ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИ, К КОТОРОЙ ОТНОСИТСЯ ИЗОБРЕТЕНИЕ
Настоящее изобретение относится к соединениям формул I, II или III и их фармацевтически приемлемым солям, к фармацевтическим композициям, включающим такие соединения и соли, и их применению. Соединения, соли и композиции по настоящему изобретению могут применяться для лечения или облегчения состояний, связанных с нарушением нормальной пролиферации клеток, таких как рак.
УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ
Гематопоэтическая киназа-предшественница 1 (HPK1), также известная как митоген-активируемая протеинкиназа-киназа-киназа 1 (MAP4K1), является представителем Ste20-подобного семейства серин/треониновых киназ млекопитающих, которая действует через сигнальные пути JNK и ERK. HPK1 в основном экспрессируется в кроветворных органах и клетках (например, Т-клетках, В-клетках и дендритных клетках), что предполагает потенциальное участие HPK1 в регуляции передачи сигналов в гемопоэтических клеточных линиях, включая лимфоциты. (Shui, et al, "Hematoppietic progenitor kinase 1 negatively regulates T cell receptor signaling and T cell-mediated immune responses", Nature Immunology 8, 84-91 (2006)). Например, после активации Т-клеточного рецептора (TCR), киназа HPK1 используется для плазматической мембраны, что приводит к полной активации киназы. Эта полная активация киназы приводит к фосфорилированию HPK1 адапторного белка SLP76, что в конечном итоге приводит к дестабилизации сигнального комплекса TCR, который препятствует последующим событиям передачи сигналов митоген активированной протеин (MAP) киназы, необходимых для активации и пролиферации Т-клеток. (Hernandez, et al., "The kinase activity of hematopoietic progenitor kinase 1 is esential for the regulation of T cell function", Open Cell Reports 25, 80-94, October 2, 2018). Кроме того, было показано, что киназа HPK1 негативно регулирует активацию сигнального пути Т-клеток рецептором PGE2 PKA-зависимым образом. Кроме того, сообщалось, что киназа HPK1 играет определенную роль: i) в индуцированной активацией гибели клеток (AICD) и активации JNK; ii) в регуляции активации интегрина антигена-1 (LFA-1), ассоциированного с функцией лейкоцитов, на Т-клетках путем прямой конкуренции с адаптерным белком, способствующим адгезии и дегрануляции (ADAP), за связывание SH2-домена SLP76; и iii) в регуляции активации через активацию сигнального пути ядерного фактора кB (NF- кB) посредством взаимодействия с IKK-α и IKK-β. Исследования также показали, что HPK1 негативно регулирует активацию сигнального пути киназы MAP и транскрипцию Ap-1 в Т-клетках. (Hernandez, et al. 2018).
Проведенные к настоящему времени исследования на киназах HPK1, показывают, что HPK1 играет определенную роль в усилении Т-клеточных ответов и повышении противоопухолевого иммунитета.
СУЩНОСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ
В настоящем изобретении предлагаются, помимо всего прочего, соединения формул I, II и III и их фармацевтически приемлемые соли. Такие соединения могут ингибировать активность киназы HPK1, тем самым влияя на биологические функции. Кроме того, предлагаются фармацевтические композиции и лекарственные препараты, содержащие соединения или соли по изобретению, сами по себе или в комбинации с дополнительными противораковыми терапевтическими средствами или паллиативными средствами.
В настоящем изобретении также предлагаются, помимо всего прочего, способы получения соединений, фармацевтически приемлемых солей и композиций по настоящему изобретению, а также способы их применения.
В одном варианте осуществления, в изобретении предлагается соединение формулы I:
или его фармацевтически приемлемая соль, где
R1 выбирают из группы, состоящей из водорода, галогена, (C1-C6)алкила, галоген(C1-C6)алкила, (C1-C6)алкокси, галоген(C1-C6)алкокси, -N(R6)(R7) и (C3-C6)циклоалкила, где указанный (C1-C6)алкил, галоген(C1-C6)алкил, и (C3-C6)циклоалкил необязательно замещены с помощью от одного до трех заместителей, выбранных из группы, состоящей из галогена, гидрокси, циано, (C1-C6)алкила и (C1-C6)алкокси;
R6 и R7 каждый независимо выбирают из группы, состоящей из водорода и (C1-C6)алкила, где указанный (C1-C6)алкил необязательно замещен с помощью от одного до трех заместителей, выбранных из группы, состоящей из галогена, (C1-C6)алкокси, циано и гидрокси, или R6 и R7, взятые вместе с азотом, к которому они присоединены, образуют (4-8-членный)гетероциклоалкил, который необязательно замещен с помощью от одного до трех заместителей, выбранных из группы, состоящей из галогена, (C1-C6)алкила, галоген(C1-C6)алкила, (C1-C6)алкокси и галоген(C1-C6)алкокси, где указанный (C1-C6)алкил и галоген(C1-C6)алкил необязательно замещены с помощью от одного до трех заместителей, выбранных из группы, состоящей из галогена, гидрокси, циано, (C1-C6)алкила и (C1-C6)алкокси;
R1a выбирают из группы, состоящей из водорода и галогена;
R2 представляет собой
i) -(CH2)mN(R8)(R9), где m представляет собой целое число, выбранное из 0, 1, 2 или 3, и R8 и R9 каждый независимо выбирают из группы, состоящей из водорода и (C1-C6)алкила, где указанный (C1-C6)алкил необязательно замещен с помощью от одного до трех заместителей, выбранных из группы, состоящей из галогена, (C1-C6)алкокси, циано и гидрокси, или R8 и R9, взятые вместе с азотом, к которому они присоединены, образуют (4-6-членный)гетероциклоалкил, который необязательно замещен с помощью от одного до трех заместителей, выбранных из группы, состоящей из галогена, гидрокси, (C1-C6)алкила, галоген(C1-C6)алкила, (C1-C6)алкокси и галоген(C1-C6)алкокси, где указанный (C1-C6)алкил и галоген(C1-C6)алкил необязательно замещены с помощью от одного до трех заместителей, выбранных из группы, состоящей из галогена, гидрокси, циано и (C1-C6)алкокси;
ii) (C1-C6)алкил, где указанный (C1-C6)алкил необязательно замещен с помощью от одного до трех заместителей, выбранных из группы, состоящей из галогена, (C1-C6)алкокси, -N(R6)(R7), циано и гидрокси, где R6 и R7 каждый независимо выбирают из группы, состоящей из водорода и (C1-C6)алкила; или
iii) (4-6-членный)гетероциклоалкил, где указанный гетероциклоалкил необязательно замещен с помощью от одного до трех заместителей, выбранных из группы, состоящей из галогена, гидрокси, циано, (C1-C6)алкила, галоген(C1-C6)алкила, (C1-C6)алкокси и галоген(C1-C6)алкокси, где указанный (C1-C6)алкил и галоген(C1-C6)алкил необязательно замещены с помощью от одного до трех заместителей, выбранных из группы, состоящей из галогена, гидрокси, циано и (C1-C6)алкокси;
R3 выбирают из группы, состоящей из водорода, галогена, гидрокси, (C1-C6)алкила, галоген(C1-C6)алкила, (C1-C6)алкокси и галоген(C1-C6)алкокси;
X представляет собой углерод или азот;
R4 представляет собой (4-6-членный)гетероциклоалкил или (5-10-членный)гетероарил, где указанный (4-6-членный)гетеро-циклоалкил и (5-10-членный)гетероарил необязательно замещены с помощью от 1 до 3 заместителей, выбранных из группы, состоящей из галогена, циано, оксо, гидрокси, -N(R10)(R11), (C1-C6)алкила, галоген(C1-C6)алкила, (C1-C6)алкокси, галоген(C1-C6)алкокси и -(CH2)n(C3-C6)циклоалкила, где указанный (C1-C6)алкил и галоген(C1-C6)алкил необязательно замещены с помощью от одного до трех заместителей, выбранных из группы, состоящей из галогена, гидрокси, циано, и (C1-C6)алкокси, и где n представляет собой целое число, выбранное из 0, 1 или 2; и где R10 и R11 каждый независимо выбирают из группы, состоящей из водорода и (C1-C6)алкила, где указанный (C1-C6)алкил необязательно замещен с помощью от одного до трех заместителей, выбранных из группы, состоящей из галогена и гидрокси;
R5 выбирают из группы, состоящей из водорода, галогена, гидрокси, (C1-C6)алкила, галоген(C1-C6)алкила, (C1-C6)алкокси и галоген(C1-C6)алкокси; и
a представляет собой целое число, выбранное из 0 или 1, при условии, что когда X представляет собой азот, a представляет собой 0.
В другом варианте осуществления, в изобретении предлагается фармацевтическая композиция, включающая соединение любой одной из описанных в изобретении формул или его фармацевтически приемлемую соль и фармацевтически приемлемый носитель или вспомогательное вещество. В некоторых вариантах осуществления, фармацевтическая композиция включает два или более фармацевтически приемлемых носителей и/или вспомогательных веществ.
В изобретении также предлагаются терапевтические методы и их применение, включающие введение соединения по изобретению или его фармацевтически приемлемой соли.
В другом варианте осуществления, в изобретении предлагается способ лечения аномального клеточного роста, в частности, рака, у субъекта, нуждающегося в этом, включающий введение субъекту терапевтически эффективного количества соединения по изобретению или его фармацевтически приемлемой соли. Соединения по изобретению могут быть введены в форме взятых в отдельности лекарственных средств, или могут быть введены в комбинации с другими противораковыми терапевтическими средствами, в частности, со стандартными средствами лечения, соответствующими конкретному типу рака.
В дополнительном варианте осуществления, в изобретении предлагается способ лечения аномального клеточного роста, в частности, рака, у субъекта, нуждающегося в этом, включающий введение субъекту количества соединения по изобретению или его фармацевтически приемлемой соли в комбинации с количеством дополнительного противоракового терапевтического средства, количества которых являются вместе эффективными при лечении указанного аномального клеточного роста.
В другом варианте осуществления, изобретение относится к соединению по изобретению или его фармацевтически приемлемой соли для применения в качестве лекарственного препарата, в частности, лекарственного препарата для лечения рака.
В другом варианте осуществления, изобретение относится к соединению по изобретению или его фармацевтически приемлемой соли для применения при лечении аномального клеточного роста, в частности, рака, у субъекта.
В дополнительном варианте осуществления, в изобретении предлагается применение соединения по изобретению или его фармацевтически приемлемой соли для лечения аномального клеточного роста, в частности, рака, у субъекта.
В другом варианте осуществления, изобретение относится к фармацевтической композиции для применения при лечении аномального клеточного роста у субъекта, нуждающегося в этом, где композиция включает соединение по изобретению или его фармацевтически приемлемую соль и фармацевтически приемлемый носитель или вспомогательное вещество.
В еще одном варианте осуществления, в изобретении предлагается применение соединения любой одной из описанных в изобретении формул или его фармацевтически приемлемой соли для приготовления лекарственного препарата для лечения аномального клеточного роста у субъекта.
В часто встречающихся вариантах осуществления упомянутых выше соединений, способов и применений, аномальный клеточный рост представляет собой рак.
В некоторых вариантах осуществления, способы и применения позволяли достигать результата в одном или более из следующих эффектов: (1) ингибирование пролиферации раковых клеток; (2) ингибирование инвазивности раковых клеток; (3) индуцирование апоптоза раковых клеток; (4) ингибирование метастазирования раковых клеток; (5) ингибирование ангиогенеза; (6) усиление Т-клеточных ответов или (7) повышение противоопухолевой активности.
В другом варианте осуществления, в изобретении предлагается способ лечения HPK1-зависимых нарушений и усиления иммунного ответа у субъекта, включающий введение субъекту соединение по изобретению или его фармацевтически приемлемую соль в количестве, которое является эффективным для лечения указанного нарушения, в частности, рака. В некоторых вариантах осуществления, нарушение представляет собой рак, который характеризуется амплификацией или гиперэкспрессией киназы HPK1.
В некоторых вариантах осуществления, описанные в изобретении способы и применения дополнительно включают введение субъекту количества дополнительного противоракового терапевтического средства или паллиативного средства, количества которых являются вместе эффективными при лечении указанного аномального клеточного роста. Каждый из описанных ниже вариантов осуществления соединений по настоящему изобретению может быть объединен с одним или более описанными в изобретении другими вариантами осуществления соединений по настоящему изобретению, не являющимися несовместимыми с вариантом осуществления (вариантами осуществления), с которым его объединяют.
Следует иметь в виду, что, как представленное выше общее описание, так и представленное далее подробное описание приводятся только в качестве примера и разъяснения, и они не ограничивают объема изобретения, заявляемого в пунктах формулы изобретения.
Кроме того, предполагается, что каждый из представленных ниже вариантов осуществления, описывающих изобретение, включает в свой объем фармацевтически приемлемые солей соединений по изобретению. Соответственно, в описании всех раскрытых в изобретении соединений подразумевается фраза "или его фармацевтически приемлемая соль".
ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Определения и пояснения с помощью примеров
Настоящее изобретение может стать более понятным после ознакомления с приведенным ниже подробным описанием предпочтительных вариантов осуществления изобретения и с включенными в описание изобретения примерами. Следует иметь в виду, что используемая в изобретении терминология применяется только для описания конкретных вариантов осуществления и никоим образом не ограничивает объем изобретения. Кроме того, следует иметь в виду, что, если в изобретение конкретно не определено иное, то используемую в изобретении терминологию следует воспринимать в ее общепринятом в соответствующей области техники значении.
Используемая в изобретении форма единственного числа включает и форму множественного числа, если не указано иное. Например, "заместитель" включает "один или несколько заместителей".
Термин "приблизительно" является относительным понятием, обозначающим приблизительное значение величины, которое составляет плюс или минус 10% от номинального значения величины, к которому этот термин относится, в одном варианте осуществления, приблизительное значение величины составляет плюс или минус 5%, в другом варианте осуществления, приблизительное значение величины составляет плюс или минус 2%. Для области, к которой относится настоящее изобретение, этот уровень приблизительного значения величины является подходящим, если только специально не указано, что приблизительное значение величины требует более узкого диапазона изменения.
Используемый в изобретении термин "n-членный", где n представляет собой целое число, обычно описывает количество атомов, образующих кольцо в фрагменте, где количество атомов, образующих кольцо, равно n. Например, пиридин является примером 6-членного гетероарильного кольца, а тиофен является примером 5-членного гетероарильного кольца.
В различных местах настоящего изобретения, заместители соединений по изобретению описываются в группах или в диапазонах. В частности, предполагается, что изобретение включает каждую отдельную субкомбинацию членов таких групп и диапазонов. Например, предполагается, что термин "C1-6алкил" конкретно включает C1 алкил (метил), C2 алкил (этил), C3 алкил, C4 алкил, C5 алкил и C6 алкил. В качестве другого примера, предполагается, что термин "5-6-членная гетероарильная группа" конкретно включает любую 5-, 6-членную гетероарильную группу.
Используемый в изобретении термин "антагонист HPK1" или "ингибитор HPK1" обозначает молекулу, которая уменьшает, ингибирует или иным образом снижает одну или более биологических активностей HPK1 (например, активность серин/треонинкиназы, рекрутмент в комплекс TCR при активации TCR, взаимодействие с партнером по связыванию белка, таким как SLP76). Антагонизм с использованием антагониста HPK1 не обязательно характеризуется полным устранением активности HPK1. В действительности, активность может снижаться на статистически значимую величину. Например, соединение по настоящему изобретению может снижать активность HPK1, по меньшей мере, на величину от приблизительно 2,5% до приблизительно 100%, от приблизительно 10% до приблизительно 90%, от приблизительно 20% до приблизительно 70%, от приблизительно 30% до приблизительно 60%, от приблизительно 40% до приблизительно 50% по сравнению с соответствующим контролем. В некоторых вариантах осуществления, антагонист HPK1 уменьшает, ингибирует или иным образом снижает активность серин/треонинкиназы HPK1. В некоторых из этих вариантов осуществления, антагонист HPK1 уменьшает, ингибирует или иным образом снижает HPK1-опосредованное фосфорилирование SLP76 и/или Gads. Раскрытые в настоящем изобретении соединения связываются непосредственно с HPK1 и ингибируют его киназную активность.
Описываемое изобретение может быть соответствующим образом осуществлено на практике в отсутствие любого элемента (элементов), конкретно не раскрытого в изобретении. Так, например, в каждом случае использования в изобретении, любой из терминов "включающий", "состоящий, в основном, из" и "состоящий из" может быть заменен на любой из двух других оставшихся терминов.
Используемый в изобретении термин "(C1-C6)алкил" относится к насыщенной, разветвленной или линейной алкильной группе, содержащей от 1 до 6 углеродных атомов, такой как, но этим не ограничивая, метил, этил, н-пропил, изопропил, н-бутил, вторбутил, изобутил, трет-бутил, н-пентил, изопентил, неопентил и н-гексил. (C1-C6)алкил может быть необязательно замещенным, в котором один или более атомов водорода заменены на заместитель, выбранный из группы, состоящей из галогена, циано, гидрокси, -SF5, нитро, -(C1-C6)алкокси и -N(R6)(R7), в котором R6 и R7 каждый независимо выбирают из водорода и (C1-C6)алкила. Например, (C1-C6)алкильный фрагмент может быть замещен с помощью одного или более атомов галогена с образованием "галоген(C1-C6)алкила". Типичные примеры галоген(C1-C6)алкила включают, но этим не ограничивая, фторметил, 2-фторэтил, дифторметил, трифторметил, и пентафторэтил. Другие типичные примеры замещенного (C1-C6)алкила включают, но этим не ограничивая, цианобутил и этоксиэтил.
Используемый в изобретении термин "галоген(C1-C6)алкил" относится к определенной выше (C1-C6)алкильной группе, где алкильная группа замещена с помощью одного или более атомов галогена. Например, галоген(C1-C6)алкил может быть выбран из фторметила, фторэтила, дифторметила, дифторэтила, трифторметила, трифторэтила.
Термин "(C2-C6)алкенил" относится к алифатическому углеводороду, имеющему от 2 до 6 углеродных атомов и имеющему по меньшей мере одну двойную связь углерод-углерод, в том числе к линейным или разветвленным группам, имеющим, по меньшей мере, одну двойную связь углерод-углерод. Типичные примеры включают, но этим не ограничивая, этенил, 1-пропенил, 2-пропенил (аллил), изопропенил, 2-метил-1-пропенил, 1-бутенил, 2-бутенил, и другие подобные алкенилы. Когда соединения по изобретению содержат (C2-C6)алкенильную группу, соединение может существовать в виде чистой E (entgegen) формы, чистой Z (zusammen) формы, или любой их смеси. (C2-C6)алкенил может быть необязательно замещенным, в котором один или более атомов водорода заменены на заместитель, выбранный из группы, состоящей из галогена, циано, гидрокси, -SF5, нитро, -(C1-C6)алкокси и -N(R6)(R7), в котором R6 и R7 каждый независимо выбирают из водорода и (C1-C6)алкила.
Термин "(C2-C6)алкинил" относится к алифатическому углеводороду, имеющему от 2 до 6 углеродных атомов и имеющему, по меньшей мере, одну тройную связь углерод-углерод, в том числе к линейным или разветвленным группам, имеющим, по меньшей мере, одну тройную связь углерод-углерод. Типичные примеры включают, но этим не ограничивая, этинил, пропинил, бутинил, пентинил и гексинил. (C2-C6)алкинил может быть необязательно замещенным, в котором один или более атомов водорода заменены на заместитель, выбранный из группы, состоящей из галогена, циано, гидрокси, -SF5, нитро, -(C1-C6)алкокси и -N(R6)(R7), в котором R6 и R7 каждый независимо выбирают из водорода и (C1-C6)алкила.
Используемый в изобретении термин "(C1-C6)алкокси" относится к определенной выше (C1-C6)алкильной группе, присоединенной к основному молекулярному фрагменту через атом кислорода. Типичные примеры (C1-C6)алкокси включают, но этим не ограничивая, метокси, этокси, пропокси, 2-пропокси, бутокси, трет-бутокси, пентилокси и гексилокси. (C1-C6)алкокси может быть необязательно замещенным, в котором в котором один или более атомов водорода заменены на заместитель, выбранный из группы, состоящей из галогена, циано, гидрокси, -SF5, нитро, -(C1-C6)алкокси и -N(R6)(R7), в котором R6 и R7 каждый независимо выбирают из водорода и (C1-C6)алкила. Например, (C1-C6)алкокси может быть замещен с помощью одного или более атомов галогена с образованием "галоген(C1-C6)алкокси". Типичные примеры галоген(C1-C6)алкокси включают, но этим не ограничивая, фторметокси, дифторметокси, 2-фторэтокси, трифторметокси и пентафторэтокси.
Используемый в изобретении термин "галоген(C1-C6)алкокси" относится к определенной выше (C1-C6)алкоксильной группе, где алкоксильная группа замещена с помощью одного или более атомов галогена. Например, галоген(C1-C6)алкокси может быть выбран из фторметокси, фторэтокси, дифторметокси, дифторэтокси, трифторметокси, трифторэтокси.
Используемый в изобретении термин "(C1-C6)алкилтио" относится к определенной выше (C1-C6)алкильной группе, присоединенной к основному молекулярному фрагменту через атом серы. Типичные примеры (C1-C6)алкилтио включают, но этим не ограничивая, метилтио, этилтио, пропилтио, и другие подобные алкилтиогруппы. (C1-C6)алкилтио может быть необязательно замещенным, в котором один или более атомов водорода заменены на заместитель, выбранный из группы, состоящей из галогена, циано, гидрокси, -SF5, нитро, -(C1-C6)алкокси и -N(R6)(R7), в котором R6 и R7 каждый независимо выбирают из водорода и (C1-C6)алкила.
Используемый в изобретении термин "(C3-C6)циклоалкил" относится к карбоциклическому заместителю, полученному путем удаления водорода из насыщенной карбоциклической молекулы, имеющей от 3 до 6 углеродных атомов. "(C3-C6)циклоалкил" может представлять собой моноциклическое кольцо, примеры которого включают циклопропил, циклобутил, циклопентил и циклогексил. (C3-C6)циклоалкил может быть необязательно замещенным, в котором один или более атомов водорода заменены на заместитель, выбранный из группы, состоящей из галогена, циано, гидрокси, -SF5, нитро, -(C1-C6)алкокси и -N(R6)(R7), в котором R6 и R7 каждый независимо выбирают из водорода и (C1-C6)алкила.
Используемый в изобретении термин "гетероциклоалкил" относится к определенному выше циклоалкилу, в котором, по меньшей мере, один из кольцевых углеродных атомов заменен на гетероатом, выбранный из азота, кислорода или серы. Термин "(4-6-членный)гетероциклоалкил" обозначает гетероциклоалкильный заместитель, который содержит суммарно от 4 до 6 кольцевых атомов, по меньшей мере, один из которых является гетероатомом. Термин "(4-8-членный)гетероциклоалкил" обозначает гетероциклоалкильный заместитель, который содержит суммарно от 4 до 8 кольцевых атомов, по меньшей мере, один из которых является гетероатомом. "(6-членный)гетероциклоалкил" обозначает гетероциклоалкильный заместитель, который содержит суммарно 6 кольцевых атомов, по меньшей мере, один из которых является гетероатомом. "(5-членный)гетероциклоалкил" обозначает гетероциклоалкильный заместитель, который содержит суммарно 5 кольцевых атомов, по меньшей мере, один из которых является гетероатомом. Гетероциклоалкильный заместитель может быть присоединен через атом азота, имеющий соответствующую валентность, или через любой кольцевой атом углерода. Гетероциклоалкильный фрагмент может быть необязательно замещен с помощью одного или более заместителей на атоме азота, имеющего соответствующую валентность, или на любом доступном атоме углерода.
Примеры гетероциклоалкильных колец включают, но этим не ограничивая, азетидинил, дигидрофуранил, дигидротиофенил, тетрагидротиофенил, тетрагидрофуранил, тетрагидротриазинил, тетрагидропиразолил, тетрагидрооксазинил, тетрагидропиримидинил, имидазолидинил, пирролидинил, пиперидинил, пиперазинил, оксазолидинил, тиазолидинил, пиразолидинил, тиоморфолинил, тетрагидропиранил, тетрагидротиазинил, тетрагидротиадиазинил, тетрагидрооксазолил, морфолинил, оксетанил, тетрагидродиазинил, оксазинил, оксатиазинил. Дополнительные примеры гетероциклоалкильных колец включают тетрагидрофуран-2-ил, тетрагидрофуран-3-ил, имидазолидин-1-ил, имидазолидин-2-ил, имидазолидин-4-ил, пирролидин-1-ил, пирролидин-2-ил, пирролидин-3-ил, пиперидин-1-ил, пиперидин-2-ил, пиперидин-3-ил, пиперидин-4-ил, пиперазин-1-ил, пиперазин-2-ил, 1,3-оксазолидин-3-ил, изотиазолидинил, 1,3-тиазолидин-3-ил, 1,2-пиразолидин-2-ил, 1,2-тетрагидротиазин-2-ил, 1,3-тиазинан-3-ил, 1,2-тетрагидродиазин-2-ил, 1,3-тетрагидродиазин-1-ил, 1,4-оксазин-4-ил, 2-оксо-пиперидинил (например, 2-оксо-пиперидин-1-ил), азабицикло[2.2.1]гептил и другие подобные гетероциклоалкильные кольца. Одним конкретным примером гетероциклоалкила является 2-оксо-1,3-оксазолидин-3-ил. Гетероциклоалкил может быть необязательно замещенным, в котором один или более атомов водорода заменены на заместитель, выбранный из группы, состоящей из галогена, циано, гидрокси, -SF5, нитро, -(C1-C6)алкокси и -N(R6)(R7), в котором R6 и R7 каждый независимо выбирают из водорода и (C1-C6)алкила.
"(C6-C10)арил" относится к полностью состоящей из углеродных атомов моноциклической или с конденсированным кольцом полициклической ароматической группе, имеющей систему сопряженных π-электронов, содержащей от 6 до 10 углеродных атомов, такой как фенил или нафтил.
Используемый в изобретении термин "гетероарил" относится к ароматической карбоциклической системе, содержащей один, два, три или четыре гетероатома, выбранных независимо из кислорода, азота и серы, и имеющей одно, два или три кольца, где такие кольца могут быть конденсированными, где определение конденсированных колец приведено выше. "(5-10-членное)гетероарильное" кольцо относится к гетероарильному кольцу, имеющему от 5 до 10 кольцевых атомов, в котором, по меньшей мере, один из кольцевых атомов является азотом, при этом остальные кольцевые атомы независимо выбирают из группы, состоящей из углерода, кислорода, серы и азота. "(5-6-членное)гетероарильное" относится к гетероарильному кольцу, имеющему от 5 до 6 кольцевых атомов, в котором, по меньшей мере, один из кольцевых атомов является азотом, при этом остальные кольцевые атомы независимо выбирают из группы, состоящей из углерода, кислорода, серы и азота. Примеры гетероарилов включают, но этим не ограничивая, имидазолил, пиразолил, пиримидинил, пиридизинил, тиазолил, триазолил (например, 1,2,3-триазол или 1,2,4-триазол), пиразинил, оксазолил, тиадиазолил, пиридинил, имидазопиридинил, триазолoпиридинил, дигидропирролотриазолил и оксадиазолил. Более конкретные примеры гетероарилов включают имидазолил, 1H-пиразолил, тиадиазолил или триазолил.
Следует иметь в виду, что гетероарил может быть необязательно конденсированным с определенными в изобретении циклоалкильной группой или гетероциклоалкильной группой.
Гетероарильный заместитель может быть присоединен через атом азота, имеющего соответствующую валентность, или через атом углерода. Гетероарильный фрагмент может быть необязательно замещен с помощью одного или более заместителей на атоме азота, имеющего соответствующую валентность, или на любом доступном атоме углерода. (5-6-членный)гетероарил может быть необязательно замещенным, в котором один или более атомов водорода заменены на заместитель, выбранный из группы, состоящей из галогена, циано, гидрокси, -SF5, нитро, -(C1-C6)алкокси и -N(R6)(R7), в котором R6 и R7 каждый независимо выбирают из водорода и (C1-C6)алкила. Заместитель может быть присоединен к гетероарильному фрагменту на любом доступном атоме углерода или к гетероатому, когда гетероатомом является азот, имеющий соответствующую валентность.
Используемый в изобретении термин "гало" или “"галоген" относится к атому хлора, фтора, брома или йода.
Используемый в изобретении термин "гидрокси" или "гидроксил" обозначает группу -OH.
Используемый в изобретении термин "циано" обозначает группу -CN, которая также может быть изображена следующим образом:
.
Используемый в изобретении термин "нитро" обозначает группу-NO2.
Используемый в изобретении термин "необязательно замещенный" означает, что замещение является необязательным и, поэтому, этот термин включает как незамещенные, так и замещенные атомы и фрагменты. Подразумевается, что в "замещенном" атоме или фрагменте любой водород на указанном атоме или фрагменте может быть заменен на заместитель, выбранный из указанной группы заместителей (вплоть до того, что каждый атом водорода на указанном атоме или фрагменте заменяется на заместитель, выбранный из указанной группы заместителей), при условии, что при этом не превышается нормальная валентность указанного атома или фрагмента, и что замещение приводит к образованию стабильного соединения. Например, если метильная группа (то есть -CH3) является необязательно замещенной, то, в этом случае, до 3 атомов водорода на атоме углерода могут быть заменены на замещающие группы.
Термины "пациент" или "субъект" относятся к теплокровным животным, таким как, например, свиньи, коровы, цыплята, лошади, морские свинки, мыши, крысы, карликовые песчанки, кошки, кролики, собаки, обезьяны, шимпанзе и люди.
Термин "фармацевтически приемлемый" указывает на то, что вещество или композиция должны быть совместимыми, с химической или токсилогической точки зрения, с другими ингредиентами, входящими в лекарственную форму, и/или с млекопитающим, которого подвергают лечению с помощью этого вещества или композиции.
Используемый в изобретении термин "терапевтически эффективное количество" относится к такому количеству вводимого соединения, которое позволят облегчать, до известной степени, один или более из симптомов нарушения, подвергаемого лечению. Применительно к лечению киназа HPK1-опосредованного нарушения (например, рака), терапевтически эффективное количество относится к такому количеству, которое позволяет, до известной степени, облегчать (или, например, устранять) один или более симптомов, связанных с киназа HPK1-опосредованным нарушением. Например, терапевтически эффективное количество относится к такому количеству, которое позволяет (1) уменьшать размер опухоли, (2) ингибировать (то есть, замедлять, до известной степени, предпочтительно, прекращать) метастазирование опухоли, (3) ингибировать, до известной степени (то есть, замедлять, до известной степени, предпочтительно, прекращать) рост опухоли или инвазивность опухоли, и/или (4) облегчать, до известной степени (или, предпочтительно, устранять) один или более признаков или симптомов, связанных с раком.
Если не указано иное, то используемый в изобретении термин "лечение" означает устранение, облегчение, ингибирование прогрессирования или предотвращение нарушения или состояния, к которым такие термины применимы, или одного или более симптомов такого нарушения или состояния. Если не указано иное, то используемый в изобретении термин "лечение" относится к акту лечения, определение которому приведено выше. Термин "лечение" также включает адъювантное и неоадъювантное лечение субъекта.
"Изомер" означает "стереоизомер" и "геометрический изомер", определения которых приводятся ниже.
"Стереоизомер" относится к соединениям, которые обладают одним или более хиральными центрами, каждый из которых может существовать в R или S конфигурации. Стереоизомеры включают все диастереоизомерные, энантиомерные и эпимерные формы, а также рацематы и их смеси.
"Геометрический изомер" относится к соединениям, которые могут существовать в цис, транс, анти, entgegen (E) и zusammen (Z) формах, а также в форме их смесей.
Если не указано иное, то используемое в изобретении термин "точка присоединения заместителя" может являться любой подходящей для заместителя точкой. Например, пиридинил (или пиридил) может представлять собой 2-пиридинил (или пиридин-2-ил), 3-пиридинил (или пиридин-3-ил) или 4-пиридинил (или пиридин-4-ил).
В случае, когда замещенный или необязательно замещенный фрагмент описывают без указания атома, через который такой фрагмент связан с заместителем, то в этом случае, заместитель может быть связан через любой подходящий атом в таком фрагменте. Например, в необязательно замещенном (5-10-членном)гетероариле, заместитель в гетероариле может быть связан с любым атомом углерода в гетероарильной части или с гетероатомом гетероарила, если позволяет валентность. Комбинации заместителей и/или переменных являются допустимыми только в тех случаях, когда такие комбинации приводят к образованию стабильных соединений.
В описании этого изобретения, термины "заместитель", "радикал" и "группа" используются взаимозаменяемо.
Если заместители описывают как "независимо выбранные" из группы, то, в каждом случае появления такого заместителя, его выбирают независимо от любого другого заместителя. Следовательно, каждый заместитель может быть идентичен или отличаться от другого заместителя (заместителей).
Соединения
Описанные выше соединения формулы I содержат ядро из азалактама (2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-она), где пирроловое кольцо соединено через его атом азота с 6-членным гетероарилом (пиридином или пиримидином), который замещен с помощью заместителя R4 и необязательного заместителя R5.
В одном варианте осуществления, в описанной выше формуле (I), R1 представляет собой -N(R6)(R7), и R6 и R7 каждый независимо выбирают из группы, состоящей из водорода и (C1-C6)алкила, где указанный (C1-C6)алкил необязательно замещен с помощью от 1 до 3 галогенов.
В другом варианте осуществления, R1 представляет собой -N(R6)(R7), и R6 и R7 каждый представляет собой метил.
В другом варианте осуществления, R1 представляет собой -N(R6)(R7), и R6 и R7 каждый представляет собой этил.
В другом варианте осуществления, R1 представляет собой -N(R6)(R7), и один из R6 и R7 представляет водород, а другой представляет собой метил.
В другом варианте осуществления, R1 представляет собой -N(R6)(R7), и один из R6 и R7 представляет метил, а другой представляет собой этил.
В еще одном варианте осуществления, R1 представляет собой -N(R6)(R7), и R6 и R7 взятые вместе с азотом, к которому они присоединены, образуют (4-8-членный)гетероциклоалкил, который необязательно замещен с помощью от одного до трех заместителей, выбранных из группы, состоящей из галогена, (C1-C6)алкила, галоген(C1-C6)алкила, (C1-C6)алкокси и галоген(C1-C6)алкокси. Когда R6 и R7, взятые вместе образуют (4-8-членный)гетероциклоалкил, гетероциклоалкил может быть выбран из группы, состоящей из азетидинила, пирролидинила и азабицикло[2.2.1]гептила.
В конкретных вариантах осуществления, R1 представляет собой азетидинил, необязательно замещенный с помощью от одного до трех заместителей, выбранных из группы, состоящей из галогена, (C1-C6)алкила, галоген(C1-C6)алкила, (C1-C6)алкокси и галоген(C1-C6)алкокси.
В конкретных вариантах осуществления, R1 представляет собой пирролидинил, необязательно замещенный с помощью от одного до трех заместителей, выбранных из группы, состоящей из галогена, (C1-C6)алкила, галоген(C1-C6)алкила, (C1-C6)алкокси и галоген(C1-C6)алкокси.
В других конкретных вариантах осуществления, R1 представляет собой (C3-C6)циклоалкил, где указанный (C3-C6)циклоалкил необязательно замещен с помощью от одного до трех заместителей, выбранных из группы, состоящей из галогена, гидрокси, (C1-C6)алкила, и (C1-C6)алкокси. Когда R1 представляет собой (C3-C6)циклоалкил, (C3-C6)циклоалкил представляет собой циклопропил.
В еще одном варианте осуществления, R1 представляет собой (C1-C6)алкил, выбранный из группы, состоящей из метила, этила, пропила, изопропила, бутила и трет-бутила.
В другом варианте осуществления, R1 представляет собой водород.
Следует иметь в виду, что любой из упомянутых выше подродов (вариантов осуществления) R1 может быть объединен вместе с любым из описанных выше и далее подродов для R1a, R2, R3, R4, R5, a и X.
В другом варианте осуществления, в описанной выше формуле (I), R2 представляет собой -(CH2)mN(R8)(R9), где m представляет собой 1, и один из R8 и R9 представляет собой водород, а другой представляет собой метил.
В другом варианте осуществления, R2 представляет собой -(CH2)mN(R8)(R9), где m представляет собой 1, и R8 и R9 оба представляют собой водород.
В других конкретных вариантах осуществления, R2 представляет собой (4-6-членный)гетероциклоалкил, и гетероциклоалкил представляет собой азетидинил.
Следует иметь в виду, что любой из упомянутых выше подродов (вариантов осуществления) R2 может быть объединен вместе с любым из описанных выше и далее подродов для R1, R1a, R3, R4, R5, a и X.
В другом варианте осуществления, в описанной выше формуле (I), R3 представляет собой водород.
В еще одном варианте осуществления, в описанной выше формуле (I), R4 представляет собой (5-6-членный)гетероарил, необязательно замещенный с помощью от 1 до 3 заместителей, выбранных из группы, состоящей из галогена, циано, гидрокси, -N(R10)(R11), (C1-C6)алкила, галоген(C1-C6)алкила, (C1-C6)алкокси, галоген(C1-C6)алкокси и -(CH2)n(C3-C6)циклоалкила, где n представляет собой целое число, выбранное из 0, 1 или 2; и где R10 и R11 каждый независимо выбирают из группы, состоящей из водорода и (C1-C6)алкила, где указанный (C1-C6)алкил необязательно замещен с помощью от одного до трех заместителей, выбранных из группы, состоящей из галогена и гидрокси. Когда R4 представляет собой (5-6-членный)гетероарил, гетероарил может представлять собой 1,2,3-триазолил, 1,2,4-триазолил или пиразолил.
В другом варианте осуществления, R4 представляет собой (4-6-членный)гетероциклоалкил, необязательно замещенный с помощью от 1 до 3 заместителей, выбранных из группы, состоящей из галогена, циано, оксо, гидрокси, -N(R10)(R11), (C1-C6)алкила, галоген(C1-C6)алкила, (C1-C6)алкокси, галоген(C1-C6)алкокси и -(CH2)n(C3-C6)циклоалкила, где n представляет собой целое число, выбранное из 0, 1 или 2; и где R10 и R11 каждый независимо выбирают из группы, состоящей из водорода и (C1-C6)алкила, где указанный (C1-C6)алкил необязательно замещен с помощью от одного до трех заместителей, выбранных из группы, состоящей из галогена и гидрокси. Когда R4 представляет собой (4-6-членный)гетероциклоалкил, гетероциклоалкил может представлять собой оксазолидинил, необязательно замещенный с помощью заместителя оксо.
Следует иметь в виду, что любой из упомянутых выше подродов (вариантов осуществления) R4 может быть объединен вместе с любым из описанных выше и далее подродов для R1, R1a, R2, R3, R5, a и X.
В еще одном варианте осуществления, в описанной выше формуле (I), X представляет собой азот, и a представляет собой 0.
В другом варианте осуществления, X представляет собой углерод, a представляет собой 1, и R5 представляет собой водород или галоген. Когда R5 представляет собой галоген, R5 может представлять собой атом фтора.
Следует иметь в виду, что любой из упомянутых выше подродов (вариантов осуществления) X может быть объединен вместе с любым из описанных выше и далее подродов для R1, R1a, R2, R3, R4, R5 и a.
В другом варианте осуществления в изобретении предлагается соединение формулы I или его фармацевтически приемлемая соль, где
R1a представляет собой H;
R1 представляет собой (C1-C6)алкил, галоген(C1-C6)алкил, -N(R6)(R7), и (C3-C4)циклоалкил, где указанный (C3-C4)циклоалкил необязательно замещен с помощью одного (C1-C6)алкила;
R6 и R7 каждый независимо выбирают из группы, состоящей из водорода и (C1-C6)алкила, или
R6 и R7, взятые вместе с азотом, к которому они присоединены, образуют (4-8-членный)гетероциклоалкил, который необязательно замещен с помощью от одного до трех (C1-C6)алкилов или галоген(C1-C6)алкилов;
R2 представляет собой -(CH2)mN(R8)(R9), где m представляет собой 1, и R8 и R9 каждый независимо выбирают из группы, состоящей из водорода и (C1-C6)алкила;
R3 представляет собой H;
X представляет собой углерод;
R5 представляет собой водород;
a представляет собой 1; и
R4 представляет собой (5-членный)гетероциклоалкил или (5-членный)гетероарил, каждый из которых необязательно замещен с помощью от 1 до 3 заместителей, выбранных из оксо, (C1-C6)алкила, необязательно замещенного с помощью гидрокси, галоген(C1-C6)алкила и -(CH2)n(C3-C6)циклоалкила, где n представляет собой 0 или 1.
В другом варианте осуществления, в изобретении предлагается соединение формулы I,
или его фармацевтически приемлемая соль, где
R1 выбирают из группы, состоящей из водорода, галогена, (C1-C6)алкила, галоген(C1-C6)алкила, (C1-C6)алкокси, галоген(C1-C6)алкокси, -N(R6)(R7) и (C3-C6)циклоалкила, где указанный (C1-C6)алкил, галоген(C1-C6)алкил и (C3-C6)циклоалкил необязательно замещены с помощью от одного до трех заместителей, выбранных из группы, состоящей из галогена, гидрокси, циано, (C1-C6)алкила и (C1-C6)алкокси;
R6 и R7 каждый независимо выбирают из группы, состоящей из водорода и (C1-C6)алкила, где указанный (C1-C6)алкил необязательно замещен с помощью от одного до трех заместителей, выбранных из группы, состоящей из галогена, (C1-C6)алкокси, циано и гидрокси, или R6 и R7, взятые вместе с азотом, к которому они присоединены, образуют (4-8-членный)гетероциклоалкил, который необязательно замещен с помощью от одного до трех заместителей, выбранных из группы, состоящей из галогена, (C1-C6)алкила, галоген(C1-C6)алкила, (C1-C6)алкокси и галоген(C1-C6)алкокси, где указанный (C1-C6)алкил и галоген(C1-C6)алкил необязательно замещены с помощью от одного до трех заместителей, выбранных из группы, состоящей из галогена, гидрокси, циано, (C1-C6)алкила и (C1-C6)алкокси;
R1a представляет собой H;
R2 представляет собой CH2N(R8)(R9), где R8 и R9 каждый независимо выбирают из группы, состоящей из водорода и (C1-C6)алкила, где указанный (C1-C6)алкил необязательно замещен с помощью от одного до трех заместителей, выбранных из группы, состоящей из галогена,(C1-C6)алкокси, циано и гидрокси, или R8 и R9, взятые вместе с азотом, к которому они присоединены, образуют (4-6-членный)гетероциклоалкил, который необязательно замещен с помощью от одного до трех заместителей, выбранных из группы, состоящей из галогена, гидрокси, (C1-C6)алкила, галоген(C1-C6)алкила, (C1-C6)алкокси и галоген(C1-C6)алкокси, где указанный (C1-C6)алкил и галоген(C1-C6)алкил необязательно замещены с помощью от одного до трех заместителей, выбранных из группы, состоящей из галогена, гидрокси, циано и (C1-C6)алкокси; и
R3 представляет собой H;
X представляет собой углерод;
R5 представляет собой водород;
a представляет собой 1; и
R4 представляет собой (4-6-членный)гетероциклоалкил или (5-10-членный)гетероарил, где указанный (4-6-членный)гетероциклоалкил и (5-10-членный)гетероарил необязательно замещены с помощью от 1 до 3 заместителей, выбранных из группы, состоящей из галогена, циано, оксо, гидрокси, -N(R10)(R11), (C1-C6)алкила, галоген(C1-C6)алкила, (C1-C6)алкокси, галоген(C1-C6)алкокси и -(CH2)n(C3-C6)циклоалкила, где указанный (C1-C6)алкил и галоген(C1-C6)алкил необязательно замещены с помощью от одного до трех заместителей, выбранных из группы, состоящей из галогена, гидрокси, циано, и (C1-C6)алкокси, и где n представляет собой целое число, выбранное из 0, 1 или 2; и где R10 и R11 каждый независимо выбирают из группы, состоящей из водорода и (C1-C6)алкила, где указанный (C1-C6)алкил необязательно замещен с помощью от одного до трех заместителей, выбранных из группы, состоящей из галогена и гидрокси.
В другом варианте осуществления, в изобретении предлагается соединение формулы I или его фармацевтически приемлемая соль, где
R1 выбирают из группы, состоящей из (C1-C4)алкила, CF3, -N(R6)(R7) и (C3-C4)циклоалкила, где указанный (C3-C4)циклоалкил необязательно замещен с помощью одного CH3;
R6 и R7 каждый независимо выбирают из группы, состоящей из водорода и (C1-C3)алкила, или
R6 и R7, взятые вместе с азотом, к которому они присоединены, образуют (4-5-членный)гетероциклоалкил, который необязательно замещен с помощью одного или двух заместителей CH3;
R2 представляет собой CH2N(R8)(R9), где R8 представляет собой водород, и R9 выбирают из группы, состоящей из водорода и CH3; и
R4 представляет собой (5-членный)гетероциклоалкил или (5-членный)гетероарил, где указанный (5-членный)гетероциклоалкил представляет собой 1,3-оксазолидин-3-ил, и указанный (5-членный)гетероарил представляет собой 1H-пиразолил или триазолил, каждый необязательно замещенный с помощью от 1 до 2 заместителей, выбранных из группы, состоящей из оксо, (C1-C5)алкила, галоген(C1-C5)алкила и -CH2-циклопропила.
В другом варианте осуществления, в изобретении предлагается соединение формулы I или его фармацевтически приемлемая соль, где
R1 выбирают из группы, состоящей из (C1-C4)алкила, CF3, -N(R6)(R7) и (C3-C4)циклоалкила, где указанный (C3-C4)циклоалкил необязательно замещен с помощью одного CH3;
R6 и R7 каждый независимо выбирают из группы, состоящей из водорода и (C1-C3)алкила, или
R6 и R7, взятые вместе с азотом, к которому они присоединены, образуют (4-5-членный)гетероциклоалкил, который необязательно замещен с помощью от одного до двух заместителей CH3;
R2 представляет собой CH2N(R8)(R9), где R8 представляет собой водород, и R9 выбирают из группы, состоящей из водорода и CH3; и
R4 представляет собой (5-членный)гетероциклоалкил или (5-членный)гетероарил, где указанный (5-членный)гетероциклоалкил представляет собой 2-оксо-1,3-оксазолидин-3-ил, необязательно замещенный с помощью 1 CH3, CH2F, CHF2 или CF3, и указанный (5-членный)гетероарил представляет собой 1H-пиразолил или триазолил, необязательно замещенный с помощью от 1 до 2 заместителей, выбранных из группы, состоящей из (C1-C5)алкила, галоген(C1-C5)алкила и -CH2-циклопропила.
В другом варианте осуществления, в изобретении предлагается соединение формулы I или его фармацевтически приемлемая соль, где R1 представляет собой -N(R6)(R7), где R6 и R7 каждый независимо выбирают из группы, состоящей из водорода и (C1-C3)алкила.
В другом варианте осуществления, в изобретении предлагается соединение формулы I или его фармацевтически приемлемая соль, где R1 представляет собой -N(R6)(R7), где R6 и R7, взятые вместе с азотом, к которому они присоединены, образуют (4-5-членный)гетероциклоалкил, который представляет собой азетидинил или пирролидинил, и указанный гетероциклоалкил необязательно замещен с помощью от одного до двух заместителей CH3.
В другом варианте осуществления, в изобретении предлагается соединение формулы I или его фармацевтически приемлемая соль, где
R1 выбирают из группы, состоящей из -N(R6)(R7) и (C3-C4)циклоалкила, где указанный (C3-C4)циклоалкил необязательно замещен с помощью одного CH3;
R6 и R7 каждый независимо выбирают из группы, состоящей из водорода и (C1-C3)алкила, или
R6 и R7, взятые вместе с азотом, к которому они присоединены, образуют (4-5-членный)гетероциклоалкил, который необязательно замещен с помощью от одного до двух заместителей, выбранных из группы, состоящей из CH3 или галоген(C1)алкила;
R2 представляет собой -CH2N(R8)(R9), где R8 и R9 каждый независимо выбирают из группы, состоящей из водорода и CH3; и
R4 представляет собой (5-членный)гетероциклоалкил или (5-членный)гетероарил, где указанный (5-членный)гетероциклоалкил представляет собой 2-оксо-1,3-оксазолидин-3-ил, необязательно замещенный с помощью 1 заместителя, выбранного из группы, состоящей из CH3, CHF2- и CH2F, и указанный (5-членный)гетероарил представляет собой имидазолил, 1H-пиразолил, тиадиазолил или триазолил, необязательно замещенный с помощью от 1 до 2 заместителей, независимо выбранных из группы, состоящей из (C1-C5)алкила, галоген(C1-C6)алкила и -(C4-C5)циклоалкила, где указанный (C1-C5)алкил необязательно замещен с помощью одного гидрокси.
В другом варианте осуществления, в изобретении предлагается соединение формулы I или его фармацевтически приемлемая соль, где
R1 представляет собой -N(R6)(R7);
R6 и R7 каждый независимо выбирают из группы, состоящей из водорода и (C1-C3)алкила, или
R6 и R7, взятые вместе с азотом, к которому они присоединены, образуют пирролидин-1-ил, необязательно замещенный с помощью от 1 до 2 CH3;
R2 представляет собой -CH2N(R8)(R9), где R8 и R9 каждый независимо выбирают из группы, состоящей из водорода и CH3; и
R4 представляет собой триазол-3-ил, замещенный с помощью от 1 до 2 заместителей, независимо выбранных из группы, состоящей из CH3-, CH3-CH2- и CH3-CH2-CH2-.
Соединения по изобретению, относящиеся к соединению формулы I или его фармацевтически приемлемой соли, где
R1a представляет собой H;
R3 представляет собой H;
a представляет собой 1;
X представляет собой углерод; и
R5 представляет собой водород; образуют структуру, представленную формулой
и где R1, R2 и R4 определены в изобретении.
В другом варианте осуществления, настоящее изобретение относится к любому одному или более из следующих соединений:
6-(диметиламино)-4-[(метиламино)метил]-2-{6-[4-(пропан-2-ил)-4H-1,2,4-триазол-3-ил]пиридин-2-ил}-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он;
4-[(метиламино)метил]-6-[метил(пропан-2-ил)амино]-2-[6-(4-пропил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)пиридин-2-ил]-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он;
4-[(метиламино)метил]-6-[(2R)-2-метилпирролидин-1-ил]-2-[6-(4-пропил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)пиридин-2-ил]-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он;
4-[(метиламино)метил]-2-[6-(5-метил-4-пропил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)пиридин-2-ил]-6-[(2R)-2-метилпирролидин-1-ил]-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он;
4-[(метиламино)метил]-6-[метил(пропан-2-ил)амино]-2-[6-(5-метил-4-пропил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)пиридин-2-ил]-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он;
4-(аминометил)-2-[6-(4-этил-5-метил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)пиридин-2-ил]-6-[(2S)-2-метилпирролидин-1-ил]-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он;
или их фармацевтически приемлемым солям.
В другом варианте осуществления, настоящее изобретение относится к соединениям формулы II
или его фармацевтически приемлемым солям, где:
R1 выбирают из группы, состоящей из водорода, галогена, (C1-C6)алкила, галоген(C1-C6)алкила, (C1-C6)алкокси, галоген(C1-C6)алкокси, -N(R6)(R7) и (C3-C6)циклоалкила, где указанный (C3-C6)циклоалкил необязательно замещен с помощью от одного до трех заместителей, выбранных из группы, состоящей из галогена, гидрокси, (C1-C6)алкила и (C1-C6)алкокси;
R6 и R7 каждый независимо выбирают из группы, состоящей из водорода и (C1-C6)алкила, где указанный (C1-C6)алкил необязательно замещен с помощью от одного до трех заместителей, выбранных из группы, состоящей из галогена и гидрокси, или R6 и R7, взятые вместе с азотом, к которому они присоединены, образуют (4-8-членный)гетероциклоалкил, который необязательно замещен с помощью от одного до трех заместителей, выбранных из группы, состоящей из галогена, (C1-C6)алкила, галоген(C1-C6)алкила, (C1-C6)алкокси и галоген(C1-C6)алкокси;
R2 представляет собой
i) -(CH2)mN(R8)(R9), где m представляет собой целое число, выбранное из 0, 1, 2 или 3, и R8 и R9 каждый независимо выбирают из группы, состоящей из водорода и (C1-C6)алкила, где указанный (C1-C6)алкил необязательно замещен с помощью от одного до трех заместителей, выбранных из группы, состоящей из галогена и гидрокси, или R8 и R9, взятые вместе с азотом, к которому они присоединены, образуют (4-6-членный)гетероциклоалкил, который необязательно замещен с помощью от одного до трех заместителей, выбранных из группы, состоящей из галогена, (C1-C6)алкила, галоген(C1-C6)алкила, (C1-C6)алкокси и галоген(C1-C6)алкокси; или
ii) (4-6-членный)гетероциклоалкил, где указанный гетероциклоалкил необязательно замещен с помощью от одного до трех заместителей, выбранных из группы, состоящей из галогена, (C1-C6)алкила, галоген(C1-C6)алкила, (C1-C6)алкокси и галоген(C1-C6)алкокси;
R5 выбирают из группы, состоящей из водорода, галогена, гидрокси, (C1-C6)алкила, галоген(C1-C6)алкила, (C1-C6)алкокси и галоген(C1-C6)алкокси; и
R12 выбирают из группы, состоящей из (C1-C6)алкила, галоген(C1-C6)алкила и -(CH2)n(C3-C6)циклоалкила, где n представляет собой целое число 0 или 1.
В другом варианте осуществления, в описанной выше формуле II, R1 представляет собой -N(R6)(R7), и R6 и R7 каждый независимо выбирают из группы, состоящей из водорода и (C1-C6)алкила, где указанный (C1-C6)алкил необязательно замещен с помощью от 1 до 3 галогенов.
В другом варианте осуществления формулы II, R1 представляет собой -N(R6)(R7), и (R6) и (R7) каждый представляют собой независимо метил.
В другом варианте осуществления формулы II, R1 представляет собой -N(R6)(R7), и (R6) и (R7) каждый представляют собой независимо этил.
В другом варианте осуществления формулы II, R1 представляет собой представляет собой -N(R6)(R7), и один из (R6) и (R7) представляет собой водород, а другой представляет собой метил.
В другом варианте осуществления формулы II, R1 представляет собой -N(R6)(R7), и один из (R6) и (R7) представляет собой метил, а другой представляет собой этил.
В еще одном варианте осуществления формулы II, R1 представляет собой -N(R6)(R7), и R6 и R7, взятые вместе с азотом, к которому они присоединены, образуют (4-8-членный)гетероциклоалкил, который необязательно замещен с помощью от одного до трех заместителей, выбранных из группы, состоящей из галогена, (C1-C6)алкила, галоген(C1-C6)алкила, (C1-C6)алкокси и галоген(C1-C6)алкокси. Когда R6 и R7, взятые вместе, образуют (4-8-членный)гетероциклоалкил, гетероциклоалкил может быть выбран из группы, состоящей из азетидинила, пирролидинила и азабицикло[2.2.1]гептила.
В конкретных вариантах осуществления формулы II, R1 представляет собой азетидинил, необязательно замещенный с помощью от одного до трех заместителей, выбранных из группы, состоящей из галогена, (C1-C6)алкила, галоген(C1-C6)алкила, (C1-C6)алкокси и галоген(C1-C6)алкокси.
В конкретных вариантах осуществления формулы II, R1 представляет собой пирролидинил, необязательно замещенный с помощью от одного до трех заместителей, выбранных из группы, состоящей из галогена, (C1-C6)алкила, галоген(C1-C6)алкила, (C1-C6)алкокси и галоген(C1-C6)алкокси.
В других конкретных вариантах осуществления формулы II, R1 представляет собой (C3-C6)циклоалкил, где указанный (C3-C6)циклоалкил необязательно замещен с помощью от одного до трех заместителей, выбранных из группы, состоящей из галогена, гидрокси, (C1-C6)алкила и (C1-C6)алкокси. Когда R1 представляет собой (C3-C6)циклоалкил, (C3-C6)циклоалкил представляет собой циклопропил.
В еще одном варианте осуществления формулы II, R1 представляет собой (C1-C6)алкил, выбранный из группы, состоящей из метила, этила, пропила, изопропила, бутила и трет-бутила.
В другом варианте осуществления формулы II, R1 представляет собой водород.
Следует иметь в виду, что любой из упомянутых выше подродов (вариантов осуществления формулы II) R1 может быть объединен вместе с любым из описанных выше и далее подродов для R2, R5 и R12 для формулы II.
В другом варианте осуществления, в описанной выше формуле II, R2 представляет собой -(CH2)mN(R8)(R9), где m представляет собой 1, и один из (R8) и (R9) представляет собой водород, а другой представляет собой метил.
В другом варианте осуществления формулы II, R2 представляет собой -(CH2)mN(R8)(R9), где m представляет собой 1, и (R8) и (R9) оба представляют собой водород.
В других конкретных вариантах осуществления формулы II, R2 представляет собой (4-6-членный)гетероциклоалкил, и гетероциклоалкил представляет собой азетидинил.
Следует иметь в виду, что любой из упомянутых выше подродов (вариантов осуществления формулы II) R2 может быть объединен вместе с любым из описанных выше и далее подродов для R1, R5 и R12 формулы II.
В другом варианте осуществления, в описанной выше формуле II, R12 представляет собой (C1-C6)алкил, выбранный из группы, состоящей из метила, этила, пропила, изопропила, бутила и трет-бутила.
В другом варианте осуществления формулы II, R12 представляет собой галоген(C1-C6)алкил, выбранный из группы, состоящей из фторметила, фторэтила, дифторметила, дифторэтила, трифторметила, трифторбутанила и трифторпентанила.
В еще одном варианте осуществления формулы II, R12 представляет собой -(CH2)n(C3-C6)циклоалкил, где n представляет собой 1, и (C3-C6)циклоалкил представляет собой циклопропил.
В некоторых вариантах осуществления, соединение формулы II имеет абсолютную стереохимию, представленную в формуле II-A или II-B:
или его фармацевтически приемлемая соль, где R1, R2, R5 и R12 определены для формулы II.
Каждый из вариантов осуществления, описанный в изобретении применительно к формуле II, также применим к соединениям формулы II-A и II-B.
