклопропил]фенил]фенил]бензонитрила
Методику стадий 1-4 из Примера 1 проводят с применением [4-[1-(гидроксиметил)циклопропил]фенил]бороновой кислоты вместо п-толилбороновой кислоты и с применением (S)-N, N-диметилпирролидин-3-амина вместо трет-бутил-N-[(3S)-пирролидин-3-ил]карбамата с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 49: Синтез 4-[5-[(3S)-3-аминопирролидин-1-карбонил]-2-(3-фтор-4-метилфенил)фенил]бензонитрил
Методику стадий 1-2 из Примера 12 проводят с применением (3-фтор-4-метилфенил)бороновой кислоты вместо пинаколового эфира 4-метил-2-нитрофенилбороновой кислоты с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 50: Синтез 4-[5-[(3S)-3-аминопирролидин-1-карбонил]-2-(4-хлорфенил)фенил]бензонитрил
Методику стадий 1-5 из Примера 9 проводят с применением 1-бром-4-хлорбензола вместо 1-бром-2-хлор-4-метилбензола с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 51: Синтез 4-[5-[(3S)-3-аминопирролидин-1-карбонил]-2-(4-бромфенил)фенил]бензонитрила
Методику стадий 1-5 из Примера 9 проводят с применением 1,4-дибромбензола вместо 1-бром-2-хлор-4-метилбензола с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 52: Синтез 5'-((1S,4S)-2,5-диазабицикло[2,2,1]гептан-2-карбонил)-4''-метил-[1,1':2',1''-терфенил]-4-карбонитрила
Методику стадий 1-5 из Примера 1 проводят с применением трет-бутил-(1S,4S)-2,5-диазабицикло[2.2.1]гептан-2-карбоксилата вместо трет-бутил-N-[(3S)-пирролидин-3-ил]карбамата с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 53: Синтез 4-[2-[4-(2-аминоэтил)фенил]-5-[(3S)-3-аминопирролидин-1-карбонил]фенил]бензонитрила
Стадия 1
Трет-бутил-N-[(3S)-1-[3-(4-цианофенил)-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензоил]пирролидин-3-ил]карбамат (50 мг), полученный в примере 9 (стадия 3), растворяют в 1,4-диоксане (0,48 мл). При комнатной температуре туда добавляют 2-(4-бромфенил)этанамин (29 мг), Pd(PPh3)4 (3,4 мг) и 2 M Na2CO3 водный раствор (0,24 мл), и смесь перемешивают в микроволновом реакторе при 120°C в течение 30 минут. Остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем (подвижная фаза: гексан/этилацетат) с получением трет-бутил-N-[(3S)-1-[4-[4-(2-аминоэтил)фенил]-3-(4-цианофенил)бензоил]пирролидин-3-ил]карбамата.
Стадия 2
Трет-бутил-N-[(3S)-1-[4-[4-(2-аминоэтил)фенил]-3-(4-цианофенил)бензоил]пирролидин-3-ил]карбамат (15 мг), полученный на стадии 1 выше, растворяют в ТФК (0,3 мл) и прогресс реакции подтверждают ЖХМС с последующей вакуумной концентрацией. Остаток очищают ВЭЖХ с обращенной фазой (подвижная фаза: вода/ацетонитрил) с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 54: Синтез 4-[5-[(3S)-3-аминопирролидин-1-карбонил]-2-(4-йодфенил)фенил]бензонитрила
Методику стадий 1-5 из Примера 9 проводят с применением 1,4-дийодбензола вместо 1-бром-2-хлор-4-метилбензола с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 55: Синтез N-[2-[4-[4-[(3S)-3-аминопирролидин-1-карбонил]-2-(4-цианофенил)фенил]фенил]этил]ацетамида
Трет-бутил-N-[(3S)-1-[4-[4-(2-аминоэтил)фенил]-3-(4-цианофенил)бензоил]пирролидин-3-ил]карбамат (15 мг), полученный в примере 53 (стадия 1), растворяют в ТГФ. При комнатной температуре туда добавляют ТЭА (0,02 мл)и затем ацетилхлорид (4,6 мг) с последующим перемешиванием при комнатной температуре в течение 1 часа. ТФК добавляют к остатку, и прогресс реакции подтверждают ЖХМС с последующей вакуумной концентрацией. Остаток очищают ВЭЖХ с обращенной фазой (подвижная фаза: вода/ацетонитрил) с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 56: Синтез 4-[5-[(3S)-3-аминопирролидин-1-карбонил]-2-(4-пропилфенил)фенил]бензонитрила
Методику стадий 1-2 из Примера 12 проводят с применением (4-пропилфенил)бороновой кислоты вместо пинаколового эфира 4-метил-2-нитрофенилбороновой кислоты с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 57: Синтез 4-[5-[(3S)-3-аминопирролидин-1-карбонил]-2-(2-нафтил)фенил]бензонитрила
Методику стадий 1-2 из Примера 12 проводят с применением 2-нафтилбороновой кислоты вместо пинаколового эфира 4-метил-2-нитрофенилбороновой кислоты с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 58: Синтез 4-[2-[4-[1-(гидроксиметил)циклопропил]фенил]-5-[(3S)-3-(метиламино)пирролидин-1-карбонил]фенил]бензонитрила
Методику стадий 1-5 из Примера 1 проводят с применением [4-[1-(гидроксиметил)циклопропил]фенил]бороновой кислоты вместо п-толилбороновой кислоты и с применением (S)-трет-бутилметил(пирролидин-3-ил)карбамата вместо трет-бутил-N-[(3S)-пирролидин-3-ил]карбамата с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 59: Синтез 4-[5-[(3S)-3-аминопирролидин-1-карбонил]-2-[4-[(1-гидроксициклопропил)метил]фенил]фенил]бензонитрила
Методику стадий 1-5 из Примера 9 проводят с применением 1-[(4-бромфенил)метил]циклопропанола вместо 1-бром-2-хлор-4-метилбензола с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 60: Синтез 4-[5-[(3S)-3-аминопирролидин-1-карбонил]-2-[4-(2-метилпроп-1-енил)фенил]фенил]бензонитрила
Методику стадий 1-5 из Примера 9 проводят с применением 1-бром-4-(2-метилпроп-1-енил)бензола вместо 1-бром-2-хлор-4-метилбензола с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 61: Синтез 4-[5-[(3S)-3-аминопирролидин-1-карбонил]-2-[4-(3-гидрокси-3-метилбутил)фенил]фенил]бензонитрила
Методику стадий 1-5 из Примера 9 проводят с применением 4-(4-бромфенил)-2-метилбутан-2-ола вместо 1-бром-2-хлор-4-метилбензола с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 62: Синтез 4-[5-[(3S)-3-аминопирролидин-1-карбонил]-2-[4-[2-(1-гидроксициклопропил)этил]фенил]фенил]бензонитрила
Методику стадий 1-5 из Примера 9 проводят с применением 1-[2-(4-бромфенил)этил]циклопропанола вместо 1-бром-2-хлор-4-метилбензола с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 63: Синтез 4-[5-[(3S)-3-аминопирролидин-1-карбонил]-2-[4-(2-гидроксиэтил)фенил]фенил]-2-фторбензонитрила
Методику стадий 1-3 из Примера 37 проводят с применением 2-(4-бромфенил)этанола вместо 1-(4-бром-3-фторфенил)-2-метилпропан-2-ола с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 64: Синтез 4-[5-[(3S)-3-аминопирролидин-1-карбонил]-2-[2-фтор-4-(2-гидрокси-2-метилпропил)фенил]фенил]бензонитрила
Методику стадий 1-5 из Примера 9 проводят с применением 1-(4-бром-3-фторфенил)-2-метилпропан-2-ола, полученного в примере 28 (стадия 1), вместо 1-бром-2-хлор-4-метилбензола с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 65: Синтез 4-[5-[(3S)-3-аминопирролидин-1-карбонил]-2-[4-(3-гидрокси-3-метилбутил)фенил]фенил]-2-фторбензонитрила
Методику стадий 1-3 из Примера 16 проводят с применением 2-метил-4-[4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенил]бутан-2-ола вместо п-толилбороновой кислоты с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 66: Синтез 4-[5-[(3S)-3-аминопирролидин-1-карбонил]-2-[4-[1-(метоксиметил)циклопропил]фенил]фенил]бензонитрила
Методику стадий 1-5 из Примера 9 проводят с применением 1-бром-4-[1-(метоксиметил)циклопропил]бензола вместо 1-бром-2-хлор-4-метилбензола с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 67: Синтез 4-[5-[(3S)-3-аминопирролидин-1-карбонил]-2-[2-фтор-4-[(1-гидроксициклопропил)метил]фенил]фенил]бензонитрила
Стадия 1
Метил-2-(4-бром-3-фторфенил)ацетат (500 мг) и изопропоксид титана (0,84 мл) растворяют в ТГФ (5 мл). При 0°C туда по каплям добавляют раствор 3 M EtMgBr в диэтиловом эфире (1,9 мл) с последующим перемешиванием при комнатной температуре в течение ночи. Туда добавляют этилацетат, смесь промывают последовательно водой и насыщенным раствором соли и сушат над безводным сульфатом натрия и растворитель отгоняют. Остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем (подвижная фаза: гексан/этилацетат) с получением 1-[(4-бром-3-фторфенил)метил]циклопропанола.
Стадия 2
Методику стадий 1-5 из Примера 9 проводят с применением 1-[(4-бром-3-фторфенил)метил]циклопропанола, полученного на стадии 1 выше, вместо 1-бром-2-хлор-4-метилбензола с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 68: Синтез 4-[5-[(3S)-3-аминопирролидин-1-карбонил]-2-[4-[1-(1-гидроксициклопропил)циклопропил]фенил]фенил]бензонитрила
Стадия 1
Методику стадии 1 из Примера 67 проводят с применением метил-1-(4-бромфенил)циклопропанкарбоновой кислоты вместо метил-2-(4-бром-3-фторфенил)ацетата с получением 1-[1-(4-бромфенил)циклопропил]циклопропанола.
Стадия 2
Методику стадий 1-5 из Примера 9 проводят с применением 1-[1-(4-бромфенил)циклопропил]циклопропанола, полученного на стадии 1 выше, вместо 1-бром-2-хлор-4-метилбензола с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 69: Синтез 4-[5-[(3S)-3-аминопирролидин-1-карбонил]-2-[4-(2-метоксиэтил)фенил]фенил]-2-фторбензонитрила
Методику стадий 1-3 из Примера 16 проводят с применением 2-[4-(2-метоксиэтил)фенил]-4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолана, полученного в примере 30 (стадия 1), вместо п-толилбороновой кислоты с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 70: Синтез 4-[5-[(3S)-3-аминопирролидин-1-карбонил]-2-[2-фтор-4-(2-гидроксиэтил)фенил]фенил]бензонитрила
Методику стадий 1-5 из Примера 9 проводят с применением 2-(4-бром-3-фторфенил)этанола вместо 1-бром-2-хлор-4-метилбензола с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 71: Синтез 4-[5-[(3S)-3-аминопирролидин-1-карбонил]-2-[2-фтор-4-(2-метоксиэтил)фенил]фенил]бензонитрила
Методику стадий 1-5 из Примера 9 проводят с применением 1-бром-2-фтор-4-(2-метоксиэтил)бензола вместо 1-бром-2-хлор-4-метилбензола с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 72: Синтез 4-[5-[(3S)-3-аминопирролидин-1-карбонил]-2-[4-(2-гидрокси-1,1-диметил-этил)фенил]фенил]бензонитрила
Методику стадий 1-5 из Примера 9 проводят с применением 2-(4-бромфенил)-2-метилпропан-1-ола вместо 1-бром-2-хлор-4-метилбензола с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 73: Синтез 4-[5-[(3S)-3-аминопирролидин-1-карбонил]-2-[4-(2-фторэтил)фенил]фенил]бензонитрила
Методику стадий 1-5 из Примера 9 проводят с применением 1-бром-4-(2-фторэтил)бензола вместо 1-бром-2-хлор-4-метилбензола с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 74: Синтез 4-[5-(2,7-диазаспиро[3.4]октан-7-карбонил)-2-[2-фтор-4-(2-метоксиэтил)фенил]фенил]-2-фторбензонитрила
Методику стадий 1-4 из Примера 22 проводят с применением трет-бутил-2,7-диазаспиро[3.4]октан-2-карбоновой кислоты вместо трет-бутил-N-[(3-эндо)-8-азабицикло[3.2.1]октан-3-ил]карбамата с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 75: Синтез 4-[5-(2,8-диазаспиро[3.5]нонан-2-карбонил)-2-[2-фтор-4-(2-метоксиэтил)фенил]фенил]-2-фторбензонитрила
Методику стадий 1-4 из Примера 22 проводят с применением трет-бутил-2,8-диазаспиро[3.5]нонан-8-карбоновой кислоты вместо трет-бутил-N-[(3-эндо)-8-азабицикло[3.2.1]октан-3-ил]карбамата с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 76: Синтез 4-[5-(2,7-диазаспиро[3.4]октан-7-карбонил)-2-[2-фтор-4-(2-гидрокси-2-метилпропил)фенил]фенил]-2-фторбензонитрила
Методику стадий 1-5 из Примера 41 проводят с применением трет-бутил-2,7-диазаспиро[3.4]октан-2-карбоновой кислоты вместо трет-бутил-N-[(3-эндо)-8-азабицикло[3.2.1]октан-3-ил]карбамата с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 77: Синтез 4-[5-(2,8-диазаспиро[3.5]нонан-2-карбонил)-2-[2-фтор-4-(2-гидрокси-2-метилпропил)фенил]фенил]-2-фторбензонитрила
Методику стадий 1-5 из Примера 41 проводят с применением трет-бутил-2,8-диазаспиро[3.5]нонан-8-карбоновой кислоты вместо трет-бутил-N-[(3-эндо)-8-азабицикло[3.2.1]октан-3-ил]карбамата с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 78: Синтез гидрохлорида 4-[5-(3,8-диазаспиро[4.5]декан-8-карбонил)-2-[2-фтор-4-(2-метоксиэтил)фенил]фенил]-2-фторбензонитрила
Методику стадий 1-4 из Примера 22 проводят с применением трет-бутил-3,8-диазаспиро[4.5]декан-3-карбоновой кислоты вместо трет-бутил-N-[(3-эндо)-8-азабицикло[3.2.1]октан-3-ил]карбамата с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 79: Синтез 4-[5-(2,8-диазаспиро[3.5]нонан-8-карбонил)-2-[2-фтор-4-(2-метоксиэтил)фенил]фенил]-2-фторбензонитрила
Методику стадий 1-4 из Примера 22 проводят с применением трет-бутил-2,8-диазаспиро[3.5]нонан-2-карбоновой кислоты вместо трет-бутил-N-[(3-эндо)-8-азабицикло[3.2.1]октан-3-ил]карбамата с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 80: Синтез гидрохлорида 4-[5-(1,4-диазепан-1-карбонил)-2-[2-фтор-4-(2-метоксиэтил)фенил]фенил]-2-фторбензонитрила
Методику стадий 1-4 из Примера 22 проводят с применением трет-бутил-1,4-диазепан-1-карбоновой кислоты вместо трет-бутил-N-[(3-эндо)-8-азабицикло[3.2.1]октан-3-ил]карбамата с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 81: Синтез 4-[5-(3,7-диазаспиро[3.4]октан-7-карбонил)-2-[2-фтор-4-(2-метоксиэтил)фенил]фенил]-2-фторбензонитрила
Методику стадий 1-4 из Примера 22 проводят с применением трет-бутил-3,7-диазаспиро[3.4]октан-3-карбоновой кислоты вместо трет-бутил-N-[(3-эндо)-8-азабицикло[3.2.1]октан-3-ил]карбамата с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 82: Синтез 4-[5-[(1S,4S)-2,5-диазабицикло[2.2.1]гептан-2-карбонил]-2-[2-фтор-4-(2-метоксиэтил)фенил]фенил]-2-фторбензонитрила
Методику стадий 1-4 из Примера 22 проводят с применением трет-бутил-(1S,4S)-2,5-диазабицикло[2.2.1]гептан-2-карбоновой кислоты вместо трет-бутил-N-[(3-эндо)-8-азабицикло[3.2.1]октан-3-ил]карбамата с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 83: Синтез 4-[5-(3,7-диазаспиро[3.5]нонан-7-карбонил)-2-[2-фтор-4-(2-метоксиэтил)фенил]фенил]-2-фторбензонитрила
Методику стадий 1-4 из Примера 22 проводят с применением трет-бутил-3,7-диазаспиро[3.5]нонан-3-карбоновой кислоты вместо трет-бутил-N-[(3-эндо)-8-азабицикло[3.2.1]октан-3-ил]карбамата с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 84: Синтез 4-[5-(2,7-диазаспиро[3.5]нонан-2-карбонил)-2-[2-фтор-4-(2-метоксиэтил)фенил]фенил]-2-фторбензонитрила
Методику стадий 1-4 из Примера 22 проводят с применением гидрохлорида трет-бутил-2,7-диазаспиро[3.5]нонан-7-карбоновой кислоты вместо трет-бутил-N-[(3-эндо)-8-азабицикло[3.2.1]октан-3-ил]карбамата с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 85: Синтез 4-[5-[(1R,4R)-2,5-диазабицикло[2.2.1] гептан-2-карбонил]-2-[2-фтор-4-(2-метоксиэтил)фенил]фенил]-2-фторбензонитрила
Методику стадий 1-4 из Примера 22 проводят с применением трет-бутил-(1R,4R)-2,5-диазабицикло[2.2.1]гептан-2-карбоновой кислоты вместо трет-бутил-N-[(3-эндо)-8-азабицикло[3.2.1]октан-3-ил]карбамата с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 86: Синтез 2-фтор-4-[2-[2-фтор-4-(2-метоксиэтил)фенил]-5-[(1S,4S)-5-метил-2,5-диазабицикло[2.2.1]гептан-2-карбонил]фенил]бензонитрила
Методику стадий 1-4 из Примера 22 проводят с применением (1S,4S)-2-метил-2,5-диазабицикло[2.2.1]гептана вместо трет-бутил-N-[(3-эндо)-8-азабицикло[3.2.1]октан-3-ил]карбамата с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 87: Синтез 2-фтор-4-[2-[2-фтор-4-(2-метоксиэтил)фенил]-5-[(1R,4R)-5-метил-2,5-диазабицикло[2.2.1]гептан-2-карбонил]фенил]бензонитрила
Методику стадий 1-4 из Примера 22 проводят с применением (1R,4R)-2-метил-2,5-диазабицикло[2.2.1]гептана вместо трет-бутил-N-[(3-эндо)-8-азабицикло[3.2.1]октан-3-ил]карбамата с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 88: Синтез 4-[5-(3,8-диазабицикло[3.2.1]октан-3-карбонил)-2-[2-фтор-4-(2-метоксиэтил)фенил]фенил]-2-фторбензонитрила
Методику стадий 1-4 из Примера 22 проводят с применением трет-бутил-3,8-диазабицикло[3.2.1]октан-8-карбоновой кислоты вместо трет-бутил-N-[(3-эндо)-8-азабицикло[3.2.1]октан-3-ил]карбамата с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 89: Синтез 4-[5-[(3S)-3-аминопирролидин-1-карбонил]-2-(1,3-бензотиазол-5-ил)фенил]-2-фторбензонитрила
Методику стадий 1-3 из Примера 16 проводят с применением 1,3-бензотиазол-5-илбороновой кислоты вместо п-толилбороновой кислоты с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 90: Синтез 4-[5-[(3S)-3-аминопирролидин-1-карбонил]-2-(1-метилпиразоло[3,4-b]пиридин-5-ил)фенил]-2-фторбензонитрила
Методику стадий 1-3 из Примера 16 проводят с применением (1-метилпиразоло[3,4-b]пиридин-5-ил)бороновой кислоты вместо п-толилбороновой кислоты с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 91: Синтез 4-[5-[(3S)-3-аминопирролидин-1-карбонил]-2-(1-метилбензимидазол-5-ил)фенил]-2-фторбензонитрила
Методику стадий 1-3 из Примера 37 проводят с применением 5-бром-1-метилбензимидазола вместо 1-(4-бром-3-фторфенил)-2-метилпропан-2-ола с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 92: Синтез 4-[5-[(3S)-3-аминопирролидин-1-карбонил]-2-(1-метилиндазол-5-ил)фенил]-2-фторбензонитрила
Методику стадий 1-3 из Примера 16 проводят с применением (1-метилиндазол-5-ил)бороновой кислоты вместо п-толилбороновой кислоты с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 93: Синтез 4-[5-[(3S)-3-аминопирролидин-1-карбонил]-2-(2-метилиндазол-5-ил)фенил]-2-фторбензонитрила
Методику стадий 1-3 из Примера 16 проводят с применением 2-метил-5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)индазола вместо п-толилбороновой кислоты с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 94: Синтез 4-[5-[(3S)-3-аминопирролидин-1-карботиоил]-2-[2-фтор-4-(2-метоксиэтил)фенил]фенил]-2-фторбензонитрила
Методику из Примера 2 проводят с применением 4-[5-[(3S)-3-аминопирролидин-1-карбонил]-2-[2-фтор-4-(2-метоксиэтил)фенил]фенил]-2-фторбензонитрила, полученного в примере 20 (стадия 3), вместо 4-[5-[(3S)-3-аминопирролидин-1-карбонил]-2-(п-толил)фенил]бензонитрила с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 95: Синтез 4-[5-[(3S)-3-аминопирролидин-1-карбонил]-2-(6-фтор-1-метил-бензимидазол-5-ил)фенил]-2-фторбензонитрила
Методику стадий 1-3 из Примера 37 проводят с применением 5-бром-6-фтор-1-метилбензимидазола вместо 1-(4-бром-3-фторфенил)-2-метилпропан-2-ола с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 96: Синтез 4-[5-[(3S)-3-аминопирролидин-1-карбонил]-2-(6-фтор-1-метилбензотриазол-5-ил)фенил]-2-фторбензонитрила
Стадия 1
Трет-бутил-N-[(3S)-1-[3-(4-циано-3-фторфенил)-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензоил]пирролидин-3-ил]карбамат (15 мг), полученный в примере 37 (стадия 1), растворяют в 1,4-диоксане (0,5 мл). При комнатной температуре туда добавляют 5-бром-6-фтор-1-метилбензотриазол (9,7 мг), PdCl2(dppf) (1,0 мг) и трикалийфосфат (18 мг), и смесь перемешивают в микроволновом реакторе при 125°C в течение 30 минут. Туда добавляют этилацетат и смесь помещают в NH-силикагель и промывают этилацетатом/метанолом. Растворитель отгоняют с получением трет-бутил-N-[(3S)-1-[3-(4-циано-3-фторфенил)-4-(6-фтор-1-метилбензотриазол-5-ил)бензоил]пирролидин-3-ил]карбамата.
Стадия 2
Трет-бутил-N-[(3S)-1-[3-(4-циано-3-фторфенил)-4-(6-фтор-1-метилбензотриазол-5-ил)бензоил]пирролидин-3-ил]карбамат (15 мг), полученный на стадии 1 выше, растворяют в ТФК (0,3 мл) и прогресс реакции подтверждают ЖХМС, с последующей вакуумной концентрацией. Остаток очищают ВЭЖХ с обращенной фазой (подвижная фаза: вода/ацетонитрил) с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 97: Синтез 4-[5-[(3-экзо)-3-амино-8-азабицикло[3.2.1]октан-8-карбонил]-2-(4-фторфенил)фенил]бензонитрила
Методику стадий 1-3 из Примера 23 проводят с применением 1-бром-4-фторбензола вместо 5-бром-6-фтор-1-метилиндола с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 98: Синтез 4-[5-[(3-экзо)-3-амино-8-азабицикло[3.2.1]октан-8-карбонил]-2-(4-хлорфенил)фенил]бензонитрила
Методику стадий 1-3 из Примера 23 проводят с применением 1-бром-4-хлорбензола вместо 5-бром-6-фтор-1-метилиндола с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 99: Синтез [(3S)-3-аминопирролидин-1-ил]-[3-(4-нитрофенил)-4-(п-толил)фенил]метанона
Методику стадий 1-5 из Примера 19 проводят с применением 1-бром-4-нитробензола вместо 4-бром-2,6-дифторбензонитрила с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 100: Синтез 4-[5-[(3S)-3-аминопирролидин-1-карбонил]-2-[6-(диметиламино)-3-пиридил]фенил]-2-фторбензонитрила
Методику стадий 1-3 из Примера 37 проводят с применением 5-бром-N, N-диметилпиридин-2-амина вместо 1-(4-бром-3-фторфенил)-2-метилпропан-2-ола с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 101: Синтез 4-[5-[(3S)-3-аминопирролидин-1-карбонил]-2-(1-метилбензотриазол-5-ил)фенил]-2-фторбензонитрила
Методику стадий 1-3 из Примера 37 проводят с применением 5-бром-1-метилбензотриазола вместо 1-(4-бром-3-фторфенил)-2-метилпропан-2-ола с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 102: Синтез 4-[5-[(3S)-3-аминопирролидин-1-карбонил]-2-(6,7-дифтор-1-метилбензимидазол-5-ил)фенил]-2-фторбензонитрила
Методику стадий 1-3 из Примера 37 проводят с применением 5-бром-6,7-дифтор-1-метилбензимидазола вместо 1-(4-бром-3-фторфенил)-2-метилпропан-2-ола с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 103: Синтез 4-[5-[(3S)-3-аминопирролидин-1-карбонил]-2-(1,2-диметилбензимидазол-5-ил)фенил]-2-фторбензонитрила
Методику стадий 1-3 из Примера 37 проводят с применением 5-бром-1,2-диметилбензимидазола вместо 1-(4-бром-3-фторфенил)-2-метилпропан-2-ола с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 104: Синтез 4-[5-[(3-экзо)-3-амино-8-азабицикло[3.2.1]октан-8-карбонил]-2-(2-нафтил)фенил]-2-фторбензонитрила
Методику стадий 1-3 из Примера 23 проводят с применением 2-бромнафталина вместо 5-бром-6-фтор-1-метилиндола с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 105: Синтез 4-[5-[(3-экзо)-3-амино-8-азабицикло[3.2.1]октан-8-карбонил]-2-(8-фтор-7-хинолил)фенил]-2-фторбензонитрила
Методику стадий 1-3 из Примера 23 проводят с применением 7-бром-8-фторхинолина вместо 5-бром-6-фтор-1-метилиндола с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 106: Синтез 4-[5-[(3-экзо)-3-амино-8-азабицикло[3.2.1]октан-8-карбонил]-2-(4-метил-2,3-дигидро-1,4-бензоксазин-7-ил)фенил]-2-фторбензонитрила
Методику стадий 1-3 из Примера 23 проводят с применением 7-бром-4-метил-3,4-дигидро-2H-бензо[b][1.4]оксазина вместо 5-бром-6-фтор-1-метилиндола с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 107: Синтез 4-[5-[(3-экзо)-3-амино-8-азабицикло[3.2.1]октан-8-карбонил]-2-(7-хинолин)фенил]-2-фторбензонитрила
Методику стадий 1-3 из Примера 23 проводят с применением 7-бромхинолина вместо 5-бром-6-фтор-1-метилиндола с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 108: Синтез 4-[5-[(3-экзо)-3-амино-8-азабицикло[3.2.1]октан-8-карбонил]-2-(6-фтор-1-метилбензимидазол-5-ил)фенил]-2-фторбензонитрила
Методику стадий 1-3 из Примера 23 проводят с применением 5-бром-6-фтор-1-метилбензимидазола вместо 5-бром-6-фтор-1-метилиндола с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 109: Синтез 4-[5-[(3-экзо)-3-амино-8-азабицикло[3.2.1]октан-8-карбонил]-2-(6-фтор-1-метилбензотриазол-5-ил)фенил]-2-фторбензонитрила
Методику стадий 1-3 из Примера 23 проводят с применением 5-бром-6-фтор-1-метилбензотриазола вместо 5-бром-6-фтор-1-метилиндола с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 110: Синтез 4-[5-[(3-экзо)-3-амино-8-азабицикло[3.2.1]октан-8-карбонил]-2-(4-фтор-1-метилиндазол-5-ил)фенил]-2-фторбензонитрила
Методику стадий 1-3 из Примера 23 проводят с применением 5-бром-4-фтор-1-метилиндазола вместо 5-бром-6-фтор-1-метилиндола с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 111: Синтез 4-[5-[(3-экзо)-3-амино-8-азабицикло[3.2.1]октан-8-карбонил]-2-(2-метилиндазол-5-ил)фенил]бензонитрила
Методику стадий 1-3 из Примера 23 проводят с применением 5-бром-2-метил-2H-индазола вместо 5-бром-6-фтор-1-метилиндола с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 112: Синтез 2-фтор-4-[2-[2-фтор-4-(2-метоксиэтил)фенил]-5-[(3-экзо)-3-(изопропиламино)-8-азабицикло[3.2.1]октан-8-карбонил]фенил]бензонитрила
Ацетон (0,002 мл) добавляют при 25°C к раствору 4-[5-[(3-экзо)-3-амино-8-азабицикло[3.2.1]октан-8-карбонил]-2-[2-фтор-4-(2-метоксиэтил)фенил]фенил]-2-фторбензонитрила, полученного в примере 26 (стадия 2), в дихлорметане (0,05 мл). Затем туда добавляют NaBH(OAc)3 (8,45 мг) с последующим перемешиванием при комнатной температуре в течение 1 часа. Туда добавляют MeOH и растворитель отгоняют. Затем остаток очищают ВЭЖХ с обращенной фазой (подвижная фаза: вода/ацетонитрил) с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 113: Синтез 2-фтор-4-[2-[2-фтор-4-(2-гидрокси-2-метилпропил)фенил]-5-[(3-экзо)-3-(изопропиламино)-8-азабицикло[3.2.1]октан-8-карбонил]фенил]бензонитрила
Методику из Примера 112 проводят с применением 4-[5-[(3-экзо)-3-амино-8-азабицикло[3.2.1]октан-8-карбонил]-2-[2-фтор-4-(2-гидрокси-2-метилпропил)фенил]фенил]-2-фторбензонитрила, полученного в примере 28 (стадия 3), вместо 4-[5-[(3-экзо)-3-амино-8-азабицикло[3.2.1]октан-8-карбонил]-2-[2-фтор-4-(2-метоксиэтил)фенил]фенил]-2-фторбензонитрила с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 114: Синтез 4-[5-[(3S)-3-(этиламино)пирролидин-1-карбонил]-2-(6-фтор-1-метилбензотриазол-5-ил)фенил]-2-фторбензонитрила
Стадия 1
Трет-бутил-N-[(3S)-1-[3-(4-циано-3-фторфенил)-4-(6-фтор-1-метилбензотриазол-5-ил)бензоил]пирролидин-3-ил]карбамат (10 мг), полученный в примере 96 (стадия 1), растворяют в ТГФ (0,5 мл). При комнатной температуре туда добавляют гидрид натрия (0,85 мг) и затем йодэтан (5,58 мг), смесь перемешивают при 50°C в течение ночи и растворитель отгоняют с получением (S)-трет-бутил-(1-(4'-циано-3'-фтор-6-(6-фтор-1-метил-1H-бензо[d][1.2.3]триазол-5-ил)-[1,1'-бифенил]-3-карбонил)пирролидин-3-ил)(этил)карбамата. Полученный продукт применяют на следующей стадии без очистки.
Стадия 2
Методику стадии 2 из Примера 26 проводят с применением (S)-трет-бутил-(1-(4'-циано-3'-фтор-6-(6-фтор-1-метил-1H-бензо[d][1.2.3]триазол-5-ил)-[1,1'-бифенил]-3-карбонил)пирролидин-3-ил)(этил)карбамата, полученного на стадии 1 выше, вместо [(3-экзо)-8-[3-(4-циано-3-фторфенил)-4-[2-фтор-4-(2-метоксиэтил)фенил]бензоил]-8-азабицикло[3.2.1]октан-3-ил]карбамата с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 115: Синтез 2-фтор-4-[2-(6-фтор-1-метилбензотриазол-5-ил)-5-[(3S)-3-(изопропиламино)пирролидин-1-карбонил]фенил]бензонитрила
Методику из Примера 112 проводят с применением 4-[5-[(3S)-3-аминопирролидин-1-карбонил]-2-(6-фтор-1-метилбензотриазол-5-ил)фенил]-2-фторбензонитрила, полученного в примере 96 (стадия 2), вместо 4-[5-[(3-экзо)-3-амино-8-азабицикло[3.2.1]октан-8-карбонил]-2-[2-фтор-4-(2-метоксиэтил)фенил]фенил]-2-фторбензонитрила с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 116: Синтез 4-[5-[(3S)-3-(циклобутиламино)пирролидин-1-карбонил]-2-(6-фтор-1-метилбензотриазол-5-ил)фенил]-2-фторбензонитрила
Методику из Примера 112 проводят с применением 4-[5-[(3S)-3-аминопирролидин-1-карбонил]-2-(6-фтор-1-метилбензотриазол-5-ил)фенил]-2-фторбензонитрила, полученного в примере 96 (стадия 2), вместо 4-[5-[(3-экзо)-3-амино-8-азабицикло[3.2.1]октан-8-карбонил]-2-[2-фтор-4-(2-метоксиэтил)фенил]фенил]-2-фторбензонитрила и с применением циклобутанона вместо ацетона с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 117: Синтез 4-[5-[(3S)-3-аминопирролидин-1-карбонил]-2-(1-метилиндолин-5-ил)фенил]-2-фторбензонитрила
Методику стадий 1-3 из Примера 37 проводят с применением 5-бром-1-метилиндоина вместо 1-(4-бром-3-фторфенил)-2-метилпропан-2-ола с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 118: Синтез 4-[5-[(3S)-3-аминопирролидин-1-карбонил]-2-(4-метил-2,3-дигидро-1,4-бензоксазин-7-ил)фенил]-2-фторбензонитрила
Методику стадий 1-3 из Примера 37 проводят с применением 7-бром-4-метил-3,4-дигидро-2H-бензо[b][1.4]оксазина вместо 1-(4-бром-3-фторфенил)-2-метилпропан-2-ола с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 119: Синтез 4-[5-[(3S)-3-аминопирролидин-1-карбонил]-2-(3-метил-2-оксо-1,3-бензооксазол-6-ил)фенил]-2-фторбензонитрила
Методику стадий 1-3 из Примера 37 проводят с применением 6-бром-3-метил-1,3-бензооксазол-2-она вместо 1-(4-бром-3-фторфенил)-2-метилпропан-2-ола с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 120: Синтез 4-[5-[(3S)-3-аминопирролидин-1-карбонил]-2-(3-метил-2-оксо-1,3-бензотиазол-6-ил)фенил]-2-фторбензонитрила
Методику стадий 1-3 из Примера 37 проводят с применением 6-бром-3-метил-1,3-бензотиазол-2-она вместо 1-(4-бром-3-фторфенил)-2-метилпропан-2-ола с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 121: Синтез 4-[5-[(3S)-3-аминопирролидин-1-карбонил]-2-(2,3-дигидро-1,4-бензодиоксин-6-ил)фенил]-2-фторбензонитрила
Методику стадий 1-3 из Примера 16 проводят с применением 2,3-дигидро-1,4-бензодиоксан-6-илбороновой кислоты вместо п-толилбороновой кислоты с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 122: Синтез 4-[5-[(3S)-3-аминопирролидин-1-карбонил]-2-(1,3-бензодиоксол-5-ил)фенил]-2-фторбензонитрила
Методику стадий 1-3 из Примера 16 проводят с применением 1,3-бензодиоксол-5-илбороновой кислоты вместо п-толилбороновой кислоты с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 123: Синтез 4-[5-[(3-эндо)-3-амино-8-азабицикло[3.2.1]октан-8-карбонил]-2-(6-фтор-1-метилиндол-5-ил)фенил]-2-фторбензонитрила
Методику стадий 1-5 из Примера 41 проводят с применением 5-бром-6-фтор-1-метилиндола вместо 1-(4-бром-3-фторфенил)-2-метилпропан-2-ола с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 124: Синтез 4-[5-[(3-эндо)-3-амино-8-азабицикло[3.2.1]октан-8-карбонил]-2-(6-фтор-1-метилиндазол-5-ил)фенил]-2-фторбензонитрила
Методику стадий 1-5 из Примера 41 проводят с применением 5-бром-6-фтор-1-метилиндазола вместо 1-(4-бром-3-фторфенил)-2-метилпропан-2-ола с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 125: Синтез 4-[5-[(3-эндо)-3-амино-8-азабицикло[3.2.1]октан-8-карбонил]-2-(6-фтор-1-метилбензотриазол-5-ил)фенил]-2-фторбензонитрила
Методику стадий 1-5 из Примера 41 проводят с применением 5-бром-6-фтор-1-метилбензотриазола вместо 1-(4-бром-3-фторфенил)-2-метилпропан-2-ола с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 126: Синтез 4-[5-[(3-эндо)-3-амино-8-азабицикло[3.2.1]октан-8-карбонил]-2-(6,7-дифтор-1-метилбензимидазол-5-ил)фенил]-2-фторбензонитрила
Методику стадий 1-5 из Примера 41 проводят с применением 5-бром-6,7-дифтор-1-метилбензимидазола вместо 1-(4-бром-3-фторфенил)-2-метилпропан-2-ола с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 127: Синтез 4-[5-[(3-экзо)-3-амино-9-азабицикло[3.3.1]нонан-9-карбонил]-2-[2-фтор-4-(2-метоксиэтил)фенил]фенил]-2-фторбензонитрила
Методику стадий 1-4 из Примера 22 проводят с применением трет-бутил-N-[(3-экзо)-9-азабицикло[3.3.1]нонан-3-ил]карбамата вместо трет-бутил-N-[(3-эндо)-8-азабицикло[3.2.1]октан-3-ил]карбамата с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 128: Синтез 4-[5-[(3-эндо)-3-амино-8-азабицикло[3.2.1]октан-8-карбонил]-2-(4-метил-2,3-дигидро-1,4-бензоксазин-7-ил)фенил]-2-фторбензонитрила
Методику стадий 1-5 из Примера 41 проводят с применением 7-бром-4-метил-3,4-дигидро-2H-бензо[b][1.4]оксазина вместо 1-(4-бром-3-фторфенил)-2-метилпропан-2-ола с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 129: Синтез 4-[5-[(3-эндо)-3-амино-9-азабицикло[3.3.1]нонан-9-карбонил]-2-[2-фтор-4-(2-метоксиэтил)фенил]фенил]-2-фторбензонитрила
Методику стадий 1-4 из Примера 22 проводят с применением трет-бутил-N-[(3-эндо)-9-азабицикло[3.3.1]нонан-3-ил]карбамата вместо трет-бутил-N-[(3-эндо)-8-азабицикло[3.2.1]октан-3-ил]карбамата с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 130: Синтез 4-[5-[(3-эндо)-3-амино-8-азабицикло[3.2.1]октан-8-карбонил]-2-(6-фтор-1-метилбензимидазол-5-ил)фенил]-2-фторбензонитрила
Методику стадий 1-5 из Примера 41 проводят с применением 5-бром-6-фтор-1-метилбензимидазола вместо 1-(4-бром-3-фторфенил)-2-метилпропан-2-ола с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 131: Синтез 4-[5-[(3-эндо)-3-амино-8-азабицикло[3.2.1]октан-8-карбонил]-2-[6-(диметиламино)-3-пиридил]фенил]-2-фторбензонитрила
Методику стадий 1-5 из Примера 41 проводят с применением 5-бром-N, N-диметилпиридин-2-амина вместо 1-(4-бром-3-фторфенил)-2-метилпропан-2-ола с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 132: Синтез 4-[5-[(3-эндо)-3-амино-8-азабицикло[3.2.1]октан-8-карбонил]-2-(1,3,3-триметил-2-оксоиндолин-5-ил)фенил]-2-фторбензонитрила
Методику стадий 1-5 из Примера 41 проводят с применением 5-бром-1,3,3-триметилиндолин-2-она вместо 1-(4-бром-3-фторфенил)-2-метилпропан-2-ола с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 133: Синтез 4-[5-[(3-эндо)-3-амино-8-азабицикло[3.2.1]октан-8-карбонил]-2-(3-метил-2-оксо-1,3-бензотиазол-6-ил)фенил]-2-фторбензонитрила
Методику стадий 1-5 из Примера 41 проводят с применением 6-бром-3-метил-1,3-бензотиазол-2-она вместо 1-(4-бром-3-фторфенил)-2-метилпропан-2-ола с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 134: Синтез (S)-5'-(3-аминопирролидин-1-карбонил)-3-фтор-2'-(6-фтор-1-метил-1H-индол-5-ил)-[1,1'-бифенил]-4-карбонитрила
Методику стадий 1-3 из Примера 37 проводят с применением 5-бром-6-фтор-1-метил-1H-индола вместо 1-(4-бром-3-фторфенил)-2-метилпропан-2-ола с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 135: Синтез (S)-5'-(3-аминопирролидин-1-карбонил)-3-фтор-2'-(6-фтор-1-метил-1H-индазол-5-ил)-[1,1'-бифенил]-4-карбонитрила
Методику стадий 1-3 из Примера 37 проводят с применением 5-бром-6-фтор-1-метил-1H-индазола вместо 1-(4-бром-3-фторфенил)-2-метилпропан-2-ола с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 136: Синтез 5'-((3-эндо)-3-амино-8-азабицикло[3.2.1]октан-8-карбонил)-3-фтор-2'-(6-фтор-1-(2-гидрокси-2-метилпропил)-1H-индол-5-ил)-[1,1'-бифенил]-4-карбонитрила
Стадия 1
5-Бром-6-фтор-1H-индол (50 мг) растворяют в ДМФ (0,78 мл). При комнатной температуре туда добавляют Cs2CO3 (151 мг) и 2,2-диметилоксиран (42 мкл), затем перемешивают при 90°C в течение 16 часов. Реакцию гасят насыщенным NH4Cl водным раствором, туда добавляют этилацетат и смесь промывают последовательно водой и насыщенным раствором соли. После того, как органический слой сушат над сульфатом натрия, растворитель отгоняют. Остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем (подвижная фаза: гексан/этилацетат) с получением 1-(5-бром-6-фториндол-1-ил)-2-метилпропан-2-ола.
