ИНТЕРФЕРОНСОДЕРЖАЩАЯ КОМПОЗИЦИЯ ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ ХРОНИЧЕСКИХ ЗАБОЛЕВАНИЙ ВЕРХНИХ ДЫХАТЕЛЬНЫХ ПУТЕЙ Российский патент 2023 года по МПК A61K9/12 A61K38/21 A61K47/12 A61K47/20 A61K47/36 A61P11/00 

Изобретение относится к области медицины, в частности, к лекарственным препаратам, а именно к интерферонсодержащей композиции, которая может быть применена для лечения инфекционно-воспалительных заболеваний верхних дыхательных путей (ВДП).

Как правило, для этих целей применяются парентерально или интраназально препараты интерферона. При этих путях введения эффективность лечебного действия интерферона лимитирована временем жизни препарата в системном кровотоке и его максимальной концентрацией, определяемой после введения.

Известен препарат "Неоферон", который представляет собой лиофилизированный порошок или таблетку, содержащие смесь интерферона со вспомогательными веществами (Иммуномодулирующий препарат с противовирусной активностью "Неоферон": заявка RU96108134, Российская Федерация, заявл. 24.04.1996, опубл. 10.07.1998). Недостатком этого препарата являются исходные низкие концентрации интерферона (0,0000001-0,0000002, мас.%), которые не достаточны для лечения заболеваний, требующих одномоментного введения высоких доз интерферона.

Известен препарат интерферона (Аэрозольный фармацевтический препарат: патент RU2156136, Российская Федерация, заявка RU2000101762, заявл. 27.01.2000, опубл. 20.09.2000), используемый в виде аэрозоля и состоящий из рекомбинантного интерферона с активностью 1000-500000 МЕ/мл, антиоксиданта трилона Б и стабилизатора - биосовместимого полимера - поливинилпироллидона и/или политгиленоксида. Недостатком этого препарата является относительно невысокая эффективность, обусловленная быстрой динамикой поступления интерферона в системный кровоток и быстрой динамикой его выведения из кровотока, что в совокупности не позволяет получить максимальную концентрацию интерферона, обеспечивающего развитие лечебного эффекта при хронических инфекционно-воспалительных заболеваний ВДП. Для лечения хронических форм инфекционно-воспалительных заболеваний ВДП возможно применение этой лекарственной формы. Однако это потребует увеличения кратности и/или частоты введения интерферона, что повышает риск возникновения нежелательных реакций в виде повышения температуры, носовых кровотечений и т.д.

Наиболее близким к заявляемому изобретению является интерферонсодержащая аэрозольная композиция "Никофен" (патент RU2277904, Российская Федерация, заявка RU2004114823, заявл. 05.05.2004, опубл. 20.06.2006), состоящая из следующих компонентов: никотиновая кислота 0.1-0.5 мас.%; олифенсодержащий препарат 0.01-0.05 мас.%; интерферон 0.5-1 млн ME, растворитель - остальное. Использование данного изобретения позволяет при однократном введении интерферона увеличить его биодоступность и время нахождения в системном кровотоке, что повышает комплаентность применения препарата для лечения острых инфекционно-воспалительных заболеваний ВДП.

Существенным недостатком указанной композиции является ее низкая эффективность для лечения хронических форм инфекционно-воспалительных заболеваний ВДП, обусловленная минимальной локальной терапевтической активностью интерферона, вызванной его быстрым поступлением в системный кровоток.

Технической проблемой является необходимость увеличения локальной активности интерферона в слизистой оболочке носа, обеспечивающей эффективное лечение хронических заболеваний ВДП.

Технический результат состоит в повышении времени задержки интерферона в слизистой оболочке носа и снижении его поступления в системный кровоток.

Технический результат достигается тем, что интерферонсодержащая композиция для лечения хронических инфекционно-воспалительных заболеваний ВДП, содержащая рекомбинантный интерферон, кислоту и воду, согласно изобретению в качестве интерферона содержит интерферон α2b и/или интерферон γ (гамма), а в качестве кислоты содержит янтарную кислоту, при этом дополнительно содержит диметилсульфоксид и хитозан при следующем содержании компонентов:

Интерферон альфа и/или гамма 0,5-1,5 млн МЕ; Янтарная кислота (раствор) 0,1-1,2 мас. %; Хитозан 0,1-1,0 мас. %; Диметилсульфоксид 0,01-0,1 мас. %. Вода остальное

Разработанная композиция после интраназального введения обеспечивает максимальную во времени задержку интерферона в слизистой оболочке носа и его минимальное поступлении в системный кровоток. В этом случае задержка в слизистой оболочке носа интерферона повышает его локальный терапевтический эффект, в том числе, при однократном введении препарата. В качестве рекомбинантного интерферона используют выпускаемый в промышленных масштабах интерферон α2b или интерферон γ в виде фармакопейного лиофильного порошка. Хитозан (N-ацетил-1,4-b-D-глюкопиранозамин) применяли с молекулярной массой 73 кДа ± 20,0% со степенью деацетилирования 75,0%-90,0%. Для получения указанной композиции хитозан предварительно растворяли в растворе янтарной кислоты с добавлением диметилсульфоксида. Эту композицию применяли для растворения лиофильного порошка рекомбинантного интерферона и ее интраназального введения.

