НОВАЯ КОМПОЗИЦИЯ ДЛЯ ПРЕДУПРЕЖДЕНИЯ ИЛИ ЛЕЧЕНИЯ НЕЙРОДЕГЕНЕРАТИВНОГО РАССТРОЙСТВА И ЕЕ ПРИМЕНЕНИЕ Российский патент 2023 года по МПК C12P19/00 C12P19/12 A61K31/7024 A61P21/00 A61P25/00 

УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Область техники изобретения

Настоящее изобретение относится к области фармацевтической технологии. Конкретнее, настоящее изобретение относится к новым соединениям для профилактики или лечения нейродегенеративных заболеваний и их применению.

Предшествующий уровень техники

Нейродегенеративные заболевания представляют собой группу заболеваний, вызванных хронической прогрессивной дегенерацией ткани центральной нервной системы. К таким болезням главным образом относятся болезнь Паркинсона (БП), болезнь Альцгеймера (БА), болезнь Хантингтона (БХ), амиотрофический латеральный склероз (АЛС) и т.д.

Болезнь Альцгеймера (БА), также именуемая пресенильной деменцией, представляет собой хроническое и прогрессивное нейродегенеративное заболевание, которое проявляется в основном в виде прогрессивного ухудшения памяти, когнитивной дисфункции и утраты способности самостоятельного проживания и самообслуживания. Вместе с увеличением стареющего населения частота возникновения БА растет с каждым годом и БА стала самым важным предметом общественного беспокойства в области вопросов здравоохранения. Основным патологическим признаком болезни Альцгеймера является формирование амилоидных бляшек и нейрофиламентных клубков в мозге пациента. Амилоидная бляшка - специфическое для болезни Альцгеймера патологическое изменение, которое главным образом является следствием внеклеточного накопления бета-амилоидного (Αβ) белка, который выделяется в ненормально большом количестве в клетках. В настоящее время предложено несколько теорий в попытке объяснить развитие патологического процесса. «Гипотеза Αβ», предложенная Харди и Селко, является общепризнанной теорией. В теории предполагается, что ввиду длительного воздействия сложных генетических и экологических факторов нервные клетки выделяют Αβ в ненормально большом количестве, который накапливается, образуя олигомеры и амилоидные бляшки. Αβ (в частности, олигомеризованный Αβ) подвергается ряду каскадных реакций (включая, например, свободнорадикальную реакцию, митохондриальное окислительное повреждение и воспалительные ответные реакции, которые прямо или косвенно воздействуют на нейроны и глиальные клетки), что приводит к нарушению функции синапса и нейрональному повреждению, вызывая активацию микроглии и астроцитов. Это ускоряет образование нейрофиламентных клубков, приводя к когнитивному нарушению после длительного воздействия. В недавнее время путем многочисленных исследований были представлены различные доказательства в поддержку «гипотезы Αβ», показывающие критическую роль Αβ в патогенезе болезни Альцгеймера.

Болезнь Паркинсона представляет собой распространенное нейродегенеративное заболевание, клиническое проявление которого имеет форму таких симптомов, как медленная реакция, дрожание, неподвижность тела и последующая потеря равновесия. Исследования мозговых тканей пациентов с БП показали, что дофаминергические нейроны в черном веществе пациентов отсутствуют. Тельца включения Леви являются одними из отличительных поражений дегенеративных нейронов при болезни Паркинсона. Исследования показали, что тельца включения Леви образуются в мозговых клетках многих пациентов с нейродегенеративными заболеваниями, включая болезнь Альцгеймера, болезнь Паркинсона и деменцию с тельцами Леви (ДТЛ).

В мозгах млекопитающих пролиферация и самообновление нейральных клеток-предшественниц (НКП) продолжаются в течение жизни и являются важной частью нейрогенеза. В случае старения, длительного стресса и неврологических заболеваний, таких как болезнь Альцгеймера (БА), способность к пролиферации и самообновлению нейральных клеток-предшественниц снижается, что приводит к нарушению когнитивной функции. Обеспечение нейрогенеза считается потенциальным лечением старения и нейродегенеративных заболеваний, связанных со старением. Следовательно, возможным решением является терапия с замещением клеток посредством пересадки эмбриональных нейральных клеток-предшественниц или нейральных клеток-предшественниц, индуцированных in vitro. Однако до сих пор существуют некоторые разногласия касательно недавно созданной сложной технологии, в частности, по безопасности и источникам клеток. Другой подход заключается в активации внутренних нейральных клеток-предшественниц с помощью фармакологических средств для достижения цели - лечения нейродегенеративных заболеваний. Фармакологические средства просто использовать и можно направлять на конкретные функции нейральных клеток-предшественниц. Следовательно, активация внутренних нейральных клеток-предшественниц представляет собой не только обоснованное лечение, но также и полезный способ профилактики. Однако для специалистов в данной области техники все еще существует необходимость получения подходящих лекарств, которые могут лучше преодолевать препятствия в теле человека для эффективной активации внутренних нейральных клеток-предшественниц с целью достижения эффективного лечения.

СУЩНОСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Цель настоящего изобретения состоит в создании нового соединения для профилактики или лечения нейродегенеративных заболеваний и способа его применения.

Согласно первому аспекту в настоящем изобретении предлагается соединение, представленное формулой (I) или изомером, сольватом, прекурсором или его фармацевтически приемлемой солью,

в котором - шестичленное гетероциклическое кольцо, причем X представлено О; R1-R4 каждое по отдельности подбираются из числа водорода, гидроксила, С1-С4 алкила, С2-С4 алкенила, С2-С4 алкинила и галогена, или же две соседние группы R1-R4 связаны друг с другом для образования циклической структуры с основным кольцом; и R1'-R3' каждое по отдельности подбираются из числа водорода, гидроксила, С1-С4 алкила, С2-С4 алкенила, С2-С4 алкинила и галогена, или же две соседние группы R1'-R3' связаны друг с другом для образования циклической структуры с основным кольцом.

В предпочтительном варианте осуществления в соединении, представленном формулой (I) или изомером, сольватом, прекурсором или его фармацевтически приемлемой солью, имеется циклическая структура, выбранная из группы, включающей: и .

В предпочтительном варианте осуществления в соединении, представленном формулой (I) или изомером, сольватом, прекурсором или его фармацевтически приемлемой солью, имеется циклическая структура .

В предпочтительном варианте осуществления в соединении, представленном формулой (I) или изомером, сольватом, прекурсором или его фармацевтически приемлемой солью, R1-R4 каждое по отдельности подбирается из числа водорода, гидроксила, С1-С4 алкила или же две соседние группы R1-R4 связаны друг с другом для образования пятичленного кольца с основным кольцом; и R1'-R3' каждое по отдельности подбирается из числа водорода, гидроксила, С1-С4 алкила или же две группы R1'-R3' связаны друг с другом для образования пятичленного кольца с основным кольцом.

В другом предпочтительном варианте осуществления в соединении, представленном формулой (I) или изомером, сольватом, прекурсором или его фармацевтически приемлемой солью, пятичленное кольцо представлено кислородсодержащим гетероциклическим кольцом и, предпочтительно, содержит два атома кислорода.

