СРЕДСТВО ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ ЛУЧЕВОЙ БОЛЕЗНИ Российский патент 2023 года по МПК A61K9/08 A61K31/115 A61P37/02 A61P39/00 

Описание патента на изобретение RU2797586C1

Изобретение относится к области экспериментальной медицины и касается радиационной биологии, может быть использовано для лечения лучевой болезни, вызываемой внешним облучением.

Известно средство противолучевой защиты из крови млекопитающих на основе протеинов (см. патент РФ № 2108792 по кл. МПК A61K35/14, опуб. 20.04.1998), представляющее собой белково-пептидную смесь, полученную в результате обработки исходного сырья 40-96%-ным раствором этилового спирта, дополнительно наполнитель и минерально-органическую добавку из минерализованных рассолов Верхне-Юрских геологических пород, представляющих собой SH - группы, ненасыщенные карбоновые кислоты, полифенолы, хромофоры, оксикислоты, гуминовые и сульфоновые кислоты, пуриновые и пиримидиновые основания, а также следующие вещества: Si, Ca+, Na+, K+, S, Se в отдельности или в сочетании. Изготавливается в виде сублингвальных таблеток, растворов для инъекций или других лекарственных форм. Средство принимают за один час до облучения в количестве 5⋅10-4- 4,5⋅10-1к/кГ массы тела. После облучения препарат продолжают принимать еще в течение десяти дней в количестве 2,0⋅10-3 - 4,5⋅10-1 г/кГ массы тела рег OS. В качестве исходного продукта для приготовления белково-пептидной фракции используют кровь млекопитающих, так как она доступна на любом мясоперерабатывающем предприятии.

Препарат был испытан на 7 добровольцах-медиках во время служебной командировки в загрязненную радионуклидами зону. Возраст испытуемых колебался от 36 до 50 лет (5 женщин и 2 мужчин).

Однако препарат многокомпонентен, трудоемок в изготовлении, требует специальных навыков и привлечения специалистов для получения белково-пептидной фракции. Все это приводит к существенному увеличению себестоимости готового препарата.

Известно средство для профилактики лучевой болезни, вызываемой внешним облучением (см. патент РФ № 2599844 по кл. МПК А61К31/433, опуб. 20.10.2016), заключающееся в применении тизанидина - 5-Хлор-4-(2-имидазолин-2-ил-амино)-2,1,3-бензотиадиазола гидрохлорида в виде официальных лекарственных препаратов «Тизанидин Тева», «Сирдалуд» и «Тизалуд». Средство применяют перорально в виде таблеток, что позволяет в 4-6 раз ускоряет радиозащитный эффект по сравнению с цистамином.

Однако, указанные препараты достаточно дороги, а профилактический эффект сопоставим с действием цистамина (30-суточная выживаемость порядка 28-40%) - широко применяемого противорадиационного средства. (см., например, https://habr.com/ru/post/397639/).

Известно также средство для лечения острого лучевого поражения в эксперименте (см. патент РФ № 2770991 по кл. МПК А61К36/15, опуб. 25.04.2022), содержащее очищенный скипидар, который вводят внутривенно крысам в дозе 0,25 мл на 1 кг массы тела двукратно: через час и через 24 часа после тотального гамма-облучения 60Cо. Применение очищенного скипидара для внутривенных инъекций широко известно в ветеринарной практике. В частности, для лечения крупозной пневмонии и гангрены легких применяют внутривенно смесь скипидара, этилового спирта и дистиллированной воды в соотношении 1:10:40 (Царев С.Г. Лекарственные средства в ветеринарии. М.: «Россельхозиздат», 1967. С. 101-102).

Однако, внутривенное применение очищенного скипидара в больших дозах может привести к развитию гастроэнтерита (см., например, http://www.cnshb.ru/AKDiL/0031/base/RM/000572.shtm). Кроме этого, при случайном попадании препарата под кожу развивается воспаление с образованием асептического “абсцесса”.

Наиболее близким к заявляемому является иммуномодулирующее средство для инъекций, содержащее активное начало и целевые добавки (см. патент РФ № 2077882 по кл. МПК А61К 31/115, опуб. 27.04.1997). В качестве активного начала оно содержит формальдегид, а в качестве целевых добавок хлорид натрия (NaCl) и дистиллированную воду, при этом оно представляет собой инъекционный раствор, содержащий, мас.%: формальдегид 0,07 0,24, NaCl 0,9 0,95, дистиллированная вода - остальное до 100%.