Хитозан является биологическим полимером, повышающим биодоступность белковых соединений для слизистых оболочек организма (Khutoryanskiy V.V. Advances in Mucoadhesion and Mucoadhesive Polymers // Macromol. Biosci. 2011. Vol. 11. N 6. P. 748/ https://doi.org/10.1002/mabi.201000388), что имеет значение для формирования локального терапевтического эффекта. Янтарная кислота - вещество с выраженным антиоксидантным эффектом, корректирующим естественный клеточный метаболизм, что также важно для усиления противовоспалительного действия композиции. Диметилсульфоксид - химическое вещество, обладающее локальным противовоспалительным действием.

Проведенные эксперименты на основе анализа фармакокинетических параметров рекомбинантного интерферона показали, что заявляемый состав композиции обеспечивает оптимальные условия его задержки в слизистой оболочке носа и ограничивает его быстрое поступление в системный кровоток после интраназального введения. Совокупность этих эффектов имеет большое значение для развития выраженного локального фармакодинамического ответа, что, по-видимому, достигается за счет образования комплекса интерферона с другими ингредиентами композиции.

Оптимальным способом получения заявляемой композиции является растворение сухой формы фармакопейного рекомбинантного интерферона в предварительно подготовленном растворе смеси хитозана, янтарной кислоты и диметилсульфоксида в заданных концентрациях и последующего интраназального введения этой композиции в виде крупнокапельного аэрозоля или капель. Примеры, приведенные ниже, демонстрируют промышленное применение заявляемой композиции.

Пример 1. Подбор оптимального количественного состава компонентов заявляемой композиции при использовании рекомбинантного интерферона α2b.

Для выбора оптимального состава заявляемой композиции была подготовлена серия образцов, содержащих различные соотношения (мас.%) ее компонентов (хитозана, янтарной кислоты, диметилсульфоксида, вода - остальное). Далее, сухой рекомбинантный интерферон α2b предварительно растворяли в этих образцах композиций и интраназально вводили крысам породы Wistar весом 320,0 г. Через 30 мин и 60 мин после введения композиций определяли концентрацию интерферона α2b в крови животных. Для взятия образцов крови крыс подключали к системе автоматического взятия образцов крови (DiLab Accusampler, Швеция), что позволяло определять прижизненные концентрации рекомбинантного белка в крови крыс в указанные периоды времени. Взятие образцов крови проводили из предварительно катетеризированной правой яремной вены животных. Количественное определение концентраций интерферона в крови крыс проводили иммуноферментным способом, используя тест-систему ELISA-IFN-α (Россия) на планшетном спектрофотометре Multiscan FC Termo scientific (Германия).

Результаты эксперимента представлены в таблице 1. Полученные результаты демонстрируют, что задержка поступления препарата НФН α2b в кровоток после интраназального введения композиций происходит при увеличении концентраций хитозана и снижении концентраций ДМСО. Увеличение в заявляемой композиции концентрации хитозана в интервале 0,1-0,5 (мас.%) не вызывает выраженную задержку поступления НФН α2b в системный кровоток крыс. Повышение концентраций хитозана до 1,0-1,2 (мас.%) вызывает более значительную задержку поступления НФН α2b после введения. Однако оптимальная концентрация хитозана в заявляемой композиции не превышает 1,00 (мас.%), т.к. дальнейшее увеличение концентрации этого ингредиента в композиции до 1,1-1,2 (мас.%) не оказывает значимого влияния на изменение концентраций НФН α2b в крови крыс. Оптимальная концентрация ДМСО в заявляемой композиции не превышает 0,05 (мас.%). Оптимальная концентрация янтарной кислоты в заявляемой композиции не превышает 0,10 (мас.%).

Таким образом, указанные оптимальные концентрации (мас.%) компонентов заявляемой композиции обеспечивают максимальный эффект задержки поступления ИФН α2b в кровоток после интраназального введения. В дальнейшем, это позволит более детально оценить влияние заявляемой композиции на основные фармакокинетические параметры рекомбинантного интерферона.

Таблица 1. Оптимизация компонентного состава заявляемой композиции. №к Доза
ИФН
α2b,
нг/мл Содержание компонентов в заявляемой
композиции, мас.% Концентрации ИФН в крови (нг/мл) после введения через: Янтарная
кислота Хитозан ДМСО Вода 30 мин 60 мин 1 90100 0,00 0,00 0,00 остальное 3,60 4,40 2 89050 0,10 0,10 0,10 остальное 3,72 4,55 3 86800 0,50 0,50 0,05 остальное 2,20 1,90 4 87650 1,00 0,50 0,10 остальное 1,40 1,25 5 88200 0,10 1,00 0,05 остальное 1,25 1,20 6 89000 0,50 1,00 0,05 остальное 1,26 1,12 7 91000 1,20 1,00 0,10 остальное 1,20 1,05 8 87500 1,00 1,20 0,10 остальное 1,10 1,10 9 88100 0,10 1,00 0,05 остальное 1,12 1,07 10 87690 0,10 1,00 0,02 остальное 1,09 1,00 11 89000 0,10 1,00 0,01 остальное 1,05 1,00 12 88100 0,10 1,10 0,01 остальное 1,13 1,10

Примечание: №к - номер композиции; средняя доза ИФН α2b (М) 88515,83 нг/мл, стандартное отклонение (Sd) ± 1178,91.

Пример 2. Подбор оптимального количественного состава компонентов заявляемой композиции при использовании рекомбинантного интерферона γ (гамма).