В другом варианте осуществления, настоящее изобретение относится к соединениям формулы III
или их фармацевтически приемлемым солям, где
R1 выбирают из группы, состоящей из водорода, галогена, (C1-C6)алкила, галоген(C1-C6)алкила, (C1-C6)алкокси, галоген(C1-C6)алкокси, -N(R6)(R7) и (C3-C6)циклоалкила, где указанный (C3-C6)циклоалкил необязательно замещен с помощью от одного до трех заместителей, выбранных из группы, состоящей из галогена, гидрокси, (C1-C6)алкила и (C1-C6)алкокси;
R6 и R7 каждый независимо выбирают из группы, состоящей из водорода и (C1-C6)алкила, где указанный (C1-C6)алкил необязательно замещен с помощью от одного до трех заместителей, выбранных из группы, состоящей из галогена и гидрокси, или R6 и R7, взятые вместе с азотом, к которому они присоединены, образуют (4-8-членный)гетероциклоалкил, который необязательно замещен с помощью от одного до трех заместителей, выбранных из группы, состоящей из галогена, (C1-C6)алкила, галоген(C1-C6)алкила, (C1-C6)алкокси и галоген(C1-C6)алкокси;
R2 представляет собой
i) -(CH2)mN(R8)(R9), где m представляет собой целое число, выбранное из 0, 1, 2 или 3, и R8 и R9 каждый независимо выбирают из группы, состоящей из водорода и (C1-C6)алкила, где указанный (C1-C6)алкил необязательно замещен с помощью от одного до трех заместителей, выбранных из группы, состоящей из галогена и гидрокси, или R8 и R9, взятые вместе с азотом, к которому они присоединены, образуют (4-6-членный)гетероциклоалкил, который необязательно замещен с помощью от одного до трех заместителей, выбранных из группы, состоящей из галогена, (C1-C6)алкила, галоген(C1-C6)алкила, (C1-C6)алкокси и галоген(C1-C6)алкокси; или
ii) (4-6-членный)гетероциклоалкил, где указанный гетероциклоалкил необязательно замещен с помощью от одного до трех заместителей, выбранных из группы, состоящей из галогена, (C1-C6)алкила, галоген(C1-C6)алкила, (C1-C6)алкокси и галоген(C1-C6)алкокси;
R5 выбирают из группы, состоящей из водорода, галогена, гидрокси, (C1-C6)алкила, галоген(C1-C6)алкила, (C1-C6)алкокси и галоген(C1-C6)алкокси; и
R12 выбирают из группы, состоящей из (C1-C6)алкила, галоген(C1-C6)алкила и -(CH2)n(C3-C6)циклоалкила.
В другом варианте осуществления, в описанной выше формуле III, R1 представляет собой -N(R6)(R7), и R6 и R7 каждый независимо выбирают из группы, состоящей из водорода и (C1-C6)алкила, где указанный (C1-C6)алкил необязательно замещен с помощью от 1 до 3 галогенов.
В другом варианте осуществления формулы III, R1 представляет собой -N(R6)(R7), и R6 и R7 каждый представляет собой метил.
В другом варианте осуществления формулы III, R1 представляет собой -N(R6)(R7), и R6 и R7 каждый представляет собой этил.
В другом варианте осуществления формулы III, R1 представляет собой -N(R6)(R7), и один из R6 и R7 представляет собой водород, а другой представляет собой метил.
В другом варианте осуществления формулы III, R1 представляет собой -N(R6)(R7), и один из R6 и R7 представляет собой метил, а другой представляет собой этил.
В еще одном варианте осуществления формулы III, R1 представляет собой -N(R6)(R7), и R6 и R7, взятые вместе с азотом, к которому они присоединены, образуют (4-8-членный)гетероциклоалкил, который необязательно замещен с помощью от одного до трех заместителей, выбранных из группы, состоящей из галогена, (C1-C6)алкила, галоген(C1-C6)алкила, (C1-C6)алкокси и галоген(C1-C6)алкокси. Когда R6 и R7, взятые вместе, образуют (4-8-членный)гетероциклоалкил, гетероциклоалкил может быть выбран из группы, состоящей из азетидинила, пирролидинила и азабицикло[2.2.1]гептила.
В конкретных вариантах осуществления формулы III, R1 представляет собой азетидинил, необязательно замещенный с помощью от одного до трех заместителей, выбранных из группы, состоящей из галогена, (C1-C6)алкила, галоген(C1-C6)алкила, (C1-C6)алкокси и галоген(C1-C6)алкокси.
В конкретных вариантах осуществления формулы III, R1 представляет собой пирролидинил, необязательно замещенный с помощью от одного до трех заместителей, выбранных из группы, состоящей из галогена, (C1-C6)алкила, галоген(C1-C6)алкила, (C1-C6)алкокси и галоген(C1-C6)алкокси.
В других конкретных вариантах осуществления формулы III, R1 представляет собой (C3-C6)циклоалкил, где указанный (C3-C6)циклоалкил необязательно замещен с помощью от одного до трех заместителей, выбранных из группы, состоящей из галогена, гидрокси, (C1-C6)алкила и (C1-C6)алкокси. Когда R1 представляет собой (C3-C6)циклоалкил, (C3-C6)циклоалкил представляет собой циклопропил.
В еще одном варианте осуществления формулы III, R1 представляет собой (C1-C6)алкил, выбранный из группы, состоящей из метила, этила, пропила, изопропила, бутила и трет-бутила.
В другом варианте осуществления формулы III, R1 представляет собой водород.
Следует иметь в виду, что любой из упомянутых выше подродов (вариантов осуществления формулы III) R1 может быть объединен вместе с любым из описанных выше и далее подродов для R2, R5 и R12 для формулы III.
В другом варианте осуществления, в описанной выше формуле III, R2 представляет собой -(CH2)mN(R8)(R9), где m представляет собой 1, и один из (R8) и (R9) представляет собой водород, а другой представляет собой метил.
В другом варианте осуществления формулы III, R2 представляет собой -(CH2)mN(R8)(R9), где m представляет собой 1, и R8 и R9 оба представляют собой водород.
В других конкретных вариантах осуществления формулы III, R2 представляет собой (4-6-членный)гетероциклоалкил, и гетероциклоалкил представляет собой азетидинил.
Следует иметь в виду, что любой из упомянутых выше подродов (вариантов осуществления формулы III) R2 может быть объединен вместе с любым из описанных выше и далее подродов для R1, R5 и R12 для формулы III.
В другом варианте осуществления, в описанной выше формуле III, R12 представляет собой (C1-C6)алкил, выбранный из группы, состоящей из метила, этила, пропила, изопропила, бутила и трет-бутила.
В другом варианте осуществления формулы III, R12 представляет собой галоген(C1-C6)алкил, выбранный из группы, состоящей из фторметила, фторэтила, дифторметила, дифторэтила, трифторметила, трифторбутанила и трифторпентанила.
В еще одном варианте осуществления формулы III, R12 представляет собой -(CH2)n(C3-C6)циклоалкил, где n представляет собой 1, и (C3-C6)циклоалкил представляет собой циклопропил.
В некоторых вариантах осуществления, соединение формулы III имеет абсолютную стереохимию, представленную в формуле III-A или III-B:
или его фармацевтически приемлемая соль, где R1, R2, R5 и R12 определены для формулы III.
Каждый из описанных в изобретении вариантов осуществления, применимый к формуле III, также применим к соединениям формулы III-A и III-B.
В другом аспекте, в изобретении предлагается соединение, выбранный из группы, состоящей из следующих соединений:
4-[(метиламино)метил]-6-(пирролидин-1-ил)-2-(6-{4-[(2S)-4,4,4-трифторбутан-2-ил]-4H-1,2,4-триазол-3-ил}пиридин-2-ил)-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он;
6-(диметиламино)-4-[(метиламино)метил]-2-(6-{4-[(2S)-4,4,4-трифторбутан-2-ил]-4H-1,2,4-триазол-3-ил}пиридин-2-ил)-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он;
2-{6-[4-(циклопропилметил)-4H-1,2,4-триазол-3-ил]пиридин-2-ил}-6-(диметиламино)-4-[(метиламино)метил]-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он;
6-(диметиламино)-4-[(метиламино)метил]-2-{6-[4-(пропан-2-ил)-4H-1,2,4-триазол-3-ил]пиридин-2-ил}-2,3-дигидро-1H-пирроло-[3,4-c]пиридин-1-он;
2-(6-{4-[(2S)-бутан-2-ил]-4H-1,2,4-триазол-3-ил}пиридин-2-ил)-6-(диметиламино)-4-[(метиламино)метил]-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он;
6-(диметиламино)-2-[6-(4-этил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)-пиридин-2-ил]-4-[(метиламино)метил]-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он;
6-(диметиламино)-4-[(метиламино)метил]-2-{6-[(4S)-4-метил-2-оксо-1,3-оксазолидин-3-ил]пиридин-2-ил}-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он;
4-(аминометил)-2-{6-[4-(циклопропилметил)-4H-1,2,4-триазол-3-ил]пиридин-2-ил}-6-(диметиламино)-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он;
4-(аминометил)-6-(диметиламино)-2-{6-[5-(пропан-2-ил)-1H-пиразол-4-ил]пиридин-2-ил}-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он;
4-[(метиламино)метил]-2-{6-[4-(пропан-2-ил)-4H-1,2,4-триазол-3-ил]пиридин-2-ил}-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он;
4-(аминометил)-6-(диметиламино)-2-{6-[4-(пропан-2-ил)-4H-1,2,4-триазол-3-ил]пиридин-2-ил}-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]-пиридин-1-он;
4-(аминометил)-6-(диметиламино)-2-(6-{4-[(2S)-4,4,4-трифторбутан-2-ил]-4H-1,2,4-триазол-3-ил}пиридин-2-ил)-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он;
6-(диметиламино)-4-[(метиламино)метил]-2-(6-{4-[(3ξ)-1,1,1-трифторпентан-3-ил]-4H-1,2,4-триазол-3-ил}пиридин-2-ил)-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он;
6-(диметиламино)-4-[(метиламино)метил]-2-(6-{4-[(3ξ)-1,1,1-трифторпентан-3-ил]-4H-1,2,4-триазол-3-ил}пиридин-2-ил)-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он;
6-(диметиламино)-2-{5-фтор-6-[5-(пропан-2-ил)-1H-пиразол-4-ил]пиридин-2-ил}-4-[(метиламино)метил]-2,3-дигидро-1H-пирроло-[3,4-c]пиридин-1-он;
4-[(метиламино)метил]-2-{6-[4-(пропан-2-ил)-4H-1,2,4-триазол-3-ил]пиридин-2-ил}-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он;
6-(азетидин-1-ил)-4-[(метиламино)метил]-2-{6-[4-(пропан-2-ил)-4H-1,2,4-триазол-3-ил]пиридин-2-ил}-2,3-дигидро-1H-пирроло-[3,4-c]пиридин-1-он;
4-(аминометил)-6-[(2R,4R)-2,4-диметилазетидин-1-ил]-2-{6-[4-(пропан-2-ил)-4H-1,2,4-триазол-3-ил]пиридин-2-ил}-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он;
6-[(1s,4s)-7-азабицикло[2.2.1]гепт-7-ил]-4-[(метиламино)-метил]-2-{6-[4-(пропан-2-ил)-4H-1,2,4-триазол-3-ил]пиридин-2-ил}-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он;
4-(аминометил)-6-циклопропил-2-{6-[(4S)-4-метил-2-оксо-1,3-оксазолидин-3-ил]пиридин-2-ил}-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]-пиридин-1-он;
6-[(2R,5S)-2,5-диметилпирролидин-1-ил]-4-[(метиламино)-метил]-2-{6-[4-(пропан-2-ил)-4H-1,2,4-триазол-3-ил]пиридин-2-ил}-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он;
6-(диэтиламино)-2-[6-(4-этил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)пиридин-2-ил]-4-[(метиламино)метил]-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]-пиридин-1-он;
6-[(2R,4R)-2,4-диметилазетидин-1-ил]-4-[(метиламино)метил]-2-{6-[4-(пропан-2-ил)-4H-1,2,4-триазол-3-ил]пиридин-2-ил}-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он;
4-(аминометил)-6-(диметиламино)-2-{6-[(4S)-4-метил-2-оксо-1,3-оксазолидин-3-ил]пиридин-2-ил}-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он;
4-(аминометил)-6-циклопропил-2-{6-[4-(пропан-2-ил)-4H-1,2,4-триазол-3-ил]пиридин-2-ил}-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]-пиридин-1-он;
6-(азетидин-1-ил)-4-[(метиламино)метил]-2-{6-[(4S)-4-метил-2-оксо-1,3-оксазолидин-3-ил]пиридин-2-ил}-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он;
4-(аминометил)-6-[(2R,4S)-2,4-диметилазетидин-1-ил]-2-{6-[4-(пропан-2-ил)-4H-1,2,4-триазол-3-ил]пиридин-2-ил}-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он;
4-(аминометил)-6-(диметиламино)-2-{6-[5-(пропан-2-ил)-1H-1,2,3-триазол-1-ил]пиридин-2-ил}-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]-пиридин-1-он;
4-[(метиламино)метил]-6-(пропан-2-ил)-2-{6-[4-(пропан-2-ил)-4H-1,2,4-триазол-3-ил]пиридин-2-ил}-2,3-дигидро-1H-пирроло-[3,4-c]пиридин-1-он;
6-циклопропил-4-[(метиламино)метил]-2-{6-[4-(пропан-2-ил)-4H-1,2,4-триазол-3-ил]пиридин-2-ил}-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он;
4-(аминометил)-6-[(2R,4R)-2,4-диметилазетидин-1-ил]-2-{6-[(4S)-4-метил-2-оксо-1,3-оксазолидин-3-ил]пиридин-2-ил}-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он;
6-циклопропил-4-[(метиламино)метил]-2-{6-[(4S)-4-метил-2-оксо-1,3-оксазолидин-3-ил]пиридин-2-ил}-2,3-дигидро-1H-пирроло-[3,4-c]пиридин-1-он;
4-(аминометил)-6-(диэтиламино)-2-{6-[4-(пропан-2-ил)-4H-1,2,4-триазол-3-ил]пиридин-2-ил}-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]-пиридин-1-он;
4-(аминометил)-2-{6-[(4S)-4-метил-2-оксо-1,3-оксазолидин-3-ил]пиридин-2-ил}-6-(пропан-2-ил)-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]-пиридин-1-он;
6-(диэтиламино)-4-[(метиламино)метил]-2-{6-[4-(пропан-2-ил)-4H-1,2,4-триазол-3-ил]пиридин-2-ил}-2,3-дигидро-1H-пирроло-[3,4-c]пиридин-1-он;
4-(аминометил)-6-(азетидин-1-ил)-2-{6-[(4S)-4-метил-2-оксо-1,3-оксазолидин-3-ил]пиридин-2-ил}-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он;
6-[(2R,5R)-2,5-диметилпирролидин-1-ил]-4-[(метиламино)-метил]-2-{6-[4-(пропан-2-ил)-4H-1,2,4-триазол-3-ил]пиридин-2-ил}-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он;
4-(аминометил)-6-(1-метилциклопропил)-2-{6-[(4S)-4-метил-2-оксо-1,3-оксазолидин-3-ил]пиридин-2-ил}-2,3-дигидро-1H-пирроло-[3,4-c]пиридин-1-он;
4-[(метиламино)метил]-6-(1-метилциклопропил)-2-{6-[(4S)-4-метил-2-оксо-1,3-оксазолидин-3-ил]пиридин-2-ил}-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он;
6-[этил(метил)амино]-4-[(метиламино)метил]-2-{6-[4-(пропан-2-ил)-4H-1,2,4-триазол-3-ил]пиридин-2-ил}-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он;
6-(диметиламино)-2-{6-[(4R)-4-(фторметил)-2-оксо-1,3-оксазолидин-3-ил]пиридин-2-ил}-4-[(метиламино)метил]-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он;
6-метил-4-[(метиламино)метил]-2-{6-[4-(пропан-2-ил)-4H-1,2,4-триазол-3-ил]пиридин-2-ил}-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]-пиридин-1-он;
6-(диметиламино)-4-[(метиламино)метил]-2-[6-(4-пропил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)пиридин-2-ил]-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]-пиридин-1-он;
4-[(метиламино)метил]-6-(1-метилциклопропил)-2-{6-[4-(пропан-2-ил)-4H-1,2,4-триазол-3-ил]пиридин-2-ил}-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он;
4-[(метиламино)метил]-6-[метил(пропан-2-ил)амино]-2-{6-[4-(пропан-2-ил)-4H-1,2,4-триазол-3-ил]пиридин-2-ил}-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он;
2-{6-[(4R)-4-(дифторметил)-2-оксо-1,3-оксазолидин-3-ил]-пиридин-2-ил}-6-(диметиламино)-4-[(метиламино)метил]-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он;
6-трет-бутил-4-[(метиламино)метил]-2-{6-[4-(пропан-2-ил)-4H-1,2,4-триазол-3-ил]пиридин-2-ил}-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он;
4-(аминометил)-6-трет-бутил-2-{6-[(4S)-4-метил-2-оксо-1,3-оксазолидин-3-ил]пиридин-2-ил}-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]-пиридин-1-он;
6-трет-бутил-4-[(метиламино)метил]-2-{6-[(4S)-4-метил-2-оксо-1,3-оксазолидин-3-ил]пиридин-2-ил}-2,3-дигидро-1H-пирроло-[3,4-c]пиридин-1-он;
6-амино-4-[(метиламино)метил]-2-{6-[4-(пропан-2-ил)-4H-1,2,4-триазол-3-ил]пиридин-2-ил}-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]-пиридин-1-он;
6-трет-бутил-4-[(метиламино)метил]-2-(6-{4-[(3ξ)-1,1,1-трифторпентан-3-ил]-4H-1,2,4-триазол-3-ил}пиридин-2-ил)-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он;
4-[(метиламино)метил]-2-{6-[4-(пропан-2-ил)-4H-1,2,4-триазол-3-ил]пиридин-2-ил}-6-(трифторметил)-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он;
6-[(2R,4S)-2,4-диметилазетидин-1-ил]-4-[(метиламино)метил]-2-{6-[4-(пропан-2-ил)-4H-1,2,4-триазол-3-ил]пиридин-2-ил}-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он;
или его фармацевтически приемлемая соль.
В другом аспекте, в изобретении предлагается соединение, выбранное из группы, состоящей из соединений, приведенных в качестве примера в таблице 1, которая содержит примеры 1 и 53, включительно, или его фармацевтически приемлемая соль. В другом аспекте, в изобретении предлагается соединение, выбранное из группы, состоящей из соединений, приведенных в примерах 1-53, или его фармацевтически приемлемая соль. В другом аспекте, изобретение относится к любому одному или более представленным в качестве примера соединениям, или их фармацевтически приемлемой соли.
Соединения по изобретению оптимизировали по селективности в отношении киназы HPK1.
"Фармацевтическая композиция" относится к смеси одного или более описанных в изобретении соединений или их фармацевтически приемлемой соли, сольвата, или пролекарства в качестве активного ингредиента и, по меньшей мере, одного фармацевтически приемлемого носителя или вспомогательного вещества. В некоторых вариантах осуществления, фармацевтическая композиция включает два или более фармацевтически приемлемых носителей и/или вспомогательных веществ. В других вариантах осуществления, фармацевтическая композиция дополнительно включает, по меньшей мере, одно дополнительное противораковое терапевтическое средство.
В другом варианте осуществления, в изобретении предлагается фармацевтическая композиция, включающая соединение одной из описанных в изобретении формул или его фармацевтически приемлемую соль и фармацевтически приемлемый носитель или вспомогательное вещество. В некоторых вариантах осуществления, фармацевтическая композиция включает два или более фармацевтически приемлемых носителей и/или вспомогательных веществ.
В некоторых вариантах осуществления, фармацевтическая композиция дополнительно включает, по меньшей мере, одно дополнительное противораковое терапевтическое средство или паллиативное средство. В некоторых таких вариантах осуществления, по меньшей мере, одно дополнительное средство представляет собой описанное ниже противораковое терапевтическое средство. В некоторых таких вариантах осуществления, комбинация обеспечивает аддитивный, выше чем аддитивный или синергетический противораковый эффект.
В одном варианте осуществления, в изобретении предлагается способ лечения аномального клеточного роста у субъекта, нуждающегося в этом, включающий введение субъекту терапевтически эффективного количества соединения по изобретению или его фармацевтически приемлемой соли.
В другом варианте осуществления, в изобретении предлагается способ лечения аномального клеточного роста у субъекта, нуждающегося в этом, включающий введение субъекту количества соединения по изобретению или его фармацевтически приемлемой соль в комбинации с количеством дополнительного терапевтического средства (например, противоракового терапевтического средства), количества которых вместе являются эффективными при лечении указанного аномального клеточного роста.
В часто встречающихся вариантах осуществления предложенных в изобретении способах, аномальный клеточный рост представляет собой рак. Соединения по изобретению могут быть введены в форме взятых в отдельности средств или могут быть введены в комбинации с другими противораковыми терапевтическими средствами, в частности, со стандартными средствами лечения, соответствующими конкретному типу рака.
В некоторых вариантах осуществления, позволяли достигать результата в одном или более из следующих эффектов: (1) ингибирование пролиферации раковых клеток; (2) ингибирование инвазивности раковых клеток; (3) индуцирование апоптоза раковых клеток; (4) ингибирование метастазирования раковых клеток; (5) ингибирование ангиогенеза; (6) усиление Т-клеточных ответов; или (7) повышение противоопухолевой активности.
В другом аспекте, в изобретении предлагается способ лечения нарушения, опосредованного активностью киназы HPK1, у субъекта, такого как конкретные типы рака, включающий введение субъекту соединение по изобретению или его фармацевтически приемлемой соли в количестве, которое является эффективным для лечения указанного нарушения.
Если не указано иное, то все ссылки в изобретении на соединения по изобретению включают в себя ссылки на их соли, сольваты, гидраты и комплексы и на сольваты, гидраты и комплексы их солей, в том числе на их полиморфы, стереоизомеры и меченые изотопами варианты.
Соединения по изобретению могут существовать в форме фармацевтически приемлемых солей, таких как, например, соли присоединения кислоты и соли присоединения основания соединений одной из приведенных в изобретении формул. Используемый в изобретении термин "фармацевтически приемлемая соль" относится к тем солям, которые сохраняют биологическую эффективность и свойства исходного соединения. Если не указано иное, то используемая в изобретении фраза "фармацевтически приемлемая соль(соли)" включает соли групп с кислотными или основными свойствами, которые могут присутствовать в соединениях раскрытых в изобретении формул.
Например, соединения по изобретению, которые по своей природе имеют основные свойства, способны образовывать целый ряд солей с различными неорганическими и органическими кислотами. В связи с тем, что такие соли должны быть фармацевтически приемлемыми для введения животным, на практике часто желательно сначала выделить соединение по настоящему изобретению из реакционной смеси в форме фармацевтически неприемлемой соли, и затем просто превратить эту соль обратно в соединение в форме свободного основания путем обработки щелочным реагентом, и затем превратить соединение в форме свободного основания в фармацевтически приемлемую соль присоединения кислоты. Эти соли присоединения кислоты соединений с основными свойствами по этому изобретению могут быть получены путем обработки соединения с основными свойствами практически эквивалентным количеством выбранной минеральной или органической кислоты в водном растворителе или в подходящем органическом растворителе, таком как метанол или этанол. После испарения растворителя, получают требуемую соль в твердом виде. Требуемая соль присоединения кислоты может быть также осаждена из раствора соединения в форме свободного основания в органическом растворителе путем добавления в раствор соответствующей минеральной или органической кислоты.
Кислоты, которые могут быть использованы для получения фармацевтически приемлемых солей присоединения кислоты таких соединений с основными свойствами, представляют собой те кислоты, которые образуют нетоксичные соли присоединения кислоты, то есть соли, содержащие фармакологически приемлемые анионы, такие как гидрохлоридные, гидробромидные, гидройодидные, нитратные, сульфатные, бисульфатные, фосфатные, кислые фосфатные, изоникотинатные, ацетатные, лактатные, салицилатные, цитратные, кислые цитратные, тартратные, пантотенатные, битартратные, аскорбатные, сукцинатные, малеатные, гентизинатные, фумаратные, глюконатные, глюкаронатные, сахаратные, формиатные, бензоатные, глутаматные, метансульфонатные, этансульфонатные, бензолсульфонатные, п-толуолсульфонатные и памоатные [то есть 1,1’-метилен-бис-(2-гидрокси-3-нафтоат)] соли.
Примеры солей включают, но этим не ограничивая, ацетатные, акрилатные, бензолсульфонатные, бензоатные (такие как хлорбензоатные, метилбензоатные, динитробензоатные, гидроксибензоатные и метоксибензоатные), бикарбонатные, бисульфатные, бисульфитные, битартратные, боратные, бромидные, бутин-1,4-диоатные, кальций эдетатные, камзилатные, карбонатные, хлоридные, капроатные, каприлатные, клавуланатные, цитратные, деканоатные, дигидрохлоридные, дигидрофосфатные, эдетатные, эдизилатные, эстолатные, эзилатные, этилсукцинатные, формиатные, фумаратные, глюцептатные, глюконатные, глутаматные, гликоллатные, гликоллиларсанилатные, гептаноатные, гексин-1,6-диоатные, гексилрезорцинатные, гидрабаминные, гидробромидные, гидрохлоридные, γ-гидроксибутиратные, йодидные, изобутиратные, изотионатные, лактатные, лактобионатные, лауратные, малатные, малеатные, малонатные, манделатные, мезилатные, метафосфатные, метансульфонатные, метилсульфатные, моногидрофосфатные, мукатные, напсилатные, нафталин-1-сульфонатные, нафталин-2-сульфонатные, нитратные, олеатные, оксалатные, памоатные (эмбонатные), пальмитатные, пантотенатные, фенилацетатные, фенилбутиратные, фенилпропионатные, фталатные, фосфатные/дифосфатные, полигалактуронатные, пропансульфонатные, пропионатные, пропиолатные, пирофосфатные, пиросульфатные, салицилатные, стеаратные, субацетатные, субератные, сукцинатные, сульфатные, сульфонатные, сульфитные, таннатные, тартратные, теоклатные, тозилатные, триэтиододные и валератные соли.
Иллюстративные примеры подходящих солей включают органические соли, образованные из аминокислот, таких как глицин и аргинин, аммиака, первичных, вторичных и третичных аминов, и циклических аминов, таких как пиперидин, морфолин и пиперазин, и неорганические соли, образованные с катионами натрия, кальция, калия, магния, марганца, железа, меди, цинка, алюминия и лития.
Соединения по изобретению, которые включают фрагмент с основными свойствами, такой как аминогруппа, могут образовывать фармацевтически приемлемые соли с различными аминокислотами, помимо упомянутых выше кислот.
Соединения по изобретению, которые по своей природе обладают кислотными свойствами, способны образовывать соли присоединения основания с различными фармакологически приемлемыми катионами. Примеры таких солей включают соли щелочных или щелочноземельных металлов и, в частности, соли натрия и калия. Все эти соли получают традиционными методами. Химические основания, которые используют в качестве реагентов для получения фармацевтически приемлемых солей присоединения основания по этому изобретению, представляют собой те основания, которые образуют не токсичные соли присоединения основания с соединениями, обладающими кислотными свойствами. Эти соли могут быть приготовлены любым подходящим методом, например, путем обработки соединения в форме свободной кислоты неорганическим или органическим основанием, таким как амин (первичный, вторичный или третичный), гидроксид щелочного металла или гидроксид щелочноземельного металла, или другие подобные основания. Эти соли могут быть также получены путем обработки соответствующих соединений с кислотными свойствами водным раствором, содержащим требуемые фармакологически приемлемые катионы, и затем испарения полученного раствора досуха, предпочтительно, при пониженном давлении. В качестве варианта, они могут быть также получены путем смешения растворов в низших спиртах соединений с кислотными свойствами и требуемых алкоксидов щелочных металлов и затем испарения полученного раствора досуха таким же способом, как указано выше. В обоих случаях, предпочтительно использовать стехиометрические количества реагентов для обеспечения полноты протекания реакции и максимальных выходов требуемого конечного продукта.
Химические основания, которые могут быть использованы в качестве реагентов для получения фармацевтически приемлемых солей присоединения основания соединений по изобретению, которые обладают по свой природе кислотными свойствами, представляют собой те химические основания, которые образуют нетоксичные соли присоединения основания с такими соединениями. Такие нетоксичные соли присоединения основания включают, но этим не ограничивая, те соли, которые образованы из таких фармакологически приемлемых катионов, как катионы щелочных металлов (например, калий и натрий) и катионы щелочноземельных металлов (например, кальций и магний), аммоний, или соли присоединения водорастворимого амина, такого как N-метилглукамин-(меглумин), и низший алканоламмоний, и другие соли присоединения основания фармацевтически приемлемых органических аминов.
Могут быть также образованы полусоли кислот и оснований, например, гемисульфатные и гемикальциевые соли.
Более исчерпывающую информацию по подходящим солям можно найти в справочнике Handbook of Pharmaceutical Salts: Properties, Selection, and Use by Stahl and Wermuth (Wiley-VCH, 2002). Методы получения фармацевтически приемлемых солей соединений по изобретению известны любому специалисту в данной области.
Соли по настоящему изобретению могут быть получены методами, известными специалистам в данной области. Фармацевтически приемлемая соль соединений по настоящему изобретению может быть легко получена путем смешивания растворов соединения и требуемой кислоты или основания, в зависимости от конкретного случая. Соль может быть осаждена из раствора и собрана фильтрацией, или может быть выделена путем испарения растворителя. Степень диссоциации соли может варьировать от полностью диссоциированной до почти недиссоциированной.
Для специалистов в данной области является очевидным, что соединения по изобретению в форме свободного основания, имеющие функциональную группу с основными свойствами, могут быть превращены в соли присоединения кислоты путем обработки стехиометрическим избытком соответствующей кислоты. Соли присоединения кислоты соединений по настоящему изобретению могут быть обратно превращены в соответствующее свободное основание путем обработки стехиометрическим избытком подходящего основания, такого как карбонат калия или гидроксид натрия, обычно в присутствии водного растворителя и при температуре в диапазоне приблизительно от 0°C до 100°C. Форма свободного основания может быть выделена традиционными методами, такими как экстракция органическим растворителем. Кроме того, соли присоединения кислоты соединений по настоящему изобретению могут быть взаимно заменены друг на друга, используя для этого различия в растворимости солей, в летучести или кислотности кислот, или обрабатывая соответствующим образом загруженной ионообменной смолой. Например, взаимный обмен может быть осуществлен путем проведения реакции соли соединения по изобретению с небольшим стехиометрическим избытком кислоты с более низкой величиной pK, чем величина pK кислотного компонента исходной соли. Это превращение обычно проводят при температуре в диапазоне приблизительно от 0°C до температуры кипения растворителя, используемого в качестве среды для проведения этого превращения. Подобные взаимные обмены возможны и с солями присоединения оснований, обычно через промежуточное образование формы свободного основания.
Соединения по изобретению могут существовать как в несольватированной, так и в сольватированной формах. Когда растворитель или вода прочно связаны, комплекс будет иметь четко определенную стехиометрию, не зависящую от влажности. Однако, когда растворитель или вода связаны слабо, как в канальных сольватах и гигроскопичных соединениях, содержание воды/растворителя будет зависеть от влажности и условий сушки. В таких случаях, отклонение от стехиометрии будет нормой. В изобретении термин "сольват" используется описания молекулярного комплекса, включающего соединение по изобретению и одну или более молекул фармацевтически приемлемого растворителя, например, этанола. Термин "гидрат" используется в случае, когда растворителем является вода. Фармацевтически приемлемые сольваты в соответствии с изобретением включают гидраты и сольваты, где растворитель, в котором проводят кристаллизацию, может быть изотопно-замещенным, например, D2O, ацетон-d6, DMSO-d6.
В объем изобретения также входят комплексы, такие как клатраты, комплексы включения хозяин-лекарственное средство, где, в отличие от упомянутых выше сольватов, лекарственное средство и хозяин присутствуют в стехиометрических или нестехиометрических количествах. Кроме того, в объем изобретения также включены комплексы лекарственного средства, содержащие два или более органических и/или неорганических компонентов, которые могут присутствовать в стехиометрических или нестехиометрических количествах. Полученные комплексы могут быть ионизированными, частично ионизированными или неионизированными. Более подробную информацию по поводу таких комплексов можно найти в публикации J Pharm Sci, 64 (8), 1269-1288 by Haleblian (August 1975), полное содержание которой включено в настоящее изобретение путем ссылки на нее.
Изобретение также относится к пролекарствам соединений приведенных в изобретении формул. Так например, конкретные производные соединений по изобретению, которые сами по себе могут обладать невысокой фармакологической активностью или не иметь ее, способны при введении пациенту превращаться в соединения по изобретению, например, в результате гидролиза. Такие производные называют "пролекарствами". Дополнительную информацию по использованию пролекарств можно найти в публикациях "Pro-drugs as Novel Delivery Systems", Vol. 14, ACS Symposium Series (T Higuchi and W Stella) и "Bioreversible Carriers и Drug Design", Pergamon Press, 1987 (ed. E B Roche, American Pharmaceutical Association)), полное содержание которых включено в настоящее изобретение путем ссылки на них.
Пролекарства в соответствии с изобретением могут, например, быть получены путем замены соответствующих функциональных групп, присутствующих в соединениях по изобретению, на конкретные фрагменты, известные специалистам в данной области как "профрагменты", описанные, например, в монографии "Design of Prodrugs" by H Bundgaard (Elsevier, 1985), полное содержание которой включено в настоящее изобретение путем ссылки на нее.
Некоторые неограничивающие примеры пролекарств в соответствии с изобретением включают:
(i) в случае, когда соединение содержит функциональную группу карбоновой кислоты (COOH), ее сложный эфир, например, образованный путем замены водород на (C1-C8)алкил;
(ii) в случае, когда соединение содержит функциональную группу спирта (ОН), ее простой эфир, например, образованный путем замены водород на (C1-C6)алканоилоксиметил или на группу простого фосфатного эфира; и
(iii) в случае, когда соединение содержит функциональную группу первичного или вторичного амина ((-NH2 или -NHR, где R ≠ H), его амид, например, образованный путем замены соответствующим образом одного или обоих атомов водорода на метаболически нестабильную группу, такую как амид, карбамат, мочевина, фосфонат, сульфонат и другие подобные группы.
Дополнительные примеры замещающих групп в соответствии с приведенными выше примерами и примеры других типов пролекарств можно найти в упомянутых выше публикациях.
И наконец, некоторые соединения по изобретению могут сами действовать как пролекарства других соединений по изобретению.
В объем изобретения также входят метаболиты соединений описанных в изобретении формул, то есть соединения, образующиеся in vivo после введения лекарственного средства.
Соединения приведенных здесь формул могут иметь асимметричные углеродные элементы. Связи углерод-углерод в соединении по изобретению могут быть изображены сплошной линией ( 
), сплошной клиновидной связью ( 
) или пунктирной клиновидной связью ( 
). Предполагается, что использование сплошной линии для изображения связей с асимметричными углеродными атомами означает, что включены все возможные стереоизомеры (например, конкретные энантиомеры, рацемические смеси и так далее) на этом атоме углерода. Предполагается, что использование либо сплошной, либо пунктирной клиновидной связи, для изображения связей с асимметричными углеродными сплавами означает, что может быть включен только изображенный стереоизомер. Возможно, что соединение по изобретению может содержать более одного асимметричного углеродного атома. Предполагается, что в этих соединениях, использование сплошной линии для изображения связей с асимметричными углеродными атомами означает, что должны быть включены и присоединены к стереоцентру все возможные стереоизомеры. Например, если не указано иное, то предполагается, что соединение по изобретению может существовать как в виде энантиомеров и диастереомеров, так в виде рацематов и их смесей. Использование сплошной линии для изображения связей с одним или более асимметричными углеродными элементами в соединении по изобретению и использование сплошной или пунктирной клиновидной линии для изображения связей с другими асимметричными углеродными атомами в том же соединении означает, что присутствует смесь диастереомеров.
Соединения по изобретению, которые имеют хиральные центры, могут существовать в виде стереоизомеров, таких как рацематы, энантиомеры или диастереомеры.
Стереоизомеры соединений приведенных в изобретении формул могут включать цис- и транс-изомеры, оптические изомеры, такие как (R) и (S) энантиомеры, диастереомеры, геометрические изомеры, ротационные изомеры, атропоизомеры, конформационные изомеры и таутомеры соединений по изобретению, включая соединения, проявляющие более одного типа изомерии; и их смеси (такие как рацематы и диастереомерные пары).
Кроме того, изобретение включает соли присоединения кислоты или соли присоединения основания, в которых противоион является оптически активным, например, d-лактат или l-лизин, или рацемическим, например, dl-тартрат или dl-аргинин.
При кристаллизации любого рацемата, возможно получение кристаллов двух разных типов. Первый тип представляет собой упомянутое выше рацемическое соединение (истинный рацемат), где образуется одна гомогенная форма кристалла, содержащая оба энантиомера в эквимолярных количествах. Второй тип представляет собой рацемическую смесь или конгломерат, где образуются две формы кристаллов в эквимолярных количествах, каждая из которых содержит индивидуальный энантиомер.
Соединения по изобретению могут проявлять явления таутомерии и структурной изомерии. Например, соединения могут существовать в нескольких таутомерных формах, включая енольную и иминную формы, а также кето- и енамин-формы, и геометрические изомеры и их смеси. Все такие таутомерные формы входят в объем соединения по изобретению. В растворе, таутомеры существуют в виде смесей таутомеров. В твердой форме обычно преобладает один таутомер. Несмотря на то, что может быть описан один таутомер, тем не менее, настоящее изобретение включает все таутомеры соединений представленных формул.
Кроме того, некоторые соединения по изобретению могут образовывать атропоизомеры (например, замещенные биарилы). Атропоизомеры представляют собой конформационные стереоизомеры, которые возникают, когда вращение вокруг одинарной связи в молекуле предотвращается или сильно замедляется в результате стерических взаимодействий с другими частями молекулы, и заместители на обоих концах одинарной связи несимметричны. Взаимное превращение атропоизомеров происходит достаточно медленно, что позволяет их разделять и выделять в заданных условиях. Энергетический барьер для термической рацемизации может определяться стерическим препятствием для свободного вращения одной или нескольких связей, образующих хиральную ось.
Если соединение по изобретению содержит группу алкенила или алкенилена, то возможно существование геометрических цис/транс (или Z/E) изомеров. Цис/транс-изомеры можно разделять традиционными методами, хорошо известными специалистам в данной области, например, хроматографией и фракционной кристаллизацией.
Традиционные методы получения/выделения индивидуальных энантиомеров включают хиральный синтез из подходящего оптически чистого предшественника или разделение рацемата (или рацемата соли или производного) с использованием, например, хиральной высокоэффективной жидкофазной хроматографии (HPLC) или сверхкритической жидкостной хроматографии (SFC).
В качестве варианта, рацемат (или рацемический предшественник) может взаимодействовать с подходящим оптически активным соединением, например, спиртом, или, в случае, когда соединение содержит фрагмент с кислотными или основными свойствами, с кислотой или основанием, такими как винная кислота или 1-фенилэтиламин. Полученная диастереомерная смесь может быть разделена хроматографией и/или фракционной кристаллизацией, и один или оба диастереоизомера могут быть превращены в соответствующий чистый энантиомер (энантиомеры) с помощью методов, хорошо известных специалистам в данной области.
Хиральные соединения по изобретению (и их хиральные предшественники) могут быть получены в энантиомерно-обогащенной форме с использованием хроматографии, обычно HPLC, на асимметрической смоле с подвижной фазой, состоящей из углеводорода, обычно гептана или гексана, содержащего от 0 до 50% изопропанола, обычно, от 2 до 20%, и от 0 до 5% алкиламина, обычно, 0,1% диэтиламина. Концентрирование элюата дает обогащенную смесь.
Стереоизомерные конгломераты могут быть разделены традиционными методами, известными специалистам в данной области; смотрите, например, монографию "Stereochemistry of Organic Compounds" by E L Eliel (Wiley, New York, 1994), полное содержание которой включено в настоящее изобретение путем ссылки на нее.
Энантиомерная чистота описанных в изобретении соединений, может быть охарактеризована в терминах энантиомерного избытка (ee), который указывает, на сколько величина содержания в образце одного энантиомера превышает содержание другого энантиомера. Рацемическая смесь имеет величину ee 0%, в то время как индивидуальный полностью чистый энантиомер имеет величину ее 100%. Аналогично, диастереомерная чистота может охарактеризована в терминах диастереомерного избытка (de).
Настоящее изобретение также включает меченые изотопами соединения, которые идентичны соединениям, описываемым одной из приведенных в изобретении формул, за исключением того факта, что в них один или несколько атомов заменены атомом, атомная масса или массовое число которого отличается от атомной массы или массового числа, обычно встречающихся в природе.
Меченые изотопами соединения по изобретению, как правило, могут быть получены традиционными методами, известными специалистам в данной области, или методами, аналогичными методам, описанным в изобретении, с использованием подходящего меченого изотопами реагента вместо немеченого изотопами реагента, используемого в других случаях.
Примеры изотопов, которые могут быть введены в соединение по изобретению, включают изотопы водорода, углерода, азота, кислорода, фосфора, фтора и хлора, такие как, но не этим не ограничивая, 2H, 3H, 13C, 14C, 15N, 18O, 17O, 31P, 32P, 35S, 18F и 36Cl. Конкретные меченые изотопами соединения по изобретению, например соединения, в которые введены радиоактивные изотопы, такие как 3H и 14C, могут применяться при исследовании распределения лекарственного средства и/или субстрата в тканях. Особенно предпочтительными изотопами являются тритий, то есть 3H, углерод 14, то есть 14C, из-за простоты их получения и обнаружения. Кроме того, замещение на более тяжелые изотопы, такие как дейтерий, то есть 2H, может давать определенные терапевтические преимущества, обусловленные большей метаболической стабильностью, например, увеличенным периодом полувыведения in vivo или снижением требуемой дозы, и, следовательно, может быть предпочтительным при некоторых обстоятельствах. Меченые изотопами соединения по изобретению можно, как правило, получить методами, представленными на схемах и/или в примерах и синтезах ниже, путем замены реагента, не меченного изотопами, на реагент, меченный изотопами.
Соединения по изобретению, предназначенные для фармацевтического применения, могут быть введены в виде кристаллических или аморфных продуктов или их смесей. Они могут быть получены, например, в виде твердых цилиндров, порошков или пленок, такими методами, как осаждение, кристаллизация, сублимационная сушка, распылительная сушка или испарительная сушка. Для этой цели может быть использована сушка в микроволновом или радиочастотном диапазоне.
Терапевтические методы и использование
В изобретении также предлагаются терапевтические способы и применения, включающие введение соединений по изобретению или их приемлемой соли, взятых отдельно или в комбинации с другими терапевтическими средствами или паллиативными средствами.
В одном варианте осуществления, в изобретении предлагается способ лечения аномального клеточного роста у субъекта, включающий введение субъекту терапевтически эффективного количества соединения по изобретению или его фармацевтически приемлемой соли. В часто встречающихся вариантах осуществления, аномальный клеточный рост представляет собой рак.
В другом варианте осуществления, в изобретении предлагается способ лечения рака у субъекта, включающий введение субъекту количества соединения по изобретению или его фармацевтически приемлемой соли в комбинации с количеством дополнительного противоракового терапевтического средства, чьи количества вместе являются эффективными при лечении указанного рака.
Соединения по изобретению включают соединения любой из описанных в изобретении формул или их фармацевтически приемлемые соли.
В еще одном варианте осуществления, в изобретении предлагается способ ингибирования пролиферации раковых клеток у субъекта, включающий введение субъекту соединения по изобретению или его фармацевтически приемлемой соли в количестве, эффективным для ингибирования пролиферации клеток.
В другом варианте осуществления, в изобретении предлагается способ ингибирования пролиферации раковых клеток у субъекта, включающий введение субъекту соединения по изобретению или его фармацевтически приемлемой соли в количестве, эффективным для ингибирования инвазивности клеток.
В другом варианте осуществления, в изобретении предлагается способ индуцирования апоптоза в раковых клетках у субъекта, включающий введение субъекту соединения по изобретению или его фармацевтически приемлемой соли в количестве, эффективном для индуцирования апоптоза.
Раскрытые в настоящем изобретении соединения находят применение для ингибирования активности киназы HPK1. HPK1, также известная как митоген-активируемая протеинкиназа-киназа-киназа 1 или MAP4K1, является представителем подсемейства киназ зародышевого центра Ste20-подобных серин/треониновых киназ. Киназа HPK1 функционирует как MAP4K путем фосфорилирования и активирования белков MAP3K, в том числе MEKK1, MLK3 и TAK1, что приводит к активации MAPK Jnk.
Полинуклеотиды и полипептиды HPK1 хорошо известны (смотрите публикацию Hu et al. (1996) Genes Dev. 10: 2251-2264, полное содержание которой включено в настоящее изобретение путем ссылки на нее). Полипептиды HPK1 содержат множество консервативных структурных мотивов. Полипептиды HPK1 содержат амино-концевой Ste20-подобный киназный домен, который охватывает аминокислотные остатки 17-293, который включает сайт связывания АТФ из аминокислотных остатков 23-46. За киназным доменом следуют четыре пролин-обогащенных (PR) мотива, которые служат сайтами связывания для SH3-содержащих белков, таких как CrkL, Grb2, HIP-55, Gads, Nek и Crk. Четыре PR мотива охватывают аминокислотные остатки 308-407, 394-402, 432-443 и 468-477, соответственно. HPK1 фосфорилируется и активируется в ответ на стимуляцию TCR или BCR. TCR- и BCR-индуцированное фосфорилирование тирозина в положении 381, расположенном между PR1 и PR2, опосредует связывание с SLP-76 в Т-клетках или BLNK в B-клетках через домен SLP-76 или BLNK SH2 и требуется для активации киназы. Домен гомологии цитрона, обнаруженный на С-конце HPK1, приблизительно охватывающий остатки 495-800, может действовать как регуляторный домен и может участвовать в макромолекулярных взаимодействиях.
Раскрытые в настоящем изобретении соединения связываются непосредственно с HPK1 и ингибируют ее киназную активность. В некоторых вариантах осуществления, раскрытые в настоящем изобретении соединения снижают, ингибируют или иным образом уменьшают HPK1-опосредованное фосфорилирование SLP76 и/или Gads. Раскрытые в настоящем изобретении соединения могут быть или могут не быть специфическим ингибитором HPK1. Специфический ингибитор HPK1 снижает биологическую активность HPK1 на величину, которая статистически значимо превышает ингибирующее действие ингибитора на любой другой белок (например, другие серин/треониновые киназы). В конкретных вариантах осуществления, раскрытые в настоящем изобретении соединения специфически ингибируют серин/треонинкиназную активность HPK1.
Раскрытые в настоящем изобретении соединения могут применяться в способе ингибирования HPK1. Такие способы включают контактирование HPK1 с эффективным количеством описанного в изобретении соединения. Термин "контактирование" означает приведение соединения в достаточно близкое соприкосновение с изолированным ферментом HPK1 или клеткой, экспрессирующей HPK1 (например, с Т-клеткой, В-клеткой, дендритной клеткой), в результате чего соединение способно связываться и ингибировать активность HPK1. Соединение может контактировать с HPK1 in vitro или in vivo в результате введения соединения субъекту.
Любой известный в данной области метод измерения киназной активности HPK1 может быть использован для определения того, произошло ли ингибирование HPK1, в том числе анализы киназы in vitro, иммуноблоты с антителами, специфичными для фосфорилированных мишеней HPK1, таких как SLP76 и Gads, или измерение последующего биологического воздействия активности киназы HPK1, такого как рекрутирование белков 14-3-3 на фосфорилированные SLP7 и Gads, высвобождение комплекса SLP76-Gads-14-3-3 из микрокластеров, содержащих LAT, или активация Т- или В-клеток.
Раскрытые в настоящем изобретении соединения могут применяться для лечения HPK1-зависимого нарушения (например, рака). В контексте настоящего изобретения, "HPK1-зависимое нарушение" представляет собой патологическое состояние, при котором активность HPK1 необходима для генеза или поддержания патологического состояния.
Раскрытые в настоящем изобретении соединения также находят применение для усиления иммунного ответа у субъекта, нуждающегося в этом. Такие способы включают введение эффективного количества описанного в изобретении соединения (то есть соединения формулы I, II или III или его фармацевтически приемлемой соли, пролекарства, метаболита или производного). Термин "усиление иммунного ответа" относится к повышению любого иммуногенного ответа на антиген. Неограничивающие примеры повышения иммуногенного ответа на антиген включают ускоренное созревание или миграцию дендритных клеток, повышенную активацию Т-клеток (например, Т-клеток CD4, Т-клеток CD8), повышенная пролиферация Т-клеток (например, Т-клеток CD4, Т-клеток CD8), повышенная пролиферация В-клеток, повышенная выживаемость Т-клеток и/или В-клеток, улучшенное представление антигена антиген представляющими клетками (например, дендритными клетками), улучшенный клиренс антигена, увеличение продукции цитокинов Т-клетками (например, интерлейкин-2), повышенная устойчивость к иммуносупрессии, индуцированной простагландином E2, и повышенная прайминг-активность и/или цитолитическая активность Т-клеток CD8. В некоторых вариантах осуществления, Т-клетки CD8 у субъекта характеризуются повышенным праймингом, активацией, пролиферацией и/или цитолитической активностью по сравнению с периодом до введения соединения формулы I, II, III или его фармацевтически приемлемой соли, пролекарства, метаболита или производного. В некоторых вариантах осуществления, прайминг Т-клеток CD8 характеризуется повышенной экспрессией CD44 и/или повышенной цитолитической активностью в Т-клетках CD8. В некоторых вариантах осуществления, активация Т-клеток CD8 характеризуется повышенной частотой возникновения γ-IFN+ Т-клеток CD8. В некоторых вариантах осуществления, Т-клетка CD8 представляет собой антигенспецифическую Т-клетку.
В некоторых вариантах осуществления, антигенпредставляющие клетки у субъекта обладают усиленным созреванием и активацией по сравнению с периодом до введения соединения Формулы I, II, III или его фармацевтически приемлемой соли, пролекарства, метаболита или производного. В некоторых вариантах осуществления, антигенпредставляющие клетки представляют собой дендритные клетки. В некоторых вариантах осуществления, созревание антигенпрезентирующих клеток характеризуется повышенной частотой возникновения дендритных клеток CD83+. В некоторых вариантах осуществления, активация антигенпрезентирующих клеток характеризуется повышенной экспрессией CD80 и CD86 на дендритных клетках.
В некоторых вариантах осуществления, сывороточные уровни цитокина IL-10 и/или хемокина IL-8, человеческого гомолога мышиного KC, у субъекта снижены по сравнению с уровнем до введения соединения Формулы I, II, III или его фармацевтически приемлемой соли, пролекарства, метаболита или производного.
Вовлечение TCR приводит к активации HPK1, которая функционирует как негативный регулятор пути ответа AP-1, индуцированного TCR. Считается, что HPK1 негативно регулирует активацию Т-клеток за счет снижения персистенции микрокластеров сигнального каскада путем фосфорилирования SLP76 на Ser376 (Di Bartolo et al. (2007) JEM 204:681-691) и Gads на Thr254, что приводит к рекрутменту 14-3-3 белков, которые связываются с фосфорилированными SLP76 и Gads, высвобождая комплекс SLP76-Gads-14-3-3 из LAT-содержащих микрокластеров, что приводит к дисфункции Т-клеток, включая анергию и истощение (Lasserre et al. (2011) J Cell Biol 195(5):839-853). Термин "дисфункция" применительно к иммунной дисфункции относится к состоянию пониженной иммунологической реактивности на антигенную стимуляцию. Термин включает общие элементы как истощения, так и/или анергии, при которых может происходить распознавание антигена, но последующий иммунный ответ для контроля инфекции или роста опухоли является неэффективным.
Используемый в изобретении термин "дисфункциональный" также включает "резистентный или невосприимчивый к распознаванию антигена", в частности, нарушение способности транслировать распознавание антигена в эффекторные функции расположенных ниже Т-клеток, такие как пролиферация, продукция цитокинов (например, IL-2, гамма IFN) и/или уничтожение клеток-мишеней.
Термин "анергия" относится к состоянию невосприимчивости к стимуляции антигеном в результате неполных или недостаточных сигналов, передаваемых через рецептор Т-клетки (например, повышение внутриклеточного Са в отсутствие активации ras). Анергия Т-клеток также может возникать после стимуляции антигеном в отсутствие ко-стимуляции, в результате чего клетка становится невосприимчивой к последующей активации антигеном даже в условиях ко-стимуляции. Состояние невосприимчивости часто может быть скорректировано за счет присутствия интерлейкина-2. Анергические Т-клетки не подвергаются клональной экспансии и/или не приобретают эффекторных функций.
Термин "истощение" относится к истощению Т-клеток как состоянию дисфункции Т-клеток, которое обусловлено устойчивой активацией сигнального пути TCR, которая возникает при многих хронических инфекций и раке. Истощение отличается от анергии тем, что возникает не в результате неполной или недостаточной активации сигнального пути, а в результате устойчивой активацией сигнального пути. Истощение характеризуется недостаточной эффекторной функцией, устойчивой экспрессией ингибирующих рецепторов и состоянием транскрипции, отличным от функциональных эффекторных Т-клеток или Т-клеток памяти. Истощение препятствует оптимальному контролю инфекций и опухолей. Истощение может быть обусловлено как внешними негативными регуляторными путями (например, иммунорегуляторными цитокинами), так и внутренними негативными регуляторными (ко-стимулирующими) путями (PD-1, B7-H3, B7-H4 и другими подобными).
"Усиление функции Т-клеток" означает индуцирование, побуждение или стимуляцию Т-клетки к поддержанию или усилению биологической функции или обновление или реактивацию истощенных или неактивных Т-клеток. Примеры усиления функции Т-клеток включают повышенную секрецию цитокинов (например, гамма-интерферона, IL-2, IL-12 и TNFa), повышенную пролиферацию, повышенную отвечаемость на антигены (например, на вирус, патоген или клиренс опухоли) по сравнению с такими уровнями до вмешательства, и увеличение продукции эффекторных гранул CD8 T-клетками, такими как гранзимы B.
Соответственно, раскрытые в настоящем изобретении соединения формулы I, II, III или их фармацевтически приемлемые соли, пролекарства, метаболиты или производные могут применяться при лечении дисфункциональных нарушений Т-клеток. "Дисфункциональное нарушение Т-клеток" представляет собой нарушение или состояние Т-клеток, характеризующееся пониженной отвечаемостью на антигенную стимуляцию. В конкретном варианте осуществления, дисфункциональное нарушение Т-клеток представляет собой нарушение, которое специфически связано с повышенной киназной активностью HPK1. В другом варианте осуществления, дисфункциональное нарушение Т-клеток представляет собой нарушение, при котором Т-клетки являются анергическими или обладают пониженной способностью секретировать цитокины, пролиферировать или исполнять цитолитическую активность. В конкретном аспекте, пониженная отвечаемостью приводит к неэффективному контролю патогена или опухоли, экспрессирующей иммуноген. Примеры дисфункциональных нарушений Т-клеток, характеризующихся дисфункцией Т-клеток, включают недиагностированную острую инфекцию, хроническую инфекцию и опухолевый иммунитет.
Таким образом, раскрытые в настоящее изобретении соединения могут применяться для лечения состояний, при которых является желательной повышенная иммуногенность, например, повышение иммуногенности опухоли для лечения рака. "Иммуногенность" относится к способности конкретного вещества вызывать иммунный ответ. Опухоли являются иммуногенными, и повышение иммуногенности опухоли способствует выведению опухолевых клеток в результате иммунного ответа.
"Опухолевый иммунитет" относится к процессу, при котором опухоли ускользают от иммунного распознавания и выведения. Таким образом, в качестве терапевтической концепции, опухолевый иммунитет "лечат", когда ослабляют такую эвазию, и опухоли распознаются и атакуются иммунной системой. Примеры распознавания опухоли включают связывание опухоли, уменьшение размера опухоли и выведение опухоли.
В одном аспекте, в настоящем изобретении предлагается способ лечения рака у субъекта, нуждающегося в этом, включающий введение субъекту эффективного количества соединения формулы I, II, III или его фармацевтически приемлемой соли, пролекарства, метаболита или производного. В некоторых вариантах осуществления, субъект болен меланомой. Меланома может быть на ранней стадии или на поздней стадии. В некоторых вариантах осуществления, субъект болен колоректальным раком. Колоректальный рак может быть на ранней стадии или на поздней стадии. В некоторых вариантах осуществления, субъект болеет немелкоклеточным раком легкого. Немелкоклеточный рак легкого может быть на ранней стадии или на поздней стадии. В некоторых вариантах осуществления, субъект страдает от рака поджелудочной железы. Рак поджелудочной железы может находиться на ранней стадии или на поздней стадии. В некоторых вариантах осуществления, субъект страдает от гематологического злокачественного новообразования. Гематологическое злокачественное новообразование может быть на ранней стадии или на поздней стадии. В некоторых вариантах осуществления, субъект страдает от рака яичников. Рак яичников может быть на ранней стадии или на поздней стадии. В некоторых вариантах осуществления, субъект страдает от рака молочной железы. Рак молочной железы может быть на ранней стадии или на поздней стадии. В некоторых вариантах осуществления, субъект страдает от почечно-клеточной карциномы. Почечно-клеточная карцинома может быть на ранней стадии или на поздней стадии. В некоторых вариантах осуществления, рак характеризуется повышенными уровнями инфильтрации Т-клеток.
В некоторых вариантах осуществления, лечение приводит к устойчивому ответу у субъекта после прекращения лечения. "Устойчивый ответ" относится к устойчивому эффекту снижения роста опухоли после прекращения лечения. Например, размер опухоли может оставаться таким же или меньшим по сравнению с размером в начале фазы введения лекарственного препарата.
Раскрытые в изобретении способы лечения могут приводить к частичному или полному ответу. Используемый в изобретении термин "полный ответ" или "CR" относится к исчезновению всех целевых опухолевых очагов; "частичный ответ" или "PR" относится, по меньшей мере, к уменьшению на 30 процентов суммы самых длинных диаметров (SLD) целевых опухолевых очагов, принимая в качестве сравнения исходную величину SLD; и "стабильное заболевание" или "SD" не относится ни к достаточному уменьшению целевых опухолевых очагов, для того чтобы квалифицировать как PR, ни к достаточному увеличению, чтобы квалифицироваться как PD, принимая в качестве сравнения наименьшую величину SLD с момента начала лечения. Используемый в изобретении термин "частота общего ответа" (ORR) относится к сумме частоты полного ответа (CR) и частоты частичного ответа (PR).
Описанные в изобретении способы лечения могут приводить к увеличению выживаемости без прогрессирования заболевания и общей выживаемости субъекта, которому вводили антагонист HPK1. Используемый в изобретении термин "выживаемость без прогрессирования заболевания" (PFS) относится к продолжительности периода времени проведения лечения и после лечения, в течение которого заболевание, которое подвергают лечению (например, рак), не усугубляется. Выживаемость без прогрессирования заболевания может включать количество времени, в течение которого пациенты испытывали полный или частичный ответ, а также количество времени, в течение которого пациенты находились в стадии стабильного заболевания.