Стадия 2
Методику стадий 1-5 из Примера 41 проводят с применением 1-(5-бром-6-фториндол-1-ил)-2-метилпропан-2-ола, полученного на стадии 1 выше, вместо 1-(4-бром-3-фторфенил)-2-метилпропан-2-ола с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 137: Синтез 5'-((3-эндо)-3-амино-8-азабицикло[3.2.1]октан-8-карбонил)-2'-(1,3-дигидроизобензофуран-5-ил)-3-фтор-[1,1'-бифенил]-4-карбонитрила
Методику стадий 1-5 из Примера 41 проводят с применением 5-бром-1,3-дигидроизобензофурана вместо 1-(4-бром-3-фторфенил)-2-метилпропан-2-ола с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 138: Синтез 5'-((3-эндо)-3-амино-8-азабицикло[3.2.1]октан-8-карбонил)-3-фтор-2'-(3-изопропил-2-оксо-2,3-дигидробензо[d]тиазол-6-ил)-[1,1'-бифенил]-4-карбонитрила
Стадия 1
6-Бром-3H-1,3-бензотиазол-2-он (100 мг) растворяют в ДМФ (0,87 мл). При комнатной температуре туда добавляют карбонат калия (90 мг), затем перемешивают при 0°C в течение 15 минут. При комнатной температуре туда добавляют 2-бромпропан (0,082 мл), затем перемешивают при 100°C в течение 3 часов. Реакцию гасят насыщенным NH4Cl водным раствором, туда добавляют этилацетат и полученную смесь промывают последовательно водой и насыщенным раствором соли. После того, как органический слой сушат над сульфатом натрия, растворитель отгоняют. Остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем (подвижная фаза: гексан/этилацетат) с получением 6-бром-3-изопропил-1,3-бензотиазол-2-она.
Стадия 2
Методику стадий 1-5 из Примера 41 проводят с применением 6-бром-3-изопропил-1,3-бензотиазол-2-она, полученного на стадии 1 выше, вместо 1-(4-бром-3-фторфенил)-2-метилпропан-2-ола с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 139: Синтез 5'-((3-эндо)-3-амино-8-азабицикло[3.2.1]октан-8-карбонил)-2'-(1-(трет-бутил)-6-фтор-1H-бензо[d][1.2.3]триазол-5-ил)-3-фтор-[1,1'-бифенил]-4-карбонитрила
Методику стадий 1-5 из Примера 41 проводят с применением 5-бром-1-(трет-бутил)-6-фтор-1H-бензо[d][1.2.3]триазола вместо 1-(4-бром-3-фторфенил)-2-метилпропан-2-ола с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 140: Синтез (S)-5'-(3-аминопирролидин-1-карбонил)-2'-(1,3-дигидроизобензофуран-5-ил)-3-фтор-[1,1'-бифенил]-4-карбонитрила
Методику стадий 1-3 из Примера 37 проводят с применением 5-бром-1,3-дигидроизобензофурана вместо 1-(4-бром-3-фторфенил)-2-метилпропан-2-ола с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 141: Синтез (S)-5'-(3-аминопирролидин-1-карбонил)-3-фтор-2'-(5-фтор-3-метил-2-оксо-2,3-дигидробензо[d]тиазол-6-ил)-[1,1'-бифенил]-4-карбонитрила
Стадия 1
5-Фтор-3H-1,3-бензотиазол-2-он (200 мг) суспендируют в MeCN (1 мл). При комнатной температуре туда добавляют NBS (231 мг) с последующим перемешиванием при комнатной температуре в течение 1 часа. Растворитель концентрируют в вакууме, и остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем (подвижная фаза: гексан/этилацетат) с получением 6-бром-5-фтор-3H-1,3-бензотиазол-2-она.
Стадия 2
6-Бром-5-фтор-3H-1,3-бензотиазол-2-он (100 мг), полученный на стадии 1 выше, растворяют в ДМФ (1,3 мл). При комнатной температуре туда добавляют карбонат калия (84 мг), затем перемешивают при 0°C в течение 15 минут. При комнатной температуре туда добавляют йодметан (0,050 мл) с последующим перемешиванием при комнатной температуре в течение 0,5 часа. Реакцию гасят насыщенным NH4Cl водным раствором, туда добавляют этилацетат и полученную смесь промывают последовательно водой и насыщенным раствором соли. После того, как органический слой сушат над сульфатом натрия, растворитель отгоняют. Остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем (подвижная фаза: гексан/этилацетат) с получением 6-бром-5-фтор-3-метил-1,3-бензотиазол-2-она.
Стадия 3
Методику стадий 1-3 из Примера 37 проводят с применением 6-бром-5-фтор-3-метил-1,3-бензотиазол-2-она, полученного на стадии 2 выше, вместо 1-(4-бром-3-фторфенил)-2-метилпропан-2-ола с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 142: Синтез 5'-((3-эндо)-3-амино-8-азабицикло[3.2.1]октан-8-карбонил)-3-фтор-2'-(6-фтор-1-(2-гидрокси-2-метилпропил)-1H-индазол-5-ил)-[1,1'-бифенил]-4-карбонитрила
Стадия 1
5-Бром-6-фтор-1H-индазол (94 мг) растворяют в ДМФ (1,5 мл). При комнатной температуре туда добавляют карбонат цезия (285 мг) и 2,2-диметилоксиран (0,078 мл), затем перемешивают при 90°C в течение 16 часов. Реакцию гасят насыщенным NH4Cl водным раствором, туда добавляют этилацетат и полученную смесь промывают последовательно водой и насыщенным раствором соли. После того, как органический слой сушат над сульфатом натрия, растворитель отгоняют. Остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем (подвижная фаза: гексан/этилацетат) с получением 1-(5-бром-6-фториндазол-1-ил)-2-метилпропан-2-ола.
Стадия 2
Методику стадий 1-5 из Примера 41 проводят с применением 1-(5-бром-6-фториндазол-1-ил)-2-метилпропан-2-ола, полученного на стадии 1 выше, вместо 1-(4-бром-3-фторфенил)-2-метилпропан-2-ола с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 143: Синтез 4-[5-[(1S,3R,4R)-рел-3-амино-7-азабицикло[2.2.1]гептан-7-карбонил]-2-[2-фтор-4-(2-метоксиэтил)фенил]фенил]-2-фторбензонитрила
Стадия 1
трет-Бутил-(1S,3R,4R)-рел-3-амино-7-азабицикло[2.2.1]гептан-7-карбоксилат (50 мг) растворяют в ТГФ (1,2 мл). При 0°C туда добавляют ТЭА (0,066 мл) и хлорид 2-нитробензолсульфонила (57 мг) с последующим перемешиванием при комнатной температуре в течение 1 часа. Туда добавляют этилацетат, и смесь промывают последовательно водой и насыщенным раствором соли. После того, как органический слой сушат над сульфатом натрия, растворитель отгоняют. Остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем (подвижная фаза: гексан/этилацетат) и растворитель отгоняют. Остаток растворяют в 4 N растворе хлористоводородной кислоты-этилацетата (2 мл) с последующим перемешиванием при комнатной температуре в течение 30 минут. Реакционную смесь концентрируют в вакууме с получением гидрохлорида N-[(1S,3R,4R)-рел-7-азабицикло[2.2.1]гептан-3-ил]-2-нитробензолсульфонамида.
Стадия 2
Методику стадии 3 из Примера 22 проводят с применением гидрохлорида N-[(1S,3R,4R)-рел-7-азабицикло[2.2.1]гептан-3-ил]-2-нитробензолсульфонамида, полученного на стадии 1 выше, вместо трет-бутил-N-[(3-эндо)-8-азабицикло[3.2.1]октан-3-ил]карбамата с получением N-[(1S,3R,4R)-рел-7-[3-(4-циано-3-фторфенил)-4-[2-фтор-4-(2-метоксиэтил)фенил]бензоил]-7-азабицикло[2.2.1]гептан-3-ил]-2-нитробензолсульфонамида.
Стадия 3
N-[(1S,3R,4R)-Рел-7-[3-(4-циано-3-фторфенил)-4-[2-фтор-4-(2-метоксиэтил)фенил]бензоил]-7-азабицикло[2.2.1]гептан-3-ил]-2-нитробензолсульфонамид (20 мг), полученный на стадии 2 выше, растворяют в ДМФ (0,5 мл). При комнатной температуре туда добавляют K2CO3 (21 мг) и 4-меркаптобензойную кислоту (12 мг), затем перемешивают при 40°C в течение 12 часов. Туда добавляют этилацетат, и смесь промывают последовательно водой и насыщенным раствором соли. После того, как органический слой сушат над сульфатом натрия, растворитель отгоняют. Остаток очищают ВЭЖХ с обращенной фазой (подвижная фаза: вода/ацетонитрил) с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 144: Синтез 5'-((3-эндо)-3-амино-8-азабицикло[3.2.1]октан-8-карбонил)-2'',3,3''-трифтор-4''-метил-[1,1':2',1''-терфенил]-4-карбонитрила
Методику стадий 1-5 из Примера 41 проводят с применением 1-бром-2,3-дифтор-4-метилбензола вместо 1-(4-бром-3-фторфенил)-2-метилпропан-2-ола с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 145: Синтез 5'-((3-эндо)-3-амино-8-азабицикло[3.2.1]октан-8-карбонил)-2'-(6,7-дифтор-1-метил-1H-бензо[d][1.2.3]триазол-5-ил)-3-фтор-[1,1'-бифенил]-4-карбонитрила
Стадия 1
Трет-бутил-N-[(3-эндо)-8-[3-(4-циано-3-фторфенил)-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензоил]-8-азабицикло[3.2.1]октан-3-ил]карбамат (200 мг), полученный на стадии 3 из Примера 41, и 5-бром-6,7-дифтор-1-метилбензотриазол (129 мг) растворяют в 1,4-диоксане (1,74 мл). При комнатной температуре туда добавляют Pd(dba)2 (16,0 мг), X-phos (26,5 мг) и трикалийфосфат (221 мг) и смесь перемешивают в микроволновом реакторе при 125°C в течение 1 часа. Реакционную смесь фильтруют, и растворитель отгоняют. Остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем (подвижная фаза: этилацетат/гексан) с получением трет-бутил-N-[(3-эндо)-8-[3-(4-циано-3-фторфенил)-4-(6,7-дифтор-1-метилбензотриазол-5-ил)бензоил]-8-азабицикло[3.2.1]октан-3-ил]карбамата.
Стадия 2
Трет-бутил-N-[(3-эндо)-8-[3-(4-циано-3-фторфенил)-4-(6,7-дифтор-1-метилбензотриазол-5-ил)бензоил]-8-азабицикло[3.2.1]октан-3-ил]карбамат (210 мг), полученный на стадии 1 выше, растворяют в MeOH (1,60 мл). При комнатной температуре туда добавляют 4 N раствор хлористоводородной кислоты-этилацетата (2,40 мл) с последующим перемешиванием при комнатной температуре в течение 1 часа. Реакционную смесь концентрируют в вакууме и растворитель отгоняют. Остаток очищают ВЭЖХ с обращенной фазой (подвижная фаза: вода/ацетонитрил) с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 146: Синтез (S)-5'-(3-аминопирролидин-1-карбонил)-3-фтор-2'-(6-фтор-1-(2-гидрокси-2-метилпропил)-1H-индол-5-ил)-[1,1'-бифенил]-4-карбонитрила
Стадия 1
Трет-бутил-N-[(3S)-1-[3-(4-циано-3-фторфенил)-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензоил]пирролидин-3-ил]карбамат (60 мг), полученный на стадии 1 из Примера 37, и 1-(5-бром-6-фториндол-1-ил)-2-метилпропан-2-ол (48,1 мг), полученный на стадии 1 из Примера 136, растворяют в 1,4-диоксане (0,50 мл). При комнатной температуре туда добавляют Pd(dba)2 (3,22 мг), X-phos (5,34 мг) и трикалийфосфат (71,4 мг) и смесь перемешивают в микроволновом реакторе при 125°C в течение 1 часа. Реакционную смесь фильтруют и растворитель отгоняют. Остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем (подвижная фаза: хлороформ/метанол) с получением трет-бутил-N-[(3S)-1-[3-(4-циано-3-фторфенил)-4-[6-фтор-1-(2-гидрокси-2-метилпропил)индол-5-ил]бензоил]пирролидин-3-ил]карбамата.
Стадия 2
Трет-бутил-N-[(3S)-1-[3-(4-циано-3-фторфенил)-4-[6-фтор-1-(2-гидрокси-2-метилпропил)индол-5-ил]бензоил]пирролидин-3-ил]карбамат (68,0 мг), полученный на стадии 1 выше, растворяют в MeOH (1,0 мл). При комнатной температуре туда добавляют 12 N хлористоводородную кислоту (1,0 мл) с последующим перемешиванием при комнатной температуре в течение 1 часа. Туда добавляют 2 N водный раствор гидроксида натрия (6,00 мл) и хлороформ, смесь промывают последовательно водой и насыщенным раствором соли и сушат над безводным сульфатом натрия и растворитель отгоняют. Остаток очищают ВЭЖХ с обращенной фазой (подвижная фаза: вода/ацетонитрил) с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 147: Синтез (S)-5'-(3-аминопирролидин-1-карбонил)-3-фтор-2'-(6-фтор-1-(2-гидрокси-2-метилпропил)-1H-индазол-5-ил)-[1,1'-бифенил]-4-карбонитрила
Стадия 1
Трет-бутил-N-[(3S)-1-[3-(4-циано-3-фторфенил)-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензоил]пирролидин-3-ил]карбамат (70 мг), полученный на стадии 1 из Примера 37, и 1-(5-бром-6-фториндазол-1-ил)-2-метилпропан-2-ол (56,3 мг), полученный на стадии 1 из Примера 142, растворяют в 1,4-диоксане (0,50 мл). При комнатной температуре туда добавляют Pd(dba)2 (3,76 мг), X-phos (6,23 мг) и трикалийфосфат (83,3 мг) и смесь перемешивают в микроволновом реакторе при 125°C в течение 1 часа. Реакционную смесь фильтруют и растворитель отгоняют. Остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем (подвижная фаза: хлороформ/метанол) с получением трет-бутил-N-[(3S)-1-[3-(4-циано-3-фторфенил)-4-[6-фтор-1-(2-гидрокси-2-метилпропил)индазол-5-ил]бензоил]пирролидин-3-ил]карбамата.
Стадия 2
Трет-бутил-N-[(3S)-1-[3-(4-циано-3-фторфенил)-4-[6-фтор-1-(2-гидрокси-2-метилпропил)индазол-5-ил]бензоил]пирролидин-3-ил]карбамат (70,0 мг), полученный на стадии 1 выше, растворяют в MeOH (1,0 мл). При комнатной температуре туда добавляют 12 N хлористоводородную кислоту (1,0 мл) с последующим перемешиванием при комнатной температуре в течение 1 часа. Туда добавляют 2 N водный раствор гидроксида натрия (6,00 мл) и хлороформ, смесь промывают последовательно водой и насыщенным раствором соли и сушат над безводным сульфатом натрия и растворитель отгоняют. Остаток очищают ВЭЖХ с обращенной фазой (подвижная фаза: вода/ацетонитрил) с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 148: Синтез 5'-((3-эндо)-3-амино-8-азабицикло[3.2.1]октан-8-карбонил)-3-фтор-2'-(хиноксалин-6-ил)-[1,1'-бифенил]-4-карбонитрила
Методику стадий 1-5 из Примера 41 проводят с применением 6-бромхиноксалина вместо 1-(4-бром-3-фторфенил)-2-метилпропан-2-ола с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 149: Синтез 5'-((3-эндо)-3-амино-8-азабицикло[3.2.1]октан-8-карбонил)-3-фтор-2'-(изохинолин-6-ил)-[1,1'-бифенил]-4-карбонитрила
Методику стадий 1-5 из Примера 41 проводят с применением 6-бромизохинолина вместо 1-(4-бром-3-фторфенил)-2-метилпропан-2-ола с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 150: Синтез 5'-((3-эндо)-3-амино-8-азабицикло[3.2.1]октан-8-карбонил)-3-фтор-2'-(изохинолин-7-ил)-[1,1'-бифенил]-4-карбонитрила
Методику стадий 1-5 из Примера 41 проводят с применением 7-бромизохинолина вместо 1-(4-бром-3-фторфенил)-2-метилпропан-2-ола с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 151: Синтез 5'-((3-эндо)-3-амино-8-азабицикло[3.2.1]октан-8-карбонил)-3-фтор-2'-(хинолин-6-ил)-[1,1'-бифенил]-4-карбонитрила
Методику стадий 1-5 из Примера 41 проводят с применением 6-бромхинолина вместо 1-(4-бром-3-фторфенил)-2-метилпропан-2-ола с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 152: Синтез 5'-((3-эндо)-3-амино-8-азабицикло[3.2.1]октан-8-карбонил)-3-фтор-2'-(хиназолин-7-ил)-[1,1'-бифенил]-4-карбонитрила
Методику стадий 1-5 из Примера 41 проводят с применением 7-бромхиназолина вместо 1-(4-бром-3-фторфенил)-2-метилпропан-2-ола с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 153: Синтез 5'-((3-эндо)-3-амино-8-азабицикло[3.2.1]октан-8-карбонил)-3-фтор-2'-(хиназолин-6-ил)-[1,1'-бифенил]-4-карбонитрила
Методику стадий 1-5 из Примера 41 проводят с применением 6-бромхиназолина вместо 1-(4-бром-3-фторфенил)-2-метилпропан-2-ола с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 154: Синтез 5'-((3-эндо)-3-амино-8-азабицикло[3.2.1]октан-8-карбонил)-3-фтор-2'-(фталазин-6-ил)-[1,1'-бифенил]-4-карбонитрила
Методику стадий 1-5 из Примера 41 проводят с применением 6-бромфталазина вместо 1-(4-бром-3-фторфенил)-2-метилпропан-2-ола с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 155: Синтез 5'-((1R,2R,4S)-рел-2-амино-7-азабицикло[2.2.1]гептан-7-карбонил)-2'',3-дифтор-4''-(2-метоксиэтил)-[1,1':2',1''-терфенил]-4-карбонитрила-изомер-B
Стадия 1
трет-Бутил-(1S,3R,4R)-рел-3-амино-7-азабицикло[2.2.1]гептан-7-карбоксилат (550 мг) растворяют в ТГФ (13,0 мл). При 0°C туда добавляют ТЭА (0,720 мл) и хлорид 2,4-динитробензолсульфонила (829 мг) с последующим перемешиванием при комнатной температуре в течение 1 часа. Туда добавляют этилацетат, смесь промывают последовательно водой и насыщенным раствором соли и сушат над безводным сульфатом натрия и растворитель отгоняют. Остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем (подвижная фаза: гексан/этилацетат) с получением трет-бутил-(1S,3R,4R)-рел-3-[(2,4-динитрофенил)сульфониламино]-7-азабицикло[2.2.1]гептан-7-карбоксилата.
Стадия 2
Трет-бутил-(1S,3R,4R)-рел-3-[(2,4-динитрофенил)сульфониламино]-7-азабицикло[2.2.1]гептан-7-карбоксилат (440 мг), полученный на стадии 1 выше, подвергают хиральному разделению с применением SFC (устройство: Thar SFC prep 80 система, колонка: CHIRALPAKIE 20×250 мм, скорость потока: 50 г/мин, подвижная фаза: CO2/MeOH=90/10) с получением (1S,3R,4R)-рел-3-[(2,4-динитрофенил)сульфониламино]-7-азабицикло[2.2.1]гептан-7-карбоксилата-изомер-A (более быстрый изомер) и (1S,3R,4R)-рел-3-[(2,4-динитрофенил)сульфониламино]-7-азабицикло[2.2.1]гептан-7-карбоксилата-изомер-B (более медленный изомер).
Каждый изомер анализируют в следующих условиях ВЭЖХ.
Колонка: CHIRALPAK IE 4,6×150 мм
Подвижная фаза: гексан (0,1% триэтиламин)/этанол=85/15
Скорость потока: 1,0 мл/мин
Время удержания каждого изомера:
(1S,3R,4R)-рел-3-[(2,4-динитрофенил)сульфониламино]-7-азабицикло[2.2.1]гептан-7-карбоксилат-изомер-A: 10,903 мин (более быстрый изомер)
(1S,3R,4R)-рел-3-[(2,4-динитрофенил)сульфониламино]-7-азабицикло[2.2.1]гептан-7-карбоксилат-изомер-B: 14,028 мин (более медленный изомер)
Стадия 3
(1S,3R,4R)-Рел-3-[(2,4-динитрофенил)сульфониламино]-7-азабицикло[2.2.1]гептан-7-карбоксилат-изомер-B (200 мг), полученный на стадии 2 выше, растворяют в этилацетате (1,00 мл). При комнатной температуре туда добавляют 4 N раствор хлористоводородной кислоты-этилацетата (2,00 мл) с последующим перемешиванием при комнатной температуре в течение 2 часов. Реакционную смесь концентрируют в вакууме с получением гидрохлорида N-((1R,2R,4S)-рел-7-азабицикло[2.2.1]гептан-2-ил)-2,4-динитробензолсульфонамида-изомер-B.
Стадия 4
3-(4-Циано-3-фторфенил)-4-[2-фтор-4-(2-метоксиэтил)фенил]бензойную кислоту (8 мг), полученную на стадии 2 из Примера 22, и гидрохлорид N-((1R,2R,4S)-рел-7-азабицикло[2.2.1]гептан-2-ил)-2,4-динитробензолсульфонамида-изомер-B (8,47 мг), полученный на стадии 3 выше, растворяют в ТГФ (0,30 мл). При комнатной температуре туда добавляют ТЭА (8,49 мкл) и ГАТУ (15,5 мг), затем перемешивают при 50°C в течение 1 часа. Растворитель отгоняют при пониженном давлении. Остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем (подвижная фаза: гексан/этилацетат) с получением N-[(1S,3R,4R)-рел-7-[3-(4-циано-3-фторфенил)-4-[2-фтор-4-(2-метоксиэтил)фенил]бензоил]-7-азабицикло[2.2.1]гептан-3-ил]-2,4-динитробензолсульфонамида-изомер-B.
Стадия 5
N-[(1S,3R,4R)-рел-7-[3-(4-циано-3-фторфенил)-4-[2-фтор-4-(2-метоксиэтил)фенил]бензоил]-7-азабицикло[2.2.1]гептан-3-ил]-2,4-динитробензолсульфонамид-изомер-B (14,5 мг), полученный на стадии 4 выше, растворяют в ДХМ (1 мл). При 0°C туда добавляют меркаптоуксусную кислоту (2,83 мкл) и ТЭА (7,49 мкл) с последующим перемешиванием при комнатной температуре в течение 2 часов. Туда добавляют хлороформ, смесь промывают 4 N водным раствором гидроксида натрия и сушат над безводным сульфатом натрия и растворитель отгоняют. Остаток очищают ВЭЖХ с обращенной фазой (подвижная фаза: вода/ацетонитрил) с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 156: Синтез 5'-((1R,2R,4S)-рел-2-амино-7-азабицикло[2.2.1]гептан-7-карбонил)-2'',3-дифтор-4''-(2-метоксиэтил)-[1,1':2',1''-терфенил]-4-карбонитрила-изомер-A
Стадия 1
(1S,3R,4R)-рел-3-[(2,4-динитрофенил)сульфониламино]-7-азабицикло[2.2.1]гептан-7-карбоксилат-изомер-A (200 мг), полученный на стадии 2 из Примера 155, растворяют в этилацетате (1,00 мл). При комнатной температуре туда добавляют 4 N раствор хлористоводородной кислоты-этилацетата (2,00 мл) с последующим перемешиванием при комнатной температуре в течение 2 часов. Реакционную смесь концентрируют в вакууме с получением гидрохлорида N-((1R,2R,4S)-рел-7-азабицикло[2.2.1]гептан-2-ил)-2,4-динитробензолсульфонамида-изомер-A.
Стадия 2
3-(4-циано-3-фторфенил)-4-[2-фтор-4-(2-метоксиэтил)фенил]бензойную кислоту (8 мг), полученную на стадии 2 из Примера 22, и гидрохлорид N-((1R,2R,4S)-рел-7-азабицикло[2.2.1]гептан-2-ил)-2,4-динитробензолсульфонамида-изомер-A (8,47 мг), полученный на стадии 1 выше, растворяют в ТГФ (0,30 мл). При комнатной температуре туда добавляют ТЭА (8,49 мкл) и ГАТУ (15,5 мг), затем перемешивают при 50°C в течение 1 часа. Растворитель отгоняют при пониженном давлении. Остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем (подвижная фаза: гексан/этилацетат) с получением N-[(1S,3R,4R)-рел-7-[3-(4-циано-3-фторфенил)-4-[2-фтор-4-(2-метоксиэтил)фенил]бензоил]-7-азабицикло[2.2.1]гептан-3-ил]-2,4-динитробензолсульфонамида-изомер-A.
Стадия 3
N-[(1S,3R,4R)-рел-7-[3-(4-циано-3-фторфенил)-4-[2-фтор-4-(2-метоксиэтил)фенил]бензоил]-7-азабицикло[2.2.1]гептан-3-ил]-2,4-динитробензолсульфонамид-изомер-A (14,5 мг), полученный на стадии 2 выше, растворяют в ДХМ (1 мл). При 0°C туда добавляют меркаптоуксусную кислоту (2,83 мкл) и ТЭА (7,49 мкл) с последующим перемешиванием при комнатной температуре в течение 2 часов. Туда добавляют хлороформ, смесь промывают 4 N водным раствором гидроксида натрия и сушат над безводным сульфатом натрия и растворитель отгоняют. Остаток очищают ВЭЖХ с обращенной фазой (подвижная фаза: вода/ацетонитрил) с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 157: Синтез 5'-((3-эндо)-3-амино-8-азабицикло[3.2.1]октан-8-карбонил)-3-фтор-2'-(3-метилимидазо[1,5-a]пиридин-7-ил)-[1,1'-бифенил]-4-карбонитрила
Методику стадий 1-5 из Примера 41 проводят с применением 7-бром-3-метилимидазо[1,5-a]пиридина вместо 1-(4-бром-3-фторфенил)-2-метилпропан-2-ола с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 158: Синтез 5'-((3-эндо)-3-амино-8-азабицикло[3.2.1]октан-8-карбонил)-3-фтор-2'-(3-метилпиразоло[1,5-a]пиримидин-6-ил)-[1,1'-бифенил]-4-карбонитрила
Методику стадий 1-5 из Примера 41 проводят с применением 6-бром-3-метилпиразоло[1,5-a]пиримидина вместо 1-(4-бром-3-фторфенил)-2-метилпропан-2-ола с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 159: Синтез 5'-((3-эндо)-3-амино-8-азабицикло[3.2.1]октан-8-карбонил)-3-фтор-2'-(6-фтор-2-(2-гидрокси-2-метилпропил)-2H-индазол-5-ил)-[1,1'-бифенил]-4-карбонитрила
Стадия 1
5-Бром-6-фтор-1H-индазол (94 мг) растворяют в ДМФ (1,5 мл). При комнатной температуре туда добавляют карбонат цезия (285 мг) и 2,2-диметилоксиран (0,078 мл), затем перемешивают при 90°C в течение 16 часов. Реакцию гасят насыщенным NH4Cl водным раствором, туда добавляют этилацетат и полученную смесь промывают последовательно водой и насыщенным раствором соли. После того, как органический слой сушат над сульфатом натрия, растворитель отгоняют. Остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем (подвижная фаза: гексан/этилацетат) с получением 1-(5-бром-6-фториндазол-2-ил)-2-метилпропан-2-ола.
Стадия 2
Методику стадий 1-5 из Примера 41 проводят с применением 1-(5-бром-6-фториндазол-2-ил)-2-метилпропан-2-ола, полученного на стадии 1 выше, вместо 1-(4-бром-3-фторфенил)-2-метилпропан-2-ола с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 160: Синтез 5'-((3-эндо)-3-амино-8-азабицикло[3.2.1]октан-8-карбонил)-2'-(1-этил-6-фтор-1H-бензо[d][1.2.3]триазол-5-ил)-3-фтор-[1,1'-бифенил]-4-карбонитрила
Методику стадий 1-5 из Примера 41 проводят с применением 5-бром-1-этил-6-фторбензотриазола вместо 1-(4-бром-3-фторфенил)-2-метилпропан-2-ола с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 161: Синтез 5'-((3-эндо)-3-амино-8-азабицикло[3.2.1]октан-8-карбонил)-2'-(6,7-дифтор-1-(2-гидрокси-2-метилпропил)-1H-бензо[d][1.2.3]триазол-5-ил)-3-фтор-[1,1'-бифенил]-4-карбонитрила
Стадия 1
1-(2,3-Дифтор-6-нитроанилино)-2-метилпропан-2-ол (6,20 г) растворяют в ДМФ (84,0 мл). При комнатной температуре туда добавляют NBS (5,80 г), затем перемешивают при 90°C в течение 1 часа. Туда добавляют этилацетат, смесь промывают последовательно водой и насыщенным раствором соли и сушат над безводным сульфатом натрия и растворитель отгоняют. Остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем (подвижная фаза: гексан/этилацетат) с получением 1-(4-бром-2,3-дифтор-6-нитроанилино)-2-метилпропан-2-ола.
Стадия 2
1-(4-Бром-2,3-дифтор-6-нитроанилино)-2-метилпропан-2-ол (5,67 г), полученный на стадии 1 выше, растворяют в этаноле (87,2 мл). При комнатной температуре туда добавляют хлорид аммония (5,67 г), железо (5,67 г) и воду (87,2 мл), затем перемешивают при 60°C в течение ночи. Реакционную смесь пропускают через Целит и промывают этилацетатом. Фильтрат концентрируют в вакууме, туда добавляют этилацетат, смесь промывают последовательно водой и насыщенным раствором соли и сушат над безводным сульфатом натрия и растворитель отгоняют. Остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем (подвижная фаза: гексан/этилацетат) с получением 1-(6-амино-4-бром-2,3-дифторанилино)-2-метилпропан-2-ола.
Стадия 3
1-(6-Амино-4-бром-2,3-дифторанилино)-2-метилпропан-2-ол (4,36 г), полученный на стадии 2 выше, растворяют в воде (28,4 мл) и ТГФ (28,4 мл). При 0°C туда добавляют 12 N хлористоводородную кислоту (28,4 мл) и нитрит натрия (1,80 г) с последующим перемешиванием при комнатной температуре в течение 1 часа. Туда добавляют этилацетат, смесь промывают последовательно водой и насыщенным раствором соли и сушат над безводным сульфатом натрия и растворитель отгоняют. Остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем (подвижная фаза: гексан/этилацетат) с получением 1-(5-бром-6,7-дифторбензотриазол-1-ил)-2-метилпропан-2-ола.
Стадия 4
Трет-бутил-N-[(3-эндо)-8-[3-(4-циано-3-фторфенил)-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензоил]-8-азабицикло[3.2.1]октан-3-ил]карбамат (50 мг), полученный на стадии 3 Примера 41, и 1-(5-бром-6,7-дифторбензотриазол-1-ил)-2-метилпропан-2-ол (39,9 мг), полученный на стадии 3 выше, растворяют в 1,4-диоксане (0,50 мл). При комнатной температуре туда добавляют Pd(dba)2 (2,50 мг), X-phos (4,14 мг) и трикалийфосфат (55,3 мг) и смесь перемешивают в микроволновом реакторе при 125°C в течение 1 часа. Реакционную смесь фильтруют и растворитель отгоняют. Остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем (подвижная фаза: хлороформ/метанол) с получением трет-бутил-N-[(3-эндо)-8-[3-(4-циано-3-фторфенил)-4-[6,7-дифтор-1-(2-гидрокси-2-метилпропил)бензотриазол-5-ил]бензоил]-8-азабицикло[3.2.1]октан-3-ил]карбамата.
Стадия 5
Трет-бутил-N-[(3-эндо)-8-[3-(4-циано-3-фторфенил)-4-[6,7-дифтор-1-(2-гидрокси-2-метилпропил)бензотриазол-5-ил]бензоил]-8-азабицикло[3.2.1]октан-3-ил]карбамат (55,0 мг), полученный на стадии 4 выше, растворяют в MeOH (1,0 мл). При комнатной температуре туда добавляют 12 N хлористоводородную кислоту (1,0 мл) с последующим перемешиванием при комнатной температуре в течение 1 часа. Туда добавляют 2 N водный раствор гидроксида натрия (6,00 мл) и хлороформ, смесь промывают последовательно водой и насыщенным раствором соли и сушат над безводным сульфатом натрия и растворитель отгоняют. Остаток очищают ВЭЖХ с обращенной фазой (подвижная фаза: вода/ацетонитрил) с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 162: Синтез (S)-5'-(3-аминопирролидин-1-карбонил)-2'-(6,7-дифтор-1-(2-гидрокси-2-метилпропил)-1H-бензо[d][1.2.3]триазол-5-ил-3-фтор-[1,1'-бифенил]-4-карбонитрила
Стадия 1
Трет-бутил-N-[(3S)-1-[3-(4-циано-3-фторфенил)-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензоил]пирролидин-3-ил]карбамат (100 мг), полученный на стадии 1 из Примера 37, и 1-(5-бром-6,7-дифторбензотриазол-1-ил)-2-метилпропан-2-ол (85,8 мг), полученный на стадии 3 из Примера 161, растворяют в 1,4-диоксане (0,934 мл). При комнатной температуре туда добавляют Pd(dba)2 (5,37 мг), X-phos (8,90 мг) и трикалийфосфат (119 мг) и смесь перемешивают в микроволновом реакторе при 125°C в течение 1 часа. Реакционную смесь фильтруют и растворитель отгоняют. Остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем (подвижная фаза: хлороформ/метанол) с получением трет-бутил-N-[(3S)-1-[3-(4-циано-3-фторфенил)-4-[6,7-дифтор-1-(2-гидрокси-2-метилпропил)бензотриазол-5-ил]бензоил]пирролидин-3-ил]карбамата.
Стадия 2
Трет-бутил-N-[(3S)-1-[3-(4-циано-3-фторфенил)-4-[6,7-дифтор-1-(2-гидрокси-2-метилпропил)бензотриазол-5-ил]бензоил]пирролидин-3-ил]карбамат (99,8 мг), полученный на стадии 1 выше, растворяют в MeOH (1,0 мл). При комнатной температуре туда добавляют 12 N хлористоводородную кислоту (1,0 мл) с последующим перемешиванием при комнатной температуре в течение 1 часа. Затем туда добавляют 2 N водный раствор гидроксида натрия (6,00 мл) и хлороформ, смесь промывают последовательно водой и насыщенным раствором соли и сушат над безводным сульфатом натрия и растворитель отгоняют. Остаток очищают ВЭЖХ с обращенной фазой (подвижная фаза: вода/ацетонитрил) с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 163: Синтез 2'',3-дифтор-4''-(2-метоксиэтил)-5'-(пиперазин-1-карбонил)-[1,1':2',1''-терфенил]-4-карбонитрила
Методику стадий 1-4 из Примера 22 проводят с применением трет-бутилпиперазин-1-карбоксилата вместо трет-бутил-N-[(3-эндо)-8-азабицикло[3.2.1]октан-3-ил]карбамата с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 164: Синтез (R)-5'-(3-аминопиперидин-1-карбонил)-2'',3-дифтор-4''-(2-метоксиэтил)-[1,1':2',1''-терфенил]-4-карбонитрила
Методику стадий 1-4 из Примера 22 проводят с применением трет-бутил-N-[(3R)-3-пиперидил]карбамата вместо трет-бутил-N-[(3-эндо)-8-азабицикло[3.2.1]октан-3-ил]карбамата с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 165: Синтез 5'-(4-аминоазепан-1-карбонил)-2'',3-дифтор-4''-(2-метоксиэтил)-[1,1':2',1''-терфенил]-4-карбонитрила
Методику стадий 1-4 из Примера 22 проводят с применением трет-бутил-N-(азепан-4-ил)карбамата вместо трет-бутил-N-[(3-эндо)-8-азабицикло[3.2.1]октан-3-ил]карбамата с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 166: Синтез 5'-((1S,2S,4R)-рел-2-амино-7-азабицикло[2.2.1]гептан-7-карбонил)-2'',3-дифтор-4''-(2-гидрокси-2-метилпропил)-[1,1':2',1''-терфенил]-4-карбонитрила-изомер-B
Стадия 1
Трет-бутил-3-(4-циано-3-фторфенил)-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензоат (500 мг), полученный на стадии 1 из Примера 41, и 1-(4-бром-3-фторфенил)-2-метилпропан-2-ол (379 мг), полученный на стадии 1 из Примера 28, растворяют в 1,4-диоксане (5,9 мл). При комнатной температуре туда добавляют Pd(dba)2 (68 мг), X-phos (113 мг) и трикалийфосфат (752 мг), затем перемешивают при 100°C в течение ночи. Растворитель отгоняют, и остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем (подвижная фаза: гексан/этилацетат) с получением трет-бутил-3-(4-циано-3-фторфенил)-4-[2-фтор-4-(2-гидрокси-2-метилпропил)фенил]бензоата.
Стадия 2
Трет-бутил-3-(4-циано-3-фторфенил)-4-[2-фтор-4-(2-гидрокси-2-метилпропил)фенил]бензоат (300 мг), полученный на стадии 1 выше, растворяют в ТГФ (0,9 мл). При 0°C туда добавляют 12 N хлористоводородную кислоту (0,9 мл) с последующим перемешиванием при комнатной температуре в течение 2 часов. Затем туда добавляют МТБЭ, смесь промывают водой и сушат над безводным сульфатом натрия и растворитель отгоняют с получением 3-(4-циано-3-фторфенил)-4-[2-фтор-4-(2-гидрокси-2-метилпропил)фенил]бензойной кислоты.
Стадия 3
3-(4-Циано-3-фторфенил)-4-[2-фтор-4-(2-гидрокси-2-метилпропил)фенил]бензойную кислоту (10 мг), полученную на стадии 2 выше, и гидрохлорид N-((1R,2R,4S)-рел-7-азабицикло[2.2.1]гептан-2-ил)-2,4-динитробензолсульфонамида-изомер-B (10,2 мг), полученный на стадии 3 из Примера 155, растворяют в ТГФ (0,12 мл). При комнатной температуре туда добавляют ТЭА (0,014 мл) и ГАТУ (18,7 мг), затем перемешивают при 50°C в течение 1 часа. Реакционную смесь концентрируют в вакууме и остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем (подвижная фаза: гексан/этилацетат) с получением N-[(1S,3R,4R)-рел-7-[3-(4-циано-3-фторфенил)-4-[2-фтор-4-(2-гидрокси-2-метилпропил)фенил]бензоил]-7-азабицикло[2.2.1]гептан-3-ил]-2,4-динитробензолсульфонамида-изомер-B.
Стадия 4
N-[(1S,3R,4R)-Рел-7-[3-(4-циано-3-фторфенил)-4-[2-фтор-4-(2-гидрокси-2-метилпропил)фенил]бензоил]-7-азабицикло[2.2.1]гептан-3-ил]-2,4-динитробензолсульфонамид-изомер-B (15 мг), полученный на стадии 3 выше, растворяют в ДХМ (0,2 мл). При 0°C туда добавляют меркаптоуксусную кислоту (2 мкл) и ТЭА (8,6 мкл) с последующим перемешиванием при комнатной температуре в течение 2 часов. Туда добавляют этилацетат, и смесь промывают последовательно водой и насыщенным раствором соли. После того, как органический слой сушат над сульфатом натрия, растворитель отгоняют. Остаток очищают ВЭЖХ с обращенной фазой (подвижная фаза: вода/ацетонитрил) с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 167: Синтез (S)-5'-(3-аминопирролидин-1-карбонил)-2'-(6,7-дифтор-1-метил-1H-бензо[d][1.2.3]триазол-5-ил)-3-фтор-[1,1'-бифенил]-4-карбонитрила
Стадия 1
Трет-бутил-N-[(3S)-1-[3-(4-циано-3-фторфенил)-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензоил]пирролидин-3-ил]карбамат (60 мг), полученный на стадии 1 из Примера 37, и 5-бром-6,7-дифтор-1-метилбензотриазол (41,7 мг) растворяют в 1,4-диоксане (0,56 мл). При комнатной температуре туда добавляют Pd(dba)2 (3,22 мг), X-phos (5,34 мг) и трикалийфосфат (71,4 мг) и смесь перемешивают в микроволновом реакторе при 125°C в течение 1 часа. Реакционную смесь фильтруют и растворитель отгоняют. Остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем (подвижная фаза: хлороформ/метанол) с получением трет-бутил-N-[(3S)-1-[3-(4-циано-3-фторфенил)-4-(6,7-дифтор-1-метилбензотриазол-5-ил)бензоил]пирролидин-3-ил]карбамата.
Стадия 2
Трет-бутил-N-[(3S)-1-[3-(4-циано-3-фторфенил)-4-(6,7-дифтор-1-метилбензотриазол-5-ил)бензоил]пирролидин-3-ил]карбамат (20 мг), полученный на стадии 1 выше, растворяют в ТФК (0,40 мл) с последующим перемешиванием при комнатной температуре в течение 5 минут. После подтверждения завершения реакции ЖХМС туда добавляют ДМСО (1,60 мл) и очистку проводят ВЭЖХ с обращенной фазой (подвижная фаза: вода/ацетонитрил) с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 168: Синтез 5'-((3-эндо)-3-амино-8-азабицикло[3.2.1]октан-8-карбонил)-3-фтор-2'-(6-фтор-1-пропил-1H-бензо[d][1.2.3]триазол-5-ил)-[1,1'-бифенил]-4-карбонитрила
Методику стадий 1-5 из Примера 41 проводят с применением 5-бром-6-фтор-1-пропилбензотриазола вместо 1-(4-бром-3-фторфенил)-2-метилпропан-2-ола с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 169: Синтез (S)-5'-(3-аминопирролидин-1-карбонил)-2'-(6,7-дифтор-1-(2-метоксиэтил)-1H-бензо[d][1.2.3]триазол-5-ил)-3-фтор-[1,1'-бифенил]-4-карбонитрила
Стадия 1
Методику стадий 1-3 из Примера 161 проводят с применением 2,3-дифтор-N-(2-метоксиэтил)-6-нитроанилина вместо 1-(2,3-дифтор-6-нитроанилино)-2-метилпропан-2-ола с получением 5-бром-6,7-дифтор-1-(2-метоксиэтил)бензотриазола.