Для выбора оптимального состава заявляемой композиции также была подготовлена серия образцов, содержащих различные концентрации (мас.%) ее компонентов (хитозана, янтарной кислоты, диметилсульфоксида, вода - остальное). Далее, аналогично интерферону α2b (пример 1), использовали сухой рекомбинантный интерферон γ, который предварительно растворяли в образцах композиций и интраназально вводили крысам породы Wistar весом 300,0 г. Через 30 и 60 мин после введения композиций определяли концентрацию интерферона γ в крови животных. Для взятия образцов крови крыс подключали к системе автоматического взятия образцов крови (DiLab Accusampler, Швеция), что позволяло определять прижизненные концентрации рекомбинантного белка в крови крыс в указанные периоды времени. Взятие образцов крови проводили из предварительно катетеризированной правой яремной вены крыс. Количественное определение концентраций интерферона в крови животных проводили иммуноферментным способом, используя тест-систему ELISA-IFN-α (Россия) на планшетном спектрофотометре Multiscan FC Termo scientific (Германия).

Результаты эксперимента представлены в таблице 2. Полученные результаты демонстрируют, что на задержку поступления препарата НФН γ в системный кровоток после интраназального введения, в основном, влияют концентрации хитозана и ДМСО. Аналогичный эффект наблюдали и при интраназальном введении ИНФ α2b (Пример 1), что свидетельствует об отсутствии существенной зависимости этого эффекта от вида рекомбинантного интерферона. При повышении концентраций хитозана и снижении концентраций ДМСО отмечается оптимальный интервал концентраций указанных компонентов, обеспечивающих выраженную задержку поступления ИФН γ в системный кровоток крыс после интраназального введения. Так, оптимальная концентрация хитозана в заявляемой композиции не превышает 1,00 (мас.%). Оптимальная концентрация ДМСО в заявляемой композиции не превышает 0,05 (мас.%). Оптимальная концентрация янтарной кислоты в заявляемой композиции не превышает 0,10 (мас.%).

Таким образом, указанные оптимальные концентрации (мас.%) компонентов заявляемой композиции обеспечивают максимальный эффект задержки поступления ИФН γ в кровоток после интраназального введения. Вместе с тем, дальнейшая оценка основных фармакокинетических параметров интерферона на фоне заявляемой композиции может проводится при использовании интерферона α2b и/или интерферона γ, т.к. динамика изменений концентраций этих препаратов в крови крыс через 30 мин и 60 мин после их введения имеет сходную направленность.

Таблица 2. Оптимизация компонентного состава заявляемой композиции. №к Доза
ИФН
γ,
нг/мл Содержание компонентов в заявляемой
композиции, мас.% Концентрации ИФН в крови (нг/мл) после введения через: Янтарная
кислота Хитозан ДМСО Вода 30 мин 60 мин 1 52400 0,00 0,00 0,00 остальное 3,94 5,25 2 55000 0,10 0,00 0,00 остальное 3,57 5,10 3 54900 0,50 0,10 0,00 остальное 3,41 4,90 4 54410 1,00 0,50 0,01 остальное 2,68 2,40 5 54800 0,10 1,00 0,05 остальное 1,10 1,02 6 56700 0,50 1,00 0,01 остальное 0,75 0,81 7 57200 1,20 1,00 0,10 остальное 0,80 0,86 8 56500 1,00 1,20 0,10 остальное 0,79 0,84 9 58050 0,10 1,00 0,05 остальное 0,70 0,72 10 57300 0,10 1,00 0,02 остальное 0,62 0,70 11 56800 0,10 1,00 0,01 остальное 0,54 0,60 12 54800 0,10 1,10 0,01 остальное 0,51 0,58

Примечание: №к - номер композиции; средняя доза ИФН γ (М) 55738,33 нг/мл; стандартное отклонение (Sd) ± 1608,75.

Пример 3. Фармакокинетические параметры интерферона α2b при его интраназальном введении в составе заявляемой композиции и в составе воды для инъекций.

Для оценки фармакокинетических параметров интерферона α2b была создана композиция содержащая: фармакопейный лиофильный препарат рекомбинантного интерферона α2b; хитозан с молекулярной массой 73 кДа ± 20,0% со степенью деацетилирования 75,0%-90,0%; янтарную кислоту и диметилсульфоксида (ДМСО). Для получения этой композиции использовали хитозан, который предварительно растворяли в 0,1 Н растворе янтарной кислоты с добавлением ДМСО до 1,0%. Эту композицию использовали для растворения рекомбинантного интерферона α2b, которую интраназально вводили животным группы 1. В качестве вещества сравнения использовали фармакопейный лиофильный препарат рекомбинантного интерферона α2b, который растворяли в воде для инъекций и интраназально вводили животным группы 2.

В эксперименте использовали половозрелых самцов крыс породы Wistar весом 320,0 г, которые были получены из питомника РАМН Рапполово Ленинградской области. Животных содержали в условиях вивария при искусственном освещении. Рацион животных состоял из гранулированного корма и питьевой воды ad libitum. Основные правила содержания и ухода соответствовали “Санитарным правилам по содержанию экспериментально-биологических клиник (вивариев)”, утвержденным МЗ СССР 06.07.73 г. и Приказу МЗ СССР № 755 от 12.08.77, а также правилам, принятым Европейской конвенцией по защите позвоночных животных (Страсбург, 1986 г.). Номер ветеринарного регистрационного удостоверения 78-07095 от 31.05.2016.