В другом предпочтительном варианте осуществления в соединении, представленном формулой (I) или изомером, сольватом, прекурсором или его фармацевтически приемлемой солью, имеется:

В другом предпочтительном варианте осуществления представлено применение соединения, представленного формулой (I) или изомером, сольватом, прекурсором или его фармацевтически приемлемой солью, при приготовлении лекарств или комплектов для предотвращения, облегчения или лечения нейродегенеративных заболеваний, депрессии или приступа.

В другом предпочтительном варианте осуществления нейродегенеративные заболевания включают в себя:

нейродегенеративные заболевания, характеризующиеся нейровоспалением в мозге;

нейродегенеративные заболевания, характеризующиеся значительным повышением продуцирования Αβ;

нейродегенеративными заболеваниями, характеризующимися значительным снижением способности к обучению и ухудшением памяти; или

нейродегенеративные заболевания, характеризующиеся значительным снижением количества нейральных клеток-предшественниц.

В другом предпочтительном варианте осуществления нейровоспаление в мозгу характеризуется значительным ростом проявлений факторов аллергического воспаления, таких как IL-6 и IL-1β.

В другом предпочтительном варианте осуществления нейродегенеративные заболевания включают в себя: болезнь Альцгеймера, болезнь Паркинсона и деменцию с тельцами Леви (ДТЛ).

Согласно другому аспекту настоящего изобретения предлагается применение соединения, представленного формулой (I) или изомером, сольватом, прекурсором или его фармацевтически приемлемой солью, при приготовлении композиций, наборов или комплектов для подавления нейровоспаления.

Согласно еще одному аспекту настоящего изобретения предлагается применение соединения, представленного формулой (I) или изомером, сольватом, прекурсором или его фармацевтически приемлемой солью, при приготовлении композиций, наборов или комплектов для содействия продуцированию нейральных клеток-предшественниц.

Согласно еще одному аспекту настоящего изобретения предлагается применение соединения, представленного формулой (I) или изомером, сольватом, прекурсором или его фармацевтически приемлемой солью, при приготовлении композиций, наборов или комплектов для снижения продуцирования Αβ.

Согласно другому аспекту настоящего изобретения предлагается фармацевтическая композиция, включающая соединение, представленное формулой (I) или изомером, сольватом, прекурсором или его фармацевтически приемлемой солью; а также фармацевтически приемлемым носителем.

В предпочтительном варианте осуществления соединение, представленное формулой (I) или изомером, сольватом, прекурсором или его фармацевтически приемлемой солью, имеется в фармацевтической композиции в эффективном количестве. Предпочтительно, чтобы эффективное количество составляло, 0,01-50% от массы, например, 0,01-5%, 0,03-3%, 0,05-1%, 20-30% и 40-50%, но не ограничивалось этими значениями, и еще предпочтительнее - 0,03-30%, а наиболее предпочтительно - 0,05-10%.

Согласно другому аспекту настоящего изобретения предлагаемые лекарственные формы фармацевтической композиции включают в себя: гранулят, порошок, таблетки, пилюли, капсулы, препараты с замедленным высвобождением, препараты с контролируемым высвобождением, инъекции, инфузионные растворы или суспензии.

Согласно еще одному аспекту настоящего изобретения предлагается комплект, включающий соединение, представленное формулой (I) или изомером, сольватом, прекурсором или его фармацевтически приемлемой солью; а также фармацевтическую композицию.

Согласно другому аспекту настоящего изобретения предлагается способ предотвращения, облегчения или лечения нейродегенеративных заболеваний, депрессии или приступа, включающий введение эффективного количества соединения, представленного формулой (I) или изомером, сольватом, прекурсором или его фармацевтически приемлемой солью, нуждающемуся в нем пациенту.

Согласно еще одному аспекту настоящего изобретения предлагается способ приготовления соединения, представленного формулой II, включающий этап реакции дирамнопиранозил-гликозида с фторидом тетрабутиламмония для получения соединения, представленного формулой (II).

Согласно другому предпочтительному варианту осуществления дирамнопиранозил-гликозид получают посредством реакциидирамнопиранозил-тиогликозида с (4-O-трет-бутилдиметилсилил)-феруловой кислотой.

Согласно еще одному предпочтительному варианту осуществления дирамнопиранозил-тиогликозид получают посредством реакции рамнопиранозил-тиогликозида с 2,3,4-O-триацетилрамнозил-1-O-трихлороацетимидатом.

Согласно другому аспекту настоящего изобретения предлагается способ приготовления соединения, представленного формулой (III) или (IV), включающий этап:

восстановления соединения (конкретно, удаления изопропилиденовой защитной группы вицинального диола) для получения соединения, представленного формулой (III) или (IV).

В одном предпочтительном варианте осуществления соединение получают за счет этапа конденсации соединения с соединением .

где Ρ представлено Η или защитной группой, а защитная группа предпочтительно подобрана из группы, состоящей из: AII, Boc, TBS, Ac, Βn, РМВ и Cbz; и эта защитная группа может быть восстановлена до Н.

В другом предпочтительном варианте осуществления соединение получают за счет этапов проведения реакции присоединения соединений и и защиты вицинального диола изопропилиденовой группой.

Другие аспекты настоящего изобретения станут очевидны для специалиста в этой области техники из описания в настоящем документе.

КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ЧЕРТЕЖЕЙ

На фиг.1 представлено улучшение показателя теста водного лабиринта Морриса на мышах с моделью болезни Альцгеймера, за счет PL402.

На фиг.2 представлено подавление нейровоспаления за счет PL402.

На фиг.3 представлено снижение продуцирования Αβ за счет PL402.

На фиг.4 представлен эффект PL404 на способность к обучению и память животных.

На фиг.5 представлен эффект PL404 на пролиферацию нейральных клеток-предшественниц человека.

На фиг.6 представлен эффект PL405 на пролиферацию нейральных клеток-предшественниц человека.

На фиг.7 представлен качественный анализ соединения 5.

На фиг.8 представлен качественный анализ PL402.

На фиг.9 представлен качественный анализ PL404.

На фиг.10 представлен качественный анализ PL405.

ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ

После обширных исследований авторами изобретения установлено, что соединение по формуле (I) может значительно облегчить симптомы нейродегенеративных заболеваний. При экспериментах как способом in vitro, так и in vivo соединение по формуле (I) может эффективно содействовать пролиферации нейральных клеток-предшественниц, что является не только профилактикой, но также может служить в качестве подхода к лечению для содействия в регенерации нервных клеток с целью противодействия когнитивным нарушениям, связанным со старением и нейродегенеративными заболеваниями.

Термины

В рамках применения в настоящем документе термин «алкил» относится к линейной или разветвленной группе насыщенных алифатических углеводородов с 1-4 атомами углерода, а предпочтительно - с 1-2 атомами углерода. Например, алкил включает в себя, помимо прочего, метил, этил, н-пропил, изопропил, н-бутил, изобутил и трет-бутил.

В рамках применения в настоящем документе термин «алкенил» включает в себя линейную или разветвленную группу углеводородов с как минимум одной углерод-углеродной двойной связью и 2-4 атомами углерода, а предпочтительно - с 2-3 атомами углерода.

В рамках применения в настоящем документе термин «алкинил» включает в себя линейную или разветвленную группу углеводородов с как минимум одной углерод-углеродной тройной связью и 2-4 атомами углерода, а предпочтительно - с 2-3 атомами углерода.