Приведенные аналоги показывают, что создание средств для лечения лучевой болезни является далеко не решенной задачей. Поэтому поиск новых средств весьма актуален.

Технической проблемой заявляемого изобретения является создание эффективного и простого в применении средства для лечения лучевой болезни в эксперименте.

Техническим результатом является обеспечение радиопротекторного действия средства за счет его способности активизировать систему репарации клеток.

Техническая проблема достигается применением иммуномодулирующего средства, содержащего муравьиный альдегид в количестве 0,073-0,075% в изотоническом растворе хлорида натрия 0,85-0,95%-ной концентрации в качестве средства для внутримышечных инъекций для лечения лучевой болезни в эксперименте.

Известно, что естественный метаболит - альдегид муравьиной кислоты используется для иммунокоррекции при различных нарушениях иммунного статуса организма (см. патент РФ № 2077882), для лечения вирусных инфекций (см. патент РФ № 2146134), в качестве холестеринорегулирующего средства (см. патент РФ № 2352331), для активизации собственных стволовых клеток организма (см. патент РФ № 2376985).

Известно (см., например, Рыбкина, В.Л. Влияние хронического облучения на некоторые показатели иммунитета / В.Л. Рыбкина, Т.В. Азизова, В. Майнеке [и др.] Иммунология. - 2015. - Т. 36, № 3. - С. 145-149), что иммунная система является одной из наиболее чувствительных к радиационному облучению, а при лучевой болезни деление иммунных клеток нарушается в первую очередь. Заявляемый препарат обладает способностью нормализации процесса деления клеток, в том числе - антителпродуцирующих клеток в селезенке.

До настоящего времени неизвестно использование препарата на основе муравьиного альдегида для лечения лучевой болезни лабораторных животных за счет способности препарата активизировать систему репарации клеток, что позволяет сделать вывод о наличии «изобретательского уровня» в заявляемом решении.

Водный раствор муравьиного альдегида (альдегид муравьиной кислоты) - прозрачная бесцветная жидкость со своеобразным острым запахом, смешивающаяся с водой и спиртом во всех соотношениях.

Муравьиный альдегид - представитель класса альдегидов НСОН. Представляет собой бесцветный газ с резким запахом, мол. массой 30,03, плотность его при 20°С равна 0,815, температура плавления 92°С, температура кипения 19,2°С. Хорошо растворим в воде, спирте.

Изотонический раствор натрия хлорида для инъекций - бесцветная прозрачная жидкость солоноватого вкуса. Раствор стерилен, апирогенен.

Хлорид натрия (NaCl) - кубические кристаллы или белый кристаллический порошок соленого вкуса, без запаха. Растворим в воде (1:3).

Заявляемое средство представляет собой прозрачную бесцветную жидкость без запаха слегка солоноватого вкуса.

Средство готовят следующим образом.

Берут 2 весовых части 36,5-37,5%-ного медицинского раствора муравьиного альдегида, добавляют его в 998 весовых частей стерильного 0,85-0,95%-ного раствора хлорида натрия для инъекций до получения 0,073-0,075%-ного раствора альдегида. Средство хранят в темном месте при температуре 15-35°С.

Лечебную противолучевую эффективность препарата изучали в опыте на 35 мышах линии СВА обоего пола массой 19-21 г. Животные содержались в стандартных условиях виварии при одинаковом уходе, на постоянной диете и при свободном доступе к воде. В группы брали по 7 животных (14 контрольных и 21 опытных). Контрольной группе животных вместо исследуемого соединения тем же способом вводили эквивалентное количество растворителя.

Для моделирования острого радиационного воздействия на экспериментальных животных облучали на установке ИГУР (МЭД - 5,0 Р/мин) в дозе 50 сГр. Уровень моделируемой иммуносупрессии сравнивали с уровнем иммунного ответа у необлученных животных.

Исследуемый препарат вводили внутримышечно однократно, на пятые сутки после облучения, в дозах 1,25 - 5,0 мл/кг. Одновременно с введением препарата животных иммунизировали эритроцитами барана (1,5 х 10 клеток на животное). По общепринятой методике определяли относительное и абсолютное содержание антителопродуцирующих клеток в селезенке экспериментальных животных, вычисляли индексы массы селезенки и определяли титры гемагглютининов в сыворотке крови.