Перед интраназальным введением композиций интерферонов животным на фоне общей ингаляционной анестезией препаратом «Изофлуран», подаваемого прибором Univertor 410 Anestesia Unit (Мальта), проводили катетеризацию яремной вены катетером SCI-cat C-2V01 (Россия). Далее животное подключали к системе автоматического взятия образцов крови (DiLab Accusampler, Швеция), что позволяло, используя одно животное определять прижизненные концентрации рекомбинантного белка в его крови в течение заданных интервалов времени. Правая яремная вена была выбрана из соображений легкой доступности для введения катетера и низкому риску кровопотери.

Животным группы 1 интраназально и однократно вводили рекомбинантный интерферон α2b (IFN1), предварительно растворенный в заявляемой композиции. Доза интерферона α2b составляла 88345 нг/мл. Животным группы 2 интраназально и однократно вводили рекомбинантный интерферон α2b (IFN2), предварительно растворенный в воде для инъекций в аналогичных дозировках. Взятие образцов крови у животных проводили до введения препаратов и после их введения через 15, 30, 60, 120, 180, 240 и 300 мин.

Количественное определение концентраций интерферонов в образцах крови проводили иммуноферментным способом при использовании тест-систем ELISA-IFN-α (Россия) на планшетном спектрофотометре Multiscan FC Termo scientific (Германия). Для оценки зависимости изменений концентраций [IFN1] и [IFN2] в крови животных от времени (t), прошедшего после их введения, использовали стандартные фармакокинетических модели, обеспечивающие максимальную корреляцию между экспериментальными значениями концентраций интерферона и их расчетными значениями. Далее определяли интеграл от начального момента времени до бесконечности, что соответствовало площади под фармакокинетической кривой (AUCt) и позволяло провести расчет основных фармакокинетических характеристик.

Для оценки изменений контрольных значений концентраций интерферона [IFN2] в крови крысы после интраназального введения использовали фармакокинетическое выражение следующего вида:

[IFN2] = А(exp^-αt-exp^-βt) (1),

где: [IFN2] - концентрация интерферона в крови после его введения, нг/мл; А - значения предэкспоненциального параметра (коэффициента); α, β - параметры, связанные с относительным распределением препарата; t - время, прошедшее после введения препарата, мин. В результате расчетов значений параметров (А, α, β) для выражения (1) была получена зависимость контрольных значений [IFN2] от времени (t):

[IFN2] = 5,903(exp(-0,00317t)-exp(-0,03836t)) (2).

Коэффициент корреляции (r) между экспериментальными и расчетными значениями [IFN2] составил 0,965 (p<0,01), что демонстрирует его статистическую значимость и позволяет с приемлемой точностью использовать выражение (2) для оценки контрольных изменений концентраций интерферона в крови животного.

Для оценки изменений опытных значений концентраций интерферона [IFN1] в крови крысы после интраназального введения также применяли фармакокинетическое выражение (1). После проведенных расчетов и определения значений параметров (А, α, β) была получена зависимость значений [IFN1] от времени (t) следующего вида:

[IFN1] = 1,224(exp(-0,00177t)-exp(-0,13096t)) (3).

Коэффициент корреляции (r) между экспериментальными и расчетными значениями для [IFN1] составил 0,940 (P<0,01), что также показывает его статистическую значимость и позволяет с достаточной точностью применять выражение (3) для оценки изменений в крови животного концентрации интерферона. На фиг.1 представлена графическая интерпретация выражений (2) и (3), а именно зависимость изменений концентраций интерферона α2b в крови крыс после однократного интраназального введения. [IFN1] - опытные значения концентрации интерферона, предварительно растворенного в композиции, содержащей хитозан, янтарную кислоту и ДМСО. [IFN2] - контрольные значения концентрации интерферона, предварительно растворенного в воде для инъекций. На фиг.1 представлены результаты проведенного эксперимента. Ось абсцисс - время, прошедшее после введения препарата, мин. Ось ординат - концентрация препарата в крови животного, нг/мл. Результаты на фиг.1 показывают, что до интраназального введения интерферона значения его концентраций [IFN1] и [IFN2] в крови крыс равны 0, что не ограничивает применение традиционных камерных фармакокинетических моделей. Как правило, использование таких моделей базируется на предположении, что до введения препарата его концентрация равна 0.

Анализ изменений концентраций в крови [IFN2] демонстрирует, что максимальная концентрация препарата фиксируется в интервале 4,3-4,4 нг/мл и определяется через 60-70 мин после его введения. Анализ изменений концентраций в крови [IFN1] показывает, что его максимальная концентрация находится в интервале 1,13-1,14 нг/мл и определяется через 30-35 мин после его введения. Это означает, что динамика повышения концентраций контрольных и опытных значений интерферона в крови крыс имеет различия.

Интраназальное введение интерферона, который предварительно растворяли в композиции, содержащей хитозан, янтарную кислоту и ДМСО, обеспечивает более быструю динамику увеличения концентрации препарата в крови, чем введение его после растворения в воде для инъекций. Значения максимальных концентраций интерферонов в крови животных также различаются, что свидетельствует о наличии эффекта задержки препарата в слизистой оболочке носа и ограничения его дальнейшего проникновения в кровоток. По-видимому, этот эффект происходит за счет специфических свойств хитозана, увеличивающего время контакта интерферона со слизистой оболочкой носа. Снижение максимальных значений [IFN2] и [IFN1] после введения наблюдали в течение 60-300 мин и 30-300 мин, соответственно. Однако при растворении интерферона в заявляемой композиции отмечается более медленная динамика снижения концентрации препарата в крови крысы.