В рамках применения в настоящем документе термин «галоген» относится к F, Cl, Br или I.

Термин «изомер» включает в себя геометрические изомеры, энантиомеры и диастереомеры, например, цис-транс-изомеры и конформационные изомеры.

Обозначение , применяемое в настоящем документе, хорошо известно специалистам в этой области техники, и оно обозначает гетероциклическое кольцо с атомом X В предпочтительном варианте реализации настоящего изобретения - шестичленное гетероциклическое кольцо.

Обозначение в рамках настоящего документа хорошо известно специалистам в этой области техники, и оно значит, что происходит замещение дополнительными группами R1-R4 в одной или нескольких точках на кольце, которые могут быть замещены. Также в разных точках замещения группы могут разниться.

Обозначение в рамках настоящего документа хорошо известно специалистам в этой области техники, и оно значит, что происходит замещение дополнительными группами R'-R3' в одной или нескольких точках на кольце, которые могут быть замещены. Также в разных точках замещения группы могут разниться.

«Р» в настоящем документе представлено Η или защитной группой, а защитная группа предпочтительно подобрана из группы, состоящей из: AII, Boc, TBS, Ac, Bn, РМВ и Cbz; и эта защитная группа может быть восстановлена до Н.

Также в различных соединениях защитные группы могут быть одинаковыми или разными. Даже в случае одинаковой серии реакций группа Ρ в разных точках разных или аналогичных соединений также может отличаться.

Термин «сольват» в настоящем документе относится к соединению, содержащему молекулу растворителя, например, растворитель может быть представлен гидратом.

Термин «содержит/содержащий» в настоящем изобретении означает, что в смеси или соединении по настоящему изобретению могут использоваться различные ингредиенты. Таким образом, термины «главным образом состоящий из» и «состоящий из» включены в объем термина «содержит/содержащий».

По настоящему изобретению «фармацевтически приемлемый» ингредиент - вещество, пригодное для применения на людях и/или животных, без избыточных нежелательных побочных эффектов, таких как токсичность, раздражение и аллергические реакции, то есть, такой, который обладает разумным соотношением эффекта и риска.

По настоящему изобретению «фармацевтически приемлемый носитель» - растворитель, суспендирующее средство или эксципиент, приемлемый с фармацевтической или пищевой точки зрения, который применяется для доставки соединения по формуле (I) настоящего изобретения или изомера, сольвата, прекурсора или его фармацевтически приемлемой соли у животных и людей. Носитель может быть жидким или твердым.

Соединение

По настоящему изобретению предлагается соединение, представленное структурной формулой (I):

Следует понимать, что точка X в формуле (I) - схематическая точка, и она не ограничена сторонами R1 или R1', представленными на фигуре. Она также может располагаться между R1 и R3, R3 и R4, R2 и группой , а также R4 и группой ; также она может находиться между R2' и R3', R1' и , R2' и , а также R3' и группой . Например, соединение может представлять собой:

или

,

в котором - шестичленное гетероциклическое кольцо, причем X представлено О; R1-R4 каждое по отдельности подбираются из числа водорода, гидроксила, С1-С4 алкила, С2-С4 алкенила, С2-С4 алкинила и галогена, или же две соседние группы R1-R4 связаны друг с другом для образования циклической структуры с основным кольцом; и R1'-R3' каждое по отдельности подбираются из числа водорода, гидроксила, С1-С4 алкила, С2-С4 алкенила, С2-С4 алкинила и галогена, или же две соседние группы R1'-R3' связаны друг с другом для образования циклической структуры с основным кольцом.

В предпочтительном варианте осуществления настоящего изобретения R1-R4 каждое по отдельности подбираются из числа водорода, гидроксила и С1-С2 алкила, или же две соседние группы R1-R4 связаны друг с другом для образования пятичленного кольца с основным кольцом; и R1'-R3' каждое по отдельности подбираются из числа водорода, гидроксила и С1-С2 алкила, или же две соседние группы R1'-R3' связаны друг с другом для образования пятичленного кольца с основным кольцом.

Настоящее изобретение также включает в себя изомер, сольват, прекурсор или фармацевтически приемлемую соль соединения по формуле (I) до тех пор, пока они также обладают функциями, аналогичными или существенно аналогичными таковым у соединения по формуле (I). «Фармацевтически приемлемая соль» относится к соли, образующейся при реакции соединения с неорганической, органической кислотами, щелочным или щелочноземельным металлом. Эти соли включают в себя, помимо прочего, (1) соли с неорганическими кислотами, такие как соляная, серная, азотная и ортофосфорная кислоты; (2) соли с органическими кислотами, такими как уксусная, щавелевая, янтарная, винная, метансульфоновая, малеиновая кислоты или аргинин. Другие соли включают в себя соли с щелочными или щелочноземельными металлами (такими как натрий, калий, кальций или магний) в форме сложных эфиров, карбаминатов или других стандартных «предлекарств». Соединение имеет один или несколько несимметричных центров. Таким образом, эти соединения могут существовать в виде рацемических смесей, отдельных энантиомеров, отдельных диастереомеров, смесей диастереомеров, цис- или транс-изомеров.

«Прекурсор соединения» относится к прекурсору соединения, преобразуемого в соединение по структурной формуле (I) или его соль, или раствор посредством метаболических или химических реакций у пациента после введения соответствующим путем.

В предпочтительном варианте осуществления настоящего изобретения пятичленное кольцо представляет собой гетероциклическое кольцо, содержащее атом кислорода; предпочтительно, чтобы пятичленное кольцо содержало два атома кислорода.

В предпочтительном варианте осуществления настоящего изобретения соединение включает в себя соединения по формулам (II)-(IV), среди которых наиболее предпочтительным является соединение по формуле (II).

, также обозначаемая как PL402;

, также обозначаемая как PL404;

, также обозначаемая как PL405.

Согласно одному варианту осуществления настоящего изобретения соединение по формуле II включает:

этап 1: смешивание 2,3,4-O-триацетилрамнозил-1-O-трихлороацетимидата и рамнопиранозил-тиогликозида, а также проведение реакции для получения конечного продукта в виде дирамнопиранозил-тиогликозида со структурой, представленной формулой (V);

этап 2: смешивание конечного продукта в виде дирамнопиранозил-тиогликозида со структурой, представленной формулой (V), и

(4-O-трет-бутилдиметилсилил)-феруловой кислоты, а также проведение реакции для получения конечного продукта в виде дирамнопиранозил-гликозида со структурой, представленной формулой VI;

этап 3: смешивание конечного продукта в виде дирамнопиранозил-гликозида со структурой, представленной формулой VI, и фторида тетрабутиламмония, а также проведение реакции для получения продукта без трет-бутилдиметилсилила (TBS) со структурой, представленной формулой VII; и

этап 4: гидролиз конечного продукта без трет-бутилдиметилсилила (TBS) для получения соединения по формуле П.

В одном варианте осуществления настоящего изобретения реакция на этапе 1) включает добавление 2,3,4-O-триацетилрамнозил-1-O-трихлороацетимидата по каплям в рамнопиранозил-тиогликозид при температуре -78°С.