Стадия 2
Методику стадий 1-3 из Примера 37 проводят с применением 5-бром-6,7-дифтор-1-(2-метоксиэтил)бензотриазола, полученного на стадии 1 выше, вместо 1-(4-бром-3-фторфенил)-2-метилпропан-2-ола с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 170: Синтез (S)-5'-(3-аминопирролидин-1-карбонил)-3-фтор-2'-(6-фтор-1-(2-гидроксиэтил)-1H-индол-5-ил)-[1,1'-бифенил]-4-карбонитрила
Методику стадий 1-3 из Примера 37 проводят с применением 2-(5-бром-6-фториндол-1-ил)этанола вместо 1-(4-бром-3-фторфенил)-2-метилпропан-2-ола с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 171: Синтез 5'-((1R,2R,4S)-рел-2-амино-7-азабицикло[2.2.1]гептан-7-карбонил)-3-фтор-2'-(6-фтор-1-(2-гидрокси-2-метилпропил)-1H-индол-5-ил)-[1,1'-бифенил]-4-карбонитрила-изомер-B
Стадия 1
Трет-бутил-3-(4-циано-3-фторфенил)-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензоат (2,3 г), полученный на стадии 1 из Примера 41, и 1-(5-бром-6-фториндол-1-ил)-2-метилпропан-2-ол (2,02 г), полученный на стадии 1 из Примера 136, растворяют в 1,4-диоксане (18,1 мл). При комнатной температуре туда добавляют Pd(dba)2 (250 мг), X-phos (414 мг) и трикалийфосфат (3,46 г), затем перемешивают при 100°C в течение ночи. Растворитель отгоняют, остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем (подвижная фаза: гексан/этилацетат) и растворитель отгоняют. Остаток растворяют в ТГФ (40,0 мл). При 0°C туда добавляют 12 N хлористоводородную кислоту (30,0 мл) с последующим перемешиванием при комнатной температуре в течение 2 часов. Затем туда добавляют МТБЭ, смесь промывают водой и сушат над безводным сульфатом натрия и растворитель отгоняют с получением 3-(4-циано-3-фторфенил)-4-[6-фтор-1-(2-гидрокси-2-метилпропил)индол-5-ил]бензойной кислоты.
Стадия 2
3-(4-Циано-3-фторфенил)-4-[6-фтор-1-(2-гидрокси-2-метилпропил)индол-5-ил]бензойную кислоту (8 мг), полученную на стадии 1 выше, и гидрохлорид N-((1R,2R,4S)-рел-7-азабицикло[2.2.1]гептан-2-ил)-2,4-динитробензолсульфонамида-изомер-B (7,47 мг), полученный на стадии 3 из Примера 155, растворяют в ТГФ (0,30 мл). При комнатной температуре туда добавляют ТЭА (0,00748 мл) и ГАТУ (13,6 мг), затем перемешивают при 50°C в течение 1 часа. Реакционную смесь концентрируют в вакууме и остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем (подвижная фаза: гексан/этилацетат) с получением N-[(1S,3R,4R)-рел-7-[3-(4-циано-3-фторфенил)-4-[6-фтор-1-(2-гидрокси-2-метилпропил)индол-5-ил]бензоил]-7-азабицикло[2.2.1]гептан-3-ил]-2,4-динитробензолсульфонамида-изомер-B.
Стадия 3
N-[(1S,3R,4R)-Рел-7-[3-(4-циано-3-фторфенил)-4-[6-фтор-1-(2-гидрокси-2-метилпропил)индол-5-ил]бензоил]-7-азабицикло[2.2.1]гептан-3-ил]-2,4-динитробензолсульфонамид-изомер-B (13,8 мг), полученный на стадии 2 выше, растворяют в ДХМ (1,0 мл). При 0°C туда добавляют меркаптоуксусную кислоту (2,49 мкл) и ТЭА (7,48 мкл) с последующим перемешиванием при комнатной температуре в течение 1 часа. Туда добавляют хлороформ и 4 N гидроксид натрия, и смесь промывают последовательно водой и насыщенным раствором соли. После того, как органический слой сушат над сульфатом натрия, растворитель отгоняют. Остаток очищают ВЭЖХ с обращенной фазой (подвижная фаза: вода/ацетонитрил) с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 172: Синтез (S)-5'-(3-аминопирролидин-1-карбонил)-2'-(6,7-дифтор-1-(2-гидрокси-2-метилпропил)-1H-индол-5-ил)-3-фтор-[1,1'-бифенил]-4-карбонитрила
Стадия 1
5-Бром-6,7-дифтор-1H-индол (300 мг) растворяют в ДМФ (4,31 мл). При комнатной температуре туда добавляют Cs2CO3 (843 мг) и 2,2-диметилоксиран (0,230 мл), затем перемешивают при 80°C в течение 3 часов. Реакционную смесь фильтруют, и растворитель отгоняют. Туда добавляют этилацетат, смесь промывают последовательно насыщенным водным раствором хлорида аммония, водой и насыщенным раствором соли и сушат над безводным сульфатом натрия и растворитель отгоняют. Остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем (подвижная фаза: гексан/этилацетат) с получением 1-(5-бром-6,7-дифториндол-1-ил)-2-метилпропан-2-ола.
Стадия 2
Трет-бутил-3-(4-циано-3-фторфенил)-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензоат (210 мг), полученный на стадии 1 из Примера 41, и 1-(5-бром-6,7-дифториндол-1-ил)-2-метилпропан-2-ол (196 мг), полученный на стадии 1 выше, растворяют в 1,4-диоксане (1,65 мл). При комнатной температуре туда добавляют Pd(dba)2 (22,8 мг), X-phos (37,8 мг) и трикалийфосфат (316 мг), затем перемешивают при 100°C в течение ночи. Растворитель отгоняют, остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем (подвижная фаза: гексан/этилацетат) и растворитель отгоняют. Остаток растворяют в ТГФ (2,63 мл). При 0°C туда добавляют 12 N хлористоводородную кислоту (2,1 мл) с последующим перемешиванием при комнатной температуре в течение 2 часов. Туда добавляют МТБЭ, смесь промывают водой и сушат над безводным сульфатом натрия и растворитель отгоняют с получением 3-(4-циано-3-фторфенил)-4-[6,7-дифтор-1-(2-гидрокси-2-метилпропил)индол-5-ил]бензойной кислоты.
Стадия 3
3-(4-Циано-3-фторфенил)-4-[6,7-дифтор-1-(2-гидрокси-2-метилпропил)индол-5-ил]бензойную кислоту (30 мг), полученную на стадии 2 выше, и трет-бутил-N-[(3S)-пирролидин-3-ил]карбамат (13,2 мг) растворяют в ТГФ (0,323 мл). При комнатной температуре туда добавляют ТЭА (0,027 мл) и ГАТУ (49,1 мг), затем перемешивают при 50°C в течение 1 часа. Растворитель отгоняют при пониженном давлении. Остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем (подвижная фаза: гексан/этилацетат) с получением трет-бутил-N-[(3S)-1-[3-(4-циано-3-фторфенил)-4-[6,7-дифтор-1-(2-гидрокси-2-метилпропил)индол-5-ил]бензоил]пирролидин-3-ил]карбамата.
Стадия 4
Трет-бутил-N-[(3S)-1-[3-(4-циано-3-фторфенил)-4-[6,7-дифтор-1-(2-гидрокси-2-метилпропил)индол-5-ил]бензоил]пирролидин-3-ил]карбамат (40 мг), полученный на стадии 3 выше, растворяют в MeOH (0,80 мл). При комнатной температуре туда добавляют 4 N раствор хлористоводородной кислоты-1,4-диоксана (0,80 мл) с последующим перемешиванием при комнатной температуре в течение 1 часа. Туда добавляют хлороформ и 2 N водный раствор гидроксида натрия (1,6 мл), смесь промывают водой и сушат над безводным сульфатом натрия и растворитель отгоняют. Остаток очищают ВЭЖХ с обращенной фазой (подвижная фаза: вода/ацетонитрил) с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 173: Синтез 5'-(7-амино-2-азабицикло[2.2.1]гептан-2-карбонил)-3-фтор-2'-(6-фтор-1-(2-гидрокси-2-метилпропил)-1H-индол-5-ил)-[1,1'-бифенил]-4-карбонитрила
3-(4-Циано-3-фторфенил)-4-[6-фтор-1-(2-гидрокси-2-метилпропил)индол-5-ил]бензойную кислоту (8 мг), полученную на стадии 1 из Примера 171, растворяют в ТГФ (0,3 мл). При комнатной температуре туда добавляют трет-бутил-N-(3-азабицикло[2.2.1]гептан-7-ил)карбамат (3,80 мг), ТЭА (0,0075 мл) и ГАТУ (13,6 мг), затем перемешивают при 50°C в течение 3 часов. После подтверждения завершения реакции ЖХМС, реакционную смесь концентрируют. ТФК (0,20 мл) добавляют к остатку с последующим перемешиванием при комнатной температуре в течение 5 минут. После подтверждения завершения реакции ЖХМС, ДМСО (0,8 мл) добавляют в реакционную смесь и очистку проводят ВЭЖХ с обращенной фазой (подвижная фаза: вода/ацетонитрил) с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 174: Синтез 5'-(7-амино-2-азабицикло[2.2.1]гептан-2-карбонил)-2'',3-дифтор-4''-(2-гидрокси-2-метилпропил)-[1,1':2',1''-терфенил]-4-карбонитрила
Стадия 1
3-(4-Циано-3-фторфенил)-4-[2-фтор-4-(2-гидрокси-2-метилпропил)фенил]бензойную кислоту (100 мг), полученную на стадии 2 из Примера 166, растворяют в ТГФ (0,982 мл). При комнатной температуре туда добавляют трет-бутил-N-(3-азабицикло[2.2.1]гептан-7-ил)карбамат (52,1 мг), ТЭА (0,103 мл) и ГАТУ (187 мг), затем перемешивают при 50°C в течение 3 часов. Остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем (подвижная фаза: гексан/этилацетат) с получением трет-бутил-N-[3-[3-(4-циано-3-фторфенил)-4-[2-фтор-4-(2-гидрокси-2-метилпропил)фенил]бензоил]-3-азабицикло[2.2.1]гептан-7-ил]карбамата.
Стадия 2
Трет-бутил-N-[3-[3-(4-циано-3-фторфенил)-4-[2-фтор-4-(2-гидрокси-2-метилпропил)фенил]бензоил]-3-азабицикло[2.2.1]гептан-7-ил]карбамат (30 мг), полученный на стадии 1 выше, растворяют в MeOH (0,5 мл). При комнатной температуре туда добавляют 12 N хлористоводородную кислоту (0,5 мл). Затем смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 0,5 часа, туда добавляют воду и 2 N водный раствор гидроксида натрия (3,0 мл). Смесь экстрагируют хлороформом и растворитель отгоняют. Остаток очищают ВЭЖХ с обращенной фазой (подвижная фаза: вода/ацетонитрил) с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 175: Синтез 5'-((1S,2S,4R)-рел-2-амино-7-азабицикло[2.2.1]гептан-7-карбонил)-2'-(6,7-дифтор-1-метил-1H-бензо[d][1.2.3]триазол-5-ил)-3-фтор-[1,1'-бифенил]-4-карбонитрила-изомер-B
Стадия 1
Трет-бутил-3-(4-циано-3-фторфенил)-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензоат (90 мг), полученный на стадии 1 из Примера 41, и 5-бром-6,7-дифтор-1-метилбензотриазол (68,6 мг) растворяют в 1,4-диоксане (0,71 мл). При комнатной температуре туда добавляют Pd(dba)2 (9,8 мг), X-phos (16 мг) и трикалийфосфат (135 мг), затем перемешивают при 100°C в течение ночи. Растворитель отгоняют, остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем (подвижная фаза: гексан/этилацетат) и растворитель отгоняют. Остаток растворяют в ТФК (1,0 мл), с последующим перемешиванием при комнатной температуре в течение 2 часов. Туда добавляют МТБЭ, смесь промывают водой и сушат над безводным сульфатом натрия и растворитель отгоняют с получением 3-(4-циано-3-фторфенил)-4-(6,7-дифтор-1-метилбензотриазол-5-ил)бензойной кислоты.
Стадия 2
3-(4-Циано-3-фторфенил)-4-(6,7-дифтор-1-метилбензотриазол-5-ил)бензойную кислоту (30 мг), полученную на стадии 1 выше, и гидрохлорид N-((1R,2R,4S)-рел-7-азабицикло[2.2.1]гептан-2-ил)-2,4-динитробензолсульфонамида-изомер-B (30,6 мг), полученный на стадии 3 из Примера 155, растворяют в ТГФ (0,367 мл). При комнатной температуре туда добавляют ТЭА (0,042 мл) и ГАТУ (55,9 мг), затем перемешивают при 50°C в течение 1 часа. Реакционную смесь концентрируют в вакууме, и остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем (подвижная фаза: гексан/этилацетат) с получением N-[(1R,3S,4S)-рел-7-[3-(4-циано-3-фторфенил)-4-(6,7-дифтор-1-метилбензотриазол-5-ил)бензоил]-7-азабицикло[2.2.1]гептан-3-ил]-2,4-динитробензолсульфонамида-изомер-B.
Стадия 3
N-[(1R,3S,4S)-рел-7-[3-(4-циано-3-фторфенил)-4-(6,7-дифтор-1-метилбензотриазол-5-ил)бензоил]-7-азабицикло[2.2.1]гептан-3-ил]-2,4-динитробензолсульфонамид-изомер-B (51 мг), полученный на стадии 2 выше, растворяют в ДХМ (0,70 мл). При 0°C туда добавляют меркаптоуксусную кислоту (5,8 мкл) и ТЭА (29,1 мкл) с последующим перемешиванием при комнатной температуре в течение 2 часов. Туда добавляют этилацетат, и смесь промывают последовательно водой и насыщенным раствором соли. После того, как органический слой сушат над сульфатом натрия, растворитель отгоняют. Остаток очищают ВЭЖХ с обращенной фазой (подвижная фаза: вода/ацетонитрил) с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 176: Синтез 5'-((1S,2S,4R)-рел-2-амино-7-азабицикло[2.2.1]гептан-7-карбонил)-3-фтор-2'-(6-фтор-1-(2-гидрокси-2-метилпропил)-1H-индазол-5-ил)-[1,1'-бифенил]-4-карбонитрила-изомер-B
Стадия 1
Трет-бутил-3-(4-циано-3-фторфенил)-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензоат (2,3 г), полученный на стадии 1 из Примера 41, и 1-(5-бром-6-фтор-1H-индазол-1-ил)-2-метилпропан-2-ол (2,03 г), полученный на стадии 1 из Примера 142, растворяют в 1,4-диоксане (18,7 мл). При комнатной температуре туда добавляют Pd(dba)2 (250 мг), X-phos (414 мг) и трикалийфосфат (3,46 г), затем перемешивают при 100°C в течение ночи. Растворитель отгоняют, остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем (подвижная фаза: гексан/этилацетат) и растворитель отгоняют. Остаток растворяют в ТГФ (10,0 мл). При 0°C туда добавляют 12 N хлористоводородную кислоту (10,0 мл) с последующим перемешиванием при комнатной температуре в течение 2 часов. Туда добавляют МТБЭ, смесь промывают водой и сушат над безводным сульфатом натрия и растворитель отгоняют с получением 3-(4-циано-3-фторфенил)-4-[6-фтор-1-(2-гидрокси-2-метилпропил)индазол-5-ил]бензойной кислоты.
Стадия 2
3-(4-Циано-3-фторфенил)-4-[6-фтор-1-(2-гидрокси-2-метилпропил)индазол-5-ил]бензойную кислоту (30 мг), полученную на стадии 1 выше, и гидрохлорид N-((1R,2R,4S)-рел-7-азабицикло[2.2.1]гептан-2-ил)-2,4-динитробензолсульфонамида-изомер-B (27,9 мг), полученный на стадии 3 из Примера 155, растворяют в ТГФ (0,34 мл). При комнатной температуре туда добавляют ТЭА (0,038 мл) и ГАТУ (51,0 мг), затем перемешивают при 50°C в течение 1 часа. Реакционную смесь концентрируют в вакууме и остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем (подвижная фаза: гексан/этилацетат) с получением N-[(1S,3R,4R)-рел-7-[3-(4-циано-3-фторфенил)-4-[6-фтор-1-(2-гидрокси-2-метилпропил)индазол-5-ил]бензоил]-7-азабицикло[2.2.1]гептан-3-ил]-2,4-динитробензолсульфонамида-изомер-B.
Стадия 3
N-[(1S,3R,4R)-Рел-7-[3-(4-циано-3-фторфенил)-4-[6-фтор-1-(2-гидрокси-2-метилпропил)индазол-5-ил]бензоил]-7-азабицикло[2.2.1]гептан-3-ил]-2,4-динитробензолсульфонамид-изомер-B (45 мг), полученный на стадии 2 выше, растворяют в ДХМ (0,58 мл). При 0°C туда добавляют меркаптоуксусную кислоту (4,9 мкл) и ТЭА (24 мкл) с последующим перемешиванием при комнатной температуре в течение 2 часов. Туда добавляют этилацетат, и смесь промывают последовательно водой и насыщенным раствором соли. После того, как органический слой сушат над сульфатом натрия, растворитель отгоняют. Остаток очищают ВЭЖХ с обращенной фазой (подвижная фаза: вода/ацетонитрил) с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 177: Синтез 5'-((1S,2S,4R)-рел-2-амино-7-азабицикло[2.2.1]гептан-7-карбонил)-2'-(6,7-дифтор-1-(2-гидрокси-2-метилпропил)-1H-бензо[d][1.2.3]триазол-5-ил)-3-фтор-[1,1'-бифенил]-4-карбонитрила-изомер-B
Стадия 1
Трет-бутил-3-(4-циано-3-фторфенил)-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензоат (3,2 г), полученный на стадии 1 из Примера 41, и 1-(5-бром-6,7-дифторбензотриазол-1-ил)-2-метилпропан-2-ол (3,01 г), полученный на стадии 3 из Примера 161, растворяют в 1,4-диоксане (25,2 мл). При комнатной температуре туда добавляют Pd(dba)2 (348 мг), X-phos (577 мг) и трикалийфосфат (4,81 г), затем перемешивают при 100°C в течение ночи. Растворитель отгоняют, остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем (подвижная фаза: гексан/этилацетат) и растворитель отгоняют. Остаток растворяют в ТГФ (15,0 мл). При 0°C туда добавляют 12 N хлористоводородную кислоту (15,0 мл) с последующим перемешиванием при комнатной температуре в течение 2 часов. Туда добавляют МТБЭ, смесь промывают водой и сушат над безводным сульфатом натрия и растворитель отгоняют с получением 3-(4-циано-3-фторфенил)-4-[6,7-дифтор-1-(2-гидрокси-2-метилпропил)бензотриазол-5-ил]бензойной кислоты.
Стадия 2
3-(4-Циано-3-фторфенил)-4-[6,7-дифтор-1-(2-гидрокси-2-метилпропил)бензотриазол-5-ил]бензойную кислоту (30 мг), полученную на стадии 1 выше, и гидрохлорид N-((1S,2S,4R)-рел-7-азабицикло[2.2.1]гептан-2-ил)-2,4-динитробензолсульфонамида-изомер-B (26,8 мг) полученный на стадии 3 из Примера 155, растворяют в ТГФ (0,33 мл). При комнатной температуре туда добавляют ТЭА (0,037 мл) и ГАТУ (48,9 мг), затем перемешивают при 50°C в течение 1 часа. Реакционную смесь концентрируют в вакууме и остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем (подвижная фаза: гексан/этилацетат) с получением N-[(1S,2S,4R)-рел-7-[3-(4-циано-3-фторфенил)-4-[6,7-дифтор-1-(2-гидрокси-2-метилпропил)бензотриазол-5-ил]бензоил]-7-азабицикло[2.2.1]гептан-3-ил]-2,4-динитробензолсульфонамида-изомер-B.
Стадия 3
N-[(1S,2S,4R)-Рел-7-[3-(4-циано-3-фторфенил)-4-[6,7-дифтор-1-(2-гидрокси-2-метилпропил)бензотриазол-5-ил]бензоил]-7-азабицикло[2.2.1]гептан-3-ил]-2,4-динитробензолсульфонамид-изомер-B (43 мг), полученный на стадии 2 выше, растворяют в ДХМ (0,54 мл). При 0°C туда добавляют меркаптоуксусную кислоту (4,5 мкл) и ТЭА (22,7 мкл) с последующим перемешиванием при комнатной температуре в течение 2 часов. Туда добавляют этилацетат, и смесь промывают последовательно водой и насыщенным раствором соли. После того, как органический слой сушат над сульфатом натрия, растворитель отгоняют. Остаток очищают ВЭЖХ с обращенной фазой (подвижная фаза: вода/ацетонитрил) с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 178: Синтез 5'-((3-эндо)-3-амино-8-азабицикло[3.2.1]октан-8-карбонил)-2'-(3-бром-6-фтор-1-(2-гидрокси-2-метилпропил)-1H-индазол-5-ил)-3-фтор-[1,1'-бифенил]-4-карбонитрила
Стадия 1
Методику стадий 1-4 из Примера 41 проводят с применением 1-(5-бром-6-фториндазол-1-ил)-2-метилпропан-2-ола, полученного на стадии 1 из Примера 142, вместо 1-(4-бром-3-фторфенил)-2-метилпропан-2-ола с получением трет-бутил-N-((3-эндо)-8-(4'-циано-3'-фтор-6-(6-фтор-1-(2-гидрокси-2-метилпропил)-1H-индазол-5-ил-[1,1'-бифенил]-3-карбонил)-8-азабицикло[3.2.1]октан-3-ил)карбамата.
Стадия 2
Трет-бутил-N-((3-эндо)-8-(4'-циано-3'-фтор-6-(6-фтор-1-(2-гидрокси-2-метилпропил)-1H-индазол-5-ил-[1,1'-бифенил]-3-карбонил)-8-азабицикло[3.2.1]октан-3-ил)карбамат (10 мг), полученный на стадии 1 выше, растворяют в ДМФ (0,076 мл). Туда добавляют NBS (3,5 мг), затем перемешивают при 80°C в течение ночи. Реакционную смесь разбавляют ДМСО до 1 мл и очистку проводят ВЭЖХ с обращенной фазой (подвижная фаза: вода/ацетонитрил) с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 179: Синтез 5'-((3-эндо)-3-амино-8-азабицикло[3.2.1]октан-8-карбонил)-3-фтор-2'-(5-фтор-3-метилбензо[d]изоксазол-6-ил)-[1,1'-бифенил]-4-карбонитрила
Стадия 1
3-Бром-4-фторфенол (5 г) растворяют в дихлорметане (114 мл). При 0°C туда добавляют ТЭА (5,5 мл) и ацетилхлорид (2,8 мл) по каплям. Реакционную смесь перемешивают при 20°C в течение 30 минут и разбавляют дихлорметаном (100 мл). Полученный продукт промывают 0,5 N хлористоводородной кислотой, насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным раствором соли, и растворитель отгоняют с получением 3-бром-4-фторфенилацетата.
Стадия 2
Комплекс трифторида бора-уксусной кислоты (53 мл) добавляют к 3-бром-4-фторфенилацетату (6,2 г), полученному на стадии 1 выше, затем перемешивают при 155°C в течение 14 часов. Реакционную смесь охлаждают до 0°C и туда добавляют лед. Осадок собирают фильтрацией, промывают водой при 0°C и сушат. Полученное твердое вещество очищают хроматографией на колонке с силикагелем (подвижная фаза: гексан/этилацетат) с получением 1-(4-бром-5-фтор-2-гидроксифенил)этанона.
Стадия 3
MeOH (30 мл) добавляют к 1-(4-бром-5-фтор-2-гидроксифенил)этанону (2,16 г), полученному на стадии 2 выше, гидрохлориду гидроксиламина (1,29 г) и ацетату натрия (1,14 г), затем перемешивают при 60°C в течение 1 часа. Ледяную воду добавляют в реакционную смесь и осадок собирают фильтрацией, промывают водой и сушат. Полученное твердое вещество растворяют в ТГФ (31 мл) и туда добавляют ТЭА (1,68 мл) и N, N'-карбонилдиимидазол (1,65 г), затем перемешивают при 70°C в течение 1 часа. Растворитель отгоняют, и остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем (подвижная фаза: хлороформ/этилацетат) с получением 6-бром-5-фтор-3-метилбензо[d]изоксазола.
Стадия 4
Методику стадий 1-5 из Примера 41 проводят с применением 6-бром-5-фтор-3-метилбензо[d]изоксазола, полученного на стадии 3 выше, вместо 1-(4-бром-3-фторфенил)-2-метилпропан-2-ола с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 180: Синтез (S)-5'-(3-аминопирролидин-1-карбонил)-3-фтор-2'-(5-фтор-3-метилбензо[d]изоксазол-6-ил)-[1,1'-бифенил]-4-карбонитрила
Методику стадий 1-3 из Примера 37 проводят с применением 6-бром-5-фтор-3-метилбензо[d]изоксазола, полученного на стадии 3 из Примера 179, вместо 1-(4-бром-3-фторфенил)-2-метилпропан-2-ола с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 181: Синтез 5'-((3-эндо)-3-амино-8-азабицикло[3.2.1]октан-8-карбонил)-3-фтор-2'-(6-фтор-1-(2-гидрокси-2-метилпропил)-3-метил-1H-индазол-5-ил)-[1,1'-бифенил]-4-карбонитрил
Стадия 1
Трет-бутил-N-((3-эндо)-8-(4'-циано-3'-фтор-6-(6-фтор-1-(2-гидрокси-2-метилпропил)-1H-индазол-5-ил-[1,1'-бифенил]-3-карбонил)-8-азабицикло[3.2.1]октан-3-ил)карбамат (69 мг), полученный на стадии 1 из Примера 178, растворяют в ДМФ (0,53 мл) и туда добавляют NBS (38 мг), затем перемешивают при 80°C в течение ночи. Смесь охлаждают до комнатной температуры и туда добавляют Boc2O (200 мг) и ДМАП (1 мг) с последующим перемешиванием при комнатной температуре в течение 2 часов. Туда добавляют этилацетат и полученную смесь промывают последовательно водой и насыщенным раствором соли. После того, как органический слой сушат над сульфатом натрия, растворитель отгоняют. Растворитель отгоняют и остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем (подвижная фаза: гексан/этилацетат) с получением трет-бутил-((3-эндо)-8-(4'-циано-3'-фтор-6-(6-фтор-1-(2-гидрокси-2-метилпропил)-1H-индазол-5-ил)-[1,1'-бифенил]-3-карбонил)-8-азабицикло[3.2.1]октан-3-ил)карбамата.
Стадия 2
Трет-бутил-((3-эндо)-8-(4'-циано-3'-фтор-6-(6-фтор-1-(2-гидрокси-2-метилпропил)-1H-индазол-5-ил)-[1,1'-бифенил]-3-карбонил)-8-азабицикло[3.2.1]октан-3-ил)карбамат (15 мг), полученный на стадии 1 выше, триметилбороксин (7,7 мг), PdCl2(dppf)CH2Cl2 (1 мг) и карбонат цезия (20 мг) суспендируют в 1,4-диоксане, затем перемешивают при 125°C в течение 30 минут при микроволновом облучении. Растворитель отгоняют и к остатку добавляют трифторуксусную кислоту (0,2 мл) с последующим перемешиванием при комнатной температуре в течение 10 минут. Реакционную смесь разбавляют ДМСО до 1 мл и очистку проводят ВЭЖХ с обращенной фазой (подвижная фаза: вода/ацетонитрил) с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 182: Синтез 5'-((1R,2S,4S)-рел-2-амино-7-азабицикло[2.2.1]гептан-7-карбонил)-2'',3-дифтор-4''-(2-гидрокси-2-метилпропил)-[1,1':2',1''-терфенил]-4-карбонитрила
Стадия 1
Трет-бутил-(1S,3S,4R)-рел-3-амино-7-азабицикло[2.2.1]гептан-7-карбоксилат (919 мг) растворяют в ТГФ (14,4 мл). При 0°C туда добавляют ТЭА (1,81 мл) и хлорид 2,4-динитробензолсульфонила (1,73 г) с последующим перемешиванием при комнатной температуре в течение ночи. Туда добавляют этилацетат, смесь промывают последовательно водой и насыщенным раствором соли и сушат над безводным сульфатом натрия и растворитель отгоняют. Остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем (подвижная фаза: гексан/этилацетат) с получением трет-бутил-(1S,3S,4R)-рел-3-[(2,4-динитрофенил)сульфониламино]-7-азабицикло[2.2.1]гептан-7-карбоксилата.
Стадия 2
Трет-бутил-(1S,3S,4R)-рел-3-[(2,4-динитрофенил)сульфониламино]-7-азабицикло[2.2.1]гептан-7-карбоксилат (100 мг), полученный на стадии 1 выше, растворяют в этилацетате (1,00 мл). При комнатной температуре туда добавляют 4 N раствор хлористоводородной кислоты-этилацетата (2,00 мл) с последующим перемешиванием при комнатной температуре в течение 1 часа. Реакционную смесь концентрируют в вакууме с получением гидрохлорида N-[(1S,3S,4R)-рел-7-азабицикло[2.2.1]гептан-3-ил]-2,4-динитробензолсульфонамида.
Стадия 3
3-(4-Циано-3-фторфенил)-4-[2-фтор-4-(2-гидрокси-2-метилпропил)фенил]бензойную кислоту (30 мг), полученную на стадии 2 из Примера 166, и гидрохлорид N-[(1S,3S,4R)-рел-7-азабицикло[2.2.1]гептан-3-ил]-2,4-динитробензолсульфонамида (30,7 мг), полученный на стадии 2 выше, растворяют в ТГФ (0,40 мл). При комнатной температуре туда добавляют ТЭА (0,0420 мл) и ГАТУ (56,0 мг), затем перемешивают при 50°C в течение 1 часа. Реакционную смесь концентрируют в вакууме и остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем (подвижная фаза: гексан/этилацетат) с получением N-[(1S,3S,4R)-рел-7-[3-(4-циано-3-фторфенил)-4-[2-фтор-4-(2-гидрокси-2-метилпропил)фенил]бензоил]-7-азабицикло[2.2.1]гептан-3-ил]-2,4-динитробензолсульфонамида.
Стадия 4
N-[(1S,3S,4R)-Рел-7-[3-(4-циано-3-фторфенил)-4-[2-фтор-4-(2-гидрокси-2-метилпропил)фенил]бензоил]-7-азабицикло[2.2.1]гептан-3-ил]-2,4-динитробензолсульфонамид (55 мг), полученный на стадии 3 выше, растворяют в ДХМ (0,752 мл). При 0°C туда добавляют меркаптоуксусную кислоту (6,27 мкл) и ТЭА (31,4 мкл) с последующим перемешиванием при комнатной температуре в течение 2 часов. Туда добавляют хлороформ, смесь промывают 4 N водным раствором гидроксида натрия и сушат над безводным сульфатом натрия и растворитель отгоняют. Остаток очищают ВЭЖХ с обращенной фазой (подвижная фаза: вода/ацетонитрил) с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 183: Синтез 5'-((3-эндо)-3-амино-8-азабицикло[3.2.1]октан-8-карбонил)-2'-(6,7-дифтор-1-(2-гидрокси-2-метилпропил)-1H-индол-5-ил)-3-фтор-[1,1'-бифенил]-4-карбонитрила
Стадия 1
3-(4-Циано-3-фторфенил)-4-[6,7-дифтор-1-(2-гидрокси-2-метилпропил)индол-5-ил]бензойную кислоту (30 мг), полученную на стадии 2 из Примера 172, и трет-бутил-N-[(3-эндо)-8-азабицикло[3.2.1]октан-3-ил]карбамат (16,1 мг) растворяют в ТГФ (0,323 мл). При комнатной температуре туда добавляют ТЭА (0,027 мл) и ГАТУ (49,1 мг), затем перемешивают при 50°C в течение 1 часа. Растворитель отгоняют при пониженном давлении. Остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем (подвижная фаза: гексан/этилацетат) с получением трет-бутил-N-[(3-эндо)-8-[3-(4-циано-3-фторфенил)-4-[6,7-дифтор-1-(2-гидрокси-2-метилпропил)индол-5-ил]бензоил]-8-азабицикло[3.2.1]октан-3-ил]карбамата.
Стадия 2
Трет-бутил-N-[(3-эндо)-8-[3-(4-циано-3-фторфенил)-4-[6,7-дифтор-1-(2-гидрокси-2-метилпропил)индол-5-ил]бензоил]-8-азабицикло[3.2.1]октан-3-ил]карбамат (42 мг), полученный на стадии 1 выше, растворяют в MeOH (0,84 мл). При комнатной температуре туда добавляют 4 N раствор хлористоводородной кислоты-1,4-диоксана (0,84 мл) с последующим перемешиванием при комнатной температуре в течение 1 часа. Туда добавляют хлороформ и 2 N водный раствор гидроксида натрия (1,68 мл), смесь промывают водой и сушат над безводным сульфатом натрия и растворитель отгоняют. Остаток очищают ВЭЖХ с обращенной фазой (подвижная фаза: вода/ацетонитрил) с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 184: Синтез 5'-((1R,2S,4S)-рел-2-амино-7-азабицикло[2.2.1]гептан-7-карбонил)-3-фтор-2'-(6-фтор-1-(2-гидрокси-2-метилпропил)-1H-индол-5-ил)-[1,1'-бифенил]-4-карбонитрила
Методику стадий 1-3 из Примера 171 проводят с применением гидрохлорида N-[(1R,2S,4S)-рел-7-азабицикло[2.2.1]гептан-3-ил]-2,4-динитробензолсульфонамида, полученного на стадии 2 из Примера 182, вместо гидрохлорида N-((1R,2R,4S)-рел-7-азабицикло[2.2.1]гептан-2-ил)-2,4-динитробензолсульфонамида-изомер-B с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 185: Синтез 5'-((1S,2S,4R)-рел-2-амино-7-азабицикло[2.2.1]гептан-7-карбонил)-2'-(6,7-дифтор-1-метил-1H-бензо[d][1.2.3]триазол-5-ил)-3-фтор-[1,1'-бифенил]-4-карбонитрила
Методику стадий 3-4 из Примера 172 проводят с применением 3-(4-циано-3-фторфенил)-4-(6,7-дифтор-1-метилбензотриазол-5-ил)бензойной кислоты, полученной на стадии 1 из Примера 175, вместо 3-(4-циано-3-фторфенил)-4-[6,7-дифтор-1-(2-гидрокси-2-метилпропил)индол-5-ил]бензойной кислоты и с применением гидрохлорида трет-бутил-((1S,2S,4R)-рел-7-азабицикло[2.2.1]гептан-2-ил)карбамата вместо трет-бутил-N-[(3S)-пирролидин-3-ил]карбамата с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 186: Синтез 5'-((3-эндо)-3-амино-8-азабицикло[3.2.1]октан-8-карбонил)-3-фтор-2'-(6-фтор-1-(2-гидрокси-2-метилпропил)-7-метокси-1H-индазол-5-ил)-[1,1'-бифенил]-4-карбонитрила
Стадия 1
5-Бром-2,3,4-трифторбензальдегид (480 мг) растворяют в 1,2-диметоксиэтане (4,8 мл). При комнатной температуре туда добавляют моногидрат гидразина (7,68 мл), затем перемешивают при 80°C в течение 5 часов. Туда добавляют этилацетат, смесь промывают последовательно водой и насыщенным раствором соли и сушат над безводным сульфатом натрия и растворитель отгоняют. Остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем (подвижная фаза: гексан/этилацетат) с получением 5-бром-6,7-дифтор-1H-индазола.
Стадия 2
5-Бром-6,7-дифтор-1H-индазол (97 мг), полученный на стадии 1 выше, растворяют в ДМФ (1,38 мл). При комнатной температуре туда добавляют метанол (0,1 мл), карбонат цезия (271 мг), 2,2-диметилоксиран (0,074 мл), затем перемешивают при 80°C в течение 1 часа. Туда добавляют этилацетат, смесь промывают последовательно водой и насыщенным раствором соли и сушат над безводным сульфатом натрия и растворитель отгоняют. Остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем (подвижная фаза: гексан/этилацетат) с получением 1-(5-бром-6-фтор-7-метокси-индазол-1-ил)-2-метилпропан-2-ола.
Стадия 3
Трет-бутил-3-(4-циано-3-фторфенил)-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензоат (45,0 мг), полученный на стадии 1 из Примера 41, и 1-(5-бром-6-фтор-7-метоксииндазол-1-ил)-2-метилпропан-2-ол (43,8 мг), полученный на стадии 2 выше, растворяют в 1,4-диоксане (0,50 мл). При комнатной температуре туда добавляют Pd(dba)2 (4,89 мг), X-phos (8,11 мг) и трикалийфосфат (67,7 мг), затем перемешивают при 100°C в течение ночи. Растворитель отгоняют, остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем (подвижная фаза: гексан/этилацетат) и растворитель отгоняют. Остаток растворяют в ТГФ (0,45 мл). При 0°C туда добавляют 12 N хлористоводородную кислоту (0,56 мл) с последующим перемешиванием при комнатной температуре в течение 2 часов. Туда добавляют МТБЭ и смесь промывают водой и сушат над безводным сульфатом натрия. Затем растворитель отгоняют с получением 3-(4-циано-3-фторфенил)-4-[6-фтор-1-(2-гидрокси-2-метилпропил)-7-метоксииндазол-5-ил]бензойной кислоты.
Стадия 4
Методику стадий 3-4 из Примера 172 проводят с применением 3-(4-циано-3-фторфенил)-4-[6-фтор-1-(2-гидрокси-2-метилпропил)-7-метоксииндазол-5-ил]бензойной кислоты, полученной на стадии 3 выше, вместо 3-(4-циано-3-фторфенил)-4-[6,7-дифтор-1-(2-гидрокси-2-метилпропил)индол-5-ил]бензойной кислоты и с применением трет-бутил-((3-эндо)-8-азабицикло[3.2.1]октан-3-ил)карбамата вместо трет-бутил-N-[(3S)-пирролидин-3-ил]карбамата с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 187: Синтез (S)-5'-(3-аминопирролидин-1-карбонил)-2'-(6,7-дифтор-1-(2-гидрокси-2-метилпропил)-1H-индазол-5-ил)-3-фтор-[1,1'-бифенил]-4-карбонитрила
Стадия 1
5-Бром-6,7-дифтор-1H-индазол (101 мг), полученный на стадии 1 из Примера 186, растворяют в ДМФ (1,44 мл). При комнатной температуре туда добавляют карбонат цезия (283 мг) и 2,2-диметилоксиран (0,077 мл), затем перемешивают при 80°C в течение ночи. Туда добавляют этилацетат, и смесь промывают последовательно водой и насыщенным раствором соли и сушат над безводным сульфатом натрия. Затем растворитель отгоняют. Остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем (подвижная фаза: гексан/этилацетат) с получением 1-(5-бром-6,7-дифториндазол-1-ил)-2-метилпропан-2-ола.