Полученные данные обрабатывали методом математической статистики применительно к фармакологическому эффекту с вычислением средней арифметической величины и ее стандартной ошибки. Достоверность сравниваемых величин (р) оценивали по критерию 1 Стьюдента.

Установлено, что в случае облучения мышей линии СВА в дозе 50 сГр наблюдается более чем пятидесятипроцентное угнетение ответной иммунной реакции гуморального типа на модели первичного иммунного ответа к эритроцитам барана. При этом абсолютное содержание антителообразующих клеток (АОК) в селезенке иммунизированных животных снижается с 52,4 ± 4,9 в необлученной группе до 23,1 ± 2,4 в контрольной группе, подвергнутой воздействию лучевого фактора (таблица 1). Указанный параметр в полной мере коррелирует с динамикой относительного количества антителопродуцентов, снижающегося, соответственно с 486,3 ± 32,7 до 229,7 ± 19,2 (-53%).

Угнетение иммунного статуса животных происходит на фоне маловыраженных подвижек показателя селезеночного индекса (р>0,05), что свидетельствует об относительной стабильности уровня клеточности исследуемого иммунокомпетентного органа в данных экспериментальных условиях. Очевидно, что воздействие γ-квантов при этом реализуется на субклеточном уровне, выражаясь в нарушении функционирования рецепторных структур, ответственных за взаимодействие макрофагов с антигенным стимулом и презентацию антигена, примированного клетками мононуклеарной фагоцитирующей системы.

Введение препарата 1 группе мышей в дозе 1,25 мл/кг (0,025 мл/мышь) обусловливает увеличение относительного и абсолютного содержания антителопродуцентов соответственно с 229,7 ± 19,2 до 463,3 ± 38,2 (+102%) и с 23,1 ± 2,4 до 47,8 ± 4,0 (+107%). Однако эти при этом показатели не достигают уровня иммуногенеза, регистрируемого у животных необлученной группы (таблица 1).

При использовании в 2 раза большей иммунотерапевтической дозы (2 группа, 0,05 мл/мышь) достигается увеличение иммунного ответа в 2,3 раза по сравнению с нелеченными животными против двукратного иммунопотенцирования в первом опыте данной серии.

Результаты, полученные в случае двукратного увеличения дозы препарата, знаменательны тем, что именно в этой серии эксперимента удалось добиться не только отмены иммуносупрессии, вызванной ионизирующим излучением, но и несколько превысить фоновые показатели иммуногенеза. Так, относительное число антителообразующих клеток увеличилось на 130% по сравнению с негативным контролем (529,3 ±35,1 в опыте, 229,7 ± 19,2 в контроле), абсолютное количество антителообразующих клеток в селезенке возросло на 125% (51,9 ± 4,3 в опыте, 21,1 ± 2,4 в контроле). Таким образом, выраженность иммунопотенцирующего эффекта препарата на модели иммуносупресии, индуцированной γ - излучением, носит дозозависимый характер.

При введении препарата в дозе 2,5 мл/кг (2 группа) наблюдаемые уровни относительного (529,3 ± 35,1) и абсолютного (51,9 ± 4,3) содержания антителопродуцентов в селезенке мышей свидетельствуют о том, что произошла полная компенсация иммунодефицитного состояния, индуцированного сублетальной дозой у- излучения.

Увеличение дозы препарата до 5,0 мл/кг (3 группа, 0,1 мл/мышь) сопровождается дальнейшим нарастанием иммунокорригирующего эффекта. Важно отметить, что достигаемые при этом уровни относительного (667,2 + 41,1) и абсолютного (66,3 ± 5,6) количества АОК в селезенке превосходит соответствующие показатели у животных не только контрольной, но и необлученной (фоновой) группы. Вычисления показывают, что при введении максимальной испытанной доза иммуномодулятора относительное число антителопродуцентов увеличивается в 1,4 раза по сравнению с интактными контрольными животными и в 2,9 раза по сравнению с нелеченными «иммунодефицитными» мышами. Полученные результаты свидетельствуют о высокой способности препарата коррегировать иммуногенез у облученных мышей. Причем усиление ответной иммунной реакции на Т-зависимый антиген под влиянием испытуемого препарата имеет дозозависимый характер, а наибольшая выраженность эффекта достигается в случае введения препарата в дозе 5 мл/кг (0,1 мл/мышь).