В одном варианте осуществления настоящего изобретения реакция на этапе 2) включает добавление дирамнопиранозил-тиогликозида по каплям в (4-O-трет-бутилдиметилсилил)-феруловую кислоту при температуре -78°С.

Согласно одному варианту осуществления настоящего изобретения смешивание на этапе 3) включает добавление фторида тетрабутиламмония по каплям в конечный продукт в виде дирамнопиранозил-гликозида при комнатной температуре.

Согласно одному варианту осуществления настоящего изобретения способ получения соединения по формуле III или IV включает следующие этапы:

этап 1: проведение реакции присоединения соединений и для получения продукта присоединения;

этап 2: защита вицинального диола в продукте присоединения, полученном на этапе 1), изопропилиденовой группой для получения продукта реакции, стабильного в конкретной точке;

этап 3: конденсация продукта реакции по этапу 2) с для получения продукта конденсации; и

этап 4: восстановление продукта конденсации, а конкретно - удаление изопропилиденовой группы, защищающей вицинальный диол, для получения соединения, представленного формулой (III) или (IV).

После ознакомления со структурой соединения по настоящему изобретению специалистам в этой области техники будет ясно, что это соединение может быть получено множеством способов, хорошо известных на предыдущем уровне техники, с помощью хорошо известного сырья, например, посредством химического синтеза или экстракции из организмов (таких как животные или растения), которые полностью включены в настоящее изобретение.

Это синтезированное соединение может быть дополнительно очищено посредством колоночной хроматографии, ВЭЖХ и другими способами.

Применение

Изобретатели выяснили, что соединение формулы (I) по настоящему изобретению может значительно облегчить симптомы нейродегенеративных заболеваний, а также является эффективным в случае депрессии или приступа. Соединение по настоящему изобретению может подавлять нейровоспаления, снижать продуцирование Αβ и содействовать продуцированию нейральных клеток-предшественниц. Экспериментальные результаты продемонстрировали, что соединение по настоящему изобретению значительно улучшает способность к обучению и память животных. Увеличение нейральных клеток-предшественниц будет дополнительно содействовать увеличению нейронов. В целом весь процесс известен как нейрогенез. Исходя из принципа действия соединения по настоящему изобретению, можно увеличить количество нейральных клеток-предшественниц, поэтому этот способ также эффективен в случае болезни Хантингтона и амиотрофического латерального склероза. Исходя из принципа действия соединения по настоящему изобретению, этот способ также эффективен в случае депрессии и приступа. В патогенезе депрессии или приступа также имеет место нейровоспаления в мозге, что в свою очередь приводит к сокращению количества нейральных клеток-предшественниц и изменениям функции нейронов. Соединение формулы (I) по настоящему изобретению может увеличить количество нейральных клеток-предшественниц, что делает его эффективным также в случае депрессии и приступа.

На основании новых наблюдений изобретателей в настоящем изобретении предлагается применение соединения, представленного формулой (I) или изомером, сольватом, прекурсором или его фармацевтически приемлемой солью, при приготовлении лекарств или комплектов для предотвращения, облегчения или лечения нейродегенеративных заболеваний, депрессии или приступа.

В настоящем изобретении также предлагается применение соединения, представленного формулой (I) или изомером, сольватом, прекурсором или его фармацевтически приемлемой солью, при приготовлении композиций, наборов или комплектов для подавления нейровоспаления.

В настоящем изобретении также предлагается применение соединения, представленного формулой (I) или изомером, сольватом, прекурсором или его фармацевтически приемлемой солью, при приготовлении композиций, наборов или комплектов для содействия продуцированию нейральных клеток-предшественниц.

В настоящем изобретении также предлагается применение соединения, представленного формулой (I) или изомером, сольватом, прекурсором или его фармацевтически приемлемой солью, при приготовлении композиций, наборов или комплектов для снижения продуцирования Αβ.

Фармацевтическая композиция

В настоящем изобретении также предлагается фармацевтическая композиция, включающая: (а) эффективное количество соединения формулы (I) или изомера, сольвата, прекурсора или его фармацевтически приемлемой соли; и (b) фармацевтически приемлемый носитель или эксципиент.

В фармацевтической композиции по настоящему изобретению соединение, представленное формулой (I) или изомером, сольватом, прекурсором или его фармацевтически приемлемой солью, имеется в эффективном количестве. Например, соединение, представленное формулой (I), или его фармацевтически приемлемая соль может содержаться в количестве 0,001-50% от массы. Предпочтительно, чтобы фармацевтическая композиция составляла 0,01-20% от массы соединения по формуле (I) или его фармацевтически приемлемой соли.

Фармацевтическая композиция по настоящему изобретению может быть в различных лекарственных формах, пока лекарственная форма может обеспечивать возможность активного ингредиента эффективно достигать необходимых участков организма млекопитающих. Например, следующие лекарственные форму доступны для выбора: гранулят, порошок, таблетки, пилюли, капсулы, препараты с замедленным высвобождением, препараты с контролируемым высвобождением, инъекции, инфузионные растворы или суспензии. В соответствии с типами заболеваний, которые будут лечиться соединением по настоящему изобретению, специалисты в области техники могут использовать удобную для применения лекарственную форму.

Для облегчения приготовления и хранения предпочтительно, чтобы фармацевтическая композиция имела твердую структуру, в частности, это касается таблеток и твердых или заполненных жидкостью капсул. Для облегчения введения предпочтительно, чтобы фармацевтическая композиция представляла собой лекарственный препарат для перорального приема. Соединение по настоящему изобретению или его фармацевтическая композиция может также храниться в стерилизованном устройстве, подходящем для инъекции и инфузионного раствора.

Эффективная доза соединения формулы (I) в качестве ингредиента может отличаться в зависимости от режима введения и тяжести заболевания, подлежащего лечению. Однако, в целом, когда соединение по настоящему изобретению вводится при дозе примерно 0,01-100 мг/кг веса тела в день, можно достичь удовлетворительных результатов. Предпочтительно, чтобы соединение по настоящему изобретению вводилось посредством 1-3 разделенных доз в день или в лекарственной форме с продолжительным усвоением. Этот режим дозирования может изменяться для обеспечения оптимального терапевтического ответа. Например, ввиду настоятельных требований терапевтического статуса можно ежедневно давать несколько разделенных доз, или дозу можно пропорционально снизить.

Ниже будет приведено дополнительное описание настоящего изобретения с привязкой к конкретным примерам. Следует понимать, что эти варианты осуществления приведены исключительно в целях демонстрации настоящего изобретения и не предназначены для ограничения объема настоящего изобретения. Экспериментальные методы, которые не приведены в следующих примерах, обычно осуществляются в соответствии со стандартными условиями, например, условиями, описанными в работе под ред. Дж. Сэмбрука «Molecular cloning: A Laboratory manuals», 3rd Edition, Science Press, 2002 («Молекулярное клонирование: инструкции по проведению лабораторных работ», 3-е издание, Science Press, 2002 г.), или в соответствии с условиями, предложенными производителем.

Статистический анализ данных

В следующих примерах все экспериментальные данные выражены как среднее значение ± стандартная погрешность. Для сравнения между различными группами лечения использовалась проверка по критерию Стьюдента. Для исследования результатов в нескольких группах применялся однофакторный дисперсионный анализ, а также проводился ретроспективный анализ посредством защищенного метода наименьшей значимой разности Фишера или критерия Бонферрони; или применялся двухфакторный дисперсионный анализ, а в качестве ретроспективного анализа применялся метод Тьюки. Когда Р<0,05, существует значительное различие между группами.