Стадия 2
Методику стадий 2-4 из Примера 172 проводят с применением 1-(5-бром-6,7-дифториндазол-1-ил)-2-метилпропан-2-ола, полученного на стадии 1 выше, вместо 1-(5-бром-6,7-дифториндол-1-ил)-2-метилпропан-2-ола с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 188: Синтез 5'-((3-эндо)-3-амино-8-азабицикло[3.2.1]октан-8-карбонил)-2'-(6,7-дифтор-1-(2-гидрокси-2-метилпропил)-1H-индазол-5-ил)-3-фтор-[1,1'-бифенил]-4-карбонитрила
Методику стадий 2-4 из Примера 172 проводят с применением 1-(5-бром-6,7-дифториндазол-1-ил)-2-метилпропан-2-ола, полученного на стадии 1 из Примера 187, вместо 1-(5-бром-6,7-дифториндол-1-ил)-2-метилпропан-2-ола и с применением трет-бутил-((3-эндо)-8-азабицикло[3.2.1]октан-3-ил)карбамата вместо трет-бутил-N-[(3S)-пирролидин-3-ил]карбамата с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 189: Синтез 5'-((1S,2S,4R)-рел-2-амино-7-азабицикло[2.2.1]гептан-7-карбонил)-3-фтор-2'-(6-фтор-1-(2-гидрокси-2-метилпропил)-1H-индазол-5-ил)-[1,1'-бифенил]-4-карбонитрила
Методику стадий 2-4 из Примера 172 проводят с применением 1-(5-бром-6-фториндазол-1-ил)-2-метилпропан-2-ола, полученного на стадии 1 из Примера 142, вместо 1-(5-бром-6,7-дифториндол-1-ил)-2-метилпропан-2-ола и с применением гидрохлорида трет-бутил-((1S,2S,4R)-рел-7-азабицикло[2.2.1]гептан-2-ил)карбамата вместо трет-бутил-N-[(3S)-пирролидин-3-ил]карбамата с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 190: Синтез (S)-5'-(3-амино-3-метилпирролидин-1-карбонил)-3-фтор-2'-(6-фтор-1-(2-гидрокси-2-метилпропил)-1H-индол-5-ил)-[1,1'-бифенил]-4-карбонитрила
Методику стадий 2-4 из Примера 172 проводят с применением 1-(5-бром-6-фториндол-1-ил)-2-метилпропан-2-ола, полученного на стадии 1 из Примера 136, вместо 1-(5-бром-6,7-дифториндол-1-ил)-2-метилпропан-2-ола и с применением трет-бутил-(S)-(3-метилпирролидин-3-ил)карбамата вместо трет-бутил-N-[(3S)-пирролидин-3-ил]карбамата с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 191: Синтез (S)-5'-(3-амино-3-метилпирролидин-1-карбонил)-2'-(6,7-дифтор-1-(2-гидрокси-2-метилпропил)-1H-бензо[d][1.2.3]триазол-5-ил)-3-фтор-[1,1'-бифенил]-4-карбонитрила
Методику стадий 3-4 из Примера 172 проводят с применением 3-(4-циано-3-фторфенил)-4-[6,7-дифтор-1-(2-гидрокси-2-метилпропил)бензотриазол-5-ил]бензойной кислоты, полученной на стадии 1 из Примера 177, вместо 3-(4-циано-3-фторфенил)-4-[6,7-дифтор-1-(2-гидрокси-2-метилпропил)индол-5-ил]бензойной кислоты и с применением трет-бутил-(S)-(3-метилпирролидин-3-ил)карбамата вместо трет-бутил-N-[(3S)-пирролидин-3-ил]карбамата с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 192: Синтез 5'-((1S,2S,4R)-рел-2-амино-7-азабицикло[2.2.1]гептан-7-карбонил)-2'-(6,7-дифтор-1-(2-гидрокси-2-метилпропил)-1H-бензо[d][1.2.3]триазол-5-ил)-3-фтор-[1,1'-бифенил]-4-карбонитрила
Методику стадий 3-4 из Примера 172 проводят с применением 3-(4-циано-3-фторфенил)-4-[6,7-дифтор-1-(2-гидрокси-2-метилпропил)бензотриазол-5-ил]бензойной кислоты, полученной на стадии 1 из Примера 177, вместо 3-(4-циано-3-фторфенил)-4-[6,7-дифтор-1-(2-гидрокси-2-метилпропил)индол-5-ил]бензойной кислоты и с применением гидрохлорида трет-бутил-((1S,2S,4R)-рел-7-азабицикло[2.2.1]гептан-2-ил)карбамата вместо трет-бутил-N-[(3S)-пирролидин-3-ил]карбамата с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 193: Синтез 5'-((1S,2S,4R)-рел-2-амино-7-азабицикло[2.2.1]гептан-7-карбонил)-2'',3-дифтор-4''-(2-гидрокси-2-метилпропил)-[1,1':2',1''-терфенил]-4-карбонитрила
Методику стадий 3-4 из Примера 172 проводят с применением 3-(4-циано-3-фторфенил)-4-[2-фтор-4-(2-гидрокси-2-метилпропил)фенил]бензойной кислоты, полученной на стадии 2 из Примера 166, вместо 3-(4-циано-3-фторфенил)-4-[6,7-дифтор-1-(2-гидрокси-2-метилпропил)индол-5-ил]бензойной кислоты и с применением гидрохлорида трет-бутил-((1S,2S,4R)-рел-7-азабицикло[2.2.1]гептан-2-ил)карбамата вместо трет-бутил-N-[(3S)-пирролидин-3-ил]карбамата с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 194: Синтез 5'-((3-эндо)-3-амино-8-азабицикло[3.2.1]октан-8-карбонил)-3-фтор-2'-(6-фтор-1-(3-гидрокси-3-метилбутил)-1H-индазол-5-ил)-[1,1'-бифенил]-4-карбонитрила
Стадия 1
5-Бром-6-фтор-1H-индазол (200 мг) растворяют в ДМФ (3,1 мл). При комнатной температуре туда добавляют карбонат цезия (606 мг) и 3-гидрокси-3-метилбутиловый эфир 4-метилбензолсульфоновой кислоты (481 мг), затем перемешивают при 90°C в течение 16 часов. Туда добавляют этилацетат, и смесь промывают последовательно водой и насыщенным раствором соли и сушат над безводным сульфатом натрия. Затем растворитель отгоняют. Остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем (подвижная фаза: гексан/этилацетат) с получением 4-(5-бром-6-фториндазол-1-ил)-2-метилбутан-2-ола.
Стадия 2
Методику стадий 2-4 из Примера 172 проводят с применением 4-(5-бром-6-фториндазол-1-ил)-2-метилбутан-2-ола, полученного на стадии 1 выше, вместо 1-(5-бром-6,7-дифториндол-1-ил)-2-метилпропан-2-ола и с применением трет-бутил-((3-эндо)-8-азабицикло[3.2.1]октан-3-ил)карбамата вместо трет-бутил-N-[(3S)-пирролидин-3-ил]карбамата с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 195: Синтез 5'-((1S,2S,4R)-рел-2-амино-7-азабицикло[2.2.1]гептан-7-карбонил)-2'-(6,7-дифтор-1-(2-гидрокси-2-метилпропил)-1H-индазол-5-ил)-3-фтор-[1,1'-бифенил]-4-карбонитрила
Методику стадий 2-4 из Примера 172 проводят с применением 1-(5-бром-6,7-дифториндазол-1-ил)-2-метилпропан-2-ола, полученного на стадии 1 из Примера 187, вместо 1-(5-бром-6,7-дифториндол-1-ил)-2-метилпропан-2-ола и с применением гидрохлорида трет-бутил-((1S,2S,4R)-рел-7-азабицикло[2.2.1]гептан-2-ил)карбамата вместо трет-бутил-N-[(3S)-пирролидин-3-ил]карбамата с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 196: Синтез 5'-((1S,2S,4R)-рел-2-амино-7-азабицикло[2.2.1]гептан-7-карбонил)-2'-(6,7-дифтор-1-(2-гидрокси-2-метилпропил)-1H-индол-5-ил)-3-фтор-[1,1'-бифенил]-4-карбонитрила
Методику стадий 1-4 из Примера 172 проводят с применением гидрохлорида трет-бутил-((1S,2S,4R)-рел-7-азабицикло[2.2.1]гептан-2-ил)карбамата вместо трет-бутил-N-[(3S)-пирролидин-3-ил]карбамата с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 197: Синтез (S)-5'-(3-амино-3-метилпирролидин-1-карбонил)-2'-(6,7-дифтор-1-(2-гидрокси-2-метилпропил)-1H-индазол-5-ил)-3-фтор-[1,1'-бифенил]-4-карбонитрила
Методику стадий 2-4 из Примера 172 проводят с применением 1-(5-бром-6,7-дифториндазол-1-ил)-2-метилпропан-2-ола, полученного на стадии 1 из Примера 187, вместо 1-(5-бром-6,7-дифториндол-1-ил)-2-метилпропан-2-ола и с применением трет-бутил-(S)-(3-метилпирролидин-3-ил)карбамата вместо трет-бутил-N-[(3S)-пирролидин-3-ил]карбамата с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 198: Синтез (S)-5'-(3-амино-3-метилпирролидин-1-карбонил)-2'-(6,7-дифтор-1-(2-гидрокси-2-метилпропил)-1H-индол-5-ил)-3-фтор-[1,1'-бифенил]-4-карбонитрила
Методику стадий 1-4 из Примера 172 проводят с применением трет-бутил-(S)-(3-метилпирролидин-3-ил)карбамата вместо трет-бутил-N-[(3S)-пирролидин-3-ил]карбамата с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 199: Синтез 3-фтор-2'-(6-фтор-1-(2-гидрокси-2-метилпропил)-1H-индазол-5-ил)-5'-(2,7-диазаспиро[3.4]октан-6-карбонил)-[1,1'-бифенил]-4-карбонитрила
Методику стадий 2-4 из Примера 172 проводят с применением 1-(5-бром-6-фториндазол-1-ил)-2-метилпропан-2-ола, полученного на стадии 1 из Примера 142, вместо 1-(5-бром-6,7-дифториндол-1-ил)-2-метилпропан-2-ола и с применением трет-бутил-2,7-диазаспиро[3.4]октан-2-карбоксилата вместо трет-бутил-N-[(3S)-пирролидин-3-ил]карбамата с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 200: Синтез 2'-(6,7-дифтор-1-(2-гидрокси-2-метилпропил)-1H-индол-5-ил)-3-фтор-5'-(2,7-диазаспиро[3.4]октан-6-карбонил)-[1,1'-бифенил]-4-карбонитрила
Методику стадий 1-4 из Примера 172 проводят с применением трет-бутил-2,7-диазаспиро[3.4]октан-2-карбоксилата вместо трет-бутил-N-[(3S)-пирролидин-3-ил]карбамата с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 201: Синтез 2'-(6,7-дифтор-1-(2-гидрокси-2-метилпропил)-1H-индол-5-ил)-3-фтор-5'-(2,8-диазаспиро[3.5]нонан-2-карбонил)-[1,1'-бифенил]-4-карбонитрила
Методику стадий 1-4 из Примера 172 проводят с применением трет-бутил-2,8-диазаспиро[3.5]нонан-6-карбоксилата вместо трет-бутил-N-[(3S)-пирролидин-3-ил]карбамата с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 202: Синтез 5'-((1S,2S,4R)-рел-2-амино-7-азабицикло[2.2.1]гептан-7-карбонил)-3-фтор-2'-(5-фтор-3-метилбензо[d]изоксазол-6-ил)-[1,1'-бифенил]-4-карбонитрила-изомер-X
Стадия 1
Гидрохлорид трет-бутил-((1S,2S,4R)-рел-7-азабицикло[2.2.1]гептан-2-ил)карбамата (36 мг) растворяют в ДХМ (2,89 мл). При комнатной температуре туда добавляют ТЭА (40 мкл) и бензилхлорформиат (25 мкл), затем перемешивают при комнатной температуре в течение 1 часа. Растворитель отгоняют и туда добавляют хлороформ и воду. Смесь экстрагируют дважды хлороформом и промывают водой и насыщенным раствором соли. Растворитель отгоняют и остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем (подвижная фаза: гексан/этилацетат) с получением бензил (1S,2S,4R)-рел-2-((трет-бутоксикарбонил)амино)-7-азабицикло[2.2.1]гептан-7-карбоксилата.
Бензил (1S,2S,4R)-рел-2-((трет-бутоксикарбонил)амино)-7-азабицикло[2.2.1]гептан-7-карбоксилат получают в виде 10 мг/мл раствора в этаноле, и разделение проводят в следующих условиях.
Изомер, имеющий более короткое время удержания, обозначают как “изомер-X”, и изомер, имеющий более длительное время удержания, обозначают как “изомер-Y”.
Колонка: Daicel CHIRALPAK IC 2,0×25 см
Подвижная фаза: гексан/2-пропанол=85/15
Скорость потока: 12,5 мл/мин
Время удержания каждого изомера:
бензил (1S,2S,4R)-рел-2-((трет-бутоксикарбонил)амино)-7-азабицикло[2.2.1]гептан-7-карбоксилат-изомер-X: 16,93 минут
бензил (1S,2S,4R)-рел-2-((трет-бутоксикарбонил)амино)-7-азабицикло[2.2.1]гептан-7-карбоксилат-изомер-Y: 23,82 минут.
Условия хирального анализа:
Колонка: CHIRALPAK IC 4,6×150 мм
Подвижная фаза: гексан/2-пропанол=85/15
Скорость потока: 1,0 мл/мин
Время удержания каждого изомера:
бензил (1S,2S,4R)-рел-2-((трет-бутоксикарбонил)амино)-7-азабицикло[2.2.1]гептан-7-карбоксилат-изомер-X: 6,972 минут
бензил (1S,2S,4R)-рел-2-((трет-бутоксикарбонил)амино)-7-азабицикло[2.2.1]гептан-7-карбоксилат-изомер-Y: 9,895 минут.
Стадия 2
Бензил (1S,2S,4R)-рел-2-((трет-бутоксикарбонил)амино)-7-азабицикло[2.2.1]гептан-7-карбоксилат-изомер-X (93 г), полученный на стадии 1 выше, и 10% Pd/C (10 г) суспендируют в метаноле (1,0 л). Смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 5 часов в атмосфере водорода (50 ф/д2). Реакционную смесь фильтруют, и фильтрат концентрируют с получением трет-бутил-((1S,2S,4R)-рел-7-азабицикло[2.2.1]гептан-2-ил)карбамата-изомер-X.
Методику стадий 2-4 из Примера 172 проводят с применением 6-бром-5-фтор-3-метилбензо[d]изоксазола, полученного на стадии 3 из Примера 179, вместо 1-(5-бром-6,7-дифториндол-1-ил)-2-метилпропан-2-ола и с применением трет-бутил-((1S,2S,4R)-рел-7-азабицикло[2.2.1]гептан-2-ил)карбамата-изомер-X, полученного на стадии 2 выше, вместо трет-бутил-N-[(3S)-пирролидин-3-ил]карбамата с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 203: Синтез 2'-(6,7-дифтор-1-(2-гидрокси-2-метилпропил)-1H-индол-5-ил)-3-фтор-5'-(октагидропирроло[3,4-c]пиррол-2-карбонил)-[1,1'-бифенил]-4-карбонитрила
Методику стадий 1-4 из Примера 172 проводят с применением трет-бутилгексагидропирроло[3,4-c]пиррол-2(1H)-карбоксилата вместо трет-бутил-N-[(3S)-пирролидин-3-ил]карбамата с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 204: Синтез (S)-5'-(3-аминопирролидин-1-карбонил)-2'-(1-(2-этил-2-гидроксибутил)-6-фтор-1H-индазол-5-ил)-3-фтор-[1,1'-бифенил]-4-карбонитрила
Стадия 1
5-Бром-6-фтор-1H-индазол (300 мг) растворяют в ДМФ (4,65 мл). При комнатной температуре туда добавляют карбонат цезия (90,9 мг) и 2,2-диэтилоксиран (0,20 мл), затем перемешивают при 90°C в течение 16 часов. Туда добавляют этилацетат, и смесь промывают последовательно водой и насыщенным раствором соли и сушат над безводным сульфатом натрия. Затем растворитель отгоняют. Остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем (подвижная фаза: гексан/этилацетат) с получением 3-[(5-бром-6-фториндазол-1-ил)метил]пентан-3-ола.
Стадия 2
Методику стадий 2-4 из Примера 172 проводят с применением 3-[(5-бром-6-фториндазол-1-ил)метил]пентан-3-ола, полученного на стадии 1 выше, вместо 1-(5-бром-6,7-дифториндол-1-ил)-2-метилпропан-2-ола с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 205: Синтез 5'-((3-эндо)-3-амино-8-азабицикло[3.2.1]октан-8-карбонил)-2'-(1-(2-этил-2-гидроксибутил)-6-фтор-1H-индазол-5-ил)-3-фтор-[1,1'-бифенил]-4-карбонитрила
Методику стадий 2-4 из Примера 172 проводят с применением 3-[(5-бром-6-фториндазол-1-ил)метил]пентан-3-ола, полученного на стадии 1 из Примера 204, вместо 1-(5-бром-6,7-дифториндол-1-ил)-2-метилпропан-2-ола и с применением трет-бутил-((3-эндо)-8-азабицикло[3.2.1]октан-3-ил)карбамата вместо трет-бутил-N-[(3S)-пирролидин-3-ил]карбамата с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 206: Синтез 5'-((1S,2S,4R)-рел-2-амино-7-азабицикло[2.2.1]гептан-7-карбонил)-2'-(1-(2-этил-2-гидроксибутил)-6-фтор-1H-индазол-5-ил)-3-фтор-[1,1'-бифенил]-4-карбонитрила-изомер-X
Методику стадий 2-4 из Примера 172 проводят с применением 3-[(5-бром-6-фториндазол-1-ил)метил]пентан-3-ола, полученного на стадии 1 из Примера 204, вместо 1-(5-бром-6,7-дифториндол-1-ил)-2-метилпропан-2-ола и с применением трет-бутил-((1S,2S,4R)-рел-7-азабицикло[2.2.1]гептан-2-ил)карбамата-изомер-X, полученного на стадии 2 из Примера 202, вместо трет-бутил-N-[(3S)-пирролидин-3-ил]карбамата с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 207: Синтез 2-(5-(5-((1S,2S,4R)-рел-2-амино-7-азабицикло[2.2.1]гептан-7-карбонил)-4'-циано-3'-фтор-[1,1'-бифенил]-2-ил)-6-фтор-1H-индол-1-ил)уксусной кислоты-изомер-X
Стадия 1
5-Бром-6-фтор-1H-индол (500 мг) растворяют в ДМФ (7,79 мл). При комнатной температуре туда добавляют карбонат цезия (1,67 г) и этил 2-хлорацетат (573 мг), затем перемешивают при 90°C в течение 16 часов. Реакцию заканчивают насыщенным водным раствором хлорида аммония. Туда добавляют этилацетат, и смесь промывают последовательно водой и насыщенным раствором соли и сушат над безводным сульфатом натрия. Затем растворитель отгоняют. Остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем (подвижная фаза: гексан/этилацетат) с получением этил 2-(5-бром-6-фториндол-1-ил)ацетата.
Стадия 2
3-(4-Циано-3-фторфенил)-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензойную кислоту (2 г), полученную на стадии 2 из Примера 41, и трет-бутил-((1S,2S,4R)-рел-7-азабицикло[2.2.1]гептан-2-ил)карбамат-изомер-X (1,24 г), полученный на стадии 2 из Примера 202, растворяют в ТГФ (21,8 мл). При комнатной температуре туда добавляют ТЭА (1,52 мл) и ГАТУ (2,28 г), затем перемешивают при 50°C в течение 1 часа. Реакционную смесь концентрируют в вакууме и остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем (подвижная фаза: гексан/этилацетат) с получением трет-бутил-((1S,2S,4R)-рел-7-(4'-циано-3'-фтор-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-[1,1'-бифенил]-3-карбонил)-7-азабицикло[2.2.1]гептан-2-ил)карбамата-изомер-X.
Стадия 3
Трет-бутил-((1S,2S,4R)-рел-7-(4'-циано-3'-фтор-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-[1,1'-бифенил]-3-карбонил)-7-азабицикло[2.2.1]гептан-2-ил)карбамат-изомер-X (100 мг), полученный на стадии 2 выше, и этил 2-(5-бром-6-фториндол-1-ил)ацетат (69,5 мг), полученный на стадии 1 выше, суспендируют в 1,4-диоксане (0,59 мл). При комнатной температуре туда добавляют Pd(dba)2 (8,2 мг), X-phos (13,6 мг) и трикалийфосфат (113 мг), затем дегазируют и замещают азотом. В атмосфере азота перемешивают при внешней температуре 100°C в течение ночи. Растворитель отгоняют, и остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем (подвижная фаза: хлороформ/метанол). Остаток растворяют в MeOH (1,0 мл) и туда добавляют 5 N водный раствор гидроксида натрия (1,0 мл) с последующим перемешиванием в течение 1 часа. Туда добавляют МТБЭ и водный слой экстрагируют. Водный слой подкисляют хлористоводородной кислотой, туда добавляют МТБЭ и полученную смесь промывают последовательно водой и насыщенным раствором соли. После того, как органический слой сушат над сульфатом натрия, растворитель отгоняют с получением 2-(5-(5-((1S,2S,4R)-рел-2-((трет-бутоксикарбонил)амино)-7-азабицикло[2.2.1]гептан-7-карбонил)-4'-циано-3'-фтор-[1,1'-бифенил]-2-ил-6-фтор-1H-индол-1-ил)уксусной кислоты-изомер-X.
Стадия 4
Ацетонитрил (1,0 мл) и 4 N раствор хлористоводородной кислоты-1,4-диоксана (1,0 мл) добавляют к 2-(5-(5-((1S,2S,4R)-рел-2-((трет-бутоксикарбонил)амино)-7-азабицикло[2.2.1]гептан-7-карбонил)-4'-циано-3'-фтор-[1,1'-бифенил]-2-ил-6-фтор-1H-индол-1-ил)уксусной кислоте-изомер-X (10 мг), полученному на стадии 3 выше, с последующим перемешиванием в течение 30 минут. Растворитель отгоняют, и остаток очищают ВЭЖХ с обращенной фазой (подвижная фаза: вода/ацетонитрил) с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 208: Синтез 2-(4'-((1S,2S,4R)-рел-2-амино-7-азабицикло[2.2.1]гептан-7-карбонил)-4''-циано-2,3''-дифтор-[1,1':2',1''-терфенил]-4-ил)уксусной кислоты-изомер-X
Методику стадий 3-4 из Примера 207 проводят с применением метил-2-(4-бром-3-фторфенил)ацетата вместо этил 2-(5-бром-6-фториндол-1-ил)ацетата с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 209: Синтез 5'-((1S,2S,4R)-рел-2-амино-7-азабицикло[2.2.1]гептан-7-карбонил)-2'-(7-хлор-6-фтор-1-(2-гидрокси-2-метилпропил)-1H-бензо[d][1.2.3]триазол-5-ил)-3-фтор-[1,1'-бифенил]-4-карбонитрила-изомер-X
Стадия 1
2-Хлор-1,3-дифтор-4-нитробензол (1 г) растворяют в ТГФ (12,9 мл). Туда добавляют ТЭА (1,08 мл) и 1-амино-2-метилпропан-2-ол (0,59 мл) с последующим перемешиванием при комнатной температуре в течение 1 часа. Туда добавляют этилацетат, и смесь промывают последовательно водой и насыщенным раствором соли. Органический слой сушат над сульфатом натрия и растворитель отгоняют с получением 1-(2-хлор-3-фтор-6-нитроанилино)-2-метилпропан-2-ола.
Стадия 2
1-(2-Хлор-3-фтор-6-нитроанилино)-2-метилпропан-2-ол (1,3 г), полученный на стадии 1 выше, растворяют в ДМФ (9,9 мл). При комнатной температуре туда добавляют NBS (1,1 г), затем перемешивают при 90°C в течение 1 часа. Туда добавляют этилацетат, и смесь промывают последовательно водой и насыщенным раствором соли и сушат над безводным сульфатом натрия. Затем растворитель отгоняют. Остаток кристаллизуют из ИПЭ:гексана=1:1 и промывают дважды гексаном с получением 1-(4-бром-2-хлор-3-фтор-6-нитроанилино)-2-метилпропан-2-ола.
Стадия 3
1-(4-Бром-2-хлор-3-фтор-6-нитроанилино)-2-метилпропан-2-ол (1,6 г), полученный на стадии 2 выше, NH4Cl (1,6 г) и железо (0,8 г) суспендируют в EtOH (7,81 мл) и воде (7,81 мл), затем перемешивают при 60°C в течение ночи. Туда добавляют МТБЭ и смесь пропускают через Целит. Туда добавляют МТБЭ и смесь промывают последовательно водой и насыщенным раствором соли и сушат над безводным сульфатом натрия. Растворитель затем отгоняют с получением 1-(6-амино-4-бром-2-хлор-3-фторанилино)-2-метилпропан-2-ола.
Стадия 4
1-(6-Амино-4-бром-2-хлор-3-фторанилино)-2-метилпропан-2-ол (352 мг), полученный на стадии 3 выше, растворяют в воде (0,70 мл) и ТГФ (1,76 мл). При 0°C туда добавляют 12 N хлористоводородную кислоту (1,06 мл) и нитрит натрия (водный раствор (0,3 мл), в котором растворен 101 мг нитрита натрия) по каплям с последующим перемешиванием при комнатной температуре в течение 1 часа. Туда добавляют МТБЭ и смесь промывают последовательно водой и насыщенным раствором соли и сушат над безводным сульфатом натрия. Растворитель затем отгоняют. ИПЭ:гексан=1:1 (68 мл) добавляют к остатку, и целевое соединение собирают фильтрацией и промывают ИПЭ:гексаном=1:1 с получением 1-(5-бром-7-хлор-6-фторбензотриазол-1-ил)-2-метилпропан-2-ола.
Стадия 5
Трет-бутил-((1S,2S,4R)-рел-7-(4'-циано-3'-фтор-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-[1,1'-бифенил]-3-карбонил)-7-азабицикло[2.2.1]гептан-2-ил)карбамат-изомер-X (50 мг), полученный на стадии 2 из Примера 207, и 1-(5-бром-7-хлор-6-фторбензотриазол-1-ил)-2-метилпропан-2-ол (37,4 мг), полученный на стадии 4 выше, суспендируют в 1,4-диоксане (0,3 мл). При комнатной температуре туда добавляют Pd(dba)2 (4,1 мг), X-phos (6,8 мг) и трикалийфосфат (56,7 мг). После азотного замещения смесь перемешивают при 100°C в течение 2 часов. Туда добавляют этилацетат, и смесь помещают в NH-силикагель и промывают этилацетатом:метанолом=10:1. Растворитель отгоняют, и к остатку добавляют ацетонитрил (1,0 мл) и 4 N раствор хлористоводородной кислоты-1,4-диоксана (1,0 мл) с последующим перемешиванием в течение 10 минут. Растворитель отгоняют, остаток растворяют в ДМСО и очистку проводят ВЭЖХ с обращенной фазой (подвижная фаза: вода/ацетонитрил) с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 210: Синтез (S)-5'-(3-аминопирролидин-1-карбонил)-2'-(7-хлор-6-фтор-1-(2-гидрокси-2-метилпропил)-1H-бензо[d][1.2.3]триазол-5-ил-3-фтор-[1,1'-бифенил]-4-карбонитрила
Методику стадий 1-5 из Примера 209 проводят с применением трет-бутил-N-[(3S)-1-[3-(4-циано-3-фторфенил)-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензоил]пирролидин-3-ил]карбамата, полученного на стадии 1 из Примера 37, вместо трет-бутил-((1S,2S,4R)-рел-7-(4'-циано-3'-фтор-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-[1,1'-бифенил]-3-карбонил)-7-азабицикло[2.2.1]гептан-2-ил)карбамата-изомер-X с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 211: Синтез 5'-((3-эндо)-3-амино-8-азабицикло[3.2.1]октан-8-карбонил)-2'-(7-хлор-6-фтор-1-(2-гидрокси-2-метилпропил)-1H-бензо[d][1.2.3]триазол-5-ил)-3-фтор-[1,1'-бифенил]-4-карбонитрила
Методику стадий 1-5 из Примера 209 проводят с применением трет-бутил-N-[(3-эндо)-8-[3-(4-циано-3-фторфенил)-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензоил]-8-азабицикло[3.2.1]октан-3-ил]карбамата, полученного на стадии 3 из Примера 41, вместо трет-бутил-((1S,2S,4R)-рел-7-(4'-циано-3'-фтор-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-[1,1'-бифенил]-3-карбонил)-7-азабицикло[2.2.1]гептан-2-ил)карбамата-изомер-X с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 212: Синтез 5-(5-((1S,2S,4R)-рел-2-амино-7-азабицикло[2.2.1]гептан-7-карбонил)-4'-циано-3'-фтор-[1,1'-бифенил]-2-ил)-6-фтор-1-(2-гидрокси-2-метилпропил)-1H-индазол-3-карбоновой кислоты-изомер-X
Стадия 1
3-(4-Циано-3-фторфенил)-4-[6-фтор-1-(2-гидрокси-2-метилпропил)индазол-5-ил]бензойную кислоту (250 мг), полученную на стадии 1 из Примера 176, растворяют в ТГФ (2,24 мл). При комнатной температуре туда добавляют ГАТУ (234 мг), трет-бутил-((1S,2S,4R)-рел-7-азабицикло[2.2.1]гептан-2-ил)карбамат-изомер-X (125 мг), полученный на стадии 2 из Примера 202, и ТЭА (0,156 мл), затем перемешивают при 50°C в течение 1 часа. Растворитель отгоняют при пониженном давлении. Остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем (подвижная фаза: хлороформ/метанол) с получением трет-бутил-((1S,2S,4R)-рел-7-(4'-циано-3'-фтор-6-(6-фтор-1-(2-гидрокси-2-метилпропил)-1H-индазол-5-ил)-[1,1'-бифенил]-3-карбонил)-7-азабицикло[2.2.1]гептан-2-ил)карбамата-изомер-X.
Стадия 2
Трет-бутил-((1S,2S,4R)-рел-7-(4'-циано-3'-фтор-6-(6-фтор-1-(2-гидрокси-2-метилпропил)-1H-индазол-5-ил)-[1,1'-бифенил]-3-карбонил)-7-азабицикло[2.2.1]гептан-2-ил)карбамат-изомер-X (289 мг), полученный на стадии 1 выше, растворяют в ДМФ (4,50 мл). При комнатной температуре туда добавляют NBS (120 мг) с последующим перемешиванием при комнатной температуре в течение 1 часа. Туда добавляют этилацетат, и смесь промывают последовательно водой и насыщенным раствором соли. После того, как органический слой сушат над сульфатом натрия, растворитель отгоняют. Остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем (подвижная фаза: гексан/этилацетат) с получением трет-бутил-((1S,2S,4R)-рел-7-(6-(3-бром-6-фтор-1-(2-гидрокси-2-метилпропил)-1H-индазол-5-ил)-4'-циано-3'-фтор-[1,1'-бифенил]-3-карбонил)-7-азабицикло[2.2.1]гептан-2-ил)карбамата-изомер-X.
Стадия 3
Трет-бутил-((1S,2S,4R)-рел-7-(6-(3-бром-6-фтор-1-(2-гидрокси-2-метилпропил)-1H-индазол-5-ил)-4'-циано-3'-фтор-[1,1'-бифенил]-3-карбонил)-7-азабицикло[2.2.1]гептан-2-ил)карбамат-изомер-X (50 мг), полученный на стадии 2 выше, и PdCl2(PPh3)2 (2,4 мг) суспендируют в 1-метил-2-пирролидиноне (0,5 мл). При комнатной температуре туда добавляют N, N-диэтилэтаноламин (0,046 мл) и после замещения CO смесь перемешивают при 125°C в течение 1 часа. t-BuOH (0,5 мл) и 2 N водный раствор гидроксида натрия (0,25 мл) добавляют к реакционной смеси, затем перемешивают при комнатной температуре в течение 1 часа. Туда добавляют МТБЭ, и водный слой отделяют. Водный слой подкисляют хлористоводородной кислотой и экстрагируют МТБЭ. После того, как органический слой сушат над сульфатом натрия, растворитель отгоняют. Ацетонитрил (0,5 мл) и 4 N раствор хлористоводородной кислоты-1,4-диоксана (0,5 мл) добавляют к остатку с последующим перемешиванием в течение 10 минут. Реакционную смесь концентрируют, и остаток очищают ВЭЖХ с обращенной фазой (подвижная фаза: вода/ацетонитрил) с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 213: Синтез 5'-((1S,2S,4R)-рел-2-амино-7-азабицикло[2.2.1]гептан-7-карбонил)-2'-(7-хлор-6-фтор-1-(2-гидрокси-2-метилпропил)-1H-бензо[d][1.2.3]триазол-5-ил-3-фтор-[1,1'-бифенил]-4-карбонитрила
Стадия 1
3-(4-Циано-3-фторфенил)-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензойную кислоту (500 мг), полученную на стадии 2 из Примера 41, и гидрохлорид трет-бутил-((1S,2S,4R)-рел-7-азабицикло[2.2.1]гептан-2-ил)карбамата (303,5 мг) растворяют в ТГФ (5.45 мл). При комнатной температуре туда добавляют ТЭА (0,379 мл) и ГАТУ (569,5 мг), затем перемешивают при 50°C в течение 1 часа. Реакционную смесь концентрируют в вакууме и остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем (подвижная фаза: гексан/этилацетат) с получением трет-бутил-((1S,2S,4R)-рел-7-(4'-циано-3'-фтор-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-[1,1'-бифенил]-3-карбонил)-7-азабицикло[2.2.1]гептан-2-ил)карбамата.
Стадия 2
Методику стадий 1-5 из Примера 209 проводят с применением трет-бутил-((1S,2S,4R)-рел-7-(4'-циано-3'-фтор-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-[1,1'-бифенил]-3-карбонил)-7-азабицикло[2.2.1]гептан-2-ил)карбамата, полученного на стадии 1 выше, вместо трет-бутил-((1S,2S,4R)-рел-7-(4'-циано-3'-фтор-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-[1,1'-бифенил]-3-карбонил)-7-азабицикло[2.2.1]гептан-2-ил)карбамата-изомер-X с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 214: Синтез 5'-((1S,2S,4R)-рел-2-амино-7-азабицикло[2.2.1]гептан-7-карбонил)-2'-(1-(2-этил-2-гидроксибутил)-6,7-дифтор-1H-бензо[d][1.2.3]триазол-5-ил)-3-фтор-[1,1'-бифенил]-4-карбонитрила-изомер-X
Методику стадий 1-5 из Примера 161 проводят с применением 3-[(2,3-дифтор-6-нитроанилино)метил]пентан-3-ола вместо 1-(2,3-дифтор-6-нитроанилино)-2-метилпропан-2-ола и с применением трет-бутил-((1S,2S,4R)-рел-7-(4'-циано-3'-фтор-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-[1,1'-бифенил]-3-карбонил)-7-азабицикло[2.2.1]гептан-2-ил)карбамата-изомер-X, полученного на стадии 2 из Примера 207, вместо трет-бутил-N-[(3-эндо)-8-[3-(4-циано-3-фторфенил)-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензоил]-8-азабицикло[3.2.1]октан-3-ил]карбамата с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 215: Синтез (S)-5'-(3-аминопирролидин-1-карбонил)-2'-(1-(2-этил-2-гидроксибутил)-6,7-дифтор-1H-бензо[d][1.2.3]триазол-5-ил)-3-фтор-[1,1'-бифенил]-4-карбонитрила
Методику стадий 1-5 из Примера 161 проводят с применением 3-[(2,3-дифтор-6-нитроанилино)метил]пентан-3-ола вместо 1-(2,3-дифтор-6-нитроанилино)-2-метилпропан-2-ола и с применением трет-бутил-N-[(3S)-1-[3-(4-циано-3-фторфенил)-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензоил]пирролидин-3-ил]карбамата, полученного на стадии 1 из Примера 37, вместо трет-бутил-N-[(3-эндо)-8-[3-(4-циано-3-фторфенил)-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензоил]-8-азабицикло[3.2.1]октан-3-ил]карбамата с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 216: Синтез 5'-((3-эндо)-3-амино-8-азабицикло[3.2.1]октан-8-карбонил)-2'-(1-(2-этил-2-гидроксибутил)-6,7-дифтор-1H-бензо[d][1.2.3]триазол-5-ил)-3-фтор-[1,1'-бифенил]-4-карбонитрила
Методику стадий 1-5 из Примера 161 проводят с применением 3-[(2,3-дифтор-6-нитроанилино)метил]пентан-3-ола вместо 1-(2,3-дифтор-6-нитроанилино)-2-метилпропан-2-ола с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 217: Синтез 5'-((1S,2S,4R)-рел-2-амино-7-азабицикло[2.2.1]гептан-7-карбонил)-2'-(1-(2-этил-2-гидроксибутил)-6,7-дифтор-1H-бензо[d][1.2.3]триазол-5-ил)-3-фтор-[1,1'-бифенил]-4-карбонитрила
Методику стадий 1-5 из Примера 161 проводят с применением 3-[(2,3-дифтор-6-нитроанилино)метил]пентан-3-ола вместо 1-(2,3-дифтор-6-нитроанилино)-2-метилпропан-2-ола и с применением трет-бутил-((1S,2S,4R)-рел-7-(4'-циано-3'-фтор-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-[1,1'-бифенил]-3-карбонил)-7-азабицикло[2.2.1]гептан-2-ил)карбамата, полученного на стадии 1 из Примера 213, вместо трет-бутил-N-[(3-эндо)-8-[3-(4-циано-3-фторфенил)-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензоил]-8-азабицикло[3.2.1]октан-3-ил]карбамата с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 218: Синтез 5'-((1S,2S,4R)-рел-2-амино-7-азабицикло[2.2.1]гептан-7-карбонил)-2'-(7-хлор-1-(2-этил-2-гидроксибутил)-6-фтор-1H-бензо[d][1.2.3]триазол-5-ил)-3-фтор-[1,1'-бифенил]-4-карбонитрила-изомер-X
Методику стадий 1-5 из Примера 209 проводят с применением 3-(аминометил)пентан-3-ола вместо 1-амино-2-метилпропан-2-ола с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 219: Синтез (S)-5'-(3-аминопирролидин-1-карбонил)-2'-(7-хлор-1-(2-этил-2-гидроксибутил)-6-фтор-1H-бензо[d][1.2.3]триазол-5-ил)-3-фтор-[1,1'-бифенил]-4-карбонитрила
Методику стадий 1-5 из Примера 209 проводят с применением 3-(аминометил)пентан-3-ола вместо 1-амино-2-метилпропан-2-ола и с применением трет-бутил-N-[(3S)-1-[3-(4-циано-3-фторфенил)-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензоил]пирролидин-3-ил]карбамата, полученного на стадии 1 из Примера 37, вместо трет-бутил-((1S,2S,4R)-рел-7-(4'-циано-3'-фтор-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-[1,1'-бифенил]-3-карбонил)-7-азабицикло[2.2.1]гептан-2-ил)карбамата-изомер-X с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 220: Синтез 5'-((3-эндо)-3-амино-8-азабицикло[3.2.1]октан-8-карбонил)-2'-(7-хлор-1-(2-этил-2-гидроксибутил)-6-фтор-1H-бензо[d][1.2.3]триазол-5-ил)-3-фтор-[1,1'-бифенил]-4-карбонитрила
Методику стадий 1-5 из Примера 209 проводят с применением 3-(аминометил)пентан-3-ола вместо 1-амино-2-метилпропан-2-ола и с применением трет-бутил-N-[(3-эндо)-8-[3-(4-циано-3-фторфенил)-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензоил]-8-азабицикло[3.2.1]октан-3-ил]карбамата, полученного на стадии 3 из Примера 41, вместо трет-бутил-((1S,2S,4R)-рел-7-(4'-циано-3'-фтор-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-[1,1'-бифенил]-3-карбонил)-7-азабицикло[2.2.1]гептан-2-ил)карбамата-изомер-X с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 221: Синтез 5'-((1S,2S,4R)-рел-2-амино-7-азабицикло[2.2.1]гептан-7-карбонил)-2'-(7-хлор-1-(2-этил-2-гидроксибутил)-6-фтор-1H-бензо[d][1.2.3]триазол-5-ил)-3-фтор-[1,1'-бифенил]-4-карбонитрила
Методику стадий 1-5 из Примера 209 проводят с применением 3-(аминометил)пентан-3-ола вместо 1-амино-2-метилпропан-2-ола и с применением трет-бутил-((1S,2S,4R)-рел-7-(4'-циано-3'-фтор-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-[1,1'-бифенил]-3-карбонил)-7-азабицикло[2.2.1]гептан-2-ил)карбамата, полученного на стадии 1 из Примера 213, вместо трет-бутил-((1S,2S,4R)-рел-7-(4'-циано-3'-фтор-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-[1,1'-бифенил]-3-карбонил)-7-азабицикло[2.2.1]гептан-2-ил)карбамата-изомер-X с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 222: Синтез 5-(5-((1S,2S,4R)-рел-2-амино-7-азабицикло[2.2.1]гептан-7-карбонил)-4'-циано-3'-фтор-[1,1'-бифенил]-2-ил)-6-фтор-1-(2-гидрокси-2-метилпропил)-1H-индол-3-карбоновой кислоты-изомер-X
Стадия 1
3-(4-Циано-3-фторфенил)-4-[6-фтор-1-(2-гидрокси-2-метилпропил)индол-5-ил]бензойную кислоту (250 мг), полученную на стадии 1 из Примера 171, растворяют в ТГФ (2,24 мл). При комнатной температуре туда добавляют ГАТУ (234 мг), трет-бутил-((1S,2S,4R)-рел-7-азабицикло[2.2.1]гептан-2-ил)карбамат-изомер-X (125 мг), полученный на стадии 2 из Примера 202, и ТЭА (0,156 мл), затем перемешивают при 50°C в течение 1 часа. Растворитель отгоняют при пониженном давлении. Остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем (подвижная фаза: хлороформ/метанол) с получением трет-бутил-((1S,2S,4R)-рел-7-(4'-циано-3'-фтор-6-(6-фтор-1-(2-гидрокси-2-метилпропил)-1H-индол-5-ил)-[1,1'-бифенил]-3-карбонил)-7-азабицикло[2.2.1]гептан-2-ил)карбамата-изомер-X.
Стадия 2
Трет-бутил-((1S,2S,4R)-рел-7-(4'-циано-3'-фтор-6-(6-фтор-1-(2-гидрокси-2-метилпропил)-1H-индол-5-ил)-[1,1'-бифенил]-3-карбонил)-7-азабицикло[2.2.1]гептан-2-ил)карбамат-изомер-X (289 мг), полученный на стадии 1 выше, растворяют в ДМФ (4,50 мл). При комнатной температуре туда добавляют N-йодсукцинимид (120 мг) с последующим перемешиванием при комнатной температуре в течение 1 часа. Туда добавляют этилацетат, и смесь промывают последовательно водой и насыщенным раствором соли. После того, как органический слой сушат над сульфатом натрия, растворитель отгоняют. Остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем (подвижная фаза: гексан/этилацетат) с получением трет-бутил-((1S,2S,4R)-рел-7-(4'-циано-3'-фтор-6-(6-фтор-1-(2-гидрокси-2-метилпропил)-3-йод-1H-индол-5-ил)-[1,1'-бифенил]-3-карбонил)-7-азабицикло[2.2.1]гептан-2-ил)карбамата-изомер-X.