В таблице 3 представлены отдельные фармакокинетические параметры для препаратов IFN1 и IFN2 после их однократного интраназального введения.

Таблица 3. Фармакокинетические параметры для препаратов IFN1 и IFN2 после их однократного интраназального введения животным в дозе 88345 нг/мл. Обозначение параметров [IFN1] [IFN2] AUS_t, нг/мл/мин 683,0 1707,7 Кr (константа всасывания) 0,13096 0,03836 Kel (константа элиминации) 0,00177 0,00317 Cl (клиренс), мл/мин 129,35 51,73

Результаты в таблице 1 показывают различия в значениях параметра (AUS_t) в ~2,5 раза между исследуемыми композициями препаратов IFN1 и IFN2, что подтверждает наличие задержки в слизистой оболочке носа [IFN1] после его введения, т.к. его выраженного поступления в кровоток не происходит. Значения параметра (Kel) сопоставимы между IFN1 и IFN2, значения параметра (Cl) демонстрируют отсутствие эффекта кумуляции препаратов.

Установленные различия значений в фармакокинетических параметрах (AUC_t) для препаратов IFN1 и IFN2 позволяют сделать заключение, что применение заявляемой композиции на основе хитозана, янтарной кислоты и ДМСО приводит к выраженной задержки интерферона в слизистой оболочке носа и ограничивает его быстрое поступление в кровоток после интраназального введения. Это важно для развития локального фармакодинамического эффекта. Поэтому заявляемая композиция для растворения рекомбинантного интерферона α2b и его интраназального введения целесообразна для лечения хронических инфекционно-воспалительных заболеваний ВДП.

Пример 4. Применение заявляемой интерферонсодержащей композиции для лечения хронического полипозного риносинусита (ХПРС).

Для лечения ХПРС было отобрано 60 пациентов, у которых отсутствовали сопутствующие заболевания - бронхиальная астма, диабет 1-2 типа, гнойно-воспалительные процессы ВДП, туберкулез, онкологические заболевания. Распределение по полу: 22 мужчин и 38 женщин. Лица пожилого возраста (старше 60 лет) представлены 12 (20%), 48 (80%) - лица моложе 60 лет. Средний возраст пациентов - 53 года.

Пациенты были распределены на 3 группы:

1-я группа пациентов получала интраназально заявляемую композицию, содержащую интерферон альфа 2b 1 млн МЕ и интерферон гамма 500 тыс МЕ. Продолжительность применения - 14 дней;

2-я группа пациентов получала интраназально заявляемую композицию, содержащую интерферон альфа 2b 1 млн МЕ и интерферон гамма 500 тыс МЕ. Применение интерферонов проводили на фоне интраназального введения мометазона фуроата 400 мкг. Продолжительность применения - 14 дней;

3-я группа пациентов получала интраназально только мометазон фуроат 400 мкг. Продолжительность применения - 14 дней.

Оценка состояния пациентов перед курсом терапии:

1. Анкетирование на основе опросника SNOT-22 (РУС). Для определения качества жизни тест включал 22 вопроса о типичных симптомах заболеваний носа и околоносовых пазух. Степень проявления симптома оценивали в баллах: «0» баллов соответствовало отсутствию симптома, «5» - выраженной активности симптома. В таблицу 4 заносили данные по ключевым симптомы полипозного риносинусита: отсутствие обоняния, затруднение носового дыхания, выделения из носа.

Таблица 4. Выраженность симптомов (баллы) полипозного риносинусита по опроснику SNOT-22. Симптомы Не
беспокоит Незначительно беспокоит Легко беспокоит Умеренно беспокоит Значительно беспокоит Выражено беспокоит Потеря обоняния 0 1 2 3 4 5 Заложенность носа 0 1 2 3 4 5 Выделения из носа 0 1 2 3 4 5

2. Оториноларингологический осмотр. Исследование ЛОР-органов включало в себя проведение фарингоскопии, непрямой ларингоскопии, отоскопии, передней и задней риноскопии с использованием жесткого эндоскопа с углом 0°, подключенного к видеокомплексу Эндоскам 450 (Россия). При визуальном осмотре полости носа оценивали в баллах выраженность отека нижних и средних носовых раковин, выделений из носа и размер полипов в полости носа.

Отечность носа оценивали в бальной системе: 0 баллов - отсутствие отека нижних и средних носовых раковин, 1 балл - закрытие 1/3 просвета общего носового хода, 2 балла - закрытие половины просвета общего носового хода и 3 балла - полное закрытие просвета общего носового хода. Баллы для каждой половины носа суммировали.

Интенсивность выделений из носа оценивали в бальной системе: отсутствие слизистого отделяемого из носа - 0 баллов, умеренное отделяемое в среднем носовом ходе - 1 балл, отделяемое в среднем и общем носовых ходах - 2 балла, обильное отделяемое в среднем и общем носовых ходах - 3 балла. Баллы для каждого носового хода суммировали.