Используемый в изобретении термин "общая выживаемость" относится к проценту субъектов в группе, которые, вероятно, будут живы после определенного периода времени.
В часто встречающихся вариантах осуществления представленных в изобретении способов, аномальный клеточный рост представляет собой рак, характеризующийся амплификацией или гиперэкспрессией киназы HPK1. В некоторых вариантах осуществления представленных в изобретении способов, у субъекта диагностирован рак, характеризующийся амплификацией или гиперэкспрессией киназы HPK1.
В часто встречающихся вариантах осуществления представленных в изобретении способов, аномальный клеточный рост представляет собой рак, где рак выбирают из группы, состоящей из рака молочной железы, рака яичников, рака мочевого пузыря, рака матки, рака предстательной железы, рака легких (включая NSCLC, SCLC, плоскоклеточную карциному или аденокарциному), рака пищевода, рака головы и шеи, колоректального рака, рака почки (включая RCC), рака печени (включая HCC), рака поджелудочной железы, рака желудка (то есть гастрального рака) и рака щитовидной железы. В дополнительных вариантах осуществления представленных в изобретении способов, рак выбирают из группы, состоящей из рака молочной железы, рака яичников, рака мочевого пузыря, рака матки, рака предстательной железы, рака легких, рака пищевода, рака печени, рака поджелудочной железы и рака желудка. В некоторых таких вариантах осуществления, рак характеризуется амплификацией или гиперэкспрессией киназы HPK1.
В некоторых вариантах осуществления рак выбирают из группы, состоящей из рака молочной железы и рака яичников. В некоторых таких вариантах осуществления, рак представляет собой рак молочной железы или рак яичников, характеризующиеся амплификацией или гиперэкспрессией киназы HPK1. В некоторых таких вариантах осуществления, рак представляет собой (а) рак молочной железы или рак яичников; (b) характеризуется амплификацией или гиперэкспрессией киназы HPK1.
В некоторых вариантах осуществления рак, представляет собой рак яичника. В некоторых таких вариантах осуществления, рак яичников характеризуется амплификацией или гиперэкспрессией киназы HPK1.
В других вариантах осуществления, рак представляет собой рак молочной железы, включая, например, ER-положительный/HR-положительный рак молочной железы, HER2-отрицательный рак молочной железы, ER-положительный/HR-положительный рак молочной железы, HER2-положительный рак молочной железы; трижды негативный рак молочной железы (TNBC); или воспалительный рак молочной железы. В некоторых вариантах осуществления, рак молочной железы представляет собой резистентный к эндокринной терапии рак молочной железы, резистентный к трастузумабу рак молочной железы, или рак молочной железы, демонстрирующий первичную или приобретенную резистентность к ингибированию CDK4/CDK6. В некоторых вариантах осуществления, рак молочной железы представляет собой прогрессирующий или метастатический рак молочной железы. В некоторых вариантах осуществления каждого из приведенных выше вариантов, рак молочной железы характеризуется амплификацией или гиперэкспрессией киназы HPK1.
В некоторых вариантах осуществления, соединение по изобретению вводят в качестве терапии первой линии. В других вариантах осуществления, соединение по изобретению вводят в качестве терапии второй (или более поздней) линии. В некоторых вариантах осуществления, соединение по изобретению вводят в качестве терапии второй (или более поздней) линии после лечения эндокринным терапевтическим средством и/или ингибитором CDK4/CDK6. В некоторых вариантах осуществления, соединение по изобретению вводят в качестве терапии второй (или более поздней) линии после лечения эндокринным терапевтическим средством. В некоторых вариантах осуществления, соединение по изобретению вводят в качестве терапии второй (или более поздней) линии после лечения ингибитором CDK4/CDK6. В некоторых вариантах осуществления, соединение по изобретению вводят в качестве терапии второй (или более поздней) линии после лечения с использованием одной или более схем химиотерапии, например, включая использование таксанов или средств на основе соединений платины. В некоторых вариантах осуществления, соединение по изобретению вводят в качестве терапии второй (или более поздней) линии после лечения средствами, нацеленными на HER2, например, трастузумабом.
Термины "аномальный клеточный рост" и "гиперпролиферативное нарушение" используются в настоящем изобретении взаимозаменяемо.
Если не указано иное, то "аномальный клеточный рост", применительно к настоящему изобретению, относится к росту клеток, который не зависит от нормальных регуляторных механизмов (например, от потери контактного ингибирования). Аномальный клеточный рост может быть доброкачественным (незлокачественным) или злокачественным (раковым).
Аномальный клеточный рост включает ненормальный рост: (1) опухолевых клеток (опухолей), которые демонстрируют повышенную экспрессию киназы HPK1; (2) опухолей, которые пролиферируют под воздействием аберрантной киназы HPK1; (3) опухолей, характеризующихся амплификацией или гиперэкспрессией киназы HPK1 и (4) опухолей, резистентных к эндокринной терапии, антагонистам HER2 или ингибированию CDK4/6.
Используемый в изобретении термин "дополнительное противораковое терапевтическое средство" обозначает любое одно или более терапевтических средств, кроме соединения по изобретению, которые применяются или могут применяться для лечения рака, такие как средства, происходящие из следующих классов: ингибиторы митоза, алкилирующие средства, антиметаболиты, противоопухолевые антибиотики, ингибиторы топоизомеразы I и II, растительные алкалоиды, гормональные средства и антагонисты, ингибиторы факторов роста, лучевая терапия, ингибиторы протеинтирозинкиназ и/или серин/треонинкиназы, ингибиторы клеточного цикла, модификаторы биологического ответа, ингибиторы ферментов, антисмысловые олигонуклеотиды или производные олигонуклеотидов, цитотоксические средства и иммуноонкологические средства.
Используемый в изобретении термин "рак" относится к любому злокачественному и/или инвазивному росту или к опухоли, возникшей в результате аномального клеточного роста. Рак включает солидные опухоли, называемые по типу клеток, которые их образуют, рак крови, костного мозга или лимфатической системы. Примеры солидных опухолей включают саркомы и карциномы. Типы рака крови включает, но этим не ограничивая, лейкоз, лимфому и миелому. Рак также включает первичный рак, который возникает в определенном месте организма, метастатический рак, который распространился из места, где он возник, в другие части тела, рецидив исходного первичного рака после ремиссии и дополнительный первичный рак, который представляет собой новый первичный рак у пациента, у которого в анамнезе был рак, отличающийся от последнего дополнительного первичного рака.
В некоторых вариантах осуществления представленных в изобретении способов, рак выбирают из группы, состоящей из рака молочной железы, рака яичников, рака мочевого пузыря, рака матки, рака предстательной железы, рака легких, рака пищевода, рака печени, рака поджелудочной железы и рака желудка. В некоторых таких вариантах осуществления, рак характеризуется амплификацией или гиперэкспрессией киназы HPK1.
Лекарственные формы и режимы дозирования
Введение соединений по изобретению может быть осуществлено любым способом, который обеспечивает доставку соединений к месту их воздействия. Эти методы включают пероральное введение, интрадуоденальное введение, парентеральное введение (включая внутривенное, подкожное, внутримышечное, интраваскулярное введение или инфузию), местное и ректальное введение.
Режимы дозирования могут быть скорректированы для достижения требуемого оптимального ответа. Например, может быть введен одноразово болюс, могут быть введены несколько разделенных доз в течение определенного периода времени, или доза может быть пропорционально уменьшена или увеличена в зависимости от возникшей терапевтической ситуации. Особенно предпочтительно приготавливать парентеральные композиции в виде лекарственной формы с разовой дозой с точки зрения простоты введения и постоянства дозирования. Используемая в изобретении лекарственная форма с разовой дозой относится к физически дискретным единицам, подходящим в качестве разовых доз для подвергаемых лечению млекопитающих; при этом каждая единица содержит заданное количество активного соединения, рассчитанное для достижение требуемого терапевтического эффекта, в сочетании с необходимым фармацевтическим носителем. Функциональные характеристики лекарственных форм с разовой дозой по изобретению обусловлены и напрямую зависят от (а) характерных особенностей химиотерапевтического средства и конкретного терапевтического или профилактического эффекта, который должен быть достигнут, и (b) ограничений, возникающих при приготовлении активного соединения для лечения сенситивности у индивидуумов.
Таким образом, для квалифицированного специалиста должно стать очевидным после ознакомления с описанием изобретения, что дозу и режим дозирования следует корректировать, используя для этого хорошо известные в терапии методы. А именно, может быть легко установлена величина максимально переносимой дозы, и также может быть определено эффективное количество, позволяющее достигать заметного положительного терапевтического эффекта у пациента, как и временные требования по введению каждого средства, позволяющие достигать заметного положительного терапевтического эффекта у пациента. Соответственно, несмотря на то, что в изобретении приведены примеры конкретных доз и режимов введения, тем не менее, эти примеры никоим образом не являются ограничениями для дозы и режимов введения, которые могут быть предложены пациенту при применении настоящего изобретения на практике.
Следует отметить, что величины доз могут варьировать в зависимости от типа и тяжести состояния, которое необходимо облегчить, и могут включать разовые или многократные дозы. Кроме того, следует иметь в виду, что для любого конкретного субъекта конкретные режимы дозирования должны корректироваться с течением времени в соответствии с потребностями индивидуума и на основании профессионального заключения медицинского специалиста, осуществляющего введение или контролирующего введение композиций, и что описанные в изобретении диапазоны доз являются только примерами и никоем образом не ограничивают объем или практику использования заявленной композиции. Например, дозы могут быть скорректированы на основе фармакокинетических или фармакодинамических параметров, которые могут включать клинические эффекты, такие как токсические эффекты, и/или данные лабораторных анализов. Таким образом, настоящее изобретение включает возможность увеличения дозы в случае одного и того же пациента на основании заключения квалифицированного специалиста. Определение подходящих доз и режимов введения химиотерапевтического средства хорошо известно в терапии, и для квалифицированного специалиста в данной области не представит никаких сложностей при проведении такого определения после ознакомления с представленными в изобретении идеями.
Количество вводимого соединения по изобретению будет зависеть от субъекта, подвергаемого лечению, тяжести нарушения или состояния, скорости введения, распределения соединения и заключения лечащего врача. Однако, эффективная доза находится в диапазоне от приблизительно 0,001 до приблизительно 100 мг на кг массы тела в сутки, предпочтительно, от приблизительно 1 до приблизительно 35 мг/кг/сутки, в разовой дозе или в разделенных дозах. Для человека с массой тела 70 кг, это составляло бы от приблизительно 0,05 до приблизительно 7 г/сутки, предпочтительно, от приблизительно 0,1 до приблизительно 2,5 г/сутки. В некоторых случаях, могут быть более чем достаточными уровни доз ниже нижнего предела упомянутого выше диапазона, в то время как в других случаях, могут применяться еще более высокие дозы, не вызывая при этом какого-либо опасного побочного эффекта, при условии, что такие более высокие дозы сначала разделены на несколько небольших доз для приема в течение суток.
Композиции и способы введения
Используемый в изобретении термин "фармацевтически приемлемый носитель" относится к носителю или разбавителю, который не вызывает значительного раздражения в организме и не аннулирует биологическую активность и свойства вводимого соединения.
Фармацевтически приемлемый носитель может включать любой традиционный фармацевтический носитель или вспомогательное вещество. Выбор носителя и/или вспомогательного вещества будет в значительной степени зависеть от таких факторов, как конкретный способ введения, влияние носителя или вспомогательного вещества на растворимость и стабильность, а также от природы лекарственной формы.
Подходящие фармацевтические носители включают инертные разбавители или наполнители, воду и различные органические растворители. Фармацевтические композиции могут, при необходимости, содержать дополнительные ингредиенты, такие как ароматизаторы, связующие вещества, вспомогательные вещества и другие подобные вещества. Так, например, в случае перорального введения, в таблетках, содержащих различные вспомогательные веществ, такие как лимонная кислота, эти вспомогательные вещества могут использоваться вместе с различными разрыхлителями, такими как крахмал, альгиновая кислота и некоторые сложные силикаты, а также со связующими средствами, такими как сахароза, желатин и гуммиарабик. Примеры вспомогательных веществ включают, без ограничения, карбонат кальция, фосфат кальция, различные сахара и типы крахмала, производные целлюлозы, желатин, растительные масла и полиэтиленгликоли. Кроме того, для целей таблетирования часто используются смазывающие средства, такие как стеарат магния, лаурилсульфат натрия и тальк. Твердые композиции подобного типа также можно использовать в мягких и твердых желатиновых капсулах. Поэтому, неограничивающие примеры материалов включают лактозу или молочный сахар и высокомолекулярные полиэтиленгликоли. Когда для перорального введения требуются водные суспензии или эликсиры, активное соединение в них может быть объединено с различными подсластителями или ароматизаторами, красящими веществами или красителями и, при необходимости, с эмульгаторами или суспендирующими средствами вместе с разбавителями, такими как вода, этанол, пропиленгликоль, глицерин или их комбинации.
Фармацевтическая композиция может, например, находиться в форме, подходящей для перорального введения, в виде таблетки, капсулы, пилюли, порошка, форм с замедленным высвобождением, раствора суспензии; для парентеральной инъекции в виде стерильного раствора, суспензии или эмульсии; для местного применения в виде мази или крема; или для ректального введения в виде суппозитория.
Примеры форм для парентерального введения включают растворы или суспензии активных соединений в стерильных водных растворах, например, водных растворах пропиленгликоля или декстрозы. При необходимости, такие лекарственные формы могут быть соответствующим образом буферированы.
Фармацевтическая композиция может находиться в лекарственных формах с разовой дозой, подходящих для разового введения точных доз.
Для специалистов в данной области являются хорошо известными фармацевтические композиции, применяемые для доставки соединений по изобретению, и методы их получения. Подробную информацию по поводу таких композиций и методов их получения можно найти, например, в руководстве "Remington’s Pharmaceutical Sciences", 19th Edition (Mack Publishing Company, 1995), полное содержание которого включено в настоящее изобретение путем ссылки на него.
Соединения по изобретению может быть введено перорально. Пероральное введение может включать проглатывание, в результате чего соединение попадает в желудочно-кишечный тракт, или может применяться буккальное или сублингвальное введение, при котором соединение попадает в кровоток непосредственно из ротовой полости.
Композиции, применяемые для перорального введения, включают твердые композиции, такие как таблетки, капсулы, содержащие частицы, жидкости или порошки, леденцы (в том числе наполненные жидкостью), жевательные таблетки, мульти- и наночастицы, гели, твердый раствор, липосомы, пленки (в том числе приклеивающиеся к слизистой оболочке), гели, спреи и жидкие композиции.
Жидкие композиции включают суспензии, растворы, сиропы и эликсиры. Такие композиции могут быть использованы в качестве наполнителей в мягких или твердых капсулах, и они обычно включают носитель, например, воду, этанол, полиэтиленгликоль, пропиленгликоль, метилцеллюлозу или подходящее масло, а также один или более эмульгаторов и/или суспендирующих средств. Жидкие композиции могут быть также приготовлены путем растворения твердого вещества, например, из порошка для приготовления раствора.
Соединения по изобретению могут быть также использованы в быстро растворяющихся, быстро распадающихся лекарственных формах, таких как лекарственные формы, которые описаны в публикации Expert Opinion on Therapeutic Patents, 11 (6), 981-986 by Liang and Chen (2001), полное содержание которой включено в настоящий изобретение путем ссылки на нее.
Для таблетированных лекарственных форм, в зависимости от дозы, лекарственное средство может составлять от 1 до 80 масс.% от массы лекарственной формы, более часто, от 5 до 60 масс.% от массы лекарственной формы. Помимо лекарственного средства, таблетки обычно содержат разрыхлитель. Примеры разрыхлителей включают натрия крахмал гликолят, карбоксиметилцеллюлозу натрия, карбоксиметилцеллюлозу кальция, натрия кроскармеллозу, кросповидон, поливинилпирролидон, метилцеллюлозу, микрокристаллическую целлюлозу, замещенную низшим алкилом гидроксипропилцеллюлозу, крахмал, прежелатинизированный крахмал и альгинат натрия. Обычно разрыхлитель может составлять от 1 до 25 масс.%, предпочтительно, от 5 до 20 масс.% от массы лекарственной формы.
Связующие вещества обычно используются для придания когезионных свойств композиции таблетки. Подходящие связующие вещества включают микрокристаллическую целлюлозу, желатин, сахара, полиэтиленгликоль, натуральные и синтетические камеди, поливинилпирролидон, прежелатинизированный крахмал, гидроксипропилцеллюлозу и гидроксипропилметилцеллюлозу. Таблетки также могут содержать разбавители, такие как лактоза (моногидрат, высушенный распылением моногидрат, безводная и другие подобные формы), маннит, ксилит, декстроза, сахароза, сорбит, микрокристаллическая целлюлоза, крахмал и дигидрат двухосновного фосфата кальция.
Таблетки могут также необязательно включать поверхностно-активные вещества, такие как лаурилсульфат натрия и полисорбат 80, и скользящие вещества, такие как диоксид кремния и тальк. В случае их присутствия, поверхностно-активные вещества обычно составляют в количестве от 0,2 до 5 масс.% от массы таблетки, а скользящие вещества составляют обычно от 0,2 до 1 масс.% от массы таблетки.
Таблетки также обычно содержат смазывающие вещества, такие как стеарат магния, стеарат кальция, стеарат цинка, стеарилфумарат натрия и смеси стеарата магния с лаурилсульфатом натрия. Смазывающие вещества обычно присутствуют в количестве от 0,25 масс.% до 10 масс.%, предпочтительно, от 0,5 масс.% до 3 масс.% от массы таблетки.
Другие традиционные ингредиенты включают антиоксиданты, красящие вещества, ароматизаторы, консерванты и вещества, корригирующие вкус и запах лекарственного средства.
Типичные таблетки содержат до приблизительно 80 масс.% лекарственного средства, от приблизительно 10 масс.% до приблизительно 90 масс.% связующего вещества, от приблизительно 0 масс.% до приблизительно 85 масс.% разбавителя, от приблизительно 2 масс.% до приблизительно 10 масс.% разрыхлителя и от приблизительно 0,25 масс.% до приблизительно 10 масс.% смазывающего вещества.
Таблеточные смеси можно прессовать непосредственно или с помощью вальцевания с образованием таблеток. Таблеточные смеси или компоненты этих смесей могут, в качестве варианта, быть подвергнуты влажной грануляции, сухой грануляции или грануляции из расплава, затвердеванию из расплава или экструдированию перед таблетированием. Конечная композиция может включать один или несколько слоев покрытия, и может быть с нанесенной оболочкой или без оболочки, или может быть инкапсулирована.
Композиция таблеток подробно обсуждается в руководстве "Pharmaceutical Dosage Forms: Tablets, Vol. 1", by H. Lieberman and L. Lachman, Marcel Dekker, N.Y., N.Y., 1980 (ISBN 0-8247-6918-X), полное содержание которого включено в настоящее изобретение путем ссылки на него.
Могут быть приготовлены твердые композиции для перорального введения с немедленным и/или модифицированным высвобождением. Композиции с модифицированным высвобождением включают композиции с отсроченным высвобождением, замедленным высвобождением, импульсным высвобождением, контролируемым высвобождением, направленным высвобождением и запрограммированным высвобождением.
Подходящие композиции с модифицированным высвобождением описаны в патентном документе U.S. Patent No. 6106864. Подробная информация о других применяемых методов высвобождения лекарственного вещества, например, путем применения высокоэнергетических дисперсий и осмотических частиц, и частиц с нанесенным покрытием, можно найти в публикации Verma et al, Pharmaceutical Technology On-line, 25(2), 1-14 (2001). Использование жевательной резинки для достижения контролируемого высвобождения описано в патентном документе WO 00/35298. Полное описание этих публикаций включено в настоящее изобретение путем ссылок на них.
Парентеральное введение
Соединения по изобретению могут быть также введены непосредственно в кровоток, в мышцу или во внутренний орган. Подходящие способы парентерального введения включают внутривенное, внутриартериальное, интраперитонеальное, интратекальное, интравентрикулярное, внутриуретральное, интрастернальное, интракраниальное, внутримышечное и подкожное введение. Подходящие устройства для парентерального введения включают игольчатые (в том числе микроигольчатые) инъекторы, безыгольчатые инъекторы и инфузионные методы.
Композиции для парентерального введения обычно представляют собой водные растворы, которые могут содержать вспомогательные вещества, такие как соли, углеводы и буферные агенты (предпочтительно, с величиной pH от 3 до 9), но для некоторых применений, эти композиции более удобно приготовлять в виде стерильного неводного раствора или в виде высушенная форма для использования в сочетании с подходящим средой, такой как стерильная апирогенная вода.
Приготовление парентеральных композиций в стерильных условиях, например, путем лиофилизации, может быть легко осуществлено стандартными фармацевтическими методами, хорошо известными специалистам в данной области.
Растворимость соединений по изобретению, используемых при приготовлении растворов для парентерального введения, может быть увеличена путем использования соответствующих методик приготовления, таких как введение веществ, увеличивающих растворимость.
Композиции для парентерального введения могут быть приготовлены в форме с немедленным и/или модифицированным высвобождением. Композиции с модифицированным высвобождением включают композиции с отсроченным высвобождением, замедленным высвобождением, импульсным высвобождением, контролируемым высвобождением, направленным высвобождением и запрограммированным высвобождением. Так например, соединения по изобретению могут быть приготовлены в форме твердого вещества, полутвердого вещества или тиксотропной жидкости для введения в форме имплантированного депо, обеспечивающего модифицированное высвобождение активного соединения. Примеры таких композиций включают стенты с лекарственным покрытием и микросферы из сополимера молочной и гликолевой кислот (PGLA).
Соединения по изобретению могут быть также введены местно на кожу или слизистую оболочку, то есть дермально или чрескожно. Типичные композиции для этой цели включают гели, гидрогели, лосьоны, растворы, кремы, мази, присыпки, повязки, пены, пленки, трансдермальные пластыри, капсулы-имплантаты, имплантаты, губки, волокна, повязки и микроэмульсии. Кроме того, могут быть использованы липосомы. Типичные носители включают спирт, воду, минеральное масло, жидкий вазелин, белый вазелин, глицерин, полиэтиленгликоль и пропиленгликоль. Могут быть введены вещества, способствующие проникновению; смотрите, например, публикацию J Pharm Sci, 88 (10), 955-958 by Finnin and Morgan (October 1999). Другие способы местного введения включают доставку путем электропорации, ионофореза, фонофореза, сонофореза и инъекций с использованием микроигл или без использования игл (например, Powderject™, Bioject™, и другие). Полное содержание этой публикации включено в настоящее изобретение путем ссылки на нее.
Композиции для местного введения могут быть приготовлены в форме с немедленным и/или модифицированным высвобождением. Композиции с модифицированным высвобождением включают композиции с отсроченным высвобождением, замедленным высвобождением, импульсным высвобождением, контролируемым высвобождением, направленным высвобождением и запрограммированным высвобождением.
Соединения по изобретению могут быть также введены интраназально или путем ингаляции, обычно, в форме сухого порошка (либо как такового в виде смеси, например, сухой смеси с лактозой, либо в виде частиц из смешанного компонента, например, смешанного с фосфолипидами, такими как фосфатидилхолин) из ингалятора сухого порошка или в виде распыляемого аэрозоля из контейнера под давлением, с помощью насоса, из распылителя, аэрозольного ингалятора (предпочтительно, аэрозольного ингалятора, использующего электрогидродинамику для получения мелкодисперсного тумана) или небулайзера с использованием или без использования подходящего пропеллента, такого как 1,1,1,2-тетрафторэтан или 1,1,1,2,3,3,3-гептафторпропан. Для интраназального применения порошок может включать биоадгезивное средство, например хитозан или циклодекстрин.
Контейнер под давлением, насос, распылитель, аэрозольный ингалятор или небулайзер содержит раствор или суспензию соединения (соединений) по изобретению, включающий, например, этанол, водный этанол или подходящее альтернативное средство для диспергирования, солюбилизации или продления высвобождения активного вещества, пропеллент (пропелленты) в качестве растворителя и необязательное поверхностно-активное вещество, такое как триолеат сорбитана, олеиновая кислота или олигомолочная кислота.
Перед использованием в форме сухого порошка или суспензии, лекарственный продукт микронизируют до размера, подходящего для доставки путем ингаляции (обычно менее 5 микрон). Это может быть достигнуто с помощью любого подходящего метода измельчения, такого как размол на спиральной струйной мельнице, размол на струйной мельнице с псевдоожиженным слоем, обработка сверхкритической жидкостью с образованием наночастиц, гомогенизация под высоким давлением или распылительная сушка.
Капсулы (изготовленные, например, из желатина или гидроксипропилметилцеллюлозы (HPMC), блистеры и картриджи для использования в ингаляторе или инсуффляторе могут быть приготовлены так, чтобы содержать порошковую смесь соединения по изобретению, подходящую порошковую основу, такую как лактоза или крахмал, и модификатор характеристик, такой как лейцин, маннит или стеарат магния. Лактоза может быть безводной или в форме моногидрата, предпочтительно, в форме моногидрата. Другие подходящие вспомогательные вещества включают декстран, глюкозу, мальтозу, сорбит, ксилит, фруктозу, сахарозу и трегалозу.
Подходящая композиция раствора для применения в аэрозольном ингаляторе с использованием электрогидродинамики для получения мелкодисперсного тумана может содержать от 1 мкг до 20 мг соединения по изобретению при одном нажатии, а объем при одном нажатии может варьировать от 1 мкл до 100 мкл. Типичная композиция включает соединение по изобретению, пропиленгликоль, стерильную воду, этанол и хлорид натрия. Альтернативные растворители, которые могут быть использованы вместо пропиленгликоля, включают глицерин и полиэтиленгликоль.
В композиции по изобретении, предназначенные для ингаляционного/интраназального введения могут быть добавлены подходящие ароматизаторы, такие как ментол и левоментол, или подсластители, такие как сахарин или сахарин натрия.
Композиции для ингаляционного/интраназального введения могут быть приготовлены в форме для немедленного и/или модифицированного высвобождения с использованием, например, сополимера молочной и гликолевой кислот (PGLA). Композиции с модифицированным высвобождением включают композиции с отсроченным высвобождением, замедленным высвобождением, импульсным высвобождением, контролируемым высвобождением, направленным высвобождением и запрограммированным высвобождением.
В случае ингаляторов сухих порошком и аэрозолей, единица дозирования определяется с помощью клапана, который подает дозированное количество. Единицы дозирования в соответствии с изобретением обычно отрегулированы для введения отмеренной дозы или "впрыскивания", содержащих требуемое количество соединения по изобретению. Общая суточная доза может быть введена в форме разовой дозы или, чаще всего, в форме разделенных доз в течение суток.
Соединения по изобретению может быть введено ректально или вагинально, например, в форме суппозитория, пессария или клизмы. Традиционной основой для суппозиториев является масло какао, в зависимости от конкретного случая могут использоваться и различные альтернативные основы.
Композиции для ректального/вагинального введения могут быть приготовлены в форме для немедленного и/или модифицированного высвобождения. Композиции с модифицированным высвобождением включают композиции с отсроченным высвобождением, замедленным высвобождением, импульсным высвобождением, контролируемым высвобождением, направленным высвобождением и запрограммированным высвобождением.
Соединения по изобретению могут быть также введены непосредственно в глаз или ухо, обычно, в форме капель микронизированной суспензии или раствора в изотоническом стерильном физиологическом растворе с корректированной величиной pH. Другие композиции, применяемые для глазного и ушного введения, включают мази, биоразлагаемые (например, рассасывающиеся гелевые губки, коллаген) и небиоразлагаемые (например, силикон) имплантаты, пластины, линзы и системы в форме частиц или пузырьков, такие как ниосомы или липосомы. Полимер, такой как сшитая полиакриловая кислота, поливиниловый спирт, гиалуроновая кислота, полимер целлюлозы, например гидроксипропилметилцеллюлоза, гидроксиэтилцеллюлоза или метилцеллюлоза, или полимер гетерополисахарида, например, геллановая камедь, может быть введен вместе с консервантом, таким как хлорид бензалкония. Такие композиции могут быть также доставлены с помощью ионтофореза.
Композиции для глазного/ушного введения могут быть приготовлены в форме с немедленным и/или модифицированным высвобождением. Композиции с модифицированным высвобождением включают композиции с отсроченным высвобождением, замедленным высвобождением, импульсным высвобождением, контролируемым высвобождением, направленным высвобождением и запрограммированным высвобождением.
Другие технологии
Для использования в любом из упомянутых выше способов введения, соединения по изобретению могут быть объединены с растворимыми макромолекулярными соединениями, такими как циклодекстрин и его подходящие производные или полимеры, содержащие полиэтиленгликоль, для улучшения их растворимости, повышения скорости растворения, корригирования вкуса и запаха, повышения биодоступности и/или стабильности.
Обнаружено, что, например, комплексы лекарственных средств с циклодекстрином обычно целесообразно использовать для большинства лекарственных форм и способов введения. Могут использоваться как комплексы включения, так и комплексы невключения. В качестве альтернативы непосредственному образованию комплекса с лекарственным средством, циклодекстрин может быть использован в качестве вспомогательной добавки, то есть в качестве носителя, разбавителя или солюбилизатора. Чаще всего для этих целей используют альфа-, бета- и гамма-циклодекстрины, примеры которых можно найти в патентных документах РСТ № WO 91/11172, WO 94/02518 и WO 98/55148, полное содержание которых включены в настоящее изобретение путем ссылок на них.
Дозирование
Количество вводимого активного соединения будет зависеть от субъекта, подвергаемого лечению, тяжести нарушения или состояния, скорости введения, распределения соединения и заключения лечащего врача. Однако эффективная доза обычно находится в диапазоне от приблизительно 0,001 до приблизительно 100 мг на кг массы тела в сутки, предпочтительно, от приблизительно 0,01 до приблизительно 35 мг/кг/сутки, в форме разовой дозы или в форме разделенных доз. Для человека с массой тела 70 кг, эффективная доза будет составлять от приблизительно 0,07 до приблизительно 7000 мг/сутки, предпочтительно, от приблизительно 0,7 до приблизительно 2500 мг/сутки. В некоторых случаях, могут быть более чем достаточными уровни доз ниже нижнего предела упомянутого выше диапазона, в то время как в других случаях, могут применяться еще более высокие дозы, не вызывая при этом какого-либо опасного побочного эффекта, при условии, что такие более высокие дозы сначала разделены на несколько небольших доз для приема в течение суток.
Фармацевтические наборы
В виду того, что может быть желательным введение комбинации активных соединений, например, с целью лечения конкретного заболевания или состояния, в объем настоящего изобретения входят две или более фармацевтических композиций, по меньшей мере, одна из которых содержит соединение по изобретению, которые можно удобно объединять в форме набора, применяемого для совместного введения композиций. Так например, набор по изобретению включает две или более раздельных фармацевтических композиций, по меньшей мере, одна из которых содержит соединение по изобретению, и средства для раздельного хранения указанных композиций, такие как контейнер, разделенная бутылка или разделенный пакет из фольги. Примером такого набора является знакомая блистерная упаковка, используемая для упаковки таблеток, капсул и других подобных лекарственных форм.
Набор по изобретению особенно подходит для введения различных лекарственных форм, например, пероральной и парентеральной, для введения раздельных композиций с разными интервалами дозирования или для титрования раздельных композиций относительно друг друга. Для того чтобы пациенту было бы легче соблюдать инструкции по приему лекарственного препарата, набор обычно включает инструкции по применению и может быть снабжен памяткой.
Комбинированная терапия
Используемый в изобретении термин "комбинированная терапия" относится к введению соединения по изобретению вместе, по меньшей мере, с одним дополнительным фармацевтическим или лекарственным средством (например, противораковым средством), либо последовательно, либо одновременно.
Как отмечалось выше, соединения по изобретению можно использовать в комбинации с одним или несколькими дополнительными противораковыми средствами. Эффективность действия соединения по изобретению при конкретных опухолях может быть повышена за счет комбинации с другими одобренными или экспериментальными методами лечения рака, например, с лучевой терапией, хирургическим вмешательством, с химиотерапевтическими средствами, с таргетной терапией, со средствами, которые ингибируют другие сигнальные пути, которые являются разрегулированными в опухолях, и с другими иммуноукрепляющими средствами, такими как антагонисты PD-1 и другие подобные средства.
При использовании комбинированной терапии, одно или более дополнительных противораковых средств может быть введено последовательно или одновременно с соединением по изобретению. В одном варианте осуществления, дополнительное противораковое средство вводят млекопитающему (например, человеку) перед введением соединения по изобретению. В другом варианте осуществления, дополнительное противораковое средство вводят млекопитающему после введения соединения по изобретению. В другом варианте осуществления, дополнительное противораковое средство вводят млекопитающему (например, человеку) одновременно с введением соединения по изобретению.
Изобретение также относится к фармацевтической клеточной композиции для лечения аномального клеточного роста у млекопитающего, включая человека, которая включает определенное выше количество соединений по изобретению (в том числе гидратов, сольватов и полиморфов указанного соединения или его фармацевтически приемлемых солей) в комбинации с одним или более (предпочтительно, от одного до трех) противораковыми терапевтическими средствами.
В конкретных вариантах осуществления, соединение по изобретению может быть введено в комбинации с одним или более средствами направленного действия, такими как ингибиторы киназы PI3, mTOR, PARP, IDO, TDO, ALK, ROS, MEK, VEGF, FLT3, AXL, ROR2, EGFR, FGFR, Src/Abl, RTK/Ras, Myc, Raf, PDGF, AKT, c-Kit, erbB, CDK4/CDK6, CDK5, CDK7, CDK9, SMO, CXCR4, HER2, GLS1, EZH2 или Hsp90, или с иммуномодулирующими средствами, такими как антагонисты PD-1 или PD-L1, агонисты OX40 или агонисты 4-1BB.
В других вариантах осуществления, соединение по изобретению может быть введено в комбинации со стандартным средством лечения, таким как тамоксифен, доцетаксел, паклитаксел, цисплатин, капецитабин, гемцитабин, винорелбин, экземестан, летрозол, фулвестрант, анастрозол или трастузумаб.
Методы синтеза
Соединения формул I, II и III могут быть получены описанными ниже методами, наряду с методами синтеза, известными в области органической химии, или с помощью модификаций и превращений, которые известны специалистам в данной области. Используемые здесь исходные материалы производятся промышленностью или могут быть получены обычными методами, известными в данной области [такими как методы, описанные в стандартных справочниках, таких как Compendium of Organic Synthetic Methods, Vol. I-XIII (published by Wiley-Interscience)]. Предпочтительные методы включают, но этим не ограничивая, описанные ниже методы.
Во время осуществления любой из следующих последовательностей синтеза может быть необходимо и/или желательно защитить малоустойчивые или реакционно-способные группы на любой из рассматриваемых молекул. Это может быть достигнуто путем использования традиционных защитных групп, таких как описанные в монографиях T. W. Greene, Protective Groups in Organic Chemistry, John Wiley & Sons, 1981; T. W. Greene and P. G. M. Wuts, Protective Groups in Organic Chemistry, John Wiley & Sons, 1991; и T. W. Greene and P. G. M. Wuts, Protective Groups in Organic Chemistry, John Wiley & Sons, 1999, полное содержание которых включено в настоящее изобретение путем ссылок на них.
Соединения формулы I, II и III или их фармацевтически приемлемые соли могут быть получены в соответствии со схемами реакций, обсуждаемыми ниже. Если не указано иное, то заместители на схемах определены выше. Для обычного специалиста в данной области является очевидным, что R13 является заместителем, который находится вне R4. Неограничивающие примеры R13 включают (C1-C6) алкил, необязательно замещенный гидрокси, галоген (C1-C6)алкил и -(CH2)n(C3-C6) циклоалкил, где n равно 0 или 1. Неограничивающие примеры (C1-C6)алкила для R13 на схемах ниже включает CH3-, CH3-CH2-, и CH3-CH2-CH2-.
Выделение и очистка продуктов осуществляется стандартными методами, которые известны химику с обычной квалификацией.
Для специалиста в данной области является очевидным, что различные символы, верхние индексы и нижние индексы, применяемые в схемах, методах и примерах, используются для удобства представления и/или для отражения порядка, в котором их вводят в схемах, и не предполагается, что они обязательно соответствуют символам, надстрочным или подстрочным индексам в прилагаемой формуле изобретения. Кроме того, для специалиста в данной области является очевидным, что, во многих случаях, эти соединения будут представлять собой смеси и энантиомеры, которые могут быть разделены на различных стадиях схем синтеза с использованием традиционных методов, таких как, но этим не ограничивая, кристаллизация, хроматография с нормальными фазами, хроматография с обращенными фазами и хиральная хроматография, для получения индивидуальных энантиомеров. Эти схемы являются типичными примерами методов, используемых при синтезе соединений по настоящему изобретению. Они никоим образом не ограничивают объем изобретения.
Соединения по изобретению получают в соответствии с приводимыми в изобретении в качестве примера методами и их модификациями, известными специалистам в данной области.
В примерах используются следующие сокращения: "Ac" обозначает ацетил, "AcO" или "OAc" обозначает ацетокси, "ACN" обозначает ацетонитрил, "aq" обозначает водный раствор, "атм" обозначает атмосферу (атмосферы), "BOC", "Boc" или "boc" обозначает N-трет-бутилкарбонил, "Bn" обозначает бензил, "Bu" обозначает бутил, "nBu" обозначает нормальный бутил, "tBu" обозначает трет-бутил, "DBU" обозначает 1,8-диазабицикло[5.4.0]ундец-7-ен, "Cbz" обозначает бензилоксикарбонил, "DCM" (CH2Cl2) обозначает метиленхлорид, "de" обозначает диастереомерный избыток, "DEA" обозначает диэтиламин, "DIPEA" обозначает диизопропилэтиламин, "DMA" обозначает N,N-диметилацетамид, "DME" обозначает 1,2-диметоксиэтан, "DMF" обозначает N,N-диметилформамид, "DMSO" обозначает диметилсульфоксид, "EDTA" обозначает этилендиаминтетрауксусную кислоту, "ee" обозначает энантиомерный избыток, "Et" обозначает этил, "EtOAc" обозначает этилацетат, "EtOH" обозначает этанол, "HOAc" или "AcOH" обозначает уксусную кислоту, "i-Pr" или "iPr" обозначает изопропил, "IPA" обозначает изопропиловый спирт, "LAH" обозначает алюмогидрид лития, "LHMDS" обозначает гексаметилдисилазид лития (лития бис(триметилсилил)амид), "mCPBA" обозначает метахлорпероксибензойную кислоту, "Me" обозначает метил, "MeOH" обозначает метанол, "MS" обозначает масс-спектрометрию, "MTBE" обозначает метилтрет-бутиловый эфир, "NCS" обозначает N-хлорсукцинимид, "Ph" обозначает фенил, "TBHP" обозначает трет-бутилгидропероксид, "TBME" обозначает трет-бутилметиловый эфир, "TFA" обозначает трифторуксусную кислоту, "THF" обозначает тетрагидрофуран, "SFC" обозначает сверхкритическую флюидную хроматографию, "ТСХ" обозначает тонкослойную хроматографию, "Rf" обозначает фактор удерживания, "~" обозначает приблизительно, "rt" обозначает время удерживания, "ч" обозначает часы, "мин" обозначает минуты, "экв" обозначает эквиваленты, "насыщ." обозначает насыщенный.
Синтез промежуточных соединений
Промежуточное соединение 1: 2-бром-6-[4-(пропан-2-ил)-4H-1,2,4-триазол-3-ил]пиридин
Стадия 1: 6-бромпиридин-2-карбогидразид (1a)
1a
К раствору метил 6-бром-2-пиридинкарбоксилата (16,0 г, 74,0 ммоль) в метаноле (120 мл) добавляли моногидрат гидразина (5,23 г, 88,8 ммоль, 85%), и смесь перемешивали в течение 16 часов при температуре окружающей среды. Полученный раствор концентрировали приблизительно до половины объема и затем растирали путем добавления 40 мл метилтрет-бутилового эфира и перемешивания в течение 10 минут. Полученное белое твердое вещество фильтровали и сушили под вакуумом с получением названного соединения (15 г, 94%). 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,82 (уш.с, 1H), 8,13 (дд, J=0,9, 7,5 Гц, 1H), 7,76-7,71 (м, 1H), 7,64 (дд, J=0,9, 8,0 Гц, 1H), 4,08 (уш.с, 2H). m/z (ESI) для (C6H6BrN3O) 217,5 (M+H)+
Стадия 2: N'-[(6-бромпиридин-2-ил)карбонил]-N,N-диметил-гидразоноформамид (1b)
Раствор 6-бромпиридин-2-карбогидразида (1a) (15,0 г, 69,4 ммоль) в диметилформамид диметилацетали (80 мл) перемешивали при 80°C в течение 16 часов. Полученную смесь концентрировали при пониженном давлении с получением остатка. К этому остатку добавляли метилтрет-бутиловый эфир (60 мл) и перемешивали в течение 40 минут, полученное желтое твердое вещество фильтровали и сушили с получением названного соединения (16 г, 85%). 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 10,74 (с, 1H), 8,06 (с, 1H), 8,01-7,97 (м, 1H), 7,91 (т, J=7,7 Гц, 1H), 7,80 (дд, J=1,0, 7,8 Гц, 1H), 2,84 (с, 6H). m/z (ESI) для (C9H11BrN4O) 272,7 (M+H)+
Стадия 3: 2-бром-6-[4-(пропан-2-ил)-4H-1,2,4-триазол-3-ил]пиридин (промежуточное соединение 1)
N'-[(6-бромпиридин-2-ил)карбонил]-N,N-диметилгидразоно-формамид (1b) (16,0 г, 59,0 ммоль) и изопропиламин (12,0 г, 200 ммоль) растворяли в уксусной кислоте (33 мл) и ацетонитриле (130 мл). После прекращения наблюдаемого выделения дыма, полученный раствор перемешивали при 95°C в течение 16 часов. Реакционную смесь объединяли с еще одной партией этой реакционной смеси (в масштабе 5 г) и концентрировали под вакуумом. Полученный материал разбавляли водой (130 мл), и доводили величину рН до 7 с помощью 1N водного раствора гидроксида натрия (120 мл). Полученную смесь затем экстрагировали этилацетатом (2×150 мл), и объединенный органический слой промывали водой (2×130 мл) и концентрировали под вакуумом. Неочищенный продукт очищали колоночной хроматографией (0-100% этилацетат в петролейном эфире) с получением названного соединения в виде желтого твердого вещества (16,9 г, средний выход 82%). 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,42-8,34 (м, 1H), 8,28 (д, J=7,8 Гц, 1H), 7,69 (т, J=7,8 Гц, 1H), 7,52 (д, J=7,8 Гц, 1H), 5,57 (спт, J=6,7 Гц, 1H), 1,56 (д, J=6,5 Гц, 6H). m/z (ESI) для (C10H11BrN4) 268,8 (M+H)+
Промежуточное соединение 2: трет-бутил ((6-хлор-1-оксо-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-4-ил)метил)(метил)карбамат
Стадия 1: 4-хлор-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он (2a)
N-бромсукцинимид (5,43 г, 30,5 ммоль) и азобисизобутиронитрил (453 мг, 2,76 ммоль) добавляли к раствору метил 2-хлор-3-метилпиридин-4-карбоксилата (5,12 г, 27,61 ммоль) в тетрахлориде углерода (35 мл, 0,8 M). Полученную смесь нагревали при 80°C в течение 18 часов. Смесь охлаждали до комнатной температуры, фильтровали, и твердое вещество промывали тетрахлоридом углерода (10 мл). Фильтрат разбавляли с помощью DCM (100 мл) и промывали насыщенным водным раствором бикарбоната натрия (100 мл). Водный слой экстрагировали с помощью DCM (100 мл). Объединенные органические слои сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали с получением бледно-коричневого масла, которое растворяли в 7 N растворе аммиака в метаноле (39 мл, 276 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 часов. Растворитель удаляли при пониженном давлении. Остаток растворяли в DCM (100 мл) и промывали насыщенным водным раствором бикарбоната натрия (100 мл). Водный слой экстрагировали с помощью DCM (100 мл). Объединенный органический слой сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали с получением названного соединения желтовато-белого твердого вещества (4,58 г, 98%). 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,62 (д, J=4,89 Гц, 1H), 7,75 (д, J=5,01 Гц, 1H), 6,70 (уш.с, 1H), 4,54 (с, 2H). m/z (APCI+) для (C7H5ClN2O) 168,7 (M+H)+
Стадия 2: метил 1-оксо-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-4-карбоксилат (2b)
В реактор высокого давления объемом 100 мл загружали 4-хлор-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он (2a) (787 мг, 4,67 ммоль), метанол (30 мл), ацетат калия (913 мг, 9,30 моль) и тетракис(трифенилфосфин)палладий (168 мг, 0,145 ммоль). В реактор подавали газообразный монооксид углерода (0,4 Мпа), и реакционную смесь нагревали в течение 4 часов при 100°C. Полученную смесь фильтровали, и полученное твердое вещество промывали метанолом. Твердое вещество затем собирали и сушили с получением названного соединения в виде коричневого твердого вещества (744 мг, 83%), которое использовали без очистки.1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 9,13 (с, 1H), 8,87 (д, J=4,77 Гц, 1H), 7,93 (д, J=4,77 Гц, 1H), 4,71 (с, 2H), 3,93 (с, 3H). m/z (APCI+) для (C9H8N2O3)193,0 (M+H)+
Стадия 3: 2-(трет-бутил) 4-метил 1-оксо-1,3-дигидро-2H-пирроло[3,4-c]пиридин-2,4-дикарбоксилат (2c)
Триэтиламин (0,81 мл, 5,81 ммоль), дитрет-бутилдикарбонат (1,07 г, 4,65 ммоль) и 4-диметиламинпиридин (48,3 мг, 0,387 ммоль) добавляли к суспензии метил 1-оксо-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-4-карбоксилата (2b) (744 мг, 3,87 ммоль) в DCM (4,0 мл, 1 M). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 4 часов. Реакционную смесь разбавляли водой (30 мл) и экстрагировали с помощью DCM (2×30 мл). Объединенный органический слой сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали. Неочищенный материал очищали колоночной хроматографией (30-100% этилацетат в гептане) с получением названного соединения в виде бледно-желтого твердого вещества (74 мг, 66%). 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,98 (д, J=4,89 Гц, 1H), 8,02 (д, J=4,89 Гц, 1H), 5,21 (с, 2H), 4,11 (с, 3H), 1,65 (с, 9H). m/z (APCI+) для (C14H16N2O5) 293,3 (M+H)+
Стадия 4: 2-(трет-Бутоксикарбонил)-4-(метоксикарбонил)-1-оксо-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридина 5-оксид (2d)
Мочевину-пероксид водорода (1,14 г, 12,1 ммоль) добавляли к раствору 2-(трет-бутил) 4-метил 1-оксо-1,3-дигидро-2H-пирроло-[3,4-c]пиридин-2,4-дикарбоксилата 2c (1,68 г, 5,76 ммоль) в ацетонитриле (38 мл, 0,15 M). Смесь охлаждали до 0°C, затем добавляли по каплям трифторуксусный ангидрид (1,6 мл, 11,5 ммоль). Полученную смесь перемешивали при 0°C и затем подогревали до комнатной температуры и перемешивали в течение 2 часов. Смесь гасили водным 10% раствором тиосульфата натрия (80 мл) и экстрагировали с помощью DCM (2×80 мл). Объединенный органический слой сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали с получением названного соединения в виде белого твердого вещества (2,23 г, 125% ~80% чистота по массе). m/z (APCI+) для (C14H16N2O6) 308,9 (M+H)+
Стадия 5: 2-(трет-бутил) 4-метил 6-хлор-1-оксо-1,3-дигидро-2H-пирроло[3,4-c]пиридин-2,4-дикарбоксилат (2e)
2,6-Лутидин (0,34 мл, 2,90 ммоль) добавляли к раствору 2-(трет-бутоксикарбонил)-4-(метоксикарбонил)-1-оксо-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин 5-оксида (2d) (1,05 г, 2,90 ммоль) в DCM (29 мл, 0,1 M) при 0°C, затем добавляли оксихлорид фосфора(V) (0,54 мл, 5,79 ммоль) и DMF (0,14 мл, 1,74 ммоль). Полученную смесь перемешивали при 0°C, затем подогревали до комнатной температуры. Через 2 часа, анализ методом LCMS показывал только присутствие исходного материала, и добавляли оксихлорид фосфора(V) (0,32 мл, 3,47 ммоль) и DMF (0,14 мл, 1,74 ммоль), и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 18 часов. Реакционную смесь гасили насыщенным водным раствором бикарбоната натрия (100 мл) и экстрагировали с помощью DCM (2×100 мл). Объединенный органический слой сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали. Неочищенный материал очищали колоночной хроматографией (30-100% этилацетат в гептане) с получением названного соединения в виде белого твердого вещества (722 мг, 76%). (По данным 1H ЯМР содержалось приблизительно 8% метил 6-хлор-2-формил-1-оксо-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]-пиридин-4-карбоксилата). 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 7,92 (с, 1H) 5,07 (с, 2H) 4,00 (с, 3H) 1,55 (с, 9H). m/z (APCI+) для (C14H15ClN2O5) 328,9 (M+H)+
Стадия 6: метил 6-хлор-1-оксо-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-4-карбоксилат (2f)
Раствор 4 N HCl в диоксане (7,0 мл, 29,0 ммоль) добавляли к раствору 2-(трет-бутил) 4-метил 6-хлор-1-оксо-1,3-дигидро-2H-пирроло[3,4-c]пиридин-2,4-дикарбоксилата (2e) (722 мг, 2,21 ммоль) в DCM (20 мл) и метаноле (5 мл). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 часов. Летучее вещество удаляли при пониженном давлении, и полученный материал подвергали дистилляции в виде азеотропной смеси с толуолом, затем дополнительно концентрировали под вакуумом с получением названного соединения в виде желтовато-белого твердого вещества (520 мг, 90%). 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 9,28 (с, 1H) 8,04 (с, 1H) 4,68 (с, 2H) 3,94 (с, 3H). m/z (APCI+) для (C9H7ClN2O3) 226,90 (M+H)+
Стадия 7: 6-хлор-4-(гидроксиметил)-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он (2g)
2,0 M раствор боргидрида лития в THF (8,8 мл, 17,7 ммоль) добавляли к суспензии метил 6-хлор-1-оксо-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-4-карбоксилата (2f) (1,0 г, 3,80 ммоль) в THF (60 мл, 0,074 M) при 0°C. Смесь перемешивали при 0°C в течение 1 часа, затем гасили водным раствором 1N HCl (0,5 мл). Смесь разбавляли водой (100 мл) и экстрагировали 20% изопропанолом в DCM (4×100 мл). Объединенный органический слой сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали с получением названного соединения в виде белого твердого вещества (795 мг, 91%). 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 9,05 (уш.с, 1H) 7,60 (с, 1H) 5,59 (т, J=5,93 Гц, 1H) 4,72 (д, J=5,75 Гц, 2H) 4,56 (с, 2H). m/z (APCI+) для (C8H7ClN2O2) 199,0 (M+H)+
Стадия 8: трет-бутил ((6-хлор-1-оксо-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-4-ил)метил)(метил)карбамат (промежуточное соединение 2)
Метансульфонилхлорид (0,04 мл, 0,483 ммоль) добавляли к суспензии 6-хлор-4-(гидроксиметил)-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]-пиридин-1-она (2g) (48,0 мг, 0,240 ммоль) в DCM (6,0 мл, 0,02 M) при 0°C. Полученную смесь перемешивали при 0°C в течение 30 минут. Добавляли 2 M раствор метиламина в THF (1,21 мл, 2,42 ммоль), и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. Летучее вещество удаляли при пониженном давлении, и остаток переносили в DCM (6 мл). Добавляли дитрет-бутилдикарбонат (66,6 мг, 0,290 ммоль) и триэтиламин (0,10 мл, 0,725 ммоль), и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 часов. Реакционную смесь разбавляли водой (20 мл) и экстрагировали с помощью DCM (2×20 мл). Объединенный органический слой сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали. Неочищенный материал очищали колоночной хроматографией (50-100% этилацетат в гептане) с получением названного соединения в виде желтовато-белого твердого вещества (40 мг, 53%). 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 7,72 (с, 1H), 4,68 (с, 2H), 4,54 (уш.с, 2H), 2,94 (с, 3H), 1,50 (уш.с, 9H). m/z (APCI+) для (C14H18ClN3O3) 312,0 (M+H)+.
Промежуточное соединение 3: трет-бутил ((6-(диметиламино)-1-оксо-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-4-ил)метил)(метил)-карбамат
Стадия 1: метил 6-(диметиламино)-1-оксо-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-4-карбоксилат (3a)
A смесь гидрохлорида диметиламина (30,8 мг, 0,377 ммоль), триэтиламина (0,14 мл, 1,03 ммоль) и метил 6-хлор-1-оксо-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-4-карбоксилата 2f (77,7 мг, 0,34 ммоль) в DMF (2 мл) нагревали до 80°C. После перемешивания при этой температуре в течение 24 часов, реакция не заканчивалась. Добавляли гидрохлорид диметиламина (30,8 мг, 0,377 ммоль) и триметиламин (0,14 мл, 1,03 ммоль), и смесь перемешивали при 80°C в течение 24 часов. Летучее вещество удаляли при пониженном давлении. Остаток переносили в воду (10 мл) и экстрагировали с помощью DCM (2×10 мл). Объединенный органический слой сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали. Неочищенный материал очищали колоночной хроматографией (0-10% метанол в DCM) с получением названного соединения в виде бледно-коричневого масла (35 мг, 43%). 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 7,17 (с, 1H) 4,71 (с, 2H) 4,06 (с, 3H) 3,22 (с, 6H). m/z (APCI+) для (C11H13N3O3) 236,0 (M+H)+
Стадия 2: 6-(диметиламино)-4-(гидроксиметил)-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он (3b)
Боргидрид лития (0,27 мл, 0,536 ммоль, 2,0 M в THF) добавляли к раствору метил 6-(диметиламино)-1-оксо-2,3-дигидро-1H-пирроло-[3,4-c]пиридин-4-карбоксилата (3a) (35 мг, 0,130 ммоль) в THF (5,0 мл, 0,03 M) при 0°C. Полученную смесь перемешивали при 0°C, затем подогревали до комнатной температуры и перемешивали в течение 18 часов. Смесь гасили водой (15 мл) и экстрагировали 10% метанолом в DCM (2×15 мл). Объединенные органические слои сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали с получением названного соединения в виде желтовато-белого твердого вещества (24 мг, 78%) которое использовали без очистки. m/z (APCI+) для (C10H13N3O2) 208,1 (M+H)+
Стадия 3: трет-бутил ((6-(диметиламино)-1-оксо-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-4-ил)метил)(метил)карбамат (промежуточное соединение 3)
К раствору 6-(диметиламино)-4-(гидроксиметил)-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-она (3b) (24 мг, 0,120 ммоль) в DCM (16,0 мл) добавляли триэтиламин (0,08 мл, 0,579 ммоль) и метансульфонилхлорид (0,02 мл, 0,232 ммоль) при 0°C Смесь перемешивали при 0°C в течение 30 минут, добавляли 1 M раствор метиламина в THF (1,2 мл, 1,16 ммоль), и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. Летучее вещество удаляли при пониженном давлении. Остаток переносили в DCM (10 мл) и добавляли триэтиламин (0,08 мл, 0,579 ммоль) и дитрет-бутилдикарбонат (39,1 мг, 0,174 ммоль). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 18 часов. Смесь гасили водой (15 мл) и экстрагировали 10% метанола в DCM (2×15 мл). Объединенный органический слой сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали. Неочищенный материал очищали колоночной хроматографией (0-10% метанол в DCM) с получением названного соединения в виде белой пены (17 мг, 46%). 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 6,83 (с, 1H), 6,61-6,44 (м, 1H), 4,50 (уш.с, 2H), 4,41-4,31 (м, 2H), 3,12 (с, 6H), 2,97-2,89 (м, 3H), 1,51 -1,39 (с, 9H). m/z (APCI+) для (C16H24N4O3) 321,0 (M+H)+.
В качестве варианта, промежуточное соединение 3 получали следующим образом:
Стадия 1: 2-хлор-6-(диметиламино)-N,N-диметилпиридин-4-карбоксамид (3c)
В круглодонную колбу объемом 3,0 л, загруженную метил 2,6-дихлорпиридин-4-карбоксилатом (58,0 г, 281 ммоль), в атмосфере N2 добавляли N,N-диметиламин (38,1 г, 845 ммоль) при 0-10°C. Добавляли THF (200 мл). Добавляли на протяжении 3 часов раствор i-PrMgCl (2,0 M в THF, 352 мл, 704 ммоль), поддерживая при этом температуру реакционной среды при 0-10°C. Реакционную смесь перемешивали в течение еще 10 минут при 0°C и затем при 25°C в течение 18 часов. Анализ методом LCMS показывал полный расход исходного материала с образованием продукта с требуемой молекулярной массой. Реакционную смесь охлаждали на ледяной бане и гасили путем добавления холодного водного насыщенного раствора NH4Cl (500 мл), поддерживая при этом температуру реакционной среды <20°C. Добавляли EtOAc (500 мл), и слои разделяли. Водный слой экстрагировали с помощью EtOAc (500 мл). Объединенные органические фазы промывали солевым раствором, сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Полученное масло переносили в гептан (200 мл) и концентрировали на роторном испарителе до тех пор, пока не образовывались твердые вещества. Суспензию перемешивали в течение 0,5 часа, и твердые вещества собирали фильтрацией. Осадок на фильтре промывали гексанами (3×50 мл). Осадок на фильтре суспендировали в смеси 1:20 EtOAc/петролейный эфир (100 мл), и твердые вещества собирали фильтрацией. Осадок на фильтре промывали смесью 1:20 EtOAc/петролейный эфир (3×30 мл) и затем сушили под вакуумом с получением 2-хлор-6-(диметиламино)-N,N-диметилпиридин-4-карбоксамида (51 г, 80% выход) в виде светло-желтого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 6,49 (д, J=0,7 Гц, 1H), 6,35 (д, J=0,9 Гц, 1H), 3,13-3,09 (м, 9H), 2,98 (с, 3H); m/z (ESI+) для (C10H14ClN3O), 227,9 (M+H)+.