Пример 1. Синтез соединения PL402

1. Приготовление соединения 3

Согласно способу описанному в J. Chem. Soc, Perkin Trans. 1, 2000, 1445-1453, соединение 2 (248 мг, 1,0 ммоль) (Organic and Biomolecular Chemistry, 2014, том. 12, №7, с. 1114-1123), сухое молекулярное сито (250 мг) и CH₂Cl₂ (12 мл) добавлялись в сухую реакционную колбу и помешивались в течение 10 минут при комнатной температуре. После охлаждения до -78°С, были добавлены раствор фильтрата триметилсилила (TMSOTf) (0,036 мл, 0,2 ммоль) в CH₂Cl₂ и раствор соединения 1 (521 мг, 1,2 ммоль) (Journal of the American Chemical Society, 2000, том 122, №41, c. 9939-9953) в CH₂Cl₂ (2 мл). По прошествии 30 мин для прекращения реакции добавлялся Et₃N в объеме 0,1 мл. Реакционный раствор был отфильтрован, упарен и очищен посредством колоночной хроматографии (петролейный эфир:этилацетат = 3:1) для получения соединения 3 (468 г, 0,9 ммоль, выход 90%).

1H ЯМР (300 МГц; CDCl₃) 5,51 (с, 1 Н), 5,33 (д, 1 Н, J=1,7 Гц), 5,30 (дд, 1 Н, J=1,9 Гц, 3,3), 5,22 (дд, 1 Н, J₁=3,3 Гц, J₂=10,1 Гц), 5,08 (т, 1 Н, J=10,0 Гц), 4,21-4,13 (м, 2 Н), 4,06 (м, 1 Н), 3,89 (м, 1 Н), 3,56 (дд, 1 Н, h=7,1 Гц, J2=9,9 Гц), 2,61 (м, 2 Н), 2,15 (с, 1 Н), 2,05 (с, 1 Н), 1,98 (с, 1 Н), 1,53 (с, 1 Н), 1,32 (с, 1 Н), 1,34-1,21 (м, 9 Н); МС ИЭР м/з 521 (М+1)⁺.

2. Приготовление соединения 5

Соединение 4 (, 308 мг, 1,0 ммоль) и молекулярное сито смешивались в сухом CH₂Cl₂ (20 мл), помешивались при комнатной температуре в течение 30 мин, затем охлаждались до -78°С, и дополнительно помешивались в течение 30 мин. N-йодсукцинимид (NIS) (225 мг, 1,0 ммоль) и TMSOTf (0,018 мл, 0,1 ммоль) были добавлены поочередно. Наконец, соединение 3 (312 мг, 0,6 ммоль), растворенное в сухом CH₂Cl₂ (DCM, 20 мл), добавлялось по каплям в реакционную смесь, помешивалось при -78°С в течение 20 мин с медленным возвратом к комнатной температуре и помешивалось снова. По прошествии 2 часов, насыщенные растворы Na₂S₂O₃ и NaHCO₃ добавлялись для гашения реакции, отфильтровывались, извлекались с помощью этилацетата, промывались насыщенным раствором хлорида натрия, высушивались посредством безводного Na₂SO₄, отфильтровывались, упаривались и очищались посредством колоночной хроматографии (петролейный эфир:этилацетат = 3:1) для получения соединения 5 в виде белого твердого вещества (368 мг, 0,48 ммоль, выход 80%).

1H ЯМР (400 МГц, CDCl₃) 7,52 (д, 1 Н, J=12 Гц), 6,09-6,88 (м, 2 Н), 6,69 (д, 1 Н, J=8 Гц), 6,24 (с, 1 Н), 6,14 (д, 1 Н, J=8 Гц), 5,20-5,15 (м, 2 Н), 5,03 (д, 1 Н, J=8 Гц), 4,93-4,90 (м, 1 Н), 4,14 (дд, 1 Н, J₁=4 Гц, J₂=8 Гц), 3,99 (д, 1 Н, J=4 Гц), 3,37-3,69 (м, 2 Н), 3,68 (с, 3 Н), 3,43 (дд, 1 Н, J₁=4 Гц, J₂=8 Гц), 1,98 (с, 3 Н), 1,89 (с, 3 Н), 1,81 (с, 3 Н), 1,38 (с, 3 Н), 1,15 (с, 3 Н), 1,11-1,05 (м, 6 Н), 0,82 (с, 9 Н), 0 (с, 6 Н); МС ИЭР м/з 767 (М+1)⁺.

Качественный анализ соединения 5 представлен на фиг.7.

3. Приготовление соединения PL402

Соединение 5 (306 мг, 0,4 ммоль) было растворено в тетрагидрофуране (8 мл) и уксусной кислоте (16 мкл, 1,12 ммоль), и раствор фторида тетрабутиламмония 1 Μ (TBAF) в тетрагидрофуране (THF) (0,54 мл, 0,54 ммоль) был добавлен с магнитным перемешиванием при комнатной температуре. После реакции при комнатной температуре в течение 3,5 ч реакционный раствор разбавлялась этилацетатом (30 мл), дистиллировался и промывался водой, насыщенным раствором NaHCO₃ и рассолом, а затем высушивался посредством безводного Na₂SO₄. Посредством фильтрации и сушки во вращающемся барабане была получена сырая смесь (253 мг), которая непосредственно использовалась на следующем этапе.

В реакционную колбу, содержащую продукт (235 мг, 0,36 ммоль) из предыдущего этапа был добавлен раствор трифторуксусной кислоты (TFA), растворенной в CH₂Cl₂ (2:25, 5 мл), реакционная смесь помешивалась при комнатной температуре в течение 1 часа, затем помешивание прекращалось. Водосодержащий раствор NaOH (5 мл, 1 М) добавлялся в ванну со льдом для гашения реакции, извлекался с помощью CH₂Cl₂, а затем высушивался посредством безводного Na₂SO₄. Посредством фильтрации и сушки во вращающемся барабане была получена сырая смесь (165 мг), которая непосредственно использовалась на следующем этапе.

Продукт из предыдущего этапа (165 мг, 0,27 ммоль) был растворен в смешанном растворе (8 мл) безводного СН₃ОН и безводного CH₂Cl₂ (1:1), и каталитическая концентрация метилата натрия (0,2 экв.) была добавлена для доведения рН до 9-10. Реакционная смесь помешивалась при 40°С в течение 5 часов, и кислотная катионная смола добавлялась для нейтрализации реакционной смеси. Посредством фильтрации и упаривания был получен белый твердый продукт. Продукт был растворен в воде (1 мл) и очищен посредством хроматографии с обращенной фазой на силикагеле для получения соединения PL402 (78 мг, 0,16 ммоль, выход трех этапов: 40%).