Размер полипов в полости носа оценивали в бальной системе: отсутствие полипов в полости носа - 0 баллов, наличие полипов в области верхнего носового хода - 1 балл, полипы в верхнем и общем носовом ходах до уровня нижней стенки средней носовой раковины - 2 балла, полная обтурация полипом общего носового хода - 3 балла. Баллы для каждого носового хода суммировали.

3. Оценка обоняния (ольфактометрия). Для определения порога восприимчивости запахов использовали набор трех ольфактивных веществ: настойка валерианы, уксусная кислота, нашатырный спирт. Растворы изготавливали в различных концентрациях (Таблица 5). Исследование обоняния проводили при температуре помещения и растворов +18-22°С в последовательности: настойка валерианы, уксусная кислота, нашатырный спирт в течение 50-60 сек. Полученные баллы по каждому веществу суммировали для получения общего балла. Максимальный общий балл - 27, определяемый для нормосмии. Количество баллов от 1 до 26 включительно свидетельствовало о гипосмии. Аносмию фиксировали при получении 0 баллов по результатам оценки обоняния.

Таблица 5. Система оценки порога обоняния (баллы). Балл Настойка валерианы (концентрация) Уксусная кислота (концентрация) Нашатырный спирт (концентрация) 1 1% 1% 1% 2 0,5% 0,5% 0,5% 3 0,25% 0,25% 0,25% 4 0,1% 0,1% 0,1% 5 0,05% 0,05% 0,05% 6 0,025% 0,025% 0,025% 7 0,01% 0,01% 0,01% 8 0,005% 0,005% 0,005% 9 0,0025% 10 0,001% 11 0,0005%

4. Передняя активная риноманометрия (ПАРМ). Для объективной оценки респираторной функции использовали метод передней активной риноманометрии. Для этого был использован риноманометр Atmos Rhino 300 (Германия). Оценивали следующие параметры: объемный поток воздуха (Fl R+L) и сопротивление полости носа (Res R+L).

Результаты лечения пациентов с ХПРС

Динамика уменьшения основных симптомов ХПРС по результатам опросника SNOT-22 представлена на фиг. 2, 3, 4. В частности, на фиг. 2 проиллюстрировано изменение выраженности жалоб на гипосмию в результате интраназального применения препаратов. ИнГКС - интраназальное глюкокортикоидное средство мометазон фуроат.

Степень выраженности жалоб на гипосмию у пациентов групп 1 и 2 снижается на 3-й день лечения и сохраняется через 1 месяц - уменьшение баллов с 4,67 до 2,43 и с 4,53 до 2,17 баллов, соответственно. Динамика снижения выраженности этого симптома у пациентов групп 1 и 2 совпадает, что свидетельствует об улучшение обоняния пациентов. В таблице 6 представлена статистическая достоверность изменений этого эффекта в группах 1 и 2 (p<0,001). Однако в 3-й группе статистически достоверного улучшения обоняния не обнаружено (p>0,05).

В таблице 7 представлены статистически достоверные различия между 1 и 3 группами и между 2 и 3 группами (р<0,001). Это подтверждает отсутствие положительного влияния ИНГКС на функцию обоняния. Отсутствие статистической достоверности различий значений выраженности гипосмии между 1 и 2 группами (р>0,05) указывает на сопоставимую эффективность применения интерферонов на фоне заявляемой композиции и при ее сочетании с ИНГКС.

Таблица 6. Статистическая достоверность изменений выраженности жалоб (баллы) на гипосмию на фоне лечения. Группа лечения Среднее значение, M Стандартное отклонение, SD Значение T критерия (Стьюдента) Критическое значение T критерия Уровень значимости, p 1-я группа До лечения 4,67 0,55 18,58 2,05 <0,001 Через 3 месяца после лечения 2,53 0,51 2-я группа До лечения 4,53 0,51 18,66 2,05 <0,001 Через 3 мес. после лечения 2,53 0,51 3-я группа До лечения 4,60 0,50 1,98 2,05 >0,05 Через 3 мес. после лечения 4,07 0,30

Таблица 7. Статистическая достоверность различий выраженности жалоб на гипосмию между группами исследования через три месяца после лечения. Группы пациентов Среднее значение, M Дисперсия, D Значение критерия Фишера (F) Критическое значение F критерия Уровень значимости, p 1-я группа 2,53 0,26 <<1,00 4,01 >>0,05 2-я группа 2,53 0,26 1-я группа 2,53 0,26 219,16 4,01 <0,001 3-я группа 4,07 0,07 2-я группа 2,53 0,26 219,16 4,01 <0,001 3-я группа 4,07 0,07

На фиг.3 представлены результаты выраженности жалоб на затруднение носового дыхания. Результаты применения препаратов у 3-х групп пациентов демонстрируют выраженное снижение жалоб на затруднение носового дыхания уже на 6 день лечения, что подтверждается результатами расчетов в таблице 9. Однако через 3 месяца лечения между группами выраженность симптома улучшение носового дыхания не имеет значимых различий на фоне исследуемых препаратов (фиг.3).