Стадия 2: 2-хлор-6-(диметиламино)-3-формил-N,N-диметил-пиридин-4-карбоксамид (3d)
Это превращение осуществляли путем проведения двух параллельных реакций. В круглодонную колбу, содержащую DMF (250 мл), при перемешивании добавляли POCl3 (85,9 г, 560 ммоль) при 15-25°C. Смесь перемешивали при 15-25°C в течение 15 минут и затем добавляли 2-хлор-6-(диметиламино)-N,N-диметилпиридин-4-карбоксамид (25,5 г, 112 ммоль). Смесь перемешивали при 50°C в течение 16 часов. Анализ методом LCMS показывал полный расход исходного материала с образованием продукта с требуемой молекулярной массой. Две реакционные смеси объединяли и затем гасили, медленно выливая в холодный водный насыщенный раствор Na2CO3, поддерживая pH ~9. Смесь экстрагировали с помощью EtOAc (4×1,0 л). Объединенные органические фазы промывали солевым раствором (5×600 мл), сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Неочищенный продукт объединяли с двумя дополнительными полученными аналогичным образом продуктами 7,5 г и 5,0 г 2-хлор-6-(диметиламино)-N,N-диметилпиридин-4-карбоксамида. Материал переносили в EtOAc (200 мл) и суспендировали в течение 20 минут. Суспензию фильтровали. Осадок на фильтре промывали с помощью EtOAc (2×50 мл). Осадок на фильтре суспендировали в смеси 1:1 петролейный эфир/EtOAc (80 мл) в течение 20 минут. Суспензию фильтровали, и осадок на фильтре промывали смесью 1:1 петролейный эфир/EtOAc (60 мл). Осадок на фильтре сушили под вакуумом. Объединенный фильтрат концентрировали досуха. Остаток суспендировали в смеси 1:1 петролейный эфир/EtOAc (100 мл) в течение 30 минут. Суспензию фильтровали, и осадок на фильтре промывали смесью 1:1 петролейный эфир/EtOAc (2×50 мл) и сушили под вакуумом. Объединенные высушенный твердые вещества суспендировали в петролейном эфире (200 мл) в течение 10 минут, и твердые вещества собирали фильтрацией. Осадок на фильтре промывали петролейным эфиром (100 мл) и затем концентрировали под вакуумом. Объединенный фильтрат концентрировали под вакуумом до ~50 мл и затем выдерживали в течение 2 дней. Полученные твердые вещества собирали фильтрацией, и осадок на фильтре промывали смесью 3:2 петролейный эфир/EtOAc (2×50 мл). Твердые вещества объединяли с получением 2-хлор-6-(диметиламино)-3-формил-N,N-диметилпиридин-4-карбоксамида (52 г, 73% выход) в виде желтого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 10,21 (д, J=0,6 Гц, 1H), 6,28 (д, J=0,6 Гц, 1H), 3,19 (с, 6H), 3,13 (с, 3H), 2,77 (с, 3H); m/z (ESI+) для (C11H14ClN3O2), 255,9 (M+H)+.
Стадия 3: трет-бутил {[6-(диметиламино)-4-(диметил-карбамоил)-3-формилпиридин-2-ил]метил}метилкарбамат (3e)
Смесь трет-бутил диметилкарбамата (3,41 г, 23,5 ммоль) и N,N,N,N-тетраметилендиамина (3,27 г, 28,2 ммоль) в 135 мл THF охлаждали до -55°C в атмосфере N2. Медленно добавляли раствор s-BuLi (1,4 M в циклогексане, 20,1 мл, 28,2 ммоль), поддерживая температуру раствора <-52°C (внутреннюю температуру). Смесь перемешивали в течение еще 30 минут при -55°C и затем обрабатывали раствором ZnCl2 (1,9 M в 2-метилтетрагидрофуране, 14,8 мл, 28,2 ммоль), поддерживая при этом температуру реакционной среды <-52°C. Раствор перемешивали в течение еще 40 минут при -55°C и затем подогревали до комнатной температуры с получением раствора {[(трет-бутоксикарбонил)(метил)амино]-метил}(хлоридо)цинка (c=0,195 M). Часть заранее приготовленного раствора соли цинка (90,2 мл, 17,6 ммоль) переносили в атмосфере N2 в высушенную в сушильном шкафу круглодонную колбы объемом 250 мл и концентрировали досуха с получением белой пены. Колбу опять заполняли N2. В отдельную колбу загружали 2-хлор-6-(диметиламино)-3-формил-N,N-диметил-пиридин-4-карбоксамид (3,0 г, 10 ммоль), PdCl2(dppf) (0,858 г, 1,17 ммоль), 1,4-диоксан (50 мл) и H2O (0,159 г, 8,8 ммоль). Суспензию переносили путем канюлирования в колбу, содержащую соль цинка, и затем смесь перемешивали при 80°C в течение 80 минут. Анализ методом LCMS показывал образование продукта с требуемой молекулярной массой и присутствие некоторого количества оставшегося исходного материала. Вводили дополнительную аликвоту раствора {[(трет-бутоксикарбонил)-(метил)амино]метил}(хлоридо)-цинка (2,0 мл), и смесь перемешивали при 80°C в течение 20 минут. Дополнительное превращение исходного материала не обнаруживалось. Реакционную смесь охлаждали до 0°C и гасили путем добавления насыщенного водного раствора NH4Cl (10 мл) и H2O (20 мл). Смесь перемешивали при 0°C в течение 20 минут и затем фильтровали через слой целита. Фильтрат экстрагировали с помощью EtOAc (4x). Объединенные органические фазы сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (80 г SiO2, 0-100% EtOAc/гептан. Полученную белую пену растирали с MTBE и концентрировали под вакуумом с получением трет-бутил {[6-(диметиламино)-4-(диметилкарбамоил)-3-формилпиридин-2-ил]метил}-метилкарбамата (3,8 г, 95% выход) в виде светло-желтого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 9,84 (д, J=6,8 Гц, 1H), 6,45 (с, 1H), 4,71 (с, 2H), 3,15 (с, 6H), 2,99 (с, 3H), 2,90 (с, 3H), 2,75 (с, 3H), 1,33 (д, J=69,8 Гц, 9H); m/z (ESI+) для (C18H28N4O4), 365,3 (M+H)+.
Стадия 4: трет-бутил {[6-(диметиламино)-4-(диметил-карбамоил)-3-{(E)-[(2-метилпропан-2-сульфинил)имино]метил}-пиридин-2-ил]метил}метилкарбамат (3f)
К раствору трет-бутил {[6-(диметиламино)-4-(диметил-карбамоил)-3-формилпиридин-2-ил]метил}метилкарбамата (3,0 г, 8,0 ммоль) и (R)-(+)-2-метил-2-пропансульфинамида (1,2 г, 9,88 ммоль) в THF (40 мл) добавляли этоксид титана(IV) (5,63 г, 24,7 ммоль). Смесь перемешивали при 50°C в течение ночи. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, разбавляли с помощью DCM (50 мл) и гасили путем добавления насыщенного водного раствора NaHCO3 (20 мл). Раствор интенсивно перемешивали в течение 20 минут и затем фильтровали через слой целита. Целит промывали с помощью DCM (3x). Объединенный фильтрат сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (80 г SiO2, 0-100% EtOAc/гептан) с получением трет-бутил {[6-(диметиламино)-4-(диметилкарбамоил)-3-{(E)-[(2-метилпропан-2-сульфинил)имино]-метил}пиридин-2-ил]метил}метилкарбамата (3,89 г, 97% выход) в виде бесцветной пены. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 8,39 (с, 1H), 6,46 (с, 1H), 4,77-4,55 (м, 2H), 3,12 (с, 6H), 2,95 (с, 3H), 2,93 (с, 3H), 2,74 (с, 3H), 1,41 (с, 4H), 1,20 (с, 5H), 1,12 (с, 9H); m/z (ESI+) для (C22H37N5O4S), 468,4 (M+H)+
Стадия 5: трет-бутил {[6-(диметиламино)-1-оксо-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-4-ил]метил}метилкарбамат
В круглодонную колбу, загруженную трет-бутил {[6-(диметил-амино)-4-(диметилкарбамоил)-3-{(E)-[(2-метилпропан-2-сульфинил)-имино]метил}пиридин-2-ил]метил}метилкарбаматом (3,89, 8,32 ммоль), в атмосфере N2 добавляли THF (42 мл). Смесь охлаждали до 0°C и затем обрабатывали раствором LiBH4 (2,0 M в THF, 4,37 мл, 8,73 ммоль). Смесь перемешивали при 0°C в течение 1 часа, и затем добавляли при этой же температуре раствор NaOMe (25% в MeOH, 17,1 мл, 74,9 ммоль). Реакционную смесь медленно подогревали до комнатной температуры и перемешивали в течение 16 часов. Анализ методом LCMS указывал на полный расход исходного материала с образованием продукта с требуемой молекулярной массой. Смесь разбавляли с помощью DCM и промывали насыщенным водным раствором NH4Cl и солевым раствором. Органический слой сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (80 г SiO2, 0-100% EtOAc/гептаны) с получением промежуточного соединения 3 (1,7 г, 64% выход) в виде бесцветной пены. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 8,68 (с, 1H), 6,68 (с, 1H), 4,42 (с, 2H), 4,23 (с, 2H), 3,06 (с, 6H), 2,86 (с, 3H), 1,36 (м, 9H); LCMS m/z (ESI+) для (C16H24N4O3), 321,2 (M+H)+.
Промежуточное соединение 4: 2-бром-6-(5-метил-1,3,4-окса-диазол-2-ил)пиридин
Стадия 1: N'-ацетил-6-бромпиридин-2-карбогидразид (4a)
К раствору 6-бромпиридин-2-карбогидразида (1a) (1,5 г, 6,94 ммоль) в DCM (23 мл) при 0°C добавляли TEA (1,4 мл, 10,4 ммоль) и ацетилхлорид (0,56 мл, 7,8 ммоль). Полученный раствор перемешивали при 20°C в течение 58 часов. Реакционную смесь концентрировали досуха, и остаток очищали флэш-хроматографией (SiO2, 0-100% этилацетат/петролейный эфир) с получением N'-ацетил-6-бромпиридин-2-карбогидразида в виде белого твердого вещества (1,0 г, 56%).1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 10,41 (д, J=1,6 Гц, 1H), 10,02 (д, J=1,6 Гц, 1H), 8,04 (дд, J=7,5, 1,2 Гц, 1H), 7,97 (т, J=7,7 Гц, 1H), 7,91 (дд, J=7,9, 1,2 Гц, 1H), 1,92 (с, 3H); m/z (ESI) для (C8H8BrN3O2), 257,9 (M+H)+.
Стадия 2: 2-бром-6-(5-метил-1,3,4-оксадиазол-2-ил)пиридин
К раствору N'-ацетил-6-бромпиридин-2-карбогидразида (4a) (240 мг, 0,93 ммоль) в DCM (6 мл) и MeCN (6 мл) добавляли TEA (0,78 мл, 5,6 ммоль) и п-толуолсульфонилхлорид (195 мг, 1,0 ммоль). Полученный раствор перемешивали при 20°C в течение 5 часов. Реакционную смесь концентрировали под вакуумом, и полученный материал очищали флэш-хроматографией (SiO2, 0-10% метанол/DCM) с получением 2-бром-6-(5-метил-1,3,4-оксадиазол-2-ил)пиридина в виде белого твердого вещества (80 мг, 36%). 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 8,18 (д, J=7,6 Гц, 1H), 8,00 (т, J=7,8 Гц, 1H), 7,90 (д, J=8,0 Гц, 1H), 2,63 (с, 3H); m/z (ESI) для (C8H6BrN3O), 241,5 (M+H)+.
Промежуточное соединение 5: 2-бром-6-(1,3,4-оксадиазол-2-ил)пиридин
Раствор 6-бромпиридин-2-карбогидразида (1a) (1,0 г, 4,63 ммоль) в HC(OEt)3 (4,0 мл) перемешивали при 120°C в течение 18 часов. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и добавляли HC(OEt)3 (4,0 мл). Реакционную смесь перемешивали при 140°C в течение 3 часов, затем при 135°C в течение 16 часов, при 150°C в течение 16 часов, и при 135°C в течение 19 часов. Анализ методом LCMS показал минимальное количество оставшегося материала и образование продукта с требуемой молекулярной массой. Реакционную смесь концентрировали досуха. Остаток очищали флэш-хроматографией (SiO2, 1:10 EtOAc/петролейный эфир) с получением промежуточного соединения 5 (400 мг, 38% выход) в виде белого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 9,46 (с, 1H), 8,23 (д, J=7,5 Гц, 1H), 8,05-7,98 (м, 1H), 7,92 (д, J=8,0 Гц, 1H); m/z (ESI) для (C7H4BrN3O), 225,8, 227,8 (M+H)+.
Промежуточное соединение 6: 2-бром-6-(1,3,4-тиадиазол-2-ил)-пиридин
Стадия 1: 6-бром-N'-формилпиридин-2-карбогидразид (6a)
Чистую муравьиную кислоту (3,2 г, 69,4 ммоль) добавляли к Ac2O (5,9 г, 57,9 ммоль) в атмосфере N2. Смесь перемешивали при 60°C в течение 1 часа и затем охлаждали до комнатной температуры. Добавляли THF (20,0 мл). Раствор добавляли к раствору 6-бромпиридин-2-карбогидразида (1a) (5,0 г, 23,1 ммоль) в THF (40 мл) при 0°C. Смесь перемешивали при 15°C в течение 3 часов. Анализ методом LCMS показывал полный расход исходного материала с образованием продукта с требуемой молекулярной массой. Реакционную смесь концентрировали досуха. Остаток суспендировали с помощью DCM (50 мл), и твердые вещества собирали фильтрацией. Осадок на фильтре промывали с помощью DCM (50 мл) и сушили под вакуумом с получением 6-бром-N'-формилпиридин-2-карбогидразида (6a) (3,7 г, 65% выход) в виде белого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 10,17 (с, 2H), 8,13-8,00 (м, 2H), 7,98-7,90 (м, 1H), 7,86 (дд, J=7,9, 1,0 Гц, 1H); m/z (ESI) для (C7H6BrN3O2), 245,7 (M+H)+.
Стадия 2: 2-бром-6-(1,3,4-тиадиазол-2-ил)пиридин
К раствору 6-бром-N'-формилпиридин-2-карбогидразида (6a) (4,2 г, 17,4 ммоль) в ксилолах (420 мл) добавляли пентасульфид фосфора (2,3 г, 10,4 ммоль). Смесь перемешивали при 140°C в течение 45 минут. Анализ методом LCMS показывал полный расход исходного материала с образованием продукта с требуемой молекулярной массой. Реакционную смесь концентрировали досуха. Остаток очищали флэш-хроматографией (SiO2, 1:1 петролейный эфир/EtOAc). Продукт повторно очищали флэш-хроматографией (SiO2, 1:3 EtOAc/петролейный эфир) с получением промежуточного соединения 6 (587 мг, 14% выход) в виде белого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 9,75 (с, 1H), 8,32 (дд, J=7,7, 0,9 Гц, 1H), 8,03-7,97 (м, 1H), 7,86 (дд, J=7,9, 0,9 Гц, 1H).; m/z (ESI) для (C7H4BrN3S), 243,8 (M+H)+.
Промежуточное соединение 7: трет-бутил [(6-хлор-1-оксо-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-4-ил)метил]карбамат
Стадия 1: (6-хлор-1-оксо-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]-пиридин-4-ил)метил метансульфонат (7a)
Раствор 6-хлор-4-(гидроксиметил)-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-она (2,0 г, 10,1 ммоль) и TEA (3,1 мг, 30,2 ммоль) в THF (50,0 мл) в атмосфере N2 охлаждали до 0°C и затем обрабатывали по каплям с помощью MsCl (1,73 г, 15,1 ммоль). Смесь перемешивали при 0°C в течение 2 часов. Анализ методом LCMS указывал на полный расход исходного материала. Реакционную смесь разбавляли с помощью EtOAc (150 мл). Смесь промывали H2O (50 мл), насыщенным водным раствором NaHCO3 (50 мл) и солевым раствором (2×50 мл), сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали с получением (6-хлор-1-оксо-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-4-ил)метил метансульфоната (2,0 г, 72% выход) в виде серого твердого вещества. m/z (ESI+) для (C9H9ClN2O4S), 276,9 (M+H)+.
Стадия 2: 4-(азидометил)-6-хлор-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он (7b)
Раствор (6-хлор-1-оксо-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-4-ил)метил метансульфоната (2,0 г, 7,23 ммоль), 18-краун-6 (191 мг, 0,723 ммоль) и NaN3 (705 мг, 10,8 ммоль) в MeCN (70 мл) перемешивали при 10°C в течение 20 часов. Анализ методом LMCS показывал полный расход исходного материала с образованием продукта с требуемой молекулярной массой. Реакционную смесь разбавляли H2O (50 мл) и экстрагировали с помощью EtOAc (2×50 мл). Объединенные органические фазы промывали солевым раствором (50 мл), сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали с получением 4-(азидометил)-6-хлор-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-она (1,62 г, >99% выход) в виде светло-коричневого твердого вещества. m/z (ESI+) для (C8H6ClN5O), 223,7 (M+H)+.
Стадия 3: 4-(аминометил)-6-хлор-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он (7c)
Раствор 4-(азидометил)-6-хлор-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-она (1,62 г, 7,23 ммоль) и PPh3 (2,84 мг, 10,8 ммоль) в смеси THF (40,0 мл) и H2O (4,0 мл) перемешивали при 20°C в течение 6 часов. Анализ методом LCMS показывал полный расход исходного материала. Добавляли раствор HCl (4,0 M в EtOAc, 50 мл), и смесь экстрагировали с помощью H2O (2×30 мл). Объединенные водные слои подщелачивали твердым NaHCO3 до pH ~8 с получением водного раствора 4-(аминометил)-6-хлор-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-она (c ~ 0,12 M, 60 мл), который непосредственно использовали на следующей стадии.
Стадия 4: трет-бутил [(6-хлор-1-оксо-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-4-ил)метил]карбамат
К раствору 4-(аминометил)-6-хлор-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-она (0,12 M в водном NaHCO3, 25 мл) добавляли TEA (620 мг, 6,03 ммоль) и DCM (10 мл). Смесь охлаждали до 10°C и добавляли Boc2O (790 мг, 3,62 ммоль). Смесь перемешивали при 15°C в течение 1,5 часа. Анализ методом LCMS показывал полный расход исходного материала с образованием продукта с требуемой молекулярной массой. Смесь разбавляли с помощью DCM (50 мл) и промывали H2O (25 мл). Органический слой сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток разбавляли с помощью DCM (5 мл). Добавляли петролейный эфир (15 мл), и смесь перемешивали при 10°C в течение 15 минут с получением суспензии. Твердые вещества собирали фильтрацией, и осадок на фильтре сушили под вакуумом с получением промежуточного соединения 7 (809 мг, 90% выход) в виде желтовато-белого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 9,08 (с, 1H), 7,62 (с, 1H), 7,50 (уш.т, J=6,0 Гц, 1H), 4,46 (с, 2H), 4,34 (д, J=6,0 Гц, 2H), 1,40 (с, 9H); m/z (ESI+) для (C13H16ClN3O3), 197,9 (M-Boc+H)+.
Промежуточное соединение 8: трет-бутил метил{[6-(1-метилциклопропил)-1-оксо-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-4-ил]метил}карбамат
Стадия 1: этил 3-циано-2-гидрокси-6-(1-метилциклопропил)-пиридин-4-карбоксилат (8a)
Смесь 2-цианоацетамида (10,0 г, 119 ммоль) и TEA (12,0 г, 119 ммоль) в EtOH (50 мл) нагревали до 65°C (внутренняя температура) до тех пор, пока не растворялись твердые вещества, и затем добавляли этил 3-(1-метилциклопропил)-3-оксопропаноат (24,6 г, 124 ммоль). Смесь перемешивали при 65°C в течение 2 часов. Анализ методом TLC (1:10 EtOAc/петролейный эфир) показывал полный расход исходного материала. Реакционную смесь охлаждали до 10°C. Полученный осадок собирали фильтрацией. Осадок на фильтре промывали с помощью MTBE (3×10 мл) и сушили под вакуумом. Фильтрат концентрировали досуха. Остаток разбавляли с помощью EtOH (10 мл) и добавляли MTBE (30 мл). Полученные твердые вещества собирали фильтрацией. Осадок на фильтре промывали с помощью EtOH (5 мл) и MTBE (2×10 мл) и сушили под вакуумом. Твердые вещества объединяли с получением этил 3-циано-2-гидрокси-6-(1-метилциклопропил)пиридин-4-карбоксилата (25,0 г , 85% выход) в виде желтого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 12,74 уш.с, 1H), 6,63 уш.с, 1H), 4,36 (кв, J=7,1 Гц, 2H), 1,45-1,27 (м, 6H), 1,16-1,06 (м, 2H), 0,92-0,75 (м, 2H).
Стадия 2: этил 2-хлор-3-циано-6-(1-метилциклопропил)пиридин-4-карбоксилат (8b)
К раствору этил 3-циано-2-гидрокси-6-(1-метилциклопропил)-пиридин-4-карбоксилата (24,0 г, 97,5 ммоль) в MeCN (487 мл) добавляли по каплям POCl3 (74,7 г, 487 ммоль) при 30°C. Смесь перемешивали при 65°C в течение 60 часов. Анализ методом TLC (EtOAc) показал полный расход исходного материала. Раствор концентрировали для удаления остаточного POCl3. Остаток выливали на лед и подщелачивали с помощью NaHCO3 до pH ~ 8. Смесь экстрагировали с помощью EtOAc (2×100 мл). Объединенные органические фазы сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (1:10 EtOAc/петролейный эфир) с получением этил 2-хлор-3-циано-6-(1-метилциклопропил)пиридин-4-карбоксилата (21,9 г, 85% выход) в виде светло-желтого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, хлороформ-d) δ 7,79 (с, 1H), 4,50 (кв, J=7,2 Гц, 2H), 1,55 (с, 3H), 1,50-1,40 (м, 5H), 1,03 (кв, J=3,9 Гц, 2H); m/z (ESI+) для (C13H13ClN2O2), 264,9 (M+H)+.
Стадия 3: 4-хлор-6-(1-метилциклопропил)-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он (8c)
К раствору этил 2-хлор-3-циано-6-(1-метилциклопропил)-пиридин-4-карбоксилата (2,5 г, 9,44 ммоль) в EtOH (500 мл) добавляли Ni Ренея (2,0 г 34,1 ммоль). Черную смесь перемешивали при 30°C в атмосфере H2 при давлении 0,2 МПа в течение 48 часов. Анализ методом TLC (1:10 EtOAc/петролейный эфир) показывал полный расход исходного материала. Смесь фильтровали через слой целита. Осадок на фильтре промывали с помощью MeOH (250 мл). Объединенный фильтрат концентрировали досуха. Остаток суспендировали в EtOAc (5 мл) в течение 20 минут, и суспензию фильтровали. Осадок на фильтре промывали с помощью EtOAc (2 мл) и сушили под вакуумом с получением 4-хлор-6-(1-метилциклопропил)-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]-пиридин-1-она (1,1 г, 52% выход) в виде серого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 7,66 (уш.с, 1H), 7,23-7,05 (м, 1H), 4,56-4,34 (м, 2H), 1,55 уш.с, 3H), 1,39-1,11 (м, 2H), 0,99-0,66 (м, 2H); m/z (ESI+) для (C11H11ClN2O), 222,8 (M+H)+.
Стадия 4: трет-бутил метил{[6-(1-метилциклопропил)-1-оксо-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-4-ил]метил}карбамат
Колбу со смесью 4-хлор-6-(1-метилциклопропил)-2,3-дигидро-1H-пирроло-[3,4-c]пиридин-1-она (1,0 г, 4,49 ммоль), [(трет-бутоксикарбонил)-(метил)амино]ацетата натрия (1,9 г, 8,98 ммоль), NiCl2·глим (197 мг, 0,898 ммоль), пиридин-2-ил-N-цианоамидина (131 мг, 0,898 ммоль) и бис[2-(2,4-дифторфенил)-5-метилпиридин-N, C20]-4,40-дитрет-бутил-2,20-бипиридин гексафторфосфата иридия(III) (22,8 мг, 0,0225 ммоль) в DMF (135 мл) вакуумировали и заполняли N2 (3x). Смесь подвергали облучению с помощью двух светодиодных лент пурпурного цвета мощностью 72 ватта при скорости прохождения раствора смеси 8 мл/мин при температуре окружающей среды в течение 7 часов при охлаждении вентилятором. Смесь дополнительно подвергали облучению с помощью одной светодиодной ленты пурпурного цвета мощностью 72 ватта при скорости прохождения раствора смеси 3 мл/мин в течение 16 часов при охлаждении вентилятором. Реакционную смесь концентрировали досуха. Остаток очищали флэш-хроматографией (5 г SiO2, 30-80% EtOAc/петролейный эфир) с получением промежуточного соединения 8 (856 мг, 58% выход) в виде желтовато-белого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 8,86 уш.с, 1H), 7,45 (с, 1H), 4,59-4,40 (м, 2H), 4,35 (с, 2H), 2,84 (с, 3H), 1,52 (с, 3H), 1,47-1,31 (м, 5H), 1,31-1,10 (м, 6H), 0,86-0,81 (м, 2H); m/z (ESI+) для (C18H25N3O3), 332,1 (M+H)+.
Промежуточное соединение 9: 4-хлор-6-[этил(метил)амино]-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
Стадия 1: этил 2-хлор-6-[этил(метил)амино]пиридин-4-карбоксилат (9a)
Раствор этил 2,6-дихлорпиридин-4-карбоксилата (1,61 г, 7,34 ммоль) и N-метилэтанамина (1,30 г, 22,0 ммоль) в DMF (3,0 мл) перемешивали при 80°C в течение 3 часов. Анализ методом LCMS показывал полный расход исходного материала. Реакционную смесь концентрировали досуха. Остаток очищали флэш-хроматографией (12 г SiO2, 0-100% EtOAc/гептан) с получением этил 2-хлор-6-[этил(метил)амино]пиридин-4-карбоксилата (1,65 г, 93% выход) в виде бесцветного масла. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 7,03 (д, J=0,9 Гц, 1H), 6,96 (д, J=0,9 Гц, 1H), 4,39 (кв, J=7,1 Гц, 2H), 3,61 (кв, J=7,1 Гц, 2H), 3,09 (с, 3H), 1,41 (т, J=7,2 Гц, 3H), 1,19 (т, J=7,1 Гц, 3H); m/z (APCI+) для (C11H15ClN2O2), 243,1 (M+H)+.
Стадия 2: этил 2-хлор-6-[этил(метил)амино]-3-формилпиридин-4-карбоксилат (9b)
К DMF (508 мг, 6,95 ммоль) в атмосфере N2 добавляли POCl3 (800 мг, 5,22 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 20 минут, и затем добавляли раствор этил 2-хлор-6-[этил(метил)амино]пиридин-4-карбоксилата (1,65 г, 6,39 ммоль) в DCM (25,5 мл). Смесь перемешивали при кипячении с обратным холодильником в течение 20 часов в атмосфере N2. Смесь охлаждали до комнатной температуры и гасили путем медленного выливания в водный насыщенный раствор NaHCO3 (100 мл). Смесь перемешивали в течение 10 минут и затем экстрагировали с помощью EtOAc (2×80 мл). Объединенные органические фазы сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (24 г SiO2, 0-100% EtOAc/гептан) с получением этил 2-хлор-6-[этил(метил)-амино]-3-формилпиридин-4-карбоксилата (1,51 г, 82% выход) в виде бледно-желтого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 10,17 (с, 1H) 6,37 (с, 1H) 4,43 (кв, J=7,09 Гц, 2H) 3,67 (уш.д, J=4,03 Гц, 2H) 3,16 (д, J=9,29 Гц, 3H) 1,39 (т, J=7,15 Гц, 3H) 1,23 (т, J=7,09 Гц, 3H); m/z (APCI+) для (C12H15ClN2O3), 271,1 (M+H)+.
Стадия 3: 4-хлор-6-[этил(метил)амино]-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
Смесь этил 2-хлор-6-[этил(метил)амино]-3-формилпиридин-4-карбоксилата (1,33 г, 4,91 ммоль) и раствора NH3 (7,0 N в MeOH, 7,01 мл, 49,1 ммоль) перемешивали в течение 1 часа при комнатной температуре. Смесь концентрировали досуха. Остаток растворяли в DCM (10,0 мл) и добавляли TFA (5,59 г, 49,1 ммоль) и Et3SiH (1,14 г, 1,57 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 90 минут. Реакционную смесь концентрировали досуха. Остаток растворяли в DCM (100 мл) и промывали насыщенным водным раствором NaHCO3. Водный слой экстрагировали с помощью DCM. Объединенные органические фазы сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали с получением промежуточного соединения 9 (823 мг, 74% выход) в виде желтого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 6,82 (с, 1H) 6,41 уш.с, 1H) 4,37 (с, 2H) 3,63 (кв, J=7,09 Гц, 2H) 3,10 (с, 3H) 1,19 (т, J=7,09 Гц, 3H); m/z (APCI+) для (C10H12ClN3O), 226,1 (M+H)+.
Промежуточное соединение 10: 4-хлор-6-[(2R)-2-метил-пирролидин-1-ил]-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
Стадия 1: {2-хлор-6-[(2R)-2-метилпирролидин-1-ил]пиридин-4-ил}(пиперидин-1-ил)метанон (10a)
Раствор (2,6-дихлорпиридин-4-ил)(пиперидин-1-ил)метанона (600 мг, 2,32 ммоль) и (2R)-2-метилпирролидина (591 мг, 6,95 ммоль) в DMF (1,5 мл) перемешивали при 100°C в течение 16 часов. Анализ методом LCMS показывал полный расход исходного материала с образованием продукта с требуемой молекулярной массой. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, разбавляли H2O и экстрагировали с помощью DCM (3x). Объединенные органические слои сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (24 г SiO2, 0-20% EtOAc/гептан) с получением {2-хлор-6-[(2R)-2-метилпирролидин-1-ил]пиридин-4-ил}(пиперидин-1-ил)метанона (664 мг, 93% выход). 1H ЯМР (400 МГц, хлороформ-d) δ 6,44 (д, J=1,0 Гц, 1H), 6,21 (д, J=1,0 Гц, 1H), 4,12 (кв, J=7,1 Гц, 1H), 3,72-3,62 (м, 2H), 3,54 (ддд, J=10,5, 7,6, 2,9 Гц, 1H), 3,40-3,28 (м, 2H), 2,10-2,04 (м, 2H), 1,75-1,62 (м, 4H), 1,26 (т, J=7,2 Гц, 1H), 1,21 (д, J=6,3 Гц, 2H); m/z (APCI+) для (C16H22ClN3O), 308,2 (M+H)+.
Стадия 2: 2-хлор-6-[(2R)-2-метилпирролидин-1-ил]-4-(пиперидин-1-карбонил)пиридин-3-карбальдегид (10b)
К раствору DMF (473 мг, 6,47 ммоль) в DCM (3,0 мл) добавляли POCl3 (992 мг, 6,47 ммоль). Смесь перемешивали в течение 10 минут и затем добавляли раствор {2-хлор-6-[(2R)-2-метилпирролидин-1-ил]пиридин-4-ил}(пиперидин-1-ил)метанона (664 мг, 2,16 ммоль) в DCM (3,0 мл). Смесь перемешивали при кипячении с обратным холодильником в течение 15 часов. Анализ методом LCMS показывал полный расход исходного материала с образованием продукта с требуемой молекулярной массой. Реакционную смесь концентрировали досуха и медленно добавляли в насыщенный водный раствор NaHCO3 (30 мл). Смесь экстрагировали с помощью DCM (3×30 мл). Объединенные органические фазы сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (24 г SiO2, 0-40% EtOAc/гептан) с получением 2-хлор-6-[(2R)-2-метилпирролидин-1-ил]-4-(пиперидин-1-карбонил)-пиридин-3-карбальдегида (568 мг, 78% выход). 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 10,07 (с, 1H), 5,99 (с, 1H), 4,13-4,65 (м, 1H), 3,68-3,83 (м, 1H), 3,55-3,68 (м, 2H), 3,35-3,55 (м, 1H), 2,98-3,20 (м, 2H), 1,88-2,17 (м, 3H), 1,71-1,83 (м, 2H), 1,55-1,67 (м, 3H), 1,46-1,55 (м, 1H), 1,31-1,42 (м, 1H), 1,17-1,26 (м, 3H); m/z (APCI+) для (C17H22ClN3O2), 336,1 (M+H)+.
Стадия 3: N-[(E)-{2-хлор-6-[(2R)-2-метилпирролидин-1-ил]-4-(пиперидин-1-карбонил)пиридин-3-ил}метилиден]-2-метилпропан-2-сульфинамид (10c)
Смесь 2-хлор-6-[(2R)-2-метилпирролидин-1-ил]-4-(пиперидин-1-карбонил)пиридин-3-карбальдегида (432 мг, 1,29 ммоль), (R)-(+)-2-метил-2-пропансульфинамида (187 мг, 1,54 ммоль) и этоксида титана(IV) (880 мг, 3,86 ммоль) в THF (10,0 мл) перемешивали при 45°C в течение 16 часов. Анализ методом LCMS показывал присутствие ~25% оставшегося исходного материала. Добавляли дополнительные порции (R)-(+)-2-метил-2-пропансульфинамида (62,4 мг, 0,515 ммоль) и этоксида титана(IV) (293 мг, 1,29 ммоль), и смесь перемешивали при 50°C в течение 16 часов. Анализ методом LCMS показывал полный расход исходного материала. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры. Смесь разбавляли с помощью DCM и промывали раствором NaHCO3 и солевым раствором. Органический слой сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали с получением N-[(E)-{2-хлор-6-[(2R)-2-метилпирролидин-1-ил]-4-(пиперидин-1-карбонил)пиридин-3-ил}метилиден]-2-метилпропан-2-сульфинамида (495 мг, 88% выход) в виде белой смолы, который использовали без дополнительной очистки. m/z (APCI+) для (C21H31ClN4O2S), 440,2 (M+H)+.
Стадия 4: 4-хлор-6-[(2R)-2-метилпирролидин-1-ил]-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
Раствор N-[(E)-{2-хлор-6-[(2R)-2-метилпирролидин-1-ил]-4-(пиперидин-1-карбонил)пиридин-3-ил}метилиден]-2-метилпропан-2-сульфинамида (495 мг, 1,13 ммоль) в THF (15,0 мл) охлаждали до 0°C, и затем добавляли раствор LiBH4 (2,0 M в THF, 620 мл, 1,24 ммоль). Смесь перемешивали при 0°C в течение 2 часов, и затем добавляли раствор NaOMe (25% в MeOH, 2,5 мл, 10,1 ммоль). реакционную смесь подогревали до комнатной температуры и затем перемешивали в течение 16 часов. Реакционную смесь разбавляли с помощью DCM (60 мл) и промывали насыщенным водным раствором NH4Cl (60 мл) и солевым раствором (60 мл). Органический слой сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (24 г SiO2, 50-100% EtOAc/гептан) с получением промежуточного соединения 10 (199 мг, 70% выход) в виде бесцветной пены. 1H ЯМР (400 МГц, хлороформ-d) δ 6,68 (с, 1H), 6,45 (с, 1H), 4,35 (с, 2H), 4,21-4,14 (м, 1H), 3,58 (ддд, J=10,5, 7,6, 2,8 Гц, 1H), 3,39 (кв, J=8,9 Гц, 1H), 2,13-1,97 (м, 2H), 1,75 (дт, J=5,2, 2,6 Гц, 1H), 1,23 (д, J=6,3 Гц, 3H). Предполагается, что на пик одного атома водорода накладывался пик воды; m/z (APCI+) для (C12H14ClN3O), 252,3 (M+H)+.
Промежуточное соединение 11: 4-хлор-6-[метил(пропан-2-ил)амино]-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
Стадия 1: 2-хлор-N,N-диметил-6-[метил(пропан-2-ил)амино]-пиридин-4-карбоксамид (11a)
Смесь 2,6-дихлор-N,N-диметилпиридин-4-карбоксамида (30,0 г, 137 ммоль) и N-метилпропан-2-амина (50,1 г, 685 ммоль) в MeCN (120 мл) распределяли между тремя герметизированными реакционными сосудами, и в каждом сосуде смесь перемешивали при 100°C в течение 60 часов. Анализ методом LCMS показывал полный расход исходного материала с образованием продукта с требуемой молекулярной массой. Реакционные смеси объединяли и концентрировали досуха. Остаток очищали флэш-хроматографией (SiO2, 1:1 EtOAc/петролейный эфир) с получением 2-хлор-N,N-диметил-6-[метил(пропан-2-ил)амино]пиридин-4-карбоксамида (30,5 г, 87% выход) в виде желтого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, хлороформ-d) δ 6,45 (д, J=0,9 Гц, 1H), 6,31 (д, J=1,0 Гц, 1H), 4,82 (п, J=6,8 Гц, 1H), 3,08 (с, 3H), 2,97 (с, 3H), 2,83 (с, 3H), 1,16 (д, J=6,7 Гц, 6H); m/z (ESI+) для (C12H18ClN3O), 255,9 (M+H)+.
Стадия 2: 2-хлор-3-формил-N,N-диметил-6-[метил(пропан-2-ил)-амино]пиридин-4-карбоксамид (11b)
К раствору DMF (21,9 г, 299 ммоль) в DCE (120 мл) добавляли по каплям POCl3 (45,9 г, 299 ммоль) при 5-15°C. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 15 минут, и добавляли 2-хлор-N,N-диметил-6-[метил(пропан-2-ил)амино]пиридин-4-карбоксамид (25,5 г, 99,7 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 65°C в течение 16 часов. Анализ методом LCMS показывал полный расход исходного материала с образованием продукта с требуемой молекулярной массой. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и добавляли по каплям к насыщенному водному раствору Na2CO3 (900 мл). Смесь экстрагировали с помощью DCM (2×300 мл). Объединенные органические слои промывали солевым раствором (5×500 мл), сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (SiO2, 1:1 EtOAc/петролейный эфир) с получением 2-хлор-3-формил-N,N-диметил-6-[метил(пропан-2-ил)-амино]пиридин-4-карбоксамида (23,7 г, 84% выход) в виде коричневого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 10,19 (с, 1H), 6,25 уш.с, 1H), 3,12 (с, 3H), 3,02-2,85 (м, 3H), 2,77 (с, 3H), 1,22 (уш.д, J=6,5 Гц, 6H); m/z (ESI+) для (C13H18ClN3O2), 283,9 (M+H)+.
Стадия 3: 2-хлор-N,N-диметил-3-{(E)-[(2-метилпропан-2-сульфинил)имино]метил}-6-[метил(пропан-2-ил)амино]пиридин-4-карбоксамид (11c)
Смесь 2-хлор-3-формил-N,N-диметил-6-[метил(пропан-2-ил)-амино]пиридин-4-карбоксамида (23,7 г, 83,5 ммоль), (R)-(+)-2-метил-2-пропансульфинамида (12,1 г, 100 ммоль) и этоксида титана(IV) (38,1 г, 167 ммоль) в THF (250 мл) перемешивали при 50°C в течение 20 часов. Анализ методом LMCS показывал полный расход исходного материала с образованием продукта с требуемой молекулярной массой. Реакционную смесь концентрировали досуха. Остаток перемешивали с насыщенным водным раствором NaHCO3 (300 мл) в течение 30 минут. Смесь фильтровали. Осадок на фильтре споласкивали H2O (3×80 мл) и петролейным эфиром (3×50 мл) и сушили под вакуумом с получением 2-хлор-N,N-диметил-3-{(E)-[(2-метил-пропан-2-сульфинил)имино]метил}-6-[метил(пропан-2-ил)амино]-пиридин-4-карбоксамида (32,3 г, >99% выход) в виде желтого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 9,07 (с, 1H), 6,74 (с, 1H), 5,36-5,10 (м, 1H), 3,30 (с, 3H), 3,26 (с, 3H), 3,10 (с, 3H), 1,54 (д, J=6,7 Гц, 6H), 1,49 (с, 9H); m/z (ESI+) для (C17H27ClN4O2S), 387,2 (M+H)+.
Стадия 4: 4-хлор-6-[метил(пропан-2-ил)амино]-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
Раствор 2-хлор-N,N-диметил-3-{(E)-[(2-метилпропан-2-сульфинил)имино]метил}-6-[метил(пропан-2-ил)амино]пиридин-4-карбоксамида (32,3 г, 83,5 ммоль) в THF (200 мл) охлаждали до 0°C, и добавляли LiBH4 (1,82 г, 83,5 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. Анализ методом LCMS показывал полный расход исходного материала. Добавляли NaOMe (165 г, 919 ммоль), и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 часов. Реакционную смесь фильтровали, и осадок на фильтре промывали с помощью EtOAc (3×200 мл). Объединенный фильтрат концентрировали досуха. Остаток растворяли в DCM (300 мл) и промывали H2O (500 мл). Водный слой экстрагировали с помощью DCM (2×300 мл). Объединенные органические слои промывали солевым раствором (500 мл), сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Твердое вещество суспендировали в смеси DCM (50 мл) и петролейного эфира (120 мл) в течение 30 минут. Твердые вещества собирали фильтрацией. Осадок на фильтре сушили под вакуумом с получением промежуточного соединения 11 (11,3 г, 56% выход) в виде желтовато-белого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, хлороформ-d) δ 7,19 (с, 1H), 6,79 (с, 1H), 4,82 (п, J=6,7 Гц, 1H), 4,35 (д, J=1,2 Гц, 2H), 2,88 (с, 3H), 1,18 (д, J=6,7 Гц, 6H); m/z (ESI+) для (C11H14ClN3O), 239,9 (M+H)+.
Промежуточное соединение 12: 2-бром-6-(4-этил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)пиридин
В колбу загружали N'-[(6-бромпиридин-2-ил)карбонил]-N,N диметилгидразоноформамид (2,0 г, 7,4 ммоль), этиламин (0,5 мл, 333 мг, 7,4 ммоль), уксусную кислоту (3 мл) и MeCN (15 мл, 0,5 M). Раствор нагревали в течение 16 часов при 95°C. Реакционную смесь разбавляли с помощью EtOAc (10 мл) и H2O (10 мл). Добавляли твердый K2CO3 до тех пор, пока величина pH водного слоя не достигала ~pH 8. Слои разделяли, и водный слой экстрагировали с помощью EtOAc (3×30 мл). Объединенные органические слои промывали солевым раствором (30 мл), сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали досуха. Остаток суспендировали с помощью EtOAc (0,3 мл) и петролейного эфира (3 мл) в течение 5 минут. Твердые вещества собирали фильтрацией с получением промежуточного соединения 12 (1,5 г, 80%) в виде бледно-желтого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 8,75 (с, 1H), 8,19 (дд, J=7,7, 0,9 Гц, 1H), 7,99-7,90 (м, 1H), 7,79 (дд, J=8,0, 0,9 Гц, 1H), 4,47 (кв, J=7,2 Гц, 2H), 1,38 (т, J=7,2 Гц, 3H); m/z (APCI+) для (C9H9BrN4), 252,7 (M+H)+.
Промежуточное соединение 13: 2-бром-6-(4-пропил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)пиридин
Смесь N'-[(6-бромпиридин-2-ил)карбонил]-N,N-диметил-гидразоноформамида (1b) (29,0 г, 106,8 ммоль) и пропан-1-амина (31,6 г, 534 ммоль) в MeCN (440 мл) и уксусной кислоте (110 мл) перемешивали при 95°C в течение 16 часов. Анализ методом LCMS показывал полный расход исходного материала с образованием продукта с требуемой молекулярной массой. Реакционную смесь концентрировали досуха. Остаток переносили в H2O (50 мл) и подщелачивали до pH ~9 с использованием 1 N NaOH (~500 мл). Смесь экстрагировали с помощью EtOAc (3×150 мл). Объединенные органические слои промывали солевым раствором (150 мл), сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток суспендировали с помощью EtOAc (50 мл) в течение 10 минут, и твердое вещество собирали фильтрацией. Осадок на фильтре промывали петролейным эфиром (2×50 мл) и сушили под вакуумом с получением промежуточного соединения 13 (21,0 г, 74% выход) в виде желтого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 8,74 (с, 1H), 8,20 (дд, J=0,7, 7,8 Гц, 1H), 7,98-7,91 (м, 1H), 7,78 (дд, J=0,7, 8,0 Гц, 1H), 4,45-4,36 (м, 2H), 1,77 (секст, J=7,4 Гц, 2H), 0,87 (т, J=7,4 Гц, 3H); m/z (ESI+) для (C10H11BrN4), 266,7 (M+H)+.
Промежуточное соединение 14: 2-бром-6-[4-(пентан-3-ил)-4H-1,2,4-триазол-3-ил]пиридин
Смесь N'-[(6-бромпиридин-2-ил)карбонил]-N,N-диметил-гидразоноформамида (1b) (3,10 г, 11,4 ммоль) и пентан-3-амина (2,99 г, 34,4 ммоль) в MeCN (24 мл) и уксусной кислоте (6 мл) перемешивали при 95°C в течение 16 часов. Анализ методом LCMS показывал полный расход исходного материала с образованием продукта с требуемой молекулярной массой. Раствор концентрировали досуха. Остаток переносили в EtOAc (100 мл) и промывали насыщенным водным раствором NaHCO3 (50 мл). Органический слой сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (SiO2, 1:1 DCM/EtOAc) с получением промежуточного соединения 14 (2,3 г, 68% выход) в виде белого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 8,92 (с, 1H), 8,16 (д, J=7,7 Гц, 1H), 7,98-7,92 (м, 1H), 7,78 (д, J=7,9 Гц, 1H), 5,01 (tt, J=8,5, 5,8 Гц, 1H), 1,85 (ддт, J=14,1, 8,5, 7,2 Гц, 4H), 0,73 (т, J=7,4 Гц, 6H); m/z (ESI+) для (C12H15BrN4), 295,0 (M+H)+.
Промежуточное соединение 15: 2-бром-6-{4-[(2S)-бутан-2-ил]-4H-1,2,4-триазол-3-ил}пиридин
Смесь N'-[(6-бромпиридин-2-ил)карбонил]-N,N-диметил-гидразоноформамида (1b) (4,40 г, 16,2 ммоль) и (2S)-бутан-2-амина (1,25 г, 17,0 ммоль) в MeCN (100 мл) и уксусной кислоте (25 мл) перемешивали при 90°C в течение 16 часов. Анализ методом LCMS показывал полный расход исходного материала. Раствор концентрировали досуха. Остаток распределяли между EtOAc (50 мл) и Na2CO3 (50 мл). Органический слой промывали солевым раствором (2×30 мл), сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (120 г SiO2, 1-5% MeOH/EtOAc) с получением промежуточного соединения 15 (3,0 г , 66% выход) в виде светло-желтого масла. 1H ЯМР (400 МГц, хлороформ-d) δ 8,33 (с, 1H), 8,30 (дд, J=7,8, 0,9 Гц, 1H), 7,72-7,67 (м, 1H), 7,53 (дд, J=7,9, 0,9 Гц, 1H), 5,42 (г, J=6,9 Гц, 1H), 1,87 (ддкв, J=30,1, 14,1, 7,2 Гц, 2H), 1,56 (д, J=6,9 Гц, 3H), 0,94 (т, J=7,4 Гц, 3H); m/z (ESI+) для (C11H13BrN4), 282,8 (M+H)+.
Промежуточное соединение 16: 6-(4-пропил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)пиридин-2-амин
Стадия 1: 6-аминопиридин-2-карбогидразид (16a)
К раствору метил 6-аминопиридин-2-карбоксилата (100 г, 657 ммоль) в MeOH (1,0 л) добавляли N2H4·H2O (69,7 г, 1,18 моль). Смесь перемешивали при кипячении с обратным холодильником в течение 5 часов. Образовывались значительные количества белого осадка. Анализ методом TLC (1:10 MeOH/DCM) показывал полный расход исходного материала. Реакционную смесь фильтровали. Осадок на фильтре промывали с помощью EtOAc (3×100 мл) и сушили под вакуумом с получением 6-аминопиридин-2-карбогидразида (95,4 г, 95% выход) в виде белого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 9,11 (с, 1H), 7,53-7,46 (м, 1H), 7,08 (дд, J=7,3, 0,9 Гц, 1H), 6,58 (дд, J=8,4, 0,9 Гц, 1H), 6,06 (с, 2H), 4,45 (д, J=4,7 Гц, 2H); m/z (ESI) для (C6H8N4O), 152,8 (M+H)+.
Стадия 2: N'-(6-{(2E)-2-[(диметиламино)метилиден]гидразин-карбонил}пиридин-2-ил)-N,N-диметилметанимидамид (16b)
Смесь 6-аминопиридин-2-карбогидразида (95,4 г, 627 ммоль) в N,N-диметилдиметоксиметиламине (500 мл) перемешивали при кипячении с обратным холодильником в течение 18 часов. Анализ методом TLC (1:10 MeOH/DCM) показывал полный расход исходного материала. Реакционную смесь концентрировали досуха. Остаток суспендировали в смеси EtOAc (100 мл) и петролейного эфира (200 мл) при 15°C в течение 5 минут. Твердые вещества собирали фильтрацией, и осадок на фильтре сушили под вакуумом с получением N'-(6-{(2E)-2-[(диметиламино)метилиден]гидразинкарбонил}пиридин-2-ил)-N,N-диметилметанимидамида (156 г, 95% выход) в виде белого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, хлороформ-d) δ 9,94 (с, 1H), 8,33 (с, 1H), 8,14 (с, 1H), 7,77 (дд, J=7,4, 0,9 Гц, 1H), 7,69-7,62 (м, 1H), 7,03 (дд, J=8,1, 0,9 Гц, 1H), 3,11 (с, 3H), 3,10 (с, 3H), 2,95 (с, 6H); m/z (ESI) для (C12H18N6O), 263,0 (M+H)+.
Стадия 3: 6-(4-пропил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)пиридин-2-амин
К раствору N'-(6-{(2E)-2-[(диметиламино)метилиден]гидразин-карбонил}пиридин-2-ил)-N,N-диметилметанимидамида (100 г, 381 ммоль) в PhMe (800 мл) добавляли пропан-1-амин (113 г, 1,91 моль) и уксусную кислоту (160 г, 2,67 моль). Смесь перемешивали при 90-100°C (внутренняя температура) в течение 24 часов. Анализ методом LCMS показывал полный расход исходного материала. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры. Смесь доводили до pH ~10-11 путем добавления 50% водного раствора NaOH, и затем промывали H2O. Водный слой экстрагировали смесью 5:1 DCM/THF (3x). Объединенные органические слои концентрировали досуха. Остаток растворяли в EtOAc (3x). Твердые вещества суспендировали в 1:2 EtOAc/гептаны в течение 30 минут. Твердые вещества собирали фильтрацией. Осадок на фильтре сушили под вакуумом с получением промежуточного соединения 16 (25,6 г, 76% выход) в виде белого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 8,57 (с, 1H), 7,53-7,47 (м, 1H), 7,22 (д, J=7,0 Гц, 1H), 6,52 (д, J=8,0 Гц, 1H), 6,15 (с, 2H), 4,48 (т, J=7,2 Гц, 2H), 1,67 (г, J=7,4 Гц, 2H), 0,81 (т, J=7,4 Гц, 3H); m/z (ESI) для (C10H13N5), 204,2 (M+H)+.
Промежуточное соединение 17: 2-бром-6-(5-метил-4-пропил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)пиридин
Это превращение осуществляли путем проведения пяти параллельных синтезов. Пиридин (20,0 мл) охлаждали на ледяной бане до 0°C. Последовательно добавляли TFA (950 мг, 8,33 ммоль), пропан-1-амин (1,48 г, 25,0 ммоль) и 2-бром-6-(5-метил-1,3,4-оксадиазол-2-ил)пиридин (промежуточное соединение 4) (2,00 г, 8,33 ммоль). Смесь герметизировали и перемешивали при 100°C в течение 3,5 дней с добавлением в реакционную смесь дополнительного количества пропан-1-амина (1,48 г, 25,0 ммоль) через 1,5 и 2,5 дня, соответственно. Анализ методом LCMS показывал полный расход исходного материала с образованием продукта с требуемой молекулярной массой. Продукты параллельных реакций объединяли и концентрировали досуха. Остаток очищали флэш-хроматографией (SiO2, 0-100% EtOAc/петролейный эфир). Требуемые фракции повторно очищали методом препаративной HPLC с использованием колонки YMC Triart C18 (250×50 мм, размер частиц 7 мкм), которую элюировали смесью 30-70% MeCN/H2O (+0,225% муравьиная кислота) при расходе 25 мл/мин. Требуемые фракции подщелачивали путем добавления насыщенного водного раствора NaHCO3 до pH ~8. Раствор концентрировали для удаления MeCN и затем экстрагировали с помощью DCM (3×50 мл). Объединенные органические слои промывали солевым раствором, сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали с получением промежуточного соединения 17 (6,11 г, 52% выход) в виде белого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,31-8,24 (м, 1H), 7,70-7,63 (м, 1H), 7,51-7,47 (м, 1H), 4,40-4,32 (м, 2H), 2,53 (с, 3H), 1,86-1,74 (м, 2H), 1,00 (тд, J=7,4, 2,9 Гц, 3H). m/z (ESI+) для (C11H13BrN4), 282,9 (M+H)+.
Промежуточное соединение 18: 2-бром-6-(4,5-диэтил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)пиридин
Стадия 1: 6-бром-N'-пропаноилпиридин-2-карбогидразид
К перемешиваемой смеси 6-бромпиридин-2-карбогидразида (промежуточного соединения 1a) (3,00 г, 13,9 ммоль) в DCM (46,3 мл) при 0°C добавляли TEA (2,11 г, 20,8 ммоль) и пропаноилхлорид (1,35 г, 15,7 ммоль). Смесь перемешивали при 0°C в течение 20 минут, и затем при 20°C в течение 16 часов. Анализ методом TLC (1:1 EtOAc/петролейный эфир) показывал присутствие оставшегося исходного материала. Смесь охлаждали до 0°C и добавляли дополнительные количества TEA (2,11 г, 20,8 ммоль) и пропаноилхлорида (1,45 г, 15,7 ммоль). Смесь перемешивали при 0°C в течение 20 минут, и затем при 20°C в течение 16 часов. Анализ методом TLC (1:1 EtOAc/петролейный эфир) показывал полный расход исходного материала. Реакционную смесь гасили путем добавления H2O (60 мл) и экстрагировали с помощью DCM (2×30 мл). Объединенные органические слои промывали солевым раствором (80 мл), сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Неочищенный материал суспендировали с помощью EtOAc (10 мл) и петролейного эфира (30 мл) в течение 10 минут при 20°C. Твердые вещества собирали фильтрацией и сушили под вакуумом с получением 6-бром-N'-пропаноилпиридин-2-карбогидразида (3,0 г, 79% выход) в виде белого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 9,96 (уш.д, J=5,4 Гц, 1H), 8,36 (уш.д, J=5,4 Гц, 1H), 8,10 (дд, J=7,5, 1,0 Гц, 1H), 7,47-7,70 (м, 1H), 7,65 (дд, J=7,9, 1,1 Гц, 1H), 2,38 (кв, J=7,6 Гц, 2H), 1,25 (т, J=7,6 Гц, 3H).
Стадия 2: 2-бром-6-(5-этил-1,3,4-оксадиазол-2-ил)пиридин
К перемешиваемому раствору 6-бром-N'-пропаноилпиридин-2-карбогидразида (3,00 г, 11,0 ммоль) в DCM (50,0 мл) и MeCN (50,0 мл) добавляли TEA (6,69 г, 66,2 ммоль) и п-толуолсульфонилхлорид (2,31 г, 12,1 ммоль). Смесь перемешивали при температуре окружающей среды в течение 60 часов. Анализ методом TLC (EtOAc) показывал полный расход исходного материала. Смесь концентрировали досуха. Остаток растворяли в H2O (50 мл) и экстрагировали с помощью DCM (2×30 мл). Объединенные органические слои промывали солевым раствором (50 мл), сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Неочищенный материал суспендировали в EtOAc (3 мл) и петролейном эфире (6 мл) при температуре окружающей среды в течение 30 минут. Твердые вещества собирали фильтрацией и сушили под вакуумом с получением 2-бром-6-(5-этил-1,3,4-оксадиазол-2-ил)пиридина (1,34 г, 48% выход) в виде желтого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,21 (дд, J=7,6, 1,0 Гц, 1H), 7,80-7,68 (м, 1H), 7,64 (дд, J=8,0, 0,9 Гц, 1H), 3,00 (кв, J=7,6 Гц, 2H), 1,46 (т, J=7,6 Гц, 3H). m/z (ESI+) для (C9H8BrN3O), 256,0 (M+H)+.
Стадия 3: 2-бром-6-(4,5-диэтил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)пиридин
Пиридин (8,0 мл) охлаждали на ледяной бане до 0°C. Последовательно добавляли TFA (301 мг, 2,64 ммоль), 2-бром-6-(5-этил-1,3,4-оксадиазол-2-ил)пиридин (670 мг, 2,64 ммоль) и этиламин (476 мг, 10,5 ммоль). Смесь перемешивали при 95°C в течение 20 часов, и затем при 100°C в течение 7 часов. Реакционную смесь концентрировали досуха. Остаток очищали флэш-хроматографией (SiO2, 1:10 MeOH/EtOAc) с получением промежуточного соединения 18 (500 мг, 67% выход) в виде желтой смолы. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,28 (дд, J=7,8, 0,9 Гц, 1H), 7,71-7,62 (м, 1H), 7,61-7,37 (м, 1H), 4,47 (кв, J=7,1 Гц, 2H), 2,84 (кв, J=7,6 Гц, 2H), 1,57-1,34 (м, 6H). m/z (ESI+) для (C11H13BrN4), 280,7 (M+H)+.
Промежуточное соединение 19: трет-бутил метил({6-[(2R)-2-метилпирролидин-1-ил]-1-оксо-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]-пиридин-4-ил}метил)карбамат
Стадия 1: трет-бутил ({3-формил-6-[(2R)-2-метилпирролидин-1-ил]-4-(пиперидин-1-карбонил)пиридин-2-ил}метил)метилкарбамат
Раствор 2-хлор-6-[(2R)-2-метилпирролидин-1-ил]-4-(пиперидин-1-карбонил)пиридин-3-карбальдегида (промежуточного соединения 10b) (600 мг, 1,79 ммоль) и PdCl2(dppf) (261 мг, 0,357 ммоль) в 1,4-диоксане (25,0 мл) продували N2 в течение 5 минут и затем нагревали до 80°C. Добавляли при 80°C раствор {[(трет-бутокси-карбонил)(метил)амино]метил}(хлоридо)цинка (0,158 M в THF, 39,6 мл), и смесь перемешивали в течение еще 35 минут при этой же температуре. Анализ методом LCMS показывал полный расход исходного материала с образованием продукта с требуемой молекулярной массой. Смесь охлаждали до 30°C и фильтровали через целит. Осадок на фильтре промывали с помощью DCM (5×10 мл), и фильтрат концентрировали досуха. Остаток объединяли с неочищенным материалом, полученным в параллельной реакции аналогичным способом, с 100 мг 2-хлор-6-[(2R)-2-метилпирролидин-1-ил]-4-(пиперидин-1-карбонил)пиридин-3-карбальдегида. Смесь очищали флэш-хроматографией (SiO2, 1:1 EtOAc/петролейный эфир) с получением трет-бутил ({3-формил-6-[(2R)-2-метилпирролидин-1-ил]-4-(пиперидин-1-карбонил)пиридин-2-ил}метил)метилкарбамата (900 мг, 97% выход) в виде желтой смолы. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 9,84 (с, 1H), 6,40-6,06 (м, 1H), 4,91-4,45 (м, 2H), 4,52-3,92 (м, 1H), 3,69-3,47 (м, 3H), 3,21-3,00 (м, 2H), 2,98-2,84 (м, 3H), 2,22-1,82 (м, 3H), 1,83-1,66 (м, 1H), 1,59 (с, 4H), 1,41 (с, 7H), 1,19 (д, J=18,2 Гц, 8H). m/z (ESI+) для (C24H36N4O4), 445,4 (M+H)+.