1H ЯМР (400 МГц; MeOD) 7,683 (д, 1 Н, J=15,6 Гц), 7,229 (д, 1 Н, J=1,6 Гц), 7,114 (дд, 1 Η, 1=1,6 Гц, J₂=8 Гц), 6,829 (д, 1 Η, J=8,8 Гц), 6,407 (д, 1 Η, J=15,6 Гц), 6,403 (д, 1 Η, J=1,6 Гц), 5,231 (д, 1 Η, J=1,6 Гц), 3,994 (кв, 1 Η, J=2 Гц), 3,896 (с, 3 Η), 3,880 (с, 1 Η), 3,845-3,831 (м, 1 Η), 3,777-3,700 (м, 2 Η), 3,650-3,621 (м, 2 Η), 3,431-3,408 (м, 1 Η), 1,319 (д, 3 Η, J=6 Гц), 1268 (д, 3 Η, J=6,4 Гц); МС ИЭР м/з 487 (М+1)⁺.

Качественный анализ PL402 представлен на фиг.8.

Пример 2. Синтез соединений PL404 и PL405

1. Приготовление соединения 7

Соединение 6 (12,2 г, 5 ммоль) (Chemistry - A European Journal, 21(29), 10416-10430; 2015), сухое молекулярное сито (20 г) и CH2Cl2 (1,5 л) добавлялись в сухую реакционную колбу, помешивались при комнатной температуре в течение 20 мин и охлаждались до -78°С. Были добавлены раствор фильтрата триметилсилила (TMSOTf) (0,18 мл, 1 ммоль) в CH2Cl2 и соединение 1 (25,6 г, 60 ммоль) (Journal of the American Chemical Society, 2000, том 122, №41, с. 9939-9953) в CH2Cl2 (2,5 л). По прошествии 30 мин для прекращения реакции добавлялся Et3N в объеме 0,5 мл. Реакционный раствор был отфильтрован, упарен и очищен посредством колоночной хроматографии (петролейный эфир:этилацетат = от 10:1 к 3:1) для получения соединения 7 (21,9 г, 42,4 ммоль, выход 85%). МС ИЭР м/з 517 (М+1)⁺.

2. Приготовление соединения 8

Соединение 7 (21,9 г, 42,4 ммоль) было растворено в смешанном растворе (2 л) безводного СН3ОН и безводного CH2Cl2 (1:1), и каталитическая концентрация метилата натрия (0,2 экв.) была добавлена для доведения рН до 9-10. Реакционная смесь помешивалась при 40°С в течение 4 часов, и кислотная катионная смола добавлялась для нейтрализации реакционной смеси. Реакционный раствор был отфильтрован, упарен и очищен посредством колоночной хроматографии (петролейный эфир:этилацетат = от 10:1 к 1:1) для получения соединения 8 (11,6 г, 29,7 ммоль, выход 70%). МС ИЭР м/з 391 (М+1)⁺.

3. Приготовление соединения 9

В трехгорлую колбу емкостью 1 л были добавлены соединеннее (11,6 г, 29,7 ммоль), ацетон (120 мл), п-толуолсульфокислота (116 мг, массовая доля 1%), а затем 2,2-диметоксипропан (9,3 г, 89,4 ммоль). Реакционный раствор был введен в реакцию при 15-20°С, которая длилась 1 час, до тех пор, пока ТСХ не показала, что реакция завершена. Триэтиламин (24 мл) был добавлен в реакционный раствор, затем он был упарен, высушен и очищен посредством колоночной хроматографии (петролейный эфир:этилацетат = от 20:1 до 5:1) для получения соединения 9 (8,9 г, 20,7 ммоль, выход 70%).

МС ИЭР м/з 431 (М+1)⁺.

4. Приготовление соединения 10

В трехгорлую колбу емкостью 1 л были добавлены соединение 9 (8,9 г, 20,7 ммоль), дихлорметан (500 мл) и соединение 4 (9,6 г, 30,2 ммоль). Затем были поочередно добавлены диизопропилэтиламин (10,7 г, 82,9 ммоль), 1-этил-3-3-диметиламинопропил-карбодиимид (7,9 г, 41,1 ммоль),

4-диметиламинопиридин (0,3 г, 2,5 ммоль) и диизопропилэтиламин (6,7 г, 51,9 ммоль). Реакционный раствор помешивался при 15-20°С в течение 18 ч, затем органическая фаза была промыта насыщенным раствором хлорида натрия (50 мл), упарена под пониженным давлением и очищена посредством колоночной хроматографии (петролейный эфир:этилацетат = от 10:1 до 2:1) для получения соединения 10 (10 г, 13,9 ммоль, выход 70%).

МС ИЭР м/з 721 (М+1)⁺.

5. Приготовление соединения 11

В трехгорлую колбу емкостью 500 мл были добавлены THF (100 мл), соединение 10 (10 г, 13,9 ммоль) и соединение TABF (25 мл, раствор 1 моль/л в THF). Реакционная смесь готовилась при 10-20°С до тех пор, пока ТСХ не показала, что реакция завершена. Реакционный раствор был добавлен в воду (200 мл) и извлечен с помощью этилацетата (200 мл * 3). Органические фазы были объединены, промыты насыщенным рассолом (200 мл * 6), высушены посредством безводного сульфата натрия, отфильтрованы, упарены и очищены посредством колоночной хроматографии (петролейный эфир:этилацетат = от 10:1 до 3:1) для получения соединения 11 (4,2 г, 6,9 ммоль, выход 50%).

МС ИЭР м/з 607 (М+1)⁺.

6. Приготовление соединения 12

В трехгорлую колбу емкостью 1 л были добавлены соединение 11 (4,2 г, 6,9 ммоль), уксусная кислота (100 мл), вода (5 мл), NaOAc (37,5 г, 276 ммоль) и PdCl2 (2,0 г, 11.3 ммоль). Реакционный раствор помешивался при 15-20°С в течение 40 ч. Он был отфильтрован, упарен и очищен посредством колоночной хроматографии (петролейный эфир:этилацетат = от 10:1 до 1:1) для получения соединения 12 (2,35 г, 4,2 ммоль, выход 60%).

МС ИЭР м/з 567 (М+1)⁺.

7. Приготовление PL404 и PL405

В трехгорлую колбу емкостью 500 мл были добавлены соединение 12 (2,35 г, 4,2 ммоль), дихлорметан (28 мл) и TFA (2,4 г, 21 ммоль). Реакционный раствор помешивался при 15-20°С в течение 20 мин, был охлажден до 0-5°С, с помощью раствора бикарбоната натрия его уровень рН был доведен до 8-9 единиц, и он был сепарирован. Органическая фаза была упарена и очищена посредством колоночной хроматографии (петролейный эфир:этилацетат = от 20:1 до 1:1) для получения соединений PL404 (273 мг, 0,52 ммоль) и PL405 (200 мг, 0,41 ммоль).

PL404:

1H ЯМР (400 МГц; CDCl3) 7,689 (д, 1 Н, J=15,6 Гц), 7,081 (дд, 1 Н, J1=1,6 Гц, J2=8 Гц), 7,034 (с, 1 Н), 6,936 (д, 1 Н, J=13,6 Гц), 6,339 (д, 1 Н, J=16 Гц), 5,372 (д, 0,7 Н, J=6 Гц), 5,086 (с, 1 Н), 4,99 (д, 0,3 Н, J=6 Гц), 4,86-4,80 (м, 1 Н), 4,768 (д, 0,7 Н, J=6 Гц), 4,695 (д, 0,3 Н, J=6 Гц), 4,609 (д, 0,7 Н, J=6 Гц), 4,524 (д, 0,3 Н, J=6 Гц), 4,028-4,008 (м, 2 Н), 3,981-3,896 (м, 6 Н), 1,446-1,223 (м, 12 Н); МС ИЭР м/з 527 (М+1)⁺.