Стадия 3
Трет-бутил-((1S,2S,4R)-рел-7-(4'-циано-3'-фтор-6-(6-фтор-1-(2-гидрокси-2-метилпропил)-3-йод-1H-индол-5-ил)-[1,1'-бифенил]-3-карбонил)-7-азабицикло[2.2.1]гептан-2-ил)карбамат-изомер-X (20 мг), полученный на стадии 2 выше, и Pd(PPh3)4 (0,92 мг) суспендируют в 1-метил-2-пирролидинone (0,2 мл). При комнатной температуре туда добавляют N, N-диэтилэтаноламин (0,0173 мл) и после замещения CO смесь перемешивают при 100°C в течение 1 часа. t-BuOH (0,2 мл) и 2 N водный раствор гидроксида натрия (0,2 мл) добавляют в реакционную смесь с последующим перемешиванием при комнатной температуре в течение ночи. Туда добавляют МТБЭ, и водный слой отделяют. Водный слой подкисляют хлористоводородной кислотой и экстрагируют МТБЭ. После того, как органический слой сушат над сульфатом натрия, растворитель отгоняют. Ацетонитрил (0,5 мл) и 4 N раствор хлористоводородной кислоты-1,4-диоксана (0,5 мл) добавляют к остатку с последующим перемешиванием в течение 10 минут. Реакционную смесь концентрируют, и остаток очищают ВЭЖХ с обращенной фазой (подвижная фаза: вода/ацетонитрил) с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 223: Синтез 5-(5-((1S,2S,4R)-рел-2-амино-7-азабицикло[2.2.1]гептан-7-карбонил)-4'-циано-3'-фтор-[1,1'-бифенил]-2-ил)-6-фтор-1-метил-1H-индазол-3-карбоновой кислоты-изомер-X
Стадия 1
Трет-бутил-((1S,2S,4R)-рел-7-(4'-циано-3'-фтор-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-[1,1'-бифенил]-3-карбонил)-7-азабицикло[2.2.1]гептан-2-ил)карбамат-изомер-X (350 мг), полученный на стадии 2 из Примера 207, и 5-бром-6-фтор-1-метилиндазол (186 мг) суспендируют в 1,4-диоксане (2,08 мл). При комнатной температуре туда добавляют Pd(dba)2 (28,7 мг), X-phos (47,6 мг) и трикалийфосфат (397 мг), затем дегазируют и замещают азотом. В атмосфере азота перемешивают при внешней температуре 100°C в течение ночи. Растворитель отгоняют и остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем (подвижная фаза: хлороформ/метанол) с получением трет-бутил-((1S,2S,4R)-рел-7-(4'-циано-3'-фтор-6-(6-фтор-1-метил-1H-индазол-5-ил)-[1,1'-бифенил]-3-карбонил)-7-азабицикло[2.2.1]гептан-2-ил)карбамата-изомер-X.
Стадия 2
Методику стадий 2-3 из Примера 212 проводят с применением трет-бутил-((1S,2S,4R)-рел-7-(4'-циано-3'-фтор-6-(6-фтор-1-метил-1H-индазол-5-ил)-[1,1'-бифенил]-3-карбонил)-7-азабицикло[2.2.1]гептан-2-ил)карбамата-изомер-X, полученного на стадии 1 выше, вместо трет-бутил-((1S,2S,4R)-рел-7-(4'-циано-3'-фтор-6-(6-фтор-1-(2-гидрокси-2-метилпропил)-1H-индазол-5-ил)-[1,1'-бифенил]-3-карбонил)-7-азабицикло[2.2.1]гептан-2-ил)карбамата-изомер-X с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 224: Синтез 5-(5-((1S,2S,4R)-рел-2-амино-7-азабицикло[2.2.1]гептан-7-карбонил)-4'-циано-3'-фтор-[1,1'-бифенил]-2-ил)-6-фтор-1-метил-1H-индол-3-карбоновой кислоты-изомер-X
Стадия 1
Трет-бутил-((1S,2S,4R)-рел-7-(4'-циано-3'-фтор-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-[1,1'-бифенил]-3-карбонил)-7-азабицикло[2.2.1]гептан-2-ил)карбамат-изомер-X (350 мг), полученный на стадии 2 из Примера 207, и 5-бром-6-фтор-1-метилиндол (185 мг) суспендируют в 1,4-диоксане (2,08 мл). При комнатной температуре туда добавляют Pd(dba)2 (28,7 мг), X-phos (47,6 мг) и трикалийфосфат (397 мг), затем дегазируют и замещают азотом. В атмосфере азота перемешивают при внешней температуре 100°C в течение ночи. Растворитель отгоняют и остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем (подвижная фаза: хлороформ/метанол) с получением трет-бутил-((1S,2S,4R)-рел-7-(4'-циано-3'-фтор-6-(6-фтор-1-метил-1H-индол-5-ил)-[1,1'-бифенил]-3-карбонил)-7-азабицикло[2.2.1]гептан-2-илкарбамата-изомер-X.
Стадия 2
Трет-бутил-((1S,2S,4R)-рел-7-(4'-циано-3'-фтор-6-(6-фтор-1-метил-1H-индол-5-ил)-[1,1'-бифенил]-3-карбонил)-7-азабицикло[2.2.1]гептан-2-илкарбамат-изомер-X (209 мг), полученный на стадии 1 выше, растворяют в ДМФ (3,6 мл). При комнатной температуре туда добавляют N-йодсукцинимид (121 мг) с последующим перемешиванием при комнатной температуре в течение 1 часа. Туда добавляют этилацетат и полученную смесь промывают последовательно водой и насыщенным раствором соли. После того, как органический слой сушат над сульфатом натрия, растворитель отгоняют. Остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем (подвижная фаза: гексан/этилацетат) с получением трет-бутил-((1S,2S,4R)-рел-7-(4'-циано-3'-фтор-6-(6-фтор-3-йод-1-метил-1H-индол-5-ил)-[1,1'-бифенил]-3-карбонил)-7-азабицикло[2.2.1]гептан-2-ил)карбамата-изомер-X.
Стадия 3
Трет-бутил-((1S,2S,4R)-рел-7-(4'-циано-3'-фтор-6-(6-фтор-3-йод-1-метил-1H-индол-5-ил)-[1,1'-бифенил]-3-карбонил)-7-азабицикло[2.2.1]гептан-2-ил)карбамат-изомер-X (211 мг), полученный на стадии 2 выше, и PdCl2(PPh3)2 (10,5 мг) суспендируют в 1-метил-2-пирролидиноне (2,11 мл). При комнатной температуре туда добавляют N, N-диэтилэтаноламин (0,197 мл) и после замещения CO смесь перемешивают при 100°C в течение 1 часа. t-BuOH (0,2 мл) и 2 N водный раствор гидроксида натрия (0,2 мл) добавляют к реакционной смеси, и полученную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение ночи. Туда добавляют МТБЭ и водный слой отделяют. Водный слой подкисляют хлористоводородной кислотой и экстрагируют МТБЭ. Органический слой сушат над сульфатом натрия, и растворитель отгоняют с получением 5-(5-((1S,2S,4R)-рел-2-((трет-бутоксикарбонил)амино)-7-азабицикло[2.2.1]гептан-7-карбонил)-4'-циано-3'-фтор-[1,1'-бифенил]-2-ил)-6-фтор-1-метил-1H-индол-3-карбоновой кислоты-изомер-X.
Стадия 4
Ацетонитрил (0,5 мл) и 4 N раствор хлористоводородной кислоты-1,4-диоксана (0,5 мл) добавляют к 5-(5-((1S,2S,4R)-рел-2-((трет-бутоксикарбонил)амино)-7-азабицикло[2.2.1]гептан-7-карбонил)-4'-циано-3'-фтор-[1,1'-бифенил]-2-ил)-6-фтор-1-метил-1H-индол-3-карбоновой кислоте-изомер-X (10 мг), полученной на стадии 3 выше, с последующим перемешиванием в течение 10 минут. Реакционную смесь концентрируют, и остаток очищают ВЭЖХ с обращенной фазой (подвижная фаза: вода/ацетонитрил) с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 225: Синтез 5'-((1S,2S,4R)-рел-2-амино-7-азабицикло[2.2.1]гептан-7-карбонил)-2'-(1-(2-этил-2-гидроксибутил)-6-фтор-1H-индазол-5-ил)-3-фтор-[1,1'-бифенил]-4-карбонитрила
Трет-бутил-((1S,2S,4R)-рел-7-(4'-циано-3'-фтор-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-[1,1'-бифенил]-3-карбонил)-7-азабицикло[2.2.1]гептан-2-ил)карбамат (40 мг), полученный на стадии 1 из Примера 213, и 3-[(5-бром-6-фториндазол-1-ил)метил]пентан-3-ол (29,2 мг), полученный на стадии 1 из Примера 204, суспендируют в 1,4-диоксане (0,5 мл). При комнатной температуре туда добавляют Pd(dba)2 (3,3 мг), X-phos (5,5 мг) и трикалийфосфат (45,4 мг), затем перемешивают при 100°C в течение 1 часа. Реакционную смесь фильтруют и растворитель отгоняют. Остаток растворяют в ацетонитриле (0,5 мл). При комнатной температуре туда добавляют 4 N раствор хлористоводородной кислоты-1,4-диоксана (0,5 мл) с последующим перемешиванием при комнатной температуре в течение 5 минут. Реакционную смесь концентрируют и остаток очищают ВЭЖХ с обращенной фазой (подвижная фаза: вода/ацетонитрил) с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 226: Синтез 5'-((1S,2S,4R)-рел-2-амино-7-азабицикло[2.2.1]гептан-7-карбонил)-3-фтор-2'-(6-фтор-1-(2-гидрокси-2-метилпропил)-1,3-дигидроизобензофуран-5-ил)-[1,1'-бифенил]-4-карбонитрила-изомер-X
Стадия 1
Метил-5-бром-4-фтор-2-йод-бензоат (2 г) растворяют в диэтиловом эфире (55,7 мл). При 0°C туда добавляют раствор 2,0 M LiBH4 в ТГФ (6,13 мл) и MeOH (0,56 мл), затем перемешивают при 0°C в течение 1 часа. Туда добавляют МТБЭ и смесь промывают последовательно водой и насыщенным раствором соли и сушат над безводным сульфатом натрия. Затем растворитель отгоняют. Остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем (подвижная фаза: гексан/этилацетат) с получением (5-бром-4-фтор-2-йод-фенил)метанола.
Стадия 2
(5-Бром-4-фтор-2-йодфенил)метанол (1,39 г), полученный на стадии 1 выше, и 3,4-дигидро-2H-пиран (0,419 мл) растворяют в ДХМ (8,4 мл). При комнатной температуре туда добавляют пиридиний п-толуолсульфоновую кислоту (106 мг) с последующим перемешиванием при комнатной температуре в течение ночи. Туда добавляют этилацетат, и смесь промывают последовательно водой и насыщенным раствором соли и сушат над безводным сульфатом натрия. Затем растворитель отгоняют. Остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем (подвижная фаза: гексан/этилацетат) с получением 2-[(5-бром-4-фтор-2-йодфенил)метокси]тетрагидропирана.
Стадия 3
2-[(5-Бром-4-фтор-2-йодфенил)метокси]тетрагидропиран (1,5 г), полученный на стадии 2 выше, PdCl2(PPh3)2 (130 мг) и CuI (34 мг) суспендируют в ТГФ (18 мл). При комнатной температуре туда добавляют ТЭА (18 мл) и 2-метил-3-бутин-2-ол (0,42 мл) с последующим перемешиванием при комнатной температуре в течение 4 часов. Реакционную смесь фильтруют и растворитель отгоняют. Остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем (подвижная фаза: гексан/этилацетат) с получением 4-[4-бром-5-фтор-2-(тетрагидропиран-2-илоксиметил)фенил]-2-метил-3-бутин-2-ола.
Стадия 4
Трет-бутил-((1S,2S,4R)-рел-7-(4'-циано-3'-фтор-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-[1,1'-бифенил]-3-карбонил)-7-азабицикло[2.2.1]гептан-2-ил)карбамат-изомер-X (150 мг), полученный на стадии 2 из Примера 207, и 4-[4-бром-5-фтор-2-(тетрагидропиран-2-илоксиметил)фенил]-2-метил-3-бутин-2-ол (129 мг), полученный на стадии 3 выше, суспендируют в 1,4-диоксане (0,89 мл). При комнатной температуре туда добавляют Pd(dba)2 (12,3 мг), X-phos (20.4 мг), затем перемешивают при 100°C в течение 1 часа. Реакционную смесь фильтруют и растворитель отгоняют. Остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем (подвижная фаза: гексан/этилацетат). Остаток растворяют в ТГФ (0,92 мл) и воде (0,46 мл). При комнатной температуре туда добавляют моногидрат п-толуолсульфоновой кислоты (6,9 мг), затем перемешивают при 70°C в течение 1 часа. Туда добавляют этилацетат, и смесь промывают последовательно водой и насыщенным раствором соли и сушат над безводным сульфатом натрия. Затем растворитель отгоняют. Остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем (подвижная фаза: гексан/этилацетат) с получением трет-бутил-((1S,2S,4R)-рел-7-(4''-циано-2,3''-дифтор-4-(3-гидрокси-3-метил-1-бутин-1-ил)-5-(гидроксиметил)-[1,1':2',1''-терфенил]-4'-карбонил-7-азабицикло[2.2.1]гептан-2-ил)карбамата-изомер-X.
Стадия 5
Трет-бутил-((1S,2S,4R)-рел-7-(4''-циано-2,3''-дифтор-4-(3-гидрокси-3-метил-1-бутин-1-ил)-5-(гидроксиметил)-[1,1':2',1''-терфенил]-4'-карбонил-7-азабицикло[2.2.1]гептан-2-ил)карбамат-изомер-X (30 мг), полученный на стадии 4 выше, растворяют в 1,4-диоксане (0,24 мл). При комнатной температуре туда добавляют раствор 1,0 M ФТБА в ТГФ (0,14 мл), затем перемешивают при 100°C в течение 1 часа. EtOH (0,12 мл) и 10% Pd/C (30 мг) добавляют к реакционной смеси и после замещения водородом смесь перемешивают при 70°C в течение 30 минут. Реакционную смесь фильтруют и фильтрат концентрируют. Остаток растворяют в ТГФ. При комнатной температуре туда добавляют ТЭА (0,013 мл), ДМАП (1,1 мг) и Boc2O (20,4 мг), затем перемешивают при 70°C в течение 1 часа. Туда добавляют этилацетат, смесь промывают 5 раз фосфорной кислотой в концентрации около 0,5 моль/л, промывают насыщенным раствором соли и сушат над безводным сульфатом натрия. Затем растворитель отгоняют. Остаток растворяют в ацетонитриле (0,5 мл). При комнатной температуре туда добавляют 4 N раствор хлористоводородной кислоты-1,4-диоксана (0,5 мл) с последующим перемешиванием при комнатной температуре в течение 5 минут. После подтверждения завершения реакции ЖХМС, растворитель отгоняют. Остаток очищают ВЭЖХ с обращенной фазой (подвижная фаза: вода/ацетонитрил) с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 227: Синтез 5'-((S)-3-аминопирролидин-1-карбонил)-3-фтор-2'-(6-фтор-1-(2-гидрокси-2-метилпропил)-1,3-дигидроизобензофуран-5-ил)-[1,1'-бифенил]-4-карбонитрила
Стадия 1
Трет-бутил-3-(4-циано-3-фторфенил)-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензоат (400 мг), полученный на стадии 1 из Примера 41, и 4-[4-бром-5-фтор-2-(тетрагидропиран-2-илоксиметил)фенил]-2-метил-3-бутин-2-ол (456 мг), полученный на стадии 3 из Примера 226, суспендируют в 1,4-диоксане (3,15 мл). При комнатной температуре туда добавляют Pd(dba)2 (43,5 мг), X-phos (144 мг) и трикалийфосфат (601 мг), затем перемешивают при 100°C в течение 1 часа. Реакционную смесь фильтруют и растворитель отгоняют. Остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем (подвижная фаза: хлороформ/метанол). Остаток растворяют в ТГФ (1,62 мл). При комнатной температуре туда добавляют воду (0,81 мл), моногидрат p-толуолсульфоновой кислоты (12,3 мг), затем перемешивают при 70°C в течение 1 часа. Туда добавляют этилацетат, и смесь промывают последовательно водой и насыщенным раствором соли и сушат над безводным сульфатом натрия. Затем растворитель отгоняют. Остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем (подвижная фаза: гексан/этилацетат) с получением трет-бутил-3-(4-циано-3-фторфенил)-4-[2-фтор-5-(гидроксиметил)-4-(3-гидрокси-3-метил-1-бутенил)фенил]бензоата.
Стадия 2
Трет-бутил-3-(4-циано-3-фторфенил)-4-[2-фтор-5-(гидроксиметил)-4-(3-гидрокси-3-метил-1-бутенил)фенил]бензоат (90 мг), полученный на стадии 1 выше, растворяют в 1,4-диоксане (0,9 мл). При комнатной температуре туда добавляют раствор 1,0 M ФТБА в ТГФ (0,54 мл), затем перемешивают при 100°C в течение 2 часов. EtOH (0,30 мл) и 10% Pd/C (90 мг) добавляют в реакционную смесь и после замещения водородом перемешивают при 70°C в течение ночи. Реакционную смесь фильтруют, и растворитель отгоняют. Остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем (подвижная фаза: гексан/этилацетат). Остаток растворяют в ТГФ (1,0 мл). При комнатной температуре туда добавляют 12 N хлористоводородную кислоту (0,5 мл) с последующим перемешиванием при комнатной температуре в течение 1,5 часов. Туда добавляют МТБЭ и экстрагируют дважды 2 N водным раствором гидроксида натрия. Водный слой подкисляют 2 N хлористоводородной кислотой и экстрагируют дважды МТБЭ. Органический слой последовательно промывают насыщенным раствором соли и сушат над безводным сульфатом натрия и растворитель отгоняют с получением 3-(4-циано-3-фторфенил)-4-[6-фтор-1-(2-гидрокси-2-метилпропил)-1,3-дигидроизобензофуран-5-ил]бензойной кислоты.
Стадия 3
3-(4-Циано-3-фторфенил)-4-[6-фтор-1-(2-гидрокси-2-метилпропил)-1,3-дигидроизобензофуран-5-ил]бензойную кислоту (10 мг), полученную на стадии 2 выше, растворяют в ТГФ (0,5 мл). При комнатной температуре туда добавляют ГАТУ (9,31 мг), трет-бутил-N-[(3S)-пирролидин-3-ил]карбамат (43,5 мг) и ТЭА (6,2 мкл), затем перемешивают при 50°C в течение 1 часа. Растворитель отгоняют и туда добавляют MeOH (0,5 мл) и 4 N раствор хлористоводородной кислоты-1,4-диоксана (0,5 мл) с последующим перемешиванием при комнатной температуре в течение 30 минут. Растворитель отгоняют, и остаток очищают ВЭЖХ с обращенной фазой (подвижная фаза: вода/ацетонитрил) с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 228: Синтез 5'-((1S,2S,4R)-рел-2-амино-7-азабицикло[2.2.1]гептан-7-карбонил)-3-фтор-2'-(6-фтор-1-(2-гидрокси-2-метилпропил)-7-метил-1H-бензо[d][1.2.3]триазол-5-ил)-[1,1'-бифенил]-4-карбонитрила-изомер-X
Методику стадий 1-5 из Примера 209 проводят с применением 1,3-дифтор-2-метил-4-нитробензола вместо 2-хлор-1,3-дифтор-4-нитробензола с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 229: Синтез (S)-5'-(3-аминопирролидин-1-карбонил)-3-фтор-2'-(5-фтор-3-(2-гидрокси-2-метилпропил)бензо[d]изоксазол-6-ил)-[1,1'-бифенил]-4-карбонитрила
Стадия 1
1-(4-Бром-5-фтор-2-гидроксифенил)этанон (150 мг), полученный на стадии 2 из Примера 179, растворяют в ТГФ (3,2 мл). При -25°C туда добавляют диизопропиламид лития (1,0 M, раствор в ТГФ) (3,2 мл), затем перемешивают при -25°C в течение 1 часа. Смесь охлаждают до -40°C и туда добавляют ацетон (0,118 мл), затем перемешивают при -40°C в течение 1 часа. Затем туда добавляют водный раствор фосфорной кислоты, туда добавляют этилацетат и смесь промывают последовательно водой и насыщенным раствором соли. После того, как органический слой сушат над сульфатом натрия, растворитель отгоняют. Остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем (подвижная фаза: гексан/этилацетат) с получением 1-(4-бром-5-фтор-2-гидроксифенил)-3-гидрокси-3-метилбутан-1-она.
Стадия 2
1-(4-Бром-5-фтор-2-гидроксифенил)-3-гидрокси-3-метилбутан-1-он (60 мг), полученный на стадии 1 выше, гидрохлорид гидроксиламина (28,6 мг) и ацетат натрия (25,4 мг) растворяют в метаноле (0,69 мл), затем перемешивают при 60°C в течение ночи. Туда добавляют МТБЭ и смесь промывают последовательно водой и насыщенным раствором соли. После того, как органический слой сушат над сульфатом натрия, растворитель отгоняют. Остаток растворяют в ТГФ (0,69 мл) и туда добавляют N, N'-карбонилдиимидазол (36,8 мг), ТЭА (0,037 мл), затем перемешивают при 70°C в течение 1 часа. Растворитель отгоняют, и остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем (подвижная фаза: гексан/этилацетат) с получением 1-(6-бром-5-фтор-1,2-бензооксазол-3-ил)-2-метилпропан-2-ола.
Стадия 3
Методику стадий 1-3 из Примера 37 проводят с применением 1-(6-бром-5-фтор-1,2-бензооксазол-3-ил)-2-метилпропан-2-ола, полученного на стадии 2 выше, вместо 1-(4-бром-3-фторфенил)-2-метилпропан-2-ола с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 230: Синтез 2-(5-(5-((1S,2S,4R)-рел-2-амино-7-азабицикло[2.2.1]гептан-7-карбонил)-4'-циано-3'-фтор-[1,1'-бифенил]-2-ил)-6-фтор-1H-индол-1-ил)ацетамида
Стадия 1
Трет-бутил-((1S,2S,4R)-рел-7-(4'-циано-3'-фтор-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-[1,1'-бифенил]-3-карбонил)-7-азабицикло[2.2.1]гептан-2-ил)карбамат (100 мг), полученный на стадии 1 из Примера 213, и этил 2-(5-бром-6-фториндол-1-ил)ацетат (69,5 мг), полученный на стадии 1 из Примера 207, суспендируют в 1,4-диоксане (0,59 мл). При комнатной температуре туда добавляют Pd(dba)2 (8,2 мг), X-phos (13,6 мг) и трикалийфосфат (113 мг), затем дегазируют и замещают азотом. В атмосфере азота перемешивают при внешней температуре 100°C в течение ночи. Растворитель отгоняют, и остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем (подвижная фаза: хлороформ/метанол). Остаток растворяют в MeOH (1,0 мл) и туда добавляют 5 N водный раствор гидроксида натрия (1,0 мл) с последующим перемешиванием в течение 1 часа. Туда добавляют МТБЭ и водный слой экстрагируют. Водный слой подкисляют хлористоводородной кислотой, туда добавляют МТБЭ и смесь промывают последовательно водой и насыщенным раствором соли. Органический слой сушат над сульфатом натрия, и растворитель отгоняют с получением 2-(5-(5-((1S,2S,4R)-рел-2-((трет-бутоксикарбонил)амино)-7-азабицикло[2.2.1]гептан-7-карбонил)-4'-циано-3'-фтор-[1,1'-бифенил]-2-ил)-6-фтор-1H-индол-1-ил)уксусной кислоты.
Стадия 2
2-(5-(5-((1S,2S,4R)-рел-2-((трет-бутоксикарбонил)амино)-7-азабицикло[2.2.1]гептан-7-карбонил)-4'-циано-3'-фтор-[1,1'-бифенил]-2-ил)-6-фтор-1H-индол-1-ил)уксусную кислоту (10 мг), полученную на стадии 1 выше, растворяют в ТГФ (0,32 мл). Затем туда добавляют N, N'-карбонилдиимидазол (5,2 мг) и смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 20 минут. Туда добавляют двадцати восьми процентный водный аммиак (0,06 мл) и смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 20 минут. Растворитель отгоняют, и ацетонитрил (0,2 мл) и 4 N раствор хлористоводородной кислоты-1,4-диоксана (0,2 мл) добавляют к остатку с последующим перемешиванием в течение 30 минут. Растворитель отгоняют, и остаток очищают ВЭЖХ с обращенной фазой (подвижная фаза: вода/ацетонитрил) с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 231: Синтез 2-(5-(5-((1S,2S,4R)-рел-2-амино-7-азабицикло[2.2.1]гептан-7-карбонил)-4'-циано-3'-фтор-[1,1'-бифенил]-2-ил)-6-фтор-1H-индол-1-ил)-N-метилацетамида
2-(5-(5-((1S,2S,4R)-Рел-2-((трет-бутоксикарбонил)амино)-7-азабицикло[2.2.1]гептан-7-карбонил)-4'-циано-3'-фтор-[1,1'-бифенил]-2-ил)-6-фтор-1H-индол-1-ил)уксусную кислоту (10 мг), полученную на стадии 1 из Примера 230, растворяют в ТГФ (0,064 мл). При комнатной температуре туда добавляют ГАТУ (6,7 мг), гидрохлорид метиламина (2,2 мг) и ТЭА (6,7 мкл), затем перемешивают при 50°C в течение 1 часа. Растворитель отгоняют, и ацетонитрил (1,0 мл) и 4 N раствор хлористоводородной кислоты-1,4-диоксана (1,0 мл) добавляют к остатку с последующим перемешиванием в течение 10 минут. Растворитель отгоняют, остаток растворяют в ДМСО и очистку проводят ВЭЖХ с обращенной фазой (подвижная фаза: вода/ацетонитрил) с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 232: Синтез 2-(5-(5-((1S,2S,4R)-рел-2-амино-7-азабицикло[2.2.1]гептан-7-карбонил)-4'-циано-3'-фтор-[1,1'-бифенил]-2-ил)-6-фтор-1H-индол-1-ил)-N, N-диметилацетамида
Методику из Примера 231 проводят с применением гидрохлорида диметиламина вместо гидрохлорида метиламина с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 233: Синтез 2-(4'-((1S,2S,4R)-рел-2-амино-7-азабицикло[2.2.1]гептан-7-карбонил)-4''-циано-2,3''-дифтор-[1,1':2',1''-терфенил]-4-ил)ацетамида
Стадия 1
2-(4-Бром-3-фторфенил)уксусную кислоту (600 мг) растворяют в ТГФ (10,3 мл). При комнатной температуре туда добавляют ГАТУ (1,08 г), NH4Cl (275,4 мг) и ТЭА (1,08 мл), затем перемешивают при 50°C в течение 1 часа. Растворитель отгоняют и остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем (подвижная фаза: хлороформ/метанол) с получением 2-(4-бром-3-фторфенил)ацетамида.
Стадия 2
Методику из Примера 225 проводят с применением 2-(4-бром-3-фторфенил)ацетамида, полученного на стадии 1 выше, вместо 3-[(5-бром-6-фториндазол-1-ил)метил]пентан-3-ола с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 234: Синтез 2-(4'-((1S,2S,4R)-рел-2-амино-7-азабицикло[2.2.1]гептан-7-карбонил)-4''-циано-2,3''-дифтор-[1,1':2',1''-терфенил]-4-ил)-N-метилацетамида
Стадия 1
2-(4-Бром-3-фторфенил)уксусную кислоту (600 мг) растворяют в ТГФ (10,3 мл). При комнатной температуре туда добавляют ГАТУ (1,08 г), метиламин (около 9,8 моль/л в MeOH) (0,525 мл) и ТЭА (1,08 мл), затем перемешивают при 50°C в течение 1 часа. Растворитель отгоняют, и остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем (подвижная фаза: хлороформ/метанол) с получением 2-(4-бром-3-фторфенил)-N-метилацетамида.
Стадия 2
Методику из Примера 225 проводят с применением 2-(4-бром-3-фторфенил)-N-метилацетамида, полученного на стадии 1 выше, вместо 3-[(5-бром-6-фториндазол-1-ил)метил]пентан-3-ола с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 235: Синтез 2-(4'-((1S,2S,4R)-рел-2-амино-7-азабицикло[2.2.1]гептан-7-карбонил)-4''-циано-2,3''-дифтор-[1,1':2',1''-терфенил]-4-ил)-N, N-диметилацетамида
Стадия 1
2-(4-Бром-3-фторфенил)уксусную кислоту (600 мг) растворяют в ТГФ (10,3 мл). При комнатной температуре туда добавляют ГАТУ (1,08 г), гидрохлорид диметиламина (419,9 мг) и ТЭА (1,08 мл), затем перемешивают при 50°C в течение 1 часа. Растворитель отгоняют, и остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем (подвижная фаза: хлороформ/метанол) с получением 2-(4-бром-3-фторфенил)-N, N-диметилацетамида.
Стадия 2
Методику из Примера 225 проводят с применением 2-(4-бром-3-фторфенил)-N, N-диметилацетамида, полученного на стадии 1 выше, вместо 3-[(5-бром-6-фториндазол-1-ил)метил]пентан-3-ола с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 236: Синтез 5-(5-((1S,2S,4R)-рел-2-амино-7-азабицикло[2.2.1]гептан-7-карбонил)-4'-циано-3'-фтор-[1,1'-бифенил]-2-ил)-6-фтор-1-метил-1H-индол-3-карбоксамида-изомер-X
5-(5-((1S,2S,4R)-Рел-2-((трет-бутоксикарбонил)амино)-7-азабицикло[2.2.1]гептан-7-карбонил)-4'-циано-3'-фтор-[1,1'-бифенил]-2-ил)-6-фтор-1-метил-1H-индол-3-карбоновую кислоту-изомер-X (10 мг), полученную на стадии 3 из Примера 224, растворяют в ТГФ (0,32 мл). Затем туда добавляют N, N'-карбонилдиимидазол (5,2 мг) и смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 20 минут. Туда добавляют двадцати восьми процентный водный аммиак (0,1 мл) и смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 20 минут. Растворитель отгоняют, и ацетонитрил (0,2 мл) и 4 N раствор хлористоводородной кислоты-1,4-диоксана (0,2 мл) добавляют к остатку с последующим перемешиванием в течение 30 минут. Растворитель отгоняют, и остаток очищают ВЭЖХ с обращенной фазой (подвижная фаза: вода/ацетонитрил) с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 237: Синтез 5-(5-((1S,2S,4R)-рел-2-амино-7-азабицикло[2.2.1]гептан-7-карбонил)-4'-циано-3'-фтор-[1,1'-бифенил]-2-ил)-6-фтор-N,1-диметил-1H-индол-3-карбоксамида-изомер-X
5-(5-((1S,2S,4R)-Рел-2-((трет-бутоксикарбонил)амино)-7-азабицикло[2.2.1]гептан-7-карбонил)-4'-циано-3'-фтор-[1,1'-бифенил]-2-ил)-6-фтор-1-метил-1H-индол-3-карбоновую кислоту-изомер-X (10 мг), полученную на стадии 3 из Примера 224, растворяют в ТГФ (0,064 мл). При комнатной температуре туда добавляют ГАТУ (6,7 мг), гидрохлорид метиламина (2,2 мг) и ТЭА (6,7 мкл), затем перемешивают при 50°C в течение 1 часа. Растворитель отгоняют, и ацетонитрил (0,5 мл) и 4 N раствор хлористоводородной кислоты-1,4-диоксана (0,2 мл) добавляют к остатку с последующим перемешиванием в течение 10 минут. Растворитель отгоняют, остаток растворяют в ДМСО и очистку проводят ВЭЖХ с обращенной фазой (подвижная фаза: вода/ацетонитрил) с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 238: Синтез 5-(5-((1S,2S,4R)-рел-2-амино-7-азабицикло[2.2.1]гептан-7-карбонил)-4'-циано-3'-фтор-[1,1'-бифенил]-2-ил)-6-фтор-N, N,1-триметил-1H-индол-3-карбоксамида-изомер-X
Методику из Примера 237 проводят с применением гидрохлорида диметиламина вместо гидрохлорида метиламина с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 239: Синтез (S)-5'-(3-аминопирролидин-1-карбонил)-3-фтор-2'-(6-фтор-1-(2-гидрокси-2-метилпропил)-7-метил-1H-бензо[d][1.2.3]триазол-5-ил-[1,1'-бифенил]-4-карбонитрила
Методику стадий 1-5 из Примера 209 проводят с применением 1,3-дифтор-2-метил-4-нитробензола вместо 2-хлор-1,3-дифтор-4-нитробензола и с применением трет-бутил-N-[(3S)-1-[3-(4-циано-3-фторфенил)-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензоил]пирролидин-3-ил]карбамата, полученного на стадии 1 из Примера 37, вместо трет-бутил-((1S,2S,4R)-рел-7-(4'-циано-3'-фтор-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-[1,1'-бифенил]-3-карбонил)-7-азабицикло[2.2.1]гептан-2-ил)карбамата-изомер-X с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 240: Синтез 5'-((3-эндо)-3-амино-8-азабицикло[3.2.1]октан-8-карбонил)-3-фтор-2'-(6-фтор-1-(2-гидрокси-2-метилпропил)-7-метил-1H-бензо[d][1.2.3]триазол-5-ил)-[1,1'-бифенил]-4-карбонитрила
Методику стадий 1-5 из Примера 209 проводят с применением 1,3-дифтор-2-метил-4-нитробензола вместо 2-хлор-1,3-дифтор-4-нитробензола и с применением трет-бутил-N-[(3-эндо)-8-[3-(4-циано-3-фторфенил)-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензоил]-8-азабицикло[3.2.1]октан-3-ил]карбамата, полученного на стадии 3 из Примера 41, вместо трет-бутил-((1S,2S,4R)-рел-7-(4'-циано-3'-фтор-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-[1,1'-бифенил]-3-карбонил)-7-азабицикло[2.2.1]гептан-2-ил)карбамата-изомер-X с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 241: Синтез 5'-((1S,2S,4R)-рел-2-амино-7-азабицикло[2.2.1]гептан-7-карбонил)-3-фтор-2'-(6-фтор-1-(2-гидрокси-2-метилпропил)-7-метил-1H-бензо[d][1.2.3]триазол-5-ил)-[1,1'-бифенил]-4-карбонитрила
Методику стадий 1-5 из Примера 209 проводят с применением 1,3-дифтор-2-метил-4-нитробензола вместо 2-хлор-1,3-дифтор-4-нитробензола и с применением трет-бутил-((1S,2S,4R)-рел-7-(4'-циано-3'-фтор-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-[1,1'-бифенил]-3-карбонил)-7-азабицикло[2.2.1]гептан-2-ил)карбамата, полученного на стадии 1 из Примера 213, вместо трет-бутил-((1S,2S,4R)-рел-7-(4'-циано-3'-фтор-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-[1,1'-бифенил]-3-карбонил)-7-азабицикло[2.2.1]гептан-2-ил)карбамата-изомер-X с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 242: Синтез 5-(5-((1S,2S,4R)-рел-2-амино-7-азабицикло[2.2.1]гептан-7-карбонил)-4'-циано-3'-фтор-[1,1'-бифенил]-2-ил)-6-фтор-1-метил-1H-индол-3-карбоновой кислоты
Стадия 1
Трет-бутил-((1S,2S,4R)-рел-7-(4'-циано-3'-фтор-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-[1,1'-бифенил]-3-карбонил)-7-азабицикло[2.2.1]гептан-2-ил)карбамат (200 мг), полученный на стадии 1 из Примера 213, и 5-бром-6-фтор-1-метилиндол (105,6 мг) суспендируют в 1,4-диоксане (1,19 мл). При комнатной температуре туда добавляют Pd(dba)2 (16,4 мг), X-phos (27,2 мг) и трикалийфосфат (226,9 мг), затем дегазируют и замещают азотом. В атмосфере азота перемешивают при внешней температуре 100°C в течение ночи. Растворитель отгоняют, и остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем (подвижная фаза: хлороформ/метанол) с получением трет-бутил-((1S,2S,4R)-рел-7-(4'-циано-3'-фтор-6-(6-фтор-1-метил-1H-индол-5-ил)-[1,1'-бифенил]-3-карбонил)-7-азабицикло[2.2.1]гептан-2-ил)карбамата.
Стадия 2
Трет-бутил-((1S,2S,4R)-рел-7-(4'-циано-3'-фтор-6-(6-фтор-1-метил-1H-индол-5-ил)-[1,1'-бифенил]-3-карбонил)-7-азабицикло[2.2.1]гептан-2-ил)карбамат (209 мг), полученный на стадии 1 выше, растворяют в ДМФ (3,6 мл). При комнатной температуре туда добавляют N-йодсукцинимид (121 мг) с последующим перемешиванием при комнатной температуре в течение 1 часа. Туда добавляют этилацетат, и полученную смесь промывают последовательно водой и насыщенным раствором соли. После того, как органический слой сушат над сульфатом натрия, растворитель отгоняют. Остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем (подвижная фаза: гексан/этилацетат) с получением трет-бутил-((1S,2S,4R)-рел-7-(4'-циано-3'-фтор-6-(6-фтор-3-йод-1-метил-1H-индол-5-ил)-[1,1'-бифенил]-3-карбонил)-7-азабицикло[2.2.1]гептан-2-ил)карбамата.
Стадия 3
Трет-бутил-((1S,2S,4R)-рел-7-(4'-циано-3'-фтор-6-(6-фтор-3-йод-1-метил-1H-индол-5-ил)-[1,1'-бифенил]-3-карбонил)-7-азабицикло[2.2.1]гептан-2-ил)карбамат (211 мг), полученный на стадии 2 выше, и PdCl2(PPh3)2 (10.5 мг) суспендируют в 1-метил-2-пирролидиноне (2,11 мл). При комнатной температуре туда добавляют N, N-диэтилэтаноламин (0,197 мл) и после замещения СО, смесь перемешивают при 100°C в течение 1 часа. t-BuOH (0,2 мл) и 2 N водный раствор гидроксида натрия (0,2 мл) добавляют к реакционной смеси, и полученную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение ночи. Туда добавляют МТБЭ и водный слой отделяют. Водный слой подкисляют хлористоводородной кислотой и экстрагируют МТБЭ. Органический слой сушат над сульфатом натрия и растворитель отгоняют с получением 5-(5-((1S,2S,4R)-рел-2-((трет-бутоксикарбонил)амино)-7-азабицикло[2.2.1]гептан-7-карбонил)-4'-циано-3'-фтор-[1,1'-бифенил]-2-ил)-6-фтор-1-метил-1H-индол-3-карбоновой кислоты.