Таблица 8. Статистическая достоверность изменений выраженности жалоб на затруднение носового дыхания на фоне проводимого лечения. Группа лечения Среднее значение, M Стандартное отклонение, SD Значение T критерия (Стьюдента) Критическое значение T критерия Уровень значимости, p 1-я группа До лечения 4,53 0,51 10,82 2,05 <0,001 Через 3 мес. после лечения 2,87 0,78 2-я группа До лечения 4,47 0,51 15,73 2,05 <0,001 Через 3 мес. после лечения 2,57 0,51 3-я группа До лечения 4,63 0,49 17,41 2,05 <0,001 Через 3 мес. после лечения 2,93 0,25

На фиг.4 представлены результаты изменения динамики выраженности жалоб на интенсивность выделений из носа. Результаты применения препаратов у 3-х групп пациентов демонстрируют выраженное снижение жалоб на интенсивность выделений из носа в течение всего периода наблюдений. В таблице 9 представлена статистическая достоверность изменений выраженности жалоб на интенсивность выделения из носа на фоне проводимого лечения. Показано, что интенсивность выделений из носа достоверно уменьшается (р<0,001) во всех 3-х группах и не зависит от способа лечения. Через 3 месяца применения препаратов значимых различий в снижении выраженности этой жалобы между группами не обнаружено (фиг.4).

Таблица 9. Статистическая достоверность изменений выраженности жалоб на интенсивность выделения из носа на фоне проводимого лечения. Группа лечения Среднее значение, M Стандартное отклонение, SD Значение T критерия (Стьюдента) Критическое значение T критерия Уровень значимости, p 1-я группа До лечения 4,5 0,51 13,36 2,05 <0,001 Через 3 мес. после лечения 2,97 0,41 2-я группа До лечения 4,57 0,51 16,66 2,05 <0,001 Через 3 мес. после лечения 2,53 0,51 3-я группа До лечения 4,53 0,51 13,38 2,05 <0,001 Через 3 мес. после лечения 2,9 0,4

На фиг.5 представлена динамика изменения отечности слизистой оболочки в результате лечения. Результаты применения препаратов в 3-х группах пациентов демонстрируют выраженное и сопоставимое снижение отечности слизистой оболочки носа в течение всего периода наблюдений. В таблице 10 представлена статистическая достоверность изменений отечности слизистой оболочки носа на фоне проводимого лечения через 3 месяц, которая доказывает эффективность применяемых средств лечения во всех группах (p<0,001) до и после лечения. Однако значимых статистических различий в снижении отечности слизистой оболочки носа между группами через 3 месяца лечения не обнаружено (фиг.5), что также свидетельствует о сопоставимом влиянии исследуемых средств лечения на выраженность этого симптома.

На фиг.5 представлена динамика изменения размеров полипов. Размеры полипов на фоне проведенной терапии уменьшились независимо от выбранного курса лечения к 14-му дню. В этот период значимых различий в снижении выраженности этого симптома между группами не выявлено, что свидетельствует о сопоставимом влиянии исследуемых средств на этот симптом в течение 14 дней лечения.

В таблице 10 представлена статистическая достоверность изменения размеров полипов между группами через 3 месяца лечения. Результаты вычислений показывают, что статистически значимой разницы в уменьшении размеров полипов при использовании различных методов терапии между группами 1 и 3 не выявлено (p>0,05). Это означает, что применение препаратов, относящихся к различным фармакотерапевтическим группам, обеспечивает сопоставимую терапевтическую эффективность.

Полученные статистические различия размеров полипов между группами 1 и 2 (p<0,01), а также между группами 2 и 3 (p<0,01) демонстрируют более выраженное снижение этого симптома в группе 2. Это означает, что применение заявляемой композиции в сочетании с ИНКС усиливает консервативную эффективность комбинированной терапии ХПРС.

Таблица 10. Статистическая достоверность изменений отечности слизистой оболочки носа на фоне проводимого лечения. Группа лечения Среднее значение, M Стандартное отклонение, SD Значение T критерия (Стьюдента) Критическое значение T критерия Уровень значимости, p 1-я группа До лечения 4,57 0,86 9,54 2,05 <0,001 Через 3 мес. после лечения 3,07 0,45 2-я группа До лечения 4,87 0,78 14,23 2,05 <0,001 Через 3 мес. после лечения 2,7 0,47 3-я группа До лечения 4,93 0,91 11,28 2,05 <0,001 Через 3 мес. после лечения 3,03 0,41

На Фиг.6 представлено изменение размеров полипов в результате интраназального применения препаратов. ИнГКС – интраназальное глюкокортикоидное средство мометазон фуроат.

Таблица 11. Статистическая достоверность различий размеров полипов (балы) между изучаемыми группами через 3 месяца после лечения. Группа пациентов Среднее значение, M Дисперсия, D Значение критерия Фишера (F) Критическое значение F критерия Уровень значимости, p 1-я группа 3,23 0,19 11,98 4,01 <0,01 2-я группа 2,85 0,09 1-я группа 3,23 0,19 5,27 4,01 >0,05 3-я группа 3,30 0,24 2-я группа 2,85 0,09 12,01 4,01 <0,01 3-я группа 3,30 0,24

На фиг.7 представлено изменение остроты обоняния по результатам ольфактометрии до и после проведенной терапии. Значительное увеличение остроты обоняния наблюдается у пациентов 1 и 2 групп через 14 дней от начала лечения. Этот эффект сохраняется в течение 3-х месяцев. Аналогичного эффекта у пациентов 3 группы не выявлено.

В таблице 12 представлена статистическая достоверность изменений остроты обоняния на фоне проводимого лечения через 3 месяца после курса терапии. Оценка остроты обоняния показывает статистически значимые различия указанного симптома в 1 и 2 группах (р<0,001). Это означает, что применение заявляемой композиции и комбинирования ее с ИНКС значительно улучшает остроту обоняния. При применении только ИНКС достоверных улучшения обоняния не получено (р>0,05), что демонстрирует отсутствие влияния ИНКС на выраженность этого симптома.