Качественный анализ PL404 представлен на фиг.9.

PL405:

1H ЯМР (400 МГц; MeOD) 7,67 (дд, 1 Н, J1=4 Гц, J2=8 Гц), 7,21 (с, 1 Н, J=1,6 Гц), 7,09 (дд, 1 Η, J1=1,6 Гц, J2=8 Гц), 6,81 (д, 1 Н, J=8 Гц), 6,43 (дд, 1 Η, J1=4 Гц, J2=12 Гц), 5,26 (д, 1 Н, J=4 Гц), 5,05 (т, 1 Н, J=8 Гц), 5,00 (с, 0,5 Н), 4,72 (с, 0,5 Н), 4,04-4,00 (м, 1 Н), 3,95-3,93 (м, 1 Н), 3,89 (с, 3 Н), 3,88-3,85 (м, 2 Н), 3,77-3,75 (м, 1 Н), 3,55-3,50 (м, 0,5 Н), 3,48-3,45 (м, 1 Н), 3,34-3,31 (м, 0,5 Н), 1,33 (д, 1 Н, J=4 Гц), 1,30 (д, 2 Н, J=4 Гц), 1,27 (д, 3 Н, J=4 Гц); МС ИЭР м/з 487 (М+1)⁺.

Качественный анализ PL405 представлен на фиг.10.

Пример 3. Улучшение способности к обучению и памяти у мышей с моделью болезни Альцгеймера за счет PL402

1. Тест водного лабиринта Морриса

Были отобраны двадцать трансгенных мышей-самцов APP/PS1 (мышей с моделью БА) возрастом 5-6 месяцев и поделены на эталонную и полисахаридную группы согласно методу таблицы случайных чисел. PL402 вводился ежедневно внутрижелудочно (50 мг/кг), а для группы отрицательного контроля (без введения) были использованы 10 нетрансгенных мышей. Через 90 дней последовательного введения для определения эффекта PL402 на способность к обучению и когнитивные функции мышей APP/PS1 был проведен тест водного лабиринта Морриса.

В этом эксперименте была использована стандартная процедура проведения теста водного лабиринта Морриса, которая включает в себя тесты по ориентированию на местности и пространственной ориентации. Продолжительность эксперимента суммарно составила 7 дней, и тест по пространственной ориентации задействовался на 4 и 7 дни.

Согласно результатам, представленным на фиг.1, видно, что во время теста по ориентированию на местности все три группы животных после 3 дней приспособления продемонстрировали ускоренную латентность спасения, что указывает на то, что каждая мышь смогла успешно выполнить задачу по изучению местности. Латентность спасения взята в качестве определяющего показателя.

Результаты продемонстрировали, что мыши в группе отрицательного контроля реагировали быстрее, и им требовалось меньше времени для обнаружения платформы после вхождения в воду. По мере увеличения времени подготовки латентность для достижения платформы сокращалась. Напротив, реакция мышей в эталонной группе была медленной. После вхождения в воду они ходили кругами вдоль стенки сосуда и не демонстрировали попыток к спасению. После того, как их принудительно направили к платформе, они снова спрыгнули в воду. После повторных попыток они, наконец, обнаружили платформу, но время, затраченное на ее поиск, было весьма продолжительным. Способность мышей в группе, принимавшей PL402, находить платформу значительно улучшалась по мере роста количества попыток. Все мыши в этих трех группах обладали определенной пространственной памятью. Латентность при достижении платформы в эталонной группе была дольше, чем в контрольной, что указывает на то, что способность к обучению и запоминанию мышей в эталонной группе была понижена, и эти мыши лучше моделировали проявления нарушений способности к обучению и нарушений памяти при БА. В сравнении с эталонной группой латентность у мышей в группе, принимавшей PL402, показала статистически значительное улучшение, что доказывает, что способности мышей с моделью БА к обучению и запоминанию после введения PL402 значительно улучшились.

2. Лечение 5-бром-2-дезоксиуридином (BrdU)

При проведении эксперимента с введением препарата каждой мыши с моделью БА в возрасте 5-6 месяцев внутрижелудочно ввели 100 мкл PL402 в дозировке 50 мг/кг массы тела. Была установлена контрольная группа, и мышам раз в день вводили 100 мкл воды внутрижелудочно. Введение продолжалось в течение 90 дней, а также с 60 дня раз в день выполнялась внутрибрюшинная инъекция 5-бром-2-дезоксиуридина (BrdU) в дозировке 50 мг/кг массы тела суммарно в течение 7 дней. После 90 дней введения мыши были усыплены, а затем подвержены перфузии параформальдегидом (ПФА), после чего для дальнейших экспериментов у них был целиком извлечен мозг.

Пример 4. Подавление нейровоспаления за счет PL402

Нейровоспаление мозга при БА - одна из причин снижения когнитивных способностей. Микроглия - это ключевые клетки, переносящие нейровоспаление. Авторами изобретения было проведено исследование эффективности PL402 при подавлении нейровоспаления посредством обнаружения проявления факторов аллергического воспаления в мышиных клетках BV-2.

Выращивание клеток BV-2 и стимуляция: клетки BV-2 выращивались в среде DMEM, были посеяны на 24-луночный планшет и выращивались в течение 24 часов. Затем было добавлено соединение PL402 (0, 10, 30, 100 или 300 мкМ) и ЛПС (300 нг/мл), а затем в течение 24 ч выполнялась инкубация. С помощью Тризола была экстрагирована РНК, и посредством кПЦР были установлены проявления факторов аллергического воспаления.

Результаты показывают, что лечение соединением PL402 может значительно подавлять проявления факторов аллергического воспаления IL-6 и IL-1β, как представлено на фиг.2.

Пример 5. Снижение продуцирования Αβ за счет PL402

Αβ - основной патогенный белок при БА. Авторы провели исследование наличия эффекта соединения PL402 на подавление продуцирования Αβ путем определения уровня Αβ в клетках нейробластомы SK-N-SH (которые могут секретировать Αβ).

Выращивание клеток SK-N-SH и определение Αβ: клетки SK-N-SH выращивались в среде DMEM, были посеяны на 24-луночный планшет и выращивались в течение 24 часов. Затем было добавлено соединение PL402 (0, 10, 30, 100 или 300 мкМ), а затем в течение 24 ч выполнялась инкубация. Был собран супернатант и посредством теста ELISA определен общий уровень белка Αβ.

Результаты показывают, что лечение соединением PL402 может значительно подавлять продуцирование Αβ, как представлено на фиг.3. Эффект подавления наиболее силен при концентрации PL402, равной 100 мкМ.

Пример 6. Эффект PL404 на способность к обучению и запоминанию у животных

Для определения эффекта PL404 на способности животных к обучению и запоминанию были выполнены подбор животных и проведение теста водного лабиринта Морриса, описанные в примере 3.