Таким образом, препарат дозозависимо корригирует иммуносупрессию у мышей линии СВА, индуцированную облучением животных γ-квантами в дозе 50 сГр.

Таблица 1. Влияние препарата на развитие иммуносупрессии у мышей линии СВА, вызванного воздействием лучевого фактора (х ±, n = 7) Группы животных Фон (ничего не вводили и не облучали) Контроль 1 группа 2 группа 3 группа Доза введения препарата, мл/кг, в/м - - 1,25 2,50 5,00 Количество АОК на 106 спленоцитов 486,3 ± 32,7 229,7 ± 19,2 463,3 ± 38,2 529,3 ± 35,1 667,2 ± 41,1 % эффекта,
Р
- -53 +102 <0,001 +130 <0,001 +190 <0,001
Кол-во АОК на селезенку (х 103) 52,4 ± 4,9 23,1 ±2,4 47,8 ± 4,0 51,9 ±4,3 66,3 ± 5,6 % эффекта,
Р
- -56 +107 <0,01 +125 <0,001 +187 <0,001
Селезеночный индекс 5,3 ± 0,3 4,8 ± 0,2 5,0 ± 0,2 5,2 ± 0,4 5,3 ± 0,3 % эффекта,
Р
- -9 >0,05 >0,05 +10 >0,05
Титры гемагглютининов 8,7 ± 0,2 8,7 ±0,1 8,6 ± 0,2 8,5 ± 0,2 8,4 ± 0,3 % эффекта,
Р
- >0,05 >0,05 >0,05

Заявляемое средство удовлетворяет критерию «новизна», так как впервые предложено использовать иммуномодулирующее средство на основе муравьиного альдегида в качестве радиопротектора.

Заявляемое средство соответствует критерию «изобретательский уровень», так как на основании доступной информации целесообразность использования заявляемого средства для лечения лучевой болезни не представляется очевидной.

Похожие патенты RU2797586C1

название год авторы номер документа
СРЕДСТВО ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ СЕРДЕЧНО-СОСУДИСТЫХ И ЦЕРЕБРОВАСКУЛЯРНЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ 2020
  • Ласкавый Владислав Николаевич
  • Хабердар, Аслан Явуз
RU2790663C1
СРЕДСТВО ДЛЯ КОРРЕКЦИИ МИТОХОНДРИАЛЬНОЙ ДИСФУНКЦИИ 2021
  • Ласкавый Владислав Николаевич
  • Шурдов Михаил Аркадьевич
RU2765467C1
КОМПОЗИЦИЯ ДЛЯ ПОДДЕРЖАНИЯ НОРМАЛЬНОГО СОСТОЯНИЯ ГОМЕОСТАЗА И ПРЕПАРАТ НА ЕЁ ОСНОВЕ 2021
  • Ласкавый Владислав Николаевич
RU2784067C1
СРЕДСТВО ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ КОРОНАВИРУСНЫХ, РЕТРОВИРУСНЫХ ИНФЕКЦИЙ И ГЕПАТИТА С 2020
  • Ласкавый Владислав Николаевич
  • Шурдов Михаил Аркадьевич
RU2738719C1
СРЕДСТВО ДЛЯ ПОВЫШЕНИЯ РЕПРОДУКТИВНОЙ ФУНКЦИИ 2019
  • Флорова Марина Александровна
  • Ласкавый Владислав Николаевич
  • Сафиуллин Хайдар Ахметсабирович
RU2728709C1
СРЕДСТВО, ОБЛАДАЮЩЕЕ ХОЛЕСТЕРИНОРЕГУЛИРУЮЩИМ ДЕЙСТВИЕМ 2007
  • Ласкавый Владислав Николаевич
  • Шохин Александр Николаевич
  • Иваненко Сергей Иванович
RU2352331C1
СРЕДСТВО ДЛЯ АКТИВАЦИИ СТВОЛОВЫХ КЛЕТОК 2008
  • Ласкавый Владислав Николаевич
  • Горюнов Дмитрий Владимирович
RU2376985C1
СРЕДСТВО ДЛЯ ПРОФИЛАКТИКИ ЛЕЙКОЗА КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА И СПОСОБ ЕГО ПРИМЕНЕНИЯ 2016
  • Ласкавый Владислав Николаевич
RU2631607C1
ДИНАТРИЕВАЯ СОЛЬ N-(6-МЕТИЛ-2,4-ДИОКСО-1,2,3,4-ТЕТРАГИДРО-5H-ПИРИМИДИНСУЛЬФОН)-N'- ИЗОНИКОТИНОИЛГИДРАЗИДА, ПРОЯВЛЯЮЩАЯ АНТИМИКРОБНУЮ И ИММУНОТРОПНУЮ АКТИВНОСТЬ, И ЛЕКАРСТВЕННОЕ СРЕДСТВО НА ЕЕ ОСНОВЕ 1999
  • Голощапов Н.М.
  • Филипских Т.П.
  • Костюк Л.Е.
  • Голощапова Е.Н.
  • Мичурина Е.А.
  • Решетов А.Л.
  • Заварзин А.А.
RU2191015C2
СРЕДСТВО, ОБЛАДАЮЩЕЕ ИММУНОСТИМУЛИРУЮЩИМ ДЕЙСТВИЕМ 2009
  • Борсук Ольга Сергеевна
  • Шерстобоев Евгений Юрьевич
  • Масная Наталья Владимировна
  • Звягина Анна Викторовна
  • Исайкина Надежда Валентиновна
  • Калинкина Галина Ильинична
RU2403054C1