Стадия 2: трет-бутил метил{[3-{(E)-[(2-метилпропан-2-сульфинил)имино]метил}-6-[(2R)-2-метилпирролидин-1-ил]-4-(пиперидин-1-карбонил)пиридин-2-ил]метил}карбамат
Смесь трет-бутил ({3-формил-6-[(2R)-2-метилпирролидин-1-ил]-4-(пиперидин-1-карбонил)пиридин-2-ил}метил)метилкарбамата (1,40 г, 3,15 ммоль), этоксида титана(IV) (1,44 г, 6,30 ммоль) и (S)-(−)-2-метил-2-пропансульфинамида (573 мг, 4,72 ммоль) в THF (50,0 мл) перемешивали при 50°C в течение 18 часов. Добавляли дополнительные количества этоксида титана(IV) (359 мг, 1,57 ммоль) и (S)-(−)-2-метил-2-пропансульфинамида (115 мг, 0,945 ммоль), и смесь перемешивали при 50°C в течение еще 20 часов. Анализ методом LCMS показывал полный расход исходного материала с образованием продукта с требуемой молекулярной массой. Реакционную смесь гасили насыщенным водным раствором Na2CO3 (150 мл) и разбавляли с помощью DCM (100 мл). Смесь фильтровали через целит, и слои разделяли. Водный слой экстрагировали с помощью DCM (100 мл). Объединенные органические слои промывали солевым раствором (150 мл), сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали с получением трет-бутил метил{[3-{(E)-[(2-метилпропан-2-сульфинил)имино]метил}-6-[(2R)-2-метилпирролидин-1-ил]-4-(пиперидин-1-карбонил)пиридин-2-ил]-метил}карбамата (1,7 г, >99% выход) в виде желтого твердого вещества. m/z (ESI+) для (C28H45N5O4S), 548,5 (M+H)+.
Стадия 3: трет-бутил метил({6-[(2R)-2-метилпирролидин-1-ил]-1-оксо-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-4-ил}метил)карбамат
К раствору трет-бутил метил{[3-{(E)-[(2-метилпропан-2-сульфинил)имино]метил}-6-[(2R)-2-метилпирролидин-1-ил]-4-(пиперидин-1-карбонил)пиридин-2-ил]метил}карбамата (1,72 г, 3,41 ммоль) в THF (20,0 мл) при 0°C добавляли LiBH4 (68,6 мг, 3,15 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 0°C в течение 1 часа. Анализ методом TLC показывал полный расход исходного материала. Смесь подогревали до температуры окружающей среды, и добавляли раствор NaOMe (30% в MeOH, 6,24 г, 34,6 ммоль). Смесь перемешивали в течение 16 часов. Анализ методом LCMS показывал образование продукта с требуемой молекулярной массой. Реакционную смесь концентрировали досуха. Остаток растворяли в EtOAc (40 мл) и промывали H2O (40 мл). Водный слой экстрагировали с помощью EtOAc (30 мл). Объединенные органические слои промывали солевым раствором (60 мл), сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (SiO2, EtOAc) с получением промежуточного соединения 19 (750 мг, 66% выход) в виде белого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 7,04-6,79 (м, 1H), 6,68 (с, 1H), 4,56-4,43 (м, 2H), 4,43-4,33 (м, 2H), 4,27-4,16 (м, 1H), 3,58 (ддд, J=2,5, 7,3, 10,0 Гц, 1H), 3,45-3,30 (м, 1H), 3,01-2,91 (м, 3H), 2,17-1,96 (м, 3H), 1,80-1,72 (м, 1H), 1,53-1,37 (м, 9H), 1,26-1,23 (м, 3H); m/z (ESI+) для (C19H28N4O3), 361,2 (M+H)+.
Промежуточное соединение 20: (4R)-3-(6-бромпиридин-2-ил)-4-(фторметил)-1,3-оксазолидин-2-он
Стадия 1: метил (4R)-2-оксо-3-(трифенилметил)-1,3-оксазолидин-4-карбоксилат
Раствор метил N-(трифенилметил)-D-серината (90,0 г, 249 ммоль) и TEA (69,8 г, 690 ммоль) в PhMe (1,8 L) добавляли по каплям к раствору трифосгена (69,8 г, 41,5 ммоль) в PhMe (300 мл) в атмосфере N2, поддерживая при этом температуру -5-10°C (внутреннюю температуру). Смесь перемешивали при температуре окружающей среды в течение 30 минут. Анализ методом TLC (1:2 EtOAc/петролейный эфир) показывал полный расход исходного материала. Реакционную смесь гасили путем добавления по каплям 1 N HCl (600 мл), и смесь перемешивали в течение 10 минут. Слои разделяли. Водный слой подщелачивали до pH ~8-9 путем добавления 2 N NaOH и затем экстрагировали с помощью DCM/PhMe (1:5, 1,5 л). Объединенные органические слои промывали насыщенным водным раствором NaHCO3 (500 мл) и солевым раствором (500 мл), сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Твердые вещества суспендировали в смеси EtOAc/петролейный эфир (1:3, 400 мл) при комнатной температуре в течение 30 минут. Твердые вещества собирали фильтрацией и сушили под вакуумом с получением метил (4R)-2-оксо-3-(трифенилметил)-1,3-оксазолидин-4-карбоксилата (71 г, 74% выход) в виде белого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 7,38-7,27 (м, 15H), 4,61-4,50 (м, 1H), 4,50-4,38 (м, 1H), 4,21 (дд, J=3,3, 8,9 Гц, 1H), 3,49 (с, 3H).
Стадия 2: (4S)-4-(гидроксиметил)-3-(трифенилметил)-1,3-оксазолидин-2-он
Раствор метил (4R)-2-оксо-3-(трифенилметил)-1,3-оксазолидин-4-карбоксилата (158 г, 409 ммоль) в THF (2,4 L) охлаждали до -65°C (внутренняя температура) и добавляли порциями LiAlH4 (18,6 г, 490 ммоль), поддерживая при этом температуру ниже -60°C (внутреннюю температуру). Смесь перемешивали при -10°C (внутренняя температура) в течение 1,5 часа. Анализ методом TLC (1:2 EtOAc/петролейный эфир) указывал на полный расход исходного материала. Смесь гасили путем осторожного добавления Na2SO4·10H2O до тех пор, пока больше не обнаруживалось выделение газа. Суспензию фильтровали через слой целита. Осадок на фильтре суспендировали в EtOAc (500 мл), перемешивали в течение 10 минут, и затем фильтровали. Этот процесс повторяли 3 раза. Объединенный фильтрат концентрировали досуха. Остаток очищали флэш-хроматографией (660 г SiO2, 0-80% EtOAc/петролейный эфир) с получением (4S)-4-(гидроксиметил)-3-(трифенилметил)-1,3-оксазолидин-2-она (29,9 г, 20% выход) в виде белого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 7,31-7,10 (м, 15H), 4,36-4,12 (м, 2H), 3,73-3,58 (м, 1H), 3,22-2,94 (м, 2H).
Стадия 3: (4R)-4-(фторметил)-3-(трифенилметил)-1,3-оксазолидин-2-он
Раствор (4S)-4-(гидроксиметил)-3-(трифенилметил)-1,3-оксазолидин-2-она (29,9 г, 83,3 ммоль) и TEA (75,9 г, 750 ммоль) в MeCN (400 мл) охлаждали на водяной бане со льдом до 0°C (внутренняя температура) и медленно добавляли нонафторбутансульфонилфторид (75,5 г, 250 ммоль), поддерживая при этом температуру реакционной среды 5-10°C (внутренняя температура). Раствор перемешивали при 0°C (внутренняя температура) в течение 5 минут. Анализ методом TLC (1:2 EtOAc/петролейный эфир) показывал полный расход исходного материала. Добавляли по каплям триэтиламина тригидрофторид (40,3 г, 250 ммоль), и раствор перемешивали при 5-10°C (внутренняя температура) в течение 2 часов. Смесь распределяли между EtOAc (200 мл) и H2O (200 мл). Водную фазу экстрагировали с помощью EtOAc (200 мл). Объединенные органические слои промывали насыщенным водным раствором NaHCO3 (200 мл) и солевым раствором (200 мл), сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток суспендировали в петролейном эфире (200 мл) и EtOAc (100 мл) в течение 2 часов при температуре окружающей среды, и твердые вещества собирали фильтрацией. Фильтрат концентрировали досуха и очищали флэш-хроматографией (80 г SiO2, 30-50% EtOAc/петролейный эфир). Требуемые фракции концентрировали досуха и объединяли с ранее выделенным осадком на фильтре с получением (4R)-4-(фторметил)-3-(трифенилметил)-1,3-оксазолидин-2-она (26,7 г, 89% выход) в виде белого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 7,39-7,22 (м, 15H), 4,54-4,46 (м, 1H), 4,41-4,35 (м, 1H), 4,08-3,82 (м, 3H); 19F ЯМР (377 МГц, CDCl3) δ -231,64 (с, 1F).
Стадия 4: (4R)-4-(фторметил)-1,3-оксазолидин-2-он
Суспензию (4R)-4-(фторметил)-3-(трифенилметил)-1,3-оксазолидин-2-она (26,7 г, 74,0 ммоль) в DCM (90,0 мл) охлаждали до 0°C (внутренняя температура) и обрабатывали по каплям с помощью TFA (90,0 мл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1,5 часа. Анализ методом LCMS показывал полный расход исходного материала. Смесь концентрировали досуха. Остаток растворяли в DCM (200 мл), и раствор охлаждали до 0°C (внутренняя температура) на ледяной бане со льдом. Смесь подщелачивали концентрированным водным раствором NH4OH до pH ~9, поддерживая при этом внутреннюю температуру 5-15°C (внутреннюю температуру). Смесь сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали через слой целита. Осадок на фильтре промывали с помощью DCM. Объединенный фильтрат концентрировали досуха. Остаток очищали флэш-хроматографией (80 г SiO2, EtOAc) с получением (4R)-4-(фторметил)-3-(трифенилметил)-1,3-оксазолидин-2-она (3,86 г, 44% выход) в виде бледно-желтого масла. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 6,41 (уш.с, 1H), 4,57-4,44 (м, 2H), 4,42-4,31 (м, 1H), 4,29-4,23 (м, 1H), 4,22-4,10 (м, 1H); 19F ЯМР (377 МГц, CDCl3) δ -229,49 (с, 1F).
Стадия 5: (4R)-3-(6-бромпиридин-2-ил)-4-(фторметил)-1,3-оксазолидин-2-он
Смесь (4R)-4-(фторметил)-3-(трифенилметил)-1,3-оксазолидин-2-она (4,70 г, 39,5 ммоль), 2,6-дибромпиридина (14,5 г, 61,2 ммоль) и Cs2CO3 (32,1 г, 98,7 ммоль) в 1,4-диоксане (250,0 мл) продували N2 в течение 2 минут. Добавляли Pd(OAc)2 (886 мг, 3,95 ммоль) и Xantphos (2,74 г, 4,74 ммоль), и смесь продували N2. Смесь перемешивали при 80°C в течение 3 часов, охлаждали до комнатной температуры и фильтровали. Осадок на фильтре промывали с помощью EtOAc (5×30 мл). Объединенный фильтрат концентрировали досуха. Остаток очищали флэш-хроматографией (330 г SiO2, 0-30% EtOAc/петролейный эфир) с получением промежуточного соединения 20 (3,72 г, 34% выход) в виде белого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,21 (дд, J=8,3, 0,7 Гц, 1H), 7,75-7,49 (м, 1H), 7,26 (дд, J=7,6, 0,7 Гц, 1H), 5,12-4,98 (м, 1H), 4,96-4,61 (м, 2H), 4,60-4,48 (м, 2H); 19F ЯМР (377 МГц, CDCl3) δ -237,04; m/z (ESI+) для (C9H8BrFN2O2), 276,7 (M+H)+; [α]D30 = +97,3° (c=1,0, MeOH).
ПРИМЕРЫ
Общие методы
Если не указано иное, то переменные на схемах имеют такие же значения, как и в описании изобретения. Упомянутые в изобретении амины могут включать в себя и защищенные амины, защиту с которых удаляют путем проведения известных в области химии стандартных реакций.
Метод A
Метод A относится к одной представленной выше последовательности синтезов для получения соединений формулы I. Согласно методу A, на первой стадии, бромирование соединения формулы A-1 (например, этил 2-хлор-3-метилизоникотината) (J. Med. Chem., 47(25), 6363-6372; 2004) с использованием N-бромсукцинимида дает соединение формулы A-2. При проведении этой стадии, заместитель R3 должен быть представлен таким же фрагментом, что и заместитель в конечном продукте, соединении формулы I, или его защищенным вариантом. На следующей стадии, соединение формулы A-2 подвергают аммонолизу с помощью аммиака с образованием 4-хлор-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-она, соединения формулы A-3. Соединение формулы A-3 затем подвергают карбонилированию хлорида используя монооксид углерода и метанол на палладиевом катализаторе, и затем проводят реакцию установление защиты с получением эфира формулы A-4. На следующей стадии, образование N-оксида соединения формулы A-4 при стандартных условиях проведения реакции (мочевина-пероксид водорода) и затем хлорирование соединения формулы A-5 с использованием оксихлорида фосфора дает хлорид формулы A-6. Затем, проведение реакции удаления карбаматной защитной группы формулы A-6 с последующей реакцией хлорида с R1 (например, с амином) дает соединение формулы A-7 (например, аминопиридин). При проведении этой стадии, заместитель R1 должен быть представлен таким же фрагментом, что и заместитель в конечном продукте, в соединении формулы I, или его защищенным вариантом. На следующей стадии, восстановление эфирной группы в формуле A-7 дает спирт формулы A-8. За активацией спиртовой группы формулы A-8 в виде мезилата (A-9, Y= OSO2CH3) следовало, либо:
i) азидирование (A-9, Y= N3) и восстановление азидной группы при стандартных условиях проведения реакции с получением первичных аминов (формула A-9, Y= NH2); либо
ii) прямое замещение мезилата (формула A-9, Y= OSO2CH3) с помощью первичных аминов с получением соответствующих вторичных аминов (формула A-9, Y= N(R8)(R9), R8 и R9=H и/или алкил) с получением соединения формулы A-9.
Защита аминной группы в форме соответствующего трет-бутилкарбамата, формула A-9 (Y= N(R8)Boc, R8=H или алкил) с последующем проведением реакции сочетания с бромпиридином формулы A-10 на палладиевом или медном катализаторе дает защищенные пирроло[3,4-c]пиридин-1-оны (R2=CH2N(R8)Boc, R8=H или алкил). При проведении этой стадии, заместители R4 и (R5)a формулы A-10 должны быть представлены таким же фрагментами, что и заместители в конечном продукте, в соединении формулы I, или их защищенными вариантами. Затем, удаление защитной карбаматной группы при стандартных условиях проведения реакции дает пирроло[3,4-c]пиридин-1-оны формулы I (R2=CH2N(R8)(R9), R8 и R9= H и/или алкил).
Метод B
Метод B относится к одной представленной выше последовательности синтезов для получения соединений формулы II. Согласно методу B, на первой стадии, бензильное бромирование соединения формулы B-1 (например, этил 2-хлор-3-метилизоникотината) (J. Med. Chem., 47(25), 6363-6372; 2004) с использованием N-бромсукцинимида дает соединение формулы B-2. На следующей стадии, соединение формулы B-2 подвергают аммонолизу с помощью аммиака с получением 4-хлор-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-она, соединения формулы B-3. Соединение формулы B-3 затем подвергают карбонилированию хлорида с использованием монооксида углерода и метанола на палладиевом катализаторе и затем реакции удаления защитной группы с получением эфира формулы B-4. На следующей стадии, образование N-оксида соединения формулы B-4 при стандартных условиях проведения реакции (мочевина-пероксид водорода) и затем хлорирование соединения формулы B-5 с использованием оксихлорида фосфора дает хлорид формулы B-6. Затем, удаление защитной карбаматной группы соединения формулы B-6 с последующей реакцией хлорида с R1 (например, с амином) дает соединение формулы B-7. При проведении этой стадии, заместитель R1 должен быть представлен таким же фрагментом, что и заместитель в конечном продукте, в соединении формулы II, или его защищенным вариантом. На следующей стадии, восстановление эфирной группы формулы B-7 дает спиртовое соединение формулы B-8. Затем, за активацией спиртовой группы формулы B-8, в виде мезилата (B-9, Y= OSO2CH3) следовало либо:
i) азидирование (B-9, Y= N3) и восстановление азидной группы при стандартных условиях проведения реакции с получением первичных аминов (формула B-9, Y= NH2); или
ii) прямое замещение мезилата (формула B-9, Y= OSO2CH3) с помощью первичных аминов с получением соответствующих вторичных аминов (формула B-9, Y= N(R8)(R9), R8 и R9=H и/или алкил) с получением соединения формулы B-9.
Защита аминной группы в форме соответствующего трет-бутилкарбамата, формула B-9 (Y= N(R8)Boc, R8=H или алкил) с последующем проведением реакции сочетания с бромпиридином формулы B-10 на палладиевом или медном катализаторе дает защищенные пирроло[3,4-c]пиридин-1-оны (R2=CH2N(R8)Boc, R8=H и/или алкил). При проведении этой стадии, заместители R5 и R12 формулы B-10 должны быть представлены таким же фрагментами, что и заместители в конечном продукте, в соединении формулы II, или их защищенными вариантами.
Затем, удаление защитной карбаматной группы при стандартных условиях проведения реакции дает пирроло[3,4-c]пиридин-1-оны формулы II (R2=CH2N(R8)(R9), R8 и R9= H и/или алкил).
Получение соединения формулы B-10 может быть осуществлено путем гидразинолиза эфира бромпиридина формулы B-11 (J. Med. Chem., 60(2), 722-748; 2017) с получением соединения формулы B-12. При проведении этой стадии, заместитель R5 формулы B-11 должен быть представлен таким же фрагментом, что и заместитель в конечном продукте, в соединении формулы II, или его защищенным вариантом. Затем, реакция гидразида формулы B-12 с диметилформамид диметилацеталем дает соединение формулы B-13. Конденсация соединение формулы B-13 с амином (например, R12-NH2) дает триазол формулы B-10. При проведении этой стадии, заместитель R12 амина должен быть представлен таким же фрагментом, что и заместитель в конечном продукте, в соединении формулы II, или его защищенным вариантом.
Метод C
Метод C относится к другой представленной выше последовательности синтезов соединений формулы II. Согласно методу C, на первой стадии, восстановление эфирной группы соединения формулы B-6 дает спиртовое соединение формулы C-1. Затем, за активацией спиртовой группы формулы C-1 в виде мезилата (C-2, Y= OSO2CH3) следовало, либо:
i) азидирование (C-2, Y= N3) и восстановление азидной группы при стандартных условиях проведения реакции с получением первичных аминов (формула C-2, Y= NH2); либо
ii) прямое замещение мезилата (формула C-2, Y= OSO2CH3) с помощью первичных аминов с получением соответствующих вторичных аминов (формула C-2, Y= N(R8)(R9), R8 и R9=H и/или алкил) с получением соединения формулы C-2.
Защита аминной группы в форме соответствующего трет-бутилкарбамата дает C-2 (Y= N(R8)Boc, R8=H или алкил), и последующее проведение реакции сочетания с бромпиридином формулы B-10 на палладиевом или медном катализаторе дает защищенные пирроло[3,4-c]пиридин-1-оны формулы C-3 (R2=CH2N(R8)Boc, R8=H или алкил). При проведении этой стадии, заместители R5 и R12 формулы B-10 должны быть представлены таким же фрагментом, что и заместители в конечном продукте, в соединении формулы II, или их защищенными вариантами. Затем, катализируемая палладием или медью реакция кросс-сочетания соединения формулы C-3 либо с аминами, защищенными аминами, либо с алкилтрифторборатами/бороновыми кислотами/боронатами/цинкатами или алкенилбороновыми эфирами, с последующим восстановлением или циклопропанированием и последующим удалением защитной карбаматной группы дает пирроло[3,4-c]пиридин-1-оны формулы II (R2=CH2N(R8)(R9), R8 и R9= H и/или алкил, R1 заместитель должен быть представлен таким же фрагментом, что и заместитель в конечном продукте, соединении формулы II, или его защищенным вариантом).
Метод D
Метод D относится к представленной выше последовательности синтезов для получения соединений формулы III. Согласно методу D, на первой стадии, сочетание 2,6-дибромпиридина формулы D-1 с оксазолидиноном формулы D-2 на палладиевом катализаторе дает бромпиридин формулы D-3. При проведении этой стадии, заместитель R5 формулы D-1 и заместитель R12 формулы D-2 должен быть представлен таким же фрагментом, что и заместитель в конечном продукте, в соединении формулы III, или его защищенным вариантом. Затем, сочетание соединения формулы D-3 с соединением формулы B-9 (Y= N(R8)Boc, R8=H или алкил) на палладиевом или медном катализаторе дает защищенные пирроло[3,4-c]пиридин-1-оны (R2=CH2N(R8) Boc, R8=H или алкил, R1 заместитель должен быть представлен таким же фрагментом, что и заместитель в конечном продукте, в соединении формулы III, или его защищенным вариантом). На следующей стадии, удаление защитной карбаматной группы при стандартных условиях проведения реакции дает пирроло[3,4-c]пиридин-1-оны формулы III (R2=CH2N(R8)(R9)Boc, R8 и R9=H и/или алкил).
Метод E
Метод E относится к представленной выше последовательности синтезов для получения соединений формулы E-4. Согласно методу E, на первой стадии, защита соединения формулы E-1 (например 4-бром-5-изопропил-1H-пиразола) с помощью тетрагидропиранильной (THP) группы дает пиразол формулы E-2. При проведении этой стадии, заместитель R12 формулы E-1 должен быть представлен таким же фрагментом, что и заместитель в конечном продукте, в соединении формулы E-4, или его защищенным вариантом. Затем, соединение формулы E-2 подвергают реакции сочетания с 2,6-дибромпиридином формулы D-1 (например, R5 =H или F) с получением бромпиридина формулы E-3. При проведении этой стадии, заместитель R5 формулы D-1 должен быть представлен таким же фрагментом, что и заместитель в конечном продукте, в соединении формулы E-4, или его защищенным вариантом. На следующей стадии, реакция сочетания соединения формулы E-3 с соединением формулы B-9 (Y= N(R8)Boc, R8=H или алкил) на палладиевом или медном катализаторе дает защищенные пирроло[3,4-c]пиридин-1-оны формулы E-4 (R2=CH2N(R8)Boc, R8=H или алкил). При проведении этой стадии, заместитель R1 формулы B-9 и заместитель R5 формулы E-3 должен быть представлен таким же фрагментом, что и заместитель в конечном продукте, в соединении формулы E-4, или его защищенным вариантом. Затем, удаление защиты с защищенного пирроло[3,4-c]пиридин-1-она при стандартных условиях проведения реакции дает пирроло[3,4-c]пиридин-1-оны формулы E-4 (R2=CH2N(R8)(R9), R8 и R9=H и/или алкил).
Метод F
Метод F относится к представленной выше последовательности синтезов для получения соединений формулы F-3. Согласно методу F, на первой стадии, сочетание соединения формулы B-3 в условиях проведения окислительно-восстановительной реакции под действием света (Zuo, et al., "Merging photoredox with nickel catalysis coupling of α-carboxyl sp3-carbons with aryl halides", Science 2014,345, 437−440) с использованием саркозина (F-1) в качестве источника аминоалкильного радикала дает пирроло[3,4-c]пиридин-1-он формулы F-2. Затем, сочетание соединения формулы F-2 с соединением бромпиридина формулы B-10 на палладиевом или медном катализаторе дает защищенный пирроло[3,4-c]пиридин-1-он формулы F-3 (R8=Boc). При проведении этой стадии, заместители R5 и R12 формулы B-10 должны быть представлены такими же фрагментами, что и заместители в конечном продукте, в соединении формулы F-3, или их защищенными вариантами. На следующей стадии, удаление защитной карбаматной группы при стандартных условиях проведения реакции дает пирроло[3,4-c]пиридин-1-он формулы F-3, где R8=H.
Метод G
Метод G относится к другой представленной выше последовательности синтезов для получения соединений формулы II. Согласно методу G, на первой стадии, реакция нуклеофильного радикального замещения соединения формулы G-1 (например, метил 3-метилизоникотината) с карбоновой кислотой (например, R1CO2H) в условиях окислительного декарбоксилирования с нитратом серебра и окислителем (персульфатом аммония) дает эфир формулы G-2. При проведении этой стадии, заместитель R1 карбоновой кислоты должен быть представлен таким же фрагментом, что и заместитель в конечном продукте, в соединении формулы II, или его защищенным вариантом. Затем, бромирование с использованием N-бромсукцинимида дает бромид формулы G-3. На следующей стадии, аммонолиз бромида формулы G-3 с помощью аммиака дает 2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он формулы G-4. Затем, декарбоксилирующее радикальное замещение с помощью N-Boc замещенной аминокислоты в окислительных условиях дает бензиламин формулы B-9 (Y=N(R8)Boc, R8=H или алкил). На следующей стадии, сочетание с бромпиридином формулы B-10 на палладиевом или медном катализаторе дает защищенные пирроло[3,4-c]пиридин-1-оны формулы II (R2=CH2N(R8)Boc, R8=H или алкил). Затем, удаление защитной карбаматной группы при стандартных условиях проведения реакции дает пирроло[3,4-c]пиридин-1-оны формулы II (R2=CH2N(R8)(R9), R8 и R9=H и/или алкил).
Метод H
Метод H относится к представленной выше последовательности синтезов для получения соединений формулы III. Согласно методу H, на первой стадии, получают оксазолидинон формулы H-2 путем циклизации метил тритил-D-серината формулы H-1 с использованием трифосгена. Затем, восстановление эфира формулы H-2 дает спирт формулы H-3. На следующей стадии, проведение либо
(i) деоксифторирования соединения формулы H-3 дает соединение формулы H-4 (W=фторалкил, например, CH2F), либо
(ii) окисления спирта формулы H-3 в альдегид формулы H-4 (W=CHO) с последующим дифторметилированием дает соединение формулы H-4 (W=CHF2).
Затем, удаление защитной N-тритильной группы формулы H-4 с последующим сочетанием соответствующего оксазолидинона формулы H-5 с 2,6-дибромпиридином формулы D-1 дает бромпиридин формулы D-3. При проведении этой стадии, заместитель R5 формулы D-1 и заместитель R12 формулы H-5 должен быть представлен таким же фрагментом, что и заместитель в конечном продукте, в соединении формулы III, или его защищенным вариантом. Затем, сочетание соединения формулы D-3 с соединением формулы B-9 (R1 заместитель должен быть представлен таким же фрагментом, что и заместитель в конечном продукте, соединении формулы III, или его защищенным вариантом, Y=N(R8)Boc, R8=H или алкил) на палладиевом или медном катализаторе дает защищенный пирроло[3,4-c]пиридин-1-он формулы III (R2=CH2N(R8)Boc, R8=H или алкил, R12=CH2F или CHF2). На конечной стадии, удаление защитной карбаматной группы при стандартных условиях проведения реакции дает пирроло[3,4-c]пиридин-1-он формулы III (R2=CH2N(R8)(R9), R8 и R9=H и/или алкил).
Метод I
Метод I относится к представленной выше последовательности синтезов для получения соединений формулы I-5. Согласно методу I, на первой стадии, гидразинолиз 2-бром-6-фторпиридина формулы I-1 дает соединение формулы I-2. На следующей стадии, диазотирование гидразина формулы I-2 дает азид формулы I-3. Затем, циклоприсоединение азида формулы I-3 с алкином дает 1,2,3-триазол формулы I-4. При проведении этой стадии, заместитель R12 алкина должен быть представлен таким же фрагментом, что и заместитель в конечном продукте, в соединении формулы I-5, или его защищенным вариантом. На следующей стадии, сочетание соединения формулы I-4 с соединением B-9 (Y=N(R8)Boc, R8=H или алкил, R1 заместитель должен быть представлен таким же фрагментом, что и заместитель в конечном продукте, соединении формулы I-5, или его защищенным вариантом) на палладиевом катализаторе дает защищенный пирроло[3,4-c]пиридин-1-он формулы I-5. Затем, удаление защитной карбаматной группы при стандартных условиях проведения реакции дает пирроло[3,4-c]пиридин-1-он формулы I-5 (R2=CH2N(R8)(R9), R8 и R9=H и/или алкил).
Метод J
Метод J относится к еще одной представленной выше последовательности синтезов для получения соединений формулы III. Согласно методу J, на первой стадии, радикальное гидроксиметилирование соединения формулы G-4 с использованием метанола и персульфата аммония дает соединение формулы B-9 (Y=OH). При проведении этой стадии, заместитель R1 формулы G-4 должен быть представлен таким же фрагментом, что и заместитель в конечном продукте, в соединении формулы III, или его защищенным вариантом. Затем, активация спиртовой группы в виде мезилата (B-9, Y= OSO2CH3) с последующим азидированием (B-9, Y= N3) и восстановлением азидной группы при стандартных условиях проведения реакции дает первичные амины (B-9, Y= NH2). На следующей стадии, защита аминной группы в форме соответствующего трет-бутилкарбамата дает B-9 (Y= N(R8)Boc, R8=H). Затем, сочетание соединения формулы D-3 с соединением B-9 на палладиевом или медном катализаторе дает защищенный пирроло[3,4-c]пиридин-1-он формулы III (R2=CH2N(R8)Boc, R8=H, R12 заместитель должен быть представлен таким же фрагментом, что и заместитель в конечном продукте, в соединении формулы III, или его защищенным вариантом). На конечной стадии, удаление защитной карбаматной группы при стандартных условиях проведения реакции дает пирроло[3,4-c]пиридин-1-он формулы III (R2=CH2N(R8)(R9), R8 и R9=H).
Метод K
Метод K относится к другой представленной выше последовательности синтезов для получения соединений формулы III. Согласно методу K, на первой стадии, конденсация 2-цианоацетамида формулы K-1 с оксалатным эфиром формулы K-2 дает гидроксипиридин формулы K-3 (Z=OH). При проведении этой стадии, заместитель R1 формулы K-2 должен быть представлен таким же фрагментом, что и заместитель в конечном продукте, в соединении формулы III, или его защищенным вариантом. На следующей стадии, хлорирование при стандартных условиях проведения реакции (POCl3) дает хлорпиридин формулы K-3 (Z=Cl). Затем, сочетание хлорпиридина формулы K-3 (Z=Cl) в условиях проведения окислительно-восстановительной реакции под действием света (Zuo, et al., "Merging photoredox with nickel catalysis coupling of α-carboxyl sp3-carbons with aryl halides", Science 2014,345, 437−440) с использованием саркозина в качестве источника аминоалкильного радикала дает бензиламин формулы K-4 Y=N(CH3)Boc)]. На следующей стадии, восстановление цианогруппы и сопутствующая циклизация дают 2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он формулы B-9 (Y=N(CH3)Boc). Затем, сочетание соединения формулы D-3 с соединением B-9 (Y=N(CH3)Boc) на палладиевом или медном катализаторе дает защищенный пирроло[3,4-c]пиридин-1-он формулы III (R2=CH2N(CH3)Boc, R5 и R12 заместители должны быть представлены таким же фрагментами, что и заместители в конечном продукте, в соединении формулы III, или их защищенными вариантами). На конечной стадии, удаление защитной карбаматной группы при стандартных условиях проведения реакции дает пирроло[3,4-c]пиридин-1-он формулы III (R2=CH2N(CH3)H.
Метод L
Метод L относится к представленной выше последовательности синтезов для получения соединений формулы L-5. Согласно методу L, на первой стадии, защита лактама формулы F-2 с помощью карбаматной защитной группы с использованием дитрет-бутилдикарбоната и 4-диметиламинопиридина дает соединение формулы L-1. Затем, трифторметилирование соединения формулы L-1 с использованием трифторметансульфината цинка и трет-бутилгидропероксида дает смесь 6-(трифторметил)-1,3-дигидро-2H-пирроло[3,4-c]пиридина формулы L-2 и 7-(трифторметил)-1,3-дигидро-2H-пирроло[3,4-c]пиридина формулы L-3. После разделения колоночной хроматографией, полное удаление всех защитных карбаматных групп формулы L-2 в кислотных условиях (TFA) с последующей селективной защитой бензиламинной группы с помощью карбаматной защитной группы, используя дитрет-бутилдикарбонат и триметиламин, дает трифторметиллактам формулы L-4. На следующей стадии, конденсация соединения формулы L-4 с соединением формулы B-10 на палладиевом катализаторе дает защищенный пирроло[3,4-c]пиридин-1-он формулы L-5 (R8=Boc). При проведении этой стадии, заместители R5 и R12 формулы B-10 должны быть представлены такими же фрагментами, что и заместители в конечном продукте, в соединении формулы L-5, или их защищенными вариантами. На конечной стадии, удаление защитной карбаматной группы при стандартных условиях проведения реакции дает пирроло[3,4-c]пиридин-1-он формулы L-5 (R8=H).
Метод M
Метод M относится к еще одной представленной выше последовательности синтезов для получения соединения формулы III. Согласно методу M, на первой стадии, сочетание соединения формулы D-3 с соединением формулы C-2 (Y=N(R8)Boc, R8=H или алкил) на палладиевом или медном катализаторе дает защищенный пирроло[3,4-c]пиридин-1-он формулы M-1 (R2=CH2N(R8)Boc, R8=H или алкил). При проведении этой стадии, заместители R5 и R12 формулы D-3 должны быть представлены такими же фрагментами, что и заместители в конечном продукте, в соединении формулы III, или их защищенными вариантами. Далее, катализируемое палладием или медью кросс-сочетание соединения формулы M-1 либо с аминами, защищенными аминами, либо с алкил трифторборатами/бороновыми кислотами/боронатами/цинкатами или алкенилбороновыми эфирами, с последующим восстановлением и циклопропанированием и последующим удалением защитной карбаматной группы дает пирроло[3,4-c]пиридин-1-он формулы III, где заместитель R1 должен быть представлен таким же фрагментом, что и заместитель в конечном продукте, в соединении формулы III, или его защищенным вариантом (R2=CH2N(R8)(R9), R8 и R9=H и/или алкил).
Метод N
Метод N относится к еще одной представленной выше последовательности синтезов для получения соединения формулы III. Согласно методу N, на первой стадии, катализируемое палладием или медью кросс-сочетание между соединением формулы C-2 (Y=N(R8)Boc, R=H или алкил) и либо аминами, защищенными аминами, либо алкилтрифторборатами/бороновыми кислотами/боронатами/цинкатами или алкенилбороновыми эфирами, с последующим восстановлением или циклопропанированием дает соединение формулы B-9. При проведении этой стадии, заместитель R1 формулы B-9 должен быть представлен таким же фрагментом, что и заместитель в конечном продукте, в соединении формулы III, или его защищенным вариантом. На следующей стадии, сочетание соединения формулы D-3 с соединением формулы B-9 на палладиевом или медном катализаторе с последующим удалением защитной карбаматной группы дает пирроло[3,4-c]пиридин-1-он формулы III (R2=CH2N(R8)(R9), R8 и R9=H и/или алкил). При проведении этой стадии, заместители R5 и R12 формулы D-3 должны быть представлены такими же фрагментами, что и заместители в конечном продукте, в соединении формулы III, или их защищенными вариантами.
Метод O
Метод O относится к еще одной представленной выше последовательности синтезов для получения соединения формулы II. Согласно методу O, на первой стадии, кросс-сочетание или нуклеофильное ароматическое замещение между требующимся реагентом-участником реакции сочетания или амином (или его замещенным вариантом) и дихлорпиридином формулы O-1 (V=N(CH3)2 или OH или пиперидинe или OMe) дает соединение O-2 (R1=NR6R7 или алкил). Формилирование соединения O-2 затем дает альдегид O-3. Последующая конденсация с сульфинамидом Элмана дает соединение формулы O-4. Последующее восстановление давало соединение формулы O-5. Карбонилирование хлорида формулы O-5 с использованием монооксида углерода и метанола на палладиевом катализаторе давало эфир формулы O-6. Восстановление эфира формулы O-6 дает бензиловый спирт B-9 (Y=OH). Активация спиртовой группы дает мезилат (B-9, Y= OSO2CH3). На следующей стадии проводят либо:
i) азидирование (B-9, Y= N3) и восстановление азидной группы при стандартных условиях с получением первичных аминов (формула B-9, Y= NH2); либо
ii) прямое замещение мезилата (формула B-9, Y= OSO2CH3) с помощью первичных аминов с получением соответствующих вторичных аминов (формула B-9, Y= N(R8)(R9), R8 и R9=H и/или алкил), получая соединение формулы B-9.
Защита аминогруппы в виде соответствующего трет-бутилкарбамата, B-9 (Y= N(R8)Boc), с последующим сочетанием с бромпиридинтриазолом B-10 на палладиевом или медном катализаторе дает защищенные пирроло[3,4-c]пиридин-1-оны формулы II (R2=CH2N(R8)Boc, R8=H или алкил, R1= N(R6)(R7) или алкил). На этой стадии, заместитель R12 формулы B-10 должен быть представлен таким же фрагментом, что и заместитель в конечном продукте, в соединении формулы II, или его защищенным вариантом. Удаление защитной группы (групп) при стандартных условиях проведения реакции дает пирроло[3,4-c]пиридин-1-оны формулы II (R2=CH2N(R8)(R9), R1= N(R6)(R7) или алкил).
Метод P
Метод P относится к еще одной представленной выше последовательности синтезов для получения соединения формулы II. На первой стадии, соединение формулы O-3 (V=N(CH3)2 или OH или пиперидин или OMe или OEt или OiPr) подвергают либо
i. катализируемой иридием декарсбоксилирующей окислительно-восстановительной реакции сочетания под действием света с соответствующей карбоновой кислотой с получением соединения формулы P-1 (Y=N(R8)Boc); либо
ii. реакции кросс-сочетания Негиши с соответствующим аминоалкилцинкатом с получением соединения формулы P-1 (Y=N(R8)Boc); либо
iii. реакции кросс-сочетания Сузуки с соответствующими трифторборатной солью, бороновой кислотой или бороновым эфиром с получением соединения формулы P-1 (Y=N(R8)Boc)
Последующая конденсация с сульфинамидом Элмана и восстановление дает соединение формулы B-9. Сочетание с бромпиридинтриазолом B-10 на палладиевом или медном катализаторе дает защищенный пирроло[3,4-c]пиридин-1-он формулы II (R2=CH2N(R8)Boc). На этой стадии, заместитель R12 формулы B-10 должен быть представлен таким же фрагментом, что и заместитель в конечном продукте, в соединении формулы II, или его защищенным вариантом. Удаление защитной группы (групп) при стандартных условиях проведения реакции дает пирроло[3,4-c]пиридин-1-он формулы II (R2=CH2N(R8)(R9)).
Метод Q
Метод Q относится к еще одной представленной выше последовательности синтезов для получения соединения формулы II. На первой стадии, восстановительное аминирование или алкилирование амина формулы Q-1 дает пирроло[3,4-c]пиридин-1-он формулы II (R2=CH2N(R8)(R9)). На этой стадии, заместители R5, R12 и R1 формулы Q-1 должны быть представлены такими же фрагментами, что и заместители в конечном продукте, в соединении формулы II.
Метод R
Метод R относится к еще одной представленной выше последовательности синтезов для получения соединения формулы II. На первой стадии, восстановительное аминирование соединения формулы O-3 с помощью эквивалентного количества аммиака или, качестве , с помощью сульфинамида Элмана дает соединение формулы O-5. На этой стадии, заместитель R1 формулы O-3 должен быть представлен таким же фрагментом, что и заместитель в конечном продукте, в соединении формулы II, или его защищенным вариантом. Сочетание с бромпиридинтриазолом B-10 на палладиевом или медном катализаторе дает соединение формулы R-1. На этой стадии, заместитель R12 формулы B-10 должен быть представлен таким же фрагментом, что и заместитель в конечном продукте, в соединении формулы II, или его защищенным вариантом. Реакция кросс-сочетания Сузуки с соответствующим трифторборатом с последующим удалением защитной группы (групп) при стандартных условиях проведения реакции дает пирроло[3,4-c]пиридин-1-он формулы II (R2=CH2N(R8)(R9)).
Метод S
Метод S относится к еще одной представленной выше последовательности синтезов для получения соединения формулы II. На первой стадии, катализируемое никелем восстановление нитрила соединения формулы K-3 (Z=Cl) дает соединение формулы O-5. На этой стадии, заместитель R1 формулы K-3 должен быть представлен таким же фрагментом, что и заместитель в конечном продукте, в соединении формулы II, или его защищенным вариантом. На следующей стадии, проводят либо
i) катализируемую никелем декарбоксилирующую окислительно-восстановительную реакцию сочетания под действием света соединения формулы O-5 с соответствующей кислотой с получением соединения формулы B-9 (Y=N(R8)Boc); либо
ii) карбонилирование хлорида для соединения формулы O-5 с использованием монооксида углерода и метанола на палладиевом катализаторе с получением эфира, который затем восстанавливают (B-9, Y=OH) и активирует в качестве мезилата (B-9, Y= OSO2CH3). На следующей стадии, проводят либо
a. прямое замещение мезилата с помощью первичных аминов с получением соответствующих вторичных аминов формулы B-9 (Y= N(R8)(R9)); либо
b. азидирование (B-9, Y= N3) и восстановление азидной группы при стандартных условиях проведения реакции с получением первичного амина формулы B-9 (Y= NH2).
Сочетание соединения формулы B-9 с бромпиридинтриазолом B-10 на палладиевом или медном катализаторе с последующим удалением защитной группы (групп) при стандартных условиях проведения реакции дает пирроло[3,4-c]пиридин-1-он формулы II.
Метод T
Метод T относится к еще одной представленной выше последовательности синтезов для получения соединения формулы III. На первой стадии, соединение формулы B-9 (Y= N(R8)Boc, R1 или его защищенный вариант является таким же как в соединение формулы III), подвергают реакции сочетания, катализируемой палладием или медью, с соединением бромпиридина формулы D-3 (полученным, как описано в методе H) с получением пирроло[3,4-c]пиридин-1-она формулы III (R2=CH2N(R8)Boc). Удаление защитной группы (групп) при стандартных условиях проведения реакции дает пирроло[3,4-c]пиридин-1-он формулы III (R2=CH2N(R8)(R9)).
Метод U
Метод U относится к представленной выше последовательности синтезов для получения соединения U-4. На первой стадии, соединение формулы B-12 подвергают реакции с соответствующим ацилхлоридом с получением соединения формулы U-1. На этой стадии, заместитель R13 ацилхлорида или его защищенный вариант является таким же, как в конечном продукте, в соединении формулы U-4. Циклизация соединения формулы U-1 дает соединение формулы U-2. Бромпиридин формулы U-2 (например промежуточное соединение 4) подвергают реакции сочетания с соединением формулы B-9 на палладиевом или медном катализаторе с получением соединения формулы U-3 (Y=N(R8)Boc). На этой стадии, заместитель R5 в соединении U-2 и заместитель R1 в соединении B-9 должен быть представлен таким же фрагментом, что и заместитель в конечном продукте, в соединении формулы U-4, или его защищенным вариантом. Соединение формулы U-3 подвергают реакции с соответствующим амином с получением соединения защищенного пирроло[3,4-c]пиридин-1-она формулы U-4. Удаление защитной группы (групп) при стандартных условиях проведения реакции дает пирроло[3,4-c]пиридин-1-он формулы U-4 (R2=CH2N(R8)(R9)).
Метод V
Метод V относится к представленной выше последовательности синтезов для получения соединений формулы V-5. На первой стадии, алкилирование имидазола формулы V-1 дает соединение формулы V-2, где заместитель R12 должен быть представлен таким же фрагментом, что и заместитель в конечном продукте, в соединении формулы V-5, или его защищенным вариантом. Катализируемая палладием реакция сочетания соединения формулы V-2 с соединением формулы V-3 дает соединение формулы V-4. На этой стадии, заместитель R5 в соединении V-3 должен быть представлен таким же фрагментом, что и заместитель в конечном продукте, в соединении формулы V-5, или его защищенным вариантом. Сочетание соединения формулы V-4 с соединением формулы B-9 на палладиевом или медном катализаторе дает защищенный пирроло[3,4-c]пиридин-1-он формулы V-5 (R2=CH2N(R8)Boc). На этой стадии, заместитель R1 в соединении B-9 должен быть представлен таким же фрагментом, что и заместитель в конечном продукте, в соединении формулы V-5, или его защищенным вариантом. Удаление защитной группы (групп) при стандартных условиях проведения реакции дает пирроло[3,4-c]пиридин-1-он формулы V-5 (R2=CH2N(R8)(R9)).
Метод W
Метод W относится к еще одной представленной выше последовательности синтезов для получения соединений формулы II. На первой стадии, катализируемая никелем окислительно-восстановительная реакция сочетания под действием света соединения формулы C-2 (Y=N(R8)Boc) и соединения W-1 дает соединение формулы B-9. На этой стадии, заместитель R1 в соединении W-1 должен быть представлен таким же фрагментом, что и заместитель в конечном продукте, в соединении формулы II, или его защищенным вариантом. Соединение формулы B-9 подвергают сочетанию с соединением формулы B-10 на палладиевом или медном катализаторе с последующим удалением защитной группы (групп) при стандартных условиях проведения реакции с получением пирроло[3,4-c]пиридин-1-она формулы II (R2=CH2N(R8)(R9)). На этой стадии, заместители R5 и R12 в соединении B-10 должны быть представлены такими же фрагментами, что и заместители в конечном продукте, в соединении формулы II, или их защищенными вариантами.
Метод AA
Метод AA относится к еще одной представленной выше последовательности синтезов для получения соединений формулы II. На первой стадии, соединение формулы O-3 (V=пиперидин, диметиламин, OH, OMe, OEt, OiPr) подвергают восстановительному аминированию с помощью пиридинамина формулы AA-1 с получением соединения формулы AA-2. На этой стадии, заместитель R1 в соединении O-3 и заместители R5 и R12 в соединении формулы AA-1 должны быть представлены такими же фрагментами, что и заместители в конечном продукте, в соединении формулы II, или их защищенными вариантами. Затем, катализируемая палладием реакция кросс-сочетания соединения формулы AA-2 с трифторборатами и цинкатами формулы AA-3 с последующим удалением защитной группы (групп) при стандартных условиях проведения реакции дает пирроло[3,4-c]пиридин-1-он формулы II. На этой стадии, заместитель R2 должен быть представлен таким же фрагментом, что и заместитель в конечном продукте, в соединении формулы II, или его защищенным вариантом.
Соединение формулы B-10 подвергают сочетанию с трет-бутилкарбаматом на палладиевом катализаторе с последующим удалением карбаматной защитной группы при стандартных условиях проведения реакции с получением аминопиридина формулы AA-1.
Метод AB
Метод AB относится к еще одной представленной выше последовательности синтезов для получения соединений формулы U-4. На первой стадии, сочетание соединения формулы O-5 с бромпиридин формулы U-2 на палладиевом или медном катализаторе дает соединение формулы R-1. На этой стадии, заместитель R1 формулы O-5 и заместители R5 и R13 формулы U-2 должны быть представлены такими же фрагментами, что и заместители в конечном продукте, в соединении формулы U-4, или их защищенными вариантами. Реакция кросс-сочетания Сузуки с соответствующим трифторборатом или реакция кросс-сочетания Негиши с соответствующим аминоалкилцинкатом с последующим удалением защитной группы (групп) при стандартных условиях проведения реакции дает пирроло[3,4-c]пиридин-1-он формулы U-4 (R2=CH2N(R8)(R9)).
Метод AC
Метод AC относится к еще одной представленной выше последовательности синтезов для получения соединений формулы U-4. На первой стадии, бромпиридин формулы U-2 (например промежуточное соединение 4) подвергают сочетанию с соединением формулы C-2 на палладиевом или медном катализаторе с получением соединения формулы AC-1 (Y=N(R8)Boc). На этой стадии, заместители R5 и R13 соединения U-2 должны быть представлены такими же фрагментами, что и заместители в конечном продукте, в соединении формулы U-4, или их защищенными вариантами. Соединение формулы AC-1 подвергают катализируемому палладием сочетанию с соответствующим амином или бороновым эфиром или бороновой кислотой, или тетрафторборатной солью с получением соединения формулы U-3. На этой стадии, заместитель R1 в соединении U-3 должен быть представлен таким же фрагментом, что и заместитель в конечном продукте, в соединении формулы U-4, или его защищенным вариантом. Реакция соединения формулы U-3 с соответствующим амином дает соединение защищенного пирроло[3,4-c]пиридин-1-она формулы U-4. Удаление защитной группы (групп) при стандартных условиях проведения реакции дает пирроло[3,4-c]пиридин-1-он формулы U-4 (R2=CH2N(R8)(R9)).
Метод AD
Метод AD относится к еще одной представленной выше последовательности синтезов для получения соединений формулы U-4. На первой стадии, бромпиридин формулы U-2 (например промежуточное соединение 4) подвергают реакции с соответствующим амином с получением соединения формулы X-3. На этой стадии, заместители R5 и R12 в соединении U-2 должны быть представлены такими же фрагментами, что и заместители в конечном продукте, в соединении формулы U-4, или их защищенными вариантами. Сочетание соединения формулы X-3 с соединением формулы B-9 на палладиевом или медном катализаторе дает соединение формулы U-4 (Y=N(R8)Boc). На этой стадии, заместитель R1 в соединении B-9 должен быть представлен таким же фрагментом, что и заместитель в конечном продукте, в соединении формулы U-4, или его защищенным вариантом. Удаление защитной группы (групп) при стандартных условиях проведения реакции дает пирроло[3,4-c]пиридин-1-он формулы U-4 (R2=CH2N(R8)(R9)).
Метод AE
Метод AE относится к еще одной представленной выше последовательности синтезов для получения соединений формулы U-4. На первой стадии, реакция соединения формулы AC-1 (Y=N(R8)Boc) с соответствующим амином дает соединение формулы AE-1. На этой стадии, заместители R5 и R12 должны быть представлены такими же фрагментами, что и заместители в конечном продукте, в соединении формулы II U-4, или их защищенными вариантами. Соединение формулы AE-1 подвергают катализируемому палладием сочетанию с соответствующим амином или бороновым эфиром или бороновой кислотой, или тетрафторборатной солью с получением соединения защищенного пирроло[3,4-c]пиридин-1-она формулы U-4. Удаление защитной группы (групп) при стандартных условиях проведения реакции дает пирроло[3,4-c]пиридин-1-он формулы U-4 (R2=CH2N(R8)(R9)).
Метод AF
Метод AF относится к еще одной представленной выше последовательности синтезов для получения соединений формулы U-4. На первой стадии, сочетание соединения формулы O-5 с бромпиридином X-3 на палладиевом или медном катализаторе дает соединение формулы AF-1. На этой стадии, заместитель R1 формулы O-5 и заместители R5, R12 и R13 формулы X-3 должны быть представлены такими же фрагментами, что и заместители в конечном продукте, в соединении формулы U-4, или их защищенными вариантами. Реакция кросс-сочетания Сузуки с соответствующим трифторборатом или реакция кросс-сочетания Негиши с соответствующим аминоалкилцинкатом с последующим удалением защитной группы (групп) при стандартных условиях проведения реакции дает пирроло[3,4-c]пиридин-1-он формулы U-4 (R2=CH2N(R8)(R9)).
Метод AG
Метод AG относится к представленной выше последовательности синтезов для получения соединений формулы AG-2. На первой стадии, сочетание соединения формулы B-9 с бромпиридином AG-1 (например, Q=O, промежуточное соединение 5, или Q=S, промежуточное соединение 6) на палладиевом или медном катализаторе дает соединение формулы AH-2. На этой стадии, заместитель R1 формулы B-9 должен быть представлен таким же фрагментом, что и заместитель в конечном продукте, в соединении формулы AG-2, или его защищенным вариантом. Удаление защитной группы (групп) при стандартных условиях проведения реакции дает пирроло[3,4-c]пиридин-1-он формулы AG-2 (R2=CH2N(R8)(R9)).
Метод AH
Метод AH относится к еще одной представленной выше последовательности синтезов для получения соединений формулы II. На первой стадии, где заместитель R1 формулы O-5 должен быть представлен таким же фрагментом, что и заместитель в конечном продукте, в соединении формулы II, или его защищенным вариантом, проводят либо
i. катализируемое никелем декарбоксилирующее кросс-сочетание соединения формулы O-5 с соответствующей кислотой с получением соединения формулы B-9 (Y=N(R8)Boc); либо
ii. кросс-сочетание Сузуки или Моландера с соответствующей бороновой кислотой, бороновым эфиром или трифторборатной солью с получением соединения формулы B-9 (Y=N(R8)Boc); либо
iii. реакцию кросс-сочетания Негиши с соответствующим аминоалкилцинкатом с получением соединения формулы B-9 (Y=N(R8)Boc); либо
iv. карбонилирование хлорида соединения формулы O-5 с использованием монооксида углерода и метанола на палладиевом катализаторе с получением эфира, который затем восстанавливают (B-9, Y=OH) и активируют в виде мезилата (B-9, Y= OSO2CH3). На следующей стадии, проводят либо
a. прямое замещение мезилата с помощью соответствующего первичного амина с получением соответствующего вторичного амина формулы B-9, (Y= N(R8)(R9)); либо
b. азидирование (B-9, Y= N3) и восстановление азидной группы при стандартных условиях проведения реакции с получением первичного амина формулы B-9 (Y= NH2).
Сочетание соединения формулы B-9 с бромпиридинтриазолом B-10 на палладиевом или медном катализаторе с последующим удалением защитной группы (групп) при стандартных условиях проведения реакции дает пирроло[3,4-c]пиридин-1-он формулы II.
Метод AI
Метод AI относится к еще одной представленной выше последовательности синтезов для получения соединений формулы U-4. На первой стадии, бромпиридин формулы X-3 подвергают сочетанию с соединением формулы C-2 (Y=N(R8)Boc) на палладиевом или медном катализаторе. На этой стадии, заместители R5, R12 и R13 в соединении X-3 должны быть представлены такими же фрагментами, что и заместители в конечном продукте, в соединении формулы II U-4, или их защищенными вариантами. Соединение формулы AI-1 подвергают катализируемому палладием сочетанию с соответствующим амином или бороновым эфиром или тетрафторборатной солью с получением соединения формулы U-4. На этой стадии, заместитель R1 должен быть представлен таким же фрагментом, что и заместитель в конечном продукте, в соединении формулы U-4, или его защищенным вариантом. Удаление защитной группы (групп) при стандартных условиях проведения реакции дает пирроло[3,4-c]пиридин-1-он формулы U-4 (R2=CH2N(R8)(R9)).
Метод AJ
Метод AJ относится к еще одной представленной выше последовательности синтезов для получения соединений формулы II. На первой стадии, соединение формулы B-9 подвергают сочетанию с бромпиридином формулы B-11 на палладиевом или медном катализаторе с получением соединения формулы AJ-1. На этой стадии, заместитель R1 в соединении B-9 и заместитель R5 в соединении B-11 должен быть представлен таким же фрагментом, что и заместитель в конечном продукте, в соединении формулы II, или его защищенным вариантом. Гидразинолиз соединения формулы AJ-1 дает соединение формулы AJ-2. Затем, гидразин формулы AJ-2 подвергают реакции с диметилформамид диметилацеталем с получением соединения формулы AJ-3. Конденсация соединения формулы AJ-3 с соответствующим амином (например, R12-NH2) с последующим удалением защитной группы (групп) при стандартных условиях проведения реакции дает пирроло[3,4-c]пиридин-1-он формулы U-3 (R2=CH2N(R8)(R9)). При проведении этой стадии, заместитель R12 для амина должен быть представлен таким же фрагментом, что и заместитель в конечном продукте, в соединении формулы II, или его защищенным вариантом.
Метод AK
Метод AK относится к еще одной представленной выше последовательности синтезов для получения соединений формулы II. В методе AK, соединение формулы P-1 подвергают восстановительному аминированию с помощью пиридинамина формулы AA-1 с последующим удалением защитных групп с получением соединения формулы II. На этой стадии, заместитель R1 в соединении P-1 и заместители R5 и R12 в соединении формулы AA-1 должны быть представлены такими же фрагментами, что и заместители в конечном продукте, в соединении формулы II, или их защищенными вариантами.
Типичные примеры
Пример 1: 6-(диметиламино)-4-[(метиламино)метил]-2-{6-[4-(пропан-2-ил)-4H-1,2,4-триазол-3-ил]пиридин-2-ил}-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
Стадия 1: трет-бутил [(6-хлор-1-оксо-2-{6-[4-(пропан-2-ил)-4H-1,2,4-триазол-3-ил]пиридин-2-ил}-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-4-ил)метил]метилкарбамат
В колбу для проведения реакций при микроволновом излучении загружали трет-бутил [(6-хлор-1-оксо-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-4-ил)метил]метилкарбамат (224 мг, 0,72 ммоль), 2-бром-6-[4-(пропан-2-ил)-4H-1,2,4-триазол-3-ил]пиридин (192 мг, 0,72 ммоль), карбонат калия (218 мг, 1,6 ммоль), 2-(диметил-амино)этиламин (0,04 мл, 0,36 ммоль), йодид меди (34 мг, 0,18 ммоль) и ацетонитрил (3 мл, 0,2 M). Реакционную смесь герметизировали и нагревали в микроволновом излучении при 120ºC в течение 90 минут. Смесь гасили водой и экстрагировали с помощью DCM. Органический слой сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали. Полученный остаток очищали флэш-хроматографией (0-10% метанол в 1:1 DCM/этилацетат) с получением названного соединения в виде желтовато-белого твердого вещества (210 мг, 59%). 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,74 (д, J=8,44 Гц, 1H) 8,63-8,72 (м, 1H) 8,19 (с, 1H) 8,01 (т, J=8,01 Гц, 1H) 7,80 (с, 1H) 5,65-5,86 (м, 1H) 5,26 (уш.с, 2H) 4,63 (уш.с, 2H) 3,04 (с, 3H) 1,72 (д, J=5,26 Гц, 6H) 1,40 (уш.с, 9H). m/z (APCI+) для (C24H28ClN7O3) 497,9 (M+H)+.