Таблица 12. Статистическая достоверность изменений остроты обоняния на фоне проводимого лечения.

Группа лечения Среднее значение, M Стандартное отклонение, SD Значение T критерия (Стьюдента) Критическое значение T критерия Уровень значимости, p 1-я группа До лечения 7,87 2,97 -11,62 2,05 <0,001 Через 3 мес. после лечения 15,33 1,65 2-я группа До лечения 7,8 2,8 -13,82 2,05 <0,001 Через 3 мес. после лечения 17,07 2,65 3-я группа До лечения 7,73 2,9 -2,08 2,05 >0,05 Через 3 мес. после лечения 8,67 1,9

На фиг.8 представлено изменение носового дыхания по данным показателей ринопневмометрии. Носовое дыхание на основании значений объемного потока воздуха улучшилось независимо от выбранного курса лечения также к 14-му дню и сохранялось весь период наблюдения. Полученный результат подтверждает результаты субъективных оценок улучшения носового дыхания по результатам опросника SNOT 22 и подтверждает эффективность заявляемой композиции.

В таблице 13 представлена статистическая достоверность изменений показателей ринопневмометрии (объемный поток воздуха) на фоне проводимого лечения через 3 месяца после лечения. Оценка показателей ринопневмометрии показывает статистически значимые различия указанного симптома во всех группах (р<0,001). Это означает, что на фоне проводимого лечения объективно отмечается увеличение объемного потока воздуха, что подтверждает улучшение носового дыхания.

Таблица 13. Статистическая достоверность изменений показателей ринопневмометрии (объемный поток воздуха) на фоне проводимого лечения.

Группа лечения Среднее значение, M Стандартное отклонение, SD Значение T критерия (Стьюдента) Критическое значение T критерия Уровень значимости, p 1-я группа До лечения 270,17 34,92 -6,77 2,05 <0,001 Через 3 мес. после лечения 299,23 25,83 2-я группа До лечения 280,37 25,06 -6,01 2,05 <0,001 Через 3 мес. после лечения 318,67 40,24 3-я группа До лечения 271,57 22,44 -3,74 2,05 <0,01 Через 3 мес. после лечения 301,13 39,23

В таблице 14 представлена статистическая достоверность различий показателей ринопневмометрии (объемный поток воздуха) между группами исследования. Через 3 месяца после лечения статистических различии показателей ринопневмометрии между группами не отмечено (р>0,05). Это свидетельствует о сопоставимом влиянии заявляемой композиции и глюкокортикоидного средства мометазон фуроат на носовое дыхание, в том числе при их сочетанном применении.

Таблица 14. Статистическая достоверность различий показателей ринопневмометрии (объемный поток воздуха) между группами исследования через 3 месяца после лечения.

Группа пациентов Среднее значение, M Дисперсия, D Значение критерия Фишера (F) Критическое значение F критерия Уровень значимости,
p 1-я группа 299,23 667,01 4,96 4,01 >0,05 2-я группа 318,67 1618,92 1-я группа 299,23 667,01 4,05 4,01 >0,05 3-я группа 301,13 1538,74 2-я группа 318,67 1618,92 4,12 4,01 >0,05 3-я группа 301,13 1538,74

Заключение

Заявляемая композиция демонстрирует положительную эффективность в лечении больных ХПРС, способствуя усилению остроты обоняния, улучшению носового дыхания, снижению выделений из носа, уменьшению размеров полипов в полости носа и уменьшению отечности слизистой оболочки носа. Таким образом, заявляемая композиция может быть рекомендована для лечения ХПРС как в самостоятельном виде, так и в сочетании с ИнГКС, которые являются основными средствами консервативного лечения данного заболевания.

Изобретение относится к области медицины, а именно к интерферонсодержащей композиции для лечения хронического полипозного риносинусита. Интерферонсодержащая композиция для лечения хронического полипозного риносинусита, содержащая рекомбинантный интерферон, кислоту и воду, отличающаяся тем, что в качестве интерферона содержит интерферон α2b И/ИЛИ гамма (γ), а в качестве кислоты содержит янтарную кислоту, при этом дополнительно диметилсульфоксид и хитозан при следующем содержании компонентов: интерферон альфа и/или гамма – 0,5–1,5 млн МЕ, янтарная кислота – 0,1–1,2 мас. %, хитозан – 0,1–1,0 мас. %, диметилсульфоксид – 0,01–0,1 мас. %, вода – остальное в мас.%. Вышеуказанное изобретение позволяет повысить время задержки интерферона в слизистой оболочке носа и снизить его поступление в системный кровоток. 8 ил., 14 табл., 4 пр.

Интерферонсодержащая композиция для лечения хронического полипозного риносинусита, содержащая рекомбинантный интерферон, кислоту и воду, отличающаяся тем, что в качестве интерферона содержит интерферон α2b И/ИЛИ гамма (γ), а в качестве кислоты содержит янтарную кислоту, при этом дополнительно диметилсульфоксид и хитозан при следующем содержании компонентов:

Интерферон альфа и/или гамма 0,5–1,5 млн МЕ Янтарная кислота 0,1–1,2 мас. % Хитозан 0,1–1,0 мас. % Диметилсульфоксид 0,01–0,1 мас. % Вода остальное в мас.%