Стадия 4
Ацетонитрил (0,5 мл) и 4 N раствор хлористоводородной кислоты-1,4-диоксана (0,5 мл) добавляют к 5-(5-((1S,2S,4R)-рел-2-((трет-бутоксикарбонил)амино)-7-азабицикло[2.2.1]гептан-7-карбонил)-4'-циано-3'-фтор-[1,1'-бифенил]-2-ил)-6-фтор-1-метил-1H-индол-3-карбоновой кислоте (10 мг), полученной на стадии 3 выше, с последующим перемешиванием в течение 10 минут. Реакционную смесь концентрируют, и остаток очищают ВЭЖХ с обращенной фазой (подвижная фаза: вода/ацетонитрил) с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 243: Синтез 5-(5-((1S,2S,4R)-рел-2-амино-7-азабицикло[2.2.1]гептан-7-карбонил)-4'-циано-3'-фтор-[1,1'-бифенил]-2-ил)-6-фтор-N,1-диметил-1H-индол-3-карбоксамида
Методику из Примера 237 проводят с применением 5-(5-((1S,2S,4R)-рел-2-((трет-бутоксикарбонил)амино)-7-азабицикло[2.2.1]гептан-7-карбонил)-4'-циано-3'-фтор-[1,1'-бифенил]-2-ил)-6-фтор-1-метил-1H-индол-3-карбоновой кислоты, полученной на стадии 3 из Примера 242, вместо 5-(5-((1S,2S,4R)-рел-2-((трет-бутоксикарбонил)амино)-7-азабицикло[2.2.1]гептан-7-карбонил)-4'-циано-3'-фтор-[1,1'-бифенил]-2-ил)-6-фтор-1-метил-1H-индол-3-карбоновой кислоты-изомер-X с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 244: Синтез 5-(5-((1S,2S,4R)-рел-2-амино-7-азабицикло[2.2.1]гептан-7-карбонил)-4'-циано-3'-фтор-[1,1'-бифенил]-2-ил)-6-фтор-N, N,1-триметил-1H-индол-3-карбоксамида
Методику из Примера 237 проводят с применением 5-(5-((1S,2S,4R)-рел-2-((трет-бутоксикарбонил)амино)-7-азабицикло[2.2.1]гептан-7-карбонил)-4'-циано-3'-фтор-[1,1'-бифенил]-2-ил)-6-фтор-1-метил-1H-индол-3-карбоновой кислоты, полученной на стадии 3 из Примера 242, вместо 5-(5-((1S,2S,4R)-рел-2-((трет-бутоксикарбонил)амино)-7-азабицикло[2.2.1]гептан-7-карбонил)-4'-циано-3'-фтор-[1,1'-бифенил]-2-ил)-6-фтор-1-метил-1H-индол-3-карбоновой кислоты-изомер-X и с применением гидрохлорида диметиламина вместо гидрохлорида метиламина с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 245: Синтез 5-(5-((1S,2S,4R)-рел-2-амино-7-азабицикло[2.2.1]гептан-7-карбонил)-4'-циано-3'-фтор-[1,1'-бифенил]-2-ил)-6-фтор-1-метил-1H-индол-3-карбоксамида
Методику из Примера 236 проводят с применением 5-(5-((1S,2S,4R)-рел-2-((трет-бутоксикарбонил)амино)-7-азабицикло[2.2.1]гептан-7-карбонил)-4'-циано-3'-фтор-[1,1'-бифенил]-2-ил)-6-фтор-1-метил-1H-индол-3-карбоновой кислоты, полученной на стадии 3 из Примера 242, вместо 5-(5-((1S,2S,4R)-рел-2-((трет-бутоксикарбонил)амино)-7-азабицикло[2.2.1]гептан-7-карбонил)-4'-циано-3'-фтор-[1,1'-бифенил]-2-ил)-6-фтор-1-метил-1H-индол-3-карбоновой кислоты-изомер-X с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 246: Синтез 5'-((1S,2S,4R)-рел-2-амино-7-азабицикло[2.2.1]гептан-7-карбонил)-2'-(7-(дифторметил)-6-фтор-1-(2-гидрокси-2-метилпропил)-1H-бензо[d][1.2.3]триазол-5-ил)-3-фтор-[1,1'-бифенил]-4-карбонитрила-изомер-X
Методику стадий 1-5 из Примера 209 проводят с применением 2-(дифторметил)-1,3-дифтор-4-нитробензола вместо 2-хлор-1,3-дифтор-4-нитробензола с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 247: Синтез 5-(5-((1S,2S,4R)-рел-2-амино-7-азабицикло[2.2.1]гептан-7-карбонил)-4'-циано-3'-фтор-[1,1'-бифенил]-2-ил)-6-фтор-1-(2-гидрокси-2-метилпропил)-1H-бензо[d][1.2.3]триазол-7-карбонитрила-изомер-X
Методику стадий 1-5 из Примера 209 проводят с применением 2,6-дифтор-3-нитробензонитрила вместо 2-хлор-1,3-дифтор-4-нитробензола и с применением ТГФ вместо EtOH с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 248: Синтез (S)-5'-(3-аминопирролидин-1-карбонил)-2'-(7-(дифторметил)-6-фтор-1-(2-гидрокси-2-метилпропил)-1H-бензо[d][1.2.3]триазол-5-ил)-3-фтор-[1,1'-бифенил]-4-карбонитрила
Методику стадий 1-5 из Примера 209 проводят с применением 2-(дифторметил)-1,3-дифтор-4-нитробензола вместо 2-хлор-1,3-дифтор-4-нитробензола и с применением трет-бутил-N-[(3S)-1-[3-(4-циано-3-фторфенил)-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензоил]пирролидин-3-ил]карбамата, полученного на стадии 1 из Примера 37, вместо трет-бутил-((1S,2S,4R)-рел-7-(4'-циано-3'-фтор-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-[1,1'-бифенил]-3-карбонил)-7-азабицикло[2.2.1]гептан-2-ил)карбамата-изомер-X с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 249: Синтез (S)-5-(5-(3-аминопирролидин-1-карбонил)-4'-циано-3'-фтор-[1,1'-бифенил]-2-ил)-6-фтор-1-(2-гидрокси-2-метилпропил)-1H-бензо[d][1.2.3]триазол-7-карбонитрила
Методику стадий 1-5 из Примера 209 проводят с применением 2,6-дифтор-3-нитробензонитрила вместо 2-хлор-1,3-дифтор-4-нитробензола, с применением ТГФ вместо EtOH и с применением трет-бутил-N-[(3S)-1-[3-(4-циано-3-фторфенил)-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензоил]пирролидин-3-ил]карбамата, полученного на стадии 1 из Примера 37, вместо трет-бутил-((1S,2S,4R)-рел-7-(4'-циано-3'-фтор-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-[1,1'-бифенил]-3-карбонил)-7-азабицикло[2.2.1]гептан-2-ил)карбамата-изомер-X с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 250: Синтез 5'-((3-эндо)-3-амино-8-азабицикло[3.2.1]октан-8-карбонил)-2'-(7-(дифторметил)-6-фтор-1-(2-гидрокси-2-метилпропил)-1H-бензо[d][1.2.3]триазол-5-ил)-3-фтор-[1,1'-бифенил]-4-карбонитрила
Методику стадий 1-5 из Примера 209 проводят с применением 2-(дифторметил)-1,3-дифтор-4-нитробензола вместо 2-хлор-1,3-дифтор-4-нитробензола и с применением трет-бутил-N-[(3-эндо)-8-[3-(4-циано-3-фторфенил)-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензоил]-8-азабицикло[3.2.1]октан-3-ил]карбамата, полученного на стадии 3 из Примера 41, вместо трет-бутил-((1S,2S,4R)-рел-7-(4'-циано-3'-фтор-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-[1,1'-бифенил]-3-карбонил)-7-азабицикло[2.2.1]гептан-2-ил)карбамата-изомер-X с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 251: Синтез 5-(5-((3-эндо)-3-амино-8-азабицикло[3.2.1]октан-8-карбонил)-4'-циано-3'-фтор-[1,1'-бифенил]-2-ил)-6-фтор-1-(2-гидрокси-2-метилпропил)-1H-бензо[d][1.2.3]триазол-7-карбонитрила
Методику стадий 1-5 из Примера 209 проводят с применением 2,6-дифтор-3-нитробензонитрила вместо 2-хлор-1,3-дифтор-4-нитробензола, с применением ТГФ вместо EtOH и с применением трет-бутил-N-[(3-эндо)-8-[3-(4-циано-3-фторфенил)-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензоил]-8-азабицикло[3.2.1]октан-3-ил]карбамата, полученного на стадии 3 из Примера 41, вместо трет-бутил-((1S,2S,4R)-рел-7-(4'-циано-3'-фтор-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-[1,1'-бифенил]-3-карбонил)-7-азабицикло[2.2.1]гептан-2-ил)карбамата-изомер-X с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 252: Синтез 5'-((1S,2S,4R)-рел-2-амино-7-азабицикло[2.2.1]гептан-7-карбонил)-2'-(7-(дифторметил)-6-фтор-1-(2-гидрокси-2-метилпропил)-1H-бензо[d][1.2.3]триазол-5-ил-3-фтор-[1,1'-бифенил]-4-карбонитрила
Методику стадий 1-5 из Примера 209 проводят с применением 2-(дифторметил)-1,3-дифтор-4-нитробензола вместо 2-хлор-1,3-дифтор-4-нитробензола и с применением трет-бутил-((1S,2S,4R)-рел-7-(4'-циано-3'-фтор-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-[1,1'-бифенил]-3-карбонил)-7-азабицикло[2.2.1]гептан-2-ил)карбамата, полученного на стадии 1 из Примера 213, вместо трет-бутил-((1S,2S,4R)-рел-7-(4'-циано-3'-фтор-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-[1,1'-бифенил]-3-карбонил)-7-азабицикло[2.2.1]гептан-2-ил)карбамата-изомер-X с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 253: Синтез 5-(5-((1S,2S,4R)-рел-2-амино-7-азабицикло[2.2.1]гептан-7-карбонил)-4'-циано-3'-фтор-[1,1'-бифенил]-2-ил)-6-фтор-1-(2-гидрокси-2-метилпропил)-1H-бензо[d][1.2.3]триазол-7-карбонитрила
Методику стадий 1-5 из Примера 209 проводят с применением 2,6-дифтор-3-нитробензонитрила вместо 2-хлор-1,3-дифтор-4-нитробензола, с применением ТГФ вместо EtOH и с применением трет-бутил-((1S,2S,4R)-рел-7-(4'-циано-3'-фтор-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-[1,1'-бифенил]-3-карбонил)-7-азабицикло[2.2.1]гептан-2-ил)карбамата, полученного на стадии 1 из Примера 213, вместо трет-бутил-((1S,2S,4R)-рел-7-(4'-циано-3'-фтор-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-[1,1'-бифенил]-3-карбонил)-7-азабицикло[2.2.1]гептан-2-ил)карбамата-изомер-X с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 254: Синтез 5'-((1S,2S,4R)-рел-2-амино-7-азабицикло[2.2.1]гептан-7-карбонил)-2'-(6,7-дифтор-1-((1-гидроксициклобутил)метил)-1H-бензо[d][1.2.3]триазол-5-ил)-3-фтор-[1,1'-бифенил]-4-карбонитрила-изомер-X
Методику стадий 1-5 из Примера 209 проводят с применением 1.2.3-трифтор-4-нитробензола вместо 2-хлор-1,3-дифтор-4-нитробензола и с применением 1-(аминометил)циклобутанола вместо 1-амино-2-метилпропан-2-ола с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 255: Синтез (S)-5'-(3-аминопирролидин-1-карбонил)-2'-(6,7-дифтор-1-((1-гидроксициклобутил)метил)-1H-бензо[d][1.2.3]триазол-5-ил)-3-фтор-[1,1'-бифенил]-4-карбонитрила
Методику стадий 1-5 из Примера 209 проводят с применением 1.2.3-трифтор-4-нитробензола вместо 2-хлор-1,3-дифтор-4-нитробензола, с применением 1-(аминометил)циклобутанола вместо 1-амино-2-метилпропан-2-ола и с применением трет-бутил-N-[(3S)-1-[3-(4-циано-3-фторфенил)-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензоил]пирролидин-3-ил]карбамата, полученного на стадии 1 из Примера 37, вместо трет-бутил-((1S,2S,4R)-рел-7-(4'-циано-3'-фтор-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-[1,1'-бифенил]-3-карбонил)-7-азабицикло[2.2.1]гептан-2-ил)карбамата-изомер-X с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 256: Синтез 5'-((3-эндо)-3-амино-8-азабицикло[3.2.1]октан-8-карбонил)-2'-(6,7-дифтор-1-((1-гидроксициклобутил)метил)-1H-бензо[d][1.2.3]триазол-5-ил)-3-фтор-[1,1'-бифенил]-4-карбонитрила
Методику стадий 1-5 из Примера 209 проводят с применением 1,2,3-трифтор-4-нитробензола вместо 2-хлор-1,3-дифтор-4-нитробензола, с применением 1-(аминометил)циклобутанола вместо 1-амино-2-метилпропан-2-ола и с применением трет-бутил-N-[(3-эндо)-8-[3-(4-циано-3-фторфенил)-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензоил]-8-азабицикло[3.2.1]октан-3-ил]карбамата, полученного на стадии 3 из Примера 41, вместо трет-бутил-((1S,2S,4R)-рел-7-(4'-циано-3'-фтор-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-[1,1'-бифенил]-3-карбонил)-7-азабицикло[2.2.1]гептан-2-ил)карбамата-изомер-X с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 257: Синтез 5'-((1S,2S,4R)-рел-2-амино-7-азабицикло[2.2.1]гептан-7-карбонил)-2'-(7-хлор-6-фтор-1-((1-гидроксициклобутил)метил)-1H-бензо[d][1.2.3]триазол-5-ил)-3-фтор-[1,1'-бифенил]-4-карбонитрила-изомер-X
Методику стадий 1-5 из Примера 209 проводят с применением 1-(аминометил)циклобутанола вместо 1-амино-2-метилпропан-2-ола с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 258: Синтез (S)-5'-(3-аминопирролидин-1-карбонил)-2'-(7-хлор-6-фтор-1-((1-гидроксициклобутил)метил)-1H-бензо[d][1.2.3]триазол-5-ил)-3-фтор-[1,1'-бифенил]-4-карбонитрила
Методику стадий 1-5 из Примера 209 проводят с применением 1-(аминометил)циклобутанола вместо 1-амино-2-метилпропан-2-ола и с применением трет-бутил-N-[(3S)-1-[3-(4-циано-3-фторфенил)-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензоил]пирролидин-3-ил]карбамата, полученного на стадии 1 из Примера 37, вместо трет-бутил-((1S,2S,4R)-рел-7-(4'-циано-3'-фтор-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-[1,1'-бифенил]-3-карбонил)-7-азабицикло[2.2.1]гептан-2-ил)карбамата-изомер-X с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 259: Синтез 5'-((3-эндо)-3-амино-8-азабицикло[3.2.1]октан-8-карбонил)-2'-(7-хлор-6-фтор-1-((1-гидроксициклобутил)метил)-1H-бензо[d][1.2.3]триазол-5-ил)-3-фтор-[1,1'-бифенил]-4-карбонитрила
Методику стадий 1-5 из Примера 209 проводят с применением 1-(аминометил)циклобутанола вместо 1-амино-2-метилпропан-2-ола и с применением трет-бутил-N-[(3-эндо)-8-[3-(4-циано-3-фторфенил)-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензоил]-8-азабицикло[3.2.1]октан-3-ил]карбамата, полученного на стадии 3 из Примера 41, вместо трет-бутил-((1S,2S,4R)-рел-7-(4'-циано-3'-фтор-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-[1,1'-бифенил]-3-карбонил)-7-азабицикло[2.2.1]гептан-2-ил)карбамата-изомер-X с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 260: Синтез 5'-((1S,2S,4R)-рел-2-амино-7-азабицикло[2.2.1]гептан-7-карбонил)-2'-(7-(дифторметил)-6-фтор-1-((1-гидроксициклобутил)метил)-1H-бензо[d][1.2.3]триазол-5-ил)-3-фтор-[1,1'-бифенил]-4-карбонитрила-изомер-X
Методику стадий 1-5 из Примера 209 проводят с применением 2-(дифторметил)-1,3-дифтор-4-нитробензола вместо 2-хлор-1,3-дифтор-4-нитробензола и с применением 1-(аминометил)циклобутанола вместо 1-амино-2-метилпропан-2-ола с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 261: Синтез (S)-5'-(3-аминопирролидин-1-карбонил)-2'-(7-(дифторметил)-6-фтор-1-((1-гидроксициклобутил)метил)-1H-бензо[d][1.2.3]триазол-5-ил)-3-фтор-[1,1'-бифенил]-4-карбонитрила
Методику стадий 1-5 из Примера 209 проводят с применением 2-(дифторметил)-1,3-дифтор-4-нитробензола вместо 2-хлор-1,3-дифтор-4-нитробензола, с применением 1-(аминометил)циклобутанола вместо 1-амино-2-метилпропан-2-ола и с применением трет-бутил-N-[(3S)-1-[3-(4-циано-3-фторфенил)-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензоил]пирролидин-3-ил]карбамата, полученного на стадии 1 из Примера 37, вместо трет-бутил-((1S,2S,4R)-рел-7-(4'-циано-3'-фтор-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-[1,1'-бифенил]-3-карбонил)-7-азабицикло[2.2.1]гептан-2-ил)карбамата-изомер-X с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 262: Синтез 5'-((3-эндо)-3-амино-8-азабицикло[3.2.1]октан-8-карбонил)-2'-(7-(дифторметил)-6-фтор-1-((1-гидроксициклобутил)метил)-1H-бензо[d][1.2.3]триазол-5-ил)-3-фтор-[1,1'-бифенил]-4-карбонитрила
Методику стадий 1-5 из Примера 209 проводят с применением 2-(дифторметил)-1,3-дифтор-4-нитробензола вместо 2-хлор-1,3-дифтор-4-нитробензола, с применением 1-(аминометил)циклобутанола вместо 1-амино-2-метилпропан-2-ола и с применением трет-бутил-N-[(3-эндо)-8-[3-(4-циано-3-фторфенил)-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензоил]-8-азабицикло[3.2.1]октан-3-ил]карбамата, полученного на стадии 3 из Примера 41, вместо трет-бутил-((1S,2S,4R)-рел-7-(4'-циано-3'-фтор-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-[1,1'-бифенил]-3-карбонил)-7-азабицикло[2.2.1]гептан-2-ил)карбамата-изомер-X с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 263: Синтез 5'-((1S,2S,4R)-рел-2-амино-7-азабицикло[2.2.1]гептан-7-карбонил)-2'-(7-(дифторметил)-6-фтор-1-((1-гидроксициклобутил)метил)-1H-бензо[d][1.2.3]триазол-5-ил)-3-фтор-[1,1'-бифенил]-4-карбонитрила
Методику стадий 1-5 из Примера 209 проводят с применением 2-(дифторметил)-1,3-дифтор-4-нитробензола вместо 2-хлор-1,3-дифтор-4-нитробензола с применением 1-(аминометил)циклобутанола вместо 1-амино-2-метилпропан-2-ола и с применением трет-бутил-((1S,2S,4R)-рел-7-(4'-циано-3'-фтор-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-[1,1'-бифенил]-3-карбонил)-7-азабицикло[2.2.1]гептан-2-ил)карбамата, полученного на стадии 1 из Примера 213, вместо трет-бутил-((1S,2S,4R)-рел-7-(4'-циано-3'-фтор-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-[1,1'-бифенил]-3-карбонил)-7-азабицикло[2.2.1]гептан-2-ил)карбамата-изомер-X с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 264: Синтез 5-(5-((1S,2S,4R)-рел-2-амино-7-азабицикло[2.2.1]гептан-7-карбонил)-4'-циано-3'-фтор-[1,1'-бифенил]-2-ил)-6-фтор-1-((1-гидроксициклобутил)метил)-1H-бензо[d][1.2.3]триазол-7-карбонитрила-изомер-X
Методику стадий 1-5 из Примера 209 проводят с применением 2,6-дифтор-3-нитробензонитрила вместо 2-хлор-1,3-дифтор-4-нитробензола и с применением 1-(аминометил)циклобутанола вместо 1-амино-2-метилпропан-2-ола с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 265: Синтез (S)-5-(5-(3-аминопирролидин-1-карбонил)-4'-циано-3'-фтор-[1,1'-бифенил]-2-ил)-6-фтор-1-((1-гидроксициклобутил)метил)-1H-бензо[d][1.2.3]триазол-7-карбонитрила
Методику стадий 1-5 из Примера 209 проводят с применением 2,6-дифтор-3-нитробензонитрила вместо 2-хлор-1,3-дифтор-4-нитробензола, с применением 1-(аминометил)циклобутанола вместо 1-амино-2-метилпропан-2-ола и с применением трет-бутил-N-[(3S)-1-[3-(4-циано-3-фторфенил)-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензоил]пирролидин-3-ил]карбамата, полученного на стадии 1 из Примера 37, вместо трет-бутил-((1S,2S,4R)-рел-7-(4'-циано-3'-фтор-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-[1,1'-бифенил]-3-карбонил)-7-азабицикло[2.2.1]гептан-2-ил)карбамата-изомер-X с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 266: Синтез 5-(5-((3-эндо)-3-амино-8-азабицикло[3.2.1]октан-8-карбонил)-4'-циано-3'-фтор-[1,1'-бифенил]-2-ил)-6-фтор-1-((1-гидроксициклобутил)метил)-1H-бензо[d][1.2.3]триазол-7-карбонитрила
Методику стадий 1-5 из Примера 209 проводят с применением 2,6-дифтор-3-нитробензонитрила вместо 2-хлор-1,3-дифтор-4-нитробензола, с применением 1-(аминометил)циклобутанола вместо 1-амино-2-метилпропан-2-ола и с применением трет-бутил-N-[(3-эндо)-8-[3-(4-циано-3-фторфенил)-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензоил]-8-азабицикло[3.2.1]октан-3-ил]карбамата, полученного на стадии 3 из Примера 41, вместо трет-бутил-((1S,2S,4R)-рел-7-(4'-циано-3'-фтор-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-[1,1'-бифенил]-3-карбонил)-7-азабицикло[2.2.1]гептан-2-ил)карбамата-изомер-X с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 267: Синтез 5-(5-((1S,2S,4R)-рел-2-амино-7-азабицикло[2.2.1]гептан-7-карбонил)-4'-циано-3'-фтор-[1,1'-бифенил]-2-ил)-6-фтор-1-((1-гидроксициклобутил)метил)-1H-бензо[d][1.2.3]триазол-7-карбонитрила
Методику стадий 1-5 из Примера 209 проводят с применением 2,6-дифтор-3-нитробензонитрила вместо 2-хлор-1,3-дифтор-4-нитробензола, с применением 1-(аминометил)циклобутанола вместо 1-амино-2-метилпропан-2-ола и с применением трет-бутил-((1S,2S,4R)-рел-7-(4'-циано-3'-фтор-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-[1,1'-бифенил]-3-карбонил)-7-азабицикло[2.2.1]гептан-2-ил)карбамата, полученного на стадии 1 из Примера 213, вместо трет-бутил-((1S,2S,4R)-рел-7-(4'-циано-3'-фтор-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-[1,1'-бифенил]-3-карбонил)-7-азабицикло[2.2.1]гептан-2-ил)карбамата-изомер-X с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 268: Синтез 5'-((1S,2S,4R)-рел-2-амино-7-азабицикло[2.2.1]гептан-7-карбонил)-2'-(6,7-дифтор-1-((1-гидроксициклобутил)метил)-1H-бензо[d][1.2.3]триазол-5-ил)-3-фтор-[1,1'-бифенил]-4-карбонитрила
Методику стадий 1-5 из Примера 209 проводят с применением 1.2.3-трифтор-4-нитробензола вместо 2-хлор-1,3-дифтор-4-нитробензола, с применением 1-(аминометил)циклобутанола вместо 1-амино-2-метилпропан-2-ола и с применением трет-бутил-((1S,2S,4R)-рел-7-(4'-циано-3'-фтор-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-[1,1'-бифенил]-3-карбонил)-7-азабицикло[2.2.1]гептан-2-ил)карбамата, полученного на стадии 1 из Примера 213, вместо трет-бутил-((1S,2S,4R)-рел-7-(4'-циано-3'-фтор-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-[1,1'-бифенил]-3-карбонил)-7-азабицикло[2.2.1]гептан-2-ил)карбамата-изомер-X с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 269: Синтез 5'-((1S,2S,4R)-рел-2-амино-7-азабицикло[2.2.1]гептан-7-карбонил)-2'-(7-хлор-6-фтор-1-((1-гидроксициклобутил)метил)-1H-бензо[d][1.2.3]триазол-5-ил)-3-фтор-[1,1'-бифенил]-4-карбонитрила
Методику стадий 1-5 из Примера 209 проводят с применением 1-(аминометил)циклобутанола вместо 1-амино-2-метилпропан-2-ола и с применением трет-бутил-((1S,2S,4R)-рел-7-(4'-циано-3'-фтор-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-[1,1'-бифенил]-3-карбонил)-7-азабицикло[2.2.1]гептан-2-ил)карбамата, полученного на стадии 1 из Примера 213, вместо трет-бутил-((1S,2S,4R)-рел-7-(4'-циано-3'-фтор-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-[1,1'-бифенил]-3-карбонил)-7-азабицикло[2.2.1]гептан-2-ил)карбамата-изомер-X с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 270: Синтез 5'-((1S,2S,4R)-рел-2-амино-7-азабицикло[2.2.1]гептан-7-карбонил)-3-фтор-2'-(6-фтор-1-((1-гидроксициклобутил)метил)-7-метил-1H-бензо[d][1.2.3]триазол-5-ил)-[1,1'-бифенил]-4-карбонитрила-изомер-X
Методику стадий 1-5 из Примера 209 проводят с применением 1,3-дифтор-2-метил-4-нитробензола вместо 2-хлор-1,3-дифтор-4-нитробензола и с применением 1-(аминометил)циклобутанола вместо 1-амино-2-метилпропан-2-ола с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 271: Синтез (S)-5'-(3-аминопирролидин-1-карбонил)-3-фтор-2'-(6-фтор-1-((1-гидроксициклобутил)метил)-7-метил-1H-бензо[d][1.2.3]триазол-5-ил)-[1,1'-бифенил]-4-карбонитрила
Методику стадий 1-5 из Примера 209 проводят с применением 1,3-дифтор-2-метил-4-нитробензола вместо 2-хлор-1,3-дифтор-4-нитробензола, с применением 1-(аминометил)циклобутанола вместо 1-амино-2-метилпропан-2-ола и с применением трет-бутил-N-[(3S)-1-[3-(4-циано-3-фторфенил)-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензоил]пирролидин-3-ил]карбамата, полученного на стадии 1 из Примера 37, вместо трет-бутил-((1S,2S,4R)-рел-7-(4'-циано-3'-фтор-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-[1,1'-бифенил]-3-карбонил)-7-азабицикло[2.2.1]гептан-2-ил)карбамата-изомер-X с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 272: Синтез 5'-((3-эндо)-3-амино-8-азабицикло[3.2.1]октан-8-карбонил)-3-фтор-2'-(6-фтор-1-((1-гидроксициклобутил)метил)-7-метил-1H-бензо[d][1.2.3]триазол-5-ил)-[1,1'-бифенил]-4-карбонитрила
Методику стадий 1-5 из Примера 209 проводят с применением 1,3-дифтор-2-метил-4-нитробензола вместо 2-хлор-1,3-дифтор-4-нитробензола, с применением 1-(аминометил)циклобутанола вместо 1-амино-2-метилпропан-2-ола и с применением трет-бутил-N-[(3-эндо)-8-[3-(4-циано-3-фторфенил)-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензоил]-8-азабицикло[3.2.1]октан-3-ил]карбамата, полученного на стадии 3 из Примера 41, вместо трет-бутил-((1S,2S,4R)-рел-7-(4'-циано-3'-фтор-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-[1,1'-бифенил]-3-карбонил)-7-азабицикло[2.2.1]гептан-2-ил)карбамата-изомер-X с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 273: Синтез 5'-((1S,2S,4R)-рел-2-амино-7-азабицикло[2.2.1]гептан-7-карбонил)-2'-(7-бром-6-фтор-1-(2-гидрокси-2-метилпропил)-1H-бензо[d][1.2.3]триазол-5-ил)-3-фтор-[1,1'-бифенил]-4-карбонитрила-изомер-X
Стадия 1
2-Бром-1,3-дифтор-4-нитробензол (3 г) растворяют в ТГФ (31,5 мл). Туда добавляют ТЭА (2,6 мл) и 1-амино-2-метилпропан-2-ол (1,4 мл) с последующим перемешиванием при комнатной температуре в течение 1 часа. Туда добавляют этилацетат, и полученную смесь промывают последовательно водой и насыщенным раствором соли. После того, как органический слой сушат над сульфатом натрия, растворитель отгоняют. Остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем (подвижная фаза: гексан/этилацетат) с получением 1-(2-бром-3-фтор-6-нитроанилино)-2-метилпропан-2-ола.
Стадия 2
1-(2-Бром-3-фтор-6-нитроанилино)-2-метилпропан-2-ол (1,03 г), полученный на стадии 1 выше, растворяют в уксусной кислоте (6,7 мл). При комнатной температуре туда добавляют N-йодсукцинимид (981 мг), затем перемешивают при 50°C в течение 3 часов. Туда добавляют МТБЭ и воду и дважды экстрагируют МТБЭ. Объединенные органические слои сушат над безводным сульфатом натрия и растворитель отгоняют. Остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем (подвижная фаза: гексан/этилацетат) с получением 1-(2-бром-3-фтор-4-йод-6-нитроанилино)-2-метилпропан-2-ола.
Стадия 3
1-(2-Бром-3-фтор-4-йод-6-нитроанилино)-2-метилпропан-2-ол (1,33 г), полученный на стадии 2 выше, и железо (1,33 г) растворяют в ТГФ (10,2 мл) и 2 N хлористоводородной кислоте (10,2 мл), затем перемешивают при 60°C в течение 1 часа. Туда добавляют МТБЭ, и смесь пропускают через Целит. Туда добавляют МТБЭ, и смесь промывают последовательно водой и насыщенным раствором соли и сушат над безводным сульфатом натрия. Затем растворитель отгоняют. Остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем (подвижная фаза: гексан/этилацетат) с получением 1-(6-амино-2-бром-3-фтор-4-йоданилино)-2-метилпропан-2-ола.
Стадия 4
1-(6-Амино-2-бром-3-фтор-4-йоданилино)-2-метилпропан-2-ол (940 мг), полученный на стадии 3 выше, растворяют в воде (1,88 мл) и ТГФ (4,7 мл). При 0°C туда добавляют 12 N хлористоводородную кислоту (2,82 мл) и водный раствор нитрита натрия (водный раствор, полученный растворением 209 мг нитрита натрия в 0,63 мл воды) по каплям с последующим перемешиванием при комнатной температуре в течение 1 часа. Туда добавляют МТБЭ, и смесь промывают последовательно водой и насыщенным раствором соли и сушат над безводным сульфатом натрия. Затем растворитель отгоняют. Остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем (подвижная фаза: гексан/этилацетат) с получением 1-(7-бром-6-фтор-5-йодбензотриазол-1-ил)-2-метилпропан-2-ола.
Стадия 5
Трет-бутил-((1S,2S,4R)-рел-7-(4'-циано-3'-фтор-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-[1,1'-бифенил]-3-карбонил)-7-азабицикло[2.2.1]гептан-2-ил)карбамат-изомер-X (50 мг), полученный на стадии 2 из Примера 207, и 1-(7-бром-6-фтор-5-йодбензотриазол-1-ил)-2-метилпропан-2-ол (47,9 мг), полученный на стадии 4 выше, растворяют в 1,4-диоксане (0,3 мл). При комнатной температуре туда добавляют Pd(dba)2 (4,1 мг), X-phos (6,8 мг) и трикалийфосфат (56,7 мг). После замещения азотом смесь перемешивают при 90°C в течение ночи. Туда добавляют этилацетат, и смесь помещают в NH-силикагель и промывают этилацетатом:метанолом=10:1. Растворитель отгоняют и ацетонитрил (1,0 мл) и 4 N раствор хлористоводородной кислоты-1,4-диоксана (1,0 мл) добавляют к остатку с последующим перемешиванием в течение 10 минут. Растворитель отгоняют, остаток растворяют в ДМСО и очистку проводят ВЭЖХ с обращенной фазой (подвижная фаза: вода/ацетонитрил) с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 274: Синтез (S)-5'-(3-аминопирролидин-1-карбонил)-2'-(7-бром-6-фтор-1-(2-гидрокси-2-метилпропил)-1H-бензо[d][1.2.3]триазол-5-ил)-3-фтор-[1,1'-бифенил]-4-карбонитрила
Методику стадий 1-5 из Примера 273 проводят с применением трет-бутил-N-[(3S)-1-[3-(4-циано-3-фторфенил)-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензоил]пирролидин-3-ил]карбамата, полученного на стадии 1 из Примера 37, вместо трет-бутил-((1S,2S,4R)-рел-7-(4'-циано-3'-фтор-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-[1,1'-бифенил]-3-карбонил)-7-азабицикло[2.2.1]гептан-2-ил)карбамата-изомер-X с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 275: Синтез 5'-((3-эндо)-3-амино-8-азабицикло[3.2.1]октан-8-карбонил)-2'-(7-бром-6-фтор-1-(2-гидрокси-2-метилпропил)-1H-бензо[d][1.2.3]триазол-5-ил)-3-фтор-[1,1'-бифенил]-4-карбонитрила
Методику стадий 1-5 из Примера 273 проводят с применением трет-бутил-N-[(3-эндо)-8-[3-(4-циано-3-фторфенил)-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензоил]-8-азабицикло[3.2.1]октан-3-ил]карбамата, полученного на стадии 3 из Примера 41, вместо трет-бутил-((1S,2S,4R)-рел-7-(4'-циано-3'-фтор-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-[1,1'-бифенил]-3-карбонил)-7-азабицикло[2.2.1]гептан-2-ил)карбамата-изомер-X с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 276: Синтез 5'-((1S,2S,4R)-рел-2-амино-7-азабицикло[2.2.1]гептан-7-карбонил)-3-фтор-2'-(6-фтор-1-((1-гидроксициклобутил)метил)-7-метил-1H-бензо[d][1.2.3]триазол-5-ил)-[1,1'-бифенил]-4-карбонитрила
Методику стадий 1-5 из Примера 209 проводят с применением 1,3-дифтор-2-метил-4-нитробензол вместо 2-хлор-1,3-дифтор-4-нитробензол, с применением 1-(аминометил)циклобутанола вместо 1-амино-2-метилпропан-2-ола, и с применением трет-бутил-((1S,2S,4R)-рел-7-(4'-циано-3'-фтор-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-[1,1'-бифенил]-3-карбонил)-7-азабицикло[2.2.1]гептан-2-ил)карбамата, полученного на стадии 1 из Примера 213, вместо трет-бутил-((1S,2S,4R)-рел-7-(4'-циано-3'-фтор-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-[1,1'-бифенил]-3-карбонил)-7-азабицикло[2.2.1]гептан-2-ил)карбамата-изомер-X с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 277: Синтез 5'-((1S,2S,4R)-рел-2-амино-7-азабицикло[2.2.1]гептан-7-карбонил)-2'-(7-бром-6-фтор-1-(2-гидрокси-2-метилпропил)-1H-бензо[d][1.2.3]триазол-5-ил)-3-фтор-[1,1'-бифенил]-4-карбонитрила
Методику стадий 1-5 из Примера 273 проводят с применением трет-бутил-((1S,2S,4R)-рел-7-(4'-циано-3'-фтор-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-[1,1'-бифенил]-3-карбонил)-7-азабицикло[2.2.1]гептан-2-ил)карбамата, полученного на стадии 1 из Примера 213, вместо трет-бутил-((1S,2S,4R)-рел-7-(4'-циано-3'-фтор-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-[1,1'-бифенил]-3-карбонил)-7-азабицикло[2.2.1]гептан-2-ил)карбамата-изомер-X с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 278: Синтез 5'-((1R,2R,4S)-рел-2-амино-7-азабицикло[2.2.1]гептан-7-карбонил)-2'-(7-циклопропил-6-фтор-1-(2-гидрокси-2-метилпропил)-1H-бензо[d][1.2.3]триазол-5-ил)-3-фтор-[1,1'-бифенил]-4-карбонитрила
Стадия 1
1-(2-Бром-3-фтор-6-нитроанилино)-2-метилпропан-2-ол (975 мг), полученный на стадии 1 из Примера 273, растворяют в 1,4-диоксане (10,6 мл). При комнатной температуре туда добавляют дихлорбис(трициклогексилфосфин)палладий(II) (234 мг), циклопропилбороновую кислоту (464 мг) и трикалийфосфат (2,02 г), затем перемешивают при 10°C в течение ночи. Растворитель отгоняют, и остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем (подвижная фаза: гексан/этилацетат) с получением 1-((2-циклопропил-3-фтор-6-нитрофенил)амино)-2-метилпропан-2-ола.
Стадия 2
1-((2-Циклопропил-3-фтор-6-нитрофенил)амино)-2-метилпропан-2-ол (204 мг), полученный на стадии 1 выше, растворяют в ацетонитриле (1,5 мл). При комнатной температуре туда добавляют NBS (196 мг), затем перемешивают при 50°C в течение 1 часа. Растворитель отгоняют, и остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем (подвижная фаза: гексан/этилацетат) с получением 1-((4-бром-2-циклопропил-3-фтор-6-нитрофенил)амино)-2-метилпропан-2-ола.
Стадия 3
1-((4-Бром-2-циклопропил-3-фтор-6-нитрофенил)амино)-2-метилпропан-2-ол (250 мг), полученный на стадии 2 выше, и железо (250 мг) растворяют в ТГФ (2,4 мл) и 2 N хлористоводородной кислоте (2,4 мл), затем перемешивают при 60°C в течение 1 часа. Туда добавляют этилацетат, и смесь пропускают через Целит. Туда добавляют этилацетат, и смесь промывают последовательно водой и насыщенным раствором соли и сушат над безводным сульфатом натрия. Затем растворитель отгоняют. Остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем (подвижная фаза: гексан/этилацетат) с получением 1-((6-амино-4-бром-2-циклопропил-3-фторфенил)амино)-2-метилпропан-2-ола.
Стадия 4
1-((6-Амино-4-бром-2-циклопропил-3-фторфенил)амино)-2-метилпропан-2-ол (192 мг), полученный на стадии 3 выше, растворяют в ТГФ (2,0 мл) и 2 N хлористоводородной кислоте (2,0 мл). Туда по каплям добавляют водный раствор нитрита натрия (водный раствор, полученный растворением 54 мг нитрита натрия в 0,16 мл воды) с последующим перемешиванием при комнатной температуре в течение 1 часа. Туда добавляют этилацетат, и смесь промывают последовательно водой и насыщенным раствором соли и сушат над безводным сульфатом натрия. Затем растворитель отгоняют. Остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем (подвижная фаза: гексан/этилацетат) с получением 1-(5-бром-7-циклопропил-6-фтор-1H-бензо[d][1.2.3]триазол-1-ил)-2-метилпропан-2-ола.
Стадия 5
Трет-бутил-((1S,2S,4R)-рел-7-(4'-циано-3'-фтор-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-[1,1'-бифенил]-3-карбонил)-7-азабицикло[2.2.1]гептан-2-ил)карбамат (15 мг), полученный на стадии 1 из Примера 213, и 1-(5-бром-7-циклопропил-6-фтор-1H-бензо[d][1.2.3]триазол-1-ил)-2-метилпропан-2-ол (10,5 мг), полученный на стадии 4 выше, растворяют в 1,4-диоксане (0,2 мл). Туда добавляют Pd(dba)2 (1,2 мг), X-phos (2,0 мг) и трикалийфосфат (17 мг). После азотного замещения смесь перемешивают при 100°C в течение ночи. Туда добавляют этилацетат, и смесь помещают в NH-силикагель и промывают этилацетатом:метанолом=10:1. Растворитель отгоняют, и ацетонитрил (1,0 мл) и 4 N раствор хлористоводородной кислоты-1,4-диоксана (1,0 мл) добавляют к остатку с последующим перемешиванием в течение 10 минут. Растворитель отгоняют, остаток растворяют в ДМСО и очистку проводят ВЭЖХ с обращенной фазой (подвижная фаза: вода/ацетонитрил) с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 279: Синтез 5'-((1R,2R,4S)-рел-2-амино-7-азабицикло[2.2.1]гептан-7-карбонил)-2'-(7-циклопропил-6-фтор-1-(2-гидрокси-2-метилпропил)-1H-бензо[d][1.2.3]триазол-5-ил)-3-фтор-[1,1'-бифенил]-4-карбонитрила-изомер-X
Методику стадий 1-5 из Примера 278 проводят с применением трет-бутил-((1S,2S,4R)-рел-7-(4'-циано-3'-фтор-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-[1,1'-бифенил]-3-карбонил)-7-азабицикло[2.2.1]гептан-2-ил)карбамата-изомер-X, полученного на стадии 2 из Примера 207, вместо трет-бутил-((1S,2S,4R)-рел-7-(4'-циано-3'-фтор-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-[1,1'-бифенил]-3-карбонил)-7-азабицикло[2.2.1]гептан-2-ил)карбамата.
Пример 280: Синтез (S)-5'-(3-аминопирролидин-1-карбонил)-2'-(7-циклопропил-6-фтор-1-(2-гидрокси-2-метилпропил)-1H-бензо[d][1.2.3]триазол-5-ил)-3-фтор-[1,1'-бифенил]-4-карбонитрила
Методику стадий 1-5 из Примера 278 проводят с применением трет-бутил-N-[(3S)-1-[3-(4-циано-3-фторфенил)-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензоил]пирролидин-3-ил]карбамата, полученного на стадии 1 из Примера 37, вместо трет-бутил-((1S,2S,4R)-рел-7-(4'-циано-3'-фтор-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-[1,1'-бифенил]-3-карбонил)-7-азабицикло[2.2.1]гептан-2-ил)карбамата с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 281: Синтез 5'-((3-эндо)-3-амино-8-азабицикло[3.2.1]октан-8-карбонил)-2'-(7-циклопропил-6-фтор-1-(2-гидрокси-2-метилпропил)-1H-бензо[d][1.2.3]триазол-5-ил)-3-фтор-[1,1'-бифенил]-4-карбонитрила
Методику стадий 1-5 из Примера 278 проводят с применением трет-бутил-N-[(3-эндо)-8-[3-(4-циано-3-фторфенил)-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензоил]-8-азабицикло[3.2.1]октан-3-ил]карбамата, полученного на стадии 3 из Примера 41, вместо трет-бутил-((1S,2S,4R)-рел-7-(4'-циано-3'-фтор-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-[1,1'-бифенил]-3-карбонил)-7-азабицикло[2.2.1]гептан-2-ил)карбамата с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 282: Синтез (S)-5'-((3-аминопирролидин-1-ил)метил)-4''-метил-[1,1':2',1''-терфенил]-4-карбонитрила
Стадия 1
3-Бром-4-хлорбензальдегид (100 мг) и трет-бутил-N-[(3S)-пирролидин-3-ил]карбамат (93,4 мг) растворяют в MeOH (1,0 мл). При 0°C туда добавляют уксусную кислоту (0,1 мл) и комплекс боран-2-пиколин (146 мг), затем перемешивают при комнатной температуре в течение ночи. Туда добавляют этилацетат, и полученную смесь промывают последовательно водой и насыщенным раствором соли и сушат над безводным сульфатом натрия. Затем растворитель отгоняют. Остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем (подвижная фаза: гексан/этилацетат) с получением трет-бутил-N-[(3S)-1-[(3-бром-4-хлорфенил)метил]пирролидин-3-ил]карбамата.
Стадия 2
Трет-бутил-N-[(3S)-1-[(3-бром-4-хлорфенил)метил]пирролидин-3-ил]карбамат (60 мг), полученный на стадии 1 выше, и (4-цианофенил)бороновую кислоту (24,9 мг) растворяют в 1,4-диоксане (0,77 мл). При комнатной температуре туда добавляют PdCl2(dppf)CH2Cl2 (3,4 мг) и трикалийфосфат (97,9 мг), затем перемешивают при 125°C в течение 45 минут. Реакционную смесь фильтруют и растворитель отгоняют. Остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем (подвижная фаза: гексан/этилацетат) с получением трет-бутил-N-[(3S)-1-[[4-хлор-3-(4-цианофенил)фенил]метил]пирролидин-3-ил]карбамата.
Стадия 3
Трет-бутил-N-[(3S)-1-[[4-хлор-3-(4-цианофенил)фенил]метил]пирролидин-3-ил]карбамат (20 мг), полученный на стадии 2 выше, п-толилбороновую кислоту (13,2 мг), Pd2(dba)3 (2,23 мг), трикалийфосфат (20,6 мг) и раствор 1M PCy3 в ТГФ (0,1 мл) суспендируют в 1,4-диоксане (0,5 мл), затем перемешивают при 160°C в течение 45 минут. Реакционную смесь фильтруют через NH-силикагель, и растворитель из фильтрата отгоняют. Остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем (подвижная фаза: гексан/этилацетат) с получением трет-бутил-N-[(3S)-1-[[3-(4-цианофенил)-4-(п-толил)фенил]метил]пирролидин-3-ил]карбамата.