Стадия 2: трет-бутил {[6-(диметиламино)-1-оксо-2-{6-[4-(пропан-2-ил)-4H-1,2,4-триазол-3-ил]пиридин-2-ил}-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-4-ил]метил}метилкарбамат
В колбу загружали трет-бутил [(6-хлор-1-оксо-2-{6-[4-(пропан-2-ил)-4H-1,2,4-триазол-3-ил]пиридин-2-ил}-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-4-ил)метил]метилкарбамат (50 мг, 0,10 ммоль), карбонат цезия (98,1 мг, 0,30 ммоль), 2 M диметиламин в THF (0,11 мл, 0,21 ммоль), 1,4-диоксан (3 мл) и (2-дициклогексилфосфино-2′,6′-диизопропокси-1,1′-бифенил)[2-(2′-амино-1,1′-бифенил)]палладия(II) метансульфонат (8,4 мг, 0,01 ммоль). Реакционную смесь нагревали до 100ºC в атмосфере азота и перемешивали в течение 16 часов. Неочищенную смесь объединяли с другой партией неочищенного продукта, полученной этой реакцией (количество 210 мг). Объединенный материал фильтровали и промывали смесью 1:10 метанол/DCM (30 мл). Фильтрат концентрировали с получением коричневого твердого вещества, which очищали колоночной хроматографией (20:1 DCM/метанол) с получением названного соединения в виде желтого твердого вещества (160 мг, средний выход 61%). 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,72 (д, J=8,3 Гц, 1H), 8,40 (с, 1H), 8,09 (уш.с, 1H), 7,98-7,90 (м, 1H), 6,89 (с, 1H), 5,81-5,41 (м, 1H), 5,14-4,90 (м, 2H), 4,49 (с, 2H), 3,16 (с, 6H), 3,02 (с, 3H), 1,72-1,62 (м, 6H), 1,46-1,29 (м, 9H) m/z (APCI+) для (C26H34N8O3) 507,3 (M+H)+.
Стадия 3: 6-(диметиламино)-4-[(метиламино)метил]-2-{6-[4-(пропан-2-ил)-4H-1,2,4-триазол-3-ил]пиридин-2-ил}-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
В колбу загружали трет-бутил {[6-(диметиламино)-1-оксо-2-{6-[4-(пропан-2-ил)-4H-1,2,4-триазол-3-ил]пиридин-2-ил}-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-4-ил]метил}метилкарбамат (43 мг, 0,09 ммоль) и этилацетат (2 мл). Раствор охлаждали до 5ºC и добавляли 4 M раствор HCl в этилацетате (5 мл). Реакционную смесь подогревали до 20ºC и перемешивали в течение 1 часа, после чего реакционную смесь становилась суспензией. Суспензию фильтровали, и твердые вещества собирали с получением названного соединения в виде желтого твердого вещества (35 мг, 93%). 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 9,27 (уш.с, 2H), 9,20 (с, 1H), 8,66 (д, J=8,3 Гц, 1H), 8,15 (т, J=8,0 Гц, 1H), 7,96 (д, J=7,5 Гц, 1H), 6,95 (с, 1H), 5,48 (квин, J=6,8 Гц, 1H), 5,17 (с, 2H), 4,32 (уш.т, J=5,6 Гц, 2H), 3,18 (с, 6H), 2,73 (т, J=5,4 Гц, 3H), 1,61 (д, J=6,8 Гц, 6H). m/z (APCI+) для (C21H26N8O) 429,1 (M+Na)+.
Пример 2: 6-(азетидин-1-ил)-4-[(метиламино)метил]-2-{6-[4-(пропан-2-ил)-4H-1,2,4-триазол-3-ил]пиридин-2-ил}-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
Стадия 1: трет-бутил {[6-(азетидин-1-ил)-1-оксо-2-{6-[4-(пропан-2-ил)-4H-1,2,4-триазол-3-ил]пиридин-2-ил}-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-4-ил]метил}метилкарбамат
В колбу загружали трет-бутил [(6-хлор-1-оксо-2-{6-[4-(пропан-2-ил)-4H-1,2,4-триазол-3-ил]пиридин-2-ил}-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-4-ил)метил]метилкарбамат (70,0 мг, 0,14 ммоль), гидрохлорид азетидина (39 мг, 0,42 ммоль), карбонат цезия (210 мг, 0,65 ммоль), (2-дициклогексилфосфино-2′,6′-диизо-пропокси-1,1′-бифенил)[2-(2′-амино-1,1′-бифенил)]палладия(II) метансульфонат (11,8 мг, 0,014 ммоль) и 1,4-диоксан (2,8 мл, 0,05 M). Реакционную смесь нагревали при 100°C в течение 18 часов, после чего добавляли дополнительное количество азетидина (39 мг, 0,42 ммоль) и (2-дициклогексилфосфино-2′,6′-диизопропокси-1,1′-бифенил)[2-(2′-амино-1,1′-бифенил)]палладия(II) метансульфоната (11,8 мг, 0,014 ммоль), и реакционную смесь нагревали в течение 24 часов при 110ºC. Реакционную смесь концентрировали под вакуумом и очищали колоночной хроматографией (0-10% метанол в смеси 1:1 DCM/этилацетат) с получением названного соединения в виде желтовато-белого твердого вещества (45 мг, 62%). m/z (APCI+) для (C27H34N8O3) 519,95 (M+H)+.
Стадия 2: 6-(азетидин-1-ил)-4-[(метиламино)метил]-2-{6-[4-(пропан-2-ил)-4H-1,2,4-триазол-3-ил]пиридин-2-ил}-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
В колбу загружали трет-бутил {[6-(азетидин-1-ил)-1-оксо-2-{6-[4-(пропан-2-ил)-4H-1,2,4-триазол-3-ил]пиридин-2-ил}-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-4-ил]метил}метилкарбамат (45 мг, 0,09 ммоль) и DCM (3 мл, 0,03 M). Добавляли трифторуксусную кислоту (0,8 мл, 10 ммоль), и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. Реакционную смесь подвергали дистилляции в виде азеотропной смеси с толуолом (2x), и полученный остаток очищали сверхкритической флюидной хроматографией (SFC) (колонка HA-морфолин 60 Å 5 мкм, 150×21,2 мм при 40°C, элюировали с градиентом 12-30% MeOH в CO2 с линейным изменением в течение 7 минут, поддерживали давление 12 МПа при расходе 85 мл/мин, проводя контроль с помощью УФ 224 нм) с получением названного соединения (17 мг, 48%). 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 8,83-8,93 (м, 1H) 8,50-8,62 (м, 1H) 7,97-8,08 (м, 1H) 7,83-7,93 (м, 1H) 6,36-6,55 (м, 1H) 5,51 (дт, J=13,42, 6,68 Гц, 1H), 5,06-5,18 (м, 2H) 3,87-3,98 (м, 4H) 3,66-3,81 (м, 2H) 2,24-2,32 (м, 5H) 1,51 (д, J=6,60 Гц, 6H). m/z (APCI+) для (C22H26N8O) 420,0 (M+H)+.
Пример 3: 6-[(2R,4R)-2,4-диметилазетидин-1-ил]-4-[(метил-амино)метил]-2-{6-[4-(пропан-2-ил)-4H-1,2,4-триазол-3-ил]-пиридин-2-ил}-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
Стадия 1: трет-бутил [(6-[(2R,4R)-2,4-диметилазетидин-1-ил]-1-оксо-2-{6-[4-(пропан-2-ил)-4H-1,2,4-триазол-3-ил]пиридин-2-ил}-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-4-ил)метил]метил-карбамат
В колбу загружали трет-бутил [(6-хлор-1-оксо-2-{6-[4-(пропан-2-ил)-4H-1,2,4-триазол-3-ил]пиридин-2-ил}-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-4-ил)метил]метилкарбамат (100 мг, 0,20 ммоль), гидрохлорид (2R,4R)-2,4-диметилазетидина (45,6 мг, 0,40 ммоль) и 1,4-диоксан (4 мл, 0,05 M). Добавляли карбонат цезия (196 мг, 0,60 ммоль), затем (2-дициклогексилфосфино-2′,6′-диизо-пропокси-1,1′-бифенил)[2-(2′-амино-1,1′-бифенил)]палладия(II) метансульфонат (16,8 мг, 0,02 ммоль). Реакционную смесь нагревали в течение 16 часов при 100°C в атмосфере азота. Смесь разбавляли этилацетатом (50 мл) и промывали солевым раствором (3×30 мл). Органический слой сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали под вакуумом с получением остатка, который очищали препаративной TLC (силикагель, 1:4 петролейный эфир/этилацетат, два раза) с получением названного соединения в виде желтовато-белого твердого вещества (40 мг, 36%). TLC Rf=0,3 (EtOAc, УФ визуализация). 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 8,95 (с, 1H), 8,60 (д, J=8,31 Гц, 1H), 8,05-8,15 (м, 1H), 7,88-7,97 (м, 1H), 6,53 (с, 1H), 5,51 (уш.с, 1H), 5,06 (уш.д,J=19,32 Гц, 2H), 4,32-4,53 (м, 4H), 3,57 (с, 1H), 2,94 (с, 3H), 2,08 (уш.т, J=6,36 Гц, 2H), 1,56-1,70 (м, 6H), 1,37 (уш.с, 11H), 1,09-1,28 (м, 6H). m/z для (C29H38N8O3) 569,4 (M+Na)+.
Стадия 2: 6-[(2R,4R)-2,4-диметилазетидин-1-ил]-4-[(метил-амино)метил]-2-{6-[4-(пропан-2-ил)-4H-1,2,4-триазол-3-ил]-пиридин-2-ил}-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
В колбу загружали трет-бутил [(6-[(2R,4R)-2,4-диметил-азетидин-1-ил]-1-оксо-2-{6-[4-(пропан-2-ил)-4H-1,2,4-триазол-3-ил]пиридин-2-ил}-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-4-ил)-метил]метилкарбамат (40 мг, 0,07 ммоль) и DCM (3 мл, 0,02) и охлаждали до температуры ниже 10°C. Добавляли по каплям трифторуксусную кислоту (0,06 мл, 0,73 ммоль), и реакционную смесь подогревали до комнатной температуры. Через 2 часа перемешивания, реакционную смесь добавляли в воду со льдом (20 мл). Добавляли твердый бикарбонат натрия до тех пор, пока величина рН раствора не достигала pH=9. Водный слой экстрагировали с помощью DCM (3×20 мл). Объединенный органический слой сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали под вакуумом. Полученный остаток очищали хроматографией (0-10% метанол в DCM) с получением названного соединения в виде желтого твердого вещества (20 мг, 61%). 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 8,83-8,93 (м, 1H) 8,50-8,62 (м, 1H) 7,97-8,08 (м, 1H) 7,83-7,93 (м, 1H) 6,36-6,55 (м, 1H) 5,51 (дт, J=13,42, 6,68 Гц, 1H) 5,06-5,18 (м, 2H) 3,87-3,98 (м, 4H) 3,66-3,81 (м, 2H) 2,24-2,32 (м, 6H) 1,51 (д, J=6,60 Гц, 6H). m/z (APCI+) для (C24H30N8O) 447,2 (M+H)+.
Пример 4: 6-(диэтиламино)-4-[(метиламино)метил]-2-{6-[4-(пропан-2-ил)-4H-1,2,4-триазол-3-ил]пиридин-2-ил}-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
Стадия 1: трет-бутил {[6-(диэтиламино)-1-оксо-2-{6-[4-(пропан-2-ил)-4H-1,2,4-триазол-3-ил]пиридин-2-ил}-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-4-ил]метил}метилкарбамат
В колбу загружали трет-бутил [(6-хлор-1-оксо-2-{6-[4-(пропан-2-ил)-4H-1,2,4-триазол-3-ил]пиридин-2-ил}-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-4-ил)метил]метилкарбамат (100 мг, 0,20 ммоль), диэтиламин (0,04 мл, 0,40 ммоль), карбонат цезия (229 мг, 0,70 ммоль) и 1,4-диоксан (4 мл, 0,05 M). Добавляли (2-дициклогексилфосфино-2′,6′-диизопропокси-1,1′-бифенил)[2-(2′-амино-1,1′-бифенил)]палладия(II) метансульфонат (16,8 мг, 0,02 ммоль). Реакционную смесь дегазировали с помощью газообразного азота (три раза) и нагревали в течение 16 часов при 100°C, после чего добавляли диэтиламин (0,04 мл, 0,40 ммоль) и (2-дициклогексилфосфино-2′,6′-диизопропокси-1,1′-бифенил)[2-(2′-амино-1,1′-бифенил)]палладия(II) метансульфонат (16,8 мг, 0,02 ммоль). Реакционную смесь дегазировали с помощью газообразного азота (три раза) и нагревали в течение 16 часов при 100°C. Смесь добавляли в воду (15 мл) и экстрагировали этилацетатом (2×10 мл). Объединенные органические слои промывали солевым раствором (15 мл), сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали под вакуумом с получением неочищенного соединения в виде желтой смолы (100 мг). Неочищенный материал очищали препаративной TLC (20:1 этилацетат/метанол, Rf=0,5 в этилацетате, УФ визуализация) с получением желтого твердого вещества (60 мг). Соединение дополнительно очищали препаративной HPLC, используя воду (0,04% NH3H2O+10 мM NH4HCO3) в качестве подвижной фазы на колонке Waters Xbridge Prep PBD C18 150*30 10 мкм. В результате получали названное соединение в виде желтого твердого вещества (40 мг, 37%). 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,74 (д, J=7,8 Гц, 1H), 8,42 (с, 1H), 8,15-8,06 (м, 1H), 7,98-7,93 (м, 1H), 6,85 (с, 1H), 5,78-5,45 (м, 1H), 5,09 (уш.с, 2H), 4,48 (с, 2H), 3,60 (кв, J=7,1 Гц, 4H), 3,08-3,02 (м, 3H), 1,74-1,66 (м, 6H), 1,46-1,30 (м, 9H), 1,23 (т, J=7,0 Гц, 6H). m/z (APCI+) для (C28H38N8O3) 535,4 (M+H)+.
Стадия 2: 6-(диэтиламино)-4-[(метиламино)метил]-2-{6-[4-(пропан-2-ил)-4H-1,2,4-триазол-3-ил]пиридин-2-ил}-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
В колбу загружали трет-бутил {[6-(диэтиламино)-1-оксо-2-{6-[4-(пропан-2-ил)-4H-1,2,4-триазол-3-ил]пиридин-2-ил}-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-4-ил]метил}метилкарбамат (40 мг, 0,075 ммоль) и этилацетат (5 мл, 0,02 M) и охлаждали до 0°C. Добавляли по каплям раствор 4 M хлористоводородной кислоты в этилацетате (5 мл, 20 ммоль). Раствор подогревали до комнатной температуры и перемешивали в течение 1 часа. Добавляли метанол (3 мл), и реакционную смесь перемешивали в течение 1 часа, и смесь концентрировали под вакуумом. Полученный остаток лиофилизировали в течение 16 часов с получением названного соединения в виде желтого твердого вещества (28 мг, 79%). 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 9,76 (уш.с, 1H), 9,60 (уш.с, 2H), 8,69 (уш.д, J=8,2 Гц, 1H), 8,18 (уш.т, J=7,6 Гц, 1H), 7,98 (уш.д, J=7,2 Гц, 1H), 6,85 (с, 1H), 5,65-5,48 (м, 1H), 5,22 (уш.с, 2H), 4,25 (уш.с, 2H), 3,63 (уш.д, J=6,6 Гц, 4H), 2,77-2,58 (м, 3H), 1,65 (уш.д, J=6,1 Гц, 6H), 1,15 (уш.т, J=6,5 Гц, 6H)].m/z (APCI+) для (C23H30N8O) 435,3 (M+H)+.
Пример 5: 6-циклопропил-4-[(метиламино)метил]-2-{6-[4-(пропан-2-ил)-4H-1,2,4-триазол-3-ил]пиридин-2-ил}-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
Стадия 1: трет-бутил [(6-циклопропил-1-оксо-2-{6-[4-(пропан-2-ил)-4H-1,2,4-триазол-3-ил]пиридин-2-ил}-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-4-ил)метил]метилкарбамат
В колбу загружали трет-бутил [(6-хлор-1-оксо-2-{6-[4-(пропан-2-ил)-4H-1,2,4-триазол-3-ил]пиридин-2-ил}-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-4-ил)метил]метилкарбамат (100 мг, 0,20 ммоль), циклопропилтрифторборат калия (59,4 мг, 0,40 ммоль), ацетат палладия (9,0 мг, 0,04 ммоль), ди(1-адамантил)-н-бутилфосфин (21,6 мг, 0,06 ммоль), карбонат цезия (196 мг, 0,60 ммоль), воду (0,25 мл) и толуол (2,5 мл, 0,08 M). Реакционную смесь нагревали в течение 20 часов при 110°C, после чего реакционную смесь разбавляли этилацетатом (50 мл). Раствор промывали солевым раствором (3×30 мл), сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали. Полученный остаток очищали колоночной хроматографией (0-5% метанол в DCM) с получением названного соединения в виде желтовато-белого твердого вещества (80 мг, 79%).1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 8,95 (с, 1H), 8,62 (д, J=7,95 Гц, 1H), 8,12 (т, J=8,07 Гц, 1H), 7,95 (д, J=7,46 Гц, 1H), 7,67 (с, 1H), 5,50 (уш.с, 1H), 5,20(уш.с, 2H), 4,55 (с, 2H), 2,90 (с, 3H), 2,26-2,35 (м, 1H), 1,58 (уш.с, 6H), 1,18-1,45 (м, 9H), 0,93-1,05 (м, 4H)).m/z (APCI+) для (C27H33N7O3) 404,2 (M+H)+.
Стадия 2: 6-циклопропил-4-[(метиламино)метил]-2-{6-[4-(пропан-2-ил)-4H-1,2,4-триазол-3-ил]пиридин-2-ил}-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
В колбу загружали трет-бутил [(6-циклопропил-1-оксо-2-{6-[4-(пропан-2-ил)-4H-1,2,4-триазол-3-ил]пиридин-2-ил}-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-4-ил)метил]метилкарбамат (80 мг, 0,16 ммоль) и DCM (3 мл, 0,5 M). Раствор охлаждали до температуры ниже 10ºC и добавляли по каплям TFA (0,12 мл, 1,6 ммоль). Реакционную смесь подогревали до комнатной температуры и перемешивали в течение 2 часов. Раствор разбавляли водой со льдом (20 мл) и добавляли твердый бикарбонат натрия до тех пор, пока величина рН водного слоя не достигала ~ pH 9. Слои разделяли, и водный слой экстрагировали с помощью DCM (3×20 мл). Объединенный органический слой промывали солевым раствором, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали под вакуумом с получением неочищенного остатка. Этот материал очищали колоночной хроматографией (0-10% метанол в DCM) с получением названного соединения в виде желтовато-белого твердого вещества (30 мг, 47%). 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 8,96 (с, 1H), 8,63 (д, J=8,31 Гц, 1H), 8,11 (т, J=8,01 Гц, 1H), 7,94-8,00 (м, 1H), 7,60 (с, 1H), 5,58 (квин, J=6,76 Гц, 1H), 5,28 (с, 2H), 3,93 (с, 2H), 2,35 (с, 3H), 2,25-2,32 (м, 1H), 1,59 (д, J=6,72 Гц, 6H), 0,97-1,04 (м, 4H). m/z (APCI+) для (C22H25N7O) 404,2 (M+H)+.
Пример 6: 4-[(метиламино)метил]-6-[метил(пропан-2-ил)амино]-2-{6-[4-(пропан-2-ил)-4H-1,2,4-триазол-3-ил]пиридин-2-ил}-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
Стадия 1: трет-бутил метил[(6-[метил(пропан-2-ил)амино]-1-оксо-2-{6-[4-(пропан-2-ил)-4H-1,2,4-триазол-3-ил]пиридин-2-ил}-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-4-ил)метил]карбамат
В колбу загружали трет-бутил [(6-хлор-1-оксо-2-{6-[4-(пропан-2-ил)-4H-1,2,4-триазол-3-ил]пиридин-2-ил}-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-4-ил)метил]метилкарбамат (96 мг, 0,19 ммоль), N-метилизопропиламин (0,1 мл, 0,96 ммоль), карбонат цезия (188 мг, 0,58 ммоль), (2-дициклогексилфосфино-2′,6′-диизо-пропокси-1,1′-бифенил)[2-(2′-амино-1,1′-бифенил)]палладия(II) метансульфонат (16 мг, 0,019 ммоль) и 1,4-диоксан (3,9 мл). Реакционную смесь нагревали в течение 18 часов при 100ºC. Смесь охлаждали до комнатной температуры и фильтровали через слой целита®, и промывали 10% метанолом в DCM. Фильтрат концентрировали под вакуумом, и полученный материал очищали колоночной хроматографией (0-10% метанол в смеси 1:1 DCM/этилацетат) с получением названного соединения в виде белого твердого вещества (60 мг, 58%). m/z (APCI+) для (C28H38N8O3) 535,3 (M+H)+.
Стадия 2: 4-[(метиламино)метил]-6-[метил(пропан-2-ил)амино]-2-{6-[4-(пропан-2-ил)-4H-1,2,4-триазол-3-ил]пиридин-2-ил}-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
В колбу загружали трет-бутил метил[(6-[метил(пропан-2-ил)амино]-1-оксо-2-{6-[4-(пропан-2-ил)-4H-1,2,4-триазол-3-ил]-пиридин-2-ил}-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-4-ил)метил]-карбамат (60 мг, 0,11 ммоль) и DCM (6 мл). Добавляли 4 N раствор хлористого водорода в 1,4-диоксане (2 мл, 8,0 ммоль), и раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. Раствор частично концентрировали под вакуумом и затем отгоняли в виде азеотропной смеси с толуолом (2x). Полученный материал очищали сверхкритической флюидной хроматографией (SFC) (колонка DCPak SFC-B 150×21,2 мм, 5 мкм при 40°C, элюировали с градиентом 15-35% метанола в диоксиде углерода с линейным изменением в течение 7 минут, поддерживали давление 12 МПа при расходе 85 мл/мин) с получением названного соединения в виде твердого вещества (28,9 мг, 59%).1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 8,95 (с, 1H) 8,63 (д, J=7,95 Гц, 1H) 8,10 (т, J=8,01 Гц, 1H) 7,95 (д, J=7,21 Гц, 1H) 6,81 (с, 1H) 5,54 (дт, J=13,36, 6,71 Гц, 1H) 5,15 (с, 2H) 4,89-5,05 (м, 1H) 3,98 (с, 2H) 2,89 (с, 3H) 2,48 (с, 3H) 1,59 (д, J=6,72 Гц, 6H) 1,16 (д, J=6,72 Гц, 6H). m/z (APCI+) для (C23H30N8O) 435,0 (M+H)+
Пример 7: 4-[(метиламино)метил]-6-(1-метилциклопропил)-2-{6-[4-(пропан-2-ил)-4H-1,2,4-триазол-3-ил]пиридин-2-ил}-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
Стадия 1: 4-[(метиламино)метил]-6-(1-метилциклопропил)-2-{6-[4-(пропан-2-ил)-4H-1,2,4-триазол-3-ил]пиридин-2-ил}-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
В колбу загружали трет-бутил [(6-хлор-1-оксо-2-{6-[4-(пропан-2-ил)-4H-1,2,4-триазол-3-ил]пиридин-2-ил}-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-4-ил)метил]метилкарбамат (88 мг, 0,18 ммоль), 4,4,5,5-тетраметил-2-(1-метилциклопропил)-1,3,2-диокса-боролан (43 мг, 0,26 ммоль), ацетат палладия (7,9 мг, 0,035 ммоль), ди(1-адамантил)-н-бутилфосфин (19 мг, 0,053 ммоль), карбонат цезия (172 мг, 0,53 ммоль), толуол (4 мл) и воду (0,4 мл). Смесь дегазировали с помощью азота в течение 8 минут, затем нагревали в течение 4 часов при 110°C. Реакционную смесь фильтровали через слой целита® и концентрировали под вакуумом. Полученный материал очищали колоночной хроматографией (0-80% этилацетат в гептане) с получением светло-желтого твердого вещества (96 мг), которое непосредственно использовали на следующей стадии. В колбу загружали выделенное твердое вещество, DCM (2 мл) и трифторуксусную кислоту (0,4 мл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. Смесь концентрировали и очищали методом HPLC с обращенной фазой (5-100% подвижная фаза B в подвижной фазе A, подвижная фаза A: 0,05% TFA в воде (по объему), подвижная фаза B: 0,05% TFA в ацетонитриле (по обмин) с получением названного соединения в виде твердого вещества (94 мг, 90% за 2 стадии). 1H ЯМР (600 МГц, DMSO-d6) δ 8,95 (с, 1H) 8,63 (д, J=8,44 Гц, 1H) 8,14 (т, J=7,98 Гц, 1H) 7,95 (д, J=7,70 Гц, 1H) 7,71 (с, 1H) 5,43 (квин, J=6,60 Гц, 1H) 5,23 (с, 2H) 4,48 (с, 2H) 2,77 (с, 3H) 1,57-1,62 (м, 9H) 1,42-1,47 (м, 2H) 0,92-0,97 (м, 2H). m/z (APCI+) для (C23H27N7O) 418,2 (M+H)+.
Пример 8: 6-[(2R,5R)-2,5-диметилпирролидин-1-ил]-4-[(метиламино)метил]-2-{6-[4-(пропан-2-ил)-4H-1,2,4-триазол-3-ил]пиридин-2-ил}-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
Стадия 1: трет-бутил [(6-[(2R,5R)-2,5-диметилпирролидин-1-ил]-1-оксо-2-{6-[4-(пропан-2-ил)-4H-1,2,4-триазол-3-ил]пиридин-2-ил}-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-4-ил)метил]метил-карбамат
В колбу загружали трет-бутил [(6-хлор-1-оксо-2-{6-[4-(пропан-2-ил)-4H-1,2,4-триазол-3-ил]пиридин-2-ил}-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-4-ил)метил]метилкарбамат (100 мг, 0,20 ммоль), (2R,5R)-2,5-диметилпирролидина HCl соль (55 мг, 0,40 ммоль), карбонат цезия (196 мг, 0,60 ммоль), 1,4-диоксан (3 мл) и (2-дициклогексилфосфино-2′,6′-диизопропокси-1,1′-бифенил)[2-(2′-амино-1,1′-бифенил)]палладия(II) метансульфонат (17 мг, 0,02 ммоль). Атмосферу заменяли на газообразный азот, и реакционную смесь нагревали в течение 40 часов при 100ºC. Смесь охлаждали до комнатной температуры и разбавляли с помощью DCM (50 мл). Раствор промывали солевым раствором (30 мл), сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали с получением желтой смолы. Неочищенный материал очищали препаративной TLC (1:4 петролейный эфир/этилацетат) с получением названного соединения в виде светло-зеленого твердого вещества (10 мг, 9%). 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,73 (д, J=8,2 Гц, 1H), 8,43 (с, 1H), 8,11 (уш.с, 1H), 8,00-7,90 (м, 1H), 6,76 (с, 1H), 5,82-5,47 (м, 1H), 5,15 -4,93 (м, 2H), 4,63-4,40 (м, 2H), 3,05 (уш.с, 3H), 2,30 (уш.с, 2H), 1,73-1,66 (м, 8H), 1,45-1,30 (м, 11H), 1,21 (д, J=6,1 Гц, 6H). m/z (APCI+) для (C30H40N8O3) 561,4 (M+H)+.
Стадия 2: 6-[(2R,5R)-2,5-диметилпирролидин-1-ил]-4-[(метиламино)метил]-2-{6-[4-(пропан-2-ил)-4H-1,2,4-триазол-3-ил]пиридин-2-ил}-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
В колбу загружали трет-бутил [(6-[(2R,5R)-2,5-диметилпирролидин-1-ил]-1-оксо-2-{6-[4-(пропан-2-ил)-4H-1,2,4-триазол-3-ил]пиридин-2-ил}-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-4-ил)метил]метилкарбамат (10 мг, 0,018 ммоль) и DCM (3 мл) и охлаждали до 0°C. Добавляли по каплям трифторуксусную кислоту (0,2 мл). Раствор подогревали до 25°C и перемешивали в течение 3 часов. Смесь разбавляли водой со льдом (10 мл) и доводили величину pH до pH=9 путем добавления твердого карбоната натрия. Слои разделяли, и водный слой экстрагировали с помощью DCM (3×20 мл). Объединенный органический слой промывали солевым раствором (2×30 мл), сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали с получением названного соединения в виде желтого твердого вещества (8 мг, 97%). 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 8,96 (с, 1H), 8,62 (д, J=7,9 Гц, 1H), 8,14-8,06 (м, 1H), 7,95 (д, J=7,1 Гц, 1H), 6,64 (с, 1H), 5,55 (тд, J=6,7, 13,3 Гц,1H), 5,21-5,08 (м, 2H), 4,27 (уш.с, 1H), 3,95-3,85 (м, 2H), 2,43 (с, 3H), 2,23 (уш.с, 2H), 1,65 (уш.д, J=5,5 Гц, 2H), 1,58 (д, J=6,7 Гц, 6H), 1,36-1,28 (м,2H), 1,17-1,07 (м, 6H). m/z (APCI+) для (C25H32N8O) 483,3 (M+Na)+.
Пример 9: 6-(диэтиламино)-2-[6-(4-этил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)пиридин-2-ил]-4-[(метиламино)метил]-2,3-дигидро-1H-пирроло-[3,4-c]пиридин-1-он
Стадия 1: 2-бром-6-(4-этил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)пиридин
В колбу загружали N'-[(6-бромпиридин-2-ил)карбонил]-N,N-диметилгидразоноформамид (2,0 г, 7,4 ммоль), этиламин (0,5 мл, 333 мг, 7,4 ммоль), уксусную кислоту (3 мл) и ацетонитрил (15 мл, 0,5 M). Раствор нагревали в течение 16 часов при 95°C. Реакционную смесь разбавляли этилацетатом (10 мл) и водой (10 мл). Добавляли твердый карбонат калия до тех пор, пока величина pH водного слоя не достигала ~ pH 8. Слои разделяли, и водный слой экстрагировали этилацетатом (3×30 мл). Объединенный органический слой промывали солевым раствором (30 мл), сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали с получением неочищенного продукта (1,8 г) в виде желтого твердого вещества. Неочищенный материал разбавляли этилацетатом (0,3 мл) и петролейным эфиром (3 мл), перемешивали в течение 5 минут и фильтровали. В результате получали названное соединение в виде бледно-желтого твердого вещества (1,5 г, 80%). 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,32 (д, J=7,8 Гц, 1H), 8,24 (с, 1H), 7,70 (т, J=7,8 Гц, 1H), 7,54 (д, J=7,8 Гц, 1H), 4,59 (кв, J=7,3 Гц, 2H), 1,52 (т, J=7,2 Гц, 3H). m/z (APCI+) для (C9H9BrN4), 252,7 (M+H)+.
Стадия 2: трет-бутил ({6-хлор-2-[6-(4-этил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)пиридин-2-ил]-1-оксо-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-4-ил}метил)метилкарбамат
В колбу загружали трет-бутил ((6-хлор-1-оксо-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-4-ил)метил)(метил)карбамат (100 мг, 0,32 ммоль), 2-бром-6-(4-этил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)пиридин (97,4 мг, 0,39 ммоль), йодид меди (15,3 мг, 0,08 ммоль), карбонат калия (97,5 мг, 0,71 ммоль) и ацетонитрил (5 мл, 0,06 M). Через раствор барботировали газообразный азот в течение 5 минут, колбу герметизировали и нагревали в течение 1,5 часа при 120°C. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и разбавляли с помощью DCM (100 мл). Раствор промывали солевым раствором (20 мл), сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали с получением желтой смолы (200 мг). Неочищенный материал очищали колоночной хроматографией (10:1 DCM/MeOH) с получением названного соединения в виде белого твердого вещества (120 мг, 77%). 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,69 (д, J=8,5 Гц, 1H), 8,28 (с, 1H), 8,17 (уш.д, J=6,8 Гц, 1H), 7,97 (т, J=8,0 Гц, 1H), 7,79 (с, 1H), 5,24 (уш.с, 2H), 4,72 (уш.с, 2H), 4,68-4,63 (м, 2H), 2,98 (с, 3H), 1,47-1,28 (м, 12H). m/z (APCI+) для (C23H26ClN7O) 484,1 (M+H)+.
Стадия 3: трет-бутил ({6-(диэтиламино)-2-[6-(4-этил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)пиридин-2-ил]-1-оксо-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-4-ил}метил)метилкарбамат
В колбу загружали трет-бутил ({6-хлор-2-[6-(4-этил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)пиридин-2-ил]-1-оксо-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]-пиридин-4-ил}метил)метилкарбамат (120 мг, 0,25 ммоль), карбонат цезия (242 мг, 0,74 ммоль), диэтиламин (0,05 мл, 0,52 ммоль) и 1,4-диоксан (4 мл, 0,06 M). Добавляли (2-дициклогексилфосфино-2′,6′-диизопропокси-1,1′-бифенил)[2-(2′-амино-1,1′-бифенил)]-палладия(II) метансульфонат (20,7 мг, 0,025 ммоль), и реакционную смесь нагревали в течение 16 часов при 100°C в атмосфере азота. Реакционную смесь разбавляли этилацетатом (50 мл) и промывали солевым раствором (3×30 мл). Органический слой сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали с получением неочищенного остатка. Неочищенный материал очищали колоночной хроматографией (10:1 DCM/метанол) с получением названного соединения (60 мг, 46%). 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,78-8,69 (м, 1H), 8,27 (с, 1H), 8,17-8,08 (м, 1H), 7,93 (т, J=7,9 Гц, 1H), 6,83 (с, 1H), 5,10-4,92 (м, 2H), 4,72 (уш.с, 2H), 4,50 (уш.с, 2H), 3,59 (кв, J=7,3 Гц, 4H), 2,99 (уш.с, 3H), 1,46-1,31 (м, 11H), 1,21 (т, J=7,0 Гц, 6H). m/z (APCI+) для (C27H36N8O3) 521,3 (M+H)+.
Стадия 4: 6-(диэтиламино)-2-[6-(4-этил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)пиридин-2-ил]-4-[(метиламино)метил]-2,3-дигидро-1H-пирроло-[3,4-c]пиридин-1-он
В колбу загружали трет-бутил ({6-(диэтиламино)-2-[6-(4-этил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)пиридин-2-ил]-1-оксо-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-4-ил}метил)метилкарбамат (60 мг, 0,12 ммоль) и этилацетат (2 мл, 0,06 M), и реакционную смесь охлаждали до температуры ниже 5°C. Добавляли раствор 4 M хлористоводородной кислоты в этилацетате (5 мл, 20 ммоль), и реакционную смесь подогревали до комнатной температуры и перемешивали в течение 1 часа. Реакционную смесь концентрировали с получением желтого твердого вещества. Неочищенный материал очищали препаративной HPLC с использованием смеси вода (0,05% HCl)/ацетонитрил на колонке PhenomenexSynergi C18 150 * 30 мм *4 мкм с получением названного соединения в виде желтого твердого вещества (30 мг, 57%). 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 9,28 (уш.д, J=5,8 Гц, 2H), 9,10 (с, 1H), 8,66 (д, J=8,3 Гц, 1H), 8,15 (т, J=8,0 Гц, 1H), 8,02 (д, J=7,5 Гц, 1H), 6,87 (с, 1H), 5,17 (с, 2H), 4,67 (кв, J=7,0 Гц, 2H), 4,32 (т, J=5,8 Гц, 2H), 3,65 (кв, J=6,8 Гц, 4H), 2,73 (т, J=5,3 Гц, 3H), 1,52 (т, J=7,2 Гц, 3H), 1,16 (т, J=6,9 Гц, 6H).m/z (APCI+) для (C22H28N8O) 442,9 (M+Na)+.
Дополнительные соединения по изобретению получали путем модификации методов, приведенных в изобретении в качестве примеров. Если не указано иное, то все соединения, имеющие хиральные центры, получали и/или выделяли в виде индивидуального энантиомера, имеющего известную относительную конфигурацию. Соединения с примечанием "абсолютная стереохимия неизвестна" обычно получали из рацемических промежуточных соединений и разделяли их на индивидуальные энантиомеры с помощью подходящего хирального препаративного метода сверхкритической флюидной хроматографии (SFC) перед их характеризацией и тестированием. Если для пары энантиомеров абсолютная стереохимия неизвестна, то представленная в таблице 1 стереохимия присваивается на основе знака оптического вращения ([α] D20) и относительной биологической активности, по аналогии с соединениями, имеющими известные абсолютные конфигурации. Соединения с примечанием "абсолютная стереохимия известна" обычно получали из хиральных промежуточных соединений, имеющих известную стереохимию.
Выбранные соединения и соответствующие данные по их характеризации представлены в таблице 1 ниже, где в скобках под номером примера указан метод, использованный для получения соединения:
№
(D)
6-(диметиламино)-4-[(метиламино)метил]-2-{6-[(4S)-4-метил-2-оксо-1,3-оксазолидин-3-ил]пиридин-2-ил}-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
абсолютная стереохимия известна
(E)
4-(аминометил)-6-(диметиламино)-2-{6-[5-(пропан-2-ил)-1H-пиразол-4-ил]пиридин-2-ил}-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
(B)
4-(аминометил)-6-(диметиламино)-2-{6-[4-(пропан-2-ил)-4H-1,2,4-триазол-3-ил]пиридин-2-ил}-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
(B)
4-(аминометил)-6-(диметиламино)-2-(6-{4-[(2S)-4,4,4-трифторбутан-2-ил]-4H-1,2,4-триазол-3-ил}пиридин-2-ил)-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
абсолютная стереохимия известна
(B)
2-(6-{4-[(2S)-бутан-2-ил]-4H-1,2,4-триазол-3-ил}пиридин-2-ил)-6-(диметиламино)-4-[(метиламино)метил]-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
абсолютная стереохимия известна
(B)
4-[(метиламино)метил]-6-(пирролидин-1-ил)-2-(6-{4-[(2S)-4,4,4-трифторбутан-2-ил]-4H-1,2,4-триазол-3-ил}пиридин-2-ил)-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
абсолютная стереохимия известна
(B)
4-(аминометил)-2-{6-[4-(циклопропилметил)-4H-1,2,4-триазол-3-ил]пиридин-2-ил}-6-(диметиламино)-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
(B)
6-(диметиламино)-4-[(метиламино)метил]-2-(6-{4-[(2S)-4,4,4-трифторбутан-2-ил]-4H-1,2,4-триазол-3-ил}пиридин-2-ил)-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
абсолютная стереохимия известна
(B)
6-(диметиламино)-4-[(метиламино)метил]-2-(6-{4-[(3ξ)-1,1,1-трифторпентан-3-ил]-4H-1,2,4-триазол-3-ил}пиридин-2-ил)-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
[α]20D =3,8° (0,02 M, MeOH), >99% ee
абсолютная стереохимия неизвестна*
(B)
6-(диметиламино)-4-[(метиламино)метил]-2-(6-{4-[(3ξ)-1,1,1-трифторпентан-3-ил]-4H-1,2,4-триазол-3-ил}пиридин-2-ил)-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
[α]20D =-20,2° (0,02 M, MeOH), 99% ee
абсолютная стереохимия неизвестна*
(B)
6-(диметиламино)-2-[6-(4-этил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)пиридин-2-ил]-4-[(метиламино)метил]-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
(B)
2-{6-[4-(циклопропилметил)-4H-1,2,4-триазол-3-ил]пиридин-2-ил}-6-(диметиламино)-4-[(метиламино)метил]-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
(E)
6-(диметиламино)-2-{5-фтор-6-[5-(пропан-2-ил)-1H-пиразол-4-ил]пиридин-2-ил}-4-[(метиламино)метил]-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
(F)
4-[(метиламино)метил]-2-{6-[4-(пропан-2-ил)-4H-1,2,4-триазол-3-ил]пиридин-2-ил}-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
(C)
4-[(метиламино)метил]-2-{6-[4-(пропан-2-ил)-4H-1,2,4-триазол-3-ил]пиридин-2-ил}-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
(C)
6-[(1s,4s)-7-азабицикло[2.2.1]гепт-7-ил]-4-[(метиламино)метил]-2-{6-[4-(пропан-2-ил)-4H-1,2,4-триазол-3-ил]пиридин-2-ил}-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
(M)
4-(аминометил)-6-циклопропил-2-{6-[(4S)-4-метил-2-оксо-1,3-оксазолидин-3-ил]пиридин-2-ил}-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
абсолютная стереохимия известна
(C)
6-[(2R,5S)-2,5-диметилпирролидин-1-ил]-4-[(метиламино)метил]-2-{6-[4-(пропан-2-ил)-4H-1,2,4-триазол-3-ил]пиридин-2-ил}-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
(C)
6-[(2R,4R)-2,4-диметилазетидин-1-ил]-4-[(метиламино)метил]-2-{6-[4-(пропан-2-ил)-4H-1,2,4-триазол-3-ил]пиридин-2-ил}-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
абсолютная стереохимия известна
(G)
6-трет-бутил-4-[(метиламино)метил]-2-{6-[4-(пропан-2-ил)-4H-1,2,4-триазол-3-ил]пиридин-2-ил}-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
(C)
4-[(метиламино)метил]-6-(пропан-2-ил)-2-{6-[4-(пропан-2-ил)-4H-1,2,4-триазол-3-ил]пиридин-2-ил}-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
(C)
4-(аминометил)-6-циклопропил-2-{6-[4-(пропан-2-ил)-4H-1,2,4-триазол-3-ил]пиридин-2-ил}-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
(D)
4-(аминометил)-6-(диметиламино)-2-{6-[(4S)-4-метил-2-оксо-1,3-оксазолидин-3-ил]пиридин-2-ил}-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
абсолютная стереохимия известна
(M)
6-(азетидин-1-ил)-4-[(метиламино)метил]-2-{6-[(4S)-4-метил-2-оксо-1,3-оксазолидин-3-ил]пиридин-2-ил}-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
абсолютная стереохимия известна
(C)
4-(аминометил)-6-[(2R,4S)-2,4-диметилазетидин-1-ил]-2-{6-[4-(пропан-2-ил)-4H-1,2,4-триазол-3-ил]пиридин-2-ил}-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
(I)
4-(аминометил)-6-(диметиламино)-2-{6-[5-(пропан-2-ил)-1H-1,2,3-триазол-1-ил]пиридин-2-ил}-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
(J)
4-(аминометил)-6-трет-бутил-2-{6-[(4S)-4-метил-2-оксо-1,3-оксазолидин-3-ил]пиридин-2-ил}-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
абсолютная стереохимия известна
(H)
2-{6-[(4R)-4-(дифторметил)-2-оксо-1,3-оксазолидин-3-ил]пиридин-2-ил}-6-(диметиламино)-4-[(метиламино)метил]-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
абсолютная стереохимия известна
(C)
4-(аминометил)-6-(диэтиламино)-2-{6-[4-(пропан-2-ил)-4H-1,2,4-триазол-3-ил]пиридин-2-ил}-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
(K)
6-трет-бутил-4-[(метиламино)метил]-2-{6-[(4S)-4-метил-2-оксо-1,3-оксазолидин-3-ил]пиридин-2-ил}-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
абсолютная стереохимия известна
(M)
6-циклопропил-4-[(метиламино)метил]-2-{6-[(4S)-4-метил-2-оксо-1,3-оксазолидин-3-ил]пиридин-2-ил}-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
абсолютная стереохимия известна
(N)
4-(аминометил)-2-{6-[(4S)-4-метил-2-оксо-1,3-оксазолидин-3-ил]пиридин-2-ил}-6-(пропан-2-ил)-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
абсолютная стереохимия известна
(M)
4-(аминометил)-6-(1-метилциклопропил)-2-{6-[(4S)-4-метил-2-оксо-1,3-оксазолидин-3-ил]пиридин-2-ил}-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
абсолютная стереохимия известна
(M)
4-(аминометил)-6-[(2R,4R)-2,4-диметилазетидин-1-ил]-2-{6-[(4S)-4-метил-2-оксо-1,3-оксазолидин-3-ил]пиридин-2-ил}-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
абсолютная стереохимия известна
(M)
4-(аминометил)-6-(азетидин-1-ил)-2-{6-[(4S)-4-метил-2-оксо-1,3-оксазолидин-3-ил]пиридин-2-ил}-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
абсолютная стереохимия известна
(H)
6-(диметиламино)-2-{6-[(4R)-4-(фторметил)-2-оксо-1,3-оксазолидин-3-ил]пиридин-2-ил}-4-[(метиламино)метил]-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
абсолютная стереохимия известна
(C)
6-(диметиламино)-4-[(метиламино)метил]-2-[6-(4-пропил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)пиридин-2-ил]-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
(C)
6-метил-4-[(метиламино)метил]-2-{6-[4-(пропан-2-ил)-4H-1,2,4-триазол-3-ил]пиридин-2-ил}-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
(C)
6-[этил(метил)амино]-4-[(метиламино)метил]-2-{6-[4-(пропан-2-ил)-4H-1,2,4-триазол-3-ил]пиридин-2-ил}-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
(M)
4-[(метиламино)метил]-6-(1-метилциклопропил)-2-{6-[(4S)-4-метил-2-оксо-1,3-оксазолидин-3-ил]пиридин-2-ил}-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
абсолютная стереохимия известна
(C)
6-амино-4-[(метиламино)метил]-2-{6-[4-(пропан-2-ил)-4H-1,2,4-триазол-3-ил]пиридин-2-ил}-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
(G)
6-трет-бутил-4-[(метиламино)метил]-2-(6-{4-[(3ξ)-1,1,1-трифторпентан-3-ил]-4H-1,2,4-триазол-3-ил}пиридин-2-ил)-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
[α]D22 = -6,6°, (0,2 M, MeOH), >99% ee
абсолютная стереохимия неизвестна*
(L)
4-[(метиламино)метил]-2-{6-[4-(пропан-2-ил)-4H-1,2,4-триазол-3-ил]пиридин-2-ил}-6-(трифторметил)-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
(C)
6-[(2R,4S)-2,4-диметилазетидин-1-ил]-4-[(метиламино)метил]-2-{6-[4-(пропан-2-ил)-4H-1,2,4-триазол-3-ил]пиридин-2-ил}-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
*Использование or1 в структуре и ξ в названии соединения обозначает хиральный центр, который был разделен на два отдельных энантиомера, но присутствие конкретного энантиомера подтверждено не было; в структуре изображена сплошная или пунктирная клиновидная связь, но фактическим энантиомером может быть другой энантиомер.
Пример 46: 6-(диметиламино)-4-[(метиламино)метил]-2-[6-(4-пропил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)пиридин-2-ил]-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
Стадия 1: трет-бутил ({6-(диметиламино)-1-оксо-2-[6-(4-пропил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)пиридин-2-ил]-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-4-ил}метил)метилкарбамат
Смесь промежуточного соединения 3 (1,33 г, 4,15 ммоль), промежуточного соединения 13 (1,16 г, 4,36 ммоль), Pd2(dba)3 (380 мг, 0,415 ммоль), Xantphos (480 г, 0,830 ммоль) и K3PO4 (2,64 г, 12,5 ммоль) в 1,4-диоксане (46 мл) дегазировали с помощью N2 в течение 5 минут и перемешивали при 85°C в течение 16 часов. Проводили анализ реакционной смеси методом LCMS, который указывал на полный расход исходного материала. Смесь охлаждали до комнатной температуры, фильтровали через слой целита®, и концентрировали под вакуумом. Остаток суспендировали с помощью EtOAc (15 мл) в течение 10 минут, и твердые вещества собирали фильтрацией. Осадок на фильтре промывали с помощью EtOAc (4x) и затем сушили под вакуумом. Остаток очищали флэш-хроматографией (40 г SiO2, 0-100% EtOAc/гептан затем 10% MeOH/EtOAc) с получением светло-желтого твердого вещества. Материал растворяли в смеси 1:9 EtOH/DCM и обрабатывали с помощью Si- Thio SiO2 (1,59 г) высокой чистоты. Смесь перемешивали в течение 2 часов и фильтровали. Осадок на фильтре промывали смесью 1:9 EtOH/DCM, и объединенный фильтрат концентрировали под вакуумом. Остаток растворяли в смеси 1:9 EtOH/DCM и обрабатывали с помощью особо чистого Si- Thio SiO2 (1,32 г). Смесь перемешивали в течение 3 часов и затем фильтровали. Осадок на фильтре промывали 1:9 EtOH/DCM, и объединенный фильтрат концентрировали. Остаток растворяли в 1:9 EtOH и обрабатывали с помощью особо чистого Si- Thio SiO2 (1,22 г). Смесь перемешивали в течение 16 часов и затем фильтровали. Осадок на фильтре промывали смесью 1:9 EtOH/DCM. Объединенный фильтрат концентрировали досуха с получением трет-бутил ({6-(диметиламино)-1-оксо-2-[6-(4-пропил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)пиридин-2-ил]-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-4-ил}метил)метилкарбамата (2,08 г, 95% выход) в виде светло-желтого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 8,74 (с, 1H), 8,61 (д, J=8,4 Гц, 1H), 8,09 (т, J=8,0 Гц, 1H), 7,97 (д, J=7,6 Гц, 1H), 6,82 (с, 1H), 5,05 (д, J=11,7 Гц, 2H), 4,56 (с, 2H), 4,52-4,46 (м, 2H), 3,09 (с, 6H), 2,92 (с, 3H), 1,88-1,76 (м, 2H), 1,40-1,19 (м, 9H), 0,87 (т, J=7,4 Гц, 3H); LCMS m/z (ESI+) для (C26H34N8O3), 507,4 (M+H)+.
Альтернативная стадия 1: трет-бутил ({6-(диметиламино)-1-оксо-2-[6-(4-пропил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)пиридин-2-ил]-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-4-ил}метил)метилкарбамат
К раствору трет-бутил {[6-(диметиламино)-4-(диметил-карбамоил)-3-формилпиридин-2-ил]метил}метилкарбамата (3e) (500 мг, 1,37 ммоль) и 6-(4-пропил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)пиридин-2-амина (промежуточного соединения 16) (293 мг, 1,44 ммоль) в MeOH (9,1 мл) добавляли декаборан (62,0 мг, 0,508 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 часов и добавляли затем раствор NaOMe (25% в MeOH, 5,02 мл, 22,0 ммоль). Смесь перемешивали при 65°C в течение 2 часов, получая желтую суспензию. Добавляли дополнительное количество NaOMe (0,5 M в MeOH, 13,7 мл, 6,86 ммоль), и смесь перемешивали при 65°C в течение 3 часов. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, и желтые твердые вещества собирали фильтрацией. Осадок на фильтре промывали H2O (2×3 мл) и сушили под вакуумом с получением трет-бутил ({6-(диметиламино)-1-оксо-2-[6-(4-пропил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)-пиридин-2-ил]-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-4-ил}метил)-метилкарбамата (518 мг, 75% выход) в виде светло-желтого твердого вещества. LCMS m/z (ESI+) для (C26H34N8O3), 507,5 (M+H)+.
Стадия 2: 6-(диметиламино)-4-[(метиламино)метил]-2-[6-(4-пропил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)пиридин-2-ил]-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
К суспензии трет-бутил ({6-(диметиламино)-1-оксо-2-[6-(4-пропил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)пиридин-2-ил]-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-4-ил}метил)метилкарбамата (1,96 г, 3,87 ммоль) в MeOH (20 мл) медленно добавляли при 0°C раствор HCl (4,0 M в 1,4-диоксане, 19,3 мл, 77,4 ммоль). Смесь перемешивали в течение 3 часов при 0°C и затем медленно подогревали до комнатной температуры. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 часов. Реакционную смесь концентрировали досуха. Твердые вещества растворяли в смеси 1:9 MeOH/DCM (80 мл), охлаждали до 0°C, и затем перемешивали с насыщенным водным раствором Na2CO3 (25 мл) в течение 20 минут. Смесь разделяли. Водный слой экстрагировали смесью 1:19 MeOH/DCM (3×50 мл). Объединенные органические слои промывали H2O (2×30 мл), сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Твердые вещества суспендировали в EtOAc при 40°C в течение 40 минут. Твердые вещества собирали фильтрацией. Осадок на фильтре промывали с помощью EtOAc и затем сушили в течение 16 часов в вакуумном сушильном шкафу при 30°C с получением 6-(диметиламино)-4-[(метиламино)метил]-2-[6-(4-пропил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)пиридин-2-ил]-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-она (1,42 г, 90% выход) в виде желтого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 8,73 (с, 1H), 8,62 (дд, J=8,4, 1,0 Гц, 1H), 8,11-8,04 (м, 1H), 8,00 (дд, J=7,7, 1,0 Гц, 1H), 6,78 (с, 1H), 5,14 (с, 2H), 4,57 (дд, J=7,9, 6,5 Гц, 2H), 3,80 (с, 2H), 3,09 (с, 6H), 2,35 (с, 3H), 1,88 (г, J=7,4 Гц, 2H), 0,93 (т, J=7,4 Гц, 3H); LCMS m/z (ESI+) для (C21H26N8O), 407,3 (M+H)+.
Пример 55: 4-[(метиламино)метил]-6-[(2R)-2-метилпирролидин-1-ил]-2-[6-(4-пропил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)пиридин-2-ил]-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
Стадия 1: трет-бутил ({6-хлор-1-оксо-2-[6-(4-пропил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)пиридин-2-ил]-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-4-ил}метил)метилкарбамат
К раствору промежуточного соединения 2 (430 мг, 1,38 ммоль), промежуточного соединения 13 (368 мг, 1,38 ммоль), K2CO3 (419 мг, 3,03 ммоль) и N,N-диметилэтилендиамина (60,7 мг, 0,690 ммоль) в MeCN (10,0 мл) добавляли CuI (65,7 мг, 0,345 ммоль). Смесь продували с помощью N2 в течение 5 минут и затем перемешивали при 120°C в течение 1,5 часа при микроволновом излучении. Анализ методом LCMS показывал полный расход исходного материала. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и добавляли H2O (10 мл). Смесь перемешивали в течение 15 минут и затем фильтровали. Осадок на фильтре промывали H2O (3×3 мл) и сушили под вакуумом. Остаток очищали флэш-хроматографией (12 г SiO2, EtOAc) с получением трет-бутил ({6-хлор-1-оксо-2-[6-(4-пропил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)пиридин-2-ил]-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-4-ил}метил)метилкарбамата (430 мг, 63% выход) в виде желтого стеклообразного вещества. 1H ЯМР (400 МГц, хлороформ-d) δ 8,68 (д, J=8,4 Гц, 1H), 8,25 (с, 1H), 8,14 (с, 1H), 8,02-7,92 (м, 1H), 7,78 (с, 1H), 5,14 (с, 2H), 4,76-4,50 (м, 4H), 2,97 (с, 3H), 1,97-1,80 (м, 2H), 1,37 (с, 9H), 0,94 (с, 3H); m/z (ESI+) для (C24H28ClN7O3), 498,2 (M+H)+.
Стадия 2: трет-бутил метил({6-[(2R)-2-метилпирролидин-1-ил]-1-оксо-2-[6-(4-пропил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)пиридин-2-ил]-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-4-ил}метил)карбамат
Раствор трет-бутил ({6-хлор-1-оксо-2-[6-(4-пропил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)пиридин-2-ил]-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-4-ил}метил)метилкарбамата (200 мг, 0,402 ммоль) и Cs2CO3 (720 мг, 2,21 ммоль) в 1,4-диоксане (5,0 мл) продували аргоном в течение 3 минут и добавляли RuPhos Pd G3 (33,6 мг, 0,0402 ммоль). Смесь продували аргоном в течение 3 минут и добавляли (2R)-2-метилпирролидин (171 мг, 2,01 мл). Смесь перемешивали при 100°C в течение 18 часов. Анализ методом LCMS показывал полный расход исходного материала. Смесь фильтровали, и осадок на фильтре промывали с помощью DCM (2×10 мл). Объединенный фильтрат концентрировали досуха. Остаток очищали флэш-хроматографией (8 г SiO2, EtOAc) с получением трет-бутил метил({6-[(2R)-2-метил-пирролидин-1-ил]-1-оксо-2-[6-(4-пропил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)-пиридин-2-ил]-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-4-ил}метил)-карбамата (210 мг, 96% выход) в виде желтого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,82-8,62 (м, 1H), 8,25 (с, 1H), 8,17-8,09 (м, 1H), 7,97-7,89 (м, 1H), 6,74 (с, 1H), 5,13-4,85 (м, 2H), 4,76-4,58 (м, 2H), 4,64-4,42 (м, 2H), 4,35-4,19 (м, 1H), 3,84-3,73 (м, 2H), 3,67-3,57 (м, 1H), 3,46-3,31 (м, 1H), 3,01 уш.с, 3H), 2,19-2,08 (м, 2H), 1,99-1,90 (м, 1H), 1,81-1,74 (м, 1H), 1,48-1,31 (м, 9H), 1,27 (д, J=6,1 Гц, 3H), 0,98 (т, J=6,3 Гц, 3H); m/z (ESI+) для (C29H38N8O3), 547,4 (M+H)+.
Стадия 3: 4-[(метиламино)метил]-6-[(2R)-2-метилпирролидин-1-ил]-2-[6-(4-пропил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)пиридин-2-ил]-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-она гидрохлоридная соль
К раствору трет-бутил метил({6-[(2R)-2-метилпирролидин-1-ил]-1-оксо-2-[6-(4-пропил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)пиридин-2-ил]-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-4-ил}метил)карбамата (210 мг, 0,384 ммоль) в DCM (5,0 мл) при 0°C добавляли раствор HCl (1,0 M в EtOAc, 5,0 мл). Смесь перемешивали при 20°C в течение 4 часов с получением суспензии. Анализ методом LCMS показывал полный расход исходного материала. Суспензию фильтровали. Осадок на фильтре промывали с помощью DCM (5 мл) и сушили под вакуумом. Материал растворяли в H2O (30 мл) и сушили лиофилизацией с получением 4-[(метиламино)метил]-6-[(2R)-2-метилпирролидин-1-ил]-2-[6-(4-пропил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)пиридин-2-ил]-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-она, выделяемого в форме гидрохлорида (170 мг, 92% выход) в виде желтого твердого вещества. 1H ЯМР (600 МГц, DMSO-d6) δ 8,68 (с, 1H), 8,53 (дт, J=6,2, 2,9 Гц, 1H), 8,04-7,98 (м, 1H), 7,94 (дд, J=8,0, 2,8 Гц, 1H), 6,53 (с, 1H), 5,06-4,98 (м, 2H), 4,56-4,48 (м, 2H), 3,84 (2H перекрыт пиком растворителя), 3,28 (д, J=9,3 Гц, 1H), 2,46-2,34 (м, 3H), 2,09-1,96 (м, 2H), 1,96-1,89 (м, 1H), 1,88-1,74 (м, 4H), 1,74-1,63 (м, 1H), 1,15 (д, J=6,1 Гц, 3H), 0,90 (т, J=7,4 Гц, 3H); m/z (ESI+) для (C24H30N8O), 447,1 (M+H)+.