Результаты приведены на фиг.4. Латентность мышей в группе, принимавшей PL402, значительно отличалась от таковой в эталонной группе, и эта разница значительна статистически.

Таким образом, способности мышей с моделью БА к обучению и запоминанию после введения PL404 значительно улучшились.

Пример 7. Эффект PL404 на пролиферацию нейральных клеток-предшественниц человека

Авторы изобретения провели исследования наличия эффекта PL404 на содействие пролиферации посредством определения инкорпорации EdU в нейральной клетке-предшественнице человека (дифференциация посредством индуцированных плюрипотентных стволовых клеток). Дозировка PL404 составляла 0, 1,3, 10, 30 или 100 мкМ.

Результаты приведены на фиг.5. Результаты показывают, что лечение соединением PL404 может значительно содействовать пролиферации нейральных клеток-предшественниц человека. В сравнении с контрольной группой, не подвергнутой лечению соединением PL404, уровень пролиферации нейральных клеток-предшественниц человека повысился на 30%.

Пример 8. Эффект PL405 на пролиферацию нейральных клеток-предшественниц человека

Был применен способ, аналогичный представленному в примере 7, за исключением того, что соединение PL404 было заменено соединением PL405, и посредством определения инкорпорации EdU в нейральной клетке-предшественнице человека было проведено исследование наличия эффекта соединения PL405 на содействие пролиферации.

Результаты приведены на фиг.6. Результаты показывают, что лечение соединением PL405 может значительно содействовать пролиферации нейральных клеток-предшественниц человека. В сравнении с контрольной группой при лечении соединением PL405 уровень пролиферации нейральных клеток-предшественниц человека повысился приблизительно на 60%.

Все документы, указанные согласно настоящему изобретению, в настоящей заявке противопоставляются в виде ссылок так, как если бы каждый документ приводился в виде противопоставленной ссылки. Кроме того, также следует понимать, что после ознакомления с описанием настоящего изобретения специалистом в этой области техники в него могут быть внесены различные изменения или модификации, и эти эквиваленты также будут укладываться в объем, определяемый прилагаемой формулой изобретения по настоящей заявке.

Изобретение относится к области биотехнологии. Описана группа изобретений, включающая соединение, представленное формулой (I) или его фармацевтически приемлемой солью

(I),

применение соединения, представленного формулой (I) или его фармацевтически приемлемой соли, при приготовлении лекарств или комплектов для предотвращения, облегчения или лечения нейродегенеративных заболеваний, депрессии или приступа, применение соединения, представленного формулой (I) или его фармацевтически приемлемой соли, при приготовлении композиций, наборов или комплектов для снижения подавления нейровоспаления, применение соединения, представленного формулой (I) или его фармацевтически приемлемой соли, при приготовлении композиций, наборов или комплектов для содействия продуцированию нейральных клеток-предшественниц, применение соединения, представленного формулой (I) или его фармацевтически приемлемой солью, при приготовлении композиций, наборов или комплектов для снижения продуцирования Aβ, фармацевтическую композицию для предотвращения, облегчения или лечения болезни Альцгеймера и способ предотвращения, облегчения или лечения нейродегенеративных заболеваний, депрессии, вызванной нейродегенеративным заболеванием или приступа нейродегенеративного заболевания. Изобретение расширяет арсенал средств для предотвращения, облегчения или лечения нейродегенеративных заболеваний. 7 н. и 5 з.п. ф-лы, 10 ил., 8 пр.

1. Соединение, представленное формулой (I) или его фармацевтически приемлемой солью,

,

отличающееся тем, что в имеется циклическая структура, выбранная из группы, состоящей из

R1-R4 каждое по отдельности подбираются из числа водорода, гидроксила, С1-С4 алкила, С2-С4 алкенила, С2-С4 алкинила и галогена, или же две соседние группы R1-R4 связаны друг с другом для образования пятичленного кольца с основным кольцом, пятичленное кольцо представляет собой гетероциклическое кольцо, содержащее два атома кислорода;

при этом в имеется циклическая структура

R1'-R3' каждое по отдельности подбираются из числа водорода, гидроксила, С1-С4 алкила, С2-С4 алкенила, С2-С4 алкинила и галогена.

2. Соединение по п. 1, представленное формулой (I) или его фармацевтически приемлемой солью, отличающееся тем, что

R1-R4 каждое по отдельности подбираются из числа водорода, гидроксила и С1-С2 алкила, или же две соседние группы R1-R4 связаны друг с другом для образования пятичленного кольца с основным кольцом, пятичленное кольцо представляет собой гетероциклическое кольцо, содержащее два атома кислорода; и

R1'-R3' каждое по отдельности подбираются из числа водорода, гидроксила и С1-С2 алкила.

3. Соединение по п. 1, представленное формулой (I) или его фармацевтически приемлемой солью, отличающееся тем, что включает

4. Применение соединения по любому из пп. 1-3, представленного формулой (I) или его фармацевтически приемлемой солью, при приготовлении лекарств или комплектов для предотвращения, облегчения или лечения нейродегенеративных заболеваний, депрессии или приступа.

5. Применение по п. 4, отличающееся тем, что нейродегенеративные заболевания представлены

нейродегенеративными заболеваниями, характеризующимися значительным нейровоспалением в мозге; или

нейродегенеративными заболеваниями, характеризующимися значительным повышением продуцирования Aβ; или

нейродегенеративными заболеваниями, характеризующимися значительным снижением способности к обучению и ухудшением памяти; или

нейродегенеративными заболеваниями, характеризующимися значительным снижением количества нейральных клеток-предшественниц.

6. Применение по п. 5, отличающееся тем, что нейродегенеративные заболевания включают болезнь Альцгеймера, болезнь Паркинсона, деменцию с тельцами Леви, болезнь Хантингтона и амиотропический латеральный склероз.

7. Применение соединения по любому из пп. 1-3, представленного формулой (I) или его фармацевтически приемлемой солью, при приготовлении композиций, наборов или комплектов для снижения подавления нейровоспаления.

8. Применение соединения, представленного формулой (I) по любому из пп. 1-3 или его фармацевтически приемлемой солью, при приготовлении композиций, наборов или комплектов для содействия продуцированию нейральных клеток-предшественниц.

9. Применение соединения, представленного формулой (I) по любому из пп. 1-3 или его фармацевтически приемлемой солью, при приготовлении композиций, наборов или комплектов для снижения продуцирования Aβ.

10. Фармацевтическая композиция для предотвращения, облегчения или лечения болезни Альцгеймера, включающая:

соединение, представленное формулой (I) по любому из пп. 1-3 или его фармацевтически приемлемой солью; и

фармацевтически приемлемый носитель.

11. Фармацевтическая композиция по п. 10, отличающаяся тем, что лекарственные формы фармацевтической композиции включают в себя: гранулят, порошок, таблетки, пилюли, капсулы, препараты с замедленным высвобождением, препараты с контролируемым высвобождением, инъекции, инфузионные растворы или суспензии.

12. Способ предотвращения, облегчения или лечения нейродегенеративных заболеваний, депрессии, вызванной нейродегенеративным заболеванием или приступа нейродегенеративного заболевания, включающий введение эффективного количества соединения, представленного формулой (I) по любому из пп. 1-3 или его фармацевтически приемлемой солью, нуждающемуся в нем пациенту.