Стадия 4
Трет-бутил-N-[(3S)-1-[[3-(4-цианофенил)-4-(п-толил)фенил]метил]пирролидин-3-ил]карбамат (10 мг), полученный на стадии 3 выше, растворяют в ТФК (0,3 мл), и развитие реакции подтверждают ЖХМС, затем концентрируют в вакууме. Остаток очищают ВЭЖХ с обращенной фазой (подвижная фаза: вода/ацетонитрил) с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 283: Синтез 5'-(((1S,2S,4R)-рел-2-амино-7-азабицикло[2.2.1]гептан-7-ил)метил)-2'',3-дифтор-4''-метил-[1,1':2',1''-терфенил]-4-карбонитрила-изомер-X
Стадия 1
3-Бром-4-хлорбензальдегид (1,1 г) растворяют в 1,4-диоксане (13 мл). При комнатной температуре туда добавляют (4-циано-3-фторфенил)бороновую кислоту (870 мг), PdCl2(dppf)CH2Cl2 (110 мг), и 2M водный раствор карбоната натрия (6,3 мл), затем перемешивают при 90°C в течение 5 часов. Туда добавляют этилацетат, и полученную смесь последовательно промывают водой и насыщенным раствором соли. Затем органический слой сушат над безводным сульфатом натрия, растворитель отгоняют. Остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем (подвижная фаза: гексан/этилацетат) с получением 4-(2-хлор-5-формилфенил)-2-фторбензонитрила.
Стадия 2
4-(2-хлор-5-формилфенил)-2-фторбензонитрил (505 мг), полученный на стадии 1 выше, растворяют в 1,4-диоксане (19,45 мл). При комнатной температуре туда добавляют (2-фтор-4-метилфенил)бороновую кислоту (599 мг), Pd2dba3 (89 мг), раствор 1M PCy3 в ТГФ (0,1 мл) и трикалийфосфат (1,24 г), и смесь перемешивают в микроволновом реакторе при 160°C в течение 1 часа. Растворитель отгоняют, и остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем (подвижная фаза: гексан/этилацетат) с получением 2-фтор-4-[2-(2-фтор-4-метил-фенил)-5-формилфенил]бензонитрила.
Стадия 3
2-Фтор-4-[2-(2-фтор-4-метилфенил)-5-формилфенил]бензонитрил (10 мг), полученный на стадии 2 выше, растворяют в ДХМ (0,6 мл). При комнатной температуре туда добавляют трет-бутил-((1S,2S,4R)-рел-7-азабицикло[2.2.1]гептан-2-ил)карбамат-изомер-X (9,55 мг), синтезированный на стадии 2 Примера 202, и триацетоксиборгидрид натрия (25,4 мг), затем перемешивают при комнатной температуре в течение 1 часа. Растворитель отгоняют, туда добавляют хлороформ, и нерастворимое вещество отфильтровывают. Растворитель отгоняют, и туда добавляют ацетонитрил (0,2 мл) и 4N раствор хлористоводородной кислоты в 1,4-диоксане (0,2 мл), затем перемешивают в течение 10 минут. Туда добавляют ДМСО (0,6 мл) и проводят очистку ВЭЖХ с обращенной фазой (подвижная фаза: вода/ацетонитрил) с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 284: Синтез (S)-5'-((3-амино-3-метилпирролидин-1-ил)метил)-2'',3-дифтор-4''-метил-[1,1':2',1''-терфенил]-4-карбонитрила
Методику со стадии 3 из примера 283 проводят с применением трет-бутил-(S)-(3-метилпирролидин-3-ил)карбамата вместо трет-бутил-((1S,2S,4R)-рел-7-азабицикло[2.2.1]гептан-2-ил)карбамата-изомер-X с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 285: Синтез дигидрохлорида 5'-(((1S,2S,4R)-рел-2-амино-7-азабицикло[2.2.1]гептан-7-ил)метил)-2'-(6,7-дифтор-1-(2-гидрокси-2-метилпропил)-1H-бензо[d][1.2.3]триазол-5-ил)-3-фтор[1,1'-бифенил]-4-карбонитрила-изомер-X
Стадия 1
3-Бром-4-хлорбензойную кислоту (19 г) растворяют в ДМФ (160 мл). При 25°C туда добавляют ДМАП (20 г) и WSC HCl (31 г), затем добавляют t-BuOH (38 мл). Полученную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение ночи. Туда добавляют этилацетат, и полученную смесь последовательно промывают водой и насыщенным раствором соли. Затем органический слой сушат над безводным сульфатом натрия, растворитель отгоняют. Остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем (подвижная фаза: гексан/этилацетат) с получением трет-бутил-3-бром-4-хлорбензоата.
Стадия 2
Трет-бутил-3-бром-4-хлорбензоат (1,00 г), полученный на стадии 1 выше, растворяют в 1,4-диоксане (8,6 мл). При комнатной температуре туда добавляют (4-циано-3-фторфенил)бороновую кислоту (509 мг), Pd(PPh3)4 (119 мг) и 2M водный раствор карбоната натрия (4,3 мл), и реакционную смесь перемешивают в микроволновом реакторе при 120°C в течение 30 минут. Реакционную смесь фильтруют, и растворитель отгоняют. Остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем (подвижная фаза: гексан/этилацетат) с получением трет-бутил-4-хлор-3-(4-циано-3-фторфенил)бензоата.
Стадия 3
Трет-бутил-4-хлор-3-(4-циано-3-фторфенил)бензоат (300 мг), полученный на стадии 2 выше, растворяют в 1,4-диоксане (5 мл). При комнатной температуре туда добавляют Pd(OAc)2 (40 мг), KOAc (300 мг), биспинаколатодиборон (500 мг) и Silica-SMAP (50 мг), затем перемешивают при 100°C в течение 26 часов. Реакционную смесь фильтруют, и растворитель отгоняют. Остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем (подвижная фаза: гексан/этилацетат) с получением трет-бутил-3-(4-циано-3-фторфенил)-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензоата.
Стадия 4
1.2.3-Трифтор-4-нитробензол (500 мг), 1-амино-2-метилпропан-2-ол (302 мг) и триэтиламин (0,590 мл) растворяют в ТГФ (5,65 мл), затем перемешивают при 45°C в течение 5 часов. Туда добавляют этилацетат, и полученную смесь последовательно промывают водой и насыщенным раствором соли. Затем органический слой сушат над безводным сульфатом натрия, растворитель отгоняют. Остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем (подвижная фаза: гексан/этилацетат) с получением 1-(2,3-дифтор-6-нитроанилино)-2-метилпропан-2-ола.
Стадия 5
1-(2,3-Дифтор-6-нитроанилино)-2-метилпропан-2-ол (74,1 г), полученный на стадии 4 выше, растворяют в ДМФ (602 мл). При комнатной температуре туда добавляют NBS (64,3 г), затем перемешивают при 90°C в течение 1 часа. Туда добавляют этилацетат и смесь промывают 3 раза водой. Затем промывают насыщенным раствором соли, сушат над безводным сульфатом натрия и затем растворитель отгоняют. Остаток кристаллизуют из ИПЭ:гексана=1:1, и кристаллы дважды промывают гексаном. Полученные кристаллы сушат с получением 1-(4-бром-2,3-дифтор-6-нитроанилино)-2-метилпропан-2-ола.
Стадия 6
1-(4-Бром-2,3-дифтор-6-нитроанилино)-2-метилпропан-2-ол (82,2 г), полученный на стадии 5 выше, хлорид аммония (82,2 г) и порошок железа (41,1 г) суспендируют в EtOH (421 мл) и воде (421 мл), затем перемешивают при 60°C в течение ночи. Туда добавляют МТБЭ, и смесь пропускают через Целит. Туда добавляют МТБЭ, и смесь последовательно промывают водой и насыщенным раствором соли, и сушат над безводным сульфатом натрия. Затем растворитель отгоняют с получением 1-(6-амино-4-бром-2,3-дифторанилино)-2-метилпропан-2-ола.
Стадия 7
1-(6-Амино-4-бром-2,3-дифторанилино)-2-метилпропан-2-ол (68,1 г), полученный на стадии 6 выше, растворяют в воде (136 мл) и ТГФ (341 мл). При 0°C туда по каплям добавляют 12N хлористоводородную кислоту (204 мл) и нитрит натрия (водный раствор (60 мл), в котором растворены 20,7 г нитрита натрия) в течение более 3 минут, затем перемешивают при комнатной температуре в течение 1 часа. Туда добавляют МТБЭ, и смесь последовательно промывают водой и насыщенным раствором соли и сушат над безводным сульфатом натрия. Затем растворитель отгоняют. К остатку добавляют ИПЭ:гексан=1:1 (68 мл), и полученное твердое вещество собирают фильтрацией и промывают ИПЭ:гексаном=1:1. Полученное твердое вещество сушат с получением 1-(5-бром-6,7-дифторбензотриазол-1-ил)-2-метилпропан-2-ола.
Стадия 8
Трет-бутил-3-(4-циано-3-фторфенил)-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензоат (3,2 г), полученный на стадии 3 выше, и 1-(5-бром-6,7-дифторбензотриазол-1-ил)-2-метилпропан-2-ол (3,01 г), полученный на стадии 7 выше, растворяют в 1,4-диоксане (25,2 мл). При комнатной температуре туда добавляют Pd(dba)2 (348 мг), X-Phos (577 мг) и трикалийфосфат (4,81 г), затем перемешивают при 100°C в течение ночи. Растворитель отгоняют, остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем (подвижная фаза: гексан/этилацетат) и растворитель отгоняют. Остаток растворяют в ТГФ (15,0 мл). При 0°C туда добавляют 12N хлористоводородную кислоту (15,0 мл), затем перемешивают при комнатной температуре в течение 2 часов. Туда добавляют МТБЭ, смесь промывают водой и сушат над безводным сульфатом натрия, и растворитель отгоняют с получением 3-(4-циано-3-фторфенил)-4-[6,7-дифтор-1-(2-гидрокси-2-метилпропил)бензотриазол-5-ил]бензойной кислоты.
Стадия 9
3-(4-Циано-3-фторфенил)-4-[6,7-дифтор-1-(2-гидрокси-2-метилпропил)бензотриазол-5-ил]бензойную кислоту (120 мг), полученную на стадии 8 выше, растворяют в ТГФ (1,29 мл). При комнатной температуре туда добавляют WSC HCl (98,6 мг) и ГОБт (78,8 мг), затем перемешивают при комнатной температуре в течение 20 минут. Туда добавляют боргидрид натрия (19,5 мг), затем перемешивают в течение 1 часа. Растворитель отгоняют при пониженном давлении. Остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем (подвижная фаза: хлороформ/метанол) с получением 4-[2-[6,7-дифтор-1-(2-гидрокси-2-метилпропил)бензотриазол-5-ил]-5-(гидроксиметил)фенил]-2-фторбензонитрила.
Стадия 10
4-[2-[6,7-Дифтор-1-(2-гидрокси-2-метилпропил)бензотриазол-5-ил]-5-(гидроксиметил)фенил]-2-фторбензонитрил (100 мг), полученный на стадии 9 выше, растворяют в ДХМ (2,21 мл). При комнатной температуре туда добавляют периодинан Десса-Мартина (103 мг), затем перемешивают при комнатной температуре в течение ночи. Реакционную смесь концентрируют в вакууме, и остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем (подвижная фаза: гексан/этилацетат) с получением 4-[2-[6,7-дифтор-1-(2-гидрокси-2-метилпропил)бензотриазол-5-ил]-5-формилфенил]-2-фторбензонитрил.
Стадия 11
4-[2-[6,7-Дифтор-1-(2-гидрокси-2-метилпропил)бензотриазол-5-ил]-5-формилфенил]-2-фторбензонитрил (50 мг), полученный на стадии 10 выше, растворяют в ДХМ (1,11 мл). При комнатной температуре туда добавляют трет-бутил-((1S,2S,4R)-рел-7-азабицикло[2.2.1]гептан-2-ил)карбамат-изомер-X (47,1 мг), синтезированный на стадии 2 примера 202, затем перемешивают при комнатной температуре в течение 30 минут. При комнатной температуре туда добавляют триацетоксиборгидрид натрия (94,1 мг), затем перемешивают при комнатной температуре в течение ночи. После добавления хлороформа, нерастворимое вещество отфильтровывают и растворитель отгоняют. Остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем (NH-силикагель, подвижная фаза: гексан/этилацетат), и растворитель отгоняют. Остаток растворяют в MeOH (1,0 мл) и туда добавляют 4N раствор хлористоводородной кислоты в 1,4-диоксане (1,0 мл), затем перемешивают в течение 30 минут. Растворитель удаляют из реакционной смеси с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 286: Синтез дигидрохлорида 5'-(((1S,2S,4R)-рел-2-амино-7-азабицикло[2.2.1]гептан-7-ил)метил)-2'-(7-хлор-6-фтор-1-((1-гидроксициклобутил)метил)-1H-бензо[d][1.2.3]триазол-5-ил)-3-фтор-[1,1'-бифенил]-4-карбонитрила-изомер-X
Методику со стадий 4-11 из примера 285 проводят с применением 2-хлор-1,3-дифтор-4-нитробензола вместо 1.2.3-трифтор-4-нитробкнзола, и с применением 1-(аминометил)циклобутанола вместо 1-амино-2-метилпропан-2-ола с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 287: Синтез дигидрохлорида 5'-(((1S,2S,4R)-рел-2-амино-7-азабицикло[2.2.1]гептан-7-ил)метил)-3-фтор-2'-(6-фтор-1-(2-гидрокси-2-метилпропил)-1H-индазол-5-ил)-[1,1'-бифенил]-4-карбонитрила-изомер-X
Стадия 1
5-Бром-6-фтор-1H-индазол (94 мг) растворяют в ДМФ (1,5 мл). При комнатной температуре туда добавляют карбонат цезия (285 мг) и 2,2-диметилоксиран (0,078 мл), затем перемешивают при 90°C в течение 16 часов. Реакцию гасят насыщенным водным раствором хлорида аммония, туда добавляют этилацетат, и полученную смесь последовательно промывают водой и насыщенным раствором соли. Затем органический слой сушат над безводным сульфатом натрия, растворитель отгоняют. Остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем (подвижная фаза: гексан/этилацетат) с получением 1-(5-бром-6-фториндазол-1-ил)-2-метилпропан-2-ола.
Стадия 2
Методику со стадий 8-11 из примера 285 проводят с применением 1-(5-бром-6-фториндазол-1-ил)-2-метилпропан-2-ола, полученного на стадии 1 выше, вместо 1-(5-бром-6,7-дифторбензотриазол-1-ил)-2-метилпропан-2-ола с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 288: Синтез дигидрохлорида 5'-(((1S,2S,4R)-рел-2-амино-7-азабицикло[2.2.1]гептан-7-ил)метил)-2'-(7-хлор-1-(2-этил-2-гидроксибутил)-6-фтор-1H-бензо[d][1.2.3]триазол-5-ил)-3-фтор-[1,1'-бифенил]-4-карбонитрила-изомер-X
Методику со стадий 4-11 из примера 285 проводят с применением 2-хлор-1,3-дифтор-4-нитробензола вместо 1.2.3-трифтор-4-нитробензола, и с применением 3-(аминометил)пентан-3-ола вместо 1-амино-2-метилпропан-2-ола с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 289: Синтез дигидрохлорида 5'-(((1S,2S,4R)-рел-2-амино-7-азабицикло[2.2.1]гептан-7-ил)метил)-3-фтор-2'-(6-фтор-1-(2-гидрокси-2-метилпропил)-1H-индол-5-ил)-[1,1'-бифенил]-4-карбонитрила-изомер-X
Стадия 1
5-Бром-6-фтор-1H-индол (50 мг) растворяют в ДМФ (0,78 мл). При комнатной температуре туда добавляют карбонат цезия (151 мг) и 2,2-диметилоксиран (42 мкл), затем перемешивают при 90°C в течение 16 часов. Реакцию гасят насыщенным водным раствором хлорида аммония, туда добавляют этилацетат, и полученную смесь последовательно промывают водой и насыщенным раствором соли. Затем органический слой сушат над безводным сульфатом натрия, растворитель отгоняют. Остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем (подвижная фаза: гексан/этилацетат) с получением 1-(5-бром-6-фториндол-1-ил)-2-метилпропан-2-ола.
Стадия 2
Методику со стадий 8-11 из примера 285 проводят с применением 1-(5-бром-6-фториндол-1-ил)-2-метилпропан-2-ола, полученного на стадии 1 выше, вместо 1-(5-бром-6,7-дифторбензотриазол-1-ил)-2-метилпропан-2-ола с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 290: Синтез дигидрохлорида 5'-(((1S,2S,4R)-рел-2-амино-7-азабицикло[2.2.1]гептан-7-ил)метил)-2'',3-дифтор-4''-(2-гидрокси-2-метилпропил)-[1,1':2',1''-терфенил]-4-карбонитрила-изомер-X
Стадия 1
Метил-2-(4-бром-3-фторфенил)ацетат (500 мг) растворяют в ТГФ (2,2 мл). При -30°C туда по каплям добавляют раствор 3M MeMgBr в диэтиловом эфире (5,40 мл), затем перемешивают при комнатной температуре в течение ночи. Реакционную смесь вводят в водным раствор хлорида аммония, туда добавляют этилацетат, и смесь последовательно промывают водой и насыщенным раствором соли. Затем органический слой сушат над безводным сульфатом натрия, растворитель отгоняют. Остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем (подвижная фаза: гексан/этилацетат) с получением 1-(4-бром-3-фторфенил)-2-метилпропан-2-ола.
Стадия 2
Методику со стадий 8-11 из примера 285 проводят с применением 1-(4-бром-3-фторфенил)-2-метилпропан-2-ола, полученного на стадии 1 выше, вместо 1-(5-бром-6,7-дифторбензотриазол-1-ил)-2-метилпропан-2-ола с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 291: Синтез дигидрохлорида (S)-5'-((3-аминопирролидин-1-ил)метил)-2'',3-дифтор-4''-(2-гидрокси-2-метилпропил)-[1,1':2',1''-терфенил]-4-карбонитрила
Методику со стадий 8-11 из примера 285 проводят с применением 1-(4-бром-3-фторфенил)-2-метилпропан-2-ола, полученного на стадии 1 из Примера 290 вместо 1-(5-бром-6,7-дифторбензотриазол-1-ил)-2-метилпропан-2-ола, и с применением трет-бутил-N-[(3S)-пирролидин-3-ил]карбамата вместо трет-бутил-((1S,2S,4R)-рел-7-азабицикло[2.2.1]гептан-2-ил)карбамата-изомер-X с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 292: Синтез дигидрохлорида 5'-(1-((1S,2S,4R)-рел-2-амино-7-азабицикло[2.2.1]гептан-7-ил)этил)-2'',3-дифтор-4''-метил-[1,1':2',1''-терфенил]-4-карбонитрила-изомер-X
Стадия 1
1-(3-Бром-4-хлорфенил)этанон (2,00 г) растворяют в 1,4-диоксане (14,3 мл). При комнатной температуре туда добавляют (4-циано-3-фторфенил)бороновую кислоту (1,55 г), PdCl2(dppf)CH2Cl2 (188 мг) и 2M водный раствор карбоната натрия (10,7 мл), затем перемешивают при 90°C в течение ночи. Туда добавляют этилацетат, и полученную смесь последовательно промывают водой и насыщенным раствором соли. Затем органический слой сушат над безводным сульфатом натрия, растворитель отгоняют. Туда добавляют диэтиловый эфир, и осадок собирают фильтрацией с получением 4-(5-ацетил-2-хлорфенил)-2-фторбензонитрила.
Стадия 2
4-(5-Ацетил-2-хлорфенил)-2-фторбензонитрил (200 мг), полученный на стадии 1 выше, и трет-бутил-((1S,2S,4R)-рел-7-азабицикло[2.2.1]гептан-2-ил)карбамат-изомер-X (160 мг), синтезированный на стадии 2 Примера 202, суспендируют в изопропоксиде титана (1,0 мл), затем перемешивают в течение 3 дней. Туда добавляют EtOH (5 мл) и боргидрид натрия (138 мг), затем перемешивают в течение 1 часа. Смесь разбавляют ТГФ, туда добавляют Целит, фильтруют через слой Целита и растворитель отгоняют. Остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем (NH двуокись кремния, подвижная фаза: гексан/этилацетат) с получением трет-бутил-N-[(1S,3R,4R)-7-[1-[4-хлор-3-(4-циано-3-фторфенил)фенил]этил]-7-азабицикло[2.2.1]гептан-3-ил]карбамата.
Стадия 3
Трет-бутил-N-[(1S,3R,4R)-7-[1-[4-хлор-3-(4-циано-3-фторфенил)фенил]этил]-7-азабицикло[2.2.1]гептан-3-ил]карбамат (20 мг), полученный на стадии 2 выше, растворяют в ДМФ (0,50 мл). При комнатной температуре туда добавляют (2-фтор-4-метилфенил)бороновую кислоту (19,7 мг), S-Phos (1,75 мг), Pd(dba)2 (1,22 мг) и трикалийфосфат (27,1 мг), и смесь перемешивают в микроволновом реакторе при 160°C в течение 45 минут. Туда добавляют МТБЭ, и смесь промывают 3 раза водой. Затем промывают насыщенным раствором соли, сушат над безводным сульфатом натрия и затем растворитель отгоняют. Остаток очищают ВЭЖХ с обращенной фазой (подвижная фаза: вода/ацетонитрил), и целевые фракции объединяют, нейтрализуют водным раствором гидрокарбоната натрия и экстрагируют дважды хлороформом. Растворитель отгоняют, остаток растворяют в MeOH (1,0 мл) и туда добавляют 4N раствор хлористоводородной кислоты в 1,4-диоксане (1,0 мл), затем перемешивают в течение 30 минут. Растворитель удаляют из реакционной смеси с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 293: Синтез дигидрохлорида 5'-(((1S,2S,4R)-рел-2-амино-7-азабицикло[2.2.1]гептан-7-ил)метил)-2'-(1-(2-этил-2-гидроксибутил)-6,7-дифтор-1H-бензо[d][1.2.3]триазол-5-ил)-3-фтор-[1,1'-бифенил]-4-карбонитрила-изомер-X
Методику со стадий 4-11 из примера 285 проводят с применением 3-(аминометил)пентан-3-ола вместо 1-амино-2-метилпропан-2-ола с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 294: Синтез дигидрохлорида 5'-(((1S,2S,4R)-рел-2-амино-7-азабицикло[2.2.1]гептан-7-ил)метил)-2'-(7-бром-6-фтор-1-(2-гидрокси-2-метилпропил)-1H-бензо[d][1.2.3]триазол-5-ил)-3-фтор[1,1'-бифенил]-4-карбонитрила-изомер-X
Стадия 1
2-Бром-1,3-дифтор-4-нитробензол (3,00 г) растворяют в ТГФ (31,5 мл). Туда добавляют ТЭА (2,63 мл) и 1-амино-2-метилпропан-2-ол (1,40 мл), затем перемешивают при комнатной температуре в течение 1 часа. Туда добавляют этилацетат, и полученную смесь последовательно промывают водой и насыщенным раствором соли. Затем органический слой сушат над безводным сульфатом натрия, растворитель отгоняют. Остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем (подвижная фаза: гексан/этилацетат) с получением 1-(2-бром-3-фтор-6-нитроанилино)-2-метилпропан-2-ола.
Стадия 2
1-(2-Бром-3-фтор-6-нитроанилино)-2-метилпропан-2-ол (1,03 г), полученный на стадии 1 выше, растворяют в уксусной кислоте (6,7 мл). При комнатной температуре туда добавляют N-йодсукцинимид (981 мг), затем перемешивают при 50°C в течение 3 часов. Туда добавляют МТБЭ и воду, и смесь экстрагируют дважды МТБЭ. Затем объединенные органические слои сушат над безводным сульфатом натрия, растворитель отгоняют. Остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем (подвижная фаза: гексан/этилацетат) с получением 1-(2-бром-3-фтор-4-йод-6-нитроанилино)-2-метилпропан-2-ола.
Стадия 3
1-(2-Бром-3-фтор-4-йод-6-нитроанилино)-2-метилпропан-2-ол (1,33 г), полученный на стадии 2 выше, и порошок железа (1,33 г) суспендируют в ТГФ (10,2 мл) и 2N хлористоводородную кислоту (10,2 мл), затем перемешивают при 60°C в течение 1 часа. Туда добавляют МТБЭ, и смесь пропускают через Целит. Туда добавляют МТБЭ и смесь последовательно промывают водой и насыщенным раствором соли, и сушат над безводным сульфатом натрия. Затем растворитель отгоняют. Остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем (подвижная фаза: гексан/этилацетат) с получением 1-(6-амино-2-бром-3-фтор-4-йоданилино)-2-метилпропан-2-ола.
Стадия 4
1-(6-Амино-2-бром-3-фтор-4-йоданилино)-2-метилпропан-2-ол (940 мг), полученный на стадии 3 выше, растворяют в воде (1,88 мл) и ТГФ (4,7 мл). При 0°C туда добавляют 12N хлористоводородную кислоту (2,82 мл) и водный раствор нитрита натрия (водный раствор, полученный растворением 209 мг нитрита натрия в 0,63 мл воды), затем перемешивают при комнатной температуре в течение 1 часа. Туда добавляют МТБЭ, и смесь последовательно промывают водой и насыщенным раствором соли и сушат над безводным сульфатом натрия. Затем растворитель отгоняют. Остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем (подвижная фаза: гексан/этилацетат) с получением 1-(7-бром-6-фтор-5-йодбензотриазол-1-ил)-2-метилпропан-2-ола.
Стадия 5
Трет-бутил-3-(4-циано-3-фторфенил)-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензоат (3 г), полученный на стадии 3 Примера 285, и 1-(7-бром-6-фтор-5-йодбензотриазол-1-ил)-2-метилпропан-2-ол (3,228 г), полученный на стадии 5 выше, растворяют в 1,4-диоксане (23,6 мл). При комнатной температуре туда добавляют PdCl2(PPh3)2 (398 мг) и трикалийфосфат (4,513 г). После азотного замещения и дегазирования смесь перемешивают при 100°C в течение ночи. Реакционную смесь пропускают через Целит и растворитель отгоняют. Остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем (подвижная фаза: гексан/этилацетат) и растворитель отгоняют. К остатку добавляют ТГФ (45,0 мл) и 12N хлористоводородную кислоту (45,0 мл), затем перемешивают при комнатной температуре в течение 2 часов. Туда добавляют МТБЭ и воду для разделения. Затем органический слой промывают насыщенным раствором соли и сушат над безводным сульфатом натрия, растворитель отгоняют. Остаток кристаллизуют из диэтилового эфира/гексана с получением 4-[7-бром-6-фтор-1-(2-гидрокси-2-метилпропил)бензотриазол-5-ил]-3-(4-циано-3-фторфенил)бензойной кислоты.
Стадия 6
4-[7-Бром-6-фтор-1-(2-гидрокси-2-метилпропил)бензотриазол-5-ил]-3-(4-циано-3-фторфенил)бензойную кислоту (88,0 мг), полученную на стадии 5 выше, растворяют в ТГФ (0,834 мл). При комнатной температуре туда добавляют WSC HCl (64,0 мг) и ГОБт (51,1 мг), затем перемешивают при комнатной температуре в течение 20 минут. Туда добавляют боргидрид натрия (18,9 мг), затем перемешивают в течение 1 часа. Растворитель отгоняют при пониженном давлении. Остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем (подвижная фаза: гексан/этилацетат) с получением 4-[2-[7-бром-6-фтор-1-(2-гидрокси-2-метилпропил)бензотриазол-5-ил]-5-(гидроксиметил)фенил]-2-фторбензонитрила.
Стадия 7
4-[2-[7-Бром-6-фтор-1-(2-гидрокси-2-метилпропил)бензотриазол-5-ил]-5-(гидроксиметил)фенил]-2-фторбензонитрил (43,5 мг), полученный на стадии 6 выше, растворяют в ДХМ (0,847 мл). При комнатной температуре туда добавляют периодинан Десса-Мартина (39,5 мг), затем перемешивают при комнатной температуре в течение ночи. Реакционную смесь концентрируют в вакууме и остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем (подвижная фаза: гексан/этилацетат) с получением 4-[2-[7-бром-6-фтор-1-(2-гидрокси-2-метилпропил)бензотриазол-5-ил]-5-формилфенил]-2-фторбензонитрила.
Стадия 8
4-[2-[7-Бром-6-фтор-1-(2-гидрокси-2-метилпропил)бензотриазол-5-ил]-5-формилфенил]-2-фторбензонитрил (37,2 мг), полученный на стадии 7 выше, растворяют в ДХМ (1,00 мл). При комнатной температуре туда добавляют трет-бутил-((1S,2S,4R)-рел-7-азабицикло[2.2.1]гептан-2-ил)карбамат-изомер-X (30,9 мг), синтезированный на стадии 2 Примера 202, затем перемешивают при комнатной температуре в течение 30 минут. При комнатной температуре туда добавляют триацетоксиборгидрид натрия (27,8 мг), затем перемешивают при комнатной температуре в течение ночи. После добавления хлороформа нерастворимое вещество отфильтровывают и растворитель отгоняют. Остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем (NH-силикагель, подвижная фаза: гексан/этилацетат), и растворитель отгоняют. Остаток растворяют в MeOH (1,0 мл) и туда добавляют 4N раствор хлористоводородной кислоты в 1,4-диоксане (1,0 мл), затем перемешивают в течение 30 минут. Растворитель удаляют из реакционной смеси с получением указанного в заголовке соединения.
Пример 295: Синтез дигидрохлорида 5'-(((1S,2S,4R)-рел-2-амино-7-азабицикло[2.2.1]гептан-7-ил)метил)-2'-(7-бром-1-(2-этил-2-гидроксибутил)-6-фтор-1H-бензо[d][1.2.3]триазол-5-ил)-3-фтор[1,1'-бифенил]-4-карбонитрила-изомер-X
Методику со стадий 1-8 из примера 294 проводят с применением 3-(аминометил)пентан-3-ола вместо 1-амино-2-метилпропан-2-ола с получением указанного в заголовке соединения.
Далее представлен список соединений из примеров 1-295.
(I)
В следующих таблицах, если структура:
показана как:
,
то соединение является смесью соединений, имеющих структуру:
,
если структура показана как:
,
то соединение является смесью соединений, имеющих структуру:
,
и если структура показана как:
,
то соединение имеет одну из следующих структур:
.
Термин «соль» означает соль. Термин «свободная» означает свободную форму.
418,0
418,1
404,1
448,0
444,2
1,11 (6H, с).
рацемат
отн. конфиг.
изомер-В
отн. конфиг.
изомер-А
отн. конфиг.
изомер-В
отн. конфиг.
изомер-В
отн. конфиг.
изомер-В
отн. конфиг.
изомер-В
отн. конфиг.
изомер-В
отн. конфиг.
Рацемат
отн. конфиг.
Рацемат
отн. конфиг.
Рацемат
отн. конфиг.
Рацемат
отн. конфиг.
Рацемат
отн. конфиг.
Рацемат
отн. конфиг.
Рацемат
отн. конфиг.
Рацемат
отн. конфиг.
изомер-Х
отн. конфиг.
изомер-Х
отн. конфиг.
изомер-Х
отн. конфиг.
изомер-Х
отн. конфиг.
изомер-Х
отн. конфиг.
579,2
553,2
593,2
изомер-Х
отн. конфиг.
рацемат
отн. конфиг.
579,2
изомер-Х
отн. конфиг.
Рацемат
отн. конфиг.
изомер-Х
отн. конфиг.
607,2
581,3
621,2
Рацемат
отн. конфиг.
607,2
изомер-Х
отн. конфиг.
изомер-Х
отн. конфиг.
изомер-Х
отн. конфиг.
Рацемат
отн. конфиг.
изомер-Х
отн. конфиг.
изомер-Х
отн. конфиг.
Рацемат
отн. конфиг.
Рацемат
отн. конфиг.
Рацемат
отн. конфиг.
Рацемат
отн. конфиг.
Рацемат
отн. конфиг.
Рацемат
отн. конфиг.
изомер-Х
отн. конфиг.
изомер-Х
отн. конфиг.
изомер-Х
отн. конфиг.
Рацемат
отн. конфиг.
Рацемат
отн. конфиг.
Рацемат
отн. конфиг.
Рацемат
отн. конфиг.
Рацемат
отн. конфиг.
изомер-Х
отн. конфиг.
изомер-Х
отн. конфиг.
Рацемат
отн. конфиг.
Рацемат
отн. конфиг.
изомер-Х
отн. конфиг.
изомер-Х
отн. конфиг.
591,2
565,2
605,2
изомер-Х
отн. конфиг.
Рацемат
отн. конфиг.
изомер-Х
отн. конфиг.
Рацемат
отн. конфиг.
Рацемат
отн. конфиг.
Рацемат
отн. конфиг.
591,4
изомер-Х
отн. конфиг.
изомер-Х
отн. конфиг.
632,1
597,1
637,1
Рацемат
отн. конфиг.
Рацемат
отн. конфиг.
623,1
Рацемат
отн. конфиг.
изомер-Х
отн. конфиг.
изомер-Х
отн. конфиг.
изомер-Х
отн. конфиг.
изомер-Х
отн. конфиг.
576,1
изомер-Х
отн. конфиг.
изомер-Х
отн. конфиг.
592,0
изомер-Х
отн. конфиг.
изомер-Х
отн. конфиг.
изомер-Х
отн. конфиг.
изомер-Х
отн. конфиг.
изомер-Х
отн. конфиг.
609,0
изомер-Х
отн. конфиг.
637,0
Экспериментальный Пример 1: Измерение ингибирующей активности в отношении LSD1 (in vitro)
Условия для измерения ингибирующей активности соединений на активность LSD1 определяют со ссылкой на документ, доступный на вебсайте PerkinElmer (U-TRF #38) и патент GlaxoSmithKline (WO2012135113).
Для измерения ингибирующей активности сначала иллюстративное соединение серийно разводят в диметилсульфоксиде (ДМСО). Затем серийно разведенный раствор иллюстративного соединения в ДМСО (конечная концентрация ДМСО: 5%) и человеческого белка LSD1 (Abcam, ab80379) добавляют в реакционный буфер (25 мМ Tris-HCl (pH 7,5), 50 мМ KCl, 2 мМ CHAPS, 1 мМ ДТТ, 0,02% АБС). Смесь предварительно инкубируют при 25°C в течение 30 минут. Затем туда добавляют H3K4 (Me1)-биотин-меченный пептид (Anaspec #64355) (конечная концентрация: 200 нМ) и оставляют взаимодействовать в течение 60 минут. Затем туда добавляют транилципромин (конечная концентрация: 3 мМ) для остановки реакции. Затем туда добавляют раствор для обнаружения, содержащий Eu-меченное анти-H3K4 антитело (PerkinElmer, TRF0404) и Streptavidin Alexa Fluor 647 (Thermo Fisher Scientific, S21374), и смесь выдерживают при комнатной температуре в течение 1 часа. Наконец интенсивность флуоресценции при возбуждении светом с длиной волны 337 нм измеряют на PHERAstar FS (BMG Labtech) при двух длинах волны: 620 нм и 665 нм. Уровень деметилирования рассчитывают из отношения интенсивности флуоресценции при двух длинах волны, и концентрацию соединения, при которой деметилирование ингибируется на 50%, определяют как IC50 (нМ). В таблице ниже представлены результаты.
Результаты тестирования показывают, что соединение бифенила, представленное формулой (I), обладает ингибирующей активностью в отношении LSD1.
Экспериментальный Пример 2: тест на ингибирование роста клеток
В следующих условиях проводят тестирование ингибирования роста клеток in vitro в отношении клеток HEL (колония клеток острого миелоцитного лейкоза человека), клеток NCI-H1417 (колонии клеток мелкоклеточного рака легких человека) и клеток NCI-H146 (колонии клеток мелкоклеточного рака легких человека).
Клетки HEL (JCRB, Cat#: JCRB0062), клетки NCI-H1417 (ATCC, Cat#: CRL-5869) или клетки NCI-H146 (ATCC, Cat#: HTB-173), культивируемые в 10% ФБС-содержащей RPMI1640 среде (Thermo Fisher Scientific, Cat#: A10491-01) засевают в 96-луночный плоскодонный микропланшет (Thermo Fisher Scientific, Cat#: 165305) так, что каждая лунка содержит 1500 клеток HEL (100 мкл), 5000 клеток NCI-H1417 (100 мкл) или клеток 1200 NCI-H146 (100 мкл). Иллюстративное соединение серийно разводят в диметилсульфоксиде (ДМСО) до концентрации, которая в 500 раз выше конечной концентрации. Серийно разведенное иллюстративное соединение или чистый диметилсульфоксид добавляют в 10% ФБС-содержащую RPMI1640 среду до концентрации, которая в 2 раза выше конечной концентрации, и полученный продукт добавляют в количестве 100 мкл в каждую лунку культурального планшета, содержащего клетки HEL, клетки NCI-H1417 или клетки NCI-H146 так, что конечные концентрации иллюстративного соединения составляют 3000, 1000, 300, 100, 30, 10, 3, 1, 0,3, 0,1, 0,03 и 0,01 нМ. Конечную концентрацию диметилсульфоксида доводят до 0,2%. Клетки с иллюстративным соединением или с чистым диметилсульфоксидом культивируют при 37°C в инкубаторе с 5% двуокисью углерода в течение 5 дней (клетки HEL) или 10 дней (клетки NCI-H1417 и клетки NCI-H146). После культивирования планшет выдерживают при комнатной температуре в течение 30 минут и 100 мкл надосадочной жидкости берут из каждой лунки, оставляя 100 мкл раствора клеточной культуры. В каждую лунку, содержащую оставшиеся 100 мкл раствора клеточной культуры, добавляют такое же количество CellTiter-Glo 2,0 Assay (Promega, Cat#: G9242). Микропланшет встряхивают на планшетном миксере в течение 1 минуты и затем выдерживают в темном месте в течение 10 минут. Затем интенсивность люминесценции жизнеспособных клеток измеряют с применением микропланшетного ридера (PerkinElmer, EnSpire). Скорость роста клеток определяют согласно следующему уравнению, и определяют концентрацию, при которой скорость роста клеток составляет 50%, т.е. концентрацию каждого тестируемого соединения, при которой рост клеток ингибируется на 50% (IC50 (нМ)).
Скорость роста клеток (%)=T/C×100
T: интенсивность люминесценции в лунке, в которую добавлено тестируемое соединение (импульсы в секунду)
C: интенсивность люминесценции в лунке, в которую добавлен чистый диметилсульфоксид (импульсы в секунду)
В таблицах ниже показаны результаты.
Тест ингибирования роста клеток: клетки HEL
Тест ингибирования роста клеток: клетки HEL
Тест ингибирования роста клеток: клетки NCI-H1417
Тест ингибирования роста клеток: клетки NCI-H1417
Тест ингибирования роста клеток: клетки NCI-H146
Результаты этого теста показывают, что соединение бифенила, представленное формулой (I), демонстрирует ингибирующее действие на рост клеток in vitro, и что это соединение не только ингибирует активность рекомбинантного человеческого белка LSD1, то также ингибирует рост раковых клеток, что позволяет предположить, что это соединение будет полезным в качестве противоопухолевого агента.
Экспериментальный Пример 3: тестирование противоопухолевого действия с применением клеток NCI-H146 (колонии клеток мелкоклеточного рака легких человека)
Клетки NCI-H146, 3,5×106 клеток (100 мкл), подкожно имплантируют мышам BALB/cAJcl-nu/nu, и мышей с объемом опухоли в интервале от 100 до 300 мм3 делят на группы так, чтобы группы имели однородный средний объем опухоли. 5 мышам в каждой группе перорально вводят носитель (0,5% гидроксиметилпропилцеллюлозу, содержащую 0,1 N HCL) или каждое соединение из Примера. Введение проводят один раз в сутки в течение 21 дня подряд (соединение из Примера 41) или 28 дней подряд (соединения из Примеров 37, 161, 166, 175, 176 и 177). Длинные оси и короткие оси каждой опухоли измеряют два раза в неделю электрическим толщинометром для расчета объема опухоли (ОО). Согласно полученным объемам опухолей рассчитывают относительный объем опухоли (ООО) и относительное изменение объема опухоли (T/C (%)). ОО, ООО и T/C (%) рассчитывают с применением следующих уравнений.
Объем опухоли ОО (мм3)=(длинные оси, мм)×(короткие оси, мм)×(короткие оси, м)/2
Относительный объем опухоли ООО=ОО/(ОО на день деления на группы)
T/C (%)=(средний ООО в группе введения)/(средний ООО в группе введения носителя)×100.
В таблице ниже показаны результаты.
Последним днем измерения является день, следующий за днем последнего введения. Соединение бифенила, представленное формулой (I), показывает противоопухолевое действие в представленной выше модели оценки эффективности, и процент снижения массы тела в последний день измерений составляет менее 20% массы тела до введения (день 0).
Результаты показывают, что соединение бифенила, представленное формулой (I), или его соль обладают превосходным LSD1 ингибирующим действием, демонстрируют ингибирующее действие на рост раковых клеток, имеют низкую токсичность и вводятся перорально. Поэтому соединение бифенила, представленное формулой (I), или его соль полезно в качестве агента для профилактики и/или лечения рака.