Пример 56: 4-(аминометил)-6-[этил(метил)амино]-2-[6-(4-пропил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)пиридин-2-ил]-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он гидрохлорид
Стадия 1: трет-бутил ({6-хлор-1-оксо-2-[6-(4-пропил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)пиридин-2-ил]-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-4-ил}метил)карбамат
К раствору промежуточного соединения 7 (300 мг, 1,01 ммоль), промежуточного соединения 13 (306 мг, 2,22 ммоль), N,N-диметилэтилендиамина (44,4 мг, 0,504 ммоль) и K2CO3 (306 мг, 2,22 ммоль) в MeCN (10,0 мл) добавляли CuI (48,0 мг, 0,252 ммоль), и смесь продували аргоном в течение 5 минут. Смесь перемешивали при 120°C в течение 1,5 часа при микроволновом излучении. Анализ методом TLC указывал на полный расход исходного материала. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и добавляли H2O (80 мл). Смесь фильтровали, и осадок на фильтре промывали H2O (3×5 мл) и сушили под вакуумом с получением трет-бутил ({6-хлор-1-оксо-2-[6-(4-пропил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)пиридин-2-ил]-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-4-ил}метил)карбамата (290 мг, 60% выход) в виде коричневого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 8,78 (с, 1H), 8,59 (д, J=8,3 Гц, 1H), 8,18-8,07 (м, 1H), 8,01 (д, J=7,6 Гц, 1H), 7,84 (с, 1H), 7,55 (т, J=5,9 Гц, 1H), 5,26 (с, 2H), 4,58 (т, J=7,1 Гц, 2H), 4,39 (д, J=5,9 Гц, 2H), 1,83 (кв, J=7,4 Гц, 2H), 1,35 (с, 9H), 0,86 (т, J=7,3 Гц, 3H); m/z (ESI+) для (C23H26ClN7O3), 484,2 (M+H)+.
Стадия 2: трет-бутил ({6-[этил(метил)амино]-1-оксо-2-[6-(4-пропил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)пиридин-2-ил]-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-4-ил}метил)карбамат
Раствор трет-бутил ({6-хлор-1-оксо-2-[6-(4-пропил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)пиридин-2-ил]-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-4-ил}метил)карбамата (290 мг, 0,599 ммоль) и Cs2CO3 (586 мг, 1,8 ммоль) в 1,4-диоксане (10,0 мл) продували аргоном в течение 3 минут и добавляли RuPhos Pd G3 (50,1, 0,0599 ммоль). Смесь продували аргоном в течение 3 минут и добавляли N-метилэтанамин (70,8 мг, 1,2 ммоль). Смесь перемешивали при 100°C в течение 18 часов в атмосфере Ar. Анализ методом LCMS показывал полный расход исходного материала. Реакционную смесь концентрировали досуха, и остаток очищали препаративной TLC (SiO2, 1:20 MeOH/EtOAc) с получением трет-бутил ({6-[этил(метил)амино]-1-оксо-2-[6-(4-пропил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)пиридин-2-ил]-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-4-ил}метил)карбамата (90 мг, 30% выход) в виде желтого твердого вещества. m/z (ESI+) для (C26H34N8O3), 507,3 (M+H)+.
Стадия 3: 4-(аминометил)-6-[этил(метил)амино]-2-[6-(4-пропил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)пиридин-2-ил]-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он гидрохлорид
К раствору трет-бутил ({6-[этил(метил)амино]-1-оксо-2-[6-(4-пропил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)пиридин-2-ил]-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-4-ил}метил)карбамата (90 мг, 0,18 ммоль) в EtOAc (5,0 мл) добавляли раствор HCl (4,0 M в EtOAc, 3,0 мл) при 0°C. Смесь перемешивали при 15°C в течение 20 часов. Анализ методом LCMS показывал полный расход исходного материала. Реакционную смесь концентрировали досуха. Остаток очищали препаративной HPLC на колонке YMC-Actus Triart C-18 (150×30 мм, размер частиц 5 мкм), которую элюировали смесью 11-51% MeCN/H2O (+0,05% HCl) с расходом 30 мл/мин с получением 4-(аминометил)-6-[этил(метил)амино]-2-[6-(4-пропил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)пиридин-2-ил]-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-она, выделяемого в форме гидрохлорида (37 мг, 47% выход) в виде желтого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 8,97 (с, 1H), 8,65 (д, J=8,4 Гц, 1H), 8,48 (с, 3H), 8,16-8,09 (м, 1H), 8,02 (д, J=7,6 Гц, 1H), 6,88 (с, 1H), 5,14 (с, 2H), 4,59 (т, J=7,3 Гц, 2H), 4,22 (д, J=6,1 Гц, 2H), 3,71 (кв, J=7,1 Гц, 2H), 3,11 (с, 3H), 1,89 (кв, J=7,3 Гц, 2H), 1,11 (т, J=6,9 Гц, 3H), 0,94 (т, J=7,4 Гц, 3H); m/z (ESI+) для (C21H26N8O), 407,3 (M+H)+.
Пример 57: 4-[(метиламино)метил]-6-(1-метилциклопропил)-2-{6-[4-(пентан-3-ил)-4H-1,2,4-триазол-3-ил]пиридин-2-ил}-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
Стадия 1: трет-бутил метил{[6-(1-метилциклопропил)-1-оксо-2-{6-[4-(пентан-3-ил)-4H-1,2,4-триазол-3-ил]пиридин-2-ил}-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-4-ил]метил}карбамат
К смеси промежуточного соединения 8 (100 мг, 0,302 ммоль), промежуточного соединения 14 (89,1 мг, 0,302 ммоль) и K3PO4 (192 мг, 0,905 ммоль) в 1,4-диоксане (5,0 мл) в атмосфере N2 добавляли Pd2(dba)3 (27,6 мг, 0,0302 ммоль) и Xantphos (34,9 мг, 0,0603 ммоль). Смесь продували с помощью N2 в течение двух минут. Смесь перемешивали при 85°C в течение 18 часов. Анализ методом LCMS показывал полный расход исходного материала. Реакционную смесь разбавляли H2O (1,5 мл) и экстрагировали с помощью EtOAc (2×10 мл). Объединенные органические фазы сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали препаративной TLC (SiO2, 1:30 MeOH/EtOAc) с получением трет-бутил метил{[6-(1-метилциклопропил)-1-оксо-2-{6-[4-(пентан-3-ил)-4H-1,2,4-триазол-3-ил]пиридин-2-ил}-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-4-ил]метил}карбамата (100 мг, 61% выход) в виде светло-желтого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 8,92 (с, 1H), 8,61 (д, J=8,4 Гц, 1H), 8,14-8,06 (м, 1H), 7,93 (д, J=7,6 Гц, 1H), 7,58 (с, 1H), 5,17 (д, J=23,7 Гц, 2H), 4,53 (с, 2H), 2,92 (с, 3H), 1,99-1,83 (м, 1H), 1,54 (с, 3H), 1,38 (с, 5H), 1,23 (с, 4H), 1,18 (с, 4H), 0,91-0,82 (м, 4H), 0,78 (т, J=7,4 Гц, 6H); m/z (ESI+) для (C30H39N7O3), 546,5 (M+H)+.
Стадия 2: 4-[(метиламино)метил]-6-(1-метилциклопропил)-2-{6-[4-(пентан-3-ил)-4H-1,2,4-триазол-3-ил]пиридин-2-ил}-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
Раствор трет-бутил метил{[6-(1-метилциклопропил)-1-оксо-2-{6-[4-(пентан-3-ил)-4H-1,2,4-триазол-3-ил]пиридин-2-ил}-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-4-ил]метил}карбамата (100 мг, 0,183 ммоль) в DCM (3,0 мл) охлаждали до 0°C и добавляли по каплям TFA (1,0 мл). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 4 часов. Анализ методом LCMS показывал полный расход исходного материала. Смесь концентрировали. Остаток растворяли в DCM (50 мл) и промывали насыщенным водным раствором NaHCO3 (20 мл) и солевым раствором (20 мл). Органический слой сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Твердые вещества сушили путем лиофилизации с получением 4-[(метиламино)метил]-6-(1-метил-циклопропил)-2-{6-[4-(пентан-3-ил)-4H-1,2,4-триазол-3-ил]-пиридин-2-ил}-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-она (33 мг, 40% выход) в виде желтовато-белого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 8,93 (с, 1H), 8,65 (д, J=8,4 Гц, 1H), 8,14-8,06 (м, 1H), 7,96 (д, J=7,6 Гц, 1H), 7,57 (с, 1H), 5,43 (тд, J=8,7, 4,3 Гц, 1H), 5,26 (с, 2H), 3,91 (с, 2H), 2,34 (с, 4H), 1,99-1,86 (м, J=6,7 Гц, 4H), 1,56 (с, 3H), 1,25 (п, J=3,5 Гц, 2H), 0,87 (кв, J=3,6 Гц, 2H), 0,83 (с, 6H); m/z (ESI+) для (C25H31N7O), 446,5 (M+H)+.
Пример 58: 2-(6-{4-[(2S)-бутан-2-ил]-4H-1,2,4-триазол-3-ил}пиридин-2-ил)-4-[(метиламино)метил]-6-(1-метилциклопропил)-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
Смесь промежуточного соединения 8 (68,4 мг, 0,206 ммоль), промежуточного соединения 15 (58,0 мг, 0,210 ммоль), K2CO3 (71,3 мг, 0,516 ммоль), N,N-диметилэтилендиамина (8,61 мг, 0,0977 ммоль) и CuI (9,3 мг, 0,0488 ммоль) перемешивали при 120°C в течение 90 минут при микроволновом излучении. Анализ методом LCMS показывал полный расход исходного материала. Смесь охлаждали до комнатной температуры и фильтровали через целит®. Осадок на фильтре промывали смесью 10% MeOH/DCM, и объединенный фильтрат концентрировали досуха. Остаток растворяли в DCM (2,0 мл) и добавляли TFA (1,0 мл). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. Реакционную смесь концентрировали досуха. Остаток очищали препаративной SFC на колонке ZymorSPHERE HADP (4,6×150 мм, размер частиц 5 мкм), которую элюировали смесью 5-50% MeOH/CO2 с расходом 4,0 мл/мин, с получением названного соединения (57,6 мг, 65% выход) в виде твердого вещества. 1H ЯМР (600 МГц, DMSO-d6) δ 8,92 (с, 1H), 8,61 (д, J=8,0 Гц, 1H), 8,15-8,07 (м, 1H), 7,93 (д, J=7,2 Гц, 1H), 7,66 (с, 1H), 5,31 (п, J=7,2 Гц, 1H), 5,25-5,17 (м, 2H), 4,35 (с, 2H), 2,68 (с, 3H), 1,92 (ддп, J=36,2, 14,6, 7,4 Гц, 2H), 1,57 (д, J=8,2 Гц, 6H), 1,42-1,37 (м, 2H), 0,91 (д, J=5,4 Гц, 2H), 0,82 (т, J=7,3 Гц, 3H); m/z (ESI+) для (C24H29N7O), 432,2 (M+H)+.
Пример 59: 6-[этил(метил)амино]-4-[(метиламино)метил]-2-[6-(4-пропил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)пиридин-2-ил]-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
Стадия 1: трет-бутил ({6-хлор-1-оксо-2-[6-(4-пропил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)пиридин-2-ил]-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-4-ил}метил)метилкарбамат
К раствору промежуточного соединения 2 (200 мг, 0,642 ммоль), промежуточного соединения 13 (180 мг, 0,674 ммоль), K2CO3 (195 мг, 1,41 ммоль) и N,N-диметилэтилендиамина (28,3 мг, 0,321 ммоль) в MeCN (7,0 мл) добавляли CuI (30,5 мг, 0,160 ммоль). Смесь продували аргоном в течение 5 минут и затем перемешивали при 120°C в течение 1,5 часа при микроволновом излучении. Анализ методом LCMS показывал полный расход исходного материала. Смесь разбавляли H2O (30 мл). Полученный осадок собирали фильтрацией. Осадок на фильтре перемешивали в EtOAc (100 мл) и фильтровали для удаления нерастворившихся твердых веществ. Фильтрат концентрировали досуха с получением трет-бутил ({6-хлор-1-оксо-2-[6-(4-пропил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)пиридин-2-ил]-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-4-ил}метил)метилкарбамата (270 мг, 85% выход) в виде серого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 8,78 (с, 1H), 8,60 (д, J=8,3 Гц, 1H), 8,17-8,10 (м, 1H), 8,00 (д, J=7,6 Гц, 1H), 7,87 (с, 1H), 5,21 (с, 2H), 4,66 (с, 2H), 4,60-4,54 (м, 2H), 2,93 (с, 3H), 1,81 (с, 2H), 1,37 (с, 5H), 1,24 (с, 4H), 0,86 (т, J=7,3 Гц, 3H); m/z (ESI+) для (C24H28ClN7O3), 498,2 (M+H)+.
Стадия 2: трет-бутил ({6-[этил(метил)амино]-1-оксо-2-[6-(4-пропил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)пиридин-2-ил]-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-4-ил}метил)метилкарбамат
Смесь трет-бутил ({6-хлор-1-оксо-2-[6-(4-пропил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)пиридин-2-ил]-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-4-ил}метил)метилкарбамата (270 мг, 0,542 ммоль), N-метилэтанамина (64,1 мг, 1,08 ммоль) и Cs2CO3 (530 мг, 1,63 ммоль) в 1,4-диоксане (8,0 мл) продували аргоном в течение 3 минут и добавляли RuPhos Pd G3 (45,4 мг, 0,542 ммоль). Смесь продували аргоном в течение еще 3 минут и затем перемешивали при 100°C в течение 18 часов. Анализ методом LCMS показывал полный расход исходного материала. Смесь разбавляли H2O (50 мл) и экстрагировали с помощью EtOAc (2×50 мл). Объединенные органические слои промывали солевым раствором, сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали препаративной TLC (1:20 MeOH/EtOAc) с получением трет-бутил ({6-[этил(метил)амино]-1-оксо-2-[6-(4-пропил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)-пиридин-2-ил]-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-4-ил}метил)-метилкарбамата (99 мг, 35% выход) в виде коричневого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 8,76 (с, 1H), 8,62 (д, J=8,4 Гц, 1H), 8,12-8,06 (м, 1H), 7,98 (д, J=7,6 Гц, 1H), 6,78 (с, 1H), 5,09-5,00 (м, 2H), 4,57 (с, 2H), 4,49 (с, 2H), 3,68-3,60 (м, 2H), 3,05 (с, 3H), 2,94 (с, 3H), 1,90-1,77 (м, 2H), 1,38 (с, 4H), 1,23 (с, 5H), 1,07 (д, J=7,9 Гц, 3H), 0,89 (т, J=7,5 Гц, 3H).; m/z (ESI+) для (C27H36N8O3), 521,4 (M+H)+.
Стадия 3: 6-[этил(метил)амино]-4-[(метиламино)метил]-2-[6-(4-пропил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)пиридин-2-ил]-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-она гидрохлорид
Раствор трет-бутил ({6-[этил(метил)амино]-1-оксо-2-[6-(4-пропил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)пиридин-2-ил]-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-4-ил}метил)метилкарбамата (99 мг, 0,19 ммоль) в DCM (20 мл) охлаждали до 0°C и обрабатывали по каплям раствором HCl (4,0 M в EtOAc, 5,0 мл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 дней. Анализ методом LCMS показывал полный расход исходного материала. Смесь концентрировали досуха. Остаток очищали препаративной HPLC на колонке YMC-Actus Triart C18 (150×30 мм, размер частиц 5 мкм), которую элюировали смесью 12-52% MeCN/H2O (+0,05% HCl) с расходом 30 мл/мин с получением 6-[этил(метил)амино]-4-[(метиламино)-метил]-2-[6-(4-пропил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)пиридин-2-ил]-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-она, выделенного в форме гидрохлорида (62,2 мг, 72% выход) в виде желтого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 9,15 (д, J=8,2 Гц, 2H), 8,85 (с, 1H), 8,65 (д, J=8,2 Гц, 1H), 8,16-8,10 (м, 1H), 8,04-7,98 (м, 1H), 6,92 (с, 1H), 5,13 (с, 2H), 4,58 (т, J=7,2 Гц, 2H), 4,33 (т, J=5,9 Гц, 2H), 3,72 (кв, J=7,0 Гц, 2H), 3,12 (с, 3H), 2,73 (т, J=5,4 Гц, 3H), 1,87 (г, J=7,4 Гц, 2H), 1,12 (т, J=7,0 Гц, 3H), 0,93 (т, J=7,4 Гц, 3H); m/z (ESI+) для (C22H28N8O), 421,2 (M+H)+.
Пример 60: 4-(аминометил)-6-[этил(метил)амино]-2-[6-(4-этил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)пиридин-2-ил]-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
Стадия 1: 4-хлор-6-[этил(метил)амино]-2-[6-(4-этил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)пиридин-2-ил]-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
Смесь 4-хлор-6-[этил(метил)амино]-2,3-дигидро-1H-пирроло-[3,4-c]пиридин-1-она (промежуточного соединения 9) (123 мг, 0,487 ммоль), промежуточного соединения 12 (110 мг, 0,487 ммоль), K2CO3 (196 мг, 1,42 ммоль), N,N-диметилэтилендиамина (28,4 мг, 0,322 ммоль) и CuI (30,7 мг, 0,161 ммоль) в MeCN (4,0 мл) перемешивали при 120°C в течение 90 минут при микроволновом излучении. Анализ методом LCMS показывал полный расход исходного материала. Смесь фильтровали через целит®. Осадок на фильтре промывали смесью 10% MeOH/DCM, и объединенный фильтрат концентрировали досуха. Остаток очищали флэш-хроматографией (12 г SiO2, 0-10% MeOH/DCM) с получением 4-хлор-6-[этил(метил)амино]-2-[6-(4-этил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)пиридин-2-ил]-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-она (173 мг, 89% выход) в виде желтого твердого вещества. m/z (APCI+) для (C19H20ClN7O), 398,2 (M+H)+.
Стадия 2: 4-(аминометил)-6-[этил(метил)амино]-2-[6-(4-этил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)пиридин-2-ил]-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
Смесь 4-хлор-6-[этил(метил)амино]-2-[6-(4-этил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)пиридин-2-ил]-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-она (172 мг, 0,432 ммоль), N-Boc-аминометилтрифторбората калия (205 мг, 0,865 ммоль), K2CO3 (299 мг, 2,16 ммоль), cataCXium A (31,0 мг, 0,0865 ммоль), Pd(OAc)2 (19,4 мг, 0,0865 ммоль) и тетраэтиламмония тетрафторбората (93,8 мг, 0,432 ммоль) в t-AmOH (4,0 мл) и H2O (0,4 мл) перемешивали при 110°C в течение 20 часов в атмосфере N2. Анализ методом LCMS показывал полный расход исходного материала. Смесь охлаждали до комнатной температуры, разбавляли H2O (10 мл) и экстрагировали с помощью DCM (2×10 мл). Объединенные органические слои сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток переносили в DCM (2,0 мл) и обрабатывали с помощью TFA (1,0 мл). Смесь перемешивали в течение 2 часов и затем концентрировали досуха. Остаток очищали препаративной SFC на колонке Princeton SFC HA-морфолин (150×4,6 мм, размер частиц 5 мкм), которую элюировали смесью 5-50% MeOH/CO2 с расходом 4,0 мл/мин, с получением 4-(аминометил)-6-[этил(метил)амино]-2-[6-(4-этил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)пиридин-2-ил]-2,3-дигидро-1H-пирроло-[3,4-c]пиридин-1-она (114,4 мг, 67% выход) в виде твердого вещества. 1H ЯМР (600 МГц, DMSO-d6) δ 8,75 (с, 1H), 8,60 (д, J=8,4 Гц, 1H), 8,32 (с, 3H), 8,12-8,06 (м, 1H), 7,98 (д, J=7,6 Гц, 1H), 6,87 (с, 1H), 5,11 (с, 2H), 4,61 (кв, J=7,2 Гц, 2H), 4,26 (с, 2H), 3,70 (кв, J=7,0 Гц, 2H), 3,11 (с, 3H), 1,47 (т, J=7,1 Гц, 3H), 1,12 (т, J=7,0 Гц, 3H); m/z (APCI+) для (C20H24N8O), 393,0 (M+H)+.
Пример 61: 4-(аминометил)-2-[6-(4-этил-5-метил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)пиридин-2-ил]-6-[(2R)-2-метилпирролидин-1-ил]-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
Стадия 1: 4-хлор-2-[6-(5-метил-1,3,4-оксадиазол-2-ил)-пиридин-2-ил]-6-[(2R)-2-метилпирролидин-1-ил]-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
Смесь промежуточного соединения 10 (142 мг, 0,593 ммоль), промежуточного соединения 4 (120 мг, 0,477 ммоль), K2CO3 (145 мг, 1,05 ммоль), CuI (22,7 мг, 0,119 ммоль) и N,N-диметилэтилендиамина (21,0 мг, 0,238 ммоль) в MeCN (3,0 мл) перемешивали при 120°C в течение 90 минут при микроволновом излучении. Анализ методом LCMS показывал полный расход исходного материала. Смесь концентрировали досуха, и остаток очищали флэш-хроматографией (SiO2, 1:1 EtOAc/DCM) с получением 4-хлор-2-[6-(5-метил-1,3,4-оксадиазол-2-ил)пиридин-2-ил]-6-[(2R)-2-метилпирролидин-1-ил]-2,3-дигидро-1H-пирроло-[3,4-c]пиридин-1-она (162 мг, 83% выход) в виде бледно-желтой пены. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,79 (д, J=8,07 Гц, 1H), 7,91-8,08 (м, 2H), 6,76 (с, 1H), 5,13 (с, 2H), 4,23 (квин, J=5,84 Гц, 1H), 3,59-3,70 (м, 1H), 3,36-3,50 (м, 1H), 2,73 (с, 3H), 2,10-2,29 (м, 2H) 1,97-2,09 (м, 1H), 1,74-1,86 (м, 1H) 1,28 (д, J=6,36 Гц, 3H); m/z (APCI+) для (C20H19ClN6O2), 411,0 (M+H)+.
Стадия 2: трет-бутил ({2-[6-(5-метил-1,3,4-оксадиазол-2-ил)пиридин-2-ил]-6-[(2R)-2-метилпирролидин-1-ил]-1-оксо-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-4-ил}метил)карбамат
Смесь 4-хлор-2-[6-(5-метил-1,3,4-оксадиазол-2-ил)пиридин-2-ил]-6-[(2R)-2-метилпирролидин-1-ил]-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-она (160 мг, 0,389 ммоль), N-Boc-аминометил-трифторбората калия (369 мг, 1,56 ммоль), cataCXium (27,9 мг, 0,0779 ммоль), Pd(OAc)2 (17,5 мг, 0,0779 ммоль) и тетраэтиламмония тетрафторбората (84,5 мг, 0,389 ммоль) в t-BuOH (6,0 мл) и H2O (0,6 мл) перемешивали при 110°C в течение 18 часов. Анализ методом LCMS показывал полный расход исходного материала. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, разбавляли H2O (10 мл) и экстрагировали с помощью DCM (2×10 мл). Объединенные органические слои сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (12 г SiO2, 30-100% EtOAc/гептан) с получением трет-бутил ({2-[6-(5-метил-1,3,4-оксадиазол-2-ил)-пиридин-2-ил]-6-[(2R)-2-метилпирролидин-1-ил]-1-оксо-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-4-ил}метил)карбамата (182 мг, 92% выход) в виде белого твердого вещества. m/z (APCI+) для (C26H31N7O4), 506,2 (M+H)+.
Стадия 3: 4-(аминометил)-2-[6-(4-этил-5-метил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)пиридин-2-ил]-6-[(2R)-2-метилпирролидин-1-ил]-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
Смесь трет-бутил ({2-[6-(5-метил-1,3,4-оксадиазол-2-ил)пиридин-2-ил]-6-[(2R)-2-метилпирролидин-1-ил]-1-оксо-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-4-ил}метил)карбамата (84 мг, 0,17 ммоль), гидрохлорида этиламина (279 мг, 3,42 ммоль) и TEA (353 мг, 3,49 ммоль) в NMP (1,0 мл) перемешивали при 140°C в течение 18 часов. Анализ методом LCMS показывал полный расход исходного материала. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, разбавляли H2O (20 мл) и экстрагировали с помощью EtOAc (20 мл). Органический слой сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (0-10% MeOH/DCM). Требуемые фракции концентрировали досуха. Остаток растворяли в DCM (5,0 мл) и обрабатывали раствором HCl (4,0 N в 1,4-диоксане, 1,0 мл). Смесь перемешивали в течение 4 часов и затем концентрировали досуха. Остаток очищали препаративной HPLC на колонке Phenemonex Gemini NX C18 (150×21,2 мм, размер частиц 5 мкм), которую элюировали смесью 30-100% MeCN/H2O (+10 мМ NH4OAc) с расходом 40 мл/мин, с получением трет-бутил ({2-[6-(5-метил-1,3,4-оксадиазол-2-ил)пиридин-2-ил]-6-[(2R)-2-метилпирролидин-1-ил]-1-оксо-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-4-ил}метил)карбамата (24,0 мг, 33% выход) в виде твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 8,59 (дд, J=8,3, 0,9 Гц, 1H), 8,08-8,01 (м, 1H), 7,96 (дд, J=7,7, 1,0 Гц, 1H), 6,60 (с, 1H), 5,19 (с, 2H), 4,56 (кв, J=7,1 Гц, 2H), 4,31-4,20 (м, 1H), 3,91 (с, 2H), 3,53-3,43 (4H перекрыт пиком растворителя), 3,21 (с, 3H), 2,15-2,03 (м, 2H), 1,45 (т, J=7,1 Гц, 3H), 1,24 (д, J=6,2 Гц, 3H); m/z (APCI+) для (C23H28N8O), 433,3 (M+H)+.
Пример 62: 4-[(метиламино)метил]-2-[6-(5-метил-4-пропил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)пиридин-2-ил]-6-[(2R)-2-метилпирролидин-1-ил]-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
Стадия 1: трет-бутил ({6-хлор-2-[6-(5-метил-1,3,4-оксадиазол-2-ил)пиридин-2-ил]-1-оксо-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-4-ил}метил)метилкарбамат
Смесь промежуточного соединения 2 (200 мг, 0,642 ммоль), промежуточного соединения 4 (154 мг, 0,642 ммоль), K2CO3 (195 мг, 1,41 ммоль), CuI (30,5 мг, 0,160 ммоль) и N,N-диметилэтилендиамина (28,3 мг, 0,321 ммоль) в MeCN (2,0 мл) продували с помощью N2 в течение 5 минут и затем перемешивали при 120°C в течение 100 минут при микроволновом излучении. Анализ методом LCMS показывал полный расход исходного материала. Смесь фильтровали через слой целита®, и фильтрат концентрировали досуха. Остаток очищали флэш-хроматографией (SiO2, 0-70% [8:1:1 EtOAc/MeOH/DCM]/гептан) с получением трет-бутил ({6-хлор-2-[6-(5-метил-1,3,4-оксадиазол-2-ил)пиридин-2-ил]-1-оксо-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-4-ил}метил)метилкарбамата (217 мг, 72% выход) в виде белого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 8,68 (д, J=8,5 Гц, 1H), 8,22-8,14 (м, 1H), 8,00 (д, J=7,6 Гц, 1H), 7,87 (с, 1H), 5,21 (с, 2H), 4,71 (с, 2H), 3,29 (с, 3H), 2,64 (с, 3H), 1,43 (с, 4H), 1,36 (с, 5H); m/z (ESI+) для (C22H23ClN6O4), 471,3 (M+H)+.
Стадия 2: трет-бутил ({6-хлор-2-[6-(5-метил-4-пропил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)пиридин-2-ил]-1-оксо-2,3-дигидро-1H-пирроло-[3,4-c]пиридин-4-ил}метил)метилкарбамат
Эту реакцию проводили в двух параллельных экспериментах. К смеси трет-бутил ({6-хлор-2-[6-(5-метил-1,3,4-оксадиазол-2-ил)пиридин-2-ил]-1-оксо-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-4-ил}метил)метилкарбамата (100 мг, 0,212 ммоль) и уксусной кислоты (31,9 мг, 0,531 ммоль) в MeCN (2,5 мл) добавляли N-пропиламина гидрохлорид (203 мг, 2,12 ммоль) и TEA (215 мг, 2,12 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 100°C в течение 16 часов. Смесь концентрировали досуха. Объединенные неочищенные остатки реакционных сред очищали флэш-хроматографией (12 г SiO2, 40-100% EtOAc/гептан затем 10% MeOH/EtOAc) с получением трет-бутил ({6-хлор-2-[6-(5-метил-4-пропил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)пиридин-2-ил]-1-оксо-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-4-ил}метил)метил-карбамата (68,4 мг, 31% выход) в виде желтовато-белой пены. 1H ЯМР (600 МГц, DMSO-d6) δ 8,59 (д, J=8,4 Гц, 1H), 8,15-8,09 (м, 1H), 7,96 (д, J=7,6 Гц, 1H), 7,87 (с, 1H), 5,26-5,15 (м, 2H), 4,65 (с, 2H), 4,53-4,45 (м, 2H), 2,93 (с, 3H), 2,49 (с, 3H), 1,77-1,68 (м, 2H), 1,37 (с, 5H), 1,23 (с, 4H), 0,86 (т, J=7,4 Гц, 3H); m/z (ESI+) для (C25H30ClN7O3), 512,3 (M+H)+.
Стадия 3: 4-[(метиламино)метил]-2-[6-(5-метил-4-пропил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)пиридин-2-ил]-6-[(2R)-2-метилпирролидин-1-ил]-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-она трифторацетат
Смесь трет-бутил ({6-хлор-2-[6-(5-метил-4-пропил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)пиридин-2-ил]-1-оксо-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]-пиридин-4-ил}метил)метилкарбамата (50,0 мг, 0,098 ммоль), (2R)-2-метилпирролидина (41,6 мг, 0,488 ммоль), Cs2CO3 (95,5 мг, 0,293 ммоль) и RuPhos-Pd G3 (12,3 мг, 0,0146 ммоль) продували с помощью N2 в течение 5 минут и затем перемешивали при 100°C в течение 18 часов. Смесь охлаждали до комнатной температуры и фильтровали через целит®. Осадок на фильтре промывали смесью 10% MeOH/EtOAc. Объединенный фильтрат концентрировали досуха. Остаток растворяли в DCM (1,5 мл) и добавляли TFA (0,6 мл). Смесь перемешивали в течение 30 минут и затем концентрировали досуха. Остаток очищали препаративной HPLC на колонке Waters Sunfire C-18 (19×100 мм, размер частиц 5 мкм), которую элюировали смесью 5-100% MeCN/H2O (+0,05% TFA) с расходом 25 мл/мин, с получением 4-[(метиламино)метил]-2-[6-(5-метил-4-пропил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)пиридин-2-ил]-6-[(2R)-2-метилпирролидин-1-ил]-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-она, выделяемого в форме трифторацетатной соли (38 мг, 68% выход) в виде твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 8,85 (с, 3H), 8,63 (д, J=8,4 Гц, 1H), 8,16-8,06 (м, 1H), 7,96 (д, J=7,6 Гц, 1H), 6,75 (с, 1H), 5,10 (с, 2H), 4,44 (дд, J=8,6, 6,6 Гц, 2H), 4,38-4,31 (м, 3H), 3,65 (т, J=9,0 Гц, 1H), 2,81-2,73 (м, 3H), 2,54 (с, 3H), 2,16-1,96 (м, 4H), 1,85-1,71 (м, 3H), 1,20 (д, J=6,2 Гц, 3H), 0,93 (т, J=7,4 Гц, 3H); m/z (ESI+) для (C25H32N8O), 461,7 (M+H)+. [∝]D22 = -53,3° (c= 0,5, MeOH).
Пример 63: 4-[(метиламино)метил]-6-[метил(пропан-2-ил)амино]-2-[6-(4-пропил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)пиридин-2-ил]-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
Стадия 1: метил 6-[метил(пропан-2-ил)амино]-1-оксо-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-4-карбоксилат
Смесь промежуточного соединения 11 (11,3 г, 47,1 ммоль), PdCl2(dppf) (2,16 г, 2,95 ммоль) и TEA (14,3 г, 141 ммоль) в MeOH (200 мл) перемешивали при 80°C в течение 40 часов в атмосфере CO при давлении 0,35 МПа. Анализ методом TLC (1:1 EtOAc/петролейный эфир) показывал полный расход исходного материала. Реакционную смесь концентрировали досуха. Остаток растворяли в H2O (200 мл) и экстрагировали с помощью DCM (2×150 мл). Объединенные органические слои промывали солевым раствором (200 мл), сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток суспендировали в DCM (50 мл) в течение 30 минут. Твердые вещества собирали фильтрацией. Осадок на фильтре промывали петролейным эфиром (3×5 мл) и сушили под вакуумом. Фильтрат очищали флэш-хроматографией (SiO2, 40-70% EtOAc/DCM). Требуемые фракции концентрировали досуха и объединяли с полученным выше осадком на фильтре с получением метил 6-[метил(пропан-2-ил)амино]-1-оксо-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]-пиридин-4-карбоксилата (12,3 г, 99% выход) в виде желтого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 7,12 (с, 1H), 6,79 (с, 1H), 4,89 (п, J=6,6 Гц, 1H), 4,68 (д, J=1,1 Гц, 2H), 3,97 (с, 3H), 2,96 (с, 3H), 1,21 (д, J=6,7 Гц, 6H); m/z (ESI+) для (C13H17N3O3), 263,9 (M+H)+.
Стадия 2: 4-(гидроксиметил)-6-[метил(пропан-2-ил)амино]-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
К смеси метил 6-[метил(пропан-2-ил)амино]-1-оксо-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-4-карбоксилата (1,0 г, 3,80 ммоль) в THF (60 мл) добавляли по каплям раствор LiAlH4 (2,5 M в THF, 1,67 мл, 4,18 ммоль) при 0°C. Смесь перемешивали при 0°C в течение 1 часа, и затем при 20°C в течение 16 часов. Анализ методом TLC (1:1 EtOAc/петролейный эфир) показывал полный расход исходного материала. Смесь гасили путем добавления 20% водного раствора NaOH (0,5 мл). К смеси добавляли Na2SO4 (4 г). Смесь перемешивали в течение 30 минут и затем фильтровали. Фильтрат концентрировали досуха с получением 4-(гидроксиметил)-6-[метил(пропан-2-ил)амино]-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-она (890 мг, >99% выход) в виде желтого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 7,04 (с, 1H), 6,82 (с, 1H), 4,85 (п, J=6,6 Гц, 1H), 4,67 (д, J=4,7 Гц, 2H), 4,33 (с, 2H), 4,09 (т, J=4,6 Гц, 1H), 2,92 (с, 3H), 1,20 (д, J=6,7 Гц, 6H); m/z (ESI+) для (C12H17N3O2), 236,0 (M+H)+.
Стадия 3: {6-[метил(пропан-2-ил)амино]-1-оксо-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-4-ил}метил метансульфонат
К смеси 4-(гидроксиметил)-6-[метил(пропан-2-ил)амино]-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-она (890 мг, 3,78 ммоль) и TEA (957 мг, 9,46 ммоль) в THF (20,0 мл) добавляли по каплям MsCl (953 мг, 8,23 ммоль) при 0°C в атмосфере N2. Смесь перемешивали при 0°C. Анализ методом LCMS показывал полный расход исходного материала. Реакционную смесь разбавляли насыщенным водным раствором Na2CO3 (30 мл) и экстрагировали с помощью EtOAc (2×20 мл). Объединенные органические слои промывали солевым раствором (30 мл), сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали с получением {6-[метил(пропан-2-ил)амино]-1-оксо-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]-пиридин-4-ил}метил метансульфоната (1,2 г, >99% выход) в виде желтого твердого вещества, которое использовали без дополнительной очистки. m/z (ESI+) для (C13H19N3O4S), 314,0 (M+H)+.
Стадия 4: 4-[(метиламино)метил]-6-[метил(пропан-2-ил)амино]-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
К смеси {6-[метил(пропан-2-ил)амино]-1-оксо-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-4-ил}метил метансульфоната (1,18 г, 3,78 ммоль) в THF (20,0 мл) добавляли раствор метиламина (2,0 M в THF, 37,8 мл, 75,6 ммоль). Смесь перемешивали в течение 1 часа. Анализ методом LCMS указывал на полный расход исходного материала. Смесь концентрировали досуха с получением 4-[(метиламино)метил]-6-[метил(пропан-2-ил)амино]-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-она (940 мг, >99% выход) в виде коричневого твердого вещества, которое использовали без дополнительной очистки. m/z (ESI+) для (C13H20N4O), 249,0 (M+H)+.
Стадия 5: трет-бутил метил({6-[метил(пропан-2-ил)амино]-1-оксо-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-4-ил}метил)карбамат
К раствору 4-[(метиламино)метил]-6-[метил(пропан-2-ил)амино]-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-она (940 мг, 11,4 ммоль) и TEA (1,15 г, 11,4 ммоль) в DCM (20,0 мл) добавляли Boc2O (1,65 мг, 7,57 ммоль). Смесь перемешивали в течение 30 минут. Анализ методом LCMS показывал полный расход исходного материала. Реакционную смесь концентрировали досуха. Остаток очищали флэш-хроматографией (SiO2, EtOAc) с получением трет-бутил метил({6-[метил(пропан-2-ил)амино]-1-оксо-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]-пиридин-4-ил}метил)карбамат (600 мг, 46% выход) в виде желтого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 6,81 (с, 1H), 6,57-6,42 (м, 1H), 4,91 (п, J=6,6 Гц, 1H), 4,48 (с, 2H), 4,35 (д, J=12,4 Гц, 2H), 2,92 (с, 3H), 2,88 (с, 3H), 1,48 (с, 5H), 1,41 (с, 4H), 1,17 (д, J=6,7 Гц, 6H); m/z (ESI+) для (C18H28N4O3), 349,2 (M+H)+.
Стадия 6: трет-бутил метил({6-[метил(пропан-2-ил)амино]-1-оксо-2-[6-(4-пропил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)пиридин-2-ил]-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-4-ил}метил)карбамат
К смеси трет-бутил метил({6-[метил(пропан-2-ил)амино]-1-оксо-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-4-ил}метил)карбамата (80 мг, 0,23 ммоль), промежуточного соединения 13 (64,4 мг, 0,24 ммоль) и K3PO4 (146 мг, 0,69 ммоль) в 1,4-диоксане (3,0 мл) добавляли Pd2(dba)3 (21,0 мг, 0,023 ммоль) и Xantphos (26,6 мг, 0,046 ммоль). Смесь продували с помощью N2 в течение 2 минут и затем перемешивали при 85°C в течение 18 часов. Анализ методом LCMS указывал на полный расход исходного материала. Реакционную смесь концентрировали досуха. Остаток очищали флэш-хроматографией (SiO2, 1:10 MeOH/EtOAc) с получением трет-бутил метил({6-[метил(пропан-2-ил)амино]-1-оксо-2-[6-(4-пропил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)пиридин-2-ил]-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-4-ил}метил)карбамата (90 мг, 73% выход) в виде коричневого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,71 (д, J=8,4 Гц, 1H), 8,23 (с, 1H), 8,14-8,06 (м, 1H), 7,96-7,87 (м, 1H), 6,86 (с, 1H), 5,04 (с, 1H), 5,00-4,90 (м, 2H), 4,68-4,57 (м, 2H), 4,51 (с, 2H), 3,03-2,93 (м, 3H), 2,92 (с, 3H), 1,90 (с, 2H), 1,41 (с, 5H), 1,33 (с, 4H), 1,20 (д, J=6,7 Гц, 6H), 0,98-0,91 (м, 3H); m/z (ESI+) для (C28H38N8O3), 535,4 (M+H)+.
Стадия 7: 4-[(метиламино)метил]-6-[метил(пропан-2-ил)амино]-2-[6-(4-пропил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)пиридин-2-ил]-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-она гидрохлорид
К раствору трет-бутил метил({6-[метил(пропан-2-ил)амино]-1-оксо-2-[6-(4-пропил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)пиридин-2-ил]-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-4-ил}метил)карбамата (90 мг, 0,17 ммоль) в EtOAc (5,0 мл) добавляли раствор HCl (4,0 M в EtOAc, 2,0 мл) при 0°C. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 4 часов. Анализ методом LCMS показывал полный расход исходного материала. Реакционную смесь концентрировали под вакуумом и затем сушили путем лиофилизации с получением 4-[(метиламино)метил]-6-[метил(пропан-2-ил)амино]-2-[6-(4-пропил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)пиридин-2-ил]-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-она, выделяемого в форме гидрохлорида (62,9 мг, 79% выход) в виде желтого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 9,21 (с, 1H), 8,65 (дд, J=8,4, 0,9 Гц, 1H), 8,17-8,10 (м, 1H), 7,99 (дд, J=7,6, 0,9 Гц, 1H), 6,88 (с, 1H), 5,10 (с, 2H), 5,05-4,92 (м, 1H), 4,60 (дд, J=8,1, 6,4 Гц, 2H), 4,31 (с, 2H), 2,90 (с, 3H), 2,71 (с, 3H), 1,88 (г, J=7,3 Гц, 2H), 1,14 (д, J=6,6 Гц, 6H), 0,92 (т, J=7,4 Гц, 3H); m/z (ESI+) для (C23H30N8O), 435,3 (M+H)+.
Пример 64: 4-[(метиламино)метил]-6-[метил(пропан-2-ил)амино]-2-[6-(5-метил-4-пропил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)пиридин-2-ил]-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
Стадия 1: трет-бутил метил({6-[метил(пропан-2-ил)амино]-2-[6-(5-метил-4-пропил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)пиридин-2-ил]-1-оксо-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-4-ил}метил)карбамат
К смеси трет-бутил метил({6-[метил(пропан-2-ил)амино]-1-оксо-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-4-ил}метил)карбамата (смотрите синтез в примере 63) (200 мг, 0,574 ммоль), промежуточного соединения 17 (169 мг, 0,603 ммоль) и K3PO4 (366 мг, 1,72 ммоль) в 1,4-диоксане (10,0 мл) в атмосфере N2 добавляли Pd2(dba)3 (52,6 мг, 0,0574 ммоль) и Xantphos (66,4 мг, 0,115 ммоль). Смесь герметизировали и перемешивали при 85°C в течение 18 часов. Анализ методом TLC (EtOAc) показывал полный расход исходного материала. Реакционную смесь концентрировали досуха, и остаток очищали флэш-хроматографией (SiO2, 1:20 MeOH/EtOAc). Следующие стадии проводили последовательно пять раз. Остаток растворяли в смеси 1:10 MeOH/EtOAc (30 мл) и добавляли особо чистый Si-Thio SiO2 (1 г). Смесь перемешивали при 50°C в течение 30 минут. Смесь фильтровали, и осадок на фильтре промывали смесью 1:10 MeOH/EtOAc (3×30 мл). Фильтрат концентрировали досуха. Полученный остаток очищали флэш-хроматографией (SiO2, 1:10 MeOH/EtOAc) с получением трет-бутил метил({6-[метил(пропан-2-ил)амино]-2-[6-(5-метил-4-пропил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)пиридин-2-ил]-1-оксо-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-4-ил}метил)карбамата (250 мг, 79% выход) в виде желтого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,68 (д, J=9,4 Гц, 1H), 8,04 (д, J=7,7 Гц, 1H), 7,94-7,85 (м, 1H), 6,86 (с, 1H), 5,02 (с, 1H), 4,94 (д, J=9,4 Гц, 2H), 4,53 (с, 3H), 3,01-2,94 (м, 4H), 2,92 (с, 3H), 2,55 (с, 3H), 1,75 (с, 2H), 1,47-1,27 (м, 9H), 1,20 (д, J=6,7 Гц, 6H), 0,90 (т, J=7,3 Гц, 3H); LCMS m/z (ESI+) для (C29H40N8O3), 549,6 (M+H)+.
Стадия 2: 4-[(метиламино)метил]-6-[метил(пропан-2-ил)амино]-2-[6-(5-метил-4-пропил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)пиридин-2-ил]-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-она гидрохлорид
Раствор трет-бутил метил({6-[метил(пропан-2-ил)амино]-2-[6-(5-метил-4-пропил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)пиридин-2-ил]-1-оксо-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-4-ил}метил)карбамата (250 мг, 0,456 ммоль) в EtOAc (5,0 мл) охлаждали до 0°C и обрабатывали раствором HCl (4,0 N в EtOAc, 3,0 мл). Смесь перемешивали при 25°C в течение 1 часа. Анализ методом LCMS показывал полный расход исходного материала. Смесь концентрировали досуха. Остаток очищали препаративной HPLC на колонке Phenomenex Gemini-NX (150×30 мм, размер частиц 5 мкм), которую элюировали смесью 19-39% MeCN/H2O (+0,05% HCl) с расходом 30 мл/мин, с получением 4-[(метиламино)метил]-6-[метил(пропан-2-ил)амино]-2-[6-(5-метил-4-пропил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)пиридин-2-ил]-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-она, выделяемого в форме гидрохлоридной соли (140 мг, 63% выход) в виде желтого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 9,30 (с, 2H), 8,71 (д, J=8,5 Гц, 1H), 8,21-8,14 (м, 1H), 7,98 (д, J=7,6 Гц, 1H), 6,92 (с, 1H), 5,15 (с, 2H), 5,11-4,98 (м, 1H), 4,58-4,48 (м, 2H), 4,30 (т, J=5,8 Гц, 2H), 2,93 (с, 3H), 2,71 (т, J=5,4 Гц, 3H), 2,67 (с, 3H), 1,87 (п, J=7,5 Гц, 2H), 1,17 (д, J=6,6 Гц, 6H), 0,97 (т, J=7,4 Гц, 3H); LCMS m/z (ESI+) для (C24H32N8O), 449,2 (M+H)+.
В качестве варианта, соединения примера 64 было также получено следующим методом.
Стадия 1: трет-бутил метил({6-[метил(пропан-2-ил)амино]-2-[6-(5-метил-4-пропил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)пиридин-2-ил]-1-оксо-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-4-ил}метил)карбамат
К смеси трет-бутил метил({6-[метил(пропан-2-ил)амино]-1-оксо-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-4-ил}метил)карбамата (смотрите синтез в пример 63) (7000 мг, 20,09 ммоль), промежуточного соединения 17 (5650, 20,1 ммоль) и K3PO4 (12800 мг, 60,3 ммоль) в 1,4-диоксане (70 мл) в атмосфере N2 добавляли Pd2(dba)3 (1840 мг, 2,01 ммоль) и Xantphos (2320 мг, 4,02 ммоль). Смесь герметизировали и перемешивали при 85°C в течение 18 часов. Анализ методом TLC (EtOAc) показывал полный расход исходного материала. Реакционную смесь фильтровали через слой целита®, и осадок на фильтре промывали с помощью EtOAc (250 мл). Фильтрат концентрировали до остатка, который растирали с 35 мл смеси 60:40 EtOAc:H2O. Суспензию затем фильтровали, и осадок на фильтре сушили под вакуумом с получением трет-бутил метил({6-[метил(пропан-2-ил)амино]-2-[6-(5-метил-4-пропил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)пиридин-2-ил]-1-оксо-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-4-ил}метил)-карбамата (10400 мг, 94% выход) в виде желтого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,68 (д, J=9,4 Гц, 1H), 8,04 (д, J=7,7 Гц, 1H), 7,94-7,85 (м, 1H), 6,86 (с, 1H), 5,02 (с, 1H), 4,94 (д, J=9,4 Гц, 2H), 4,53 (с, 3H), 3,01-2,94 (м, 4H), 2,92 (с, 3H), 2,55 (с, 3H), 1,75 (с, 2H), 1,47-1,27 (м, 9H), 1,20 (д, J=6,7 Гц, 6H), 0,90 (т, J=7,3 Гц, 3H); LCMS m/z (ESI+) для (C29H40N8O3), 549,3 (M+H)+.
Стадия 2: 4-[(метиламино)метил]-6-[метил(пропан-2-ил)амино]-2-[6-(5-метил-4-пропил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)пиридин-2-ил]-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
Раствор трет-бутил метил({6-[метил(пропан-2-ил)амино]-2-[6-(5-метил-4-пропил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)пиридин-2-ил]-1-оксо-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-4-ил}метил)карбамата (10400 мг, 18,95 ммоль) в EtOAc (15,0 мл) и MeOH (5 мл) охлаждали до 0°C и обрабатывали раствором HCl (4,0 N в EtOAc, 100 мл). Смесь перемешивали при 25°C в течение 4 часов. Анализ методом TLC (EtOAc, 254 нм, УФ) показывал полный расход исходного материала. Реакционную смесь фильтровали и концентрировали до остатка, который растворяли в воде (200 мл) и экстрагировали с помощью EtOAc (150 мл). К водному слою добавляли DCM (250 мл) и затем добавляли твердый NaHCO3 до тех пор, пока величина pH смеси не достигала ~8. Слои разделяли, и водный слой экстрагировали с помощью DCM (2×100 мл). Объединенные органические слои промывали солевым раствором (150 мл), сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали до остатка. Остаток растирали с 22 мл смеси 10:1 EtOAc:MeCN, и суспензию фильтровали, осадок на фильтре сушили под вакуумом с получением 4-[(метиламино)метил]-6-[метил(пропан-2-ил)амино]-2-[6-(5-метил-4-пропил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)пиридин-2-ил]-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-она (5,59 г, 66% выход) в виде желтого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,73 (д, J=8,5 Гц, 1H), 8,13 (д, J=7,8 Гц, 1H), 7,92 (т, J=8,0 Гц, 1H), 6,88 (с, 1H), 5,05 (с, 2H), 4,98-4,92 (м, 1H), 4,53-4,45 (м, 2H), 3,88 (с, 2H), 2,95 (с, 3H), 2,58 (с, 3H), 2,55 (с, 3H), 1,91-1,85 (м, 2H), 1,23 (д, J=6,8 Гц, 6H), 1,04 (т, J=7,4 Гц, 3H); LCMS m/z (ESI+) для (C24H32N8O), 449,2 (M+H)+.
Пример 65: 2-[6-(4-циклобутил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)пиридин-2-ил]-4-[(метиламино)метил]-6-(1-метилциклопропил)-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
Стадия 1: метил 6-[4-{[(трет-бутоксикарбонил)(метил)-амино]метил}-6-(1-метилциклопропил)-1-оксо-1,3-дигидро-2H-пирроло[3,4-c]пиридин-2-ил]пиридин-2-карбоксилат
К смеси промежуточного соединения 8 (1,50 г, 4,53 ммоль), метил 6-бромпиридин-2-карбоксилата (1,17 г, 5,43 ммоль) и K3PO4 (2,88 г, 13,6 ммоль) в 1,4-диоксане (50,0 мл) в атмосфере N2 добавляли Pd2(dba)3 (414 мг, 0,453 ммоль) и Xantphos (524 мг, 0,905 ммоль). Смесь продували с помощью N2 в течение 2 минут и затем герметизировали, и перемешивали при 85°C в течение 5 часов. Анализ методом LCMS показывал полный расход исходного материала. Реакционную смесь разбавляли H2O (50 мл) и экстрагировали с помощью EtOAc (3×50 мл). Объединенные органические слои промывали солевым раствором (50 мл), сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (SiO2, 1:3 EtOAc/петролейный эфир) с получением метил 6-[4-{[(трет-бутоксикарбонил)(метил)амино]метил}-6-(1-метилциклопропил)-1-оксо-1,3-дигидро-2H-пирроло[3,4-c]пиридин-2-ил]пиридин-2-карбоксилата (1,89 г, 89% выход) в виде коричневого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,95-8,61 (м, 1H), 7,96-7,83 (м, 2H), 7,78-7,62 (м, 1H), 5,18 (с, 2H), 4,64 (д, J=10,3 Гц, 2H), 3,99 (с, 3H), 2,96 (с, 3H), 1,58 (с, 3H), 1,53-1,41 (м, 9H), 1,33 (кв, J=3,7 Гц, 2H), 0,95-0,77 (м, 2H); LCMS m/z (ESI+) для (C25H30N4O5), 467,4 (M+H)+.
Стадия 2: трет-бутил ({2-[6-(гидразинкарбонил)пиридин-2-ил]-6-(1-метилциклопропил)-1-оксо-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]-пиридин-4-ил}метил)метилкарбамат
К суспензии метил 6-[4-{[(трет-бутоксикарбонил)(метил)-амино]метил}-6-(1-метилциклопропил)-1-оксо-1,3-дигидро-2H-пирроло[3,4-c]пиридин-2-ил]пиридин-2-карбоксилата (1,89 г, 4,05 ммоль) в MeOH (50,0 мл) добавляли моногидрат гидразина (715 мг, 12,1 ммоль). Смесь перемешивали в течение 3 часов. Анализ методом TLC (1:3 EtOAc/петролейный эфир) показывал полный расход исходного материала. Реакционную смесь концентрировали досуха с получением трет-бутил ({2-[6-(гидразинкарбонил)пиридин-2-ил]-6-(1-метилцикло-пропил)-1-оксо-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-4-ил}метил)-метилкарбамата (1,74 г, 92% выход) в виде желтого твердого вещества, которое использовали без дополнительной очистки. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 10,09-9,54 (м, 1H), 8,73-8,52 (м, 1H), 8,17-7,98 (м, 1H), 7,82 (д, J=7,4 Гц, 1H), 7,56 (с, 1H), 5,29 (д, J=8,3 Гц, 2H), 4,81-4,07 (м, 4H), 2,93 (с, 3H), 1,55 (с, 3H), 1,44 уш.с, 4H), 1,28-1,15 (м, 7H), 0,94-0,70 (м, 2H); LCMS m/z (ESI+) для (C24H30N6O4), 467,3 (M+H)+.
Стадия 3: трет-бутил {[2-(6-{(2E)-2-[(диметиламино)-метилиден]гидразинкарбонил}пиридин-2-ил)-6-(1-метилциклопропил)-1-оксо-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-4-ил]метил}метил-карбамат
Раствор трет-бутил ({2-[6-(гидразинкарбонил)пиридин-2-ил]-6-(1-метилциклопропил)-1-оксо-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]-пиридин-4-ил}метил)метилкарбамат (1,74 г, 3,84 ммоль) в N,N-диметилдиметоксиметиламине (40,0 мл) перемешивали при 80°C в течение 6 часов. Анализ методом TLC (1:10 MeOH/EtOAc) показывал полный расход исходного материала. Смесь концентрировали досуха. Остаток суспендировали с помощью TBME (40 мл) в течение 20 минут. Твердые вещества собирали фильтрацией и сушили под вакуумом с получением трет-бутил {[2-(6-{(2E)-2-[(диметиламино)метилиден]-гидразинкарбонил}пиридин-2-ил)-6-(1-метилциклопропил)-1-оксо-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-4-ил]метил}метилкарбамата (1,76 г, 88% выход) в виде белого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 10,77-10,44 (м, 1H), 8,82-8,34 (м, 1H), 8,25-7,98 (м, 2H), 7,82 (д, J=7,5 Гц, 1H), 7,58 (с, 1H), 5,30 (уш.д, J=11,0 Гц, 2H), 4,66 (с, 2H), 2,92 (с, 3H), 2,91 (с, 6H), 1,56 (с, 3H), 1,43 (с, 4H), 1,25 (д, J=6,9 Гц, 5H), 1,11 (с, 2H), 0,93-0,73 (м, 2H); LCMS m/z (ESI+) для (C27H35N7O4), 522,4 (M+H)+.
Стадия 4: трет-бутил ({2-[6-(4-циклобутил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)пиридин-2-ил]-6-(1-метилциклопропил)-1-оксо-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-4-ил}метил)метилкарбамат
К суспензии трет-бутил {[2-(6-{(2E)-2-[(диметиламино)-метилиден]гидразинкарбонил}пиридин-2-ил)-6-(1-метилциклопропил)-1-оксо-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-4-ил]метил}метил-карбамата (180 мг, 0,345 ммоль) в MeCN (2,0 мл) добавляли циклобутанамин (61,4 мг, 0,863 ммоль) и уксусную кислоту (0,4 мл). Смесь перемешивали при 95°C в течение 3 часов. Анализ методом TLC (1:10 MeOH/EtOAc) показывал полный расход исходного материала. Раствор концентрировали досуха. Остаток растворяли в H2O (20 мл) и экстрагировали с помощью EtOAc (3×20 мл). Объединенные органические слои промывали солевым раствором (30 мл), сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (SiO2, 1:10 MeOH/EtOAc) с получением трет-бутил ({2-[6-(4-циклобутил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)пиридин-2-ил]-6-(1-метил-циклопропил)-1-оксо-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-4-ил}-метил)метилкарбамата (104 мг, 57% выход) в виде белого стеклообразного вещества. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 9,05 уш.с, 1H), 8,62 (уш.д, J=8,3 Гц, 1H), 8,19-8,01 (м, 1H), 7,91 уш.с, J=7,5 Гц, 1H), 7,61 (с, 1H), 5,74-5,55 (м, 1H), 5,25 (с, 2H), 4,61 (с, 2H), 2,97-2,88 (м, 3H), 1,93-1,75 (м, 2H), 1,57 (с, 3H), 1,47-1,10 (м, 15H), 0,94-0,73 (м, 2H); LCMS m/z (ESI+) для (C29H35N7O3), 530,3 (M+H)+.