Реферат патента 2023 года СРЕДСТВО ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ ЛУЧЕВОЙ БОЛЕЗНИ

Изобретение относится к области медицины, а именно к терапии и радиационной биологии, и предназначено для лечения острой лучевой болезни. Применяют иммуномодулирующее средство, содержащее муравьиный альдегид в количестве 0,073-0,075% в изотоническом растворе хлорида натрия 0,85-0,95%-ной концентрации, в качестве средства для внутримышечных инъекций для лечения острой лучевой болезни. Использование изобретения обеспечивает радиопротекторное действие средства за счет его способности активизировать систему репарации клеток. 1 табл.

Формула изобретения RU 2 797 586 C1

Применение иммуномодулирующего средства для внутримышечных инъекций, содержащего активную часть в виде муравьиного альдегида в количестве 0,073-0,075% и добавку в виде изотонического раствора хлорида натрия для инъекций 0,85-0,95%-ной концентрации - остальное, в качестве средства для лечения острой лучевой болезни.

Документы, цитированные в отчете о поиске Патент 2023 года RU2797586C1

ИММУНОМОДУЛИРУЮЩЕЕ СРЕДСТВО 1995
  • Ласкавый Владислав Николаевич
  • Рыбин Владимир Васильевич
RU2077882C1
СРЕДСТВО РАННЕЙ ПАТОГЕНЕТИЧЕСКОЙ ТЕРАПИИ ОСТРОЙ ЛУЧЕВОЙ БОЛЕЗНИ 2003
  • Плужников Николай Николаевич
  • Легеза Владимир Иванович
  • Галеев Игорь Шарифович
  • Магира Валерий Федорович
  • Андросов Николай Сергеевич
  • Родионов Геннадий Георгиевич
  • Турлаков Юрий Сергеевич
  • Селезнев Алексей Борисович
  • Чигарева Наталия Григорьевна
  • Зиновьев Евгений Владимирович
RU2281092C2
СПОСОБ ЛЕЧЕНИЯ ОСТРОЙ ЛУЧЕВОЙ БОЛЕЗНИ 2008
  • Бударков Виктор Алексеевич
  • Суркова Ольга Валерьевна
  • Кудряшов Юрий Борисович
  • Куренков Дмитрий Валерьевич
RU2385731C1
СПОСОБ ЛЕЧЕНИЯ ЛУЧЕВОЙ БОЛЕЗНИ У ЖИВОТНЫХ 1991
  • Костеша Н.Я.
RU2077888C1
СРЕДСТВО ЛЕЧЕНИЯ ОСТРОЙ ЛУЧЕВОЙ БОЛЕЗНИ 2005
  • Иванов Александр Александрович
  • Уланова Алла Михайловна
  • Дешевой Юрий Борисович
  • Мальцев Вячеслав Николаевич
RU2294755C1

RU 2 797 586 C1

Авторы

Ласкавый Владислав Николаевич

Даты

2023-06-07Публикация

2022-06-24Подача