Экспериментальный пример 4: Отношение между чувствительностью к ингибитору LSD1 и уровнем экспрессии INSM1
4-1. Тестирование ингибирования роста клеток с применением цисплатина или паклитаксела
Тестирование ингибирования роста клеток проводят следующим образом с применением 17 колоний клеток, полученных из человеческого МКРЛ: DMS114, DMS79, NCI-H1417, NCI-H146, NCI-H1694, NCI-H196, NCI-H2081, NCI-H209, NCI-H211, NCI-H446, NCI-H510A, NCI-H524, NCI-H526, SW1271 (все из American Type Culture Collection), COR-L51 (European Collection of Authenticated Cell Cultures), Lu-135 (Japanese Collection of Research Bioresources) и SBC-5 (Health Science Research Resources Bank). В качестве среды применяют Waymouth's MB 752/1 (Life Technologies Corp., Cat# 11220-035) для DMS114, F-12K (Life Technologies Corp., Cat# 21127-022) для NCI-H510A, MEM (Life Technologies Corp., Cat# 10370-021) для SBC-5 и L-15 (Life Technologies Corp., Cat# 11415-064) для SW1271. Для остальных 13 колоний применяют RPMI1640 (Life Technologies Corp., Cat# A10491-01). 10% ФТС (Biological Industries, Cat# 04-111-1A) добавляют во все среды. К MEM дополнительно добавляют 2 мМ L-глутамина (Life Technologies Corp., Cat# 25030-08). Колонии клеток высевают в 96-луночный плоскодонный микропланшет в количестве 75 мкл, и лунку, содержащую 100 мкл только среды, также готовят для базовых измерений. Концентрации высевания следующие (все единицы даны в клетках/мл): 2,0×105 (NCI-H1417, NCI-H510A, NCI-H209, DMS114, COR-L51 и DMS79), 1,5×105 (NCI-H146, NCI-H1694, Lu-135, NCI-H524 и SW1271), 1,0×105 (NCI-H2081, NCI-H196, NCI-H211, NCI-H526 и NCI-H446) и 3,5×104 (SBC-5). Культивирование проводят при 37°C в содержащем 5% двуокись углерода инкубаторе в течение 1 дня. Цисплатин (Bristol-Myers Squibb) или паклитаксел (Wako), серийно разведенные в диметилсульфоксиде (ДМСО), или чистый диметилсульфоксид добавляют в среду в каждую колонию клеток. Полученный продукт добавляют в количестве 25 мкл в каждую лунку указанного выше 96-луночного плоскодонного микропланшета так, что конечные концентрации лекарственного средства составляют 3000, 1000, 333, 111, 37,0, 12,3, 4,12 и 1,37 нМ. Затем культивирование далее проводят при 37°C в содержащем 5% двуокись углерода инкубаторе в течение 3 дней. После культивирования микропланшет выдерживают при комнатной температуре в течение 30 минут и добавляют CellTiter-Glo 2.0 Assay (Promega) в количестве 100 мкл в каждую лунку. Затем микропланшет выдерживают при комнатной температуре в течение 10 минут, интенсивность люминесценции жизнеспособных клеток в каждой лунке измеряют с помощью микропланшетного ридера (PerkinElmer, EnSpire). В 17 колониях клеток человеческого МКРЛ скорость роста клеток определяют в соответствии со следующим уравнением; и определяют концентрацию, при которой скорость роста клеток составляла 65%, т.е. концентрацию каждого лекарственного средства, при которой рост клеток ингибировался на 35% (IC35 (нМ)).
Скорость роста клеток (%) = ((T-BG)/(C-BG))×100
C: Интенсивность люминесценции в лунке, в которую добавлен только диметилсульфоксид (импульсы в секунду)
T: Интенсивность люминесценции в лунке, в которую добавлено тестируемое соединение (импульсы в секунду)
BG: Интенсивность люминесценции в лунке для базовых измерений (импульсы в секунду)
4-2. Тестирование ингибирования роста клеток с применение ингибитора LSD1
Применяют те же колонии клеток и среду, как и в разделе 4-1. Колонии клеток высевают в количестве 150 мкл в 96-луночный плоскодонный микропланшет, и лунку, содержащую 200 мкл только среды, также готовят для базовых измерений. Концентрации высевания следующие (все единицы даны в клетках/мл): 1,5×105 (NCI-H209), 5,0×104 (NCI-H510A), 3,5×104 (NCI-H1417 и DMS114), 3,0×104 (COR-L51 и DMS79), 2,0×104 (NCI-H1694, NCI-H524 и SW1271), 1,5×104 (Lu-135), 1,0×104 (NCI-H146, NCI-H2081, NCI-H211, NCI-H526 и NCI-H446), 7,0×103 (NCI-H196) и 4,0×102 (SBC-5). Культивирование проводят при 37°C в содержащем 5% двуокись углерода инкубаторе в течение 1 дня. Ингибитор LSD1 (соединения из примеров 37, 161, 166, 176, 177 или 273; GSK2879552, ORY-1001 или GSK690), серийно разведенные в диметилсульфоксиде (ДМСО), добавляют в среду в каждую колонию клеток. Полученный продукт добавляют в количестве 50 мкл в каждую лунку 96-луночного плоскодонного микропланшета так, что конечные концентрации лекарственного средства составляют 1000, 333, 111, 37,0, 12,3, 4,12, 1,37 и 0,457 нМ (соединение из примера 37); 100, 33,3, 11,1, 3,70, 1,23, 0,412, 0,137 и 0,0457 нМ (соединения из примеров 161 и 166 и ORY-1001); 30,0, 10,0, 3,33, 1,11, 0,370, 0,123, 0,0412 и 0,0137 нМ (соединения из примеров 176, 177 и 273); 3000, 1000, 333, 111, 37,0, 12,3, 4,12 и 1,37 нМ (GSK2879552); или 10000, 3330, 1110, 370, 123, 41,2, 13,7, 4,57 нМ (GSK690). Затем культивирование далее проводят при 37°C в содержащем 5% двуокись углерода инкубаторе в течение 10 дней. После культивирования микропланшет выдерживают при комнатной температуре в течение 30 минут и затем 100 мкл надосадочной жидкости удаляют из каждой лунки, оставляя 100 мкл раствора клеточной культуры. К 100 мкл оставшегося раствора культуры клеток или к среде, не содержащей клетки, добавляют то же количество CellTiter-Glo 2.0 Assay (Promega). Затем микропланшет выдерживают при комнатной температуре в течение 10 минут, интенсивность люминесценции жизнеспособных клеток в каждой лунке измеряют с помощью микропланшетного ридера (PerkinElmer, EnSpire). IC35 каждого лекарственного средства получают, как описано выше.
4-3. Анализ экспрессии белка в колониях клеток МКРЛ
С применением Nunc Cell Culture Treated EasYFlasks, T75, фильтра (Thermo Fisher Scientific, Cat# 156499), 17 колоний клеток МКРЛ, которые прошли тестирование ингибирования роста клеток, культивируют в той же среде, которая применялась для тестирования ингибирования роста клеток.
Колонии клеток во время культивирования дважды промывают холодным ФРФБ (Nacalai, 14249-95), и туда добавляют солюбилизированный буфер (M-PER (Thermo Fisher Scientific, Cat# 78501), содержащий cOmplete Mini (Sigma, Cat# 11836153001)) для солюбилизации. Солюбилизированные растворы клеток центрифугируют при 4°C и 14000 об./мин в течение 10 минут для сбора надосадочных жидкостей, с получением экстрактов белков. Полученные экстракты белков измеряют на концентрацию белка с применением BCA Protein Assay Reagent (Thermo Fisher Scientific, Cat# 23225) в соответствии с инструкцией. Буфер для образца (Nacalai, Cat# 09499-14) добавляют к экстрактам белков, и экстракты кипятят при 95°C в течение 5 минут, тем самым денатурируя их. 5 мкг каждого восстановленного экстракта белка применяют с Criterion TGX Precast Gels (Bio-Rad, Cat# 567-1085) на дорожку, и проводят SDS-PAGE.
TBST (Santa Cruz, Cat# sc-24953), 10-кратно разведенный Milli-Q, применяют в качестве промывочной жидкости, и промывочную жидкость, содержащую 5% Blocking One (Nacalai, Cat# 03953-95), применяют в качестве разбавителя антитела.
После завершения SDS-PAGE, белки переносят на соответствующие ПВДФ мембраны (Trans-Blot Turbo Midi PVDF Transfer Pack, Bio-Rad, Cat# 170-4157) с применением аппарата для блоттинга (Trans-Blot Turbo Transfer System, Bio-Rad). Перенесенные мембраны инкубируют при комнатной температуре в течение 30 минут для проведения блокировки Blocking One-P (Nacalai, Cat# 05999-84). Затем мембраны подвергают реакции при 4°C в течение ночи с анти-человеческим кроличьим антителом Актин (Cell Signaling Technology, Cat# 4967L), которое разводят 1000-кратно разбавителем для антитела, с анти-человеческим INSM1 мышиным антителом (Santa Cruz, Cat# sc-271408), которое разводят 500-кратно разбавителем для антитела, анти-человеческим LSD1 кроличьим антителом (Cell Signaling Technology, Cat# 2184S), которое разводят 1000-кратно разбавителем для антитела, и анти-человеческим Gfi-1 козьим антителом (Santa Cruz, Cat# sc-8558), которое разводят 500-кратно разбавителем для антитела. Мембраны ПВДФ промывают один раз промывочной жидкостью и затем подвергают реакции при комнатной температуре в течение 1 часа с вторичными антителами (анти-кроличьим антителом (Cell Signaling Technology, Cat# 7074-P2), анти-мышиным антителом (Cell Signaling Technology, Cat# 7076S) и анти-козьим антителом (Santa Cruz, Cat# sc-2768), которые мечены пероксидазой хрена (ПОХ), и которые разводят 5000-кратно разбавителем для антитела). Мембраны ПВДФ промывают три раза промывочной жидкостью, и затем хемилюминесценцию определяют с SuperSignal West Dura Extended Duration Substrate (Thermo Fisher Scientific, Cat# 34076) с применением Amersham Imager 600 (GE Healthcare). На фиг. 1 показаны полосы полученных белков.
4-4. Отношение между ингибирующими эффектами LSD1 и экспрессией INSN1
В качестве показателя для подтверждения уровня экспрессии INSM1 и чувствительности клеток к ингибиторам LSD1, определяют следующее. Относительно каждого соединения, если IC35 колонии клеток с наименьшей IC35 определена как IC35min соединения, колонию клеток, IC35 которой составляет 30-кратную величину от IC35min, т.е. IC35min × 30≥IC35, определяют как штамм, чувствительный к соединению, и колонию клеток, имеющую IC35min × 30 < IC35, определяют как штамм, который не чувствителен к соединению.
В анализе уровня экспрессии белка, полосу каждого белка, полученную в конце с применением Amersham Imager 600, количественно оценивают с применением ImageJ (National Institutes of Health). Значение, полученное делением уровня экспрессии каждого белка (INSM1, LSD1 или Gfi-1) на уровень экспрессии Актина, называют стандартизированным уровнем экспрессии белка. Относительно каждого соединения проводят параметрический t-критерий Стьюдента с применением стандартизированных уровней экспрессии белка, полученных при делении штаммов на две группы, т.е. чувствительные штаммы и нечувствительные штаммы (н.з.: нет значимой разницы).
Как показано на фиг. 2a, если IC35 применяют как показатель согласно указанного выше способа, статистически значимая разница в уровне экспрессии INSM1 подтверждена между штаммами, которые чувствительны к ингибиторам LSD1, и штаммами, которые не чувствительны к ингибиторам LSD1. Наоборот, как показано на фиг. 2b и 2c, статистически значимая разница в уровне экспрессии INSM1 не найдена между колониями клеток, которые чувствительны к цисплатину и паклитакселу, и колониями клеток, которые не чувствительны к цисплатину и паклитакселу, где цисплатин или паклитаксел являются стандартизированными методами лечения МКРЛ.
Далее, как показано на фиг. 2d и фиг. 2e, статистически значимая разница в уровне экспрессии LSD1 и уровне экспрессии Gfi-1, который, как известно, имеют домен SNAG и связывается с LSD1 как и INSM1, не была найдена среди штаммов, которые чувствительны и ингибиторам LSD1 и штаммов, которые не чувствительны и ингибиторам LSD1.
4-5. Правильность прогнозирования чувствительности к ингибитору LSD1 с применением уровня экспрессии INSM1 в качестве показателя
Подтверждают точку завершения сбора данных, рассчитанную с применением кривой ROC, и правильность определения ингибирующих эффектов LSD1 по уровню экспрессии INSM1.
Точку завершения сбора данных с применением кривой ROC рассчитывают с применением JMP (SAS Institute Inc.).
Как показано в следующей таблице, точность прогнозирования эффектов лечения ингибитором LSD1 с применением уровня экспрессии INSM1 как показателя была следующей: чувствительность=100% (7/7), специфичность=80% (8/10) и точность=88% (15/17).
Экспериментальный пример 5: Ингибирующие эффекты на рост клеток ингибитора LSD1 на чувствительных/нечувствительных штаммах
С применением соединений из примеров 41, 214 и 285, подтверждают чувствительность к клеткам NCI-H1417 и клеткам DMS 79, которые были соответственно определены как чувствительные и нечувствительные к ингибиторам LSD1 в экспериментальном примере 4. Чувствительность подтверждают на основе тестирования ингибирования роста клеток.
В качестве среды применяют 10% ФТС-содержащую RPMI1640. Колонии клеток высевают в 96-луночный плоскодонный микропланшет в количестве 120 мкл, и также готовят лунку, содержащую 160 мкл только среды для базовых измерений. Соединения из примера 41, 214 или 285, серийно разведенные в диметилсульфоксиде, добавляют в среду. Полученный продукт добавляют в количестве 40 мкл в каждую лунку указанного выше 96-луночного плоскодонного микропланшета так, что конечные концентрации лекарственного средства составляют 200, 66,7, 22,2, 7,41, 2,47, 0,823, 0,274 и 0,0914 нМ (соединение из примера 41); 20, 6,67, 2,22, 0,741, 0,247, 0,0823, 0,0274 и 0,00914 нМ (соединении из примера 214); или 5,00, 1,67, 0,556, 0,185, 0,0617, 0,0206, 0,00686 и 0,00229 нМ (соединение из примера 285). Затем культивирование далее проводят при 37°C в содержащем 5% двуокись углерода инкубаторе в течение 10 дней. После культивирования микропланшет выдерживают при комнатной температуре в течение 30 минут. К 160 мкл раствора культуры клеток или к среде, не содержащей клетки, добавляют 140 мкл CellTiter-Glo 2.0 Assay (Promega). Затем микропланшет выдерживают при комнатной температуре в течение 10 минут, интенсивность люминесценции жизнеспособных клеток в каждой лунке измеряют с помощью микропланшетного ридера (PerkinElmer, EnSpire). IC35 каждого лекарственного средства получают, как описано выше.
Как показано на фиг. 3 и 4, соединения из примеров 41, 214 и 285, которые являются ингибиторами LSD1, показали эффекты ингибирования роста на клетках NCI-H1417, которые чувствительны к ингибиторам LSD1; однако, они не показали эффекты ингибирования роста на клетках DMS79, которые не чувствительны к ингибиторам LSD1.
Экспериментальный пример 6: Анализ экспрессии INSM1 согласно иммуногистохимическому окрашиванию
Четыре типа колоний клеток МКРЛ (Lu-135, NCI-H146, DMS79 и NCI-H196) культивируют в той же среде, которую применяют при тестировании ингибирования роста клеток. Культивированные клетки фиксируют параформальдегидом, заливают в парафин и режут с получением парафиновых срезов. Срезы клеток приклеивают к стеклам.
Стекла погружают в ксилол на 5 минут 3 раза, затем погружают в 99,5% этанол на 3 минуты 3 раза, и наконец промывают проточной водой, проводят депарафинизацию. Блокирующий пероксидазу раствор (Dako) добавляют в срезу клеток, затем инкубируют при комнатной температуре в течение 10 минут и промывают TBST (Dako) 3 раза. С применением Instant Antigen Retrieval Solution H (LSI Medience) проводят активацию антигена в камере под давлением (Pascal, Dako).
После промывания проточной водой и TBST (Dako), срезы клеток покрывают Protein Block Serum-Free (Dako), затем инкубируют при комнатной температуре в течение 10 минут. INSM1 (A-8) (мышиный mAb) (Santa Cruz), разведенный 100-кратно разбавителем для антитела с Background Reducing Components (Dako), добавляют к срезам клеток, и реакцию проводят при комнатной температуре в течение 1 часа. Затем срезы клеток промывают TBST (Dako) 3 раза, туда добавляют EnVision+System-HRP Labelled Polymer Anti-Mouse (Dako), и реакцию проводят при комнатной температуре в течение 30 минут. После промывания TBST (Dako) 3 раза, проводят проявление цвета DAB с применением Liquid DAB+ Substrate Chromogen System (Dako). После промывания очищенной водой, срезы клеток погружают в Tacha's Automated Hematoxylin (Biocare Medical) для проведения сравнения окрашивания. После промывания очищенной водой срезы клеток погружают в 99,5% этанол на 5 минут 3 раза и затем в ксилол на 5 минут 3 раза для проведения дегидратации; и затем запечатывают с помощью Entellan new (Merck).
Изображения полученных окрашенных образцов делают и анализируют с применением Scanscope AT Turbo (Aperio) и Aperio ePathology Solutions (Aperio). Ссылаясь на контрольный срез HercepTest II (Dako), паталогоанатом классифицирует интенсивность окрашивания на четыре стадии (нет окрашивания: 0, слабая интенсивность окрашивания: 1+, средняя интенсивность окрашивания: 2+, сильная интенсивность окрашивания: 3+).
На фиг. 5 и в таблице 47, соответственно, показаны окрашенные изображения клеток, и доля клеток с сильной интенсивностью окрашивания.
В клетках Lu-135 и клетках NCI-H146, которые показали чувствительность к ингибиторам LSD1, доля клеток с сильной интенсивностью окрашивания была высокой; хотя в клетках DMS-79 и клетках NCI-H196, которые показали чувствительность к ингибиторам LSD1, доля клеток с сильной интенсивностью окрашивания была низкой.
Представленные выше результаты показывают, что воздействия ингибитора LSD1 на раковые клетки являются прогнозируемыми на основе уровня экспрессии INSM1.
| название | год | авторы | номер документа |
|---|---|---|---|
| НОВОЕ СОЕДИНЕНИЕ БИФЕНИЛА ИЛИ ЕГО СОЛЬ | 2018 |
|
RU2765152C2 |
| УСИЛИТЕЛЬ ПРОТИВООПУХОЛЕВОГО ЭФФЕКТА С ПРИМЕНЕНИЕМ НОВОГО СОЕДИНЕНИЯ БИФЕНИЛА | 2018 |
|
RU2765153C2 |
| НОВОЕ СОЕДИНЕНИЕ БИФЕНИЛА ИЛИ ЕГО СОЛЬ | 2016 |
|
RU2726622C2 |
| ХИМИЧЕСКИЕ СОЕДИНЕНИЯ 637: ПИРИДОПИРИМИДИНДИОНЫ В КАЧЕСТВЕ ИНГИБИТОРОВ PDE4 | 2008 |
|
RU2479584C2 |
| ЗАМЕЩЕННЫЕ ГЕТЕРОЦИКЛИЧЕСКИЕ СУЛЬФОНАМИДНЫЕ СОЕДИНЕНИЯ, ПОЛЕЗНЫЕ В КАЧЕСТВЕ МОДУЛЯТОРОВ TRPA 1 | 2014 |
|
RU2675792C2 |
| ИНГИБИТОРЫ ФУРИНА | 2019 |
|
RU2799824C2 |
| КЛАСС БИФУНКЦИОНАЛЬНЫХ ХИМЕРНЫХ ГЕТЕРОЦИКЛИЧЕСКИХ СОЕДИНЕНИЙ ДЛЯ НАПРАВЛЕННОГО РАЗРУШЕНИЯ АНДРОГЕННЫХ РЕЦЕПТОРОВ И ИХ ПРИМЕНЕНИЕ | 2020 |
|
RU2825000C2 |
| МОДУЛЯТОРЫ ПРОТЕОЛИЗА И СООТВЕТСТВУЮЩИЕ СПОСОБЫ ПРИМЕНЕНИЯ | 2019 |
|
RU2805511C2 |
| НОВОЕ ПРОИЗВОДНОЕ НИКОТИНАМИДА ИЛИ ЕГО СОЛЬ | 2011 |
|
RU2576623C2 |
| ИНГИБИТОРЫ ВЗАИМОДЕЙСТВИЯ МЕНИН-MLL | 2017 |
|
RU2799820C2 |
Предложенная группа изобретений относится к медицине, а именно к фармацевтике. Предложены способ и набор для прогнозирования терапевтического эффекта химиотерапии с применением противоопухолевого агента, содержащего ингибитор LSD1, у пациента с раком, на основе уровня экспрессии INSM1 в образце, выделенном у пациента с раком. Предложен способ лечения рака, включающий измерение экспрессии INSM1 в образце пациента с раком, прогнозирование того, что химиотерапия с применением противоопухолевого агента, содержащего ингибитор LSD1, с высокой вероятностью обеспечивает достаточный эффект у пациента с раком, если уровень экспрессии INSM1 равен или выше, чем заданная точка завершения сбора данных и проведение химиотерапии у пациента с раком, у которого было спрогнозировано с высокой вероятностью получение достаточного терапевтического эффекта. Предложено применение ингибитора LSD1 для производства противоопухолевого агента, содержащего ингибитор LSD1, у пациента с раком, у которого было спрогнозировано с высокой вероятностью получение терапевтических эффектов. Предложенная группа изобретений обеспечивает эффективное прогнозирование терапевтического эффекта ингибитора LSD1 за счет определения экспрессии INSM1. 4 н.п. ф-лы, 5 ил., 47 табл., 301 пр.
1. Способ прогнозирования терапевтического эффекта химиотерапии с применением противоопухолевого агента, содержащего ингибитор LSD1, у пациента с раком, на основе уровня экспрессии INSM1 в образце, выделенном у пациента с раком,
где способ включает стадии (1) и (2) ниже:
(1) стадия измерения экспрессии INSM1 в образце, содержащем опухолевые клетки, выделенные у пациента с раком; и
(2) стадия прогнозирования того, что химиотерапия с применением противоопухолевого агента, содержащего ингибитор LSD1, с высокой вероятностью обеспечивает достаточный терапевтический эффект у пациента с раком, если уровень экспрессии INSM1, полученный на стадии (1), равен или выше, чем заданная точка завершения сбора данных,
где заданная точка завершения сбора данных представляет собой среднее значение и медианное значение уровня экспрессии INSM1 у пациентов с раком;
точку завершения сбора данных для разделения группы с высокой экспрессией INSM1 и группы с низкой экспрессией INSM1 среди пациентов с раком, которая является значением, при котором значение P становится меньше стандартного значения в логранговом критерии относительно терапевтических эффектов химиотерапии с применением противоопухолевого агента, содержащего ингибитор LSD1, в группе с высокой экспрессией INSM1 и группе с низкой экспрессией INSM1;
точку завершения сбора данных для разделения группы с высокой экспрессией INSM1 и группы с низкой экспрессией INSM1 среди пациентов с раком, которая является значением, при котором значение P составляет не более 0,1 в логранговом критерии относительно терапевтических эффектов химиотерапии с применением противоопухолевого агента, содержащего ингибитор LSD1, в группе с высокой экспрессией INSM1 и группе с низкой экспрессией INSM1;
точку завершения сбора данных для разделения группы с высокой экспрессией INSM1 и группы с низкой экспрессией INSM1 среди пациентов с раком, которая является значением, определенным из соотношения между уровнем экспрессии INSM1 у пациента, который проходил химиотерапию с применением противоопухолевого агента, содержащего ингибитор LSD1, и присутствием или отсутствием терапевтических эффектов химиотерапии с применением ингибитора LSD1 до определенной степени или более так, что сумма чувствительности и специфичности становится максимальной на основе анализа рабочих характеристик приемника (ROC);
точку завершения сбора данных для разделения группы с высокой экспрессией INSM1 и группы с низкой экспрессией INSM1 среди пациентов с раком, которая является значением, при котором значение P становится минимальным и меньше стандартного значения в тесте хи–квадрат относительно терапевтических эффектов химиотерапии с применением противоопухолевого агента, содержащего ингибитор LSD1, в группе с высокой экспрессией INSM1 и группе с низкой экспрессией INSM1; или
точку завершения сбора данных для разделения группы с высокой экспрессией INSM1 и группы с низкой экспрессией INSM1 среди пациентов с раком, которая является значением, при котором значение P составляет не более 0,1 в тесте хи–квадрат относительно терапевтических эффектов химиотерапии с применением противоопухолевого агента, содержащего ингибитор LSD1, в группе с высокой экспрессией INSM1 и группе с низкой экспрессией INSM1, и
где ингибитором LSD1 является соединение согласно любому из следующих соединений (1)–(6):
(1) 4–[5–[(3S)–3–аминопирролидин–1–карбонил]–2–[2–фтор–4–(2–гидрокси–2–метилпропил)фенил]фенил]–2–фторбензонитрил;
(2) 4–[5–[(3–эндо)–3–амино–8–азабицикло[3.2.1]октан–8–карбонил]–2–[2–фтор–4–(2–гидрокси–2–метилпропил)фенил]фенил]–2–фторбензонитрил;
(3) 5’–((3–эндо)–3–амино–8–азабицикло[3.2.1]октан–8–карбонил)–2’–(6,7–дифтор–1–(2–гидрокси–2–метилпропил)–1H–бензо[d][1,2,3]триазол–5–ил)–3–фтор–[1,1’–бифенил]–4–карбонитрил;
(4) 5’–((1S,2S,4R)–рел–2–амино–7–азабицикло[2.2.1]гептан–7–карбонил)–2’’,3–дифтор–4’’–(2–гидрокси–2–метилпропил)–[1,1’:2’,1’’–терфенил]–4–карбонитрил–изомер–B;
(5) 5’–((1S,2S,4R)–рел–2–амино–7–азабицикло[2.2.1]гептан–7–карбонил)–3–фтор–2’–(6–фтор–1–(2–гидрокси–2–метилпропил)–1H–индазол–5–ил)–[1,1’–бифенил]–4–карбонитрил–изомер–B;
(6) 5’–((1S,2S,4R)–рел–2–амино–7–азабицикло[2.2.1]гептан–7–карбонил)–2’–(6,7–дифтор–1–(2–гидрокси–2–метилпропил)–1H–бензо[d][1,2,3]триазол–5–ил)–3–фтор–[1,1’–бифенил]–4–карбонитрил–изомер–B;
или его соль.
2. Набор, содержащий реагент для измерения уровня экспрессии INSM1 для прогнозирования терапевтического эффекта химиотерапии с применением противоопухолевого агента, содержащего ингибитор LSD1, у пациента с раком, на основе уровня экспрессии INSM1 в образце, выделенном у пациента с раком,
где набор применяют для прогнозирования терапевтического эффекта химиотерапии с применением противоопухолевого агента, содержащего ингибитор LSD1, у пациента с раком, посредством способа прогнозирования терапевтического эффекта химиотерапии с применением противоопухолевого агента, содержащего ингибитор LSD1, у пациента с раком, включающего следующие стадии (1) и (2):
(1) стадия измерения экспрессии INSM1 в образце, содержащем опухолевые клетки, выделенные у пациента с раком; и
(2) стадия прогнозирования того, что химиотерапия с применением противоопухолевого агента, содержащего ингибитор LSD1, с высокой вероятностью обеспечивает достаточный эффект у пациента с раком, если уровень экспрессии INSM1, полученный на стадии (1), равен или выше, чем заданная точка завершения сбора данных,
где заданная точка завершения сбора данных представляет собой среднее значение и медианное значение уровня экспрессии INSM1 у пациентов с раком;
точку завершения сбора данных для разделения группы с высокой экспрессией INSM1 и группы с низкой экспрессией INSM1 среди пациентов с раком, которая является значением, при котором значение P становится меньше стандартного значения в логранговом критерии относительно терапевтических эффектов химиотерапии с применением противоопухолевого агента, содержащего ингибитор LSD1, в группе с высокой экспрессией INSM1 и группе с низкой экспрессией INSM1;
точку завершения сбора данных для разделения группы с высокой экспрессией INSM1 и группы с низкой экспрессией INSM1 среди пациентов с раком, которая является значением, при котором значение P составляет не более 0,1 в логранговом критерии относительно терапевтических эффектов химиотерапии с применением противоопухолевого агента, содержащего ингибитор LSD1, в группе с высокой экспрессией INSM1 и группе с низкой экспрессией INSM1;
точку завершения сбора данных для разделения группы с высокой экспрессией INSM1 и группы с низкой экспрессией INSM1 среди пациентов с раком, которая является значением, определенным из соотношения между уровнем экспрессии INSM1 у пациента, который проходил химиотерапию с применением противоопухолевого агента, содержащего ингибитор LSD1, и присутствием или отсутствием терапевтических эффектов химиотерапии с применением ингибитора LSD1 до определенной степени или более так, что сумма чувствительности и специфичности становится максимальной на основе анализа рабочих характеристик приемника (ROC);
точку завершения сбора данных для разделения группы с высокой экспрессией INSM1 и группы с низкой экспрессией INSM1 среди пациентов с раком, которая является значением, при котором значение P становится минимальным и меньше стандартного значения в тесте хи–квадрат относительно терапевтических эффектов химиотерапии с применением противоопухолевого агента, содержащего ингибитор LSD1, в группе с высокой экспрессией INSM1 и группе с низкой экспрессией INSM1; или
точку завершения сбора данных для разделения группы с высокой экспрессией INSM1 и группы с низкой экспрессией INSM1 среди пациентов с раком, которая является значением, при котором значение P составляет не более 0,1 в тесте хи–квадрат относительно терапевтических эффектов химиотерапии с применением противоопухолевого агента, содержащего ингибитор LSD1, в группе с высокой экспрессией INSM1 и группе с низкой экспрессией INSM1,
где реагент для измерения уровня экспрессии INSM1 включает пробу, которая специфически гибридизируется с ДНК или мРНК INSM1, или антитело, которое специфически распознает белок INSM1,
где набор дополнительно содержит отрицательный или положительный контроль для измерения уровня экспрессии, и
где ингибитором LSD1 является соединение согласно любому из следующих соединений (1)–(6):
(1) 4–[5–[(3S)–3–аминопирролидин–1–карбонил]–2–[2–фтор–4–(2–гидрокси–2–метилпропил)фенил]фенил]–2–фторбензонитрил;
(2) 4–[5–[(3–эндо)–3–амино–8–азабицикло[3.2.1]октан–8–карбонил]–2–[2–фтор–4–(2–гидрокси–2–метилпропил)фенил]фенил]–2–фторбензонитрил;
(3) 5’–((3–эндо)–3–амино–8–азабицикло[3.2.1]октан–8–карбонил)–2’–(6,7–дифтор–1–(2–гидрокси–2–метилпропил)–1H–бензо[d][1,2,3]триазол–5–ил)–3–фтор–[1,1’–бифенил]–4–карбонитрил;
(4) 5’–((1S,2S,4R)–рел–2–амино–7–азабицикло[2.2.1]гептан–7–карбонил)–2’’,3–дифтор–4’’–(2–гидрокси–2–метилпропил)–[1,1’:2’,1’’–терфенил]–4–карбонитрил–изомер–B;
(5) 5’–((1S,2S,4R)–рел–2–амино–7–азабицикло[2.2.1]гептан–7–карбонил)–3–фтор–2’–(6–фтор–1–(2–гидрокси–2–метилпропил)–1H–индазол–5–ил)–[1,1’–бифенил]–4–карбонитрил–изомер–B;
(6) 5’–((1S,2S,4R)–рел–2–амино–7–азабицикло[2.2.1]гептан–7–карбонил)–2’–(6,7–дифтор–1–(2–гидрокси–2–метилпропил)–1H–бензо[d][1,2,3]триазол–5–ил)–3–фтор–[1,1’–бифенил]–4–карбонитрил–изомер–B;
или его соль.
3. Способ лечения рака, включающий:
следующие стадии (1)–(3):
(1) стадия измерения экспрессии INSM1 в образце, содержащем опухолевые клетки, выделенные у пациента с раком;
(2) стадия прогнозирования того, что химиотерапия с применением противоопухолевого агента, содержащего ингибитор LSD1, с высокой вероятностью обеспечивает достаточный эффект у пациента с раком, если уровень экспрессии INSM1, полученный на стадии (1), равен или выше, чем заданная точка завершения сбора данных,
где заданная точка завершения сбора данных представляет собой среднее значение и медианное значение уровня экспрессии INSM1 у пациентов с раком;
точку завершения сбора данных для разделения группы с высокой экспрессией INSM1 и группы с низкой экспрессией INSM1 среди пациентов с раком, которая является значением, при котором значение P становится меньше стандартного значения в логранговом критерии относительно терапевтических эффектов химиотерапии с применением противоопухолевого агента, содержащего ингибитор LSD1, в группе с высокой экспрессией INSM1 и группе с низкой экспрессией INSM1;
точку завершения сбора данных для разделения группы с высокой экспрессией INSM1 и группы с низкой экспрессией INSM1 среди пациентов с раком, которая является значением, при котором значение P составляет не более 0,1 в логранговом критерии относительно терапевтических эффектов химиотерапии с применением противоопухолевого агента, содержащего ингибитор LSD1, в группе с высокой экспрессией INSM1 и группе с низкой экспрессией INSM1;
точку завершения сбора данных для разделения группы с высокой экспрессией INSM1 и группы с низкой экспрессией INSM1 среди пациентов с раком, которая является значением, определенным из соотношения между уровнем экспрессии INSM1 у пациента, который проходил химиотерапию с применением противоопухолевого агента, содержащего ингибитор LSD1, и присутствием или отсутствием терапевтических эффектов химиотерапии с применением ингибитора LSD1 до определенной степени или более так, что сумма чувствительности и специфичности становится максимальной на основе анализа рабочих характеристик приемника (ROC);
точку завершения сбора данных для разделения группы с высокой экспрессией INSM1 и группы с низкой экспрессией INSM1 среди пациентов с раком, которая является значением, при котором значение P становится минимальным и меньше стандартного значения в тесте хи–квадрат относительно терапевтических эффектов химиотерапии с применением противоопухолевого агента, содержащего ингибитор LSD1, в группе с высокой экспрессией INSM1 и группе с низкой экспрессией INSM1; или
точку завершения сбора данных для разделения группы с высокой экспрессией INSM1 и группы с низкой экспрессией INSM1 среди пациентов с раком, которая является значением, при котором значение P составляет не более 0,1 в тесте хи–квадрат относительно терапевтических эффектов химиотерапии с применением противоопухолевого агента, содержащего ингибитор LSD1, в группе с высокой экспрессией INSM1 и группе с низкой экспрессией INSM1; и
(3) стадия проведения химиотерапии у пациента с раком, у которого было спрогнозировано с высокой вероятностью получение достаточного терапевтического эффекта на стадии (2),
где ингибитором LSD1 является соединение согласно любому из следующих соединений (1)–(6):
(1) 4–[5–[(3S)–3–аминопирролидин–1–карбонил]–2–[2–фтор–4–(2–гидрокси–2–метилпропил)фенил]фенил]–2–фторбензонитрил;
(2) 4–[5–[(3–эндо)–3–амино–8–азабицикло[3.2.1]октан–8–карбонил]–2–[2–фтор–4–(2–гидрокси–2–метилпропил)фенил]фенил]–2–фторбензонитрил;
(3) 5’–((3–эндо)–3–амино–8–азабицикло[3.2.1]октан–8–карбонил)–2’–(6,7–дифтор–1–(2–гидрокси–2–метилпропил)–1H–бензо[d][1,2,3]триазол–5–ил)–3–фтор–[1,1’–бифенил]–4–карбонитрил;
(4) 5’–((1S,2S,4R)–рел–2–амино–7–азабицикло[2.2.1]гептан–7–карбонил)–2’’,3–дифтор–4’’–(2–гидрокси–2–метилпропил)–[1,1’:2’,1’’–терфенил]–4–карбонитрил–изомер–B;
(5) 5’–((1S,2S,4R)–рел–2–амино–7–азабицикло[2.2.1]гептан–7–карбонил)–3–фтор–2’–(6–фтор–1–(2–гидрокси–2–метилпропил)–1H–индазол–5–ил)–[1,1’–бифенил]–4–карбонитрил–изомер–B;
(6) 5’–((1S,2S,4R)–рел–2–амино–7–азабицикло[2.2.1]гептан–7–карбонил)–2’–(6,7–дифтор–1–(2–гидрокси–2–метилпропил)–1H–бензо[d][1,2,3]триазол–5–ил)–3–фтор–[1,1’–бифенил]–4–карбонитрил–изомер–B;
или его соль.
4. Применение ингибитора LSD1 для производства противоопухолевого агента, применяемого для проведения химиотерапии с применением противоопухолевого агента, содержащего ингибитор LSD1, у пациента с раком, у которого было спрогнозировано с высокой вероятностью получение терапевтических эффектов способом прогнозирования терапевтического эффекта химиотерапии у пациента с раком, включающим следующие стадии (1) и (2):
(1) стадия измерения экспрессии INSM1 в образце, содержащем опухолевые клетки, выделенные у пациента с раком; и
(2) стадия прогнозирования того, что химиотерапия с применением противоопухолевого агента, содержащего ингибитор LSD1, с высокой вероятностью обеспечивает достаточный эффект у пациента с раком, если уровень экспрессии INSM1, полученный на стадии (1), равен или выше, чем заданная точка завершения сбора данных,
где заданная точка завершения сбора данных представляет собой среднее значение и медианное значение уровня экспрессии INSM1 у пациентов с раком;
точку завершения сбора данных для разделения группы с высокой экспрессией INSM1 и группы с низкой экспрессией INSM1 среди пациентов с раком, которая является значением, при котором значение P становится меньше стандартного значения в логранговом критерии относительно терапевтических эффектов химиотерапии с применением противоопухолевого агента, содержащего ингибитор LSD1, в группе с высокой экспрессией INSM1 и группе с низкой экспрессией INSM1;
точку завершения сбора данных для разделения группы с высокой экспрессией INSM1 и группы с низкой экспрессией INSM1 среди пациентов с раком, которая является значением, при котором значение P составляет не более 0,1 в логранговом критерии относительно терапевтических эффектов химиотерапии с применением противоопухолевого агента, содержащего ингибитор LSD1, в группе с высокой экспрессией INSM1 и группе с низкой экспрессией INSM1;
точку завершения сбора данных для разделения группы с высокой экспрессией INSM1 и группы с низкой экспрессией INSM1 среди пациентов с раком, которая является значением, определенным из соотношения между уровнем экспрессии INSM1 у пациента, который проходил химиотерапию с применением противоопухолевого агента, содержащего ингибитор LSD1, и присутствием или отсутствием терапевтических эффектов химиотерапии с применением ингибитора LSD1 до определенной степени или более так, что сумма чувствительности и специфичности становится максимальной на основе анализа рабочих характеристик приемника (ROC);
точку завершения сбора данных для разделения группы с высокой экспрессией INSM1 и группы с низкой экспрессией INSM1 среди пациентов с раком, которая является значением, при котором значение P становится минимальным и меньше стандартного значения в тесте хи–квадрат относительно терапевтических эффектов химиотерапии с применением противоопухолевого агента, содержащего ингибитор LSD1, в группе с высокой экспрессией INSM1 и группе с низкой экспрессией INSM1; или
точку завершения сбора данных для разделения группы с высокой экспрессией INSM1 и группы с низкой экспрессией INSM1 среди пациентов с раком, которая является значением, при котором значение P составляет не более 0,1 в тесте хи–квадрат относительно терапевтических эффектов химиотерапии с применением противоопухолевого агента, содержащего ингибитор LSD1, в группе с высокой экспрессией INSM1 и группе с низкой экспрессией INSM1,
где ингибитором LSD1 является соединение согласно любому из следующих соединений (1)–(6):
(1) 4–[5–[(3S)–3–аминопирролидин–1–карбонил]–2–[2–фтор–4–(2–гидрокси–2–метилпропил)фенил]фенил]–2–фторбензонитрил;
(2) 4–[5–[(3–эндо)–3–амино–8–азабицикло[3.2.1]октан–8–карбонил]–2–[2–фтор–4–(2–гидрокси–2–метилпропил)фенил]фенил]–2–фторбензонитрил;
(3) 5’–((3–эндо)–3–амино–8–азабицикло[3.2.1]октан–8–карбонил)–2’–(6,7–дифтор–1–(2–гидрокси–2–метилпропил)–1H–бензо[d][1,2,3]триазол–5–ил)–3–фтор–[1,1’–бифенил]–4–карбонитрил;
(4) 5’–((1S,2S,4R)–рел–2–амино–7–азабицикло[2.2.1]гептан–7–карбонил)–2’’,3–дифтор–4’’–(2–гидрокси–2–метилпропил)–[1,1’:2’,1’’–терфенил]–4–карбонитрил–изомер–B;
(5) 5’–((1S,2S,4R)–рел–2–амино–7–азабицикло[2.2.1]гептан–7–карбонил)–3–фтор–2’–(6–фтор–1–(2–гидрокси–2–метилпропил)–1H–индазол–5–ил)–[1,1’–бифенил]–4–карбонитрил–изомер–B;
(6) 5’–((1S,2S,4R)–рел–2–амино–7–азабицикло[2.2.1]гептан–7–карбонил)–2’–(6,7–дифтор–1–(2–гидрокси–2–метилпропил)–1H–бензо[d][1,2,3]триазол–5–ил)–3–фтор–[1,1’–бифенил]–4–карбонитрил–изомер–B;
или его соль.
| Механизм для автоматической подачи электродной проволоки при электрической дуговой сварке | 1930 |
|
SU26389A1 |
| WO 2017013061 A1, 26.01.2017 | |||
| ROSENBAUM J.N | |||
| et al | |||
| Печь для непрерывного получения сернистого натрия | 1921 |
|
SU1A1 |
| Am.J.Clin.Pathol | |||
| Устройство для закрепления лыж на раме мотоциклов и велосипедов взамен переднего колеса | 1924 |
|
SU2015A1 |
| MAIQUES-DIAZ A | |||
| et al | |||
| Печь для непрерывного получения сернистого натрия | 1921 |
|
SU1A1 |
| Epigenobics | |||
| Токарный резец | 1924 |
|
SU2016A1 |
| WANG H.W | |||
| et | |||