Стадия 5: 2-[6-(4-циклобутил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)пиридин-2-ил]-4-[(метиламино)метил]-6-(1-метилциклопропил)-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
Раствор трет-бутил ({2-[6-(4-циклобутил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)пиридин-2-ил]-6-(1-метилциклопропил)-1-оксо-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-4-ил}метил)метилкарбамата (104 мг, 0,196 ммоль) в DCM (5,0 мл) охлаждали до 0°C и обрабатывали с помощью TFA (3,0 мл). Смесь перемешивали при 15°C в течение 2 часов. Анализ методом LCMS показывал полный расход исходного материала. Смесь концентрировали досуха. Остаток растворяли в H2O (20 мл) и подщелачивали насыщенным водным раствором Na2CO3 (~3 мл) до pH~9. Смесь экстрагировали с помощью DCM (2×20 мл). Объединенные органические слои промывали солевым раствором (2×15 мл), сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали препаративной HPLC на колонке Agela DuraShell C18 (150×25 мм, размер частиц 5 мкм), которую элюировали смесью 33-63% MeCN/H2O (+0,04% NH4OH, +10 мМ NH4HCO3) с расходом 2 мл/мин. Требуемые фракции повторно очищали препаративной HPLC на колонке Phenomenex Gemini NX (150×30 мм, размер частиц 5 мкм), которую элюировали смесью 36-76% MeCN/H2O (+0,05% NH4OH) с расходом 30 мл/мин, с получением соединения примера 65 (15,4 мг, 18% выход) в виде белого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 9,09 (с, 1H), 8,64 (д, J=8,3 Гц, 1H), 8,24-8,01 (м, 1H), 7,94 (д, J=7,6 Гц, 1H), 7,57 (с, 1H), 5,74 (п, J=8,6 Гц, 1H), 5,35 (с, 2H), 3,94 (с, 2H), 2,61-2,54 (м, 2H), 2,48-2,42 (м, 2H), 2,35 (с, 3H), 1,98-1,78 (м, 2H), 1,56 (с, 3H), 1,38-1,09 (м, 2H), 1,06-0,66 (м, 2H); LCMS m/z (ESI+) для (C24H27N7O), 430,2 (M+H)+.
Пример 66: 2-[6-(4,5-диэтил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)пиридин-2-ил]-4-[(метиламино)метил]-6-[(2R)-2-метилпирролидин-1-ил]-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
Стадия 1: трет-бутил ({2-[6-(4,5-диэтил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)пиридин-2-ил]-6-[(2R)-2-метилпирролидин-1-ил]-1-оксо-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-4-ил}метил)метилкарбамат
К раствору промежуточного соединения 19 (80,0 мг, 0,222 ммоль), промежуточного соединения 18 (93,6 мг, 0,333 ммоль) и K3PO4 (141 мг, 0,666 ммоль) в 1,4-диоксане (5,0 мл) в атмосфере N2 добавляли Pd2(dba)3 (20,3 мг, 0,0223 ммоль) и Xantphos (25,7 мг, 0,0444 ммоль). Смесь продували с помощью N2 в течение 2 минут и затем герметизировали, и перемешивали при 85°C в течение 18 часов. Анализ методом TLC (EtOAc) показывал полный расход исходного материала. Смесь концентрировали досуха. Остаток очищали флэш-хроматографией (SiO2, 1:10 MeOH/EtOAc) с получением трет-бутил ({2-[6-(4,5-диэтил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)пиридин-2-ил]-6-[(2R)-2-метилпирролидин-1-ил]-1-оксо-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]-пиридин-4-ил}метил)метилкарбамата (120 мг, >99% выход) в виде желтого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,69 (уш.д, J=8,3 Гц, 1H), 8,09 (уш.д, J=7,5 Гц, 1H), 7,97-7,73 (м, 1H), 6,72 (с, 1H), 5,14-4,90 (м, 2H), 4,73-4,43 (м, 5H), 4,31-4,16 (м, 1H), 3,70-3,52 (м, 2H), 3,44-3,29 (м, 2H), 2,99 уш.с, 3H), 2,92-2,77 (м, 2H), 2,20-1,96 (м, 3H), 1,80-1,70 (м, 1H), 1,62 (с, 9H), 1,43-1,38 (м, 3H), 1,32-1,11 (м, 3H). LCMS m/z (ESI+) для (C30H40N8O3), 561,4 (M+H)+.
Стадия 2: 2-[6-(4,5-диэтил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)пиридин-2-ил]-4-[(метиламино)метил]-6-[(2R)-2-метилпирролидин-1-ил]-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-она гидрохлорид
Суспензию трет-бутил ({2-[6-(4,5-диэтил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)пиридин-2-ил]-6-[(2R)-2-метилпирролидин-1-ил]-1-оксо-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-4-ил}метил)метилкарбамата (120 мг, 0,222 ммоль) в EtOAc (10,0 мл) охлаждали до 0°C и обрабатывали раствором HCl (4,0 N в EtOAc, 5,0 мл). Смесь перемешивали в течение 2 часов. Анализ методом LCMS показывал полный расход исходного материала. Смесь концентрировали досуха. Остаток очищали препаративной HPLC на колонке Phenomenex Gemini-NX (150×30 мм, размер частиц 5 мкм), которую элюировали смесью 12-42% MeCN/H2O (+0,05% HCl) с расходом 30 мл/мин, с получением 2-[6-(4,5-диэтил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)пиридин-2-ил]-4-[(метиламино)метил]-6-[(2R)-2-метилпирролидин-1-ил]-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]-пиридин-1-она, выделяемого в форме гидрохлоридной соли (72,0 мг, 66% выход) в виде желтого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 9,65-9,29 (м, 2H), 8,73 (д, J=8,4 Гц, 1H), 8,33-8,13 (м, 1H), 8,02 (д, J=7,6 Гц, 1H), 6,75 (с, 1H), 5,21 (с, 2H), 4,66 (кв, J=7,1 Гц, 2H), 4,42-4,28 (м, 3H), 3,65 (т, J=8,7 Гц, 1H), 3,50-3,30 (м, 1H), 3,10 (кв, J=7,5 Гц, 2H), 2,72 (т, J=5,3 Гц, 3H), 2,21-1,93 (м, 3H), 1,81-1,64 (м, 1H), 1,51 (т, J=7,1 Гц, 3H), 1,43 (т, J=7,5 Гц, 3H), 1,21 (д, J=6,2 Гц, 3H); LCMS m/z (ESI+) для (C25H32N8O), 461,3 (M+H)+.
Пример 67: 2-[6-(4,5-диэтил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)пиридин-2-ил]-4-[(метиламино)метил]-6-[метил(пропан-2-ил)амино]-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
Стадия 1: трет-бутил ({2-[6-(4,5-диэтил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)пиридин-2-ил]-6-[метил(пропан-2-ил)амино]-1-оксо-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-4-ил}метил)метилкарбамат
К раствору трет-бутил метил({6-[метил(пропан-2-ил)амино]-1-оксо-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-4-ил}метил)карбамата (смотрите синтез в примере 63) (100 мг, 0,287 ммоль), промежуточного соединения 18 (80,7 мг, 0,287 ммоль) и K3PO4 (183 мг, 0,861 ммоль) в 1,4-диоксане (5,0 мл) в атмосфере N2 добавляли Pd2(dba)3 (26,3 мг, 0,0287 ммоль) и Xantphos (33,2 мг, 0,0574 ммоль). Смесь продували с помощью N2 в течение 2 минут, герметизировали, и перемешивали при 85°C в течение 18 часов. Анализ методом LCMS показывал полный расход исходного материала. Смесь фильтровали через целит®. Осадок на фильтре промывали с помощью EtOAc (100 мл). Объединенный фильтрат концентрировали досуха и очищали препаративной TLC (EtOAc) с получением трет-бутил ({2-[6-(4,5-диэтил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)пиридин-2-ил]-6-[метил(пропан-2-ил)амино]-1-оксо-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-4-ил}-метил)метилкарбамата (120 мг, 76% выход) в виде желтого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,70 (д, J=8,2 Гц, 1H), 8,10 (д, J=7,6 Гц, 1H), 7,99-7,80 (м, 1H), 6,89 (с, 1H), 5,12-5,01 (м, 1H), 4,98-4,84 (м, 2H), 4,71-4,62 (м, 2H), 4,58-4,26 (м, 2H), 3,04-2,96 (м, 3H), 2,94 (с, 3H), 2,89 (кв, J=7,5 Гц, 2H), 1,51 (т, J=7,5 Гц, 3H), 1,45-1,34 (м, 12H), 1,23 (с, 3H), 1,21 (с, 3H). LCMS m/z (ESI+) для (C29H40N8O3), 549,2 (M+H)+.
Стадия 2: 2-[6-(4,5-диэтил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)пиридин-2-ил]-4-[(метиламино)метил]-6-[метил(пропан-2-ил)амино]-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-она гидрохлорид
Раствор трет-бутил ({2-[6-(4,5-диэтил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)пиридин-2-ил]-6-[метил(пропан-2-ил)амино]-1-оксо-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-4-ил}метил)метилкарбамата (120 мг, 0,219 ммоль) в EtOAc (1,0 мл) охлаждали до 0°C и обрабатывали по каплям раствором HCl (4,0 N в EtOAc, 5,0 мл). Смесь перемешивали в течение 2 часов при комнатной температуре. Анализ методом LCMS показывал полный расход исходного материала. Полученные твердые вещества собирали фильтрацией. Осадок на фильтре сушили под вакуумом с получением 2-[6-(4,5-диэтил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)пиридин-2-ил]-4-[(метиламино)метил]-6-[метил(пропан-2-ил)амино]-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-она, выделяемого в форме гидрохлоридной соли (95 мг, 90% выход) в виде желтого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 9,23 уш.с, 2H), 8,67 (д, J=8,4 Гц, 1H), 8,19-8,09 (м, 1H), 7,99 (д, J=7,7 Гц, 1H), 6,92 (с, 1H), 5,16 (с, 2H), 5,11-4,97 (м, 1H), 4,57 (кв, J=6,4 Гц, 2H), 4,33 (т, J=6,0 Гц, 2H), 3,01-2,88 (м, 5H), 2,72 (т, J=5,4 Гц, 3H), 1,45 (т, J=7,1 Гц, 3H), 1,39 (т, J=7,5 Гц, 3H), 1,18 (с, 3H), 1,16 (с, 3H); LCMS m/z (ESI+) для (C24H32N8O), 449,2 (M+H)+.
Пример 68: 4-(аминометил)-2-{6-[(4R)-4-(фторметил)-2-оксо-1,3-оксазолидин-3-ил]пиридин-2-ил}-6-[(2R)-2-метилпирролидин-1-ил]-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
Стадия 1: трет-бутил [(6-хлор-2-{6-[(4R)-4-(фторметил)-2-оксо-1,3-оксазолидин-3-ил]пиридин-2-ил}-1-оксо-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-4-ил)метил]карбамат
К раствору промежуточного соединения 20 (462 мг, 1,68 ммоль), промежуточного соединения 7 (500 мг, 1,68 ммоль), K2CO3 (511 мг, 3,69 ммоль) и N,N-диметилэтилендиамина (74,0 мг, 0,840 ммоль) добавляли CuI (80,0 мг, 0,420 ммоль). Смесь продували с помощью N2 в течение 5 минут и затем перемешивали при 120°C в течение 1,5 часов при микроволновом излучении. Анализ методом LCMS показывал полный расход исходного материала. Смесь разбавляли H2O (8 мл) и MeCN (1 мл), и полученные твердые вещества собирали фильтрацией. Осадок на фильтре промывали H2O (3×2 мл) и MeCN (4×1 мл), и сушили под вакуумом с получением трет-бутил [(6-хлор-2-{6-[(4R)-4-(фторметил)-2-оксо-1,3-оксазолидин-3-ил]пиридин-2-ил}-1-оксо-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-4-ил)метил]карбамата (595 мг, 72% выход) в виде белого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 8,22 (д, J=7,9 Гц, 1H), 8,03-7,97 (м, 1H), 7,92 (д, J=8,1 Гц, 1H), 7,80 (с, 1H), 7,54 (т, J=6,2 Гц, 1H), 5,31-5,00 (м, 4H), 4,87-4,71 (м, 1H), 4,65 (т, J=8,9 Гц, 1H), 4,59-4,50 (м, 1H), 4,41 (д, J=6,0 Гц, 2H), 1,39 (с, 9H); 19F ЯМР (376 МГц, DMSO-d6) δ -238,40 (с, 1F); m/z (ESI+) для (C22H23ClFN5O5), 436,1 (M-tBu+H)+.
Стадия 2: трет-бутил [(2-{6-[(4R)-4-(фторметил)-2-оксо-1,3-оксазолидин-3-ил]пиридин-2-ил}-6-[(2R)-2-метилпирролидин-1-ил]-1-оксо-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-4-ил)метил]карбамат
Раствор трет-бутил [(6-хлор-2-{6-[(4R)-4-(фторметил)-2-оксо-1,3-оксазолидин-3-ил]пиридин-2-ил}-1-оксо-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-4-ил)метил]карбамата (595 мг, 1,21 ммоль), (2R)-2-метилпирролидина (294 мг, 2,42 ммоль) и Cs2CO3 (2,36 г, 7,26 ммоль) в 1,4-диоксане продували аргоном в течение 3 минут и добавляли RuPhos Pd G3 (101 мг, 0,121 ммоль). Смесь продували аргоном в течение 3 минут, герметизировали и перемешивали при 100°C в течение 16 часов. Анализ методом LCMS показывал полный расход исходного материала. Смесь фильтровали, и осадок на фильтре промывали с помощью EtOAc (2×10 мл). Объединенный фильтрат концентрировали досуха. Неочищенный материал очищали флэш-хроматографией (8 г SiO2, 1:1 EtOAc/петролейный эфир). Требуемые фракции концентрировали досуха. Остаток суспендировали в смеси EtOAc/петролейный эфир (2:1, 10 мл) в течение 5 минут при комнатной температуре, и твердые вещества собирали фильтрацией. Осадок на фильтре промывали смесью EtOAc/петролейный эфир (2:1, 3×10 мл) и сушили под вакуумом. Твердые вещества растворяли в смеси MeOH/EtOAc (1:10, 30 мл). Добавляли особо чистый Si-Thio SiO2 (1 г), и смесь перемешивали при 50°C в течение 30 минут. Смесь фильтровали, и осадок на фильтре промывали смесью MeOH/EtOAc (1:10, 3×30 мл). Фильтрат концентрировали досуха. Обработку с помощью особо чистого Si-Thio SiO2 повторяли аналогичным образом (4x). Неочищенный материал очищали флэш-хроматографией (SiO2, 1:10 MeOH/EtOAc) с получением трет-бутил [(2-{6-[(4R)-4-(фторметил)-2-оксо-1,3-оксазолидин-3-ил]пиридин-2-ил}-6-[(2R)-2-метил-пирролидин-1-ил]-1-оксо-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-4-ил)метил]карбамата (330 мг, 51% выход) в виде желтого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 8,23 (д, J=8,0 Гц, 1H), 8,01-7,91 (м, 1H), 7,87 (д, J=8,1 Гц, 1H), 7,25 (т, J=6,0 Гц, 1H), 6,56 (с, 1H), 5,20-4,90 (м, 4H), 4,79 (дд, J=45,8, 10,0 Гц, 1H), 4,64 (т, J=8,9 Гц, 1H), 4,57-4,48 (м, 1H), 4,26 (дд, J=6,0, 2,0 Гц, 2H), 4,21 (т, J=6,2 Гц, 1H), 3,58-3,50 (м, 1H), 3,33-3,29 (м, 1H), 2,10-2,01 (м, 2H), 1,97-1,87 (м, 1H), 1,73-1,58 (м, 1H), 1,39 (с, 9H), 1,20 (д, J=5,4 Гц, 3H); 19F ЯМР (377 МГц, DMSO-d6) δ -238,33 (с, 1F); m/z (ESI+) для (C27H33FN6O5), 541,3 (M+H)+.
Стадия 3: 4-(аминометил)-2-{6-[(4R)-4-(фторметил)-2-оксо-1,3-оксазолидин-3-ил]пиридин-2-ил}-6-[(2R)-2-метилпирролидин-1-ил]-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-она гидрохлорид
Раствор трет-бутил [(2-{6-[(4R)-4-(фторметил)-2-оксо-1,3-оксазолидин-3-ил]пиридин-2-ил}-6-[(2R)-2-метилпирролидин-1-ил]-1-оксо-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-4-ил)метил]карбамата (300 мг, 0,610 ммоль) в EtOAc (5,0 мл) и MeOH (10,0 мл) охлаждали до 0°C и обрабатывали раствором HCl (4,0 N в EtOAc, 5,0 мл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 9 часов. Анализ методом LCMS показывал полный расход исходного материала. Смесь концентрировали досуха. Твердые вещества растворяли в H2O (25 мл) и промывали с помощью EtOAc (20 мл). Водный слой концентрировали досуха. Остаток очищали препаративной HPLC на колонке Phenomenex Gemini-NX (150×30 мм, размер частиц 5 мкм), которую элюировали смесью 24-44% MeCN/H2O (+0,05% HCl) с расходом 30 мл/мин, с получением 4-(аминометил)-2-{6-[(4R)-4-(фторметил)-2-оксо-1,3-оксазолидин-3-ил]пиридин-2-ил}-6-[(2R)-2-метилпирролидин-1-ил]-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-она, выделяемого в форме гидрохлоридной соли (200 мг, 69% выход) в виде желтого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 8,53 уш.с, 3H), 8,24 (д, J=8,0 Гц, 1H), 8,08-7,94 (м, 1H), 7,89 (д, J=8,0 Гц, 1H), 6,69 (с, 1H), 5,21-4,99 (м, 4H), 4,74 (уш.д, J=9,8 Гц, 1H), 4,64 (т, J=8,9 Гц, 1H), 4,52 (дд, J=3,3, 8,5 Гц, 1H), 4,39-4,29 (м, 1H), 4,25-4,15 (м, 2H), 3,63 (уш.т, J=8,7 Гц, 1H), 3,47-3,34 (м, 1H), 2,14-1,94 (м, 3H), 1,77-1,68 (м, 1H), 1,20 (д, J=6,0 Гц, 3H); 19F ЯМР (377 МГц, DMSO-d6) δ -238,09 (с, 1F); m/z (ESI+) для (C22H25FN6O3), 441,3 (M+H)+.
Дополнительные соединения по изобретению получали путем модификации методов, приведенных в изобретении в качестве примеров. Использование or1 в структуре и ξ в названии соединения обозначает хиральный центр, который был разделен на два отдельных энантиомера, но присутствие конкретного энантиомера подтверждено не было; в структуре изображена сплошная или пунктирная клиновидная связь, но фактическим энантиомером может быть другой энантиомер. Эти соединения сопровождаются примечаниями, такими как "абсолютная стереохимия неизвестна" и включают оптическое вращение. Соединения с примечанием "абсолютная стереохимия известна" обычно получали из хиральных промежуточных соединений, имеющих известную стереохимию.
Соединения и соответствующие данные по их характеризации представлены в таблице 1А ниже, где в скобках под номером примера указан метод, использованный для получения соединения:
№
(C)
6-циклобутил-4-[(метиламино)метил]-2-{6-[4-(пропан-2-ил)-4H-1,2,4-триазол-3-ил]-пиридин-2-ил}-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
(P)
6-[этил(пропан-2-ил)амино]-4-[(метиламино)метил]-2-{6-[4-(пропан-2-ил)-4H-1,2,4-триазол-3-ил]-пиридин-2-ил}-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
(O)
2-[6-(4-этил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)пиридин-2-ил]-4-[(метиламино)-метил]-6-[метил(пропан-2-ил)амино]-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
(O)
4-[(метиламино)метил]-6-[метил(пропан-2-ил)-амино]-2-(6-{4-[(3ξ)-1,1,1-трифторпентан-3-ил]-4H-1,2,4-триазол-3-ил}пиридин-2-ил)-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
абсолютная стереохимия неизвестна *
(O)
4-[(метиламино)метил]-6-[метил(пропан-2-ил)-амино]-2-(6-{4-[(3ξ)-1,1,1-трифторпентан-3-ил]-4H-1,2,4-триазол-3-ил}пиридин-2-ил)-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
абсолютная стереохимия неизвестна *
(T)
4-[(метиламино)метил]-2-{6-[(4S)-4-метил-2-оксо-1,3-оксазолидин-3-ил]-пиридин-2-ил}-6-[метил(пропан-2-ил)-амино]-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
абсолютная стереохимия известна
(O)
4-(аминометил)-6-(диэтиламино)-2-[6-(4-этил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)пиридин-2-ил]-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
(O)
6-(этиламино)-2-[6-(4-этил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)пиридин-2-ил]-4-[(метиламино)метил]-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
(O)
6-(этиламино)-4-[(метиламино)метил]-2-{6-[4-(пропан-2-ил)-4H-1,2,4-триазол-3-ил]-пиридин-2-ил}-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
(C)
4-[(метиламино)метил]-6-(пропан-2-иламино)-2-{6-[4-(пропан-2-ил)-4H-1,2,4-триазол-3-ил]-пиридин-2-ил}-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
(O)
4-(аминометил)-6-[метил(пропан-2-ил)амино]-2-{6-[4-(пропан-2-ил)-4H-1,2,4-триазол-3-ил]пиридин-2-ил}-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
(O)
6-(диэтиламино)-4-[(метиламино)метил]-2-[6-(4-пропил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)пиридин-2-ил]-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
(O)
4-[(метиламино)метил]-6-[метил(пропан-2-ил)-амино]-2-[6-(4-метил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)-пиридин-2-ил]-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
(O)
4-(аминометил)-6-[метил(пропан-2-ил)-амино]-2-[6-(4-пропил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)-пиридин-2-ил]-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
(C)
2-{5-фтор-6-[4-(пропан-2-ил)-4H-1,2,4-триазол-3-ил]пиридин-2-ил}-4-[(метиламино)метил]-6-(1-метилциклопропил)-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
(C)
6-[этил(пропан-2-ил)-амино]-2-[6-(4-этил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)-пиридин-2-ил]-4-[(метиламино)метил]-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
(M)
4-(аминометил)-2-{6-[(4R)-4-(фторметил)-2-оксо-1,3-оксазолидин-3-ил]пиридин-2-ил}-6-(1-метилциклопропил)-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
абсолютная стереохимия известна
(M)
4-(аминометил)-6-циклопропил-2-{6-[(4R)-4-(фторметил)-2-оксо-1,3-оксазолидин-3-ил]пиридин-2-ил}-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
абсолютная стереохимия известна
(M)
6-циклопропил-2-{6-[(4R)-4-(фторметил)-2-оксо-1,3-оксазолидин-3-ил]пиридин-2-ил}-4-[(метиламино)-метил]-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
абсолютная стереохимия известна
(Q)
6-(диэтиламино)-4-[(диметиламино)метил]-2-[6-(4-этил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)пиридин-2-ил]-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
(R)
4-(аминометил)-2-[6-(4-этил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)пиридин-2-ил]-6-[метил(пропан-2-ил)-амино]-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
(O)
4-(аминометил)-6-(1-метилциклопропил)-2-[6-(4-пропил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)пиридин-2-ил]-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
(M)
2-{6-[(4R)-4-(фторметил)-2-оксо-1,3-оксазолидин-3-ил]пиридин-2-ил}-4-[(метиламино)метил]-6-(1-метилциклопропил)-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
абсолютная стереохимия известна
(O)
6-(азетидин-1-ил)-2-[6-(4-этил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)пиридин-2-ил]-4-[(метиламино)метил]-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
(O)
6-(азетидин-1-ил)-4-[(метиламино)метил]-2-[6-(4-пропил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)пиридин-2-ил]-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
(S)
4-[(метиламино)метил]-6-(1-метилциклопропил)-2-[6-(4-пропил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)пиридин-2-ил]-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
(S)
2-[6-(4-этил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)пиридин-2-ил]-4-[(метиламино)-метил]-6-(1-метилцикло-пропил)-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
(V)
6-(диэтиламино)-2-[6-(1-этил-2-метил-1H-имидазо-5-ил)пиридин-2-ил]-4-[(метиламино)метил]-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
(U)
6-(диэтиламино)-2-[6-(4-этил-5-метил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)пиридин-2-ил]-4-[(метиламино)-метил]-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
(T)
6-[этил(пропан-2-ил)амино]-2-{6-[(4R)-4-(фторметил)-2-оксо-1,3-оксазолидин-3-ил]пиридин-2-ил}-4-[(метиламино)-метил]-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
(O)
6-[этил(пропан-2-ил)амино]-4-[(метил-амино)метил]-2-[6-(4-пропил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)пиридин-2-ил]-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
(T)
4-(аминометил)-2-{6-[(4S)-4-метил-2-оксо-1,3-оксазолидин-3-ил]пиридин-2-ил}-6-[метил(пропан-2-ил)амино]-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
абсолютная стереохимия известна
(W)
6-циклобутил-2-[6-(4-этил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)пиридин-2-ил]-4-[(метиламино)метил]-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
(C)
6-{бис[(пентадейтерио)этил]амино}-2-[6-(4-этил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)-пиридин-2-ил]-4-[(метил-амино)метил]-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
(W)
6-циклобутил-4-[(метиламино)метил]-2-[6-(4-пропил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)пиридин-2-ил]-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
(C)
4-[(метиламино)метил]-6-[(2R)-2-метилпирролидин-1-ил]-2-{6-[4-(пропан-2-ил)-4H-1,2,4-триазол-3-ил]пиридин-2-ил}-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
(C)
6-[(2R,5R)-2,5-диметилпирролидин-1-ил]-4-[(метиламино)метил]-2-[6-(4-пропил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)пиридин-2-ил]-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
абсолютная стереохимия известна
(C)
6-[(2R,5R)-2,5-диметилпирролидин-1-ил]-2-[6-(4-этил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)пиридин-2-ил]-4-[(метиламино)-метил]-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
абсолютная стереохимия известна
(AA)
4-(аминометил)-6-[(2R)-2-метилпирролидин-1-ил]-2-{6-[4-(пропан-2-ил)-4H-1,2,4-триазол-3-ил]-пиридин-2-ил}-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
(P)
6-[этил(пропан-2-ил)амино]-4-[(метиламино)метил]-2-[6-(4-метил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)пиридин-2-ил]-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
(C)
6-(2,2-диметилпирролидин-1-ил)-4-[(метиламино)метил]-2-{6-[4-(пропан-2-ил)-4H-1,2,4-триазол-3-ил]пиридин-2-ил}-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
(C)
4-(аминометил)-6-[(2R,5R)-2,5-диметилпирролидин-1-ил]-2-[6-(4-этил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)пиридин-2-ил]-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
(U)
6-[(2R,5R)-2,5-диметилпирролидин-1-ил]-2-[6-(4-этил-5-метил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)пиридин-2-ил]-4-[(метиламино)метил]-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
(C)
6-[2,6-диметилморфолин-4-ил]-4-[(метиламино)-метил]-2-{6-[4-(пропан-2-ил)-4H-1,2,4-триазол-3-ил]пиридин-2-ил}-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
(C)
4-[(метиламино)метил]-2-[6-(4-пропил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)пиридин-2-ил]-6-[(2S)-2-(трифтор-метил)пирролидин-1-ил]-2,3-дигидро-1H-пирроло-[3,4-c]пиридин-1-он
(C)
2-[6-(4-этил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)пиридин-2-ил]-4-[(метиламино)-метил]-6-[(2S)-2-метилпирролидин-1-ил]-2,3-дигидро-1H-пирроло-[3,4-c]пиридин-1-он
(C)
2-[6-(4-этил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)пиридин-2-ил]-4-[(метиламино)-метил]-6-[(2R)-2-метилпирролидин-1-ил]-2,3-дигидро-1H-пирроло-[3,4-c]пиридин-1-он
(U)
6-[(2R,5R)-2,5-диметилпирролидин-1-ил]-4-[(метиламино)метил]-2-{6-[5-метил-4-(пропан-2-ил)-4H-1,2,4-триазол-3-ил]пиридин-2-ил}-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
(AA)
4-(аминометил)-6-(диметиламино)-2-{6-[4-(пентан-3-ил)-4H-1,2,4-триазол-3-ил]пиридин-2-ил}-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
(M)
6-[(2R,5R)-2,5-диметилпирролидин-1-ил]-2-{6-[(4R)-4-(фторметил)-2-оксо-1,3-оксазолидин-3-ил]пиридин-2-ил}-4-[(метиламино)метил]-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
абсолютная стереохимия известна
(R)
4-(аминометил)-6-[(2R,5R)-2,5-диметил-пирролидин-1-ил]-2-{6-[4-(пентан-3-ил)-4H-1,2,4-триазол-3-ил]пиридин-2-ил}-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
(C)
4-[(метиламино)метил]-2-[6-(4-пропил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)пиридин-2-ил]-6-[(2R)-2-(трифторметил)пирролидин-1-ил]-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
(AC)
2-[6-(4-этил-5-метил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)-пиридин-2-ил]-4-[(метиламино)метил]-6-[(2R)-2-метилпирролидин-1-ил]-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
(AA)
4-(аминометил)-6-(диэтиламино)-2-{6-[4-(пентан-3-ил)-4H-1,2,4-триазол-3-ил]пиридин-2-ил}-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
(T)
4-(аминометил)-6-[этил(пропан-2-ил)амино]-2-{6-[(4R)-4-(фторметил)-2-оксо-1,3-оксазолидин-3-ил]пиридин-2-ил}-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
(M)
4-(аминометил)-6-[(2R,5R)-2,5-диметил-пирролидин-1-ил]-2-{6-[(4R)-4-(фторметил)-2-оксо-1,3-оксазолидин-3-ил]пиридин-2-ил}-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
абсолютная стереохимия известна
(T)
4-(аминометил)-2-{6-[(4S)-4-метил-2-оксо-1,3-оксазолидин-3-ил]пиридин-2-ил}-6-[(2R)-2-метил-пирролидин-1-ил]-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
абсолютная стереохимия известна
(S)
4-(аминометил)-6-(1-метилциклопропил)-2-{6-[4-(пентан-3-ил)-4H-1,2,4-триазол-3-ил]-пиридин-2-ил}-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
(AD)
4-(аминометил)-2-[6-(4-этил-5-метил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)пиридин-2-ил]-6-(1-метил-циклопропил)-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
(AD)
4-(аминометил)-6-(1-метилциклопропил)-2-[6-(5-метил-4-пропил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)-пиридин-2-ил]-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
(C)
4-(аминометил)-6-циклопропил-2-{6-[4-(пентан-3-ил)-4H-1,2,4-триазол-3-ил]пиридин-2-ил}-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
(AE)
6-[этил(метил)амино]-4-[(метиламино)метил]-2-[6-(5-метил-4-пропил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)-пиридин-2-ил]-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
(C)
6-[этил(метил)амино]-2-[6-(4-этил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)пиридин-2-ил]-4-[(метиламино)-метил]-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
(M)
4-(аминометил)-2-{6-[(4S)-4-метил-2-оксо-1,3-оксазолидин-3-ил]пиридин-2-ил}-6-[(2S)-2-метил-пирролидин-1-ил]-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
абсолютная стереохимия известна
(AF)
4-(аминометил)-2-[6-(5-метил-4-пропил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)пиридин-2-ил]-6-[(2R)-2-метил-пирролидин-1-ил]-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
(AE)
4-[(метиламино)метил]-2-[6-(5-метил-4-пропил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)-пиридин-2-ил]-6-[(2S)-2-метилпирролидин-1-ил]-2,3-дигидро-1H-пирроло-[3,4-c]пиридин-1-он
(AE)
4-[(метиламино)метил]-2-{6-[5-метил-4-(пентан-3-ил)-4H-1,2,4-триазол-3-ил]пиридин-2-ил}-6-[(2S)-2-метилпирролидин-1-ил]-2,3-дигидро-1H-пирроло-[3,4-c]пиридин-1-он
(C)
4-(аминометил)-6-[(2R,5R)-2,5-диметил-пирролидин-1-ил]-2-[6-(4-пропил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)пиридин-2-ил]-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
(D)
4-(аминометил)-6-[(2R,5R)-2,5-диметил-пирролидин-1-ил]-2-{6-[(4S)-4-метил-2-оксо-1,3-оксазолидин-3-ил]пиридин-2-ил}-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
абсолютная стереохимия известна
(C)
4-[(метиламино)метил]-6-[(2S)-2-метилпирролидин-1-ил]-2-{6-[4-(пентан-3-ил)-4H-1,2,4-триазол-3-ил]пиридин-2-ил}-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
(S)
2-(6-{4-[(2R)-бутан-2-ил]-4H-1,2,4-триазол-3-ил}пиридин-2-ил)-4-[(метиламино)метил]-6-(1-метилциклопропил)-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
абсолютная стереохимия известна
(AG)
4-(аминометил)-6-[этил(пропан-2-ил)амино]-2-[6-(1,3,4-тиадиазол-2-ил)пиридин-2-ил]-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
(AH)
4-(аминометил)-6-[этил(пропан-2-ил)амино]-2-[6-(4-этил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)пиридин-2-ил]-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
(C)
6-циклопропил-4-[(метиламино)метил]-2-{6-[4-(пентан-3-ил)-4H-1,2,4-триазол-3-ил]пиридин-2-ил}-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
(R)
4-(аминометил)-6-[(2R)-2-метилпирролидин-1-ил]-2-{6-[4-(пентан-3-ил)-4H-1,2,4-триазол-3-ил]-пиридин-2-ил}-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
(C)
4-[(метиламино)метил]-6-[(2R)-2-метилпирролидин-1-ил]-2-{6-[4-(пентан-3-ил)-4H-1,2,4-триазол-3-ил]пиридин-2-ил}-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
(AH)
4-(аминометил)-6-[этил(пропан-2-ил)амино]-2-{6-[4-(пропан-2-ил)-4H-1,2,4-триазол-3-ил]-пиридин-2-ил}-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
(AH)
4-(аминометил)-6-[этил(пропан-2-ил)амино]-2-[6-(4-пропил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)пиридин-2-ил]-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
*Использование or1 в структуре и ξ в названии соединения обозначает хиральный центр, который был разделен на энантиомеры, но присутствие конкретного энантиомера подтверждено не было; в структуре изображена сплошная или пунктирная клиновидная связь, но фактическим энантиомером может быть другой энантиомер.
Таблица 1B
№
(C)
4-(аминометил)-6-[метил(пропан-2-ил)амино]-2-{6-[4-(пентан-3-ил)-4H-1,2,4-триазол-3-ил]пиридин-2-ил}-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
(C)
4-(аминометил)-6-(2,2-диметилпирролидин-1-ил)-2-{6-[4-(пентан-3-ил)-4H-1,2,4-триазол-3-ил]пиридин-2-ил}-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
(C)
4-(аминометил)-6-[(2S)-2-метилпирролидин-1-ил]-2-{6-[4-(пентан-3-ил)-4H-1,2,4-триазол-3-ил]пиридин-2-ил}-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
(C)
4-(аминометил)-6-[этил(метил)амино]-2-{6-[4-(пентан-3-ил)-4H-1,2,4-триазол-3-ил]пиридин-2-ил}-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
(AI)
4-(аминометил)-6-(2,2-диметилпирролидин-1-ил)-2-[6-(4-этил-5-метил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)-пиридин-2-ил]-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
(AI)
4-(аминометил)-6-(2,2-диметилпирролидин-1-ил)-2-[6-(5-метил-4-пропил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)-пиридин-2-ил]-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
(AI)
4-(аминометил)-2-{6-[5-метил-4-(пропан-2-ил)-4H-1,2,4-триазол-3-ил]пиридин-2-ил}-6-[(2R)-2-метилпирролидин-1-ил]-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
(AI)
4-(аминометил)-2-[6-(4-этил-5-метил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)пиридин-2-ил]-6-[(2S)-2-метилпирролидин-1-ил]-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
(AI)
4-(аминометил)-2-[6-(4-этил-5-метил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)пиридин-2-ил]-6-[метил(пропан-2-ил)амино]-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]-пиридин-1-он
(AI)
4-(аминометил)-2-[6-(5-метил-4-пропил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)пиридин-2-ил]-6-[(2S)-2-метилпирролидин-1-ил]-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
(AI)
4-(аминометил)-6-[этил(метил)амино]-2-{6-[5-метил-4-(пропан-2-ил)-4H-1,2,4-триазол-3-ил]пиридин-2-ил}-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
(AI)
4-(аминометил)-6-[этил(метил)амино]-2-[6-(5-метил-4-пропил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)пиридин-2-ил]-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
(AI)
4-(аминометил)-2-{6-[5-метил-4-(пропан-2-ил)-4H-1,2,4-триазол-3-ил]пиридин-2-ил}-6-[(2S)-2-метилпирролидин-1-ил]-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
(AI)
4-(аминометил)-6-(диэтиламино)-2-[6-(4-этил-5-метил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)пиридин-2-ил]-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
1H ЯМР (400 МГц, Метанол-d4+D2O) δ 8,85 (д, J=8,3 Гц, 1H), 8,19-8,12 (м, 1H), 8,07-8,00 (м, 1H), 6,98 (с, 1H), 5,19 (с, 2H), 4,83-4,75 (м, 2H), 4,36 (с, 2H), 3,71 (кв, J=7,0 Гц, 4H), 2,80 (с, 3H), 1,63 (т, J=7,2 Гц, 3H), 1,27 (т, J=7,0 Гц, 6H)
(AI)
4-(аминометил)-6-(2,2-диметилпирролидин-1-ил)-2-{6-[5-метил-4-(пропан-2-ил)-4H-1,2,4-триазол-3-ил]пиридин-2-ил}-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
(AI)
4-(аминометил)-6-[метил(пропан-2-ил)амино]-2-{6-[5-метил-4-(пропан-2-ил)-4H-1,2,4-триазол-3-ил]пиридин-2-ил}-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
(C)
4-(аминометил)-6-[этил(пропан-2-ил)амино]-2-{6-[4-(пентан-3-ил)-4H-1,2,4-триазол-3-ил]пиридин-2-ил}-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
(AI)
4-(аминометил)-2-[6-(4-этил-5-метил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)пиридин-2-ил]-6-[этил(пропан-2-ил)амино]-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]-пиридин-1-он
(AI)
4-(аминометил)-6-[(2R,5R)-2,5-диметилпирролидин-1-ил]-2-[6-(4-этил-5-метил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)-пиридин-2-ил]-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
(AI)
4-(аминометил)-6-[(2R,5R)-2,5-диметилпирролидин-1-ил]-2-{6-[5-метил-4-(пропан-2-ил)-4H-1,2,4-триазол-3-ил]пиридин-2-ил}-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
(AI)
4-(аминометил)-6-(диэтиламино)-2-[6-(5-метил-4-пропил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)пиридин-2-ил]-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
(AI)
4-(аминометил)-6-[этил(метил)амино]-2-[6-(4-этил-5-метил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)-пиридин-2-ил]-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
(AI)
4-(аминометил)-6-[метил(пропан-2-ил)-амино]-2-[6-(5-метил-4-пропил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)пиридин-2-ил]-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
(C)
2-(6-{4-[(2S)-бутан-2-ил]-4H-1,2,4-триазол-3-ил}пиридин-2-ил)-6-[этил(метил)амино]-4-[(метиламино)метил]-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
(H)
4-(аминометил)-6-(диметиламино)-2-{6-[(4R)-4-(фторметил)-2-оксо-1,3-оксазолидин-3-ил]пиридин-2-ил}-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
абсолютная стереохимия известна
(AD)
2-[6-(5-этил-4-пропил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)пиридин-2-ил]-4-[(метиламино)метил]-6-[(2R)-2-метилпирролидин-1-ил]-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
(AD)
4-[(метиламино)метил]-2-{6-[5-метил-4-(2-метилпропил)-4H-1,2,4-триазол-3-ил]пиридин-2-ил}-6-[(2R)-2-метилпирролидин-1-ил]-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
(B)
6-(диметиламино)-4-[(метиламино)метил]-2-{6-[4-(2-метилпропил)-4H-1,2,4-триазол-3-ил]пиридин-2-ил}-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
(B)
6-(диметиламино)-4-[(метиламино)метил]-2-(6-{4-[(2S)-3-метилбутан-2-ил]-4H-1,2,4-триазол-3-ил}-пиридин-2-ил)-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
абсолютная стереохимия известна
(AJ)
2-[6-(4-циклопентил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)-пиридин-2-ил]-4-[(метиламино)метил]-6-(1-метилциклопропил)-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
(S)
4-[(метиламино)метил]-6-(1-метилциклопропил)-2-(6-{4-[(3ξ)-1,1,1-трифторпентан-3-ил]-4H-1,2,4-триазол-3-ил}пиридин-2-ил)-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
абсолютная стереохимия неизвестна *
(S)
4-[(метиламино)метил]-6-(1-метилциклопропил)-2-(6-{4-[(3ξ)-1,1,1-трифторпентан-3-ил]-4H-1,2,4-триазол-3-ил}-пиридин-2-ил)-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
абсолютная стереохимия неизвестна *
(B)
6-(диметиламино)-4-[(метиламино)метил]-2-(6-{4-[(2R)-3-метилбутан-2-ил]-4H-1,2,4-триазол-3-ил}-пиридин-2-ил)-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
абсолютная стереохимия известна
(S)
2-(6-{4-[(2ξ)-1-гидроксибутан-2-ил]-4H-1,2,4-триазол-3-ил}-пиридин-2-ил)-4-[(метиламино)метил]-6-(1-метилциклопропил)-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
абсолютная стереохимия неизвестна *
(S)
2-(6-{4-[(2ξ)-1-гидроксибутан-2-ил]-4H-1,2,4-триазол-3-ил}-пиридин-2-ил)-4-[(метиламино)метил]-6-(1-метилциклопропил)-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
абсолютная стереохимия неизвестна *
(AD)
4-(аминометил)-2-[6-(4,5-диэтил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)пиридин-2-ил]-6-[(2R)-2-метилпирролидин-1-ил]-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
(AD)
4-(аминометил)-2-[6-(5-этил-4-пропил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)пиридин-2-ил]-6-[(2R)-2-метилпирролидин-1-ил]-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
(AD)
2-[6-(4-циклобутил-5-метил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)пиридин-2-ил]-4-[(метиламино)метил]-6-(1-метилциклопропил)-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
(AD)
4-(аминометил)-2-[6-(4-циклобутил-5-метил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)-пиридин-2-ил]-6-(1-метилциклопропил)-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он
*Использование or1 в структуре и ξ в названии соединения обозначает хиральный центр, который был разделен на энантиомеры, но присутствие конкретного энантиомера подтверждено не было; в структуре изображена сплошная или пунктирная клиновидная связь, но фактическим энантиомером может быть другой энантиомер.
Исследование биологической активности и полученные результаты
Биохимический ферментативный анализ HPK1
Ингибирование фермента HPK1 измеряли методом анализа сдвига подвижности (MSA) с использованием микрофлюидных чипов. Реакции проводили в объемах 50 мкл в 96-луночных планшетах, и лунки содержали 0,5 нМ полноразмерной рекомбинантной HPK1 человека, 3 мкМ фосфоакцепторного пептидного субстрата, 5FAM-AKRRRLSSLRA-COOH (CPC Scientific, Sunnyvale, CA), испытуемое соединение (11 доз, приготовленных 3-х кратным последовательным разведением, конечное содержание DMSO 2%) или только DMSO, 0,002% Tween-20, 1 мМ DTT и 2,5 мМ MgCl2 в 50 мМ MOPS (3-(N-морфолино)пропансульфоновой кислоты), буфер с pH 7,8, и реакции инициировали путем добавления 75 мкМ АТФ с последующей предварительной инкубацией в течение 20 минут. Реакции проводили в течение 60 мин при 37°C, затем прерывали путем добавления 50 мкл 0,015 M EDTA, pH 8, и определяли степень завершенности реакций (~ конверсия 15-20% без ингибитора) после электрофоретического разделения флуоресцентно меченого пептидного субстрата и фосфорилированного продукта на приборе LabChip EZ Reader II (PerkinElmer, Inc., Waltham, MA).
Кроме того, измеряли ингибирование HPK1 с использованием флуоресценции на основе метода усиленной хелатированием (CHEF) флуоресценции (1) с использованием флуоресцентного пептидного субстрата собственного приготовления, в котором цистеиновый остаток алкилирован производным на основе сульфонамидооксина с получением аминокислоты, называемой C-Sox (CSx). Анализ проводили аналогично описанному выше для метода MSA, но с использованием 3 мкМ Ac-[CSx]HSLPRFNR-амидного пептидного субстрата (также известного под названием AQT0178, приобретенного у фирмы AssayQuant Technologies Inc., Hopkinton, MA) и 45 мкМ АТФ. Начальные скорости реакции определяли по флуоресценции пептида (λex=360 нм, λem=500 нм) при 30°C в течение 15 минут в планшет-ридере Tecan M1000 (Tecan Group Ltd., Männedorf, Zürich, Switzerland). Значения константы ингибирования (Ki) рассчитывали путем аппроксимации начальных скоростей на основе % конверсии (метод MSA) или на основе флуоресценции (метод CHEF) с помощью уравнения Моррисона (2) для конкурентного ингибирования сильного связывания с использованием метода нелинейной регрессии, и экспериментально измеряли АТФ Km (29 мкМ по MSA и 19 мкМ по CHEF, соответственно). Кинетические и кристаллографические исследования показали, что ингибиторы являются АТФ-конкурентными. Белок HPK1 продуцировали своими силами и предварительно активировали путем аутофосфорилирования фермента с помощью MgATP, как описано в разделе "Получение рекомбинантной аутофосфорилированной полноразмерной HPK1"
Клеточные анализы
Анализ фосфо-SLP-76 (Ser376) методом гомогенной флуоресценции с временным разрешением (HTRF)
Клетки линии Jurkat высевали при плотности 90000 клеток/лунка в 90 мкл среды для выращивания RPMI1640, содержащей 10% FBS, и инкубировали при 37°C в присутствии 5% CO2 в течение ночи. На следующий день, соединения последовательно трехкратно разбавляли в DMSO, начиная с максимальной дозы 10 мМ, для построения кривой по 11 точкам. Соединения промежуточно разбавляли в среде для выращивания в соотношении 1:100 перед разведением 1:10 на клетках до конечной концентрации от 10 мкМ до 0,1 нМ в 0,1% DMSO. После 30-минутной предварительной обработки с помощью соединений, клетки стимулировали с использованием 200 мкг/мл комплекса F(ab)2 против CD3 (клон UCTH1) в течение 15 минут при 37° C в присутствии 5% CO2. Стимуляцию останавливали, используя охлажденный льдом PBS, и клетки собирали центрифугированием и затем проводили лизис в буфере для лизиса Cisbio (Cisbio, Bedford, MA). Лизаты переносили в белые планшеты малого объема, содержащие антитела против фосфо-SLP-76-криптата плюс антитела против фосфо-SLP-76-d2 HTRF, и инкубировали в течение ночи при комнатной температуре с защитой от воздействия света в соответствии с протоколом фирмы-производителя (Cisbio, Bedford, MA). Гомогенную флуоресценцию с временным разрешением (HTRF) измеряли на планшет-ридере Perkin Elmer Envision, и величины IC50 рассчитывали путем аппроксимации кривой концентрация-ответ с использованием четырехпараметрического нелинейного регрессионного анализа.
Данные по биологической активности для выбранных соединений в анализах сдвига электрофоретической подвижности HPK1 и анализах гомогенной флуоресценции с временным разрешением (HTRF) фосфо-SLP-76 (Ser376) представлены в таблице 2 в виде величин IC50 (мкМ).
№
Ki (мкM)
IC50 (µM)
Данные по биологической активности в анализах сдвига электрофоретической подвижности HPK1 и анализах гомогенной флуоресценции с временным разрешением (HTRF) фосфо-SLP-76 (Ser376) приведены в таблице 3 для примеров 55-68.
№
Ki (мкM)
IC50 (µM)
В таблицах 3-5, ND означает "не определяли", а NA означает "не применимо" в колонке для числа экспериментов.
Данные по биологической активности в анализах сдвига электрофоретической подвижности HPK1 и анализах гомогенной флуоресценции с временным разрешением (HTRF) фосфо-SLP-76 (Ser376) приведены в таблице 4 для примеров из таблицы 1A.
№
Ki (мкM)
IC50 (µM)
Данные по биологической активности в анализах сдвига электрофоретической подвижности HPK1 и анализах гомогенной флуоресценции с временным разрешением (HTRF) фосфо-SLP-76 (Ser376) приведены в таблице 5 для примеров из таблицы 1B.
№
Ki (мкM)
IC50 (µM)
Полные содержания всех упоминаемых в изобретении публикаций и заявок на патенты включены в настоящее изобретение путем ссылок на них. Для специалистов в данной области является очевидным, что в изобретение могут быть внесены конкретные изменения и модификации без отклонения от сущности или объема прилагаемой формулы изобретения.
| название | год | авторы | номер документа |
|---|---|---|---|
| СОЕДИНЕНИЯ АЗАЛАКТАМА В КАЧЕСТВЕ ИНГИБИТОРОВ HPK1 | 2021 |
|
RU2819642C1 |
| БИЦИКЛИЧЕСКИЕ ЛАКТАМЫ И СПОСОБЫ ИХ ПРИМЕНЕНИЯ | 2016 |
|
RU2716136C2 |
| ИНГИБИТОРЫ БРОМДОМЕНА | 2012 |
|
RU2671571C1 |
| СОЕДИНЕНИЯ ИМИДАЗОТРИАЗИНОНА | 2011 |
|
RU2603140C2 |
| ИНГИБИТОРЫ БРОМДОМЕНА | 2012 |
|
RU2647592C2 |
| ПРОИЗВОДНЫЕ ТРИАЗОЛО[1,4]ДИАЗЕПИНА И СПОСОБЫ ИХ ПОЛУЧЕНИЯ | 1989 |
|
RU2117670C1 |
| ДИГИДРОПИРИДОФТАЛАЗИНОНОВЫЕ ИНГИБИТОРЫ ПОЛИ(АДФ-РИБОЗА)ПОЛИМЕРАЗЫ | 2009 |
|
RU2514937C2 |
| ЗАМЕЩЕННЫЕ 1,2-ДИГИДРО-3Н-ПИРАЗОЛО[3,4-D]ПИРИМИДИН-3-ОНЫ | 2019 |
|
RU2812726C2 |
| ПИРРОЛОПИРРОЛОВЫЕ КОМПОЗИЦИИ В КАЧЕСТВЕ АКТИВАТОРОВ ПИРУВАТКИНАЗЫ (PKR) | 2018 |
|
RU2736217C2 |
| ЗАМЕЩЕННЫЕ ХРОМАНЫ | 2015 |
|
RU2718060C2 |
Группа изобретений относится к области медицины, а именно к терапии, и предназначена для лечения рака. Представлены соединения формулы I и их фармацевтически приемлемые соли, а также фармацевтические композиции, включающие такие соединения и соли. В другом воплощении обеспечивается применение указанных соединений и солей для ингибирования активности киназы HPK1 и для лечения рака. Также обеспечивается комбинация указанных соединений и солей с другим противораковым терапевтическим или паллиативным средством для лечения рака. Группа изобретений обеспечивает новые соединения формулы I и их фармацевтически приемлемые соли, обладающие ингибирующей активностью в отношении киназы HPK1, которые могут применяться для лечения или облегчения состояний, связанных с нарушением нормальной пролиферации клеток, таких как рак. 6 н. и 13 з.п. ф-лы, 5 табл., 188 пр.
1. Соединение формулы I
или его фармацевтически приемлемая соль, где:
R1 выбирают из группы, состоящей из водорода, (C1-C6)алкила, -N(R6)(R7) и (C3-C6)циклоалкила, где указанный (C3-C6)циклоалкил необязательно замещен с помощью от одного до трех заместителей, выбранных из (C1-C6)алкила;
R6 и R7 каждый независимо выбирают из группы, состоящей из водорода и (C1-C6)алкила, или R6 и R7, взятые вместе с азотом, к которому они присоединены, образуют (4-8-членный)гетероциклоалкил, содержащий 1 или 2 гетероатома, каждый из которых независимо выбран из N и O, где указанный гетероциклоалкил необязательно замещен с помощью от одного до трех заместителей, выбранных из группы, состоящей из галогена, (C1-C6)алкила, галоген(C1-C6)алкила, (C1-C6)алкокси и галоген(C1-C6)алкокси;
R2 представляет собой
i) -(CH2)mN(R8)(R9), где m представляет собой целое число, выбранное из 0, 1, 2 или 3, и R8 и R9 каждый независимо выбирают из группы, состоящей из водорода и (C1-C6)алкила; или
ii) (C1-C6)алкил, где указанный (C1-C6)алкил необязательно замещен с помощью от одного до трех заместителей, выбранных из группы, состоящей из галогена, (C1-C6)алкокси и -N(R6)(R7), где R6 и R7 каждый независимо выбирают из группы, состоящей из водорода и (C1-C6)алкила; и
R4 представляет собой (4-6-членный)гетероциклоалкил, содержащий 2 гетероатома, каждый из которых независимо выбран из N и O, или (5-10-членный)гетероарил, содержащий 2 или 3 гетероатома, каждый из которых независимо выбран из N и S, где указанный (4-6-членный)гетероциклоалкил и (5-10-членный)гетероарил необязательно замещены с помощью от 1 до 3 заместителей, выбранных из группы, состоящей из галогена, оксо, (C1-C6)алкила, галоген(C1-C6)алкила, (C1-C6)алкокси, галоген(C1-C6)алкокси и -(CH2)n(C3-C6)циклоалкила, где n представляет собой целое число, выбранное из 0 или 1.
2. Соединение по п.1 или его фармацевтически приемлемая соль, где R1 представляет собой -N(R6)(R7) и R6 и R7 каждый независимо выбирают из группы, состоящей из водорода и (C1-C6)алкила.
3. Соединение по п.1 или его фармацевтически приемлемая соль, где R1 представляет собой -N(R6)(R7) и R6 и R7, взятые вместе с азотом, к которому они присоединены, образуют (4-8-членный)гетероциклоалкил, который необязательно замещен с помощью от одного до трех заместителей, выбранных из группы, состоящей из галогена, (C1-C6)алкила, галоген(C1-C6)алкила, (C1-C6)алкокси и галоген(C1-C6)алкокси.
4. Соединение по п.3 или его фармацевтически приемлемая соль, где R1 представляет собой (4-8-членный)гетероциклоалкил, выбранный из группы, состоящей из азетидинила, пирролидинила и азабицикло[2.2.1]гептила, где азетидинил, пирролидинил и азабицикло[2.2.1]гептил необязательно замещены с помощью от одного до трех заместителей, выбранных из группы, состоящей из галогена, (C1-C6)алкила, галоген(C1-C6)алкила, (C1-C6)алкокси и галоген(C1-C6)алкокси.
5. Соединение по п.4 или его фармацевтически приемлемая соль, где R1 представляет собой пирролидинил, необязательно замещенный с помощью от одного до трех заместителей, выбранных из группы, состоящей из галогена, (C1-C6)алкила, галоген(C1-C6)алкила, (C1-C6)алкокси и галоген(C1-C6)алкокси.
6. Соединение по любому из предшествующих пунктов или его фармацевтически приемлемая соль, где R2 представляет собой -(CH2)mN(R8)(R9), m представляет собой 1 и один из R8 и R9 представляет собой водород, а другой представляет собой метил.
7. Соединение по любому из пп.1-5 или его фармацевтически приемлемая соль, где R2 представляет собой -(CH2)mN(R8)(R9), m представляет собой 1 и R8 и R9 оба представляют собой водород.
8. Соединение по любому из предшествующих пунктов или его фармацевтически приемлемая соль, где R4 представляет собой (5-6-членный)гетероарил, необязательно замещенный с помощью от 1 до 3 заместителей, выбранных из группы, состоящей из галогена, (C1-C6)алкила, галоген(C1-C6)алкила, (C1-C6)алкокси, галоген(C1-C6)алкокси и -(CH2)n(C3-C6)циклоалкила, где n представляет собой целое число, выбранное из 0 или 1.
9. Соединение по п.8 или его фармацевтически приемлемая соль, где (5-6-членный)гетероарил представляет собой 1,2,3-триазолил, 1,2,4-триазолил или пиразолил.
10. Соединение или его фармацевтически приемлемая соль, где соединение выбирают из группы, состоящей из следующих соединений:
4-[(метиламино)метил]-6-[метил(пропан-2-ил)амино]-2-[6-(4-пропил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)пиридин-2-ил]-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он;
4-[(метиламино)метил]-6-[(2R)-2-метилпирролидин-1-ил]-2-[6-(4-пропил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)пиридин-2-ил]-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он;
4-[(метиламино)метил]-2-[6-(5-метил-4-пропил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)пиридин-2-ил]-6-[(2R)-2-метилпирролидин-1-ил]-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он;
4-[(метиламино)метил]-6-[метил(пропан-2-ил)амино]-2-[6-(5-метил-4-пропил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)пиридин-2-ил]-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он; и
4-(аминометил)-2-[6-(4-этил-5-метил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)пиридин-2-ил]-6-[(2S)-2-метилпирролидин-1-ил]-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он.
11. Соединение по п.10 или его фармацевтически приемлемая соль, где соединение представляет собой 4-[(метиламино)метил]-6-[метил(пропан-2-ил)амино]-2-[6-(4-пропил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)пиридин-2-ил]-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он.
12. Соединение по п.10 или его фармацевтически приемлемая соль, где соединение представляет собой 4-[(метиламино)метил]-6-[(2R)-2-метилпирролидин-1-ил]-2-[6-(4-пропил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)пиридин-2-ил]-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он.
13. Соединение по п.10 или его фармацевтически приемлемая соль, где соединение представляет собой 4-[(метиламино)метил]-2-[6-(5-метил-4-пропил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)пиридин-2-ил]-6-[(2R)-2-метилпирролидин-1-ил]-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]-пиридин-1-он.
14. Соединение по п.10 или его фармацевтически приемлемая соль, где соединение представляет собой 4-[(метиламино)метил]-6-[метил(пропан-2-ил)амино]-2-[6-(5-метил-4-пропил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)пиридин-2-ил]-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он.
15. Соединение по п.10 или его фармацевтически приемлемая соль, где соединение представляет собой 4-(аминометил)-2-[6-(4-этил-5-метил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)пиридин-2-ил]-6-[(2S)-2-метилпирролидин-1-ил]-2,3-дигидро-1H-пирроло[3,4-c]пиридин-1-он.
16. Фармацевтическая композиция для ингибирования HPK1, включающая соединение по любому из пп.1-15 или его фармацевтически приемлемую соль и фармацевтически приемлемый носитель или вспомогательное вещество.
17. Применение соединения по любому из пп.1-15 или его фармацевтически приемлемой соли для ингибирования HPK1.
18. Применение соединения по любому из пп.1-15 или его фармацевтически приемлемой соли для лечения рака.
19. Комбинация соединения по любому из пп.1-15 или его фармацевтически приемлемой соли и другого противоракового терапевтического средства или паллиативного средства для лечения рака.
| WO 2018167147 A1, 20.09.2018 | |||
| EA 201890059 A1, 31.07.2018 | |||
| WO 2016205942 A1, 29.12.2016 | |||
| BASTIN R | |||
| J | |||
| et al | |||
| Salt selection and optimisation procedures for pharmaceutical new chemical entities | |||
| Organic Process Research & Development, 2000, Vol | |||
| Очаг для массовой варки пищи, выпечки хлеба и кипячения воды | 1921 |
|
SU4A1 |
| Кипятильник для воды | 1921 |
|
SU5A1 |
| Способ уравновешивания движущихся масс поршневых машин | 1925 |
|
SU427A1 |
